一种益生菌发酵补血组合物及其制备方法和应用 |
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| 申请号 | CN201610154898.7 | 申请日 | 2016-03-18 | 公开(公告)号 | CN105616705A | 公开(公告)日 | 2016-06-01 |
| 申请人 | 三株福尔制药有限公司; | 发明人 | 吴炳新; 褚新红; 孙筱林; 甄宗武; 吕美; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种 益生菌 发酵 补血组合物及其制备方法，将中药大枣、枸杞子、桑葚、龙眼肉，经 水 浸，提取，浓缩，阿胶烊化后加入，添加微量元素，调整pH值，灭菌，接种多株益生菌，发酵，制得益生菌发酵补血组合物。试验结果显示，本发明的益生菌发酵补血组合物能显著提高受试患者的血红蛋白的含量，并且受试患者红细胞内的游离原卟啉明显下降，血清 铁 蛋白的含量明显升高，具有明显改善人体营养性贫血功能和在体外对人肠道中的主要益生菌具有明显的生长促进作用。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种益生菌发酵补血组合物，其特征在于，将中药大枣、枸杞子、桑葚、龙眼肉，经水浸，提取，浓缩，阿胶烊化后加入，添加微量元素，调整pH值，灭菌，接种多株益生菌，发酵，制得益生菌发酵补血组合物； |
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| 说明书全文 | 一种益生菌发酵补血组合物及其制备方法和应用技术领域背景技术[0002] 贫血是指人体外周血红细胞容量减少，低于正常范围下限的一种常见的临床症状。营养性贫血是一种小细胞低色素性贫血，由体内铁缺乏造成血红蛋白合成减少所引起，临床以血清铁浓度、转铁蛋白饱和度和血清铁蛋白降低，采用铁剂治疗有效为特征， 主要症状有面色苍白或萎黄、唇甲色淡、倦怠乏力、食欲不振等。世界上约有 10 ～ 30％的人群有不同程度的缺铁。 [0003] 现有补血产品主要有以下三类：纯中药类、纯铁制剂类以及中药加铁类。纯中药类补血制剂主要通过提升人体脾胃等机能来促进膳食中铁的吸收，同时还可促进骨髓细胞的造血功能，通过养血进而补血，然而存在起效慢以及对缺铁性贫血患者的补铁量不足的缺陷；而单纯铁制剂则起效快，疗效确切，但铁制剂普遍存在对胃肠有刺激性的缺陷，且口感差、还会染黑牙齿；现有的中药加铁制剂虽然优于以上两种情况，但仍存在可致腹泻、食欲减退等副作用，因此患者常常因为胃肠道副作用不能耐受而终止治疗。 发明内容[0004] 肠道是一个庞大的微生态系统， 其微生物的总量占人体总微生物量的 78.68%左右，是人体主要的微生态系统。肠道的正常菌群包括有害菌、共生菌的有益菌和条件性有害菌，其中共生菌的有益菌是对人体有重要生理功能的微 生物，与机体健康密切相关。肠道菌群处于健康状态时，维持着人体的各种功能，特别是营养促进作用，促进蛋白质和铁、锌等营养物质的吸收，部分益生菌还能够合成维生素B和叶酸，起到营养机体的作用，人们越来越多地发现宿主健康与肠道菌群有着千丝万缕的联系。微生态学研究显示，肠道微生物参与宿主的能量代谢，调控脂类、糖类、蛋白质类物质在肠道中的吸收。并且肠道菌群代谢产生的短链脂肪酸可影响骨髓造血系统，促进巨噬细胞和树突细胞前体的产生，从根本上改变贫血症状。 [0005] 为克服现有技术的不足，本发明提供了一种益生菌发酵补血组合物。本发明所述的补血组合物包括中药、微量元素、益生菌及其代谢产物，具体涉及中药大枣、枸杞子、桑葚、龙眼肉，经水浸，提取，浓缩，阿胶烊化后加入，添加微量元素，调整pH值，灭菌，接种多株益生菌，发酵，制得发酵组合物。 [0006] 所述中药在益生菌发酵补血组合物中的重量g/体积ml 百分比分别为：阿胶1-10%；枸杞4-20%；桑葚4-20%；大枣4-30%；龙眼肉2-20%。 [0007] 优选的，各中药成分在益生菌发酵补血组合物中的重量g/体积ml 百分比为：阿胶2%；枸杞12%；桑葚12%；大枣20%；龙眼肉6%。 [0008] 所述微量元素为铁、锌、硒，在益生菌发酵补血组合物中的含量分别为：铁5-500mg/L；锌5-200mg/L、硒10-500ug/L。 [0009] 优选的，微量元素在补血益生菌发酵组合物中的含量分别为铁60mg/L；锌30mg/L；硒150ug/L。 [0010] 所述的铁选自乙二胺四乙酸铁钠、硫酸亚铁、柠檬酸亚铁、乳酸亚铁、甘氨酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、右旋糖酐铁或富马酸亚铁；所述的锌选自硫酸锌、柠檬酸锌、乳酸锌、甘氨酸锌或葡萄糖酸锌；所述的硒选自亚硒酸钠、硒蛋白或富硒酵母。 [0011] 所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌。 [0012] 所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌、动物双歧杆菌、青春双歧杆菌和婴儿双歧杆菌；所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、卷曲乳杆菌、瑞士乳杆菌、唾液乳杆菌、格式乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌。 [0013] 菌种来源于中国典型培养物保藏中心（CCTCC）（中国，武汉）或中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC）（中国，北京）或者从正常人的粪便或肠粘膜组织中分离得到这些细菌菌株。 [0014] 本发明的益生菌发酵补血组合物的制备方法，包括以下步骤：a. 取中药复方中的大枣、枸杞子、桑葚、龙眼肉，加水浸泡1.0～2.0 小时，煎煮二次，第一次1.0～2.0 小时，第二次1.0～2.0 小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至50℃下测定相对密度为1.01 ～1.10； b．将阿胶粉碎，烊化后，与上述中药浓缩液混合，添加微量元素，调整pH7.0±0.5，并于 110～121℃下灭菌30～60分钟，温度降至37℃时，同时接种预培养的体积百分比各0.2～ 1.0%的一种或者两种双歧杆菌的菌液和预培养的体积百分比各0.2～1.0%的两种或者三种乳杆菌的菌液；常规发酵16～48小时，当pH降至4.0以下时结束发酵，稳定化处理，即得到益生菌发酵补血组合物。 本发明中使用的双歧杆菌和乳杆菌属于乳酸菌，为常见益生菌菌株，主要是基于它们在人体肠道内分布的总体广泛性，以及它们生理学活性的互补性。乳酸菌发酵可直接产生有机酸、氨基酸等营养物质，其中有机酸能使铁、锌等元素处于离子状态，可提高其吸收利用率；乳酸菌参与多种维生素代谢，能产生维生素B、叶酸、烟酸、生物素等供机体所需；乳酸菌还能合成与机体物质代谢相关的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等各种消化酶类，促进营养物质的消化吸收。 [0015] 本发明所述的益生菌发酵补血组合物可用于制备补血和调节肠道菌群功能的食品、保健食品、药品。 [0016] 补血类中药均属于滋补类中药，滋补类中药存在腻滞性，不利于消化吸收，特别是身体较弱或胃肠功能低下的人群，直接进补无法达到效果。与益生菌共同发酵后能降低其腻滞之性，补而不腻．便于消化吸收，增强滋养而不影响食欲。既保留了产品营养性、功能性、天然性，又易于人体全面吸收。 [0017] 有益效果：为检测本发明的益生菌发酵组合物能改善人体营养性贫血，同时具有调节有益菌群的作用，本发明分别进行了人体试食试验和体外益生菌生长实验，结果显示：本发明的益生菌发酵组合物具有明显改善人体营养性贫血功能和在体外对人肠道中的主要益生菌具有明显的生长促进作用。 具体实施方式[0018] 实施例1：益生菌发酵补血组合物A的制备取中药大枣100g、枸杞子100g、桑葚200g、龙眼肉100g，加水浸泡2.0 小时，煎煮二次，第一次2.0 小时，第二次1.0 小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至约1000ml，50℃下测定相对密度为1.03；将阿胶40g粉碎，烊化（加入适量上述中药浓缩液使其完全溶化）后，与上述中药浓缩液混合，添加葡萄糖酸亚铁0.088g、硫酸锌0.044g、亚硒酸钠0.24mg，调整pH7.0，并于115℃下灭菌50分钟，温度降至37℃时，同时接种预培养的体积百分比1.0%的短双歧杆菌（AS 1.2213）的菌液和体积百分比各0.5%的嗜酸乳杆菌（AS 1.1854）、植物乳杆菌（AS 1.19）及德氏乳杆菌（AS 1.1480）的菌液，37℃发酵16～28小时检测pH值，当pH值降至 4.0以下时结束发酵，稳定化处理，无菌分装，即得。 [0019] 实施例2：益生菌发酵补血组合物B的制备取中药大枣200g、枸杞子120g、桑葚120g、龙眼肉60g，加水浸泡1.0小时，煎煮二次，第一次2.0 小时，第二次2.0 小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至约1000ml，50℃下测定相对密度为1.04；将阿胶20g粉碎，烊化（加入适量上述中药浓缩液使其完全溶化）后，与上述中药浓缩液混合，添加乙二胺四乙酸铁钠0.44g、葡萄糖酸锌0.22g、硒蛋白（含硒3000PPM） 50mg，调整pH6.5，并于110℃下灭菌60分钟，温度降至37℃时，同时接种预培养的体积百分比各约1.0%的动物双歧杆菌（CGMCC 1.3003）、两歧双歧杆菌（CGMCC 1.5090）的菌液，再接种预培养好的体积百分比各约0.5%的副干酪乳杆菌（ CGMCC 1.2468）和鼠李糖乳杆菌（ CGMCC 1.104）的菌液。