発明の詳細な説明 ［技術分野］
本発明は、キラル異性体を互いに分離する分野に関する。 詳細には、本発明は、クロマン化合物、特にトコフェロール及びトコトリエノール並びにそれらのエステル及び中間体の、キラル異性体の分離の分野に関する。 ［発明の背景］
分子中のキラル中心の存在は、多くの場合、異なるキラル異性体をもたらす。 分子中のキラル中心の数が多ければ多いほど、異なる異性体の数は多くなる。 そのようなキラル分子の合成においては、通常、キラル異性体の混合物が形成される。 しかしながら、キラル化合物を、例えばそれらは異なる特性を有しているので、互いに分離することが望ましいことが非常に多い。 クロマン化合物は、キラル天然物及び生物活性化合物の重要なクラスを代表する。 クロマン化合物の１つの重要なクラスは、ビタミンＥ及びそのエステルである。 多くの場合、ビタミンＥは、そのエステルの形態で商品化されており、というのは、後者は向上した安定性を示すからである。 一方において、ビタミンＥの典型的な技術的合成は、異性体の混合物をもたらす。 また他方において、分子の環中のエーテル原子の隣に位置しているキラル中心（本書面において後で用いられる式の中で＊で示される）においてＲ配置（即ち、２Ｒ配置）を有するトコフェロール及びトコトリエノールによって、Ｓ配置を有する対応する異性体と比較して、概してより高い対生物活性（生物作用能）が生ずることが示されている。 特に活性があるのは、例えばＨ． Ｗｅｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ． によりＪ． Ｎｕｔｒ． １９９６，１２６（１０），２５３９−４９において開示されているように、全てのキラル中心において天然配置を有するトコフェロールの異性体（例えば、（Ｒ，Ｒ，Ｒ）−トコフェロール）である。 このことは、異性体を分離するための効率的な方法に対する強い欲求に繋がる。 従って、ビタミンＥの、またそれのみならずそのエステルの、特にその酢酸エステルの、及びその前駆体の、異性体分離に主要な関心がある。 Ｓ． Ｋ． ＪｅｎｓｅｎによりＶｉｔａｍｉｎｓ ａｎｄ Ｈｏｒｍｏｎｅｓ ２００７，Ｖｏｌ． ７６，２８１−３０８において開示されているように、キラル化合物のクロマトグラフィー分離は、特定のキラル異性体の分離のための適切な方法であることが分かっている。 工業的クロマトグラフィー分離プロセスに特に適しているのは、擬似移動床（Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ Ｍｏｖｉｎｇ Ｂｅｄ：ＳＭＢ）クロマトグラフィーであり、というのはこれは、分離効率の向上及び分離に必要な溶離剤の量の低減に繋がるからである。 キラル異性体の一部のみが所望の配置を有しているので、いずれの公知の分離方法も、本来的に、所望の異性体を少量しかもたらさない。 所望の異性体のこの量は、キラル中心の数が増加するにつれて少なくなる。 説明のために、以下のことが述べられる：各キラル中心における統計的分布を仮定するならば、所望の異性体の量は、１個のキラル中心の場合は５０％、２個のキラル中心の場合は２５％、３個のキラル中心の場合は１２．５％である。 所望の異性体のみが標的分子であるので、合成された生成物の大半、即ち非所望の異性体は、典型的には、処理または廃棄されることになり、これは非常に高くつく。 こうした固有の問題を克服するために、所望の異性体のみの選択的形成を可能にする立体特異的合成を提供することが試みられてきた。 しかしながら、こうした方法は、異性体混合物をもたらす従来の工業的合成と比較して、非常に費用がかかり、複雑で、かつ／または珍しい。 ［発明の概要］
従って、本発明が解決しようとする課題は、クロマン化合物のキラル異性体、特にトコフェロール及びトコトリエノール並びにそれらのエステル及び中間体のキラル異性体を、所望の異性体についてより高い収率で分離する方法であって、従来の合成方法により調製される異性体混合物の使用を可能にするであろう方法を提供することである。 驚くべきことに、請求項１に記載の方法が、この課題を解決できることが見出された。 この方法は、クロマトグラフィー分離を調整することと非所望の異性体の異性化とによって、主として所望の異性体の任意のものについて収率を最適化することを可能にする。 工業生産における本方法の実施においては非所望の異性体が異性化され、従って部分的に所望の異性体に変換されるので、立体特異的な合成経路を採用する必要なしに、異性体の混合物からの所望の異性体についてのほぼ１００％の収率を可能にする方法が、今回提供され得る。 本発明の方法が容易であり、かつ特定の必要に適合され得ることが示された。 更には、少量のアルコール及び／または６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）が添加された主として炭化水素からなる溶離剤が使用される場合に、キラル相による特に良好な分離が得られることも見出された。 本発明の更なる態様は、更なる独立請求項の主題である。 特に好ましい実施形態は、従属請求項の主題である。
図１は、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール（Ｒ ２ ＝Ｈ）または（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェリルアセテート（Ｒ ２ ＝ＣＯＣＨ ３ ）を生成する好ましい実施形態を、それぞれ概略的に示している。 図２は、種々の実行可能な事柄を概略的に示している。 図３は、キラル相が所望の異性体（Ｉ）（本図においてはＲ−異性体）を第１の溶出成分として完全に分離する場合を、概略的なクロマトグラムで示している。 図４は、キラル相が所望の異性体（Ｉ）（本図においてはＲ−異性体）を部分的にしか分離しない場合を、同様に概略的なクロマトグラムによって示している。 図５は、図４の例において溶出液（実線）が二重線で示された保持時間まで回収され、残りの部分（Ｉ'）が１００％のＳ−異性体と約８５％の所望のＲ−異性体とを含む場合を、残りの部分（Ｉ'）及びその異性体Ｒ（点線）またはＳ（破線）の概略的なクロマトグラムによって示している。 図６は、Ｒ配置にある分子の数とＳ配置にある分子の数との比が工程ｃ）における異性化後に５０：５０となる最適な場合を、概略的なクロマトグラムによって示している。 図７は、更なる分離の対象である式（Ｉ−Ａ）の異性体の混合物が貯蔵される場合の実施形態についての概念図を示している。 図８は、工程ｃ）において得られた異性化した異性体が、工程ａ）における式（Ｉ−Ａ）の異性体の流れに添加される場合を、概略的に示している。 図９は、複数の分離カラムまたは複数のＳＭＢユニット１を用いたプロセスの概念図を示している。 図１０ｂ）は、実施例１において調製された６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（３Ｅ，７Ｅ）−４，８，１２−トリメチルトリデカ−３，５，１１−トリエニル）クロマン−４−オンをＨＰＬＣにより分析した際のクロマトグラムを示し、図１０ａ）は、これの調製用ＨＰＬＣ分離のクロマトグラムを示し、図１０ｃ）または図１０ｄ）は、それぞれ回収された第１の画分または第２の画分のクロマトグラムを示している。 図１１ｂ）は、実施例２において（全−ｒａｃ）−α−トコフェロール（ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）をＨＰＬＣにより分析した際のクロマトグラムを示し、図１１ａ）は、これの調製用ＨＰＬＣ分離のクロマトグラムを示し、図１１ｃ）または図１１ｄ）は、それぞれ回収された第１の画分または第２の画分のクロマトグラムを示している。 図１２ｂ）は、実施例３において２−ａｍｂｏ−α−トコフェロールをＨＰＬＣにより分析した際のクロマトグラムを示し、図１２ａ）は、これの調製用ＨＰＬＣ分離のクロマトグラムを示し、図１２ｃ）または図１２ｄ）は、それぞれ回収された第１の画分または第２の画分のクロマトグラムを示している。 図１３は、実施例７の異性化生成物のクロマトグラムを示している。 図１４は、実施例９の異性化生成物のクロマトグラムを示している。 図１５は、溶離剤中に異なるアルコールを用いた異性体の分離を示している。 図１５は、溶離剤中に異なるアルコールを用いた異性体の分離を示している。 図１５は、溶離剤中に異なるアルコールを用いた異性体の分離を示している。 図１６は、溶離剤中の６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）の有益な効果を示している。 図１６は、溶離剤中の６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）の有益な効果を示している。 図１６は、溶離剤中の６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）の有益な効果を示している。 図１６は、溶離剤中の６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）の有益な効果を示している。 図１７は、負荷能力に対する、溶離剤中のアルコールと６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）との組み合わせの有益な効果を示している。 図１７は、負荷能力に対する、溶離剤中のアルコールと６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）との組み合わせの有益な効果を示している。 図１７は、負荷能力に対する、溶離剤中のアルコールと６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）との組み合わせの有益な効果を示している。 。 図１７は、負荷能力に対する、溶離剤中のアルコールと６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）との組み合わせの有益な効果を示している。 ［発明の詳細な説明］
第１の態様において、本発明は、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体
［式中、Ｒ
１ 、Ｒ ３及びＲ ４は、互いに独立して、水素またはメチル基であり、
Ｒ
２は、水素またはフェノール保護基を表し、
Ｒ
５は、完全に飽和した直鎖もしくは分岐のＣ ６〜２５ −アルキル基か、または少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む直鎖もしくは分岐のＣ ８〜２５ −アルキル基を表し、
そして式中、
＊は、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体のキラル中心を表す］
を分離する方法であって、
ａ）式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物を供給する工程と、
ｂ）所望の異性体（Ｉ）と残りの部分（Ｉ'）とへの、キラル相による、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体の混合物のクロマトグラフィー分離の工程と、
ｃ）工程ｂ）で分離される残りの部分（Ｉ'）の異性体の、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）中の
＊で示された中心におけるキラリティーを異性化する工程と、
ｄ）工程ｃ）で得られた異性化した異性体を、更なる分離の対象である式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物に添加する工程と、
ｅ）所望の異性体（Ｉ）を回収する工程とを含む、方法に関する。
