Reverse-turn mimetics and methods relating to it专利检索- 库本身如阵列混合物专利检索查询-专利查询网

Reverse-turn mimetics and methods relating to it
申请号	JP2001505919	申请日	2000-06-20	公开(公告)号	JP2003503352A	公开(公告)日	2003-01-28
申请人	モレキュメティックスリミテッド;			发明人	マイケルカーン，; ファ−オークキム，; マーシンスタシアック，; 政尚江口;
摘要	(57)【要約】生物学的に活性なペプチドおよびタンパク質の逆領域の二次構造を模倣する立体配置的に束縛された化合物が、開示される。このような逆ターン模倣物は、細胞接着指示性疾患（例えば、多発性硬化症、アテローム性動脈硬化症、ぜん息および炎症性腸疾患）の処置における有用性を有する。本発明はまた、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と組み合わされた、治療有効量の化合物含む組成物を、それを必要とする温血動物に投与する工程を包含する細胞接着媒介性疾患を処置するための方法を提供する。
权利要求	【特許請求の範囲】【請求項１】細胞接着媒介性疾患を処置するための方法であって、該方法は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と組み合わされた、治療有効量の以下の構造：【化１】を有する化合物を含む組成物を、それを必要とする温血動物に投与する工程を包含するここで、Ｙは、−ＣＨ（Ｒ ₅ ）−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−ＣＨ（Ｒ ^' ）−、−Ａ−（Ｒ ₁ ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ ₁ ）−、− Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｏ−および−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｎ（Ｒ ^' ）−から選択され；Ａは、−（ＣＨＲ'） _n −であり、ここでｎ＝０、１または２であり；Ｂは、−（ＣＨＲ''） _m −であり、ここでｍ＝１、２または３であり；Ｒ'、Ｒ''、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₅は、同じかまたは異なり、そしてアミノ酸側鎖部分またはその誘導体、リンカーおよび固体支持体から、独立して選択され；そしてＲ ₁およびＲ ₄は、該化合物の残基を示し、そしてここで縮合された二環式環上の任意の２つの隣接するＣＨ基または隣接するＮＨ基およびＣＨ基は、必要に応じて二重結合を形成し得る、方法。【請求項２】請求項１に記載の方法であって、ここでＹは、−ＣＨ（Ｒ ₅ ）−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−であり、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化２】ここでＡ、ＢおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₅は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項３】請求項２に記載の方法であって、ここでＡは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化３】ここでｎ、ｍおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₅は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項４】請求項３に記載の方法であって、ここでｎは０であり、ｍは１であり、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化４】ここでＲ ₁ 〜Ｒ ₅は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項５】請求項１に記載の方法であって、ここでＹは、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−ＣＨ（Ｒ'）−、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化５】ここでＡ、Ｂ、Ｒ'およびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項６】請求項５に記載の方法であって、前記縮合された二環式環上の２つの隣接するＣＨ基が、二重結合を形成し、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化６】ここで、Ａ、Ｂ、Ｒ'およびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項７】請求項６に記載の方法であって、ここでＡは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、−Ｒ'は、水素であり、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化７】ここでｎ、ｍおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項８】請求項１に記載の方法であって、ここでＹは、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−Ｃ（＝Ｏ）−であり、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化８】ここで、Ａ、ＢおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項９】請求項８に記載の方法であって、ここでＡは−（ＣＨ ₂ ） _n − であり、Ｂは−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして前記化合物は、以下の構造を有し：【化９】ここでｎ、ｍおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１０】請求項１に記載の方法であって、ここでＹは−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ ₁ ）−であり、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１０】ここでＡ、ＢおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１１】請求項１０に記載の方法であって、ここでＡは−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１１】ここでｎ、ｍおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１２】請求項１に記載の方法であって、ここでＹは−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｏ−であり、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１２】ここでＡ、ＢおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１３】請求項１２に記載の方法であって、ここでＡは−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１３】ここでｎ、ｍおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１４】請求項１に記載の方法であって、ここでＹは−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｎ（Ｒ'）−であり、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１４】ここでＡ、Ｂ、Ｒ'およびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１５】請求項１４に記載の方法であって、ここで前記縮合された二環式環上の２つの隣接するＮＨ基およびＣＨ基は二重結合を形成し、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１５】ここで、Ａ、ＢおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１６】請求項１５に記載の方法であって、ここでＡは−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして前記化合物は以下の構造を有し：【化１６】ここでｎ、ｍおよびＲ ₁ 〜Ｒ ₄は、請求項１に列挙されるとおりである、方法。【請求項１７】前記化合物が、α ₄ β ₁インテグリンまたはα ₄ β ₇インテグリンの化合物である、請求項１に記載の方法。【請求項１８】請求項１に記載の方法であって、細胞接着指示性疾患が、慢性関節リウマチ、アルツハイマー病、ＡＩＤＳ痴呆、ＡＲＤＳ、ぜん息、アレルギー、炎症性腸疾患、ＣＮＳ炎症、アトピー性皮膚炎、脳炎、多発性硬化症、髄膜炎、腎炎、Ｉ型糖尿病、アテローム性動脈硬化症、心筋虚血、再狭窄、発作、腫瘍転移、網膜炎または乾癬である、方法。【請求項１９】前記細胞接着指示性疾患が、アテローム性動脈硬化症、ぜん息、炎症性腸疾患、多発性硬化症である、請求項１８に記載の方法。【請求項２０】前記細胞指示性疾患が、アテローム性動脈硬化症である、請求項１８に記載の方法。【請求項２１】前記細胞指示性疾患が、ぜん息である、請求項１８に記載の方法。【請求項２２】前記細胞指示性疾患が、炎症性腸疾患である、請求項１８に記載の方法。【請求項２３】前記疾患が、多発性硬化症である、請求項１８に記載の方法。
说明书全文	【発明の詳細な説明】【０００１】（技術分野）本発明は、逆ターン模倣物（ｒｅｖｅｒｓｅ−ｔｕｒｎｍｉｍｅｔｉｃ）（細胞接着媒介性疾患のインヒビターを含む）、ならびに逆ターン模倣物の化学ライブラリーに一般的に関連する。【０００２】（発明の背景）細胞接着は、生物の生存度に重要である。接着は、多細胞性組織を一緒に保持し、そして胚の発生を配向する。それは創傷治癒、感染の根絶および血液の凝集において、重要な役割を果たす。インテグリンは、すべてのこれらの機能に親密に関与する細胞表面タンパク質のファミリーである。これらは、赤血球を除くほとんどすべての型のヒト細胞において見出された。インテグリン機能における異常は、炎症性疾患、心臓発作、発作および癌を含む種々の障害に寄与する。【０００３】インテグリンは、互いに非共有結合したαサブユニットおよびβサブユニットのヘテロダイマーからなる。これらの細胞表面レセプターは、細胞膜から細胞質まで及ぶ。少なくとも１５の異なるαサブユニットおよび９の異なるβサブユニットは、公知である。しかし、ほとんどのαタンパク質は、１つのβにのみ結合するので、約２１の公知のインテグリンレセプターが存在する。細胞表面において、２つのサブユニットの頭は、互いに接触し、細胞外タンパク質リガンドのための結合表面を形成し、他の細胞または細胞外マトリックスへの付着を可能にする。これらのレセプターの親和性は、細胞の外側または細胞内のシグナルによって調節され得る。例えば、白血球の損傷または感染の部位への漸増は、一連の接着性相互作用に関する。内皮および白血球セレクチンと炭水化物との間の弱い相互作用は、血管壁に沿った白血球の一過性の接着および回転を媒介する。感染の部位によって放出される種々のケモキネシスおよび他のトリガー因子は、シグナルとして作用し、静止性状態から高親和性状態にインテグリンを活性化する。次いで、これらの活性化されたインテグリンは、内皮細胞の表面上のそれらの同族のリガンドに結合し、強力な接着および白血球の平板化を生じる。続いて、白血球は、内皮からその下の組織に移動する。【０００４】インテグリンα ₄ β ₁は、血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）、あるいはＩＩＩ型連結セグメント（ＩＩＩＣＳ）を含むフィブロネクチンのスプライス改変体のいずれかとの、主に結合を介して、細胞接着を媒介する。炎症に関与する種々の細胞は、α ₄ β ₁を発現する（リンパ球、単球、好塩基球および好酸球を含むが、好中球を含まない）。 α ₄サブユニットに対するモノクローナル抗体は、α ₄を含むインテグリンを、慢性関節リウマチ（Ｂａｒｂａｄｉｌｌｏら、ＳｐｒｉｎｇｅｒＳｅｍｉｎＩｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ１６：４２７−３６，１９９５；Ｉｓｓｅｋｕｔｓら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ８８：５６９−７６、１９９６）、急性大腸炎（Ｐｏｄｏｌｓｋｙら、ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ９２：３７２−８０、１９９３）、多発性硬化症（Ｙｅｄｎｏｃｋら、Ｎａｔｕｒｅ３５６：６３−６、１９９２）、ぜん息（Ａｂｒａｈａｍら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：７７６−８７，１９９４；米国特許第５，８７１，７３４号）および糖尿病（Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら、ＣｅｌｌＩｍｍｕｎｏｌ１６５：１９３−２０１、１９９５）の動物モデルにおける潜在的な治療標的として確証するために使用されている。より最近は、低分子量のペプチジル誘導体は、α ₄ β ₁の競合的なインヒビターとして産生され、そいてヒツジにおけるアレルギー気道応答を阻害することが示された（Ｌｉｎら、ＪＭｅｄＣｈｅｍ４２：９２０−３４、１９９９）。