人免疫缺陷病毒复制的抑制剂 |
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| 申请号 | CN201480013594.8 | 申请日 | 2014-03-10 | 公开(公告)号 | CN105008358B | 公开(公告)日 | 2017-12-29 |
| 申请人 | 百时美施贵宝公司; | 发明人 | K.皮斯; 王中玉; J.F.卡多; B.N.奈杜; | ||||
| 摘要 | 本公开内容一般地涉及用于 治疗 人免疫 缺陷 病毒(HIV)感染的式I的化合物（包括组合物）和方法。本公开内容提供了新颖的HIV 抑制剂 、含有这样的化合物的药物组合物、和在HIV感染的治疗中使用这些化合物的方法。 | ||||||
| 权利要求 | 1.化合物，其选自： |
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| 说明书全文 | 人免疫缺陷病毒复制的抑制剂[0001] 相关申请的交叉引用 背景技术[0003] 本公开内容一般地涉及用于治疗人免疫缺陷病毒(HIV)感染的化合物、组合物和方法。本公开内容提供了新颖的HIV抑制剂、含有这样的化合物的药物组合物、和在HIV感染的治疗中使用这些化合物的方法。 [0004] 人免疫缺陷病毒(HIV)已被鉴定为引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病原，所述AIDS是一种致命性疾病，其特征是免疫系统的破坏和不能抵抗危及生命的机会性感染。 最近的统计指示，全球多达3330万人感染该病毒(对于Global AIDS Epidemic 2010的 UNAIDS Report)。除了大量已被感染的个体外，该病毒继续播散。1998年的估计指出，仅该年就有接近600万新感染者。在该年，有大约250万例死亡与HIV和AIDS有关。 [0005] 目前有许多抗病毒药物可用来抵抗感染。基于这些药物靶向的病毒蛋白和它们的作用模式，可以将这些药物分类。具体而言，沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、阿扎那韦、达芦那韦、氨普那韦、呋山那韦、洛匹那韦和替拉那韦是HIV表达的天冬氨酰蛋白酶的竞争性抑制剂。齐多夫定、去羟肌苷、司他夫定、拉米夫定、扎西他滨、恩曲他滨、替诺福韦和阿巴卡韦是核苷(酸)逆转录酶抑制剂，它们作为底物模仿物以停止病毒cDNA合成。非核苷 逆转录酶抑制剂奈韦拉平、地拉韦啶、依法韦仑和依曲韦林通过非竞争性的(或无竞争性 的)机制抑制病毒cDNA的合成。恩夫韦肽和马拉韦罗抑制病毒进入宿主细胞。还已经批准 HIV整合酶抑制剂拉替拉韦(MK-0518, Isentress®)用于有治疗经历的患者，显然，这类抑 制剂作为含有不同种类的HIV抑制剂的组合方案的组成部分是非常有效的。 [0006] 单独使用的这些药物可有效地减少病毒复制：但是，该效果只是暂时的，因为病毒容易产生对所有已知的用作单一疗法的药剂的耐药性。另一方面，已经在许多患者中证实联合治疗非常有效地减少病毒和抑制耐药性产生。在广泛可得到联合治疗的美国，HIV相关的死亡的数量已经急剧下降(Palella, F. J.; Delany, K. M.; Moorman, A. C.; Loveless, M. O.; Furher, J.; Satten, G. A.; Aschman, D. J.; Holmberg, S. D. N. Engl. J. Med. 1998, 338, 853-860)。 [0007] 不幸的是，并不是所有的患者都具有响应性，并且这种治疗对大量的患者无效。事实上，初步研究提示，抑制组合中的至少一种药物最终对大约30-50%的患者无效。在大多数情况下，治疗无效由病毒耐药性的产生造成。病毒耐药性又由感染过程中HIV-1的复制速率以及与病毒聚合酶有关的相对较高病毒突变率和HIV感染的个体不能坚持施用他们的处方药物造成。显然，需要新抗病毒剂，优选地其具有针对病毒的活性，所述病毒已经耐受目前批准的药物。其它重要的因素包括改善的安全性和比许多目前批准的药物更方便的定量施 用方案。 [0008] 已经公开了抑制HIV复制的化合物。参见WO2007131350、WO2009062285、WO2009062288、WO2009062289、WO2009062308、WO2010130034、WO2010130842、 WO2011015641、WO2011076765、WO2012003497、WO2012003498、WO2012033735、WO2012065963和WO2012066442。 [0009] 本发明提供了技术优点，例如，所述化合物是新的且可用于治疗HIV。此外，所述化合物提供了药学用途的优点，例如，关于它们的作用机理、结合、抑制效力、靶标选择性、溶解度、安全性或者生物利用度中的一种或多种。 发明内容[0010] 本发明包括式I的化合物（包括药学上可接受的盐）、它们的药物组合物以及它们在抑制HIV整合酶和治疗被HIV或AIDS感染的患者中的用途。 [0011] 本发明的一个方面是式I的化合物或其药学上可接受的盐 [0012] [0013] 其中： [0014] R1是-CON(R7)(R8)、-NHSOR7或(R7)Ar2 [0015] R2是氢或烷基； [0016] R3是氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高吗啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基； [0017] 或者R3是环烷基、环烯基、色满基、噁嗪基或二氢吡喃并喹啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基； [0018] R4是烷基或卤代烷基； [0019] R5是氢或烷基； [0020] R6是氢或烷基； [0021] R7是(Ar1)烷基； [0022] R8是氢或烷基； [0023] Ar1是被0-3个取代基取代的苯基，所述取代基选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和烯氧基；且 [0024] Ar2是吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基或噻二唑基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和烯氧基。 [0025] 本发明的另一个方面是式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-CON(R7)(R8)；R2是氢或烷基；R3是氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高吗啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基；或R3是环烷基、环烯基、色满基、噁嗪基或二氢吡喃并喹啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基； R4是烷基或卤代烷基；R5是氢或烷基；R6是氢或烷基；R7是(Ar1)烷基；R8是氢或烷基；且Ar1是被0-3个取代基取代的苯基，所述取代基选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和烯氧基。 [0026] 本发明的另一个方面是式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-CON(R7)8 2 3 (R)；R是氢；R是氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高吗啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基；或R3是环烷基、环烯基、色满基、噁嗪基或二氢吡喃并喹啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代 4 烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基；R 是烷基或卤代烷基；R5是烷基；R6是氢；R7是(Ar1)烷基；R8是氢；且Ar1是被0-3个取代基取代的苯基，所述取代基选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和烯氧基。 [0027] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R2是氢，R4是烷基，R5是烷基，且R6是氢。 [0028] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R3是氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高吗啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基。 [0029] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R3是被0-3个取代基取代的哌啶基，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基。 [0030] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R3是环烷基、环烯基、色满基、噁嗪基或二氢吡喃并喹啉基，且被0-3个取代基取代，所述取代基选自卤素、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烯基、环烷基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、烯氧基和苯基。 [0031] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R4是烷基。 [0032] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R5是烷基。 [0033] 本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R7是(Ar1)CH2且R8是氢。 [0034] 对于式I的化合物，可变取代基（包括R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Ar1和Ar2）的任何例子的范围可以独立于可变取代基的任何其它例子的范围来使用。这样，本发明包括不同方面的组合。 [0035] 除非另有说明, 这些术语具有下述含义。“烷基”是指由1-6个碳组成的直链或支链烷基。“烯基”是指具有至少一个双键的、由2-6个碳组成的直链或支链烷基。“亚烷基”是指由1-6个碳组成的直链或支链二价烷基。“亚烯基”是指由2-6个碳组成的、含有至少一个双键的直链或支链二价烯烃基。“环烷基”是指由3-7个碳组成的单环系。具有取代的烷基部分的“羟基烷基”、“烷氧基”和其它术语包括其烷基部分由1-6个碳原子组成的直链和支链异构体。“卤代”包括氟代、氯代、溴代和碘代。“卤代”包括在用卤代定义的取代基（例如，“卤代烷基”和“卤代烷氧基”、“卤代苯基”、“卤代苯氧基”）中从单卤代至全卤代的所有卤代异构体。“芳基”包括碳环和杂环芳族取代基。通过化学绘图图解成键合在多环系(例如二环系)的可变位置处的取代基意图键合至它们被绘制成所连接的环。带括号的和带多层括号 的术语意图为本领域技术人员澄清键合关系。例如，诸如((R)烷基)的术语是指被取代基R 进一步取代的烷基取代基。 [0036] 本发明包括所述化合物的所有药学上可接受的盐形式。药学上可接受的盐是这样的盐：其中抗衡离子不会对化合物的生理活性或毒性显著地做出贡献且由此起药理学上等 价物的作用。这些盐可以根据常规有机技术采用商购可得的试剂来制备。