钾通道在膜电位中起重要作用。在不同类型的钾通道中，ATP敏 感(KATP-)通道受腺苷三磷酸胞内浓度变化的调节。在各种组织的细胞 中都已发现了KATP-通道，诸如在心细胞、胰细胞、骨胳肌、平滑肌、 中枢神经元和腺垂体细胞中。这些通道与不同的细胞功能有关，例如 激素分泌(胰β细胞分泌胰岛素，腺垂体细胞分泌生长激素和催乳激 素)、血管舒张(在平滑肌细胞中)、心动作电位持续、中枢神经系 统中神经递质释放。
现已发现KATP-通道的调制剂对于各种疾病的治疗来说是重要的。 某些已用于治疗非胰岛素依赖性糖尿病的磺酰脲类药物是通过抑制胰β 细胞上的KATP-通道从而刺激胰岛素释放而起作用的。现已发现包含化 合物的多相基团的钾通道开启剂能松弛血管平滑肌，因此已用于治疗 高血压。
此外，钾通道开启剂可在哮喘和多种其他疾病的治疗中用作支气 管扩张药。
另外，已显示钾通道开启剂能促进头发生长，并已用于治疗脱发。
钾通道开启剂还能松弛膀胱平滑肌，因此能用于治疗尿失禁。松 弛子宫平滑肌的钾通道开启剂能用于治疗早产。
由于一些KATP-开启剂能拮抗基底或脑动脉的血管痉挛，因此本发 明的化合物可用于治疗血管痉挛病，诸如蛛网膜下出血和偏头痛。
钾通道开启剂能使神经元超极化并抑制神经递质释放，因此预期 本发明化合物能用于治疗各种中枢神经系统疾病，例如：癫痫、局部 缺血和神经变性疾病，并可用于治疗疼痛。
最近，已显示二氮嗪(7-氯-3-甲基-2H-1，2，4-苯并噻二嗪-1，1-二氧 化物)和某些3-(烷基氨基)-4H-吡啶并[4，3-e]-1，2，4-噻二嗪1，1-二氧化 物衍生物通过激活胰β细胞上的KATP-通道而抑制胰岛素释放(Pirotte B. 等人，《生物化学与药理学》47，1381-1386(1994)；Pirotte B.等人， 《医药化学杂志》36，3211-3213(1993))。另外还显示二氮嗪能延迟BB- 大鼠的糖尿病的发作(Vlahos WD等人，《代谢》40，39-46(1991))。 还显示二氮嗪减少了肥胖的zucker大鼠的胰岛素分泌，增加了胰岛素 受体的结合，并因此改善了葡萄糖耐受性，减少了体重的增加 (Alemzadeh R.等，《内分泌学》133，705-712，1993)。预期这样的 钾通道开启剂能用于治疗以胰岛素产生过量为特征的疾病，以及用于 治疗和预防糖尿病。
对本发明的说明
本发明涉及通式I表示的取代3，3-二氨基-2-丙烯腈，下文中也称 作氰烯胺： 其中：
R1是可选地被卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、 二烷基氨基、芳基烷基氨基或二芳基氨基取代的烷基；可选地被烷基、 三氟甲基、芳基、杂芳基、卤素、烷氧基、芳氧基、二烷基氨基、烷 基芳基氨基、二芳基氨基、硝基、烷基-磺酰基、芳基-磺酰基、氰基、 烷氧基羰基或氨基羰基取代的芳烷基、芳基；可选地被烷基、芳基、 杂芳基、卤素、烷氧基、芳氧基、二烷基氨基、烷基芳基氨基、二芳 基氨基、卤素、硝基、烷基-磺酰基、芳基-磺酰基、氰基、烷氧基羰基 或氨基羰基取代的杂芳基；
R2和R3独立地为氢，可选地被芳基、杂芳基、5、6或7元杂环 系统、卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、二烷基氨基、 芳基烷基氨基或二芳基氨基取代的烷基；可选地被烷基、芳基、杂芳 基、卤素、烷氧基、芳氧基、二烷基氨基、烷基芳基氨基、二芳基氨 基、硝基、烷基-磺酰基、芳基-磺酰基、氰基、烷氧基羰基或氨基羰基 取代的芳基；可选地被烷基、芳基、杂芳基、卤素、烷氧基、芳氧基、 二烷基氨基、烷基芳基氨基、二芳基氨基、硝基、烷基-磺酰基、芳基- 磺酰基、氰基、烷氧基羰基或氨基羰基取代的杂芳基； 或者R2和R3通过-(CH2)n-连接在一起，n为4-7， 条件是R2和R3不同时为氢；
Z是氢，氰基，烷氧基羰基，可选取代的氨基羰基，烷基磺酰基 或芳基磺酰基，它们可选地被烷基、芳基、杂芳基、卤素、烷氧基、 芳氧基、二烷基氨基、烷基芳基氨基、二芳基氨基、硝基、烷基-磺酰 基、芳基-磺酰基、氰基、烷氧基羰基或氨基羰基取代；和
其药学上可接受的盐。
在本发明的范围内包括式I化合物的所有非对映体和对映体，它 们中有一些是旋光性的，以及包括其外消旋混合物的它们的混合物。
本发明的范围内还包括式I化合物的所有互变异构型。
盐包括药学上可接受的酸加成盐，药学上可接受的金属盐或可选 的烷基化铵盐，诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸、三氟乙酸、 三氯乙酸、草酸、马来酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、柠檬酸、酒石 酸、富马酸、扁桃酸、苯甲酸、肉桂酸、甲磺酸、乙磺酸、苦味酸等 等，以及与《药物科学杂志》66，2(1977)中所列的药学上可接受的盐 有关的酸，该文结合在此作为参考，或者锂、钠、钾、镁盐等等。
本文中所用的术语“5、6或7元杂环系统”是指：含有一个、二 个或三个选自氮、氧和硫的杂原子，且具有5个环原子的不饱和或饱 和单环系统，例如：吡咯、呋喃、噻吩、吡咯啉、二氢呋喃、二氢噻 吩、咪唑、咪唑啉、吡唑、吡唑啉、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、1，2，3-噁 二唑、呋咱、1，2，3-三唑、1，2，3-噻二唑或2，1，3-噻二唑；含有两个或多 个氮原子且具有6个环原子的芳族单环系统，例如：吡嗪、嘧啶、哒 嗪、1，2，4-三嗪、1，2，3-三嗪或四嗪；含有一个或多个选自氮、氧和硫 的杂原子，且具有6或7个环原子的非芳族单环系统，例如：吡喃、 噻喃、哌啶、二噁烷、噁嗪、异噁嗪、二噻烷、氧硫杂环己烷(oxathine)、 噻嗪、哌嗪、噻二嗪、二噻嗪、噁二嗪或氧代氮杂环庚烷(oxoazepane)。
烷基是指具有1至15个碳原子、优选具有1至6个碳原子的低级 直链、环状、二环、稠合或分支烷基。芳基是指苯基或被烷基或苯基 取代的苯基，或与环烷基稠合的苯基，或多环芳族系统，诸如萘基、 蒽基、菲基、芴基等。亚烷基是指具有1至15个碳原子、优选具有1 至6个碳原子的低级直链、环状、稠合或分支亚烷基。杂芳基是指任 何可能的同分异构的、未取代或烷基取代的吡咯基、呋喃基、噻吩基、 咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、噻唑基、噁二唑基、噻 二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基和哒嗪基，以及其相应的苯并和二 苯并衍生物或其他稠合环系统。杂芳基的含义还包括上面列举的杂环 系统的部分或完全氢化的衍生物。烷氧基是指-O-烷基，芳氧基是指-O- 芳基。氰基是指-CN，羟基是指-OH，氨基是指-NH2，硝基是指-NO2。 二烷基氨基是指-N(烷基)2。烷基芳基氨基是指-N(烷基)(芳基，二芳基 氨基是指-N(芳基)2。卤素是指-F、-Cl、-Br和-I。芳烷基是指-亚烷基- 芳基。烷硫基是指-S-烷基，芳硫基是指-S-芳基。烷氧基羰基是指-CO-O- 烷基，氨基羰基是指-CO-N(烷基)2、-CO-N(烷基)(芳基)或-CO-N(芳 基)2。酰氨基是指-N(烷基)-CO-烷基或-N(烷基)-CO-芳基。离去基团是 指能作为阴电荷部分、或阳电荷基团或原子而存在于溶液中的基团或 原子。
本发明化合物与钾通道相互作用，并由此作为ATP调节的钾通道 的开启剂或阻断剂，这使得它们能用于治疗各种心血管系统疾病，例 如：脑局部缺血、高血压、缺血性心脏病、心绞痛和冠心病；肺系统 疾病；胃肠系统疾病；中枢神经系统疾病和内分泌系统疾病。
本发明化合物还可用于治疗与骨胳肌血流减少有关的疾病，如雷 诺氏病和间歇性跛行。