用語「ビタミンＥ」は、α−トコフェロールの生物学的活性を定性的に示す全てのトコール誘導体及びトコトリエノール誘導体に対する包括的な記述語として、本書面において使用される（ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎ １９８１、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１２３，４７３−４７５（１９８２））。 用語「（全−ｒａｃ）−α−トコフェロール」は、（２ＲＳ，４'ＲＳ，８'ＲＳ）−α−トコフェロール、即ち、全てのキラル中心（２、４'及び８'）において混合配置を有するα−トコフェロールを特定するものである。 本書面における用語「互いに独立して」とは、置換基、部分または基の文脈において、同様に示された置換基、部分または基が、同じ分子内において異なる意味を持って同時に存在し得ることを意味している。 本書面においては、点線はいずれも、置換基を分子の残部に結合している結合を表す。 「Ｃ ｘ〜ｙ −アルキル」基、「Ｃ ｘ〜ｙ −アシル」基は、それぞれ、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含むアルキル基、アシル基である。 用語「アルキル基」は、本書面において、Ｃ及びＨからなる全飽和の（即ち完全に飽和した）置換基だけに限定されるのではなく、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有するＣ及びＨからなるかかる置換基をも含むというように理解されるべきである。 従って、例えば−ＣＨ ２ −ＣＨ ２ −ＣＨ ２ −ＣＨ ２ −ＣＨ（ＣＨ ３ ）−ＣＨ ３及び−ＣＨ ２ −ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ ２ −ＣＨ（ＣＨ ３ ）−ＣＨ ３は、両方ともＣ ７ −アルキル基と見なされる。 用語「実質的に」は、例えば、９５％より多く、特に９８％より多く、好ましくは９９％より多くの量を示すために本書面において使用される。 「ｐＫ ａ 」は、酸解離定数の負の１０進法対数（ｐＫ ａ ＝−ｌｏｇ １０ Ｋ ａ ）として一般に知られている。 有機酸が数個のプロトンを有する場合、ｐＫ ａは、第１のプロトンの解離（Ｋ ａ１ ）に関する。 示されるｐＫ ａ値は、室温におけるものである。 当業者は、特定の酸の酸性度が、適切な溶媒中で測定され、個々の測定法によって、またはｐＫ ａの測定が異なる溶媒中で測定されたという事実に起因して異なり得、従って異なるｐＫ ａ値が、ある特定の酸について見出され得るということを理解している。 従って、ある酸について異なるｐＫ ａ値が文献において見出され得、そのうちの少なくとも１つは本書面で示されるｐＫ ａ範囲の中にあるが、他の値は前記範囲の外にあるのが見出されるという、臨界的な場合において、そのような酸は、そのｐＫ ａ値の範囲内にあるものと見なされると定義される。 本書面において、用語「異性化した（ｉｓｏｍｅｒｉｚｅｄ）」または「異性化（ｉｓｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）」または「異性化する（ｉｓｏｍｅｒｉｚｉｎｇ）」は、キラリティーの変更に関する。 従って、別の原子連結（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｔｏｍｓ）をもたらす構造異性化は、この用語によって意味されない。 更に、本書面については、この用語は、シス／トランス異性化も除外する。 当該方法は、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体の分離を可能にする。 詳細には、この分離は、キラル中心（１つまたは複数）において異なる配置を有しているが、同じ化学構造（即ち同じ原子連結）を有しているキラル異性体の分離に関する。 残基Ｒ ５は、長鎖残基を表し、特に、問題になっている分子の疎水性挙動に係わっている。 好ましくは、基Ｒ ５は、式（ＩＩ）
のものである。
式（ＩＩ）中、ｍ及びｐは、互いに独立して、０〜５の値を表し、但し、ｍとｐとの合計は１〜５である。 更に、ｓ１及びｓ２で表される式（ＩＩ）中の部分構造は、任意の配列であることができる。 点線は、式（ＩＩ）の置換基を式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の残部に結合している結合を表す。 １つの好ましい実施形態において、ｍは３を表し、ｐは０を表す。 別の好ましい実施形態において、ｐは３を表し、ｍは０を表す。 別の好ましい実施形態において、ｍ＝１及びｐ＝０である。 特に好ましくは、コルジアクロメン（２−メチル−２−（４−メチルペンタ−３−エニル）−２Ｈ−クロメン−６−オール）であり、これは、非常に特異的な生物学的活性（例えば、抗炎症活性）を示す公知の化合物である。 従って、Ｒ ５は、好ましくは、式（ＩＩ−Ａ）、特に（ＩＩ−ＡＲＲ）、または（ＩＩ−Ｂ）のものである。
好ましくは、以下の組み合わせのＲ １ 、Ｒ ３及びＲ ４である。
Ｒ １ ＝Ｒ ３ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３
またはＲ １ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ３ ＝Ｈ
またはＲ １ ＝Ｈ、Ｒ ３ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３
またはＲ １ ＝Ｒ ３ ＝Ｈ、Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ １つの実施形態において、式（Ｉ−Ｂ）のキラル異性体は、コルジアクロメン（２−メチル−２−（４−メチルペンタ−３−エニル）−２Ｈ−クロメン−６−オール）の異性体である。 最も好ましくは、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体は、
・α−トコフェロール（Ｒ １ ＝Ｒ ３ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ａ）、特に（ＩＩ−ＡＲＲ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・β−トコフェロール（Ｒ １ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ３ ＝Ｈ、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ａ）、特に（ＩＩ−ＡＲＲ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・γ−トコフェロール（Ｒ １ ＝Ｈ、Ｒ ３ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ａ）、特に（ＩＩ−ＡＲＲ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・δ−トコフェロール（Ｒ １ ＝Ｒ ３ ＝Ｈ、Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ａ）、特に（ＩＩ−ＡＲＲ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・α−トコトリエノール（Ｒ １ ＝Ｒ ３ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ｂ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・β−トコトリエノール（Ｒ １ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ３ ＝Ｈ、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ｂ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・γ−トコトリエノール（Ｒ １ ＝Ｈ、Ｒ ３ ＝Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ｂ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
・δ−トコトリエノール（Ｒ １ ＝Ｒ ３ ＝Ｈ、Ｒ ４ ＝ＣＨ ３ 、Ｒ ５ ＝（ＩＩ−Ｂ）、Ｒ ２ ＝Ｈ）、
及びそれらのエステル、特に酢酸エステル（Ｒ ２ ＝ＣＯＣＨ ３ ）からなる群から選択される異性体である。 Ｒ ２は、Ｈか、またはフェノール保護基を表す。 保護基は、フェノール基（Ｒ ２ ＝Ｈ）を保護する基であって、容易に（即ち、従来技術の方法により）脱保護されて再びフェノール基とし得る基である。 これらの２つの実施形態は、構造的に強く関連している、というのは、それらは、それぞれ保護反応または脱保護反応により、容易に相互に変換され得るからである。 特に、フェノール保護基は、エステル、エーテルまたはアセタールからなる群から選択される化学官能基を、分子の残部と共に形成している。 フェノール保護基が分子の残部と共にエステルを形成する場合、このエステルは、有機酸または無機酸のエステルである。 エステルが有機酸のエステルである場合、この有機酸は、モノカルボン酸またはポリカルボン酸（即ち、２個以上のＣＯＯＨ基を有する酸）であり得る。 ポリカルボン酸は、好ましくは、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、マレイン酸またはフマル酸である。 好ましくは、有機酸は、モノカルボン酸である。 従って、置換基Ｒ ２は、好ましくはアシル基である。 このアシル基は、特に、直鎖または分岐のＣ １〜１０ −アルキル基またはシクロアルキル基またはアラルキル基である。 好ましくは、置換基Ｒ ２は、ベンジル基または置換ベンジル基であり、特に好ましくは、ベンジル基である。 保護基は、水素化により容易に脱保護され得る。 エステルが無機酸のエステルである場合、無機酸は、好ましくは、硝酸または多塩基酸（即ち、酸分子１個当たり１個より多くのプロトンを供与することができる酸）、特に、リン酸、ピロリン酸、亜リン酸、硫酸及び亜硫酸からなる群から選択されるものである。 保護基は、ベンゾイル基またはＣ １〜４ −アシル基、特にアセチル基であることが好ましい。 それぞれ、Ｒ ２がアシル基、特にアセチル基を表す分子は、対応するフェノール（Ｒ ２ ＝Ｈ）化合物からエステル化により容易に調製され得、このフェノール化合物は、対応するエステルからエステル加水分解により得られ得る。 そうした反応及びその反応条件は、当業者によく知られている。 トコフェリルエステル、特にトコフェリルアセテートは、それらの著しくより高い安定性のため、ビタミンＥサプリメントとして一般的に使用されることが既に知られている。 トコフェリルエステルは、例えば生体内で、対応する遊離トコフェロールに容易に加水分解される。 フェノール保護基が分子の残部と共にアセタールを形成する場合、置換基Ｒ ２は、好ましくは、
であり、ｎ＝０または１である。
