一类鹅去氧胆酸类化合物及其制备方法和用途 |
|||||||
| 申请号 | CN201510865138.2 | 申请日 | 2015-12-01 | 公开(公告)号 | CN105348354A | 公开(公告)日 | 2016-02-24 |
| 申请人 | 四川百利药业有限责任公司; | 发明人 | 朱义; 王一茜; 李杰; 何桂佳; 刘威加; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了结构式（I）的化合物及其药学上可接受的盐、 溶剂 合物或 氨 基酸偶联物：其中：6位取代基可分别位于α位或β位；R1为COOH或OSO3H；R2为卤烷基、环烷基、环烷基-烷基、杂环基、杂环基-烷基、杂芳基、杂芳基-烷基、酰基或烷 氧 烷基。 | ||||||
| 权利要求 | 1.结构式（I）的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物或氨基酸偶联物： |
||||||
| 说明书全文 | 一类鹅去氧胆酸类化合物及其制备方法和用途技术领域[0001] 本发明属于化学制药技术领域，涉及一类鹅去氧胆酸类化合物及其制备方法和用途。 背景技术[0002] 法尼酯X受体(fanesoid X receptor)是一类由胆汁酸(bile acid, BA)激活的核受体，该受体激活后可激活一系列转录网络和信号级联，从而影响一系列靶基因的表达，参与调节人体内多个生理代谢过程，包括胆汁酸稳态调节，脂肪和碳水化合物代谢；此外，一些靶基因还涉及到炎症发生、纤维化和癌变过程。FXR受体大量表达于BA存在的组织，比如肝脏、小肠，肾、肾上腺和回肠上皮细胞，在肠道中，内源性的胆汁酸大量地被吸收。FXR可在生理浓度下由内源性的胆汁酸包括鹅去氧胆酸(CDCA)、脱氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA)以及这些胆酸的牛磺酸盐和甘氨酸偶联物所激活。 [0003] FXR与其它核受体超家族有相似的模块结构，包含一个高度保留的DNA结合域(DBD)和一个碳端配体结合域(LBD)。DBD结合域识别特定的DNA序列，也就是反应元件，即靶基因的增强子区域。FXR与9-顺式维生素A酸受体（RXR）形成异质二聚体与DNA结合。LBD与亲脂性的配体结合可招募转录共激活物，产生相应的生物学效应。 [0004] 肝胆相关疾病在我国有较高的发病率，包括肝炎、肝纤维化、肝硬化、脂肪肝、肝癌等。其中，非酒精性脂肪肝(NAFLD)已发展为最为常见的严重肝病，在欧美国家，NAFLD患病率约20-30%，而有10-20%会发展成为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。在我国，NAFLD的患病率约为15-20%，而约15%为NASH，肥胖病人中NASH患病率则可高达30% 。而患有糖尿病和肥胖病人中罹患NAFLD的比例分别高达62%和96%。而NAFLD尚无上市药物，目前的治疗手段主要集中在控制饮食，改变生活习惯，对症治疗糖尿病、肥胖和高血脂等症状，因此开发新的改善NASH患者组织病理情况的药物势在必行。目前研究表明，FXR受体激动剂表现对肝胆疾病表现出较大的潜力。目前最有望上市的药物为6-ECDA (6α-ethyl-chenodeoxycholic acid)，是CDCA的6位乙基取代衍生物，现在正在进行NASH的三期临床与原发性胆汁性肝硬化的三期临床实验。由于6-ECDCA不能选择性的激和FXR受体亚型，治疗过程中产生了不希望发生的多基因效应，开发选择性高、活性好、生物利用度高的化合物有重要意义。在6-ECDCA的基础上，以CDCA为先导化合物，通过化学结构修饰，在其6-位及侧链上进行结构发行，设计了一系列CDCA的衍生物。本发明符合我国肝胆疾病高发而治疗药物极度缺乏的现状，并具有良好的市场前景。 发明内容[0006] 本发明另一目的在于公开该类CDCA衍生物及其药学上可接受的盐的制备方法。 [0007] 本发明的又一目的在于公开该类CDCA衍生物及其药学上可接受的盐、溶剂合物或氨基酸偶联物在制备治疗和/或预防各种肝胆相关疾病药物中的用途，包括但不限于胆汁淤积和肝脏代谢疾病，包括原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎和非酒精性脂肪肝等肝胆疾病。 [0008] 为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：结构式（I）的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物或氨基酸偶联物： 其中：6位取代基可分别位于α位或β位； 1 R为COOH或OSO3H； 2 R为卤烷基、环烷基、环烷基-烷基、杂环基、杂环基-烷基、杂芳基、杂芳基-烷基、酰基或烷氧烷基。 [0009] 作为优选，所述卤烷基为单取代或多取代。 [0010] 作为优选，所述环烷基为C3-7碳环基。 [0011] 作为优选，所述环烷基-烷基为—(CH2)m—A，其中m为1或2，A为C3-7碳环基。 [0012] 作为优选，所述杂环基为被一个或多个氧原子、硫原子或氮原子取代的C3-7碳环基。 [0013] 作为优选，所述杂环基-烷基为—(CH2)m—B，其中m为1或2，B为被一个或多个氧原子、硫原子或氮原子取代的C3-7碳环基。 [0014] 作为优选，所述杂芳基为被一个或多个氧原子、硫原子或氮原子取代的C3-7环芳基。 [0015] 作为优选，所述杂芳基-烷基为—(CH2)m—D，m为1或2，D为被一个或多个氧原子、硫原子或氮原子取代的C3-7环芳基。 [0016] 作为优选，所述酰基表示卤素单取代或多取代的甲酰基或乙酰基。 [0017] 作为优选，所述烷氧烷基是—(CH2)m—X—E，m为1、2或3，X为杂原子O、S或N，E为氢、C1-C6烷基、C3-7碳环基、一个或多个氧原子、硫原子或氮原子取代的C3-7碳环基、或一个或多个氧原子、硫原子或氮原子取代的C3-7环芳基。 [0018] 包括上述任一所述的通式（Ⅰ）的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物或氨基酸偶联物的药物组合物。 [0019] 根据上述任一所述的通式（Ⅰ）的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物或氨基酸偶联物在制备代谢疾病、炎症、肝病、自身免疫性疾病、心脏病、肾病、癌症或胃肠疾病药物中的用途。 [0020] 名词：DCM：二氯甲烷；DMAP：4-二甲氨基吡啶；DME：乙二醇二甲醚； LDA：二异丙基氨基锂；NBS：N-溴代丁二酰亚胺；PCC：氯铬酸吡啶酯； TBAF：四丁基氟化铵；THF：四氢呋喃。 具体实施方式[0022] 实施例1：化合物7和其6-β异构体的制备步骤A 将3а，7а-二-羟基-5β胆烷酸（2.0 g，5.1 mmol），溴化钠（30 mg，0.25 mmol），四丁基溴化铵（5.4 g，16.8 mmol）和 (甲醇：冰乙酸：水：乙酸乙酯=3:1:0.25:6.5) 43 mLo o 混合液加入到反应瓶中。将反应混合液降至0 C滴加次氯酸钠（5%，10 mL，5.6 mmol），0 C活化30 min后升至室温反应6 小时。3.3%的亚硫酸氢钠溶液加入反应液中至溶液由浅黄o 色变为白色悬浊液，水（50 mL）加入上述溶液中15 C搅拌5 min，乙酸乙酯萃取反应液三次，合并有机相依次用3.3%的亚硫酸氢钠溶液洗，水洗，无水硫酸钠干燥，过滤旋干得粗品 2.0 g。柱层析纯化（二氯甲烷：甲醇=100:1）得1.2 g 的化合物1。收率60%。 [0023]步骤B 将化合物1（1.17 g，3.0 mmol）和乙醇（60 mL）加入反应瓶中，使反应液温度降至10 0C以下，将2-呋喃甲醛（576 mg ，6.0 mmol）和氢氧化钾（7.5 mL，40%乙醇中）依次加入到上述反应液中，搅拌反应0.5 小时，升至室温反应过夜。加入冰乙酸中和反应液并倒入300 mL 冰水中，过滤，固体水洗后干燥，乙醇重结晶，得0.84 g化合物5。收率60%.步骤C 将化合物5（1.4 g，3.0 mmol）和THF:MeOH（75 mL，4:1 v/v）加入到反应瓶中，搅拌均匀后依次加入三氯化铈（0.74 g，9.0 mmol）和硼氢化钠（136 mg，3.6 mmol）。室温反应3小时后加入水和甲醇，蒸干溶剂，加水稀释，乙酸乙酯萃取溶液三次。合并有机相后依次用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干溶剂后得粗品，柱层析纯化后得1.27 g化合物 6。收率90%. 步骤D 将化合物6（1.41 g，3.0 mmol）和THF:MeOH（60 mL，1:1 v/v）加入到反应瓶中，氮气置换三次后加入钯碳（5 wt%，50 mg），再次置换氮气三次，后置换氢气三次，搅拌下室温反应8 小时。反应液滤除钯碳后旋干得粗品，柱层析纯化后得1.04 g化合物7（收率74%）和 0.23 g化合物8（收率16%）。 [0024] 实施例2：化合物9和其6-β异构体的制备按照实施例1的方法，将化合物1和2-呋喃甲醛进行反应，得化合物9和和其6-β异构体。 [0025]实施例3：化合物10和其6-β异构体的制备 按照实施例1的方法，将化合物1和3-呋喃甲醛进行反应，得化合物10和其6-β异构体。 [0026]实施例4：化合物11和其6-β异构体的制备 按照实施例1的方法，将化合物1和2-咪唑甲醛进行反应，得化合物11和其6-β异构体。 [0027]实施例5：化合物12和其6-β异构体的制备 按照实施例1的方法，将化合物1和3-咪唑甲醛进行反应，得化合物12和其6-β异构体。 [0028]实施例6：化合物13和其6-β异构体的制备 按照实施例1的方法，将化合物1和四氢呋喃-2-甲醛进行反应，得化合物13和其6-β异构体。 [0029] 实施例7：化合物18及其6-β异构体的制备步骤A 向250mL三口瓶中加入CDCA 7.85 g，无水甲醇150 mL，搅拌溶清，加入催化量的浓硫酸，回流反应1小时，TLC检测原料反应完全。旋干甲醇，加乙酸乙酯300 mL溶解残余物，依次用饱和碳酸氢钠溶液100 mLx2,水100 mL，饱和盐水100 mL洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得7.95 g化合物2，收率97.8%。 [0030]步骤B 向500mL三口瓶中加入化合物2（4.06 g，10 mmol）和DCM 125 mL，搅拌溶清，再向反应液中加入硅胶20 g(200-300目)，冰水浴下滴加含PCC的DCM溶液（2.4 g PCC溶于125 mL DCM），滴完后升至室温反应，TLC检测反应至原料反应完，过滤，滤渣用DCM洗涤，合并洗液和滤液，依次用水（100 mLx2），饱和盐水（100 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得 3.0 g化合物3。收率：74.1%。 [0031]步骤C 向100mL三口瓶中加入化合物3 (2.02 g，5 mmol)，乙酸乙酯40 mL，搅拌溶清，再依次加入DMAP 50 mg，三乙胺1.01 g，乙酸酐1.02 g，室温反应4小时，TLC检测反应完全，依次用0.5 M稀盐酸（10 mLx2），水（10 mL），饱和食盐水（10 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得2.1 g化合物4。收率：94.0%。 [0032]步骤D 将化合物4（5.60 g，12.54 mmol）溶于乙酸（100 mL）中，加入溴（2.8 g）的乙酸溶液（10 mL），并立即随之加入48%的氢溴酸溶液（0.74 mL）。反应液于室温搅拌过夜，然后倒入 300 mL水中，过滤，固体用柱层析纯化，得5.9 g化合物14。收率90%。 [0033]步骤E 将氮杂环丁烷（0.27 mL，4 mmol）溶于DCM（30 mL）中，加入三乙胺（1.26 mL），反应液降至0℃搅拌0.5 h，然后滴加化合物14（2.36 g，4.5 mmol）的DCM溶液（20 mL），升至室温搅拌过夜，浓缩反应液，溶于100 mL乙酸乙酯中，依次用水（20 mL），饱和食盐水（20 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，粗品用柱层析纯化，得0.93 g化合物15（收率41%）和 0.41 g化合物16（收率18%）。 [0034]步骤F 将化合物15（3.00g，6mmol）溶于30 mL甲醇和10 mL THF中，搅拌溶清，加入1M NaOH溶液24 mL，室温反应，TLC检测原料反应完全，加1M盐酸调PH至3，旋掉溶剂，加乙酸乙酯（30 mL×3）萃取，合并有机相，依次用水（30 mL×2）,饱和盐水（30 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得2.74 g化合物17。收率：91%。 [0035]步骤G 将化合物17（1.78 g，4 mmol）溶于100 mL无水甲醇中，降温至0 ℃，将NaBH4（1.06 g，28 mmol）加入反应液，室温反应3小时，慢慢加入水100 mL，蒸出一半溶剂，加乙酸乙酯（60 mL×3）萃取，合并有机相，用水（40 mL×2）,饱和盐水（40 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得1.54 g化合物18。收率：86%。 [0036]化合物18的6-β异构体可按步骤F、G的方法用化合物20制备。 [0037] 实施例8：化合物21和其6-β异构体的制备向反应瓶中加入铜粉（0.03 g，0.53 mmol）、化合物14（2.78 g，5.30 mmol）、氮杂环丁酮（0.45 g，6.36 mmol）和碳酸钾（1.10 g，7.95 mmol），氮气置换后加入N,N’-二甲基乙二胺（0.09 g，1.06 mmol）和甲苯（20mL），升至135℃搅拌反应6 h。将反应液降至室温，过滤，乙酸乙酯洗涤，滤液浓缩，所得粗品用柱层析纯化，得1.34 g化合物19（收率49%）和0.36 g化合物20（收率13%）。 [0038] 按照实施例7步骤F、G的方法，用化合物19和化合物20可制备得到化合物21和其6-β异构体。 [0039] 实施例9：化合物25和其6-β异构体的制备步骤A 按实施例7步骤E的方法，将化合物和甘氨酸乙酯进行反应，得化合物22和23。 [0040]步骤B 向化合物22（1.31 g，2.4mmol）的DCM（30 mL）溶液中，加入异氰酸乙酯（0.34 g， 4.8mmol），用氮气置换反应瓶中空气后，将反应液升至80℃反应，TLC检测原料反应完全，将反应液浓缩，柱层析纯化，得0.96 g化合物24。收率：70%。 [0041]按照实施例7步骤F、G的方法，由化合物24可制备得到化合物25。 [0042]化合物25的6-β异构体可按照该实施例的步骤方法，由化合物23制备得到。 [0043] 实施例10：化合物26和其6-β异构体的制备按照实施例9中步骤B的方法，将化合物22和异硫氰酸乙酯进行反应，再按照实施例 7步骤E、F的方法，得化合物26和其6-β异构体。 [0044] 实施例11：化合物31和其6-β异构体的制备步骤A 向化合物14（2.20 g，4.2 mmol）和三甲基叠硅烷（0.97 g，8.4 mmol）的THF（20 mL）溶液中滴加1M四丁基氟化铵的THF溶液（8.3 mL，8.3 mmol），将反应液升至75℃搅拌反应 17 h，降至室温，浓缩溶剂后柱层析纯化。将所得化合物溶于80 mL无水乙醇，加入5%钯碳（0.69 g，0.3 mmol），通入氢气，在20psi压力下搅拌反应2 h。将反应液过滤，滤液浓缩，用（乙酸乙酯:甲醇=7:1）重结晶，得1.55 g化合物27，收率80%。 [0045]步骤B 向乙酰乙酸乙酯（2.60 g，20 mmol）的丙酮（50 mL）溶液中加入碳酸钾（4.50 g，24 mmol）和溴乙烷（2.60 g，24 mmol），回流反应24 h。将反应液降至室温，过滤，浓缩溶剂后进行柱层析纯化。将所得化合物（1.90 g，12 mmol）和NBS（2.56 g，14.4 mmol）置于100 mL反应瓶中，加入对甲基苯磺酸（0.23 g，1.2 mmol），室温搅拌反应6 h，用乙醚（100 mL）萃取产品，再用20 mL水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品用柱层析纯化，得2.01 g化合物28，收率43%。 [0046]步骤C 将化合物27（0.92 g，2 mmol）溶于THF（10 mL）中，加入化合物28（0.57 g，2.4 mmol）和三乙胺（0.40 g，4 mmol），搅拌反应36 h。浓缩溶剂后用乙酸乙酯（100 mL×3）萃取产品，再用20 mL水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品用柱层析纯化，得0.69 g化合物 29（收率60%）和0.16 g化合物30（收率14%）。 [0047]按照实施例7步骤F、G的方法，由化合物29可制备得到化合物31。 [0048]化合物31的6-β异构体可按照该实施例的步骤方法，由化合物30制备得到。 [0049] 实施例12：下列化合物按照实施例9和实施例10的方法进行制备，其化学结构式如下所示：其中，当X为C时，R3和R4由表格1所列基团组合而成；当X为S时，R4为乙基或环戊基与表格1中所列R3基团组合而成： 表格1 R1 R2 H 实施例13：下列化合物按照实施例11的方法进行制备，其化学结构式如下所示： 其中， R4为表格1中所列基团。 [0050] 实施例14：化合物34的制备步骤A 在N2保护下，将化合物4 (2.23 g，5 mmol)溶于100 mL无水THF中，冷却至-78℃，依次将正丁基锂6 mL（1.6 M正己烷溶液）和LDA 6 mL（2.0 M正己烷溶液）滴加入反应液，搅拌反应30分钟，将1,3-二溴丙烷1.41 g滴加入反应液，然后升至室温反应，TLC检测反应完全，将反应液用1 M稀盐酸淬灭，加适量水和乙酸乙酯提取分液，收集有机相，用饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得粗品，柱层析纯化，得1.11 g化合物32。收率：45.5%。 [0051]步骤B 将化合物32（2.92g，6mmol）溶于30 mL甲醇和10 mL THF中，搅拌溶清，加入1M NaOH溶液24 mL，室温反应，TLC检测原料反应完全，加1M盐酸调PH至3，旋掉溶剂，加乙酸乙酯（30 mL×3）萃取，合并有机相，依次用水（30 mL×2）,饱和盐水（30 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得2.34 g化合物33。收率：90.6%。 [0052]步骤C 将33（1.72 g，4 mmol）溶于100 mL无水甲醇中，降温至0 ℃，将NaBH4（1.06 g，28 mmol）加入反应液，室温反应3小时，慢慢加入水100 mL，蒸出一半溶剂，加乙酸乙酯（60 mL×3）萃取，合并有机相，用水（40 mL×2）,饱和盐水（40 mL）洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得1.49 g化合物34。收率：86.1%。 [0053] 实施例15：化合物35的制备按照实施例14的方法，将化合物4和1,3-二溴乙烷进行反应，得化合物35。 [0054]实施例16：化合物38和其6-β异构体的制备 步骤A 在N2保护下，将化合物4 (2.23 g，5 mmol)溶于100 mL无水THF中，冷却至-78℃，依次将正丁基锂3 mL（1.6 M正己烷溶液），LDA 3 mL（2.0 M正己烷溶液）滴加入反应液，搅拌反应30分钟，加入溴代环丙烷0.85 g（7 mmol），然后升至室温反应， TLC检测反应完全，将反应液用1M稀盐酸淬灭，加适量水和乙酸乙酯提取分液，收集有机相，用饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得粗品，柱层析纯化得0.92 g化合物36（收率37.8%）和0.20 g化合物37（收率8.2%）。 [0055] 步骤B将化合物36和化合物37按照实施例14中步骤B和C的方法反应，分别得化合物38和其6-β异构体。 [0056] 实施例17：化合物39和其6-β异构体的制备按照实施例16的方法，将化合物4和溴甲基环丙烷进行反应，得化合物39和其6-β异构体。 [0057]实施例18：化合物40和其6-β异构体的制备 按照实施例16的方法，将化合物4和溴代环丁烷进行反应，得化合物40和其6-β异构体。 [0058]实施例19：化合物41和其6-β异构体的制备 按照实施例16的方法，将化合物4和溴甲基环丁烷进行反应，得化合物41和其6-β异构体。 [0059]实施例20：化合物42和其6-β异构体的制备 按照实施例16的方法，将化合物4和氟溴甲烷进行反应，得化合物42和其6-β异构体。 [0060] 实施例21：化合物45和其6-β异构体的制备步骤A 在N2保护下，将化合物1（3.91 g，10 mmol）溶于200 mL无水THF中，冷却至-78℃，将25 mL LDA（2.0M正己烷溶液）滴加入反应液，搅拌反应30分钟，再滴加1.99 g三氟乙酸乙酯，将反应液于-78℃搅拌反应30分钟，然后升至室温继续搅拌，TLC检测原料反应完全，将反应液用1M稀盐酸淬灭，加适量水和乙酸乙酯提取分相，收集有机相，用饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析纯化，得1.98g化合物43（收率40.7%）和 0.54 g化合物44（收率11.1%）。 [0061] 步骤B将化合物43和化合物44按照实施例14中步骤B的方法反应，分别得化合物45和其 6-β异构体。 [0062] 实施例22：化合物51和其6-β异构体的制备步骤A 将化合物9（2 g，4.09 mmol）加入到90%甲酸（30 mL）和70%高氯酸（70uL）的混合液中，升温至50℃，搅拌1.5 h后冷却至40℃（24 mL），加入醋酸酐，搅拌10 min，冷却至室温，倒入水中，剧烈搅拌，过滤除去沉淀物，水洗一次，溶于乙醚中，无水硫酸钠干燥，浓缩即得化合物46（2.13 g，收率97%），无需纯化直接进行下一步反应。 [0063]步骤B 在5 ℃下将化合物46（2.13 g，3.91 mmol）加入三氟乙酸（6.7 mL）和三氟乙酸酐（1.8 mL,12.7 mmol）的混合溶液中，分批加入亚硝酸钠（321 mg，4.65 mmol），并在此温度下搅拌反应1 h，而后升至40 ℃搅拌1.5 h，再将反应液冷却至室温，加入2 N NaOH（30 mL），乙醚萃取，有机相用1 N NaOH和水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得化合物44的粗品，用硅胶色谱柱进行分离纯化，以（正己烷:乙酸乙酯=8:2）洗脱即得纯品化合物47（1.6 g，收率80%）。 [0064] 步骤C将化合物47（1.66 g，3.13 mmol）加入到30%的KOH的乙醇和水（50mL，乙醇:水=1:1）的混合溶液中，加热回流48 h，反应液浓缩，用乙醚萃取，有机相用水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得白色固体粗品，用硅胶色谱柱进行分离纯化，以（二氯甲烷:甲醇=9:1）洗脱即得纯品化合物48（1.15 g，收率78%）。 [0065]步骤D 将化合物48（1.15 g，2.42 mmol）和对甲基苯磺酸（1.2 g，6.22 mmol）溶于无水甲醇（50 mL）中，室温下搅拌过夜。加入碳酸氢钠淬灭反应，浓缩溶剂，加入EA萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸干燥，即得化合物45的甲酯产物。用硅胶色谱柱进行分离纯化，以二氯甲烷：甲醇=95:5洗脱即得纯品。 [0066] 将上述所得产品和对甲基苯磺酰氯（2.4 g，12.7 mmol）的吡啶（15 mL）溶液加入到干燥的吡啶（15 mL）中，室温下搅拌4 h，除去溶剂，将残留物溶于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩即得化合物46的粗品，用硅胶色谱柱进行分离纯化，以（正己烷:乙酸乙酯=1:1）洗脱，即得化合物49的纯品（1.88 g，收率78%）。 [0067]步骤E 在0 ℃并在氮气保护下将化合物49（1.88 g，2.36 mmol）溶于干燥的四氢呋喃（10 mL）中，加入无水甲醇（122 ul），和2 M硼氢化锂的四氢呋喃溶液(1.5 mL)，并在此温度下搅拌8 h，用1N NaOH（4mL）淬灭反应后，升至室温，EA萃取，有机相用水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得粗品，用硅胶色谱柱进行分离纯化，以（二氯甲烷:甲醇=95:5）洗脱，即得化合物50（1.24 g，收率69%）。 [0068] 步骤F将化合物50（1.24 g，1.61 mmol）加入到吡啶三氧化硫复合物（0.33 g，1.61 mmol）的干燥吡啶（16 mL）溶液中，氮气保护，室温下搅拌48 h，减压除去溶剂，将残留物溶于5% NaOH的甲醇（6mL）溶液中，室温下搅拌过夜，用1M盐酸调节pH为2~3，浓缩溶剂，将残留物溶于（甲醇:水=1:1）的混合溶液中，用反相色谱柱（RP-18 B型）进行分离纯化得化合物51（0.39 g，收率43%）。 [0069]化合物51的6-β异构体可按照该实施例的步骤方法，由化合物9的6-β异构体制备得到。 [0070]实施例23：磺酸基系列化合物的合成，其化学结构式如下所列： 2 其中R基团可分别位于α位或β位。 [0071] 按照实施例22的方法进行制备，使用的原料选自化合物7、化合物10、化合物12、化合物13、化合物18、化合物21、化合物25、化合物26、化合物31、化合物34、化合物35、化合物38、化合物39、化合物40、化合物41、化合物42、化合物45、或实施例12和实施例13中描述的化合物及其6-β异构体。 [0072]实施例24：化合物57和其6-β异构体的制备 步骤A 将化合物3（3.57 g, 8.82 mmol）、1H-咪唑（0.90 g, 13.24 mmol）和TBSCl（2.00 g, 13.24 mmol）溶于干燥二氯甲烷(16 mL)中，室温下搅拌过夜。往反应液中加入饱和NaHCO3，水层以CH2Cl2萃取（20 mL × 3），合并有机层并依次以水和饱和NaCl洗一次，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物51的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯=30:1）洗脱，即得化合物51的纯品，为白色固体（4.25g, 93%）。 [0073] 步骤B将化合物51溶于干燥THF（12 mL）中，搅拌下降温至-78℃，滴入LDA（2.0M 正己烷溶液）（3.62 mL, 7.25 mmol），约30min滴加完毕。加毕，缓慢滴加环氧乙烷(0.34 mL, 6.79 mmol)，约15min滴加完毕。加毕，缓慢升温至自然搅拌反应过夜。