曲安西龙衍生物及其医药用途

申请号 CN202310310879.9 申请日 2023-03-28 公开(公告)号 CN116023425A 公开(公告)日 2023-04-28
申请人 南京师范大学; 发明人 赵波; 赵诗雨; 丁龙飞; 刘景滔;
摘要 本 发明 公开了曲安西龙衍 生物 及其医药用途,如下式I‑III任一所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐;本发明的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐具有优异的抗炎作用,抗炎活性可以与倍他米松相当,可以达到曲安西龙的5倍以上,可以用于制备 治疗 皮炎湿疹的药物,也可以成为一种β‑肾上腺受体激动剂。
权利要求

1.如下式I‑III任一所示的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐;

其中,R1选自:H或卤素;R2选自H、甲基或卤素;R3选自线性或支链的C1‑6烷基;R4选自羟基或卤素;虚线为单键或双键。
2.根据权利要求1所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐,其特征在于,所述R1为F、Cl、Br或I;所述R2 为 H、甲基、F、Cl或I,所述R3为线性或支链的C1‑6烷基;所述R4为羟基或Cl;虚线为双键。
3.一种权利要求1所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法,其特征在于,合成路线如下所示:
若R4为羟基:

第一步开环:加入无机强酸,降温搅拌,加入曲安西龙环化合物,反应后,加析出沉淀,用水将pH调至中性,静置,抽滤,滤饼水洗后,抽滤,干燥得曲安西龙卤化物;第二步成环:加入曲安西龙双氯化合物、催化剂和反应溶剂,加热回流后,缓慢加入成环剂,TLC监测反应完全后,萃取,旋干通过柱层析法获得式I‑III化合物;
若R4为Cl:

第一步加成:加入曲安西龙双键化合物,加入含Cl2的四氯化溶液,同时持续通氯气,反应后,减压浓缩旋干溶剂,得到曲安西龙双氯化合物;
第二步成环:加入曲安西龙双氯化合物、催化剂和反应溶剂,加热回流后,缓慢加入成环剂,反应后,萃取,旋干通过柱层析法获得式I‑III化合物。
4.根据权利要求3所述的合成方法,其特征在于,所述无机强酸为:盐酸氢溴酸氢氟酸或者氢碘酸中的任意一种或者多种;碱水为:氢氧化钠水溶液、氢氧化水溶液、碳酸钾水溶液、碳酸氢钠水溶液或碳酸钠水溶液中的任意一种或者多种;所述成环剂为原乙酸三乙酯、原丙酸三乙酯或者原戊酸三乙酯中的任意一种或者多种。
5. 如下式IV所示的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐,所述式IV 所述的曲安西龙衍生物为权利要求1所述曲安西龙衍生物的水解产物;

其中,R1选自:H或卤素;R2选自H、甲基或卤素;R4选自羟基或卤素;R5 、R6 、R7各自独立地选自:H或OC(O)X,其中X为线性或支链的C1‑6烷基、C3‑7环烷基或芳基、呋喃环、噻吩环或5‑氯噻吩环;虚线为单键或双键。
6.根据权利要求5所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐,其特征在于,所述R1为H、甲基、F、Cl或I ;所述R2为H、甲基、F、Cl或I;R4为Cl或羟基;R5 、R6 、R7各自独立地选自:
H或OC(O)X,其中X为线性或支链的C1‑6烷基、C3‑7环烷基或芳基、呋喃环、噻吩环或5‑氯噻吩环;虚线为双键。
7.一种权利要求5所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
加入甲醇和二氯甲烷、式I‑III中的一种化合物、甲苯磺酸一水合物,常温下搅拌,TLC监测反应完全,减压蒸干溶剂得到产物进行重结晶得式IV化合物;
或者:加入催化剂、有机溶剂和曲安西龙双氯化合物或曲安西龙卤化物,加热回流,缓慢加入酰氯,直至TLC监测反应完全,淬灭反应,萃取,旋干,制柱,通过柱层析法得IV化合物。
8.一种权利要求1‑7任意所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐在制备β‑肾上腺受体激动剂中的应用。
9.一种权利要求1‑7任意所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗炎、抗过敏药物中的应用。
10.一种权利要求1‑7任意所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗皮肤病药物中的应用。