従って、そのように形成されたアセタールは、好ましくは、メトキシメチルエーテル（ＭＯＭ−エーテル）、β−メトキシエトキシメチルエーテル（ＭＥＭ−エーテル）またはテトラヒドロピラニルエーテル（ＴＨＰ−エーテル）である。 保護基は、酸によって容易に脱保護され得る。 Ｒ ２ ＝Ｈを有する式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体は、保護剤と反応されて、Ｒ ２ ＝フェノール保護基を有する式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体を生じ得る。 対応するフェノール保護基をもたらす保護剤、並びにこの反応の化学プロセス及び条件は、当業者に知られている。 例えばフェノール保護基が分子の残部と共にエステルを形成する場合、好適な保護剤は、例えば酸、無水物またはハロゲン化アシルである。 Ｒ ２ ＝Ｈを有する式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体と保護剤との反応によりエステルが形成され、前記エステルが有機ポリカルボン酸または無機多塩基酸のエステルである場合においては、必ずしも全ての酸基がエステル化されるとは限らない。 無機多塩基酸の好ましいエステルは、トコフェリルホスフェート及びジトコフェリルホスフェート、特にα−トコフェリルホスフェート及びα−ジトコフェリルホスフェートである。 好ましい実施形態において、Ｒ ２は、Ｈである。 特に、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の所望のキラル異性体は、トコトリエノールの異性体、特に（２Ｒ）−トコトリエノール、好ましくは（２Ｒ）−α−トコトリエノール、またはそれらの酢酸エステルである。 ＊の付いたキラル中心において天然配置を有する異性体が、特に生理学的に活性であることが認められている。 多くの場合において、とりわけＲ配置が、生理学的に特に活性である。 これは、例えば、Ｓ． Ｋ． ＪｅｎｓｅｎによりＶｉｔａｍｉｎｓ ａｎｄ Ｈｏｒｍｏｎｅｓ ２００７，Ｖｏｌ． ７６，２８１−３０８において示されており、その全内容が参照により本明細書に援用される。 従って、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の所望のキラル異性体は、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）中の＊の付いた炭素においてＲ配置を有することが好ましい。 残基Ｒ ５に起因して、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体は、他のキラル中心を有し得る。 特に、異性体が式（ＩＩ−Ａ）の残基Ｒ ５を含む、好ましい実施形態の１つにおいて、更なるキラル中心が存在する。 とりわけ側鎖Ｒ ５におけるそのような更なるキラル中心におけるＲ配置が、生理学的に特に有利であることが見出されている。 最も好ましい実施形態において、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の所望のキラル異性体は、異性体（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールまたは異性体（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェリルアセテートである。 ［式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体の合成］
式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体は、構造的に関連し合っており、容易に相互に変換され得る。 式（Ｉ−Ｂ）の分子は、式（Ｉ−Ａ）の分子から、対応するアルコールへの還元とそれに続く水の除去により得られ得る。 式（Ｉ−Ｃ）の分子は、式（Ｉ−Ｂ）の分子から、還元により（例えば接触水素化により）得られ得る。 式（Ｉ−Ａ）の化合物を合成する好ましいやり方は、その開示内容全体が参照により本明細書において援用されるＫａｂｂｅ ａｎｄ Ｈｅｉｔｚｅｒ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９７８；（１２）：８８８−８８９により詳細に開示されているように、それぞれ式（ＩＩＩ−Ａ）の対応する２−アセチル−メチルヒドロキノン、２−アセチル−ジメチルヒドロキノンまたは２−アセチル−トリメチルヒドロキノン及び式（ＩＶ−Ａ）のメチルケトンから、特にファルネシルアセトンまたはテトラヒドロゲラニルアセトンからの、塩基の存在下、特にピロリジンの存在下のものである。 フェノール保護基は、Ｒ ２がＨである式（Ｉ−Ａ）の化合物を、対応する保護剤と反応させることにより導入され得る。 Ｋａｂｂｅ ａｎｄ Ｈｅｉｔｚｅｒは、ピリジン及びトルエンの存在下におけるそれの無水酢酸との反応によるアセチル基の導入を開示している。
式（Ｉ−Ｂ）の化合物は、例えば、Ｋａｂｂｅ ａｎｄ Ｈｅｉｔｚｅｒ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９７８；（１２）：８８８−８８９により開示されているように水素化ホウ素ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｂｏｒａｎａｔｅ）による式（Ｉ−Ａ）の還元により得られ得る。 式（Ｉ−Ｃ）の化合物は、還元による、例えば部分水素化による、特にその開示内容全体が参照により本明細書において援用されるＭａｎｅｃｋｅ ａｎｄ Ｂｏｕｒｗｉｅｇ，Ｃｈｅｍ． Ｂｅｒ． ９５，１４１３（１９６２）に記載されているようなナトリウム／エタノールによる式（Ｉ−Ｂ）の化合物の化学変換から得られ得る。 式（Ｉ−Ｃ）の化合物はまた、式（Ｉ−Ａ）の化合物の化学変換からも得られ得る。 詳細には、この化学変換は、例えばその開示内容全体が参照により本明細書において援用される米国特許第６，０９６，９０７号明細書に開示されているように、酸または酸混合物の存在下における金属亜鉛の反応により行われる。 完全に飽和したＣ ６〜２５ −アルキル基を置換基Ｒ ５として有する式（Ｉ−Ｃ）の化合物はまた、公知のやり方で、それぞれ式（ＩＩＩ−Ｃ）の対応するメチルヒドロキノン、ジメチルヒドロキノンまたはトリメチルヒドロキノン及び式（ＩＶ−Ｃ１）または（ＩＶ−Ｃ２）の対応するアルコールからも合成され得る（Ｕｌｌｍａｎｎ'ｓ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｒｅｌｅａｓｅ ２０１０，７ ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，“Ｖｉｔａｍｉｎｓ”，ｐａｇｅ ４４−４６）。
前記反応は、立体特異的でないか、立体特異的であり、従って、 ＊の付いたキラル中心においてＲ配置及びＳ配置を有する式（Ｉ−Ｃ）の異性体の混合物が形成される。 典型的に、約５０％のＳ−異性体と５０％のＲ−異性体とのラセミ混合物が形成される。 残基Ｒ ５が少なくとも１つのキラル炭素中心を含む場合、式（ＩＶ−Ｃ１）または（ＩＶ−Ｃ２）の対応するアルコールもまた、それぞれ典型的に、前記更なるキラル炭素中心（１つまたは複数）において異なる配置を有する異性体の混合物である。 従来の工業的合成は、個々の異性体の混合物を生じる。 例えば、Ｒ ５が式（ＩＩ−Ａ）の残基である場合、使用される式（ＩＶ−Ｃ１）または（ＩＶ−Ｃ２）のアルコールは、それぞれイソフィトールまたはフィトールであり、これは、それぞれ典型的に、従来の方法に従って合成される４種の異性体（（Ｒ，Ｒ）−、（Ｒ，Ｓ）−、（Ｓ，Ｒ）−及び（Ｓ，Ｓ）−異性体）の異性体混合物である。 これとは対照的に、天然フィトールは、Ｒ，Ｒ−異性体のみからなり、従って、異性体的に純粋である。 従って、１つの好ましい実施形態において、式（Ｉ−Ｃ）の化合物は、天然フィトールから調製される。 しかしながら、天然フィトールまたはイソフィトールは、それぞれかなり少ない量でしか市販されておらず、かつかなり高価であるので、天然フィトールまたはイソフィトールをそれぞれトコフェロールの工業規模の合成のために使用する可能性は、かなり限られている。 しかしながら、新たな開発は、単一異性体の選択的形成でフィトールを合成することを可能にする。 例えばその全内容が参照により本明細書に援用される国際公開第２００６／０６６８６３Ａ１号パンフレットは、キラルイリジウム錯体を用いたアルケンの不斉水素化の方法を開示している。 この方法を用いることで、選択性を以って対応するアルケンのキラル水素化生成物の所望の異性体がもたらされ、次いでこれが、それぞれフィトールまたはイソフィトールの所望の異性体に化学的に変換され得ることが見出された。 次いで、フィトールまたはイソフィトールは、それぞれ更なる公知の化学変換により、最終的にトコフェロールの所望の異性体に変換され得る。 従って、別の好ましい実施形態において、式（Ｉ−Ｃ）の化合物は、キラルイリジウム錯体の存在下におけるアルケンの不斉水素化を含む多段反応で得られるイソフィトールから調製される。 トコフェロールまたはそれらのエステル、特にそれらの酢酸エステル、即ちＲ ５が式（ＩＩ−ＡＲＲ）のものである式（Ｉ−Ｃ）の分子を合成する更なる実行可能な手段は、トコトリエノールまたはそのエステル、特にその酢酸エステル、即ちＲ ５が式（ＩＩ−Ｂ）のものである式（Ｉ−Ｃ）の分子からの、上記のキラルイリジウム錯体を用いたアルケンの不斉水素化によるものである。 図１は、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール（Ｒ ２ ＝Ｈ）または（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェリルアセテート（Ｒ ２ ＝ＣＯＣＨ ３ ）を生成する好ましい実施形態を、それぞれ概略的に示している。 図１において反応スキームＲＳ１で示される第１の実施形態において、まずトコトリエノールまたはその酢酸エステルが、 ＊で示されたキラル原子においてＲ配置またはＳ配置をそれぞれ有する異性体に（本発明に従う分離プロセスを用いて）分離され、続いてＲ異性体が、キラルイリジウム錯体を用いて不斉水素化される。 図１において反応スキームＲＳ２で示される他の実施形態において、まずトコトリエノールまたはその酢酸エステルが、キラルイリジウム錯体を用いて不斉水素化されて、２−ａｍｂｏ−トコフェロールとしても知られる（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロールと（２Ｓ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロールとの混合物またはそれらの酢酸エステルの混合物をそれぞれもたらし、次いでこれが、更なる工程において本発明に従う分離プロセスを用いて分離されて、所望の異性体を生じる。 両方の実施形態において、キラルイリジウム錯体及びキラルイリジウム錯体を用いたアルケンの不斉水素化の方法は、好ましくは、その全内容が参照により本明細書に援用される国際公開第２００６／０６６８６３Ａ１号パンフレットに開示されているものである。 第１の工程で、
ａ）式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物を供給する工程を含む式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離する方法。 工程ａ）における用語「式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物」は、主として＊で示された炭素原子において異なるキラリティーを有する同じ式の異性体の混合物に関し、即ち、そのような混合物は、第１の場合は式（Ｉ−Ａ）の異性体のＲ配置とＳ配置との混合物、第２の場合は式（Ｉ−Ｂ）の異性体のＲ配置とＳ配置との混合物、並びに第３の場合は式（Ｉ−Ｃ）のＲ配置とＳ配置との混合物である。 上で既に述べたように、式（Ｉ−Ａ）及び（Ｉ−Ｂ）及び（Ｉ−Ｃ）の化合物は、構造的に関連し合っており、相互に変換され得る。 図２は、種々の実行可能な事柄を概略的に示している。 式（Ｉ−Ａ）のＲ−異性体とＳ−異性体との混合物は、式（Ｉ−Ｂ）のＲ−異性体及びＳ−異性体に化学的に変換され得る（水平矢印）。 式（Ｉ−Ａ）のＲ−異性体とＳ−異性体との混合物はまた、本発明の方法により式（Ｉ−Ａ）の所望の（本図においてはＲ−異性体）異性体に分離され得る（垂直矢印）。 同様に、式（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の所望の異性体が、それぞれ図２のスキームで示されているように得られ得る。 当然、式（Ｉ−Ｂ）及び（Ｉ−Ｃ）の異性体の混合物は、別の仕方でも、即ちそれぞれ式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）からではなくても、得られ得る。 例えば、式（Ｉ−Ｃ）の異性体は、式（ＩＶ−Ｃ１）または（ＩＶ−Ｃ２）のアルコールをそれぞれ用いた合成について述べた時に既に説明した方法により得られ得る。 側鎖、即ち置換基Ｒ ５が更なるキラル炭素中心を有する場合は、２種より多くの異性体が上記の混合物中に存在し得る。 ［クロマトグラフィー分離］
