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可配置的动态三维阵列

申请号 CN02816288.9 申请日 2002-04-12 公开(公告)号 CN1545561A 公开(公告)日 2004-11-10
申请人 阿尔利克斯公司; 发明人 戴维·格里尔; 沃德·洛佩斯; 刘易斯·格鲁贝尔;
摘要 本 发明 一般涉及用于分析 流体 中的靶的可配置的探针阵列。这些探针包含于光陷阱中,这允许变更选择和再配置阵列中的探针的数量和 质量 。此外,阵列是动态的,在于一旦配置,光陷阱可以允许给定的光陷阱和包含的探针独立地再 定位 。
权利要求

1、一种配置和跟踪探针阵列的方法,包括:
在容器中产生至少两个可移动的光陷阱;
在容器中提供至少两个探针;
选择至少两个探针用于光陷阱内部所包含的探针阵列中的内 含物;
用光陷阱中之一捕获每个选定的探针,以配置包含在光陷阱 内部的探针阵列;并且,
通过监测包含探针的光陷阱的位置,跟踪阵列中至少一个被 捕获的探针的位置。
2、权利要求1中的方法,进一步包括通过移动包含被跟踪的探 针的光陷阱更改至少一个被跟踪的探针的位置。
3、权利要求1中的方法,其中光陷阱由两个或更多光镊,光学 漩涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼构成。
4、权利要求2中的方法,其中每个光陷阱可独立地移动。
5、权利要求2中的方法,其中每个光陷阱的移动由计算机控制。
6、权利要求4中的方法,其中每个光陷阱的移动由计算机控制。
7、权利要求4中的方法,其中至少一个探针与标有波长特定标 记的基底结合,且该至少一个探针通过利用光谱测量该标记和利用光 谱测量选择该至少一个结合的探针。
8、权利要求4中的方法,其中至少两个探针彼此具有不同的结 合或反应特性,并且通过通过根据探针不同的结合或反应特性隔离探 针选择至少一个探针,通过移动探针到容器内预定的位置并使用被隔 离的探针的位置来选择该探针。
9、权利要求8中的方法,其中预定的位置是物理的子细胞。
10、权利要求8中的方法,其中预定的位置是光学的子细胞。
11、权利要求1中的方法进一步包括,引入容器中至少一个靶, 并确定每个被捕获的探针与每个靶在其中有或没有反应。
12、权利要求11中的方法,其中被捕获的探针是生物材料。
13、权利要求11中的方法,其中被捕获的探针是化学化合物。
14、权利要求12中的方法,其中靶是生物材料。
15、权利要求12中的方法,其中靶是化学化合物。
16、权利要求13中的方法,其中靶是生物材料。
17、权利要求13中的方法,其中靶是化学化合物。
18、权利要求12中的方法,其中被捕获的探针是低核苷酸,多 核苷酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体抗原,蜂窝细胞器官, 脂,分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者它们的组 合。
19、权利要求14中的方法,其中靶是低核苷酸,多核苷酸,蛋 白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官,脂,分裂 球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者它们的组合。
20、权利要求16中的方法,其中靶选自于由低核苷酸,多核苷 酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官,脂, 分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者它们组合构成 的组中一个或者更多。
21、权利要求1的方法,进一步包括,探针全部与基底结合。
22、权利要求1的方法,进一步包括探针全部直接被光陷阱捕获。
23、权利要求1的方法,进一步包括至少一些探针与基底结合并 且至少一些探针不与基底结合。
24、权利要求21的方法进一步包括,通过移动包含探针的光陷 阱变更阵列中至少两个被跟踪的探针的位置。
25、权利要求1的方法,进一步包括产生与至少一个光陷阱的同 一性和位置相对应的数据的光学数据流。
26、权利要求24的方法,其中每个光陷阱可独立地移动。
27、权利要求24的方法,其中每个光陷阱的移动是受计算机控 制的。
28、权利要求25的方法,进一步包括用计算机接收光学数据流。
29、权利要求28的方法,进一步包括用计算机分析光学数据流。
30、权利要求29的方法,其中计算机根据光学数据流的分析指 导至少一个光陷阱的移动。
31、权利要求25的方法,进一步包括将光学数据流转换为视频 信号
32、权利要求31的方法,进一步包括用计算机接收视频信号
33、权利要求32的方法,进一步包括用计算机分析视频信号。
34、权利要求33的方法,进一步包括根据视频信号的分析利用 计算机指导一个或更多光陷阱的移动。
35、权利要求31的方法,其中视频信号用于产生图像。
36、权利要求35的方法,进一步包括操作者观察图像,并基于 图像的观察指导一个或更多光陷阱的移动。
37、权利要求25的方法,其中数据是光谱数据。
38、权利要求37的方法,进一步包括基于光谱数据的分析利用 计算机指导一个或更多光陷阱的移动。
39、权利要求24的方法,其中光陷阱由两个或更多光镊,光学 漩涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼形成。
40、权利要求26的方法,其中每个光陷阱的移动由计算机控制。
41、权利要求24的方法,其中通过光谱测量标记和利用光谱测 量结果选择至少一个探针。
42、权利要求24的方法,其中至少两个探针彼此具有不同于的 结合或反应特性,并且通过根据探针不同的结合或反应特性隔离该探 针来选择至少一个探针,通过移动探针到容器内预定的位置和使用被 隔离的探针的位置来选择该探针。
43、权利要求42中的方法,其中预定的位置是物理的子细胞。
44、权利要求42中的方法,其中预定的位置是光学的子细胞。
45、权利要求169中的方法,其中被捕获的探针是生物材料。
46、权利要求169中的方法,其中被捕获的探针是化学化合物。
47、权利要求46中的方法,其中靶是生物材料。
48、权利要求46中的方法,其中靶是化学化合物。
49、权利要求45中的方法,其中靶是生物材料。
50、权利要求45中的方法,其中靶是化学化合物。
51、权利要求45中的方法,其中被捕获的探针是低核苷酸,多 核苷酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官, 脂,分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者其组合。
52、权利要求47中的方法,其中靶是低核苷酸,多核苷酸,蛋 白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官,脂,分裂 球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者其组合。
53、权利要求49中的方法,其中靶选自于由低核苷酸,多核苷 酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官,脂, 分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者其组合构成的 组中的一个或者更多。
54、权利要求24的方法,其中探针全部与基底结合。
55、权利要求24的方法,其中探针全部不与基底结合。
56、权利要求24的方法,其中至少一些探针与基底结合并且至 少一些探针不与基底结合。