反应毕，加入饱和NaHCO3淬灭反应，水层以EA萃取（20 mL × 3），合并有机层并依次以饱和NaHCO3、H2O和饱和NaCl各洗一次，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物52和53的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯=20:1）洗脱，即得化合物52和53的纯品。其中，化合物 52为类白色固体（0.99g, 39%），化合物53为浅黄色固体（0.43 g, 17%）。 [0074] 步骤C将化合物52（500 mg, 0.89 mmol）溶于干燥DME（3 mL）中，冰水浴下加入NaH（60%， 53 mg, 1.33 mmol），待放热停止后，撤去冰水浴并升温至回流反应2h。反应毕，冷却至室温，滴加碘甲烷（0.08 mL, 1.33 mmol）的DME（2 mL）溶液，约10min滴加完毕。加毕，升温至40℃反应3h。反应毕，缓慢滴加水淬灭反应。水层以EA萃取（15 mL × 3），合并有机层并依次以5%醋酸、H2O、饱和NaCl各洗一次，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物54的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯=40:1）洗脱，即得化合物54的纯品，为淡黄色油状物（317 mg, 62%）。 [0075] 步骤D将化合物54（300 mg, 0.52 mmol）与TBAF（177 mg, 0.68 mmol）溶于干燥THF（6 mL）中，室温搅拌过夜。反应毕，加入H2O（20 mL），水层以EA萃取（10 mL × 3），合并有机层并以饱和NaCl洗，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物55的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯=10:1）洗脱，即得化合物55的纯品，为白色固体（175 mg, 73%）。 [0076] 步骤E将化合物55（150 mg, 0.32 mmol）溶于干燥MeOH（5 mL）中，分批加入NaBH4（37 mg, 0.97 mmol），室温搅拌反应5h。反应毕，往反应液中加入水（20 mL），水层以EA萃取（10 mL × 3），合并有机层并以饱和NaCl洗，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物56的粗品。 采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯=15:1）洗脱，即得化合物56的纯品，为类白色固体（102 mg, 68%）。 [0077] 步骤F将化合物56（100 mg, 0.22 mmol）溶于MeOH（2 mL）和水（2 mL）的混合溶剂中，加入LiOH·H2O（18 mg, 0.43 mmol）后室温搅拌8h。反应毕，减压蒸馏除掉大部分甲醇。加入H2O（10 mL），水层以EA洗（10 mL × 2）。再将水层以10% HCl调pH至3。水层以EA萃取（10 mL × 3），合并有机层并以饱和NaCl洗，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物 57的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯:醋酸=15:1:2%）洗脱，即得化合物57的纯品，为白色固体（82 mg, 86%）。 [0078] 按照实施例24中步骤C-F的方法，以化合物53为原料，得化合物57的6-β异构体58。 [0079] 实施例25：化合物59和其6-β异构体的制备按照实施例24的方法，将化合物52和2-碘代丙烷进行反应，得化合物59和其6-β异构体。 [0080] 实施例26：化合物60和其6-β异构体的制备按照实施例24的方法，将化合物52和溴代环丙烷进行反应，得化合物60和其6-β异构体。 [0081] 实施例27：化合物61和其6-β异构体的制备按照实施例24的方法，将化合物52和溴代环己烷进行反应，得化合物61和其6-β异构体。 [0082] 实施例28：化合物66和其6-β异构体的制备步骤A 在N2氛下将化合物52（600 mg, 1.07 mmol）、1H-咪唑（94 mg, 1.39 mmol和三苯基磷（335 mg, 1.28 mmol）溶于干燥氯仿（6 mL）中，冰水浴下滴加单质碘（325 mg, 1.28 mmol）的氯仿（6 mL）溶液，约20min滴加完毕。滴毕，自然升温至室温搅拌5h。