丙型肝炎病毒抑制剂
阅读：112发布：2024-02-01
专利汇可以提供丙型肝炎病毒抑制剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供式(I)化合物，其中变量如本 说明书 中的定义，或其医药学上可接受的盐，所述化合物为丙型 肝炎 病毒复制的 抑制剂 。本发明还提供包含所述化合物的医药组合物，使用所述化合物 治疗 丙型肝炎 病毒感染 的方法，以及适用于制备所述化合物的工艺和中间物。，下面是丙型肝炎病毒抑制剂专利的具体信息内容。
1.一种式(III)化合物：
其中
1 q q
R 是选自C1-6烷基、苯基和C3-6环烷基，其中C1-6烷基任选经-OR 取代，其中R 为氢或C1-3烷基；
2
R 选自氢和C1-6烷基；
3 a b
R 是选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基、-C(O)NRR、-C(O)C3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基其中：
a b
R 和R 独立地为氢或C1-6烷基；
5 k d e f g h
R 是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、-C(RR)NRR、-NRR、杂芳基、杂环和-CH2-杂芳基；
其中：
任何杂芳基或杂环均具有5或6个环原子；
c
C1-6烷基任选经1或2个独立地选自-OR、-NHC(O)C1-3烷基和-NHC(O)OC1-3烷基的取代基取代；
d
C1-6烷氧基任选经-OR 取代；
C3-6环烷基任选经1或2个独立地选自C1-3烷基和卤基的取代基取代；
任何杂环均任选经1、2或3个独立地选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基、-C(O)C3-6环烷基、-C(O)NHC1-6烷基和-C(O)NHC3-6环烷基的取代基取代；
n d e
其中任何-C(O)C1-6烷基均任选经-NHC(O)OC1-3烷基、-OR、-NRR 或杂环取代，任何-C(O)C3-6环烷基均任选经1或2个C1-3烷基取代，且
n
任何-C(O)NHC1-6烷基均任选经-OR 或C3-6环烷基取代；
任何杂芳基均任选经C1-3烷基取代；
c
R 是独立地选自氢、C1-6烷基和苯基；
k d e g h
R、R、R、R 和R 各自独立地为氢或C1-3烷基；
f
R 是选自氢和-C(O)C1-3烷基；
n
R 独立地为氢或C1-3烷基；
7
R 是选自卤基、C1-3烷基和C1-3烷氧基，其中C1-3烷基和C1-3烷氧基任选经1、2或3个卤基取代；和
9
R 为C1-3烷基；
a为1或2；和
c为1或2；
或其医药学上可接受的盐或立体异构体。
5 e f g h
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R 是选自C3-4环烷基、-CH2NRR、-NRR、咪唑基、吡唑基、嘧啶基和吡咯烷基；
其中：
C3-4环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代；
吡咯烷基经甲基和选自-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基和-C(O)NHC1-6烷基的取代基取代，其中
n d e
-C(O)C1-6烷基经-NHC(O)OC1-3烷基、-OR、-NRR 或杂环取代。
5
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R 是选自-NHCH3、2，2-二甲基环丙基、
4.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为C1-6烷基，R2为氢；并且R3为-C(O)OC1-6烷基。
5.根据权利要求1所述的化合物，其中R7是选自氟、氯、-CF3和-OCF3；并且R9为甲基。
6.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1是异丙基，R2是氢，并且R3是-C(O)OCH3；
R7是选自氟、氯、-CF3和-OCF3，并且R9是甲基；和
R5是选自-NHCH3、2，2-二甲基环丙基和
7.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是选自：
和其医药学上可接受的盐。
8.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是选自：
和其医药学上可接受的盐。
9.一种式(IV)化合物：
其中：
1 q q
R 是选自C1-6烷基、苯基和C3-6环烷基，其中C1-6烷基任选经-OR 取代，其中R 为氢或C1-3烷基；
2
R 选自氢和C1-6烷基；
3 a b
R 是选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基、-C(O)NRR、-C(O)C3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基其中：
a b
R 和R 独立地为氢或C1-6烷基；
5 k d e f g h
R 是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、-C(RR)NRR、-NRR、杂芳基、杂环和-CH2-杂芳基；
其中：
任何杂芳基或杂环均具有5或6个环原子；
c
C1-6烷基任选经1或2个独立地选自-OR、-NHC(O)C1-3烷基和-NHC(O)OC1-3烷基的取代基取代；
d
C1-6烷氧基任选经-OR 取代；
C3-6环烷基任选经1或2个独立地选自C1-3烷基和卤基的取代基取代；
任何杂环均任选经1、2或3个独立地选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基、-C(O)C3-6环烷基、-C(O)NHC1-6烷基和-C(O)NHC3-6环烷基的取代基取代；
n d e
其中任何-C(O)C1-6烷基均任选经-NHC(O)OC1-3烷基、-OR、-NRR 或杂环取代，任何-C(O)C3-6环烷基均任选经1或2个C1-3烷基取代，并且
n
任何-C(O)NHC1-6烷基均任选经-OR 或C3-6环烷基取代；
任何杂芳基均任选经C1-3烷基取代；
c
R 是独立地选自氢、C1-6烷基和苯基；
k d e g h
R、R、R、R 和R 各自独立地为氢或C1-3烷基；
f
R 是选自氢和-C(O)C1-3烷基；
n
R 独立地为氢或C1-3烷基；和
7
R 是选自卤基、C1-3烷基和C1-3烷氧基，其中C1-3烷基和C1-3烷氧基任选经1、2或3个卤基取代；和
9 n
R 为C1-3烷基或-CH2OR ；
T为CH或N；
a和c独立地为0、1或2；
或其医药学上可接受的盐或立体异构体。
10.根据权利要求9所述的化合物，其中
5 k d e f g h
R 是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、-C(RR)NRR、-NRR、杂芳基、杂环和-CH2-杂芳基；
其中
任何杂芳基或杂环均具有5或6个环原子；
C3-6环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代；
任何杂环均任选经1或2个选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、任选经-NHC(O)OC1-3烷基取代的-C(O)C1-6烷基和任选经1或2个C1-3烷基取代的-C(O)C3-6环烷基的取代基取代；
k d e g h
R、R、R、R 和R 各自独立地为氢或C1-3烷基；和
f
R 是选自氢和-C(O)C1-3烷基。
11.一种医药组合物，其包含根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物和医药学上可接受的载剂。
12.根据权利要求11所述的医药组合物，其进一步包含一种或一种以上适用于治疗丙型肝炎病毒感染的其它治疗剂。
13.根据权利要求12所述的医药组合物，其中所述一种或一种以上其它治疗剂是选自HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、干扰素和聚乙二醇化干扰素以及病毒唑(ribavirin)和相关核苷类似物。
14.根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物，其是用于疗法。
15.根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物，其是用于治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染。
16.根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物，其是与一种或一种以上其它治疗剂一起用于治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染。
17.根据权利要求16所述的化合物，其中所述一种或一种以上其它治疗剂是选自HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、干扰素和聚乙二醇化干扰素以及病毒唑和相关核苷类似物。
18.根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物，其用于抑制哺乳动物的丙型肝炎病毒复制。
19.根据权利要求18所述的化合物，其用于与一种或一种以上选自HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、干扰素和聚乙二醇化干扰素以及病毒唑和相关核苷类似物的其它治疗剂组合。
20.一种包含根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物和医药学上可接受的载剂的医药组合物的用途，其用于制备用以治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的药剂。
21.根据权利要求20所述的用途，其中所述药剂与一种或一种以上适用于治疗丙型肝炎病毒感染的其它治疗剂组合使用。
22.根据权利要求21所述的用途，其中所述一种或一种以上其它治疗剂是选自HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、干扰素和聚乙二醇化干扰素以及病毒唑和相关核苷类似物。
23.一种包含根据权利要求1至10中任一权利要求所述的化合物和医药学上可接受的载剂的医药组合物的用途，其用于制备用以抑制哺乳动物的丙型肝炎病毒复制的药剂。
24.根据权利要求23所述的用途，其中所述药剂与一种或一种以上适用于抑制哺乳动物的丙型肝炎病毒复制的其它治疗剂组合使用。
25.根据权利要求24所述的用途，其中所述一种或一种以上其它治疗剂是选自HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、干扰素和聚乙二醇化干扰素以及病毒唑和相关核苷类似物。
丙型肝炎病毒抑制剂
技术领域
背景技术
[0002] 最近估计全世界感染丙型肝炎病毒(HCV)的人数超过170,000,000，包括3,000,000美国人。认为感染率大致为人类免疫缺陷病毒(HIV)感染率的4至5倍。虽然在一些个体中，天然免疫反应能够战胜病毒，但在大多数情况下会建立慢性感染，导致发展肝硬化和肝细胞癌的风险增加。因此，丙型肝炎感染带来严重公共卫生问题。
[0003] 到2011年中期，HCV的公认护理标准涉及使用聚乙二醇化干扰素，相信聚乙二醇化干扰素通过与病毒唑一起增强身体免疫反应而起作用。令人遗憾的是，治疗过程非常漫长，通常为48周，往往伴随严重不良副作用，包括抑郁、流感样症状、疲劳和溶血性贫血，并且在多达50％的患者中无效。在2011年中期，美国有两种HCV蛋白酶抑制剂批准用于与干扰素和病毒唑组合使用。尽管已报告较佳的治愈率，但是治疗过程仍漫长并且报随不想要的副作用。因此，在HCV治疗方面存在未被满足的迫切需要。
[0004] 造成HCV感染的病毒已经鉴别为属于黄病毒科(family Flaviviridae)的正链RNA病毒。HCV基因组编码聚合蛋白，聚合蛋白在病毒生命周期期间裂解成10种个别蛋白质，包括结构蛋白与非结构蛋白。已显示6种非结构蛋白(表示为NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)为RNA复制所需。具体来说，NS5A蛋白看似在病毒复制以及调节宿主细胞的生理机能方面起重要作用。也已鉴别NS5A对干扰素信号传导、细胞生长调控和细胞凋亡的作用。(麦克唐纳(Macdonald)等人，普通病毒学杂志(Journal of General Virology)(2004)，85，2485-2502。)预期抑制NS5A蛋白功能的化合物可提供新颖HCV治疗方法。
发明内容
[0005] 在一方面中，本发明提供抑制HCV病毒复制的新颖化合物。
[0006] 因此，本发明提供式(I)化合物：
[0007]
[0008] 其中：
[0009] R1是选自C1-6烷基、苯基、C3-6环烷基、杂芳基和杂环，其中C1-6烷基任选经-ORq取q代，其中R 为氢或C1-3烷基；
[0010] R2是选自氢和C1-6烷基；
[0011] R3是选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基、-C(O)OC3-6环烷基、-C(O)NRaRb、-C(O)C1-6烷基、-C(O)C3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基；
[0012] 其中
[0013] Ra和Rb独立地为氢或C1-6烷基；
[0014] R4为-C(O)R5或-S(O)2R6；
[0016] 其中
[0017] C1-6烷基任选经1或2个独立地选自-ORc、-S(O)2C1-3烷基、-NHC(O)C1-3烷基和-NHC(O)OC1-3烷基的取代基取代；
[0018] C1-6烷氧基任选经-ORd取代；
[0019] C3-6环烷基任选经1、2或3个独立地选自C1-3烷基、NRjRm、-ORn和卤基的取代基取代；
[0020] 任何杂环均任选经1、2或3个独立地选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基、-C(O)C3-6环烷基、-C(O)NHC1-6烷基、-C(O)NHC3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基的取代基取代；
[0021] 其中任何-C(O)C1-6烷基均任选经-NHC(O)OC1-3烷基、-ORn、-NRdRe或杂环取代；
[0022] 任何-C(O)C3-6环烷基均任选经1或2个C1-3烷基取代；并且
[0023] 任何-C(O)NHC1-6烷基均任选经-ORn或C3-6环烷基取代；
[0024] 任何杂芳基均任选经C1-6烷基取代；
[0025] Rc是独立地选自氢、C1-6烷基和苯基；
[0026] Rd独立地为氢或C1-6烷基；
[0027] Re独立地为氢或C1-6烷基；
[0028] Rf是独立地选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基和-C(O)C1-6烷基；
[0029] Rn独立地为氢或C1-3烷基；
[0030] Rk是独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、苯基和-CH2ORn；
[0031] Rg独立地为氢或C1-6烷基；
[0032] Rh是独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基，其中C1-6烷基任选d经-OR 取代；
[0033] Rj独立地为氢或C1-6烷基；
[0034] Rm是独立地选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基和-C(O)C1-6烷基；
[0035] R6是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、苯基和杂芳基环；
[0036] R7、R8和R11是独立地选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-C(O)ORn、-CH2NRaRb和-CN，其d中C1-6烷基和C1-6烷氧基任选经1、2、3、4或5个卤基取代，并且其中C1-6烷氧基任选经-OR取代；
[0037] R9是独立地选自C1-6烷基、-CH2ORn、-C(O)NRnRp和C(O)ORn，其中C1-6烷基任选经-S(O)2C1-3烷基或-SC1-3烷基取代；
[0038] Rp独立地为氢或C1-3烷基；
[0039] R10是选自氢、卤基、C1-6烷基、-C(O)ORc、-C(O)NRaRb、-CH2NRaRb、C3-6环烷基和-CN；
[0041] W、X、Y和Z独立地为碳或氮，其中任何碳原子均键结到氢或R7，其限制条件为W、X、Y和Z中至少两者为碳；
[0042] Am为-NHC(O)-或-C(O)NH-；
[0043] Q、T、U和V独立地为碳或氮，其中任何碳原子均键结到氢或R8，其限制条件为Q、T、U和V中至少两者为碳；并且
[0044] a、b、c和d独立地为0、1或2；
[0045] 或其医药学上可接受的盐或立体异构体。
[0046] 如下文中所使用，短语“式(I)化合物”意指式(I)化合物或其医药学上可接受的盐； 也就是说，除非另外指示，否则这个短语意指呈游离碱形式或呈医药学上可接受的盐形式的式(I)化合物。
[0047] 本发明还提供一种医药组合物，其包含本发明化合物和医药学上可接受的载剂。此外，本发明提供一种医药组合物，其包含本发明化合物、医药学上可接受的载剂和一种或一种以上适用于治疗丙型肝炎病毒感染的其它治疗剂。
[0048] 本发明还提供一种治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或医药组合物。此外，本发明提供一种治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明的化合物或医药组合物和一种或一种以上适用于治疗丙型肝炎病毒感染的其它治疗剂。此外，本发明提供一种抑制哺乳动物中的丙型肝炎病毒复制的方法，所述方法包含投予本发明的化合物或医药组合物。
[0049] 在独立和不同方面中，本发明还提供本文所述的合成工艺和中间物，其适用于制备本发明化合物。
具体实施方式
[0051] 在其它方面中，本发明提供式(I)的HCV复制抑制剂、其医药学上可接受的盐和用于其制备的中间物。以下取代基和值打算提供本发明的各种方面的代表性实例。这些代表性值打算进一步定义所述方面，而不打算排除其它值或限制本发明的范畴。
[0052] 在一特定方面中，R1是选自C1-6烷基、苯基、C3-6环烷基、杂芳基和杂环；其中C1-6烷q q基任选经-OR 取代；其中R 为氢或C1-3烷基。
[0053] 在本发明的另一特定方面中，R1是选自C1-6烷基、苯基、C3-6环烷基、杂芳基和杂环。
[0054] 在另一特定方面中，R1是选自C1-6烷基、苯基和C3-6环烷基，其中C1-6烷基任选q q经-OR 取代；其中R 为氢或C1-3烷基。
[0055] 在另一特定方面中，R1是选自C1-6烷基和苯基。
[0056] 在一特定方面中，R1为C1-3烷基。
[0057] 在另一特定方面中，R1为异丙基。
[0058] 在一特定方面中，R2为氢或C1-6烷基。
[0059] 在其它特定方面中，R2为氢或C1-3烷基；或R2为氢。
[0060] 在一特定方面中，R3是选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基、-C(O)OC3-6环烷基、-C(O)a b a bNRR、-C(O)C1-6烷基、-C(O)C3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基，其中R 和R 独立地为氢或C1-6烷基。
[0061] 在另一特定方面中，R3是选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基、-C(O)NRaRb、-C(O)C3-6a b环烷基和-S(O)2C1-3烷基，其中R 和R 独立地为氢或C1-6烷基。
[0062] 在其它特定方面中，R3是选自氢、C1-6烷基和-C(O)OC1-6烷基；并且R3为-C(O)OC1-3烷基。
[0063] 在一特定方面中，R1为C1-6烷基，R2为氢，并且R3为-C(O)OC1-6烷基。
[0064] 在另一特定方面中，R1为异丙基，R2为氢，并且R3为-C(O)OCH3。
[0065] 在其它特定方面中，R1为苯基且R2和R3各自为C1-3烷基，或R1为苯基并且R2和R31 2 3
各自为乙基；或R 为苯基，R 为氢，并且R 为-C(O)OC1-3烷基。
各自为乙基；或R 为苯基，R 为氢，并且R 为-C(O)OC1-3烷基。
[0066] 在一特定方面中，R4为-C(O)R5，其中R5如式(I)中所定义。
[0067] 在另一特定方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷k d e f g h c氧基、-C(RR)NRR、-NRR、杂芳基、杂环、-CH2-杂芳基和苯基；其中C1-6烷基任选经-ORj m n
或-S(O)2C1-3烷基取代；C3-6环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代，或经NRR 或-OR 取代；
任何杂环均任选经1或2个选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、任选经-NHC(O)OC1-3烷基取代的-C(O)C1-6烷基、和任选经1或2个C1-3烷基取代的-C(O)C3-6环烷基的取代基取代；
h
并且任何杂芳基均任选经C1-6烷基取代，其中R 是选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基和-S(O)2C1-3c k d e f g j m n
烷基，并且R、R、R、R、R、R、R、R 和R 如式(I)中所定义。
或-S(O)2C1-3烷基取代；C3-6环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代，或经NRR 或-OR 取代；
任何杂环均任选经1或2个选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、任选经-NHC(O)OC1-3烷基取代的-C(O)C1-6烷基、和任选经1或2个C1-3烷基取代的-C(O)C3-6环烷基的取代基取代；
h
并且任何杂芳基均任选经C1-6烷基取代，其中R 是选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基和-S(O)2C1-3c k d e f g j m n
烷基，并且R、R、R、R、R、R、R、R 和R 如式(I)中所定义。
[0068] 在另一特定方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧k d e f g h基、-C(RR)NRR、-NRR、杂芳基、杂环和-CH2-杂芳基，其中任何杂芳基或杂环均具有5或
6个环原子；C3-6环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代；任何杂环均任选经1或2个选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、任选经-NHC(O)OC1-3烷基取代的-C(O)C1-6烷基、和任选经1或k d e g h
2个C1-3烷基取代的-C(O)C3-6环烷基的取代基取代；R、R、R、R 和R 各自独立地为氢或f
C1-3烷基；并且R 是选自氢和-C(O)C1-3烷基。
6个环原子；C3-6环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代；任何杂环均任选经1或2个选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、任选经-NHC(O)OC1-3烷基取代的-C(O)C1-6烷基、和任选经1或k d e g h
2个C1-3烷基取代的-C(O)C3-6环烷基的取代基取代；R、R、R、R 和R 各自独立地为氢或f
C1-3烷基；并且R 是选自氢和-C(O)C1-3烷基。
[0069] 在另一特定方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自C3-4环烷基、-CH2NReRf、-NRgRh、咪唑基、吡唑基、嘧啶基和吡咯烷基；其中：C3-4环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代；吡咯烷基经甲基和选自-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基、-C(O)NHC1-6烷基的取代基取 代，其中-C(O)n d eC1-6烷基经-NHC(O)OC1-3烷基、-OR、-NRR 或杂环取代。
[0070] 在另一特定方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自-O-叔丁基、环丙基、叔丁基、-NHCH3、2，2-二甲基环丙基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、-CH2-吡唑基、1-乙酰基吡咯烷基、2-甲基吡咯烷-1-甲酸甲酯、1-环丙基-2-甲基吡咯烷、1-(2，2-二甲基环丙基)-2-甲基吡咯烷和[-2-甲基-1-(2-甲基-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯。
[0071] 在另一特定方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自-O-叔丁基、环丙基、叔丁基、-NHCH3、2，2-二甲基环丙基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、-CH2-吡唑基和1-乙酰基吡咯烷基。
[0072] 在另一方面中，R4为-C(O)R5，其中R5为5或6元杂芳基环；
[0073] 在另一方面中，R4为-C(O)R5，其中R5为环丙基或2，2-二甲基环丙基。
[0074] 在另一方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自-NHCH3、2，2-二甲基环丙基、[0075]
[0076] 在另一方面中，R4为-C(O)R5，其中R5是选自-NHCH3、2，2-二甲基环丙基和[0077] 在另一方面中，R4为-C(O)R5，其中R5为-NHCH3。
[0078] 在一特定方面中，R4为-S(O)2R6，其中R6是选自C1-6烷基、C3-6环烷基和杂芳基。
[0079] 在另一特定方面中，R4为-S(O)2R6，其中R6是选自C1-6烷基、C3-6环烷基和5或6元杂芳基。
[0080] 在另一特定方面中，R4为-S(O)2R6，其中R6为C1-6烷基。
[0081] 在另一特定方面中，R4为-S(O)2R6，其中R6为甲基。
[0082] 在一特定方面中，R7、R8和R11是独立地选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-C(O)n a bOR、-CH2NRR 和-CN，其中C1-6烷基和C1-6烷氧基任选经1、2或3个卤基取代，并且其中C1-6d
烷氧基任选经-OR 取代。
烷氧基任选经-OR 取代。
[0083] 在另一特定方面中，R7、R8和R11是独立地选自卤基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-C(O)n a bOR、-CH2NRR 和-CN，其中C1-6烷基和C1-6烷氧基任选经1、2或3个卤基取代。
[0084] 在一特定方面中，R7是独立地选自卤基、C1-6烷基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基和C1-6烷氧基任选经1、2或3个卤基取代。
[0085] 在另一特定方面中，R7为卤基。
[0086] 在另一特定方面中，R7为氯或氟。
[0087] 在另一特定方面中，R7是选自甲基、-CF3、-OCH3、-OCF3和氟。
[0088] 在另一特定方面中，R7是选自氟、氯、-CF3和-OCF3。
[0089] 在一特定方面中，R9是选自C1-6烷基、-CH2ORn、-C(O)NRnRp和C(O)ORn，其中C1-6烷基任选经-S(O)2C1-3烷基或-SC1-3烷基取代。
[0090] 在另一特定方面中，R9是选自C1-6烷基、-CH2ORn、-C(O)NRnRp和C(O)ORn。
[0091] 在另一特定方面中，R9为C1-6烷基或-CH2ORn。
[0092] 在另一特定方面中，R9为C1-6烷基。
[0093] 在另一特定方面中，R9为甲基。
[0094] 在一特定方面中，R10是选自氢、卤素、C1-6烷基、-C(O)ORc、-C(O)NRaRb、-CH2NRaRb、C3-6环烷基和-CN。
[0095] 在一特定方面中，R10是选自氢、卤基和C1-6烷基。
[0096] 在其它特定方面中，R10为卤基，或R10为氯。
[0097] 在另一特定方面中，R10为氢。
[0098] 在一特定方面中，W′、X′、Y′和Z′各自为CH。
[0099] 在一特定方面中，W、X、Y和Z独立地为碳或氮，其中任何碳原子均键结到氢或R7，其限制条件为W、X、Y和Z中至少两者为碳。
[0100] 在另一特定方面中，W、X、Y和Z独立地为碳或氮，其中任何碳原子均键结到氢或7
R，其限制条件为W、X、Y和Z中至少三者为碳。
R，其限制条件为W、X、Y和Z中至少三者为碳。
[0101] 在另一特定方面中，W、X、Y和Z各自为碳，并且W、X、Y和Z中两者为CH并且W、X、7
Y和Z中两者键结到R。
Y和Z中两者键结到R。
[0102] 在另一特定方面中，W和Z独立地为键结到R7的碳，并且X和Y为CH。
[0103] 在一特定方面中，Q、T、U和V是独立地选自CH和N。
[0104] 在一特定方面中，Q、U和V各自为CH且T为N。
[0105] 在一特定方面中，a为1或2。
[0106] 在另一特定方面中，a为1。
[0107] 在另一特定方面中，a为0。
[0108] 在一特定方面中，b为0。
[0109] 在一特定方面中，c为1或2。
[0110] 在另一特定方面中，c为2。
[0111] 在另一特定方面中，c为1。
[0112] 在另一特定方面中，c为0。
[0113] 在一特定方面中，d为1。
[0114] 在一特定方面中，d为0。
[0115] 在一方面中，本发明提供2011年6月1日申请的美国临时申请案第61/492,267号中所公开的式(I)化合物。
[0116] 在另一方面中，本发明提供式(II)化合物：
[0117]
[0118] 其中式(II)中的变量如本文所定义。
[0119] 在另一方面中，本发明提供式(III)化合物
[0120]
[0121] 其中式(III)中的变量如本文所定义。
[0122] 一组特定式(III)化合物为如下群组，其中：
[0123] R1是选自C1-6烷基、苯基和C3-6环烷基，其中C1-6烷基任选经-ORq取代；
[0124] R3是选自氢、C1-6烷基、-C(O)OC1-6烷基、-C(O)NRaRb、-C(O)C3-6环烷基和-S(O)2C1-3烷基；
[0125] R5是选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、-C(RkRd)NReRf、-NRgRh、杂芳基、杂环和-CH2-杂芳基；
[0126] 其中：
[0127] 任何杂芳基或杂环均具有5或6个环原子；
[0128] C1-6烷基任选经1或2个独立地选自-ORc、-NHC(O)C1-3烷基和-NHC(O)OC1-3烷基的取代基取代；
[0129] C1-6烷氧基任选经-ORd取代；
[0130] C3-6环烷基任选经1或2个独立地选自C1-3烷基和卤基的取代基取代；
[0131] 任何杂环均任选经1、2或3个独立地选自C1-3烷基、卤基、-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基、-C(O)C3-6环烷基、-C(O)NHC1-6烷基和-C(O)NHC3-6环烷基的取代基取代；
[0132] 其中任何-C(O)C1-6烷基均任选经-NHC(O)OC1-3烷基、-ORn、-NRdRe或杂环取代；
[0133] 任何-C(O)C3-6环烷基均任选经1或2个C1-3烷基取代；并且
[0134] 任何-C(O)NHC1-6烷基均任选经-ORn或C3-6环烷基取代；
[0135] 任何杂芳基均任选经C1-3烷基取代；
[0136] Rk、Rd、Re、Rg和Rh各自独立地为氢或C1-3烷基；
[0137] Rf是选自氢和-C(O)C1-3烷基；
[0138] R7是选自卤基、C1-3烷基和C1-3烷氧基，其中C1-6烷基和C1-6烷氧基任选经1、2或3个卤基取代；
[0139] R9为C1-3烷基；
[0140] a为1或2；和
[0141] c为1或2；并且所有其它变量均如式(I)中所定义。
[0142] 另一组式(III)化合物为如下群组，其中：
[0143] R5是选自C3-4环烷基、-CH2NReRf、-NRgRh、咪唑基、吡唑基、嘧啶基和吡咯烷基；
[0144] 其中：
[0145] C3-4环烷基任选经1或2个C1-3烷基取代；
[0146] 吡咯烷基经甲基和选自-C(O)OC1-3烷基、-C(O)C1-6烷基、-C(O)NHC1-6烷基的取代基取代，其中
[0147] -C(O)C1-6烷基经-NHC(O)OC1-3烷基、-ORn、-NRdRe或杂环取代；
[0148] 其中Re、Rg和Rh各自独立地为氢或C1-3烷基；并且Rf是选自氢和-C(O)C1-3烷基。
[0149] 另一组式(III)化合物为如下群组，其中：
[0150] R1是异丙基，R2是氢，并且R3是-C(O)OCH3；
[0151] R7是选自氟、氯、-CF3和-OCF3，并且R9是甲基；和
[0152] R5是选自-NHCH3、2，2-二甲基环丙基和
[0153]
[0154] 在另一方面中，本发明另外提供式(IV)化合物：
[0155]
[0156] 其中式(IV)的变量如本文所定义。
[0157] 在另一方面中，本发明提供式(V)化合物：
[0158]
[0159] 其中每一变量如本文所定义。
[0160] 在一方面中，本发明提供以下实例1-77以及表1-34的化合物。
[0161] 在另一方面中，本发明提供选自下文所述的化合物的化合物：
[0162]
[0163]
[0164]
[0165] 和其医药学上可接受的盐。
[0166] 在另一方面中，本发明提供选自下列化合物的化合物：
[0167]
[0168] 和其医药学上可接受的盐。
[0169] 针对实例1的化合物说明本文所使用的化学命名规则：
[0170]
[0171] 根据AutoNom软件(德国法兰克福市MDL信息系统有限公司(MDL Information Systems，GmbH，Frankfurt，Germany))中 所 实 施 的 IUPAC规 则，所 述 化 合 物 为 {(S)-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯。
[0172] 本发明化合物含有一个或一个以上手性中心，并且因此所述化合物(和其中间物)可作为外消旋混合物、纯立体异构体(也就是对映异构体或非对映异构体)、立体异构体增浓混合物等存在。除非另外指示，否则本文中展示或命名的未定义手性中心处的立体化学的手性化合物打算包括未定义立体异构中心处的任何或所有可能的立体异构体变化形式。特定立体异构体的描述或命名意指所指示的立体异构中心具有指定立体化学，条件是除非另外指示，否则也可存在少量其它立体异构体，其限制条件为所描述或命名的化合物的效用不会因存在另一立体异构体而消除。
[0173] 式(I)化合物也含有若干碱性基团(例如氨基)，并且因此所述化合物可作为游离碱或以各种盐形式存在，例如单质子化了的盐形式、二质子化了的盐形式、三质子化了的盐形式或其混合物。除非另外指示，否则所有所述形式均包括在本发明范畴内。
[0174] 本发明还包括经同位素标记的式(I)化合物，也就是说式(I)化合物的一个原子已经置换或增浓为具有相同原子序数但原子质量不同于在自然界中占优势的原子质量的2 3 11 13 14 13 15
原子。可并入式(I)化合物中的同位素的实例包括(但不限于)H、H、C、C、C、N、N、
15 17 18 35 36 18
O、O、O、S、Cl和 F。特别关注氚或碳-14增浓的式(I)化合物，所述化合物可用于例如组织分布研究。还特别关注氘增浓的式(I)化合物，尤其在代谢部位，预期所述化合物具
11 18 15 13
有较大代谢稳定性。另外特别关注正电子发射同位素(例如 C、F、O和 N)增浓的式(I)化合物，所述化合物可用于例如正电子发射断层摄影法(Positron Emission Tomography；
PET)研究。
原子。可并入式(I)化合物中的同位素的实例包括(但不限于)H、H、C、C、C、N、N、
15 17 18 35 36 18
O、O、O、S、Cl和 F。特别关注氚或碳-14增浓的式(I)化合物，所述化合物可用于例如组织分布研究。还特别关注氘增浓的式(I)化合物，尤其在代谢部位，预期所述化合物具
11 18 15 13
有较大代谢稳定性。另外特别关注正电子发射同位素(例如 C、F、O和 N)增浓的式(I)化合物，所述化合物可用于例如正电子发射断层摄影法(Positron Emission Tomography；
PET)研究。
[0175] 定义
[0176] 当描述本发明(包括其各个方面和实施例)时，除非另外指示，否则以下术语具有以下含义。
[0177] 术语“烷基”意指可为直链或分支链或其组合的单价饱合烃基。除非另外定义，否则所述烷基通常含有1至10个碳原子。代表性烷基包括例如甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基(n-Pr)或(nPr)、异丙基(i-Pr)或(iPr)、正丁基(n-Bu)或(nBu)、仲丁基、异丁基、叔丁基(t-Bu)或(tBu)、正戊基、正己基、2，2-二甲基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、2-乙基丁基、2，2-二甲基戊基、2-丙基戊基等。
[0178] 当碳原子的特定数目打算用于特定术语时，碳原子数目显示于所述术语之前。例如，术语“C1-3烷基”意指具有1至3个碳原子的烷基，其中碳原子呈任何化学上可接受的组态，包括直链或分支链组态。
[0179] 术语“烷氧基”意指单价基团-O-烷基，其中烷基如上文所定义。代表性烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。
[0180] 术语“环烷基”意指可为单环或多环的单价饱和碳环基团。除非另外定义，否则所述环烷基通常含有3至10个碳原子。代表性环烷基包括例如环丙基(cPr)、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、金刚烷基等。
[0181] 术语“杂环”意指总共具有3至10个环原子的单价饱和或部分不饱和环状非芳香族基团，其中所述环含有2至9个碳环原子和1至4个选自氮、氧和硫的环杂原子。杂环基团可为单环或多环(也就是稠合或桥接)。代表性杂环基团包括例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、咪唑啶基、吗啉基、硫代吗啉基(thiomorpholyl)、吲哚啉-3-基、2-咪唑啉基、1，2，3，4-四氢异喹啉-2-基、奎宁环基、7-氮杂降莰烷基、去甲茛菪烷基等，其中连接点位于任何可利用的碳或氮环原子处。如果上下文使得杂环基团的连接点显而易见，那么所述基团可替代地称为零价物质，也就是吡咯烷、哌啶、哌嗪、咪唑等。
[0182] 术语“杂芳基”或“杂芳基环”意指总共具有5至10个环原子的单价芳香族基团，其中所述环含有1至9个碳环原子和1至4个选自氮、氧和硫的环杂原子。杂芳基可为单环或多环。代表性杂芳基包括例如吡咯基、异噁唑基、异噻唑基、吡唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、三嗪基、噻吩基、吡啶基(pyridyl/pyridinyl)、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基等，其中连接点位于任何可利用的碳或氮环原子处。如果上下文使得杂芳基的连接点显而易见，那么所述基团可替代地称为零价物质，也就是吡咯、异噁唑、异噻唑、吡唑、咪唑等。
[0183] 术语“卤基”意指氟、氯、溴或碘。
[0184] 术语“治疗有效量”意指当投予需要治疗的患者时足以实现治疗的量。
[0185] 如本文所使用的术语“治疗”意指治疗患者(例如哺乳动物，尤其人类)的疾病、病症或医学病状(例如丙型肝炎病毒感染)，其包括以下一者或一者以上：
[0186] (a)防止疾病、病症或医学病状发生，也就是说，防止疾病或医学病状复发或对易患所述疾病或医学病状的患者进行预防性治疗；