57、一种分析生物材料的方法包括:
在容器内部产生至少两个可移动的光陷阱;
在容器中提供流体介质;
在流体介质内提供至少两个用于生物材料的探针;
选择至少两个探针用于阵列中的内含物;
用光陷阱之一跟踪每个被选择的探针;
引入容器内至少一个包含生物材料的靶;和,
确定每个被捕获的探针与每个靶反应或没有反应。
58、权利要求57的方法,进一步包括通过监测包含探针的光陷 阱的位置,跟踪至少一个被捕获的探针的位置。
59、权利要求57的方法,其中被捕获的探针包含生物材料。
60、权利要求57的方法,其中被捕获的探针包含化学化合物。
61、权利要求59的方法,其中被捕获的探针是低核苷酸,多核 苷酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官, 脂,分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者其组合。
62、权利要求57的方法,其中靶是低核苷酸,多核苷酸,蛋白 质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官,脂,分裂球, 细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,RNA或者其组合。
63、权利要求57的方法,进一步包括,产生与至少一个光陷阱 的同一性和位置相对应的数据的光学数据流。
64、权利要求63的方法,进一步包括,通过移动包含探针的光 陷阱变更阵列中至少一个被捕获的探针的位置。
65、权利要求64的方法,其中每个光陷阱可独立地移动。
66、权利要求64的方法,其中每个光陷阱的移动是受计算机控 制的。
67、权利要求63的方法,进一步包括用计算机接收光学数据流。
68、权利要求67的方法,进一步包括用计算机分析光学数据流。
69、权利要求68的方法,进一步包括利用计算机基于光学数据 流的分析指导一个或更多光陷阱的移动。
70、权利要求63的方法,进一步包括将光学数据流转换为视频 信号。
71、权利要求70的方法,进一步包括用计算机接收视频信号。
72、权利要求71的方法,进一步包括用计算机分析视频信号。
73、权利要求72的方法,进一步包括利用计算机基于视频信号 的分析指导一个或更多光陷阱的移动。
74、权利要求70的方法,其中视频信号用于产生图像。
75、权利要求74的方法,进一步包括操作者观察图像,并基于 图像的观察指导一个或更多光陷阱的移动。
76、权利要求63的方法,其中数据是光谱数据。
77、权利要求76的方法,进一步包括利用计算机基于光谱数据 的分析指导一个或更多光陷阱的移动。
78、权利要求63的方法,其中光陷阱由两个或更多光镊,光学 漩涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼形成。
79、权利要求63的方法,其中至少一个探针与基底结合。
80、权利要求63的方法,其中至少一个探针不与基底结合。
81、权利要求79的方法,其中所有具有相同的结合或反应特性 的与基底结合的探针标有相同的标记。
82、权利要求81的方法,其中至少一个标记是波长特定染料。
83、权利要求82的方法,其中为选择至少一个探针,通过测量 波长特定染料的光谱响应和利用光谱测量结果选择至少一个与基底 结合的探针。
84、权利要求63的方法,其中至少两个探针彼此具有不同的结 合或反应特性,并且根据探针不同的结合或反应特性隔离该探针来选 择至少一个探针,通过移动探针到容器内预定的位置和利用被隔离的 探针的位置来选择该探针。
85、权利要求63中的方法,其中预定的位置是物理的子细胞。
86、权利要求84中的方法,其中预定的位置是光学的子细胞。
87、一种配置探针阵列的方法包括:
在容器内部产生至少两个可移动的光陷阱;
在容器内部提供至少两个探针;和,
通过用光陷阱之一选择每个探针来配置至少两个探针的阵列。
88、一种配置和再配置探针阵列的方法,包括:
定向一聚焦光束在相位模式化光学元件上以形成多个来处相位 模式化光学元件的子光束;
定向该多个子光束在聚焦透镜后孔径上,以传送子光束通过聚焦 透镜,并会聚从聚焦透镜发出的子光束,以在容器内产生可移动的光 陷阱;
在容器内提供大量探针;
选择至少两个探针用于包含在光陷阱内的探针阵列中的内容物;
用光陷阱之一捕获每个被选定的探针,以配置包含在光陷阱内的 探针阵列;和
通过移动包含探针的光陷阱,变更至少一个包含在光陷阱的内的 探针的位置,以再配置包含在光陷阱内的探针阵列。
89、权利要求90的方法,其中相位模式化光学元件具有静态的 表面。
90、权利要求91的方法,其中静态的表面包含两个或更多离散 的区域。
91、权利要求90的方法,其中至少一个包含于光陷阱内的探针 的位置通过改变光束被定向到的静态表面的离散区域而被变更。
92、权利要求89的方法,其中静态表面是基本连续变化的。
93、权利要求89的方法,其中至少一个光陷阱的位置通过改变 光束被定向到的静态表面的离散区域变更。
94、权利要求89的方法,其中光束改变光学元件是光栅,全息 图,模版,光整形全息滤波器,透镜,反射镜,棱镜,或波片。
95、权利要求90的方法,其中每个离散区域是光栅,全息图, 模版,光整形全息滤波器,透镜,反射镜,棱镜,或波片。
96、权利要求88的方法,其中相位模式化光学元件是动态的。
97、权利要求96的方法,其中至少一个包含于光陷阱内的探针 的位置通过改变动态相位模式化光学元件而被变更。
98、权利要求97的方法,其中至少一个光陷阱的形态通过改变 动态相位模式化光学元件而被改变。
99、权利要求97的方法,其中改变的光陷阱是光镊,光学漩涡, 光学瓶颈,光学旋转器或光笼。
100、权利要求91的方法,其中至少一个光陷阱的形态通过移动 离散静态表面而改变。
101、权利要求100的方法,其中被改变的光陷阱是光镊,光学 漩涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼。
102、权利要求97的方法,其中动态相位模式化光学元件的改变 是在其表面上编码的全息图中的变化。
103、一种用于形成和跟踪包含探针的光陷阱的系统包括:
用于产生聚焦光束的光源
基本透明的容器;
用来产生照明容器的内含物的光束的图像照明源;
用于定向的分束器;
相位模式化光学元件,其用于接收来自光源的聚焦光束,并将其 衍射成至少两个子光束,相位模式化光学元件具有一个表面用于定向 每个子光束在聚焦透镜的后孔径上,该表面是可改变以改变至少一个 子光束的相位剖面和/或取向;
用于会聚每个子光束以形成用于包含探针的光陷阱的聚焦透镜; 和
用于接收照明容器中的内含物的光束,并跟踪至少一个光陷阱的 移动和内含物的监控器。
104、权利要求103的系统,进一步包括,包含有一入口的容器。
105、权利要求103的系统,进一步包括,包含有一出口的容器。
106、权利要求8的方法,其中探针是利用由光陷阱,流动通路 或微毛细管的移动而被隔离的。
107、权利要求42的方法,其中探针是利用由光陷阱,流动通路 或微毛细管的移动而被隔离的。
108、权利要求84的方法,其中探针是利用由光陷阱,流动通路 或微毛细管的移动而被隔离的。
109、权利要求63的方法,其中靶选自于由低核苷酸,多核苷酸, 蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官,脂,分 裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,和RNA构成的组中的一个 或者更多。
110、权利要求9的方法,其中探针是利用由光陷阱,流动通路 或微毛细管的移动而被隔离的。
111、权利要求103的系统,其中相位模式化光学元件是动态的, 并且其进一步包括:
第一计算机,以控制由相位模式化光学元件引起的衍射;和,
第二计算机,以保持包含于光陷阱中的每个探针的记录。
112、权利要求2的方法,其中是基于编码相位模式化光学元件 所引起的每个光陷阱的预定移动,跟踪被捕获的探针的移动。
113、一种用于形成和跟踪包含结合于靶的探针的光陷阱的系统, 包括:
与靶结合的多个探针;
用于产生聚焦光束的光源;
基本透明的容器;
图像照明源,用于产生照明容器中的内含物的光束;
分束器,用于定向产生于光源的聚焦光束和照明容器中的内含物 的光束;
相位模式化光学元件,其用于接收来自光源的光束,并将其衍射 成至少两个子光束,相位模式化光学元件具有一个表面用于定向每个 子光束在聚焦透镜的后孔径上,该表面是可改变的以改变至少一个子 光束的相位剖面和/或取向;
聚焦透镜,用于会聚每个子光束以形成包含与靶结合的探针的光 陷阱;和
监控器,用于接收照明容器中的内含物的光束,并跟踪至少一个 光陷阱的移动和内含物。
114、权利要求113的系统,其中探针是生物材料。
115、权利要求113的系统,其中探针是化学化合物。
116、权利要求114中的系统,其中靶是生物材料。
117、权利要求114中的系统,其中靶是化学化合物。
118、权利要求115中的系统,其中靶是生物材料。
119、权利要求115中的系统,其中靶是化学化合物。
120、权利要求114中的系统,其中探针选自于由低核苷酸,多 核苷酸,蛋白质,肽,cDNA,和RNA构成的组中的一个或者更多。
121、权利要求116中的系统,其中靶选自于由低核苷酸,多核 苷酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官, 脂,分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,和RNA构成的组中 的一个或者更多。
122、权利要求118中的系统,其中靶选自于由低核苷酸,多核 苷酸,蛋白质,多糖,配合体,细胞,抗体,抗原,蜂窝细胞器官, 脂,分裂球,细胞聚集体,微生物,肽,cDNA,和RNA构成的组中 一个或者更多。
123、权利要求2中的方法,其中至少一个光陷阱的移动选自于 由在固定位置的旋转,在非固定位置的旋转,在二维中的移动,和在 三维中的移动构成的组中的一个或者更多。
124、权利要求2中的方法,进一步包括通过改变相位模式化光 学元件的表面,移动包含被跟踪的探针的光陷阱。
125、权利要求103中的系统,其中相位模式化光学元件具有静 态表面。
126、权利要求125中的系统,其中静态表面包括两个或更多离 散区域。
127、权利要求126中的系统,其中静态表面是可移动的,以使 聚焦光束对准静态表面的被选定的区域。
128、权利要求2中的方法,其中相位模式化光学元件具有静态 表面,该静态表面具有两个或更多离散的区域,并且至少一个光陷阱 的位置通过改变光束被定向到的静态表面的离散区域而被变更。
129、权利要求103中的系统,其中相位模式化光学元件具有基 本连续变化的静态表面。
130、权利要求127中的系统,其中相位模式化光学元件选自于 包含光栅,全息图,模版,光修整全息图滤波器,透镜,反射镜,棱 镜,或波片的组。
131、权利要求126中的系统,其中每个离散的区域选自于包含 光栅,全息图,模版,光修整全息图滤波器,透镜,反射镜,棱镜, 或波片的组。
132、权利要求103中的系统,其中相位模式化光学元件是动态 的。
133、权利要求2中的方法,其中相位模式化动态元件是动态的, 并且改变相位模式化光学元件改变至少一个光陷阱的位置。
134、权利要求4中的方法,其中相位模式化动态元件是动态的, 并且改变相位模式化光学元件改变至少一个光陷阱的位置。
135、权利要求2中的方法,其中相位模式化动态元件是动态的, 并且改变相位模式化光学元件改变至少一个光陷阱的形式为光镊,光 学漩涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼。
136、权利要求2中的方法,其中相位模式化光学元件具有静态 表面,该静态表面包含两个或更多离散区域,并且至少一个光陷阱的 形式通过移动静态表面而被改变。
137、权利要求136中的方法,其中改变的光陷阱的形式选自于 由光镊,光学漩涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼构成的组。
138、权利要求132中的系统,其中相位模式化光学元件选自于 组中的至少一个,该组包括计算机生成衍射图案,相移材料,液晶相 移阵列,微镜阵列,空间光调制器,电光偏转器,声光调制器,变形 镜,反射MEMS阵列。
139、权利要求132中的系统,进一步包括一计算机以控制动态 相位模式化光学元件。
140、权利要求103中的系统,进一步包括子细胞在容器内用于 隔离至少一个包含探针的光陷阱。
141、权利要求140中的系统,其中子细胞是物理的子细胞。
142、权利要求150中的系统,进一步包括一个计算机,以变更 位形成图案光学元件来改变至少一个子光束的取向且移动相应的光 陷阱以包含探针。
143、权利要求103中的系统,其中光源是激光,其用于产生具 有绿色光谱波长的聚焦光束。
144、权利要求103中的系统,其中光源是激光,其用于产生具 有可见光蓝色光谱波长的聚焦光束。
145权利要求103中的系统,其中光源是激光,其用于产生具有 可见光红色光谱波长的聚焦光束。
146、权利要求103中的系统,其中光源产生具有约400nm到约 1060nm范围的波长的聚焦光束。
147、权利要求103中的系统,其中光源是激光束
148、权利要求103中的系统,进一步包括用于接收光学数据流 的计算机。
149、一种用于形成光陷阱阵列的装置,包括:
用于产生光束的光源;
具有顶部和底部的聚焦透镜,所述底部形成后孔径;
相位模式化光学元件,其用于接收聚焦的光束,并将其衍射成至 少两个子光束,相位模式化光学元件具有一个表面用于将每个子光束 定向在聚焦透镜的后孔径上;
具有第一和第二端的第一光通道,第一端与相位模式化光学元件 相通;
具有第一和第二端的第二光通道,第一端与第一光通道的第二端 交叉;
具有第一和第二端的第三光通道,第一端与第二光通道的第二端 相通;
第一反射镜,其用于反射从相位模式化光学元件发出的子光束通 过第一光通道;
第一组传递光学装置,其设置在第一光通道中,其被准直以接收 第一反射镜所反射的子光束;
第二组传递光学装置,其设置在第一光通道中,其被准直以接收 通过第一组传递透镜的子光束;
第二反射镜,其位于第一光通道和第二光通道的交点,其被准直 以反射通过第二组传递光学装置和第三光通道的子光束;和
第三反射镜,其其设置在第三光通道之内,用于反射通过第三光 通道的子光束到聚焦透镜的后孔径,从而形成光陷阱阵列。
150、权利要求149的装置,进一步包括,用于产生照明光束的 照明源,其设置在邻近聚焦透镜的顶部。
151、权利要求150的装置,其中第三反射镜是二向色分束器, 用于引导光源产生的聚焦光束和照明源产生的光束。
152、权利要求149的装置,其中每组传递光学装置选自于对称 空气间隙单镜片和对称空气间隙双合透镜。
153、权利要求149的装置,其中每组传递光学装置包含选自于 凸透镜和凹透镜所组成的组中的透镜。
154、权利要求149的装置,其中第一和第二组传递光学装置是 对称空气间隙的,并间隔一定距离以结合作为远摄镜头。
155、权利要求25的方法,进一步包括引进容器至少一个靶,并 确定每个被捕获的探针与每个靶在其中有或没有反应。
156、与权利要求1一致的方法,进一步包括,通过传递探针从 一个光陷阱到另一个光陷阱,移动至少一个被捕获的探针。
157、与权利要求1一致的方法,进一步包括,通过传递探针从 第一组光陷阱到第二组光陷阱,移动至少三个被捕获的探针。