此外，本发明化合物可用于治疗慢性气道疾病，包括哮喘，并可 治疗继发于膀胱流出障碍的逼肌不稳定，并因此可通过帮助结石通过 输尿管而治疗肾结石。钾通道开启剂还可松弛膀胱平滑肌，因此，本 发明化合物可用于治疗尿失禁。
本发明化合物还可用于治疗与胃肠移动性失调有关的疾病，如过 敏性肠综合征。另外，这些化合物可用于治疗早产和痛经。
此外，钾通道开启剂可促进头发生长，因此本发明化合物可用于 治疗脱发。
在诸如胰岛细胞增殖症和胰岛瘤等其中胰岛素的过度分泌导致严 重低血糖的疾病中，可以用本发明化合物来减少胰岛素分泌。在肥胖 中，经常发生高胰岛素血和胰岛素抗性。此状况可导致非胰岛素依赖 性糖尿病(NIDDM)的发展。预期钾通道开启剂、并由此预期本发明化 合物可用于对抗该高胰岛素血，并由此预防糖尿病和减轻肥胖。在用 钾通道开启剂、以及由此用本发明化合物对高胰岛素血的明显NIDDM 治疗中，可有益于恢复葡萄糖敏感性和正常胰岛素分泌。
在胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)的早期或前驱糖尿病期，钾通道开 启剂以及由此本发明化合物可用于诱导β细胞静息，这可防止该自身免 疫疾病的向前发展。
用作KATP-通道阻断剂的本发明化合物可用于治疗NIDDM。
优选地，本发明化合物可用于治疗或预防内分泌系统疾病，如高 胰岛素血和糖尿病。
因此，本发明的另一方面涉及通式I化合物或其药学上可接受的 酸加成盐作为治疗上可接受的物质而使用，优选作为治疗上可接受的 物质而用于治疗高胰岛素血和治疗或预防糖尿病。
另外，本发明还涉及通式I的本发明化合物作为药剂用于治疗高 胰岛素血和治疗或预防糖尿病的用途。
在另一方面，本发明涉及制备上述化合物的方法。该方法包含用 作钾通道开启剂的有机化合物、特别是治疗上重要的那类化合物、即 不同取代的氰烯胺的固相和组合合成。本发明中公开的新合成顺序给 出了得到一类新的、用作钾通道开启剂的氰烯胺的途径。
下列术语具有以下普遍含义：
1.底物：是指任何不溶或部分不溶的物质，化合物可共价连接其上。 底物可从由任何种类的有机或无机聚合或寡聚物组成的组中选择，例 如：不同交联度的聚苯乙烯，聚乙二醇(PEG)，连接于聚苯乙烯的聚 乙二醇(例如TentaGel)，聚丙烯酰胺，聚酰胺，多糖或硅酸盐。可 选地，底物的所给部分可连接在标记物上，标记物即能在大量底物部分 中明确地鉴定出此底物部分的物质或装置。
2.连接体：有至少两个反应部位的分子，这使其可共价连接到其 他分子或底物上。连接体与底物间的或连接体与和其连接的其他分子 间的或该连接体自身的键，必须是可随着与诸如选定化学激活剂等激 活剂的选择性接触或其他特定条件而裂开的，例如，用强酸处理或接 受电磁辐射或用金属催化。
3.阵列：利用相同合成反应顺序以平行方式同时合成的、具有共 同结构元素的化合物的N单一化合物或N混合物的集合。在化合物的 阵列中单一化合物的精确结构，或在混合物的阵列中混合物的成分， 可利用产生该化合物或混合物的反应物的顺序来确定，并可从记录的 反应方案中推断出来。该阵列的空间布置情况是不相干的。
4.氰烯胺：含有结构元素RR’N-CR”＝CR-CN的有机化合物。
5.保护基：与分子或底物化学键合、并可随着与诸如选定化学激 活剂等激活剂的选择性接触或其他特定条件而除去的物质，例如通过 用强酸处理或接受电磁辐射或用金属催化而除去。
6.组合合成：通过顺序加入试剂而平行合成单一化合物或混合物 阵列的有序策略。
7.简写：下列频繁使用的简写形式含义如下： AcOH：冰醋酸 DBU：1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯 DCM：二氯甲烷 DIC：二异丙基碳化二亚胺 DMF：N，N-二甲基甲酰胺 EDC：盐酸N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺，“水溶性碳化 二亚胺” FMoc：芴基甲氧基羰基 NMP：N-甲基吡咯烷酮 R：有机基 TFA：三氟乙酸 THF：四氢呋喃
本发明还提供了治疗上有用化合物的合成方法。本发明还提供了 作为治疗上一类重要化合物的氰烯胺衍生物阵列的迅速组合合成和筛 选方法。本发明还提供了氰烯胺的固相合成，它去除了纯化和分离步 骤，因此大大提高了合成效率。本说明书还描述了固相合成法向非寡 聚有机化合物的重要扩展。
参照本说明书的其余部分可进一步理解本发明的性质和优点。  
本发明申请还包括，优选以平行和同时的方式迅速制备和筛选通 式I表示的大量不同取代的氰烯胺：
其中：Z、R1、R2和R3如上所定义 或通式II表示的大量不同取代的氰烯胺： 其中：Su是底物，
L是化学键或连接体，
R1、R2和R3如上所定义。
反应方案1全面阐述了氰烯胺的固相合成。 方案1
在该合成中，底物Su可以是任何不溶或部分不溶的物质，化合物 可以共价连接其上。优选地，底物可从由聚苯乙烯，聚乙二醇(PEG)， 连接于聚苯乙烯的聚乙二醇(例如TentaGel)，聚酰胺，多糖和硅酸 盐组成的组中选择。根据所选底物的类型，可以使用不同类型的溶剂 或保护基。
底物键合醇1可以用适当的通式NC-CH2-COX的氰乙酸衍生物酰 化，在NC-CH2-COX中，X是离去基，优选用就地产生的对称酸酐酰 化(Zaragoza，F.，《四面体快报》1995，36，8677-8678)。另一方 面，其他就地产生或分离的氰乙酸衍生物也可以用作酰化剂，诸如从 氯甲酸烷基酯和氰乙酸得到的混合酸酐，或咪唑酰胺(imidazolide)， 或其他类型的活化酯，诸如N-羟基苯并三唑酯或N-羟基琥珀酰酯，或 对本领域技术人员来说显而易见的其他活化酯。该酯化反应可以可选 地在催化剂如4-二甲氨基吡啶的存在下进行，反应得到通式为{底物}- {连接体}-O-CO-CH2-CN的衍生物。
然后，所得树脂键合氰乙酸衍生物2可用过量的、在适当的溶剂 如NMP、DMF或THF中的、通式为R1-NCS的芳香或脂族异硫氰酸 酯处理，该反应在碱、优选为二异丙基乙胺或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十 一碳-7-烯(DBU)的存在下进行。
然后所得中间产物3可用在合适溶剂中的EDC和通式R2R3NH的 脂族或芳香伯胺或仲胺处理，合适的溶剂如NMP、DMF、乙腈、DCM、 1，2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯等，优选DMF。另一方面，也可以使 用其他冷凝剂(例如：苯并三唑-1-基-氧-三-(二甲氨基)六氟磷酸 鏻(“BOP”)，羰基二咪唑，N-乙基-N’-3-(三甲铵丙基)-碳化二亚胺，二 异丙基碳化二亚胺，二环己基碳化二亚胺，等等)，单独使用或在催 化剂如甲苯磺酸吡啶鎓盐或叔胺盐的存在下使用。该反应与已公开的 将硫脲转化为氰基胍的方法密切相关(K.S.Atwal，S.Z.Ahmed， B.C.O’Reilly，《四面体快报》1989，30，7313-7316)。
底物键合氰烯胺II的连接体的断裂可以将氰烯胺衍生物I释放到 溶液中。断裂条件将取决于所选底物和连接体的类型。例如，在聚苯 乙烯树脂与Wang连接体或Rink连接体的情况下，用纯TFA或 TFA/DCM混合物处理该载体键合氰烯胺II，可使该连接体裂开。由 此可得到为其氰基脒-三氟乙酸酯互变体的氰烯胺I，当用碱或缓冲液 处理时，它可以可逆地互变异构为中性氰烯胺。
另一方面，也可对氰烯胺衍生物II进行进一步化学转化。含有NH 基的那些氰烯胺II可以通过用过量活化羧酸衍生物或用异氰酸酯或用 异硫氰酸酯或用磺酰氯处理而在氮上酰化，分别得到相应的甲酰胺、 脲、硫脲或磺酰胺。这些反应都可用对本领域技术人员来说显而易见 的常规方法进行。
另一方面，也可对氰烯胺衍生物I进行进一步化学转化，得到高 产率和纯的粗产物，以使这些衍生物不必进一步纯化就符合它们的筛 选的需要。例如，含有NH基的那些氰烯胺衍生物可以通过用过量活 化羧酸衍生物或用异氰酸酯或用异硫氰酸酯或用磺酰氯处理而在氮上 酰化，分别得到相应的甲酰胺、脲、硫脲或磺酰胺。这些反应都可用 对本领域技术人员来说显而易见的常规方法进行。
