技术领域
[0001] 本
发明属于
生物技术领域，具体涉及一种酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物及其制备方法与应用。
背景技术
[0002] 近几年，通过
微生物制剂调整动物肠道菌群，维持微生态平衡，提高
机体免疫
力以及各种生理机能一直被广大研究者们密切关注，是动物营养研究的热点之一。酵母菌是一种单细胞真核微生物，它的繁殖周期短，培养容易并且产率高。酵母菌
体细胞内不仅含有赖氨酸，同时也含有丰富的维生素和微量元素等。
[0003] 已经有许多实验证明，在日粮中添加酵母菌可以有效调控
反刍动物中
瘤胃的功能，促进营养吸收，提高免疫力。酵母菌可以与其他肠道微生物共同作用，有效改善稳态失衡的瘤胃微生物活性，从而导致奶
牛摄入干物
质量以及
奶牛对
饲料的消化率有所提高，奶牛的产奶量和产奶品质也得到改善。酵母菌对反刍动物瘤胃的影响与酵母菌自身的种类、品质、反刍动物生理状况以及食用粮的类型等均有关系。
[0004] 一直以来，传统的饲料添加物使用的都是抗生素，但如今，抗生素暴露出来地各种弊端越来越多。相比之下，酵母复合物的优点则越发明显：无毒、无污染、不产生抗性。荷斯坦奶牛在食用了添加酵母复合物的饲料后，酵母在牛的瘤胃中发酵，促进
纤维素的分解，有利于动物吸收营养，对乳酸的利用率得以提高，有助于防止瘤胃酸中毒，改善了肠道内微生物的生存环境。
[0005] 但是，目前国内奶牛饲养和
挤奶过程中容易造成乳腺的损伤及
炎症，造成奶牛由于炎症问题严重影响产奶量，因此，生产厂家不得不使用抗生素，而抗生素使用将对人类健康造成危害，另外还会影响奶牛的瘤胃和肠道菌群，恶化了奶牛对营养物质的吸收，进入恶性循环。
发明内容
[0006] 解决的技术问题：针对上述技术问题，本发明提供一种酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物及其制备方法与应用，制备的产品与奶牛饲料掺合，能够调控奶牛瘤胃发酵模式，减少酵母复合物添加数量，提高奶产量及奶质量，获得更高的经济效益。
[0007] 技术方案：一种酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物，所述复合物由酵母发酵产物和聚谷氨酸组成，其中酵母发酵产物和聚谷氨酸的质量比为(1～5):1。
[0008] 上述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0009] 步骤一.将干酵母加入
磷酸钠缓冲液中混匀，然后加入
葡萄糖和
表面活性剂，其中，干酵母与磷酸钠缓冲液的比值为50g:0.8L，葡萄糖和表面活性剂的比值为200g:5mL，葡萄糖与干酵母的质量比为4:1，然后将混合物在28-37℃、180-250r/min摇床培养8h后在100℃
温度下加热20min，离心去除沉淀，将上清液用2倍体积99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在60-80℃烘箱中过夜，烘干的产物进行
粉碎得到酵母发酵提取物；
[0010] 步骤二.将含有50g/L谷氨酸钠、40g/L葡萄糖和10g/L蛋白胨的培养基进行灭菌后，在32℃温度下加入枯草杆菌
种子培养液，其中枯草杆菌种子培养液与培养基的体积比为3mL:1L，然后将混合物在28-37℃、180-250r/min摇床上培养24h，培养完成后用离心去除沉淀，将上清液用2倍体积99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在60-80℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到聚谷氨酸钠；
[0011] 步骤三.将步骤一制备的酵母发酵提取物和步骤二制备的聚谷氨酸钠进行混合。
[0012] 作为优选，所述步骤一中将干酵母加入pH为5.5-6.5，摩尔质量为0.5mol-0.6mol磷酸钠缓冲液中混匀。
[0013] 作为优选，所述步骤一中表面活性剂为吐温80表面活性剂。
[0014] 上述酵母发酵提取物和聚谷氨酸的复合物在制备奶牛饲料中的应用。
[0015] 作为优选，所述酵母发酵提取物和聚谷氨酸的复合物与奶牛饲料中基本日料的配比为1:1000-1:5000。
[0016] 有益效果：本发明通过在奶牛饲料中添加酵母发酵提取物和聚谷氨酸的复合物，能够提高奶牛瘤胃中微生物的数量，以此促进奶牛对草料养分的分
解吸收，增强奶牛身