37℃发酵24～32小时检测pH值，当pH值降至4.0以下时结束发酵，稳定化处理，分装，即得。 [0020] 实施例3：益生菌发酵补血组合物C的制备取中药大枣300g、枸杞子50g、桑葚50g、龙眼肉40g，加水浸泡1.0小时，煎煮二次，第一次1.0 小时，第二次1.0 小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至约1000ml，50℃下测定相对密度为1.02；将阿胶60g粉碎，烊化（加入适量上述中药浓缩液使其完全溶化）后，与上述中药浓缩液混合，添加富马酸亚铁0.90g、乳酸锌（含3结晶水）0.26g、富硒酵母（含硒2000PPM） 150mg，调整pH7.5，并于121℃下灭菌30分钟，温度降至37℃时，同时接种预培养的体积百分比约1.0%的青春双歧杆菌（CGMCC1.2190）的菌液，再接种预培养好的体积百分比各约0.5%的发酵乳杆菌（ CGMCC 1.3269 ）和德氏乳杆菌乳亚种（ CGMCC 1.2142）的菌液。37℃发酵 16～32小时检测pH值，当pH值降至4.0以下时结束发酵，稳定化处理，分装，即得。 [0021] 实验例1：本发明的益生菌发酵补血组合物对肠道益生菌的体外生长促进作用本实施例旨在举例说明按本发明方法制备的发酵人参组合物对选自长双歧杆菌（B.longum）、两歧双歧杆菌（B.bifidum）和嗜酸乳杆菌（L.acidophilus）等人肠道益生菌的体外生长促进作用。 [0022] 使用长双歧杆菌、两歧双歧杆菌和嗜酸乳杆菌作为实验菌，实验菌经活化后按每管0.1ml（接种后培养基细菌浓度为106个/ml）分别接种于（1）常规PTYG培养基（每升培养基含有胰蛋白胨5g、大豆蛋白胨5g、酵母提取物10g、葡萄糖10g、盐溶液40ml、半胱氨酸盐酸盐0.5g、吐温80 0.1ml、0.1%刃天青1ml）；（2）本发明的发酵组合物（使用氢氧化钠调pH值至7并灭菌）。接种后将试管置于37℃下恒温培养24小时。培养后收集培养液并稀释，然后进行菌落计数。结果见表1： 表1 发酵组合物对双歧杆菌及嗜酸乳杆菌生长的影响 从表1中所示的数据可以看出，将双歧杆菌和嗜酸乳杆菌等已知的益生菌，接种于本发明发酵组合物中并培养24小时后，被接种的细菌数均增殖到108cfu/ml以上。 [0023] 由以上结果可以看出，按本发明方法制备的发酵组合物对人体肠道中的主要益生菌具有明显的生长促进作用。 [0024] 实验例2：本发明的益生菌发酵补血组合物人体试验1.受试对象 女性血红蛋白(Hb) ＜ 120g/L 的女性120 人。 [0025] 2.试验药物及服用方法将符合贫血诊断要求的志愿受试者按完全随机双盲法分为实验组1组、2组、3组和对照组。给实验1组、2组、3组连续食用本实施例1、2、3制备的益生菌发酵补血组合物A、B、C，并给对照组食用外观与之相同的安慰剂，每天2 次，每次50mL，观察期为40 天，服用期间对受试对象的生活和饮食不加干预，但避免应用其它含铁制剂。 [0026] 3.观察指标在试验前和试验后，经臂静脉采血6mL(3mL 不抗凝，3mL 抗凝)，分别在指定医院检验科进行检测，主要指标包括主观感觉指标、体格检查指标、血液学指标、生化指标、血红蛋白(Hb) 测定、红细胞内游离原卟啉(FEP) 测定和血清铁蛋白(SF) 测定。 [0027] 4.改善营养性贫血功能的判定标准①显效：临床症状、体征消失或明显好转，血红蛋白值上升10g/L 以上，其余所观察的指标有改善；②有效：临床症状、体征有改善，血红蛋白升高5g/L ～ 10g/L，其它所观察指标无不良改变；③无效：其余为无效。 [0028] 5.结果功效性指标变化结果如表2所示。 [0029] 表2：血红蛋白、红细胞内游离原卟啉和血清铁蛋白变化情况与试验前比较，**P [0030] 改善营养性贫血的功效按规定食用本发明组合物40d 的90 例实验组受试对象中，显效率为62.22％，有效率为30％，总有效率为92.22％。具体数据如表3 所示。 [0031] 表3改善营养性贫血表3 的数据说明本发明补血益生菌发酵组合物能显著改善营养性贫血，总有效率为 |
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