当該式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離する方法は、
ｂ）所望の異性体（Ｉ）と残りの部分（Ｉ'）とへの、キラル相による、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体の混合物のクロマトグラフィー分離という更なる工程を含む。 クロマトグラフィーは、ずっと以前から知られている分離技術である。 キラル化合物がキラル相を用いることによって分離され得ることも知られている。 本発明については、キラル相は、キラル静的相（ｃｈｉｒａｌ ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ ｐｈａｓｅ：ＣＳＰ）である。 キラル静的相は、アキラル固体担体（例えば、シリカゲル）の表面に好適なキラル化合物を結合させることによって調製され得る。 キラル化合物は、担体材料上に固定化されていてもよいし、被膜を形成していてもよい。 キラル化合物は、担体に吸着または化学結合され得る。 好ましくは、キラル化合物は、担体に化学結合される。 そのようなキラル相は、欧州特許出願公開第０１５７３６５Ａ２号明細書、欧州特許出願公開第０１５５６３７Ａ２号明細書、米国特許第７，７７２，１５３Ｂ２号明細書、米国特許第４，６１９，９７０号明細書及び米国特許第４，８６１，８７２号明細書に記載されており、その全内容が参照により本明細書に援用される。 キラル化合物がキラル分離においてそのままで直接使用され得るということも、場合によってはあり得る。 これは特に、キラル化合物が鉱物起源のものである場合、または、担体材料が何ら必要とされない高分子の不溶性キラルポリマー（ｈｉｇｈｌｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｃｈｉｒａｌ ｐｏｌｙｍｅｒ）が使用される場合に当てはまる。 好ましくは、キラル相は、特にアキラル固体担体（例えば、シリカゲル）上に固定化された、多糖またはその誘導体である。 多糖またはその誘導体は、例えばその全内容が参照により本明細書に援用されるＰｕｒｅ Ａｐｐｌ． Ｃｈｅｍ． ，Ｖｏｌ． ７９，Ｎｏ． ９，２００７，１５６１−１５７３において、好適なキラル相として記載されている。 特に好適なキラル相は、セルロース、アミロース、キチン、キトサン、キシラン、カードラン、デキストラン、イヌリン及びシクロデキストリン及びそれらの誘導体からなる群のキラル相である。 更に、ある場合においては、タルトレート相、ポリアクリルアミド相、キラル配位化合物相もしくは電荷移動相（Ｃｈａｒｇｅ−Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｐｈａｓｅ）、キラルイオン交換相またはＰｉｒｋｌｅ相から選択されるキラル相が、本発明の目的のために使用され得る。 特に好ましいキラル相は、セルロース、アミロース、デキストラン及びシクロデキストリン並びにそれらの誘導体からなる群のキラル相である。 特に適しているのは、シリカ担体上に固定化または塗布された、アミローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）、セルローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）、セルローストリス（３，５−ジクロロフェニルカルバメート）、セルローストリス（４−メチルフェニルカルバメート）またはセルローストリス（４−メチルベンゾエート）である。 最も好ましいキラル相は、シリカ担体上に固定化または塗布された、アミローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）である。 特に好適であるのは、Ｅｕｒｏｃｅｌ（登録商標）（Ｋｎａｕｅｒ ＧｍｂＨ、ドイツ）、Ｒｅｇｉｓｐａｃｋ（登録商標）（Ｒｅｇｉｓ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）及びＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）（ダイセル化学工業株式会社（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ．）、日本）、好ましくはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＡ、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＢ、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ及びＣｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｉ（ダイセル化学工業株式会社、日本）という商標で市販されているキラル相である。 キラル相の粒径は、１つの実施形態において、２５マイクロメートルより小さく、特に３〜２５マイクロメートルの間、好ましくは５〜２５マイクロメートルの間である。 この場合に特に好ましいのは、クロマトグラフィー分離が、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）により行われることである。 そのような小さな粒径を用いることにより、より良好な（１回のクロマトグラフィー実験での）異性体分離が達成され得るが、より高い圧力が必要とされることが見出された。 この粒径の場合の圧力は、典型的には２０ｂａｒより大きい。 別の実施形態において、キラル相の粒径は、２５マイクロメートルより大きく、特に、５０〜７０マイクロメートルの間である。 そのようなより大きな粒径を用いれば、より低い圧力が必要とされるが、しかしながら、（１回のクロマトグラフィー実験での）異性体分離ははるかに少ないことが見出された。 クロマトグラフィー分離のために使用されるべき圧力は、この粒径の場合は、好ましくは１〜１８ｂａｒの間、特に２〜１７ｂａｒの間、好ましくは５〜１５ｂａｒの間である。 炭化水素溶媒が溶離剤として使用される場合に、効率的な分離が好ましく達成され得ることが示された。 特に好適な炭化水素溶媒は、脂肪族炭化水素、脂環式炭化水素または芳香族炭化水素（例えば、Ｃ ６ 〜Ｃ ８ −アルカン、特にｎ−オクタン、ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサン、及びそれらの全ての構造異性体；シクロヘキサン、メチルシクロヘキサン；ベンゼン、エチルベンゼン、キシレン、及びトルエンまたはそれらの混合物）である。 好ましくは、単一の炭化水素、特にヘキサンまたはヘプタンのみが、溶離剤としての炭化水素溶媒として使用される。 工程ｂ）におけるクロマトグラフィー分離を少なくとも１種のアルコールの存在下で行うことが選択的（ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ）であることが見出された。 アルコールとして特に好適であるのは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、イソブタノール、ｔｅｒｔ． −ブタノール、２−メチル−２−ブタノール、３−メチル−２−ブタノール、３−メチル−１−ブタノール、２−メチル−１−ブタノール及びアリルアルコールからなる群から選択されるアルコールである。 好ましくは、アルコールは、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールである。 最も好ましくは、１−プロパノールである。 アルコールの混合物もまた、使用され得る。 アルコールが溶離剤の一部であり、特に炭化水素溶媒と組み合わされて存在することが好ましい。 更に、工程ｂ）におけるクロマトグラフィー分離を、６．０未満、特に０．５〜６．０の間、好ましくは３．０〜６．０の間のｐＫ ａを有する少なくとも１種の有機酸（Ｓ１）、特に酢酸の存在下で行うことが選択的であることが見出された。 ３．０〜６．０の間のｐＫ ａを有する有機酸についての例は、特に、クエン酸、フタル酸、テレフタル酸、コハク酸、桂皮酸、ギ酸、乳酸、酢酸、アスコルビン酸、安息香酸、ブタン酸、プロパン酸及びオクタン酸である。 ６．０未満のｐＫ ａを有する酸は、上述の酸に加えてスルホン酸またはハロゲン化酸などの酸であり、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ドデシルベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸及びノナフルオロブタンスルホン酸である。 意外なことに、６未満、特に３．０〜６．０の間のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）、好ましくは酢酸の、少量の存在が、キラル相の負荷能力（ｌｏａｄａｂｉｌｉｔｙ）を高めることが示された。 換言すれば、少量の有機酸を添加することにより、より多くの量の異性体が所与のキラル相によって分離され得る。 この発見は、工業的分離のための設備のコスト計算を考慮すると、非常に重要である。 工程ｂ）におけるクロマトグラフィー分離のために使用される溶離剤は、
８５〜１００重量％、特に９０〜９８重量％の、炭化水素、特にＣ ６ 〜Ｃ ８ −アルカン；
０〜１０重量％、特に０．１〜５重量％の、アルコール、好ましくは１−プロパノールまたは２−プロパノール；
０〜５重量％、特に０．１〜２重量％の、６．０未満、特に３．０〜６．０の間のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）、好ましくは酢酸を含むことが好ましい。 好ましくは、溶離剤は、少なくとも１種の炭化水素と、少なくとも１種のアルコールと、６．０未満、特に３．０〜６．０の間のｐＫ ａを有する少なくとも１種の有機酸とを含む。 溶離剤としてはＣ ６ 〜Ｃ ８ −アルカンと１−プロパノールまたは２−プロパノールとを含む上記の溶離剤、及びキラル相としてはシリカ担体上に固定化または塗布されたアミローストリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）が、極めて良好な分離特性を示すことが認められた。 特に良好な分離のためには、擬似移動床（ＳＭＢ）クロマトグラフィーがキラルクロマトグラフィー分離のために使用されることが見出された。 擬似移動床（ＳＭＢ）クロマトグラフィーは、ラセミ混合物を分離するための公知の方法であり、例えばその全内容が参照により本明細書に援用される米国特許第５，５１８，６２５号明細書及び国際公開第０３／０５１８６７Ａ１号パンフレットに開示されている。 所望の異性体（Ｉ）と残りの部分（Ｉ'）とへの、キラル相による、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体の分離は、完全または部分的であり得る。 １つの実施形態において、分離は、実質的に完全、好ましくは完全である。 分離及び異性化をより詳細に説明するために、本発明のこれらの態様の更なる詳細を、概略的なクロマトグラムまたはダイアグラムによってそれぞれ示す、図３〜９が参照される。 簡潔にするために、小さい方の保持時間（ｔ ｒｅｔ ）を有するピークは、 ＊で示されたキラル中心においてＲ配置を有し、大きい方の保持時間（ｔ ｒｅｔ ）におけるピークは、Ｓ配置を有するものと仮定される。 当然、実際は、Ｒ−異性体及びＳ−異性体の配列は、システム及びカラム材料に強く依存し、従って、更なる測定または誘導体化法によって特定される必要がある。 図３は、キラル相が所望の異性体（Ｉ）（本図においてはＲ−異性体）を第１の溶出成分として完全に分離する場合を、概略的なクロマトグラムで示している。 この概略的クロマトグラムのｘ軸は、任意単位（ａ．ｕ．）での保持時間（ｔ ｒｅｔ ）を示している。 概略的クロマトグラムのｙ軸は、任意単位（ａ．ｕ．）での吸光度（Ａ）を示しており、これにより異性体分布が検出される。 溶出液（実線）が二重線で示された保持時間まで回収される場合、異性体Ｒ（点線）は、異性体Ｓ（破線）から完全に分離され得る。 一方、図４は、キラル相が所望の異性体（Ｉ）（本図においてはＲ−異性体）を部分的にしか分離しない場合を、同様に概略的なクロマトグラムによって示している。 溶出液（実線）が二重線で示された保持時間まで回収される場合、所望の異性体Ｒ（点線）の一部が残りの部分から分離され得る。 この場合の残りの部分は、異性体Ｓ（破線）だけでなく所望の異性体Ｒの一部も含む。 この概略的な例においては、分離工程ｂ）により、約１５％の所望の異性体しか分離されず、従って、残りの部分（Ｉ'）は、１００％のＳ−異性体と約８５％の所望のＲ−異性体とを含む。 図５は、この場合を、残りの部分（Ｉ'）及びその異性体Ｒ（点線）またはＳ（破線）それぞれの概略的クロマトグラムによって示している。 当業者には、先の記述が、Ｒ−異性体が所望の異性体である場合に関するものであることが明らかである。 しかしながら、Ｓ−異性体が所望の異性体であるならば、図４中の概略的クロマトグラムにおいて、前記概念図における２２ａ． ｕ． より大きな保持時間を有する部分を回収することによって、Ｓ−異性体を残りの部分から分離し、２２ａ． ｕ． までの保持時間を有する部分を、次に続く工程で次いで異性化されることになる残りの部分として用い得るであろう。 ［異性化］
