一种植物提取物中糊精的薄层检测方法
阅读：498发布：2020-05-11
专利汇可以提供一种植物提取物中糊精的薄层检测方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种 植物 提取 物中糊精的薄层检测方法，解决了采用现有糊精检测方法，无法对 植物提取物 中的糊精进行种类及大致含量判断的问题。该方法包括以下步骤：1)制备对照品溶液以及样品溶液；2)薄层点样；3)制备展开剂；4)展开；5)显色形成斑点；6)对比 鉴别 。该成本低，操作简单，快速，图谱信息丰富的薄层检测方法，灵敏度高，专属性强，对糊精的检测对比明显，结果直观，易于辨认和区分，为确保植物提取物的 质量 提供了可靠的鉴别方法。，下面是一种植物提取物中糊精的薄层检测方法专利的具体信息内容。
1.一种植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)制备对照品溶液以及样品溶液
1.1)取适量的白糊精和黄糊精，并分别加入质量浓度为50％的乙醇溶解，制成质量浓度为0.8～1.5mg/ml的对照品溶液；
1.2)取待鉴别的植物提取物置于可密封的试验容器中，加入质量浓度为50％的乙醇溶解，并超声处理30～60分钟，取出试验容器后放至室温，再采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品溶液；
2)薄层点样
将步骤1)中制备好的对照品溶液和样品溶液依次分别点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上，形成点样原点；
3)制备展开剂
3.1)取氯仿、甲醇和水，以5∶5∶1的体积比混合，得到展开剂；
3.2)将展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；
4)展开
将步骤3)预饱和后的展开缸打开，将步骤2)点样后的硅胶G薄层板放入展开缸中，且点样原点不能浸入展开剂中；当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，距离点样原点6cm～15cm时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色形成斑点
吹干步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，喷以质量浓度为5％～10％的硫酸乙醇溶液，在105℃下加热10～20分钟，使各点样原点显色形成斑点，放至室温后在白光下检视；
6)对比鉴别
将硅胶G薄层板上对照品点样原点形成的斑点与样品点样原点形成的斑点进行比对，根据斑点出现的位置判断样品中有无糊精以及糊精种类，根据斑点颜色深浅判断样品中糊精浓度大小。
2.根据权利要求1所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤1.1)中，所述对照品溶液的质量浓度为1mg/ml；
步骤2)中，对照品溶液和样品溶液的点样量为20μl。
3.根据权利要求2所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤1.2)中，所述超声处理为60分钟。
4.根据权利要求3所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤2)中，所述样品溶液和对照品溶液的点样位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为
1.0～1.5cm。
5.根据权利要求4所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤3.2)中，所述展开缸采用双槽展开缸，双槽展开缸的规格为10×10cm、20×10cm或
10×20cm，且双槽中的展开剂剂量保持一致，并预饱和15分钟。
6.根据权利要求5所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤4)中，当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，距离点样原点8cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出。
7.根据权利要求6所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤5)中，所述硫酸乙醇溶液的质量浓度为10％。
8.根据权利要求7所述的植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于：
步骤5)中，采用吹风机将硅胶G薄层板上的试剂吹干；采用电加热板对硅胶G薄层板进行加热。
一种植物提取物中糊精的薄层检测方法
