本发明的领域对应于制剂方法、生物活性物质特别是在食品，更 特别是在功能性食品的营养补充食品中的应用，包括微囊包封方法、 其制备的微胶囊和当其包含某些化合物时它们的应用，其中某些化合 物在本申请中是首次被描述。

微囊包封
微囊包封技术是公知的，并用在许多领域(药学、农业化学、染料 等)中。微囊包封的化合物存在不同形式，以此形式它们可被控制释放。 关于术语微胶囊的完全准确的定义和更广泛的现有技术，参见Fong， M.“Techologies of microencapsulation”in“Controlled Release Systems： Fabrication Technology，1988 Vol I，Editor Dean Hsieh，CRD Press， Florida。其解释了，术语“微胶囊”常被混淆，其不能与其它制剂方 法如乳剂、微球、脂质体等混淆。“真正的”微胶囊(在本发明中我们 称之为微胶囊)基于通过壁(聚合物)实现的相的物理分离，壁内-“核” -具有微囊包封的物质。(本发明中所称的)“真正的”微囊包封不能 与通过将制剂材料分散或混合入聚合物基质中(没有明确的相物理分 离)进行的制剂材料技术混淆。必须小心以避免认为微胶囊是简单的乳 剂。已有大量有关基质包封以及乳剂W/O/W(水包油包水型)、W/O(油 包水型)和O/W(水包油型)的文献(专利和科学文献)。本发明与所有提 到真正的微胶囊(下文的微胶囊)的以前的专利的根本不同是，我们制 备了W/O型乳剂，其被微胶囊壁包封，并且这些微胶囊分散或乳化于 水中，而且，所述微胶囊可在核中含有较小的微胶囊，因此具有多微 胶囊。一方面，本文公开了微胶囊(以及它们的制备方法)，其特征在 于，所述壁由聚合和交联的水胶体的混合物制成，并且由于温度升高 而使结构硬化，所述方法在各工艺步骤之间没有时间间隔和连续搅拌 下进行。没有专利或科学文献公开了类似于其的微囊包封方法。
没有专利或科学文献公开了类似于本发明的微囊包封方法。关于 本发明的最接近的现有技术在US 6,234,464中给出。
US 6,234,464描述了FA(脂肪酸)的微囊包封方法。本发明与其的 区别在于：i)在US 6,234,464中，微胶囊的核仅有O(油)相；在本发 明中，核有W/O相，ii)在US 6,234,464中，核不含多重微囊包封的 液滴；在本发明中，核含有(如统计学分布的)在较大微胶囊的核内的 微胶囊，iii)在US 6,234,464中，壁限于两种水胶体，进一步分离和 分化成两层；在本发明中，可能方便地将多于两种水胶体组合，且不 存在分层结构；iv)在US 6,234,464中，在实施例1公开的方法中， 该方法包括pH改变步骤和使微胶囊硬化的冷却步骤；在本发明中， 通过在连续方法结束时升高温度来完成硬化，因为不需要形成“第一 层”和稍后的“第二层”(我们允许所有水胶体一起聚合和交联)；v)在 US 6,234,464中没有提及任何其它化合物；在本发明中，推荐在油相 或两个水相中的任一相中使用稳定剂和抗氧化剂；vi)在US 6,234,464 中通过冷却完成硬化步骤；然而，本发明通过升高温度，并且在本发 明中使壁更坚固；vii)在US 6,234,464中，为了得到干燥的微胶囊， 使用乙醇从壁中除去水；在本发明中，可以不使用乙醇而得到干燥的 微胶囊(粉末形式)。
尽管提及的区别很多，他们参考了该方法；其形成的微胶囊也存 在相当不同的特征，尤其是热性质、活性成分的控制释放(US 6,234,464 仅涉及FA)等方面的特征。其它公开的微囊包封方法和其制备的微胶 囊与本发明的区别均远多于US 6,234,464与本发明的区别。
FA在食品中的应用
本领域技术人员已知，某些UFAs是有益健康的(ealthy)，尤其是 MUFAs、PUFAs和HUFAs。我们可以区分ω-3和ω-6。随着科学家和 流行病学研究的出版物，后来已经提交了许多专利，它们基于这样的 研究，请求保护这些自始就被人类消费的天然化合物的应用。本专利 的发明人没有发现任何请求保护FA与鞘脂或与脑苷脂组合应用的专 利。
所有这些化合物的应用方法有多种改变，包括微囊包封，但与本 文描述的(特征在于允许将微囊包封的UFAs引入任何类型的食品，而 它们没有显著降解)的方法甚至连相似也谈不上。
已经描述了UFAs和抗氧化剂的组合(EP 404058、US 5,855,944)， 但是绝没有使用本文描述的那些微胶囊，且没有任何对UFAs在食品 工业加工中的质量(即无UFAs降解)或仅仅是贮存期稳定性的充分研 究。
存在许多UFAs的来源，在专利中请求保护之前，几乎它们全部 都在科技文献中被描述过。该专利的新颖性不是指UFAs的来源，而 是从天然来源(或GMOs)得到的或者通过有机合成得到的UFAs的微 囊包封，及微胶囊在食品中的应用和其它应用。
婴儿食品
本发明的特定实施方案为本发明的制剂在婴儿食品中的应用。牛 奶缺乏某些母乳中存在的UFAs。这种类型的营养增补剂已在别处被 请求保护，但没有关于微囊包封的物质和UFAs直到最终消费时的最 佳保存(WO 9213086)的公开。
智力发育
通过DNA重组技术提高智力或至少潜在的智力是当前的辩论内 容。本发明的发明人基于多种多样的描述大脑皮层(其中存在智力)在 UFAsω-3、ω-6和ω-9的恰当平衡消费下的发育以及某些鞘脂在神经 传导中的作用的科学文献，了解人的代谢途径，发现了通过向饮食中 加入某些天然化合物而满足以下社会新需求的方案：最大程度地开发 人的潜能，尤其是作为人类特有的特征的智力。我们在此描述了ω-3、 ω-6和ω-9及鞘脂尤其是脑苷脂的组合应用，以增加智力的潜在发育。 本发明的发明人并不知道这些化合物用于上述目的的这种应用，更不 要说以微囊包封的物质的形式使用，更不要说在本文描述的微胶囊中 使用。已有关于ω-3和ω-6和ω-9有关智力的应用的科学证据(但不是 与鞘脂或脑苷脂组合用于脑发育)。参见Biol.Neonate 1998，74： 416-429和“Evidence for the unique function of DHA during evolution of the modern hominid brain”，Lipids 1999，vol.34(S)：S39-S47。后者指出 了DHA在从原始人类到人的智力发育中的作用。
抗氧化剂、防护剂和UV-光阻断剂及自由基阻断剂的应用
众所周知，许多疾病，从癌症到白内障，都源于氧化反应、由于 氧化过程所致或由氧化剂诱导的DNA链的降解、UV-光和/或自由基。 许多发明涉及使用天然抗氧化提取物、抗氧化化合物等(EP 1344516、 EP 1064910)来预防多种疾病。然而，由于本发明的微囊包封技术，本 发明实现了以下需要的事实，即，抗氧化化合物或提取物在工业加工 和强应力环境中保留了它们的抗氧化能力，直到消费者获得质量和功 能状态完美(没有降解)的化合物。

本发明涉及连续多重微囊包封方法、其微胶囊及其应用，所述方 法采用生物活性物质的原位界面聚合法，其特征在于：
(a)在第一步中，将含有聚合引发剂和任选的至少一种生物活性 物质的水相加入[任选含有至少一种生物活性物质的]油相中；在所述 两相的至少一相中还存在至少一种表面活性剂，并且在所述两相的至 少一相中存在生物活性物质；
(b)在第二步中，[向(a)中]加入含有至少一种水胶体的水溶液或水 分散液，这产生相转化，所述水胶体开始沉积并聚合在新形成的[为油 包水型乳剂]液滴的壁上，还发生任选在阳离子存在下的水胶体聚合物 的交联，
(c)在第三步中，[向(b)中]加入含有至少一种保护胶体的水溶液或 水分散液，其开始沉积在油包水型液滴的表面上，并且开始与自身和 所述水胶体聚合和交联，
(d)在第四步中，[向(c)中]加入第一表面活性剂的水溶液或水分散 液，其使得油包水型液滴的粒径降低，
(e)在第五步中，在降低粒径的过程中，部分形成的微胶囊解聚 集并再聚集，最终发生较大液滴内部的液滴包封(多重微囊包封)，
(f)当经过足够长的时间以使油[油包水]滴被至少一种水胶体和 至少一种保护胶体覆盖时，升高温度以强化所述液滴的壁；此时所述 液滴已经是悬浮在水中的微胶囊或多微胶囊，
(g)任选地，干燥所述制剂以得到粉剂，任选地通过现有技术将 其重新配制以得到(或者以将所述微胶囊与)可湿性粉末、凝胶、化妆 用乳膏或医用、沐浴用产品、微生物培养基(混合)；任选地加入用于 微胶囊的干燥制剂的添加剂(任选为抗聚集剂)，
(h)所有步骤-除了任选的步骤(g)-均在连续搅拌下进行。
在更详细的方法描述中，参照附图，其为相同主题的另一描述， 参照附图，本发明涉及微胶囊的制备方法，其特征在于：
(a)通过将1b加入1a中来混合两种不同的溶液(图1)1a(油)和1b (水)，这些溶液含有活性成分及任选的游离或螯合阳离子，后者稍后 被释放，
(b)由于可以在1a或1b中的食品乳化剂，形成水滴(10)进入油相 (9)的乳剂。这一步骤以乳剂1c的形成结束，其中在油相(9)中是溶解 或分散的-优选脂溶性的-活性成分；还形成水包油型乳剂，其中水 滴(10)含有-优选水溶性的-活性成分，任选通过衍生化活性成分来 改良[所述活性成分]在水或在油中的溶解性，
(c)然后，将溶液2b加入已有乳剂[1c]中，2b含有至少一种[能被 聚合和交联的]水胶体，并任选含有至少一种活性成分，