【０００５】 α ₄ β ₁への結合に関与するＩＩＩＣＳにおける重要な配列は、２５残基のペプチドＣＳ１であることが示され、そしてこの配列内で、最小に認識されるモチーフは、トリペプチド（ＬＤＶ）である。類似の配列（ＩＤＳ）は、ＶＣＡＭ−１のα ₄ β ₁への結合をに関与していた。ＶＣＡＭ−１のＮ末端の２つのドメインのフラグメントのＸ線結晶構造は、ＩＤＳ配列が、２つのβ鎖を連結する露出するループの一部であることを示す（Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ３７３：５３９ −４４，１９９５；Ｗａｎｇら、ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ９２：５７１−８、１９９５）。逆コンフォメーションを採用する環状ペプチドおよびその誘導体は、α ₄ β ₁へのＶＣＡＭ−１の結合のインヒビターであることが示された（ＷＯ９６／００５８１；ＷＯ９６／０６１０８；Ｄｏｙｌｅら、ＩｎｔＪＰｅｐｔＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ４７：４２７３６−１９９６）。さらに、多くの強力かつ選択性（α ₅ β ₁に対する）環状ペプチドベースのインヒビターが発見された（Ｊａｃｋｓｏｎら、ＪＭｅｄＣｈｅｍ４０：３３５９−６８、１９９７）。いくつかの非ペプチジルβターン模倣物はまた、低μＭの範囲のＩＣ ₅₀ ｓで、α ₄ β ₁を結合することが報告された（Ｓｏｕｒｅｒｓら、ＢｉｏｏｒｇＭｅｄＣｈｅｍＬｅｔｔ８：２２９７−３０２、１９９８）。多くのフェニルアラニンおよびチロシン誘導体はまた、α ₄ β ₁のインヒビターして開示された（ＷＯ９９／０６３９０；ＷＯ９９／０６４３１；ＷＯ９９／０６４３３；ＷＯ９９／０６４３４；ＷＯ９９／０６４３５；ＷＯ９９／０６４３６；ＷＯ９９／０６４３７；ＷＯ９８／５４２０７；ＷＯ９９／１０３１２；ＷＯ９９／１０３１３；ＷＯ９８／５３８１４；ＷＯ９８／５３８１７；ＷＯ９８／５８９０２）。しかし、強力かつ経口的に利用可能な低分子インヒビターは開示されていない。【０００６】関連したインテグリン（α ₄ β ₇ ）は、リンパ球の表面上で発現され、そしてＶＣＡＭ−１、フィブロネクチンおよび粘膜のアドレシン（ａｄｒｅｓｓｉｎ）細胞接着分子１（ＭＡｄＣＡＭ−１）に結合する。インテグリンα ₄ β ₇およびＭＡｄＣＡＭは、血液、腸およびリンパ組織の間でのリンパ球の部分集合の再循環を媒介する。ＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンＣＳ−１と同様に、ＭＡｄＣＡＭ−１のＣＤループ上に存在するトリペプチド配列（ＬＤＴ）が存在する。ＭＡｄＣＡＭ−１は、α ₄ β ₇による認識のために重要である。Ｘ線結晶構造は、この配列はまた、ターン構造の一部であることを示す（Ｔａｎら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ６：７９３−８０１、１９９８）。最近の研究は、α ₄ β ₇は、疾患（例えば、ぜん息（Ｌｏｂｂら、ＡｎｎＮＹＡｃａｄＳｃｉ７９６：１１３−２３、１９９６）、炎症性腸疾患（Ｆｏｎｇら、ＩｍｍｕｎｏｌＲｅｓ１６：２９９−３１１、１９９７）および糖尿病（Ｙａｎｇら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ４６：１５４２−７、１９９７））において役割を果たすことを示した。さらに、 α ₄インテグリンは、癌（例えば、頚部および前立腺）において下方制御されるようであるが、転移性の黒色腫においては上方制御されるようである（Ｓａｎｄｅｒｓら、ＣａｎｃｅｒＩｎｖｅｓｔ１６：３２９−４４、１９９８）。このことは、α ₄ β ₁およびα ₄ β ₇のインヒビターが、抗癌剤として有用であることを示す。【０００７】逆ターンは、タンパク質の二次構造の３つのクラスの１つを含み、そして互いに固定された空間的な関係での、３（γターン）、４（βターン）、またはそれ以上（ループ）のアミノ酸側鎖を示す。ターンは、分子認識において重要であることが示され（Ｒｏｓｅら、ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＰｒｏｔｅｉｎＣｈｅｍｉｓｔｒｙ３７：１−１０９、１９８５）、そしてそれらの低分子模倣物についての研究の拡大する分野を生じた（例えば、Ｈａｎｅｓｓｉａｎら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ５３：１２７８９−１２８５４、１９９７）。多くの模倣物は、外部ターン模倣物（生理学的に関連する側鎖のすべてを示し得ない（例えば、Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２１０：６５６−８、１９８０））または小さく、立体配置的に可動な環状ペプチド誘導体（例えば、Ｖｉｌｅｓら、ＥｕｒＪＢｉｏｃｈｅｍ２４２：３５２−６２、１９９６）のいずれかである。しかし、非ペプチド化合物が開発され、それらは、生物学的に活性なタンパク質またはペプチドにおいて見出される逆ターンの二次構造を非常に模倣する。例えば、Ｋａｈｎの米国特許第５，４７５，０８５号、同第５，６７０，１５５号、および同第５，６７２，６８１号およびＫａｈｎの刊行されたＰＣＴＷＯ９４／０３４９４のすべては、逆ターンの３次元構造を模倣する立体配置的に抑制された非ペプチド化合物を開示する。より最近に刊行されたＫａｈｎのＰＣＴＷＯ９７／１５５７７およびＫａｈｎらのＰＣＴＷＯ９８／４９１６８は、さらに高度に抑制された二環式複素環を、逆ターン模倣物として開示した。それにもかかわらず、１種の鋳型であらゆる型のターンを模倣することができないので、さらなる逆ターン鋳型およびそれらの使用方法についての必要性が、当該分野には存在する。【０００８】有意な伸展が、立体構造的に抑制された逆ターン模倣物の合成および同定においてなされたが、ペプチドの二次構造を模倣する低分子についての必要性が当該分野にまだ存在する。さらに、このような模倣物のライブラリーの合成および生理活性ライブラリーメンバーを同定するための生物学的標的に対するライブラリーメンバーをスクリーニングするための技術の必要性が、当該分野でさらに存在する。さらに、炎症性疾患および心臓血管疾患ならびにいくつかの癌の処置に使用するための、経口的に利用可能なインテグリンのインヒビターの必要性が当該分野で存在する。特に、慢性関節リウマチ、ぜん息、糖尿病、および炎症性腸疾患の処置に使用するためのα ₄ β ₁およびα ₄ β ₇のインヒビターの必要性が存在する。本発明は、これらの必要性を満たし、かつさらに関連する利点を提供する。【０００９】（発明の要旨）簡単には、本発明は、立体構造的に抑制された化合物に関し、それらの化合物は、生物学的に活性なペプチドおよびタンパク質の逆ターン領域の二次構造を模倣する。本発明はまた、このような化合物を含むライブラリーならびにその合成およびクリーニングを開示する。さらに、本発明は、細胞接着媒介性疾患の処置のための逆ターン模倣物の使用を開示する。【００１０】本発明の化合物は、以下の一般構造（Ｉ）を有する：【００１１】【化１７】ここで、Ｙは、−ＣＨ（Ｒ ₅ ）−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−ＣＨ（Ｒ '）−、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ ₁ ）−、− Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｏ−、および−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｎ（Ｒ'）−であり；Ａは、−（ＣＨＲ'） _n −であり；Ｂは、−（ＣＨＲ''） _m −であり；ｎ＝０、１または２であり；ｍ＝１、２または３であり；そして二環式環上の任意の２つの隣接するＣＨ基または隣接するＮＨ基およびＣＨ基は、必要に応じて二重結合を形成し；そしてここでＲ'、Ｒ''、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、以下に詳細に記載されるとおりである。【００１２】実施形態において、Ｙは−ＣＨ（Ｒ ₅ ）−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−であり、本発明の化合物は以下の構造（Ｉ'）を有し：【００１３】【化１８】ここでＡおよびＢは上記の定義どおりであり、そしてＲ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、以下の詳細な説明で定義されるとおりである。【００１４】実施形態において、Ｙは−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−ＣＨ（Ｒ'）−であり、本発明の化合物は以下の構造（Ｉ''）を有し：【００１５】【化１９】ここでＡおよびＢは上記の定義どおりであり、そしてＲ'、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、以下の詳細な説明で定義されるとおりである。【００１６】実施形態において、Ｙは−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−Ｃ（＝Ｏ）−であり、本発明の化合物は以下の構造（Ｉ'''）を有し：【００１７】【化２０】ここでＡおよびＢは上記の定義どおりであり、そしてＲ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、以下の詳細な説明で定義されるとおりである。【００１８】実施形態において、Ｙは−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ ₁ ）−であり、本発明の化合物は以下の構造（Ｉ''''）を有し：【００１９】【化２１】ここでＡおよびＢは上記の定義どおりであり、そしてＲ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、以下の詳細な説明で定義されるとおりである。【００２０】実施形態において、Ｙは−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｏ−であり、本発明の化合物は以下の構造（Ｉ'''''）を有し：【００２１】【化２２】ここでＡおよびＢは上記の定義どおりであり、そしてＲ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、以下の詳細な説明で定義されるとおりである。【００２２】実施形態において、Ｙは−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｎ（Ｒ'）−であり、本発明の化合物は以下の構造（Ｉ''''''）を有し：【００２３】【化２３】ここでＡおよびＢは上記の定義どおりであり、そしてＲ'、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、以下の詳細な説明で定義されるとおりである。【００２４】本発明はまた、上記の構造（Ｉ）の化合物を含むライブラリーならびにこのようなライブラリーを合成するための方法および生物学的に活性な化合物を同定するためのこのようなライブラリーのスクリーニングに関する。本発明の化合物を用いて、細胞接着媒介性疾患を処置するために使用する方法を記載する。薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と組合わせた本発明の化合物を含む組成物をまた開示する。【００２５】本発明のこれらの局面および他の局面は、添付の図面および以下の詳細な記載を参照すると明白である。この目的のために、より詳細な特定の手順、化合物および／または組成物を記載する種々の参考を本明細書中に示し、これらを、その全体が参考として援用される。【００２６】（本発明の詳細な説明）本発明は、逆ターン（ｒｉｖｅｒｓｅ−ｔｕｒｎ）および逆ターン模倣物を含む化学ライブラリに関する。本発明の逆ターン模倣物は、生物学的試薬として有用であり、これには、診断剤、予防剤および／または治療剤としての使用が挙げられるが、これに限定されない。本発明の逆ターン模倣物ライブラリは、このような生物学的試薬の同定に使用される。本発明の実施において、このライブラリは、１０〜１００〜１０００（またこれより多く）の別個の逆ターン模倣物（これはまた、本明細書において「模倣物」と呼ばれる）を含み得る。【００２７】本発明の１局面において、以下の構造（Ｉ）：【００２８】【化２４】を有する、逆ターン模倣物が開示される。ここで、Ｙは、−ＣＨ（Ｒ ₅ ）−Ａ− Ｎ（Ｒ ₁ ）−、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−ＣＨ（Ｒ'）−、−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ ₁ ）−、−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｏ−および−Ａ− ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｎ（Ｒ'）−であり；Ａは、−（ＣＨＲ'） _n −であり；Ｂは、− （ＣＨＲ”） _m −であり；ｎ＝０，１または２であり；ｍ＝１，２または３であり；そして二環式環上の任意の２個の隣接するＣＨ基または隣接するＮＨ基およびＣＨ基は、必要に応じて２重結合を形成し得、；そしてここで、Ｒ'、Ｒ”、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、以下に規定される通りである。【００２９】上記の構造（Ｉ'）〜（Ｉ”””）において、縮合した二環式環上の炭素原子への種々のＲ基の結合のための実線表示は、これらのＲ基が紙面の上側または下側のいずれかに存在し得ることを示す。