技术领域
背景技术
[0002] 淀粉在加热、遇酸或遇淀粉酶作用下会发生分解和水解，将大分子的淀粉首先转化成为小分子的中间物质，这时的中间小分子物质，又称为糊精。糊精根据生产工艺的不同可分为三大类：黄糊精、白糊精和英国胶(不列颠胶)；其中，黄糊精和白糊精由于其具有粘性大、增稠性强、溶解性好、速溶性佳、载体性好、发酵小、吸潮性低、无异味、甜度低、人体易于消化和吸收、低热、低脂肪等特点，是食品和医药领域最理想的基础辅料之一，在食品和医药产品中得到越来越广泛的应用，但在白糊精和黄糊精被广泛应用的同时，很多产品或原辅料中添加了太多的糊精，导致产品质量下降，不能达到产品的预期效果；特别是对于目前很多保健品和用作保健品的植物提取物，里边添加有大量的糊精以次充好，严重影响了产品的质量，损害了消费者的利益。
[0003] 因此，如何鉴别植物提取物中是否添加了糊精以及添加了多少糊精(大致范围)，对于保证植物提取物的质量和保护消费者的利益至关重要。
[0004] 糊精添加到植物提取物中后，由于都是极细的粉末，是无法用肉眼进行检测识别的，而对于糊精的添加量，更是无法得知。传统的糊精检测是加碘显色法，即糊精加碘反应后呈紫红色(这个紫红色有其变化范围，根据淀粉降解后糊精降解程度的不同颜色也会有差异，淀粉降解越彻底，这种紫色越浅)，但这种方法仅限于检测植物提取物中有无糊精，并不能检测出该糊精为黄糊精还是白糊精，以及对糊精添加量进行一个大致判断(判断是否满足产品质量标准即可)；而且由于有些植物提取物自身存在颜色，对于加碘显色法中颜色的变化有一定的干扰，难以辨别。
[0005] 由此，目前还没有一个很好的检测方法可对植物提取物中的糊精进行种类及大致含量判断。
发明内容
[0006] 本发明的目的在于解决采用现有糊精检测方法，无法对植物提取物中的糊精进行种类及大致含量判断的不足之处，而提供了一种植物提取物中糊精的薄层检测方法。
[0007] 为了实现上述发明目的，本发明的构思是：
[0008] 作为食品和医药重要添加剂的黄糊精和白糊精，是淀粉降解不同程度的两种产物。黄糊精是淀粉降解程度较低时的产物，白糊精是淀粉降解程度较高时的产物，两者分别代表了降解程度两端的两个产物，其具体组成是有所区别的，在薄层上会显现出不同的斑点。利用薄层上黄糊精和白糊精特有的斑点，便可判断植物提取物中是否添加有糊精以及该糊精的种类，同时，通过比较对照品和样品中糊精斑点的颜色深浅，可进一步判断样品中糊精添加量的大致范围，对产品质检具有指导意义。
[0009] 为实现上述目的，本发明所提供的技术解决方案是：
[0010] 一种植物提取物中糊精的薄层检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0011] 1)制备对照品溶液以及样品溶液
[0012] 1.1)取适量的白糊精和黄糊精，并分别加入质量浓度为50％的乙醇溶解制成质量浓度为0.8～1.5mg/ml的对照品溶液；
[0013] 1.2)取待鉴别的植物提取物置于可密封的试验容器中，加入质量浓度为50％的乙醇溶解，并超声处理30～60分钟，取出试验容器后放至室温，再采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品溶液；
[0014] 上述乙醇的质量浓度为50％最为合适，若浓度过高，糊精无法溶解，浓度过低，则不利于薄层点样；
[0015] 2)薄层点样
[0017] 3)制备展开剂
[0018] 3.1)取氯仿、甲醇和水，以5∶5∶1的体积比混合，得到展开剂；此处氯仿、甲醇均为纯品；
[0019] 3.2)将展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；
[0020] 4)展开
[0021] 将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G薄层板放入展开缸中，放入的硅胶G薄层板应斜靠在展开缸中，且点样原点不能浸入展开剂中；当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，超出并距离点样原点6cm～15cm时，将硅胶G薄层板取出；
[0022] 5)显色形成斑点
[0024] 6)对比鉴别
[0025] 将硅胶G薄层板上对照品点样原点形成的斑点与样品点样原点形成的斑点进行比对，根据斑点出现的位置判断样品中有无糊精以及糊精种类，即看看样品点样原点是否出现了对照品白糊精和黄糊精的特征斑点，以此判断样品中有无糊精以及糊精种类；根据斑点颜色深浅判断样品中糊精浓度大小，即判断样品中糊精浓度大于、小于还是等于对照品中糊精浓度，以此推断出样品中糊精的大致含量。
[0026] 进一步地，步骤1.1)中，所述对照品溶液的质量浓度为1mg/ml；步骤2)中，对照品溶液和样品溶液的点样量均为20μl；按照此条件进行配置对照品溶液并进行点样，展开的斑点清晰容易判断，且不拖尾。