说明书全文

1.发明的领域

本发明一般涉及探针阵列。尤其是,本发明涉及一种系统和方法, 这种系统和方法使用了多个光陷阱,以形成一个可能是或可能不是与 基底结合的可配置的动态探针阵列。

2.相关技术领域的讨论

有发展前景的反应探针(reactive probes)的阵列用于分析和其他 化学和生物测试和试验中具有很长的历史。例如,阵列经常用于遗传 学,生物化学,和生物学领域以分析生物学或化学材料的样品(称为 靶)。被分析的样品经常仅仅可提供相当小的量。一些材料的这种有 限的供应导致了微阵列的发展,该微阵列用于在一个小阵列中提供相 对高密度的探针,以对少量样品中的的靶分析。

用于生物材料的测试中的微阵列常常被称为生物芯片。两个主要 的关于生物芯片的应用是:关于一个特殊核酸的序列信息的提取,即, 无论核酸相应于一个生物体的全部基因组,一个单个基因,还是一个 单个基因的一部分(美国专利US6,025,136);和基因表达式的评定。 (参见Schena,Ad.et al.“Quantitative monitoring of gene expression patterns with a complimentary DNA microarray”,Science 270(5235): 467-70(Oct.20,1995);D.J.and Winzeler,E.A.,“Genomics,gene expression and DNA arrays”,Nature 405(6788):827-836(2000)和 Ekins,R.and Chu,F.<RTI W.,“Microarrays:their origins and applications”,Trends in Biotechnology 17:217-18(1999).)

常规的微阵列包括低核苷酸探针的或者线状或二维结构,附在一 个固体支撑(基底)的平坦表面上。不同类型的低核苷酸以预定的位 置固定在基底上。从而,微阵列一旦形成,探针的位置和由此与探针 起反应的任意靶的位置始终是已知的。探针的固定或者是通过被称为 原位照相平板印刷技术合成(in situ photolithography synthesis)(美 国专利US5,837,832和US5,143,854)的工艺直接合成低核苷酸到基 底上来实现,或者是在它合成完后通过低核苷酸的固定来实现。

这样的微阵列的一个缺点是它们的线性或二维结构提供了有限 的探针能被固定的表面区域,从而对分析靶的探针的密度设定了一个 限制。在靶(DNA或DNA碎片)和探针(固定的低核苷酸)之间的 DNA杂交的情况下,杂交速率由靶能够与探针接触起来的速率控制。 因此,探针的密度越高,杂交的速率越大。

这样的微阵列的第二个缺点是由它们的构造的方法引起的。一旦 微阵列制备好,探针的类型和数量也就固定了。

在对少量的样品中的靶进行分析的另一种方法中,探针固定在小 珠状基层的表面。(Kambara & Mitsuhashi.的未决的专利WO 00/61198)每个包含一个不同探针的小珠用各不相同的标签标记,从 而,在完成分析后,允许通过分辨哪一个小珠有什么标签来识别每个 探针和相结合的靶(见WO 00/71243)。

通过物理地移动小珠,同时探针固定于导杆,毛细管,凹槽,或 薄板内的孔中,然后清洗带有靶的小珠,小珠和探针的同一性被保持。 虽然小珠的非平面特性确实比微阵列探针为靶提供了更大的表面区 域以相互作用,但在整个分析过程中小珠仍然必须保持预定的顺序以 以保持支撑哪一个探针的小珠或探针必须连接的小珠,以及在分析后 被检查的每个小珠的同一性的记录以确定其同一性。

微阵列和小珠分析的另外一个缺点是需要探针物理固定到基底 上。在一些情况中,这种固定本身而且自然而然地改变探针,或影响 探针正用于分析的过程。在其他情况中,初始分析期间或之后,如果 整个分析过程中已知探针的同一性,而且阵列的结构能容易改变,那 么可得到对探针的数量和质量进行想要的改变的信息。然而,不管微 阵列还是小珠分析,这种改变都是不可能的。

在非相关技术领域中,已知的是用多个同时产生的光镊光学地捕 获粒子。(见颁发给Grier&Dufresne的美国专利US 6,055,106)光镊 基于粒子的介电常数,使用一束光的梯度来捕获粒子。为了将能量 减到最小,具有高于环境介质的介电常数的粒子会移动到光镊的区 域,那里电场强度最高。

能用于光学捕获粒子的其他类型的捕获包括,但不限于,光学漩 涡(optical vortices),光学瓶颈(optical bottles),光学旋转器(optical rotators)和光笼(light cages).光学漩涡产生一个环绕零电场的区 域的梯度,其用于控制介电常数低于环境介质的粒子,或者反射性的 粒子,或者被光镊排斥的其他类型粒子。为了使其能量最小化,这种 粒子会移动到电场强度最低的区域,即在适当形状的激光束的焦点的 零电场区域。光学漩涡提供了一个很象炸面圈(环形室)中的孔的零 电场的区域。光学梯度是径向的,在炸面圈的圆周具有最高电场。光 学漩涡在炸面圈的孔中滞留住一个小粒子。滞留是通过在沿着零电场 线的小粒子上滑动漩涡实现的。

光学瓶颈不同于光学漩涡在于它只在焦点有一个零电场,而在围 绕焦点的所有其他方向上,即在漩涡的端部,有非零电场。光学瓶颈 可以用于捕获原子和纳米团簇,它们由于太小或吸收性太强以至于不 能用光学漩涡或光镊捕获。(J.Arlt & MJpadgett.“Gneration of a beam with a dark focus surrounded by regions of higher intensity:The optical bottle beam,”Opt.Lett.25,191-193,2000.)

