作为腺苷A2B受体拮抗剂的噻唑并嘧啶/吡啶脲衍生物

本发明包括式I的化合物及其药用盐和酯，

其中R1，R2，R3和R4如下定义。

这些化合物被认为主要用作腺苷A2B受体拮抗剂，并因此具有治疗糖 尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的潜力。本发明包括式I的化合物 和它们的药用盐和酯，它们的制备和含有它们的药物的制备，以及将上述 化合物用于控制或预防上述疾病、特别是糖尿病的方法。

腺苷是一种在许多组织中产生的内分泌物，其通过四种受体亚型-A1， A2A，A2B和A3-介导各种功能。所有四种受体属于G-蛋白偶联受体 (GPCRs)类别，其含有七个螺旋疏水结构域，这些疏水结构域跨质膜、通 过亲水的胞外和胞内环连接。A1和A3受体与Gi和Go蛋白偶联，而A2A 和A2B受体与Gs蛋白偶联。由于这些区别，腺苷经由它通过A2A和A2B 受体的作用发信号使得胞内cAMP水平升高，和通过A1和A3受体发信 号使得胞内cAMP水平降低。另外，由于它与Gq蛋白的偶联，腺苷通过 A2B受体升高胞内钙离子水平。

如在CHO-A2B-cAMP测定中测量，式I化合物具有有效的人腺苷A2B 受体拮抗剂活性。

相对于其它三种受体的选择性A2B激动剂和拮抗剂的缺乏，使得在各 种细胞类型上A2B受体的功能活性的作用的研究复杂化。典型地，在用 NECA-一种有效和非选择性的腺苷受体激动剂-引发应答的同时，通 过其它三种腺苷受体的选择性激动剂和拮抗剂的作用的缺乏，推导出A2B 受体的功能活性。通常，当观察到下列独特顺序的激动剂效力时，鉴定 A2B受体对于给定细胞类型的作用：NECA(非选择性的)>PIA(A1-选择性 激动剂)>IB-MECA(A3-选择性激动剂)>CGS-21680(A2A-选择性激动剂)。

腺苷对于四种受体的相对激动剂效力确定为A1(EC50-0.31uM)>A3 (EC50-0.29uM)>A2A(EC50-0.7)>A2B(EC50-24uM)，提示在慢性、高 氧化应激病症过程中A2B受体的独特作用，所述病症包括但不限于高血 糖、肥大细胞激活、和胃肠道炎症。不管腺苷对于A2B受体具有低的激 动剂效力，已经报道了许多具有高A2B受体拮抗剂效力的化合物。

使用特异的激动剂和拮抗剂，Eisai研究人员证明了A2B受体拮抗作 用在抑制肝葡萄糖生成中的关键作用，并且在大鼠原代肝细胞中一种有效 的A2B受体拮抗剂和一种葡萄糖生成抑制剂也显示降低KK-Ay小鼠中的 空腹葡萄糖水平和餐后葡萄糖水平，所述KK-Ay小鼠是一种公认的II型 糖尿病模型。因此，本发明的化合物可用于预防和/或治疗II型糖尿病。

A2B受体还存在于内皮细胞的质膜中，并且已经发现刺激它们的生长。 由于这将导致新血管的生长(血管发生)。本发明的一个目的是预防和/或治 疗特征在于异常血管生长的疾病，如糖尿病性视网膜病。

使用免疫荧光技术，使用特异性抗-人A2B-抗体，指示在通过支气管 肺泡灌洗细胞而获自哮喘病患者的人肺肥大细胞中存在A2B受体。因此， 式I的化合物提供一种预防和/或治疗哮喘、支气管痉挛和变应性疾病以及 其它阻塞性气道类型的疾病的方法。

A2B受体在结肠中在肠上皮细胞的基底外侧区域中被发现，并且对诸 如腹泻的疾病中的胃肠道炎症起反应而增加氯离子分泌。因此，式I的化 合物提供一种治疗包括腹泻的炎性胃肠道病症的方法。

更具体地，本发明涉及式I的化合物，

其中

X 是C或N，

R1 是C1-4烷氧基，

R2 是氢，羟基，C1-2烷氧基或C1-2烷硫基，

R3 是氢或C1-3烷基，

R4 是被芳基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基，或芳酰基氨基 取代的C1-4烷基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成下式的5-6元杂环：

其中R3和R4都是CH2或一个是CH2并且另一个是被低级烷基单取代的 亚甲基，

Ya是2-3个环碳的饱和或部分不饱和的烷基链段，其被选自由以下组成的 组的一个芳族取代基取代：芳基，芳烷基，芳烷基氧基，芳酰基，芳氧基， 芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基， 并且Ya可以另外具有0、1或2个选自以下的非芳族取代基：羟基，氨基， 低级烷基氨基，低级烷酰基氨基，氧代，氰基，羧基，羟基烷基氨基，氨基 甲酰基和低级烷基氨基甲酰基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成下式的5-6元杂环：

其中R3和R4都是CH2或一个是CH2并且另一个是被低级烷基单取代的 亚甲基，

Yh是2-3个环原子的饱和杂烷基链段，所述环原子之一是杂原子，并且 Yh被一个芳族基团取代，在碳环原子的情形中，该芳族基团选自以下组 成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳氧 基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基，或者，在氮的情形中，该芳族基 团选自选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳基羟甲基烷基，芳基 羧甲基烷基，芳基烷氧基甲基烷基，芳基磺酰基，芳氧基烷基，芳基氨基 烷基和芳酰基氨基烷基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成哌啶基或吡咯烷基，其与未取代的或 单-、二-或三-取代的苯基苯并稠合，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成哌啶基，该哌啶基与含有1或2个杂 原子的5-6元饱和杂环螺-稠合，该杂环与未取代的或单-、二-或三-取代的 苯基结合或苯并稠合，并且所述杂环可以另外具有0、1或2个选自低级 烷基、酰基和低级烷基磺酰基的非芳族取代基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成5-取代的2，5-二氮杂-[2.2.1]-双环庚烷 或5-取代的2，5-二氮杂-[3.3.0]-二环辛烷，其中所述5-取代基选自以下组成 的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳基磺酰基，芳氧基烷基，和芳基羟甲基烷 基，芳基羧甲基烷基，芳基烷氧基甲基烷基，

或其药用盐或酯。

优选的上述化合物是那些化合物，其中

R2 是氢或羟基，

R3 是氢或C1-3烷基，并且

R4 是被芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基或芳酰 基氨基取代的C1-4烷基。

其它优选的上述化合物是那些化合物，其中

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成下式的5-6元杂环：

其中R3和R4都是CH2或一个是CH2并且另一个是被低级烷基单取代的 亚甲基，

Ya是2-3个环碳的饱和或部分不饱和的烷基链段，其被选自由以下组成的 组的一个芳族取代基取代：芳基，芳烷基，芳烷基氧基，芳酰基，芳氧基， 芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基， 并且Ya可以另外具有0、1或2个选自以下的非芳族取代基：羟基，氨基， 低级烷基氨基，低级烷酰基氨基，氧代，氰基，羧基，羟基烷基氨基，氨基 甲酰基和低级烷基氨基甲酰基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成下式的5-6元杂环：

其中R3和R4都是CH2或一个是CH2并且另一个是被低级烷基单取代的 亚甲基，

Yh是2-3个环原子的饱和杂烷基链段，所述环原子之一是杂原子，并且 Yh被一个芳族基团取代，在碳环原子的情形中，该芳族基团选自以下组 成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳氧 基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基，或者，在氮的情形中，该芳族基 团选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳基羟甲基烷基，芳基羧甲 基烷基，芳基烷氧基甲基烷基，芳基磺酰基，芳氧基烷基，芳基氨基烷基 和芳酰基氨基烷基。在这些化合物中，优选地R1是甲氧基并且R2是氢或 羟基。

其它优选的式I化合物是那些化合物，其中

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成哌啶基或吡咯烷基环，其与未取代的 或单-、二-或三-取代的苯基苯并稠合。在这些化合物中，优选地R1是甲 氧基并且R2是氢或羟基。

其它优选的式I化合物是那些化合物，其中

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成哌啶基或吡咯烷基，其与含有1或2 个杂原子的5-6元饱和杂环螺-稠合，该杂环与未取代的或单-、二-或三- 取代的苯基结合或苯并稠合，并且所述杂环可以另外具有0、1或2个选 自低级烷基、酰基和低级烷基磺酰基的非芳族环取代基。在这些化合物中， 优选地R1是甲氧基并且R2是氢或羟基。

其它优选的如上定义的化合物是那些化合物，其中R3和R4形成的所 述杂环是吡咯烷基，哌啶基或哌嗪基。

其它优选的如上定义的化合物是具有下式的那些化合物：

其中

R5是芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基烷基，芳基磺酰基，芳基氨基烷 基，芳基羟甲基烷基，芳基烷氧基甲基烷基，芳基羧甲基烷基或芳酰基氨 基烷基。在这些化合物中，优选地R1是甲氧基并且R2是氢或羟基。

其它优选的如上所述的化合物是具有下式的那些化合物：

其中R6-R8之一是CH2，R6-R8之一是CH2或CH(OH)并且R6-R8之 一是被一个芳族取代基取代、或被一个芳族取代基和一个非芳族取代基双 取代的亚甲基，其中所述芳族取代基选自芳基，芳烷基，芳烷基氧基，芳 酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和 芳酰基氨基，并且所述非-芳族取代基选自羟基，氰基，氨基，低级烷基氨 基，低级烷酰基氨基，羧基，羟基烷基氨基，氨基甲酰基和低级烷基氨基 甲酰基。在这些化合物中，优选地R1是甲氧基并且R2是氢或羟基。更优 选地，所述芳族取代基进一步被独立地选自以下组成的组的一个或两个取 代基取代：卤素，羟基，低级烷氧基，卤代烷基和卤代烷氧基。优选地，所 述一个或两个取代基独立地选自以下组成的组：氯，氟，甲氧基，全氟烷基 和全氟甲氧基。

其它优选的如上定义的化合物是具有下式的那些化合物：

其中R9和R10之一是CH2并且另一个是被一个芳族取代基取代、或 被一个芳族取代基和一个非芳族取代基双取代的亚甲基，其中所述芳族取 代基选自芳基，芳烷基，芳烷基氧基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷 基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基，并且所述非-芳族取 代基选自羟基，氰基，氨基，烷基氨基，羧基，羟基烷基氨基，氨基甲酰基 和低级烷基氨基甲酰基。在这些化合物中，优选地R1是甲氧基并且R2是 氢或羟基。优选地，所述芳基部分的芳环进一步被选自以下组成的组的一 个或两个取代基取代：卤素，羟基，低级烷氧基，卤代烷基和卤代烷氧基。 优选地，所述一个或两个取代基独立地选自以下组成的组：氯，氟，甲氧 基，全氟烷基和全氟甲氧基。

其它优选的化合物是具有下式的那些化合物：

其中

R11是芳基，芳酰基，芳氧基或芳基磺酰基并且n是1-4。优选地，R1 是甲氧基并且R2是氢或羟基。优选地，R11芳基部分的芳环进一步被选自 以下组成的组的一个或两个取代基取代：卤素，羟基，低级烷氧基，卤代烷 基和卤代烷氧基。优选地，所述一个或两个取代基独立地选自以下组成的 组：氯，氟，甲氧基，全氟烷基和全氟甲氧基。

其它优选的上述化合物是具有下式的那些化合物：

其中

Z 是碳或氮，并且

R12是未取代的或单-、二-或三-取代的苯基。优选地，R1是甲氧基并 且R2是氢或羟基。

其它优选的上述化合物是具有下式的那些化合物：

其中R13是氢，低级烷基或低级烷基磺酰基，并且R14是氢，卤素， 低级烷基或低级烷基磺酰基。优选地，R1是甲氧基并且R2是氢或羟基。

其它优选的上述化合物是具有下式的那些化合物：

其中R15选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺 酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基，芳酰基氨基，芳基羟甲 基烷基，芳基羧甲基烷基，和芳基烷氧基甲基烷基。优选地，R1是甲氧基 并且R2是氢或羟基。