[0027] 进一步地，步骤1.2)中，所述超声处理为60分钟。
[0028] 进一步地，步骤2)中，所述样品溶液和对照品溶液的点样位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.0～1.5cm，能够在完成展开步骤时，有效地利用薄层板。
[0029] 进一步地，步骤3.2)中，为了使展开剂在展开缸中更好的达到平衡，从而减少硅胶G薄层板的边缘效应，所述展开缸采用双槽展开缸，，双槽展开缸的大小为10×10cm、20×10cm或10×20cm，且双槽中的展开剂剂量保持一致，并预饱和15分钟。
[0030] 进一步地，步骤4)中，当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，距离点样原点8cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出。
[0031] 进一步地，步骤5)中，为了使显色效果更好，所述硫酸乙醇溶液的质量浓度为10％。
[0033] 本发明的优点是：
[0034] 1.本发明鉴别糊精采用成本低，操作简单，快速，图谱信息丰富的薄层检测方法，灵敏度高，专属性强，对糊精的检测对比明显，结果直观，易于辨认和区分，为确保植物提取物的质量提供了可靠的鉴别方法。
[0035] 2.本发明选用白糊精和黄糊精的薄层特征斑点进行定性检测，斑点清晰，结果判断直观准确，可以很好的判断提取物中是否添加有糊精，以及确定添加的是白糊精还是黄糊精。同时，用对照品和样品中糊精特征斑点颜色的深浅，可大致判断样品中糊精添加量的范围，结果判断简单快速，易于操作。
[0036] 3.本发明中对照品和样品均选用50％的乙醇溶解，既减少了外因对照品溶液和样品溶液的影响，又使检测成分得到了充分的溶解，有利于提高检测结果的准确性。
[0037] 4.本发明中对照品溶液的质量浓度选用1mg/ml，对照品溶液和样品溶液点样量选用20μl，使斑点清晰且不拖尾，容易判断。
[0038] 5.本发明采用氯仿、甲醇、水以5∶5∶1的体积比混合，得到展开剂，斑点分离效果好，各样品特征斑点突出，且没有斑点拖尾和斑点扩散现象，结果对比明显，容易判断。
[0039] 6.本发明薄层板的展开距离为8～10cm，此时斑点分离度效果好，斑点没有重合现象。
[0041] 图1为本发明实施例1的显色视图；
[0042] 图2为本发明实施例2的显色视图；
[0043] 图3为本发明实施例3的显色视图；
[0044] 图4为本发明实施例4的显色视图；
[0045] 图5为本发明实施例5的显色视图。
具体实施方式
[0046] 以下结合附图和具体实施例对本发明的内容作进一步的详细描述：
[0047] 实施例1
[0048] 植物提取物中糊精的薄层检测方法包括以下步骤：
[0049] 1)制备对照品溶液以及样品溶液
[0050] 1.1)分别取适量的白糊精和黄糊精，并分别质量浓度为50％的乙醇溶解制成质量浓度为1mg/ml的对照品溶液，依次编号为1号、2号；
[0051] 1.2)取不含糊精的植物提取物、添加有10％白糊精的植物提取物、添加有10％黄糊精的植物提取物各100g置于可密封的试验容器中，分别加入10ml质量浓度为50％的乙醇溶解，并进行超声处理60分钟，取出试验容器后放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品溶液，依次编号为3号、4号、5号；
[0052] 2)薄层点样
[0053] 将步骤1)中制备好的对照品溶液和样品溶液依次分别点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上，形成点样原点，点样量20μl，点样位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.0cm；
[0054] 3)制备展开剂
[0055] 3.1)取氯仿、甲醇和水，以5∶5∶1的体积比混合，制备20ml的展开剂；此处氯仿、甲醇均为纯品；
[0056] 3.2)将展开剂置于10×10cm的双槽展开缸中，且双槽中的展开剂剂量保持一致，密封展开缸，预饱和15分钟；
[0057] 4)展开
[0058] 将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G薄层板放入展开缸中，放入的硅胶G薄层板应斜靠在展开缸中，且点样原点不能浸入展开剂中；当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，超出并距离点样原点8cm时，将硅胶G薄层板取出；
[0059] 5)显色形成斑点
[0060] 采用吹风机将步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂吹干，喷以质量浓度为10％的硫酸乙醇溶液，采用电加热板在105℃下加热10～20分钟，放至室温后在白光下检视，得到图1中的视图；