[0187] (b)改善疾病、病症或医学病状，也就是说，消除患者的疾病、病症或医学病状或使所述疾病、病症或医学病状消退，包括抵消其它治疗剂的作用；
[0188] (c)抑制疾病、病症或医学病状，也就是说，减缓或阻止患者的疾病、病症或医学病状发展；或
[0189] (d)减轻患者的疾病、病症或医学病状的症状。
[0190] 术语“医药学上可接受的盐”意指投予患者或哺乳动物(例如人类)可接受的盐(例如对于既定给药方案具有可接受的哺乳动物安全性的盐)。代表性医药学上可接受的盐包括乙酸盐、抗坏血酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙烷磺酸盐、乙二磺酸盐、反丁烯二酸盐、龙胆酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、谷氨酸盐、马尿酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、顺丁烯二酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲烷磺酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐、萘-1，5-二磺酸盐、萘-2，6-二磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐和羟萘甲酸盐等。
[0191] 术语“其盐”意指当酸的氢由阳离子(例如金属阳离子或有机阳离子等阳离子)置换时所形成的化合物。例如，阳离子可为式(I)化合物的质子化了的形式，也就是一个或一个以上氨基已由酸质子化了的形式。盐通常为医药学上可接受的盐，但不打算投予患者的中间化合物的盐则不需要如此。
[0192] 术语“氨基保护基”意指适用于防止氨基氮处发生不合需要的反应的保护基。代表性氨基保护基包括(但不限于)甲酰基；酰基，例如烷酰基，例如乙酰基和三氟乙酰基；烷氧基羰基，例如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧基羰基，例如苯甲氧羰基(Cbz)和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)；芳基甲基，例如苯甲基(Bn)、三苯甲基(Tr)和1，1-二-(4′-甲氧基苯基)甲基；硅烷基，例如三甲基硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基硅烷基(TBDMS)、[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基(SEM)；等。多种保护基以及其引入和去除描述于T.W.格林(Greene)和G.M.瓦茨(Wuts)，有机合成中的保护基(Protecting Groups in Organic Synthesis)，第3版，纽约威利出版公司(Wiley，New York)中。
[0193] 一般合成程序
[0194] 本发明化合物和其中间物可使用市售或按常规制备的起始物质和试剂根据以下1 2
一般方法和程序制备。除非另外指示，否则以下流程中所使用的取代基和变量(例如R、R、
3 4
R、R 等)具有与本文其它部分所定义相同的含义。此外，除非另外指示，否则具有酸性或碱性原子或官能团的化合物可作为盐使用或可作为盐制造(在一些情况下，在特定反应中使用盐将需要在进行反应之前使用常规程序将盐转化成非盐形式，例如游离碱)。
一般方法和程序制备。除非另外指示，否则以下流程中所使用的取代基和变量(例如R、R、
3 4
R、R 等)具有与本文其它部分所定义相同的含义。此外，除非另外指示，否则具有酸性或碱性原子或官能团的化合物可作为盐使用或可作为盐制造(在一些情况下，在特定反应中使用盐将需要在进行反应之前使用常规程序将盐转化成非盐形式，例如游离碱)。
[0195] 虽然以下程序中可能展示或描述本发明的特定实施例，但所属领域的技术人员应认识到，本发明的其它实施例或方面也可使用所述程序或使用所属领域的技术人员已知的其它方法、试剂和起始物质来制备。具体来说，应了解，本发明化合物可通过多种工艺路线来制备，在所述路线中反应物以不同顺序组合以提供不同中间物供制造最终产物。
[0196] 在一例示性合成方法中，制备式(1-3)化合物，其中Am定义为-NHC(O)-，如流程1中所示：
[0197] 流程1
[0198]
[0199] 其中R4a为氨基保护基Pg，或R4a为如式(I)中所定义的R4，并且G表示基团G1：
[0200]
[0201] 其中R1、R2和R3如式(I)中所定义，或为氨基保护基Pg。根据典型酰胺键形成条件使苯胺中间物1-1与羧酸1-2反应，获得式1-3化合物。在一些情况下，首先将羧酸1-2转化成酸性氯化物，接着与苯胺中间物1-1反应，获得式1-3化合物。如以下实例中所示，酰胺键形成反应可利用偶合剂，例如六氟磷酸N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲盐(HATU)或1，3-二环己基碳化二亚胺(DCC)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(EDC)或六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷基- (PyBop)，任选组合7
1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)。优选使用流程1的工艺来制备式1-3化合物，其中R 不
7
存在(a为0)或R 为多电子取代基，例如未经取代的烷基或未经取代的烷氧基，并且反应
4a
在约50℃至约60℃的温度下在偶合剂EDC和HOAt存在下进行。优选地，G和R 中仅一者为保护基，或如果存在两个保护基，那么使用在不同条件下可移动的基团。
1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)。优选使用流程1的工艺来制备式1-3化合物，其中R 不
7
存在(a为0)或R 为多电子取代基，例如未经取代的烷基或未经取代的烷氧基，并且反应
4a
在约50℃至约60℃的温度下在偶合剂EDC和HOAt存在下进行。优选地，G和R 中仅一者为保护基，或如果存在两个保护基，那么使用在不同条件下可移动的基团。
[0202] 当变量R4a定义为R4且变量G定义为G1时，则流程1的反应产物1-3为最终式(I)化合物。
[0203] 或者，当R4a定义为R4且G定义为保护基Pg(例如Boc)时，流程1的反应产物1-3为受保护中间物，接着脱除其保护基(例如通过用酸处理)，并且与试剂X-G1(其中X为卤素离去基)或在如上文所述的酰胺键形成条件下与式HO-G1的羧酸反应，获得所要产物。
[0204] 在另一例示性合成方法中，制备式2-2化合物和式2-3化合物，如流程2中所示：
[0205] 流程2
[0206]
[0207] 当中间物2-1中的G表示G1时，则流程2的反应直接获得本发明化合物。为制备4 5
式2-2化合物(其中R 定义为-C(O)R)，在碱存在下使中间物2-1与酸性氯化物反应(反
5 g h
应(i))，或如果R 定义为-NRR，那么与异氰酸酯反应(反应(iii))。或者，在酰胺键形成条件下使中间物2-1与羧酸反应(反应(ii))以制备式2-2化合物。类似地，为制备式
4 6
2-3化合物(其中R 定义为-S(O)2R)，通常在碱存在下使中间物2-1与磺酰氯反应(反应(iv))。
式2-2化合物(其中R 定义为-C(O)R)，在碱存在下使中间物2-1与酸性氯化物反应(反
5 g h
应(i))，或如果R 定义为-NRR，那么与异氰酸酯反应(反应(iii))。或者，在酰胺键形成条件下使中间物2-1与羧酸反应(反应(ii))以制备式2-2化合物。类似地，为制备式
4 6
2-3化合物(其中R 定义为-S(O)2R)，通常在碱存在下使中间物2-1与磺酰氯反应(反应(iv))。
[0208] 如上文所述，当G表示保护基时，随后进行脱除保护基步骤，并且与中间物X-G1或HO-G1偶合，获得最终产物。
[0209] 以上流程的中间物可通过常规合成反应制备。例如，双芳基苯胺中间物1-1可通过在钯催化剂存在下进行铃木偶合反应(Suzuki coupling reaction)来制备(宫浦(Miyaura)和铃木(Suzuki)，化学评论(Chem.Rev.)1995，95，2457-2483)。如以下流程3中所示，任一偶合搭配物均可带有硼酸酯部分。或者，可使用硼酸试剂替代硼酸酯试剂，例如下文所述的频哪醇硼酸酯。
[0210] 流程3
[0211]
[0212] 流程4中展示用于制备中间物1-2的例示性工艺，在所述中间物中R4a表示Pg(化4a 5
合物1-2″)或R 表示例如-C(O)R(化合物1-2′)。
合物1-2″)或R 表示例如-C(O)R(化合物1-2′)。
[0213] 流程4
[0214]
[0215] 哌嗪与氟苯甲酸酯或氟烟酸酯4-1(通常为甲酯或乙酯)的反应可在通常为约100℃至约130℃的高温下在碳酸钾存在下于二甲亚砜中进行。所产生的中间物4-2随后水解，获得受保护的中间物1-2″。为制备中间物1-2′，可将受保护的中间物1-2″(其中保护基优选为Boc)脱除保护基，接着如流程2与酸性氯化物、羧酸或异氰酸酯反应，获得中间物1-2′。
[0216] 流程5中展示用于制备中间物1-2的替代性工艺，在所述中间物中T表示氮且R4a4a 5
表示Pg(化合物1-2a″)或R 表示-C(O)R(化合物1-2a′)。
表示Pg(化合物1-2a″)或R 表示-C(O)R(化合物1-2a′)。
[0217] 流程5
[0218]
[0219] 氟烟酸5-1与受保护的哌嗪5-2反应获得中间物1-2a″通常在低于约-20℃的温度下使用异丙基氯化镁进行。
[0220] 为制备中间物1-2a′，可将受保护的中间物1-2a″(其中保护基优选为Boc)脱除保护基，并且通过在甲醇中与硫酸反应将其酯化，获得酯中间物5-3，如流程2使中间物5-3与酸性氯化物、羧酸或异氰酸酯反应，随后水解，获得中间物1-2a′。
4a
4a
[0221] 中间物2-1(其中G表示G1)可通过流程1的工艺制备，在所述中间物中变量R定义为保护基Pg。在此情况下，式1-3描述受保护的中间物，脱除其保护基即获得中间物2-1。
[0222] 流程6中展示用于制备中间物2-1的替代性工艺，在所述中间物中T表示氮(化合物2-1a)。
[0223] 流程6
[0224]
[0225] 在第一步骤中，联苯苯胺1-1与氟吡啶羰基氯6-1在碱存在下反应，获得含氟中间物6-2，中间物6-2与过量受保护哌啶5-2反应，获得受保护中间物6-3。所述反应通常在碱存在下进行，同时加热到约80℃至约120℃的温度后持续约4小时至约48小时的时期。最后，例如通过在有机溶剂中用盐酸处理将中间物6-3脱除保护基，获得呈盐酸盐形式的中间物2-1a。
[0226] 用于制备中间物2-1a的另一替代性工艺利用硼酸酯试剂3-2与中间物7-1的铃木偶合反应，接着在上述条件下进行脱除保护基步骤，如流程7中所示。
[0227] 流程7
[0228]4
[0229] 如果受保护的中间物7-1由带有取代基R 的中间物7-1′替换：
[0230]
[0231] 那么流程7的第一步骤中硼酸酯3-2的铃木偶合将直接获得最终本发明化合物。
[0232] 或者，在流程7的铃木偶合反应中，相对偶合搭配物可带有硼酸酯部分，如流程3中所示。
[0233] 含溴中间物7-1可例如通过使芳基胺8-1与氟吡啶羰基氯6-1进行酰胺偶合，接着与受保护的哌嗪5-2反应来制备，如流程8中所示。
[0234] 流程8
[0235]
[0236] 或者，中间物7-1可通过使8-1与羧酸中间物1-2″反应来制备，如流程9中所提供。
[0237] 流程9
[0238]
[0239] 例如，可如流程10和流程11中所示制备流程3的铃木反应中所使用的中间物3-1和3-2。
[0240] 流程10
[0241]
[0242] 试剂10-1(其中X表示溴或氯)与受保护的脯氨酸羧酸10-2在过量乙酸铵存在下反应，获得中间物10-3，其转化成中间物3-1″，其中变量G表示保护基。闭环反应通常在约100℃与约120℃之间的温度下进行，持续约4小时至约24小时的时期。为获得化合物3-1′(其中变量G表示G1)，通常将中间物3-1″脱除保护基，获得中间物10-4，接着使中间物10-4与试剂HO-G1偶合，获得化合物3-1′。
[0243] 最后，为获得硼酸酯中间物3-2，在钯催化剂存在下使中间物3-1与11-1反应，如流程11中所示。
[0244] 流程11
[0245]
[0246] 为制备流程7中的中间物2-1a，可在单罐法(single pot process)中根据流程11的工艺当场制备硼酸酯中间物3-2，接着与中间物7-1反应，获得中间物6-3。
[0247] 通过类似于上文所述的工艺制备式12-3化合物，其中变量Am定义为-C(O)NH-。流程12中展示一种用于制备式12-3化合物的例示性工艺。
[0248] 流程12
[0249]
[0250] 酸12-1与苯胺或氨基吡啶12-2在酰胺键形成条件下反应。如上，当变量R4a表示4
R 且变量G表示G1时，则流程12的反应直接获得最终式(I)化合物。
R 且变量G表示G1时，则流程12的反应直接获得最终式(I)化合物。
[0251] 或者，当R4a表示R4且G表示保护基Pg(例如Boc)时，所述反应获得式12-3的受保护中间物，接着脱除其保护基并且与试剂X-G1(其中X为卤素离去基)或式HO-G1的羧酸反应，获得所要产物。
[0252] 在另一替代性途径中，由式12-3化合物(其中G定义为G1且R4a为保护基Pg)获得适用中间物，将所述中间物脱除保护基并如流程2与例如酸性氯化物、羧酸或异氰酸酯反应，获得最终式(I)化合物。
[0253] 流程12的中间物可通过常规合成反应制备。例如，可通过流程13的铃木偶合反应制备双芳基酸中间物12-1。
[0254] 流程13
[0255]
[0256] 适用于制备流程12的氨基吡啶中间物12-2的工艺利用经硝基取代的氯吡啶或氯苯基14-1，使其与受保护的哌嗪5-2反应，获得受保护的中间物14-2，如流程14中所示。
[0257] 流程14
[0258]
[0259] 将硝基还原成胺，获得中间物12-2″，其中R4a表示保护基。将化合物12-2″脱除保护基，并如以上流程与例如酸性氯化物、羧酸或异氰酸酯反应，获得中间物12-2′，其中R4a表示R4。
[0260] 所属领域的技术人员应理解，可通过类似方法以适当起始物质为起始物来制备具有杂环替代以上流程中的各结构中的苯基环的其它本发明化合物。关于制备本发明的代表性化合物或其中间物的特定反应条件和其它程序的细节描述于以下实例中。
[0261] 此外应理解，本发明涵盖通过例如上文或下文所述的合成工艺或通过代谢过程(包括人体或动物体体内或体外发生的代谢过程)制备的式(I)化合物。
[0262] 医药组合物
[0263] 本发明化合物和其医药学上可接受的盐通常以医药组合物或调配物的形式使用。所述医药组合物可由任何可接受的投药途径投予患者，包括(但不限于)经口、经直肠、经阴道、经鼻、吸入、局部(包括经皮)和不经肠投药模式。
[0264] 因此，在本发明组合物的一方面中，本发明涉及包含医药学上可接受的载剂或赋形剂和式(I)化合物的医药组合物，其中如上文所定义，“式(I)化合物”意指式(I)化合物或其医药学上可接受的盐。必要时，所述医药组合物可任选含有其它治疗剂和/或调配剂。 当论述组合物和其用途时，“本发明化合物”在本文中也可能称作“活性剂”。如本文所使用，术语“本发明化合物”打算包括式(I)所涵盖的所有化合物以及式(II)、式(III)、式(IV)和式(V)所体现的物质，和其医药学上可接受的盐。
[0265] 本发明的医药组合物通常含有治疗有效量的本发明化合物。然而，所属领域的技术人员应认识到，医药组合物可含有大于治疗有效量(也就是总组合物)或小于治疗有效量(也就是，经设计用于多次投药来达成治疗有效量的个别单位剂量)。
[0266] 通常，所述医药组合物应含有约0.1至约95重量％的活性剂；优选为约5至约70重量％；并且更优选为约10至约60重量％的活性剂。
[0267] 任何常规载剂或赋形剂均可用于本发明的医药组合物中。对特定载剂或赋形剂或载剂或赋形剂的组合的选择将视用于治疗特定患者或医学病状类型或疾病病况的投药模式而定。就此而言，用于特定投药模式的合适医药组合物的制备完全在熟习医药技术者的范畴内。此外，本发明的医药组合物中所使用的载剂或赋形剂可购自市面。为进一步说明，常规调配技术描述于以下文献中：雷明顿：药学技术与实践(Remington：The Science and Practice of Pharmacy)，第20版，马里兰州巴尔的摩利平科特.威廉斯和怀特出版公司(Lippincott Williams&White，Baltimore，Maryland)(2000)；和H.C.安塞尔(Ansel)等人，医药剂型和药物递送系统(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)，第7版，马里兰州巴尔的摩利平科特.威廉斯和怀特出版公司(Lippincott Williams&White，Baltimore，Maryland)(1999)。
[0268] 可充当医药学上可接受的载剂的物质的代表性实例包括(但不限于)以下各物：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素，例如微晶纤维素和其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；
滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原质水；等张生理食盐水；林格氏溶液(Ringer′s solution)；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；和医药组合物中所采用的其它无毒相容性物质。
滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原质水；等张生理食盐水；林格氏溶液(Ringer′s solution)；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；和医药组合物中所采用的其它无毒相容性物质。
[0269] 通常通过充分且精细混合或掺合活性剂与医药学上可接受的载剂和一种或一种以上任选选用的成分来制备医药组合物。接着，可使用常规程序和设备将所得均匀掺合的混合物成形或装载于片剂、胶囊、丸剂等中。
[0270] 本发明的医药组合物优选封装成单位剂型。术语“单位剂型”是指适合向患者给药的物理离散单元，也就是每一单位含有经计算可单独或与一个或一个以上额外单位组合 而产生所要治疗效果的预定量的活性剂。举例来说，所述单位剂型可为胶囊、片剂、丸剂等，或适合不经肠投药的单位包装。
[0271] 在一实施例中，本发明的医药组合物适合经口投药。适于经口投药的医药组合物可呈胶囊、片剂、丸剂、锭剂、药包(cachets)、糖衣药丸、散剂、颗粒剂的形式；或呈含于水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；或呈水包油或油包水型液体乳液；或呈酏剂或糖浆；等；各自含有预定量的本发明化合物作为活性成分。
[0272] 当打算以固体剂型(也就是呈胶囊、片剂、丸剂等)经口投药时，本发明的医药组合物通常将包含活性剂和一种或一种以上医药学上可接受的载剂，例如柠檬酸钠或磷酸二钙。所述固体剂型也可任选包含或者替代包含：填充剂或增量剂，例如淀粉、微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和/或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶(acacia)；保湿剂，例如甘油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和/或碳酸钠；溶解延迟剂，例如石蜡；吸收促进剂，例如季铵化合物；湿润剂，例如鲸蜡醇和/或甘油单硬脂酸酯；吸收剂，例如高岭土和/或膨润土；润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和/或其混合物；着色剂；和缓冲剂。
[0273] 脱模剂、湿润剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于本发明的医药组合物中。医药学上可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、偏亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。片剂、胶囊、丸剂等的包衣剂包括用于肠溶衣的包衣剂，例如邻苯二甲酸乙酸纤维素、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸甲基丙烯酸酯共聚物、乙酸偏苯三酸纤维素、羧甲基乙基纤维素、乙酸丁二酸羟丙基甲基纤维素等。
[0274] 也可使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素或其它聚合物基质、脂质体和/或微球体调配本发明的医药组合物以缓慢释放或控制释放活性剂。此外，本发明的医药组合物可任选含有乳浊剂，并且可经调配以使其仅在胃肠道的某一部分或优先在胃肠道的某一部分任选以延迟方式释放活性成分。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物和蜡。活性剂也可呈微囊封形式，适当时具有一种或一种以上上述赋形剂。
[0275] 用于经口投药的适合液体剂型包括例如医药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。液体剂型通常包含活性剂和惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶 剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(尤其棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯和其混合物。除活性成分以外，悬浮液也可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶和其混合物。
[0276] 本发明化合物也可不经肠投予(例如通过静脉内、皮下、肌肉内或腹膜内注射)。对于不经肠投药，通常将活性剂与适用于不经肠投药的媒剂混合，所述媒剂包括例如无菌水溶液、生理食盐水、低分子量醇(例如丙二醇)、聚乙二醇、植物油、明胶、脂肪酸酯(例如油酸乙酯)等。不经肠调配物也可含有一种或一种以上抗氧化剂、增溶剂、稳定剂、防腐剂、湿润剂、乳化剂、缓冲剂或分散剂。可通过使用无菌可注射介质、杀菌剂、过滤、照射或热使这些调配物变得无菌。
[0277] 或者，本发明的医药组合物经调配以便通过吸入投药。通过吸入投药的适合医药组合物通常将呈气雾剂或散剂形式。所述组合物一般使用熟知递送装置(例如定剂量吸入器、干粉吸入器、喷雾器或类似递送装置)进行投药。
[0278] 当使用加压容器通过吸入投药时，本发明的医药组合物通常将包含活性成分和例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适合气体的适合推进剂。另外，医药组合物可呈包含本发明化合物的胶囊或药筒(例如由明胶制成)和适用于粉末吸入器的散剂的形式。适合的散剂基质包括例如乳糖或淀粉。
[0279] 本发明化合物也可使用已知的经皮递送系统和赋形剂经皮投药。例如，可将活性剂与渗透增强剂(例如丙二醇、聚乙二醇单月桂酸酯、氮杂环烷-2-酮等)混合，并且并入贴片或类似递送系统中。必要时，所述经皮组合物中可使用其它赋形剂，包括胶凝剂、乳化剂和缓冲剂。
[0280] 效用
[0281] 在HCV复制子分析中，本发明化合物已展示抑制病毒复制，并且因此预期其适用于治疗丙型肝炎病毒感染。
[0282] 因此，在一方面中，本发明提供一种抑制哺乳动物(例如人类)中的丙型肝炎病毒复制的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物治疗有效量的本发明化合物或包含医药学上可接受的载剂和本发明化合物的医药组合物。
[0283] 本发明进一步提供一种治疗哺乳动物(例如人类)的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物治疗有效量的本发明化合物或包含医药学上可接受的载剂和本发明化合物的医药组合物。
[0284] 本发明化合物可通过抑制由HCV基因组编码的NS5A蛋白的功能来抑制病毒复制。因此，在一方面中，本发明提供一种抑制哺乳动物中的HCV NS5A蛋白质的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明的化合物或组合物。
[0285] 当用于治疗HCV感染时，本发明化合物通常将以单日剂量或多剂量形式每天经口投予，但可使用其它投药形式。每剂投予的活性剂的量或每天投予的总量通常将由医师根据相关情况确定，包括欲治疗的病状、所选投药途径、实际投予的化合物和其相对活性、个别患者的年龄、体重和反应、患者的症状严重性等。
[0286] 对于平均70kg的人类，用于治疗HCV感染的适合剂量将在每天约1 mg至约2000mg活性剂的范围内，包括每天约5mg至约200mg和每天约10mg至约130mg活性剂。
[0287] 组合疗法
[0288] 本发明化合物也可与一种或一种以上通过相同机制或不同机制起作用以实现HCV治疗的药剂组合使用。适用于组合疗法的药剂类别包括(但不限于)HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、解螺旋酶抑制剂、NS4B蛋白抑制剂、HCV病毒进入抑制剂、亲环蛋白(cyclophyllin)抑制剂、类铎受体(toll-like receptor)激动剂、热休克蛋白抑制剂、干扰RNA、反义RNA、HCV内部核糖体进入部位(IRES)抑制剂、硫唑立特(thiazolides)、核苷类似物(例如病毒唑和相关化合物)、干扰素和其它免疫调节剂、肌苷5′-单磷酸脱氢酶(IMPDH)抑制剂，和其它NS5A蛋白抑制剂。通过任何其它机制用于抑制HCV复制的药剂也可与本发明化合物组合使用。
[0289] 可用于组合疗法的HCV NS3蛋白酶抑制剂包括(但不限于)特拉匹韦(telaprevir)(VX-950)、博 赛 匹 韦(boceprevir)(SCH-503034)、TMC-435、那 拉 匹 韦(narlaprevir)(SCH-900518)、瓦尼匹韦(vaniprevir)(MK-7009)、达诺匹韦(danoprevir)(ITMN-191、R-7227)、BI-201335、ABT-450、BMS-650032、GS-9256、ACH-1625、ACH-2684、BMS-605339、VX-985、PHX-1766、BMS-791325和IDX-320。
[0290] HCV NS5B核苷聚合酶抑制剂的实例包括(但不限于)RG7128、IDX-184、PSI-7977、PSI-7851、PSI-938、INX-189(INX-08189)、RG7348、MK-0608、TMC-649128和HCV-796，而非核苷HCV NS5B聚合酶抑制剂包括(但不限于)菲力布维(filibuvir)(PF-8685540)、特格布维(tegobuvir)(GS-9190)、VX-222、VX-759、ANA-598(赛拓布维(setrobuvir))、ABT-072、ABT-333、BI-207127、BMS-791325、MK-3281、IDX-37和BMS-824393。
[0291] 多种具有抗病毒、抗增殖或免疫调节效应的干扰素和聚乙二醇化干扰素可与本发明化合物组合，包括α、β、ω和γ干扰素。代表性实例包括(但不限于) A(干扰素-α2b)、 (干扰素-γ-1b)、Alferon N、 Roferon-A(干扰
素α-2a)、 (聚乙二醇化干扰素-α2b)、Alfaferone、 (聚乙二醇化
干扰素α-2a)、Alfanative(干扰素α)、ZalbinTM(白蛋白干扰素α-2b)、 (干
TM
扰素alfacon-1)、Omega (ω干扰素)、Locteron (干扰素α)、PEG-rIL-29(聚
乙二醇化干扰素λ)和 (干扰素β-1a)。
素α-2a)、 (聚乙二醇化干扰素-α2b)、Alfaferone、 (聚乙二醇化
干扰素α-2a)、Alfanative(干扰素α)、ZalbinTM(白蛋白干扰素α-2b)、 (干
TM
扰素alfacon-1)、Omega (ω干扰素)、Locteron (干扰素α)、PEG-rIL-29(聚
乙二醇化干扰素λ)和 (干扰素β-1a)。
[0292] 核 苷 类 似 物 抗 病 毒 剂 包 括 ( 但 不 限 于 ) 病 毒 唑( 和 韦 拉 咪 定 (Viramidine)( 他 立 韦 林
(taribavirin))。干扰素与病毒唑也以试剂盒的形式提供，所述试剂盒包括例如(但不限于) (干扰素α-2b/病毒唑)和 (聚乙二醇化干扰素α-2b/病毒
唑)。
(taribavirin))。干扰素与病毒唑也以试剂盒的形式提供，所述试剂盒包括例如(但不限于) (干扰素α-2b/病毒唑)和 (聚乙二醇化干扰素α-2b/病毒
唑)。
[0293] 通过其它机制起作用的适用化合物包括(但不限于)：亲环蛋白抑制剂，例如DEB-025、SCY-635、NIM-811和环孢素和衍生物；类铎受体激动剂，例如雷西莫特(resiquimod)、IMO-2125和ANA-773；HCV病毒进入抑制剂，例如西瓦思(civacir)；硫唑立特，例如硝唑尼特(nitazoxanide)；和广谱病毒抑制剂，例如肌苷-5′-单磷酸脱氢酶(IMPDH)抑制剂。
[0294] 此外，本发明化合物可与NS5A抑制剂(例如BMS-790052、AZD-7295、PPI-461、PPI-1301、GS-5885或GSK2336805)组合。
[0295] 因此，在另一方面中，本发明提供一种用于治疗丙型肝炎病毒感染的治疗性组合，所述组合包含本发明化合物和一种或一种以上适用于治疗HCV的其它治疗剂。例如，本发明提供一种组合，其包含本发明化合物和一种或一种以上选自HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷和非核苷聚合酶抑制剂、干扰素和聚乙二醇化干扰素、以及病毒唑和相关核苷类似物的药剂。因此，还提供一种医药组合物，其包含本发明化合物和一种或一种以上适用于治疗HCV的其它治疗剂。
[0296] 此外，在一方法方面中，本发明提供一种治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明化合物和一种或一种以上适用于治疗HCV的其它治疗剂。
[0297] 在另一方法方面中，本发明提供一种抑制哺乳动物中的丙型肝炎病毒复制的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明化合物和一种或一种以上适用于抑制丙型肝炎病毒复制的其它治疗剂。
[0298] 例如，在一方法方面中，本发明提供一种治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明化合物、干扰素或聚乙二醇化干扰素和病毒唑。
[0299] 在另一例示性方法方面中，本发明提供一种治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明化合物、干扰素或聚乙二醇化干扰素、病毒 唑和HCV NS3蛋白酶抑制剂。
[0300] 在另一方法方面中，本发明提供一种治疗哺乳动物的丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含投予所述哺乳动物本发明化合物、病毒唑和HCV NS3蛋白酶抑制剂。
[0301] 其它组合疗法包括例如本发明化合物、HCV NS3蛋白酶抑制剂、HCV NS5B核苷聚合酶抑制剂和HCV NS5B非核苷聚合酶抑制剂；和本发明化合物、HCV NS5B核苷聚合酶抑制剂和HCV NS5B非核苷聚合酶抑制剂。
[0302] 在另一方法方面中，本发明提供一种抑制哺乳动物的丙型肝炎病毒复制的方法，所述方法使用本发明化合物与如上文所述的其它药剂的组合。
[0303] 当用于组合疗法时，所述药剂可调配成如上文所公开的单一医药组合物，或所述药剂可以同时或在各别时间由相同或不同投药途径投予的各别组合物的形式提供。当分别投予时，所述试剂的投予时间足够接近，以便提供所要治疗效果。这些组合物可分别封装，或可封装在一起作为试剂盒。试剂盒中的两种或两种以上治疗剂可由相同投药途径或不同投药途径投予。
[0304] 最后，本发明化合物还可用作研究工具，例如用于发现新颖HCV NS5A蛋白质抑制剂或解释HCV复制机制。
[0305] 在HCV复制子分析中已证明本发明化合物为有效HCV复制抑制剂，如以下实例中所述。
[0306] 实例
[0307] 提供以下合成实例和生物实例来说明本发明，并且所述实例不以任何方式被视为限制本发明的范畴。在以下实例中，除非另外指示，否则以下缩写具有以下含义。下文未定义的缩写具有其公认含义。
[0308] ACN＝乙腈
[0309] DCM＝二氯甲烷
[0310] DMA＝N，N-二甲基乙酰胺
[0311] DMF＝N，N-二甲基甲酰胺
[0312] DMSO＝二甲亚砜
[0313] EDC＝N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐
[0314] EtOAc＝乙酸乙酯
[0315] h＝小时
[0316] HATU＝六氟磷酸N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲盐[0317] HCTU＝六氟磷酸2-(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基铵
[0318] HOAt＝1-羟基-7-氮杂苯并三唑
[0319] min＝分钟
[0321] MTBE＝甲基叔丁基醚
[0322] RT＝室温
[0323] TFA＝三氟乙酸
[0324] THF＝四氢呋喃
[0325] 试剂和溶剂是购自商业供货商(奥德里奇(Aldrich)、福禄克(Fluka)、西格玛(Sigma)等)且不经进一步纯化即使用。除非另外注明，否则反应在氮气气氛下进行。通过薄层色谱法(TLC)、分析型高效液相色谱法(分析型HPLC)和质谱法监测反应混合物的进展。如每一反应中明确描述来处理反应混合物；其通常通过萃取和其它纯化方法(例如温度依赖性结晶和溶剂依赖性结晶，和沉淀)纯化。此外，惯常通过制备型HPLC纯化反应混合物，通常使用C18或BDS管柱填充物和常规洗脱剂。典型制备型HPLC条件如下文所述。
[0326] 惯常由质谱法和1H-NMR谱术表征反应产物。对于NMR分析，将样品溶解于氘化溶剂(例如CD30D、CDCl3或d6-DMSO)中，并且用瓦里安双子星(Varian Gemini)2000仪1
器(400MHz)在标准观测条件下获取 H-NMR谱。通过电喷雾电离法(ESMS)用Applied Biosystems(加利福尼亚州福斯特城(Foster City，CA))API150EX型仪器或安捷伦(Agilent)(加利福尼亚州帕洛阿尔托(Palo Alto，CA))1200LC/MSD型仪器质谱鉴别化合物。
器(400MHz)在标准观测条件下获取 H-NMR谱。通过电喷雾电离法(ESMS)用Applied Biosystems(加利福尼亚州福斯特城(Foster City，CA))API150EX型仪器或安捷伦(Agilent)(加利福尼亚州帕洛阿尔托(Palo Alto，CA))1200LC/MSD型仪器质谱鉴别化合物。
[0327] 一般制备型HPLC条件
[0328] 管柱：C18，5μm，21.2×150mm或C18，5μm，21×250或C1421×150
[0329] 管柱温度：室温
[0330] 流动速率：20.0mL/min
[0331] 移动相：A＝水+0.05％TFA
[0332] B＝ACN+0.05％TFA
[0333] 注射体积：(100至1500μL)
[0334] 检测器波长：214nm
[0335] 将粗制化合物以约50mg/mL溶解于1∶1水∶乙酸中。使用2.1×50mm C18管柱进行4分钟分析规模测试操作，接着使用100μL注射与基于分析规模测试操作的％B滞留的梯度进行15分钟或20分钟制备规模操作。精确梯度视样品而定。用21×250mm C18管柱和/或21×150mm C14管柱检查具有相近操作杂质的样品以获得最佳分离。通过质 谱分析鉴别含有所要产物的洗脱份。
[0336] 分析型HPLC方法A、B、C
[0337] 管柱：Zorbax Bonus-RP3.5μm，4.6×150mm
[0338] 管柱温度：35℃
[0339] 流动速率：1.0mL/min
[0340] 移动相：A＝水/ACN(98∶2)+0.1％TFA
[0341] B＝水/ACN(10∶90)+0.1％TFA
[0342] 注射体积：100至1500μL
[0343] 检测器波长：254nm(方法A和方法B)；214nm(方法C)
[0344] 样品制备：溶解于1∶1ACN∶水中
[0345] 梯度方法A
[0346] 总共21分钟(时间(分钟)/％B)：0.5/10，15/60，16.5/80，17/80，18/10，21/10。
[0347] 梯度方法B
[0348] 总共40分钟(时间(分钟)/％B)：0.5/15，28/40，30/80，33/80，35/15，40/15。
[0349] 梯度方法C
[0350] 总共29分钟(时间(分钟)/％B)：0.5/10，24/90，25/90，26/10，29/10
[0351] 制备1：4-(4-溴-苯基)-2-(S)-吡咯烷-2-基-1H-咪唑
[0352]
[0353] (a)2-溴-1-(4-溴-苯基)-乙酮
[0354] 在环境温度下将溴(80g，500mmol)逐滴添加到1-(4-溴-苯基)-乙酮(100g，500mmol)于二氯甲烷(1500mL)中的溶液中。搅拌反应混合物3小时，接着浓缩。用二氯甲烷(100mL)洗涤残余物，获得白色固体状粗制标题化合物(120g，86％产率)。1H NMR(CDCl3，
400MHz)6(ppm)：7.78(d，J＝8.4Hz，2H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H)，4.32(s，2H)。
400MHz)6(ppm)：7.78(d，J＝8.4Hz，2H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H)，4.32(s，2H)。
[0355] (b)(S)-吡咯烷-1.2-二甲酸2-[2-(4-溴-苯基)-2-氧代-乙基]酯1-叔丁酯[0356] 在室温下将二异丙基乙胺(67g，518mmol)逐滴添加到先前步骤的产物(120g，432mmol)和(S)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(L-Boc脯氨酸)(102g，475mmol)于乙腈(2L)中的溶液中。搅拌反应混合物过夜并且浓缩到干燥。将残余物溶解于乙酸乙酯(2L)中并且用水(2L)洗涤。使有机层经硫酸钠干燥并且浓缩，获得粗制标题化合物(178g，100％产率)。
[0357] (c)(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[0358] 在回流下将先前步骤的产物(178g，432mmol)和乙酸铵(500g，6.5mol)于甲苯(2L)中的溶液加热过夜。去除溶剂并且将残余物溶解于乙酸乙酯(2L)中，并且用水(2L)洗涤。使有机层经硫酸钠干燥并且浓缩。通过硅胶管柱色谱法在1∶3石油醚∶乙酸乙酯中纯1
化残余物，获得黄色固体状标题化合物(120g，71％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：
7.56(s，1H)，7.39(d，J ＝ 8.0Hz，2H)，7.24(m，1H)，7.14(s，1H)，4.88(m，1H)，3.33(m，2H)，
2.94(s，1H)，2.07(m，2H)，1.88(m，1H)，1.42(s，9H)。
化残余物，获得黄色固体状标题化合物(120g，71％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：
7.56(s，1H)，7.39(d，J ＝ 8.0Hz，2H)，7.24(m，1H)，7.14(s，1H)，4.88(m，1H)，3.33(m，2H)，
2.94(s，1H)，2.07(m，2H)，1.88(m，1H)，1.42(s，9H)。
[0359] (d)4-(4-溴-苯基)-2-(S)-吡咯烷-2-基-1H-咪唑
[0360] 在0℃下，向(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3g，7.6mmol)于甲醇(3mL)中的溶液中添加含4N HCl的甲醇(60mL)。搅拌反应混合物2小时，接着浓缩，获得黄色固体状粗制标题化合物盐酸盐(2.51g，100％产率)。
[0361] 制备2：(S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酸
[0362]
[0363] 在0℃下用氯甲酸甲酯(8g，85mmol)处理(S)-2-氨基-3-甲基-丁酸(10g，85mmol)、NaOH(10.3g，255mmol)于水(100mL)中的混合物。在室温下搅拌反应混合物24小时，接着向反应混合物中添加5N HCl水溶液，将pH值调节到4。使混合物经由硅藻土垫过滤，获得白色固体状产物(10g，67％产率)。1H NMR(CH3OD，400MHz)δ(ppm)4.05(d，1H)，