其它优选的上述化合物是具有下式的那些化合物：

其中R16选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺 酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基，芳酰基氨基，芳基羟甲 基烷基，芳基羧甲基烷基，和芳基烷氧基甲基烷基。优选地，R1是甲氧基 并且R2是氢或羟基。

优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(4-氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-氰基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(2-氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3，4-二氟-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-氯-4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(3-硝基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，和

3-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基甲基]-苯甲 酸甲酯。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(3，5-二甲氧基-苄基)哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(3-三氟甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(3-二氟甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(3，5-二氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-[3-(2-羟基-乙氧基)-苄基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-[1-(3-氯-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-苯乙基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(4-氟-3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺，和

4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(5-氯-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

{3-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基甲基]-苯氧 基}-乙酸，

4-(3，5-二氯-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(3-氟-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(5-氟-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(2-羟基-3-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

2-羟基-3-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基甲 基]-苯甲酸，

4-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基甲基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，

4-吡啶-2-基甲基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，和

4-苄基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(4-氯-2-甲磺酰基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺，

4-(3，4-二氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-(3-氰基-4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺，

4-(3，5-双-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺，

4-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，

4-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-(6-三氟甲基-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-(3-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-氯-苯磺酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺， 和

4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

2-(4-三氟甲基-苯基)-吗啉-4-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺， 哌啶-1，3-二羧酸1-[(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺]3-噻唑-2-基 酰胺，

4-(5-甲基-2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-3-(4-三氟甲氧基-苄基)- 哌啶-3-羧酸乙酯，

4’-羟基-3’，4’，5’，6’-四氢-2H-[2，4’]联吡啶基-1’-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺，

3，4-二羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，

4-(2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，和

4-(1，3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺三氟乙酸盐。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(4-氟-苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4，5]癸烷-8-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺，

5-氯-1，2-二氢-N-(7-甲氧基噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基)-1-(甲基磺酰基)螺[3H-吲 哚-3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，

1，2-二氢-5-甲氧基-N-(7-甲氧基噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基)-1-甲基螺[3H-吲哚 -3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，

1-(环丙基甲基)-1，2-二氢-N-(7-甲氧基噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基)螺[3H-吲哚 -3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，

1-(环丙基甲基)-1，2-二氢-5-氯-N-(7-甲氧基噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基)螺[3H-吲 哚-3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，

4-(4-氟-苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂-螺[4.5]癸烷-8-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，和

4-氧代-1-苯基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸烷-8-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(3-苯基-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(2-苯基-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(2，3-二氢-吲哚-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

4-(5-氯-2，3-二氢-吲哚-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-三氟甲基-苯基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，

3-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

3-苄基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，和

4-(2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(3-三氟甲基-苯磺酰基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺，

4-(4-氯-苯磺酰基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(甲苯-4-磺酰基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(3-氯-苯氧基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-(4-氟-苄基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

2-[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌啶-4-磺酰基]-苯甲 酸甲酯，和

4-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-(3-氯-苯基)-4-羟基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-羟基-4-(3-甲氧基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺，

4’-羟基-6-三氟甲基-3’，4’，5’，6’-四氢-2’H-[2，4’]联吡啶基-1’-羧酸(7-甲氧基- 噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-乙酰基氨基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，

4-氨基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，

4-[(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺，和

4-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基氨基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

3-(4-氯-苄基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

3-(4-三氟甲基-苄基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，

3-(甲苯-4-磺酰基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

3-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基氨基]-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

(R)-3-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺，

(R)-3-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，和

(S)-3-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

8-三氟甲基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，和

6-三氟甲基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-氟-N-{2-[3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-脲基]-乙基}-3-三氟甲基- 苯甲酰胺，

1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-乙基]-3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-脲，

3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-1-甲基-1-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙 基]脲4-[1-(3-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺，

(3-氯-苯基)-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1-基]- 乙酸甲酯，

4-[2-甲氧基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，

4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(5-甲磺酰基-7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，和

4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(5-羟基-7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺。

其它优选的上述化合物是选自以下组成的组的那些：

4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2- 基)-酰胺，

3-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶 -2-基)-酰胺，和

4-(3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-酰胺。

另外，本发明涉及式I的化合物，

其中

X 是C或N，

R1 是C1-4烷氧基，

R2 是氢，羟基，C1-2烷氧基或C1-2烷硫基，

R3 是氢或C1-3烷基，

R4 是被芳基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基，或芳酰基氨基 取代的C1-4烷基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成下式的5-6元杂环：

其中R3和R4都是CH2或一个是CH2并且另一个被低级烷基单-取代， Ya是2-3个环碳的饱和或部分不饱和的烷基链段，其被选自由以下组成的 组的一个芳族取代基取代：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基， 芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基，并且Ya可以另 外具有0、1或2个选自以下的非芳族取代基：羟基，氨基，低级烷基氨基， 低级烷酰基氨基，氰基，羧基，羟基烷基氨基，氨基甲酰基和低级烷基氨 基甲酰基，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成下式的5-6元杂环：

其中R3和R4都是CH2或一个是CH2并且另一个被低级烷基单-取代， Yh是2-3个环原子的饱和杂烷基链段，所述环原子之一是杂原子，并且 Yh被一个芳族基团取代，在碳环原子的情形中，该芳族基团选自以下组 成的组：芳基，芳烷基，芳烷基氧基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷 基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基，或者，在氮的情形 中，该芳族基团选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳基羟甲基烷 基，芳基羧甲基烷基，芳基烷氧基甲基烷基，芳基磺酰基和芳氧基烷基， 或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成哌啶基或吡咯烷基，所述哌啶基或吡 咯烷基与未取代的或单-、二-或三-取代的苯基苯并稠合，

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成哌啶基，该哌啶基与含有1或2个杂 原子的5-6元饱和杂环螺-稠合，该杂环与未取代的或单-、二-或三-取代的 苯基结合或苯并稠合，并且所述杂环可以另外具有0、1或2个选自低级 烷基、酰基和低级烷基磺酰基的非芳族取代基；

或

R3和R4与它们连接的脲氮一起形成5-取代的2，5-二氮杂-[2.2.1]-双环庚烷 或5-取代的2，5-二氮杂-[3.3.0]-二环辛烷，其中所述5-取代基选自以下组成 的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳基磺酰基，芳氧基烷基，和芳基羟甲基烷 基，芳基羧甲基烷基，芳基烷氧基甲基烷基，

或以上化合物的药用盐和酯。

优选的式I化合物是：

其中R5是芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基烷基，芳基磺酰基，芳基氨 基烷基或芳酰基氨基烷基，

其中R6-R8之一是CH2，R6-R8之一是CH2或CH(OH)并且R6-R8之 一被一个芳族取代基取代、或被一个芳族取代基和一个非-芳族取代基双取 代，其中所述芳族取代基选自芳基，芳烷基，芳烷基氧基，芳酰基，芳氧基， 芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基， 和所述非-芳族取代基选自羟基，氰基，氨基，低级烷基氨基，低级烷酰基 氨基，羧基，羟基烷基氨基，氨基甲酰基和低级烷基氨基甲酰基，

其中R9和R10之一是CH2并且另一个被一个芳族取代基取代、或被 一个芳族取代基和一个非-芳族取代基双取代，其中所述芳族取代基选自芳 基，芳烷基，芳烷基氧基，芳酰基，芳氧基，芳基磺酰基，芳烷基氨基，芳 氧基烷基，芳氧基烷基氨基和芳酰基氨基，和所述非-芳族取代基选自羟基， 氰基，氨基，烷基氨基，羧基，羟基烷基氨基，氨基甲酰基和低级烷基氨基 甲酰基，和

其中

R11是芳基，芳酰基，芳氧基或芳基磺酰基并且n是1-4。

优选的具有螺-稠合哌啶基的式I化合物是：

其中z是碳或氮，并且R12是未取代的或单-、二-或三-取代的苯基，

其中R13是氢，低级烷基或低级烷基磺酰基，并且R14是氢，卤素， 低级烷基或低级烷基磺酰基，

其中R15选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺 酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基，芳酰基氨基，和芳基羟 甲基烷基，芳基羧甲基烷基和芳基烷氧基甲基烷基，

和

其中R16选自以下组成的组：芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基，芳基磺 酰基，芳烷基氨基，芳氧基烷基，芳氧基烷基氨基，芳酰基氨基，芳基羟甲 基烷基，芳基羧甲基烷基和芳基烷氧基甲基烷基。

对于式I-IX的化合物，优选R1＝甲氧基或乙氧基，最优选甲氧基。R2 优选地是氢或羟基。

在本说明书中，“烷基”表示直链、支链或完全或部分环状的脂族烃。

术语＂低级烷基＂，单独或以组合形式(例如，作为以下定义的“低级烷 氧基，”＂低级烷酰基，＂“低级烷基氨基，”等的一部分)，表示含有最多6个碳 原子的烷基。“卤代烷基”和“羟基烷基”是指取代的低级烷基。

术语“酰基“表示-C(O)-低级烷基。

术语“杂原子”表示N，O或S。

术语“杂环(heterocycle)”或“杂环(heterocyclic ring)”是指饱和或部分饱 和的混合碳和杂原子的单环或二环。优选的杂环是含有1-3个杂原子的5-6 元单环或7-8元二环。

术语“芳基”是指取代或未取代的5-6元单环芳环，其可以完全是碳环 的或者可以含有一个、两个或三个环杂原子。芳基可以被一个、两个、三 个或四个取代基取代。优选地，每个取代基独立地是羟基，羧基，硝基， 腈，低级烷基，低级烷氧基，卤素，卤代烷基，卤代烷氧基，羟基烷基，氨 基，或低级烷基氨基。芳基部分的实例包括但不限于：任选取代的苯基， 任选取代的噻唑基，任选取代的吡嗪基，任选取代的吡咯基，任选取代的 吡嗪基，任选取代的吡啶基，任选取代的嘧啶基等。

术语“环烷基”是指取代的或未取代的5-6元单环脂肪族环，其可以完 全是碳环的或者可以含有一个、两个或三个环杂原子。环烷基的取代基优 选地有低级烷基，氧代，或取代或未取代的苯基。

术语＂芳烷基＂，表示以上定义的低级烷基或环烷基，其中一个氢原子 已经被以上定义的芳基替代，或在环烷基的情形中，其中两个相邻碳苯并 稠合于取代或未取代的苯基以形成二环基团。

术语＂芳氧基＂是指通过氧原子与分子的其余部分连接的芳基基团。优 选的芳氧基是苯氧基。“芳氧基烷基”是指其中一个氢原子已经被芳氧基替 换的低级烷基取代基。

术语“芳烷基氧基”是指通过氧原子与分子的其余部分连接的所定义的 芳烷基基团。

术语“芳基羟甲基烷基”是指一个碳原子已经被芳基和羟甲基两者取代 的低级烷基取代基。

术语“芳基羧基烷基”是指一个碳原子已经被芳基和羧甲基两者取代的 低级烷基取代基。

术语“芳基烷氧基烷基”是指一个碳原子已经被芳基和烷氧基甲基两者 取代的低级烷基取代基。

术语“芳酰基”是指通过羰基与分子的其余部分连接的芳基基团。芳酰 基的实例有苯甲酰基，3-氰基苯甲酰基等。

术语“芳基磺酰基”是指通过磺酰基的硫原子与分子的其余部分连接的 芳基。

术语”芳烷基氨基”是指通过氨基的氮原子与分子的其余部分连接的芳 烷基。

术语”芳酰基氨基”是指通过氨基的氮原子与分子的其余部分连接的芳 酰基。

术语＂低级烷氧基＂是指通过氧原子连接的低级烷基。未取代的低级烷 氧基的实例有甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，叔丁氧 基等。“卤代烷氧基”是被卤素取代的低级烷氧基。术语“烷氧基”是指通过 氧原子连接的烷基。