说明书全文

曲安西龙衍生物及其医药用途

技术领域

[0001] 本发明属于生物医药领域,具体涉及一种曲安西龙衍生物及其医药用途。

背景技术

[0002] 曲安西龙为糖皮质激素类药物,适应症为应用其较强的免疫抑制作用,治疗各种变态反应性炎症、各种自身免疫性疾病。由于它的主要药理作用和醋酸泼尼松(强的松)相同,因此其适应症和强的松基本相同,主要包括:1、系统性红斑狼疮等结缔组织病;2、肾病综合症等免疫性肾脏疾病;3、特发性血小板减少性紫癜等免疫性病;4、醋酸泼尼松所适用的其它疾病。由于曲安西龙为口服药,它的不良反应为胃肠道,中上腹不适,腹胀,厌食,恶心,少数患者有可能诱发胃、十二指肠溃疡甚至并发出血、穿孔。
[0003] 根据现有技术的抗炎试验中,曲安西龙的半效期为12‑36h,抗炎强度可以达到5,而抗炎效果更强的倍他米松半效期为36‑72h,抗炎强度为25,其抗炎活性为曲安西龙的5倍。同时由于曲安西龙由于钠滞作用轻微,只能用于口服,可能会带来一些副作用,也不作为外用膏剂类药物。因此,需要开发可以外用的高效抗炎药物,尤其是用于治疗皮肤疾病的药物。

发明内容

[0004] 发明目的:针对现有技术中存在的问题,本发明提供一种新型曲安西龙衍生物,本发明的曲安西龙衍生物具有抗炎、抗过敏药物作用,抗炎活性与倍他米松相当,可以达到曲安西龙的5倍以上,也可以成为一种β‑肾上腺受体激动剂;本发明的衍生物可制备成外用膏剂类药物,有效解决了曲安西龙口服用药问题,减少肝功能和胃损害。
[0005] 本发明的另一个目的是提供所述曲安西龙衍生物的制备方法和医药用途。
[0006] 技术方案:为实现上述目的,本发明所述如下式I‑III任一所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐;;
[0007] 其中,R1选自:H或卤素;R2选自H、甲基或卤素;R3选自线性或支链的C1‑6烷基;R4选自羟基或卤素;虚线为单键或双键。
[0008] 作为优选,所述R1为F、Cl、Br或I;所述R2为H、甲基、F、Cl或I,所述R3为线性或支链的C1‑6烷基;所述R4为羟基或Cl;虚线为双键。
[0009] 本发明所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法,合成路线如下所示:若R4为羟基:

[0010] 第一步开环:加入无机强酸,降温搅拌,加入曲安西龙环化合物,反应后,加水析出,用水将pH调至中性,静置,抽滤,滤饼水洗后,抽滤,干燥得曲安西龙卤化物;第二步成环:加入化合物1、催化剂和反应溶剂,加热回流后,缓慢加入成环剂,TLC监测反应完全后,萃取,旋干通过柱层析法获得式I‑III化合物;
若R4为Cl:

[0011] 第一步加成:加入曲安西龙双键化合物,加入含Cl2的四氯化溶液,同时持续通氯气,反应后,TLC监测反应完全,减压浓缩旋干溶剂,得到曲安西龙双氯化合物;第二步成环:加入曲安西龙双氯化合物、催化剂和反应溶剂,加热回流后,缓慢加入成环剂,反应完全后,萃取,旋干通过柱层析法获得式I‑III化合物。
[0012] 其中,所述无机强酸为:盐酸氢溴酸氢氟酸或者氢碘酸中的任意一种或者多种;碱水为:氢氧化钠水溶液、氢氧化水溶液、碳酸钾水溶液、碳酸氢钠水溶液或碳酸钠水溶液中的任意一种或者多种;所述成环剂为原乙酸三乙酯、原丙酸三乙酯或者原戊酸三乙酯中的任意一种或者多种。
[0013] 本发明所述如下式IV所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐,所述式IV所述的曲安西龙衍生物为式I‑III任一所述的曲安西龙衍生物的水解产物;;
[0014] 其中,R1选自:H或卤素;R2选自H、甲基或卤素;R4选自羟基或卤素;R5 、R6 、R7各自独立地选自:H或OC(O)X,其中X为线性或支链的C1‑6烷基、C3‑7环烷基或芳基、呋喃环、噻吩环或5‑氯噻吩环;虚线为单键或双键。
[0015] 作为优选,所述R1为H、甲基或卤素F、Cl或I ;所述R2为H、甲基、F、Cl或I;R4为Cl或羟基;R5 、R6 、R7各自独立地选自:H或OC(O)X,其中X为线性或支链的C1‑6烷基、C3‑7环烷基或芳基、呋喃环、噻吩环或5‑氯噻吩环;虚线为双键。
[0016] 本发明所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐的制备方法,包括如下步骤:加入甲醇和二氯甲烷、式I‑III中的一种化合物、甲苯磺酸一水合物,常温下搅拌,TLC监测反应完全,减压蒸干溶剂得到产物进行重结晶得式IV化合物;
或者:加入催化剂、有机溶剂和曲安西龙双氯化合物或曲安西龙卤化物,加热回流,缓慢加入酰氯,直至TLC监测反应完全,淬灭反应,萃取,旋干,制柱,通过柱层析法得IV化合物。
[0017] 作为优选,所述酰氯为:乙酰氯、丙酰氯、戊酰氯、糠酰氯或者5‑氯噻吩酰氯中的任意一种或者多种。
[0018] 作为优选,所述曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐为如下任意一种:。
[0019] 本发明所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐在制备β‑肾上腺受体激动剂中的应用。
[0020] 本发明所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗炎、抗过敏药物中的应用。
[0021] 本发明所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗皮肤病中的药物。
[0022] 作为优选,所述皮肤病包括湿疹、屑病、过敏性皮炎、神经性皮炎、瘙痒炎和过敏反应。
[0023] 本发明所述一种预防或治疗皮肤病的药物组合物,根据本发明的化合物可以任何方便的方式配制以供管理,因此,本发明还在其范围内包括的化合物或生理上可接受的其溶剂组成的药物组合物,如果需要的话,与一种或多种生理上可接受的稀释剂或载体混合在一起,其含有所述的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐作为活性成分和药学上可接受的载体。
[0024] 其中,所述药物组合物是胶囊剂、散剂、片剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、糖浆剂、口服液、吸入剂、软膏剂、栓剂或贴剂。
[0025] 本发明提出了一种全新结构的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐,经过细胞活性、动物实验验证,特别是在局部给药时,具有抗炎、抗过敏药物作用,抗炎活性为与倍他米松的相当,可以达到曲安西龙的5倍。本发明的曲安西龙衍生物对比曲安西龙活不仅活性更高,同时曲安西龙在治疗湿疹、银屑病、过敏性皮炎、神经性皮炎、瘙痒炎和过敏反应方面,主要是口服,外用无效;而本发明的化合物可以用于局部外用给药,具有很好的抗炎、抗毒、抗过敏药物作用。也可以成为一种β‑肾上腺受体激动剂。本发明化合物在疾病状态中具有效用的例子包括皮肤病,如湿疹、银屑病、过敏性皮炎、神经性皮炎、瘙痒炎和过敏反应。
[0026] 有益效果:与现有技术相比,本发明具有如下优点:(1)本发明的提供全新结构的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐,同时通过细胞活性实验可以证明本发明的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐具有非常优异的抗炎、抗过敏活性,其效果与倍他米松相当,可以达到曲安西龙的5倍;可以用于制备抗炎、抗过敏药物。本发明化合物针对皮炎湿疹具有抗炎活性,并且效果显著,可以用于制备治疗皮肤病中的药物。同时本发明的曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐可以克服了曲安西龙口服问题,减少肝功能和胃损害进一步增强的曲安西龙药物抗炎活性。
[0027] (2)本发明曲安西龙衍生物或其药学上可接受的盐易于制备且成本低廉,并且结构简单,设计巧妙,原料便宜易得,合成工艺安全、环保,易于规模化生产。附图说明
[0028] 图1为本发明曲安西龙衍生物外涂效果。