当該式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離する方法は、
ｃ）工程ｂ）で分離される残りの部分（Ｉ'）の異性体の、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）中の＊で示された中心におけるキラリティーを異性化するという更なる工程を含む。 工程ｃ）における異性化は、様々な方法で行われ得る。 １つの実施形態において、工程ｃ）における異性化は、１５０℃より高い、特に１６０〜５００℃の間の温度への、残りの部分（Ｉ'）の曝露により行われる。 しかしながら、この温度は、異性体の望まれない分解を回避するためにあまり高くなりすぎるべきではない。 １６０〜３００℃の間の温度が、良好な結果をもたらすことが見出された。 この異性化方法は、式（Ｉ−Ｂ）の異性体の異性化に非常に好適であることが分かった。 別の実施形態において、工程ｃ）における異性化は、対応する酸が１３より大きいｐＫ ａを有する塩基への、残りの部分（Ｉ'）の曝露により行われる。 この塩基は、ケト−エノールプロトンを脱プロトン化するのに好適な塩基性を有する。 塩基として特に適しているのは、アルカリ金属のアルコラート、特にナトリウム、カリウム及びリチウムのアルコラートである。 好ましい塩基は、ナトリウムメタノラート及びナトリウムエタノラートである。 この異性化方法は、式（Ｉ−Ａ）の異性体の異性化に非常に好適であることが分かった。 この異性化は、バッチ式または連続的に行われ得る。 添加される塩基は、工程ｄ）の前に除去されることが好ましい。 好ましくは、除去は完全である。 塩基は、好ましくは工程ｄ）の前、即ち異性化後に、除去される。 これは、最終異性体の異性化安定性の点から見て有利である。 別の実施形態において、工程ｃ）における異性化は、２より小さい、特に１より小さいｐＫ ａの酸への、残りの部分（Ｉ'）の曝露により行われる。 この異性化方法は、式（Ｉ−Ｃ）の異性体の異性化に非常に好適であることが分かった。 一方において、好適な酸は、有機酸、特にスルホン酸またはハロゲン化酸、強酸イオン交換樹脂（特にＳＯ ３ Ｈ基を含有するもの）、ビス（トリフルオロメチルスルホニル）イミド及びメタントリスルホネートである。 好適なスルホン酸またはハロゲン化酸についての例は、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ドデシルベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸及びノナフルオロブタンスルホン酸、またはそれらのポリマー結合形態である。 他方において、好適な酸は、無機酸（鉱酸）である。 特に好ましい酸は、硫酸、塩酸、リンモリブデン酸及びリンタングステン酸である。 好ましくは、ｐ−トルエンスルホン酸が、工程ｃ）における異性化のための２より小さいｐＫ ａを有する酸として使用される。 異性化のために酸が使用される場合、その異性化は、典型的には５０〜２００℃の間の温度で行われる。 式（Ｉ−Ｃ）の異性体の異性化は、９０℃より高い温度、特に９０℃〜１６０℃の間の温度での、２より小さい、特に１より小さいｐＫ ａの酸への、残りの部分（Ｉ'）の曝露により起こることが見出された。 この異性化は、バッチ式または連続的に行われ得る。 ２より小さいｐＫ ａを有する酸は、工程ｂ）において分離される残りの部分（Ｉ'）に、特に水溶液の形態で添加されることが好ましい。 別の実施形態において、２より小さいｐＫ ａを有する酸、または塩基は、固体担体上に固定化される。 この実施形態において、工程ｂ）において分離される残りの部分（Ｉ'）は、好ましくは、例えば固定化された酸を含むカラムまたは充填床を通過することによって、接触させられる。 添加される２より小さいｐＫ ａを有する酸は、工程ｄ）の前に除去されることが好ましい。 好ましくは、除去は完全である。 しかしながら、残った少量の酸は、ある場合には許容され得る。 少なくとも９５％の酸が、除去されることが好ましい。 ２より小さいｐＫ ａを有する酸は、好ましくは工程ｄ）の前、即ち異性化後に、除去される。 これは、工程ｅ）において回収される異性体の異性化安定性の点から見て有利である。 除去は、特に、抽出または相分離により行われ得る。 当該異性化は、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）中の＊で示されたキラル中心における配置の変更をもたらす。 工程ｃ）における異性化は、Ｒ配置にある分子の数とＳ配置にある分子の数との比が異性化後に約５０：５０となるような、 ＊で示された中心における配置の変更をもたらす。 当業者には、実際の異性化は、異性化が完全であるにも関わらず、５０：５０の比と異なり得ることが明らかである。 完全な異性化が望ましいのであるが、不完全な異性化もまた、所望の異性体の量がその異性化によって増大する限り、本発明にとって有用である。 所望の異性体の量：非所望の異性体の量の比は、異性化工程後は、少なくとも２５：７５、特に少なくとも３０：７０、好ましくは少なくとも４０：６０であることが見出された。 ５０：５０の比という最適な場合が、図６の概略的クロマトグラムにより示されている。 当該異性化は、図４の分離の例について、または所望の異性体（Ｉ）の分離後の図５の残りの部分（Ｉ'）について上でそれぞれ述べたように、異性化された残りの部分（実線）及び個々の異性体Ｒ（点線）または異性体Ｓ（破線）それぞれを示す図６の概略的クロマトグラムを、この例においてもたらす。 当該異性化は、 ＊で示されたキラル中心のキラリティーのみに影響を及ぼし、他のキラル中心（即ち、側鎖中のキラル中心、換言すれば、残基Ｒ ５中のキラル中心）のキラリティーは変化しないまま残すということを認識することが重要である。 ［再混合］
当該式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離する方法は、
ｄ）工程ｃ）で得られた異性化した異性体を、更なる分離の対象である式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物に添加するという更なる工程を含む。 前記混合物は、貯蔵され輸送されることもできるし、直ちに使用されることもできる。 図７は、前記混合物が貯蔵される場合の実施形態についての概念図を示している。 この例示的な図において、工程ａ）で式（Ｉ−Ａ）のキラル異性体の混合物が供給され；工程ｂ）でキラル相１を用いてクロマトグラフィーにより所望の異性体（Ｉ）と残りの部分（Ｉ'）とに分離され；工程ｃ）で残りの部分（Ｉ'）の異性体が異性化され、次いで式（Ｉ−Ａ）の異性体の混合物に添加される。 この混合物は、更なる分離が望まれるまで貯蔵され得る。 示された図において、異性化は、固定化された酸を含むカラム２と残りの部分（Ｉ'）を接触させることにより行われる。 所望の異性体（Ｉ）は、工程ｅ）で回収される。 しかしながら、本発明の方法は、連続法であること、特に、更なる分離の対象である式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物が工程ａ）の式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物である連続法であることが好ましい。 従って、換言すれば、工程ｃ）において得られる異性化した異性体は、工程ａ）における式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の流れに添加されることが好ましい。 この場合は、図８に概略的に示されている。 この例示的な図において、工程ａ）で式（Ｉ−Ａ）のキラル異性体の混合物が供給され、工程ｂ）でキラル相１を用いてクロマトグラフィーにより所望の異性体（Ｉ）と残りの部分（Ｉ'）とに分離され；工程ｃ）で残りの部分（Ｉ'）の異性体が異性化され、次いで工程ａ）における異性体の混合物の入来する流れに供給される。 示された図において、異性化は、固定化された酸を含むカラム２と残りの部分（Ｉ'）を接触させることにより行われる。 この方法は、非常に費用効率の高いやり方で、工程ｅ）において、即ち工程ｂ）における所望の異性体（Ｉ）と残りの部分（Ｉ'）との分離のすぐ後に回収される所望の異性体（Ｉ）を連続的に生成することを可能にするので、この方法は、非常に好ましい。 ［回収］
当該式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離する方法は、
ｅ）所望の異性体（Ｉ）を回収するという更なる工程を含む。 所望の異性体（Ｉ）は、好ましくは工程ｂ）におけるクロマトグラフィー分離のすぐ後に回収される。 前記方法は、効率的なやり方で、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の少なくとも２種の異性体の混合物から所望の異性体（Ｉ）を生成する。 当該方法は、工程ｂ）において異性体の分離が良好であればあるほど効率的になる。 前記分離効率は、キラル相の粒径が１つの実施形態において２５マイクロメートルより小さく、特に３〜２５マイクロメートルの間であり、ＨＰＬＣと組み合わせて使用される場合、特に工程ｂ）におけるクロマトグラフィー分離のために使用される溶離剤が、炭化水素及びアルコール及び／または６．０未満、特に３．０〜６．０の間のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）を含む場合に、より高いことが認められた。 しかしながら、クロマトグラフィーにおいて高圧が使用される場合、特に擬似移動床（ＳＭＢ）クロマトグラフィーが使用される場合には、信頼性の高い連続生産を可能にする設備に対する高い要求が生じる。 特に高い技術的要求は、ポンプ、弁及び接続部に対する要求である。 こうした高い要求は、著しい多額の費用に繋がる。 本方法の条件は、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の化合物の劣化にも著しい分解にも繋がることはないので、サイクルｂ）−ｃ）−ｄ）の数は、さほど重要ではない。 従って、より低い圧力と組み合わされたキラル相のより大きな、即ち２５マイクロメートルより大きな粒径に起因する、異性体（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の異性体を分離することにおけるより低い効率は、設備及び維持を考慮するとより低い費用が必要であるので、本質的に必ずしも不利とは限らない。 従って、高い分離効率を有する３〜２５マイクロメートルの間の粒子を充填したカラムを備えた高圧ＳＭＢ装置を用いるよりもむしろ、低圧で運転される低コストのカラムまたはＳＭＢユニットのマニホールドによって、及びいくつかの追加のサイクルを用いて分離プロセスを運転することが、財政的にかなり有利であり得る。 