[0061] 6)对比鉴别
[0062] 将硅胶G薄层板上对照品点样原点形成的斑点与样品点样原点形成的斑点进行比对，从图1中可以看出：
[0063] a.白光下，在Rf＝0.38，0.28，0.18，0.11附近，白糊精有四个明显棕黑色斑点；在Rf＝0.01～0.10之间，白糊精有黑色的条带。由此，可以判断出编号3和编号5的样品中不含有白糊精，编号4的样品含有白糊精。
[0064] b.白光下，在Rf＝0.50附近，黄糊精有一个明显的棕黑色斑点。由此，可以判断出编号3和编号4的样品中不含有黄糊精，编号5的样品中含有黄糊精。
[0065] c.白光下，选取Rf＝0.38，0.28，和0.18这三个点作为白糊精对比斑点，根据白糊精对照品的浓度，通过对比样品溶液和对照品溶液中这三个斑点的颜色深浅，即可得出样品中白糊精的大致浓度。如图1所示，编号4的样品在Rf＝0.38，0.28，和0.18处的三个斑点颜色和编号1的白糊精对照品斑点颜色深浅基本一致，由此可以大致判断出编号4的样品溶液中白糊精的浓度和对照品基本一致，进而推断出白糊精的含量约为10％，此判断结果与实际配样结果一致。
[0066] d.白光下，选取Rf＝0.5这个斑点作为黄糊精对比斑点，根据黄糊精对照品的浓度，通过对比样品溶液和对照品溶液中这个斑点的颜色深浅，即可得出样品中黄糊精的大致浓度。如图1所示，编号5的样品在Rf＝0.50处的斑点颜色和编号2的黄糊精对照品斑点颜色深浅基本一致，由此可以大致判断出编号5的样品溶液中黄糊精的浓度和对照品基本一致，进而推断出黄糊精的含量约为10％，此判断结果与实际配样结果一致。
[0067] e.选用没有添加糊精的植物提取物和添加有糊精的植物提取物同时进行对比分析，对比结果明显，糊精定性鉴别的专属性强，大致含量的判断简单快速。
[0068] 通过a、b、c、d、e进一步地验证了本发明检测方法的可靠性。
[0069] 实施例2
[0070] 与实施例1的不同之处在于：
[0071] 步骤1.2)中，编号4中白糊精的添加量为20％，编号5中黄糊精的添加量为30％；
[0072] 步骤2)中，点样位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.5cm；
[0073] 步骤4)中，当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，距离点样原点10cm时，将硅胶G薄层板取出；
[0074] 得到的显色图参见图2，采用与实施例1相同的判断方法，由图2中可以得出：编号4的样品含有白糊精，且含量大于10％；编号5的样品含有黄糊精，且含量大于10％；判断结果与实际配样结果一致。
[0075] 实施例3
[0076] 与实施例1的不同之处在于：
[0077] 步骤1.2)中，编号4中白糊精的添加量为5％，编号5中黄糊精的添加量为5％；超声处理30分钟；
[0078] 步骤5)中，喷以质量浓度为5％的硫酸乙醇溶液；
[0079] 得到的显色图参见图3，采用与实施例1相同的判断方法，由图3中可以得出：编号4的样品含有白糊精，且含量小于10％；编号5的样品含有黄糊精，且含量小于10％；判断结果与实际配样结果一致。
[0080] 上述实施例1-实施例3均采用的是验证法，自己配置样品，反向验证本发明方法的可靠性。
[0081] 实施例4
[0082] 植物提取物中糊精的薄层检测方法包括以下步骤：
[0083] 1)制备对照品溶液以及样品溶液
[0084] 1.1)分别取适量的白糊精和黄糊精，并分别质量浓度为50％的乙醇溶解制成质量浓度为0.9mg/ml的对照品溶液，依次编号为1号、2号；
[0085] 1.2)取两种待检测植物提取物样品(均不知道添加的糊精种类和添加量)，根据产品合格可接受糊精的添加量上限(含量30％，当然这个添加量上限根据不同企业的对产品质量要求会有所不同)分别称取30mg，并分别加入10ml质量浓度为50％的乙醇溶解，超声处理60分钟，取出试验容器后放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品溶液，依次编号为3号、4号；
[0086] 2)薄层点样
[0087] 将步骤1)中制备好的对照品溶液和样品溶液依次分别点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上，形成点样原点，点样量20μl，点样位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.5cm；
[0088] 3)制备展开剂
[0089] 3.1)取氯仿、甲醇和水，以5∶5∶1的体积比混合，制备20ml的展开剂；此处氯仿、甲醇均为纯品；
[0090] 3.2)将展开剂置于10×10cm的双槽展开缸中，且双槽中的展开剂剂量保持一致，密封展开缸，预饱和15分钟；