利用该合成方法，可以在平行固相合成用装置的帮助下构造氰烯 胺衍生物II或I的阵列。这可以是Geysen等研制的pin法(《免疫 方法学杂志》1987，102，259-274)，或是带有数种固相合成用反应 器的装置(容器有可渗透壁)，它允许试剂和溶剂的自动或手工加入， 以及通过在这些反应器的可渗透壁的内侧和外侧间同时或单独施用不 同压力而将溶剂从反应器中去除。
这样的阵列可以在多有机合成器(例如“Advanced ChemTech” 的“ACT 496”)上制备，通过在碱的存在下，使位于单独容器中的 氰基乙酰化底物在特定条件下，单独与通式为R1-NCS的不同异硫氰 酸酯反应而完成。然后所得中间产物3在EDC的存在下与在DMF中 的通式为R2R3NH的不同胺反应，得到不同氰烯胺衍生物II的阵列。 从该载体上断裂将得到相应的氰烯胺I的阵列。
本发明还提供了氰烯胺衍生物的混合物的阵列的合成。这可利用 “分裂与混合”法(Sepetov，N.F.，Krchnák，V.，Stankova，M.，Wade，S.， Lam，K.S.，和Lebl，《美国国家科学院院报》1995年，92，5426-5430) 完成，或利用相应试剂的混合物完成。
利用本发明主要可构造两种不同类型的氰烯胺I或II的阵列：完 全组合阵列(FCA)和非完全组合阵列(NFCA)。
我们用FCA指取代氰烯胺的阵列，其中一系列选定构件(R基) 的所有可能的组合形式都已实现。例如，通过选择n异硫氰酸酯和m 胺，使n×m＝N，并合成所有可能的异硫氰酸酯/胺的组合，就可制备 N氰烯胺的FCA。构件的选择可以根据该阵列的成员的预期性能进行。
我们用NFCA指氰烯胺的阵列，其中仅实现了一系列选定构件的 所有可能组合形式的选择部分。例如，首先选择n异硫氰酸酯和m胺， 使n×m＞N，然后从所有理论上可能的n×m氰烯胺中，通过将所有 可能的n×m氰烯胺分到具有相似预期性能的N组氰烯胺中，并从每 组中选择一种氰烯胺从而选择出N氰烯胺，然后进行合成，由此制备 N氰烯胺的NFCA。构件和氰烯胺的选择可以根据该阵列的成员的预 期性能进行。为了制备这样的化合物的阵列，底物自身的精确位置没 有给出有关在该特定成批底物上制备的化合物的任何结构信息。因此， 该底物的空间布置情况是不相干的。结构信息将从加入到每批底物中 的试剂的顺序记录中得到。在FCA或NFCA的每一制备步骤中，记 录在容器的阵列中每一底物-容器的精确位置以及加入到该容器中的 不同试剂的结构，以便总是能推断出从一所给容器中得到的氰烯胺的 精确结构。
然后，通过将各个氰烯胺就它们结合特定受体的能力、或诱导特 定生物过程的能力、或催化生化或化学反应的能力等进行比较，从而 对所得氰烯胺的阵列进行筛选。这基本上可以两种不同方式完成。一 种可能性是例如针对可溶性受体来筛选该底物键合氰烯胺II。例如， 该受体可以是放射性标记的肽或酶，它们可容易地允许通过洗去所用 的过量放射性配体，并测定每种底物键合氰烯胺II-肽复合物的剩余放 射性，从而测定所给底物键合氰烯胺II与此肽的结合强度。另一方面， 作为另一个例子，可以通过对比在所给底物键合氰烯胺II存在和不存 在的条件下该生物过程或化学反应发生的速率，从而测量不同底物键 合氰烯胺II对该生物过程或化学反应的催化活性。
第二种进行筛选的可选方法在于当底物键合氰烯胺II的连接体已 断裂后，利用合适的相似多孔操作的带电及索引性(charged and indexed)微量滴定板，在溶液中针对可选的底物键合受体或酶来筛选 氰烯胺I。可溶性小分子的筛选是常规且众所周知的。一般使用放射性 检测法，其中研究所给受体的放射性标记的天然配体和欲测试化合物 对该受体的竞争性结合情况。
例如，可以筛选氰烯胺的钾通道开启剂活性。这可通过以下方法 实现：首先用86Rb+处理大鼠的主动脉，然后用氰烯胺I处理。释放到 溶液中的放射性86Rb+和该组织中剩余的放射性的比率与所测试氰烯胺 I的钾通道开启剂活性成比例。文献中已描述了此类型的分析(参见： 例如，T.Nakajima，T.Izawa，T.Kashiwabara，S.Nakajima， Y.Munezuka，《化学与药学通报》1994，42，2475-2490)。
氰烯胺I还可在溶液中制备。所用方法如下图所示：
受体取代的乙腈在碱的存在下与异硫氰酸酯反应。所得硫代酰胺 在脱硫剂如氧化汞(II)或EDC的存在下用伯胺或仲胺处理，得到氰烯 胺I。其中Z＝叔丁氧基羰基的氰烯胺I用三氟乙酸的二氯甲烷溶液处 理，可制得未取代的氰乙脒。由此将酯基水解，接着脱羧，得到相应 的氰乙脒三氟乙酸盐。 在先技术
2-氰基-3-(二甲氨基)-3-芳基氨基-2-丙烯腈的一些衍生物已请求保 护为血管紧张素II拮抗剂(EP 591891，《化学文摘》1995年，122， 81364；《化学文摘》1994年，121，300890)。例如：
含有该亚结构单元的其他化合物已请求保护为抗血栓形成药(EP 547517，《化学文摘》1993年，119，249845；《化学文摘》1993年， 119，180666)，例如：
几种3-(芳基氨基)-3-(烷基氨基)-2-氰基-2-丙烯腈-2-丙烯酰胺已请 求保护为杀真菌剂和除草剂(EP 10396，《化学文摘》1982年，97， 140276；《化学文摘》1980年，93，144701)，例如以下几种：
胺RR’NH与通式为NC-CH2-C(OR)＝NH的丙二腈的单亚氨酸酯 反应得到RR’N-C(NH2)＝CH-CN型化合物，其中两个氨基之一限制为 NH2(Cocco，M.T.；Congiu，C.；Maccioni，A.；Plumitallo，A.，《杂环化 学杂志》1989年，26，1859-1862；Klemm，K.；Pruesse，W.；Baron，L.； Daltrozzo，E.，《化学报告》1981年，114，2001-2018；Cocco，M.T.； Onnis，V.，《合成》1993年，2，199-201；Fanshawe，W.J.等人，《有 机化学杂志》1964年，29，308-311；Troschuetz，R.；Dennstedt，T.， 《药理学文献》(Weinheim Ger.)1994年，327，85-90)。
另一种方法是O-烷基化氰基乙酰胺与脂族胺反应(G.J.Durant等 人，专利CH 606026，《化学文摘》1979年，90，87449，G.J.Durant， 专利US 4024260，《化学文摘》1977年，87，135327)。还报道了3，3- 二甲氧基丙烯腈与胺的反应，该反应可逐步进行，以制备通式为 RR’N-C(NR”R)＝CH-CN的化合物(G.J.Durant，专利US 4277485， 《(化学文摘》1981年，95，156591)，并可用于制备雷尼替丁类似物。
另外，已报道3，3-二氯丙烯腈与胺反应可得到通式为 (RR’N)2C＝CH-CN的氰烯胺，它有两个相同的胺部分RR’N- (Hashimoto等人，《有机化学杂志》1970年，35，828-831；Takeda Chem.Ind.Ltd.，JP 7022328，1970年，《化学文摘》73，98434z)。 除此以外，还公开了这些化合物的一些特殊合成方法(例如，Sasaki，T.； Kojima，A.，《英国化学会志，C部分》1970年，476-480；Clark，j.， Parvizi，B.；Southon，I.W.，《英国化学会志，柏尔金汇刊第1辑》1976 年，125-130；Smith；Kline and French Lab.Lim，FR 2229417，DE 2423813，《化学文摘》82，170943；Meyer，K.，Justus Liebigs Ann. Chem.，1978年，1491；Elagamey，A.G.A.；El-Taweel，F.M.A.，J.Prakt. Chem.，1991年，333，333-338)。
