技术领域
[0001] 本
发明属于药物化学领域,具体涉及一种
啤酒酵母菌抑制试剂及其制备方法和应用。
背景技术
[0002] 苯并噻唑类化合物是一类重要的杂环化合物,存在于
治疗糖尿病药物、脂肪酰胺
水解酶
抑制剂、
醛糖还原酶抑制剂、抗
肿瘤试剂和
脂肪酸氧化抑制剂等
生物活性分子中。在医疗方面,苯并噻唑类化合物表现出良好的抑菌、杀菌、抗肿瘤、抗病毒等生物活性。喹啉衍生物是一类重要的含氮芳香杂环化合物,其独特的结构特点使得其易于与不同的酶和受体通过如疏水作用、π-π堆积及静电作用等多种非共价键相互作用,进而表现出广泛的生物活性,如抗细菌、抗
真菌、抗结核、抗癌、抗病毒、抗寄生虫、抗炎和抗糖尿病活性等因而具有多种生物活性,受到人们的广泛关注。在应用中,最受人们关注的是含8-羟基喹啉结构的螯合剂,含8-羟基喹啉结构的苯并噻唑类化合物,能与许多种
金属离子形成配合物,并稳定存在,且具有较好的光学活性、催化活性、生物活性和一定的抑癌能
力。但大部分工作者研究的主要为含8-羟基喹啉结构的醛与脂肪胺及芳香胺反应,少有涉及含有噻唑类杂环化合物。
发明内容
[0003] 本发明利用药物设计拼合原理,在同一分子中引入苯并噻唑和喹啉等药效团,设计合成了基于喹啉的苯并噻唑类似物,提供了一种制备工艺简单、收率高、对啤酒酵母菌抑制效果好的酵母菌抑制试剂及其制备方法和应用。
[0004] 为实现上述目的,本发明采用的技术方案是,一种啤酒酵母菌抑制试剂,所述抑制试剂的结构式如下:。
[0005] 所述啤酒酵母菌抑制试剂的制备方法如下:以醇为
溶剂,邻
氨基苯硫酚、间苯二甲氧基-双(8-(2-甲酰基喹啉))醚在加热回流的条件下反应制成所述啤酒酵母菌检测试剂。
[0006] 优选的,所述啤酒酵母菌抑制试剂的制备方法如下:将邻氨基苯硫酚、间苯二甲氧基-双(8-(2-甲酰基喹啉))醚加入
乙醇中,搅拌30 min,然后在加热回流、氮气保护下反应6h,所得沉淀经过滤、乙醇洗涤即得所述啤酒酵母菌抑制试剂。
[0007] 优选的,邻氨基苯硫酚、间苯二甲氧基-双(8-(2-甲酰基喹啉))醚的物质的量比为1:2-2.2。
[0008] 本发明产生的益效果是:本发明的酵母菌抑制试剂制备工艺简单、收率高,通过对合成得到的酵母菌抑制试剂进行抗菌实验测试。从抗菌结果可以看出目标化合物对啤酒酵母具有较好的抑菌效果,最小抑菌浓度(MIC) 0.2mg/L,而对黄链霉菌枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、苏
云金芽孢杆菌和黑曲霉均几乎没有抑菌效果。
具体实施方式
[0009] 以下以具体
实施例来说明本发明的技术方案,但本发明的保护范围不限于此。
[0010] 实施例1实施例中的啤酒酵母菌抑制试剂的合成路线如下:
。
[0011] 具体制备方法如下:取邻氨基苯硫酚(2.1mmol)、间苯二甲氧基-双(8-(2-甲酰基喹啉))醚(1mmol),加入10毫升乙醇于50毫升烧瓶中,搅拌30分钟,然后在在加热回流、氮气保护的条件下反应6h,得到黄色沉淀,过滤、乙醇洗涤即得所述啤酒酵母菌抑制试剂,收率为93%。
[0012] 所述啤酒酵母菌抑制试剂表征数据如下 1)红外
光谱测定:
用溴化
钾压片法在400 4000 cm–1范围内用美国Nicolet magna 750 傅里叶红外光谱~
仪测定。
[0013] 所得啤酒酵母菌抑制试剂的主要红外吸收峰为:3436, 2928, 1613, 1563, 1501, 1428, 1380, 1272, 1183, 1103, 990, 832, 754, 724, 6967, 668, 484 cm-1。
[0014] 2)
核磁共振氢谱测定:用氘代氯仿为溶剂,四甲基
硅烷为内标,用Bruker400核磁共振波谱仪测定氢谱。
[0015] 所得啤酒酵母菌抑制试剂的核磁共振氢谱为:8.42(d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.19(d, J = 8.1 Hz, 3H), 8.08(d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.73(d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.67(d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.57(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.46(s, 1H), 7.40(t, J = 10.2 Hz, 5H), 7.34 (s, 1H), 7.19 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 5.56 (s, 4H)。
[0016] 3)核磁共振
碳谱测定:用氘代氯仿为溶剂,四甲基硅烷为内标,用Bruker400核磁共振波谱仪测定碳谱。
[0017] 所得啤酒酵母菌抑制试剂的核磁共振碳谱为:170, 155, 154, 150, 140, 137, 137, 136, 130, 129, 128, 126, 125, 124, 122, 120, 119, 112, 71。
[0018] 4)元素分析测定:元素分析用美国PE公司,PE2400-II 元素分析仪测定:
所得啤酒酵母菌抑制试剂的元素分析值为:C, 72.91; H, 4.00; N, 8.47; S, 9.70。
(理论值:C, 72.93; H, 3.98; N, 8.50; O, 4.86; S, 9.73)。
[0019] 5)质谱测定:质谱用Bruker Compass DataAnalysis质谱仪测定:
所得啤酒酵母菌抑制试剂的质谱为:681.24 [M + Na]+(理论值:681.14) 。
[0020] 6)抑菌活性测试:细黄链霉菌、啤酒酵母、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、
苏云金芽孢杆菌和黑曲霉(广州市
微生物研究所提供) 。上述菌株分别用
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养。采用
滤纸片法测定化合物对上述菌株的抑菌活性。用DMF为溶剂,把各待测样品配成溶液。直径为5. 0 mm的滤纸片分别浸泡在各种不同浓度的待测化合物溶液中12 h(同时以相应溶剂为空白对照) 。滤纸片经灭菌、沥干后贴在含菌琼脂平板上(每板贴各自浓度不同样品的滤纸片各1片),在
培养箱中28 ℃恒温培养3d(黑曲霉、细黄链霉菌和啤酒酵母),37 ℃ 恒温培养24 h( 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌)。以十字交叉法测量其抑菌圈直径,比较抑菌效果。以上实验重复3次,取平均值。最小抑菌浓度(MIC) 如下:金黄色葡萄球菌(6.58 mg/L)、大肠杆菌(6.30 mg/L)、苏云金芽孢杆菌(5.80 mg/L),枯草芽孢杆菌(12.30 mg/L),啤酒酵母(0.2 mg/L),细黄链霉菌(7.60 mg/L)、黑曲霉(4.50 mg/L);由此可见,所得啤酒酵母菌抑制试剂对啤酒酵母具有较好的抑菌效果。