[0091] 4)展开
[0092] 将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G薄层板放入展开缸中，放入的硅胶G薄层板应斜靠在展开缸中，且点样原点不能浸入展开剂中；当展开剂的前沿上行至硅胶G薄层板上边缘，距离点样原点8cm时，将硅胶G薄层板取出；
[0093] 5)显色与检视
[0094] 采用吹风机将步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂吹干，喷以质量浓度为10％的硫酸乙醇溶液，采用电加热板在105℃下加热10～20分钟，放至室温后在白光下检视，得到图4中的视图。
[0095] 6)对比鉴别
[0096] 将硅胶G薄层板上对照品点样原点形成的斑点与样品点样原点形成的斑点进行比对，从图4中可以看出：
[0097] a.白光下，在Rf＝0.38，0.28，0.18，0.11附近，白糊精有四个明显棕黑色斑点；在Rf＝0.01～0.10之间，白糊精有黑色的条带；在Rf＝0.50附近，黄糊精有一个明显的棕黑色斑点；
[0098] 由此，可以判断出编号3的样品中既含有白糊精，又含有黄糊精，而编号4的样品中仅含有黄糊精。
[0099] b.白光下，选取Rf＝0.38，0.28，和0.18这三个点作为白糊精对比斑点，选取Rf＝0.50这个斑点作为黄糊精对比斑点，根据白糊精对照品、黄糊精对照品的浓度，通过对比样品溶液和对照品溶液中这三个斑点的颜色深浅，即可得出样品中白糊精的大致浓度。如图4所示，编号3的样品在Rf＝0.38，0.28，和0.18处的三个斑点颜色较编号1的白糊精对照品斑点的颜色深、在Rf＝0.5处这个斑点颜色深浅较编号2的黄糊精对照品斑点的颜色深；而编号4的样品在Rf＝0.5处这个斑点颜色较编号2的黄糊精对照品斑点的颜色浅；由此可以大致判断出编号3的样品溶液中白糊精的浓度以及黄糊精的浓度均大于对照品中的浓度，进而推断出白糊精的含量大于30％、黄糊精的含量大于30％；而编号4的样品溶液中黄糊精的浓度小于对照品中的浓度，进而推断出黄糊精的含量小于30％；
[0100] 通过a、b进一步地验证了本发明检测方法的可靠性。
[0101] 实施例5
[0102] 与实施例4的不同之处在于：
[0103] 步骤3.2)中，预饱和20分钟；
[0104] 得到的显色视图参见图5，采用与实施例4相同的判断方法，由图5中可以得出：编号3的样品含有白糊精，且含量小于30％；编号4的样品含有黄糊精，且含量大于30％。
[0105] 上述实施例4和实施例5均从正面验证了本发明方法的可靠性，对未知样品中有无糊精、糊精种类以及糊精添加量进行判断。
[0106] 在实际应用该过程中，由于每个企业对糊精添加量的标准都有所不同，因此可根据实际情况，选择合适的添加量期望值对未知样品进行称取和配置，同时根据添加量期望值配置对照品溶液；若对产品的糊精添加量无具体范围要求，则可配置产品合格糊精上限值对应的对照品溶液和样品溶液即可，若对产品糊精添加量有具体范围要求，则按照具体范围要求配置端点值对应的对照品溶液和样品溶液，然后依照本发明方法进行检测、判断即可；综上，本发明检测方法在应用时可灵活配置对照品溶液和样品溶液，以满足要求。
[0107] 以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明公开的技术范围内，可轻易想到各种等效的修改或替换，这些修改或替换都应涵盖在本发明的保护范围之内。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 青翅蚁形隐翅甲V-ATPase-A基因的dsRNA及其人工饲料和应用 | 2020-05-12 | 344 |
| 牡丹PsMYB12转录因子及其编码基因与应用 | 2020-05-13 | 315 |
| 一种植物提取物抗糖化效果的评估方法 | 2020-05-08 | 703 |
| 一种利用亚精胺促进杉木体胚发生的方法 | 2020-05-13 | 992 |
| 一种利用氨基寡糖素促进杉木体胚发生的方法 | 2020-05-13 | 75 |
| 一种辅助萌蘖型隐芽植物度过环境胁迫和快速复萌的方法 | 2020-05-13 | 609 |
| 利用BCS1L基因和向导RNA/CAS核酸内切酶系统改良植物农艺性状的方法 | 2020-05-12 | 186 |
| 一种利用水杨酸促进杉木体胚发生的方法 | 2020-05-13 | 281 |
| 用于杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的定性、定量检测方法 | 2020-05-14 | 690 |
| 一种植物病原真菌恒温培养箱 | 2020-05-14 | 182 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