本発明の逆ターン模倣物は、天然に存在するアミノ酸（すなわち、「Ｌ−アミノ酸」）の逆ターンを模倣することを意図し、このＲ基は、構造（Ｉ）において、紙面の下側に一般に存在する：【００３０】【化２５】しかし、本発明の逆ターン模倣物が、１個以上のＤアミノ酸を含む逆ターンを模倣することを意図する場合に、対応するＲ基（単数または複数）は、構造（Ｉ）において、紙面の上側に存在する：【００３１】【化２６】１実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、同じまたは異なり、そして化合物の残基を示し、そしてＲ'、Ｒ”、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、およびＲ ₅は、同じまたは異なり、そして独立してアミノ酸側鎖部分またはその誘導体から選択される。Ｒ'およびＲ ”に関して、存在する場合のＲ'およびＲ”の各々は、独立してアミノ酸側鎖部分またはその誘導体から選択される。例えば、ｍ＝２である場合、Ｂは、−ＣＨＲ”ＣＨＲ”−部分である。この場合において、存在する場合の両方のＲ”は、独立して選択され、そして同じであっても異なっていてもよい。従って、存在する場合の第１のＲ”が、水素であり、存在する場合の第２のＲ”がメチルである場合、Ｂは、構造−ＣＨ ₂ ＣＨ（ＣＨ ₃ ）−を有する。【００３２】本明細書において使用される場合、用語「化合物の残基」は、Ｒ１および／またはＲ ₄位のいずれかにおいて、逆ターン模倣物に共有結合する、任意の部分、試薬、化合物、支持体、分子、リンカー、アミノ酸、ペプチドまたはタンパク質を意味する。この用語はまた、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体を含む。【００３３】本明細書において使用される場合、用語「アミノ酸側鎖部分」は、表１に示される天然に存在するアミノ酸側鎖部分を含む天然に存在するタンパク質（これらに限定されない）中に存在する、任意のアミノ酸側鎖部分を示す。本発明の他の天然に存在するアミノ酸側鎖部分は、３，５−ジブロモチロシン、３，５−ジヨードチロシン、ヒドロキシリジン、γ−カルボキシグルタメート、ホスホチロシンおよびホスホセリンの側鎖部分が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、グリコシル化アミノ酸側鎖はまた、本発明の実施において使用され得、これには、グルコシル化トレオニン、セリンおよびアスパラギンが挙げられるが、これらに限定されない。【００３４】【表１】天然に存在するアミノ酸側鎖部分に加えて、本発明のアミノ酸側鎖部分はまた、それれの種々の誘導体を含む。本明細書中で使用される場合、アミノ酸側鎖部分の「誘導体」は、天然に存在するアミノ酸側鎖部分に対する修飾物および／または改変物を含む。例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびフェニルアラニンのアミノ酸側鎖部分は、一般に、低級鎖アルキル、低級鎖アリール、または低級鎖アラルキル部分として分類され得る。アミノ酸側鎖部分の誘導体は、他の直鎖または分枝鎖、環式または非環式、置換または非置換、飽和または不飽和の低級鎖アルキル、低級鎖アリールまたは低級鎖アラルキル部分を含む。【００３５】本明細書において使用される場合、「低級鎖アルキル部分」は、１〜１２個の炭素原子を含み、「低級鎖アリール部分」は、６〜１２個の炭素原子を含み、そして「低級鎖アラルキル部分」は、７〜１２個の炭素原子を含む。従って、１実施形態において、アミノ酸側鎖誘導体は、Ｃ _1〜12アルキル、Ｃ _6〜12アリール、およびＣ _7〜12アラルキルから選択され、そしてより好ましくい実施形態において、Ｃ _1〜7アルキル、Ｃ _6〜10アリール、およびＣ _7〜11アラルキルから選択される。【００３６】本発明のアミノ側鎖誘導体は、さらに、低級鎖アルキル、低級鎖アリールおよび低級鎖アラルキル部分の置換された誘導体をさらに含み、ここで、この置換基は、以下の１以上の化学部分から選択される（これらに限定されない）：−ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＮＨ ₂ 、−ＮＨ ₂ 、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯ ₂ Ｒ、−ＳＯ ₂ Ｈ、−ＳＯＲおよびハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを含む）。ここで、存在する場合のＲの各々は、直鎖または分枝鎖、環式または非環式、置換または非置換、飽和または不飽和の低級鎖アルキル、低級鎖アリールまたは低級鎖アラルキル部分から独立して選択される。さらに、本発明の環式の低級鎖アルキル、低級鎖アリールおよび低級鎖アラルキル部分としては、ナフタレン、ならびに複素環式化合物（例えば、チオフェン、ピロール、フラン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、３−ピロリン、ピロリジン、ピリジン、ピリミジン、プリン、キノリン、イソキノリンおよびカルバゾール）が挙げられる。アミノ酸側鎖誘導体は、低級鎖アルキルおよび低級鎖アラルキル部分のアルキル部分のヘテロアルキル誘導体をさらに含み、これには、アルキルおよびアラルキルホスホネートならびに生理食塩水が挙げられる（これに限定されない）。【００３７】代表的なＲ ₁およびＲ ₄部分としては、特別に、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＣＯＲ、− ＣＯＯＲ、−ＣＯＮＨ ₂ 、−ＣＯＮＲ、−ＣＯＮＲＲ、−ＮＨ ₂ 、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ，−ＳＯ ₂ Ｒおよび−ＣＯＳＲが挙げられる（これらに限定されない）。ここで、存在する場合のＲの各々は、上に定義される通りである。【００３８】さらなる実施形態において、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体（あるいはＲ ₁およびＲ ₄の場合ではこの化合物の残基）であることに加えて、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄またはＲ ₅は、この化合物の、別の部分または化合物への連結を容易にするリンカーであり得る。例えば、本発明の化合物は、診断またはスクリーニングアッセイにおいて使用するために、１個以上の公知の化合物（例えば、ビオチン）に連結され得る。さらに、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄またはＲ ₅は、化合物を固体支持体（例えば、固相ペプチド合成において使用される支持体）に連結するリンカーであり得るか、あるいはその支持体であり得る。この実施形態において、別の部分または化合物、あるいは固体支持体への連結は、Ｒ ₁またはＲ ₄部分において好ましく、より好ましくは、Ｒ ₄部分である。【００３９】Ｙが、−ＣＨ（Ｒ ₅ ）−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−である実施形態において、この逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉ'）：【００４０】【化２７】を有する。ここで、Ａ、Ｂ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、上に定義される通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、この化合物の残基を示し、そしてＲ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₅は、アミノ酸側鎖部分から独立して選択される。【００４１】構造（Ｉ'）のさらに特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そしてこの逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉａ'）：【００４２】【化２８】を有する。ここで、ｎ、ｍ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、上に定義される通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、この化合物の残基を示し、そしてＲ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₅は、アミノ酸側鎖部分から独立して選択される。【００４３】構造（Ｉ'）のなおさらに特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n −、であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、ｎは０であり、ｍは１であり、そしてこの逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉｂ'）：【００４４】【化２９】を有する。ここで、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、上に定義される通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、この化合物の残基を示し、そしてＲ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₅は、アミノ酸側鎖部分から独立して選択される。別の好ましい実施形態において、Ｒ ₁は、ＲＯＣ（Ｏ）−、ＲＳＯ ₂ −およびＲＮＨＣ（Ｏ）−から選択され、ここで、Ｒは、上に定義される通りである。より好ましい実施形態において、Ｒ ₁は、ＲＯＣ（Ｏ）−、ＲＳＯ ₂ −およびＲＮＨＣ（Ｏ）− から選択され、そしてＲは、置換または非置換の低級鎖アリールおよび低級鎖アラルキル部分から選択される。別の特定の実施形態において、Ｒ ₂およびＲ ₅は、低級鎖アルキル部分から独立して選択され、ＣＯＯＨまたはＣＯＯＲで置換される。ここでＲは、上に定義される通りである。別の特定の実施形態において、Ｒ ₃は、置換または非置換の低級鎖アリールおよび低級鎖アラルキル部分から選択される。【００４５】この実施形態において、Ｙが−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−ＣＨ（Ｒ'）−である場合、この逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉ”）：【００４６】【化３０】を有する。ここで、Ａ、Ｂ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ'は、上に定義される通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、この化合物の残基を示し、そしてＲ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ'は、アミノ酸側鎖部分から独立して選択される。【００４７】構造（Ｉ”）の実施形態において、二環式環上の２個の隣接するＣＨ基は、二重結合を形成し、本発明の逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉａ”）：【００４８】【化３１】を含む。ここで、Ａ、Ｂ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ'は、上に定義される通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、この化合物の残基を示し、Ｒ ₂およびＲ ₃は、アミノ酸側鎖部分から独立して選択され、そしてＲ'は、水素である。【００４９】構造（Ｉａ”）のより特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、Ｒ'は、水素であり、そして逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉｂ''）：【００５０】【化３２】を有し、ここで、ｎ、ｍ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。【００５１】Ｙが−Ａ−Ｎ（Ｒ ₁ ）−（Ｃ＝Ｏ）である実施形態において、逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉ'''）：【００５２】【化３３】を有し、ここで、Ａ、Ｂ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、化合物の残基を表し、そしてＲ ₂およびＲ ₃は、独立して、アミノ酸側鎖部分から選択される。【００５３】構造（Ｉ'''）のより特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉａ '''）：【００５４】【化３４】を有し、ここで、ｎ、ｍ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。【００５５】Ｙが、−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ−（Ｒ ₁ ）−である実施形態において、逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉ''''）：【００５６】【化３５】を有し、ここで、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、化合物の残基を表し、そしてＲ ₂およびＲ ₃は、独立してアミノ酸側鎖部分から選択される。【００５７】構造（Ｉ''''）のより特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉａ''''）：【００５８】【化３６】を有し、ここで、ｎ、ｍ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。【００５９】Ｙが、−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｏ−である実施形態において、逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉ'''''）：【００６０】【化３７】を有し、ここで、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、化合物の残基を表し、そしてＲ ₂およびＲ ₃は、独立してアミノ酸側鎖部分から選択される。