一些阴离子盐形 式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡萄糖醛酸盐(glucouronate)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、扑酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵、铝、苄星青霉素、铋、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、锂、镁、葡甲胺、4-苯基环己胺、哌嗪、钾、钠、氨丁三醇和锌。 [0037] 本发明的一些化合物以立体异构形式存在。本发明包括所述化合物的所有立体异构形式，包括对映异构体和非对映异构体。制备和分离立体异构体的方法是本领域已知的。 本发明包括所述化合物的所有互变异构形式。本发明包括阻转异构体和旋转异构体。 [0038] 本发明意图包括在本发明化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但不同质量数的那些原子。作为一般性的例子而不是限制，氢的同位素包括氘和 氚。碳的同位素包括13C和14C。通常通过本领域技术人员已知的常规技术，或通过类似于本文描述的那些的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替否则会采用的未标记的试剂，可 以制备同位素标记的本发明的化合物。这样的化合物可以具有多种潜在用途，例如在生物 学活性的确定中作为标准品和试剂。在稳定同位素的情况下，这样的化合物可能具有有利 地调节生物学、药理学或者药物动力学性质的潜力。 [0039] 生物学方法 [0040] HIV复制的抑制 构建重组NL-Rluc病毒，其中来自NL4-3的nef基因的一部分被Renilla萤光素酶基因替换。通过共转染两种质粒pNLRLuc和pVSVenv，制备NL-RLuc病毒。 pNLRLuc含有克隆进pUC18的PvuII位点处的NL-Rluc DNA，而pVSVenv含有连接到LTR启动子 的VSV G蛋白的基因。根据生产商，用得自Invitrogen (Carlsbad, CA)的LipofectAMINE PLUS试剂盒，以1:3的pNLRLuc与pVSVenv的比例在293T细胞中进行转染，并且将产生的假型病毒在MT-2细胞中滴定(titered)。对于敏感性分析，在有化合物存在下使用滴定的病毒感染MT-2细胞，且在温育5天以后，处理细胞，并通过表达的萤光素酶的量定量病毒生长。这会提供一种简单且容易的定量病毒生长程度并从而定量试验化合物的抗病毒活性的方法。使 用得自Promega (Madison, WI)的Dual Luciferase试剂盒，定量萤光素酶。 [0041] 通过在有化合物的系列稀释物存在下温育，确定病毒对化合物的敏感性。通过使用指数形式的中间效应方程式，计算50%有效浓度(EC50)，其中(Fa) = 1/[1+ (ED50/药物 浓度)m] (Johnson VA, Byington RT. Infectivity Assay. In Techniques in HIV Research. Aldovini A, Walker BD编. 71-76. New York: Stockton Press.1990)。在3 种血清条件（10%FBS、15mg/ml人血清白蛋白/10%FBS或40%人血清/5%FBS）下评价化合物的抗病毒活性，使用得自至少2个实验的结果计算EC50值。结果显示在表1中。等于A的活性表示具有EC50≤100 nM的化合物，而B和C表示具有EC50在100 nM至1uM之间(B)或EC50>1uM (C)的化合物。 [0042] 表1. [0044] 药物组合物和使用方法 [0046] 本发明的另一个方面是式I的化合物在药物制备中的用途，所述药物用于治疗AIDS或HIV感染。 [0047] 本发明的另一个方面是一种用于治疗人患者中的HIV感染的方法，所述方法包括：施用治疗有效量的式I的化合物或其药学上可接受的盐以及治疗有效量的至少一种用于治 疗AIDS或HIV感染的其它药剂，所述其它药剂选自：核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV融合抑制剂、HIV附着抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV出芽或成熟抑制剂和HIV整合酶抑制剂。 [0048] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是核苷HIV逆转录酶抑制剂。 [0049] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述核苷HIV逆转录酶抑制剂选自阿巴卡韦、去羟肌苷、恩曲他滨、拉米夫定、司他夫定、替诺福韦、扎西他滨和齐多夫定或其药学上可接受的盐。 [0050] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是非核苷HIV逆转录酶抑制剂。 [0051] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述非核苷HIV逆转录酶抑制剂选自地拉韦啶、依法韦仑和奈韦拉平或其药学上可接受的盐。 [0052] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是HIV蛋白酶抑制剂。 [0053] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述HIV蛋白酶抑制剂选自氨普那韦、阿扎那韦、茚地那韦、洛匹那韦、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦和呋山那韦或其药学上可接受的盐。 [0054] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是HIV融合抑制剂。 [0055] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述HIV融合抑制剂是恩夫韦肽或T-1249或其药学上可接受的盐。 [0056] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是HIV附着抑制剂。 [0057] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是CCR5抑制剂。 [0058] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述CCR5抑制剂选自Sch-C、Sch-D、TAK-220、PRO-140和UK-427857或其药学上可接受的盐。 [0059] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是CXCR4抑制剂。 [0060] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述CXCR4抑制剂是AMD-3100或其药学上可接受的盐。 [0061] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是HIV出芽或成熟抑制剂。 [0062] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述出芽或成熟抑制剂是PA-457或其药学上可接受的盐。 [0063] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是HIV整合酶抑制剂。 [0064] 本发明的另一个方面是一种药物组合物，其包含治疗有效量的式I的化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种用于治疗AIDS或HIV感染的其它药剂，所述其它药剂选自 核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV融合抑制剂、HIV附着抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV出芽或成熟抑制剂和HIV整合酶抑制剂和药学上可接受的载体。 [0065] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是核苷HIV逆转录酶抑制剂。 [0066] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述核苷HIV转录酶抑制剂选自阿巴卡韦、去羟肌苷、恩曲他滨、拉米夫定、司他夫定、替诺福韦、扎西他滨和齐多夫定或其药学上可接受的盐。 [0067] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是非核苷HIV逆转录酶抑制剂。 [0068] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述非核苷HIV逆转录酶抑制剂选自地拉韦啶、依法韦仑和奈韦拉平或其药学上可接受的盐。 [0069] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是HIV蛋白酶抑制剂。 [0070] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述HIV蛋白酶抑制剂选自氨普那韦、阿扎那韦、茚地那韦、洛匹那韦、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦和呋山那韦或其药学上可接受的盐。 [0071] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是HIV融合抑制剂。 [0072] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述HIV融合抑制剂是恩夫韦肽或T-1249或其药学上可接受的盐。 [0073] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是HIV附着抑制剂。 [0074] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是CCR5抑制剂。 [0075] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述CCR5抑制剂选自Sch-C、Sch-D、TAK-220、PRO-140和UK-427857或其药学上可接受的盐。 [0076] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述药剂是CXCR4抑制剂。 [0077] 本发明的另一个方面是这样的方法，其中所述CXCR4抑制剂是AMD-3100或其药学上可接受的盐。 [0078] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是HIV出芽或成熟抑制剂。 [0079] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述出芽或成熟抑制剂是PA-457或其药学上可接受的盐。 [0080] 本发明的另一个方面是这样的组合物，其中所述药剂是HIV整合酶抑制剂。 [0081] 关于施用式I的化合物与至少一种抗HIV剂的“组合”、“共同施用”、“并行的”和类似的术语是指，如AIDS和HIV感染领域的从业人员所理解的，所述组分是联合抗逆转录病毒治疗或高活性抗逆转录病毒治疗(HAART)的一部分。 [0082] “治疗上有效的”是指，如AIDS和HIV感染领域的从业人员所理解的，提供有意义的患者益处所需的药剂的量。一般而言，治疗的目标是抑制病毒载量、恢复和保持免疫功能、改善生活质量和降低HIV相关的发病率和死亡率。 [0083] “患者”是指，如AIDS和HIV感染领域中的从业人员所理解的，被HIV病毒感染且适于治疗的人。 [0084] 如AIDS和HIV感染领域中的从业人员所理解的，使用“治疗”、“疗法”、“方案”、“HIV感染”、“ARC”、“AIDS”和有关的术语 [0085] 本发明的化合物通常作为药物组合物来施用，所述药物组合物包含治疗有效量的式I的化合物或它的药学上可接受的盐和药学上可接受的载体，且可以含有常规赋形剂。治疗有效量是提供有意义的患者益处所需的量。药学上可接受的载体是具有可接受的安全性 的那些常规已知的载体。组合物包括所有常见固体形式和液体形式，包括胶囊剂、片剂、锭剂和粉剂以及液体混悬液、糖浆剂、酏剂和溶液剂。使用一般制剂技术来制备组合物，且常规的赋形剂(诸如粘合剂和润湿剂)和媒介物(诸如水和醇)通常用于组合物。参见，例如， Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 第 17版, 1985。 [0086] 通常将固体组合物制备成剂量单位，且每剂提供约1-1000 mg活性成分的组合物是优选的。剂量的一些例子为1 mg、10 mg、100 mg、250 mg、500 mg和1000 mg。通常，其它抗逆转录病毒药剂将以类似于临床上使用的该类药剂的单位范围存在。通常，这是0.25-1000 mg/单位。 [0087] 液体组合物经常是在剂量单位范围。通常，液体组合物是在1-100 mg/mL的单位剂量范围。剂量的一些例子为1 mg/mL、10 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL和100 mg/mL。通常，其它抗逆转录病毒药剂将以类似于临床上使用的该类药剂的单位范围存在。通常，这是1-100 mg/mL。 [0088] 本发明包括所有常规施用模式；口服和胃肠外方法是优选的。通常，施用方案将会类似于临床上使用的其它抗逆转录病毒药剂。通常，每日剂量将为每日1-100 mg/kg体重。通常，口服需要更多的化合物，且胃肠外需要更少。但是，具体施用方案将由医师使用合理的医学判断来确定。 [0089] 本发明还包括其中在联合治疗中施用所述化合物的方法。也就是说，所述化合物可以与可用于治疗AIDS和HIV感染的其它药剂联合地、但是分开地使用。这些药剂中的一些包括HIV附着抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV细胞融合抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV核苷逆转录酶抑制剂、HIV非核苷逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、出芽和成熟抑制剂、免疫调节剂和抗感染剂。在这些组合方法中，式I的化合物通常以每日1-100 mg/kg体重的每日剂量与其它药剂联合施用。所述其它药剂通常以治疗上使用的量施用。但是，具体施用方案将由医师使用合理的医学判断来确定。 [0090] 合成方法 [0091] 通过本领域已知的多种方法，包括在以下路线图和具体实施方案部分中的那些，可以制备本发明的化合物。在合成路线图中显示的结构编号和变量编号不同于在权利要求 书或说明书的其它部分中的结构或变量编号，且不应当与其混淆。在路线图中的变量仅仅 意在解释如何制备本发明的一些化合物。本公开内容不限于前述示例性实施例，且所述实 施例应当在所有方面考虑为示例性的和非限制性的，参考所附权利要求，而不是前述实施 例，并且因此意图包括在权利要求的等同方案的含义和范围内的所有变化。 [0092] 在路线图和实施例中使用的缩写通常遵循在本领域中使用的惯例。如下定义在说明书和实施例中使用的化学缩写：“KHMDS”代表双(三甲基甲硅烷基)氨基钾；“DMF”代表N,N-二甲基甲酰胺；“HATU”代表O-(t-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐，“MeOH”代表甲醇；“Ar”代表芳基；“TFA”代表三氟乙酸，“DMSO”代表二甲基亚砜；“h”代表小时；“rt”代表室温或保留时间(上下文将会指明)；“min”代表分钟；“EtOAc”代表乙酸乙酯；“THF”代表四氢呋喃；“Et2O”代表乙醚；“DMAP”代表4-二甲基氨基吡啶；“DCE”代表1,2-二氯乙烷；“ACN”代表乙腈；“DME”代表1,2-二甲氧基乙烷；“HOBt”代表1-羟基苯并三唑水合物；和“DIEA”代表二异丙基乙胺。 [0093] 如下定义本文中使用的缩写：“1 x”代表1次，“2 x”代表2次，“3 x”代表3次，“℃”代表摄氏度，“eq”代表当量，“g”代表克，“mg”代表毫克，“L”代表升，“mL”代表毫升，“μL”代表微升，“N”代表当量浓度(normal)，“M”代表摩尔，“mmol”代表毫摩尔，“atm”代表大气压，“psi”代表磅/平方英寸，“conc.”代表浓的，“sat”或“sat’d”代表饱和的，“MW”代表分子量，“mp”代表熔点，“ee”代表对映体过量，“MS”或“Mass Spec”代表质谱法，“ESI”代表电喷射电离质谱法，“HR”代表高分辨率，“HRMS”代表高分辨率质谱法，“LCMS”代表液相色谱法质谱法，“HPLC”代表高压液相色谱法，“RP HPLC”代表反相HPLC，“TLC”或“tlc”代表薄层色谱法，“NMR”代表核磁共振光谱法，“1H”代表质子，“δ”代表δ，“s”代表单峰，“d”代表双峰，“t”代表三重峰，“q”代表四重峰，“m”代表多重峰，“br”代表宽峰，“Hz”代表赫兹，和“α”、“β”、“R”、“S”、“E”和“Z”是本领域技术人员熟悉的立体化学命名。 [0094] 根据路线图I，可以从适当地取代的杂环I-1合成本发明的一些化合物。 [0095] 路线图I [0096] [0097] 通过在路线图II中描绘的方法，可以制备本发明的一些化合物。 [0098] 路线图II [0099] [0100] 通过在路线图III中描绘的方法，可以制备本发明的一些化合物。 [0101] 路线图III [0102] [0103] 使用适当的溶剂系统，通过硅胶柱上的正相柱色谱法，通过本领域技术人员已知的方法，纯化本文所述化合物。通过在C18制备柱(5 μm)上的梯度洗脱，使用流动相A：含有 10 mM NH4OAc的9:1 H2O/乙腈和流动相B：A：含有10 mM NH4OAc的9:1乙腈/H2O，或流动相A： 含有20 mM NH4OAc的95:5 H2O/MeOH和流动相B：含有20 mM NH4OAc的95:5 MeOH/H2O，进行在该实验部分中提及的制备型HPLC纯化。 [0104] 中间体1 [0105] [0106] 2,6-二氯-4-甲基烟酸: 按照US6677352 (2004)中的流程，从商购可得的2,6-二氯-4-甲基烟腈制备。 [0107] 中间体2 [0108] [0109] 2,6-二氯-4-甲基烟酸叔丁酯: 向2,6-二氯-4-甲基烟酸(1.00 g, 4.85 mmol, 1当量)在乙酸叔丁酯(24 mL)中的溶液中加入70%高氯酸(0.88 mL, 14.56 mmol, 3当量)。1 h以后，将反应物用DCM稀释，小心地用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩，得到作为淡黄色油的产物(1.21 g, 95%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.15 (s, 1H), 2.37 (d, J = 0.5 Hz, 3H), 1.62 (s, 9H)；LCMS (ESI, M+1): 262.1。 [0110] 中间体3 [0111] [0112] 6-氯-2-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-4-甲基烟酸叔丁酯: 向2,6-二氯-4-甲基烟酸叔丁酯(11.93 g, 45.4 mmol, 1当量)在DCE (228 mL)中的溶液中加入4,4-二甲基哌啶 (7.21 g, 63.7 mmol, 1.4当量)和DIPEA (11.1 mL, 63.7 mmol, 1.4当量)。将反应物加 热至回流保持2 h，在此时，它似乎止步于约40%转化率。在真空中浓缩溶液。将残余物溶解于DMF (228 mL)中，并加入更多的4,4-二甲基哌啶(7.21 g, 63.7 mmol, 1.4当量)和 DIPEA (11.1 mL, 63.7 mmol, 1.4当量)。加热至80℃保持18 h。LCMS指示约70%转化率。移除热，并加入到饱和碳酸氢钠水溶液中。将其用乙醚(x2)萃取。将合并的乙醚萃取物干燥 (MgSO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速硅胶色谱法(0-100%DCM/己烷)纯化，得到作为黄色固体的产物(6.73 g, 44%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.55 (s, 1H), 3.41 - 3.33 (m, 4H), 2.27 (s, 3H), 1.59 (s, 9H), 1.48 - 1.41 (m, 4H), 0.99 (s, 6H)； LCMS (ESI, M+1): 339.25。 [0113] 中间体4 [0114] [0115] 6-氨基-2-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-4-甲基烟酸叔丁酯: 将6-氯-2-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-4-甲基烟酸叔丁酯(1.0 g, 2.95 mmol, 1当量)、二苯甲酮亚胺(0.59 mL, 3.54 mmol, 1.2当量)、Pd2(dba)3 (0.135 g, 0.148 mmol, 0.05当量)、4,5-双(二苯基 膦)-9,9-二甲基氧杂蒽（xantphos）(0.171 g, 0.295 mmol, 0.10当量)和Cs2CO3 (2.31 g, 7.08 mmol, 2.4当量)在二噁烷(30 mL，通入氮气鼓泡10 min来除氧)中的溶液加热至90 ℃。20 h以后，移除热。用EtOAc稀释并用水洗涤。将EtOAc层干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。 将其溶解于MeOH (25 mL)中，并加入醋酸钠(0.73 g, 8.85 mmol, 3当量)和盐酸羟胺 (0.41 g, 5.90 mmol, 2当量)。反应物变成非常深色。1 h以后，将反应物加入1 N NaOH中，并用DCM (x3)萃取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速硅胶色谱法(0-40%EtOAc/己烷)纯化，得到作为黄色固体的产物(0.76 g, 81%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.77 (d, J = 0.5 Hz, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.37 - 3.23 (m, 4H), 2.22 (d, J = 0.5 Hz, 3H), 1.58 (s, 9H), 1.47 - 1.39 (m, 4H), 0.98 (s, 6H)；LCMS (ESI, M+1): 320.3。 [0116] 中间体5 [0117] [0118] 5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2,6-二甲酸6-叔丁酯2-乙酯: 将6-氨基-2-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-4-甲基烟酸叔丁酯(0.76 g, 2.38 mmol, 1 当量)和溴代丙酮酸乙酯(0.40 mL, 2.85 mmol, 1.2当量)在EtOH (24 mL)中的溶液在90 ℃加热5 h。