一种益生菌蜂蜜组合物及其制备方法 |
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| 申请号 | CN201610178652.3 | 申请日 | 2016-03-25 | 公开(公告)号 | CN105831666A | 公开(公告)日 | 2016-08-10 |
| 申请人 | 天津中天精科科技有限公司; | 发明人 | 李建树; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种 益生菌 蜂蜜组合物，以蜂蜜为主要原料，首先以部分蜂蜜、麦芽提取物和韭花、益生菌粉剂为原料，经低温酶解、高压脉冲 电场 杀菌、变温 发酵 、分次益生菌接种、 超滤 浓缩等工艺，制备出酸甜适宜、益生菌含量及其功能性 代谢物 含量高的蜂蜜益生菌发酵浓缩液，其益生菌含量可达8.12×1012?9.58×1012CFU/ml，益生性极强，然后与剩余蜂蜜、麦芽提取物和生姜提取物及功能性辅料制备出一种蜂蜜含量高、口感酸甜适宜、长期保存(36?48个月)不结晶、保健效果显著的益生菌蜂蜜组合物。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备：蜂蜜155-185份，麦芽提取物4-10份，生姜提取物2-6份，益生菌粉剂1-3份，韭花1-3份； |
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| 说明书全文 | 一种益生菌蜂蜜组合物及其制备方法技术领域[0001] 本发明涉及蜂蜜制品，特别涉及一种益生菌蜂蜜组合物及其制备方法。 背景技术[0002] 蜂蜜是蜜蜂采集植物花蜜酿成的一种理想的天然保健品。其主要成分有：(1)葡萄糖、果糖：这两种糖在蜂蜜中占65％以上。它赋予蜂蜜的甜味、吸湿性和能量的价值及有形的特征。(2)酸类：蜂蜜中的酸类包括有机酸、无机酸和氨基酸。有机酸主要是葡萄糖酸和柠檬酸。无机酸包括磷酸、盐酸、硼酸和碳酸。蜂蜜中的氨基酸大约有17种，其中脯氨酸是主要的氨基酸，其次是赖氨酸和天门冬氨酸。(3)酶类：主要是转化酶和淀粉酶。(4)维生素：蜂蜜中的维生素以B族最为丰富，其次是维生素C。常见的维生素有核黄素、吡多酸(VB6)、烟酸、叶酸、抗坏血酸。还有生物素、生育酚等。蜂蜜中的维生素主要来自蜂蜜中的花粉，少量来自花蜜。(5)矿物质：蜂蜜中的矿物质含量差异很大，与植物生长的土壤有密切关系。蜂蜜中的矿物质含量和种类与人体血液中的含量、种类十分相近，而且深色蜂蜜中的矿物质含量比浅色蜂蜜高。枣花蜜属深色蜜，经测定其含有的矿物质、微量元素均高于其它蜂蜜。如钾、钠、钙、磷等比其它蜂蜜高出4～10倍。铁、铜、硒高10倍左右。(6)蛋白质：蜂蜜中的蛋白质有4～7种，其中3种来自花蜜，另有4种来自蜜蜂。蜂蜜中含有一种胶体物质，它是由蛋白质、蜡类、戊聚糖和无机物组成，在深色蜂蜜中含量约为1％。它对蜂蜜的色泽和浑浊度有影响。 (7)芳香物质：蜂蜜中的芳香物质主要是醇和醛的衍生物及其相应的脂类化合物。这些芳香物质大部分来自花蜜，少部分在蜂蜜酿制过程中产生的，它赋予蜂蜜独特的香气。(8)其它物质：蜂蜜中还含有色素、花粉、糖醇类、丹宁类、树脂及其它生物活性物质。 [0003] 蜜制膏是以蜂蜜为主要原料配以其它功能性食品或药品原料而制备的一种膏剂，目前，蜜制膏的品种较多，中国专利CN 102334626 B公开了一种蜂产品复合配方的膏剂制品及制备方法，用蜂蜜、破壁蜂花粉、鲜蜂王浆、蜂王幼虫冻干粉、雄蜂蛹冻干粉五种具有保健作用的原料来制备的，本发明公开了蜂五宝膏的配方，成分是以重量计，分别是蜂蜜60-85％、破壁蜂花粉10-15％、鲜蜂王浆3-10％、蜂王幼虫冻干粉0.5-2％、雄蜂蛹冻干粉0.5- 2％。本发明还公开了该蜂五宝膏的制备方法，制备方法是将水分控制在19-22％的蜂蜜60℃预热，并开启搅拌装置，将鲜王浆、破壁蜂花粉、蜂王幼虫冻干粉、雄蜂蛹冻干粉等加入到蜂蜜中，混合均匀，再过胶体磨均质、装瓶。这样将富有营养的蜂产品集合在一起，充分发挥对于补充营养，改善体质的作用，另外也可将该产品稀释或直接用于面部营养美白滋润。 [0004] 中国专利CN 103519041 B一种蔬果米汁蜂蜜膏及其制作方法，其特征在于，由下列重量份的原料制成：蜂蜜50-55、果葡糖浆10-12、芋头粉4-5、红薯粉12-14、大米5-7、胡萝卜12-15、南瓜10-13、芹菜20-30、山楂2-3、淡竹叶3-4、竹叶菜4-5、三七花1-2、地黄叶3-4、杨梅叶4-5、板栗壳20-12、钙果叶4-5、水适量。本发明中蜂蜜补脾胃，润肠道，滋润皮肤；蔬菜瓜果能够补充人体所需的维生素与微量元素；大米、芋头粉、红薯粉补充碳水化合物；中药提取物增加了保健功效，能够清热解毒、滋补肝肾；而且味道醇厚、口感独特。 [0005] 中国专利CN 103039774 B公开了一种复方罗汉果蜜膏的加工方法。将罗汉果、百合、川贝和甘草加水洗净，加水煮沸提取3次，合并提取液，滤过，滤液浓缩至流浸膏；将流浸膏加入蜂蜜中混匀，加热煮沸，趁热装瓶，密封，即得复方罗汉果蜜膏。本发明产品具有润肺、清肺利咽、化痰止咳的功效。适合演员、教师、广播员、营业员等需保护发音器官者、慢性咽炎患者。增加了罗汉果精深加工产品品种，利于工业化生产。 [0006] 中国专利CN 101869235 B公开了一种营养蜂蜜制品的配方及制备方法，具体来说就是用具有营养保健作用的几味中药和蜂蜜来制备的，本发明公开了中药的配方，包括决明子、茯苓、枸杞子、菊花、白果、郁李仁、火麻仁、苏叶、甘草。成分是以重量计，制品含有3.0％～5.0％的中药提取物，含有95％～97％的蜂蜜。本发明还公开了该制品的制备方法，制备方法是将决明子、茯苓、枸杞子、菊花、白果、郁李仁、火麻仁、苏叶、甘草混合后提取，提取液浓缩后加到蜂蜜中，并将二者混合均匀，再浓缩、装瓶。在服用蜂蜜制品的过程中可以将上述几味中药的有效成分摄入到体内，既减少了服用这几味中药的麻烦，也减轻了不同药味对人体的刺激，同时又增强了蜂蜜和中药的保健作用。 [0007] 中国专利CN 104757363 A公开了一种解酒蜂蜜膏，属于食品技术加工领域，包括如下重量份数的各组分：红枣4-8份；枸杞4-8份；生姜5-10份；橘皮5-10份；维生素C 1-3份；维生素E 1-3份；橄榄油2-5份；醋10-15份；蜂蜜50-70份。本发明还提供了上述解酒蜂蜜膏的制备方法及使用方法。本发明使醉酒的人在短时间内醒酒，缓解和解除因醉酒而引起的身体不适及痛苦感觉，解决了单纯食醋进行解酒的效果有限的问题，简单方便，既有解酒作用，又能养肝护胃，饮用方便。 [0008] 中国专利CN 105192506 A公开了一种鹿茸蜂蜜膏的加工方法。主要是为解决目前服用鹿茸与蜂蜜混合的产品会产生燥热或者腹泻等不良反应的问题而发明的。它是由下述原料按如下重量份制得的：蜂蜜80～90份，酶解鹿茸粉8～18份，黄柏提取物2份；蜂蜜由重量百分比为85％的洋槐蜜、10％的桂花蜜和5％的椴树蜜组成；具体制备方法是：将洋槐蜜、桂花蜜、椴树蜜混合于不锈钢容器中后置于水中加热，加热55℃预融，待其具有较好的流动性后加入酶解鹿茸粉及黄柏提取物，边加入边搅拌，搅拌12min待其充分混匀后，过胶体磨研磨5min，过180目筛，入灭菌罐，81℃灭菌30min。优点是蜂蜜和黄柏对鹿茸起到降燥、收敛的作用。 [0009] 中国专利CN 103637218 B公开了一种保健蜂蜜及其制备方法，原料组成为：黑蜂蜂蜜100份，茯苓5-15份，黄芪5-15份，红枣5-15份。本发明针对蜂蜜单一产品保健功效起效慢的不足，根据多年的经验以及大量的实验筛选，将多种成分按照特定的比例加入黑蜂蜂蜜中，获得本发明保健蜂蜜。本发明保健蜂蜜营养丰富，具有抗衰老、增强免疫力、强身健体、滋润养颜、润肠通便等功效，特别适合体质虚弱、便秘人群，能快速调理体质，使身体恢复健康状态。本发明的方法制备简单，易于实现，便于工业化生产。 [0010] 上述公开的蜂蜜膏均以蜂蜜为主要原料，加入功能性原料，以解决相应的功能性问题，但是，质量较好，蜂蜜含量较高、水分含量较低的蜜制膏随着环境温度的不同，会出现不同程度的局部结晶，虽然不影响蜜制膏的内在质量，但也不会像纯蜂蜜那样整体、均一的结晶，会出现不均一的结晶而影响外观质量，误导消费者的质量意识，降低顾客的购买欲和食欲；同时，不论是纯蜂蜜还是蜜制膏长期饮用会出现胃胀、胃酸等情况，个别的会出现“蜂蜜不适应症”，情况更加严重；并且因蜂蜜中含有特殊的有机酸、矿物质等，口感酸涩，糖酸比例失调，不适用广大的消费群体。中国专利CN 104757357 A公开了防止蜂蜜结晶的处理方法，属于食品加工技术领域。该方法在瓶装蜂蜜传统生产工艺步骤中，浓缩蜂蜜过程中同时加入融化结晶核的环节，其操作方法是：在浓缩蜂蜜开始时，先将蜂蜜温度升高到77℃，保温5分钟，接着关闭进气阀进行浓缩，当蜂蜜温度降到50-60℃时，控制在该温度范围内继续浓缩，至蜜的含水量符合标准，然后将蜜泵入外有保温层的储蜜罐，进行超声波处理30秒，即破坏了蜂蜜的结晶核，防止蜂蜜降温后再次结晶。本发明直接在生产线上安装保温储蜜罐，蜂蜜在浓缩步骤中经冷热处理初步破坏结晶核，再在储蜜罐中超声波处理，彻底破坏结晶核，所得到的蜂蜜不仅滋味好，而且保持了原来的透明流质状态，比一般的加热解晶法所用成本低。上述处理方法得到的蜂蜜当温度降低时还会出现出现结晶现象，具有可逆性，并且工艺复杂，成本高。中国专利CN 101785539 B一种不易结晶蜂蜜及其制备方法。通过对蜂蜜加工的工艺流程和工艺参数进行调整和优化，经过融蜜、粗滤、配料、中滤、真空脱水、破晶核、精滤、冷却、灌装、装箱工序得到不易结晶蜂蜜。本发明与现有技术相比，实现了不添加任何物质延缓蜂蜜结晶，延长了蜂蜜的货架期。上述制备方法工艺复杂，采取多级过滤，蜂蜜有效成分含量降低，并且经过12个月结晶仍然会产生。 [0011] 因此，制备一种蜂蜜含量高、口感酸甜适宜、长期保存不结晶、保健效果显著的益生菌蜂蜜组合物很有必要。 发明内容[0012] 本发明所解决的技术问题是克服现有蜜制膏的缺陷，以蜂蜜为主要原料，科学复配可提供全面、天然植物酶和多种营养物质的麦芽提取物；可有效防止蜜制膏结晶以提高蜜制膏外观质量和稳定性、增强食欲的生姜提取物；可有机调节人体整体免疫力、增强巨噬细胞吞噬能力、抑制有害菌在人体肠道粘附和侵袭以增强益生性的益生菌粉；可促进蜂蜜消化吸收、防止胃肠胀气的韭花等，以此为蜜制膏的主要制备原料，科学复配少量一种或多种功能性辅料，制备出一种蜂蜜含量高、口感酸甜适宜、长期保存不结晶、保健效果显著的益生菌蜂蜜组合物。 [0013] 为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案： [0014] 一种益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0015] 蜂蜜155-185份，麦芽提取物4-10份，生姜提取物2-6份，益生菌粉剂1-3份，韭花1-3份； [0016] 优选地，所述益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0017] 蜂蜜165-175份，麦芽提取物6-8份，生姜提取物3-5份，益生菌粉剂1.5-2.5份，韭花1.5-2.5份； [0018] 更优选地，所述益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0019] 蜂蜜170份，麦芽提取物7份，生姜提取物4份，益生菌粉剂2份，韭花2份； [0020] 进一步地，所述益生菌蜂蜜组合物还包括以下重量份数的一种或几种辅料： [0021] 水果粉0.6-1.2份，藻类0.5-1份，库拉索芦荟凝胶0.5-1份，蜂花粉0.2-0.8份，低聚木糖0.2-0.8份，壳寡糖0.1-0.7份，海洋鱼骨胶原低聚肽粉0.1-0.7份，中草药提取物0.1-0.6份，蛹虫草0.1-0.5份； [0022] 优选地，所述益生菌蜂蜜组合物还包括以下重量份数的一种或几种辅料： [0023] 水果粉0.8-1.0份，藻类0.7-0.9份，库拉索芦荟凝胶0.7-0.9份，蜂花粉0.4-0.6份，低聚木糖0.4-0.6份，壳寡糖0.3-0.5份，海洋鱼骨胶原低聚肽粉0.3-0.5份，中草药提取物0.2-0.4份，蛹虫草0.2-0.4份； [0024] 更优选地，所述益生菌蜂蜜组合物还包括以下重量份数的一种或几种辅料： [0025] 水果粉0.9份，藻类0.8份，库拉索芦荟凝胶0.8份，蜂花粉0.5份，低聚木糖0.5份，壳寡糖0.4份，海洋鱼骨胶原低聚肽粉0.4份，中草药提取物0.3份，蛹虫草0.3份； [0026] 进一步地，所述蜂蜜至少含有80-100％的洋槐蜂蜜； [0027] 进一步地，所述麦芽提取物中不仅含有丰富的植物蛋白酶、淀粉酶、半纤维素酶、酯酶、氧化还原酶等多种植物酶而且含有植物多糖和单糖、植物淀粉、植物蛋白等营养物质，不仅可为益生菌蜂蜜组合物提供全面、天然的植物酶，还可为益生菌提供全面、丰富的营养物质； [0029] 更优选地，所述麦芽提取物的制备方法为：将大麦芽和小麦芽按质量比8-10:1-3均匀混合，粉碎至粒度0.5-1mm,得粉碎麦芽；然后将木瓜、菠萝、无花果分别于超声波清洗机中在功率200W、频率30KHz条件下超声清洗5-10min，沥干，室温下破碎至粒度0.5-1mm，并按质量比7-9:1-3:1-2均匀混合，加入混合物质量3-5倍的粉碎麦芽得原料混合物，加入原料混合物质量1-3倍的水，用柠檬酸调节pH值为3-4，在功率150-300W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间60-80s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，控制温度20-35℃，如此辐照10次，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；保温1-3h,然后，在功率200-400W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间90-105s,进行间隔式辐照：辐照15s，间隔10s，控制温度40-60℃，如此辐照10次，同时在功率300-500W,频率40-50KHz条件下进行超声波辅助提取，最后自然降温至室温，于电场强度25-35kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场提取15-20min；提取液过滤得第一滤液，加滤渣4倍的水漂洗、过滤得第二滤液，将第一滤液和第二滤液按质量比1:3-5均匀混合，减压浓缩至固形物含量为20％以上，即得麦芽提取物； [0030] 优选地，所述超声波清洗机中清洗液为0.3-0.5％的碳酸氢钠溶液。 [0031] 进一步地，所述生姜提取物是将黄姜和生姜科学复配，经超声清洗、冷冻破碎后经高压脉冲电场提取和微波提取，最后经生物酶解而制得的，在本发明中，其独特作用是可有效防止高含量蜂蜜益生菌蜂蜜组合物在储存过程发生局部、分散性重结晶，提高益生菌蜂蜜组合物的储存稳定性，延长益生菌蜂蜜组合物的货架期，提高益生菌蜂蜜组合物的商品价值，并且还会协同提升纯天然蜂蜜的香气，增强消费者食欲；当然，同时还具备其原料有效成分的功能特性； [0032] 优选地，所述生姜提取物的制备方法，包括如下步骤：将生姜和黄姜分别放入装有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200-400W、30-40KHz清洗5-10min，沥干，按质量比6-9:1-3均匀混合，然后于-20--24℃冷冻8-10min；立即粉碎至粒径0.2-0.4mm；置容器中并添加4-6倍重量的水，得混合物料，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度15- 25kV/cm，脉冲数30-50条件下进行高压脉冲电场处理；然后升温至30-40℃，保温，在功率 300-500W条件下进行微波辐照提取，其中，每次微波辐照总时间70s,进行间隔式辐照：辐照 10s，间隔10s，如此辐照10次；继续升温至40-50℃，保温，首先，向提取液中加入金属离子，使得金属离子含量为：钠离子28-30mg/L、锌离子20-22mg/L、钾离子15-18mg/L、钙离子10- 12mg/L和镁离子6-8mg/L，然后加入混合物料总重量0.5-1.5％的复合酶酶解40-60min，布袋过滤，得滤液；滤渣用2倍重量60-70℃水漂洗3次，漂洗液与滤液合并，均匀混合，减压浓缩至固形物含量为20％以上，即得生姜提取物； [0034] 进一步地，所述益生菌粉剂益生菌活菌含量为：6×1012-8×1012cfu/g； [0035] 所述益生菌粉剂包括以下益生菌粉剂中的任意一种或多种：例如：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum)、婴儿双岐杆菌(B.infantis)、长双岐杆菌(B.longum)、短双岐杆菌(B.breve)、青春双岐杆菌(B.adolescentis)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus.Bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)； [0036] 优选地，所述益生菌粉剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌30-40份，两岐双岐杆菌25-35份，乳双歧杆菌20-30份，嗜热链球菌10-20份，保加利亚乳杆菌12-15份，嗜酸乳杆菌12-15份，干酪乳杆菌8-10份，鼠李糖乳杆菌5-10份； [0037] 更优选地，所述植物乳杆菌粉剂是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌按按常规方法制备的，其中的冷冻保护剂以含有抗冻蛋白的动物或植物为原料，经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和复配酶酶解而制得的，可有效提高植物乳杆菌粉剂在冷冻干燥过程活菌存活率； [0038] 优选地，所述保护剂的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、沙冬青、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比8-10:3-5:2-4均匀混合，加入混合物料质量0.1-1倍的pH值为3.8-4.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.5-3mm,接着加入粉碎物质量10-20倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量1-2％的复配酶，于45-55℃酶解30-50min；酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得保护剂； [0040] 更优选地，所述微波辐照提取为间歇式提取，即微波辐照10s，间隔20s。 [0041] 进一步地，所述水果粉为诺丽果粉、芒果粉、雪梨粉、沙棘粉、玛咖粉中的任意一种。 [0042] 进一步地，所述藻类为雨生红球藻、盐藻、钝顶螺旋藻中的任意一种。 [0043] 进一步地，所述蜂花粉为芝麻花粉、油菜花粉中的任意一种。 [0044] 进一步地，所述中草药提取物是以百合、金银花、薄荷、罗汉果、阿胶、菊花、葛根、红枣、火麻仁、莲子、酸枣仁、黄精、枸杞、玉竹、白芷、人参、荷叶、决明子、枳椇子中的一种或几种为原料而制备的； [0045] 优选地，所述中草药提取物的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取上述一种或几种中草药，置盛有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗10-15min，沥干，将上述中药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，得混合物料，控制温度70-90℃保持2-4h，接着降温至40-50℃，用乳酸调节pH值为3.5- 4.5，在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量0.5-1.5％的混合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:1-3，控制温度至60-78℃保持3-4h，过滤，得第一滤液；添加滤渣1-3倍重量的水，控制温度85-95℃保持1-3h，然后降温至25-35℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4:1-3合并,均匀混合，即得中草药提取物； [0046] 所述混合酶为葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、单宁酶按质量比3-5：3-5:2-4:1-3:1-2均匀混合。 [0047] 本发明另一目的是提供上述益生菌蜂蜜组合物的制备方法，包括如下步骤： [0048] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、沥干，破碎至粒径0.3-0.5mm,向其中加入20-50份蜂蜜和2-5份麦芽提取物，均匀混合，加入混合物料2-4倍的去离子水，用乳酸调节pH值为5-7，升温至55-65℃，保温30-50min，然后降温至32-35℃于电场强度20-30kV/cm，脉冲时间 200-400μs,脉冲频率200-400Hz进行高压脉冲电场杀菌5-10min，调整pH值为6.0-7.0，加入益生菌粉剂质量的40-50％恒温发酵0.5-1h，接着以0.8-1.0℃/min的速率升温至40-45℃,加入益生菌粉剂质量的50-60％恒温发酵2-4h，最后以0.6-0.8℃/min的速率升温至50-55℃,继续发酵0.5-1h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经循环超滤浓缩至固形物含量为60％以上得蜂蜜益生菌发酵浓缩液； [0049] 2)将剩余蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有50-60℃水的预溶装置中，预溶30-50min,过100-120目筛，转入调配罐，保温50-60℃，边搅拌边依次加入剩余麦芽提取物、生姜提取物，充分溶解10-15min；接着加入辅料充分溶解4-6min得初混料；然后过胶体磨研磨 4-6min，调整物料细度，过160-200目筛，入灭菌罐80-83℃灭菌28-32min，转入贮罐降温至 48-52℃，最后灌装、封口、包装即得益生菌蜂蜜组合物。 [0050] 经上述方法制备的益生菌蜂蜜组合物结晶出现时间为36-48个月。 [0051] 本发明植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101。 [0052] 植物乳杆菌益生特性如下： [0053] 本发明所提供的植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCC NO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％。 [0054] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763对胆固醇降解能力研究和测定： [0055] 取1ml CGMCC NO.11763母液接种于10mL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量0.1mg/ml,pH 6.2)中，37℃的恒温静置分别培养20h、40h、60h备用，以接入1mL无菌水的MRS胆固醇培养基为对照，取以上培养不同时间的菌液样品及对照液各1ml,9000r/min，4℃下离心10min，得到发酵上清液，邻苯二甲醛法测定上清液中胆固醇含量(具体为：取各上清液 0.1ml于相应的试管中,加冰醋酸0.3ml,1mg/ml的邻苯二甲醛0.15ml，缓缓加入浓硫酸 1.0ml，混合均匀。室温静置10min，于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复，以同样方法制作胆固醇标准曲线，计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知，CGMCCNO.11763对胆固醇有很好的降解作用，在发酵60h小时后，降解率可达到64.76％。 [0056] 表1 对胆固醇的降解情况。 [0057]降解时间(h) 0 20h 40h 60h 胆固醇含量(mg/ml) 0.2273±0.0058 0.1356±0.0018 0.1011±0.0094 0.801±0.0231胆固醇降解率％ 40.34％ 55.52％ 64.76％ [0058] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763菌株的耐胆盐试验： [0059] 取CGMCCNO.11763菌液1mL接种菌种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％)的10mL MRS液体培养基(PH＝6.4)，置于37℃下分别培养0、2、4h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1％处理4h后菌的生长量依然达到 0.59±0.92×107(cfu/ml)，有很好的耐胆盐能力。 [0060] 表2 耐胆盐能力检测[(±s)×107cfu/ml] [0061] [0062] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763菌株的耐酸试验 [0063] 取HLX37母液按1ml接种菌种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的10mLMRS液体培养基，置于37℃下分别培养0、2、4h，每一处理3个重复。各取1ml样品菌液于 9ml生理盐水中混匀，制备稀释溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有很强的耐酸能力。 [0064] 表3 耐酸能力检测[(±s)×107cfu/ml] [0065] [0066] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763的黏附能力测定 [0067] 培养CGMCC NO.11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌DH5α(LB液体培养基)24h得发酵液，分别置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌泥，分别用pH＝7.0的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤菌泥2次(即在菌落中加入PBS，震荡混合均匀后，置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌体)。自凝集率(％)：用无菌的PBS将菌泥CGMCC NO.11763制成在波长600nm处的吸光值为0.4±0.1(A 0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A 24，自凝集率(％)公式为(A 0—A 24)/A 0。；他凝集率(％)：将CGMCC NO.11763和大肠杆菌DH5α的悬菌液调节成在波长600nm处的吸光值为0.6±0.1(A 0)的混合悬浮菌液。静置24H后测定吸光值A 24，他凝集率(％)公式为(A 0—A 24)/A 0。测定结果见表5，可知CGMCC NO.11763的自凝集率为95.71％，有很强的黏附能力。 [0068] 表4 黏附能力表 [0069] [0070] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763的菌株生理特性 [0071] 所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101。 [0073] 理化特征为：过氧化氢酶(-)，明胶液化(-)，吲哚实验(+)，运动性(-)，发酵产气(-)，亚硝酸盐还原(-)，发酵产气(-)，产硫化氢气体(-)，pH4.0MRS培养基中生长(+)。经过生理生化鉴定为为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH。 [0074] 菌株能够在57℃下生长良好，葡萄糖耐受能力为275g/L。 [0075] 本发明植物乳杆菌由采集人李建树，从新疆维吾尔族老乡家中酸奶中分离得到，采集时间2015年6月2日。 [0076] 本发明植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCCNO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％，菌株能够在57℃下生长良好，葡萄糖耐受能力为275g/L。 [0077] 有益效果: [0078] 本发明以蜂蜜为主要原料，首先以部分蜂蜜、麦芽提取物和韭花、益生菌粉剂为原料，经低温酶解、高压脉冲电场杀菌、变温发酵、分次益生菌接种、超滤浓缩等工艺，制备出酸甜适宜、益生菌含量及其功能性代谢物含量高的蜂蜜益生菌发酵浓缩液，其益生菌含量可达8.12×1012-9.58×1012CFU/ml，益生性极强，然后与剩余蜂蜜、麦芽提取物和生姜提取物及功能性辅料制备出一种蜂蜜含量高、口感酸甜适宜、长期保存(36-48个月)不结晶、保健效果显著的益生菌蜂蜜组合物。具体技术效果见实施例七至九；具体技术原理如下： [0079] 1.本发明的益生菌剂科学复配多种乳酸菌剂，种类多，功能全，益生性强，特别是植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCC NO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％。 [0080] 需要说明的是本发明益生菌蜂蜜组合物中含有大量的功能性益生菌代谢物和死菌体，虽为死菌体，但死菌体、细胞碎片与代谢产物与活菌一样，可抑制病原菌对肠壁的粘附和侵袭、有机调节人体整体免疫力、增强巨噬细胞吞噬能力、抑制肿瘤生长、提高自然杀伤细胞(NK细胞)的活性、改善粘膜表面病菌和溶菌酶平衡等，其效果同死菌体数量成正比例，灭活的蜂蜜益生菌发酵浓缩液同样具备其益生菌的较强的益生性。 [0081] 2.本发明在制备植物乳杆菌粉剂时采用的冷冻保护剂将含有抗冻蛋白较高的冬黑麦、沙冬青和鲨鱼皮胶原蛋白科学复配，经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和生物酶解而制得，全程低温提取，抗冻蛋白提取率高，损失少，得到的保护剂抗冻多肽含量高、种类全、功能性强、抗冻效果好，提高了植物乳杆菌粉剂中的活菌含量。 [0082] 3.