术语“氨基甲酰基”是指羧酰胺取代基-C(O)-NH2。术语“低级烷基氨基 甲酰基”是指酰胺的一个或两个氢原子独立地被低级烷基取代。

术语“低级烷酰基”是指通过羰基与分子的其余部分连接的低级烷基， 并且在上述定义的意义上包括基团如甲酰基(甲基酰基)，乙酰基，丙酰基 等。“低级烷酰基氨基”是指通过氨基与分子的其余部分连接的低级烷酰 基。“低级烷基氨基”是指通过氨基与分子的其余部分连接的低级烷基。

术语“卤素”是指选自氯、氟和溴的原子。

“IC50”是指具体化合物抑制50％特定测量的活性所需的浓度。IC50尤其 可以如随后所述测量。

“药用酯”是指常规酯化的具有羧基的式I化合物，该酯保持式I化 合物的生物学效力和性质并且在体内(生物体内)裂解为相应的活性羧酸。 因此，在本文中无论哪里提到羧基，应当理解式I化合物还包括其相应的 药用酯。

关于酯和酯在递送药物化合物中的用途的信息在以下文献中可获得： 前药设计(Design of Prodrugs)。Bundgaard H编辑(Elsevier，1985)。还参 见，H.Ansel等，药物剂型和药物递送系统(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)(第6版，1995)，第108-109页； Krogsgaard-Larsen，等，药物设计和开发教科书(Textbook of Drug Design and Development)(第2版，1996)，第152-191页。

＂药用盐＂是指保留本发明化合物的生物学效力和性能并且由适当非毒 性有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。酸加成 盐的实例包括衍生于无机酸的那些和衍生于有机酸的那些，所述无机酸如 盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸，所述有机酸如对 甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，甲 磺酸等。碱加成盐的实例包括衍生于以下的那些：铵，钾，钠和季铵氢氧 化物，如例如氢氧化四甲铵。将药物化合物(即药物)化学修饰成盐是药物 化学家公知的技术，该技术用于获得化合物改善的物理和化学稳定性、吸 湿性、流动性和溶解度。参见例如，H.Ansel等，药物剂型和药物递送系 统(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)(第6版， 1995)，第196页和第1456-1457页。

式(I)化合物可以具有一个或多个不对称碳原子并且可以以旋光纯对映 异构体、对映异构体的混合物如例如外消旋物、旋光纯非对映异构体、非 对映异构体混合物、非对映异构体的外消旋物或非对映异构体的外消旋物 的混合物的形式存在。通过本领域公知的方法，例如通过拆分外消旋物、 通过不对称合成或不对称色谱法(使用手性吸附剂或洗脱剂的色谱法)，可 以获得旋光活性形式。本发明包括所有这些形式。

式(I)化合物可以通过以下提供的方法、通过实施例提供的方法或通过 类似方法制备。对于单个反应步骤的适当的反应条件对于本领域技术人员 是已知的。原材料或者可商购，或者可以通过类似于以下提供的方法的方 法、通过实施例中描述的方法、或通过本领域已知的方法制备。

式I化合物和/或它们的药用盐可以用作药物，例如以药物制剂形式用 于经肠的、肠胃外或局部给药。它们可以这样给药，例如经口给药，其形 式如片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或混悬剂； 直肠给药，如以栓剂形式；肠胃外给药，如以注射液或输液形式；或者局 部给药，如以软膏剂、乳膏剂或油剂形式。优选口服给药。

药物制剂的制备可以是以本领域技术人员熟悉的方式进行的，将所述 的式(I)化合物和/或它们的药用盐，任选地联合其它在治疗上有价值的物 质，以及合适的、非毒性的、惰性的、治疗相容的固体或液体载体物质以 及如果需要，与普通的药物辅剂一起制成盖仑给药形式。

合适的载体材料不仅有无机载体材料，而且有有机载体材料。因此， 可以使用例如乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐作为用于 片剂、包衣片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的载体材料。软明胶胶囊的合适载 体材料为，例如植物油、蜡、脂肪以及半固体和液体多元醇(但是，根据活 性成分的性质，软明胶胶囊可以不需要载体)。制备溶液和糖浆的合适载体 材料为，例如水、多元醇、蔗糖，转化糖等。注射液的合适载体材料为， 例如水，醇类，多元醇，甘油和植物油。栓剂的合适载体材料为，例如天 然或硬化油、蜡、脂肪和半液体或液体多元醇。局部制剂的合适载体材料 为甘油酯类、半合成和合成甘油酯类、氢化油、液态蜡、液体石蜡、液态 脂肪醇、甾醇类、聚乙二醇和纤维素衍生物。可考虑使用常用的稳定剂、 防腐剂、湿润和乳化剂、稠度改善剂、增香剂、用于改变渗透压的盐、缓 冲物质、增溶剂、着色剂以及掩蔽剂和抗氧化剂作为药物辅药。

根据所要控制的疾病、患者的年龄和个体状况以及给药方式，式(I)化 合物的剂量可以在宽的限度内变化，当然，在每个具体病例中将和个体需 求相适合。对于成年患者，可考虑的日剂量为约1至1000mg，特别是约 1至100mg。取决于疾病严重性和精确的药代动力学曲线，化合物可以以 一个或数个日剂量单位施用，例如以1至4个剂量单位施用。

本发明的化合物优选地用于治疗通过A2B受体拮抗剂调节的疾病和 病症。这些疾病和病症包括例如II型糖尿病，特征在于异常血管生长的疾 病，如糖尿病性视网膜病，哮喘，支气管痉挛和变应性疾病以及其它阻塞 性气道类型的疾病，和炎性胃肠道病症，包括腹泻。

本发明因此还涉及药物组合物，该药物组合物含有以上定义的A2B受 体拮抗剂和药用载体和/或辅药。

本发明同样包括上述A2B受体拮抗剂，其用作治疗活性物质，特别是 用作用于治疗和/或预防通过A2B受体拮抗剂调节的疾病的治疗活性物 质，具体地用作治疗和/或预防II型糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘、 支气管痉挛和变应性疾病、炎性胃肠道病症和腹泻的治疗活性物质。

在另一个优选实施方案中，本发明涉及一种治疗性和/或预防性治疗通 过A2B受体拮抗剂调节的疾病、特别是用于治疗性和/或预防性治疗以下 疾病的方法：II型糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘、支气管痉挛和变应 性疾病、炎性胃肠道病症和腹泻，该方法包括向人或动物施用以上定义的 A2B受体拮抗剂。

本发明还包括以上定义的A2B受体激动剂在治疗性和/或预防性治疗 通过A2B受体拮抗剂调节的疾病中的应用，特别是在治疗性和/或预防性 治疗II型糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘、支气管痉挛和变应性疾病、 炎性胃肠道病症和腹泻中的应用。

本发明还涉及以上定义的A2B受体拮抗剂用于制备药物的应用，所述 药物用于治疗性和/或预防性治疗通过A2B受体拮抗剂调节的疾病，特别 是用于治疗性和/或预防性治疗II型糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘、 支气管痉挛和变应性疾病、炎性胃肠道病症和腹泻。这些药物含有上述 A2B受体拮抗剂。

II型糖尿病是用本发明的A2B受体拮抗剂治疗的优选疾病。

下列反应路线和相关叙述阐明了用于制备本发明新化合物的一般方法 学。

其中X＝N或C的式I的脲可以通过使用标准方法将相应的噻唑并嘧 啶/吡啶胺2与各种胺偶合来制备。例如，使用三光气或光气，可以将嘧 啶/吡啶胺2原位转化为相应的氨基甲酰基衍生物，其可以然后与所关心 的胺反应。另外，也可以将对应于噻唑并嘧啶/吡啶胺的氨基甲酸苯基酯衍 生物，3用于偶合至不同取代的胺(反应路线1)。

反应路线1

i)三光气/光气，(R3)(R4)NH；ii)(R3)(R4)NH，乙腈回流，

iii)苯氧基碳酰氯

在反应路线2-6中显示了可以用于制备式I化合物的合成胺前体，2。 反应路线2阐述了噻唑并嘧啶胺2a的合成，其中R2是H。这些化合物 从可商购的4，6-二氯-5-氨基吡啶以三步简单的化学反应而容易地获得，所 述三步反应包括与异氰酸苯甲酰酯缩合、碱催化水解苯甲酰基和与对应于 R1的低级烷基醇盐的氯置换反应。

反应路线2

i)缩合，ii)水解，iii)醇盐置换

其中R2是低级烷硫基醚的式2a的化合物可以如反应路线3所示制 备。该序列从2-低级烷基噻吩基-4，6-二羟基-嘧啶的硝化开始。适当取代的 低级烷硫基取代的嘧啶容易从文献方法获得(参见例如，药物化学杂志(J. Med.Chem)，1984，27(12)，1621-9；PCT国际申请2001092263，12月06日， 2001；J.Het.Chem.2004，41(4)，581-585)，其可以在标准条件下硝化。硝化 的嘧啶衍生物然后可以使用诸如五氯化磷的试剂氯化。然后可以以顺序的 方式通过氯的置换引入硫氰酸盐(酯)基团和各种低级烷基醇盐。然后通过 标准的噻唑形成反应，即将硝基还原成氨基，可以获得式2a的靶分子， 其进行迅速的环化以形成噻唑环。

反应路线3

i)硝化，ii)氯化，iii)用硫氰酸置换，

iv)用低级烷基醇置换，v)还原硝基，vi)环化

其中R2是低级烷基醚或羟基的式2a的化合物可以如反应路线4所示 进行制备。该序列从保护式2a的化合物的2-氨基开始，其中R2是低级 烷硫基醚。该2-氨基-保护的嘧啶并-噻唑化合物然后可以使用标准硫醚氧 化方法氧化为相应的烷基砜衍生物。烷基砜然后可以用低级烷基醇盐或氢 氧化物置换，将胺去保护，获得式2a的目标分子，其中R2基团是低级烷 基醚或氢氧化物(参见例如，生物有机&药物化学学报(Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters)，2002，12(1)，81-84；四面体(Tetrahedron) 2000，56(27)，4739-4745)。

反应路线4

i)胺的保护，ii)烷硫基的氧化，

iii)用低级烷基醇盐或氢氧化物置换

其中R2是H的式2b的化合物(X＝C)可以如反应路线5所示进行制 备。该序列从用低级烷基醇盐置换4-溴-3-硝基吡啶中的溴开始，获得的吡 啶衍生物然后可以使用标准方法还原和氯化。可以将4-烷氧基-3-氨基-2- 氯吡啶在适当溶剂中在硫氰酸铵的存在下加热至回流，产生的式2b的化 合物，其中R2是H。

反应路线5

i)用低级烷基醇盐置换，ii)还原(硝基至氨基)，iii)氯化，

iV)硫氰酸铵缩合和环化

其中R2是低级烷硫基醚，低级烷氧基或羟基的式2b的化合物可以如 反应路线6所示制备。该序列从用适当低级烷基醇在酸性条件下同时醚化 和酯化白屈氨酸开始，其类似于Inouye等(美国化学协会杂志(J.Amer. Chem.Soc)，1995，117，12416-12425)报道的那些。获得的醚/二酯吡啶然后 可以通过顺序的水解、接着Barton-改进的Hunsdieker反应(Barton等，四 面体(Tetrahedron)，1985，41，3901-3924)而转化为相应的2，6-二溴吡啶衍生 物。二溴吡啶衍生物可以在标准硝化条件下硝化，获得相应的硝基吡啶衍 生物，从其按照反应路线3和4中先前描述的类似的反应序列，可以制备 式2b的化合物，其中R2是低级烷硫基醚，低级烷基砜，低级烷氧基，或 羟基。

