驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法及用途
阅读：989发布：2020-05-13
专利汇可以提供驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法及用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法和用途。该方法是将干燥的驱虫斑鸠菊果实 粉碎 ，采用 有机 溶剂 提取， 树脂 分离纯化获得驱虫斑鸠菊提取物，主要成分为酚酸类化合物。部位中酚酸含量的 质量 百分比20%‑99%。驱虫斑鸠菊酚酸部位中主要活性成分3,4‑二咖啡酰基奎宁酸、3,5‑二咖啡酰基奎宁酸和4,5‑二咖啡酰基奎宁酸的含量分别为3‑26%、5‑34%和5‑40%。经初步实验证明：通过本发明所述的方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位具有增加毛囊中黑素细胞、促进黑素合成的作用，可用于 治疗 白癜 风 。本发明所述的方法工艺简单，生产成本低，有效成分稳定，易于质量控制。本发明为白癜风治疗提供了新的药用部位及化合物。，下面是驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法及用途专利的具体信息内容。
1.一种驱虫斑鸠菊酚酸部位在制备防治白癜风的药物中的用途，其特征在于按下列步骤进行：
a.将干燥的驱虫斑鸠菊果实粉碎后，用浓度为0-95％甲醇、乙醇或水溶液，室温-95℃提取1-5次，提取时间0.5-3小时，冷却至室温，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物，驱虫斑鸠菊果实与甲醇或乙醇水溶液的固液比为1∶3-30；
b.将步骤a得到的提取物用浓度为0-15％甲醇、乙醇或水溶液溶解分散后，过滤，再用树脂为DM-130、AB-8、HPD-450、NKA-9、HPD-100、D101、HPD-400、HPD-500、HPD-600、HPD-300、HPD-417、聚酰胺或十八烷基硅烷键合硅胶分离，先用水洗去杂质，再用浓度为10-95％甲醇或乙醇洗脱，收集甲醇或乙醇洗脱液，减压浓缩除尽溶剂，干燥，即得到含有3，5-二咖啡酰基奎宁酸5-34％、4，5-二咖啡酰基奎宁酸5-40％、3，4-二咖啡酰基奎宁酸3-26％的驱虫斑鸠菊酚酸部位，所述驱虫斑鸠菊酚酸部位中含有酚酸类化合物为质量百分比20％-99％。
驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法及用途
技术领域
背景技术
[0002] 白癜风(vitiligo，OMIM：#193200)是一种常见的后天性色素脱失性疾病，主要特征为皮肤和毛发黑素细胞选择性破坏导致的色素脱失。白癜风在不同地域和种族间有较大的差异，肤色较深的人群更易患病，我国白癜风的患病率为0.09％-2.7％。
[0003] 白癜风的损害可发生于全身任何部位的皮肤、粘膜和毛发，但暴露部位，及易摩擦部位，均较易发生。皮损多呈对称分布，或沿神经节段分布。色素完全脱失斑为乳白色，边界清楚，大小形态不同，生长于白斑区的毛发也可变白，严重者白斑可泛发全身。白癜风组织病理特征为皮损区黑素细胞的减少或消失，细胞中黑素颗粒缺失，早期可在皮损周边发现以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润。
[0004] 白癜风发病机制不明，目前存在多种发病机制假说，但任何一种假说都有其局限，且不同类型白癜风发病机理可能不同。白癜风的病因和发病机制主要有自身免疫假说、遗传假说、黑素细胞自身破坏假说等。
[0005] 驱虫斑鸠菊，Vernonia anthelmintica(L.)Willd，别名印度山茴香，是菊科(Asteraceae)斑鸠菊属(Vernonia)一年生高大草本，药用部位为成熟的果实，秋季采收、晾干。其性三级干热，功效主要是清除异常粘液质、驱虫、消肿、散寒止痛，是历代传统维吾尔医治疗白癜风的主要经典药物。
[0007] 驱虫斑鸠菊在民间用药历史悠久，有着长期稳定的临床应用，因此其开发应用前景广阔。维吾尔医药理论中，驱虫斑鸠菊性三级干热，功效主要是清除异常粘液质、驱虫、消肿、散寒止痛。驱虫斑鸠菊种子为主药的上市药品和制剂有驱虫斑鸠菊注射液、卡力孜然蜜膏、复方驱虫斑鸠菊丸、复方卡力孜然酊、复方卡力孜然片、驱白巴布斯片等。黄酮类化合物及黄酮部位治疗白癜风已有报道，但是酚酸类化合物及酚酸部位治疗白癜风未见报道。
[0008] 目前驱虫斑鸠菊的提取物、黄酮部位以及黄酮类化合物治疗白癜风已有较多报道，但是酚酸部位及酚酸类化合物未见报道。
发明内容