反应毕，减压蒸馏除去溶剂，剩余物采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酸乙酯=25:1）洗脱，即得化合物62的纯品，为浅棕色油状物（630 mg, 88%）。 [0083] 步骤B在氮气氛下将化合物62（600 mg, 0.89 mmol）和哌啶（0.41 mL, 4.46 mmol）溶于干燥乙腈（12 mL）中，室温搅拌过夜。反应毕，减压蒸除溶剂，剩余物采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（二氯甲烷:甲醇=80:1）洗脱，即得化合物63的纯品，为黄色油状物（420 mg, 75%）。 [0084] 步骤C将化合物63（420 mg, 0.67 mmol）与TBAF（227 mg, 0.87 mmol）溶于干燥THF（6 mL）中，室温搅拌过夜。反应毕，加入H2O（20 mL），水层以EA萃取（20 mL × 3），合并有机层并以饱和NaCl洗，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物64的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:丙酮=3:1）洗脱，即得化合物64的纯品，为浅黄色固体（230mg, 67%）。 [0085] 步骤D将化合物64（200 mg, 0.39mmol）溶于干燥MeOH（6 mL）中，分批加入NaBH4（44 mg, 1.16 mmol），室温搅拌反应5h。反应毕，往反应液中加入水（20 mL），水层以EA萃取（20 mL × 3），合并有机层并以饱和NaCl洗，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物65的粗品。 采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:丙酮=3:1）洗脱，即得化合物65的纯品，为类白色固体（108mg, 54%）。 [0086] 步骤E将化合物65（108 mg, 0.21 mmol）溶于MeOH（2 mL）和水（2 mL）的混合溶剂中，加入LiOH·H2O（18 mg, 0.42 mmol）后室温搅拌8h。反应毕，减压蒸馏除掉大部分甲醇。加入H2O（6 mL），水层以EA洗（10 mL × 2）。再将水层以10% HCl调pH至2。析出大量白色固体，抽滤，滤饼以水洗至中性，以MeOH重结晶即得化合物66的纯品，为白色固体（80 mg, 71%）。 [0087] 按照实施例28的方法，以化合物53为原料，得化合物66的6-β异构体67。 [0088] 实施例29：化合物70和其6-β异构体的制备步骤A 将化合物52（500 mg, 0.89 mmol）并溶于干燥二氯甲烷（10 mL）中，加入TEA（0.19 mL, 1.33 mmol），冰水浴下滴加甲磺酰氯（0.1 mL, 1.33 mmol）的二氯甲烷（5 mL）溶液，约 10min滴加完毕。自然升温至室温反应过夜。反应毕，往反应液中加入饱和NaHCO3溶液，水层以二氯甲烷萃取（10 mL × 3），合并有机层并依次以饱和NaHCO3、水、饱和NaCl各洗一次，无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物68的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酰乙酯=80:1）洗脱，即得化合物68的纯品，为黄色油状物（535mg, 94%）。 [0089] 步骤B将化合物68（500 mg, 0.78 mmol）、丁二酰亚胺（93 mg, 0.94 mmol）和无水碳酸钾（216 mg, 1.56 mmol）溶于干燥DMF（6 mL）中，升温至90℃反应40h。反应毕，往反应液中加入H2O（15 mL），水层以EA萃取（20 mL × 3），合并有机层并以水洗（20 mL × 3），饱和NaCl洗（20 mL × 1），无水Na2SO4干燥。过滤并浓缩得化合物69的粗品。采用硅胶柱层析进行分离纯化，以（石油醚:乙酰乙酯=10:1）洗脱，即得化合物69的纯品，为浅黄色固体（160mg, 32%）。 [0090] 将化合物69按照实施例24中步骤D-F的方法反应，得化合物70。 [0091] 将化合物53按照实施例29的方法反应，得化合物70的6-β异构体71。 [0092] 实施例30：化合物和其6-β异构体的制备步骤A： |
||||||
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