(d)接下来进行相转化，然后形成分散液滴(11)，其为油包水型(12) 乳剂，分散在连续相(24)即水中，
(e)稍后，(图5)加入溶液或分散液5a，其含有至少一种水胶体(15) 作为保护胶体，将含有第一乳化剂的溶液或分散液加入乳剂2a中，
(f)当认为聚合和交联反应结束时，粒径降低至约1-30m，将保 持在约30-70℃的温度升高至60-100℃，
(g)最后加入食品级粘度调节剂，
(h)任选地，可以将所述制剂喷雾干燥或采用任何现有技术，收 集形成的干燥粉末、可自乳化粉末、凝胶、乳膏或可以含有它们的任 一其它剂型，包括油分散液，以及进行冻干单元操作。
本发明还涉及生物活性物质的微囊包封方法。

因为优选实施方案是将微胶囊加入功能性食品中的应用，因此对 所述微胶囊进行耐热、抗压和在特定pH范围内降解的测试。
水胶体和保护胶体可以在最初以溶液或水分散液的形式一起加 入。
第一乳化剂和保护胶体可以选自水胶体和粘度调节剂，因为水胶 体具有所有这些特征。
根据所述方法，更适于成功制剂(功能上可接受的，也就是说，它 用于生物活性成分的功能上可接受的包封，而且对于其它生命材料或 无机材料，功能上可接受的理解为工业上可用于所述物质被微囊包封 的目的，各功能高度取决于其最终应用)的化合物对应于壳聚糖、淀粉、 糊精、环糊精、纤维素、木质素、果胶、琼脂、藻酸盐、角叉菜胶 (carragenatos)、明胶、瓜尔胶、阿拉伯胶、黄蓍胶、木质素磺酸盐、 Caravan胶、Ceratonia siliqua胶、皂苷、黄原胶、种子胶、半乳甘露 聚糖、阿拉伯半乳聚糖、β-葡聚糖、菊糖、欧车前、阿拉伯胶；其全 部异构体和立体化学构型，就构成所述水胶体的单体或低聚物的量和 质量而言的它们的所有变体，它们所有的出现形式，如金属、氮化、 含磷、硫化的盐，以及上述水胶体的任一衍生产物。
所述第一乳化剂的亲水亲油平衡值(HLB)可以方便地选择为 9-16，优选为12-14。
所述乳剂1c(10)的粒径(Master Sizer激光装置用于所有粒径测 量)通常为50-500μm，优选为70-200μm。
在方法结束时，形成的微胶囊的粒径为0.1-100μm，优选为1-30 μm，更优选为1-5μm。此粒径可以随聚集进行而随时间变化，这在一 定程度上可能是期望的，只要制剂的总结构不受影响。
降低乳剂粒径的剪切应力和常规搅拌由现有技术的搅拌器(锚、 齿、组合)提供，速度约为3000-25000rpm。这些值取决于方法的阶段 和反应器的大小。一旦微胶囊形成，便不推荐提供太多的动能/热能， 以避免微胶囊的破坏。
胶体的特定类型是水凝胶，则水胶体可以被水凝胶代替，所述水 凝胶任选基于白蛋白、藻酸盐、聚羧酸酯、聚-L-乳酸、淀粉及衍生物。 根据试验测量的释放速率(被介质例如酸乳酪影响)，我们可以选择不 同的水胶体组合、改变聚合度、壁的硬度、壁的厚度和渗透性(以确定 材料的类型)和电性质。
成壁材料的可变性也适用于粘度调节剂和乳剂，其中任一个用于 形成(1c)(优选聚山梨醇酯)，作为第一乳化剂(优选大豆卵磷脂基乳化 剂)。
所述微胶囊可以以干燥状态得到，或者再分散入液相中或固体和 可固化的基质中。微胶囊的外部介质可含有有助于保持壁结构的化合 物，例如离子力调节剂、渗透压等。在微胶囊内部可能存在曾经形成 的金属阳离子，有助于保持结构，例如用胶质制得的微胶囊壁内的钙 离子。
活性成分可以在方法的任一步骤中加入，包括当食品与微胶囊混 合时的步骤阶段，但是，显然优选将物质引入微胶囊内。这样，活性 成分可以来自溶液1a、1b、2b、5a，或者在最终食品加工的任一步骤 中加入，当微胶囊预期用于食品中时，其是本发明的优选实施方案(功 能性食品)。
阻止(例如UFAs和抗氧化剂的)氧化过程是重要的。这样，所述 方法可以在真空下，存在惰性气体(氮气、氦气)、针对任一波长的保 护和无菌条件下方便地进行。
本文中提及的水相指除单独的水之外的以下溶液或分散液：(i)基 于水提取物的溶液或分散液，(ii)醇类的含量低于40％，其余为水的 溶液或分散液，(iii)在水中可溶或可分散的化合物(更好的解释是极性 物质)的溶液或分散液。
还必须理解，油相是指功能上可接受的任一疏水相(其导致稳定的 制剂，能够被引入食品中或用于其它特定的应用，实现预期的成功)， 例如其可以是蜂蜜或蜡。
由于水、醇类或油类的不同热性质以及相与相之间的传导系数， 还必须考虑可以改良水相或油相的热性质以降低微胶囊内部和外部 的热应激。微胶囊内部和外部的溶液和分散液的热能累积可用于保护 活性成分免于变质。可加入食品级微生物稳定剂。
本发明的一个实施方案涉及由微生物稳定剂覆盖的干燥微胶囊。 对于某些应用，特别是化妆品应用，一旦微胶囊是干燥的(或者甚至是 湿的形式)，它们可加入凝胶、油、用于香料的醇溶液等中。在本发明 的实施方案中，微胶囊含有香料，其用在香水中或给凝胶和沐浴乳或 皂提供香料。
微胶囊可用于所有类型的食品中，非限制性实例为以下实例：谷 类及衍生物(任选为穆兹利(muesli)、制乳的谷类)、面包糕点店、乳制 品、营养增补剂、糖类及衍生物(任选为巧克力、糖果、牛轧糖、杏仁 糖)、(低卡路里水平的)甜食、in régime食品和用于糖尿病的食品、油 类及衍生物、乳品及衍生物、禽蛋、蔬菜和蔬菜、蔬菜、水果、块茎 及衍生物、可食用的茎、零食、开胃品、可食用的根(任选为甘草)、 月桂树和野生产品、果脯、干果、肉类、香肠、鱼、贝和甲壳类及它 们的保藏食品、含酒精和不含酒精的饮料、碳酸饮料或非碳酸饮料、 液汁、糖浆、花蜜、香料、调味品、预煮食品、预加工食品(冷冻的大 量面包)、比萨饼、蜂蜜。
尽管本发明的主要和更有用的实施方案涉及(人和其它动物，甚至 是鱼，还有微生物)的食物供给，所述微胶囊也可用于其它目的，尤其 是包封化学信息素、引诱剂、拒虫剂、杀虫剂、稳定剂、除草剂、杀 真菌剂、杀菌剂、杀病毒剂(或预防病毒感染的物质)、基因载体(用于 基因治疗或用于重组DNA技术的目的)、香料、存在化合物-如混在 气体或液体中的-的指示剂、卫生间用化学品、避免摄取有毒产品的 收敛剂，还用于家用产品中。也可实施本发明以避免气味，调整壁材 料和其它因素，以最大程度地避免包封的物质的释放。这对来自鱼油 的富含ω-3/-6/-9的产品特别有用，以这种方式可将不期望的气味降至 最小。
在随后给出的实施例中，我们将看到，申请人已经使用了先进的 统计技术，其用于减少必需测试的数目，所述测试用于确定包封某些 化合物的最佳参数，或者用于得到想要的释放速度等，以选择独立变 量：构成壁的类型、粒径、乳化剂、搅拌器的旋转速度、搅拌器类型、 粘度调节剂等，以及代表制剂或微胶囊质量的独立变量。由于本发明 的重复涉及大量因素，因此推荐重复本发明的试验的这种类型的减 少。已经使用了具有阶乘分数设计的方差分析或多方差分析，优选阶 乘2、4、8、16、32和64阶、半饱和分数、I Box-Behnken设计、中 央化合物、Plackett-Burman。本发明是多于50000种的不同制剂的五 年的结果，然而，不采用这些统计学技术，试验次数将上升，至少上 升10个数量级的较大数。
对本发明的一个方面进行定义，其涉及采用多重微囊包封连续方 法制备微胶囊，其特征在于，(a)它们含有用于人类健康的有益活性 成分，(b)所述微胶囊的壁由至少两种水胶体的混合物组成，如聚合 和交联的混合物，这种水胶体是可食用的，(c)所述水胶体的聚合度、 交联和性质影响活性化合物的控制释放及针对氧和/或光和/或温度的 保护，(d)所述微胶囊在其内部含有油包水型乳剂，活性成分任选存 在于油相中，任选存在于其稀释的相中，或者任选存在于两相中，并 且(e)它们可含有较小的微胶囊(多重微囊包封，可能至少达5度多重 微囊包封)；所述微胶囊的粒径为0.1-100μm，优选为1-10μm，(f)它 们通过多重微囊包封连续方法，通过原位界面聚合制备。
根据所描述的方法形成的微胶囊可由于至少一种选自以下的因 素而释放它们的成分：pH、温度、压力、离子力、渗透、挥发、溶解 所述微胶囊壁的化合物的存在。
在相应于人消费的实施方案中，所形成的微胶囊应耐受常规营养 工业加工，特别是属于现有技术的与针对微生物、有害和/或不期望的 化合物的存在、制剂或食品所用的微生物沉淀器有关的操作，本发明 提供能对其进行诸如以下的单元操作的微胶囊：灭菌、微生物稳定、 巴氏消毒、UHT、臭氧处理、UV和γ射线处理、消毒辐射。
在另一实施方案中，所述制剂具有质量证明，其中分析表明不存 在重金属、所述生物活性物质的降解有毒产物、在制备所述生物活性 化合物中使用的农业化学产品以及其它对健康有害的物质。
在本发明的另一实施方案中，所述微胶囊用于提供营养组成代谢 物，有助于鉴别导致疾病的微生物的化合物(如选择性的组成代谢物或 具有放射活性的荧光或标记产品)，这些化合物任选地可通过培养方式 (p.例如琼脂马铃薯-右旋糖)中的pH变化而被释放，用于(相同微生物 培养，p.ej.)酶的制备或其它代谢产物(如醇或释放的酶)。
所述微胶囊可加入天然或人工甜味剂、盐、胡椒、香料和常用的 调味品，其加入的方式使得将所述调味品加入食品中提高所述食品的 营养值或健康效果。
为了更好地保护同一微胶囊的壁或其中所含的活性化合物，方便 地在所述微胶囊内部或外部包含防止紫外线的氧化作用的化合物。