図９は、複数の分離カラムまたは複数のＳＭＢユニット１を用いたプロセスの概念図を示している。 この図において、式（Ｉ−Ａ）の異性体の混合物は、平行配置で使用されるカラムまたは複数のＳＭＢユニット１により分離されて、そのそれぞれにより、回収される所望の異性体（Ｉ）と、次いで異性化されて式（Ｉ−Ａ）の異性体の流れの中に再供給される残りの部分（Ｉ'）とがもたらされる。 分離プロセスにおいて示されているカラムまたはＳＭＢユニット１は、それぞれ典型的に５〜１５ｂａｒの間の低い圧力で運転され、２５マイクロメートルより大きな粒径のキラル相を使用する。 分離効率は比較的低く、これは、図４で示される概略的クロマトグラムにより視覚化され得る。 示された図において、異性化は、固定化された酸を含むカラム２と残りの部分（Ｉ'）を接触させることにより行われる。 開示された方法は、工業規模で異性体を分離することを可能にする。 連続的なやり方で当該方法を使用する際は、異性化工程のおかげで、ほぼ全ての非所望の異性体が所望の異性体に変換され得る。 従って、非立体特異的な合成により生成される非所望の異性体は、殆ど廃棄される必要はなく、従って、所望の異性体においてほぼ１００％の収率が得られ得る。 これは、経済的にも生態学的にも特に有利であり、従って、この技術分野での開発における顕著かつ重要な前進を意味する。 本発明の更なる態様は、式（ＩＩ−ＡＲＲ）の置換基Ｒ ５を有しかつ＊で示されたキラル中心において所望の配置、特にＲ配置を有する式（Ｉ−Ｃ）の化合物を製造する方法である。 この方法においては、第１の工程で、 ＊で示されたキラル中心において所望の配置、特にＲ配置を有する異性体が、式（ＩＩ−Ｂ）の置換基Ｒ ５を有する式（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離する、上で詳細に説明したプロセスを用いることにより回収される。 次いで、第２の工程で、所望の異性体が、キラルイリジウム錯体を用いた不斉水素化により水素化されて、式（ＩＩ−ＡＲＲ）の置換基Ｒ ５を有しかつ＊で示されたキラル中心において所望の配置、特にＲ配置を有する式（Ｉ−Ｃ）の化合物を生じる。 キラルイリジウム錯体及び不斉水素化は、特に、国際公開第２００６／０６６８６３Ａ１号パンフレットに記載されているものである。 従って、好ましい実施形態において、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール、または（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェリルアセテート、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェリルアセテートは、それぞれトコトリエノールまたはトコトリエニルアセテート、特にそれぞれα−トコトリエノールまたはα−トコトリエニルアセテートから上述の分離プロセスを用いて先に得られた（２Ｒ）−トコトリエノール、特に（２Ｒ）−α−トコトリエノールから、キラルイリジウム錯体を用いた不斉水素化により得られ得る（図１における反応スキームＲＳ１も参照されたい）。 前記方法の変形例において、第１の第２の工程で、式（ＩＩ−Ｂ）の置換基Ｒ ５を有する式（Ｉ−Ｃ）の異性体が、キラルイリジウム錯体を用いた不斉水素化により水素化されて、式（ＩＩ−ＡＲＲ）の置換基Ｒ ５を有しかつ＊で示されたキラル中心においてＲ／Ｓ配置の混合を有する式（Ｉ−Ｃ）の化合物を生じ、次いでこれが、第２の工程で、上で詳細に説明したプロセスを用いて分離されて、式（ＩＩ−ＡＲＲ）の置換基Ｒ ５を有しかつ＊で示されたキラル中心において所望の配置、特にＲ配置を有する式（Ｉ−Ｃ）の化合物を生じる。 キラルイリジウム錯体及び不斉水素化は、特に、国際公開第２００６／０６６８６３Ａ１号パンフレットに記載されているものである。 従って、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール、または（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェリルアセテート、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェリルアセテートを生成する更なる方法は、それぞれトコトリエノールまたはトコトリエニルアセテート、特にそれぞれα−トコトリエノールまたはα−トコトリエニルアセテートからキラルイリジウム錯体を用いた不斉水素化により先に得られた２−ａｍｂｏ−トコフェロールまたは２−ａｍｂｏ−トコフェリルアセテートからの、上述の分離プロセスによるものである（図１における反応スキームＲＳ２も参照されたい）。 従って、１つの好ましい実施形態において、当該方法は、所望のキラル異性体が、工程ｂ）の前または工程ｅ）の後の何れかに行われるキラルイリジウム錯体を用いた不斉水素化の工程により、トコトリエノールまたはトコトリエニルアセテートからそれぞれ得られたトコフェロールまたはトコフェリルアセテートであるというようなものである。 本発明の更なる実施形態において、Ｒ ２が水素を表す式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体が分離され、次いで工程ｆ）で保護剤と反応されて、式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のトコフェロールの保護されたキラル異性体を生じる。 従って、当該方法は、
ｆ）所望の異性体（Ｉ）を保護剤と反応させるという工程を更に含む。 従って、好ましくは（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールは、上で詳細に説明したように、所望の異性体（Ｉ）として分離され、回収され、工程ｆ）で保護剤と反応されて、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールの保護された形態にあるもの、好ましくは（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロールアセテート、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールアセテートを生ずる。 本発明の方法により分離される式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体は、いくつかの応用分野において使用され得る。 特に、それらは、食料または飼料または飲料または製剤の分野における用途を見出す。 特にこれらの分野において、所定のキラリティーでキラル化合物を提供することは非常に有利である、または必要でさえある。 これらの応用分野にとって特に有益であるのは、初期異性体混合物から単一の所望の異性体のみが分離され得る場合である。 本発明の分離プロセスは、そうした目標を可能にする。 更なる態様において、本発明は、従って、上で説明したように式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離するプロセスによって分離された式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の所望のキラル異性体を含む食料または飼料または飲料に関する。 特に、そのような食料または飼料または飲料は、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェロール、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール、または（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−トコフェリルアセテート、特に（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェリルアセテートを含む。 なお更なる態様において、本発明は、従って、上で説明したように式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）のキラル異性体を分離するプロセスによって分離された式（Ｉ−Ａ）または（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の所望のキラル異性体を含む薬学的組成物に関する。 特に、そのような薬学的組成物は、コルジアクロメン（２−メチル−２−（４−メチルペンタ−３−エニル）−２Ｈ−クロメン−６−オール）の所望の異性体を含む。 ［参照符号一覧］
１ キラル相、カラム、ＳＭＢユニット２ 固定化された酸を含むカラムＩ 所望の異性体Ｉ' 残りの部分Ｉ−Ａ 式（Ｉ−Ａ）のキラル異性体の混合物 ［実施例］
本発明を、以下の実験により更に説明する。 ［１． クロマトグラフィー分離］
出発材料 入手したまま使用した溶媒及び試薬は、ヘプタン（Ｆｌｕｋａ、５１７５０）、エタノール（Ｍｅｒｃｋ、１．００９８３）、イソプロパノール（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、５９３００）及び酢酸（Ｆｌｕｋａ、４５７３０）であった。 クロマトグラフィー Ａｇｉｌｅｎｔ １１００デガッサー、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００分取ポンプ、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ダイオードアレイ検出器、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ＭＰＳ Ｇ２２５０Ａオートサンプラー／フラクションコレクターからなる、ケムステーション／ＣＣ−モードソフトウェアパッケージにより制御されたＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズｈｐｌｃシステムによって、調製用分離を行った。 調製用分離のためのＨＰＬＣ条件 カラム：Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×２０ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘプタン中の０．５％イソプロパノール、０．２％酢酸；流量１３ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、４００μｌ注入。 ［（Ｒ）−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（３Ｅ，７Ｅ）−４，８，１２−トリメチルトリデカ−３，７，１１−トリエニル）クロマン−４−オンと（Ｓ）−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（３Ｅ，７Ｅ）−４，８，１２−トリメチルトリデカ−３，７，１１−トリエニル）クロマン−４−オンとの分離］
［実施例１］
６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（３Ｅ，７Ｅ）−４，８，１２−トリメチルトリデカ−３，７，１１−トリエニル）クロマン−４−オンを、Ｋａｂｂｅ ａｎｄ Ｈｅｉｔｚｅｒ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９７８；（１２）：８８８−８８９の実施例６ａに従って調製した。 生成物を、ＨＰＬＣ（カラム：Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘキサン中の１％エタノール；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、２μｌ注入）により分析した。 図１０ｂ）が、このクロマトグラムを示している。 これは、生成物が４９．５：５０．５の混合物であることを示している（保持時間１３．２分及び１４．２分）。 ヘプタン中の８７．５ｍｇのこの生成物を注入し、３５．４分（１）（５０．９％）または４３．５分（２）（４９．１％）の最大での保持時間を有する２つのピークを、それぞれ調製用ＨＰＬＣ分離により分離した。 図１０ａ）が、その調製用ＨＰＬＣ分離のクロマトグラムを示している。 蒸発乾固及び溶解後、その２つの回収した画分を、分析用カラム（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘキサン中の１％エタノール；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、２μｌ注入）によって再分析した。 図１０ｃ）または図１０ｄ）は、それぞれ第１の画分または第２の画分のクロマトグラムを示している。 ２つの画分中の２種の異性体の分離（保持時間 それぞれ１３．２分または１４．２分）が、それぞれ９４．９：５．１（図１０ｃ））または７．１：９２．９（図１０ｄ））であることを示している。 従って、２種の異性体は、調製用クロマトグラフィーによってほぼ完全に分離された。 ［（２Ｒ）−トコフェロールと（２Ｓ）−トコフェロールとの分離］