体素质，从而使牛奶中的体细胞数得到了有效控制，下降了百分之二十四，降低了得病
风险，使奶牛的产奶量从平均每头牛的27.67公斤/天提高到了29公斤/天，体细胞数从37/mL万降低到28万/mL。如果单独使用酵母发酵提取物对控制牛奶中的体细胞数和奶牛的产奶量有一定提高，产奶量从27.4公斤/天提高到了28.2公斤/天提高到了，体细胞数从37/mL万降低到32万/mL，但单独使用聚谷氨酸效果不明显。
[0017] 每天每头奶牛只需使用15g该种酵母发酵提取物和聚谷氨酸的复合物，便可使每头奶牛每月增加产奶量约1.2-1.5公斤。此举不仅降低了奶牛饲料添加数量，减少前期投资成本，同时大大提高了产奶效率，并由于该种方法易于操作，适用于大规模奶牛畜牧养殖，将为奶牛养殖带来可观的经济收益。
附图说明
[0018] 图1为本发明
实施例1中所述每周各组奶牛平均产奶量统计图。
具体实施方式
[0019] 下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步描述。
[0020] 实施例1
[0021] 一种酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物，所述复合物由酵母发酵产物和聚谷氨酸组成，其中酵母发酵产物和聚谷氨酸的质量比为3:1。
[0022] 上述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0023] 步骤一.将干酵母加入pH为6.0，摩尔质量为0.5mol磷酸钠缓冲液中混匀，然后加入葡萄糖和吐温80表面活性剂，其中，干酵母与磷酸钠缓冲液的比值为50g:0.8L，葡萄糖和表面活性剂的比值为200g:5mL，葡萄糖与干酵母的质量比为4:1，然后将混合物在30℃、220r/min摇床培养8h后在100℃温度下加热20min，离心去除沉淀，将上清液用2倍体积
99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在80℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到酵母发酵提取物；
[0024] 步骤二.将含有50g/L谷氨酸钠、40g/L葡萄糖和10g/L蛋白胨的培养基进行灭菌后，在32℃温度下加入枯草杆菌种子培养液，其中枯草杆菌种子培养液与培养基的体积比为3mL:1L，然后将混合物在32℃、220r/min摇床上培养24h，培养完成后用离心去除沉淀，将上清液用2倍体积99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在80℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到聚谷氨酸钠；
[0025] 步骤三.将步骤一制备的酵母发酵提取物和步骤二制备的聚谷氨酸钠进行混合。
[0026] 酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物，包括酵母发酵产物和聚谷氨酸。不仅能提高奶产量，而且还能降低奶牛隐形乳房炎，对奶牛生产性能有着重要影响。随后通过一定的技术手段，在保证其生理活性的前提下加以融合，制成复合态制剂。在实验过程中，可简化操作，直接将其与基本日料混合，而饲养效果比喂养基本日料的效果更好，可以使得奶牛产奶量显著提升，同时使得体细胞数目下降，提高了奶牛肠道菌群的多样性和
稳定性。
[0027] 通过将新鲜酵
母乳液(酶解)分离、浓缩等技术手段得到纯天然酵母发酵产物，并在此
基础上添加其它有利于奶牛瘤胃微生物发酵的复合成分，包含各种必需氨基酸、维生素、核苷酸、多肽及微量元素。将酵母复合物与聚谷氨酸混合，将其适量添加混合在奶牛每天日料中，仅通过日常喂养的方式实现奶牛产奶量及质量的提高。
[0028] 将制备的产品应用于奶牛进行测试，本实施例中实验对象为20头中国荷斯坦奶牛，实验期内，所选用的实验牛均处于泌乳中期，它们的年龄、胎次和乳成分等指标都相近，将其随机分为两组。
[0029] 其中，第一组为对照组，用传统饲料喂养；第二组为实验组，实验组在对照组传统饲料的基础上添加15g/(天·头)的酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物。实验时长为30天，在正式试验之前进行了7天预实验。实验期间，每天定时测定20头奶牛的日产奶量和体细胞数的具体情况。具体结果参见下表和图1，根据结果分析得出如下结论：与对照组进行比较发现，实验组奶牛食用添加混合物的饲料30天，产奶量显著提高了4.02％。由此可以证明，酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物对中国荷斯坦奶牛有显著的提高产奶性能的作用。