优选的实施方案为在其中微囊包封的物质是科学家已知的化合 物，并且对于公众来说，其非常适于保持健康或预防疾病，或者甚至 适于治疗疾病。然而，当考虑请求保护某些化合物(主要是抗氧化剂和 脂肪酸ω-3、ω-6和ω-9)的应用的专利数量时，有必要说明，大多数这 些专利都是在这些化合物的有益效果被科学界在文章和会议上描述 后提出的。这样，本发明的目的是应用众所周知的健康化合物的微囊 包封形式，因为本发明的微囊包封方法能保持活性化合物的所有有益 性质(避免其降解)直到被消费者或任一其它动物最终消费。在本专利 中描述的实际上全部的产品已经作为有益产品被描述了对于20年， 或者甚至被人有意识地或无意识地利用其有益效果上千年，甚至自人 类起源就开始使用。从这个意义上来说，本发明的发明人选择了非限 制性的化合物组(组合或部分或单独使用)用于微囊包封，例如：绿茶、 红茶、可可饮料、红葡萄酒或葡萄或葡萄榨渣、苹果酒或苹果或苹果 汁、谷物胚或麸、胡萝卜、辣椒、葱、萝卜(尤其是辛辣的萝卜)，作 为长时间使用的食品。
同样地，也已解释过，本发明允许各种类型物质的制剂，新颖性 在于微囊包封的物质被可食用材料微囊包封，以比现有技术高得多的 程度，在工业加工或厨房中受到保护而免于降解，其原因是多微胶囊 的结构。在本发明的发明人进行大量试验之后，认为化学上类似的化 合物在加工中和在微胶囊中的行为类似(例如蒎烯(pineno)和柠檬烯， 是两种单萜，在微囊包封时它们的释放时间一定不存在差异，甚至倍 半萜copaene与单萜也不会有大的差别，或者具有另外的官能团的柠 檬烯氧化物，官能团不影响微胶囊的形成，在以激烈方式形成乳剂中 也不影响。在那些由于需要特殊乳化剂而化合物可能影响加工的情况 下，本发明的发明人预见到其中使用不同乳化剂、聚合物等的情况， 并且限于那些已经提及的-但在包封以下化合物或物质的过程中能 够克服任何困难)：
(a)一般的黄酮类化合物及衍生物：花色素(anthocyianidins)、原 花色素、低聚物-原花青素、异黄酮、查耳酮、儿茶酚、epihatechin、 没食子酸表儿茶精、表没食子儿茶精、没食子酸表没食子儿茶精、圣 草次苷、芸香甙、芦丁、柑桔苷、杨梅苷、橘皮苷、杨梅黄酮、圣草 酚、漆树黄酮、槲皮素、柚皮素、四羟黄酮、橙皮苷、山柰酚、异鼠 李黄素、芹菜苷配基、鼠李黄素、高良姜黄素、槲皮甙、槲皮素、香 叶木素、紫杉醇、高良姜精、鹰嘴豆素A、染料木素、圣草酚、白杨 黄素、羟基酪醇、橄榄苦苷、光甘草定(gabardine)、甘草查耳酮、大 豆黄素、罗汉松树脂酚、闭联异松树脂醇、肠二醇、肠内酯、牛尿酚、 去甲安哥拉紫檀素、luteoferol、木樨黄定、apiferol、芹菜定、无色矢 车菊素、紫杉醇、花葵素及其衍生物；
(b)一般的酚酸及衍生物(优选酯、苷、芸香糖苷和胺)：没食子酸、 芥子酸、丁香酸、咖啡酸、氯原酸、阿魏酸、(邻、间或对)香豆酸、 愈创木酚、(邻、间或对)甲酚、4-乙基苯酚、4-乙烯基愈创酚、丁香酚、 对羟基苯甲酸、原儿茶酸、香草酸、羟基肉桂酸、单宁、鞣花单宁、 没食子鞣质及其衍生物；
(c)esctructurally结合的酰胺，包括羟基肉桂酸和邻氨基苯甲酸 (avenanthramides)、燕麦甾醇、羟基肉桂酸和长链脂肪酸或醇-及其衍 生物；吲哚胺(例如褪黑激素)；菊糖、谷胱甘肽(glutation)；
(d)一般的萜类及衍生物：单萜、二萜、倍半萜、三萜、四萜， 包括类胡萝卜素：α-胡萝卜素、八氢番茄红素、环阿乔醇、β-胡萝卜 素、紫罗兰酮、玉米黄素、辣椒黄素、还原虾红素、角黄素(canthaxantin)、 堇黄素、玉米黄呋喃素、黄黄素、玉米黄二呋喃素、新黄质、阿朴- 胡萝卜素(apo-carotinal)、叶黄素及其衍生物；
(e)以下类型的一般用于食品的合成抗氧化剂及其衍生物：丁基 羟基茴香醚、2，6-二叔丁基羟基甲苯、叔丁基氢醌、2，6-二叔丁基氢醌、 2，6-二叔丁基-4-羟基甲基苯酚、2，4，5-三羟基苯丁酮 (2，4，5-trihidroxibutyrophenone)及其衍生物、生育酚(例如α、β、γ和δ生 育酚-及其衍生物)、生育三烯酚(α、β、γ和δ生育三烯酚-及其衍生 物-)；生育色原烷醇(Tocochromanols)；
(f)α-硫辛酸；辅酶Q-10；维生素；氨基酸(优选L-精氨酸、cistina 和cisteine)和它们相应的有机聚合物，如寡肽、肽-优选肌肽、肉毒 碱、谷胱甘肽-；酶；酶抑制剂(优选酚酶或氧合酶或脂氧合酶或脂酶 抑制剂；
(g)矿物质和微量元素，尤其是在体内参与氧化还原过程的那些， 如硒、锌、镁。
其中可选择上述化合物(或其它未知的化合物，或已知的但未在上 述天然来源中提及的化合物)的天然来源-考虑任一令人感兴趣的物 质(纯的形式或混合形式，以任一物理状态)的现有技术提取方法-可 选自在食品中应用的可接受的植物添加剂，考虑加入食品中的某些添 加剂，其为所述食品的基本部分的主要方面，或不是。本发明的发明 人考虑一些产生麻醉药的植物，其能在医学上使用。最后，以下目录 列出了具有已知治疗性质的植物，它们用于药草收集学(herboristery) 和副药学(para-pharmacy)。这是包封的天然a.i.的非限制性实例的目 录，其可通过分离化合物，也可通过水或醇溶液，也可是叶、根、茎、 花、果等的分散液，研磨至某适宜的粒径，也可为这种a.i.的冻干制 剂或以任一形式预加工。该目录非限制性地为：
紫苜蓿(Medicago sativa)、Pimenal officinalis、黄葵(Hibiscus abelmoschus)、古当归(Angelica archangelica)、安古树(Galipea officinalis)、茴芹(Pimpinella anisum)、阿魏(Ferula foetida)、阿魏油 (Ferula asafetida)、香蜂花(Melissa officinalis)、秘鲁香(Myroxylon pereirae)、甜罗勒(Ocimum basilicum)、Pimenta acris、佛手柑油(Citrus aurantium bergamia)、扁桃(Prunus amygdalus)、酸橙(Citrus aurantium)、 苦柑橘(Citrus aurantium amara)、胡椒(Piper nigrum)、黑刺李(Prunus spinosa)、花梨木(Aniba rosaeodora)、油茶(Camelia oleifera)、茶科茶 (Camelia sinensis)、苋蒿(Carum carvi)、小豆蔻(Elettaria cardamomum)、 角豆(Ceratonia siliqua)、胡萝卜(Daucus carota)、胡萝卜(Dacus carota sativa)、加斯加利拉树(Cascarilla)、旱芹(Apium graveolens)、黄春菊 (Anthemis nobilis)、洋甘菊(Matricaria chamomilla)、黄春菊(Anthemis nobilis)、茴芹(Anthriscus cerefolium)、菊苣(Cichorium intybus)、樟树 (Cinnamomum spp.)、丁香(Cinnamomum zeylanicum)、香茅(Cymbopogon nardus)、洋苏草(Salvia sclarea)、红三叶(Trifolium pratense)、可可 (Theobroma cacao)、咖啡树(Coffea arabica)、芫荽(Coriandrium sativum)、孜然芹(Cuminum cyminum)、蒲公英(Taraxacum officinale)、 接骨木(Sambucus nigra)、高山火绒草(Edelweiss)、意大利永久花 (Helichrysum italicum)、茴香(Foeniculum vulgare)、葫芦巴(Trigonella foenumgraecum)、拟南芥(Arabidopsis spp.)、紫苜蓿(Zingiber officinale)、 柚(Citrus grandis)、番石榴(Psidium guajava)、啤酒花(Humulus lupus)、 欧夏至草(Marrubium vulgare)、马薄荷(Monarda punctata)、神香草 (Hyssopus officinals)、素方花(Jasminum officinale)、大花茉莉(Jasminum grandiflorum)、刺柏(Juniperus spp.)、欧洲刺柏(Juniperus comunis)、 Eucaliptus officinalis、可乐果(Cola acuminata)、月桂(Laurus nobilis)、 醒目薰衣草(Lavandula spp.Lavandula hybrida)、红果杉(Taxus baccata)、柠檬(Citrus medica limonum)、肉豆蔻(Myristica fragans)、牛 膘草(Marjorana hortensis)、百里香(Thymus spp.)