| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 181 | 经基因组编辑的细胞的制造方法 | CN201980091726.1 | 2019-12-12 | CN113423823A | 2021-09-21 | 铃木淳史; 川又理树 |
| 一种仅单侧等位基因经基因组编辑的细胞的制造方法，包括将(A)和(B)导入细胞的工序，所述(A)为选自由(a1)在间隔序列的5’末端添加有1个以上核苷酸残基的向导RNA、(a2)包含相对于靶序列具有1个碱基或多个碱基错配的间隔序列的向导RNA及(a3)可表达所述(a1)或所述(a2)的向导RNA的表达载体组成的组中的至少1种，所述(B)为选自由Cas蛋白及能表达所述Cas蛋白的表达载体组成的组中的至少1种。 | ||||||
| 182 | 基于CRISPR/Cas12a的大白菜黄萎病检测方法及其相关材料和应用 | CN202410766644.5 | 2024-06-14 | CN118599837A | 2024-09-06 | 于拴仓; 汪维红; 刘肖静; 苏同兵; 辛晓云; 李佩荣; 赵岫云; 张德双; 余阳俊; 张凤兰; 王姣 |
| 本发明公开了基于CRISPR/Cas12a的大白菜黄萎病检测方法及其相关材料和应用。具体公开了一种用于切割黄萎病rDNA‑ITS的Cas12a向导RNA分子，所述向导RNA分子包括靶向序列和结构序列，所述靶向序列的核酸序列为序列1的第4位‑第24位，所述结构的核酸序列为序列1的第25位‑第44位。使用向导RNA分子和及针对靶标设计的检测引物对待测样本进行cas12a‑RPA检测，结果表明可快速、直观的检测到样本中是否含有目标基因组，可用于工农业生产。 | ||||||
| 183 | 基于CRISPR/Cas12a的大白菜霜霉病检测方法及其相关材料和应用 | CN202410766646.4 | 2024-06-14 | CN118546931A | 2024-08-27 | 于拴仓; 刘肖静; 苏同兵; 辛晓云; 汪维红; 李佩荣; 赵岫云; 张德双; 余阳俊; 张凤兰 |
| 本发明公开了基于CRISPR/Cas12a的大白菜霜霉病检测方法及其相关材料和应用。具体公开了一种用于切割霜霉菌rDNA‑ITS序列的Cas12a向导RNA分子，所述向导RNA分子包括靶向序列和结构序列，所述靶向序列的核酸序列为序列1的第4位‑第24位，所述结构的核酸序列为序列1的第25位‑第44位。使用向导RNA分子和及针对靶标设计的检测引物对待测样本进行cas12a‑RPA检测，结果表明可快速、直观的检测到样本中是否含有目标基因组，可用于工农业生产。 | ||||||
| 184 | 单倍体机能不全的基因疗法 | CN202410279202.8 | 2018-02-07 | CN118370844A | 2024-07-23 | N·阿黑度威; N·玛莎鲁 |
| 提供了一种治疗哺乳动物对象中单倍体机能不全疾病的方法，所述方法包括使所述对象的细胞与组合物接触，所述组合物包含：i）向导RNA；和b）CRISPR核酸酶结合区域或特异性结合CRISPR核酸酶结合区域的区域；和ii）CRISPR核酸酶，‑其中所述接触形成包含与向导RNA结合的CRISPR核酸酶的复合物，其中所述复合物中向导RNA的靶向区域与所述启动子或增强子杂交；‑其中所述复合物包含催化失活的CRISPR核酸酶和转录激活结构域，并且‑其中所述复合物以足以治疗所述对象中的单倍体机能不全疾病的量和持续时间激活单倍体机能不全的基因的野生型拷贝的转录。 | ||||||
| 185 | 一种基于茄子斑驳矮化病毒的植物基因编辑系统 | CN202311475277.5 | 2023-11-08 | CN117511988A | 2024-02-06 | 高茜; 向海英; 蒋佳芮; 曾婉俐; 孔维松; 黄海涛; 米其利; 张建铎; 许力; 李正和; 陈斌焕 |
| 本发明公开了一种基于茄子斑驳矮化病毒的植物基因编辑系统，包括：a)一个EMDV病毒载体；b)一个引入的异源的核酸序列转录单元被插入茄子斑驳矮化病毒载体基因组中，用于表达序列特异性Cas9核酸酶和外切核酸酶融合蛋白；c)另一个引入的异源的核酸序列转录单元被插入茄子斑驳矮化病毒载体基因组中，用于表达CRISPR向导RNA；其中，茄子矮化斑驳病毒侵染植物瞬时表达异源序列，Cas9核酸酶由向导RNA引导切割植物特定基因组DNA序列，外切核酸酶进一步消化DNA末端产生序列缺失。本申请EMDV在侵染的烟草组织中可高效稳定地表达Cas9‑TREX2和Cas9‑T5融合蛋白及向导RNA。 | ||||||