［実施例２］
［（全−ｒａｃ）−α−トコフェロールの分離］
（全−ｒａｃ）−α−トコフェロール（ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓを、ＨＰＬＣ（カラム：Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘプタン中の０．５％エタノール；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、２μｌ注入）により分析した。図１１ｂ）が、このクロマトグラムを示している（保持時間 それぞれ７．２分または８．２分、５０：５０）。 ヘプタン中の１４０ｍｇの（全−ｒａｃ）−α−トコフェロール（ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を注入し、１２．６分（１）（５０．１％）及び１４．２分（２）（４９．９％）の最大での保持時間を有する２つのピークを、調製用ＨＰＬＣ分離により分離した。 図１１ａ）が、その調製用ＨＰＬＣ分離のクロマトグラムを示している。 蒸発乾固及び溶解後、その２つの回収した画分を、分析用カラム（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘプタン中の０．５％エタノール；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、２μｌ注入）によって再分析した。 図１１ｃ）または図１１ｄ）は、それぞれ第１の画分（保持時間７．２分）または第２の画分（保持時間８．２分）のクロマトグラムを示している。 ２種の異性体の分離が、完全であることが示された。 これらの異性体は、（２Ｒ）−α−トコフェロール（図１１ｃ）及び（２Ｓ）−α−トコフェロール（図１１ｄ）であると特定された。 ［実施例３］
［２−ａｍｂｏ−α−トコフェロールの分離］
２−ａｍｂｏ−α−トコフェロールを、ＨＰＬＣ（カラム：Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘプタン中の０．５％エタノール；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、２μｌ注入により分析した。図１２ｂ）が、このクロマトグラムを示している（保持時間 それぞれ７．２分または８．２分、５０．２：４９．２）。 ヘプタン中の１４０ｍｇの２−ａｍｂｏ−α−トコフェロールを注入し、１３．４分（１）（５０．１％）及び１５．０分（２）（４９．９％）の最大での保持時間を有する２つのピークを、調製用ＨＰＬＣ分離により分離した。 図１２ａ）が、その調製用ＨＰＬＣ分離のクロマトグラムを示している。 蒸発乾固及び溶解後、その２つの回収した画分を、分析用カラム（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘプタン中の０．５％エタノール；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ、２μｌ注入）によって再分析した。 図１２ｃ）または図１２ｄ）は、それぞれ第１の画分または第２の画分のクロマトグラムを示している。 ２つの画分中の２種の異性体の分離（保持時間 それぞれ７．２分または８．２分）が、それぞれ９９．５：０．５（図１２ｃ））または０．８：９９．２（図１２ｄ）であることを示している。 従って、２種の異性体は、調製用クロマトグラフィーによってほぼ完全に分離された。 これらの異性体は、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール（保持時間７．２分）及び（２Ｓ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール（保持時間８．２分）であると特定された。 ［２． 異性化］
出発材料 異性化反応のために使用されたビタミンＥ化合物は、全ての例において＞９９％の（２Ｒ）−立体異性体を含有していた。 （２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール（Ｃｏｖｉｔｏｌ（登録商標）Ｆ１４９０、最小含有量９６％）は、Ｈｅｎｋｅｌ（Ｌｏｔ ４Ｃ１１５０４）及びＣｏｇｎｉｓ（Ｌｏｔ Ｕ４０Ｃ０３Ｆ００２からのものであり、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−β−トコフェロール、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−γ−トコフェロール、（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−δ−トコフェロール及び（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロールは、天然源材料からのクロマトグラフィー単離及び化学的改質により調製した。入手したまま使用した溶媒及び試薬は、アセトニトリル（ＬｉＣｈｒｏｓｏｌｖ Ｍｅｒｃｋ １．０００３０）、水（クロマトグラフィー用 Ｍｅｒｃｋ １．１５３３３）、トルエン（Ｆｌｕｋａ、８９６８１）、ｎ−ヘプタン（Ｆｌｕｋａ、ｐｕｒｕｍ ５１７５０、含有量９９％）、炭酸エチレン（Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｅ２６２５８、含有量９９．９％）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（Ｆｌｕｋａ、８９７６０）、ポリタングステン酸水和物（Ａｌｄｒｉｃｈ ４５５９７０、含有量８８．９％）であった。 ［分析方法］
ＨＰＬＣ方法１
カラム：Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離剤 ｎ−ヘキサン中の０．５％ＥｔＯＨ；流量１ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ。 ＨＰＬＣ方法２
カラム：Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−ＲＨ、１５０ｍｍ×４．６ｍｍ、粒径５μｍ；溶離剤 アセトニトリル／水 ８０／２０（体積／体積）；流量１ｍｌ／分；検出２１０ｎｍ；温度２３℃；保持時間：（２Ｒ）−α−トコフェロール １３．６分、（２Ｓ）−α−トコフェロール １５．７分、（２Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロール １７．７分、（２Ｓ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロール ２１．４分、（２Ｒ／２Ｓ）−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２−（（４'ＲＳ，８'ＲＳ）−４，８，１２−トリメチルトリデシル）−クロマン−４−オン １３．８分及び１４．６分。 ［（２Ｒ）−トコフェロールの（２Ｒ／Ｓ）−トコフェロールへの異性化］
［実施例４］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールの異性化］
トルエン（１０ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール（０．４４８ｇ、９６．２ｗｔ％、１．０ｍｍｏｌ）の磁気撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下において、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。 この溶液を、還流下（浴温度１４０℃）において３時間にわたり加熱した。 ２５℃まで冷却した後、褐色の反応混合物を、ｎ−ヘキサン（２５ｍｌ）で希釈し、連続的に水（２０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（１０ｍｌ）及び飽和ＮａＣｌ溶液（１０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固した：０．４２４ｇの帯黄色の油状物、収率９５％、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５２．９：４７．１（ＨＰＬＣ方法１により測定）。 クロマトグラムは、図１２ｂ）に示されているクロマトグラムに実質的に一致する。 ［実施例４Ａ］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールの異性化］
トルエン（２５ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール（４．４４ｇ、９７．０ｗｔ％、１０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、４１℃で、アルゴン雰囲気下において、リンタングステン酸水和物（０．３２ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。 この混合物を、還流下（浴温度１４０℃、内部温度１１２〜１１３℃）において４時間にわたり磁気撹拌した。 ３０℃まで冷却した後、褐色の反応混合物を、トルエン（１０ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（１５ｍｌ）で洗浄した。 水性相をトルエン（５ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をＮａ ２ ＳＯ ４ （１０ｇ）上で乾燥させ、濾過し、固体をトルエン（５ｍｌ）で洗浄し、合わせた濾液を、５０℃／１６ｍｂａｒ／１５分及び２５℃／０．１ｍｂａｒ／１６時間で蒸発乾固した：４．５０ｇの褐色の油状物、内容物９３．１ｗｔ％のα−トコフェロール（ＧＣ、内部標準）、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５１．７：４８．３（ＨＰＬＣ方法２により測定）。 ［実施例４Ｂ］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロールの異性化］