3.65(s，3H)，2.14(m，1H)，0.95(m，6H)。
3.65(s，3H)，2.14(m，1H)，0.95(m，6H)。
[0364] 制备3：((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0365]
[0366] 在0℃下，在氮气下将三乙胺(2.3g，11.4mmol)添加到4-(4-溴-苯基)-2-(S)-吡咯烷-2-基-1H-咪唑盐酸盐(2g，11.4mol)、(S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酸(2.5g，7.6mmol)和HATU(4.3g，11.4mmol)于二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物过夜，并且用乙酸乙酯(100mL)和水(1000mL)加以处理。用水(2×100mL)和盐水(100mL)洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并且浓缩。通过硅胶管柱色谱法在1∶1石油醚∶
1
乙酸 乙酯中纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(2.5g，74％产率)。H NMR(d6-DMSO，
400MHz)δ(ppm)7.63(d，J＝8.8Hz，2H)，7.54(m，1H)，7.47(m，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，1H)，
5.03(m，1H)，4.02(t，J ＝ 8.4Hz，1H)，3.76(m，2H)，3.51(s，3H)，2.10(m，2H)，1.93(m，3H)，
0.85(d，J＝6.8Hz，3H)，0.81(d，J＝6.8Hz，3H)。
1
乙酸 乙酯中纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(2.5g，74％产率)。H NMR(d6-DMSO，
400MHz)δ(ppm)7.63(d，J＝8.8Hz，2H)，7.54(m，1H)，7.47(m，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，1H)，
5.03(m，1H)，4.02(t，J ＝ 8.4Hz，1H)，3.76(m，2H)，3.51(s，3H)，2.10(m，2H)，1.93(m，3H)，
0.85(d，J＝6.8Hz，3H)，0.81(d，J＝6.8Hz，3H)。
[0367] 制备4：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0368]
[0369] 向 4-( 苯 甲 氧 基 羰 基 氨 基 ) 苯 基 硼 酸 (1.57g，5.79mmol) 和((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(1.74g，3.86mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(30mL，400mmol)中的混合物中添加水(21.91mL，1216mmol)和碳酸氢钠(2.43g，28.96mmol)。用氮气吹扫所得混合物。
添加四(三苯膦)钯(0)(468mg，0.41mmol)。用氮气吹扫反应混合物，接着在90℃下加热过夜。将反应混合物冷却到室温，用甲醇(10mL)稀释，接着过滤。浓缩滤液，并且通过制备型HPLC纯化粗产物，获得白色固体(1.28g)。将粗物质溶解于甲醇(40mL)中，接着在70℃下使用氢氧化钯/碳(20％w/w)滤筒经由连续流动氢化器泵吸。将所得溶液浓缩到约10mL，TM
用Stratospheres PL-CO3树脂处理，并且在室温下搅拌30分钟。过滤反应混合物并且浓缩滤液，获得标题化合物(680mg)。
添加四(三苯膦)钯(0)(468mg，0.41mmol)。用氮气吹扫反应混合物，接着在90℃下加热过夜。将反应混合物冷却到室温，用甲醇(10mL)稀释，接着过滤。浓缩滤液，并且通过制备型HPLC纯化粗产物，获得白色固体(1.28g)。将粗物质溶解于甲醇(40mL)中，接着在70℃下使用氢氧化钯/碳(20％w/w)滤筒经由连续流动氢化器泵吸。将所得溶液浓缩到约10mL，TM
用Stratospheres PL-CO3树脂处理，并且在室温下搅拌30分钟。过滤反应混合物并且浓缩滤液，获得标题化合物(680mg)。
[0370] 制备5：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0371] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(9.10g，20.34mmol)于二噁烷∶水(3∶1)(200mL)中的溶液中添加4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊烷-2-基)苯胺(4.9g，22.37mmol)、碳酸钠(4.3g，40.68mmol)和Pd(dppf)2Cl2(0.83g，5％)。在氮气下使反应混合物升温到回流，搅拌4小时，冷却到室温，过滤并且浓缩。用乙酸乙酯和水萃取残余物，用硫酸钠干燥并且浓缩。通过硅胶色谱法，用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脱来纯化粗产物，获得黄色1
固体状标题化合物(7g，75％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.62-7.55(m，1H)，
7.50(d，Ｊ＝8.0Hz，2H)，7.40(m，3H)，7.18(s，1H)，6.75(d，J＝8.4Hz，2H)，5.50(d，J＝
9.2Hz，1H)，5.25-5.23(m，1H)， 4.31(t，J ＝ 2.4Hz，1H)，3.83-3.80(m，1H)，3.67(s，3H)，
3.59-3.53(m，1H)，3.05-2.95(m，1H)，2.40-2.30(m，1H)，2.19-2.11(m，1H)，2.08-2.03(m，
1H)，1.98-1.93(m，1H)，1.07-1.01(m，1H)，0.85(d，J＝6.8Hz，6H)。
固体状标题化合物(7g，75％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.62-7.55(m，1H)，
7.50(d，Ｊ＝8.0Hz，2H)，7.40(m，3H)，7.18(s，1H)，6.75(d，J＝8.4Hz，2H)，5.50(d，J＝
9.2Hz，1H)，5.25-5.23(m，1H)， 4.31(t，J ＝ 2.4Hz，1H)，3.83-3.80(m，1H)，3.67(s，3H)，
3.59-3.53(m，1H)，3.05-2.95(m，1H)，2.40-2.30(m，1H)，2.19-2.11(m，1H)，2.08-2.03(m，
1H)，1.98-1.93(m，1H)，1.07-1.01(m，1H)，0.85(d，J＝6.8Hz，6H)。
[0372] 制备6：4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯甲酸
[0373]
[0374] (a)4-(4-乙氧基羰基-苯基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0375] 在120℃下将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(18.6g，0.1mol)、4-氟-苯甲酸乙酯(16.8g，1mol)和碳酸钾(0.15mol)于二甲亚砜(100mL)中的混合物搅拌24小时。使反应混合物冷却到室温，并且倾入水(1L)中。过滤固体沉淀物，用水洗涤，并且浓缩到干燥，获得白色
1
固体状标题化合物(20g，60％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.91(d，2H)，6.83(d，
2H)，4.30(q，2H)，3.55(m，4H)，3.26(m，4H)，1.46(s，9H)，1.32(t，3H)。
1
固体状标题化合物(20g，60％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.91(d，2H)，6.83(d，
2H)，4.30(q，2H)，3.55(m，4H)，3.26(m，4H)，1.46(s，9H)，1.32(t，3H)。
[0376] (b)4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯甲酸
[0377] 向4-(4-乙氧基羰基-苯基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10g，29.9mmol)于乙醇(200mL)中的混合物中添加1N氢氧化钠(100mL)。在70℃下将反应混合物搅拌过夜。在真空下去除溶剂，并且用乙酸乙酯洗涤残余物两次，用5N HCl酸化到pH6，过滤并且浓缩到干
1
燥，获得白色固体状标题化合物(8g，87％产率)。H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)7.74(m，
2H)，6.92(m，2H)，3.90(m，2H)，3.42(m，2H)，3.25(m，4H)，1.38(s，9H)。
1
燥，获得白色固体状标题化合物(8g，87％产率)。H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)7.74(m，
2H)，6.92(m，2H)，3.90(m，2H)，3.42(m，2H)，3.25(m，4H)，1.38(s，9H)。
[0378] 制备7：4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酸
[0379]
[0380] (a)4-哌嗪-1-基-苯甲酸
[0381] 在室温下将含4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯甲酸(28g，91mmol)的盐酸于甲醇(3()()mL)中的混合物搅拌4小时。通过过滤收集所产生的沉淀物并且浓缩到干燥，获得白色固体状标题化合物(17g，61％产率)。
[0382] (b)4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酸
[0383] 在0℃下向4-哌嗪-1-基-苯甲酸(20g，71.6mmol)和三乙胺(58g，573mmol)于二氯甲烷(500mL)中的混合物中逐滴添加环丙烷羰基氯。在室温下搅拌反应混合物过夜。通过旋转蒸发去除溶剂。用水稀释残余物，用氢氧化钠处理，并且用乙酸乙酯和二氯甲烷洗涤。用5N HCl将水相酸化到pH6。通过过滤收集所产生的沉淀物并且浓缩到干燥， 获得白
1
色固体状标题化合物(10g，51％产率)。H NMR(CH3OD，400MHz)δ(ppm)7.87(m，2H)，6.95(m，
2H)，3.90(s，2H)，3.73(s，2H)，3.29(m，4H)，1.99(m，1H)，0.86(m，4H)。
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色固体状标题化合物(10g，51％产率)。H NMR(CH3OD，400MHz)δ(ppm)7.87(m，2H)，6.95(m，
2H)，3.90(s，2H)，3.73(s，2H)，3.29(m，4H)，1.99(m，1H)，0.86(m，4H)。
[0384] 制备8：[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4′-(4-哌嗪-1-基-苯甲酰基氨基)-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0385]
[0386] 向4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯甲酸(365mg，1.19mmol)于二氯甲烷(18mL，280mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(92.3μL，1.19mmol)中的溶液中添加乙二酰氯(101μL，1.19mmol)。在室温下搅拌反应混合物20分钟，接着依序添加N，N-二异丙基乙胺(1.42mL，8.14mmol)和((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(500.0mg，1.083mmol)，并且在搅拌下使混合物反应过夜。
[0387] 制备4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯甲酸(365mg，1.19mmol)和乙二酰氯(101μL，1.19mmol)于二氯甲烷(18mL，280mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(92.3μL，
1.19mmol)中的第二溶液，并且添加到反应混合物中，搅拌1小时。添加甲醇(10mL)。在真空下浓缩混合物，接着溶解于DCM(25mL)中，并且用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤。浓缩有机层，溶解于含2.0M氯化氢的1，4-二噁烷(16.2mL，16.2mmol)和乙醇(1.0mL，0.17mmol)中，并且在室温下搅拌过夜。将反应混合物溶解于1∶1乙酸∶水(8.0mL)中，并且通过
1
制备型HPLC使用BDS管柱纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐。H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)10.11(s，1H)，8.99-8.77(m，2H)，7.92(dd，J ＝ 15.0，8.9Hz，4H)，7.84(m，4H)，
7.76(t，J＝9.3Hz，2H)，7.37-7.25(m，2H)，7.09(d，J＝9.1Hz，2H)，7.02(d，J＝8.9Hz，
1H)，6.96(d，J＝9.1Hz，1H)，5.12(t，J＝7.1Hz，1H)，4.15-4.06(m，1H)，3.90-3.81(m，1H)，
3.66-3.56(m，1H)，3.55-3.46(m，6H)，3.46-3.39(m，2H)，3.39-3.29(m，2H)，2.43-2.32(m，
1H)，2.22-1.91(m，4H)，0.82(d，J＝6.7Hz，3H)，0.77(d，J＝6.6Hz，3H)。
1.19mmol)中的第二溶液，并且添加到反应混合物中，搅拌1小时。添加甲醇(10mL)。在真空下浓缩混合物，接着溶解于DCM(25mL)中，并且用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤。浓缩有机层，溶解于含2.0M氯化氢的1，4-二噁烷(16.2mL，16.2mmol)和乙醇(1.0mL，0.17mmol)中，并且在室温下搅拌过夜。将反应混合物溶解于1∶1乙酸∶水(8.0mL)中，并且通过
1
制备型HPLC使用BDS管柱纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐。H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)10.11(s，1H)，8.99-8.77(m，2H)，7.92(dd，J ＝ 15.0，8.9Hz，4H)，7.84(m，4H)，
7.76(t，J＝9.3Hz，2H)，7.37-7.25(m，2H)，7.09(d，J＝9.1Hz，2H)，7.02(d，J＝8.9Hz，
1H)，6.96(d，J＝9.1Hz，1H)，5.12(t，J＝7.1Hz，1H)，4.15-4.06(m，1H)，3.90-3.81(m，1H)，
3.66-3.56(m，1H)，3.55-3.46(m，6H)，3.46-3.39(m，2H)，3.39-3.29(m，2H)，2.43-2.32(m，
1H)，2.22-1.91(m，4H)，0.82(d，J＝6.7Hz，3H)，0.77(d，J＝6.6Hz，3H)。
[0388] 将TFA盐溶解于甲醇(10mL)中并且用StratospheresTM PL-CO3树脂处理，并且在室温下搅拌30分钟。过滤反应混合物并且浓缩滤液，获得标题化合物(0.354g)。
[0389] 制备9：[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0390]
[0391] 在氮气下向((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(50g，0.11mol)、4，4，5，5，4′，4′，5′，5′-八甲基-[2，2′]双[[1，3，2]二氧硼戊烷基](57g，0.22mol)和乙酸钾(108g，1.1mol)于二噁烷(1000mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(4.5g，5.5mmol)。在85℃下搅拌反应混合物过夜，接着添加乙酸乙酯(100mL)和水(1000mL)。用水(2×1000mL)和盐水(1000mL)洗涤有机层，经无水Na2SO4干燥并且浓缩。通过硅胶管柱色谱(1∶1石油醚∶乙酸乙酯)1
纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(22.5g)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.71(m，
3H)，7.32(m，1H)，7.19(m，1H)，5.56(m，1H)，5.18(m，1H)，4.23(m，1H)，3.73(m，1H)，3.61(s，
3H)，3.55(m，1H)，2.95(m，1H)，2.38(s，1H)，2.13(m，1H)，2.02(m，1H)，1.89(m，2H)，1.22(s，
12H)，0.79(d，6H)。
纯化残余物，获得黄色固体状标题化合物(22.5g)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.71(m，
3H)，7.32(m，1H)，7.19(m，1H)，5.56(m，1H)，5.18(m，1H)，4.23(m，1H)，3.73(m，1H)，3.61(s，
3H)，3.55(m，1H)，2.95(m，1H)，2.38(s，1H)，2.13(m，1H)，2.02(m，1H)，1.89(m，2H)，1.22(s，
12H)，0.79(d，6H)。
[0392] 制备 10：((S)-1-{(S)-2-[4-(4 ′-氨 基-2 ′-氟-联 苯-4-基)-1H- 咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0393]
[0394] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(60mg，0.12mmol)和4-溴-3氟苯胺(23mg，0.12mmol)溶解于1，2-二甲氧基乙烷(1.2mL，12mmol)和水(0.44mL，24mmol)中。用氮气吹扫反应混合物。依序添加碳酸钠(41.6mg，0.39mmol)和四(三苯膦)钯(0)(21mg，0.018mmol)，并且用氮气吹扫混合物，密封并且在85℃下加热过夜。使反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯(5mL)稀释，并且用水(5mL)洗涤。浓缩有机层，溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，并且通过制备型HPLC加以纯化，获得TFA盐，使TFA盐TM
通过StratoSpheres PL-CO3树脂(0.36mmol)，获得标题化合物(15mg)。(m/z)：C26H30FN5O3+
的[M+H] 计算值为 480.23，实验值为480.4。
通过StratoSpheres PL-CO3树脂(0.36mmol)，获得标题化合物(15mg)。(m/z)：C26H30FN5O3+
的[M+H] 计算值为 480.23，实验值为480.4。
[0395] 制备11：4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-联苯-4-甲酸
[0396]
[0397] 在室温下向[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(1.05g，2.12mmol)和4-碘-苯甲酸甲酯(665mg，2.54mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(9.0mL，
120mmol)中的混合物中添加水(2.0mL，110mmol)和碳酸氢钠(711mg，8.46mmol)。用氮气冲洗反应混合物，并且在氮气下添加四(三苯膦)钯(0)(122mg，0.106mmol)。用氮气冲洗反应混合物，接着在90℃下在氮气气氛下加热过夜。
120mmol)中的混合物中添加水(2.0mL，110mmol)和碳酸氢钠(711mg，8.46mmol)。用氮气冲洗反应混合物，并且在氮气下添加四(三苯膦)钯(0)(122mg，0.106mmol)。用氮气冲洗反应混合物，接着在90℃下在氮气气氛下加热过夜。
[0398] 使反应混合物冷却到室温，并且分配在EtOAc(60.0mL)与水(20.0mL)之间。用水(2×20.0mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得黑色油状物，通过硅胶色谱(24g硅胶，0至100％EtOAc:己烷)加以纯化。合并所要洗脱份并且浓缩，获得淡黄色油状物，并且在真空下进一步干燥，获得淡黄色泡沫(956.9mg)。
[0399] 合并来自先前步骤的产物与先前操作的相应产物(总共1.13g)，溶解于甲醇(10.0mL)和水(2.1mL)中，并且在60℃下用单水合氢氧化锂(564.5mg)处理3小时。浓缩反应混合物，并且用1∶1乙酸∶水(8.0mL)处理残余物，并进行声波处理。再添加TFA(3.0mL)，并且对反应混合物进行声波处理，产生淡灰色固体沉淀物。在室温下搅拌反应混合物10分钟，接着过滤。用EtOAc(20.0mL)萃取滤液。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油状物，将其溶解于1∶1乙酸∶水(6.0mL)中，并且通过反相制备型HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体(107.6mg)。将过滤所得的固体溶解于EtOAc(60.0mL)中，并且用水(2×15.0mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(20.0mL)和盐水(15.0mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色固体状标题化合物(490mg)。+
(m/z)：C27H30N4O5的[M+H] 计算值为491.22，实验值491.6。
(m/z)：C27H30N4O5的[M+H] 计算值为491.22，实验值491.6。
[0400] 制备12：N-(4-溴-苯基)-4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺
[0401]
[0402] 在室温下将4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酸(1.0g，3.6mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.70g，3.6mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.50g，3.6mmol)于二氯甲烷(39mL，610mmol)中的溶液搅拌20分钟，接着添加对溴苯胺(0.52g，3.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.6mL，15mmol)，并且将反应混合物搅拌2天。过滤反应混合物；将滤液溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中。形成沉淀物。过滤这种物质，获+
得呈乙酸盐形式的标题产物(225mg)。(m/z)：C21H22BrN3O2的[M+H] 计算值428.09，实验值
428.0。
得呈乙酸盐形式的标题产物(225mg)。(m/z)：C21H22BrN3O2的[M+H] 计算值428.09，实验值
428.0。
[0403] 制备13：4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-N-[4′-((S)-2-吡咯烷-2-基-1H-咪唑-4-基)-联苯-4-基]-苯甲酰胺
[0404]
[0405] (a)(S)-2-(4-{4′-[4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[0406] 在室温下向(S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.40g，3.19mmol)和N-(4-溴-苯基)-4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺(0.910g，2.12mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(16.53mL，213.5mmol)中的混合物中添加碳酸钠(1.338g，15.93mmol)。接着添加水(12.06mL，669.2mmol)。使氮气鼓泡通过所得混合物并持续5分钟，接着添加四(三苯膦)钯(0)(0.258g，0.223mmol)。在90℃下，在氮气下加热反应混合物过夜，冷却到室温，用甲醇(30.0mL)稀释并且过滤。浓缩滤液，并且溶解于乙酸乙酯(约3mL)中，并且缓慢添加己烷(2mL)，获得粗产物沉淀物。过滤这种物质，获得150mg产物。浓缩滤液，并经受相同沉淀条件，获得另外50mg产物。合并这种物质与第一批沉淀物，并且不经进一步纯化即用于下一步骤。
[0407] (b)4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-N-[4′-((S)-2-吡咯烷-2-基1H-咪唑-4-基)-联苯-4-基]-苯甲酰胺
[0408] 将先前步骤的产物(200mg，0.3mmol)溶解于含4M HCl的1，4-二噁烷(0.6mL，2mmol)中。搅拌反应混合物4小时，并且在真空下浓缩，获得呈盐酸盐形式的标题化合物+
(176mg)。(m/z)：C34H36N602的[M+H] 计算值为561.29，实验值为561.4。
(176mg)。(m/z)：C34H36N602的[M+H] 计算值为561.29，实验值为561.4。
[0409] 制备14：(R)-二乙基氨基-苯基-乙酸
[0410]
[0411] 经数分钟将氰基硼氢化钠(15g，238mmol)分数份添加到(R)-氨基-苯基-乙酸(6.00g，39.7mmol)与甲醇(150mL)的冷却(冰/水)混合物中，并且搅拌5分钟。经10分钟逐滴添加乙醛(40mL)。在冷却温度下搅拌反应混合物45分钟，并且在环境温度下搅拌6.5小时。再次将反应混合物冷却到0℃。接着，再经10分钟逐滴添加乙醛(60mL)。在0℃下搅拌反应混合物45分钟，并且在环境温度下搅拌过夜。用冰-水浴冷却反应混合物，并且用水(3mL)处理。经45分钟逐滴添加浓盐酸，直到混合物的pH值为1.5-2.0。去除冷却浴，并且继续搅拌，同时添加浓盐酸以维持混合物的pH值为约1.5至2.0。搅拌反应混合物过夜，过滤并且在真空下浓缩滤液。通过制备型HPLC纯化粗物质，并且用乙酸乙酯洗涤，得到发光白色固体状标题化合物(5g，61％产率)。1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)7.47(m，
2H)，7.36(m，3H)，4.34(s，1H)，2.90(m，2H)，2.86(m，2H)，1.03(t，6H)。
2H)，7.36(m，3H)，4.34(s，1H)，2.90(m，2H)，2.86(m，2H)，1.03(t，6H)。
[0412] 制 备15：{(S)-1-[(S)-2-(5-{4 ′-[(6- 氟-吡 啶 -3-羰 基)- 氨 基]- 联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0413]
[0414] 向((S)-1-{(S)-2-[5-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(2000mg，4mmol)溶解于二氯甲烷(27.8mL)和N，N-二甲基乙酰胺(2.82mL，30.3mmol)中的溶液中添加2-氟吡啶-5-羰基氯(691mg，4.33mmol)溶解于二氯甲烷(6.0mL)中的溶液，并且在室温下搅拌反应混合物30分钟。浓缩反应混合物，溶解于少量二氯甲烷中，并且缓慢添加乙醚直到形成白色沉淀物。对混合物进行声波处理并且过滤，产生所要产物的盐酸盐。将固体溶解于乙酸乙酯(20mL)中，在室温下搅拌30分钟并且过滤，产生自由流动的黄色固体状标题产物盐酸盐(2.5g)。(m/z)：C32H33FN6O4的+[M+H] 计算值为585.26，实验值为585.5。
[0415] 制备16：((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((S)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-
[0416] 联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0417]
[0418] 在120℃下将{(S)-1-[(S)-2-(5-{4′-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯盐酸盐
(600.0mg，0.966mmol)和(S)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.290g，1.449mmol)于二甲亚砜(1.5mL)和N，N-二异丙基乙胺(1.01mL，5.80mmol)中的混合物加热过夜。将反应混合物冷却到室温并且添加水(5.0mL)。将所得混合物离心并且过滤。向固体中添加含4.0M氯化氢的1，4-二噁烷(4.9mL，20mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物30分钟，接着浓缩。
将残余物与乙酸乙酯(3×5.0mL)共蒸发，溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相制备型HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得呈三氟乙酸盐形式的标题+
化合物(320mg)。(m/z)：C37H44N8O4的[M+H] 计算值为665.36，实验值为665.4。
(600.0mg，0.966mmol)和(S)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.290g，1.449mmol)于二甲亚砜(1.5mL)和N，N-二异丙基乙胺(1.01mL，5.80mmol)中的混合物加热过夜。将反应混合物冷却到室温并且添加水(5.0mL)。将所得混合物离心并且过滤。向固体中添加含4.0M氯化氢的1，4-二噁烷(4.9mL，20mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物30分钟，接着浓缩。
将残余物与乙酸乙酯(3×5.0mL)共蒸发，溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相制备型HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得呈三氟乙酸盐形式的标题+
化合物(320mg)。(m/z)：C37H44N8O4的[M+H] 计算值为665.36，实验值为665.4。
[0419] 制备17：(R)-4-[5-(4-溴-3-甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0420]
[0421] (a)N-(4-溴-3-甲基-苯基)-6-氟-烟酰胺
[0422] 向4-溴-3-甲基苯胺(200mg，1mmol)溶解于DCM(4mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(170mg，1.1mmol)溶解于DCM(1mL)中的溶液。观察到白色沉淀物。浓缩反应混合物，产生所要产物的盐酸盐。
[0423] (b)(R)-4-[5-(4-溴-3-甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0424] 将得自先前步骤的白色固体溶解于二甲亚砜(2mL，30mmol)中，依序添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(220mg，1.1mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2mL，10mmol)。在120℃下加热反应混合物过夜，冷却到室温，并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生淡黄色+
固体状标题化合物(200mg，40％产率)。(m/z)：C23H29BrN4O3的[M+H] 计算值为489.15，实 验值为489.4。
固体状标题化合物(200mg，40％产率)。(m/z)：C23H29BrN4O3的[M+H] 计算值为489.15，实 验值为489.4。
[0425] 制备18：((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(2′-甲基-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0426]
[0427] (a)(R)-4-[5-(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-甲基-联苯-4-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0428] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(200mg，0.41mmol)和(R)-4-[5-(4-溴-3-甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌
嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.4mmo1；制备17)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(4.25mL，
40.9mmol)和水(0.74mL，40.9mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(129mg，1.53mmol)和四(三苯膦)钯(0)(70.8mg，0.0613mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯(5mL)和水(3mL)萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状物，通过反相HPLC加以纯化，产+
生标题中间物的二(三氟乙酸)盐。(m/z)：C43H54N8O6的[M+H] 计算值为779.43，实验值为
779.5。
嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.4mmo1；制备17)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(4.25mL，
40.9mmol)和水(0.74mL，40.9mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(129mg，1.53mmol)和四(三苯膦)钯(0)(70.8mg，0.0613mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯(5mL)和水(3mL)萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状物，通过反相HPLC加以纯化，产+
生标题中间物的二(三氟乙酸)盐。(m/z)：C43H54N8O6的[M+H] 计算值为779.43，实验值为
779.5。
[0429] (b)((S)-2-甲 基-1-{(S)-2-[4-(2 ′- 甲基 -4 ′-{[6-((R)-2-甲 基- 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0430] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(3mL，10mmol)处理先前步骤的三氟乙酸盐并且在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物，并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生黄色固体状标题+化合物三盐酸盐(180mg，60％总产率)。(m/z)：C38H46N8O4的[M+H] 计算值为679.37，实验值为679.7。
[0431] 制备19：(S)-1-乙酰基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸
[0432]
[0433] 向(S)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(50.0mg，0.387mmol)溶解于N，N-二甲基乙酰胺(1.5mL，16mmol)中的溶液中添加乙酰氯(31.9mg，0.406mmol)溶解于N，N-二甲基乙酰胺(0.5mL)中的溶液，接着添加N，N-二异丙基乙胺(1mL，6mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物30分钟。浓缩反应混合物，产生淡棕色油状标题化合物(30mg，40％产率)。(m/z)：C8H13NO3的[M+H]+计算值为172.10，实验值为172.2。
[0434] 制备20：(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸
[0435]
[0436] 向(S)-2-甲氧基羰基氨基-3-丁酸(543mg，3.10mmol)溶解于N，N-二甲基乙酰胺(10mL，11mmol)中的溶液中依序添加HATU(1413mg，3.72mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.62mL，9.29mmol)。搅拌反应混合物10分钟，接着添加(S)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(400mg，3.10mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(5mL)中，过滤并且通过制备型HPLC加以纯化。合并具有所要分子量的洗脱份并+且冻干，获得标题化合物(604mg，68％产率)。C13H22N2O5的[M+H] 计算值为287.15，实验值为287.0。
[0437] 制备21：(R)-4-[5-(4-溴-3-乙氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0438]
[0439] (a)N-(4-溴-3-乙氧基-苯基)-6-氟-烟酰胺
[0440] 向4-溴-3-乙氧基苯胺盐酸盐(500mg，2mmol)溶解于DCM(7mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(240mg，1.5mmol)溶解于DCM(1.2mL)中的溶液。观察到白色沉淀物。搅拌反应混合物1小时并且浓缩，产生标题中间物的盐酸盐。
[0441] (m/z)：C14H12BrFN2O2的[M+H]+计算值为339.01，实验值为339.0。
[0442] (b)(R)-4-[5-(4-溴-3-乙氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0443] 将得自先前步骤的白色固体溶解于DMSO(3.2mL，44mmol)中，依序添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.6mL，14.8mmol)。在120℃下加热反应混合物过夜，冷却到室温，并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸 钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生淡黄色固+