| 186 | 一种J亚型禽白血病受体NHE1基因编辑的鸡胚盘细胞及其应用 | CN202210211432.1 | 2022-03-05 | CN114934049A | 2022-08-23 | 唐小川; 韩瑞莹; 张喆 |
| 本发明提供一种CRISPR腺病毒介导的J亚型禽白血病受体NHE1基因编辑的鸡胚盘细胞及其应用。以鸡NHE1第38位氨基酸NHE1‑W38及其附近基因序列为模板设计多个CRISPR/Cas9向导RNA，通过体外切割实验筛选活性最高的向导RNA。构建含有向导RNA序列和Cas9基因序列的质粒、构建含有NHE1‑W38切割位点上游序列和下游序列的质粒，并进一步包装含有上述序列的腺病毒，使用腺病毒转染鸡胚盘细胞，获得NHE1‑W38定点缺失、并维持干细胞性质的鸡胚盘细胞。上述基因编辑的鸡胚盘细胞可进行抗J亚型禽白血病基因编辑鸡的制备，为禽白血病的防治奠定基础。 | ||||||
| 187 | DNA片段靶向富集方法及其在基因组靶向测序中的应用 | CN202110377037.6 | 2021-04-08 | CN113106144A | 2021-07-13 | 李杰群; 司中洲; 谭洁琼 |
| 本发明公开一种DNA片段靶向富集方法，该方法包括根据靶标片段的DNA序列信息分析所述靶标片段上下游向导RNA，并合成所述向导RNA；获取样本DNA；通过cas9蛋白和所述向导RNA对所述样本DNA做体外cas9酶切反应，以从所述样本DNA上切割所述靶标片段；对通过体外cas9酶切反应切割的所述样本DNA进行琼脂糖凝胶电泳，切下与所述靶标片段条带大小对应的胶块；回收所述胶块中的DNA并进行测序。本发明提供的DNA片段靶向富集方法可适用度高，引入偏倚小。 | ||||||
| 188 | 基因组靶标目的基因的定向敲除的方法及试剂盒 | CN201410520023.5 | 2014-09-30 | CN104328138A | 2015-02-04 | 陈静 |
| 本发明涉及基因工程领域，具体而言，涉及一种基因组靶标目的基因的定向敲除的方法及试剂盒。该方法包括构建pPTD-NLS-Cas9；体外表达、纯化并获得PTD-NLS-Cas9融合蛋白；将其与向导RNA共孵育，得到PTD-NLS-Cas9/RNA复合物；将PTD-NLS-Cas9/RNA复合物与靶细胞共孵育，使其进入靶细胞进行目的基因的定向敲除。该复合物利用蛋白转导结构域和细胞核定位结构域的穿膜定位机制，实现Cas9核酸内切酶和向导RNA快速、高效的导入靶细胞中的效果；克服了现有技术中Cas9核酸内切酶难以导入靶细胞的技术问题。 | ||||||
| 189 | 用于提高RNA有效载荷转录的工程化构建体 | CN202380074917.3 | 2023-08-23 | CN120112640A | 2025-06-06 | 斯蒂芬·伯利; 李耑坤; 阿德里安·阮格汉姆·布里格斯 |
| 本文描述了编码小RNA有效载荷诸如工程化向导RNA的表达盒。所述表达盒可被工程化以增加由所述表达盒编码的所述小RNA有效载荷的表达。所述工程化表达盒包括可增强所述小RNA有效载荷表达的各种序列元件，诸如转录因子结合序列、转录终止序列和核心启动子序列。序列元件可以组合或互换以调整小RNA有效载荷表达水平。本文还描述了使用由表达盒编码的小RNA有效载荷编辑靶标基因的方法。 | ||||||
| 190 | 基于中温Argonaute蛋白和等温扩增的核酸检测方法 | CN202210639483.4 | 2022-06-07 | CN116064736A | 2023-05-05 | 刘倩; 李晓; 冯雁; 孙奕杰 |
| 本发明提供了基于中温Argonaute蛋白和等温扩增的核酸检测方法。具体地，本发明提供了一种用于检测靶标核酸分子的检测体系，该体系包含：(a)向导ssDNA对或向导ssRNA对；(b)中温Argonaute蛋白(Ago酶)，所述中温Argonaute蛋白(Ago酶)为以DNA或RNA为向导指导剪切靶标DNA或靶标RNA的中温Argonaute蛋白(Ago酶)；(c)荧光报告核酸，所述荧光报告核酸带有荧光基团和淬灭基团；(d)用于等温扩增反应的试剂；其中，所述的靶标核酸分子为目标核酸。本发明方法可以广泛应用于感染性疾病如重大传染性和病原体感染性疾病(病毒、病原菌)检测领域等领域。 | ||||||