冷却至环境温度以后，将反应物加入饱和碳酸氢钠水溶液中，并用DCM (x3)萃取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速硅胶色谱法(0- 100%EtOAc/己烷)纯化，得到作为黄色固体的产物(0.61 g, 62%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 4.48 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.27 - 3.08 (m, 4H), 2.38 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 1.74 - 1.67 (m, 2H), 1.66 - 1.63 (m, 9H), 1.51 - 1.49 (m, 2H), 1.47 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.08 (s, 6H)； LCMS (ESI, M+1): 416.35。 [0119] 中间体6 [0120] [0121] 5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-(乙氧基羰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酸: 将5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2,6-二甲酸6-叔丁酯2-乙 酯(0.61 g, 1.47 mmol)在TFA (15 mL)中的溶液搅拌2 h，然后在真空中浓缩。将残余物溶解于THF/苯中，并在真空中浓缩(x2)以除去残余的TFA。得到作为粘稠棕色油( 1.2 g)的产~ 1 物。将该物质直接使用。H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 4.51 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.44 - 3.04 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 1.62 (br. s., 4H), 1.50 - 1.41 (m, 3H), 1.10 (s, 6H)；LCMS (ESI, M+1):360.3。 [0122] 中间体7 [0123] [0124] 5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-6-(2-甲氧基-2-氧代乙酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸乙酯: 将得自前一反应的5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-(乙氧基羰基)-7-甲 基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酸( 1.2 g, 1.47 mmol, 1当量)在DCM (15 mL)和DMF (0.02 ~ mL)中的溶液加入草酰氯(0.31 mL, 3.53 mmol, 2.4当量)中。观察到气体形成。1 h以后，在真空中浓缩反应物。然后将粗制的酰基氯溶解于DCM (15 mL)中。向该溶液中加入1-(氰 基甲基)四氢-1H-噻吩-1-鎓, 溴化物盐(0.92 g, 4.41 mmol, 3当量)和DIPEA。搅拌18 h 以后，将反应物加入饱和碳酸氢钠水溶液中，并用DCM (x3)萃取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。然后将粗制的硫叶立德溶解于MeOH (15 mL)和水(1 mL)中。加入过一硫酸氢钾复合盐(oxone)(1.45 g, 2.35 mmol, 1.6当量)。将白色浆搅拌18 h。将反应物加入饱和碳酸氢钠水溶液中，并用DCM (x3)萃取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速硅胶色谱法(10-100%EtOAc/己烷)纯化，得到作为黄色油的产物(0.28 g, 47%)，所述黄色油被起始酸的甲酯（5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2,6-二甲酸6-甲酯2-乙酯）重度污染( 50%)。原样用在以后的反应中。LCMS ~ (ESI, M+1): 402.1。 [0125] 中间体8 [0126] [0127] (S)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-6-(1-羟基-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯: 向5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-6-(2-甲氧基-2-氧代乙酰 基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸乙酯(280 mg, 0.70 mmol, 1当量)在甲苯(7 mL) 中的溶液中加入R-5,5-二苯基-2-甲基-3,4-桥亚丙基-1,3,2-氧杂氮杂硼杂环戊烷(309 mg, 1.12 mmol, 1.6当量)。然后将反应物冷却至-30℃(IPA/干冰)，并加入儿茶酚硼烷 (0.27 mL 50%的在甲苯中的溶液, 1.12 mmol, 1.6当量)。3 h以后，将反应物加入10%碳酸钾水溶液中，并用EtOAc (x3)萃取。将合并的EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速硅胶色谱法(10-100%EtOAc/己烷)纯化，得到被少量残余CBS氨基醇污染的 1 产物(144 mg, 51%)。原样使用。H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.25 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.48 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.09 - 2.90 (m, 4H), 2.40 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 1.75 - 1.61 (m, 4H), 1.46 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.09 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+1): 404.25。 [0128] 中间体9 [0129] [0130] (S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯：向(S)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-6-(1-羟基-2-甲 氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯(144 mg, 0.36 mmol, 1当 量)在乙酸叔丁酯(7 mL)中的溶液中加入70%高氯酸(0.092 mL, 1.07 mmol, 3当量)。立即 形成白色沉淀物。加入DCM (5 mL)和更多的70%高氯酸(0.18 mL, 2.14 mmol, 6当量)。1 h以后，将反应物小心地加入饱和碳酸氢钠水溶液中，并用EtOAc (x3)萃取。将合并的EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩，得到粗产物。将粗产物通过快速硅胶色谱法(10-100%EtOAc/己烷)纯化，得到作为白色泡沫的产物(47 mg, 29%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.23 (s, 1H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 6.05 - 6.00 (m, 1H), 4.48 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.54 - 3.45 (m, 1H), 3.16 - 3.06 (m, 1H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.45 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.73 - 1.57 (m, 4H), 1.46 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.25 (s, 9H), 1.15 (s, 3H), 1.09 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+ 1): 460.3。 [0131] 中间体10 [0132] [0133] (S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸钠盐: 向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-5- (4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯(47 mg, 0.102 mmol, 1当量)在二噁烷(1.0 mL)中的溶液中加入1 N NaOH (0.11 mL, 0.11 mmol, 1.1当量)。18 h以后，将反应物在真空中浓缩，得到作为钠盐的粗产物。将该物质直接用于以后的反应。 LCMS (ESI, M+1): 432.25。 [0134] 实施例1 [0135] [0136] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-((4-氟-3-甲基苄基)氨甲酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸: 向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧 代乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸钠盐(44 mg, 0.102 mmol, 1当量)和4-氟-3-甲基苄胺(43 mg, 0.306 mmol, 3当量)在DMF中的溶液中 加入HATU (54 mg, 0.143 mmol, 1.4当量)，得到深黄色溶液。1.5 h以后，加入更多的HATU (54 mg, 0.143 mmol, 1.4当量)。搅拌1 h以后，加入水(0.5 mL)和氢氧化锂一水合物(86 mg, 2.04 mmol, 20当量)，并将反应物加热至60℃。搅拌2 h以后，加入更多的氢氧化锂一水合物(86 mg, 2.04 mmol, 20当量)，并将反应物加热至90℃。1 h以后，将混合物冷却至环境温度并过滤。用以下条件通过制备型LC/MS纯化该溶液：柱: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有20-mM乙酸铵的水；流动相B：含有20-mM乙酸铵的95:5乙腈:水；梯度：35-75%B历时20分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min。