（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−α−トコフェロール（４．４４ｇ、９７．０ｗｔ％、１０．０ｍｍｏｌ）と、ｎ−ヘプタン（２５ｍｌ）と、２５ｇの炭酸エチレン（５０℃で溶融）との混合物に、６２℃で、アルゴン雰囲気下において、リンタングステン酸水和物（０．６５ｇ、０．２ｍｍｏｌ）を添加した。 この混合物を、還流下（浴温度１４０℃、内部温度１０５〜１０６℃）において６時間にわたり磁気撹拌した。 ８０℃まで冷却した後、反応混合物を、１００ｍｌ分液漏斗に移した。 上方の黄色のヘプタン相を、３６℃（炭酸エチレンの融点）より上で、下方の黒色の炭酸エチレン相から分離した。 下方の相を、ｎ−ヘプタン（１５ｍｌ）で抽出し、合わせたヘキサン抽出物を飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（１５ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ ２ ＳＯ ４ （１０ｇ）上で乾燥させ、濾過し、固体をｎ−ヘプタン（２×５ｍｌ）で洗浄し、合わせた濾液を５０℃／１６ｍｂａｒ／１５分及び２５℃／０．１ｍｂａｒ／１６時間で蒸発乾固した：４．４２ｇの褐色の油状物、内容物９４．２ｗｔ％α−トコフェロール（ＧＣ、内部標準）、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５３．７：４６．３（ＨＰＬＣ方法２により測定）。 ［実施例５］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−β−トコフェロールの異性化］
トルエン（１０ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−β−トコフェロール（０．４１７ｇ、９９．２ｗｔ％、１．０ｍｍｏｌ）の磁気撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下において、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。 この溶液を、還流下（浴温度１４０℃）において１４時間にわたり加熱した。 ２５℃まで冷却した後、褐色の反応混合物を、ｎ−ヘキサン（２５ｍｌ）で希釈し、連続的に水（２０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（１０ｍｌ）及び飽和ＮａＣｌ溶液（１０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固した：０．３７８ｇの帯黄色の油状物、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５１．５：４８．５（ＨＰＬＣ方法１により測定）。 ［実施例６］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−γ−トコフェロールの異性化］
トルエン（１０ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−γ−トコフェロール（０．４２８ｇ、９７．４ｗｔ％、１．０ｍｍｏｌ）の磁気撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下において、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。 この溶液を、還流下（浴温度１４０℃）において３時間にわたり加熱した。 ２５℃まで冷却した後、褐色の反応混合物を、ｎ−ヘキサン（２５ｍｌ）で希釈し、連続的に水（２０ｍｌ）、飽和ＮＡＨＣＯ ３溶液（１０ｍｌ）及び飽和ＮａＣｌ溶液（１０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固した：０．４２４ｇの帯黄色の油状物、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝４７．８：５２．２（ＨＰＬＣ方法１により測定）。 ［実施例７］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−γ−トコフェロールの異性化］
トルエン（１０００ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−γ−トコフェロール（４３．９４ｇ、９６．９５ｗｔ％、１０２．２５ｍｍｏｌ）の磁気撹拌（５５０ｒｐｍ）溶液に、アルゴン雰囲気下において、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１９．６５ｇ、１０２．２５ｍｍｏｌ）を添加した。 この溶液を、約１時間にわたり還流（浴温度１４０℃）まで加熱し、この温度で更に７時間撹拌した。 試料のキラルＨＰＬＣ分析は、６．５時間の反応時間後に、異性化の完了を示した（２Ｒ：２Ｓ＝５１：４９）（ＨＰＬＣ方法１により測定）。 この混合物を冷却し、室温で一晩維持し、真空中で蒸発させ、ｎ−ヘキサン（５００ｍｌ）に吸収させ、濾過した。 残渣をｎ−ヘキサン（１２５ｍｌ）で洗浄し、合わせた濾液を水（各５００ｍｌ）で３回洗浄し、ＭｇＳＯ ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固した：４１．２１ｇの褐色の油状物、収率９１．９％、純度９５．０ｗｔ％、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５０．７：４９．３。 カラムクロマトグラフィー（２ｋｇのシリカゲル６０、０．０６３〜０．２ｍｍ、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン １：９）による更なる精製及び蒸発乾固（４０℃／１６ｍｂａｒ→２３℃／０．３ｍｂａｒ）により、３７．３ｇの帯褐色の油状物（収率８７．３％、純度９９．６５ｗｔ％、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５０．６：４９．４）が得られた。 図１３は、実施例７の異性化生成物のクロマトグラムを示している。 ［実施例８］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−δ−トコフェロールの異性化］
トルエン（１０ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−δ−トコフェロール（０．４１５ｇ、９６．９６ｗｔ％、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン雰囲気下において、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。 この溶液を、還流下（浴温度１４０℃）において７時間にわたり加熱した。 ２５℃まで冷却した後、褐色の反応混合物を、ｎ−ヘキサン（２５ｍｌ）で希釈し、連続的に水（２０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（１０ｍｌ）及び飽和ＮａＣｌ溶液（１０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固した：０．４３０ｇの帯黄色の油状物、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝４９．３：５０．７（ＨＰＬＣ方法１により測定）。 ［デヒドロトコフェロールの異性化］
［実施例９］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロールの異性化］
（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロール（９８．９ｍｇ、８７．２ｗｔ％、０．２０１ｍｍｏｌ）を、Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒオーブン中で真空下（約１１ｍｂａｒ）において、７時間にわたり２００℃で加熱した。 ２５℃まで冷却した後、黒色の油状物を、異性体比について分析した（２Ｒ：２Ｓ＝５１．０：４９．０（ＨＰＬＣ方法１により測定））。 図１４は、実施例９の異性化生成物のクロマトグラムを示している。 ［実施例９Ａ］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロールの異性化］
トルエン（２．５ｍｌ）中の（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロール（５２１ｍｇ、８２．３ｗｔ％、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、３４℃で、アルゴン雰囲気下において、リンタングステン酸水和物（３２ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を添加した。 この混合物を、還流下（浴温度１４０℃、内部温度１１２℃）において２時間にわたり磁気撹拌した。 ２５℃まで冷却した後、暗褐色の反応混合物を、トルエン（３ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（５ｍｌ）で洗浄した。 有機層を、Ｎａ ２ ＳＯ ４ （２ｇ）上で乾燥させ、濾過し、固体をトルエン（５ｍｌ）で洗浄し、合わせた濾液を、５０℃／１６ｍｂａｒ／１５分及び２５℃／０．１ｍｂａｒ／１時間で蒸発乾固した：５１４ｍｇの暗褐色の油状物、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝５０．３：４９．７（ＨＰＬＣ方法２により測定）。 ［実施例９Ｂ］
［（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロールの異性化］
（２Ｒ，４'Ｒ，８'Ｒ）−３，４−デヒドロ−α−トコフェロール（５２１ｍｇ、８２．３ｗｔ％、１．０ｍｍｏｌ）と、ｎ−ヘプタン（２．５ｍｌ）と、２．５ｇの炭酸エチレン（５０℃で溶融）との混合物に、４４℃で、アルゴン雰囲気下において、リンタングステン酸水和物（６５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加した。 この混合物を、還流下（浴温度１４０℃、内部温度１０１℃）において２．５時間にわたり磁気撹拌した。 ６０℃まで冷却した後、黒色の２相の反応混合物を、分液漏斗に移した。 飽和ＮａＨＣＯ ３溶液（５ｍｌ）を添加し、この混合物をｎ−ヘプタン（３ｍｌ）で抽出した。 上方のヘプタン相を分離し、Ｎａ ２ ＳＯ ４ （２ｇ）上で乾燥させ、濾過し、固体をｎ−ヘプタン（５ｍｌ）で洗浄し、合わせた濾液を、５０℃／１６ｍｂａｒ／１５分及び２５℃／０．１ｍｂａｒ／１時間で蒸発乾固した：５０９ｍｇの暗褐色の油状物、異性体比２Ｒ：２Ｓ＝４９．０：５１．０（ＨＰＬＣ方法２により測定）。 ［３． 分離の質］
以下の実験は、異なる溶離剤を用いた、キラル相（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＡ（３μｍ）、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）による、（全−ｒａｃ）−α−トコフェロール（ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）（１００ｍｇ／ｍｌ）の異性体のクロマトグラフィー分離の質に関する流量１ｍｌ／分；検出２８０ｎｍ）。 図１５は、溶離剤中に異なるアルコールを用いた異性体の分離を示している。 全ての例において、０．５ｍｇの（全−ｒａｃ）−α−トコフェロールの絶対量に相当する５μｌを注入した。
この比較は、アルコールの種類が、異性体の分離の質に強い影響を及ぼすということを示している。 図１５ｃ）は、特に１−プロパノールが選択良好な分離特性を示すことを示している。 図１６は、溶離剤中の６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）の有益な効果を示している。 全ての例において、０．５ｍｇの（全−ｒａｃ）−α−トコフェロールの絶対量に相当する５μｌを注入した。
図１７は、負荷能力に対する、溶離剤中のアルコールと６．０未満のｐＫ ａを有する有機酸（Ｓ１）との組み合わせの有益な効果を示している。 異なる量を注入した。
この比較は、エタノールの場合（図１７ａ）及びｂ））は、カラムに注入された異性体混合物の量が比較的少ない時に既に２つのピークがかなり重なり合っているが、１−プロパノール及び酢酸の場合（図１７ｃ）及びｄ））は、分離がはるかに良好であり、カラムに注入された異性体混合物の注入量がはるかに多い時でさえも優れた分離が得られ得るということを示している。 |