体状标题化合物(324mg，42％产率)。(m/z)：C24H31BrN4O4的[M+H] 计算值为519.15，实验值为519.5。
体状标题化合物(324mg，42％产率)。(m/z)：C24H31BrN4O4的[M+H] 计算值为519.15，实验值为519.5。
[0444] 制 备22：((S)-1-{(S)-2-[4-(2 ′ -乙 氧 基-4 ′-{[6-((R)-2-甲 基- 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0445]
[0446] (a)(R)-4-[5-(2-乙氧基-4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-联苯-4-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0447] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(253mg，0.52mmol)和(R)-4-[5-(4-溴-3-乙氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌
嗪-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸盐(324mg，0.52mmol；制备21)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(5.32mL，51.2mmol)和水(0.92mL，51.2mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(161mg，1.92mmol)和四(三苯膦)钯(0)(89mg，0.077mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯和水萃取反应混合物。使+
有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状标题中间物。(m/z)：C44H56N8O7的[M+H]计算值为809.43，实验值为809.6。
嗪-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸盐(324mg，0.52mmol；制备21)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(5.32mL，51.2mmol)和水(0.92mL，51.2mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(161mg，1.92mmol)和四(三苯膦)钯(0)(89mg，0.077mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯和水萃取反应混合物。使+
有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状标题中间物。(m/z)：C44H56N8O7的[M+H]计算值为809.43，实验值为809.6。
[0448] (b)((S)-1-{(S)-2-[4-(2′-乙氧基-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0449] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(3.8mL，15.3mmol)处理先前步骤的棕色油状物并且在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生棕色固体。将固体溶解于1∶1乙酸∶水溶液(4mL)中，过滤且通过反相HPLC加以纯化，产生黄色固体+状的标题化合物三(三氟乙酸)盐。(m/z)：C39H48N8O5的[M+H] 计算值为709.37，实验值为
709.9。
709.9。
[0450] 制备23-1：(R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1- 甲酸叔丁酯
[0451]
[0452] (a)N-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基)-6-氟-烟酰胺
[0453] 向4-溴-3-三氟甲氧基-苯胺(300mg，1mmol)溶解于DCM(5mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(190mg，1.2mmol)溶解于DCM(1mL)中的溶液。观察到白色沉淀物。浓缩反应混合物，产生标题中间物的盐酸盐。(m/z)：C13H7BrF4N2O2的[M+H]+计算值为378.96，实验值为379.0。
[0454] (b)(R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0455] 将得自先前步骤的白色固体溶解于DMSO(2mL)中，并且依序添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(230mg，1.2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2mL，10mmol)。在120℃下加热反应混合物过夜，冷却到室温，并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生淡黄色固体状标题化合物(200mg，40％产率)。(m/z)：C23H26BrF3N4O4的[M+H]+计算值为559.11、561.11，实验值为561.0。
[0456] 制备23-2：(R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0457]
[0458] 按照制备23-1的程序，用5-氨基-2-溴三氟甲苯(300mg，1mmol)替代4-溴-3-三+氟甲氧基-苯胺(300mg，1mmol)来制备标题中间物。(m/z)：C23H26BrF3N4O3的[M+H] 计算值为543.11、545.11，实验值为545.4。
[0459] 制备24：((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0460]
[0461] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(360mg，0.64mmol)和(R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲
基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(360mg，0.64mmol；制备23-1)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(6.69mL，64.4mmol)和水(1.16mL，64.4mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(203mg，2.41mmol)和四(三苯膦)钯(0)(112mg，0.097mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯(5mL)和水(3mL)萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状物。
基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(360mg，0.64mmol；制备23-1)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(6.69mL，64.4mmol)和水(1.16mL，64.4mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(203mg，2.41mmol)和四(三苯膦)钯(0)(112mg，0.097mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯(5mL)和水(3mL)萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状物。
[0462] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(4mL，20mmol)处理得自先前步骤的油状物并且在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生黄色固体状的标题化合物盐酸盐，通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(150mg，+21％总产率)。(m/z)：C38H43F3N8O5的[M+H] 计算值为749.33，实验值为749.5。
[0463] 制备25：((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0464]
[0465] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(280mg，0.57mmol)与(R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.72mmol；制备23-2)的混合物溶解于1，4-二噁烷(5.8mL，
75mmol)和水(0.83mL，46mmol)中。添加碳酸铯(560mg，1.7mmol)，用氮气对反应混合物充气，接着添加氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′- 三-异丙基-1，1′-联苯)[2-(2-氨基乙基)苯基]钯(II)甲基-叔丁基醚加合物(28mg，0.034mmol)。用氮气密封反应混合物并且在95℃下加热3小时。用乙酸乙酯和水萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生橙色油状物。
75mmol)和水(0.83mL，46mmol)中。添加碳酸铯(560mg，1.7mmol)，用氮气对反应混合物充气，接着添加氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′- 三-异丙基-1，1′-联苯)[2-(2-氨基乙基)苯基]钯(II)甲基-叔丁基醚加合物(28mg，0.034mmol)。用氮气密封反应混合物并且在95℃下加热3小时。用乙酸乙酯和水萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生橙色油状物。
[0466] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(4mL，20mmol)处理得自先前步骤的油状物并且在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生黄色固体状的标题化合物盐酸盐，通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(150mg，+24％总产率)。(m/z)：C38H43F3N8O4的[M+H] 计算值为733.34，实验值733.5。
[0467] 制备26：(2S，5R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯[0468]
[0469] (a)(2S.5R)-445-甲氧基羰基-吡啶-2-基)-2.5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯[0470] 在120℃下，在DMSO(2.0mL)中将6-氟烟酸甲酯(200mg，1.29mmol)与(2S，5R)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的混合物与碳酸钾(178mg，1.29mmol)一起加热2小时。
使反应混合物分配在乙酸乙酯(20.0mL)与水(5.0mL)之间。用水(2×5.0mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油状标题中间物。
使反应混合物分配在乙酸乙酯(20.0mL)与水(5.0mL)之间。用水(2×5.0mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油状标题中间物。
[0471] (b)(2S，5R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0472] 将先前步骤的油状物溶解于甲醇(10.0mL，247mmol)和水(2.5mL，140mmol)中，并且在40℃下用单水合氢氧化锂(108mg，2.58mmol)处理过夜。浓缩反应混合物；将残余物溶解于1∶1乙酸∶水溶液(6mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体状的标题化合物三(三氟乙酸)盐(327mg，产率56％)。(m/+z)：C17H25N304的[M+H] 计算值为336.18，实验值为336.5。
[0473] 制备27：(2S，5R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0474]
[0475] 向4-溴-3-三氟甲氧基-苯胺(190mg，0.74mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.65mL，3.73mmol；于N，N-二甲基乙酰胺(3mL)中的溶液中添加(2S，5R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸盐(330mg，0.74mmol；制备26)和HCTU(401mg，0.97mmol)于N，N-二甲基乙酰胺(3mL)中的溶液。在50℃下加热反应混合物过夜。通过旋转 蒸发浓缩反应混合物，用乙酸乙酯/饱和碳酸钠萃取，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(0至50％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，获得标题化合物+
(155mg，产率36％)。(m/z)：C24H28BrF3N4O4的[M+H] 计算值为573.12、575.12，实验值为
575.5。
(155mg，产率36％)。(m/z)：C24H28BrF3N4O4的[M+H] 计算值为573.12、575.12，实验值为
575.5。
[0476] 制备28：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0477]
[0478] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(86mg，0.17mmol)与(2S，5R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，
5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，制备27)的混合物溶解于1，4-二噁烷(1.8mL，23mmol)和水(0.25mL，14mmol)中。添加碳酸铯(170mg，0.52mmol)。用氮气对反应混合物充气，接着添加四(三苯膦)钯(0)(12.1mg，0.011mmol)。在氮气下密封反应混合物，并且在95℃下加热过夜。用乙酸乙酯/水萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥并且浓缩，产生橙色油状物。
5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，制备27)的混合物溶解于1，4-二噁烷(1.8mL，23mmol)和水(0.25mL，14mmol)中。添加碳酸铯(170mg，0.52mmol)。用氮气对反应混合物充气，接着添加四(三苯膦)钯(0)(12.1mg，0.011mmol)。在氮气下密封反应混合物，并且在95℃下加热过夜。用乙酸乙酯/水萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥并且浓缩，产生橙色油状物。
[0479] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(2mL，7mmol)处理得自先前步骤的油状物并且在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生黄色固体状的标题化合物盐酸盐，通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(150mg，30％总产率)。(m/z)：C39H45F3N805的[M+H]+计算值为763.35，实验值为763.7。
[0480] 制备29-A：((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0481]
[0482] (a)4-溴-7-甲氧基-3，N-二甲基-苯甲酰胺
[0483] 在室温下将4-溴-3-甲基-苯甲酸(15g，0.069mol)、O，N-二甲基羟胺(6.5g，0.1mol)、HATU(38g，0.1mol)和三乙胺(20g，0.2mol)溶解于DMF(50mL)中的混合物搅拌12小时，浓缩并且通过硅胶色谱法(1∶1EtOAc∶石油醚)加以纯化，获得标题中间物(11g，
61％产率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.52(m，2H)，7.32(m，1H)，3.50(s，3H)，3.29(m，
3H)，2.38(s，3H)。
61％产率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.52(m，2H)，7.32(m，1H)，3.50(s，3H)，3.29(m，
3H)，2.38(s，3H)。
[0484] (b)1-(4-溴-3-甲基-苯基)-乙酮
[0485] 在-78℃下将甲基锂(24mL，0.038mol)添加到先前步骤的产物(9g，0.035mol)于THF(20mL)中的溶液中，并且在室温下搅拌反应混合物12小时。用氯化铵水溶液(20mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(1∶5EtOAc∶石油醚)加以纯化，获得标题中间物(6g，81％产率)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.79(m，1H)，7.59(m，2H)，2.55(d，J＝2.8Hz，3H)，2.43(d，J＝0.4Hz，3H)。
[0486] (c)2-溴-1-(4-溴-3-甲基-苯基)-乙酮
[0487] 将三溴化三甲基苯基铵(13g，0.036mol)添加到1-(4-溴-3-甲基-苯基)-乙酮(6.3g，0.030mol)于THF(30mL)中的溶液中，并且在室温下搅拌反应混合物12小时，过滤并1
且浓缩，获得标题中间物(8.6g，100％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.82(m，1H)，
7.66(m，2H)，4.38(s，2H)，2.56(s，3H)。
且浓缩，获得标题中间物(8.6g，100％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.82(m，1H)，
7.66(m，2H)，4.38(s，2H)，2.56(s，3H)。
[0488] (d)(S)-吡咯烷-1，2-二甲酸2-[2-(4-溴-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯1-叔丁酯
[0489] 将先前步骤的产物(8.6g，0.03mol)、(S)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(9.5g，0.044mol)和碳酸钾(12.4g，0.09mol)的混合物溶解于ACN(50mL)中，并且在室温下搅拌反应混合物12小时并且浓缩，获得标题中间物(13g，100％产率)。(m/z)：C19H24BrNO5的+
[M+H-Boc] 计算值为326.04，实验值为326.0。
[M+H-Boc] 计算值为326.04，实验值为326.0。
[0490] (e)(S)-2-[4-(4-溴-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[0491] 在110℃下将先前步骤的产物(13g，0.029mol)和乙酸铵(47g，0.61mol)溶解于甲苯(100mL)中的混合物搅拌12小时，浓缩，并且通过硅胶色谱法(1∶1EtOAc∶石油醚)1
加以纯化，获得标题中间物(8g，68％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.40(m，3H)，
7.13(m，1H)，4.89(m，1H)，3.34(m，2H)，2.94(m，1H)，2.34(s，3H)，2.10(m，2H)，1.88(m，1H)，
1.58(m，10H)。
加以纯化，获得标题中间物(8g，68％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.40(m，3H)，
7.13(m，1H)，4.89(m，1H)，3.34(m，2H)，2.94(m，1H)，2.34(s，3H)，2.10(m，2H)，1.88(m，1H)，
1.58(m，10H)。
[0492] (f)4-(4-溴-3-甲基-苯基)-2-(S)-吡咯烷-2-基-1H-咪唑
[0493] 在0℃下向先前步骤的产物(8g，0.020mol)于甲醇(3mL)中的溶液中添加含4N HCl的甲醇(50mL)。在室温下搅拌反应混合物4小时并且浓缩，获得黄色固体状标题中间+物(6g，100％产率)。(m/z)：C14H16BrN3的[M+H] 计算值为306.06，实验值为307.7。
[0494] (g)((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0495] 在室温下将先前步骤的产物(6g，0.018mol)、(S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酸(4.6g，0.026mol)、HATU(10g，0.026mol)和三乙胺(5.3g，0.078mol)溶解于DCM(50mL)中的混合物搅拌12小时，浓缩并且通过硅胶色谱法(1∶1EtOAc∶石油醚)加1
以纯化，获得标题中间物(5.5g，69％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：10.4(s，1H)，
7.64(m，1H)，7.46(m，2H)，7.17(m，1H)，5.50(m，1H)，5.39(m，1H)，4.34(m，1H)，3.86(m，1H)，
3.69(s，3H)，3.60(m，1H)，2.45-2.01(m，6H)，1.07(m，1H)，0.851(m，6H)。
以纯化，获得标题中间物(5.5g，69％产率)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：10.4(s，1H)，
7.64(m，1H)，7.46(m，2H)，7.17(m，1H)，5.50(m，1H)，5.39(m，1H)，4.34(m，1H)，3.86(m，1H)，
3.69(s，3H)，3.60(m，1H)，2.45-2.01(m，6H)，1.07(m，1H)，0.851(m，6H)。
[0496] 制备29-B：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2，2′-二甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0497]
[0498] 将碳酸钾(224mg，1.619mmol)添加到((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯((150mg，0.324mmol)和3-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯胺(90.6mg，
0.389mmol)于甲苯(0.6mL，6mmol)和水(0.3mL，20mmol)中的混合物中。将反应混合物除气且用氮气冲洗。在氮气下添加四(三苯膦)钯(0)(44.9mg，0.039mmol)，接着盖上反应混合物并且在100℃下加热过夜，冷却到室温并且分配在乙酸乙酯(10mL)与水(2mL)之间。
使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油状物，通过硅胶色谱法(12g硅胶，0至100％EtOAc/己烷)加以纯化。合并所要洗脱份并且浓缩，获得淡黄色泡沫状标题化合物(135mg，85％产率)。(m/z)：C28H35N5O3的[M+H]+计算值为490.27，实验值为490.6。
0.389mmol)于甲苯(0.6mL，6mmol)和水(0.3mL，20mmol)中的混合物中。将反应混合物除气且用氮气冲洗。在氮气下添加四(三苯膦)钯(0)(44.9mg，0.039mmol)，接着盖上反应混合物并且在100℃下加热过夜，冷却到室温并且分配在乙酸乙酯(10mL)与水(2mL)之间。
使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油状物，通过硅胶色谱法(12g硅胶，0至100％EtOAc/己烷)加以纯化。合并所要洗脱份并且浓缩，获得淡黄色泡沫状标题化合物(135mg，85％产率)。(m/z)：C28H35N5O3的[M+H]+计算值为490.27，实验值为490.6。
[0499] 制备30：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2，2′-二甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0500]
[0501] (a)(2S，5R)-4-[5-(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2，2′-二甲基-联苯-4-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0502] 在室温下将(2S，5R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸盐(80.8mg，0.180mmol)、EDC(34.4mg，0.180mmol)和HOAt(24.5mg，
0.180mmol)于 DMA(2.0mL，22mmol)中 的 混 合 物 搅 拌20分 钟，接 着 依 序 添 加((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2，2′-二甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯
烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(80.0mg，0.163mmol；制备29-B)和N，N-二异丙基乙胺(0.142mL，0.817mmol)。将所产生的混合物在50℃下加热过夜。使反应混合物分配在EtOAc(10mL)与水(2mL)之间。用水(2mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油状物。(m/z)：C45H58N8O6的[M+H]+计算值为807.45，实验值为807.6。
0.180mmol)于 DMA(2.0mL，22mmol)中 的 混 合 物 搅 拌20分 钟，接 着 依 序 添 加((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2，2′-二甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯
烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(80.0mg，0.163mmol；制备29-B)和N，N-二异丙基乙胺(0.142mL，0.817mmol)。将所产生的混合物在50℃下加热过夜。使反应混合物分配在EtOAc(10mL)与水(2mL)之间。用水(2mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油状物。(m/z)：C45H58N8O6的[M+H]+计算值为807.45，实验值为807.6。
[0503] (b)((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2，2′-二甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0504] 在室温下用含4M HCl的1，4-二噁烷(1.5mL，6.0mmol)处理得自先前步骤的油状残余物30分钟。浓缩反应混合物，将残余物溶解于1∶1乙酸∶水溶液(8mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体状的标题化合物+三(三氟乙酸)盐(66mg，产率39％)。(m/z)：C40H50N8O4的[M+H] 计算值为707.40，实验值为707.8。
[0505] 制备31：(R)-4-[5-(4-溴-3，5-二氟-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0506]
[0507] 向4-溴-3，5-二氟苯胺(250mg，1.2mmol)溶解于DCM(5mL)中的溶液中添加2-氟吡啶-5-羰基氯(190mg，1.2mmol)溶解于DCM(2mL)中的溶液，接着添加N，N-二异丙基乙 胺(100μL，0.60mmol)。在室温下搅拌反应混合物1小时并且浓缩，产生透明油状物。
[0508] 将得自先前步骤的油状物溶解于DMSO(2.6mL，36mmol)中，并且添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(240mg，1.2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.1mL，12mmol)。在120℃下加热反应混合物过夜，并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生白色固体状标题产物+
(产率62％)。(m/z)：C22H25BrF2N4O3的[M+H] 计算值511.11、513.11，实验值为513.4。
(产率62％)。(m/z)：C22H25BrF2N4O3的[M+H] 计算值511.11、513.11，实验值为513.4。
[0509] 制备32：((S)-1-{(S)-2-[4-(2′，6′-二氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0510]
[0511] 按照制备24的程序，在0.4mmol规模下，用制备31的产物替代制备23-1的产物+来制备标题化合物的三(三氟乙酸)盐。(m/z)：C37H42F2N8O4的[M+H] 计算值为701.33，实验值为701.4。
[0512] 制备33：(R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0513]
[0514] 将6-氟烟酸(150g，1.063mol)和(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(234.2g，1.169mol)于四氢呋喃(1.75L)中的混合物冷却到-40℃，接着缓慢添加含2M氯化异丙基镁的四氢呋喃(1.196L，2.39mol)，同时维持温度低于-20℃。使反应混合物缓慢升温到室温，在室温下搅拌4小时，接着添加1N HCl(1.75L)和水(1.175L)。用乙酸乙酯(4L)萃取反应混合物。蒸发有机相，获得粗制固体(534g)。向粗制固体中添加丙酮(2L)和水(200mL)。
将所产生的反应混合物加热到50℃，接着缓慢添加水(2.8L)。添加约1L水后，添加得自先前较小规模操作的晶种。使反应混合物经3小时冷却到20℃，在20℃下搅拌过夜并且过滤。
用2∶3丙酮∶水(2×500mL)洗涤固体，并且在真空下干燥，获得灰白色固体状标题化合物(329g，96％产率)。HPLC方法A：滞留时间为9.73分钟。
将所产生的反应混合物加热到50℃，接着缓慢添加水(2.8L)。添加约1L水后，添加得自先前较小规模操作的晶种。使反应混合物经3小时冷却到20℃，在20℃下搅拌过夜并且过滤。
用2∶3丙酮∶水(2×500mL)洗涤固体，并且在真空下干燥，获得灰白色固体状标题化合物(329g，96％产率)。HPLC方法A：滞留时间为9.73分钟。
[0515] 制备34：(R)-4-[5-(4-溴-3-氟-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0516]
[0517] 在室温下将(R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.47mmol，制备33)、EDC(130mg，0.70mmol)和HOAt(95mg，0.70mmol)溶解于DMA(4.3mL，
47mmol)中的溶液搅拌30分钟，接着依序添加4-溴-3-氟苯胺(89mg，0.47mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.2mL，1.2mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜并且用乙酸乙酯/水萃取。
使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(洗脱：0至40％EtOAc:己烷)加+
以纯化，获得淡黄色油状标题化合物(100mg，40％产率)。(m/z)：C22H26BrFN4O3的[M+H] 计算值为493.12，实验值为493.2。
47mmol)中的溶液搅拌30分钟，接着依序添加4-溴-3-氟苯胺(89mg，0.47mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.2mL，1.2mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜并且用乙酸乙酯/水萃取。
使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(洗脱：0至40％EtOAc:己烷)加+
以纯化，获得淡黄色油状标题化合物(100mg，40％产率)。(m/z)：C22H26BrFN4O3的[M+H] 计算值为493.12，实验值为493.2。
[0518] 制备35：((S)-1-{(S)-2-[4-(2′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0519]
[0520] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(99mg，0.20mmol)和(R)-4-[5-(4-溴-3-氟-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌
嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，制备34)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(2.06mL，
19.9mmol)和水(0.358mL，19.9mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(62.6mg，0.75mmol)和四(三苯膦)钯(0)(34.4mg，0.030mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯(5mL)和水(3mL)萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状物。
嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，制备34)的混合物溶解于1，2-二甲氧基乙烷(2.06mL，
19.9mmol)和水(0.358mL，19.9mmol)中，并且用氮气对混合物充气。依序添加碳酸氢钠(62.6mg，0.75mmol)和四(三苯膦)钯(0)(34.4mg，0.030mmol)。再用氮气对反应混合物充气，在氮气下密封，并且在90℃下加热过夜。用乙酸乙酯(5mL)和水(3mL)萃取反应混合物；使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生棕色油状物。
[0521] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(3mL，10mmol)处理得自先前步骤的油状物，在室温下搅拌1小时，浓缩并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生黄色固体状的标题化合物盐酸盐，通过反相HPLC加以纯化，产生标题化合物的三(三氟乙酸)盐(100mg)。(m/z)：C37H43FN8O4+的[M+H] 计算值为683.34，实验值为683.8。
[0522] 制备36：6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-烟酸
[0523]
[0524] (a)6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-烟酸甲酯
[0525] 向(R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(50g，0.156mol)与甲醇(500mL)的混合物中缓慢添加浓硫酸(37mL)。使反应混合物升温到64℃，在64℃下搅拌过夜，冷却到室温，接着依序添加冰水(800mL)和50％氢氧化钠水溶液(60mL)。用乙酸乙酯(3×800mL)萃取反应混合物。使合并的有机层经硫酸钠干燥并且蒸发，获得油状标题中间物。HPLC方法A：滞留时间为3.50分钟和3.72分钟。
[0526] (b)6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-烟酸甲酯
[0527] 向得自先前步骤的油状物于二甲基甲酰胺(600mL)中的冷却溶液中添加(S)-2，2-二甲基-环丙烷甲酸(16.89g，0.148mol)和HCTU(61.23g，0.148mol)，接着添加N，N-二异丙基乙胺(51.6mL，0.296mol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，用乙酸乙酯(1L)稀释并且用1∶1碳酸钠∶水洗涤。用乙酸乙酯(500mL)萃取水相。用饱和碳酸氢钠水溶液(500mL)和水(1L)洗涤合并的有机相。用3N HCl(2×500mL，300mL)萃取有机层，接着向合并的水性萃取物中添加50％NaOH水溶液(169g)。30分钟后，过滤反应混合物，获得固体(51.1g)。向粗制固体中依序添加丙酮(300mL)和水(450mL)。在室温下搅拌反应混合物过夜并且过滤，获得微黄色固体状标题中间物(36.86g，两个步骤的产率为71.5％)。HPLC方法B：滞留时间为15.05分钟。
[0528] (c)6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-烟酸[0529] 向先前步骤的产物(35.0g，0.106mol)与甲醇(280mL)的混合物中添加含2M LiOH的水(106mL，0.211mol)，同时保持温度低于30℃。在室温下搅拌反应混合物过夜，在减压下浓缩，接着依序添加乙醇(64mL)和1N HCl(230mL)。添加160mL HCl后，添加得自先前较小规模操作的晶种。1小时后，过滤混合物，获得浅黄色固体状标题化合物(33.2g，99％产率)。HPLC方法B：滞留时间为8.27分钟。
[0530] 制备 37：((S)-1-{(S)-2-[4-(4 ′-氨 基-2 ′-氯-联 苯-4-基)-1H- 咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0531]
[0532] 将饱和碳酸钠水溶液(0.2mL)添加到[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(100mg，0.20mmol)、4-溴-3-氯苯胺(46mg，0.22mmol)、四(三苯膦)钯(0)(23mg，0.02mmol)和水(0.3mL)的混合物中。用氮气吹扫反应混合物，接着添加1，
4-二噁烷(0.7mL)。将反应混合物除气，搅拌并且在90℃下加热过夜。添加水和乙酸乙酯；