【００６１】構造（Ｉ'''''）のより特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n − であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉａ'''''）：【００６２】【化３８】を有し、ここで、ｎ、ｍ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。【００６３】Ｙが−Ａ−ＣＨ（Ｒ ₁ ）−Ｎ（Ｒ'）−であり、かつ二環式環上の隣接ＮＨおよびＣＨ基が二重結合を形成する実施形態において、本発明の逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉａ''''''）：【００６４】【化３９】を含み、ここで、Ａ、Ｂ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。好ましい実施形態において、Ｒ ₁およびＲ ₄は、化合物の残基を表し、そしてＲ ₂およびＲ ₃は、独立してアミノ酸側鎖部分から選択される。【００６５】構造（Ｉａ''''''）のより特定の実施形態において、Ａは、−（ＣＨ ₂ ） _n −であり、Ｂは、−（ＣＨ ₂ ） _m −であり、そして逆ターン模倣物は、以下の構造（Ｉｂ''''''）：【００６６】【化４０】を有し、ここで、ｎ、ｍ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃およびＲ ₄は、上記で定義された通りである。【００６７】構造（Ｉ）の好ましい実施形態において、Ｒ ₁は、ＲＯＣ（Ｏ）−、ＲＳＯ ₂ − 、およびＲＨＮＣ（Ｏ）−から選択され、ここで、Ｒは、上記で定義された通りである。より特定の実施形態において、Ｒ ₁は、ＲＯＣ（Ｏ）−、ＲＳＯ ₂ −、およびＲＨＮＣ（Ｏ）から選択され、そしてＲは、置換または非置換の低級鎖アリール部分および低級鎖アラルキル部分から選択される。【００６８】構造（Ｉ）の特定の実施形態において、Ｒ ₂およびＲ ₅は、独立して低級鎖アルキル部分（ＣＯＯＨまたはＣＯＯＲで置換される）から選択され、ここで、Ｒは、上記で定義された通りである。構造（Ｉ）の別の特定の実施形態において、Ｒ ₂およびＲ ₅は、Ｈ−およびＲＣ（Ｏ）ＮＨ−から独立して選択され、ここで、Ｒは、上記で定義された通りである。【００６９】構造（Ｉ）の別の特定の実施形態において、Ｒ ₃は、置換または非置換の低級鎖アリール部分および低級鎖アラルキル部分から選択される。【００７０】構造（Ｉ）の別の特定の実施形態において、Ｒ ₃は、置換または非置換の低級鎖アリール部分および低級鎖アラルキル部分（複素環を含む）から選択される。【００７１】本発明の逆ターン模倣物は、適切な出発成分分子（本明細書中の後で、「成分ピース」としていわれる）を利用することによって調製され得る。手短にいえば、構造（Ｉ'）を有する逆ターン模倣物の合成において、第１および第２の成分ピースは、結合されて結合第１−第２中間体を形成し、第３および第４の成分ピースは、結合されて結合第３−第４中間体を形成し（または、市販される場合、単一の第３中間体が使用され得る）、次いで、結合第１−第２中間体および第３ −第４中間体（または第３中間体）は、結合されて第１−第２−第３−第４中間体（または第１−第２−第３中間体）を提供し、これは、環化されて本発明の逆ターン模倣物を生じる。あるいは、構造（Ｉ'）の逆ターン模倣物は、溶液中で段階的にかまたは固相ペプチド合成において一般的に実行されるような固相合成のいずれかによって個々の成分ピースの連続カップリングによって調製され得る。【００７２】本発明の文脈において、「第１成分ピース」は、以下の構造１：【００７３】【化４１】を有し、ここで、Ｒ ₄およびＢは、上記で定義された通りであり、そしてＲは、ペプチド合成において使用するために適切な保護基である。適切なＲ基としては、アルキル基が挙げられ、そして好ましい実施形態において、Ｒは、メチル基である。このような第１成分ピースは、ＣＨ（ＯＲ） ₂ −（ＣＨ ₂ ）ｍ−ＣＨＯをＨ ₂ Ｎ−Ｒ ₄と結合させることによる還元アミノ化かまたはＣＨ（ＯＲ） ₂ −（ＣＨ ₂ ）ｍ−Ｂｒの置換によって容易に合成され得る。あるいは、Ｒ基の１つは、リンカーおよび樹脂であり得る。ポリスチレン樹脂（例えば、代表的にペプチド合成において使用されかつワングリンカー（４−ヒドロキシメチルフェノキシブチレート）を含む樹脂）は、適切である。【００７４】本発明の「第２成分ピース」は、以下の構造２：【００７５】【化４２】を有し、ここで、Ｒ ₃は、上記で定義された通りであり、Ｐは、ペプチド合成において使用するために適切なアミノ保護基であり、そしてＸは、活性化カルボン酸基の脱離基を表す。好ましい保護基としては、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ＢＯＣ、ＦＭＯＣ、およびＡｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）が挙げられる。Ｎ保護アミノ酸は、市販される。例えば、ＦＭＯＣアミノ酸は、種々の供給元から入手可能である。これらの化合物の本発明の第２成分ピースへの転換は、Ｎ保護アミノ酸のカルボン酸基の活性化によって容易に達成され得る。適切な活性化カルボン酸基としては、Ｘがクロリドまたはブロミドのようなハライドである酸ハライド、Ｘがアセチルのような酸性基である酸無水物、反応性エステル（例えば、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルおよびペンタフルオロフェニルエステル）、および他の活性化中間体（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）またはジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）のようなカルボジイミドを用いるカップリング反応で形成された活性中間体）が挙げられる。【００７６】第２成分ピースとして機能するアミノ酸のアジド誘導体の場合において、このような化合物は、Ｚａｌｏｏｍら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４６：５１７３−７６，１９８１）に開示される反応によって対応するアミノ酸から調製され得る。【００７７】本発明の「第３成分ピース」は、以下の構造３：【００７８】【化４３】を有し、ここで、Ｒ ₂およびＲ ₅は、上記で定義される通りであり、そしてＰは、カルボン酸保護基（例えば、メチル基またはｔ−ブチル基）である。【００７９】本発明の「第４成分ピース」は、以下の構造４：【００８０】【化４４】を有し、ここで、Ｒ ₁は、上記で定義される通りである。適切な第４の成分ピースは、種々の供給元から市販される。あるいは、第４の成分ピースは、１級アミンの合成のために一般的に利用される標準有機合成技術によって容易に調製され得る。【００８１】より詳細には、構造（Ｉ'）の本発明の逆ターン模倣物は、第１成分ピースを第２成分ピースと反応させて結合第１−第２中間体を提供し、続いて、結合第１ −第２中間体を第３および第４成分ピースと連続して反応させるかまたはこの中間体を結合第３−第４中間体と反応させて結合第１−第２−第３−第４中間体を提供し、次いで、この中間体を環化して逆ターン模倣物をもたらすことによって、合成される。【００８２】構造Ｉ'を有する逆ターン模倣物の一般的合成は、以下の技術によって合成され得る。第１成分ピース１は、第２成分ピース２に結合されて、Ｎ脱保護の後、以下に図示されるように結合第１−第２中間体１−２をもたらす：【００８３】【化４５】逆ターン模倣物の合成は、収束性であり得、この場合において、結合第３−第４中間体３−４は、第４成分ピース４との第３成分ピース３のカップリングから調製され、Ｏ脱保護の後、以下に図示されるように結合第３−第４中間体３−４を生じる：【００８４】【化４６】上記の構造（Ｉ）のｎが１または２である場合、以下の構造３−４'の中間体：【００８５】【化４７】が以下の通りに作製され得、ここで、Ａは−（ＣＨＲ'） _n −である。次いで、中間体３−４'は、以下の反応において中間体３−４の代わりに用いられて、構造（Ｉ'）を有する本発明の逆ターン模倣物を生じ得る。あるいは、上記の構造（Ｉ）のｎが１、２または３である場合、３−４'は、以下の通りにアクリル化またはスルホニル化され、次いでＯ脱保護される、β−アミノ酸誘導体、γ−アミノ酸誘導体またはδ−アミノ酸誘導体から作製され得る：【００８６】【化４８】結合中間体１−２と３−４とのカップリングは、中間体１−２−３−４を提供し、これは、環化によって、逆ターン模倣物（Ｉ'）を以下に例示されるように生じる：【００８７】【化４９】本発明の代表的な成分断片の合成は、実施例１に記載される。代表的な結合した第１の中間体−第２の中間体および第３の中間体−第４の中間体の合成は、それぞれ、実施例２および３に記載される。代表的な結合した第１の中間体−第２の中間体−第３の中間体−第４の中間体を形成する、これらの中間体のカップリングは、実施例４に記載にされる。代表的な逆ターン模倣物を形成するこの中間体の環化は、実施例５に記載される。【００８８】好ましい実施形態では、構造（Ｉａ'）の逆ターン模倣物は、図２に記載される反応スキームに従って溶液中で作製され得る。別の好ましい実施形態では、構造（Ｉａ'）の逆ターン模倣物は、図８に示され、そして実施例８に記載される反応スキームに従って固相上で作製され得る。より好ましい実施形態では、構造（Ｉａ'）の逆ターン模倣物は、図９に示され、そして実施例１０に記載される反応スキームに従って固相上で作製され得る。【００８９】構造（Ｉ”）〜（Ｉ”””）の逆ターン模倣物は、上記に開示されるモジュラー成分の合成に類似の技術によって、しかし、この成分断片に適切な改変を行って作製され得る。より詳細には、構造（Ｉ”）〜（Ｉ”””）の逆ターン（ｒｅｖｅｒｓｅ−ｔｕｒｍ）模倣物は、図３〜７に示される反応スキームによって作製され得る。詳細には、構造（Ｉｂ”）、（Ｉａ”'）、（Ｉａ””）、（Ｉａ ””'）および（Ｉｂ”””）の逆ターン模倣物は、それぞれ、図３、４、５、６および７に示される代表的な反応スキームによって作製され得る。【００９０】本発明の別の局面では、本発明の逆ターン模倣物を含むライブラリーが開示される。一旦組み立てられると、本発明のライブラリーをスクリーニングして、生物活性を有する個々のメンバーを同定し得る。生物活性メンバーについてのライブラリーのこのようなスクリーニングは、例えば、ライブラリーのメンバーの結合活性を評価することまたは機能アッセイに対してライブラリーのメンバーが有する効果を評価することを含み得る。スクリーニングは通常、ライブラリーのメンバー（またはライブラリーのメンバーのサブセット）を、目的の標的（例えば、抗体、酵素、レセプターまたは細胞株など）と接触させることによって達成される。目的の標的と相互作用し得る、ライブラリーのメンバーは、本明細書中で、「生物活性なライブラリーのメンバー」または「生物活性な模倣物」と呼ばれる。例えば、生物活性模倣物は、抗体もしくはレセプターに結合し得るか、酵素を阻害し得るか、または例えば、細胞株と関連する機能的応答を惹起もしくは拮抗し得る、ライブラリーのメンバーであり得る。言い換えると、本発明のライブラリーのスクリーニングは、どのライブラリーのメンバーが目的の１以上の生物学的標的と相互作用し得るかを決定する。さらに、相互作用が生じた場合、生物活性模倣物は、ライブラリーのメンバーから同定され得る。ライブラリーからの単一の（または制限された数の）生物活性模倣物の同定は、それ自体が生物学的に活性であって、従って、診断剤、予防剤または治療剤として有用であり、そしてこれらの分野におけるリード化合物の同定を顕著に前進させるためにさらに用いられ得る、逆ターン模倣物を生じる。【００９１】本発明のライブラリーのペプチド模倣物の合成は、公知のペプチド合成技術を、本発明の第１の成分断片、第２の成分断片および第３の成分断片と組み合わせて用いて達成され得る。より詳細には、任意のアミノ酸配列は、コンホメーションが制限された逆ターン模倣物のＲ ₁部分、Ｒ ₂部分、Ｒ ₃部分、Ｒ ₄部分またはＲ ₅部分のいずれかとして付加され得る。好ましくは、アミノ酸配列は、Ｒ ₁部分またはＲ ₄部分として付加され得る。これを達成するために、模倣物は、公知の技術（例えば、ＪｏｈｎＭ．ＳｔｅｗａｒｔおよびＪａｎｉｓＤ．Ｙｏｕｎｇ，ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９８４，ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ；Ａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．，Ｓｈｅｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ；ＩＲＬ：Ｏｘｆｏｒｄ，１９８９を参照のこと）によって固体支持体（例えば、４−ヒドロキシメチルフェノキシブチレートをリンカーとして利用したポリスチレン）上で合成され得るか、またはアルコール結合によってシリル連結樹脂上で合成され得る（Ｒａｎｄｏｌｐｈら，Ｊ．ＡｍＣｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１７：５７１２−１４，１９９５を参照のこと）。【００９２】さらに、溶液合成技術および固相合成技術の両方の組み合わせを利用して、本発明のペプチド模倣物を合成し得る。例えば、固体支持体を利用して、直鎖状ペプチド配列を、コンホメーションが制限された逆ターンがこの配列に付加される点まで合成し得る。次いで、溶液合成技術によって以前に合成された適切なコンホメーションが制限された逆ターン模倣物は、次の「アミノ酸」として固相合成に添加され得る（すなわち、少なくとも２つの反応部位を有するコンホメーションが制限された逆ターン模倣物を、直鎖状ペプチドに対して付加されるべき次の残基として利用し得る）。コンホメーションが制限された逆ターン模倣物の、この配列への取り込みの際に、次いで、さらなるアミノ酸が付加されて、固体支持体に結合されたペプチドを完成し得る。