[0030]
[0031] 实施例2
[0032] 一种酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物，所述复合物由酵母发酵产物和聚谷氨酸组成，其中酵母发酵产物和聚谷氨酸的质量比为1:1。
[0033] 上述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0034] 步骤一.将干酵母加入pH为5.5，摩尔质量为0.5mol磷酸钠缓冲液中混匀，然后加入葡萄糖和吐温80表面活性剂，其中，干酵母与磷酸钠缓冲液的比值为50g:0.8L，葡萄糖和表面活性剂的比值为200g:5mL，葡萄糖与干酵母的质量比为4:1，然后将混合物在28℃、180r/min摇床培养8h后在100℃温度下加热20min，离心去除沉淀，将上清液用2倍体积
99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在60℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到酵母发酵提取物；
[0035] 步骤二.将含有50g/L谷氨酸钠、40g/L葡萄糖和10g/L蛋白胨的培养基进行灭菌后，在32℃温度下加入枯草杆菌种子培养液，其中枯草杆菌种子培养液与培养基的体积比为3mL:1L，然后将混合物在28℃、180r/min摇床上培养24h，培养完成后用离心去除沉淀，将上清液用2倍体积99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在60℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到聚谷氨酸钠；
[0036] 步骤三.将步骤一制备的酵母发酵提取物和步骤二制备的聚谷氨酸钠进行混合。
[0037] 上述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物在制备奶牛饲料中的应用。所述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物与奶牛饲料中基本日料的配比为1:1000。
[0038] 实施例3
[0039] 一种酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物，所述复合物由酵母发酵产物和聚谷氨酸组成，其中酵母发酵产物和聚谷氨酸的质量比为5:1。
[0040] 上述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0041] 步骤一.将干酵母加入pH为6.5，摩尔质量为0.6mol磷酸钠缓冲液中混匀，然后加入葡萄糖和吐温80表面活性剂，其中，干酵母与磷酸钠缓冲液的比值为50g:0.8L，葡萄糖和表面活性剂的比值为200g:5mL，葡萄糖与干酵母的质量比为4:1，然后将混合物在37℃、250r/min摇床培养8h后在100℃温度下加热20min，离心去除沉淀，将上清液用2倍体积
99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在80℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到酵母发酵提取物；
[0042] 步骤二.将含有50g/L谷氨酸钠、40g/L葡萄糖和10g/L蛋白胨的培养基进行灭菌后，在32℃温度下加入枯草杆菌种子培养液，其中枯草杆菌种子培养液与培养基的体积比为3mL:1L，然后将混合物在37℃、250r/min摇床上培养24h，培养完成后用离心去除沉淀，将上清液用2倍体积99vt.％酒精进行沉淀，然后将酒精沉淀所得产物在80℃烘箱中过夜，烘干的产物进行粉碎得到聚谷氨酸钠；
[0043] 步骤三.将步骤一制备的酵母发酵提取物和步骤二制备的聚谷氨酸钠进行混合。
[0044] 上述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物在制备奶牛饲料中的应用。所述酵母发酵产物和聚谷氨酸的复合物与奶牛饲料中基本日料的配比为1:5000。