具体实施方式

[0029] 下面通过实施例具体地说明本发明的内容。在本发明中,以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明,并不是用来限制本发明的范围。在不背离本发明的精神和范围的前提下,可以对本发明进行各种变化和修饰。
[0030] 下述实施例中所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂家建议的条件。实施例1
[0031] 第一步
[0032] 10mL甲醇,10mL二氯甲烷,5g的四烯物(21‑羟基孕甾‑1,4,9(11),16‑四烯‑3,20‑二‑21‑醋酸酯)加入三颈瓶中,室温搅拌反应20min后,加入15mL质量分数30%碳酸钾溶液,继续室温搅拌反应5h,TLC监测完全,减压蒸干溶剂,得到4.5g化合物1。
[0033] 0℃ 下加入1g化合物1、10mL丙酮、 1.2mL质量分数 88%的甲酸,室温搅拌15min后,加入2mL的质量分数7%高锰酸钾溶液,继续搅拌10min后,加入2.6mL的质量分数35%亚硫酸钠溶液,逐渐升温至45℃,搅拌30min,TLC监测完全,过滤,减压浓缩,加水析出固体,抽滤,得化合物A。
[0034]  0℃下,将7mL的丙酮,24.6μL的质量分数70%高氯酸,1.43mL的水加入到三颈瓶中,室温搅拌10min后,加入1g的化合物A,微溶,室温搅拌15min后,缓慢加入0.67g的二溴海因,室温搅拌反应1小时后,TLC监测反应完全。反应完全后,加入6mL的质量分数10%亚硫酸钠溶液淬灭,抽滤,加入适量的乙酸乙酯进行洗涤,抽滤,水洗,干燥得曲安西龙溴化物1.2g,收率95%。
[0035] 或者采用下述方法:0℃下,将7mL的四氢呋喃,25.6μL的质量分数70%高氯酸,1.5mL的水加入到三颈瓶中,室温搅拌10min后,加入1g的化合物A,微溶,室温搅拌15min后,缓慢加入0.67g的二溴海因,室温搅拌反应1小时后,TLC监测反应完全。反应完全后,加入6mL的质量分数10%亚硫酸钠溶液淬灭,抽滤,加入适量的乙酸乙酯进行洗涤,抽滤,水洗,干燥得曲安西龙溴化物
1.13g,收率89%。
[0036] 或者采用下述方法:0℃下,7mL的四氢呋喃,0.5mL的98%浓硫酸,1.5mL的水加入到三颈瓶中,搅拌
10min后,加入1g的A,微溶,室温搅拌15分钟后,缓慢加入0.79g的二溴海因,室温搅拌反应1小时后,TLC监测反应完全。反应完全后,加入6mL的质量分数10%亚硫酸钠溶液淬灭,抽滤,加入适量的乙醇进行洗涤,抽滤,水洗,干燥得曲安西龙溴化物0.8g,收率63%。
[0037] 第二步:接酯
[0038] 在反应瓶中加入2g曲安西龙溴化物、0.11g对甲基苯磺酸吡啶盐和10mL二氯甲烷,加热回流至47℃,加热回流20分钟后,缓慢加入2mL原乙酸三乙酯,搅拌至TLC监测反应完全后,用10mL二氯甲烷萃取3次、饱和食盐水洗涤,旋干通过柱层析法(甲醇/二氯甲烷=1:50)获得1.46g上述化合物2,收率63.2%。
[0039] 1HNMR (500 MHz, Chloroform‑d) δ 6.98 (ddd,J= 9.3, 1.9, 1.1 Hz, 1H), 6.38 (dd,J= 9.3, 1.3 Hz, 1H), 6.22 (dd,J= 2.1, 1.0 Hz, 1H), 4.48 (q,J= 14.9 Hz, 2H), 4.34 (d,J= 6.2 Hz, 1H), 4.26 (d,J= 6.2 Hz, 1H), 4.13 (q,J= 6.5 Hz, 