、香芹酚(Thymus officinalis)、野马郁兰(Thymus mastichina)、巴拉圭草(Ilex paraguarensis)、甘菊(Chamomilla recutita)、甘蔗(Saccharum officinarum)、肉豆蔻(Myristica fragans)、洋葱(Allium cepa)、甜橙(Citrus aurantium dulcis)、荷兰芹(Carum petroselinum)、欧亚薄荷(Mentha pulegium)、欧薄荷(Mentha piperita)、甘椒(Pimenta officinalis)、伞形梅 笠草(Chimaphila umbellate)、石榴(Punica granatum)、天竺葵 (Pelargonium spp.)、天竺葵(Pelargonium  graveolens)、迷迭香 (Rosmarinus officinalis)、藏红花(Crocus sativus)、洋苏草(Salvia app.)、 药鼠尾草(Salvia officinalis)、留兰香(Mentha spicata)、绿薄荷(Mentha viridis)、夏香薄荷(Satureia hortensis)、夏香薄荷(Satureja hortensis)、 马郁兰(Origanum majorana)、酸角(Tamarindus indica)、红橘(Citrus reticulate)、龙艾(Artemisia dracunculus)、山茶(Thea sinensis)、花园百 里香(Thymus vulgaris)、晚香玉(Polianthes tuberosa)、姜黄(Curcuma longa)、黑野樱树(Prunus serotina)、Thymus serpillum、冬香薄荷 (Satureja Montana)、依兰香(Cananga odorata)、莪术(Curcuma zedoaria)、大车前(Plantago major)、猴面包树(Adansonia digitata)、菠 萝(Ananas comosus)、面包树(Artocarpus altilis)、番木瓜(Carica papaya)、番茄(Lycopersicon esculentum)、Cephalophus spp.、欧洲越橘 (Vaccinium myrtillus)、Thymus aragonensis、百里香(Thymus spp.)、来 檬(Citrus aurantiifolia)、葡萄柚精油(Citrus paradisi)、甜瓜(Cucumis melo)、南瓜(Cucurbita spp.)、葡萄(Vitis spp.)、葡萄(Vitis vinifera)、芒 果(Mangifera indica)、唇形科(Lamiaceae)、彩叶草(Coleus)、Hedeoma、 山香属(Hyptis)、益母草(Leonurus)、绣球防风属(Leucas)、地笋属 (Lycopus)、欧夏至草属(Marrubium)、薄荷属(Mentha)、马薄荷属 (Monarda)、紫苏属(Perilla)、夏枯草属(Prunella)、洋苏草(Salvia)、草 石蚕(Stachys)、石蚕属(Teucrium)、百里香属(Thymus)、野麻(Cannabis spp.)、毛花洋地黄(Digitalis lanata)、春福寿草(Adonis vernalis)、七叶 树(Aesculus hippocastanum)、大叶白蜡(Frazinus rhychophylla)、大花龙 牙草(Agrimonia supatoria)、蛇根木(Rauvolfia sepentina)、穿心莲 (Andrographis paniculata)、槟榔(Areca catechu)、颠茄(Atropa belladonna)、刺檗(Berberis vulgaris)、紫金牛(Ardisia japonica)、桦木 芽(Betula alba)、菠萝(Ananas comosus)、茶(Camellia sinensis)、樟树 (Cinnamomum camphora)、喜树(Camptotheca acuminata)、莓叶委陵草 (Potentilla fragarioides)、古柯(Erythroxylum coca)、罂粟(Papaver somniferum)、秋水仙(Colchicum autumnale)、麦角菌(Claviceps purpurea)、紫花洋地黄(Digitalis purpurea)、毛花洋地黄(Digitalis lanata)、黄海罂粟(Glaucium flavum)、罂粟(Papaver somniferum)、棉 (Gossypium spp.)、莨菪(Hyoscyamus niger)、喜树(Camptotheca acuminata)、卡瓦(Piper methysticum)、北美山梗菜(Lobelia inflata)、野 百合(Crotalaria sessiliflora)、烟草(Nicotiana tabacum)、毒扁豆 (Physostigma venenosum)、麻黄(Ephedra sinica)、金钠鸡树(Cinchona ledgeriana)、杜鹃花(Rhododendron molle)、蔓陀螺(Datura spp.)、短叶 红豆杉(Taxus brevifolia)、马钱子(Strychnos nux-vomica)、甜菊(Stevia rebaudiana)、可可(Theobroma cacao)、缬草(Valeriana officinalis)、育 亨(Pausinystalia yohimbe)、麻黄(Ephedra spp.)、山楂(Crataegus oxyacantha)、金缕梅(Hamamelis virginiana)、白毛茛(Hydrastis Canadensis)、贯叶连翘(Hypericum perforatum)、Potentilla erectra、杜 香(Ledum palustre)、洋苏草(Salvia officinalis)、甘菊(Chamomilla recutita)、熊果(Arctostaphylos uva)、杜仲(Eucommia ulmoides)、紫贻 贝(Mytilus galloprovincialis)、过沟菜蕨(Diplazium esculentum)、Manihot utillissima、Sauropous androgynus、三木果(Terminalia arjuna)、屈曲花 (Iberis amara)、山楂(Crataegus spp.)、草莓树(Arbutus unedo)、洋蓟 (Cynara scolymus)、尾穗苋(Amaranthus caudatus)、Alchornea laxiflora、 高良姜(Alpinia officinarum)、红发夫酵母(Xanthophyllomyces dendrorhous)、英国山楂(Crataegus monogyna)、云南红豆杉(Taxus yunnanensis)、婆萝密(Bacopa monniera)、Cistus albidus、甜罗勒 (Ocimum basilicum)、迷迭香(Rosmarinus officinalis)、花园百里香 (Thymus vulgaris)、红木(Bixa orellana)、积雪草(Centella asiatica)、荨 麻(Urtica dioica)、茶树菇(Agrocybe aegerita)、光山楂(Crataegus laevigata)、山香薄荷(Satureja hortensis)、藏红花(Crocus sativus)、葫 芦(Coccinia indica)、马来丝虫(Brugia malayi)、悬枸子(Rubus spp.)、 水飞蓟(Silybum marianum)、野麻(Cannabis spp.)、大麻(Cannabis sativa)、贯叶连翘(Hypericum perforatum)、四川胡椒(Rhus coriaria)、 油橄榄(Olea europaea)、Cyclopia intermedia、银杏(Ginkgo biloba)、洁 丽香菇(Lentinus lepideus)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、 Sargassum micracanthum、辐射松(Pinus radiata)、松(Pinus sp.)、绿豆 (Phaseoulus mungo)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)、豇豆(Vigna sinensis)、 绿豆(Phaseolus aureus)、扁豆(Dolichos lablab)、木豆(Cajanus cajan)、 蚕豆(Vicia faba)、双花豆(Dolichos biflorus)、菜豆(Phaseolus lunatus)、 Phaseolus aconitifolius、豌豆(Pisum sativum)、四棱豆(Psophocarpus tetragonolobus)、落花生(Arachis hypoagea)、油菜(Brassica spp.)、红菜 苔(Brassica campestris)、欧洲油菜(Brassica napus)、缬草(Valeriana officinalis)、紫雏菊(Echinacea purpurea)、白紫雏菊(Echinacea pallida)、 狭叶紫锥菊(Echinacea angustifolia)、Glcyrrhiza glabra、Seronea repens、 大果越橘(Vaccinium macrocarpon)、菊蒿(Tancetum parthenuum)、菊蒿 (Tancetum parthenuum)、大果越橘(Vaccinium macrocarpon)、谷类、果 种、silvestre bays、豆科(leguminosae)、绿茶、红茶和能产生长链不饱 和脂肪酸的微生物。