[0009] 本发明目的在于，提供一种驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法和用途。该方法是将干燥的驱虫斑鸠菊果实粉碎，采用有机溶剂提取，树脂分离纯化获得驱虫斑鸠菊提取物，主要成分为咖啡酰基奎宁酸、二咖啡酰基奎宁酸等酚酸类化合物。测定酚酸含量的质量百分比20％-99％。驱虫斑鸠菊酚酸部位中主要活性成分3,4-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量分别为3-26％、5-34％和5-40％。经初步实验证明：通过本发明所述的方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位具有增加毛囊中黑素细胞、促进黑素合成的作用，可用于治疗白癜风。本发明所述的方法工艺简单，生产成本低，有效成分稳定，易于质量控制。本发明为白癜风治疗提供了新的药用部位及化合物。
[0010] 本发明所述的一种驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法，按下列步骤进行：
[0011] a.将干燥的驱虫斑鸠菊果实粉碎后，用浓度为0-95％甲醇、乙醇或水溶液，室温-95℃提取1-5次，提取时间0.5-3小时，冷却至室温，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物，驱虫斑鸠菊果实与甲醇或乙醇水溶液的固液比为1:3-30；
[0012] b.将步骤a得到的提取物用浓度为0-15％甲醇、乙醇或水溶液溶解分散后，过滤，再用树脂分离，先用水洗去杂质，再用浓度为10-95％甲醇或乙醇洗脱，收集甲醇或乙醇洗脱液，减压浓缩除尽溶剂，干燥，即得到含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位。
[0013] 步骤b中所述的树脂为DM-130、AB-8、HPD-450、NKA-9、HPD-100、D101、HPD-400、HPD-500、HPD-600、HPD-300、HPD-417、聚酰胺或十八烷基硅烷键合硅胶。
[0014] 所述方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位中含有酚酸类化合物为质量百分比20％-99％。
[0015] 所述方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位中主要活性成分3,4-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量分别为3-26％、5-34％和5-40％。
[0016] 所述的方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位在制备防治白癜风的药物中的用途。
[0017] 本发明所述的驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备方法和用途，通过该方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位经药效学试验证明，具有显著的治疗白癜风的作用，且在在相同临床等效剂量下，驱虫斑鸠菊酚酸部位作用优于白癜风胶囊。附图说明
[0018] 图1为本发明HE染色观察皮肤组织形态学变化图；
[0019] 图2为本发明酚酸部位对白癜风小鼠皮肤含黑色素毛囊数的影响(黑色素染色，200倍)图。
具体实施方式
[0020] 实施例1：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0021] 将干燥的驱虫斑鸠菊果实药材10kg粉碎，加入30倍体积的水溶液，加热回流提取3次，温度95℃，时间3小时，冷却至室温，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0022] 将得到的醇提物用浓度为5％乙醇分散至含生药100g/L，过滤，再用AB-8型大孔吸附树脂柱，先用1倍柱体积水洗脱，再用8倍柱体积浓度为40％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位390g。
[0023] 实施例2：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0024] 将干燥的驱虫斑鸠菊果实药材10kg粉碎，加入3倍体积浓度为95％乙醇，加热回流提取5次，室温，时间3小时，冷却至室温，过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0025] 将得到的醇提物用浓度为5％乙醇分散至含生药50g/L，离心(4000转/分钟)，DM-130型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用1倍柱体积浓度为95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位420g。
[0026] 实施例3：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0027] 将干燥的驱虫斑鸠菊果实药材10kg粉碎，加入15倍体积浓度为30％乙醇，加热回流提取3次，温度75℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0028] 将得到的提取物用浓度为10％甲醇分散至含生药80g/L，离心(4000转/分钟)，HPD-100型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积水洗脱，再用6倍柱体积浓度为50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位440g。