光学旋转器是一种最近记载的光学工具,它提供了一种捕获目标 的螺旋形臂的模式。改变模式会使得捕获的目标旋转。 (L.paterson,M.P.MacDonald,RArlt,RSibbett,P.E.Bryant,and K. Dholakia,“Controlled rotation of optically trapped microscopic particles,”Science 292,912-914,2001.)这类工具可以用于控制非球形 的粒子和驱动MEMs装置或纳米机械装置。

光笼(Neal美国专利US5,939,716)广义地讲,其与光学漩 涡在宏观上是同族。光笼形成光镊的一个时间平均环来环绕太大或反 射性太强以至于不能被捕获的粒子,其介电常数低于环境介质。然而, 不同于漩涡,产生了非零电场区。光学漩涡,虽然使用上类似于光镊, 但是操作原理相反。

存在对一种分析方法和系统的需求,其中在没有将探针固定到基 底上时,能够评估探针与靶的相互作用。还存在对形成可配置的(和 再配置的)探针阵列的方法和系统的需求,该方法在整个分析过程中 保持探针的同一性,而与探针的位置无关。本发明满足这些和其他的 需要,并且提供了进一步相关的优点。

发明概要

本发明提供一种构造,配置和使用三维探针阵列的新颖的和改进 的方法和系统。

在一个容器中产生光陷阱。通过使光束,例如激光束,定向在一 个光学元件来产生光陷阱,该光学元件通过组合(patterning)其相位 改变光束以产生子光束。该子光束反过来通过透镜聚焦,并产生光学 捕获所必要的梯度条件。然后,每个具有已知的特性的探针加入容器。 选择用于给定的分析的探针,然后每个探针通过将其包含于光陷阱中 而被选定

形成阵列的探针的数量和质量通过使用光陷阱以增加,去掉,或 取代探针而很容易被重新配置。在阵列中,探针的排列相对于彼此也 是动态的,因为当保持所选择的构成阵列的的探针的同一性的同时, 能够改变探针彼此之间的空间关系。因此,阵列和它的每个探针在容 器内也都可以作为一个整体或者单独地在三维上移动且可以定位

当探针保持包含在光陷阱中时,不管它是否已重新定位在容器 中,也不管它在阵列中的空间位置“顺序”的任何改变,可以通过知 道包含探针的光陷阱的同一性而保持探针的同一性。此外,光陷阱可 以把探针传递到另外一个光陷阱,以此类推,同时跟踪探针的光学捕 获收容(custody)链从而保持光陷阱中所包含的探针的同一性。

本发明的其它特征和优点将会在下面的说明书中和附图中部分 地提及,其中描述和显示了本发明的优选实施例,而且部分地,在仔 细研读以下结合附图的详细说明后,这对于本领域的技术人员来说, 这将是显而易见的,或者也可以通过本发明的实践获悉。本发明的优 点可以通过在后附的权利要求中特别地指出的手段和结合来实现和 得到。