在先技术中已记载了数种不同的制备2-受体取代的3，3-双(烷基/芳 基氨基)-2-丙烯腈的合成方法(Elvidge，J.A.等，《英国化学会志，柏 尔金汇刊第1辑》1983年，1741-1744；Yatsishin，A.A.等，《有机化 学杂志》1979年，15，1381-1384；Hartke，K.，《应用化学》1964年， 76，781)。
药理学方法
这些化合物与钾通道相互作用的能力可以用多种方法来确定。当 使用膜片钳术(Hamill，O.P.，Marty A.，Nefer E.，Sakman B.和Sigworth F.J.，Plügers Arch.1981年，391，85-100)时，可以记录通过细胞单 通道的离子电流。
这些化合物作为钾通道开启剂的活性还可以按照以下方法用大鼠 主动脉环的松弛来量测：
将大鼠主动脉弓与横隔膜之间的胸主动脉部分切割并封藏为环制 品，如Taylor P.D.等人在《英国药理学杂志》1994年，111，42-48 页中所述。
经过2g张力下的45分钟平衡期后，利用所需浓度的苯福林使这 些制品收缩到最大应答的80％。当苯福林应答上升到稳定水平时，利 用半对数摩尔增量以2分钟间隔向该浴中累积加入小体积潜在血管舒 张剂。松弛用收缩张力的百分数表示。化合物的效能用引起50％组织 松弛所需的浓度表示。
在胰b-细胞中，KATP-通道的开放可以通过测量随后的胞质游离 Ca2+浓度的变化来确定，可按照Arkhammer P.等人在《生物化学杂志》 1987年，262，5448-5454中记载的方法进行。 从β细胞系中流出的86Rb+
RIN 5F细胞系在添加了10％胎牛血清的、带有Glutamax I的 RPMI 1640(来自GibcoBRL，Scotland，UK)中生长，并保持在37℃ 下，5％CO2/95％空气的气氛中。这些细胞用胰蛋白酶-EDTA溶液(来 自GibcoBRL，Scotland，UK)分离，再悬浮于培养基中，加入1mCi/mL 86Rb2+并以在100μl/孔中50000细胞/孔的密度再涂覆到微量滴定板(96 孔类3596，无菌的，来自Costar Corporation，MA，USA)中，使其 在用于测定前生长24小时。
这些滴定板用林格缓冲液(150mM NaCl，10mM Hepes，3.0mM KCl，1.0mM CaCl2，20mM蔗糖，pH7.1)洗涤4次。加入80μL林格 缓冲液和溶于DMSO的1μL对照或测试化合物。在室温下加盖培养 1小时后，将50μL上清液转移到PicoPlates(Packard Instrument Company，CT，USA)中，并加入100μL MicroScint40(Packard Instrument Company，CT，USA)。这些滴定板在TopCount(Packard Instrument Company，CT，USA)中以32P程序计数，每孔1分钟。
利用四参数对数曲线：y＝(a-d)/(1+(x/c)b)+d，其中a＝浓度为0时 的估计活性，b＝斜率因子，c＝曲线中间的浓度，d＝浓度无穷大时的估 计活性，通过SlideWrite(Advanced Graphics Software，Inc.，CA， USA)计算EC50和Emax。当该曲线在浓度无穷大时翻转时，EC50＝C， Emax＝d。
本发明化合物在宽剂量范围内都是有效的。一般每天约0.05mg至 约1000mg的剂量就可得到令人满意的结果，优选每天约0.1mg至约 500mg。最优选的剂量是每天约5mg至200mg。精确的剂量将取决于 给药的方式，剂型，欲治疗的主体以及欲治疗主体的体重，主管医师 或兽医的选择和经验。
可以使用任何能有效地将活性化合物传送到合适或预期作用部位 的给药途径，诸如口服或胃肠外给药，如直肠、经皮、皮下、静脉内、 肌内或鼻内给药，优选口服途径。
典型组合物包括式I化合物或其药学上可接受的酸加成盐，结合 药学上可接受的赋形剂，赋形剂可以是载体或稀释剂，或是用载体稀 释，或者封装在胶囊、扁囊、纸或其他容器等形式的载体中。可以使 用药物组合物的常规制备技术来制备这些组合物。例如，活性化合物 通常将与载体混合，或用载体稀释，或封装在安瓿、胶囊、扁囊、纸 或其他容器等形式的载体中。当用载体作为稀释剂时，它可以是固体、 半固体或液体，它们作为活性化合物的载体、赋形剂或介质。活性化 合物可以吸附在颗粒固体容器如扁囊中。一些合适的载体的实例是水， 盐溶液，醇，聚乙二醇，多羟基乙氧基化蓖麻油，明胶，乳糖，直链 淀粉，硬脂酸镁，滑石，硅酸，脂肪酸单甘油酯和二甘油酯，季戊四 醇脂肪酸酯，羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。该制剂还可包括湿润 剂，乳化和悬浮剂，防腐剂，甜味剂或调味剂。采用本领域中熟知的 方法，可以将本发明制剂配制成在对患者给药后，活性成分能快速、 持续或延迟释放的形式。
可以将该药物制剂灭菌，如果需要，还可与不会跟活性化合物发 生有害反应的辅助剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲液和/或着色物 质等混合。
对于胃肠外应用来说，尤其合适的是可注射溶液或悬浮液，优选 溶于多羟基化蓖麻油中的活性化合物的水溶液。
含有滑石和/或碳水化合物载体或结合剂或类似物质的片剂、糖衣 丸或胶囊尤其适于口服应用。片剂、糖衣丸或胶囊的优选载体包括乳 糖、玉米淀粉和/或马铃薯淀粉。在可以应用甜味载体的情况下，可以 使用糖浆剂或酏剂。
适用于该方法的典型片剂可以用常规压片技术制备，它含有：
活性化合物            5.0mg
乳糖(Lactosum)        67.8mg，欧洲药典
微晶纤维素Avicel    31.4mg
安伯来特Amberlite   1.0mg
硬脂酸镁              0.25mg，欧洲药典
由于本发明化合物具有高活性，因此它们可以给予需要的哺乳动 物，特别是人，以治疗、预防、消除、减轻或改善上文提到的多种疾 病，尤其是内分泌系统疾病如高胰岛素血和糖尿病。这样的哺乳动物 还包括动物，无论是家养动物，例如家庭宠物，还是非家养动物，如 野生动物。
实施例 实施例1.三氟乙酸N-(4-甲氧基苄基)-N’-苯基氰乙脒的合成
向Wang树脂(20.0g，19.2mmol，Novabiochem，载荷量： 0.96mmol/g)的DCM悬液(100mL)中加入氰乙酸(30.0g，353mmol) 和DMF(100mL)。边搅拌边分批加入DIC(25mL)，由此发生放 热反应。当DIC加完后，加入4-二甲氨基吡啶(10mL 1M DMF溶液)， 所得混合物在室温下搅拌15小时。然后该混合物过滤，树脂用DMF、 DCM和甲醇充分洗涤。干燥后，得到约20g Wang树脂-O-CO-CH2- CN。
向该树脂(0.30g，约0.3mmol，膨胀于DCM中)中加入DMF (4mL)、二异丙基乙胺(0.8mL)和异硫氰酸苯酯(0.54mL，4.5mmol)。 所得混合物振摇16小时，过滤，用DMF洗涤(3×6mL)，然后加 入EDC(0.95g，4.95mmol)、DMF(5mL)和4-甲氧基苄胺(0.40mL， 3.03mmol)的混合物。该混合物振摇24小时，过滤，树脂用DMF、 甲醇、DCM和10％ AcOH的DCM溶液仔细洗涤。然后将其悬浮于 DCM(3mL)和TFA(2mL)中并振摇35分钟。加入四氯化碳(5mL)， 过滤并用DCM洗涤后，将滤液浓缩。由此得到84mg(71％)三氟乙 酸N-(4-甲氧基苄基)-N’-苯基氰乙脒，为油状，其在室温下在48小时 内缓慢结晶。重结晶(乙酸乙酯/甲醇/庚烷)得到22mg标题化合物， 为无色晶体，mp161-163℃。