浓缩反应混合物；溶解于1∶1乙酸∶水(1mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化。合并洗脱份，用碳酸氢钠水溶液调节到pH8-9，并且用DCM萃取。用水洗涤萃取物，用硫酸钠干燥并且浓缩。将浓缩物溶解于甲醇中并且在真空下浓缩，获得标题化合物。(m/z)：C26H30ClN5O3+
的[M+H] 计算值为496.20，实验值为496.7。
4-二噁烷(0.7mL)。将反应混合物除气，搅拌并且在90℃下加热过夜。添加水和乙酸乙酯；
浓缩反应混合物；溶解于1∶1乙酸∶水(1mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化。合并洗脱份，用碳酸氢钠水溶液调节到pH8-9，并且用DCM萃取。用水洗涤萃取物，用硫酸钠干燥并且浓缩。将浓缩物溶解于甲醇中并且在真空下浓缩，获得标题化合物。(m/z)：C26H30ClN5O3+
的[M+H] 计算值为496.20，实验值为496.7。
[0533] 制备38-A：((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-3-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0534]
[0535] (a)1-(4-溴-3-氟-苯基)-2-氯-乙酮
[0536] 在0℃下将乙二酰二氯(6.1g，48mmol)添加到4-溴-3-氟-苯甲酸(7g，32mmol)于DCM(80mL)中的溶液中，接着添加DMF(0.2mL)，并且在室温下搅拌反应混合物2小时，接着在真空下浓缩，获得粗产物4-溴-3-氟-苯甲酰氯。
[0537] 在0℃下向溶解于DCM(50mL)中的粗产物中添加2N三甲基硅烷基重氮甲烷(48mL，96mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物3小时。添加乙酸，并且用DCM稀释反应混合物，用盐水洗涤并且浓缩，获得粗产物1-(4-溴-3-氟-苯基)-2-二氮烯基-2-三甲基硅烷基-乙酮(8.0g)。
[0538] 在0℃下向先前步骤的产物(8.0g)于THF(50mL)中的溶液中添加含4N HCl的二噁烷(20mL)，并且在室温下搅拌反应混合物3小时，浓缩并且添加EtOAc(100mL)。用碳 酸氢钠洗涤溶液，干燥，浓缩并且通过硅胶色谱法(用5∶1石油醚∶EtOAc洗脱)加以纯化，+获得标题中间物(6.5g，81％产率)。(m/z)：C8H5BrClFO的[M+H] 计算值为252.93，实验值
1
为252.7。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.72-7.76(2H，M)，7.63-7.65(1H，m)，4.64(2H，s)。
1
为252.7。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.72-7.76(2H，M)，7.63-7.65(1H，m)，4.64(2H，s)。
[0539] (b)(S)-吡咯烷-1，2-二甲酸2-[2-(4-溴-3-氟-苯基)-2-氧代-乙基]酯1-叔丁酯
[0540] 向先前步骤的产物(6.1g，28.4mmol)于DMF(100mL)中的溶液中添加(S)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(6.5g，25.8mmol)和碳酸铯(16.8g，51.6mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物2小时。添加乙酸乙酯(500mL)，并且用盐水(4×50mL)洗涤溶液，干燥并且+浓缩，获得深色油状标题中间物(10g)。(m/z)：C18H21BrFNO5的[M+H-Boc] 计算值为330.02，实验值为331.9。
[0541] (c)(S)-2-[4-(4-溴-3-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[0542] 将乙酸铵(39.8g，516mmol)添加到先前步骤的产物(10g，25.8mmol)于甲苯(150mL)中的溶液中，并且在回流下搅拌反应混合物过夜。添加乙酸乙酯(200mL)，并且用水(3×50mL)洗涤溶液，干燥，浓缩并且通过硅胶色谱法(用4∶1石油醚∶EtOAc洗脱)加+以纯化，获得黄色固体状标题产物(4.2g)。(m/z)：C18H21BrFN3O2的[M+H] 计算值为410.09，
1
实验值为409.9。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.41-7.56(3H，m)，7.25(1H，s)，4.97(1H，d)，3.43(2H，m)，3.01(1H，s)，2.10(2H，m)，1.98(2H，m)，1.42-1.51(10H，m)。
1
实验值为409.9。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：7.41-7.56(3H，m)，7.25(1H，s)，4.97(1H，d)，3.43(2H，m)，3.01(1H，s)，2.10(2H，m)，1.98(2H，m)，1.42-1.51(10H，m)。
[0543] (d)((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-3-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0544] 向先前步骤的产物(4.2g，10.24mmol)于甲醇中的溶液中添加含4N HCl的二噁烷(30mL)，并且在室温下搅拌反应混合物2小时并且浓缩，获得粗产物4-(4-溴-3-氟-苯基)-2-(S)-吡咯烷-2-基-1H-咪唑(4.1g)。
[0545] 向所述粗产物(4.1g，10.24mmol)于DMF(70mL)中的溶液中添加(S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酸(1.97g，11.26mmol)、HATU(4.67g，12.29mmol)和三乙胺(3.11g，30.72mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物过夜。添加乙酸乙酯(200mL)，并且用盐水(3×40mL)洗涤溶液，干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(用2∶1石油醚∶EtOAc洗+
脱)加以纯化，获得黄色固体状标题产物(2.6g，54％产率)。(m/z)：C20H24BrN4O3的[M+H]
1
计算值为467.11，实验值为468.9。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：7.51-7.62(m，2H)，
7.40-7.42(m，2H)，5.12-5.16(m，1H)，4.22-4.20(m，1H)，4.05-3.95(m，1H)，3.88-3.82(m，
1H)，3.65(s，3H)，2.41-2.11(m，3H)，2.05-1.99(m，1H)，0.97-0.88(m，7H)。
脱)加以纯化，获得黄色固体状标题产物(2.6g，54％产率)。(m/z)：C20H24BrN4O3的[M+H]
1
计算值为467.11，实验值为468.9。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：7.51-7.62(m，2H)，
7.40-7.42(m，2H)，5.12-5.16(m，1H)，4.22-4.20(m，1H)，4.05-3.95(m，1H)，3.88-3.82(m，
1H)，3.65(s，3H)，2.41-2.11(m，3H)，2.05-1.99(m，1H)，0.97-0.88(m，7H)。
[0546] 制备38-B：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2，2′-二氟-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-
[0547] 羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0548]
[0549] 将 碳 酸 钾 (300mg，2.1mmol)添 加 到 ((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-3- 氟- 苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(200mg，0.4mmol)和3-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯胺(130mg，0.55mmol)溶解于甲苯(0.91mL，8.6mmol)和水(0.38mL，21mmol)中的溶液中。用氮气对反应混合物充气。添加四(三苯膦)钯(0)(59mg，0.051mmol)且用氮气对反应混合物充气，并且在100℃下加热过夜。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干+燥，过滤并且浓缩，产生红色固体。(m/z)：C26H29F2N5O3的[M+H] 计算值为498.20，实验值为
498.5
498.5
[0550] 通过硅胶色谱法(0至100％乙酸乙酯:己烷)纯化红色固体，产生含有氧化三苯膦的黄色固体状所要产物。将一部分黄色固体(50mg)溶解于1∶1乙酸∶水(5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，产生白色粉末状的标题中间物三氟乙酸盐(210mg，99.3％纯度)。
[0551] 制备39：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-5 ′-氟-2′- 三氟甲基 -联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0552]
[0553] 用氮气吹扫4-溴-2-氟-5-(三氟甲基)苯胺(78mg，0.302mmol)和[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(150mg，0.302mmol)于甲苯(0.6mL，6mmol)和水(0.4mL，20mmol)中的混合物。在氮气气氛下添加碳酸钾(208.8g，1.511mmol)和四(三苯膦)钯(0)(35mg，0.030mmol)。盖上反应混合物并且在100℃下加热过夜，冷却到室温，并且分配在乙酸乙酯(5.0mL)与水(1.5mL)之间。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油，通过硅胶色谱法(12g硅胶，0至100％EtOAc/己烷)加以纯化。合并所要洗 脱份并且浓缩，获得淡黄色固体状标题中间物(128mg，77％产率)。(m/z)：
+
C27H24F4N5O3的[M+H] 计算值为548.22，实验值为548.6。
+
C27H24F4N5O3的[M+H] 计算值为548.22，实验值为548.6。
[0554] 制备40：{(S)-1-[(S)-2-(4-{5′-氟-4′-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-2′-三氟甲基-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙
基}-氨基甲酸甲酯
基}-氨基甲酸甲酯
[0555]
[0556] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-5′-氟-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(128mg，0.234mmol；制备39)于DCM(3mL，47mmol)和DMA(0.3mL，3mmol)中的溶液中添加2-氟吡啶-5-羰基氯(37mg，0.234mmol)，并且在室温下搅拌所产生的溶液过夜。通过旋转蒸发浓缩反应混合物，获得淡棕色油状标题中间物单盐酸盐(163mg)，其不经进一步纯化即使用。(m/z)：C33H31F5N6O4的+
[M+H] 计算值为671.23，实验值为671.7。
[M+H] 计算值为671.23，实验值为671.7。
[0557] 制备41：((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0558]
[0559] 在120℃下将{(S)-1-[(S)-2-(4-{5′-氟-4′-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-2′-三氟甲基-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙
基}-氨基甲酸甲酯盐酸盐(100mg，0.141mmol，制备40)、(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(283mg，1.414mmol)和N，N-二异丙基乙胺(246.3μL，1.414mmol)于DMSO(1.5mL，21mmol)中的溶液搅拌过夜。通过旋转蒸发浓缩反应混合物，获得粗制中间物，用含4.0M HCl的1，
4-二噁烷(1.0mL，4.0mmol)处理1小时，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并洗脱份并且冻干，获得标题中间物的三+
(三氟乙酸)盐(54mg，35％ 产率)。(m/z)：C38H42F4N8O4的[M+H] 计算值为751.33，实验值为751.7。
基}-氨基甲酸甲酯盐酸盐(100mg，0.141mmol，制备40)、(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(283mg，1.414mmol)和N，N-二异丙基乙胺(246.3μL，1.414mmol)于DMSO(1.5mL，21mmol)中的溶液搅拌过夜。通过旋转蒸发浓缩反应混合物，获得粗制中间物，用含4.0M HCl的1，
4-二噁烷(1.0mL，4.0mmol)处理1小时，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并洗脱份并且冻干，获得标题中间物的三+
(三氟乙酸)盐(54mg，35％ 产率)。(m/z)：C38H42F4N8O4的[M+H] 计算值为751.33，实验值为751.7。
[0560] 制备42：4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯胺
[0561]
[0562] 向2-氟-5-(三氟甲氧基)苯胺(1g，5mmol)溶解于DMF(2mL)中的混合物中缓慢添加N-溴丁二酰亚胺(1.1g，6.2mmol)溶解于DMF(2mL)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物1小时，浓缩并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过硅胶色谱法(用0至10％乙酸乙酯:己烷洗脱)加以纯化，产生红色油状标题中间物(818mg，+58％产率)。(m/z)：C7H4BrF4NO的[M+H] 计算值为273.94、275.94，实验值为276.1。
[0563] 制备43：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-5′-氟-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0564]
[0565] 将碳酸钾(350mg，2.5mmol)添加到[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(250mg，0.50mmol)和4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯胺(140mg，0.50mmol；制备42)溶解于甲苯(2mL)和水(0.54mL)中的溶液中。用氮气对反应混合物充气。添加四(三苯膦)钯(0)(70mg，0.06mmol)且用氮气对反应混合物充气，并且在100℃下加热过夜。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生红色固体，通过硅胶色谱法(0至100％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生含一+
些氧化三苯膦杂质的白色固体状所要产物。(m/z)：C27H29F4N5O4的[M+H] 计算值为564.2，实验值为564.4。
些氧化三苯膦杂质的白色固体状所要产物。(m/z)：C27H29F4N5O4的[M+H] 计算值为564.2，实验值为564.4。
[0566] 将固体(50mg)溶解于1∶1乙酸∶水(5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，产生白色固体状标题中间物三氟乙酸盐。
[0567] 制备44：((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0568]
[0569] (a){(S)-1-[(S)-2-(4-{5′-氟-4′-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0570] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4 ′ -氨 基-5 ′ -氟 -2 ′ -三 氟 甲 氧 基- 联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(50 mg，0.09 mmol，制备43)于DCM(0.6 mL，9 mmol)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(10 mg，0.09 mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物5分钟，接着浓缩，获得有色固体。
[0571] (b)(R)-4-[5-(5-氟-4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0572] 将得自先前步骤的固体溶解于二甲亚砜(0.20 mL，2.8 mmol)与N，N-二异丙基乙胺(0.32 mL，1.8 mmol)的混合物中，接着添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(180 mg，0.91mmol)，并且在120℃下将反应混合物加热过夜并且通过旋转蒸发加以浓缩，产生深色油状物。
[0573] (c)((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0574] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(2 mL，8 mmol)处理得自先前步骤的油状物并且在50℃下加热1小时。浓缩反应混合物，并且与乙酸乙酯(2×)一起蒸发，产生固体状所要产物盐酸盐，通过反相HPLC加以纯化，产生白色固体状所要产物三(三氟乙酸)盐(53 mg，+
50％产率)。(m/z)：C38H42F4N8O5的[M+H] 计算值为767.32，实验值为767.7。
50％产率)。(m/z)：C38H42F4N8O5的[M+H] 计算值为767.32，实验值为767.7。
[0575] 制备45：4-溴-3-三氟甲氧基-苯甲酸甲酯
[0576]
[0577] (b)4-氨基-3-三氟甲氧基-苯甲酸甲酯
[0578] 在室温下将4-氨基-3-(三氟甲氧基)苯甲酸(5 g，22.61 mmol)、甲醇(75 mL)和含4.0 M HCl的1，4-二噁烷(56.53mL，226.1mmol)的混合物搅拌2天。浓缩反应混合物，并且将所产生的残余物与EtOAc(3×20mL)一起蒸发并且在真空下干燥，获得标题中间物的盐酸盐(6.9g)。
[0579] (b)4-溴-3-三氟甲氧基-苯甲酸甲酯
[0580] 在室温下将先前步骤的产物(2.00g，7.36mmol)溶解于乙腈(89mL)与水(9.2mL)的混合物中。添加溴化铜(II)(2.27g，10.2mmol)，接着逐滴添加亚硝酸叔丁酯(1.51mL，12.7mmol)。在70℃下加热所产生的混合物1小时，冷却到室温，并且用饱和碳酸氢钠(30mL)处理。用EtOAc(100mL)萃取混合物。用EtOAc(100mL)萃取水层。用盐水(30mL)洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油状物，通过硅胶色谱法(0至30％EtOAc/己烷)加以纯化。合并所要洗脱份并且浓缩，获得淡黄色油状标题中间物(1.57g，71％产率)，由NMR来证实。
[0581] 制备46：4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-甲酸
[0582]
[0583] 在室温下向4-溴-3-三氟甲氧基-苯甲酸甲酯(331mg，1.11mmol；制备45)和[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(500mg，1.01mmol)于甲苯(1mL)和水(1mL)中的混合物中添加碳酸钾(696mg，5.04mmol)。将混合物除气且用氮气冲洗。在氮气下添加四(三苯膦)钯(0)(116mg，0.101mmol)，接着盖上反应混合物并且在100℃下加热过夜，冷却到室温并且分配在EtOAc(20mL)与水(5mL)之间。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油状物。
[0584] 在65℃下用甲醇(6mL)和水(1mL)和单水合氢氧化锂(254mg，6.04mmol)处理得自先前步骤的油状残余物1小时。浓缩反应混合物，并且用1∶1乙酸∶水(20mL)处理所产生的残余物，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白+色固体状标题中间物三氟乙酸盐(190mg)。(m/z)：C28H29F3N4O6的[M+H] 计算值为575.20，实验值为575.5。
[0585] 制备47：(R)-2-甲基-1-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪
[0586]
[0587] (a)(R)-3-甲基-4-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0588] 在100℃下将2-氯-5-硝基吡啶(1.0g，6.3mmol)、(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.4g，6.9mmol)和碳酸钾(1.308g，9.46mmol)于DMSO(20mL)中的混合物加热过夜。将反应混合物冷却到室温，并经由硅胶垫过滤，用EtOAc(150mL)洗脱。用水(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤滤液，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油状物，通过硅胶色谱法(80g硅胶，0至60％EtOAc/己烷)加以纯化。合并所要洗脱份并且浓缩，获得淡黄色固体+
状标题中间物。(m/z)：C15H22N4O4的[M+H] 计算值为323.16，实验值为323.3。
状标题中间物。(m/z)：C15H22N4O4的[M+H] 计算值为323.16，实验值为323.3。
[0589] (b)(R)-2-甲基-1-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪
[0590] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(47.3mL)和HCl(11.6mL)处理得自先前步骤的固体，并且在室温下搅拌反应混合物2小时并且浓缩，产生黄色固体，与乙酸乙酯一起蒸发两次，+产生黄色固体状标题中间物二盐酸盐(940mg，50％产率)。(m/z)：C10H14N4O2的[M+H] 计算值为223.11，实验值为223.2。
[0591] 制备48：((S)-1-{(S)-2-[(R)-4-(5-氨基-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪-1-羰基]-2-甲基-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0592]
[0593] (a)((S)-2-甲基-1-{(S)-2-甲基-2-[(R)-3-甲基-4-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0594] 将(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(770mg，2.7mmol)溶解于DMA(17mL)中且添加HATU(1.0g，2.7mmol)。搅拌反应混合物20分钟，接着依序添加(R)-2-甲基-1-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪二盐酸盐(700mg，
2mmol；制备47)和N，N-二异丙基乙胺(2.0mL，11mmol)，并且在55℃下搅拌反应混合物过夜，冷却到室温，通过旋转蒸发加以浓缩并且用EtOAc/水萃取。依序用水和盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，在真空下浓缩并且通过硅胶色谱法(0至100％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生黄色油状标题中间物(970mg)。(m/z)：C23H34N6O6的[M+H]+计算值为491.25，实验值为491.7。
2mmol；制备47)和N，N-二异丙基乙胺(2.0mL，11mmol)，并且在55℃下搅拌反应混合物过夜，冷却到室温，通过旋转蒸发加以浓缩并且用EtOAc/水萃取。依序用水和盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，在真空下浓缩并且通过硅胶色谱法(0至100％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生黄色油状标题中间物(970mg)。(m/z)：C23H34N6O6的[M+H]+计算值为491.25，实验值为491.7。
[0595] (b)((S)-1-{(S)-2-[(R)-4-(5-氨基-吡 啶-2-基)-3-甲 基-哌嗪-1- 羰基]-2-甲基-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0596] 将得自先前步骤的油状物溶解于甲醇(15mL)中并且用50％湿润氢氧化钯/碳(20％w/w)(13mg，0.45mmol)进行处理，并且在室温下搅拌2小时。使反应混合物经由硅藻土过滤，并且在真空下浓缩，产生暗红色油状物，通过硅胶色谱法(0至100％乙酸乙酯:己烷，持续15分钟；接着0至5％甲醇:EtOAc，再持续15分钟)加以纯化，产生淡红色固体状标题中间物(375mg；40％产率)。(m/z)：C23H36N6O4的[M+H]+计算值为461.28，实验值为461.6。
[0597] 制备49：(2S，5R)-4-[5-(4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0598]
[0599] 向4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯胺(500mg，2mmol)溶解于DCM(1mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(290mg，1.8mmol)于DCM(1mL)中的溶液。添加数滴DMA，并且浓缩反应混合物，形成紫色固体状N-(4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯基)-6-氟-烟酰胺。
[0600] 将得自先前步骤的固体溶解于N，N-二异丙基乙胺(0.7mL，4mmol)与DMSO(0.7mL，10mmol)的混合物中，并且添加(2S，5R)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(590mg，
2.7mmol)并且在120℃下加热反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于少量DCM中并且通过硅胶色谱法(0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生白色固体状标题中间物+
(613mg，57％产率)。(m/z)：C24H27F4N4O4的[M+H] 计算值为591.12，实验值为591.4。
2.7mmol)并且在120℃下加热反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于少量DCM中并且通过硅胶色谱法(0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生白色固体状标题中间物+
(613mg，57％产率)。(m/z)：C24H27F4N4O4的[M+H] 计算值为591.12，实验值为591.4。
[0601] 制备50：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-5′-氟-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0602]
[0603] 将碳酸钾(470mg，3.4mmol)添加到[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(340mg，0.68mmol)和(2S，5R)-4-[5-(4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400mg，0.68mmol；制备
49)溶解于甲苯(2.5mL)和水(0.73mL)中的溶液中。用氮气对反应混合物充气。添加四(三苯膦)钯(0)(94mg，0.081mmol)且用氮气对反应混合物充气，并且在100℃下加热4小时。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生红色固体状(2S，5R)-4-[5-(5-氟-4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-基胺
甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。
49)溶解于甲苯(2.5mL)和水(0.73mL)中的溶液中。用氮气对反应混合物充气。添加四(三苯膦)钯(0)(94mg，0.081mmol)且用氮气对反应混合物充气，并且在100℃下加热4小时。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生红色固体状(2S，5R)-4-[5-(5-氟-4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-基胺
甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。
[0604] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(5mL，20mmol)处理得自先前步骤的固体且在50℃下搅拌30分钟。浓缩反应混合物，溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中并且通过反相HPLC加以纯化。合并含有所要化合物的洗脱份并且冻干，产生白色粉末状标题中间物三(三氟乙酸)+盐(490mg，64％产率)。(m/z)：C39H44F4N8O5的[M+H] 计算值为781.34，实验值为781.6。
[0605] 制备51：5-氨基-2-溴-4-氯三氟甲苯
[0606]
[0607] 将N-溴丁二酰亚胺(1.0g，5.6mmol)溶解于DMF(3mL)中的溶液缓慢添加到3-氨基-4-氯三氟甲苯(1g，5mmol)溶解于DMF(2mL)中的混合物中，并且在室温下搅拌反应混合物20分钟，浓缩并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并且通过急骤色谱法(用100％己烷洗脱)加以纯化，产生淡红色油状标题中间物(970mg，70％产率)。(m/z)：C7H4BrClF3N的[M+H]+计算值为273.92、275.92，实验值为276.2。
[0608] 制备52：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-5 ′-氯-2′- 三氟甲基 -联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0609]
[0610] 将碳酸钾(280mg，2.0mmol)添加到[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(200mg，0.40mmol)和5-氨基-2-溴-4-氯三氟甲苯(110mg，0.40mmol；制备51)溶解于甲苯(1.3mL)和水(0.43mL)中的溶液中。用氮气对反应混合物充气。添加四(三苯膦)钯(0)(56mg，0.48mmol)且用氮气对反应混合物充气，并且在100℃下加热4小时。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生红色固体，通过硅胶色谱法(0至100％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生黄色固体状所要产物。
[0611] 将固体(约30mg)溶解于1∶1乙酸∶水(5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，+产生标题中间物的二(三氟乙酸)盐(31.1mg)。(m/z)：C27H29ClF3N5O3的[M+H] 计算值为
564.19，实验值为564.2。
564.19，实验值为564.2。
[0612] 制备53：((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氯-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0613]
[0614] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-5′-氯-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(50mg，0.09mmol；制备52)溶解于DCM(0.3mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(14mg，0.091mmol)溶解于DCM(0.3mL)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物5分钟并且浓缩，产生黄色固体状{(S)-1-[(S)-2-(4-{5′-氯-4′-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-2′-三氟甲基-联
苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯。
苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯。
[0615] 将得白先前步骤的黄色固体溶解于DMSO(0.3mL，4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.3mL，2mmol)的混合物中，并且添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.91mmol)。在100℃下加热反应混合物72小时，并且通过旋转蒸发加以浓缩，产生暗色油状(R)-4-[5-(5-氯-4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲基-联苯-4-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲
基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。
基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯。
[0616] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(2mL，8mmol)处理得白先前步骤的油状物，并且在50℃下搅拌反应混合物1小时，并且在真空下浓缩，产生所要产物的盐酸盐，将其溶解于
1∶1乙酸∶水(5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化。合并含有所要产物的洗脱份并且冻干，产生白色粉末状标题中间物三(三氟乙酸)盐(30mg，30％产率)。(m/z)：C38H42ClF3N8O4+
的[M+H] 计算值为767.30，实验值为767.5。
1∶1乙酸∶水(5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化。合并含有所要产物的洗脱份并且冻干，产生白色粉末状标题中间物三(三氟乙酸)盐(30mg，30％产率)。(m/z)：C38H42ClF3N8O4+
的[M+H] 计算值为767.30，实验值为767.5。
[0617] 制备54：(2S，5R)-4-[5-(4-溴-2-氯-5-三氟甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0618]
[0619] 向5-氨基-2-溴-4-氯三氟甲苯(466mg，1.70mmol)溶解于DCM(1mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(270mg，1.70mmol)于DCM(1mL)中的溶液。添加数滴DMA且浓缩反应混合物，形成紫色固体状N-(4-溴-2-氯-5-三氟甲基-苯基)-6-氟-烟酰胺。
[0620] 用N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，3mmol)、DMSO(0.5mL，7mmol)和(2S，5R)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(273mg，1.27mmol)处理一半得白先前步骤的固体并且在120℃下加热反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于少量DCM中，并且通过硅胶色谱法(0至50％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生黄色固体状标题中间物(288mg，29％产率)。(m/+z)：C24H27F4N4O4的[M+H] 计算值为591.09、593.09，实验值为593.2。
[0621] 制备55：((S)-1-{(S)-2-[4-5′-氯-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0622]
[0623] 按照制备50的程序，在0.24mmol规模下，用(2S，5R)-4-[5-(4-溴-2-氯-5-三氟甲基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(140mg，0.24mmol，制备54)替代(2S，5R)-4-[5-(4-溴-2-氟-5-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(制备49)来制备白色粉末状标题中间物+
三(三氟乙酸)盐(490mg，64％产率)。(m/z)：C39H44ClF3N8O4的[M+H] 计算值为781.31，实验值为781.6。
三(三氟乙酸)盐(490mg，64％产率)。(m/z)：C39H44ClF3N8O4的[M+H] 计算值为781.31，实验值为781.6。
[0624] 制备56：{(S)-2-甲基-1-[(S)-2-(4-{4′-[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶基-3-基胺甲酰基]-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0625]
[0626] 在室温下将4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-甲酸三氟乙酸盐(600mg，0.9mmol)和HATU(364mg，0.96mmol)于DMA(8mL)中的混合物搅拌15分钟，接着依序添加含0.5M(R)-4-(5-氨基-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的DMA(1.7mL)和