附图描述

图1显示了形成可配置的探针阵列的系统的部分剖面侧视图。

图2显示了包含在光陷阱内的自由探针。

图3显示了用来形成探针阵列的系统的概略图。

图4显示了用多个静态区改变元件的光束。

图5A显示了探针的第一有效运动。

图5B显示了探针的第二有效运动。

图6A显示了用于形成光陷阱的小型系统的组成视图。

图6B显示了图6A的装有小型系统的倒置的显微镜

优选实施例的详细描述

为了描述本发明的原理和操作,下面将相当详细地描述本发明的 几个特定实施例。但是,可能作各种变更,而本发明的范围不受下述 的示范性实施例限制。例如,虽然对于基因序列和DNA杂交特别参 考生物学系统和分析,但是,可以理解该方法和系统在下面所述的领 域同样实用,例如光学电路制造和测试,纳米复合材料结构和测试, 光电装置的制作,电子组元测试,全息数据存储矩阵的集合(assembly) 和测试,化学分析,基因组分析,蛋白质组学分析,组合化学的简易 化,胶体的自集结的促进,和探测非生物材料。
为了方便和作为参考但不作为限制,在以下的说明书中使用某些 技术术语。下面提供了简短的定义:
A.“子光束”是指通过定向一束光或其它能源束,例如由激光或 发光二极管准直输出所产生光束,经过介质所产生的光或其它能源 的子光束,,其中介质将其衍射为两束或更多的子光束。一个子光束 的例子将是衍射出光栅的更高阶激光束。
B.“相位剖面(Phase profile)”是指光束或子光束的横截面中 的光或其它能源的相位。
C.“相位模式化(Phase patterning)”指赋予光束或者子光束的模 式化的相移,该相移改变光束或子光束的相剖面图,其包括,但是不 限于,衍射、相位调制、模式形成、分束、会聚、分散、成形,以及 其它控制光束或子光束。
D.“探针”指有选择地与靶结合或与靶反应的生物或其它化学材 料。探针包括,但不限于,低核苷酸,多核苷酸,化学化合物,蛋白 质,缩酸,脂,多糖,配合体,细胞,抗体抗原,细胞器官,脂, 分裂球,细胞聚集体,微生物,cDNA,RNA等等。
E.“靶”是指一种生物或其它化学材料,该材料在样品中的存在 与不存在通过靶与探针结合或靶与探针反应来探测。例如,由基因材 料形成的靶的存在是通过靶的基因材料和探针的基因材料(其具有为 杂交所必需的特定的特性,即互补的结构(complimentary structure)) 的反应,如杂交反应,而被探测。靶材料还包括,但不限于,低核苷 酸,多核苷酸,化学化合物,蛋白质,脂,多糖,配合体,细胞,抗 体,抗原,细胞器官,脂,分裂球,细胞聚集体,微生物,缩氨酸, cDNA,RNA等等。
如图1所示,探针500-504可以通过任何合适的粘合工艺或规程 (protocol),与任何合适的基底结合或反应。合适的基底的一个重要特 性是,它是一种可以被光陷阱包含或操纵的材料。典型的电介质基底 包括小珠,不规则的小颗粒,或其它规则的小颗粒。构成合适的基底 的材料包括,但不限于,可控多孔玻璃(control pore glass),陶瓷, 石,二,乳胶,塑料,例如聚苯乙烯,甲基苯乙烯 (methylstyrene),聚甲基丙烯酸甲酯,顺磁材料,thoriosol,石墨, 聚四氟乙烯,交叉链接右旋糖苷,例如琼脂糖,纤维素,尼龙,交叉 链接胶束,脂质体,和囊。
如图2显示的另一个可供选择的实施例所示,本发明的方法还包 括使用一个或使用多个光陷阱1005(显示一个)以包含未粘合到基 底上的一个或多个探针505(显示一个)。应当理解的是,可配置的 阵列可以仅包含粘合的探针、非粘合的探针,或者粘合的和非粘合的 探针的组合。如果有的话,选择粘合和非粘合探针的什么混合物,可 能会部分地受到探针的物理特性的影响。具体地,某些探针的性质, 例如皮肤细胞,可以改变为不与基底的粘合。相反地,其它探针例如 蛋白质的作用,可以通过除去基底保持探针/蛋白质的第三结构而被 更好地使用。
图1显示了用于分析生物材料的与基底粘合的探针500-504的可 配置阵列8。使用由聚焦的子光束2000-2004构造的可移动的光陷阱 1000-1004把探针配置在主细胞(subject cell)10中。主细胞10是一个 由基本透明的材料构造的容器(vessel),其允许子光束通过且不影响光 陷阱的形成。
图3显示的是产生和改变可配置的探针阵列的位置的系统的概 略图,通常标记为20。通过传播平行光,最好是由激光器102产生 的激光束100,到光束分束器30上的A’区域,在容器10中产生可移 动的光陷阱1000-1004(图1)。光束之一,即光束31,来自激光器 102并被重定向以便从光束分束器30上的A’区域继续前进到相位模 式化光学元件(phase patterning optical element)22上的区域A。然 后,相位模式化光学元件22所产生的每个子光束经过位于聚焦透镜 12的后孔径28的区域B。子光束由聚焦透镜12会聚。由此产生的聚 焦子光束通过产生在三维包含和控制探针所必需的梯度条件来形成 光陷阱1000-1004。为了清楚起见,图1中只显示了五组探针、子光 束和光陷阱,但是应当理解的是,根据分析的性质,范围和其它参数 和产生光陷阱的系统的能力,可以使用更多或更少的数量。
可以使用任何合适的激光器作为激光束100的能源。可用的激光 器包括固态激光器,二极管激光器,气体激光器,染料(dye)激 光器,亚历山大(alexanderite)激光器,自由电子激光器,VCSEL 激光器,二极管激光器,Ti-兰宝石激光器,掺杂YAG激光器,掺杂 YLF激光器,二极管泵浦YAG激光器,和闪光灯泵浦YAG激光器。 在10mW到5W之间工作的二极管泵浦Nd:YAG激光器是优选的。 用于形成研究生物材料的阵列的激光束100的优选波长包括:红外 线,近红外线,可视红(visible red),绿,和可视蓝(visible blue) 波长,具有从约400nm到约1060nm的波长是最优选的。
光束分束器30由二向色镜,光能隙反射镜(photonic band gap mirror),全向反射镜(omni directional mirror),或其它相似的装置 构成。光束分束器30有选择地反射用于形成光陷阱的光的波长,并 传输其它波长。然后,从光束分束器的A’区域所反射的部分光经过 编码的相位模式化光学元件22的区域A,这些相位模式化光学元件 22基本上设置于与聚焦透镜12的平面的后孔径28配结的平面24中。
当激光束100通过相位模式化光学元件22被定向时,相位模式 化光学元件产生具有改变了的相剖面的多个子光束。根据想要的光陷 阱的数量和类型,这种改变可以包括衍射,波前整形,相移,转向 (steering),分散和会聚。基于所选择的相位剖面,相位模式化光学 元件可以用于产生以下形式的光陷阱:光镊,光学漩涡,光学瓶颈, 光学旋转器,光笼,和这些形式中的两个或更多的组合。
在那些子光束的相位剖面在外围强度较小而从外围向内的区域 强度较大的实施例中,过分填充后孔径28的低于约15%,与不过分 填充后孔径28相比,用于形成在外围具有更大强度的光陷阱。
根据合适的相位模式化光学元件如何定向聚焦光束或其它能源 束,合适的相位模式化光学元件的特征为透射的或折射反射的。透射 折射光学元件透射光束或其它能源束,而反射折射光学元件反射光束 或其它能源束。
相位模式化光学元件也可以分类为具有静态表面的或具有动态 表面的。合适的静态相位模式化光学元件的例子包括那些具有一个或 更多固定表面区域的光学元件,例如光栅,包括散射光栅、反射光栅、 和透射光栅,全息图,包括多色全息图,模板,光整形全息图滤波器, 多色全息图,透镜,反射镜,棱镜,波片等等。静态透射的相位模式 化光学元件40,如图4所示,其特征为固定表面41。然而,在一些 实施例中,相位模式化光学元件本身是可移动的,通过相对激光束移 动相位模式化光学元件以选择合适的区域,从而允许选择一个以上的 固定表面区域42-46。静态相位模式化光学元件可以固定在轴 (spinder)47上,并绕一个可控制电动机(未示出)旋转。在图4所示 的实施例中的静态相位模式化光学元件具有固定表面41和离散区域 (discreet regions)42-46。在静态相位模式化光学元件的其它实施 例中,无论是透射的还是反射的,固定表面41具有一个包含基本上 连续改变的区域的非均匀表面,或者离散区域和基本连续改变的区域 的组合。