反应路线6

i)用低级烷基醇酯化和醚化，ii)酯水解，iii)Barton改进的Hunsdiecker反应，iv)硝化，

v)异硫氰酸铵缩合，vi)用低级烷基硫醇盐置换，vii)硫醚的氧化，viii)用低级烷基醇盐和 氢氧化物置换

其中R3和R4基团可以连接形成各种取代的5或6元环的式I的化合 物。对于包括氮原子的6元胺可以是哌嗪(piperizine)环。含有哌嗪环的式 I的化合物可以按照反应路线7所示的反应经由中间体4来制备。

反应路线7

i)与Boc-哌嗪偶合(见反应路线1)，ii)TFA和HCl，iii)与5还原性胺化(R19＝H，低级烷基， 或羧基烷基，羟基烷基)，iv)与芳基烷基磺酰氯缩合

其中R19是H或低级烷基或取代的烷基的式6的化合物可以使用还原 性胺化方法进行制备，其中适当取代的芳基或杂芳基醛或酮与中间体4反 应，用还原剂例如氰基硼氢钠原位还原哌嗪。式4的中间体化合物容易通 过反应路线1所示的反应序列获得。其中哌嗪的4位氮被各种酰基和磺酰 基取代的式7化合物可以容易地通过将酰基或磺酰基卤与哌嗪脲4偶合来 制备。另外，式6的化合物也可以通过反应路线8所示的下列反应来制备， 其中使用反应路线1所示的反应序列可以将适当取代的哌嗪直接转化为与 噻唑嘧啶/吡啶胺2偶合的目标化合物。

反应路线8

i)还原性胺化，ii)HCl或TFA

其中R3和R4可以连接形成哌嗪环的化合物，其可以在远端氮被α- 支链芳烷基取代。这些基团可以是酯，或羟甲基，或低级烷氧基甲基(分别 是化合物9，10，和11)。这些化合物可以按照所示反应路线9、根据有充 分先例的反应进行制备。

反应路线9

i)用α-溴芳基乙酸酯烷基化(R20＝低级烷基)，ii)还原，

iii)O-烷基化(R21＝低级烷基)

iv)参见反应路线1

其中R3和R4连接形成6元哌啶环12的式I的化合物可以从容易获 得的试剂制备。适当取代的哌啶可以从文献方法制备，例如，酰胺和氨基 -烷基衍生物可以从容易获得的4-氨基-哌啶通过分别与适当的芳基羧酸缩 合和还原性胺化反应制备。类似地，醚和磺酰基连接的哌啶也可以从4- 羟基-哌啶通过以下制备：分别与芳基醇盐或芳基硫代醇盐的取代反应，接 着将它氧化为砜。碳-连接的哌啶可以通过有机金属化学、使用4-苄基-哌 啶酮和它与芳基格氏试剂的反应来获得(反应路线10)。

反应路线10

i)a)芳基格利雅反应，当A＝CHO时，或b)与羟基芳基化合物的Mitsnobu反应，当A＝OH时； 或c)与芳基甲胺的还原性胺化，当A＝NH2时；d)与芳基羧酸偶合，当A＝NH2时，

e)当A＝OH时将它转化为OMs，然后将它与芳基烷基硫醇反应，和氧化硫醚为砜

ii)HCl或TFA

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，其在4位被苯并 稠合环脲和氨基甲酸酯取代，14可以使用适当的哌啶衍生物从上述通用方 法制备(参见反应路线1)。具有4-苯并稠合环脲或氨基甲酸酯的哌啶13 可以通过在适当取代的苯并稠合环脲或氨基甲酸酯和4-羟基哌啶之间的 Mitsnobu反应(药物化学杂志(J.Med.Chem.)，47(27)，6921，2004)制备。 这些化合物也可以从适当保护的4-氨基哌啶衍生物，通过邻-硝基-卤苯的 亲核置换来制备，其然后可以被还原和环化，如反应路线11所示(药物化 学杂志(J.Med.Chem.)，57(6)，814，1987；四面体(Tetrahedron)，57(6)，981， 2001)。来自1，2-二氨基苯的苯并稠合环脲和来自邻-羟基-2-氨基-苯的苯并 稠合环状氨基甲酸酯可以使用文献方法制备(Farmaco，60(2)，127，2005；核 心药物通讯(Nuclear Medicine Communications)，25(8)，845，2004；美国化 学协会杂志(J.Amer.Chem.Soc)，77，5757，1955；绿色化学(Green Chemistry)，6(2)，78，2004；美国化学协会杂志(J.Amer.Chem.Soc)，71， 1265，1949)。

反应路线11

i)苯并稠合环脲(R23＝R24＝独立地H，或低级烷基，低级烷氧基或卤素) Mitsnobu反应，ii)去保护，iii)使用邻-卤代-硝基-苯的取代反应，

iv)用阮内镍Ni还原，v)光气，vi)参见反应路线1

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，其在4位被环状 或非环状胺取代，15可以从4-哌啶酮中间体16、使用标准还原性胺化步 骤制备(反应路线12)。

反应路线12

i)Pd-C/H2，ii)三光气，iii)与2偶合，iv)与HN(R25)(R26)还原性胺化

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，其在4位被甲醇 和芳基基团取代，17可以从中间体16制备或从保护的4-哌啶酮衍生物开 始通过格利雅加成制备，如反应路线13所示(参见例如，欧洲药物化学杂 志(Eur.J.Med.Chem)，40(12)，1197，2005；生物有机药物化学(Bioorg.Med. Chem.Lett)，15(7)，1891，2005；欧洲药物化学杂志(Eur.J.Med.Chem)， 10(2)，178，1975)。

反应路线13

P＝保护基

i)与芳基镁化卤的格利雅反应，ii)去保护

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，其在4位上被芳 基和各种碳连接的官能团取代，如氰基18，羟甲基19，酯20，羧酸21，或 酰胺衍生物22，可以从保护的4-氰基-4-芳基哌啶衍生物开始、使用公知 的反应制备，如反应路线14所示。4-氰基-4-芳基哌啶衍生物容易按照文 献报道的方法获得(例如参见，药物化学杂志(J.Med.Chem)，48(5)，1336， 2005；生物有机药物化学学报(Bioorg.Med.Chem.Lett.)14(1)，207，2004； 生物有机药物化学(Bioorg.Med，Chem)，12(19)，5063，2004；四面体 (Tetrahedron)，60(22)，4875，2004；生物有机药物化学学报(Bioorg.Med. Chem.Lett)，11(14)，1959，2001；欧洲专利申请(Eur.Pat.Appl.)924196，6月 23日，1999；Org.Prep.And Proc.Int.28(4)，478，1996；杂环化学杂志(J. Heterocycl.Chem.)23(1)，73，1986)。

反应路线14

i)低级烷基醇解，酸(R20＝低级烷基)；ii)去保护，iii)参见反应路线1，

iv)水解，v)胺偶合(R27＝低级烷基)

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，所述哌啶环变成 螺二氢吲哚环的一部分，23可以从适当的螺二氢吲哚哌啶开始、使用先前 描述的类似反应路线制备(参见反应路线1)。例如从芳基肼和4-甲酰基-哌 啶开始，使用文献方法可以制备螺二氢吲哚哌啶(参见WO9633189；US 5723616，1998；四面体学报(Tetrahedron Lett)，38(9)，1497，1997)(反应路线 15)。

反应路线15

i)甲苯回流，(R28＝R29＝独立地H，或低级烷基，低级烷氧基或卤素(腙形成)，ii)CF3COOH (Fischer吲哚合成)，iii)NaBH4(亚胺的还原)，iv)烷基化(R22＝低级烷基)，

v)去保护，vi)参见反应路线1

其中R3和R4基团连接形成哌啶或3，6-二氢-2H-吡啶环的式I的化合 物，其分别被4-芳基基团取代，24和25，可以从中间体17制备，中间体 17可以使用酸催化剂脱水，获得式24的化合物。式24的化合物可以使用 Pd-催化的氢化方法加氢，获得式25的化合物，如反应路线16所示。

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，所述哌啶环被双 羟基化和具有4-芳基取代基，21可以便利地从式24的化合物通过双-羟基 化反应制备，如反应路线16所示。

反应路线16

i)脱水，ii)氢化，iii)双-羟基化(OsO4/NalO4或环氧化接着碱催化的开环)

其中R3和R4基团连接形成3-苄基哌啶的式I的化合物，27可以从 反应路线17所示的反应制备。所需的3-苄基-哌啶可以容易地从吡啶-3- 甲醛(carboxaldehyde)和芳基格利雅试剂开始制备。获得的甲醇可以去氧并 且吡啶环可以使用催化氢化饱和化，如B.Agai等(四面体(Tetrahedron)，59 (2003)，7897-7900)报道。如前(参见反应路线1)，3-苄基-哌啶可以容易地 与嘧啶/嘧啶胺2偶合，获得式I的化合物。

反应路线17

i)芳基-Mg-卤化物，ii)氢化，iii)参见反应路线1

其中R3和R4基团连接形成哌啶环的式I的化合物，所述哌啶环被 4-N-乙酰基-4-芳基取代，28可以从式17的化合物使用酸催化的乙腈加成 来制备，该加合物被水解以形成式28的化合物(反应路线18)。与氯乙腈 的类似反应获得中间体29，其可以转化为相应的胺衍生物30。因此，其 中胺可以是低级烷基烷基化33或低级烷基酰基化32或低级烷氧基羰基化 31的式30的化合物，如反应路线18所示。

反应路线18

i)CH3CN/H2SO4/AcOH，ii)ClCH2CN/H2SO4/AcOH，iii)硫脲/EtOH/AcOH/HCl，

iv)用R26-CHO(R26＝低级烷基)还原性烷基化，v)用R30-CO-Cl或R30-SO2-Cl(R30＝低 级烷基)酰化，vi)R31-OCO-Cl，碱(R31＝低级烷基)

其中R3和R4基团连接形成1，3，8-三氮杂-螺[4，5]癸-4-酮环系统的式I 的化合物，该环系统获得式34和35的化合物，可以容易地从Strecker类 型合成、从保护的4-哌啶酮开始、按照文献报道(WO2005/040166；药物化 学杂志(J.Med，Chem)，28(12)，1811，1985；US 199,142，1982)容易地制备， 如反应路线19所示。

反应路线19

i)Strecker合成，ii)原甲酸三乙酯，iii)烷基化(R32-低级烷基基团)，

iv)去保护，v)参见反应路线1

其中R3和R4基团连接形成3-苄基吡咯烷的式I的化合物36可以从 苯基甘氨醇(glycinol)衍生的内酰胺(Meyers，A.I，等，有机化学杂志(J.Org. Chem)，1989，54，4243)按照Westrum和Meyers(四面体学报(Tetrahedron Lett)，1994，973-976)报道的合成方法制备，如反应路线20所示。

反应路线20

i)LiHMDS，烷基化芳基-CH2-卤化物，ii)用LAH还原，iii)氢化，

iv)参见反应路线1

类似地，其中R3和R4基团连接形成3-氨基，3-酰氨基或3-亚磺酰氨 基-吡咯烷的式I的化合物37-39，可以容易地从可商购的3-氨基吡咯烷 衍生物制备(反应路线21)。

反应路线21

i)参见反应路线1，ii)去保护，iii)酰化或磺酰化，iv)烷基化

其中R3是低级烷基或氢并且R4是被芳基，芳烷基，芳酰基，芳氧基， 芳基磺酰基，芳烷基氨基，或芳酰基氨基取代的低级烷基的式I的化合物 40，可以从适当取代的胺、使用反应路线1所示的反应序列制备。这些不 同取代的仲胺可以使用标准合成方法制备。

其中R3和R4基团连接形成3-芳基取代的吗啉环的式I的化合物41， 可以从适当取代的3-芳基-吗啉开始制备，适当取代的3-芳基-吗啉可以使 用文献报道的方法制备。例如，可以使用从容易获得的芳基环氧化物开始 的反应序列制备适当取代的3-芳基吗啉(反应路线22)，所述反应序列如 Epifani，E等(药物化学杂志(J.Med.Chem)，1983，26，254-259)报道。