あるいは、直鎖状Ｎ末端保護ペプチド配列および直鎖状Ｃ末端保護ペプチド配列は、固体支持体上で合成され得、支持体から除去され得、次いで公知の溶液カップリング技術を用いて溶液中のコンホメーションが制限された逆ターン模倣物にカップリングされ得る。【００９３】本発明の別の局面では、ライブラリーを構築するための方法が開示される。伝統的な組み合わせ化学および並行合成技術（例えば、ＴｈｅＣｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌＩｎｄｅｘＢｕｎｉｎ，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９８；Ｇａｌｌｏｐら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７：１２３３−１２５１，１９９４を参照のこと）は、基本的分子骨格への試薬の逐次の組み合わせによって非常に多数の化合物が迅速に調製されることを可能にする。例えば、上記の開示された合成は、Ｎｉｃｏｌａｏｕおよび協同実験者（Ｎｉｃｏｌａｏｕ，Ｘｉａｏら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．３４：２２８９ −２２９１，１９９５）の特異的（ｄｉｒｅｃｔｅｄ）選別技術を用いて実施され得る。現在、この技術についての装置は、ＩＲＯＲＩ（ＬａＪｏｌｌａ，ＣＡ）から市販される。あるいは、上記で開示された合成は、４８ウェルプレート形式または９８ウェルプレート形式を用いた並行合成によって実施され得、ここで、各ウェルは、溶媒および試薬を排出するためのフリット化出口を含む（ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＧｕｉｄｅｔｏＣｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｚａｒｎｉｋおよびＤｅＷｉｔｔ編、ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，１９９７）。Ｒｏｂｂｉｎｓ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）、Ｃｈａｒｙｂｄｉｓ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）およびＢｏｈｄａｎ（Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）は現在、この技術のために適切な装置を提供する。【００９４】本発明のさらなる局面では、ライブラリーを生物活性についてスクリーニングするためおよび生物活性なライブラリーのメンバーを単離するための方法が開示される。本発明のライブラリーは、種々の技術および方法によって生物活性についてスクリーニングされ得る。一般に、スクリーニングアッセイは、以下によって行われ得る：（１）ライブラリーを目的の生物学的標的（例えば、レセプター）と接触させて、ライブラリーの模倣物と標的との間で結合を生じさせる工程、ならびに（２）適切なアッセイによって（例えば、Ｌａｍら（Ｎａｔｕｒｅ３５４：８２−８４，１９９１）またはＧｒｉｍｉｎｓｋｉら（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１２：１００８−１０１１，１９９４）によって開示される比色アッセイによって）結合事象を検出する工程。好ましい実施形態では、ライブラリーのメンバーは、溶液中に存在し、そして標的は、固相上に固定される。あるいは、ライブラリーは、固相上に固定され得、そして溶液中でこれを標的と接触させることによってプローブされ得る。【００９５】上記のように、本発明の逆ターン模倣物は、生物活性剤（例えば、診断剤、予防剤および治療剤）として有用である。代表的な逆ターン模倣物のオピエートレセプター結合活性を実施例９に提示する。この実施例では、本発明の逆ターン模倣物は、放射標識エンケファリン誘導体の、δオピエートレセプターおよびμオピエートレセプターへの結合を効果的に阻害することが見出された。このデータは、これらの逆ターン模倣物の、レセプターアンタゴニストおよび潜在的鎮痛剤としての有用性を実証する。さらなる実施形態では、代表的な逆ターン模倣物のインテグリン結合活性を実施例１１に提示する。この実施例では、逆ターン模倣物は、ＣＳ１ペプチドをＲａｍｏｓ細胞から効果的に置換することが見出された。従って、このデータは、逆ターン模倣物がα ₄ β ₁インテグリンを拮抗する能力、および潜在的な抗炎症剤として作用する能力を示す。【００９６】別の局面では、本発明は、貯蔵または投与のために調製された薬学的組成物を包含し、この組成物は、治療有効量の本発明の化合物を、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤と組み合わせて含む。細胞接着のインヒビターを用いた治療は、種々の炎症状態（特に、慢性関節リウマチ、炎症性腸疾患および喘息）の処置および予防のために示される。この分野における経験者は、抗炎症治療を必要とする状況を容易に認識する。さらに、細胞接着のインヒビターを用いた治療は、過剰のインテグリン媒介細胞接着が寄与因子である任意の状態（例えば、アテローム性動脈硬化症など）について示される。【００９７】本発明の化合物の「治療有効量」は、投与の経路、処置される温血動物の型、および考慮されている特定の動物の身体的特徴に依存する。この量を決定するためのこれらの因子およびそれらの関係は、医学分野の当業者に周知である。この量および投与の方法は、最適な効力を達成するように調整され得るが、体重、食餌、同時の薬物適用および医学分野の当業者が認識すると記されるような他の因子のような因子に依存する。【００９８】本発明の化合物の「治療有効量」は、所望の影響（ａｆｆｅｃｔ）および治療指標に依存して広範にわたり得る。代表的に、投薬量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１００ｍｇ／ｋｇ体重との間であり、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１０ｍｇ／ｋｇ体重との間である。【００９９】希釈剤を含む、治療的使用のための「薬学的に受容可能なキャリア」は、薬学の分野で周知であり、そして例えば、ＲｅｍｉｎｇｔｏｎｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．（Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５）に記載される。例えば、生理学的ｐＨの、滅菌生理食塩水およびリン酸緩衝化生理食塩水が用いられ得る。保存剤、安定剤、色素およびさらに矯味矯臭剤は、薬学的組成物中に提供され得る。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸およびｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが保存剤として添加され得る。さらに、抗酸化剤および懸濁剤が用いられ得る。【０１００】本発明の化合物は、過剰のインテグリン媒介細胞接着が寄与因子である、任意の状態の予防および処置のために有用である。特に、本発明の化合物は、炎症および関連する状態の予防および処置のための薬剤として有用である。本発明の方法の実施において、治療有効量の本発明の化合物を含む組成物は、それが必要である温血動物に投与される。例えば、本発明の化合物は、慢性関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、ＡＩＤＳ痴呆、ＡＲＤＳ、喘息、アレルギー、炎症性腸疾患、ＣＮＳ炎症、アトピー性皮膚炎、Ｉ型糖尿病、脳炎、心筋虚血、多発性硬化症、髄膜炎、腎炎、再狭窄、網膜炎、乾癬、発作および腫瘍転移から選択される状態を発達していると診断されたかまたはその危険性がある温血動物に投与され得る。【０１０１】多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系の進行性に消耗性の自己免疫疾患である。現在、免疫応答を誘因する正確な抗原はわかっていない。しかし、マクロファージは、脳における神経線維を取り囲む脂肪性ミエリン鞘を攻撃し、破壊を開始するようである。ＭＳの動物モデルにおいて（実験的なアレルギー性脳脊髄炎）、α ₄ β ₁に対するマウスモノクローナル抗体は、内皮への白血球の接着をブロックし、そして中枢神経系の炎症および引き続く動物の麻痺を防止した（Ｙｅｄｎｏｃｋ，Ｃａｎｎｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ３５６：６３−６，１９９２）。【０１０２】本発明の化合物は、単独で、２つ以上の化合物の組合わせて、または炎症の他の公知のインヒビターとの組合わせて、使用され得る。例えば、本発明の化合物は、副腎皮質ステロイド、非ステロイド性抗炎症性剤、ＣＯＸ−２インヒビター、マトリックスメタロプロテアーゼインヒビターまたはリポキシゲナーゼインヒビターと共に治療的に使用され得る。本発明の化合物は、錠剤、カプセル剤（これらの各々は徐放性または時限放出性の処方物を含む）、丸剤、粉末剤、顆粒、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁剤、シロップ剤、および乳剤のような経口形態で投与され得る。同様に、これらは、静脈内（ボーラスまたは注入）、腹腔内、皮下、鼻腔内、直腸内または筋肉内の形態で投与され得、これらは全て薬学的分野における当業者に周知の形態を使用する。これらの化合物は、眼内または局所的に、ならびに経口または非経口的に投与され得る。【０１０３】本発明の化合物は、吸入によって投与され得、従って加圧パックまたは噴霧器からエアロゾルスプレーの形態で送達され得る。これらの化合物はまた、処方され得る粉末として送達され得、そしてこの粉末組成物は、吸入粉末吸入デバイスの助けを伴って吸入され得る。吸入のための好ましい送達システムは、計測用量の吸入エアロゾルであり、これは適切な噴霧剤（例えば、フルオロカーボンまたは炭化水素）中の本発明の化合物の懸濁液または溶液として処方され得る。別の好ましい送達システムは、乾燥粉末吸入エアロゾルであり、これはさらなる賦形剤を伴ってかまたは伴わずに、本発明の化合物の乾燥粉末として処方され得る。【０１０４】本発明の化合物は、蓄積注射または移植調製物の形態で投与され得、これは活性成分の徐放を可能にするような様式で処方され得る。この活性成分は、ペレットまたは小さな円柱に圧縮され得、そして蓄積注射またはインプラントとして皮下または筋肉内に移植され得る。インプラントは、生分解性ポリマーまたは合成シリコーン（例えば、シラスチック、シリコーンゴムまたはＤｏｗ−ＣｏｒｎｉｎｇＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって製造される他のポリマー）のような不活性材料を使用し得る。【０１０５】本発明の化合物はまた、リポソーム送達システム（例えば、小さな単層ビヒクル、大きな単層ビヒクルおよび多層ビヒクル）の形態で投与され得る。リポソームは、種々のリン脂質（例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン）から形成され得る。【０１０６】本発明の化合物はまた、化合物分子が結合される個別のキャリアとしてのモノクローナル抗体の使用によって送達され得る。インテグリンインヒビターはまた、標的化可能な薬物キャリアとして溶解性ポリマーに結合され得る。このようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン（ｐｏｌｙｖｉｎｌｙｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルタルニド（ａｓｐａｒｔａｒｎｉｄｅ）−フェノール、またはパルミトイル残基で置換したポリエチレンオキシド−ポリリジンが挙げられ得る。さらに、インテグリンインヒビターは、薬物の制御放出の達成において有用な生分解性ポリマーのクラス（例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸およびポリグリコール酸のコポリマー、ポリエプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋コポリマーまたは両親媒性ブロックコポリマー）に結合され得る。【０１０７】投与の用量および方法は、最適な効力を達成するために調整され得るが、これは、体重、食品、併用薬剤のような要因および医療分野の当業者が認識する他の要因に依存する。投与が非経口的（例えば、日ベースで静脈内）である場合、注入可能な薬学的組成物は、液体溶液もしくは懸濁液、注入の前の液体中の溶液または懸濁液に適切な固体形態、またはエマルジョンのいずれかで、従来の形態で調製され得る。【０１０８】本発明の活性化合物の経口投与に適切な錠剤は、以下のようにして調製され得る：【０１０９】【表２】活性化合物、セルロース、およびコーンスターチの一部は全て混合され、そして１０％コーンスターチペーストに顆粒化される。得られた顆粒を篩にかけ、乾燥し、そして残りのコーンスターチおよびステアリン酸マグネシウムと混合する。次いで、得られた顆粒は、錠剤当たりそれぞれ２５．０、５０．０、および１００．０ｍｇの活性成分を含む錠剤に圧縮される。【０１１０】上記の活性化合物の静脈内剤形は、以下のようにして調製され得る：【０１１１】【表３】上記の量を用いて、活性化合物は、注入のための水（ＵＳＰ、ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａＣｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ，ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ１９９４により刊行のＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ／ＮａｔｉｏｎａｌＦｏｒｍｕｌａｒｙｆｏｒ１９９５、１６３６頁を参照のこと）中の塩化ナトリウム、クエン酸、およびクエン酸ナトリウムの予め調製した溶液に、室温で溶解される。【０１１２】以下の実施例は、例示の目的で提供され、限定の目的ではない。