N，N-二异丙基乙胺(0.76mL，4.36mmol)。在55℃下加热反应混合物过夜，用EtOAc(100mL)和水(25mL)洗涤。再次依序用水和盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生暗红色油状物，通过硅胶色谱法(40g硅石管柱，0至80％己烷:EtOAc)加以纯化，获得淡棕色固体状(R)-4-{5-[(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-羰基)-氨基]-吡啶-2-基}-3-甲
基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(646mg)。
N，N-二异丙基乙胺(0.76mL，4.36mmol)。在55℃下加热反应混合物过夜，用EtOAc(100mL)和水(25mL)洗涤。再次依序用水和盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生暗红色油状物，通过硅胶色谱法(40g硅石管柱，0至80％己烷:EtOAc)加以纯化，获得淡棕色固体状(R)-4-{5-[(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-羰基)-氨基]-吡啶-2-基}-3-甲
基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(646mg)。
[0627] 用含4.OM HCl的1，4-二噁烷(6.5mL，26.14mmol)和HCl(1.6mL)处理固体，并且在室温下搅拌反应混合物1小时，浓缩并且与EtOAc(2×1mL)一起蒸发，获得米色固体状标+题中间物三盐酸盐(693mg)。(m/z)：C38H43F3N8O5的[M+H] 计算值为749.33，实验值为749.8。
[0628] 制备57：((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{6-[(R)-2-甲基-4-((S)-2-甲基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-吡啶基-3-基胺甲酰基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0629]
[0630] 向(S)-2-甲基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(222mg，0.97mmol)溶解于DMA(6mL) 中的混合物中添加HATU(369mg，0.97mmol)且搅拌反应混合物20分钟，接着依序添加{(S)-2-甲基-1-[(S)-2-(4-{4′-[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶基-3-基
胺甲酰基]-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-丙
基}-氨基甲酸甲酯三盐酸盐(693mg，0.81mmol；制备56)和N，N-二异丙基乙胺(0.71mL，
4.04mmol)。在55℃下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，并且用EtOAc(80mL)和水(20mL)萃取。再次依序用水和盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩，并且通过硅胶色谱法(40g硅石管柱，0至100％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生537mg淡棕色固体。
胺甲酰基]-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-丙
基}-氨基甲酸甲酯三盐酸盐(693mg，0.81mmol；制备56)和N，N-二异丙基乙胺(0.71mL，
4.04mmol)。在55℃下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，并且用EtOAc(80mL)和水(20mL)萃取。再次依序用水和盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩，并且通过硅胶色谱法(40g硅石管柱，0至100％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生537mg淡棕色固体。
[0631] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(6.1mL，24.23mmo1)和HCl(1.5mL)处理得白先前步骤的淡棕色固体且在室温下搅拌1小时，浓缩，并且与乙酸乙酯(2×1mL)一起蒸发，产生淡+黄色固体状标题中间物三盐酸盐(569mg)。(m/z)：C44H52F3N9O6的[M+H] 计算值为860.40，实验值为860.6。
[0632] 制备 58：(2S，5R)-4-[5-(6-溴-2- 甲基- 吡啶 基-3-基 胺 甲 酰基)- 吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0633]
[0634] (a)(2S，5R)-4-(5-甲氧基羰基-吡啶-2-基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0635] 在120℃下，将6-氟烟酸甲酯(1.0g，6.4mmol)、(2S，5R)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯盐酸盐(1.6g，6.4mmol)和碳酸钾(1.78g，12.9mmol)的混合物在DMSO(10mL)中搅拌2小时，冷却，用乙酸乙酯(50mL)稀释，用水(2×10mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并且浓缩。
[0636] (b)(2S，5R)-4-(5-羧基-吡啶-2-基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0637] 将氢氧化锂(618mg，12.9mmol)添加到先前步骤的产物于甲醇(15mL)和水(3mL)中的溶液中，并且在40℃下搅拌所产生的混合物5小时，浓缩并且用1N HCl酸化到pH4。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取所产生的混合物。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，浓缩，溶解于
1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题中间物的三氟乙酸盐+
(1.55g，54％产率)。(m/z)：C17H25N3O4的[M+H] 计算值为336.18，实验值为336.4。
1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题中间物的三氟乙酸盐+
(1.55g，54％产率)。(m/z)：C17H25N3O4的[M+H] 计算值为336.18，实验值为336.4。
[0638] (c)(2S，5R)-4-[5-(6-溴-2-甲基-吡啶基-3-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0639] 在室温下将先前步骤的产物(180.2mg，0.40)、EDC(115.3mg，0.60mmol)和 HOAt(81.9mg，0.60mmol)于DMF(2mL)中搅拌10分钟，接着添加6-溴-2-甲基-吡啶基-3-基胺(75mg，0.40mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.35mL，2.01mmol)，并且在50℃下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(5mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并含有所要产物的洗脱份并且冻干，获得标题中间物的三氟乙酸+
盐(91mg，37％产率)。(m/z)：C23H30BrN5O3的[M+H] 计算值为504.15，实验值为504.3。
盐(91mg，37％产率)。(m/z)：C23H30BrN5O3的[M+H] 计算值为504.15，实验值为504.3。
[0640] 制备59：[(S)-1-((S)-2-{4-[4-(5-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-6-甲基-吡啶-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0641]
[0642] (a)(2S，5R)-4-{5-[6-(4-{2-[(S)-][-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-苯基)-2-甲基-吡啶基-3-基胺甲酰基]-吡啶-2-基}-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0643] 将[(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[4-(4，4，5，5-四 甲 基 -[1，3，2]二 氧 硼 戊烷-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(73.0mg，0.147mmol)、(2S，5R)-4-[5-(6-溴-2-甲基-吡啶基-3-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，
5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸盐(91.0mg，0.147mmol；制备58)和2M碳酸钠于水(0.29mL，0.588mmol)和DMF(0.9mL，10mmol)中的混合物用氮气充气，接着添加四(三苯膦)钯(0)(11.9mg，0.010mmol)。用氮气吹扫反应混合物，在100℃下加热过夜，冷却，用乙酸乙酯(25mL)稀释，用水(2×5mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(5ml)中，过滤且通过反相HPLC加以纯化。合并含有所要产物的洗脱份并且冻干，获得+
标题中间物的三(三氟乙酸)盐(100.3mg)。(m/z)：C43H55N9O6的[M+H] 计算值为794.46，实验值为794.6。
5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸盐(91.0mg，0.147mmol；制备58)和2M碳酸钠于水(0.29mL，0.588mmol)和DMF(0.9mL，10mmol)中的混合物用氮气充气，接着添加四(三苯膦)钯(0)(11.9mg，0.010mmol)。用氮气吹扫反应混合物，在100℃下加热过夜，冷却，用乙酸乙酯(25mL)稀释，用水(2×5mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(5ml)中，过滤且通过反相HPLC加以纯化。合并含有所要产物的洗脱份并且冻干，获得+
标题中间物的三(三氟乙酸)盐(100.3mg)。(m/z)：C43H55N9O6的[M+H] 计算值为794.46，实验值为794.6。
[0644] (b)[(S)-1-((S)-2-{4-[4-(5-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-6-甲基-吡啶-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0645] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(1mL，4.0mmol)处理先前步骤的产物1小时，并且通过旋转蒸发浓缩反应混合物，获得标题中间物的四盐酸盐(75mg，61％产率)。(m/z)：C38H47N9O4+的[M+H] 计算值为694.38，实验值为694.6。
[0646] 制备60：[(S)-1-((S)-2-{4-[6-(4-氨基-2-三 氟甲氧 基-苯基)-吡 啶基-3-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0647]
[0648] (a)2-溴-1-(6-溴-吡啶基-3-基)-乙酮
[0649] 经5分钟将溴(4g，25mmol)于DCM(10mL)中的溶液逐滴添加到1-(6-溴-吡啶基-3-基)-乙酮(5g，25mmol)和HBr(48％，0.2mL)的冷却(0℃)溶液中。40分钟后，去除冷却浴并且在室温下继续搅拌66小时。过滤所形成的固体，用DCM洗涤且在室温下干1
燥，获得黄色固体状不纯标题中间物(8.1g)。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.96(m，1H)，
8.28-8.25(m，1H)，7.82-7.79(m，1H)，4.7(s，2H)。
燥，获得黄色固体状不纯标题中间物(8.1g)。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.96(m，1H)，
8.28-8.25(m，1H)，7.82-7.79(m，1H)，4.7(s，2H)。
[0650] (b)((S)-1-{(S)-2-[4-(6-溴-吡啶基-3-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0651] 按照制备29-A的一般程序，用步骤a的产物(7.6g)替代2-溴-1-(4-溴-3-甲1
基-苯基)-乙酮，制得黄色泡沫状标题中间物(3.5g)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：
8.73-8.68(m，1H)，7.93-7.9(m，1H)，7.45-7.43(m，1H)，7.25(s，1H)，5.52-5.49(m，1H)，
5.24-5.21(m，1H)，4.34-4.29(m，1H)，3.87-3.81(m，1H)，3.69(s，1H)，2.36-2.31(m，1H)，
2.29-2.20(m，1H)，2.19-2.07(m，1H)，1.98-1.92(m，1H)，1.08-1.01(m，1H)，0.92-0.81(m，
6H)。
基-苯基)-乙酮，制得黄色泡沫状标题中间物(3.5g)。H NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)：
8.73-8.68(m，1H)，7.93-7.9(m，1H)，7.45-7.43(m，1H)，7.25(s，1H)，5.52-5.49(m，1H)，
5.24-5.21(m，1H)，4.34-4.29(m，1H)，3.87-3.81(m，1H)，3.69(s，1H)，2.36-2.31(m，1H)，
2.29-2.20(m，1H)，2.19-2.07(m，1H)，1.98-1.92(m，1H)，1.08-1.01(m，1H)，0.92-0.81(m，
6H)。
[0652] (c)[4-(5-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-吡啶-2-基)-3-三氟甲氧基-苯基]-氨基甲酸叔丁酯
[0653] 使先前步骤的产物(469mg，1.04mmol)、[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼戊烷-2-基)-3-三氟甲氧基-苯基]-氨基甲酸叔丁酯(420mg，1.04mmol)、Na2CO3(331mg，3.12mmol)和Pd(dPPf)Cl2(50mg)于二噁烷(9mL)和水(3mL)中的混合物回流5小时。过滤后，在真空下浓缩滤液，获得粗产物(700mg)。
[0654] (d)[(S)-1-((S)-2-{4-[6-(4- 氨 基 -2- 三 氟 甲 氧 基 - 苯 基 )- 吡 啶基-3-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0655] 将先前步骤的产物(700mg，1.08mmol)溶解于HCl/二噁烷(10mL)中且在室温下搅拌混合物3小时。在真空下浓缩混合物，获得残余物，通过制备型HPLC加以纯化，1
获 得标题中间物(140mg，产率24％)。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：9.18(s，1H)，
8.69-8.67(m，1H)，8.2-8.15(m，2H)，7.68(d，J ＝ 8.4Hz，1H)，7.02-6.98(m，2H)，5.26(m，
1H)，4.23-4.21(m，1H)，4.09-4.05(m，1H)，3.9-3.88(m，1H)，3.65(s，3H)，2.64-2.5(m，1H)，
2.38-2.0(m，4H)，0.92(d，J＝6.8Hz，3H)，0.88(d，J＝6.8Hz，3H)。
获 得标题中间物(140mg，产率24％)。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：9.18(s，1H)，
8.69-8.67(m，1H)，8.2-8.15(m，2H)，7.68(d，J ＝ 8.4Hz，1H)，7.02-6.98(m，2H)，5.26(m，
1H)，4.23-4.21(m，1H)，4.09-4.05(m，1H)，3.9-3.88(m，1H)，3.65(s，3H)，2.64-2.5(m，1H)，
2.38-2.0(m，4H)，0.92(d，J＝6.8Hz，3H)，0.88(d，J＝6.8Hz，3H)。
[0656] 制备61：[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[6-(4-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2-三氟甲氧基-苯基)-吡啶基-3-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0657]
[0658] 向 [(S)-1-((S)-2-{5-[6-(4- 氨 基 -2- 三 氟 甲 氧 基 - 苯 基 )- 吡 啶基-3-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基1-氨基甲酸甲酯(140mg，0.26mmol，制备60)于DCM(2.56mL)和DMA(0.25mL)中的混合物中依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.14mL，0.77mmol)和2-氟吡啶-5-羰基氯(40.9mg，0.26mmol)。在室温下搅拌反应混合物1小时并且浓缩。
[0659] 将所产生的残余物溶解于DMSO(0.5mL)中，并且添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(128mg，0.64mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.64mmol)，并且在120℃下将所产生的混合物加热过夜。冷却到室温，并且分配在EtOAc(10mL)与水(2mL)之间。用水(2mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油状物，在室温下用含4M HCl的1，4-二噁烷(1mL)处理1小时。浓缩反应混合物，溶解于1∶1乙酸∶水(7mL)中，过滤并且通过反相制备型HPLC加以纯化，获得淡黄色固体状标题中间物三(三氟乙酸)盐(57mg，+
20％产率)。(m/z)：C37H42F3N9O5的[M+H] 计算值为750.33，实验值为750.8。
20％产率)。(m/z)：C37H42F3N9O5的[M+H] 计算值为750.33，实验值为750.8。
[0660] 制备62：(R)-4-[5-(4-溴-2-氯-5-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0661]
[0662] (a)4-溴-2-氯-5-三氟甲氧基-苯胺
[0663] 向4-溴-3-三氟甲氧基-苯胺(2.0g，7.8mmol)于ACN(60mL)中的混合物中缓慢添加 N-氯丁二酰亚胺(1.0g，7.8mmol)于ACN(40mL)中的溶液。将反应混合物加热到60℃过夜，并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥且通过急骤色谱法(40g管柱，
100％己烷至10％EtOAc:己烷)加以纯化，产生淡橙色油状所要产物(1.4g，64％产率)。
100％己烷至10％EtOAc:己烷)加以纯化，产生淡橙色油状所要产物(1.4g，64％产率)。
[0664] (b)N-(4-溴-2-氯-5-三氟甲氧基-苯基)-6-氟-烟酰胺
[0665] 向先前步骤的产物(1.2g，4.1mmol)于DCM(5mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(0.66g，4.1mmol)于DCM(3mL)中的溶液并且添加20滴DMA。浓缩反应混合+物，形成淡黄色固体(2g)。(m/z)：C13H6BrClF4N2O2的[M+H] 计算值为412.92、414.92，实验值为413.415。
[0666] (c)(R)-4-[5-(4-溴-2-氯-5-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基1-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0667] 向先前步骤的产物(999mg，2.42mmol)于N，N-二异丙基乙胺(0.84mL，4.83mmol)和DMSO(0.86mL，12.08mmol)的混合物中的反应混合物中添加(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(726mg，3.62mmol)，并且在120℃下将反应混合物加热过夜并且用乙酸乙酯/水萃取。使有机层经硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。将深色油状物溶解于少量DCM中并且通过硅胶色谱法(24g管柱，0至40％乙酸乙酯:己烷)加以纯化，产生白色固体状标题中间物+(916mg，64％产率)。(m/z)：C23H25BrClF3N4O4的[M+H] 计算值为593.07、595.07，实验值为
595.4。
595.4。
[0668] 制备63：((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氯-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0669]
[0670] 使制备62的产物(534mg，0.9mmol)按照制备50的程序进行反应，获得白色粉末状标题化合物三(三氟乙酸)盐(186mg，约18％产率)。(m/z)：C38H42ClF3N8O5的[M+H]+计算值为783.29，实验值为784.3
[0671] 实例1：{(S)-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0672]
[0673] 向4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酸(0.015g，0.055mmol)于二氯甲烷(2mL，30mmol)中的溶液中添加N，N-二甲基甲酰胺(0.004mL，0.055mmol)和乙二酰氯(0.014mL，0.164mmol)。搅拌反应混合物25分钟，接着依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.048mL，0.273mmol)和((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪
唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(0.025g，0.055mmol)。搅拌反应混合物90分钟，通过旋转蒸发进行干燥，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(7.9mg)。(m/z)：C41H47N7O5的+ 1
[M+H] 计算值为718.36；实验值为718.2。 H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)10.07(s，
1H)，8.09(s，1H)，7.90(dd，J＝8.9，2.1Hz，4H)，7.83(dd，J＝18.2，8.5Hz，4H)，7.74(d，J＝8.8Hz，2H)，7.32(d，J＝8.7Hz，1H)，7.04(d，J＝9.1Hz，2H)，5.11(t，J＝7.1Hz，1H)，
4.10(t，J ＝ 7.9Hz，1H)，3.96-3.55(m，9H)，3.53(s，3H)，3.42-3.22(m，4H)，2.45-2.28(m，
1H)，2.20-1.92(m，5H)，0.82(d，J＝6.7Hz，3H)，0.80-0.69(m，6H)。
唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(0.025g，0.055mmol)。搅拌反应混合物90分钟，通过旋转蒸发进行干燥，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(7.9mg)。(m/z)：C41H47N7O5的+ 1
[M+H] 计算值为718.36；实验值为718.2。 H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)10.07(s，
1H)，8.09(s，1H)，7.90(dd，J＝8.9，2.1Hz，4H)，7.83(dd，J＝18.2，8.5Hz，4H)，7.74(d，J＝8.8Hz，2H)，7.32(d，J＝8.7Hz，1H)，7.04(d，J＝9.1Hz，2H)，5.11(t，J＝7.1Hz，1H)，
4.10(t，J ＝ 7.9Hz，1H)，3.96-3.55(m，9H)，3.53(s，3H)，3.42-3.22(m，4H)，2.45-2.28(m，
1H)，2.20-1.92(m，5H)，0.82(d，J＝6.7Hz，3H)，0.80-0.69(m，6H)。
[0674] 实 例 2：((S)-1-{(S)-2-[4-(4 ′ -{4-[4-(2，2- 二 甲 基 - 丙 酰 基 )- 哌嗪-1-基]-苯甲酰基氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0675]
[0676] 搅拌4-[4-(2，2-二甲基-丙酰基)-哌嗪-1-基]-苯甲酸(10.3mg，0.036mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(8.17mg，0.043mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(6.77mg，0.050mmol)于二氯甲烷(0.3mL，4mmol)中的反应混合物以使其溶解，并且再搅拌20分钟。接着在室温下添加((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(8.2mg，
0.018mmol)和N，N-二异丙基乙胺(7.43μL，0.0426mmol)。搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并 且通过制备型HPLC加以纯化，获得呈三氟乙酸盐形式+
的标题化合物(5.6mg)。(m/z)：C42H51N7O5的[M+H] 计算值为734.40，实验值为734.4。
0.018mmol)和N，N-二异丙基乙胺(7.43μL，0.0426mmol)。搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并 且通过制备型HPLC加以纯化，获得呈三氟乙酸盐形式+
的标题化合物(5.6mg)。(m/z)：C42H51N7O5的[M+H] 计算值为734.40，实验值为734.4。
[0677] 实例3：4-[4-(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-联苯-4-基胺甲酰基)-苯基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0678]
[0679] 向4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯甲酸(24.7mg，0.081mmol)于二氯甲烷(0.89mL，14mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(0.4mL，6mmol)中的溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.071mL，0.407mmol)和氯甲酸甲酯(0.006mL，0.081mmol)。在室温下搅拌反应混合物15分钟，接着添加((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(25.0mg，0.054mmol)且使得混合物搅拌过夜。浓缩反应混合物，接着溶解于DCM(5mL)中，并且用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤(2mL)。浓缩有机层。浓缩约15mg粗物质，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，并且通过制备型HPLC+
加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(7.3mg)。(m/z)：C42H51N7O6的[M+H] 计算值为
750.39，实验值为750.4。
加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(7.3mg)。(m/z)：C42H51N7O6的[M+H] 计算值为
750.39，实验值为750.4。
[0680] 实例4：{(S)-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-甲烷磺酰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0681]
[0682] 将 亚 甲 基 磺 酰 氯 (1.19mg，0.015mmol) 添 加 到 [(S)-2- 甲基-1-((S)-2-{4-[4′-(4-哌嗪-1-基- 苯甲酰基 氨基)-联苯-4-基]-1H-咪
唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(10.0mg，0.015mmol)于二氯甲烷(0.75mL，12mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(0.75mL，8.1mmol)和三乙胺(25μL，0.18mmol)中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物15分钟，通过旋转 蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，接着通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(12.3mg)。
+
(m/z)：C38H45N7O6S的[M+H] 计算值为728.32，实验值为728.2。
唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯(10.0mg，0.015mmol)于二氯甲烷(0.75mL，12mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(0.75mL，8.1mmol)和三乙胺(25μL，0.18mmol)中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物15分钟，通过旋转 蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，接着通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(12.3mg)。
+
(m/z)：C38H45N7O6S的[M+H] 计算值为728.32，实验值为728.2。
[0683] 实例5：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0684]
[0685] (a){(S)-2-甲基-1-[(S)-2-(4-{4′-[(6-哌嗪-1-基-吡啶-3-羰基)-氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0686] 将乙二酰氯(44.0μL，0.520mmol)添加到4-(5-羧基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(70.3mg，0.229mmol)于二氯甲烷(6.67mL，104mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(2.01μL，0.026mmol)中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物20分钟，接着依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.181mL，1.04mmol)和((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(100.0mg，
0.217mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时，接着通过旋转蒸发进行干燥。将粗物质溶解于二氯甲烷(1mL)中，接着用饱和碳酸氢钠水溶液(1mL)洗涤。浓缩有机层，溶解于含4.0M氯化氢的1，4-二噁烷(6.7mL，27mmol)中并且在室温下搅拌1小时直到完全脱除保护基。
浓缩反应混合物且直接用于下一步骤。
0.217mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时，接着通过旋转蒸发进行干燥。将粗物质溶解于二氯甲烷(1mL)中，接着用饱和碳酸氢钠水溶液(1mL)洗涤。浓缩有机层，溶解于含4.0M氯化氢的1，4-二噁烷(6.7mL，27mmol)中并且在室温下搅拌1小时直到完全脱除保护基。
浓缩反应混合物且直接用于下一步骤。
[0687] (b)((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0688] 将环丙烷甲酸(26.86mg，0.312mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(59.81mg，0.312mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(42.46mg，0.312mmol)溶解于N，N-二甲基乙酰胺(3.868mL，41.60mmol)中并且搅拌5分钟。接着将一半得自先前步骤的物质添加到反应混合物中，接着添加N，N-二异丙基乙胺(0.269g，2.080mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过+制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(39.9mg)。(m/z)：C40H46N8O5的[M+H]
1
计算值为719.36，实验值为719.2。H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)10.14 (s，1H)，8.77(d，J＝2.5Hz，1H)，8.12(dd，J＝9.7，3.1Hz，2H)，7.95-7.78(m，6H)，7.75(d，J＝8.8Hz，2H)，
7.32(d，J ＝ 8.4Hz，1H)，6.95(d，J ＝ 9.3Hz，1H)，5.15-5.07(m，1H)，4.15-4.05(m，1H)，
3.90-3.55(m，11H)，3.53(s，3H)，2.28-2.40(m，1H)，2.23-1.87(m，5H)，0.75-0.85(m，3H)，
0.79-0.63(m，6H)。
1
计算值为719.36，实验值为719.2。H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ(ppm)10.14 (s，1H)，8.77(d，J＝2.5Hz，1H)，8.12(dd，J＝9.7，3.1Hz，2H)，7.95-7.78(m，6H)，7.75(d，J＝8.8Hz，2H)，
7.32(d，J ＝ 8.4Hz，1H)，6.95(d，J ＝ 9.3Hz，1H)，5.15-5.07(m，1H)，4.15-4.05(m，1H)，
3.90-3.55(m，11H)，3.53(s，3H)，2.28-2.40(m，1H)，2.23-1.87(m，5H)，0.75-0.85(m，3H)，
0.79-0.63(m，6H)。
[0689] 实例6：4-{4-[(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-联苯-4-羰基)-氨基]-苯基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0690]
[0691] 将4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-3H-咪唑-4-基}-联苯-4-甲酸(15.0mg，0.031mmol)和六氟磷酸N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲盐(11.6mg，0.031mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(0.5mL，6mmol)中的混合物添加到4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(28.2mg，
0.102mmol)中，接着添加N，N-二异丙基乙胺(10.6μL，0.061mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，过滤，并且通过制备型HPLC加以纯化，+
获得标题化合物的三氟乙酸盐(26.2mg)。(m/z)：C42H51N7O6的[M+H] 计算值为750.39，实验值为750.4。
0.102mmol)中，接着添加N，N-二异丙基乙胺(10.6μL，0.061mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，过滤，并且通过制备型HPLC加以纯化，+
获得标题化合物的三氟乙酸盐(26.2mg)。(m/z)：C42H51N7O6的[M+H] 计算值为750.39，实验值为750.4。
[0692] 实例7：{(S)-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯基胺甲酰基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0693]
[0694] (a)[(S)-2-甲基-1-((S)-2-{4-[4′-(4-哌嗪-1-基-苯基胺甲酰基)-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0695] 向[4-{4-[(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-联苯-4-羰基)-氨基]-苯基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(42.4mg，0.0565mmol)于二氯甲烷 (0.67mL，10mmol)中的溶液中添加三氟乙酸(0.3mL，0.004mmol)。在室温下搅拌反应混合物1小时，浓缩，溶解于甲醇(1mL)中，通过StratospheresTM PL-CO3树脂，并且浓缩滤液，获得标题化合物。(m/z)：C37H43N7O4的[M+H]+计算值为650.34，实验值为650.8。