LCMS(Lichrosorb RP18，乙腈/水梯度，于214nm监测)：于7.2 分钟洗脱MH+计算值280，实测值280.1H NMR(300MHz，CDCl3/DMSO-d61∶1)δ3.82(s，br， 3H)，3.89(s，br，2H，可与D2O交换)，4.60(s，br，2H)，6.95(d，J＝8.0 Hz，2H)，7.29(d，J
 ＝8.0Hz，2H)，7.30-7.55(m，5H)，10.25(s，br，1H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ20.26(t)，
 46.17(t)，55.10(q)，113.98(d)，125.66(d)，126.71(d)，127.62(d)，129.19(d)，137.50(s，br).
 154.36(s，br)，159.29(s).分析计算  C19H18F3N3O3(393.36)：C，58.01；H，4.61；N，
 10.68.实测值C，57.98；H，4.68；N，10.47. 实施例2：2-氰基-3-(3-甲基丁氨基)-3-(苯氨基)-2-丙烯腈
在0℃下，向丙二腈(0.34g，5.15mmol)的DMF溶液(5mL)中先加 入异硫氰酸苯酯(0.60mL，5.02mmol)，再加入三乙胺(1.4mL)。所得混 合物在O℃下搅拌25分钟，然后加入新制备的EDC(2.90g，15.1mmol)、 3-甲基丁胺(1.20mL，10.3mmol)和DMF(10mL)的混合物。在室温下搅 拌2天后，将该混合物倒入冰水(50mL)和浓盐酸(3.0mL)的混合物中。 萃取该产物(2×30mL乙酸乙酯)，合并后的有机萃取物洗涤(2×30mL 盐水)、干燥(硫酸镁)并浓缩。剩余的油与甲醇(3mL)混合，由 此沉淀出固体。20小时后，将该固体过滤并真空干燥。得到0.60g(47％) 标题化合物，为浅黄色晶体。从乙酸乙酯/庚烷中重结晶，得到0.40g 分析纯样品，mp183-185℃。
LCMS：MH+计算值255。实测值255.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝0.83(d，J＝7Hz，6H)，1.40(q，J＝7Hz，2H)，1.57
(nonett，J＝7Hz，1H)，3.18(m，2H)，7.10(m，3H)，7.33(t，J＝8Hz，2H)，7.87(s，br，1H)，
9.33(s，1H)；13C NMR(100MHz，DMSO-d6)：δ＝22.06，24.90，35.34，37.38，41.92，118.11，
121.46，124.16，129.15，138.81，161.43.分析计算  C15H18N4(254.34)：C，70.84；H，
7.13；N，22.03实测值C，70.88；H，7.28；N，21.90. 实施例3. 3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-2-氰基-3-(3-甲基丁氨基)丙烯酸 叔丁酯的合成
向2-{N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]硫代氨基甲酰基}氰乙酸叔丁酯 (1.12g，2.7mmol，用氰乙酸叔丁酯和3，5-双(三氟甲基)异硫氰酸苯酯 制备)的DCM溶液(15mL)中加入3-甲基丁胺(1.0mL，8.60mmol)、 硫酸镁(0.5g)和氧化汞(II)(2.0g)。所得混合物在室温下搅拌14小 时，用DCM(30mL)稀释，用硅藻土过滤，用冰冷的稀盐酸洗涤， 用盐水洗涤(2×20mL)，干燥(硫酸镁)并浓缩。残余物从庚烷中 结晶，得到0.29g(23％)标题化合物，为无色结晶，mp 128-129℃。从 母液又得到0.25g(20％)产物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝0.82(d，
J＝7Hz，6H)，1.41(s，9H)，1.43(q，J＝7Hz，2H)，1.57(nonett，J＝7Hz，1H)，3.18(q，br，J
＝7Hz，2H)，7.63(s，2H)，7.70(s，1H)，8.91(s，br，1H)，9.52(s，1H)；13C NMR(100MHz，
DMSO-d6)：δ＝21.96，24.95，28.02，37.50，41.84，61.55，79.66，115.53，118.67，119.87，
123.05(q，J＝282Hz)，130.44(q，J＝33Hz)，142，11，160.46，167.93.分析计算
C21H25F6N3O2(465.44)：C，54.19；H，5.41；N，9.03实测值C，54.27；H，5.57；N，8.84. 实施例4. 3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-3-(3-甲基丁氨基)-2-丙烯腈的合 成
向3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-2-氰基-3-(3-甲基丁氨基)丙烯酸叔 丁酯(194mg，0.417mmol)的DCM溶液(2mL)中加入三氟乙酸 (2mL)。室温下30分钟后，将该溶液浓缩，残余物再溶于四氯化碳 (10mL)中并再次浓缩。该产物用快速色谱法纯化(6g硅胶，庚烷/ 乙酸乙酯梯度)。得到45mg(30％)油状标题化合物。LCMS：MH+＝ 366。LCMS确定，该化合物与用固相合成法得到的产物相同。 实施例5. 3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-2-氰基-3-(3-甲基丁氨基)-2-丙烯 腈的合成
在0℃下，向丙二腈(0.33g，5.00mmol)的DCM溶液中先加入3，5- 双(三氟甲基)异硫氰酸苯酯(1.41g，5.20mmol)，再加入三乙胺(1.0mL)。 该混合物在室温下搅拌1小时45分钟后，加入DCM(5mL)、3-甲基 丁胺(1.0mL，8.60mmol)、硫酸镁(0.57g)和氧化汞(II)(2.54g， 11.7mmol)。所得混合物在室温下搅拌17小时，由此其变黑。然后将 该混合物过滤(硅藻土)，用DCM(60mL)稀释，用水(100mL) 和浓盐酸(2.0mL)的冰冷混合物洗涤，用盐水洗涤(3×50mL)， 干燥(硫酸镁)并浓缩。残余物用柱色谱法纯化(50g硅胶，庚烷/乙 酸乙酯梯度)，得到1.22g(63％)泡沫状标题化合物。该泡沫可从甲苯/ 庚烷中结晶，得到1.08g几乎无色的结晶，mp158-159℃。1H NMR(300
MHz，DMSO-d6)：δ＝0.87(d，J＝7Hz，6H)，1.45(q，J＝7Hz，2H)，1.60(nonett，J＝7Hz.
1H)，3.31(m，2H)，7.72(s，2H)，7.78(s，1H)，8.22(s，br，1H)，9.79(s，1H)；13C NMR(75
MHz，DMSO-d6)：δ＝22.04，24.99，36.85，37.14，59.66，116.52，117.52，121.21，123.02(q，J
＝275Hz)，131.02(q，J＝33Hz)，141，35，161.27.分析计算C17H16F6N4(390.33)：C.
52.31；H，4.13；N，14.35.实测值C，52.80；H，4.29；N，13.83. 实施例6. 3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]3-(3-甲基丁氨基)-2-(4-氯苯磺酰 基)-2-丙烯腈的合成