【０１１３】（実施例）（実施例１）（成分片の合成）本実施例において、本発明の逆向ターン模倣物（ｒｅｖｅｒｓｅ−ｔｕｒｎｍｉｍｅｔｉｃｓ）を形成するために結合され得る代表的な成分片の合成が開示される。【０１１４】（Ａ．代表的な第１成分片）以下の構造１を有する第１成分片を使用した：【０１１５】【化５０】ここで、Ｒ ₄は上記で規定した通りであり、そしてＲはペプチド合成における使用に適切な保護基を表す。適切なＲ基としては、アルキル基が挙げられ、そして好ましい実施形態において、Ｒはメチル基である。【０１１６】一般に、第１成分片を、２−ハロエタナールのジアルキルアセタールでのアミンのＮ−アルキル化によって調製する。代表的な第１成分片の、フェネチルアミンおよび２−ブロモエタナールのジメチルアセタールからの合成を、以下に模式的に示す。【０１１７】【化５１】この手順において、２４ｍｌ（３．４３ｍｌ，２０．３ｍｍｏｌ）のブロミドおよび２．８ｍｌ（２．７１ｇ，２２．３ｍｍｏｌ）のフェネチルアミンを、還流冷却器を備えた１５０ｍｌのアルゴン充填丸底フラスコ中の４０ｍｌの新鮮な蒸留ＴＨＦに添加した。この反応物を加熱して２４時間穏やかに還流させ、次いで揮発物を減圧下で除去し、そして残渣を２００ｍｌのジクロロメタンに溶解した。この有機層を２×１００ｍｌの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥した。揮発物を減圧下で除去し、そして残渣を３時間高真空下で乾燥して、３．５ｇ（８３％）の第１成分片１ａ（ｍ＝１）を淡褐色油状物として得、これをさらなる精製なしで使用した。【０１１８】（Ｂ．代表的な第２成分片）本発明の代表的な第２成分片は、活性化カルボン酸基を有する反応性Ｎ−保護アミノ酸、またはアミノ酸のアジド誘導体であり、これらは以下の構造２で表される：【０１１９】【化５２】ここで、Ｒ ₃は上記で規定した通りであり、Ｐはペプチド合成における使用に適切なアミノ保護基であり、そしてＸは活性化カルボン酸基の脱離基を表す。好ましい保護基としては、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ＢＯＣ、ＦＭＯＣ、およびＡｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）が挙げられる。Ｎ−保護アミノ酸は、市販されている。例えば、ＦＭＯＣアミノ酸は、種々の供給業者から市販されている。これらの化合物の、本発明の第２成分片への転換は、Ｎ−保護アミノ酸のカルボン酸基の活性化によって容易に達成され得る。適切な活性化カルボン酸基としては、酸ハロゲン化物（ここでＸはクロリドまたはブロミドのようなハライドである）、酸無水物（ここでＸはアセチルのようなアシル基である）、反応性エステル（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルおよびｐ −ニトロフェニルエステル）、および他の活性化中間体（例えば、カルボジイミド（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ））を用いるカップリング反応において形成される活性中間体）が挙げられる。同様に、対応するアジド誘導体は、公知の技術によって調製され得る。好ましい実施形態において、Ｘは、ＨＡＴＵ（０−（７−アザベンゾトリアゾール（ａｚａｂｅｎｚｏｔｒｉａｏｌ）−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）カップリングのためのヒドロキシルであるか、またはケイ素媒介カップリングのためのフッ素である。【０１２０】（Ｃ．代表的な第３成分片）本発明の代表的な第３の成分片は、以下の構造３を有するα，β−不飽和カルボン酸またはその誘導体である：【０１２１】【化５３】ここで、Ｒ ₂およびＲ ₅は、上記で規定した通りであり、そしてＰは、メチル基またはｔ−ブチル基のようなカルボン酸保護基である。このような第３成分片は、商業的に入手し得るか、または以下の反応スキームに従って市販のアルデヒドおよび適切なリンイリドから合成し得る：【０１２２】【化５４】（ＷａｄｓｗｏｒｔｈおよびＥｍｍｏｎｓ，Ｏｒｇ．Ｓｙｎ．４５：４４，１９６５を参照のこと）。【０１２３】（Ｄ．代表的な第４成分片）本発明の代表的な第４成分片は、以下の構造４を有する第一級アミンである：Ｒ ₁ −ＮＨ ₂ここでＲ ₁は上記で定義された通りである。適切な第４成分部分は、種々の供給源から市販されている。あるいは、第４成分部分は、一級アミンの合成に一般的に利用される標準的な有機合成技術により容易に調製され得る。【０１２４】（実施例２）（連結第１−第２中間体：第１成分部分および第２成分部分のカップリング）本発明の逆ターン模倣物を生成するための成分部分のカップリングは、一般的にアミド結合の形成を含む。これらの部分を連結するアミド結合は、標準的な合成ペプチド技術により形成され得、そして液相合成かまたは固相合成のいずれかにより行われ得る。【０１２５】第１成分部分および第２成分部分のカップリングは、脱保護の後、以下の構造１−２：【０１２６】【化５５】を有する連結第１−第２中間体を生じ、ここでＲ、Ｒ ₃ 、およびＲ ₄は、上記で記載される通りである（この実施例において、構造（Ｉ'）のＲ''（単数または複数）は、水素である）。【０１２７】連結第１−第２中間体の調製は、第１成分部分１のアミンと第２成分部分２の活性化カルボン酸基との間のアミド結合形成、それに続くＮ−脱保護により達成される。代表的な連結第１−第２中間体の合成を、以下に模式的に示す。【０１２８】【化５６】この手順において、アルゴンを充填した２５ｍｌ丸底フラスコ中の、実施例１Ａに記載されるように調製された６５０ｍｇ（３．１７ｍｍｏｌ）の第１成分部分（１ａ）、１ｇ（３．１７ｍｍｏｌ）のＦＭＯＣ−グリシンクロリド（２ａ）、１０ｍｌの新鮮な蒸留ベンゼンに、９３７ｍｇ（７ｍｍｏｌ）のシアン化銀（ＡｇＣＮ）を加え、この生じた反応混合物を４８時間激しく攪拌した。この反応系を２５ｍｌのｗ／酢酸エチルで希釈し、そしてセライトプラグを通して濾過した。揮発性物質を減圧下で除去し、そして残渣を移動相として２０：８０酢酸エチル：ヘキサンを使用してフラッシュグレードのシリカゲルでクロマトグラフィーにかけて、１．１ｇ（７１％）の非晶質固体を得た。【０１２９】５ｍｌのアセトニトリル中の４００ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）の非晶質固体に、１ｍｌのジエチルアミン（ＤＥＡ）を滴下し、そして生じた反応混合物を室温で２時間攪拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣を、移動相としてアンモニア飽和メタノール（５％）、ジクロロメタン（９５％）を使用してフラッシュグレードのシリカゲルでクロマトグラフィーにかけて、２０７ｍｇ（９５％）の連結第１−第２中間体（１−２ａ）を粘稠無色油状物として得た。【０１３０】（実施例３）（連結第３−第４中間体：第３成分部分および第４成分部分のカップリング）第３成分部分の第４成分部分とのカップリングは、連結第３−第４中間体を提供する。連結第３−第４成分部分を、第４成分部分４のアミン基の、第３成分部分３のα，β−不飽和カルボニル基への共役付加から生じるアミン結合形成により生成する。【０１３１】第３成分部分および第４成分部分のカップリングは、脱保護の後に、以下の構造３−４：【０１３２】【化５７】を有する連結第３−第４中間体を提供し、ここでＲ ₁ 、Ｒ ₂ 、およびＲ ₅は、上記の通りである（この実施例において、構造（Ｉ'）のｎは、Ｏである）。【０１３３】連結第３−第４中間体の調製は、第４成分部分４の一級アミノ基と第３成分部分３のα，β−不飽和カルボニル基との間のアミン結合形成、それに続くＯ脱保護により達成される。代表的な連結第３−第４中間体の合成を、以下に模式的に示す。【０１３４】【化５８】この手順において、アルゴンを充填した２５０ｍｌの丸底フラスコ中の、４０ｍｌの新鮮な蒸留テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に懸濁した５ｇのチラミンに、この懸濁液を溶解するのに充分なメタノールを加えた。生じた溶液に、５．３ｍｌ（４．６７ｇ、３６．４ｍｍｏｌ）のアクリル酸ｔ−ブチルを５分間かけて滴下し、そして生じた反応混合物を一晩室温で攪拌した。残った出発物質を消費するためにさらに２ｍｌのアクリル酸ｔ−ブチルを加え、そしてこの反応系をさらに４時間攪拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、そして残渣を、移動相として９５：５ジクロロメタン：アンモニア飽和メタノール：ＮＨ ₃ ／ＭｅＯＨを使用してフラッシュグレードのシリカゲルでクロマトグラフィーにかけて６．６ｇ（６８％）のエステル（無色油状物、これは一晩冷凍した際に固化した）を得た。１グラム（３．７７ｍｍｏｌ）のエステルのジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に、０℃で８０ｍｌの冷トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加え、生じた反応混合物を室温まで昇温させながら２４時間にわたって攪拌した。揮発性物質を減圧下で除去して、９５０ｍｇの透明な油状物を得た。最後の生成物を９５：５ジクロロメタン：メタノールに溶解し、そしてゆっくりと中性アルミナのパッドを通して濾過した。揮発性物質を濾液から除去して７５０ｍｇの３−４ａを非晶質固体として得た。【０１３５】（実施例４）（連結第１−第２−第３−第４中間体：連結第１−第２中間体および連結第３ −第４中間体のカップリング）連結第１−第２中間体の連結第３−第４中間体とのカップリングは、連結第１ −第２−第３−第４中間体を提供する。連結第１−第２−第３−第４中間体を、連結第１−第２中間体１−２のアミン基の、連結第３−第４中間体３−４のカルボン酸基へのカップリングにより生じるアミド結合形成により生成する。連結第１−第２−第３−第４中間体は、以下の構造１−２−３−４：【０１３６】【化５９】を有し、ここでＲ、Ｒ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、上記の通りである。【０１３７】代表的な連結第１−第２−第３−第４中間体の合成を、以下に模式的に示す。【０１３８】【化６０】この手順において、２１２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）の３−４ａ、２７０ｍｇ（１．０１ｍｍｏｌ）の１−２ａ、および１３６ｍｇ（１．０１ｍｍｏｌ）の１− ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ）を１０ｍｌのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、そして０℃に冷却した。この溶液に、２９０ｍｇ（１．５２ｍｍｏｌ、１．５当量）の１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３− エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）を加え、そして生じた反応混合物を攪拌し、２４時間かけて室温まで昇温させた。ＤＭＦを減圧下で除去し、そして残渣を２００ｍｌの酢酸エチルに再溶解した。酢酸エチル層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水で洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥した。揮発性物質を減圧下で除去し、そして残渣を溶離液として９５：５ジクロロメタン：アンモニア飽和メタノールを使用してフラッシュグレードのシリカゲルでクロマトグラフィーにかけて、３１０ｍｇ（０．６８ｍｍ６７％）の１−２−３−４ａを粘稠無色油状物として得た。【０１３９】（実施例５）（代表的な逆ターン模倣物の合成：連結第１−第２−第３―第４中間体の環化）連結第１−第２−第３―第４中間体の環化は、本発明の逆ターン模倣物を提供する。連結第１−第２−第３―第４中間体１−２−３−４を、カンファースルホン酸（ＣＳＡ）か、または好ましい実施形態においては、ＴＭＳＯＴＦ（０℃で）での処理によって環化して、以下の構造（Ｉａ）：【０１４０】【化６１】を有する逆ターン模倣物を与えた。ここでＲ ₁ 、Ｒ ₂ 、Ｒ ₃ 、Ｒ ₄およびＲ ₅は、上記の通りである。【０１４１】本発明の代表的な逆ターン模倣物の合成を以下に模式的に示す。【０１４２】【化６２】この手順において、０．５ｇ（２．４ｍｍｏｌ）のカンファースルホン酸（ＣＳＡ）を３〜１５ｍｌずつの新鮮な蒸留トルエンと共沸させ、そして還流冷却器を備えた１００ｍｌ丸底フラスコ中で減圧下４０℃にて３時間乾燥した。次いで２０ｍｌの新鮮な蒸留トルエンを加え、そしてＣＳＡ溶液を激しく還流するまで加熱した。この還流ＣＳＡ溶液に、５０ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）１−２−３− ４ａの新鮮な蒸留トルエン（２０ｍｌ）溶液を、シリンジポンプで１時間かけて加えた。生じた反応混合物を１２時間還流させ、室温まで冷却し、そして２００ｍｌの酢酸エチルに希釈した。有機層を２〜７５ｍｌずつの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、７５ｍｌの飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥した。揮発性物質を減圧下で除去して、２２ｍｇのＩａをガラス状固形物として得た。粗生成物を５０／５０ジイソプロピルエーテル：ヘキサンで倍散して非極性不純物を除去した。次いでこの固体をジクロロメタンに溶解し、そして極性不純物を除去するために濾過した。エバポレーションした際の残渣を減圧下で２４時間乾燥した。【０１４３】（実施例６）（代表的な逆ターン模倣物塩の合成）本発明の逆ターン模倣物は、窒素ベースであり、従って、種々酸での処理によってそれらの対応する塩に変換され得る。この実施例において、逆ターン模倣物の代表的な塩の調製を記載する。【０１４４】実施例５において記載されるように調製された、逆ターン模倣物Ｉａの２，４ −ジニトロ安息香酸塩を、水性メタノール中でこの酸を用いてこの逆ターン模倣物を処理することによって得た。