[0696] (b){(S)-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯基胺甲酰基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0697] 将环丙烷甲酸(7.30mg，0.085mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(21.6mg，0.113mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(15.4mg，0.113mmol)与二氯甲烷(0.8mL，10mmol)组合，搅拌以便溶解，接着再搅拌20分钟。在室温下向反应混合物中添加先前步骤的产物于1∶1二氯甲烷：N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，3mmol)中的溶液。在室温下搅拌所产生的反应混合物过夜，在真空下浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，过滤，并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(8.2mg)。(m/z)：
+
C41H47N7O5的[M+H] 计算值为718.36，实验值为718.4。
+
C41H47N7O5的[M+H] 计算值为718.36，实验值为718.4。
[0698] 实例8：{(S)-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-2′-氟-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0699]
[0700] 向4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-苯甲酸(13mg，0.047mmol)于二氯甲烷(1.0mL，16mmol)和1滴N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中添加乙二酰氯(0.0119mL，
0.141mmol)。搅拌反应混合物25分钟，接着依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.027mL，
0.16mmol)和((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯
烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(15mg，0.031mmol)。搅拌反应混合物过夜，在真空下浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物+
的三氟乙酸盐(1.9mg)。(m/z)：C41H46FN7O5的[M+H] 计算值为735.85；实验值为736.4。
0.141mmol)。搅拌反应混合物25分钟，接着依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.027mL，
0.16mmol)和((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯
烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(15mg，0.031mmol)。搅拌反应混合物过夜，在真空下浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物+
的三氟乙酸盐(1.9mg)。(m/z)：C41H46FN7O5的[M+H] 计算值为735.85；实验值为736.4。
[0701] 实例9：4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-N-(4′-{2-[(S)-1-((R)-2-二乙基氨基-2-苯基-乙酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-联苯-4-基)-苯甲酰胺
[0702]
[0703] 搅拌(R)-二乙基氨基-苯基-乙酸(6.654mg，0.032mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(6.154mg，0.032mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(4.370mg，0.032mmol)于N，N-二甲基乙酰胺(0.498mL，5.350mmol)中的组合以使其溶解，接着再搅拌20分钟。在室温下搅拌过夜后，向反应混合物中添加4-(4-环丙烷羰基-哌嗪-1-基)-N-[4′-((S)-2-吡咯烷-2-基-1H-咪唑-4-基)-联苯-4-基]-苯甲酰胺(15mg，0.027mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.023mL，0.134mmol)。接着浓缩反应混合物，并且溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的+
三氟乙酸盐，从而获得标题化合物(6.4mg)。(m/z)：C46H51N7O3的[M+H] 计算值为750.41；
实验值为750.4。
三氟乙酸盐，从而获得标题化合物(6.4mg)。(m/z)：C46H51N7O3的[M+H] 计算值为750.41；
实验值为750.4。
[0704] 实例 10：((S)-2-甲 基-1-{(S)-2-[4-(4 ′-{[6-(4-甲 基 胺 甲酰 基- 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0705]
[0706] 将一半得自实例5步骤(a)的粗物质溶解于N，N-二甲基甲酰胺(3.22mL，41.6mmol)和N，N-二异丙基乙胺(36.2μL，0.208mmol)中，接着添加异氰酸甲酯
(12.36μL，0.208mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于
1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(35.7mg)。(m/z)：C38H45N9O5的[M+H]+计算值为708.35，实验值为708.2。1H NMR(d6-DMSO，
400MHz)δ(ppm)10.13(s，1H)，8.75(d，J ＝ 2.6Hz，1H)，8.11(dd，J ＝ 8.5，3.0Hz，2H)，
7.91-7.79(m，6H)，7.75(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.6Hz，1H)，6.95(d，J＝9.1Hz，
1H)，6.52(br.s，1H)，5.15-5.03(m，1H)，4.10(t，J ＝ 7.9Hz，1H)，3.90-3.75(m，3H)，
3.66-3.55(m，4H)，3.56-3.50(m，3H)，3.42-3.34(m，3H)，2.58(s，3H)，1.90-2.25(m，1H)，
2.18-1.89(m，4H)，0.81(d，J＝6.8Hz，3H)，0.77(d，J＝6.7Hz，3H)。
(12.36μL，0.208mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于
1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(35.7mg)。(m/z)：C38H45N9O5的[M+H]+计算值为708.35，实验值为708.2。1H NMR(d6-DMSO，
400MHz)δ(ppm)10.13(s，1H)，8.75(d，J ＝ 2.6Hz，1H)，8.11(dd，J ＝ 8.5，3.0Hz，2H)，
7.91-7.79(m，6H)，7.75(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.6Hz，1H)，6.95(d，J＝9.1Hz，
1H)，6.52(br.s，1H)，5.15-5.03(m，1H)，4.10(t，J ＝ 7.9Hz，1H)，3.90-3.75(m，3H)，
3.66-3.55(m，4H)，3.56-3.50(m，3H)，3.42-3.34(m，3H)，2.58(s，3H)，1.90-2.25(m，1H)，
2.18-1.89(m，4H)，0.81(d，J＝6.8Hz，3H)，0.77(d，J＝6.7Hz，3H)。
[0707] 实例11：{(S)-1-[(S)-2-(5-氯-4-{4′-[4-(4-甲基胺甲酰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0708]
[0709] 将{(S)-2-甲基-1-[(S)-2-(4-{4′-[4-(4-甲基胺甲酰基-哌嗪-1-基)-苯甲酰基氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-丙基}-氨基甲酸甲酯三TM
氟乙酸盐(22.0mg，0.0311mmol)溶解于甲醇(5mL)中，并且用Stratospheres PL-CO3树脂处理，并且搅拌15分钟。过滤反应混合物并且浓缩滤液。将此粗物质溶解于N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL，19mmol)中，接着添加N-氯丁二酰亚胺(6.23mg，0.0467mmol)。在50℃下加热反应混合物并且在50℃下搅拌过夜，通过旋转蒸发进行浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(4.5mg)。(m/+
z)：C39H45ClN8O5的[M+H] 计算值为741.32，实验值为741.5。
氟乙酸盐(22.0mg，0.0311mmol)溶解于甲醇(5mL)中，并且用Stratospheres PL-CO3树脂处理，并且搅拌15分钟。过滤反应混合物并且浓缩滤液。将此粗物质溶解于N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL，19mmol)中，接着添加N-氯丁二酰亚胺(6.23mg，0.0467mmol)。在50℃下加热反应混合物并且在50℃下搅拌过夜，通过旋转蒸发进行浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的三氟乙酸盐(4.5mg)。(m/+
z)：C39H45ClN8O5的[M+H] 计算值为741.32，实验值为741.5。
[0710] 实例12：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((R)-4-环丙烷羰基-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0711]
[0712] (a)((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基
甲酸甲酯
甲酸甲酯
[0713] 在120℃下将{(S)-1-[(S)-2-(5-{4′-[(6-氟-吡啶-3-羰基)-氨基]-联苯-4-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯盐酸盐
(728.1mg，1.17mmol)[反应物A]与(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.352g，1.76mmol)[反应物B]于二甲亚砜(3.7mL)和N，N-二异丙基乙胺(1.23mL，7.03mmol)中的混合物加热过夜。将反应混合物冷却到室温并且添加水(5.0mL)。将所产生的混合物离心并且过滤。
所述固体与使反应物A(237.8 mg，0.383mmol)与反应物B(115.0mg，0.574mmol)在相同条件下反应的先前反应的产物合并。将合并的固体溶解于1∶1乙酸∶水(20mL)中，过滤并且分成3个相等部分，各部分独立地通过反相制备型HPLC进行纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体(总共805.5mg)。
(728.1mg，1.17mmol)[反应物A]与(R)-3-甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.352g，1.76mmol)[反应物B]于二甲亚砜(3.7mL)和N，N-二异丙基乙胺(1.23mL，7.03mmol)中的混合物加热过夜。将反应混合物冷却到室温并且添加水(5.0mL)。将所产生的混合物离心并且过滤。
所述固体与使反应物A(237.8 mg，0.383mmol)与反应物B(115.0mg，0.574mmol)在相同条件下反应的先前反应的产物合并。将合并的固体溶解于1∶1乙酸∶水(20mL)中，过滤并且分成3个相等部分，各部分独立地通过反相制备型HPLC进行纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体(总共805.5mg)。
[0714] 向先前步骤的产物中添加含4.0M氯化氢的1，4-二噁烷(6.0mL，24mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物30分钟，接着浓缩。将残余物与乙酸乙酯(3×5.0mL)共蒸发，并且在真空下干燥，获得淡黄色固体状标题中间物三盐酸盐(655.9mg)。
[0715] (b)((S)-1-{(S)-2-[4-(4 ′ -{[6-((R)-4- 环 丙 烷 羰 基 -2- 甲 基 - 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0716] 在室温下将得自先前步骤的物质(350mg)溶解于N，N-二甲基乙酰胺(2.7mL，29mmol)中，并且依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.52mL，3.0mmol)和环丙烷羰基氯(0.041mL，0.45mmol)。搅拌反应混合物10分钟，并且再添加酸性氯化物以消耗所有起始物质。浓缩反应混合物，并且将残余物溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体。
[0717] 在室温下将白色固体溶解于乙醇(15.0mL)中并且添加含4.0M氯化氢的1，4-二噁烷(6.0mL)。搅拌反应混合物10分钟并且浓缩。将残余物溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相制备型HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固+体状标题化合物三氟乙酸盐(194.6mg)。(m/z)：C41H48N8O5的[M+H] 计算值为733.38，实
1
验值为733.5。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.65(s，1H)，8.08-8.10(dd，1H，J＝10，
4)，7.67-7.77(m，7H)，7.60-7.62(m，2H)，6.86-6.88(d，1H，J ＝ 8)，5.13-5.17(t，1H，J ＝
15.2)，4.52-4.56和4.64-4.68(m，总共1H)，3.99-4.37(m，5H)，3.74-3.80(m，1H)，3.56(s，
3H)，2.96-3.00和3.13-3.23和3.38-3.60(m，总共3H)，2.45-2.52(m，1H)，1.91-2.20(m，
4H)，1.09-1.18(m，4H)，0.76-0.90(m，10H)。
1
验值为733.5。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.65(s，1H)，8.08-8.10(dd，1H，J＝10，
4)，7.67-7.77(m，7H)，7.60-7.62(m，2H)，6.86-6.88(d，1H，J ＝ 8)，5.13-5.17(t，1H，J ＝
15.2)，4.52-4.56和4.64-4.68(m，总共1H)，3.99-4.37(m，5H)，3.74-3.80(m，1H)，3.56(s，
3H)，2.96-3.00和3.13-3.23和3.38-3.60(m，总共3H)，2.45-2.52(m，1H)，1.91-2.20(m，
4H)，1.09-1.18(m，4H)，0.76-0.90(m，10H)。
[0718] 实例13：[(S)-1-((S)-2-{4-[4′-({6-[(S)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷-羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0719]
[0720] 在 室 温 下 向 ((S)-2-甲 基-1-{(S)-2-[4-(4 ′ -{[6-((S)-2-甲 基 - 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基)-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基)-丙基)-氨基甲酸甲酯三氟乙酸盐(320.0mg，0.318mmol，制备16)和(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸(39.9mg，0.350mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(30.0mL，387.4mmol)中的混合物中依序添加六氟磷酸N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲盐(0.133g，
0.350mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.277mL，1.589mmol)。
0.350mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.277mL，1.589mmol)。
[0721] 用水(40.0mL)稀释反应混合物且用乙酸乙酯(2×20.0mL)萃取。用水(20.0mL)和盐水(20.0mL)洗涤合并的有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡黄色油状物。将残余物溶解于1∶1乙酸∶水(8mL)中，过滤并且通过反相制备型HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥。通过反相制备型HPLC再纯化物质。合并所要洗脱份并且冷冻+干燥，获得白色固体状标题化合物三氟乙酸盐(205.1mg)。(m/z)：C43H52N8O5的[M+H] 计算
1
值为761.42，实验值为761.7。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.65(s，1H)，8.12-8.15(m，
1H)，7.67-7.77(m，7H)，7.6-7.62(m，2H)，6.94-6.96(d，1H，J ＝ 8)，5.13-5.17(t，1H，J ＝ 16)，4.56-4.65(m，1H)，4.33-4.36(m，1H)，3.99-4.25(m，4H)，3.75-3.81(m，1H)，
3.56(s，3H)，3.4-3.53(m，1H)，3.24-3.3(m，1H)，2.95-3.11(m，1H)，2.45-2.52(m，1H)，
1.93-2.21(m，4H)，1.65-1.71(m，1H)，1.16-1.24(m，4H)，1.00-1.09(m，4H)，0.79-0.93(m，
8H)，0.68-0.71(m，1H)。
1
值为761.42，实验值为761.7。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.65(s，1H)，8.12-8.15(m，
1H)，7.67-7.77(m，7H)，7.6-7.62(m，2H)，6.94-6.96(d，1H，J ＝ 8)，5.13-5.17(t，1H，J ＝ 16)，4.56-4.65(m，1H)，4.33-4.36(m，1H)，3.99-4.25(m，4H)，3.75-3.81(m，1H)，
3.56(s，3H)，3.4-3.53(m，1H)，3.24-3.3(m，1H)，2.95-3.11(m，1H)，2.45-2.52(m，1H)，
1.93-2.21(m，4H)，1.65-1.71(m，1H)，1.16-1.24(m，4H)，1.00-1.09(m，4H)，0.79-0.93(m，
8H)，0.68-0.71(m，1H)。
[0722] 实例14：[(S)-1-((S)-2-{4-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷-羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0723]
[0724] 在 室 温 下 向 ((S)-2-甲 基-1-{(S)-2-[4-(4 ′ -{[6-((R)-2-甲 基 - 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯盐酸盐(60.0mg，0.0775mmo1)和(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸(10.6mg，0.093mmo1)于N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL，19mmo1)中的混合物中添加六氟磷酸N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲盐(35.4mg，0.093mmo1)和N，N-二异丙基乙胺(54.0μL，0.310mmo1)。在室温下搅拌反应混合物过夜，接着浓缩。将残余物再溶解于1∶1乙酸∶水(6mL)中，过滤并且通过反相制备型HPLC加以纯化。合+
并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体(34.1mg)。(m/z)：C43H52N8O5的[M+H] 计算值
1
为761.42，实验值为761.7。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.76(s，1H)，8.18-8.20(m，
1H)，7.76-7.86(m，7H)，7.68-7.7(m，2H)，6.95-6.99(m，1H)，5.22-5.26(t，1H，J ＝ 16)，
4.59-4.73(m，1H)，4.03-4.38(m，5H)，3.82-3.89(m，1H)，3.69-3.74(m，1H)，3.65(s，
3H)，3.12-3.2和 3.3-3.5(m，总 共 2H)，2.53-2.6(m，1H)，2.0-2.3(m，4H)，1.75-1.78和
1.82-1.85(m，总共1H)，1.25(s，3H)，1.12(s，3H)，1.07-1.1和1.14-1.17(m，总共1H)，
0.96(s，3H)，0.88-0.96和1.21-1.27(m，总共6H)，0.76-0.8(m，1H)。
并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得白色固体(34.1mg)。(m/z)：C43H52N8O5的[M+H] 计算值
1
为761.42，实验值为761.7。H NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：8.76(s，1H)，8.18-8.20(m，
1H)，7.76-7.86(m，7H)，7.68-7.7(m，2H)，6.95-6.99(m，1H)，5.22-5.26(t，1H，J ＝ 16)，
4.59-4.73(m，1H)，4.03-4.38(m，5H)，3.82-3.89(m，1H)，3.69-3.74(m，1H)，3.65(s，
3H)，3.12-3.2和 3.3-3.5(m，总 共 2H)，2.53-2.6(m，1H)，2.0-2.3(m，4H)，1.75-1.78和
1.82-1.85(m，总共1H)，1.25(s，3H)，1.12(s，3H)，1.07-1.1和1.14-1.17(m，总共1H)，
0.96(s，3H)，0.88-0.96和1.21-1.27(m，总共6H)，0.76-0.8(m，1H)。
[0725] 实例15：[(S)-1-((S)-2-{5-[4′-({6-[(R)-4-((S)-1-乙酰基-2-甲基-吡咯烷-2-羰基)2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2′-甲基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0726]
[0727] 向[((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[5-(2 ′-甲基-4 ′-{[6-((R)-2-甲基- 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙
基)-氨基甲酸甲酯三盐酸盐(15mg，0.019mmol；制备18)和N，N-二异丙基乙胺(33.1μL，
0.190mmol)溶解于DMA(0.6mL，7mmol)中的溶液中添加(S)-1-乙酰基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(3.2mg，0.019mmol，制备19)和HATU(11mg，0.028mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(4mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题+
化合物的二(三氟乙酸)盐(9.1mg)。(m/z)：C46H57N9O6的[M+H] 计算值为832.44，实验值为832.4。
基)-氨基甲酸甲酯三盐酸盐(15mg，0.019mmol；制备18)和N，N-二异丙基乙胺(33.1μL，
0.190mmol)溶解于DMA(0.6mL，7mmol)中的溶液中添加(S)-1-乙酰基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(3.2mg，0.019mmol，制备19)和HATU(11mg，0.028mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(4mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题+
化合物的二(三氟乙酸)盐(9.1mg)。(m/z)：C46H57N9O6的[M+H] 计算值为832.44，实验值为832.4。
[0728] 实例16至实例20
[0729] 按照实例15的程序，使制备19的中间物(20mg，0.02mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0730]
[0731]
[0732] 实例21：[(S)-1-((S)-2-{4-[2′-乙氧基-4′-({6-[(R)-4-((S)-1-{(S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基}-2-甲基-吡咯烷-2-羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙
基]-氨基甲酸甲酯
基]-氨基甲酸甲酯
[0733]
[0734] 将(S)-1-{(S)-2-[4-(2′-乙氧基-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯 -4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(30mg，0.03mmol；制备22)溶解于DMA(1.0mL，
11mmo1)中，并且依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.015mL，0.086mmol)和含有含
0.5M(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸的
DMA(68.5μL，0.034mmol)和HATU(13.0mg，0.034mmol)的溶液。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化+
合物的二(三氟乙酸)盐(13.5mg)。(m/z)：C52H68N10O9的[M+H] 计算值为977.52，实验值为977.6。
11mmo1)中，并且依序添加N，N-二异丙基乙胺(0.015mL，0.086mmol)和含有含
0.5M(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸的
DMA(68.5μL，0.034mmol)和HATU(13.0mg，0.034mmol)的溶液。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化+
合物的二(三氟乙酸)盐(13.5mg)。(m/z)：C52H68N10O9的[M+H] 计算值为977.52，实验值为977.6。
[0735] 实例22至实例24
[0736] 按照实例21的程序，使制备22的中间物(30mg，0.03mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0737]
[0738]
[0739] 实例25：[(S)-1-((S)-2-{5-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0740]
[0741] 向((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-(R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯3[C2HF3O2](15mg，0.014mmol；制备24)和N，N-二异丙基乙胺(24μL，
0.14mmol)溶解于DMA(0.5mL，5mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(28μL，0.014mmol)和HATU(7.8mg，0.021mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合+
物的二(三氟乙酸)盐(11.4mg)。(m/z)：C44H51F3N8O6的[M+H] 计算值为845.39，实验值为
845.4。
0.14mmol)溶解于DMA(0.5mL，5mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(28μL，0.014mmol)和HATU(7.8mg，0.021mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合+
物的二(三氟乙酸)盐(11.4mg)。(m/z)：C44H51F3N8O6的[M+H] 计算值为845.39，实验值为
845.4。
[0742] 实例26至实例28
[0743] 按照实例25的程序，使制备24的中间物(15mg，0.014mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0744]
[0745]
[0746] 实例29：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-4-甲基胺甲酰基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0747]
[0748] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(11.4mg，0.011mmol；制备28)和N，N-二异丙基乙胺(18μL，0.11mmol)溶解于DM(0.4mL，4mmol)中的溶液中添加含1.0M异氰酸甲酯的甲苯(10μL，0.01mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐(7.1mg)。(m/z)：C41H48F3N9O6的[M+H]+计算值为820.37，实验值为820.5。
[0749] 实例30至实例33
[0750] 按照实例29的程序，使制备28的中间物(11.4mg，0.011mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0751]
[0752]
[0753]
[0754] 实例34：[(S)-1-((S)-2-{5-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2′-三氟甲基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0755]
[0756] 向((S)-2-甲基-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰
基}-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(17mg，0.016mmol；制备25)和N，N-二异丙基乙胺(27.5μL，0.158mmol)溶解于DMA(0.5mL，6mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，
2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(32μL，0.016mmol)和HATU(9mg，0.024mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获+
得标题化合物的二(三氟乙酸)盐(8.3mg)。(m/z)：C44H51F3N8O5的[M+H] 计算值为829.39，实验值为829.4。
基}-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(17mg，0.016mmol；制备25)和N，N-二异丙基乙胺(27.5μL，0.158mmol)溶解于DMA(0.5mL，6mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，
2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(32μL，0.016mmol)和HATU(9mg，0.024mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获+
得标题化合物的二(三氟乙酸)盐(8.3mg)。(m/z)：C44H51F3N8O5的[M+H] 计算值为829.39，实验值为829.4。
[0757] 实例35至实例38
[0758] 按照实例34的程序，使制备25的中间物(17mg，0.016mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0759]
[0760]
[0761] 实 例39：[(S)-1-((S)-2-{4-[4 ′ -({6-[(2R，5S)-4-((S)-2，2-二 甲 基- 环丙烷羰基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2，2′-二甲基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0762]
[0763] 在室 温 下 向(S)-(+)-2，2-二 甲 基环 丙 烷甲 酸(2.39mg，0.021mmol) 和((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2，2′-二甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(20mg，0.019mmol，制备30)于DMF(0.5mL，6mmol)中的混合物中依序添加HATU(7.98mg，0.021mmol)和N，N-二异丙基乙胺(16.60μL，0.095mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，过滤并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐(15mg)。
[0764] (m/z)：C46H58N8O5的[M+H]+计算值为803.45，实验值为803.4。
[0765] 实例40
[0766] 按照实例39的程序，使制备30的中间物(20mg，0.019mmol)与(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(6mg，0.021mmol)反应，获得+以下化合 物的二(三氟乙酸)盐(6mg)。(m/z)：C53H70N10O8的[M+H] 计算值为975.45，实验值为975.6。
[0767]
[0768] 实例41：[(S)-1-((S)-2-{5-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2′，6′-二氟-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0769]
[0770] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(2′，6′-二氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(20mg，0.02mmol；制备32)和N，N-二异丙基乙胺(33.4μL，0.192mmol)溶解于DMA(0.6mL，7mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(38μL，0.019mmol)和HATU(11mg，0.029mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得+
标题化合物的二(三氟乙酸)盐(10.1mg)。(m/z)：C43H50F2N8O5的[M+H] 计算值为797.39，实验值为797.4。
标题化合物的二(三氟乙酸)盐(10.1mg)。(m/z)：C43H50F2N8O5的[M+H] 计算值为797.39，实验值为797.4。
[0771] 实例42至实例44
[0772] 按照实例41的程序，使制备32的中间物(20mg，0.02mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0773]
[0774]
[0775] 实例45：[(S)-1-((S)-2-{5-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2′-氟-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0776]
[0777] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(2′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙
基)-氨基甲酸甲酯3[C2HF3O2](15mg，0.015mmol；制备35)和N，N-二异丙基乙胺(25.5μL，
0.146mmol)溶解于DMA(0.5mL，5mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(29μL，0.015mmol)和HATU(8.3mg，0.022mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合+
物的二(三氟乙酸)盐(9.5mg)。(m/z)：C43H51FN8O5的[M+H] 计算值为779.40，实验值为
779.4。
基)-氨基甲酸甲酯3[C2HF3O2](15mg，0.015mmol；制备35)和N，N-二异丙基乙胺(25.5μL，
0.146mmol)溶解于DMA(0.5mL，5mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(29μL，0.015mmol)和HATU(8.3mg，0.022mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合+
物的二(三氟乙酸)盐(9.5mg)。(m/z)：C43H51FN8O5的[M+H] 计算值为779.40，实验值为
779.4。
[0778] 实例46至实例48
[0779] 按照实例45的程序，使制备35的中间物(15mg，0.015mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0780]
[0781]
[0782] 实例49：[(S)-1-((S)-2-{4-[2′-氯-4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0783]