1H), 4.07 (q,J= 6.5 Hz, 1H), 3.63 (dq,J= 10.3, 6.9 Hz, 1H), 3.55 (dq,J= 10.3, 
7.0 Hz, 1H), 2.58 – 2.46 (m, 2H), 2.18 (dd,J= 13.7, 6.6 Hz, 1H), 2.03 – 1.85 (m, 4H), 1.80 – 1.65 (m, 2H), 1.64 – 1.54 (m, 4H), 1.28 – 1.21 (m, 6H), 0.96 +
(s, 3H).MS(ESI)m/z :525[M+H]。
[0040]
[0041] 在反应瓶中加入3mL甲醇、5mL二氯甲烷、1.2g化合物2、0.06g对甲苯磺酸一水合物,室温下搅拌至TLC监测反应完全,减压蒸干溶剂得到淡黄色固体。将所得到的固体加入5mL二氯甲烷,完全溶解,缓慢加入10ml石油醚,强搅拌下析出大量固体,抽滤烘干得产物曲安西龙溴羟乙酸酯0.98g,收率86.3%。
[0042] 1HNMR (500 MHz, Chloroform‑d) δ 6.97 (ddd,J= 9.3, 1.9, 1.1 Hz, 1H), 6.38 (dd,J= 9.3, 1.3 Hz, 1H), 6.24 (dd,J= 2.1, 1.0 Hz, 1H), 4.56 (d,J= 6.3 Hz, 1H), 4.50 (ddd,J= 11.7, 6.9, 4.2 Hz, 2H), 4.36 (d,J= 6.2 Hz, 1H), 4.32 (dd,J= 13.7, 7.5 Hz, 1H), 4.17 – 4.13 (m, 2H), 2.58 – 2.44 (m, 2H), 2.09 (s, 
3H), 2.04 (dd,J= 13.8, 6.5 Hz, 1H), 1.95 (dddd,J= 24.9, 20.3, 12.2, 6.5 Hz, 
3H), 1.82 (dt,J= 13.9, 6.4 Hz, 1H), 1.70 (ddddd,J= 20.4, 13.9, 12.9, 5.2, 3.8 +
Hz, 3H), 1.26 (d,J= 0.9 Hz, 3H), 0.98 (s, 3H).MS(ESI)m/z :497[M+H]。
实施例2
[0043]
[0044] 将0.26g氢氧化钠溶于481μL的水中。量取5.47mL的二氯甲烷,6.38mL的甲醇,0.9g曲安西龙溴化物(实施例1制备)于三颈瓶中,微溶,盐浴下,N2置换3次,在10分钟内滴加完氢氧化钠溶液,溶液先澄清后浑浊,室温搅拌反应20min,TLC监测反应完全。后处理:缓慢滴加乙酸,直至pH=6‑7后,将溶液旋蒸抽滤得曲安西龙环氧0.726g,收率97.9%。
[0045]
[0046] 在0℃下单颈瓶中加入5ml的盐酸,缓慢加入0.5g的曲安西龙环氧,室温搅拌反应5h,TLC监测反应完全,加入大量水,搅拌20min后,析出大量固体,加入适量的乙酸乙酯洗涤,抽滤,水洗,抽滤,干燥得曲安西龙氯化物0.526g,收率96%。
[0047]
[0048] 在反应瓶中加入1g曲安西龙氯化物、0.21g对甲基苯磺酸吡啶盐和10mL二氯甲烷,加热回流至66℃,加热回流20分钟后,缓慢加入3.6mL原丙酸三乙酯,搅拌至TLC监测反应完全后,用10ml二氯甲烷萃取3次、饱和食盐水洗涤,旋干通过柱层析法(甲醇/二氯甲烷=1:50)获得0.6g化合物3,收率49.8%。