将含有期望的产物的级分合并，并通过离心蒸发干燥，得到产物(35.6 mg, 65%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.94 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.27 - 7.22 (m, 2H), 7.18 (br. s., 1H), 7.07 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 5.78 (br. s., 1H), 4.42 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.54 (br. s., 2H), 3.24 - 3.16 (m, J = 12.8 Hz, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.60 (dd, J = 18.9, 9.2 Hz, 2H), 1.51 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 1.18 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.04 (s, 3H)；LCMS (ESI): 538.30。 [0137] 中间体11 [0138] [0139] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-((3-(4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨甲酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸-甲酯: 向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2- 甲氧基-2-氧代乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸(29 mg, 0.067 mmol, 1当量)在DCM (1.5 mL)中的溶液中加入(COCl)2 (0.040 mL, 0.081 mmol, 1.2当量)和DMF (1滴)，并将反应物在室温搅拌1 h。将反应物在真空中浓缩，然后将粗制的酰基氯加入预搅拌的1-氨基-3-(4-氟苯基)丙烷-2-酮, HCl (27.4 mg, 0.134 mmol, 2当量)和DIPEA (0.070 mL, 0.403 mmol, 6当量)在DCM (2 mL)中的溶液中。将得 到的溶液在室温搅拌2 h。然后加入水，并将混合物用DCM萃取，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗制物通过快速柱色谱法(5-70%EtOAc/己烷)纯化，得到作为浅黄色固体的(S)-2- (叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-((3-(4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨甲酰基)- 7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸-甲酯(20 mg, 50%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.77 - 7.71 (m, 1H), 7.26 - 7.22 (m, 2H), 7.12 - 7.03 (m, 3H), 6.25 (br. s., 0.7H), 5.89 (s, 0.3H), 5.53 (s, 0.7H), 5.45 (s, 0.3H), 4.47 - 4.33 (m, 2H), 4.27 - 4.19 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 2.76 (s, 1H), 2.69 (s, 2H), 2.20 - 2.12 (m, 1H), 2.10 - 1.98 (m, 2H), 1.79 - 1.68 (m, 1H), 1.60 - 1.54 (m, 2H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.26 (s, 4H), 1.25 (br. s., 2H), 1.23 (s, 7H), 1.14 (s, 2H)。LCMS (ESI, M+1): 593.4。 [0140] 实施例2 [0141] [0142] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟苄基)噁唑-2-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸: 将(S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌 啶-1-基)-2-((3-(4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨甲酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基) 乙酸-甲酯(45 mg, 0.077 mmol, 1当量)与Burgess试剂(55.4 mg, 0.232 mmol, 3当量) 一起在THF (0.39 mL)中在80℃搅拌1 h。结束后，加入MeOH (0.6 mL)、水(0.2 ml)和LiOH (50 mg)。将反应物在60℃搅拌2 h。结束后，使反应物冷却至环境温度，过滤，并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈: 水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈: 水；梯度：30-70%B历时15分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(15.9 mg, 37%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 7.17 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 7.02 (s, 1H), 5.74 (br. s., 1H), 4.13 (s, 2H), 3.53 (br. s., 1H), 3.42 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.21 (d, J=11.3 Hz, 1H), 2.93 - 2.85 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.69 - 1.36 (m, 4H), 1.16 (s, 9H), 1.10 (s, 3H), 1.02 (s, 3H)； LCMS (ESI, M): 548.3。 [0143] 实施例3 [0144] [0145] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸: 向(S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌 啶-1-基)-2-((3-(4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨甲酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基) 乙酸-甲酯(30 mg, 0.052 mmol, 1当量)在甲苯(1 mL)中的溶液中加入Lawesson's试剂 (23 mg, 0.057 mmol, 1.1当量)。将反应物在60℃加热2 h。冷却至环境温度后，将反应物在真空中浓缩。将粗产物溶解于MeOH (1 mL)中，并加入1 N NaOH (0.16 mL, 0.16 mmol, 3当量)。将反应物在65℃搅拌4 h。结束后，使反应物冷却至环境温度，过滤，并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x mm, 5-μm颗粒； [0146] 流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈: 水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈: 水；梯度：40-100%B历时20分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(6.2 mg, 21%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 8.2, 5.8 Hz, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.16 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 5.75 (br. s., 1H), 4.22 (s, 2H), 3.30 - 3.29 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 1.90 (s, 5H), 1.17 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.03 (s, 3H)。LCMS (ESI, M+1) = 565.3。 [0147] 实施例4 [0148] [0149] (S)-2-(2-(3-苄基-1,2,4-噁二唑-5-基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸: 向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代 乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸钠盐(20 mg, 0.044 mmol, 1当量)在DCM (0.4 mL)中的溶液中加入草酰氯(0.006 mL, 0.066 mmol, 1.5当量) 和DMF (1滴)。将反应物搅拌1 h，然后在真空中浓缩。将残余物再溶解在MeCN (0.4 mL)和(Z)-N'-羟基-2-苯基乙脒(7 mg, 0.049 mmol, 1.1当量)中，并加入DIPEA (0.010 mL, 0.057 mmol, 1.3当量)。然后将反应物加热至85℃保持18 h。冷却至环境温度后，将反应物在真空中浓缩。将粗产物溶解于MeOH (1 mL)、水(0.1 ml)中，并加入LiOH (79 mg, 3.30 mmol, 60当量)。将反应物在60℃搅拌1 h。结束后，使反应物冷却至环境温度，过滤，并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈: 水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈: 水；梯度：30-70%B历时 20分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(10.3 mg, 33%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 7.35 (d, J = 4.0 Hz, 5H), 7.27 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 5.78 (br. s., 1H), 4.17 (s, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.66 - 1.37 (m, 4H), 1.16 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 1.01 (s, 3H)；LCMS (ESI, M): 531.3。 [0150] 实施例5 [0151] [0152] (S)-2-(2-(5-苄基-1,3,4-噁二唑-2-基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸: 向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代 乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸钠盐(30 mg, 0.070 mmol, 1当量)在DCM (0.5 mL)中的溶液中加入草酰氯(11 mg, 0.083 mmol, 1.2当量)和 DMF (1滴)。