この手順において、５ｍｇ（１２．７μｍｏｌ）Ｉａを、３ｍｌの８０／２０のメタノール：水に溶解し、そして０℃に冷却した。この溶液に、２．７０ｍｇ（１２．７μｍｏｌ、１．０当量）の２，４−ジニトロ安息香酸を加え、そして得られた溶液を、均一になるまで攪拌した。揮発物を減圧下で除去し、そして残渣を真空下で２４時間乾燥した。残渣を温水に溶解し、そして濾過して不溶性の不純物を除いた。次いで、溶液を凍結乾燥し塩５を得た。【０１４５】（実施例７）（代表的な逆ターン模倣物の合成）この実施例は、本発明のさらなる代表的な逆ターン模倣物の合成を例示する。【０１４６】（構造（６）の合成：）【０１４７】【化６３】ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＮ−ベンジルグリシンエチルエステル（１．９３ｇ、１０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（１．９ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、続いてＨＯＢｔ（１．６２ｇ、１２ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ）を室温（「ｒｔ」）で加えた。得られた溶液を、室温で５時間（「ｈ」）攪拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した後に、この溶液を１ＮＨＣｌ（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ ₃ （５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した；これを乾燥（ＭｇＳＯ ₄ ）し、ＳｉＯ ₂の短いパッドを通過させ、そして濃縮して定量的収率で油状物を得た。ＴＬＣは、この生成物がさらなる精製なしに次の反応で使用するのに十分純粋であることを示した。【０１４８】【数１】（構造（７）の合成）【０１４９】【化６４】ＴＨＦ／Ｈ ₂ Ｏ（５０／５０ｍＬ）中の３．８ｇの粗エチルエステル（６）の攪拌溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ ₂ Ｏ（１ｇ）を室温で加えた。３０分間室温で攪拌した後、この溶液をＥｔ ₂ Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄し、そして水相を６ＮＨＣｌ（ｐＨ２）で酸性化し、そしてＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ ₄ ）し、ＳｉＯ ₂の短いパッドを通し、そして濃縮して定量的収率で泡状物を得た。この生成物をさらなる精製なしに次の工程に使用した。【０１５０】【数２】（構造（８）の合成：）【０１５１】【化６５】ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の３．４ｇの酸（７）およびシアノメチレントリフェニルホスホラン（４．１ｇ、１２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、連続的にＤＩＥＡ（５ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２５０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（２．９ｇ、１５ｍｍｏｌ）を室温で加えた。１２時間攪拌後、この溶液を濃縮し、そして得られた残渣を１ＮＨＣｌ（１００ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ ₃ （１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ ₄ ）し、ＳｉＯ ₂の短いパッドを通して、そして濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝５０：５０から３０：７０から２０：８０）によって精製して泡状の固体（４．４０ｇ、７１％）を得た。【０１５２】【数３】（構造（９）の合成）【０１５３】【化６６】ジクロロメタン（５ｍＬ）中のホスホラン（８）（３１０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、溶液が青緑になるまで−７８℃で１５分間、Ｏ ₃をバブリングした；ＴＬＣは、開始化合物の完全な消費を示した。この溶液から過剰のオゾンを除去するために、Ａｒをバブリングした後、Ｎ−ベンジルグリシンエチルエステル（１００ｍＬ）を加え、そしてこの溶液を−７８℃で３０分間攪拌した。濃縮後、残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解し、１ＮＨＣｌ（２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ ₃ （２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ ₄ ）し、そして再び濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９０：１０から８０：２０から７０：３０から６０：４０）によって精製して油状物（１０５ｍｇ、３９％）を得た。【０１５４】【数４】（構造（１０）の合成）【０１５５】【化６７】０．５ｍＬのジクロロメタン中の１００ｍｇのケトアミド（９）（０．１８ｍｍｏｌ）の溶液を、３０分間室温で０．５ｍＬのＴＦＡで処理した。濃縮後、残渣をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、室温で一晩（１３時間）、ＺｎＣｌ ₂ （６ｍｇ）およびＮａＢＨ ₃ ＣＮ（１５ｍｇ）で処理した。濃縮後、残渣を飽和ＮａＨＣＯ ₃ （２０ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ ₄ ）し、濃縮して油状物とし、分取用ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡＣ＝６０：４０）で精製してガラス状の固体（５２ｍｇ、７７％）を得た。（エナミンは、この方法によって還元に対して耐性があることが示された）。【０１５６】【数５】（構造（１１）の合成：）【０１５７】【化６８】ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中のＰｔＯ ₂ （５ｍｇ）をともなう２５ｍｇの構造（１０）（０．０６６ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｈ ₂雰囲気（２０ａｔｍ）下で１０日間攪拌した。濃縮後、残渣を分取用ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝６０：４０から５０：５０）によって精製して、淡黄色の油状物（１４ｍｇ、５６％）を開始物質（１０ｍｇ）とともに得た。【０１５８】【数６】（実施例８）（代表的な逆ターン模倣物の合成）本実施例はさらに、本発明の逆ターン模倣物の合成を例示する。詳細には、［４．４．０］二環式逆ターン模倣物の調製を、溶液相（方法Ａ）および固相（方法ＢおよびＣ）で行った。代表的な模倣物の構造を表２に与える。これらの逆ターン模倣物の固相合成は、このようなメンバーを含むライブラリーが容易に調製され得ることを示す。【０１５９】方法Ａの溶液相合成は、方法Ｂの固相合成と類似しており、基本的に図２に示されるように実行された。この化合物を以下の方法Ｃにおけるように精製した。【０１６０】方法Ｂの固相合成は、図８に例示される。図を参照して、市販のアミノメチル樹脂を、ＤＭＦ中の過剰の４−ブロモ−２−ブテン酸およびＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）と反応させて、４−ブロモ−２−ブテンアミド樹脂を得た。ＤＭＳＯ中でブロモ基を第１級アミンに置換して、対応する４−アルキルアミノ−２−ブテンアミド樹脂を得た。固相での標準的なペプチドカップリング手順を実施して、Ｎ−アルキルオキシカルボニル−α−アルキル−β−アラニル−α −アルキルグリシル−Ｎ'−アルキルアミノ−２−ブテンアミド樹脂を得た。逆ターン模倣物を、樹脂の四酸化オスミウム触媒過ヨウ素酸酸化し、続いてジクロロメタン中で触媒量のＴＦＡで、得られた単環式生成物を処理することによって得た。粗生成物は、逆相ＨＰＬＣ分析によって単一の主要なピークを与えた。【０１６１】方法Ｃの固相合成は、方法Ｂと同様であり、実施例１１に与えられ、そして図９に例示される。選択された化合物を、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨの適切な組み合わせを使用して、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーまたは分取用ＴＬＣによって精製した。【０１６２】模倣物を以下のように特徴付けた：分析Ｃ ₁₈逆相ＨＰＬＣを標準的技術（移動相：水およびアセトニトリル中において０．１％の勾配）を使用して行った。これらの方法によって、固相で合成された粗生成物は、一般的に、８０％より高い純度を示し、そして精製された全ての化合物は９５％より高い。エレクトロスプレー質量分析を、標準的な技術を使用して実行した。（Ｍ＋Ｈ ⁺ ）イオンの観測値を、表２のそれぞれの化合物について与える。 ¹ ＨＮＭＲを、精製された模倣物で実行し、そしてスペクトルをＣＯＳＹ実験およびＲＯＥＳＹ実験の組み合わせによってアサインした。全てのスペクトルは、以下に示す構造と一致し、そしてＩ型またはＩＩ型β−ターンに類似したコンホメーションを示した。【０１６３】【表４】（実施例９）（オピオイドレセプター結合における代表的な逆ターン模倣物の活性）本実施例においては、デルタ（δ）およびミュー（μ）オピオイドレセプターならびに非選択的オピオイドレセプターの調製に対する代表的な逆ターン模倣物の結合活性が記載される。５（構造Ｉａの逆ターン模倣物の２，４−ジニトロ安息香酸塩（実施例６に記載されるように調製した））および実施例８に記載されるように調製した種々の逆ターン模倣物の結合親和性を、これらの競合放射性リガンド結合アッセイにおいて評価した。【０１６４】（Ａ．オピエート（δ）結合活性）この方法において、膜を雄モルモットの全脳から調製し、そして２ｎＭ［ ³ Ｈ］ＤＰＤＰＥ（Ｄ−ｐｅｎ ³ 、Ｄ−ｐｅｎ ⁵ ）エンケファリンを用いて４℃で１時間平衡化し、その後、試験物質を加えて２５℃で４時間インキュベートした。非特異的結合を、０．３μＭナルトリンドールの存在下で決定した。結合［ ³ Ｈ］ＤＰＤＰＥを、ガラスファイバーフィルターマットを通した迅速な濾過によって遊離放射性リガンドから分離し、続いて３回洗浄した。次いで、フィルターマットをＬＫＢＢｅｔａｐｌａｔｅでカウントし、特異的に結合した［ ³ Ｈ］ＤＰＤＰＥを決定した。（Ｍｏｓｂｅｒｇら、「ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒ δ ＯｐｉａｔｅＲｅｃｅｐｔｏｒＢｉｎｄｉｎｇ」、Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３１：５９９−６０２，１９８７を参照のこと）。【０１６５】【表５】このアッセイにおいて、放射性リガンド（［ ³ Ｈ］ＤＰＤＰＥ）は、Ｂ _max ＝１２．６ｆｍｏｌ／ｍｇタンパク質および６０％の特異的結合を用いて、Ｋ _d ＝０．６５ｎＭを有すると決定した。１０μＭの濃度において、５は、６０％レベルで放射性リガンド結合を阻害することが見出され、そしてＫ _i ＝１．７±０．３ μＭおよびＩＣ ₅₀ ＝６．９±１．２μＭを示した。これらの結果は、図１（ｏ）に示され、これは放射性リガンド結合の％阻害を、逆ターン模倣物５濃度の関数として図示する。また、１０μＭの濃度において、逆ターン模倣物１６は、９２％レベルで放射性リガンド結合を阻害することが見出された。これらの結果は、逆ターン模倣物５および１６、ならびに特に、本発明の逆ターン模倣物が、一般的に、δオピエートレセプターへの結合を効果的に阻害し、そして鎮痛活性を有することを示す。【０１６６】（Ｂ．オピエート（μ）結合活性）この方法においては、膜を雄モルモットの全脳から調製し、そして２ｎＭ［ ³ Ｈ］ＤＡＭＧＯ（Ｄ−Ａｌａ ² 、Ｎ−メチル−ｐｈｅ ⁴ 、ｇｌｙ−ｏｌ ⁵ −エンケファリン）とともに２５℃で２時間インキュベートした。非特異的結合を、０．５μＭＤＡＭＧＯの存在下で決定した。結合［ ³ Ｈ］ＤＡＭＧＯを、ガラスファイバーフィルターマットを通して迅速に濾過することによって遊離放射性リガンドから分離し、続いて３回洗浄した。次いでフィルターマットをＬＫＢＢｅｔａｐｌａｔｅでカウントし、特異的に結合した［ ³ Ｈ］ＤＡＭＧＯを決定した。（Ｐａｔｒｉｃｉａら、「Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆｆｅｎｔａｎｙｌａｎａｌｏｇｓａｔ μ，δ ａｎｄ κ ｏｐｉａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ」、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２１３：２１９−２２５，１９９２を参照のこと）。【０１６７】【表６】このアッセイにおいて、放射性リガンド（［ ³ Ｈ］ＤＡＭＧＯ）は、Ｂ _max ＝８．７ｐｍｏｌ／ｍｇタンパク質および７０％の特異的結合を用いて、Ｋ _d ＝０．２７ｎＭを有すると決定した。１０μＭの濃度において、５は、６４％レベルで放射性リガンド結合を阻害し、そしてＫ _i ＝０．６４±０．０８μＭおよびＩＣ ₅ ₀ ＝５．４±０．７μＭを示した。これらの結果は、図１（●）に示され、これは、放射性リガンド結合の％阻害を、逆ターン模倣物５濃度の関数として図示する。また、１０μＭの濃度において、逆ターン模倣物１６は、９８％レベルで放射性リガンド結合を阻害ことが見出された。これらの結果は、逆ターン模倣物５および１６、特に本発明の逆ターン模倣物が、一般的に、μオピエートレセプターへの結合を効果的に阻害し、そして鎮痛活性を有することを示す。