向3，5-双(三氟甲基)异硫氰酸苯酯(1.44g，5.31mmol)的DCM (15mL)和乙腈(5mL)溶液中先加入4-氯苯磺酰乙腈(1.10g， 5.10mmol)，然后加入三乙胺(1.0mL)。所得混合物在室温下搅拌 2小时15分钟，然后加入异戊胺(0.65mL，5.59mmol)、氧化汞(II) (2.70g，12.47mmol)和硫酸镁(0.8g)。继续搅拌2天。然后将该混 合物过滤，倒入冰水(200mL)和浓盐酸(2mL)的混合物中，使相 分离，水层用DCM(20mL)萃取2次，合并后的萃取液干燥(硫酸 镁)并浓缩。残余物用柱层析(100g硅胶，用庚烷/乙酸乙酯10∶0-3∶1 梯度洗脱)得到317mg(12％)油状标题化合物。
1H NMR(300MHz，
DMSO-d6)：δ＝0.79(d，J＝7Hz，6H)，1.39(q，J＝7Hz，2H)，1.50(nonett，J＝7Hz，1H)，
3.31(m，2H)，7.27(s，2H)，7.67-7.80(m，5H)，8.13(s，br，1H)，9.76(s，1H)；LCMS：洗脱于
16.23min，MH+：540. 实施例7. 3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-2-氰基-3-[3-(2-氧代氮杂环庚烷 (oxoazepan)-1-基)丙氨基]丙烯酸叔丁酯
向3，5-双(三氟甲基)异硫氰酸苯酯(2.83g，10.4mmol)、DCM (20mL)和氰乙酸叔丁酯(1.65mL，11.6mmol)的混合物中加入DBU (4.0mL，26.8mmol)，由此发生放热反应。所得混合物在室温下搅拌 2小时，然后加入硫酸镁(2.0g)、异戊胺(2.35mL)和氧化汞(II)(6.80g， 31.4mmol)。搅拌25小时后，该混合物与硅藻土混合，过滤，滤液 与0.5M盐酸混合。再次过滤后，萃取滤液(3×100mL DCM)，合 并后的萃取液用盐水洗涤(2×300mL，强烈乳化)，干燥(硫酸镁) 并浓缩。用柱层析(80g硅胶，用庚烷/乙酸乙酯10∶0-2∶3梯度洗脱) 得到2.23g(39％)标题化合物，为无色固体，以及0.72g(15％)3-[3，5-双 (三氟甲基)苯氨基]-2-氰基-3-(3-甲基丁氨基)丙烯酸叔丁酯。该标题化 合物样品通过重结晶进一步纯化。为无色固体，mp.167-168℃(乙酸 乙酯)。 LCMS：洗脱于15.4min，MH+：549；1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ＝1.40(s，9H)，1.43(m，4H)，1.57(m，2H)，1.71(q，J＝7Hz，2H)，2.35(m，2H)， 3.20(q，J＝7Hz，2H)，3.31(m，2H)，7.66(s，2H)，7.68(s，1H)，8.95(s，br，1H)，9.52(s，1H)； 13C NMR(100MHz，DMSO-d6)：δ＝22.93，27.93，28.11，28.32，29.23，36.44，41.55，44.47. 48.38，61.93，79.66，115.36，118.75，119.89，123.18(q，J＝275 Hz)，131.02(q，J＝33Hz)， 142.33，160.59，167.95，174.74.分析计算  C25H30F6N4O3(548.53)：C，54.74；H，5.51； N，10.21实测值C，54.62；H，5.66；N，9.97. 实施例8. 3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-3-[3-(2-氧代氮杂环庚烷-1-基)丙 氨基]丙烯腈的合成
在0℃下，向3-[3，5-双(三氟甲基)苯氨基]-2-氰基-3-[3-(2-氧代氮杂 环庚烷-1-基)丙氨基]丙烯酸叔丁酯(203mg，0.37mmol)的DCM溶液 (6.0mL)中加入TFA(6.0mL)。所得混合物在0℃下搅拌30分钟， 然后倒入冰冷的饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)中。用DCM(30mL) 稀释后，使相分离，萃取水层(3×20mL DCM)，合并后的萃取液用 盐水洗涤(2×50mL)，干燥(硫酸镁)并浓缩，得到190mg(100％) 油状标题化合物(异构体的混合物)。
LCMS：
洗脱于9.97min，MH+：449).1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝1.45-1.80(m，8H)，2.40
(m，2H)，2.95(m，1H)，3.21(m，2H)，3.35(m，6H)，3.58(s，br，1H)，7.35-7.70(m，3H). 实施例9. 2-氰基-3-(4-甲氧基苄氨基)-3-(苯氨基)丙烯酸叔丁酯的合成
在0℃下，向氰乙酸叔丁酯(1.3mL，9.12mmol)的DMF溶液 (10mL)中先加入异硫氰酸苯酯(1.2mL，10.0mmol)，然后加入三 乙胺(2.80mL)。所得混合物在0℃搅拌30分钟，在室温下搅拌30 分钟。将该混合物冷却至0℃，然后加入EDC(5.77g，30.1mmol)、 DMF(30mL)和4-甲氧基苄胺(2.65mL，20.3mmol)。在室温下搅 拌9小时后，在60℃下搅拌14小时，然后在室温下搅拌2天，将该 混合物倒在冰(150ml)和浓盐酸(4mL)上。萃取(3×30mL乙酸 乙酯)，将合并后的萃取液干燥(硫酸镁)并浓缩得到油状物，其用 柱层析(50g硅胶，用庚烷/乙酸乙酯1∶0-1∶4梯度洗脱)纯化，得到 0.43g(12％)标题化合物，为无色固体，mp.158-159℃(乙酸乙酯/庚烷)。
            1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.39(s，9H)，3.72(s，3H)，4.22(s，br， 2H)，6.89(d，J＝8Hz，2H)，7.02-7.16(m，5H)，7.32(m，2H)，8.95(s，br，0.5H)，9.18(s， 0.5H).分析计算  C22H25N3O3(379.46)：C，69.64；H，6.64；N，11.07.实测值：C，69.51；H， 6.80；N.10.89. 实施例10.一个80种不同氰烯胺阵列的自动合成
已用下列方式制备了一个80种不同氰烯胺阵列：将100mg Wang 树脂键合氰乙酸(如实施例1所述制备)同等分配到多有机合成器- “Advanced Chem Tech”的“ACT 496”的80个反应器中。然后如 实施例1中所述，80个反应器中的每一个用8种不同芳香异硫氰酸酯 之一处理，即：4-三氟甲基异硫氰酸苯酯，2-三氟甲基异硫氰酸苯酯， 2，3-二氯异硫氰酸苯酯，3-氯-4-氟异硫氰酸苯酯，2-甲氧基-4-硝基异 硫氰酸苯酯，2，4-二氟异硫氰酸苯酯，4-氰基异硫氰酸苯酯和3，5-双(三 氟甲基)异硫氰酸苯酯。然后所得硫代酰胺以能实现异硫氰酸酯-胺的 所有可能的组合的方式，用10种不同伯胺处理，即：2-甲基丙胺，1，2- 二甲基丙胺，异丙胺，1，3-二甲基丁胺，2，2-二甲基丙胺，丁胺，4-叔 丁基环己胺，1，2，2-三甲基丙胺，外-2-降冰片基胺和环己基甲胺。充分 洗涤后，所得树脂键合氰烯胺通过用50％TFA的DCM溶液处理(30 分钟)而从底物上裂开，得到一个纯度为70-＞90％(HPLC)的80种不 同氰烯胺阵列。这些样品再用甲醇溶解数次，并再次浓缩，以除去微 量TFA。最后再将这些样品溶于甲醇(2mL)和三乙胺(0.05mL)， 再次浓缩并再溶于DMSO(3.5mL)。将所得溶液用于筛选。