将反应物搅拌1 h，然后在真空中浓缩。将残余物再溶解在DCM (0.70 mL)和2-苯基乙酰肼(15 mg, 0.097 mmol, 1.4当量)中，并加入DIPEA (0.027 mL, 0.153 mmol, 2.2当量)。搅拌30 min以后，加入Burgess试剂(66 mg, 0.278 mmol, 4当量)，并将反应物搅拌18 h。将反应物在真空中浓缩。将粗产物溶解于MeOH (1 mL)、水(0.1 ml)中，并加入LiOH (83 mg, 3.48 mmol, 50当量)。将反应物在60℃搅拌1 h。结束后，使反应物冷却至环境温度，过滤，并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈: 水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈: 水；梯度：20-60%B历时20分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(5 mg, 14%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 7.41 - 7.22 (m, 6H), 5.76 (br. s., 1H), 4.37 (s, 2H), 3.19 (d, J = 11.6 Hz, 3H), 2.96 - 2.91 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 1.65 - 1.40 (m, 4H), 1.16 (s, 9H), 1.12 (br. s., 3H), 1.02 (br. s., 3H)；LCMS (ESI, M): 531.3。 [0153] 中间体12 [0154] [0155] (2S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-((1-氰基-2-(4-氟苯基)乙基)氨甲酰基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸-甲酯: 将(S)-6-(1-(叔丁氧基)- 2-甲氧基-2-氧代乙基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸钠 盐(110 mg, 0.242 mmol, 1当量)、2-氨基-3-(4-氟苯基)丙烷腈, HCl (68 mg, 0.339 mmol, 1.4当量)、DIPEA (0.13 mL, 0.339 mmol, 3当量)和HATU (129 mg, 0.339 mmol, 1.4当量)在DMF (1.4 mL)中的溶液搅拌1 h。然后将反应物用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥 (Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗产物通过快速柱色谱法(0-100%EtOAc [2%TEA]/己烷)纯 化，得到作为白色固体的产物(112 mg, 80%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.23 - 8.16 (m, 1H), 7.75 - 7.67 (m, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 2H), 7.22 - 7.17 (m, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 6.08 - 6.00 (m, 1H), 5.38 - 5.28 (m, 1H), 3.71 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.63 - 3.56 (m, 1H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.27 - 3.18 (m, 2H), 3.13 - 3.04 (m, 1H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.74 - 1.62 (m, 2H), 1.54 - 1.43 (m, 2H), 1.25 (s, 9H), 1.14 (s, 3H), 1.08 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+1): 578.35。 [0156] 中间体13 [0157] [0158] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(4-氯-5-(4-氟苄基)-1H-咪唑-2-基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸-甲酯: 向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-(2- ((1-氰基-2-(4-氟苯基)乙基)氨甲酰基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2- a]吡啶-6-基)乙酸-甲酯(101 mg, 0.175 mmol, 1当量)和CCl4 (0.042, 0.437 mmol, 2.5当量)在MeCN (1.7 mL)中的溶液中加入PPh3 (115 mg, 0.437 mmol, 2.5当量)。将反 应物加热至45℃保持6 h。冷却至环境温度后，将反应物用DCM稀释，用1 N NaOH洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗产物通过快速柱色谱法(0-100%EtOAc [2%TEA]/己烷)纯 化，得到作为黄色固体的产物(60 mg, 58%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 - 8.03 (m, 1H), 7.27 - 7.22 (m, 3H), 7.03 - 6.95 (m, 2H), 6.02 - 5.90 (m, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.63 - 3.54 (m, 1H), 3.49 - 3.40 (m, 1H), 3.20 - 3.10 (m, 1H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.48 (br. s., 3H), 1.78 - 1.51 (m, 4H), 1.24 (s, 9H), 1.16 (s, 3H), 1.09 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+1): 596.35。 [0159] 实施例6 [0160] [0161] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(4-氯-5-(4-氟苄基)-1H-咪唑-2-基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸: 将(S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(4-氯- 5-(4-氟苄基)-1H-咪唑-2-基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6- 基)乙酸-甲酯(20 mg, 0.034 mmol, 1当量)和LiOH一水合物(42 mg, 1.01 mmol, 30当 量)在MeOH (1 mL)和水(几滴)中的溶液在60℃加热3 h。冷却至环境温度后，将反应物过滤并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈: 水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈: 水；梯度： 40-80%B历时15分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(14.8 mg, 76%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 13.21 - 12.87 (m, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.33 - 7.28 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.14 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 5.80 (br. s., 1H), 3.92 (s, 2H), 3.62 - 3.54 (m, 2H), 3.23 - 3.14 (m, J = 9.5 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.67 - 1.55 (m, 2H), 1.50 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.17 (s, 9H), 1.13 (s, 3H), 1.03 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+1): 582.3。 [0162] 实施例7 [0163] [0164] (S)-2-(叔丁氧基)-2-(5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟苄基)-1H-咪唑-2-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙酸: 将(S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(4-氯-5-(4- 氟苄基)-1H-咪唑-2-基)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙 酸-甲酯(40 mg, 0.067 mmol, 1当量)、TsOH一水合物(15 mg, 0.081 mmol, 1.2当量)和 10%Pd/C (14 mg, 0.013 mmol, 0.2当量)在MeOH (1.3 mL)中的溶液在氢气舱下搅拌6天。 将反应物穿过硅藻土过滤，用MeOH洗脱。在真空中浓缩滤液。将粗制的咪唑溶解于MeOH (1 mL)和水(数滴)中。加入LiOH一水合物(84 mg, 2.01 mmol, 30当量)，并将反应物在60℃加热2 h。冷却至环境温度后，将反应物过滤并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95乙腈: 水；流动相B： 含有10-mM乙酸铵的95:5乙腈: 水；梯度：40-100%B历时20分钟，然后在100%B保持5-分钟； 流速：20 mL/min，得到产物(4.4 mg, 11%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.03 - 7.91 (m, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 7.16 - 7.04 (m, 3H), 6.79 - 6.70 (m, 1H), 5.62 - 5.43 (m, 1H), 3.89 - 3.84 (m, 2H), 3.67 - 3.52 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.63 - 1.34 (m, 4H), 1.14 (s, 9H), 1.12 (br. s., 3H), 1.03 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+ 1): 548.4。 [0165] 中间体14 [0166] [0167] 4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯: 在N2气氛下，将3N的甲基溴化镁在乙醚中的溶液(1.67 mL, 5.02 mmol)逐滴加入冷却的(-25℃) 4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (4g, 20.08 mmol)在乙醚(20 mL)中的溶液。将反应混合物温热至室温，并搅拌2 h。然后将它冷却至0℃，并通过加入饱和氯化铵水溶液进行淬灭。加入另外20 mL乙醚，并将混合物在分液漏斗中分离。将有机相放在一边，并将水相用另外20 mL乙醚萃取。将合并的乙醚萃取物经MgSO4干燥、过滤并蒸发，得到油，然后将其通过biotage纯化，用0-50%EtOAc/己烷洗脱，得到作为无色油的4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.30 g, 18.0 mmol, 90%)。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.84 - 3.65 (m, 2H), 3.34 - 3.18 (m, 2H), 2.59 - 2.39 (m, 1H), 1.61 - 1.53 (m, 4H), 1.50 - 1.45 (m, 9H), 1.32 - 1.27 (m, 3H)。 [0168] 中间体15 [0169] [0170] 4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯: 在0℃向4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.30 g, 20.0 mmol)在DMF (50 mL)中的混合物中加入NaH (60重量%) (1.60 g, 39.9 mmol)。然后将混合物在室温搅拌2h。在此时，历时5 min缓慢地加入烯丙基溴(8.64 mL, 100 mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h。然后将它冷却至0℃，并用饱和氯化铵水溶液淬灭。将反应混合物用乙醚萃取。将有机相经MgSO4干燥、过滤并浓缩，得到无色油，然后将其通过biotage纯化，用0-25%EtOAc/己烷洗脱，分离出3.1 g (61%)作为无色油的4-(烯丙 氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.02 - 5.90 (m, 1H), 5.32 (dd, J=17.2, 1.7 Hz, 1H), 5.16 (dd, J=10.4, 1.4 Hz, 1H), 3.94 - 3.88 (m, 2H), 3.73 (br. s., 2H), 3.19 (br. s., 2H), 1.78 (d, J=13.1 Hz, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 11H), 1.21 (s, 3H)。 [0171] 中间体16 [0172] [0173] 4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶氯化氢盐: 将4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.10 g, 12.1 mmol)和4N HCl/二噁烷(15 mL, 60.0 mmol)的混合物在室温搅拌3h。然 后将它在真空中浓缩，得到2.2 g (95%)作为浅棕色固体的4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶盐酸 盐。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 6.02 - 5.92 (m, 1H), 5.33 (dd, J=17.2, 1.7 Hz, 1H), 5.15 (dd, J=10.6, 1.7 Hz, 1H), 3.96 (dt, J=5.1, 1.6 Hz, 2H), 3.23 - 3.18 (m, 4H), 2.06 (dd, J=15.3, 2.5 Hz, 2H), 1.77 - 1.69 (m, 2H), 1.31 - 1.28 (s, 3H)。通过将HCl盐与Na2CO3水溶液一起搅拌并用DCM萃取，得到游离碱(棕色固体)。 [0174] 中间体17 [0175] [0176] 6-氨基-2-氯-4-甲基烟酸叔丁酯。将2,6-二氯-4-甲基烟酸叔丁酯(10.5 g, 40.1 mmol, 1当量)、Pd2(dba)3 (1.84 g, 2.01 mmol, 0.05当量)、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽（xantphos）(2.32 g, 4.01 mmol, 0.1当量)和Cs2CO3在二噁烷(通过用氮气在其中鼓泡10 min进行除氧)中制浆，并加入。加入二苯甲酮亚胺(8.0 mL, 48.1 mmol, 1.2当 量)，并将混合物在90℃加热1 h。冷却至环境温度后，将反应物用EtOAc稀释，并用水洗涤、干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗产物溶解于MeOH (200 mL)和NaOAc (9.87, 120 mmol, 当量)中，并加入盐酸羟胺(5.57 g, 80 mmol, 2当量)。30 min以后，将反应物加入1 N NaOH中，并用DCM (x2)萃取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速柱色谱法(0-30%EtOAc/己烷)纯化，得到6-氨基-2-氯-4-甲基烟酸叔丁酯(7.5 g, 77%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.22 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 4.58 (br. s., 2H), 2.27 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 1.60 (s, 9H)；LCMS (ESI, M+1): 243.1。 [0177] 中间体18 [0178] [0179] 5-氯-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2,6-二甲酸6-叔丁酯2-乙酯。将6-氨基-2-氯-4-甲基烟酸叔丁酯(9.4 g, 38.7 mmol, 1当量)和溴代丙酮酸乙酯(6.5 mL, 46.5 mmol, 1.2当量)在EtOH (194 mL)中的溶液加热至回流保持2 h。冷却至环境温度后，在真空中浓 缩溶液。将残余物在乙醚中研磨并过滤，得到作为奶油色固体的产物(11.4 g, 70%)。LCMS (ESI, M+1): 339.1。 [0180] 中间体19 [0181] [0182] 5-氯-2-(乙氧基羰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酸。将5-氯-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2,6-二甲酸6-叔丁酯2-乙酯(11.4 g, 27.2 mmol, 1当量)用TFA (100 mL)处理并搅拌2 h。结束后，将反应物在真空中浓缩。将粗产物在乙醚中研磨并过滤，得到作为奶油色固体的产物(10.8 g, 100%)。LCMS (ESI, M+1): 283.1。 [0183] 中间体20 [0184] [0185] 5-氯-6-(2-甲氧基-2-氧代乙酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸乙酯。向5-氯-2-(乙氧基羰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酸(0.46 g, 1.623, 1当量)和1- (氰基甲基)四氢-1H-噻吩-1-鎓, 溴化物盐(0.47 g, 2.27 mmol, 1.4当量)在DCM (16 mL)中的浆中加入DIPEA (1.13 mL, 6.49 mmol, 4当量)，然后加入HATU (0.86 g, 2.27 mmol, 1.4当量)。2 h以后，加入更多的1-(氰基甲基)四氢-1H-噻吩-1-鎓, 溴化物盐(0.20 g)和DIPEA (0.5 mL)。搅拌18 h以后，将反应物加入饱和NaHCO3水溶液，并用DCM (x2)萃 取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗制的硫叶立德溶解于MeOH (16 mL)中，并加入过一硫酸氢钾复合盐(2.4 g, 3.90 mmol, 2.4当量)在水(5 mL)中的溶液。2天后，加入更多的过一硫酸氢钾复合盐(2.4 g, 3.90 mmol, 2.4当量)。6 h后，将反应物小心地加入饱和NaHCO3水溶液，并用DCM (x3)萃取。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过快速柱色谱法(20-100%EtOAc/己烷)纯化，得到作为粘稠黄色油的产物(0.40, 76%)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.55 - 7.52 (m, 1H), 4.51 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 2.40 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.47 (t, J = 7.2 Hz, 3H)；LCMS (ESI, M+1): 325.05。 [0186] 中间体21 [0187] [0188] 5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(2-甲氧基-2-氧代乙酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸乙酯: 将5-氯-6-(2-甲氧基-2-氧代乙酰基)-7-甲基咪唑并[1,2- a]吡啶-2-甲酸乙酯(0.75 g, 2.31 mmol, 1当量)、4-烯丙氧基-4-甲基哌啶, HCl (0.66 g, 3.46 mmol, 1.5当量)和DIPEA (1.21 mL, 6.93 mmol, 3当量)在DMF (11.5 mL)中的 溶液搅拌1 h。然后将反应物加入饱和NaHCO3水溶液中，并用EtOAc (x2)萃取。将合并的 EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶快速色谱法(0-100%EtOAc [2%TEA]/己烷)纯化，得到产物(0.85 g, 83%)。LCMS (ESI, M+1): 444.25。 [0189] 中间体22 [0190] [0191] (S)-5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-羟基-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯: 向5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(2- 甲氧基-2-氧代乙酰基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸乙酯(0.86 g, 1.94 mmol, 1 当量)在甲苯(19 mL)中的搅拌黄色溶液中加入(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2- c][1,3,2]氧杂氮杂硼杂环戊二烯/甲苯(0.54 g, 1.94 mmol, 1当量)。