反应路线22

i)氨，ii)N-酰化，iii)环化，iv)还原，v)参见反应路线1，

vi)甲磺酰氯，碱，vii)用硫代乙酸钾置换，

viii)碱催化的硫代乙酸酯水解和环化

其中R3和R4基团连接形成5-取代的2，5-二氮杂-[2.2.1]-双环庚烷环 衍生物的式I的化合物42，43和44，可以从适当5-取代的2，5-二氮杂 -[2.2.1]-双环庚烷和5-取代的2，5-二氮杂-[3.3.0]-二环辛烷开始、使用先前 描述的方法(参见反应路线1)制备，所述适当5-取代的2，5-二氮杂-[2.2.1]- 双环庚烷和5-取代的2，5-二氮杂-[3.3.0]-二环辛烷可以容易地从可商购的 试剂制备。

42 a X＝N；n＝0，1R33＝低级烷基 43 a X＝N；n＝0，1；B＝CO或SO2

42 b X＝C；n＝0，1R33＝低级烷基 43 b X＝C；n＝0，1；B＝CO或SO2

44 a X＝N；n＝0，1；B＝CO或SO2

44 b X＝C；n＝0，1；B＝CO或SO2

其中R3和R4基团连接形成取代的-4-芳基哌嗪环衍生物的式I的化 合物45，可以从相应的4-芳基哌嗪开始、使用反应路线1所示的反应序列 制备。N-芳基哌嗪通过数个不同路线容易地获得，所述路线包括例如从保 护的或未保护的哌嗪和含卤素芳族化合物开始，参见Brenner E等(四面体 (Tetrahedron)，2002，58，6913)和Wan Y等(合成(Synthesis)，2002，1597)。

其中R3和R4基团连接形成取代的-3-苄基-3-羰(carbo)烷氧基哌啶衍 生物的式I的化合物45，可以从相应的3-苄基-3-羰烷氧基哌啶开始、使 用反应路线1所示的反应序列制备。3-苄基-3-羰烷氧基哌啶可以按照 Maligress，P.E等，(有机化学杂志(J.Org.Chem)，1998，63，9548)报道的方法 制备。

46 a X＝N，R20＝低级烷基

46 b X＝C，R20＝低级烷基

其中R1和R2基团连接形成1-芳基-3，8-二氮杂螺[4，5]癸(dicane)-4-酮 衍生物的式I的化合物47，可以从相应的1-芳基-3，8-二氮杂螺[4，5]癸-4- 酮开始，使用反应路线1所示的反应序列制备。1-芳基-3，8-二氮杂螺[4，5] 癸-4-酮可以按照Van Parys，M等，(Bull des Soc Chimiques Belges，1981，90， 757)或Galley，G等(WO 01/94346 A1，2001)报道的方法制备。类似地，式 48的化合物也可以从适当的哌啶化合物制备(参见四面体学报(Tetrahedron Lett)，43(38)，6865，2002；Helv.Chimica.Acta，83(6)，1247，2000；欧洲专利 申请636609，1995)。

                           48 a X＝N，R34＝H或低级烷基，

47 a X＝N，R34＝H或低级烷基 R35＝R36＝独立地H，或低级烷基，低级烷氧基或

47 b X＝C，R34＝H或低级烷基 卤素

                           48 b X＝C，R34＝H或低级烷基，

                           R35＝R36＝独立地H，或低级烷基，低级烷氧基或

                           卤素

其中R3和R4基团连接形成3-取代的吡咯烷衍生物的式I的化合物 可以从相应的3-取代的吡咯烷开始，使用反应路线1所示的反应序列制备。 3-取代的吡咯烷衍生物可以容易地从保护的3-羟基-吡咯烷、使用本领域已 知的方法(参见例如，Alanine，A等.，WO01/81303A1(2001)和Sternfeld等. 药物化学杂志(J.Med.Chem.)，42，677-690(1999))获得。

49 a X＝N；Z＝O或SO2；Ar＝芳基或芳烷基

49 b X＝C；Z＝O或SO2；Ar＝芳基或芳烷基

下列实施例将阐明本发明的优选实施方案，而不意欲限制本发明的范 围。

实施例1

合成4-(3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺。

步骤1：将5-氨基-4，6-二氯-嘧啶(5.0g，30.49mmol)在丙酮(30mL) 中的25℃混合物用异硫氰酸苯甲酰基酯(5.5g，33.54mmol)处理。将混合 物在回流下搅拌6小时，然后冷却至25℃。将获得的固体通过过滤收集， 用丙酮和石油醚洗涤，并真空干燥，获得N-(7-氯-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 苯甲酰胺(7.87g，79％)，为灰白色固体。在样品上获得的NMR谱图与它 的结构相一致。

步骤2：将N-(7-氯-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-苯甲酰胺(1.0g，3.06 mmol)在甲醇(25mL)中的混合物在25℃用甲醇钠(1.65g，30.60mmol)处 理。将混合物在回流下搅拌3天。此时，真空浓缩反应。将获得的固体溶 解在乙酸乙酯中，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤 并真空浓缩，获得7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺(385mg，70％)，为淡 黄色固体。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤3：将哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.0g，22mmol)在二氯甲烷(40mL)中 的0℃溶液用吡啶(2.65ml，33mmol)和三光气(3.2g，10.8mmol)处理。将 获得的黄色溶液在25℃搅拌1小时。此时，将反应混合物在二氯甲烷(200 mL)和1N盐酸水溶液(75mL)之间分配。通过硫酸镁干燥有机物，并真空 浓缩，获得4-氯羰基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.73g，89％)，为黄色固体。将 该物质在不进一步纯化下用于下一步骤。

步骤4：将7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺(3.5g，19.2mmol)在四 氢呋喃(100mL)中的溶液用氢化钠(60％，在矿物油中，2.3g，57mmol)在 25℃下处理。观察到少许气体逸出。将获得的紫色淤浆升温至50℃达1 小时。此时，将反应冷却至25℃，用N，N-二异丙基乙基胺(10mL，57mmol) 处理。将获得的混合物在25℃搅拌30分钟。然后将混合物用4-氯羰基- 哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.73g，19mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液在10 分钟期间内处理。将反应在50℃搅拌过夜。此时，真空浓缩反应，用甲 醇(100mL)稀释，吸收到硅胶(6g)上。将硅胶分成两等份。ISCO色谱法 (330g，二氧化硅，梯度洗脱5/95甲醇/二氯甲烷)获得4-(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.58g，74％)，为灰白 色固体；LRMS：对于C16H22N6O4S(M+H)+，m/z＝395。在样品上获得的 NMR谱图与它的结构相一致。

步骤5：在0℃将氯化氢气体鼓泡通过4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.20g，13mmol)在二氯甲烷(70mL) 中的溶液10分钟。形成白色沉淀。将获得的淤浆在25℃搅拌2小时。此 时，将混合物真空浓缩，高真空干燥，获得哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐(4.61g)，为白色固体；LRMS：C11H14N6O2S (M+H)+，m/z＝295。将该固体在不进一步纯化下用于下一步骤。

步骤6：将哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐 (2g，6.0mmol)在甲醇(200mL)中的溶液用N，N-二异丙基乙基胺(2.2mL， 12.6mmol)处理。将混合物在25℃搅拌10分钟，直至形成澄清溶液。此 时，将反应用乙酸(1.75mL，30.6mmol)，3-三氟甲基-苯甲醛(2.4mL，17.9 mmol)和氰基硼氢钠(1.1g，17.7mmol)处理。将该混合物在25℃搅拌过 夜。然后将反应真空浓缩并在二氯甲烷和磷酸盐缓冲水溶液(pH＝7)之间分 配。将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓 缩，获得固体。将该固体溶解在甲醇中，吸收到硅胶(4g)上。ISCO色谱 法(330g，二氧化硅，梯度洗脱5/95甲醇/二氯甲烷)获得4-(3-三氟甲基- 苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(1.56g，58％)， 为白色固体；LRMS：C19H19F3N6O2S(M+H)+，m/z＝453。在样品上获得 的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似的方式，如下获得实施例2-28的化合物：

实施例2

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-氯-苯甲醛：4-(3-氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H19ClN6O2S(M+H)+，m/z＝419。在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例3

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 4-氯-苯甲醛：4-(4-氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H19ClN6O2S(M+H)+，m/z＝419。在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例4

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-氰基-苯甲醛：4-(3-氰基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C19H19N7O2S(M+H)+，m/z＝410.在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例5

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 2-氯-苯甲醛：4-(2-氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H19ClN6O2S(M+H)+，m/z＝419。在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例6

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-甲氧基-苯甲醛：4-(3-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C19H22N6O3S(M+H)+，m/z＝415。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例7

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3，4-二氟-苯甲醛：4-(3，4-二氟-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H18F2N6O2S(M+H)+，m/z＝421。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例8

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-氯-4-甲氧基-苯甲醛：4-(3-氯-4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色粉末；LRMS：C19H21ClN6O3S(M+H)+， m/z＝449。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例9

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-硝基-苯甲醛：4-(3-硝基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，为白色粉末；LRMS：C18H19N7O4S(M+H)+，m/z＝430。在 样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例10

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-甲酰基-苯甲酸甲酯：3-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)- 哌嗪-1-基甲基]-苯甲酸甲酯，为白色固体；LRMS：C20H22N6O4S(M+H)+， m/z＝443。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例11

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3，5-二甲氧基-苯甲醛：4-(3，5-二甲氧基-苄基)哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C20H24N6O4S(M+H)+，m/z＝ 445。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例12

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-三氟甲氧基-苯甲醛：4-(3-三氟甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C19H19F3N6O3S(M+H)+， m/z＝469。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例13

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-二氟甲氧基-苯甲醛：4-(3-二氟甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C19H20F2N6O3S(M+H)+， m/z＝451。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例14

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3，5-二氯-苯甲醛：4-(3，5-二氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H18Cl2N6O2S(M+H)+，m/z＝454。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例15

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-羟基-苯甲醛：4-(3-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，为灰白色固体；LRMS：C18H20N6O3S(M+H)+，m/z＝401。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例16

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-(2-羟基-乙氧基)-苯甲醛：4-[3-(2-羟基-乙氧基)-苄基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧 基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为灰白色固体；LRMS：C20H24N6O4S (M+H)+，m/z＝445。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例17

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 1-(3-氯-苯基)-乙酮：4-[1-(3-氯-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为灰白色固体；LRMS：C19H21ClN6O2S(M+H)+， m/z＝433。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例18

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 苯基-乙醛：4-苯乙基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺 三氟乙酸盐，为灰白色固体；LRMS：C19H22N6O2S(M+H)+，m/z＝399。

实施例19

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 4-氟-3-(三氟甲基)苯甲醛：4-(4-氟-3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧 基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C19H18F4N6O2S(M+H)+471.1221，实测值471.1220。

实施例20

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 6-三氟甲基-吡啶-3-甲醛：4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲 氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C18H18F3N7O2S(M+H)+454.1268，实测值454.1272。

实施例21

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 5-氯水杨醛：4-(5-氯-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C18H20N6O3SCl(M+H)+435.1001，实测值435.1002。

实施例22

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-甲酰基苯氧基乙酸：{3-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰 基)-哌嗪-1-基甲基]-苯氧基}-乙酸三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e 理论值C20H23N6O5S(M+H)+459.1445，实测值459.1446。

实施例23

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3，5-二氯水杨醛：4-(3，5-二氯-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C18H19N6O3SCl2(M+H)+469.0611，实测值469.0613。

实施例24

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-氟水杨醛：4-(3-氟-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C18H20N6O3SF(M+H)+419.1296，实测值419.1298。

实施例25

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 5-氟水杨醛：4-(5-氟-2-羟基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C18H20N6O3SF(M+H)+419.1296，实测值419.1298。

实施例26

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-甲基水杨醛：4-(2-羟基-3-甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C19H23N6O3S(M+H)+415.1547，实测值415.1547。

实施例27

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-甲酰基水杨酸：2-羟基-3-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰 基)-哌嗪-1-基甲基]-苯甲酸三氟乙酸盐，为白色固体；ES-HRMS m/e理论 值C19H21N6O5S(M+H)+445.1289，实测值445.1291。

实施例28

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 6-吗啉代-烟碱醛：4-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基甲基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻 唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C21H26N6O3S(M+H)+， m/z＝470。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例29

合成4-吡啶-2-基甲基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

将三光气(165mg，0.55mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物用吡啶 (260mg，3.30mmol)缓慢处理，接着滴加7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺 (200mg，1.10mmol)。使得混合物在25℃搅拌2小时。此时，将反应用1-[(2- 吡啶基)甲基]哌嗪(390mg，2.20mmol)处理。将混合物在25℃继续搅拌另 外2小时。此时，通过缓慢加入水猝灭反应。将水层用乙酸乙酯萃取。然 后将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩。 快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，98/2二氯甲烷/甲醇)获得4-吡啶 -2-基甲基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(43mg， 10％)，为淡黄色油；LRMS：C17H19N7O2S(M+H)+，m/z＝385。在样品上 获得的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似方式，如下获得实施例30-36的化合物：

实施例30

起始于(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-甲基胺和1-苄基哌嗪：4-苄 基-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为黄色固体； ES-HRMS m/e理论值C18H21N6O2S(M+H)+385.1441，实测值385.1441.