发达国家中关注的另一社会问题是益生微生物的消费，这种微生 物理解为由于其代谢或通过其在(外来)有机体中存在而抗感染(尤其 是念珠菌病)、降低胆固醇和甘油酯水平，并帮助消化和肠运动。通常， 将这些微生物引入酸乳酪和其它乳制品中，但是通过本发明，我们能 够包封存在于所谓的益生原食品中的活细菌、酵母和霉菌，并在食品 工业的微囊包封和加工后，如均化和巴氏消毒及某些类型的烹调或家 用处理后保持活力。这暗示了新颖性，以将此益生微生物加入多种食 品中。优选地，我们非限制性地选择以下微生物：益生菌，任选为酸 性乳酸菌，更优选选自：干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、嗜酸乳酸杆 菌(L.acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、胚芽乳杆菌(L. paracasei)、加氏乳杆菌(L.gasseri)、发酵乳杆菌(L.fermentum)、胚芽 乳杆菌(L.plantarum)、唾液乳杆菌(L.salivarius)、卷曲乳杆菌(L. crispatus)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(L.bulgaricus)、发酵乳杆菌(L. fermentum)、路氏乳杆菌(L.reuteri)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、双歧双歧杆菌(B.bifidum)、唾液链球菌嗜热亚种 (Streptococcus termophilus)、牛链球菌(S.bovis)、耐久肠球菌 (Enterococcus durans)、粪肠球菌(E.faecalis)、鹑鸡肠球菌(E. Gallinarum)、大肠杆菌(Escherichia coli)、费氏丙酸杆菌 (Propionibacterium freudenreicheii)或者插入了有益基因的基因修饰的 细菌或真菌或酵母，所述有益基因表征益生菌的有益性质，还有根据 前述权利要求的任一适宜组合的生物活性物质的微囊包封方法，其特 征在于，存在于所述制剂中的至少一种所述生物活性物质为益生酵 母，优选选自：啤酒糖酵母(Saccharomyces cerevisiae)、马克斯克鲁维 氏酵母(Kluyveromices marxianus)、深红酵母(Rhodotorula rubra)、 Sporobolomyces puniceus、出芽短柄霉(Aureobasidium pullulans)、 Leucosporidium scotti，还有微囊包封方法，其特征在于，存在于所述 制剂中的至少一种所述生物活性物质为益生真菌，优选存在于干酪中 或与其共同存在或来自其的那些真菌。
科学界对ω3/6/9FA有兴趣，政府、大学和医学推动的研究也对 其感兴趣，证实了这些化合物的益处。许多专利涉及从这些研究中推 出的结果的保护(其也包括不同类型的ωFA的确定的比例)。本发明不 涉及该专利领域，而是应用本发明的微胶囊来保护，其比现有技术有 格外更好的性能。在考虑了其在脑部尤其是皮层(其中存在智力)和其 它部位(例如视网膜)发育中的化学和生物作用之后，在这方面，本发 明的发明人研究了用新型化合物微囊包封的稳定性和适宜性，所述化 合物通过用鞘脂，更确切说用脑苷脂酯化UFAs而形成。就我们所知， UFAs与脑苷脂的组合尚无先例，更不要说其在共价键合化合物(A)和 (B)中的应用，例如，本发明的发明人根据Dondoni等人(1990)，J.Org. Chem.55(5)：1439-1446和Schmidt和Zimmermann(1986)Tetrahedron 27(4)：481-484的改良合成方法合成。
我们合成了化合物B，R3：CH2CH3，R4： CO-(CH2)2-(CH2-CH＝CH)4-CH2-CH3，，(以最初的花生四烯酸含量为基 准)收率为35％。由于所合成的化合物量少，我们只能得到LC-MS数 据(Agilent 1100系列LC/MSD Trap)，证实峰值具有鞘脂侧和典型的花 生四烯酸片段的特征分段峰(M/Z：79、67、91、55、108、318[M+])。 在酯化和苯甲酰化之后还分析了鞘脂支链的分析。同样，我们没有观 察到在205nm处的UV吸收，因此表明双键保持无反式异构化。当 用化合物A酯化stearidonate时，结果是类似的，在R1位，导致R2 为H的合成。因此，在本发明中，我们提供了微囊包封方法，其特征 在于，至少一种a.i.(生物活性物质)选自相应于化学结构(A)和(B)的化 合物，包括其全部对映异构体和/或异构形式。
化合物A

其中，
R1为ω-3或ω-6脂肪酸酯或ω-9脂肪酸酯
R2为ω-3或ω-6脂肪酸酯
化合物B

其中，
R3为ω-3或ω-6或ω-9脂肪酸酯
R4为ω-3或ω-6或ω-9脂肪酸酯或寡糖共价键
化合物A和B能够将到目前为止尚未描述过的其它来源的脑苷脂 和/或鞘脂递送到体内。
一个实施方案为微囊包封方法，其特征在于，存在至少一种由式 (A)和/或(B)定义的化合物；以及一种微胶囊的制剂，其用于胎儿和母 乳喂养婴儿的潜在智力开发-通过母体摄食适宜的其中加入了所述 微胶囊的制剂的营养载体，并用于根据前述权利要求的供婴儿和儿童 用的牛奶制剂中，其特征在于，其含有ω-3和ω-6脂肪酸，二者比例 为0.5-10.0，优选1.4-5.7，并含有0.005％-1％的脑苷脂，和/或任选含 有化合物(A)和/或(B)，还任选含有ω-9脂肪酸；以及根据前述权利要 求的任一适宜组合的微胶囊的制剂，其用于婴儿配制食品，其特征在 于，不加入ω-6脂肪酸，而单独任选地加入1.25％的γ-亚麻酸。
关于脑苷脂的比例，用于增加大脑皮层和智力发育的微胶囊的制 剂的特征在于，其含有ω-3和ω-6脂肪酸，二者优选比例为1.4-5.7， 并且还含有0.005％-1％的脑苷脂，任选含有化合物(A)和/或(B)。
优选用于本发明的脂肪酸指下组-也用于A和B的取代基-不限 于：油酸、steradionic、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十二碳五 烯酸、亚油酸、共轭亚油酸、γ-亚麻酸、α-亚麻酸、双高-γ-亚麻酸、 花生四烯酸和油酸。
这些FA可以与其它化合物缀合，所述化合物刺激它们在人体内 先于血转运的释放，这些FA可能是键合的(保留或未保留它们的全部 不饱和性)，和/或优选与单酸甘油酯、甘油二酯和甘油三酯、磷脂、 鞘脂、髓磷脂、胺、醚、糖、苷、寡糖、氮化和/或氧化和/或含磷和/ 或硫化的杂环或取代的芳环共价键合。
由于花生四烯酸的高度不饱和性(4)，其非常不稳定，其它UFAs 也一样，本发明的微胶囊保护原始分子的完整性，直到其被消费者使 用。在抗氧化剂保护方面，我们提出了一种制剂，其含有微胶囊的分 散液，其特征在于，易氧化的活性成分，特别是不饱和脂肪酸，被其 它活性成分保护，所述其它活性成分可由确定的化学结构定义或者是 具有抗氧化性质的提取物或液汁，作为抗氧化剂，它们在水相中或在 油相中，优选在所述易氧化的物质存在的相中具有疏水性。
本发明的单独方面为在优选的实施方案中，在pH＜3时(因此，仅 在胃中释放活性成分)释放活性成分的能力。根据水胶体的试验选择组 合(考虑其生物可降解性)，其可以是定制的微胶囊，在pH高于3.5时 微胶囊壁不打开，微胶囊壁在pH低于3时发生快速破裂(并随后释放 成分)，或者其特征在于，微胶囊壁的分解和成分的释放发生在动物胃 环境中，微胶囊壁材料根据动物胃的pH范围或其酶消化能力适当选 择。
长链FA(多于6个碳原子)存在于天然来源中，ω-6和ω-9在植物 中常见，但是在植物中较难找到ω-3，它们主要存在于鱼中。除了ω-6 和ω-9的常规(现有技术)来源，ω-3的其它来源为：
(a)植物来源：紫草科(Boraginaceae)、(Borago spp.、琉璃苣(Borago officinalis))；亚麻科(Linaceae)(亚麻(Linum usitatissimum)、Linum arvense、Linum sativum)；Onograceae(月见草(Oenothera biennis))；茶 瀌子科(Grossulariaceae)(黑穗醋栗(Ribes nigrum))、玉蜀黍(Zea Mais)、 路地棉(Gossypium hirsutum)、红花(Carthamus tinctorius)、大豆(Glycine max)，