[0029] 实施例4：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0030] 将干燥的驱虫斑鸠菊果实药材10kg粉碎，加入18倍体积的浓度为60％甲醇，加热回流提取2次，温度50℃，时间0.5小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0031] 将得到的提取物用浓度为15％甲醇分散至含生药100g/L，离心(4000转/分钟)，NKA-9型大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积水洗脱，再用5倍柱体积浓度为60％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位460g。
[0032] 实施例5：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0033] 将干燥的驱虫斑鸠菊果实药材10kg粉碎，加入12倍体积浓度为10％乙醇加热回流提取2次，温度80℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0034] 将得到的提取物用浓度为10％乙醇分散至含生药30g/L，过滤，再用D101型大孔吸附树脂柱，先用8倍柱体积水洗脱，再用6倍柱体积浓度为80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位564g。
[0035] 实施例6：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0036] 将干燥的驱虫斑鸠菊果实药材10kg粉碎，加入18倍体积浓度为95％乙醇，加热回流提取2次，温度60℃，时间1小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0037] 将得到的提取物用水分散至含生药50g/mL，离心(4000转/分钟)，用HPD400型大孔吸附树脂柱，先用6倍柱体积水洗脱，再用6倍柱体积浓度为65％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位490g。
[0038] 实施例7：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0039] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入30倍体积浓度为95％甲醇，加热回流提取2次，温度65℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0040] 将得到的提取物用浓度为10％乙醇分散至含生药60g/mL，离心(4000转/分钟)，HPD600型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用8倍柱体积浓度为95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位524g。
[0041] 实施例8：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0042] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入15倍体积浓度为95％甲醇，加热回流提取2次，温度55℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0043] 将得到的提取物用浓度为10％乙醇分散至含生药80g/mL，离心(4000转/分钟)，HPD500型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用6倍柱体积浓度为75％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位498g。
[0044] 实施例9：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0045] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入20倍体积浓度为75％甲醇，加热回流提取2次，温度60℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0046] 将得到的提取物用浓度为15％乙醇分散至含生药60g/mL，离心(4000转/分钟)，HPD450型大孔吸附树脂柱，先用1倍柱体积水洗脱，再用4倍柱体积浓度为75％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位433g。