| 191 | 基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统及应用 | CN201911009403.1 | 2019-10-23 | CN111206053B | 2022-11-15 | 马信龙; 赵杰 |
| 本发明提供了一种基于CRISPR‑Cas13的RNA编辑系统及其应用，所述系统包括靶向元件、编辑效应元件和向导元件；其中，所述靶向元件包含刺激响应蛋白A和失活型Cas13酶（dCas13），所述编辑效应元件包括刺激响应蛋白B和RNA编辑效应蛋白；所述刺激响应蛋白A与刺激响应蛋白B在刺激作用下相互结合，刺激消失后解除结合；本发明首次提出了光控RNA编辑的概念，将光遗传学与RNA编辑相结合，构建了基于CRISPR‑Cas系统的光控RNA编辑系统，实现了RNA编辑的精准时空调控，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。 | ||||||
| 192 | 基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统及应用 | CN201911009403.1 | 2019-10-23 | CN111206053A | 2020-05-29 | 马信龙; 赵杰 |
| 本发明提供了一种基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统及其应用，所述系统包括靶向元件、编辑效应元件和向导元件；其中，所述靶向元件包含刺激响应蛋白A和失活型Cas13酶（dCas13），所述编辑效应元件包括刺激响应蛋白B和RNA编辑效应蛋白；所述刺激响应蛋白A与刺激响应蛋白B在刺激作用下相互结合，刺激消失后解除结合；本发明首次提出了光控RNA编辑的概念，将光遗传学与RNA编辑相结合，构建了基于CRISPR-Cas系统的光控RNA编辑系统，实现了RNA编辑的精准时空调控，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。 | ||||||
| 193 | 使用RNA引导的内切核酸酶在非常规酵母中基因靶向 | CN201580056204.X | 2015-07-21 | CN107002020A | 2017-08-01 | R.弗里施; X.范; S-P.洪 |
| 本文公开了非常规酵母，其包含至少一种RNA引导的内切核酸酶(RGEN)，所述RNA引导的内切核酸酶包含至少一种不具有5’端的RNA组分。该未封端的RNA组分包含与酵母中的染色体或附加体中的靶位点序列互补的序列。RGEN可结合到，并任选地切割靶位点序列处的一个或两个DNA链。本文的RGEN的示例是Cas9蛋白质与向导RNA的复合物。在某些实施方案中使用核酶以提供缺乏5’端的RNA组分。本文还公开了在非常规酵母中基因靶向的方法。 | ||||||
| 194 | 使用RNA引导的内切核酸酶在非常规酵母中基因靶向 | CN201580056204.X | 2015-07-21 | CN107002020B | 2021-12-21 | R.弗里施; X.范; S-P.洪 |
| 本文公开了非常规酵母，其包含至少一种RNA引导的内切核酸酶(RGEN)，所述RNA引导的内切核酸酶包含至少一种不具有5’端的RNA组分。该未封端的RNA组分包含与酵母中的染色体或附加体中的靶位点序列互补的序列。RGEN可结合到，并任选地切割靶位点序列处的一个或两个DNA链。本文的RGEN的示例是Cas9蛋白质与向导RNA的复合物。在某些实施方案中使用核酶以提供缺乏5’端的RNA组分。本文还公开了在非常规酵母中基因靶向的方法。 | ||||||
| 195 | 一种可视化病毒核酸RNA检测所用的RT-LAMP扩增体系及应用 | CN202011001921.1 | 2020-09-22 | CN112359137A | 2021-02-12 | 王永明; 王瑞 |
| 本申请属于核酸检测技术领域，具体公开一种可视化病毒核酸RNA检测所用的RT‑LAMP扩增体系及应用，所述可视化病毒核酸RNA检测所用的RT‑LAMP扩增体系由模板、引物组、反应液和去离子水组成；其用于病毒核酸RNA可视化检测时所用的CRISPR体系由Cas12a酶或Cas12b酶、向导RNA、RNA酶抑制剂和ssDNA荧光猝灭探针等组成，可视化病毒核酸RNA检测所用的RT‑LAMP扩增体系：CRISPR体系的体积比为0.1‑5.0:1。整个检测过程可在30至45min内完成，检测结果的准确性和可靠性，适用于核酸的现场、快速、高灵敏检测。 | ||||||