实施例31

起始于(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-甲基胺和4-(4-氟-苯基)-2，8- 二氮杂-螺[4.5]癸-1-酮：获得4-(4-氟-苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂螺[4，5]癸烷 -8-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(59mg，24％)，为白色固体； LRMS：C21H21FN6O3S(M+H)+，m/z＝456。在样品上获得的NMR谱图 与它的结构相一致。

实施例32

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和2-(4-三氟甲基-苯基)-吗啉： 获得2-(4-三氟甲基-苯基)-吗啉-4-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺(140mg，58％)，为白色固体；LRMS：C18H16F3N5O3S(M+H)+，m/z＝ 439。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例33

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和哌啶-3-羧酸噻唑-2-基酰胺盐 酸盐：获得哌啶-1，3-二羧酸1-[(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺]3- 噻唑-2-基酰胺(11mg，5.4％)，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C16H17N7O3S2(M+Na)+442.0726，实测值442.0729.

实施例34

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和3-(4-氯苄基)吡咯烷草酸盐： 3-(4-氯-苄基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(21 mg，9.3％)，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值C18H18ClN5O2S(M+H)+ 404.0943，实测值404.0944.

实施例35

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和3-[4-(三氟甲基)苄基]吡咯烷 草酸盐：3-(4-三氟甲基-苄基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺(12mg，5％)，为白色固体；.ES-HRMS m/e理论值 C19H18F3N5O2S(M+H)+438.1206，实测值438.1207.

实施例36

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和3-(4-甲基苯基磺酰基)吡咯烷 盐酸盐：3-(甲苯-4-磺酰基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺(78mg，32.8％)，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值C18H19N5O4S2 (M+H)+434.0951，实测值434.0951.

实施例37

合成4-(4-氯-2-甲磺酰基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺。

将哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐(如在 实施例1中制备，625mg，1.70mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合 物用N，N-二异丙基乙基胺(660mg，5.10mmol)处理、接着1-(溴甲基)-4- 氯-2-(甲基磺酰基)-苯(530mg，1.87mmol)处理。使得反应混合物在80℃ 搅拌3小时。此时，将反应倒入水中。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物 用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速色谱 法(Merck硅胶60，230-400目，80/20己烷/乙酸乙酯)获得4-(4-氯-2-甲磺 酰基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(580mg， 69％)，为灰白色固体；LRMS：C19H21ClN6O4S2(M+H)+，m/z＝496。在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似的方式，如下获得实施例38-42的化合物：

实施例38

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3，4-二氯苄基溴：获得4-(3，4-二氯-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(64mg，26％)，为白色固体；LRMS：C18H18Cl2N6O2S (M+H)+，m/z＝453。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例39

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 4-甲氧基-3-(三氟甲基)苄基溴：获得4-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄基)-哌嗪 -1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(90mg，34％)，为淡棕色固 体；LRMS：C20H21F3N6O3S(M+H)+，m/z＝482。在样品上获得的NMR谱 图与它的结构相一致。

实施例40

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 5-溴甲基-2-甲氧基-苄腈：获得4-(3-氰基-4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲 氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(25mg，6％)，为淡棕色固体；LRMS： C20H21N7O3S(M+H)+，m/z＝439。在样品上获得的NMR谱图与它的结构 相一致。

实施例41

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3，5-二(三氟甲基)苄基溴：获得4-(3，5-双-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲 氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(130mg，28％)，为灰白色固体；LRMS： C20H18F6N6O2S(M+H)+，m/z＝520。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

实施例42

(e)起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐 和1-(2-溴乙氧基)-3-(三氟甲基)苯：获得4-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基]- 哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(39mg，9％)，为棕色 固体；LRMS：C20H21F3N6O3S(M+H)+，m/z＝482。在样品上获得的NMR 谱图与它的结构相一致。

实施例43

合成4-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺

将哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐(如实 施例1制备，300mg，0.91mmol)，4-氟-3-(三氟甲基)苄基氯(140mL，0.92 mmol)和三乙胺(3.4mL，2.27mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液在25℃ 搅拌过夜。此时，将反应倒入水中，萃取到乙酸乙酯中。将合并的有机物 用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。将获得 的固体从2:1:1甲醇/二甲亚砜/二噁烷再结晶两次，获得4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯甲酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(134 mg，30.5％)，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值C19H16F4N6O3S(M+H)+ 485.1014，实测值485.1014.

以类似的方式，如下获得实施例44-46的化合物：

实施例44

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 6-三氟甲基-烟酰氯：4-(6-三氟甲基-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻 唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色固体；ES-HRMS m/e理论值 C18H16F3N7O3S(M+H)+468.1060，实测值468.1058.

实施例45

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-氯苯甲酰氯：4-(3-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H17ClN6O3S(M+H)+，m/z＝433。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例46

起始于哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺盐酸盐和 3-氯-苯磺酰氯：4-(3-氯-苯磺酰基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，为灰白色固体；LRMS：C17H17ClN6O4S2(M+H)+，m/z＝469。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例47

合成4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺

步骤1：将三光气(3.2g，10.85mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物 通过注射器用吡啶(1.72g，21.72mmol)缓慢处理。将获得的白色悬浮液然 后用1-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪(500mg，2.17mmol)逐份处理。使得反应混 合物在25℃搅拌18小时。此时，通过加入水缓慢猝灭反应。将水层用二 氯甲烷萃取。将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤 并真空浓缩，获得4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-碳酰氯(500mg，79％)。在 样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺(100mg，0.55mmol)在四 氢呋喃(10mL)中的混合物在25℃在氮气氛下用氢化钠(60％悬浮液，在 矿物油中，30mg，0.66mmol)处理。将反应混合物在50℃搅拌30分钟。此 时，将反应用N，N-二异丙基乙基胺(215mg，1.65mmol)和4-[3-(三氟甲基) 苯基]哌嗪-1-碳酰氯(180mg，0.60mmol)处理。在50℃搅拌该混合物3天。 此时，真空浓缩反应，倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机物用2N盐酸 水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快 速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，80/20己烷/乙酸乙酯)获得4-[3-(三 氟甲基)苯基]哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(70mg， 29％)，为淡棕色固体；LRMS：C18H17F3N6O2S(M+H)+，m/z＝438。在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似的方式，如下获得实施例48-58的化合物：

实施例48

从7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺和5-氯-1，2-二氢-1-(甲基磺酰基)螺 [3H-吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐：获得5-氯-1，2-二氢-N-(7-甲氧基噻唑[5，4-d]嘧 啶-2-基)-1-(甲基磺酰基)螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺(214mg，77％)，为 淡棕色固体；LRMS：C20H21ClN6O4S2(M+H)+，m/z＝508。在样品上获得 的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例49

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(6-氟-2-氧代-苯并噁唑-3- 基)-哌啶-1-碳酰氯：获得4-(6-氟-2-氧代-苯并噁唑-3-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲 氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(184mg，75％)，为淡棕色固体；LRMS： C19H17FN6O4S(M+H)+，m/z＝444。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

实施例50

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和5-甲氧基-1，2-二氢-1-甲基螺 -[3H-吲哚-3，4′-哌啶]：获得1，2-二氢-5-甲氧基-N-(7-甲氧基噻唑[5，4-d]嘧啶 -2-基)-1-甲基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，为黄色固体；LRMS： C21H24N6O3S(M+H)+，m/z＝440。在样品上获得的NMR谱图与它的结构 相一致。

实施例51

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和1-(环丙基甲基)-1，2-二氢-螺 [3H-吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐：获得1-(环丙基甲基)-1，2-二氢-N-(7-甲氧基噻 唑[5，4-d]嘧啶-2-基)螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，为黄色固体；LRMS： C23H26N6O2S(M+H)+，m/z＝450。在样品上获得的NMR谱图与它的结构 相一致。

实施例52

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和5-氯-1-(环丙基甲基)-1，2-二氢 -螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]盐酸盐：获得1-(环丙基甲基)-1，2-二氢-5-氯-N-(7-甲 氧基噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基)螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-甲酰胺，为黄色固体； LRMS：C23H25ClN6O2S(M+H)+，m/z＝484。在样品上获得的NMR谱图 与它的结构相一致。

实施例53

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和5-甲基-1-哌啶-4-基-1，3-二氢- 苯并咪唑-2-酮：获得4-(5-甲基-2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1-基)-哌啶-1-羧 酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为淡黄色固体；LRMS： C20H21N7O3S(M+H)+，m/z＝439。在样品上获得的NMR谱图与它的结构 相一致。

实施例54

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和3-(4-三氟甲氧基-苄基)-哌啶 -3-羧酸乙酯：获得1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-3-(4- 三氟甲氧基-苄基)-哌啶-3-羧酸乙酯，为黄色固体；LRMS：C23H24F3N5O5S (M+H)+，m/z＝539。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例55

从7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(4-氟-苯基)-2，8-二氮杂-螺 [4.5]癸-1-酮：获得4-(4-氟-苯基)-1-氧代-2，8-二氮杂-螺[4.5]癸烷-8-羧酸(7- 甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为淡棕色固体；LRMS： C21H21FN6O3S(M+H)+，m/z＝456。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

实施例56

从7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4′-羟基-3′，4′，5′，6′-四氢-2′H-[2，4′] 联吡啶基-1′-碳酰氯：获得4’-羟基-3’，4’，5’，6’-四氢-2H-[2，4’]联吡啶基-1’-羧 酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为灰白色固体；LRMS： C17H18N6O3S(M+H)+，m/z＝386。在样品上获得的NMR谱图与它的结构 相一致。

实施例57

从7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1- 基)-哌啶-1-碳酰氯：4-(2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧 基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺；ES-HRMS m/e理论值C18H20N7O3S (M+H)+426.1343，实测值426.1344.