将反应物冷却至- 40℃(乙腈/干冰浴)，并历时10 min加入50%儿茶酚硼烷在甲苯(0.93 mL, 3.88 mmol, 2当 量)中的溶液。将反应混合物在-15℃搅拌2 h。结束后，将反应物用EtOAc (30 mL)和饱和 NaHCO3 (10 mL)稀释。将混合物剧烈搅拌30 min。将有机相用饱和NaHCO3水溶液(2 X 5 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(0-10%MeOH/DCM)纯化，得到作为灰白色固体的期望产物(0.86 g, 100%)。LCMS (ESI, M+1): 446.25。 [0192] 中间体23 [0193] [0194] (S)-5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯:将(S)-5-(4,4-二甲基哌啶-1-基)-6-(1- 羟基-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯(1.3 g, 3.22 mmol, 1当量)悬浮于DCM (3 mL)和乙酸叔丁酯(10 mL)中。穿过密封的橡胶塞，向该混合物中加入70%HClO4 (0.831 mL, 9.67 mmol, 3当量)。2 h以后，LCMS指示约60%转化率。将反应物用1 N NaOH洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶快速色谱法(0- 100%EtOAc [2%TEA]/己烷)纯化，得到产物(0.68 g, 46%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.22 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.47 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.60 (td, J = 11.4, 2.8 Hz, 1H), 3.49 (td, J = 11.5, 2.6 Hz, 1H), 3.10 (dt, J = 11.9, 3.5 Hz, 1H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.44 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.73 - 1.48 (m, 7H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 1.24 (s, 10H), 1.15 (s, 3H), 1.08 (s, 3H)；LCMS (ESI, M+1): 502.35。 [0195] 中间体24 [0196] [0197] (S)-5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸钠盐：将(S)-5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1- 基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯 (450 mg, 0.923 mmol, 1当量)溶解在MeOH (9 mL)中。向该溶液中加入1 N NaOH (1.02 mL, 1.015 mmol, 1.1当量)。将反应物在60℃搅拌2 h。冷却至环境温度后，将反应物在真空中浓缩。然后将残余物与甲苯一起共沸，得到淡棕色固体(S)-5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基 哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲 酸(400 mg, 92%收率)，将其原样用于以后的反应。LCMS (ESI, M+1): 474.35。 [0198] 中间体25 [0199] [0200] (S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-7-甲基-2-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸-甲酯：向(S)-5-(4- (烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-甲氧基-2-氧代乙基)-7-甲基咪唑并 [1,2-a]吡啶-2-甲酸(1.0 g, 2.112 mmol, 1当量)在THF (84 ml)中的溶液中加入三乙胺 (0.59 mL, 0.100 mmol, 2当量)和叠氮磷酸二苯酯(0.92 mL, 0.100 mmol, 2当量)。搅拌 16 h以后，加入2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(0.50 g, 4.22 mmol, 2当量)，并将反应物回流6 h。冷却至环境温度后，将反应物在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶快速色谱法(0-60%EtOAc [2%TEA]/己烷)纯化，得到(S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-7-甲基-2-(((2- (三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸-甲 酯(1.0 g, 80%)。LCMS (ESI, M+1): 589.4。 [0201] 中间体26 [0202] [0203] (S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-氨基-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸-甲酯: 将(S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-7- 甲基-2-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁 氧基)乙酸-甲酯(0.85 g, 1.444 mmol)和TBAF (1.877 ml的1 M的在THF中的溶液，1.877 mmol, 1.3当量)在THF (14 ml)中的溶液搅拌3 h。将反应物用EtOAc稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩，得到作为黄色泡沫的产物(460 mg, 72%)，将其原样使用。LCMS(ESI, M+1): 445.3。 [0204] 实施例8 [0205] [0206] (S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-氟苯基)甲基磺酰氨基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸：向(S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基 哌啶-1-基)-2-氨基-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸-甲酯(30 mg, 0.067 mmol)和TEA (28.2µL, 0.202 mmol, 3当量)在THF (0.45 mL)中的溶液中加入(4- 氟苯基)甲磺酰氯(28.2 mg, 0.135 mmol, 2当量)，并搅拌18 h。然后向反应物中加入水 (0.45 mL)、MeOH (0.45 mL)和LiOH一水合物(160 mg, 4.05 mmol, 30当量)。将反应物在 50℃加热2 h。冷却至环境温度后，将混合物过滤，并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95甲醇: 水；流动相B： 含有10-mM乙酸铵的95:5甲醇: 水；梯度：50-90%B历时20分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(40.6 mg, 100%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.43 - 7.36 (m, 2H), 7.27 - 7.07 (m, 4H), 6.11 - 5.99 (m, 1H), 5.89 (br. s., 1H), 5.37 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.15 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 2H), 4.00 - 3.95 (m, 2H), 3.70 - 3.62 (m, 2H), 2.99 - 2.91 (m, 1H), 2.66 - 2.58 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.88 - 1.63 (m, 4H), 1.24 (s, 3H), 1.18 (s, 9H)；LCMS (ESI, M): 602.3。 [0207] 实施例9 [0208] [0209] (S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-氟苯基磺酰氨基)-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸：向(S)-2-(5-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1- 基)-2-氨基-7-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸-甲酯(20 mg, 0.045 mmol, 1当量)和TEA (18µL, 0.135 mmol, 3当量)在THF (0.30 mL)中的溶液中加入4-氟 苯-1-磺酰氯(17.51 mg, 0.090 mmol, 2当量)，并搅拌18 h。然后向反应物中加入水(0.30 mL)、MeOH (0.30 mL)和LiOH一水合物(54 mg, 135 mmol, 30当量)。将反应物在50℃加热2 h。冷却至环境温度后，将混合物过滤，并用以下条件通过制备型LC/MS纯化：柱: XBridge C18, 19 x mm, 5-μm颗粒；流动相A：含有10-mM乙酸铵的5:95甲醇: 水；流动相B：含有10-mM乙酸铵的95:5甲醇: 水；梯度：50-90%B历时20分钟，然后在100%B保持5-分钟；流速：20 mL/min，得到产物(3.5 mg, 13%)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.87 (br. s., 2H), 7.41 - 6.98 (m, 5H), 6.17 - 5.85 (m, 2H), 5.81 (br. s., 1H), 5.52 - 5.08 (m, 2H), 4.07 - 3.84 (m, 3H), 2.97 (br. s., 1H), 2.35 (br. s., 3H), 1.88 - 1.57 (m, 4H), 1.25 (br. s., 3H), 1.19 - 1.10 (m, 9H)；LCMS (ESI, M): 588.2。 [0210] 对于本领域技术人员显而易见的是，本公开内容不限于前述示例性实施例，且在不背离本发明的基本属性的情况下，它可以以其它具体形式实施。因此，期望所述实施例在所有方面都被视为示例性的而非限制性的，应该参考所附权利要求书而非前述实施例，且 因此在权利要求的等同方案的含义和范围内的所有变化都意图被包括在权利要求中。 |
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