【０１６８】（Ｃ．オピエート（非選択的）結合活性）この方法（Ｃｈｉｌｄｅｒｓら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５５：１１，１９７９）においては、膜をラット大脳皮質から調製し、そして［ ³ Ｈ］ナロキソン（１ｎＭ）およびβ−ターン模倣物（３０μＭ〜０．３ｎＭ）とともに２２℃で４０分間インキュベートした。インキュベーションの後、膜をガラスファイバーフィルター（ＦｉｌｔｅｒｍａｔＡ、Ｗａｌｌａｃ）を通して減圧下で迅速に濾過した。次いで、フィルターを、セルハーベスター（Ｔｏｍｔｅｃ）を用いて氷冷緩衝液で数回洗浄した。結合放射活性を、固体閃光（ＭｕｌｔｉＬｅｘＢ／ＨＳ，Ｗａｌｌａｃ）を用いてシンチレーションカウンター（Ｂｅｔａｐｌａｔｅ，Ｗａｌｌａｃ）で測定した。同じ実験において、参照化合物（ナロキソン）を８つの濃縮物で二通り試験し、この実験を確証するための競合曲線を得た。【０１６９】レセプターに対する特異的放射性リガンド結合は、過剰の非標識リガンドの存在下で決定した全結合と非特異的結合との間の差として規定される。結果は、β −ターン模倣物の存在下で得られたコントロール特異的結合のパーセントとして表した。ＩＣ ₅₀値およびＨｉｌｌ係数（ｎＨ）は、競合曲線の非線形回帰分析によって決定した。これらのパラメータは、Ｈｉｌｌ等式カーブフィッティングによって得た。阻害定数（Ｋｉ）は、ＣｈｅｎＰｒｕｓｏｆｆ等式（Ｋｉ＝ＩＣ ₅₀ ／（１＋Ｌ／Ｋ _d ）、ここで、Ｌ＝アッセイにおける放射性リガンドの濃度、およびＫ _d ＝レセプターに対する放射性リガンドの親和性）から計算した。【０１７０】このアッセイにおいて、放射性リガンド（［ ³ Ｈ］ナロキソン）は、ＩＣ ₅₀ ＝２．５ｎＭを有すると決定した。逆ターン模倣物（実施例８に記載されるように調製および精製した）は、１μＭ濃度において９９％までの特異的結合を示した。化合物２９および３０は、０．９のＨｉｌｌ係数を用いて、それぞれ８０ｎＭおよび２７ｎＭのＩＣ ₅₀を有すると決定した。これらの結果は、特に、模倣物２９および３０、ならびに本発明の逆ターン模倣物が、一般的にオピオイドレセプターに対する結合（非選択的）を効果的に阻害し、そして鎮痛活性を有することを示す。【０１７１】（実施例１０）（鎮痛活性に対する代表的な逆ターン模倣物のインビボ活性）この実施例においては、代表的な逆ターン模倣物の鎮痛剤としてのインビボ活性が示される。化合物５（実施例６に記載されるように調製した）（本明細書中以後「試験化合物」という）を、マウステールフリックアッセイ（ＰａｎＬａｂｓ，ＰｈａｒｍａｓｃｒｅｅｎＴｅｓｔＮｏ．１０４０２Ａ）において用いた。このアッセイにおいては、マウスのグループにおいて放射熱疼痛刺激に対するテールフリック応答を誘発するために必要な時間は、疼痛閾値応答として測定される。【０１７２】体重が各々２２（±２）グラムの雄ＩＣＲマウスの５つのグループ（３試験グループ＋１生理食塩水コントロール＋１モルヒネ陽性コントロール）を使用した。これらの動物の各々を予め選択し、そしてこの動物の尾の中位背面に集束放射熱ビームを集中させた後、６〜７．５秒以内にテールフリック応答を誘発した。特定の量の試験化合物（すなわち、１０、３０および１００μｇ）を、６％ＤＭＳＡを含有する５マイクロリットル（５μｌ）の生理食塩水に溶解し、そして各動物に脳室内（ＩＣＶ）投与した。生理食塩水のみの溶液を陰性コントロールとして用い、モルヒネの１０μｇ／５μｌ／動物のＩＣＶ注射を、陽性コントロールとして用いた。【０１７３】ＩＣＶ注射後１分で、１５秒の最大カットオフ時間を用いて、マウスのグループをテールフリック応答について測定した。各処置グループについての応答時間の平均を、処理前（「時間０」）と処置後１分（「１分」）との間の比較について計算した。５０％を超える処置後１分の持続（「％持続」）は、有意な活性であると考えられた。この実験の結果は表５に示され、これは試験化合物が有意な鎮痛活性（すなわち、モルヒネの効力の約１０％〜１５％）を有したことを示す。【０１７４】【表７】（実施例１１）（代表的な逆ターン模倣物の合成）この実施例は、本発明の逆ターン模倣物の合成をさらに説明する。詳細には、［４．４．０］二環式逆ターン模倣物の調製を、実施例８、方法Ｂの方法の代替方法によって固相で実施した。この方法を、図９に概説する。【０１７５】（２−ブロモ−１−エトキシ−エチル−１−オキシ結合樹脂（２７）の合成）【０１７６】【化６９】一般的には、１バッチの樹脂（ＡｒｇｏｇｅｌＯＨまたはヒドロキシメチルポリスチレン）を、８当量のブロモアルキルアルデヒドジエチルアセタールおよび２当量のｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ＰＰＴＳ）の存在下で、１，２ −ジクロロエタン（ＤＣＥ）中で４時間、還流した。１つの場合においては、ヒドロキシルメチルポリスチレン（１０．０ｇ、０．７ｍｍｏｌＯＨ／ｇ、７ｍｍｏｌ）および３．５ｇのＰＰＴＳ（１４ｍｍｏｌ）を、２００ｍｌのＤＣＥに懸濁した。次いで、８．５ｍｌの２−ブロモジエトキシエタン（約５６ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（１００ｍｌ）中の溶液を攪拌しながら加え、そして反応混合物を還流（約８０℃）で加熱した。４時間後、樹脂を濾別し、１００ｍＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、５０ｍＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１００ｍＬのＤＭＦ、２００ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）、５０ｍＬの１，４−ジオキサンおよび最後に１００ｍＬのメタノールで洗浄した。乾燥後、１１．７３ｇの樹脂２７を得た。臭素分析は、定量的なローディング（ｌｏａｄｉｎｇ）を示した。【０１７７】（構造（Ｉａ'）の代表的な化合物の合成）樹脂を保持するためにそれぞれポリプロピレンフリットを取り付けた、適切な大きさのプラスチック使い捨てシリンジ中で、反応を行った。各工程後、樹脂のバッチをＤＭＦ（３×）およびＤＣＭ（３×）で洗浄した。代表的に、ＤＭＦ中で予め膨張させた樹脂２７の０．０３ｍｍｏｌのサンプル（例えば、０．６ｍｍｏｌＢｒ／ｇのローディングを有する５０ｍｇのポリスチレン樹脂）を、ＤＭＳＯ中のアミンＲ ₄ −ＮＨ ₂ （２ｍｍｏｌ）の２．０Ｍ溶液（１ｍＬ）で６０℃で１６〜２４時間処理した。【０１７８】次に、この樹脂を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中で、ＨＡＴＵ（３４ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０３２ｍｌ、０．１８ｍｍｏｌ）の存在下、０．０９ｍｍｏｌのＦｍｏｃアミノ酸（ＦｍｏｃＮＨ−ＣＨＲ ₃ −ＣＯＯＨ）とクロルアニル試験が陰性になるまで（代表的には、１〜２時間）反応させた。引き続いて、２５％（ｖ／ｖ）ピペリジン／ＤＭＦ溶液（２ｍＬ）で２０分間かけて処理することによってＦｍｏｃ保護を除去した。【０１７９】次いで、この樹脂を、０．０９ｍｍｏｌのＦｍｏｃβ−アミノ酸（ＦｍｏｃＮＨ−ＣＨＲ ₅ −ＣＨＲ ₂ −ＣＯＯＨ）と、ＤＭＦ（１ｍＬ）中で、ＤＩＣ（０．０１４ｍｌ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１４ｎｇ，０．０９ｍｍｏｌ）の存在下で、Ｋａｉｓｅｒ試験が陰性になるまで（代表的には、１時間）反応させた。この樹脂を、２５％（ｖ／ｖ）ピペリジン／ＤＭＦ溶液（２ｍＬ）で２０分かけて再び処理した。【０１８０】最後に、樹脂結合配列を、ＤＣＭ（１ｍＬ）中で、ＤＩＥＡ（０．１０６ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）の存在下、塩化スルホニル（Ｒ ₁ ＳＯ ₂ Ｃｌ、０．３ｍｍｏｌ）との１時間の反応（Ｋａｉｓｅｒ試験陽性）によって終結させた。あるいは、クロロホルメートＲ ₁ ＯＣＯＣｌまたはイソシアネートＲ ₁ ＮＣＯ（後者は、ＤＩＥＡの存在を必要としない）を、塩化スルホニルの代わりにＲ ₁部分の導入のために用いた。【０１８１】洗浄および乾燥した樹脂をＤＣＭ中で再膨張させ、排出し、そして１ｍＬのギ酸（９６％）で室温で終夜で処理した。多くの場合においては、６０℃までの上昇した温度または延長した反応時間が、環化を完結させるために必要であった（条件については、以下の表２を参照のこと）。上澄みを集めて、洗浄液（２×０．５ｍＬのギ酸）と合わせた。ギ酸のエバポレーションの後に得られた残渣をアセトニトリル／水５０：５０混合物中に再溶解させ、凍結し、凍結乾燥した。【０１８２】表６は、上記の手順によって合成した本発明の代表的な化合物を示す。【０１８３】【表８】（実施例１２）（細胞接着アッセイにおける代表的な逆ターン模倣物の活性）ＣＳ１ペプチドのα ₄ β ₁インテグリンへの結合をアンタゴナイズする実施例１の化合物の能力を測定するアッセイを行った。Ｖａｎｄｅｒｓｌｉｃｅ，Ｐ．ら（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９７，１７１０−１７１８）（本明細書中に参考として援用される）の手順の変形を利用した。【０１８４】簡潔には、１００μＬ／ウェルのビオチン化ＣＳ１ペプチドの溶液（１ｍｇ／１００ｍＬのリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ））を、ＮｅｕｔｒＡｖｉｄｉｎプレート（Ｐｉｅｒｃｅ）中で室温で１時間インキュベートした。次いで、このプレートを蒸留水で３回洗浄し、そして２００μＬのブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中の３％ＢＳＡ）で少なくとも４時間処理した。ブロッキングされたプレートを上記のように洗浄した。収集したＲａｍｏｓ細胞（１０ ⁷ ／ｍＬ）を、１０ μＬのカルセイン（ｃａｌｃｅｉｎ）ＡＭ／ｍＬを含有するＰＢＳ中に再懸濁し、暗所で３０分間インキュベートした。この懸濁液を、４５ｍＬのＰＢＳで希釈し、細胞を遠心分離および吸引によって収集した。この細胞を、結合緩衝液（約５×１０ ⁵ ／ｍＬ）に再懸濁した。細胞溶解をモニターした場合、エチジウムホモダイマーを５μＭの最終濃度までこの緩衝液に加えた。試験される化合物またはコントロールペプチドの溶液（１０μＬ）を適切なウェルに加え、続いて９０ μＬの細胞懸濁液を加えた。プレートを３７℃で１時間インキュベートした。エチジウムホモダイマーを加えた場合、リンスをする前に５３５／６１７での蛍光を測定した。他方、プレートを３回洗浄し、５０μＬの溶解緩衝液を各ウェルに加え、プレートを暗所で１０分間振動させ、そして４８５ｎｍ励起および５３５ｎｍ発光で蛍光をモニターした。【０１８５】実施例１１で調製した化合物は、このアッセイにおいて活性を示した。このように、本発明の化合物は、細胞接着を効果的に阻害し、そして抗炎症剤としての活性を有する。【０１８６】本発明の特定の実施形態を本明細書中で例示の目的で記載してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく種々の変更がなされ得ることは明らかである。従って、本発明は添付の特許請求の範囲によって限定される以外には限定されない。【図面の簡単な説明】【図１】図１は、本発明の代表的な逆ターン模倣物のδおよびμアヘン剤レセプタに対して結合する放射リガンドの阻害％を、濃度の関数として示す。【図２】図２は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図３】図３は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図４】図４は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図５】図５は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図６】図６は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図７】図７は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図８】図８は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。【図９】図９は、本発明の逆ターン模倣物の合成のための、代表的な反応スキームを示す。 ───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl. ⁷識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 9/10 Ａ６１Ｐ 9/10 １０１１０１ 11/00 11/00 11/06 11/06 13/12 13/12 17/00 17/00 17/06 17/06 19/02 19/02 25/00 25/00 25/28 25/28 27/02 27/02 29/00 29/00 １０１１０１ 31/18 31/18 35/00 35/00 37/08 37/08 43/00 １０５ 43/00 １０５ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者キム，ファ−オークアメリカ合衆国ワシントン 98052，レッドモンド， 154ティーエイチアベニューノースイースト 5606 (72)発明者スタシアック，マーシンアメリカ合衆国ワシントン 98033，カークランド，レイクワシントンブールバードノースイースト 4331，ナンバー7306 Ｆターム(参考） 4C050 AA01 BB08 CC08 EE03 FF02 GG03 HH01 4C086 AA01 AA02 CB09 MA01 MA04 NA14 ZA02 ZA06 ZA15 ZA16 ZA39 ZA40 ZA45 ZA59 ZA81 ZA89 ZA96 ZB11 ZB13 ZB15 ZB21 ZB26 ZC35 ZC55

Reverse-turn mimetics and methods relating to it

该功能需要专业版企业版VIP权限，您可以：