按照上面给出的方法，已制得以下氰烯胺衍生物I：                                   MH+ No  R1                   -NR2R3              预计值   实测值 1   4-(三氟甲基)苯基    2-(甲基丙基)氨基 2   4-(三氟甲基)苯基    (1，2-二甲基丙基)氨基 3   4-(三氟甲基)苯基    异丙基氨基 4   4-(三氟甲基)苯基    (1，3-二甲基丁基)氨基 5   4-(三氟甲基)苯基    (2，2-二甲基丙基)氨基 6   4-(三氟甲基)苯基    丁氨基 7   4-(三氟甲基)苯基    (4-叔丁基环己基)氨基      366      366 8   4-(三氟甲基)苯基    (1，2，2-三甲基丙基)氨基 9   4-(三氟甲基)苯基    2-外-降冰片基氨基 10  4-(三氟甲基)苯基    (环己基甲基)氨基 11  2-(三氟甲基)苯基    2-(甲基丙基)氨基 12  2-(三氟甲基)苯基    (1，2-二甲基丙基)氨基 13  2-(三氟甲基)苯基    异丙基氨基 14  2-(三氟甲基)苯基    (1，3-二甲基丁基)氨基 15  2-(三氟甲基)苯基    (2，2-二甲基丙基)氨基 16  2-(三氟甲基)苯基    丁氨基                    284      284 17  2-(三氟甲基)苯基    (4-叔丁基环己基)氨基 18  2-(三氟甲基)苯基    (1，2，2-三甲基丙基)氨基 19  2-(三氟甲基)苯基    2-外-降冰片基氨基 20  2-(三氟甲基)苯基    (环己基甲基)氨基 21  2，3-二氯苯基       2-(甲基丙基)氨基 22  2，3-二氯苯基        (1，2-二甲基丙基)氨基 23  2，3-二氯苯基        异丙基氨基 24  2，3-二氯苯基        (1，3-二甲基丁基)氨基 25  2，3-二氯苯基        (2，2-二甲基丙基)氨基       298      298 26  2，3-二氯苯基        丁氨基 27  2，3-二氯苯基        (4-叔丁基环己基)氨基 28  2，3-二氯苯基        (1，2，2-三甲基丙基)氨基 29  2，3-二氯苯基        2-外-降冰片基氨基 30  2，3-二氯苯基        (环己基甲基)氨基 31  2-甲氧基-4-硝基苯基  2-(甲基丙基)氨基             291      291 32  2-甲氧基-4-硝基苯基  (1，2-二甲基丙基)氨基 33  2-甲氧基-4-硝基苯基  异丙基氨基 34  2-甲氧基-4-硝基苯基  (1，3-二甲基丁基)氨基 35  2-甲氧基-4-硝基苯基  (2，2-二甲基丙基)氨基 36  2-甲氧基-4-硝基苯基  丁氨基 37  2-甲氧基-4-硝基苯基  (4-叔丁基环己基)氨基 38  2-甲氧基-4-硝基苯基  (1，2，2-三甲基丙基)氨基 39  2-甲氧基-4-硝基苯基  2-外-降冰片基氨基 40  2-甲氧基-4-硝基苯基  (环己基甲基)氨基             331      331 41  2，4-二氟苯基        2-(甲基丙基)氨基 42  2，4-二氟苯基        (1，2-二甲基丙基)氨基        266      266 43  2，4-二氟苯基        异丙基氨基 44  2，4-二氟苯基        (1，3-二甲基丁基)氨基 45  2，4-二氟苯基        (2，2-二甲基丙基)氨基 46  2，4-二氟苯基        丁氨基 47  2，4-二氟苯基        (4-叔丁基环己基)氨基 48  2，4-二氟苯基        (1，2，2-三甲基丙基)氨基 49  2，4-二氟苯基        2-外-降冰片基氨基 50  2，4-二氟苯基        (环己基甲基)氨基 51  3-氯-4-氟苯基          2-(甲基丙基)氨基 52  3-氯-4-氟苯基          (1，2-二甲基丙基)氨基             282       282 53  3-氯-4-氟苯基          异丙基氨基 54  3-氯-4-氟苯基          (1，3-二甲基丁基)氨基 55  3-氯-4-氟苯基          (2，2-二甲基丙基)氨基 56  3-氯-4-氟苯基          丁氨基 57  3-氯-4-氟苯基          (4-叔丁基环己基)氨基              350       350 58  3-氯-4-氟苯基          (1，2，2-三甲基丙基)氨基 59  3-氯-4-氟苯基          2-外-降冰片基氨基 60  3-氯-4-氟苯基          (环己基甲基)氨基 61  4-氰基苯基             2-(甲基丙基)氨基 62  4-氰基苯基             (1，2-二甲基丙基)氨基             255       255 63  4-氰基苯基             异丙基氨基 64  4-氰基苯基             (1，3-二甲基丁基)氨基 65  4-氰基苯基             (2，2-二甲基丙基)氨基 66  4-氰基苯基             丁氨基 67  4-氰基苯基             (4-叔丁基环己基)氨基 68  4-氰基苯基             (1，2，2-三甲基丙基)氨基 69  4-氰基苯基             2-外-降冰片基氨基 70  4-氰基苯基             (环己基甲基)氨基 71  3，5-双(三氟甲基)苯基  2-(甲基丙基)氨基                  352       352 72  3，5-双(三氟甲基)苯基  (1，2-二甲基丙基)氨基 73  3，5-双(三氟甲基)苯基  异丙基氨基                        338       338 74  3，5-双(三氟甲基)苯基  (1，3-二甲基丁基)氨基             380       380 75  3，5-双(三氟甲基)苯基  (2，2-二甲基丙基)氨基             366       366 76  3，5-双(三氟甲基)苯基  丁氨基 77  3，5-双(三氟甲基)苯基  (4-叔丁基环己基)氨基              434       434 78  3，5-双(三氟甲基)苯基  (1，2，2-三甲基丙基)氨基 79  3，5-双(三氟甲基)苯基  2-外-降冰片基氨基                 390      390 80     3，5-双(三氟甲基)苯基   (环己基甲基)氨基 81     苯基                    (4-甲氧基苄基)氨基            280    280 82     3-氟苯基                丙氨基                        220    220 83     3-氟苯基                己氨基                        262    262 84     3-氟苯基                炔丙基氨基                    216    216 85     3-氟苯基                (3-甲基丁基)氨基              248    248 86     3-吡啶基                丙氨基                        203    203 87     3-吡啶基                己氨基                        245    245 88     3-吡啶基                炔丙基氨基                    