本发明制备的麦芽提取物中不仅含有丰富的植物蛋白酶、淀粉酶、半纤维素酶、酯酶、氧化还原酶等多种植物酶而且含有植物多糖和单糖、植物淀粉、植物蛋白、可溶性纤维等营养物质，不仅可为益生菌蜂蜜组合物提供全面、天然的植物酶，还可为益生菌提供全面、丰富的营养物质；同时将其与生姜提取物科学复配，可协同增强蜂蜜的储存稳定性，进而可防止蜂蜜重结晶，经超声清洗、微波辅助超声提取和高压脉冲电场提取、减压浓缩等低温提取后，其效果更加显著，并且有效提高了原料利用率、植物酶活性和产率；有效保证了麦芽提取物的食品安全性。 [0083] 4.本发明制备的生姜提取物是将黄姜和生姜科学复配，经超声清洗、冷冻破碎后经高压脉冲电场提取和微波提取，最后经生物酶解而制得的，在本发明中，其独特作用是可有效提高高含量蜂蜜益生菌蜂蜜组合物在储存过程的稳定性，提高产品的外观质量，防止益生菌蜂蜜组合物在温度、水分、微生物污染等环境条件下发生局部、分散性重结晶，延长益生菌蜂蜜组合物的货架期，提高益生菌蜂蜜组合物的商品价值，并且还会协同提升纯天然蜂蜜的香气，增强消费者食欲，与麦芽提取物科学复配，协同作用更强；当然，同时还具备黄姜和生姜有效成分的功能特性。 [0084] 5.本发明将韭花科学复配于益生菌蜂蜜组合物中，突破了传统的韭花与蜂蜜不可同食的理论，将少量韭花与蜂蜜、麦芽提取物科学复配，并经益生菌发酵，不但不会产生腹痛、腹泻等症状，而且还会促进蜂蜜消化、吸收，防止胃肠胀气，特别适合因食用蜂蜜而胃酸、胃胀、腹泻消费者，拓展了益生菌蜂蜜组合物的消费群体。 [0085] 6.本发明科学复配了诺丽果粉、芒果粉、雪梨粉、沙棘粉、玛咖粉等水果粉；雨生红球藻、盐藻、钝顶螺旋藻等藻类；库拉索芦荟凝胶；芝麻花粉、油菜花粉等蜂花粉；低聚木糖；壳寡糖；海洋鱼骨胶原低聚肽粉；百合、金银花、薄荷、罗汉果、阿胶、红枣、火麻仁、莲子、酸枣仁、黄精、枸杞、玉竹、白芷、人参、荷叶、决明子、枳椇子等中草药提取物；蛹虫草；以上述原料中的一种或几种作为辅料，更加增强了益生菌蜂蜜组合物的功能特性及保健效果，可制备出多种功能性保健系列益生菌蜂蜜组合物。 [0086] 需要说明的是本发明益生菌蜂蜜组合物的技术效果是各组分技术特征相互协同、相互作用的结果，并非简单的技术特征(组分功能)的叠加，各组分技术特征的有机结合和协同产生的效果远远超过各单一技术特征功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。 具体实施方式[0087] 下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。 [0088] 实施例一： [0089] 原料制备 [0090] 1、麦芽提取物的制备 [0091] 其制备方法为： [0092] 将大麦芽和小麦芽按质量比9:2均匀混合，粉碎至粒度0.8mm,得粉碎麦芽；然后将木瓜、菠萝、无花果分别于装有0.4％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中在功率200W、频率30KHz条件下超声清洗8min，沥干，室温下破碎至粒度0.8mm，并按质量比8:2:1.5均匀混合，加入混合物质量4倍的粉碎麦芽得原料混合物，加入原料混合物质量2倍的水，用柠檬酸调节pH值为3.5，在功率225W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间 70s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，控制温度28℃，如此辐照10次，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；保温2h,然后，在功率300W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间95s,进行间隔式辐照：辐照15s，间隔10s，控制温度50℃，如此辐照10次，同时在功率400W,频率45KHz条件下进行超声波辅助提取，最后自然降温至室温，于电场强度30kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场提取18min；提取液过滤得第一滤液，加滤渣4倍的水漂洗、过滤得第二滤液，将第一滤液和第二滤液按质量比1:4均匀混合，减压浓缩至固形物含量为30％，即得麦芽提取物。 [0093] 2、生姜提取物的制备 [0094] 其制备方法，包括如下步骤： [0095] 将生姜和黄姜分别放入装有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于300W、35KHz清洗8min，沥干，按质量比7.5:2均匀混合，然后于-22℃冷冻9min；立即粉碎至粒径0.3mm；置容器中并添加5倍重量的水，得混合物料，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度 20kV/cm，脉冲数40条件下进行高压脉冲电场处理；然后升温至35℃，保温，在功率400W条件下进行微波辐照提取，其中，每次微波辐照总时间70s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，如此辐照10次；继续升温至45℃，保温，首先，向提取液中加入金属离子，使得金属离子含量为：钠离子29mg/L、锌离子21mg/L、钾离子16.5mg/L、钙离子11mg/L和镁离子7mg/L，然后加入混合物料总重量1.0％的复合酶酶解50min，布袋过滤，得滤液；滤渣用2倍重量65℃水漂洗3次，漂洗液与滤液合并，均匀混合，减压浓缩至固形物含量为30％，即得生姜提取物； [0096] 上述复合酶质量组成为：纤维素酶:葡聚糖酶:木聚糖酶:甘露糖酶:漆酶＝6:4:4:3:2。 [0097] 3、植物乳杆菌粉剂的制备 [0098] 植物乳杆菌粉剂是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌按按常规方法制备的，其中的冷冻保护剂以含有抗冻蛋白的动物或植物为原料，经高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取和复配酶酶解而制得的，可有效提高植物乳杆菌粉剂在冷冻干燥过程活菌存活率； [0099] 上述保护剂的制备方法，包括如下步骤： [0100] 将冬黑麦、沙冬青、鲨鱼皮胶原蛋白分别清洗、沥干，按质量比9:4:3均匀混合，加入混合物料质量0.5倍的pH值为4.2的乳酸润湿6h,于-20℃冷冻1.5h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径2mm,接着加入粉碎物质量15倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min；然后于室温在功率225W条件下进行微波辐照提取18min，同时在功率250W,频率 35KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量1.5％的复配酶，于50℃酶解40min；酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.2mm即得保护剂； [0101] 上述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比4:3:2:2:1.5均匀混合； [0102] 上述微波辐照提取为间歇式提取，即微波辐照10s，间隔20s。 [0103] 以下实施例二至六所用麦芽提取物、生姜提取物、植物乳杆菌粉剂均由实施例一制备。 [0104] 实施例二： [0105] 一种雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0106] 蜂蜜170份，麦芽提取物7份，生姜提取物4份，益生菌粉剂2份，韭花2份，雨生红球藻0.8份； [0107] 其中蜂蜜含有90％的洋槐蜂蜜； [0108] 上述益生菌粉剂益生菌活菌含量为：7×1012cfu/g； [0109] 益生菌粉剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌35份，两岐双岐杆菌30份，乳双歧杆菌25份，嗜热链球菌15份，保加利亚乳杆菌13份，嗜酸乳杆菌13份，干酪乳杆菌9份，鼠李糖乳杆菌8份； [0110] 雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物的制备方法，包括如下步骤： [0111] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、沥干，破碎至粒径0.4mm,向其中加入35份蜂蜜和2.5份麦芽提取物，均匀混合，加入混合物料3倍的去离子水，用乳酸调节pH值为6，升温至60℃，保温40min，然后降温至33.5℃于电场强度25kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz进行高压脉冲电场杀菌8min，调整pH值为6.5，加入益生菌粉剂质量的45％恒温发酵0.8h，接着以0.9℃/min的速率升温至43℃,加入益生菌粉剂质量的55％恒温发酵3h，最后以0.7℃/min的速率升温至52.5℃,继续发酵0.8h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经循环超滤浓缩至固形物含量为70％得蜂蜜益生菌发酵浓缩液； [0112] 2)将剩余蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有55℃水的预溶装置中，预溶40min,过110目筛，转入调配罐，保温55℃，边搅拌边依次加入剩余麦芽提取物、生姜提取物，充分溶解13min；接着加入雨生红球藻充分溶解5min得初混料；然后过胶体磨研磨5min，调整物料细度，过180目筛，入灭菌罐82℃灭菌30min，转入贮罐降温至50℃，最后灌装、封口、包装即得雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物。 [0113] 经上述方法制备的益生菌蜂蜜组合物结晶出现时间为48个月。 [0114] 实施例三： [0115] 一种菊花葛根益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0116] 蜂蜜165份，麦芽提取物6份，生姜提取物3份，益生菌粉剂1.5份，韭花1.5份，中草药提取物0.3份，芒果粉0.9份； [0117] 其中蜂蜜含有80％的洋槐蜂蜜； [0118] 上述益生菌粉剂益生菌活菌含量为：6×1012cfu/g； [0119] 益生菌粉剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌30份，两岐双岐杆菌25份，乳双歧杆菌20份，嗜热链球菌10份，保加利亚乳杆菌12份，嗜酸乳杆菌12份，干酪乳杆菌8份，鼠李糖乳杆菌5份； [0120] 上述中草药提取物是以菊花、葛根、红枣为原料而制备的； [0121] 其制备方法包括如下步骤： [0122] 按重量份数计，称取上述菊花、葛根、红枣，置盛有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗13min，沥干，将上述菊花、葛根、红枣粉碎至粒径为1mm，置容器中均匀混合并添加5倍重量的水，得混合物料，控制温度80℃保持3h，接着降温至45℃，用乳酸调节pH值为4.0，在功率225W条件下进行微波提取13min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量1.0％的混合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为6.2，酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:2，控制温度至69℃保持3.5h，过滤，得第一滤液；添加滤渣2倍重量的水，控制温度90℃保持2h，然后降温至30℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比3:2合并,均匀混合，即得中草药提取物； [0123] 上述混合酶为葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、单宁酶按质量比4：4:3:2:1.5均匀混合。 [0124] 菊花葛根益生菌蜂蜜组合物的制备方法，包括如下步骤： [0125] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、沥干，破碎至粒径0.3mm,向其中加入20份蜂蜜和2份麦芽提取物，均匀混合，加入混合物料2倍的去离子水，用乳酸调节pH值为5，升温至55℃，保温30min，然后降温至32℃于电场强度20kV/cm，脉冲时间200μs,脉冲频率200Hz进行高压脉冲电场杀菌5min，调整pH值为6.0，加入益生菌粉剂质量的40％恒温发酵0.5h，接着以0.8℃/min的速率升温至40℃,加入益生菌粉剂质量的50％恒温发酵2h，最后以0.6℃/min的速率升温至50℃,继续发酵0.5h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经循环超滤浓缩至固形物含量为65％得蜂蜜益生菌发酵浓缩液； [0126] 2)将剩余蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有50℃水的预溶装置中，预溶30min,过100目筛，转入调配罐，保温50℃，边搅拌边依次加入剩余麦芽提取物、生姜提取物，充分溶解10min；接着加入中草药提取物、芒果粉，充分溶解4min得初混料；然后过胶体磨研磨 4min，调整物料细度，过160目筛，入灭菌罐80℃灭菌28min，转入贮罐降温至48℃，最后灌装、封口、包装即得菊花葛根益生菌蜂蜜组合物。 [0127] 经上述方法制备的益生菌蜂蜜组合物结晶出现时间为45个月。 [0128] 实施例四： [0129] 一种低聚木糖益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0130] 蜂蜜175份，麦芽提取物8份，生姜提取物5份，益生菌粉剂2.5份，韭花2.5份，低聚木糖0.5份； [0131] 其中蜂蜜含有99％的洋槐蜂蜜； [0132] 上述益生菌粉剂益生菌活菌含量为：8×1012cfu/g； [0133] 益生菌粉剂由以下重量份数的粉剂均匀混合而成：植物乳杆菌40份，两岐双岐杆菌35份，乳双歧杆菌30份，嗜热链球菌20份，保加利亚乳杆菌15份，嗜酸乳杆菌15份，干酪乳杆菌10份，鼠李糖乳杆菌10份； [0134] 低聚木糖益生菌蜂蜜组合物的制备方法，包括如下步骤： [0135] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、沥干，破碎至粒径0.5mm,向其中加入50份蜂蜜和5份麦芽提取物，均匀混合，加入混合物料4倍的去离子水，用乳酸调节pH值为7，升温至65℃，保温50min，然后降温至35℃于电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率400Hz进行高压脉冲电场杀菌10min，调整pH值为7.0，加入益生菌粉剂质量的50％恒温发酵1h，接着以1.0℃/min的速率升温至45℃,加入益生菌粉剂质量的60％恒温发酵4h，最后以0.8℃/min的速率升温至55℃,继续发酵1h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经循环超滤浓缩至固形物含量为75％得蜂蜜益生菌发酵浓缩液； [0136] 2)将剩余蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有60℃水的预溶装置中，预溶50min,过120目筛，转入调配罐，保温60℃，边搅拌边依次加入剩余麦芽提取物、生姜提取物，充分溶解15min；接着加入低聚木糖充分溶解6min得初混料；然后过胶体磨研磨6min，调整物料细度，过200目筛，入灭菌罐83℃灭菌32min，转入贮罐降温至52℃，最后灌装、封口、包装即得低聚木糖益生菌蜂蜜组合物。 [0137] 经上述方法制备的益生菌蜂蜜组合物结晶出现时间为40个月。 [0138] 实施例五： [0139] 一种蛹虫草益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0140] 蜂蜜155份，麦芽提取物4份，生姜提取物2份，益生菌粉剂1份，韭花1份，蛹虫草0.3份； [0141] 其中蜂蜜含有85％的洋槐蜂蜜； [0142] 上述益生菌粉剂益生菌活菌含量为：6.5×1012cfu/g； [0143] 益生菌粉剂为植物乳杆菌粉剂； [0144] 蛹虫草益生菌蜂蜜组合物的制备方法，包括如下步骤： [0145] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、沥干，破碎至粒径0.35mm,向其中加入30份蜂蜜和3份麦芽提取物，均匀混合，加入混合物料2.5倍的去离子水，用乳酸调节pH值为5.5，升温至 58℃，保温35min，然后降温至33℃于电场强度23kV/cm，脉冲时间250μs,脉冲频率250Hz进行高压脉冲电场杀菌7min，调整pH值为6.3，加入益生菌粉剂质量的43％恒温发酵0.7h，接着以0.85℃/min的速率升温至42℃,加入益生菌粉剂质量的53％恒温发酵2.5h，最后以 0.65℃/min的速率升温至52℃,继续发酵0.6h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经循环超滤浓缩至固形物含量为80％得蜂蜜益生菌发酵浓缩液； [0146] 2)将剩余蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有53℃水的预溶装置中，预溶35min,过105目筛，转入调配罐，保温53℃，边搅拌边依次加入剩余麦芽提取物、生姜提取物，充分溶解12min；接着加入蛹虫草充分溶解4.5min得初混料；然后过胶体磨研磨4.5min，调整物料细度，过170目筛，入灭菌罐81℃灭菌29min，转入贮罐降温至49℃，最后灌装、封口、包装即得蛹虫草益生菌蜂蜜组合物。 [0147] 经上述方法制备的益生菌蜂蜜组合物结晶出现时间为36个月。 [0148] 实施例六： [0149] 一种壳寡糖益生菌蜂蜜组合物，主要由以下重量份数的原料制备： [0150] 蜂蜜185份，麦芽提取物10份，生姜提取物6份，益生菌粉剂3份，韭花3份，壳寡糖0.4份； [0151] 其中蜂蜜含有95％的洋槐蜂蜜； [0152] 上述益生菌粉剂益生菌活菌含量为：7.5×1012cfu/g； [0153] 益生菌粉剂为干酪乳杆菌粉剂； [0154] 壳寡糖益生菌蜂蜜组合物的制备方法，包括如下步骤： [0155] 1)按照配方，首先取韭花，清洗、沥干，破碎至粒径0.45mm,向其中加入40份蜂蜜和4份麦芽提取物，均匀混合，加入混合物料3.5倍的去离子水，用乳酸调节pH值为6.5，升温至 63℃，保温45min，然后降温至34℃于电场强度28kV/cm，脉冲时间350μs,脉冲频率350Hz进行高压脉冲电场杀菌9min，调整pH值为6.8，加入益生菌粉剂质量的48％恒温发酵0.9h，接着以0.95℃/min的速率升温至44℃,加入益生菌粉剂质量的58％恒温发酵3.5h，最后以 0.75℃/min的速率升温至54℃,继续发酵0.9h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经循环超滤浓缩至固形物含量为85％得蜂蜜益生菌发酵浓缩液； [0156] 2)将剩余蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有58℃水的预溶装置中，预溶45min,过115目筛，转入调配罐，保温58℃，边搅拌边依次加入剩余麦芽提取物、生姜提取物，充分溶解14min；接着加入壳寡糖充分溶解5.5min得初混料；然后过胶体磨研磨5.5min，调整物料细度，过190目筛，入灭菌罐82℃灭菌31min，转入贮罐降温至51℃，最后灌装、封口、包装即得壳寡糖益生菌蜂蜜组合物。 [0157] 经上述方法制备的益生菌蜂蜜组合物结晶出现时间为38个月。 [0158] 实验例七食用雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物后总胆固醇的变化 [0159] 选总胆固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名，男女各半，随机分成三组；第一组每天晚餐饮用150毫升矿泉水；第二组每天晚餐冲饮普通市售雨生红球藻蜜制膏150g，第三组每天晚餐冲饮本发明实施例2的雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物150g，期间每天食用同样的食物，食物包括肉、蛋、蔬菜和水果。分别在实验开始的前一天和第20、40、60天采集试验者的血液，测定血液中的总胆固醇含量，结果如表1： [0160] 表1：血液中总胆固醇含量检测结果 [0161]时间 0天 20天 40天 60天 第一组(mg/dl) 202.3 203.8 206.2 209.3 第二组(mg/dl) 207.6 206.5 203.2 202.1 第三组(mg/dl) 210.5 201.9 189.7 178.6 [0162] 由上表可知冲饮本发明实施例2的雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物后，成年人血液中的总胆固醇的含量发生明显变化。与普通市售雨生红球藻蜜制膏相比，本发明雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物对成年人血液中的总胆固醇的含量明显的降低，而矿泉水组成年人血液中的总胆固醇的含量明显的增加，市售雨生红球藻蜜制膏虽然有所降低，但与本发明产品相比，效果不显著，由此可知，本发明采用具有降低胆固醇特性的特定菌株制备的雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物具有很好的降低胆固醇的保健效果。 [0163] 需要说明的是：本发明实施例3-6所制备的益生菌蜂蜜组合物同样具有上述技术效果，各实施例之间差异性不显著。 [0164] 实施例八 本发明雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物的感官品评试验 [0165] 邀请24名人员对本发明实施例2制备的雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物与市售两种同类相同生产日期的雨生红球藻蜜制膏进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表2： [0166] 表2：感官品评统计结果 [0167] [0168] [0169] 注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。 [0170] 以上结果表明，本发明制备的雨生红球藻益生菌蜂蜜组合物从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售雨生红球藻蜜制膏，特别是外观、风味和口感极好，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。 [0171] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的益生菌蜂蜜组合物同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。 [0173] 1实验目的 [0174] 通过运动耐力测试(小鼠游泳试验)，验证本发明益生菌蜂蜜组合物的提高免疫力、抗疲劳作用。 [0175] 2实验材料与试剂 [0176] 2.1供试药物： [0177] 市售益生菌蜂蜜组合物(G1)；市售益生菌蜂蜜组合物(G2)；本发明实施例2-6制备的益生菌蜂蜜组合物(G3-G7)。 [0178] 2.2试剂： [0179] 肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所；浓硫酸(AR)，南京化学试剂有限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。 [0180] 3.实验动物 [0181] ICR小鼠，♂，清洁级，体重18-22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小鼠自由饮食。 [0182] 4.主要仪器 [0183] 铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公司；水浴锅：DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称：BS224S型，Sartorius公司；秒表，温度计 [0184] 5.实验分组 [0185] 5.1剂量分组及受试样品给予时间随机将小鼠分为8组，每组10只，第1组至第7组分别给G1～G7的药物，第8组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。 [0186] 5.2样品配制第1组至第7组：称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml；空白对照组：双蒸水150ml。 [0187] 6.实验方法 [0188] 6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25±1℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。 [0189] 6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送宁夏医科大学附属医院检验科检测。 [0190] 6.3肝糖原的测定末次给药30min后，在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min，颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏100mg，肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。 [0191] 6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法：分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值) [0192] 7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值 [0193] 8.统计方法实验数据用 表示，采用t检验进行组间比较 [0194] 9.实验结果 [0195] 9.1本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠体重的影响 [0196] 各组小鼠在给予G1～G9药物后，前、中，后期体重分别见下表所示,各组小鼠的初始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05)，表明G1～G9药物均无明显的毒性。实验结果详见表3。 [0197] 表3 负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重 [0198] [0199] [0200] 9.2本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠负重游泳时间的影响 [0201] 经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，可以明显延长小鼠负重游泳时间，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明益生菌蜂蜜组合物G3～G7药物与空白对照组比较，可以显著延长小鼠负重游泳时间，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表4。 [0202] 表4 益生菌蜂蜜组合物对小鼠负重游泳时间的影响 [0203] [0204] “*”p<0.05vs空白对照； [0205] “**”p<0.01vs空白对照； [0206] 9.3本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠运动前后血乳酸的影响 [0207] 经口给予小鼠本发明的益生菌蜂蜜组合物后，本发明益生菌蜂蜜组合物G3～G7药物对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，G1～G2药物组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低，但并无统计学差异(P＞0.05)。结果见表5。 [0208] 表5 本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠运动前后血乳酸水平的影响 [0209] [0210] [0211] “*”p<0.05vs空白对照； [0212] 9.4本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠肝糖原的影响 [0213] 经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明益生菌蜂蜜组合物G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表6。 [0214] 表6 本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠肝糖原含量的影响 [0215] [0216] “*”p<0.05vs空白对照； [0217] “**”p<0.01vs空白对照； [0218] 9.5本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠血清尿素的影响 [0219] 经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物组与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明益生菌蜂蜜组合物G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表7。 [0220] 表7 本发明益生菌蜂蜜组合物对小鼠血清尿素含量的影响 [0221] [0222] [0223] “*”p<0.05vs空白对照； [0224] “**”p<0.01vs空白对照； [0225] 10.实验结论 [0226] 本实验主要通过小鼠负重游泳实验，同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明益 |
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