(b)优选藻类：江蓠科(Graciliariceae)(江蓠(Gracilaria spp))；杉 藻科(Gigartinaceae)(Iidaea spp.)；Kallymeniaceae(Callopyllis variegata)；丛梗藻科(Durvillaceae)(Durvillaea antartica)；红翎菜科 (Solieriaceae)(Euchema cottoni)；石花菜科(Gelidiaceae)(石花菜 (Gelidium spp.))；Lossoniaceae(Lesonia nigrescens)；Gigantinaceae (Gigartina spp.)；巨藻科(Lessoniaceae)(巨藻(Macrocystis spp.))；红毛 菜科(Bangiaceae)(紫菜(Porphyra spp.))；Crypthecodinium spp，
(c)动物来源：常规的鱼油，优选：Engaulidae(Lycengraulis olidus)；鲱科(Clupeidae)(沙丁鱼(Sardina pilchardus))；竹刀鱼科 (Scomberesocidae)(竹刀鱼(Scomberesox saurus scombroides))；金眼鲷 科(Berycidae)(红金眼鲷(Beryx splendens))；鯷科(Engraulidae)(秘鲁鳃 (Engraulis ringens))；蛇鳗科(Ophichthyidae)(Ophichthus spp.)；鮨科 (Serranidae)(Hemilutjanus macrophthalmus)；鲭科(Scombridae)(金枪鱼 (Thunnus spp.)、en especial、黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)、长鳍金 枪鱼(Thunnus alalunga)、大眼鲷金枪鱼(Thunnus obesus)；石首鱼科 (Sciaenidae)(沙犬牙石首鱼(Cynoscion analis))；真鲨科(Carcharhinidae) (蓝鲨(Prionace glauca))；诺氏鱼科(Normanichthyidae)(诺氏鱼 (Normanichthys crockeri))；鲈科(Percichthyidae)(Polyprion oxygeneios)；槽背鱼科(Nototheniidae)(小鳞犬牙南极鱼(Dissostichus eleginoides))；天竺鯛科(Apogonidae)(Epigonus crassicaudus)；方头鱼 科(Branchiostegidae)(Prolatilus jugularis)；鲭科(Scombridae)(金枪鱼， 黄鳍金枪鱼、长鳍金枪鱼、大眼鲷金枪鱼，狐鲤(Sarda spp.)，智利狐 鲣(Sarda chiliensis)、Scomber japonicus peruanus)、石首鱼科(Sciaenidae) (沙犬牙石首鱼(Cynoscion analis))、真鲨科(Carcharhinidae)、诺氏鱼科 (诺氏鱼)；鲈科(Polyprion oxygeneios)；槽背鱼科(Nototheniidae)(鱸魚 (Bacalao de profundidad)；天竺鯛科(Epigonus crassicaudus)；方头鱼 科(Prolatilus jugularis)；唇指鲶科(Cheilodactylidae)(Cheilodactylus gayi)；鳕科(Gadidae)(鳕鱼(salilota australis))；石鲈科(Pomadasyidae)； 鮋科(Scorpaenidae)；鮨科(Serranidae)；鲤科(Cyprinidae)；板机魨科 (Monacanthidae)；长鲳科(Centrolophidae)；鼬鳚科(Ophidiidae)；鮋科 (Scorpaenidae)；鲯鳅科(Coryphaenidae)；Channichthydae；石首鱼科 (Sciaenidae)；单指鲶科(Aplodactylidae)；鰺科(Carangidae)(Trachurus symetricus murphyi)；鲆科(Bothidae)(Paralichthys microps)；鲻科 (Mugilidae)；鲱科(Clupeidae)；Priacathidae；无须鳟科(Merlucciidae) (Merluccius gayi gayi、澳大利亚无须鳕(Merluccius australis))； Macruronidae(南美尖尾无须鳕(Macruronus magellanicus))；鳕科 (Gadidae)(南蓝鳕(Micromesistius australis))；鱾科(Girellidae)；棘鲷科 (Trachichthyidae)；鰺科(Carangidae)；舵魚科(Kyphosidae)；叶吻银鲛 科(Callorhynchidae)；隆头鱼科(Labridae)；长尾鳕科(Macrouridae)； 银汉鱼科(Atherinidae)；喉盘鱼科(Gobiesocidae)；长尾鲨科(Alopiidae)； 南乳鱼科(Galaxiidae)；鳐科(Rajidae)；乌鲂科(Bramidae)；鲹科 (Carangidae)；南极鳕鱼(Nototheniidae)；Scianidae；鲻形 科 (Mugiloididae)；鲑科(Salmonidae)(Salmo spp.，大西洋鲑(Salmo salar)、 太平洋鲑鱼(Oncorhynchus spp.)、银鲑(Oncorhynchus kisutch)、硬头鳟 (Oncorhynchus mykiss)、虹鳟鱼(Oncorhynchus tshawytscha))；鲱科 (Clupeidae)(沙丁鱼(Sardinops spp.)、沙丁鱼(Sardinops sagax)、鲱鱼 (Clupea bentincki))；石鲈科(Pomadasyidae)；蛇鲭科(Gempylidae)；鼠 鲨科(Lamnidae)(长尾鲨科(Isurus spp.)，灰鲭鲛(Isurus oxyrinchus))；皱 唇鲨科(Triakidae)；胎鳚科(Clinidae)；菱鲆科(Scophthalmidae)；隆头 鱼科(Labridae)；更优选大西洋鲭(Atlantic mackerel)、鯷鱼(Engraulis encrasicholus)、鯥(Pomatomus saltatrix)、狐鲣(Sarda sarda)、沙丁鱼、 大西洋油鲱(Brevoortia tyrannus)、大鳞油鲱(Brevoortia patronus)、 Chloroscombrus chrysurus、扁舵鲣(Auxis thazard)、大西洋鲭鱼(Scomber scombrus)、太平洋鲭鱼(Scomber japonicus)、Alosa aestivalis、鲱鱼 (Clupea harengus)、脂眼鲱(Etrumeus teres)、水珍鱼(Argentina silus)、 斑点叉尾 (Ictalurus punctatus)，
(d)微生物源，优选：啤酒糖酵母(Saccharomices cerevisiae)、大 肠杆菌、Schizochytrium spp.、真菌破囊壶菌(Thraustochytrium aureum)、 破囊壶菌(Thraustochytrium roseum)、Thraustochytrium striatum、 Mortiriella spp.、Phytium spp.、曲霉(Aspergillus spp.)、构巢曲霉 (Aspergillus nidulans)、聚多曲霉(Aspergillus sydowi)、镰刀菌(Fusarium spp.)、水贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。
本发明的一个实施方案为一种微囊包封的制剂，其用于加强神经 元发育，特别是脑，更特别是胎儿、新生儿、婴儿和儿童中，其特征 在于，存在至少一种式A和/或B的化合物。
另一实施方案是使用微囊包封的制剂来加强新生儿和母乳喂养 婴儿的潜在智力，其通过母体摄食适宜的其中加入了所述微囊包封的 制剂的食品实现。而且对于婴儿食品和牛奶，其特征在于，其含有ω-3 和ω-6脂肪酸，二者比例为0.5-10，优选1.4-5.7，并且其含有0.005％-1％ 的脑苷脂，和/或任选含有A+B。存在许多推荐的ω-3与ω-6的比例， 但没有牢固的科学基础。另一方面，存在囊括所有可设想的比例的组 合的专利。本发明的发明人采用了被不同国家的医学机构更多接受的 范围。本发明的新颖性在于引入了脑苷脂和任选的化合物A+B，以 及给消费者提供UFAs的方式，而不存在不良或味道不佳(off-aromas) 或UFAs降解产物。本发明的发明人已经证实，在工业方法中用ω-3 制备奶，在均化和巴氏消毒期间损失ω-3的最初含量的50％。在中试 工厂中证实，工业上在最差情况下，本发明的微胶囊的ω-3最大损失 为7％。我们还请求保护微胶囊的制剂，其用于婴儿配制食品，其特 征在于，不加入ω-6脂肪酸，而单独任选地加入1.25％的γ-亚麻酸。另 外，在优选的实施方案中，我们使用用于增加大脑皮层和智力发育的 微囊包封的制剂，其特征在于，其含有ω-3和ω-6脂肪酸，二者优选 比例为0.5-10.0，更优选1.4-5.7，并且含有0.005％-1％的脑苷脂，和/ 或任选含有化合物(A)和/或(B)。