199    199 89     3-吡啶基                (3-甲基丁基)氨基              231    231 90     3，4-二氯苯基           丙氨基                        271    271 91     3，4-二氯苯基           己氨基                        313    313 92     3，4-二氯苯基           炔丙基氨基                    267    267 93     3，4-二氯苯基           (3-甲基丁基)氨基              299    299 94     3，5-双(三氟甲基)苯基   丙氨基                        338    338 95     3，5-双(三氟甲基)苯基   己氨基                        380    380 96     3，5-双(三氟甲基)苯基   炔丙基氨基                    334    334 97     3，5-双(三氟甲基)苯基   (3-甲基丁基)氨基              366    366 98     苯基                    苯氨基                        236    236 99     苄基                    (4-甲氧基苄基)氨基            294    294 100    苯基                    1-吡咯烷基                    214    214 101    3-(三氟甲基)苯基        (3-甲基丁基)氨基              297    297 102   4-氯-3-(三氟甲基)苯基    (3-甲基丁基)氨基              331    331 103   3-乙酰苯基               (3-甲基丁基)氨基              271    271 104   2-氯-5-(三氟甲基)苯基    (3-甲基丁基)氨基              331    331 105   3，4-二氰基苯基          (3-甲基丁基)氨基              279    279 106   4-溴-2-(三氟甲基)苯基    (3-甲基丁基)氨基              376    376 107   4，6-二甲基-2-嘧啶基     (3-甲基丁基)氨基              259    259 108   4-乙酰苯基               (3-甲基丁基)氨基              271    271 109   3，5-二氯苯基             (3-甲基丁基)氨基                   298    298 110   3-氯-4-甲苯基             (3-甲基丁基)氨基                   277    277 111   1  2，5-双(三氟甲基)苯基  (3-甲基丁基)氨基                   366    366 112   3，5-二氯苯基             (2-甲基丙基)氨基                   284    284 113   3-氯-4-甲苯基             (2-甲基丙基)氨基                   263    263 114   2，5-双(三氟甲基)苯基     (2-甲基丙基)氨基                   351    351 115   3，5-双(三氟甲基)苯基     (3-苯基丙基)氨基                   413    413 116   3，5-双(三氟甲基)苯基     (2，2，6，6-四甲基-4-哌啶基)氨基   434    434 117   3，5-双(三氟甲基)苯基     N，N-二丙氨基                      379    379 118   3，5-双(三氟甲基)苯基     2-(4-氯苯基)乙氨基                 433    433 119   3，5-双(三氟甲基)苯基     2-(2-吡啶基)乙氨基                 400 120   3，5-双(三氟甲基)苯基     4-甲基-1-哌啶基                    377    377 121   3，5-双(三氟甲基)苯基     N，N-双(2-甲基丙基)氨基            407    407 122   3，5-双(三氟甲基)苯基     1-吡咯烷基                         349    349 123   3，5-双(三氟甲基)苯基     3-(1-咪唑基)丙氨基                 403    403 124   3，5-双(三氟甲基)苯基     N-甲基-N-(3-吡啶基)甲氨基          400    400 125   3，5-双(三氟甲基)苯基     (3-氨基-2，2-二甲基丙基)氨基       380    380 126   3，5-双(三氟甲基)苯基     3-(2-氧-1-吡咯烷基)丙氨基          420    420 127   3，5-双(三氟甲基)苯基     (4-甲氧基苄基)氨基                 415    415 128   3，5-双(三氟甲基)苯基     3-羟基-1-哌啶基                    379 129   3，5-双(三氟甲基)苯基     四氢异喹啉-1-基                    411    411 130   3，5-双(三氟甲基)苯基     2，6-顺-二甲基-4-吗啉基            393    393 131   3，5-双(三氟甲基)苯基     4-[(3-三氟甲基)苯基]-1-哌嗪基      508    508 132   3，5-双(三氟甲基)苯基     4-叔丁基-1-哌啶基                  419    419 133   3，5-双(三氟甲基)苯基     1-氮杂环庚烷基                     377    377 134   3，5-双(三氟甲基)苯基     4-苯甲酰基-1-哌啶基                467    467 135   苯基                      四氢异喹啉-1-基                    275    275 136   苯基                      4-(甲基苯基)氨基                   249    249 137   3-氰基苯基                4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基              363    363 138   3-乙酰苯基            四氢异喹啉-1-基             317    317 139   3-氰基苯基            N-乙基-N-苯氨基             289    289 140   苯基                  (4-氯苯基)氨基              270    270
参考文献：
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