一种含有祛痰粘液溶解剂的偶联物及其合成方法和用途 |
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| 申请号 | CN201710443434.2 | 申请日 | 2017-06-13 | 公开(公告)号 | CN107474099A | 公开(公告)日 | 2017-12-15 |
| 申请人 | 佛山市第五人民医院; 佛山科学技术学院; | 发明人 | 黄文柱; 刘连; 刘腾; 彭咏波; 王志军; 严文; | ||||
| 摘要 | 本 发明 属于天然药物和药物 治疗 领域，公开了一种含有祛痰粘液溶解剂的偶联物及合成方法和用途。该偶联物具有如下式(Ⅰ)所示的结构。合成方法包括步骤：将 熊果酸 与乙酰半胱 氨 酸在无 水 二氯甲烷中，在吡啶和4-二甲氨基吡啶的催化下，室温反应过夜，过滤，过 硅 胶色谱柱，旋蒸，干燥，即可获得目标化合物。通过体外MTT检测实验，发现其对 肿瘤 细胞株(MCF-7、K562、A549和HepG2细胞)具有很好的抑制效果，比熊果酸的IC50值强5-10倍，但对正常 肝细胞 L-O2低毒。该化合物以两个药物分子偶联成靶向前药的方式治疗癌症，克服熊果酸溶解性差，复合乙酰半胱氨酸抗癌效应，达到通过增强细胞凋亡的途径清除癌细胞的效果。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种含有祛痰粘液溶解剂的偶联物，其特征在于：该偶联物是由熊果酸和祛痰粘液溶解剂乙酰半胱氨酸偶联而成，具有如下式(Ⅰ)所示的结构式： |
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| 说明书全文 | 一种含有祛痰粘液溶解剂的偶联物及其合成方法和用途技术领域背景技术[0002] 癌症是严重危害人类健康的一大顽症，现已成为仅次于心血管病的第二大杀手，所以寻找安全、有效、低毒的抗肿瘤药物和研究其作用机理，具有重要意义。 [0003] 熊果酸(Ursolid Acid，简称UA)即3β-羟基-熊果-12-烯-28-酸(3β-hydroxy-urs-12-en-28-oic acid)，又名乌索酸、乌苏酸，属五环三萜类化合物，其相对分子量为456.68，分子式为C30H48O3，它以游离或糖苷的形式，广泛分布于自然界中，如玄参科植物毛泡桐的叶，茜草科植物栀子的果实、龙胆科植物湿生蕾、木樨科植物女贞的叶等多种不同科属植物中。其结构式如下所示： [0004] [0005] 大量研究表明熊果酸具有抗肿瘤、抗炎，抗HIV，保肝，镇静，抗氧化，抑菌等多种生物活性。其中尤以抗癌活性最为显著，其抗癌谱广，不仅对多种致癌、促癌物有抵抗作用，而且对多种肿瘤细胞体内、外均有抑制作用。其副作用小，毒性低，显示出较大的临床应用潜力，被欧美、日韩等国家列为最有希望的癌化学预防药物之一。由于其广泛的抗癌活性、多靶点、非癌毒性低等特点，越来越受到人们的重视，不少人对其进行药理机制研究、结构修饰，希望开发出更多具有抗肿瘤活性的熊果酸衍生物有着重要的意义。多数研究表明，熊果酸能通过化学预防、抗突变、细胞毒作用、抗肿瘤血管生成及诱导肿瘤细胞分化、凋亡等来抑制肿瘤的发生、入侵与转移。乙酰半胱氨酸为粘液溶解剂，具有很好的水溶性，偶联其他药物分子可改善其溶解性，提高其活性、溶解性及增强吸收。目前，熊果酸在体内的活性偏低、吸收少、溶解性差、代谢过快和生物利用度低，这些特性极大地限制了它的应用。以熊果酸为先导化合物与祛痰粘液溶解剂乙酰半胱氨酸直接偶联成抗癌细胞的前药，此类化合物的合成及前药研究国内外均未见其报道。 发明内容[0006] 为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种含有祛痰粘液溶解剂的偶联物；该偶联物是由抗肿瘤药物熊果酸与祛痰粘液溶解剂乙酰半胱氨酸偶联的化合物。 [0007] 本发明的另一目的在于提供一种上述含有祛痰粘液溶解剂的偶联物的合成方法。 [0008] 本发明的再一目的在于提供上述含有祛痰粘液溶解剂的偶联物的用途。 [0009] 本发明的目的通过下述技术方案实现： [0010] 一种含有祛痰粘液溶解剂的偶联物，该偶联物是由熊果酸和祛痰粘液溶解剂乙酰半胱氨酸偶联而成，具有如下式(Ⅰ)所示的结构式： [0011] [0012] 所述熊果酸和乙酰半胱氨酸通过酯键偶联。 [0013] 上述含有祛痰粘液溶解剂的偶联物的合成方法，包括以下操作步骤：将熊果酸与乙酰半胱氨酸溶解在无水二氯甲烷中，在吡啶和4-二甲氨基吡啶(DMAP)的催化下，室温反应过夜，过滤，过硅胶色谱柱，旋蒸，干燥，即可获得目标化合物。 [0014] 所述室温为25-30℃。 [0015] 所述吡啶和4-二甲氨基吡啶的摩尔比为(1～3):1。 [0016] 所述硅胶色谱柱所用的洗脱溶剂为乙酸乙酯和石油醚，溶剂体积比为(2～10):7。 [0017] 上述含有祛痰粘液溶解剂的偶联物及其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的用途。 [0018] 上述含有祛痰粘液溶解剂的偶联物及其药学上可接受的盐在制备抗炎药物或美容品中的用途。 [0019] 一种药物组合物，其中含有治疗有效量的上述含有祛痰粘液溶解剂的偶联物或其药学上可接受的盐及载体。 [0020] 上述药物组合物在制备抗肿瘤药物、抗炎药物或美容品中的用途。 [0021] 本发明与现有技术相比具有如下突出的优点及有益效果： [0022] 本发明合成了一种偶联物，通过体外MTT检测实验，发现其对肿瘤细胞株(MCF-7、K562、A549和HepG2细胞)具有很好的抑制效果，比熊果酸的IC50值强4-6倍，但对正常肝细胞L-O2低毒。该化合物以两个药物分子偶联成靶向前药的方式治疗癌症，克服熊果酸溶解性差、吸收少、代谢快等缺点，达到通过增强细胞凋亡的途径清除癌细胞的效果。 具体实施方式[0023] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。 [0024] 实施例1： [0025] 将熊果酸(1.5mmole)与乙酰半胱氨酸(1.9eq)溶解在无水二氯甲烷(30ml)中，在吡啶(0.5g)和4-二甲氨基吡啶(0.5g)的催化下，室温25-30℃下反应过夜，过滤，过硅胶色谱柱(所用的洗脱溶剂为体积比(3～8):7的乙酸乙酯和石油醚)，旋蒸，干燥，即可获得白色固体目标化合物。经液相色谱质谱和核磁共振技术分析，所新制备的白色固体目标化合物为具有式(Ⅰ)所示结构的偶联物： [0026] [0027] [0028] 实施例2 [0030] 取对数生长期的细胞，根据细胞的大小接种4～40×103个于96孔板上，待生长24小时后，弃上清，然后按以下分组给药：肿瘤细胞设不加药组和加药组(浓度0.1～100μM对肿瘤细胞，浓度5～200μM对LO2细胞)，熊果酸偶联乙酰半胱氨酸UA-NAC(即实施例1所得目标化合物)，熊果酸UA，乙酰半胱氨酸NAC和两者等摩尔混合物UA+NAC。每组设4～6个复孔，培养72小时，弃上清，加入100μl含0.5mg/ml的MTT(四氮唑盐)无血清培养液培养4h，加入100μl DMSO(二甲亚砜)，放置于微型振荡仪上振荡10min，再置于酶标仪上570nm处检测OD值。正常人细胞系LO2做对照。每次实验均重复3次。 [0031] 结果显示，随着药物浓度增加，与相应不加药对照组比较，细胞增殖活性分别下降，说明化合物呈浓度依赖性抑制肿瘤细胞细胞增殖。而对正常肝细胞系LO2细胞的增殖活性未有变化，显示出该化合物对正常细胞具有低毒特性(表1)。 [0032] 表1不同细胞的IC50值(72h)及不同化合物IC50比值 [0033] [0034] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。 |
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