本发明的发明人已经配制了一种饮料(软饮料)，其含有微胶囊的 制剂，其特征在于，所述饮料含有微胶囊，后者在油相中含有ω-6和/ 或ω-3脂肪酸，任选地在所述微胶囊的水相中或在所述微胶囊的油相 中或在两者中加入抗氧化剂，并且所述饮料还含有香料或葡萄、菠萝 和至少一种柠檬水果的提取物，所述柠檬水果优选选自橘子、桔子、 蜜桔、柠檬、酸橙，并且在工业加工后所述ω-3和ω-6脂肪酸在所述 饮料中保持稳定至少达一个月，ω-3损失小于7％，所述工业加工包括 常规微生物稳定加工，如巴氏消毒。在多于一百次尝试掩蔽ω-3源的 臭味(off-flavor)的试验后，本发明的发明人尝试了最佳方案，品尝小 组不能检测鱼油或亚麻油味的存在。本发明的另一个实施方案是含有 本发明的微胶囊的液汁，其特征在于，(a)所述微胶囊含有ω-3脂肪酸， 其来自可食用的亚麻油的市售制剂；(b)所述油相含有亚麻油和基于 大豆化合物的乳化剂；(c)所述水相含有藻酸盐和/或阿拉伯胶和/或 kappa-carrageenate和/或瓜尔胶类型的不同小类水胶体的混合物，还含 有HLB为10-14的可食用的第一乳化剂以及可食用的粘度调节剂；(d) 所述微胶囊的制剂的pH为3-6，新制备的微胶囊的粒径中值为1-10 μm；(e)所述液汁的主要成分是橘汁。任选地，构成所述液汁的水果 选自：柠檬、菠萝、葡萄，且其含有(全部数据均指150mL的液汁) 20-200mg的ω-3、10-100mg的ω-6和5-50mg的ω-9，其中ω-3∶ω-6 为约3∶1。
采用水胶体或水凝胶类型，本发明的发明人能够配制微胶囊，所 述微胶囊在低pH(例如在人胃中存在的低pH)下受到破坏，或耐受低 pHs(并且能够通过胃-对某些激素例如胰岛素而言方便-当在肠中 pH升高时微胶囊壁受到破坏)，并能够配制壁，其可被细菌攻击(例如 使用淀粉作为壁材料，淀粉酶将会破坏所述壁)，或被咀嚼压力攻击， 或者在唾液淀粉酶存在下凝胶化，以极快方式释放香料(例如甲醇)。 由于本发明并不限于共人消费，因此所述微胶囊可以设计用于各种动 物的特定环境(例如猪在口中含有许多淀粉酶，其不同于人，用淀粉作 为壁材料配制的微胶囊将会适于给食品带来更好的味道，以增加食品 摄取，因此有益于农民)。
所述微胶囊和适宜的制剂是相容的，并且对于其中活性成份来自 农业(包括水产业和动物畜牧业的术语)“生物”和/或“生态”的食品 是期望的，因为这符合健康饮食，而无非自然产物的介入。显然，在 此实施方案中，并且在许多其它实施方案中，所有材料必须都是可食 用的。
在另一个实施方案中，以与前述段落中提到的精神完全相反的精 神，所述制剂用于活性成分GMOs的obtention，其为杂交植物品种或 通过人选择得到，以及由任一技术选择的微生物培养物。此实施方案 是可能的，但不是期望的，因为消费者通常回避GMOs。
除了营养应用以外，由本发明的方法制备的微胶囊可包含于药物 制剂中，与所述微胶囊中不存在的活性化合物组合，或者所述微胶囊 (或微胶囊的制剂)中存在的活性成份是所述药物制剂中的唯一活性成 份，术语药物制剂也包括用于放射医学造影、放射疗法、温热疗法或 用任一波长的光进行的治疗的接种的物质。在优选的实施方案中，放 射医学造影非常适于与本发明的微胶囊组合(用作a.i)用于医药目的 (例如由于微胶囊壁材料对血浆的酶敏感而降解来检测出血)，其允许 经过胃而不被降解，并最后排泄。
因为许多健康活性成份易分解，尤其是易氧化，因此一种实施方 案为保持胶囊与食品或饮料分离，直到最终消费产品，任选地用在压 力下从微胶囊的制剂中释放进入食品或饮料的贮器，优选为干燥的。
为了更好地理解本发明，提供19幅附图，当阅读它们所指的实 施例时，该解释会被更好地理解。
实施例
给出以下实施例以阐明本发明的目的，不能认为它们是对请求保 护的制剂的限制，在此范围内，此处给出的实施例在实验室制剂中和 /或在批量生产中的改变易于实现。
而且，当用本文提供的信息制备了制剂时，为了明确测定，申请 人已经开发了专利方法来分析由本文公开的方法制备的制剂。这些分 析方法也是可获得的，以符合批准新上市产品的健康和政府规则。
实施例1
在该实施例中，我们描述了用于制备适用于桔汁的制剂的活性 成份。
1.1-成分
油相                     [％]
Flaxoil                   25.00
Emulpur                   1.00
水相
蒸馏水*                  20.00
迷迭香提取物              2.80
胡萝卜汁                  7.30
Orlistat(脂肪酶抑制剂)    1.00
1.2.-包封和乳化成分
                          [％]
藻酸盐溶液**             25.00
瓜尔胶(4％在水中)         15.40
Lamegin                   2.50
Keltrol                   0.30
*加0.5％ CaCl2，0.1％抗坏血酸，0.08％ nipagil[全部在水中]
**藻酸盐溶液＝5％ Manucol LB在水中
1.2方法：
-油相            在瓶中称重，在超声浴中均化
-水相            在瓶中称重，在超声浴中均化
-W/O乳剂         将油然后将水相置入反应器中，
                     在7350rpm下用搅拌器制备乳剂，25分钟
-(W/O)/W乳剂         加入藻酸盐溶液，在35℃和350rpm下搅拌
-微粒的减少          在加入阿拉伯胶不久之后，在35℃和8350
                     rpm下搅拌
-粒径的进一步降低    不久后，加入Lamegin，在35℃和8135rpm
                     下Ultraturrax
-微胶囊的固化        在75℃和3000rpm下120分钟
-粘度调节剂的加入    20min后，在5000rpm下加入Keltrol
-冷却                停止水浴，冷却至5-10℃
-填充                直接填充在包装中。
生理化学参数：
pH＝6.5
粒径：
D(v；0,5)：12,57μm[中值]    D(v；0,9)：26,39μm[百分数90]
实施例2至11
在表1中，我们给出了一系列微囊包封方法。这些微囊包封按照 上述的一般方法进行。用以前的专利中提供的数据在许多情况下不足 以重现或得到请求保护的制剂。
测试的组分和结果都列于表1中。
制剂组分活性成分为描述的在油相中的那些和在水相中的那些。 所提供的粒径数据对应于百分位数50-D(v；0,5)-和百分位数90-D (v；0,9)-。
我们可以在最后一行中看到所得制剂的质量。如我们可以看到 的，组合物中的小的改变可能导致配制的微囊包封材料不良。
实施例12
在本实施方案中，我们显示了微胶囊在某个pH下的释放。微胶 囊在胃pH下分解，而微胶囊在酸乳酪中保持完整，酸乳酪也是酸性 的(但是没有在胃中酸性高)。
本实施例的目的是测试存在于益生酸乳酪中的(根据本发明的)微 囊包封核黄素的释放速率。
已经按常规、手工方式，使用“内部”发酵培养物制备(20kg)酸 乳酪，所述培养物保留自前次酸乳酪生产。
制剂的组成(相对于总活性成分的百分比)为：
-核黄素100μg/kg酸乳酪(少于总活性成分的0.1％)
-干酪乳杆菌10％(每平方厘米有500个菌落的培养物在水中的 溶液)
-燕麦提取物90％
根据一般包封方法制备制剂，用藻酸盐作为交联水胶体，用 Ceratonia siliqua胶和arbabic胶的混合物作为保护水胶体。
在试验中包括未包封材料以显示差异，其也作为空白样品。
A)在酸性介质中测试(1HCl，pH 2.5下缓冲)-在胃中的环境
B)在pH 4.0下和等渗溶液中测试维生素B2的递送速率-在有机 农场中生产的有机酸乳酪中的环境。
A-在酸性介质中的结果-
其清楚地显示了维生素B2在胃环境中从制剂GAT 032541中的释 放。
30分钟后释放的核黄素的平均量为21.5μg/kg[也就是说，加权样 品的转化为约30-40％]；60分钟后，释放25.7μg/kg[也就是说，加权 样品的转化为约40-50％]。
如所预期的，在未包封材料中的释放速率较高。30分钟后，维生 素B2的平均释放量为46.8％[也就是说，加权样品的40-50％]；60分 钟后，释放47.2μg/kg[也就是说，加权样品的转化为约65-75％]。
空白没有显示核黄素的任何释放(气-液色谱峰)。
B-在酸乳酪介质中的结果-
在酸乳酪中保存至少一个半月，制剂GAT 032541没有释放任何 维生素B2。
30分钟后，未包封的样品显示0.021μg/g的轻微释放，60分钟后 为0.032μg/g。
空白样品没有显示维生素B2含量的任何显著变化。
实施例13