| 196 | gRNA支架及CRISPR-Cas系统及其应用 | CN202410179080.5 | 2024-02-08 | CN118127011A | 2024-06-04 | 陈柏洪; 崔开心; 胡洋; 林少芸; 徐文倡; 农保庭; 孙金帅; 石翾; 余宇霖; 余嘉俊; 谭文琼; 梁普平 |
| 本文公开了向导RNAscaffold及其在CRISPR‑Cas系统中的应用。本文具体公开了向导RNA(gRNA)scaffold、CRISPR‑Cas系统、工程化的Cas12f多肽、Cas12f融合多肽、工程化的Cas12f多肽或融合多肽与gRNA形成的复合物、核酸、载体、载体系统、递送系统、试剂盒、组合物、以及利用上述组分修饰核酸的方法。 | ||||||
| 197 | Ago蛋白的用途及组合物和基因编辑方法 | CN201910870351.0 | 2019-09-16 | CN112481309A | 2021-03-12 | 仪宏; 冯慧勇; 李天明; 刘金雷 |
| 本发明提供了一种Ago蛋白的用途及组合物和基因编辑方法，本发明的真核细胞靶向基因编辑方案，通过使外源Ago蛋白与同源重组片段出现于真核细胞中，进行所述细胞内的基于同源重组的靶向基因编辑，其不需要向导DNA或向导RNA的靶向定位，仅需外源Ago蛋白与同源重组片段便可引发真核细胞的基因编辑，应用前景广泛。 | ||||||
| 198 | Ago蛋白的用途及组合物和基因编辑方法 | CN201910870351.0 | 2019-09-16 | CN112481309B | 2023-10-10 | 仪宏; 冯慧勇; 李天明; 刘金雷 |
| 本发明提供了一种Ago蛋白的用途及组合物和基因编辑方法，本发明的真核细胞靶向基因编辑方案，通过使外源Ago蛋白与同源重组片段出现于真核细胞中，进行所述细胞内的基于同源重组的靶向基因编辑，其不需要向导DNA或向导RNA的靶向定位，仅需外源Ago蛋白与同源重组片段便可引发真核细胞的基因编辑，应用前景广泛。 | ||||||
| 199 | 一种用于III-A型CRISPR-Csm系统中RNA编辑的组合物及应用 | CN202110241231.1 | 2021-03-04 | CN112852817A | 2021-05-28 | 林平; 蒋建新; 吴敏 |
| 本发明属于基因编辑技术领域，具体为一种用于III‑A型CRISPR‑Csm系统中RNA编辑的组合物及应用。所述组合物包括Csm复合物和靶向定位目标RNA序列的向导RNA，所述Csm复合物由Cas10、Csm2、Csm3、Csm4和Csm5组成，核苷酸序列为SEQ ID NO:1‑SEQ IDNO:5，氨基酸序列为SEQ ID NO:6‑SEQ ID NO:10。本发明所提供的组合物有助于实现对靶向目标RNA的高效编辑，为基因改造提供有效的RNA编辑技术体系，此外，本发明所提供的组合物还可以用于制备抗病毒治疗的药物，具有良好的应用前景和医药用途。 | ||||||
| 200 | 产生高阶基因组编辑文库的方法 | CN201780081590.7 | 2017-12-27 | CN110249049A | 2019-09-17 | 曼纽尔·考利奇; 安德烈亚斯·恩斯特; 马丁·韦格纳; 瓦伦蒂娜·迪尔; 拉埃尔·德布鲁恩; 斯文贾·威克曼 |
| 本发明涉及产生用于靶标基因敲除、敲低和基因组修饰方法的高度多样化的RNA表达载体和载体文库的新方法。本发明涉及用于产生这样的高阶文库而不需要经典克隆技术的方法。这对基于大型载体的文库特别有用，其中序列不能容易地用经典诱变方法进行突变。根据本发明的方法产生的载体和文库可特别用于RNA辅助的沉默技术如RNA干扰，以及用于使用成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/Cas系统或使用小向导RNA来将CRISPR复合体靶向特定基因组序列的类似的RNA/DNA编码的基因扰动系统的靶标基因组编辑。本发明还提供了试剂盒，其包含用于实施本发明的方法的材料。 | ||||||
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