[0049] 1HNMR (500 MHz, Chloroform‑d) δ 7.25 (dd,J= 9.3, 1.1 Hz, 1H), 6.40 (dd,J= 9.3, 1.3 Hz, 1H), 6.24 (dd,J= 2.1, 1.0 Hz, 1H), 4.49 (q,J= 14.9 Hz, 2H), 4.35 (d,J= 6.4 Hz, 1H), 4.16 (q,J= 6.5 Hz, 1H), 4.06 (q,J= 6.5 Hz, 1H), 
3.66 – 3.51 (m, 2H), 2.98 (d,J= 6.4 Hz, 1H), 2.69 – 2.56 (m, 2H), 2.47 (dddd,J= 13.9, 8.6, 6.4, 1.0 Hz, 1H), 2.15 (dd,J= 13.9, 6.6 Hz, 1H), 2.03 – 1.96 (m, 2H), 1.95 – 1.71 (m, 5H), 1.66 (d,J= 0.9 Hz, 3H), 1.58 (dt,J= 7.3, 6.5 +
Hz, 1H), 1.23 (t,J= 6.9 Hz, 3H), 0.98 – 0.94 (m, 6H).MS(ESI)m/z :496[M+H]。
实施例3
[0050]
[0051] 称取3.5g的二氧化锰于圆底烧瓶中,在加热状态下,缓慢将10mL浓盐酸加入至二氧化锰中,生成的全部氯气通入装有20ml的四氯化碳的溶液的茄形瓶中。
[0052] 冰浴下,上述在含有氯气的四氯化碳溶液中加入1g的化合物A(实施例1制备),并持续通入氯气,持续搅拌6h,TLC监测反应完全。用10mL二氯甲烷萃取3次,饱和食盐水洗涤、无水亚硫酸钠干燥,减压旋干固体,通过柱层析法(丙酮/二氯甲烷=20:1)得到0.8g曲安西龙双氯产物,收率66.9%。
[0053]
[0054] 在反应瓶中加入0.6g曲安西龙双氯、0.088g对甲基苯磺酸吡啶盐和3mL二氯甲烷,加热回流至47℃,加热回流20分钟后,缓慢加入1.2mL原乙酸三乙酯,搅拌至TLC监测反应完全后,用10mL二氯甲烷萃取3次、饱和食盐水洗涤,旋干通过柱层析法(甲醇/二氯甲烷=1:50)获得0.51g化合物4,收率73%。
[0055] 1HNMR (500 MHz, Chloroform‑d) δ 7.26 (ddd,J= 9.3, 1.9, 1.1 Hz, 1H), 6.40 (dd,J= 9.3, 1.3 Hz, 1H), 6.26 (dd,J= 2.1, 1.0 Hz, 1H), 4.55 – 4.43 (m, 
3H), 4.34 (d,J= 6.2 Hz, 1H), 4.22 (q,J= 6.5 Hz, 1H), 3.67 – 3.50 (m, 2H), 
2.57 (dddd,J= 14.0, 8.6, 6.4, 1.0 Hz, 1H), 2.48 (dddd,J= 13.7, 8.6, 6.3, 1.0 Hz, 1H), 2.39 (dt,J= 7.5, 5.6 Hz, 1H), 2.10 (dd,J= 12.7, 5.6 Hz, 1H), 2.02 (dd,J= 12.8, 5.5 Hz, 1H), 1.94 (dt,J= 14.1, 6.4 Hz, 1H), 1.87 – 1.78 (m, 2H), 
1.67 (dddd,J= 12.8, 8.6, 6.4, 5.5 Hz, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.57 – 1.55 (m, 1H), 
1.54 (t,J= 2.8 Hz, 3H), 1.23 (t,J= 6.9 Hz, 3H), 0.95 (s, 3H).MS(ESI)m/z :499+
[M+H]。
实施例4
[0056]