具有其功能与时间有关的适当的静态相位模式化光学元件的例 子包括:计算机生成衍射图案,相移材料,液晶相移阵列,微镜阵列, 包括活塞式微镜阵列,空间光调制器,电光偏转器,声光调制器,变 形镜,反射MEMS阵列等等。因为具有动态相位模式化光学元件, 所以包含相位模式化光学元件的介质编码能被改变的全息图,以赋予 模式化的相移给聚焦光束,这导致在聚焦光束的相位剖面的相应改 变,例如衍射,或会聚。另外,介质可以被变更以产生光陷阱的位置 的变化。介质可以改变以独立地移动每个光陷阱,这是动态相位模式 化光学元件的优势。
优选的动态光学元件包括纯相位(phase-only)空间光调制器例如 日本Hamamatsu制造的“PAL-SLM系列X7665”,或者由科罗拉多 州的Boulder Nonlinear Systems of Layafette制造的“SLM512N15’ 和SLM512SA7”。这些相位模式化光学元件计算机控制的以通过编码 在介质中的全息图产生子光束2000-2004(图1),其中,该介质能被 改变以产生子光束并选择子光束的形式。
在一些实施例中,用于形成阵列的光陷阱的形式和/或光陷阱的 位置被改变,并由此被配置和被再配置。该形式可以从其原始的形式 改变为以下形式:光镊,光学旋涡,光学瓶颈,光学旋转器或光笼。 光陷阱可以在二维或三维中移动。
相位模式化光学元件还可以用于给予激光一个特定的拓扑模式, 例如,通过将Gaussian模式转换成Gaussian-Laguerre模式。因此, 一个子光束可以被形成Gaussian-Laguerre模式,而另一个子光束可 以被形成Gaussian模式。
探针配置在容器10中。容器10是一个由基本透明的材料构成的 主细胞,这允许子光束经过且不影响光陷阱的形成。在那些实施例中, 在基底用波长特定的染料标记处,主细胞对该特定波长应该是透明 的。此外,主细胞应该由对于基底是惰性的材料构成。例如,生物基 底,如细胞,蛋白质,和DNA不应该粘到主细胞的表面上,并一定 不会被材料改变或者破坏。
具有为与感兴趣的靶结合和/或反应所必需的特殊性质的探针被 选择以增加到容器中和包含到可配置阵列中。在一些实施例中,探针 与基底粘合处,基底被标有标记(如波长特定的染料)以利于探针的 选择。在优选实施例中,所有粘合具有相同粘合特性或反应特性的探 针的基底标有相同类型的标记。当基底标有波长特定的标记时,探针 500-504的选择可以通过把与带有标记的基底粘合的探针加入到容器 10中来完成。然后,如图3中所示,探针的带有标记的基底的光谱 测量可以用于选择(或不选择)包含在阵列中的探针。在一些实施例 中(图2)探针可以不粘合到基底上并且还可以被标记。
在选择未被标记的探针以形成所有或部分阵列的实施例中,探针 可以依次地加入容器10中。在这样的情形下,探针的同一性可以通 过加载顺序知道或者探针的同一性可以根据加入探针的时间得知。作 为选择,彼此具有不同粘合特性或反应特性的探针,可以根据性质的 不同,被隔离到不同的预定位置。然后根据探针在容器中的位置选择 探针。
如图3中所见,生物材料的样品的光谱可以用成像照明光源39 完成,其既适合于光谱学又适合于偏振光后向散射(polarized light back scattering),前者用于定估化学同一性,后者适合于测量内部结 构的尺寸,例如原子核尺寸。在一些实施例中,使用这样的光谱学方 法,细胞被查询,且探针阵列由挑选出的被查询的细胞创建。例如, 计算机38可以用于分析光谱数据,并用于识别可疑的癌性的,癌前 的和/或非癌性的细胞类型。然后计算机可以采用信息以引导光陷阱 包含被选择的细胞类型。被包含的细胞然后可以根据所包含的细胞与 靶(例如其它细胞,抗体,抗原,和其它生物材料,或药品和其它化 学药品)的反应或粘合,而用作分析中的探针。本领域技术人员会认 识到,根据对癌细胞特殊的参数,用于查询和集中细胞的方法学可以 被改变,用于查询和/或分离分裂球,细胞或其它材料,而不背离本
发明的范围。
在其它实施例中,带有标记的或没有标记的探针,例如具有不同 的粘合或反应特性的没有标记的探针可以放置在一连串的设置于容 器10中的子细胞16中。在图1中,为清楚起见,只显示了一个子细 胞。然而,应当理解的是,可以提供多个这样的子细胞。在一些实施 例中,子细胞的边界由光陷阱构成。许多置于正确的方位的光陷阱产 生光学子细胞,其可以执行与物理子细胞16相同的功能。
子细胞16中的探针的布置采用了任何合适的手段,包括用光陷 阱,通过流体通道,通过微毛细管或通过其它等效的机构移动。在每 个子细胞中,放置了具有相同粘合或反应特性的一个或更多探针。然 后,根据包含探针的子细胞,选择包含在阵列中的探针。
然后通过在光陷阱1000-1004中包含探针,使用光陷阱1000-1004 捕获所选择的探针500-504。一组这样的被包含的探针从而被配置以 形成阵列。
发明的方法和系统本身提供用于跟踪每个光陷阱的移动和内容 的半自动或自动的过程。该移动可以通过摄象机,频谱,或光学数据 流被监测,其提供计算机控制探针的选择,和用于调整光陷阱所包含 的探针的类型的光陷阱信息的产生,和形成阵列的探针的成份。在其 它实施例中,根据通过编码相位模式化光学元件所引起的每个光陷阱 的预定的移动跟踪所述移动。此外,在一些实施例中,计算机用于保 持包含在每个光陷阱中的每个探针的记录。
返回到分束器30,分束器30还提供了来自成像照明光源39的 光束32,其通过主细胞10形成与由光陷阱所包含的探针的定位和位 置得出的一个或更多的子光束对应的光学数据流。
然后,光学数据流可以被操作者36的视觉监查34a、利用光谱设 备34b、和/或视频监测34c来观察、转换为视频信号、监测或分析。 光学数据流32还可以由监测强度的光电探测器或任何合适的装置处 理以将光学数据流转换为数字数据流用于计算机38使用。
为了构造阵列,操作者36和/或计算机38会调整由相位模式化 光学元件22编码的全息图,以引导每个光陷阱的移动来获得所选择 的探针并捕获它。多个带有被包含的探针的光陷阱形成配置的阵列的 组分,至于探针的组分或位置,根据使用者的需要,该阵列可以再配 置。使用光学数据流,一个或更多被捕获的探针的位置可以被识别, 且它们的位置可以被监测。基于这样的信息,相位模式化光学元件的 表面可以被改变,在一些实施例中被独立地改变,以改变包含探针的 一个或更多的光陷阱的形式。
另外,阵列中一个或更多的被捕获的探针的位置可以通过监测包 含它的光陷阱的位置而被跟踪。然后,使用这样的信息,通过改变相 位模式化光学元件的表面,阵列中任何给定的探针都可以独立地重定 位在主细胞中,并且通过包含探针的光陷阱,每个探针的同一性保持 已知,无论光陷阱将探针定位在哪儿。
在一个优选实施例中,计算机38在捕获探针之前和之后都控制 光陷阱的移动。在其它实施例中,光学数据流首先转换为视频信号, 其然后用于产生与阵列相应的图像,然后操作者观察图像以基于图像 控制至少一个光陷阱的移动。
参考图1和3,为进行分析,首批靶T1-T5通过入口14加入主 细胞10,其还包含流体介质3000。探针500-504的阵列由光陷阱 1000-1004对它们的容积(containment)悬浮于介质3000中。为了 增加与靶T1-T5反应的机会,探针可以与光陷阱的移动相对应在主细 胞周围移动。
例如,在一个实施例中,探针500-504被旋转通过包含靶T1-T5 的介质3000。通过光学地包含探针,与物理地包含相反,以及在主 细胞10中移动探针,探针与每个靶相互作用的机会增加了,因此提 高了分析的速度和效率。