[0784] 在50℃ 下将6-[(R)-4-((S)-2，2-二 甲基-环 丙烷羰 基)-2-甲基 -哌嗪-1-基]-烟酸(4.54mg，0.014mmol；制备36)、HCTU(8.0mg，0.019mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.013mL，0.072mmol)和DMA(0.2mL，2mmol)的混合物搅拌30分钟，接着添加((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2′-氯-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(7.1mg，0.014mmol；制备37)。搅拌反应混合物过夜，接着添加HCTU(8mg)，并且将反应混合物加热到55℃。5小时后，将反应混合物冷却到室温，添加乙酸乙酯和水。在真空下浓 缩有机层并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合+
物的二(三氟乙酸)盐(1.3mg)。(m/z)：C43H51ClN8O5的[M+H] 计算值为795.37，实验值为
795.4。
基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(7.1mg，0.014mmol；制备37)。搅拌反应混合物过夜，接着添加HCTU(8mg)，并且将反应混合物加热到55℃。5小时后，将反应混合物冷却到室温，添加乙酸乙酯和水。在真空下浓 缩有机层并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合+
物的二(三氟乙酸)盐(1.3mg)。(m/z)：C43H51ClN8O5的[M+H] 计算值为795.37，实验值为
795.4。
[0785] 实例50：[(S)-1-((S)-2-{4-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2，2′-二氟-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0786]
[0787] 向6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-烟酸(6.4mg，0.020mmol；制备36)的溶液中添加含EDC(5.8mg，0.030mmol)和HOAt(4.2mg，
0.030mmol)的DMA(0.5mL，5mmol)。在室温下搅拌反应混合物30分钟，接着添加
((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2，2′-二氟-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯
烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(10mg，0.02mmol；制备38-B)和N，N-二异丙基乙胺(18μL，0.10mmol)且在室温下搅拌反应混合物过夜。通过旋转蒸发浓缩反应混合物，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的二+
(三氟乙酸)盐(6.8mg)。(m/z)：C43H50F2N8O5的[M+H] 计算值为797.39，实验值为797.4。
0.030mmol)的DMA(0.5mL，5mmol)。在室温下搅拌反应混合物30分钟，接着添加
((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-氨基-2，2′-二氟-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯
烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(10mg，0.02mmol；制备38-B)和N，N-二异丙基乙胺(18μL，0.10mmol)且在室温下搅拌反应混合物过夜。通过旋转蒸发浓缩反应混合物，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的二+
(三氟乙酸)盐(6.8mg)。(m/z)：C43H50F2N8O5的[M+H] 计算值为797.39，实验值为797.4。
[0788] 实例51：[(S)-1-((S)-2-{4-[4′-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-5′-氟-2′-三氟甲基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0789]
[0790] 将(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸(2.09mg，0.018mmol)与HATU(8.35mg，0.022mmol)的混合物在DMA(1.0mL，11mmol)中搅拌10分钟，接着添加((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2- 基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(20.0mg，0.018mmol，制备41)和N，N-二异丙基乙胺(15.94μL，0.091mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，过滤，并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐(4.8mg)。(m/+
z)：C44H50F4N8O5的[M+H] 计算值为847.38，实验值为847.4。
z)：C44H50F4N8O5的[M+H] 计算值为847.38，实验值为847.4。
[0791] 实例52
[0792] 按照实例51的程序，使制备41的中间物(20mg，0.019mmol)与(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(5.24mg，0.018mmol)反应，+获得以下化合物的二(三氟乙酸)盐(2.8mg)。(m/z)：C51H62F4N10O8的[M+H] 计算值为
1019.47，实验值为1019.4。
1019.47，实验值为1019.4。
[0793]
[0794] 实例53：((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-4-甲基胺甲酰基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0795]
[0796] 向含1.0M异氰酸甲酯的甲苯(11.4μL，0.011mmol)溶解于DMA(0.5mL)中的溶液中添加((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氟-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(12.7mg，0.011mmol；制备44)和N，N-二异丙基乙胺(19.9μL，0.114mmol)且在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过制备型HPLC加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐+
(7.7mg)。(m/z)：C40H48F4N9O6的[M+H] 计 算值为824.34，实验值为824.4。
(7.7mg)。(m/z)：C40H48F4N9O6的[M+H] 计 算值为824.34，实验值为824.4。
[0797] 实例54至实例55
[0798] 按照实例53的程序，使制备44的中间物(12.7mg，0.011mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0799]
[0800]
[0801] 实例56
[0802]
[0803] 在室温下向4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-甲酸三氟乙酸盐(23.0mg，0.033mmol；制备46)和((S)-1-{(S)-2-[(R)-4-(5-氨基-吡啶-2-基)-3-甲基-哌
嗪-1-羰基]-2-甲基-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(15.4mg，
0.033mmol；制备48)于DMF(0.5mL)中的混合物中添加HATU(14.0mg，0.037mmol)和N，N-二异丙基乙胺(29.1μL，0.167mmol)。在室温下搅拌所产生的混合物2小时，接着分配在EtOAc(10mL)与水(2mL)之间。用水(2mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油。将残余物溶解于1∶1乙酸∶ 水(1.5mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得淡粉色固体状标题化合物二(二氟乙酸)盐+
(9.1mg，22％产率)。(m/z)：C51H63F3N10O9的[M+H] 计算值为1,017.47，实验值为1017.9。
嗪-1-羰基]-2-甲基-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯(15.4mg，
0.033mmol；制备48)于DMF(0.5mL)中的混合物中添加HATU(14.0mg，0.037mmol)和N，N-二异丙基乙胺(29.1μL，0.167mmol)。在室温下搅拌所产生的混合物2小时，接着分配在EtOAc(10mL)与水(2mL)之间。用水(2mL)洗涤有机层，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，获得淡棕色油。将残余物溶解于1∶1乙酸∶ 水(1.5mL)中，过滤并且通过反相HPLC加以纯化。合并所要洗脱份并且冷冻干燥，获得淡粉色固体状标题化合物二(二氟乙酸)盐+
(9.1mg，22％产率)。(m/z)：C51H63F3N10O9的[M+H] 计算值为1,017.47，实验值为1017.9。
[0804] 实例57：[(S)-1-((S)-2-{4-[4′-({6-[(2R)，5S)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-5′-氟-2′-三氟甲基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0805]
[0806] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-5′-氟-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(二氟乙酸)盐(15mg，0.013mmol；制备50)和N，N-二异丙基乙胺(23μL，0.13mmol)溶解于DMA(0.5mL，5mmol)中的溶液中添加含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(27μL，0.013mmol)和HATU(7.6mg，
0.020mmol)。在50℃下搅拌反应混合物2小时，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得呈二(三氟乙酸)盐形式的标题化合物(9.1mg)。(m/z)：
+
C45H52F4N8O6的[M+H] 计算值为877.39，实验值为878.0。
0.020mmol)。在50℃下搅拌反应混合物2小时，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得呈二(三氟乙酸)盐形式的标题化合物(9.1mg)。(m/z)：
+
C45H52F4N8O6的[M+H] 计算值为877.39，实验值为878.0。
[0807] 实例58至实例60
[0808] 按照实例57的程序，使制备50的中间物(15mg，0.013mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0809]
[0810]
[0811]
[0812] 实 例 61：[(S)-1-((S)-2-{4-[5 ′ - 氯 -4 ′ -({6-[(R)-4-((S)-2，2- 二 甲基-环丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-2′-三氟甲基-联苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0813]
[0814] 向含0.5M(S)-(+)-2，2-二甲基环丙烷甲酸的DMA(28.9μL，0.015mmol)和HATU(8.25mg，0.022mmol)溶解于DMA(0.5mL)中的溶液中添加((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氯-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三
氟乙酸)盐(16mg，0.014mmol；制备53)和N，N-二异丙基乙胺(25.2μL，0.15mmol)且在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得呈二(三氟乙酸)盐形式的标题化合物(8.6mg)。(m/z)：C44H50ClF3N8O5的+
[M+H] 计算值为863.35，实验值为863.4。
氟乙酸)盐(16mg，0.014mmol；制备53)和N，N-二异丙基乙胺(25.2μL，0.15mmol)且在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得呈二(三氟乙酸)盐形式的标题化合物(8.6mg)。(m/z)：C44H50ClF3N8O5的+
[M+H] 计算值为863.35，实验值为863.4。
[0815] 实例62
[0816] 按照实例61的程序，使制备53的中间物(16mg，0.014mmol)与(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(4.14mg，0.015mmol)反应，+获得以下化合物的二(三氟乙酸)盐(6.5mg)。(m/z)：C51H62ClF3N10O8的[M+H] 计算值为
1,035.44，实验值为1035.4。
1,035.44，实验值为1035.4。
[0817]
[0818] 实例63至实例65
[0819] 按照实例57的程序，用制备55的中间物(15mg，0.013mmol)替代制备50的中间物(15mg，0.013mmol)，制得以下化合物：
[0820]
[0821]
[0822] 实例66：
[0823]
[0824] 将甲氧基乙酸(1.14μL，0.014mmol)溶解于DMA(1mL)中且添加HATU(5.65mg，0.015mmol)。在室温 下搅拌 反应混合 物15分钟，接着 依序添 加((S)-2-甲
基-1-{(S)-2-[4-(4′-{6-[(R)-2-甲基-4-((S)-2-甲基-吡咯烷-2-羰 基)-哌
嗪-1-基]-吡啶基-3-基胺甲酰基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯三盐酸盐(12.0mg，0.012mmol；制备57)和N，N-二异丙基乙胺(10.8μL，0.062mmol)且在55℃下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐+
(8.3mg)。(m/z)：C47H56F3N9O8的[M+H] 计算值为932.42，实验值为932.4。
基-1-{(S)-2-[4-(4′-{6-[(R)-2-甲基-4-((S)-2-甲基-吡咯烷-2-羰 基)-哌
嗪-1-基]-吡啶基-3-基胺甲酰基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-丙基)-氨基甲酸甲酯三盐酸盐(12.0mg，0.012mmol；制备57)和N，N-二异丙基乙胺(10.8μL，0.062mmol)且在55℃下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐+
(8.3mg)。(m/z)：C47H56F3N9O8的[M+H] 计算值为932.42，实验值为932.4。
[0825] 实例67至实例70
[0826] 按照实例66的程序，使制备57的中间物(12.0mg，0.012mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0827]
[0828]
[0829] *在分离和纯化之前，向反应混合物中添加另一当量相应酸以及先前在室温下搅拌15分钟的HOAt(2.53mg，0.019mmol)和EDC(3.56mg，0.019mmol)，在60℃下搅拌过 夜。
[0830] 实例71：{(S)-1-[(S)-2-(4-{4-[5-({6-[(2R，5S)-4-((S)-2，2-二甲基-环丙烷羰基)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-6-甲基-吡啶-2-基]-苯基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0831]
[0832] 将 (s)-(+)-2，2- 二 甲 基 环 丙 烷 甲 酸 (2.13mg，0.019mmol) 与HATU(8.52mg，0.022mmol)的 混 合 物 在 DMA(1mL)中 搅 拌 10分 钟，接 着 添 加[(S)-1-((S)-2-{4-[4-(5-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-6-甲基-吡啶-2-基)-苯基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯四盐酸盐(15mg，0.018mmol；制备59)和N，N-二异丙基乙胺(16.3μL，
0.093mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(11mg)。
+
(m/z)：C44H55N9O5的[M+H] 计算值为790.43，实验值为790.4。
0.093mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，通过旋转蒸发加以浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(11mg)。
+
(m/z)：C44H55N9O5的[M+H] 计算值为790.43，实验值为790.4。
[0833] 实例72至实例75
[0834] 按照实例71的程序，使制备59的中间物(15.0mg，0.018mmol)与适当试剂反应，获得以下化合物：
[0835]
[0836]
[0837]
[0838] 实 例 76：{(S)-1-[(S)-2-(4-{6-[4-({6-[(R)-4-((S)-2，2-二 甲 基 - 环 丙烷羰基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-三氟甲氧基苯基]-吡啶基-3-基}-1H-咪唑-2-基)-吡咯烷-1-羰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸甲酯
[0839]
[0840] 在 室 温 下 向 [(S)-2-甲 基 -1-((S)-2-{4-[6-(4-{[6-((R)-2-甲 基 - 哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2-三氟甲氧基-苯基)-吡啶基-3-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-丙基]-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(14.25mg，
0.013mmol；制 备61)和(S)-(+)-2，2-二 甲 基环 丙 烷 甲酸(2.2mg，0.020mmol) 和HATU(7.4mg，0.020mmol)于DMF(0.5mL)中的混合物中添加N，N-二异丙基乙胺(11.37μL，
0.065mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(10.8mg)。(m/z)：C43H50F3N9O6+
的[M+H] 计算值为846.38，实验值为847.0。
0.013mmol；制 备61)和(S)-(+)-2，2-二 甲 基环 丙 烷 甲酸(2.2mg，0.020mmol) 和HATU(7.4mg，0.020mmol)于DMF(0.5mL)中的混合物中添加N，N-二异丙基乙胺(11.37μL，
0.065mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中，并且通过反相HPLC加以纯化，获得标题化合物的三(三氟乙酸)盐(10.8mg)。(m/z)：C43H50F3N9O6+
的[M+H] 计算值为846.38，实验值为847.0。
[0841] 实例77：
[0842] (a)[(S)-1-((S)-2-{4-[5′-氯-2′-三氟甲氧基-4′-({6-[(R)-2-甲基-4-((S)-2-甲基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-吡啶-3-羰基}-氨基)-联
苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
苯-4-基]-1H-咪唑-2-基}-吡咯烷-1-羰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸甲酯
[0843]
[0844] 在室温下将(S)-2-甲基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(23.2mg，0.10mmol)和HATU(38.5mg，0.10mmol)于DMA(1mL)中的混合物搅拌20分钟，接着依序添加((S)-1-{(S)-2-[4-(5′-氯-4′-{[6-((R)-2-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯三(三氟乙酸)盐(95.0mg，0.084mmol；制备62)和N，N-二异丙基乙胺(0.074mL，
0.42mmol)并且在55℃下搅拌反应混合物过夜。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且依序用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生黄色油状物。
0.42mmol)并且在55℃下搅拌反应混合物过夜。在乙酸乙酯中稀释反应混合物，并且依序用水和盐水洗涤。使有机层经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，产生黄色油状物。
[0845] 用含4M HCl的1，4-二噁烷(0.63mL，2.53mmol)和HCl(0.16mL)处理得自先前步骤的油状物，并且在室温下搅拌反应混合物1小时，浓缩，并且与EtOAc(2×)一起蒸发，产生淡黄色固体状标题中间物三盐酸盐(87.3mg)。
[0846] (b)
[0847]
[0848] 向溶解于DMA中的先前步骤产物(22mg，0.022mmol)中依序添加含0.5M甲基氨基甲酰氯的DMA(52.6μL，0.026mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.016mL，0.089mmol)，并且在室温下搅拌反应混合物过夜，浓缩，溶解于1∶1乙酸∶水(1.5mL)中并且通过反相HPLC+加以纯化，获得标题化合物的二(三氟乙酸)盐(14.4mg)。(m/z)：C46H54ClF3N10O7的[M+H]计算值为951.38，实验值为951.6。
[0849] 实例78：((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-4-甲基胺甲酰基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯的替代性合成
[0850] (a)N-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基)-6-氟-烟酰胺
[0851]
[0852] 向4-溴-3-三氟甲氧基-苯胺(3.15g，12.3mmol)和三乙胺(3.43mL，24.6mmol)于DCM(25mL)中的溶液中缓慢添加2-氟吡啶-5-羰基氯(2.36g，14.8mmol)于DCM(10mL)中的溶液。在室温下2小时后，添加MTBE(90mL)且用水、盐水和饱和碳酸钠洗涤反应混合物，干燥并且蒸发，获得固体(5.4g)。向固体中添加乙醇(43mL)，接着缓慢添加水(43mL)。搅拌反应混合物1.5小时，过滤，并且用1∶4乙醇∶水(2×25mL)洗涤，获得白色固体状标题中间物(3.87g)。HPLC方法C：滞留时间＝21.3分钟。
[0853] (b)(2S，5R)-4-[5-(4-溴-3-三氟甲氧基-苯基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0854]
[0855] 将先前步骤的产物(3.86g，10.2mmol)、(2S，5R)-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.62g，12.2mmol)和N，N-二异丙基乙胺(5.32mL，30.5)溶解于DMSO(12mL)中。在120℃下加热反应混合物3小时，用EtOAc(100mL)稀释，用水和饱和NH4Cl、水和盐水洗涤。将反应混合物蒸发到约40％体积，并且缓慢添加含3M HCl的环戊基甲基醚(4.24mL，12.7mmol)。添加得自先前较小规模操作的晶种，并且搅拌反应混合物2天并且过滤，获得标题中间物的盐酸盐(5.15g，83％产率)。HPLC方法C：滞留时间＝21.1分钟
[0856] (c)(2S，5R)-4-[5-(4′-{2-[(S)-1-((S)-2-甲氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基)-吡咯烷-2-基]-1H-咪唑-4-基}-2-三氟甲氧基-联苯-4-基胺甲酰基)-吡啶-2-基]-2，5-二甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0857]
[0858] 向((S)-1-{(S)-2-[4-(4-溴-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲 酸甲酯(3.05g，6.8mmol)、双(频哪醇根基)二硼(1.81g，7.1mmol)和乙酸钾(1.00g，10.2mmol)的溶液中添加以氮气充气的甲苯(15mL)。用氮气对所产生的混合物充气并且添加1，1′-双(二苯膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷(Pd催化剂)(0.17g，0.204mmol)。在90℃下搅拌反应混合物过夜。
[0859] 将反应混合物冷却到室温，并向此混合物中添加以氮气充气的水(7.6mL)、碳酸钾(5.16g，37.3mmol)。在95℃下搅拌反应混合物过夜。
[0860] 反应混合物中添加另一份上文所使用的Pd催化剂(0.08g，0.10mmol)。5小时后，将反应混合物冷却到室温，用EtOAc(150mL)稀释，用水(150mL)和盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且蒸发，获得黑色残余物(6.7g)，通过硅胶色谱法(用50％至100％EtOAc/己烷洗脱)加以纯化，获得标题中间物(5.3g，90％产率)。HPLC方法C：滞留时间＝14.7分钟。
[0861] (d)((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0862]
[0863] 向乙醇(18mL)中添加乙酰氯(2.57mL，36.2mmol)并且在室温下搅拌1小时。向所产生的盐酸溶液中添加先前步骤的产物(3.90g，4.5mmol)于乙醇(18mL)中的溶液。使反应混合物升温到35℃并且搅拌过夜。向乙醇(7.8mL)中添加乙酰氯(1.28mL，18.1mmol)并且搅拌30分钟。在35℃下将所得到的盐酸溶液添加到反应混合物中。使温度上升至40℃。将混合物浓缩到干燥，通过二氯甲烷追踪，获得标题中间物的粗制三盐酸盐(5.4g)，直接用于下一步骤。HPLC方法C：滞留时间＝10.1分钟。
[0864] (e)((S)-1-{(S)-2-[4-(4′-{[6-((2R，5S)-2，5-二甲基-4-甲基胺甲酰基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-羰基]-氨基}-2′-三氟甲氧基-联苯-4-基)-1H-咪唑-2-基]-吡咯烷-1-羰基}-2-甲基-丙基)-氨基甲酸甲酯
[0865]
[0866] 向先前步骤的产物(5.4g粗产物，约3.96mmol)和N，N-二异丙基乙胺(6.89mL，39.6mmol)于DCM(52mL)中的溶液中缓慢添加含1M甲基氨基甲酰氯的DMA(4.3mL)。在室温下搅拌反应混合物1小时，接着添加水(50mL)。依序用饱和NH4Cl和盐水洗涤有机层，经Na2S04干燥并且蒸发，获得5.2g粗产物，通过硅胶色谱法(133g硅石，2％至8％甲醇/DCM，持续15分钟；接着8％甲醇/DCM，持续40分钟)加以纯化，获得标题化合物(2.4g，74％产率)。HPLC方法C：滞留时间为11.2分钟。
[0867] 使用类似合成方法制备表1至表34的化合物，其中任一栏中的空白均表示氢，并且此外，当一栏中列出超过一个变量时(例如表5)，任何未规定的变量均为氢：
[0868] 表1
[0869]
[0870]
[0871]
[0872]
[0873]
[0874] 表2
[0875]
[0876]
[0877] 表3
[0878]
[0879]实例编号 R7a R7b R7c 化学式 [M+H]+计算值 [M+H]+实验值
3-1 F C41H46FN7O5 736.35 736.4
3-2 OCH3 C42H49N7O6 748.37 748.4
3-3 F F C41H45F2N7O5 754.35 754.2
3-4 Cl C41H46ClN7O5 752.33 752.4
3-5 Cl Cl C41H45Cl2N7O5 786.29 786.2
3-6 F C41H46FN7O5 736.35 736.4
3-7 Cl C41H46ClN7O5 752.33 752.2
3-1 F C41H46FN7O5 736.35 736.4
3-2 OCH3 C42H49N7O6 748.37 748.4
3-3 F F C41H45F2N7O5 754.35 754.2
3-4 Cl C41H46ClN7O5 752.33 752.4
3-5 Cl Cl C41H45Cl2N7O5 786.29 786.2
3-6 F C41H46FN7O5 736.35 736.4
3-7 Cl C41H46ClN7O5 752.33 752.2
[0880] 表4
[0881]
[0882]
[0883] 表5
[0884]
[0885]
[0886] *未规定的R8a、R9a、R9b、R10各自为H。
[0887] 表6
[0888]
[0889]
[0890] 表7
[0891]
[0892]
[0893] 表8
[0894]
[0895]
[0896] 表9
[0897]
[0898]
[0899] 表10
[0900]
[0901]
[0902]
[0903] (a)(R)CH2NH(S)C(O)(1，1-二-甲基环丙基)
[0904] (b)(R)CH2NHC(O)OCH2苯基
[0905] 表11
[0906]
[0907]
[0908]10 10
[0909] *R 为C1；所有其它R 均为氢。
[0910] 表12
[0911]
[0912]
[0913] 表13
[0914]
[0915]
[0916] 表14
[0917]
[0918]
[0919]
[0920] 表15
[0921]
[0922]
[0923] 表16
[0924]
[0925]
[0926] 表17
[0927]
[0928]
[0929]
[0930] (a)R10为C1
[0931] (b)R10为CH3
[0932] 表18
[0933]
[0934]
[0935] 表19
[0936]
[0937]
[0938] 表20
[0939]
[0940]
[0941]
[0942] 表21
[0943]
[0944]
[0945]
[0946]
[0947]
[0948]
[0949]
[0950] 表22
[0951]
[0952]
[0953]
[0954] 表23
[0955]
[0956]
[0957]
[0958]
[0959] 表24
[0960]
[0961]
[0962]
[0963]
[0964] 表25
[0965]
[0966]
[0967]
[0968] 表26
[0969]
[0970]
[0971]
[0972] 表27
[0973]
[0974]
[0975]
[0976]
[0977]
[0978]
[0979]
[0980] 表28
[0981]
[0982]
[0983]
[0984]
[0985]
[0986] 表29
[0987]
[0988]
[0989]
[0990]
[0991] 表30
[0992]
[0993]
[0994] 表31
[0995]
[0996]
[0997] 表32
[0998]
[0999]
[1000]
[1001] 表33
[1002]
[1003]
[1004]
[1005] 表34
[1006]
[1007]
[1008] 生物学分析
[1009] 丙型肝炎病毒已基于核苷酸序列分类为6种主要不同基因型，并且在各基因型内进一步分成亚型。本发明化合物在一个或一个以上以下HCV复制子分析中显示抑制HCV复制。
[1010] 分析1：HCV基因型1b复制子分析
[1011] HCV基因型1b复制子细胞系是获自Apath LLC(纽约市布鲁克林区(Brooklyn，NY))(APC144；Huh7细胞背景)。此亚基因组复制子含有与新霉素抗性可选标记融合的HCV核心蛋白的N端。EMCV IRES位于与非结构蛋白质NS3-NS5B融合的人类化海肾 荧光素酶的下游且驱动其表达。使用此细胞系来测定化合物效能，使用荧光素酶活性读出值作为化合物抑制复制子水平的量度。
[1012] 细胞在37℃下在含5％CO2湿气培育箱中在含10％FBS(海康公司(HyClone))、1×NEAA(英杰公司(Invitrogen))、1×青霉素-链霉素(Pen-Strep)(英杰公司)和
500μg/mL G418(英杰公司)的DMEM(英杰公司)中生长。在分析第1天，细胞在200μL缺乏G418的培养基中以10,000个细胞/孔接种于白色96孔组织培养板(科斯塔公司
(Costar))中。4小时后，在细胞已附着后，去除培养基，并且替换为含有测试化合物的剂量反应的培养基(无G418)。化合物最初在DMSO中稀释，接着再在培养基中稀释200×，以使最终DMSO浓度降到0.5％。细胞与测试化合物一起培育48小时。在培育期结束时，从培养板去除培养基和化合物，并且使用普洛麦格公司(Promega)Renilla-Glo试剂测定荧光素酶活性。
500μg/mL G418(英杰公司)的DMEM(英杰公司)中生长。在分析第1天，细胞在200μL缺乏G418的培养基中以10,000个细胞/孔接种于白色96孔组织培养板(科斯塔公司
(Costar))中。4小时后，在细胞已附着后，去除培养基，并且替换为含有测试化合物的剂量反应的培养基(无G418)。化合物最初在DMSO中稀释，接着再在培养基中稀释200×，以使最终DMSO浓度降到0.5％。细胞与测试化合物一起培育48小时。在培育期结束时，从培养板去除培养基和化合物，并且使用普洛麦格公司(Promega)Renilla-Glo试剂测定荧光素酶活性。
[1013] 为分析数据，绘制荧光素酶活性相对于化合物浓度的曲线，并且根据四参数稳固拟合(robust fit)模型用格拉夫派得普锐斯(GraphPad Prism)软件包(加利福利亚州圣地亚哥格拉夫派得(GraphPad)软件公司(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA))确定EC50值。结果表示为EC5o值的负十进制对数pEC5o。
[1014] 在此分析中具有较高pEC5o值的测试化合物展示对HCV基因型1b复制的较大抑制作用。此分析中所测试的本发明化合物通常展现约7与约12之间的pEC5o值。
[1015] 分析2：HCV基因型1a复制子分析
[1016] HCV基因型1a复制子细胞系是获自Apath LLC(APC89；Huh7.5细胞背景)。此亚基因组复制子含有与新霉素抗性可选标记融合的HCV核心蛋白的N端。EMCV IRES位于非结构蛋白质NS3-NS5B的下游且驱动其表达。测定化合物效能，使用溶胞物中的NS3特异性蛋白酶活性作为化合物抑制复制子水平的量度。
[1017] 细胞在37℃下，在含5％CO2湿气培育箱中，在含10％FBS(海康公司)、1×NEAA(英杰公司)、1×青霉素-链霉素(英杰公司)和850μg/mL G418(英杰公司)的DMEM(英杰公司)中生长。在分析第1天，细胞在200μL缺乏G418的培养基中，以15,000个细胞/孔接种于黑色96孔组织培养板(科斯塔公司)中。4小时后，一旦细胞已附着后，即去除培养基，并且替换为含有测试化合物的剂量反应的培养基(无G418)。化合物最初在DMSO中稀释，接着再在培养基中稀释200×，以使最终DMSO浓度降到0.5％。细胞与测试化合物一起培育48小时或72小时。在培育期结束时，从培养板去除培养基和化合物。
[1018] 为测定溶胞物中的NS3特异性蛋白酶活性，在室温下使细胞于50μL/孔的50mM Hepes pH7.5、150mM NaCl、15％甘油、0.15％Triton X-100、10mM DTT中随振荡溶解20分钟。接着，向各孔中添加50μL NS3/4a蛋白酶特异性FRET底物(Anaspec RET S1 目录号22991)，最终浓度为15μM。在37℃下培育培养板20分钟，其相当于蛋白酶活性仍处于线性期的时间点。通过测量荧光(激发：340nm；发射：509nm)来测定蛋白酶活性。
[1019] 为分析数据，绘制荧光相对于化合物浓度的曲线，并且根据四参数稳固拟合模型，使用格拉夫派得普锐斯软件确定EC50值。此分析中所测试的本发明化合物通常展现约7至约11.5之间的pEC50值。
[1020] 分析3：针对抗性突变体的复制子分析
[1021] 为产生具有相关抗性突变的复制子细胞，首先通过定点诱变法将突变引入亲本质粒中。基因型1b中的突变包括L31V、Y93H和L31V/Y93H双重突变体。基因型1a中的突变包括Q30R和L31V。接着使复制子质粒线性化并且体外转录到RNA。使用所述RNA通过电穿孔稳定转染Huh7细胞，并且在500μg/mL G418下选择新颖细胞系。如上文先前关于HCV基因型1b和1a复制子分析所述，测定测试化合物针对这些突变细胞系的效能。
[1022] 使用短暂性转染分析测定测试化合物针对其它相关突变的效能。这些突变体包括基因型1a Y93C、Y93H、M28T、Q30E和Q30K。首先通过定点诱变法将突变引入亲本质粒中。接着使复制子质粒线性化且体外转录到RNA。使用所述RNA通过电穿孔短暂性转染Huh-LUNET细胞(获自德国施里斯海姆ReBLikon有限责任公司(ReBLikon GmbH，Schriesheim，Germany))，并且如先前所述测定测试化合物针对突变体的效能。
[1023] 分析4：集落形成分析
[1024] 使用集落形成分析评定测试化合物抗性的总体遗传障碍。将复制子细胞接种于组织培养烧瓶中，并且在G418(500μg/mL至850μg/mL)存在下用各种浓度的测试化合物(或DMSO对照)处理3至4周。每周两次将培养基替换为含有化合物和G418的新鲜培养基。视需要使细胞裂解。在此期间，许多细胞死亡，并且出现抗性集落。接着固定所述集落并且用结晶紫/甲醇染色。本发明化合物与达诺匹韦(NS3蛋白酶抑制剂)的组合与单独的任一单一化合物相比能够在更大程度上显著抑制抗性突变体出现。
[1025] 分析5：药剂组合的复制子分析
[1026] 如关于HCV基因型1b和1a复制子分析所述，测试本发明化合物与另一治疗剂的组合。细胞与测试化合物的各种组合(呈棋盘矩阵)一起培育48小时。如上文所述测定单独任一化合物的效能，并且使用MacSynergy II软件来确定测试化合物的组合是展现协同作用还是相加作用还是拮抗作用。本发明化合物与达诺匹韦(NS3蛋白酶抑制剂)的组合展示相加抗病毒作用。类似地，本发明化合物与干扰素α2b的组合展示相加抗病毒作 用。
[1027] 分析结果
[1028] 在一个或一个以上上述分析中测试实例1至实例77和表1至表33的所有化合物。例如，在HCV基因型1b和1a复制子分析中获得以下结果，其中A表示pEC50值在7与8之间(EC50在100nM与10nM之间)，B表示pEC50值在8与9之间(EC50在1nM与10nM之间)，C表示pEC50值在9与约10之间(EC50在1nM与0.1nM之间)，并且D表示pEC50＞10(EC50＜0.1nM)。
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