[0047] 实施例10：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0048] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入30倍体积浓度为55％甲醇，加热回流提取2次，温度70℃，时间3小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0049] 将得到的提取物用浓度为10％乙醇分散至含生药100g/mL，离心(4000转/分钟)，HPD417型大孔吸附树脂柱，先用1倍柱体积水洗脱，再用8倍柱体积浓度为85％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位603g。
[0050] 实施例11：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0051] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入30倍体积浓度为45％甲醇，加热回流提取2次，温度55℃，时间1小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0052] 将得到的提取物用浓度为15％乙醇分散至含生药90g/mL，离心(4000转/分钟)，HPD300型大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积水洗脱，再用6倍柱体积浓度为65％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位491g。
[0053] 实施例12：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0054] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入30倍体积浓度为95％甲醇，加热回流提取2次，温度45℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0055] 将得到的提取物用浓度为10％乙醇分散至含生药90g/mL，离心(4000转/分钟)，聚酰胺树脂柱，先用1倍柱体积水洗脱，再用8倍柱体积浓度为85％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥成干粉，即得含有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸和3,4-二咖啡酰基奎宁酸的驱虫斑鸠菊酚酸部位586g。
[0056] 实施例13：驱虫斑鸠菊酚酸部位的制备：
[0057] 将干燥的驱虫斑鸠菊药果实材10kg粉碎，加入30倍体积浓度为55％甲醇，加热回流提取2次，温度65℃，时间2小时，冷却至室温，合并提取液，减压浓缩至无醇味，得到醇提物；
[0058] 采用十八烷基硅烷键合硅胶，通过制备液相进行反复纯化，分别获得纯度为99％的3,4-二咖啡酰基奎宁酸的、3,5-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸；
[0059] 分别称取2.6毫克3,4-二咖啡酰基奎宁酸的、3.4毫克3,5-二咖啡酰基奎宁酸和4毫克4,5-二咖啡酰基奎宁酸混合均匀，即得到总酚酸含量为99％的驱虫斑鸠菊酚酸部位。
[0060] 实施例14：驱虫斑鸠菊酚酸部位的成分分析：
[0061] 用分光光度法对所得到的驱虫斑鸠菊酚酸部位进行含量测定，结果表明：驱虫斑鸠菊酚酸部位中总酚酸含量质量百分比为20％-99％。采用液相色谱分析表明：在驱虫斑鸠菊药果实材原料中3,4-二咖啡酰基奎宁酸的、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-二咖啡酰基奎宁酸含量质量百分比分别为0.3-3％，0.5-3％，0.6-3％，通过本发明所述方法获得的驱虫斑鸠菊酚酸部位3,4-二咖啡酰基奎宁酸的、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-二咖啡酰基奎宁酸中含量质量百分比分别为3-26％，5-34％，5-40％，结果表明：本发明所述方法能显著提高3,4-二咖啡酰基奎宁酸的、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量。
[0062] 实施例15：驱虫斑鸠菊酚酸部位急毒性评价：