实施例58

3，4-二羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺

将4-(3-三氟甲基-苯基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(来自实施例67)(100mg，0.23mmol)，N-甲基吗啉 N-氧化物(60mg，0.51mmol)和四氧化锇(4wt.％，在水中，13μL，0.053 mmol)在丙酮(9mL)和水(1mL)中的混合物室温搅拌过夜。将反应混合物 用硫酸氢钠猝灭，室温搅拌10分钟。将混合物过滤并将滤液用甲醇稀释， 吸收到硅胶上。柱色谱法(610％甲醇/二氯甲烷)获得3，4-二羟基-4-(3- 三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(25 mg，23％产率)，为淡棕色粉末；LRMS：C19H18F3N5O4S(M+H)+，m/z＝470。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例59

合成4-(3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐

步骤1：将三光气(2.84g，9.6mmol)在二氯甲烷(100mL)中的0℃溶液 用1-苄基-哌啶-4-酮(6.0g，31.7mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液处理。 使得反应混合物升温至25℃，25℃搅拌过夜。此时，将混合物真空浓缩。 快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，梯度洗脱60/40乙酸乙酯/己烷) 获得4-氧代-哌啶-1-碳酰氯(3.9g，76％)，为棕色油。在样品上获得的NMR 谱图与它的结构相一致。

步骤2：将7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺(2.2g，12.1mmol)在四 氢呋喃(70mL)中的25℃溶液用氢化钠(60％，在矿物油中，1.45g，36mmol) 处理。观察到少许气体逸出。将获得的紫色淤浆升温至70℃1小时。此时， 将反应冷却至25℃，用N，N-二异丙基乙基胺(6.5mL，37.4mmol)和4-氧 代-哌啶-1-碳酰氯(3.9g，24.2mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液处理。 70℃搅拌反应过夜。此时，真空浓缩反应，溶解在甲醇中并吸收到硅胶(6 g)上。将硅胶分成两等份。ISCO色谱法(120g，二氧化硅，梯度洗脱5/95 甲醇/二氯甲烷)获得不纯的暗棕色固体(1.09g)。从乙酸乙酯中研制固体， 获得4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(0.88g， 24％)，为淡棕色固体；LRMS：C12H13N5O3S(M+H)+，m/z＝308。在样品 上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤3：将4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺 (50mg，0.16mmol)在甲醇(5mL)中的25℃溶液用1，2，3，4-四氢-异喹啉 (22mg，0.16mmol)，乙酸(28mL，0.49mmol)和氰基硼氢钠(30mg，0.48 mmol)处理。将反应混合物在25℃搅拌过夜。此时，真空浓缩反应。高效 液相色谱法(乙腈/0.1％三氟乙酸-水/0.1％三氟乙酸10-90％梯度)获 得4-(3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺三氟乙酸盐(18mg，21％)，为白色固体；LRMS：C21H24N6O2S (M+H)+，m/z＝425。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似的方式，如下获得实施例60-64的化合物：

实施例60

起始于4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺和 2，3-二氢-1H-异吲哚：4-(1，3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为淡棕色固体；LRMS：C20H22N6O2S (M+H)+，m/z＝411.

实施例61

起始于4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺和 3-苯基-吡咯烷：4-(3-苯基-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为淡棕色固体；LRMS：C22H26N6O2S (M+H)+，m/z＝439.

实施例62

起始于4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺和 2-苯基-吡咯烷：4-(2-苯基-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为淡棕色固体；LRMS：C22H26N6O2S (M+H)+，m/z＝439.

实施例63

起始于4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺和 2，3-二氢-1H-吲哚：4-(2，3-二氢-吲哚-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为淡棕色固体；LRMS：C20H22N6O2S (M+H)+，m/z＝411.

实施例64

起始于4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺和 5-氯-2，3-二氢-1H-吲哚：4-(5-氯-2，3-二氢-吲哚-1-基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基 -噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，为淡棕色粉末；LRMS： C20H21N6O2S(M+H)+，m/z＝445.

实施例65

合成4-羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺

步骤1：将冷却至-20℃的三光气(3.26g，0.011mol)和无水四氢呋喃 (1000mL)的溶液用吡啶(4.45mL，0.055mol)处理。将获得的浑浊悬浮液 用4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-4-醇(9g，0.036mol)在无水四氢呋喃(45mL) 中的溶液缓慢处理，将内部温度保持在-20℃至-30℃之间。将获得的混合 物转移到冰浴中，使得达到25℃过夜，以提供淡棕色溶液，有少量棕色 沉淀。然后将反应混合物真空浓缩，获得棕色固体。快速色谱法(Merck硅 胶60，230-400目，75/25己烷/乙酸乙酯)获得4-羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)- 哌啶-1-碳酰氯(6.89g，61％)，为澄清的粘性油。在样品上获得的NMR谱 图与它的结构相一致。

步骤2：将7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺(2.72g，0.015mol)在四 氢呋喃(250mL)中的混合物在25℃用氢化钠(60％，在矿物油中，1.79g， 0.045mol)处理。将淤浆升温至50℃ 1小时，然后在冰浴中冷却至0℃。 将冷却的反应混合物用N，N-二异丙基乙基胺(7.8mL，0.045mol)和4-羟基 -4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-碳酰氯(6.5g，0.021mol)在四氢呋喃(50mL) 中的溶液处理。使得反应混合物达到25℃过夜。此时，真空浓缩混合物， 获得棕色固体，其置入乙酸乙酯(600mL)中。将有机物用1N盐水水溶液 (2 x 200mL)，水(1 x 200mL)和饱和氯化钠水溶液(1 x 200mL)洗涤，通过 硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。ISCO色谱法(330g，二氧化硅，梯度洗脱 8/92甲醇/二氯甲烷)获得淡棕色固体(3.81g)。将该固体从二氯甲烷中研制 两次，获得4-羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(3.32g，49％)，为白色固体；LRMS：C19H18F3N5O3S (M+H)+，m/z＝454。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似方式，如下获得实施例66-78的化合物：

实施例66

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(3-三氟甲基-苯基)-哌 啶-1-碳酰氯：4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，为灰白色固体；LRMS：C19H18F3N5O2S(M+H)+，m/z＝438。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例67

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(3-三氟甲基-苯基)-3，6- 二氢-2H-吡啶-1-碳酰氯：4-(3-三氟甲基-苯基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(7- 甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为淡棕色固体；LRMS： C19H16F3N5O2S(M+H)+，m/z＝436。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

实施例68

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和3-(3-三氟甲基-苄基)-哌 啶-1-碳酰氯：3-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，为淡棕色固体；LRMS：C20H20F3N5O2S(M+H)+，m/z＝452。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例69

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和3-苄基-吡咯烷-1-碳酰氯： 3-苄基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为灰白色 固体；LRMS：C18H19N5O2S(M+H)+，m/z＝370。在样品上获得的NMR 谱图与它的结构相一致。

实施例70

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(3-三氟甲基-苯磺酰 基)-哌啶-1-碳酰氯：4-(3-三氟甲基-苯磺酰基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为棕色固体；LRMS：C19H18F3N5O4S2(M+H)+， m/z＝502。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例71

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-氧代-1-苯基-1，3，8-三氮 杂-螺[4.5]癸烷-8-碳酰氯：4-氧代-1-苯基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸烷-8-羧酸 (7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为淡棕色固体；LRMS： C20H21N7O3S(M+H)+，m/z＝440。在样品上获得的NMR谱图与它的结构 相一致。

实施例72

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(4-氯-苯磺酰基)-哌啶 -1-碳酰氯：4-(4-氯-苯磺酰基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C18H18ClN5O4S2(M+H)+，m/z＝468。在 样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例73

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(甲苯-4-磺酰基)-哌啶 -1-碳酰氯：4-(甲苯-4-磺酰基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺，为白色固体；LRMS：C19H21N5O4S2(M+H)+，m/z＝448。在样 品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例74

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(3-氯-苯氧基)-哌啶-1- 碳酰氯：4-(3-氯-苯氧基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，为灰白色固体；LRMS：C18H18ClN5O3S(M+H)+，m/z＝420。在样品 上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例75

(k)起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(4-氟-苄基)-哌啶-1- 碳酰氯：4-(4-氟-苄基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺，为淡棕色固体；LRMS：C19H20FN5O2S(M+H)+，m/z＝402。在样品上 获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例76

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和2-(1-氯羰基-哌啶-4-磺酰 基)-苯甲酸甲酯：2-[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌啶 -4-磺酰基]-苯甲酸甲酯，为淡棕色固体；LRMS：C20H21N5O6S2(M+H)+， m/z＝492。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例77

起始于7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺和4-(3-三氟甲基-苄基)-哌 啶-1-碳酰氯：4-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺，为淡棕色固体；LRMS：C20H20F3N5O2S(M+H)+，m/z＝452。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例78

合成4-(3-氯-苯基)-4-羟基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺

将冷却至0℃的4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺(如实施例59制备，100mg，0.33mmol)在四氢呋喃(35mL)中的 溶液用3-氯苯基溴化镁(0.5M，在四氢呋喃中，1.6mL，0.8mmol)处理。将 获得的混合物在25℃搅拌3小时。此时，将反应混合物冷却至0℃，用另 外量的3-氯苯基溴化镁(0.5M，在四氢呋喃中，6mL，3.0mmol)处理。使得 混合物升温至25℃和在25℃搅拌过夜。此时，用甲醇猝灭反应，将反应 物吸收到硅胶(6g)上。ISCO色谱法(120g，二氧化硅，梯度洗脱7/93甲 醇/二氯甲烷)获得4-(3-氯-苯基)-4-羟基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(61mg，44％)，为淡棕色固体；LRMS：C18H18ClN5O3S (M+H)+，m/z＝420。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

以类似的方式，如下获得实施例79的化合物：

实施例79

起始于4-氧代-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺和 3-甲氧基苯基溴化镁：4-羟基-4-(3-甲氧基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻 唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为淡棕色固体；LRMS：C19H21N5O4S(M+H)+， m/z＝416。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例80

合成4’-羟基-6-三氟甲基-3’，4’，5’，6’-四氢-2’H-[2，4’]联吡啶基-1’-羧酸(7-甲 氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

步骤1：将冷却至-78℃的在氮气氛下的2-溴-6-(三氟甲基)吡啶(300 mg，1.33mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物用正丁基锂(2M在四氢呋 喃中的溶液，0.83mL，1.33mmol)处理。在-78℃搅拌混合物15分钟。此时， 用1-boc-4-哌啶酮(265mg，1.33mmol)处理反应。将混合物然后缓慢升温至 25℃，在25℃搅拌1小时。此时，将反应倒入水中。将水层用乙酸乙酯 萃取。将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空 浓缩，获得4’-羟基-6-三氟甲基-3’，4’，5’，6’-四氢-2’H-[2，4’]联吡啶基-1’-羧酸 叔丁酯(450mg，98％)，为黄色油；LRMS：C16H21F3N2O3(M+H)+，m/z＝ 346。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将4’-羟基-6-三氟甲基-3’，4’，5’，6’-四氢-2’H-[2，4’]联吡啶基-1’- 羧酸叔丁酯(450mg，1.30mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混合物用三氟乙酸 (5mL)处理。在25℃搅拌反应30分钟。此时，将反应真空浓缩，获得黄 色油。将该油溶解在二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水 溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，获得6-三氟甲基-2’，3’，5’，6’- 四氢-1’H-[2，4’]联吡啶基-4’-醇(320mg，100％)，为黄色油；LRMS： C11H13F3N2O3(M+H)+，m/z＝246。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

步骤3：将6-三氟甲基-2’，3’，5’，6’-四氢-1’H-[2，4’]联吡啶基-4’-醇(320 mg，1.30mmol)在乙腈(15mL)中的混合物用(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-氨基甲酸苯基酯(360mg，1.18mmol)处理。将混合物在回流下搅拌 2小时。此时，将反应倒入饱和碳酸氢钠水溶液。将水层用二氯甲烷萃取。 将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。 快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，98/2二氯甲烷/甲醇)获得4’-羟 基-6-三氟甲基-3’，4’，5’，6’-四氢-2’H-[2，4’]联吡啶基-1’-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(94mg，17％)，为白色固体；LRMS： C18H17F3N6O3S(M+H)+，m/z＝454。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

实施例81

合成4-乙酰基氨基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

将4-羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺(如实施例65制备，100mg，0.22mmol)在乙腈(0.16mL)和 冰醋酸(0.21mL)中的冷却至0℃的溶液用浓硫酸(0.21mL)逐滴处理。然 后将获得的混合物升温至25℃。在搅拌2小时后，将反应混合物用水稀释， 用饱和碳酸氢钠溶液中和并用乙酸乙酯萃取。将萃取物通过硫酸钠干燥， 过滤并真空浓缩。高效液相色谱法(乙腈/0.1％三氟乙酸/水梯度)、接着冻干 所需级分，获得4-乙酰基氨基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基- 噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(37mg，28％)，为白色粉末；ES-HRMS m/e 理论值C21H22N6O3SF3(M+H)+495.1421，实测值495.1424.