[0057] 在反应瓶中加入0.8gDMAP,10mL二氯甲烷和1g曲安西龙氯化物(实施例3中制备),加热回流至47℃,加热回流10min后,缓慢加入1.08mL糠酰氯,搅拌直至TLC监测反应完全,加入12mL的15%盐酸淬灭反应,用13ml二氯甲烷萃取3次,减压旋干溶剂,制柱,通过柱层析法(甲醇/二氯=1:100)得0.8g曲安西龙氯化物糠酸酯,收率65%。
[0058] 1HNMR (500 MHz, Chloroform‑d) δ 7.65 (t,J= 1.5 Hz, 1H), 7.30 – 7.23 (m, 2H), 6.56 (dd,J= 7.9, 1.6 Hz, 1H), 6.41 (dd,J= 9.3, 1.3 Hz, 1H), 6.25 (dd,J= 2.1, 1.0 Hz, 1H), 5.00 (t,J= 6.0 Hz, 1H), 4.44 – 4.35 (m, 2H), 4.21 (q,J= 6.5 Hz, 1H), 4.06 – 4.01 (m, 2H), 3.31 (d,J= 6.2 Hz, 1H), 2.67 (dt,J= 7.5, 5.5 Hz, 1H), 2.59 (dddd,J= 13.9, 8.6, 6.5, 1.0 Hz, 1H), 2.46 (dddd,J= 
13.7, 8.4, 6.4, 1.0 Hz, 1H), 2.14 (ddd,J= 13.8, 10.2, 6.5 Hz, 2H), 1.98 (dt,J= 14.1, 6.1 Hz, 1H), 1.91 (dd,J= 13.8, 6.5 Hz, 1H), 1.77 (qddd,J= 12.8, 8.4, 
6.4, 5.5 Hz, 2H), 1.67 (d,J= 0.9 Hz, 3H), 1.62 (dt,J= 7.5, 6.5 Hz, 1H), 0.95 +
(s, 3H).MS(ESI)m/z :506[M+H]。
实施例5
[0059] 活性测试方法,以下实验为针对皮炎湿疹的抗炎活性测试:HEK293细胞培养于24孔细胞培养板,种板12小时后细胞密度达到70%,将pGL4.19‑TA‑GRELuc(400ng/孔)和β‑gal表达载体(200ng/孔)共转染细胞。待细胞生长42小时后,将‑9 ‑8 ‑7 ‑6
实施例1‑3中合成的化合物2‑4以1x10 、1x10 、1x10 和1x10 mol/L的浓度孵育细胞6h。随后裂解细胞,用荧光素酶检测试剂盒测定荧光强度,即荧光素酶活性。以2‑硝基苯基β‑D‑半乳吡喃糖苷为底物测定β‑gal活性,作为转染效率的对照。荧光素酶活性同β‑gal活性的比值用以表征各个药物对糖皮质激素受体的激动活力,根据激动活力值求出AUC,AUC值越高,化合物抗炎活性越强。结果如表1所示。
[0060] 表1为实施例中化合物抗炎活性测试结果
[0061] 从表1可以看出,本发明制备的化合物其抗炎活性与倍他米松相当,实施例制备的化合物3其抗炎活性甚至超过了倍他米松。而现有技术已经明确报道倍他米松的抗炎活性为曲安西龙的5倍(如文献Treatment with Synthetic Glucocorticoids and the Hypothalamus‑Pituitary‑Adrenal Axis,Int. J. Mol. Sci. 2017, 18, 2201),说明本发明的曲安西龙衍生物抗炎活性显著超过了曲安西龙。实施例6
[0062] 按中国药典2015版中的常规方法,将化合物1制成含量为千分之二的外用药膏,涂在患者后背湿疹处(涂抹均匀即可),如图1所示,在涂抹后,湿疹处症状减轻,一天后,症状消失,因此该曲安西龙衍生物具有外用治疗皮炎湿疹功效。
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