[0063] 20只清洁级昆明系小鼠，5周龄，体质量20g，均衡随机分为2组(给药组和对照组)，每组10只，雌雄各半。禁食不禁水16h后，给药组小鼠灌胃给予浓度0.6g/mL的酚酸部位，给药容积为40mL/kg，灌胃给药1次。空白组小鼠灌胃等量蒸馏水。给药后4h内连续观察，以后每天上午观察1次，连续观察14天。实验期间每天测定小鼠体重，给药组与对照组体重给药前后均无统计学差异，结果见表1；同时观察动物的外观、饮食、行为活动、分泌物、排泄物等均无显著异常；试验期间未见小鼠死亡；试验结束后，小鼠分别断头处死，解剖，各脏器颜色正常，组织未见异常，结果见表2；计算酚酸部位的最大给药量(MLD)为：24g/kg/d(相当于生药量564.7g生药/kg)，为临床成人用剂量的6776.67倍。说明酚酸部位基本无毒性，临床用药的安全性大；
[0064] 表1 酚酸部位急性毒性试验小鼠体质量变化(g， n＝10)
[0065]
[0066] 表2 酚酸部位对小鼠急性毒性试验结果
[0067]
[0068] 实施例16：驱虫斑鸠菊酚酸部位对白癜风模型小鼠的作用：
[0069] C57BL/6小鼠70只，体重18-22g，雌雄对半，用电动剃毛刀剃去背部毛发，面积约2cm×2cm，均衡随机分成6组：空白对照组，模型组，阳性药(白癜风胶囊)对照组，提取物低、中、高剂量组，每组12只。模型组与各给药组在脱毛区涂抹5％的氢醌，每次0.5mL，每天2次，空白对照组在脱毛区涂抹等量蒸馏水；连续50天，建立白癜风小鼠模型，在此期间，各组小鼠在皮肤受试区域平均每3天脱毛1次；氢醌造模20天后，小鼠皮肤和毛发出现脱色现象；从造模第21天开始，各组分别在涂抹5％氢醌1小时后，按设定剂量，开始灌胃给药：空白对照组，模型组灌胃给予等体积蒸馏水，给药组灌胃给予受试药物，每天1次，连续给药30天，实验结束后，处死小鼠。
[0070] 1.肉眼观察药物治疗白癜风的疗效：
[0071] 实验结果显示，造模过程中，肉眼可见各组造模小鼠受试区皮肤颜色苍白，毛发生长缓慢，随造模时间延长，出现白斑，新生毛发变成白色，；经治疗后，肉眼可见，白癜风胶囊组及酚酸部位各剂量组可不同程度的恢复白癜风小鼠受试区皮肤颜色，新生毛发也可见恢复为黑色。在相同临床等效剂量下，酚酸部位大剂量组优于白癜风胶囊组，结果见表3；
[0072] 表3 酚酸部位对氢醌所致白癜风小鼠的疗效观察
[0073]
[0074] 注：与模型组比较，*P<0.05。
[0075] 2.组织学观察
[0076] 2.1 HE染色观察皮肤组织形态学变化：
[0077] 空白对照组：小鼠皮肤层次清楚，毛囊结构完整，数目多，色素含量多且颜色深；
[0079] 白癜风胶囊组：小鼠皮肤厚度恢复正常，皮肤角质层未见明显增厚，表皮和真皮无水肿，基底层细胞有色素沉着，毛囊数目增多，结构完整，色素含量增加，色泽加深；
[0080] 酚酸部位低剂量组：小鼠皮肤明显变薄，部分角质层增厚，表皮细胞轻度水肿，棘细胞层可见水肿，真皮层及皮下组织可见少量毛囊分布；
[0081] 酚酸部位中剂量组：小鼠皮肤厚度恢复正常，表皮和真皮未见明显水肿，基底层细胞有色素沉着，毛囊结构完整，其数目和色素含量明显增加，真皮层及皮下组织可见毛囊分布；
[0082] 酚酸部位高剂量组：小鼠皮肤厚度恢复正常，皮肤角质层变薄，表皮和真皮无明显水肿，基底层细胞有色素沉着，毛囊结构完整，数目明显增加，色素颜色明显加深，真皮层及皮下组织可见毛囊分布，见图1。
[0083] 2.2黑色素染色观察皮肤黑色素分布情况：
[0084] 模型组小鼠，与空白对照组比较，不仅毛囊数目少，且大部分毛囊几乎不含黑色素；各给药组小鼠，与模型组比较，毛囊数目增多，其中酚酸部位中、高剂量组黑色素明显增加。在相同临床等效剂量下，驱虫斑鸠菊酚酸部位作用优于白癜风胶囊，结果见表4，图2；
[0085] 表4 酚酸部位对氢醌致白癜风小鼠皮肤含黑色素毛囊数的影响
[0086]
[0087] 注：与空白对照组比较，#P<0.05；与模型组比较，*P<0.05。
[0088] 3.小鼠血清和皮肤组织酪氨酸酶含量测定：
[0089] 实验结果表明，模型组小鼠，与空白对照组比较，血清中TYR的含量显著增加，皮肤组织中TYR的含量显著降低；酚酸部位各剂量组可明显降低白癜风小鼠血清中TYR的含量(P<0.05)，并且增加白癜风小鼠皮肤组织中TYR的含量(P<0.05)效果优于白癜风胶囊，结果见表5；
[0090] 表5 酚酸部位对氢醌所致白癜风小鼠血清和皮肤TYR的影响
[0091]
[0092] 注：与空白对照组比较，#P<0.05；与模型组比较，*P<0.05。
[0093] C57小鼠氢醌造模后，模型组小鼠皮肤出现白斑；组织学观察可见棘细胞层水肿，毛干色素脱失，含黑色素毛囊减少；皮肤组织中毛囊结构不完整，皮脂腺崩解；血清中TYR含量显著增加，皮肤组织中TYR含量显著降低，表明氢醌损伤模型组小鼠毛囊组织结构以及毛囊中黑素细胞。
[0094] 相较模型组，酚酸部位作用组能改善氢醌造模对C57小鼠的影响，恢复白癜风模型小鼠受试区皮肤颜色；组织学观察无明显水肿，毛干色素脱失，含黑色素毛囊数量恢复正常范围；皮肤组织中毛囊结构完整，数目明显增加；血清中TYR含量恢复正常范围，皮肤组织中TYR的含量显著增加。酚酸部位能增加皮肤组织中黑素生成蛋白含量，增加含黑色素毛囊数量，较好恢复小鼠受试区皮肤颜色。
[0095] 综上所述，驱虫斑鸠菊酚酸部位能够增加白癜风小鼠毛囊中黑素细胞数量、促进黑素合成，可用于制备治疗白癜风的药物中的用途。
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