本发明的一个创新方面是与本领域的微囊包封和甚至任何其它 制剂方法相比，其保持活性成分较长时间稳定的能力。显然，这并不 适用于稳定的活性成分(例如矿物质)。
我们已经进行了贮存能力的测试，同时保持活性成分不变。
包封方法基本上如实施例1给出的，不同之处在于用黄原胶(来自 Fluka)形成第二壁，乳化剂为Softenol3767(1％)，粘度调节剂为 Glycosperse(1％)，ω-3和ω-6脂肪酸的来源为鱼油(Clupea harengus)。
此试验的结果在下表中显示，其中我们注意到脂肪酸在45℃ 60 天的稳定性是异常的。   棕榈酸   在油中的％   硬脂酸   在油中的％   油酸   在油中的％   亚油酸   在油中的％   α-亚麻酸   在油中的％   ω-3酸   在油中的％  d＝0  d＝30；4℃  d＝30；25℃  d＝30；45℃  d＝60；45℃   1,1   1,1   1,1   1,1   1,1   1,4   1,4   1,4   1,3   1,3   2,9   2,7   2,6   2,6   2,4   2,8   2,6   2,6   2,5   2,5   2,7   2,5   2,6   2,5   2,4   7,8   7,8   7,7   7,7   7,5
实施例14
与开发新制剂相关的主要问题是难于从过去的制剂中推断出真 实的结果。就许多组分(和量)可存在于微囊包封中而言，良好统计学 验证所需的试验数量非常巨大。我们已经用与试验设计相关的本领域 统计学技术克服了这个问题。我们已经使用了Folded Plackett-Burman 试验设计(我们仅对主要因素感兴趣，而对这种分析目的的相互作用不 感兴趣)，其具有3个中心点和可接受水平的自由度误差(19)。其进行 27次试验(而非常规试验设计中所需的64次-所有组合-)以研究以下 因素在最终制剂中的影响：
-油相(葡萄籽油[50％]+鲑鱼油[50％])：2种水平，10％-30％
-天然提取物(葡萄痕(grape marks)[50％]+除去咖啡因的绿茶 [50％])：2种水平，10％-20％
-藻酸盐溶液：2种水平，5％-10％
-角叉菜胶溶液：2种水平，5％-10％
-丝兰提取物：2种水平，3％-5％
-均化：2种水平，存在-不存在
-喷雾干燥：2种水平，存在-不存在
在本例中，独立变量为反映用于工业目的的微囊包封的适宜性， 特别地，用于加入软饮料中。为了评价这种“可接受指数”，我们使 用了如下表达式：

通过一系列试验，我们做出了表格，其为每种粒径(和其它变量) 给出了0至1的数值。“密度”(不是密度的实际意义)可以具有数值0， 因为在定义的范围之外，不考虑密度；而且，可接受指数取决于其它 变量的约束(例如如果未反应的聚合物的程度高于40％，我们给予数值 为0的可接受指数，不考虑其余参数的数值)。已经具体为软饮料开发 了用于解释每种数值重量的恒定值。显然在这些试验设计的背后涉及 大量工作。
通过这种方法，我们得到了(Statgraphics)如下的随机设计，“-1” 为较低水平，而“1”为较高水平(最后一栏，可接受指数)：
  次数/测试   油   植物   藻酸盐   黄原胶   丝兰   Hom.   喷雾   可接受指数   1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   0,0   1,0   1,0   1,0   1,0   -1,0   1,0   0,0   -1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   0,0   -1,0   1,0   -1,0   0,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   0,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   0,0   1,0   1,0   1,0   0,0   -1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   0,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   -1,0   -1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   1,0   0,0   1,0   1,0   -1,0   0,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   -1,0   0,0   1,0   1,0   1,0   1,0   1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   0,0   -1,0   -1,0   -1,0   0,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   0,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   0,0   1,0   -1,0   -1,0   0,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   0,0   -1,0   -1,0   -1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   1,0   1,0   1,0   1,0   0,0   -1,0   -1,0   1,0   0,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   0,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   1,0   1,0   -1,0   1,0   -1,0   -1,0   1,0   -1,0   0,0   -1,0   1,0   1,0   0   10   95   60   84   32   20   0   60   30   28   45   31   69   85   93   15   7   54   61   12   69   81   0   20   17   72
表2中所示的ANOVA分析结果表明，所研究的所有参数都影响 最终产物的可接受性。这由p-值(在所有情况下均＜0.05)指示，如统计 技术人员会理解的。因此，在开发改善健康的软饮料的制剂中，我们 不能忽视所有测试的变量的任何效果。
值得注意的是，在用于软饮料的这种类型的微囊包封中最重要的 参数，均化，对最终的胶胶囊具有最大的影响。
实施例15
我们测试了枯草杆菌芽孢制剂的稳定性(根据实施例9，通过加入 第二乳化剂-司盘65,5％-改善先前的结果)。稍后，我们测试了实际 上芽孢具有活性(在马铃薯右旋糖-琼脂中接种有菌落发生)。
在图19中显示了基于分散液粒径的稳定性，不同成熟期的微胶 囊的稳定性结果。显示了微胶囊的粒径分布(外径，当在多重包封的情 况下)。不同的曲线对应于不同的存储时间和温度：
A＝开始(时间＝0，T＝25℃)
B＝在3℃下60天后
C＝在25℃下60天后
D＝在25℃下90天后
曲线形状是均匀的，表示没有发生胶囊分解。
注意粒径是微胶囊的粒径(当计数器达到1000000粒径测量时标 绘这些值)。如果我们将芽孢释放入培养基中，曲线的形状将会改变， 并向左偏移，因为枯草杆菌芽孢在1至2μm的范围内。
实施例16
在制剂的分析方法中，我们得到了粘度对剪切应力的图。
在图10至12中显示的峰是本发明制剂特征性的。其表明由于施 加的力(剪切应力)，微胶囊制剂逐渐减少其内部结构，但是在一段时 间(力)以后，保持制剂的大分子结构稳定的内聚力受到破坏(即，直到 出现峰)。注意微胶囊没有受到破坏，相反，保持微胶囊的结构分散， 没有制剂的沉淀、凝聚或其它变形。当大分子内聚力(主要是静电力) 低时(图13)，我们没有观察到任何峰，但是粘度随施加的剪切应力而 降低，因为在这样低的粘度范围内，内聚力易于受到破坏。在本发明 的制剂中，这种类型的行为是可接受的，但是与图10至12中所示相 比是不太期望的。当曲线几乎是直线(图13的较低曲线)时，这意味着 我们正在处理具有牛顿行为的液体，后者对本发明的制剂也是不利 的。
实施例17
在本实施例中，我们显示了本发明的另一实施方案，其中存在包 封的矿物质。
在显微照片(图14)中，我们可以观察到微胶囊核内包含有无机矿 物质。加入了硒(来自适宜的酵母培养物)和柠檬酸锌。清楚表明了(卵 圆形和箭形)柠檬酸锌的晶体形成于油相中，同时，我们观察到多重包 封的效果，其中周围的小颗粒为包封在含有所述晶体的较大微胶囊内 的真正的微胶囊。
实施例18
在本实施例中，我们显示了两种不同类型的微胶囊。
在显微照片(图15)中，我们观察到单个微胶囊(在矩形内)，及内 部有更多微胶囊(在椭圆内)的微胶囊。必须调整光和聚焦以使两种比 较类型的微胶囊离物镜的距离相同。然后，光折射的较大差异显示微 囊包封的程度。