图5A和5B中显示了通过顺序地产生几组光陷阱移动探针 500-502的阵列。在图5A显示的实施例中,显示了探针阵列简单的 线性移动,其沿线P1配置,P1代表了第组预定位置。移动通过将探 针从第一组光陷阱转移到第二组,第三组,然后第四组来完成。另外 参考图4,第一组光陷阱是通过定向激光束在相位模式化光学元件40 的第一区域42上而产生的。当第一区域42发出的子光束通过聚焦透 镜时,它们在包含探针500-503的第一位置P1形成了第一组光陷阱。
为了将探针500-502从第一位置P1移动到第二位置P2,静态相 位模式化光学元件40围绕轴47旋转,以使激光束与第二区域43对 准,在相应的第二组预定位置P2处产生第二组光陷阱。通过在适当 的临近第一位置P1处构造第二组组光陷阱,探针可以从第一组光陷 阱传递到第二组光陷阱。通过旋转相位模式化光学元件以对准与想要 的位置P1-P5对应的适当区域42-46,可以依次继续传递探针从第二 组预定位置P2到第三组预定位置P3,从第三组预定位置P3到第四 组预定位置P4,从第四组预定位置P4到第五组预定位置P5。一组光 陷阱的终止和下一组的产生之间的时间间隔应该持续一段时间,以确 保探针在漂移之前传递到下一组光陷阱。
探针的这种移动可以用于旋转(troll)探针通过介质,从而增加 介质中的靶与探针相互作用的机会。这种类型的简单移动还可以用于 从子细胞16(图1)移动探针到主细胞10的另一个区域,或者将探 针隔离到子细胞16中。
在图5B显示的实施例中,显示了探针临近得从宽到狭的交错的 移动。探针的交错移动以与如参照图5A所描述的方式相近似的方式 产生。然而,现在第一区域42用沿线P1所配置的两个探针500和 502产生光陷阱,,而第三探针501配置在P2,即介于上面两个探针 之间,但与线P1间隔开。当探针从第一组光陷阱传递到第二组并移 动到第二和随后的位置,探针的交错排列允许探针被密集地填塞而不 必同时在离两个探针太临近的位置放置一组陷阱,否则会导致探针被 包含于错误的光陷阱中。
一旦靶与探针相互作用,可以使用光谱方法研究靶。那些具有正 的结果的探针(即,那些与靶反应或粘合的探针)的光谱可以通过使 用图像照明39得到,例如这适于非弹性光谱学(inelastic spectroscopy)或者偏振光后向散射。计算机38可以分析光谱数据以 识别想要的靶,并引导相位模式化元件去隔离那些想要的靶。本领域 技术人员会认识到根据光谱数据的用于隔离靶的方法学可以被变更, 以根据从靶和/或光学数据流可得到的其它信息,来识别和/或隔离靶, 而不背离本发明的范围。
当完成分析时,通过计算机38和/或操作者36,选择抛弃哪个探 针和收集哪个探针。阵列的再配置的特性允许给定的光陷阱和被包含 的探针有选择地移动。在一些情况下,介质3000和非粘合的靶会从 主细胞10经由出口18排除或清洗掉,然后完成分析。在其它情形下, 至少一些仍包含于光陷阱的探针,与另外的靶一起而被重新利用以进 行进一步分析。根据分析的参数,该技术能用于测定为正或负的探针 的情形中。还在另外一些情形中,因为关于形成阵列的探针的数量和 特性探针的阵列被重新配置,光陷阱可以用于排除非粘合探针并获得 用于进一步实验的另外的探针。
在一些实施例中,没有必要从静态光束改变光学元件40的每个 区域产生子光束,或者在一规定方向上移动光束改变光学元件40。 作为替代,改变区域的顺序会改变这组光陷阱的位置。
图6A显示的是用于形成光陷阱的小型的系统的立体图,通常标 记为50。相位模式化光学元件51是动态的光学元件,具有反射的、 动态的表面,其也是纯相位的空间光调制器例如由日本Hamamatsu 制造的“PAL-SLM系列X7665”,或者由科罗拉多州的Boulder Nonlinear Systems Lafayette制造的“SLM512N15’和 SLM512SA7”。这些动态的光学元件具有可编码的反射表面,其中计 算机可以控制形成在其中的全息图。
图6A显示了用于形成光陷阱的小型系统,光学元件51对准外壳 52或附着于外壳52上,通过该外壳52提供第一光频道53a。第一光 频道的一端53b紧邻于光学元件51,第一光频道的另一端53c和与 其垂直的第二光频道53d相互作用并相通。第二光频道形成于安装转 台(turret)或“换镜旋座(nosepiece)”54b的显微镜透镜的底座 54a中。换镜旋座54b适于装配到Nixon TE 200系列显微镜(未示出)。 第二光频道与也正交于第二光频道的第三光频道55a相通。第三光频 道55a从换镜旋座54b的顶部表面横向通过换镜旋座54a,并平行于 物镜聚焦透镜56。聚焦透镜具有顶部和形成后孔径57的底部。插入 第二光频道和聚焦透镜的后孔径57之间的第三光频道的是二向色镜 分束器58。在小型系统中用于形成光陷阱50的其它部件包括第一反 射镜M1,其反射从相位模式化光学元件发出的子光束通过第一光频 道,设置在第一光频道中的第一组传递光学装置TO1,其被准直以接 收第一反射镜M1反射的子光束,设置在第一光频道中的第二组传递 光学装置TO2,其被准直以接收通过第一组传递透镜TO1的子光束, 和位于第一光频道和第二光频道的交点处的第二反射镜M2,其被准 直以反射通过第二组传递光学装置TO2和第三光频道55a的子光束。
为了产生光陷阱,引导激光束(未示出)通过光纤150从准直管 末端151出来并反射离开光学元件51的动态表面59。从光纤150的 准直器末端151输出的光束(未示出)被光学元件51的动态表面59 衍射成多个子光束(未示出)。每个子光束的编号类型和方向可以通 过变更编码在动态表面介质59中的全息图控制和改变。子光束然后 反射出第一反射镜M1经过第一组传递光学装置TO1,沿着第一光频 道53a经过第二组传递光学装置TO2到达第二反射镜M2;然后被定 向在分光镜58上直到物镜56的后孔径57,通过物镜56被会聚,从 而产生形成光陷阱所必需的光学梯度条件。用于成像,通过二向色镜 58被分解的那部分光通过第三光频道55b的下部分形成光数据流(未 示出)。
在那些其中子光束的相位剖面在外围强度较小而在从外围向内 的区域强度较大的实施例中,过分填充后孔径57的低于约15%,与 不过分填充后孔径57相比,用于形成在周围具有较大强度的光陷阱。
图6B示出的是Nixon TE 200系列显微镜的立体图,其中装配了 用于形成光陷阱50的小型系统,通常标记为60。带有附于其上的外 壳52的换镜旋座54通过支撑换镜旋座54a和54b的底座直接安装在 显微镜中。外壳和它的内含物和相连的光学元件51固定到换镜旋座 54a和54b,对显微镜的其余部分要求很少或不需要变更和改进。为 了成像,在物镜56上方可以提供照明源。
第一和第二组传递光学装置TO1和TO2被显示了每个包含两个 透镜元件。透镜可以是凸的或者是凹的。可以选择不同的和变化的类 型和数量的透镜,例如对称空气间隙单镜片(symmetrical air spaced singlets),对称空气间隙双重镜片(symmetrical air spaced doublets) 和/或另外的透镜或透镜组,以实现图象从第一反射镜M1到第二反射 镜M2的传递。在一些实施例中,第一和第二组传递光学装置是对称 空气间隙双重谱线,其隔开一定距离组合作为远摄镜头。
由于在以上的系统装置和方法中可以做一定的改动而不背离本 发明的范围,所以,所有包含于以上描述中的内容,如附图和说明书 所示,可以解释为说明性的,而非限制的意义。
发明的背景
在整个申请中的括号里提及了各种公开出版的文献。为了更充分 地描述本发明所属技术领域的情况,在本申请中结合这些公开出版的 文献的全部公开内容作为参考。
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