实施例82

合成4-氨基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺盐酸盐

步骤1：将4-羟基-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(如实施例65制备，114mg，0.25mmol)在乙酸 (0.24mL)中的混合物用氯乙腈(0.20mL，3.10mmol)处理。将获得的混合 物在水浴中超声处理直至所有固体溶解，然后冷却至0℃。将反应然后用 浓硫酸(0.24mL)在0℃处理。在加入完成后，将反应升温至25℃，25℃ 搅拌2小时。此时，将混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。将有机物用饱 和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤并真 空浓缩。将获得的物质用二乙醚研制，获得4-(2-氯-乙酰基氨基)-4-(3-三氟 甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(88mg， 67％)，为灰白色固体。将该物质不进一步纯化使用。

步骤2：将4-(2-氯-乙酰基氨基)-4-(3-三氟甲基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲 氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(81mg，0.15mmol)和硫脲(15.4mg， 0.20mmol)在乙醇/乙酸(0.5mL的5:1乙醇/乙酸混合物)中的混合物在密 封管中加热至80℃18小时。此时，使得混合物冷却至25℃，用水(5mL) 稀释并过滤。将滤液用1N氢氧化钠水溶液中和，然后用乙酸乙酯萃取。 将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩， 获得35mg粗制物质。将该物质溶解在甲醇/二氯甲烷中，装载到2硅胶 制备薄层色谱板(0.5mm厚)上，其然后用10％甲醇/二氯甲烷洗脱，获得 白色粉末(26mg)。然后将该物质溶解在二噁烷中，用在二噁烷中的4N盐 酸(1mL)处理。将获得的溶液然后浓缩和冻干，获得4-氨基-4-(3-三氟甲 基-苯基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺的盐酸盐(27 mg，37％)，为淡黄色固体；ES-HRMS m/e理论值C19H20N6O2SF3(M+H)+ 453.1315，实测值453.

实施例83

合成4-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺

步骤1：将(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-氨基甲酸苯基酯(6g， 19.8mmol)和哌啶-4-基-氨基甲酸叔丁酯(4.37g，21.8mmol)在乙腈(400 mL)中的溶液加热至回流1小时，然后在25℃搅拌过夜。将获得的固体通 过过滤收集，用乙腈漂洗，真空干燥，获得[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基氨基甲酰基)-哌啶-4-基]-氨基甲酸叔丁酯(7.3g，90％)，为白色固体； ES-HRMS m/e理论值C17H24N6O4S(M+H)+409.1653，实测值409.1653.

步骤2：将[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌啶-4- 基]-氨基甲酸叔丁酯(14.5g)和三氟乙酸(100mL)的混合物在25℃搅拌1 小时。然后将反应真空浓缩。将获得的残余物用乙醚研制，并真空干燥， 获得4-氨基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺的三氟乙 酸盐(14.4g，100％)，为白色固体。

步骤3：将4-氨基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺 的三氟乙酸盐(1.82g，4.30mmol)在甲醇中的悬浮液用N，N-二异丙基乙基 胺(1.5mL，6.50mmol)，4-氟-3-(三氟甲基)苯甲醛(1.3mL，6.50mmol)和 甲苯处理。将获得的混合物在25℃搅拌1小时，然后真空浓缩。重复该 步骤，直至反应混合物在溶解在甲苯中时变得均匀。在最终浓缩去除甲苯 后，将反应混合物用二氯乙烷(100mL)稀释，然后用乙酸(0.26g)和三乙 酰氧基硼氢化钠(2.73g，13mmol)处理。将获得的反应混合物在25℃搅拌 过夜。此时，将反应混合物倒入水中，萃取到乙酸乙酯中。将有机物用饱 和碳酸氢钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。快速色谱法 (Merck硅胶60，230-400目，梯度洗脱1:1乙酸乙酯/己烷)获得无色油。 将该油溶解在二乙醚中，然后真空浓缩，获得4-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨 基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(530mg，25％)， 为白色泡沫状固体；ES-HRMS m/e理论值C20H20F4N6O2S(M+H)+ 485.1378，实测值485.1378.

以类似方式，如下获得实施例84的化合物：

实施例84

起始于4-氨基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺的 三氟乙酸盐和6-三氟甲基-吡啶-3-甲醛：4-[(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨 基]-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(72mg，31.4％)， 为白色固体；ES-HRMS m/e理论值C19H20F3N7O2S(M+H)+468.1424，实测 值468.1424.

实施例85

合成4-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基氨基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

将4-氨基-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺的三氟 乙酸盐(如实施例83制备，580mg，1.37mmol)，4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰氯 (261mL，1.64mmol)和三乙胺(573L，4.11mmol)在二氯甲烷(15mL)中 的悬浮液在25℃搅拌过夜。此时，将反应用水稀释，用乙酸乙酯萃取。 将有机物用饱和氯化钠水溶液和饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干 燥，过滤和真空浓缩。快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，梯度洗脱 3:7乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯)获得4-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰基氨 基)-哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(21mg，30.6％)， 为灰白色固体；ES-HRMS m/e理论值C20H18F4N6O3S(M+H)+499.1170，实 测值499.1170.

实施例86

合成3-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基氨基]-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

步骤1：将7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺(1.0g，5.50mmol)在四氢 呋喃(1L)中的混合物用吡啶(1.3g，16.48mmol)处理。将反应在25℃搅 拌30分钟。此时，将反应用三光气(880mg，2.96mmol)在四氢呋喃(5mL) 中的溶液、接着(3R)-(+)-3-(叔丁氧羰基)氨基吡咯烷(1.74g，9.34mmol)缓 慢处理。使得混合物在25℃搅拌过夜。此时，通过加入1N盐酸水溶液 猝灭反应。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物用2N盐酸水溶液和饱和氯 化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤和真空浓缩，获得[1-(7-甲氧基- 噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.75g， 81％)，为米色固体；LRMS：C16H22N6O4S(M+H)+，m/z＝394。在样品上 获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-3- 基]氨基甲酸叔丁酯(3.4g，8.63mmol)在三氟乙酸(25mL)中的混合物在 25℃搅拌1小时。此时，将反应真空浓缩以提供红色油。将该油用乙醚 研制，获得(S)-3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺的三氟乙酸盐(3.5g，99％)，为淡棕色固体。

步骤3：将(S)-3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺(300mg，0.74mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物用 N，N-二异丙基乙基胺(285mg，2.20mmol)和1-(2-溴乙氧基)-3-(三氟甲基) 苯(220mg，0.81mmol)处理。将反应混合物在80℃搅拌1小时。此时， 将反应倒入水中。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物用饱和氯化钠水溶液 洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。制备高效液相色谱分离获得 3-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基氨基]-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(28mg，8％)，为淡棕色固体；LRMS：C20H21F3N6O3S (M+H)+，m/z＝482。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例87

合成(R)-3-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

步骤1：将(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-氨基甲酸苯基酯(1.5g， 0.0049mol)在乙腈(80mL)中的25℃溶液用吡咯烷-3(R)-基-氨基甲酸叔丁 酯(0.92g，0.049mol)处理。将反应混合物在回流下加热1小时。然后将它 冷却至25℃并真空浓缩。将残余物用乙醚研制，过滤和真空浓缩，获得 [1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-3(R)-基]-氨基甲 酸叔丁酯(1.99g，99％)；LRMS：C16H22N6O4S(M+H)，m/z 395.

步骤2：将[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷 -3(R)-基]-氨基甲酸叔丁酯(11.7g，0.029mol)和三氟乙酸(50mL)的混合 物在25℃搅拌2小时。然后将反应真空浓缩。将获得的残余物用乙醚研 制并真空干燥，获得3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺的三氟乙酸盐(14.5g，94.1％)，为灰白色固体。

步骤3：将3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺的三氟乙酸盐(2.35g，5.8mmol)在甲醇(50mL)中的悬浮液用N，N-二异 丙基乙基胺(1.5mL，8.6mmol)处理。将获得的混合物在25℃搅拌30分 钟。此时，将反应用4-氟-3-(三氟甲基)苯甲醛(1.34g，6.96mmol)、接着 甲苯(50mL)处理。将获得的混合物在60℃搅拌1小时，然后真空浓缩。 然后加入另外的甲苯(200mL)。将反应混合物搅拌15分钟，然后真空浓 缩。重复该步骤数次，直至反应混合物在溶解在甲苯中时变得均匀。在最 终浓缩去除甲苯后，将反应混合物用二氯乙烷(100mL)稀释，然后用乙酸 (351mg，5.8mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.7g，17.4mmol)处理。将获得 的反应混合物在25℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃 取。将合并的有机物用水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤， 通过硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。快速色谱法(Merck硅胶60，230-400 目，梯度洗脱1:1乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯)获得(R)-3-(4-氟-3-三 氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺 (1.44g，52.8％)，为泡沫状固体；ES-HRMS m/e理论值C19H18F4N6O2S (M+H)+471.1221，实测值471.1221.

以类似的方式，如下获得实施例88-89的化合物：

实施例88

起始于3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺 的三氟乙酸盐和(4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰氯：(R)-3-(4-氟-3-三氟甲基-苯甲 酰基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(72mg， 31.4％)，为白色固体(48mg，39％)；ES-HRMS m/e理论值C19H16F4N6O3S (M+H)+507.0833，实测值507.0837.

实施例89

起始于(S)-3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰 胺的三氟乙酸盐(如实施例86制备)和4-氟-3-三氟甲基-苯甲酰氯：(S)-3-(4- 氟-3-三氟甲基-苯甲酰基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶 -2-基)-酰胺，为白色固体(18mg，10％)；ES-HRMS m/e理论值 C19H16F4N6O3S(M+H)+485.1014，实测值485.1016.

实施例90

合成4-氟-N-{2-[3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-脲基]-乙基}-3-三氟 甲基-苯甲酰胺

将7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺(233mg，1.28mmol)和吡啶 (310μL，3.53mmol)在四氢呋喃(6mL)中的25℃溶液用三光气(190mg， 0.64mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液、接着(2-叔丁氧基羰基氨基-乙基)- 氨基甲酸(225mg，1.40mmol)处理。25℃搅拌反应过夜。此时，将反应用 1N盐酸水溶液处理，并在25℃搅拌另外30分钟。此时，将获得的沉淀 通过过滤收集，并用1N盐酸水溶液和二乙醚洗涤，获得{2-[3-(7-甲氧基- 噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-脲基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(170mg，36.8％)，为 粉红色固体；LRMS：C14H20N6O4S(M+H)+，m/z＝369.

将{2-[3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-脲基]-乙基}-氨基甲酸叔 丁酯(170mg，0.46mmol)的溶液用三氟乙酸(80μL，0.57mmol)处理。将 反应在25℃搅拌1小时。然后将反应真空浓缩，用二乙醚研制，通过过 滤收集并真空干燥。将一部分获得的3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺的三氟乙酸盐(88mg，0.23mmol)在二氯甲烷中在 25℃用4-氟-3-(三氟甲基)苯甲酰氯(70mL，0.46mmol)处理。将获得的溶 液在25℃搅拌过夜。快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，梯度洗脱 3:1乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯)获得4-氟-N-{2-[3-(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-脲基]-乙基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(25mg，11.8％)，为白 色固体；ES-HRMS m/e理论值C17H14F4N6O3S(M+H)+459.0857，实测值 459.0862.

实施例91

合成1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-乙基]-3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-脲

将3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺的三 氟乙酸盐(176mg，0.46mmol)在甲醇(6ml)中的溶液，4-氟-3-(三氟甲基) 苯甲醛(90mg，0.46mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(293mg，1.38mmol)在 25℃。将获得的溶液在25℃搅拌过夜。此时，将反应混合物用三乙胺(200 mL，1.44mmol)处理，然后搅拌另外24小时。此时，真空浓缩反应。快速 色谱法(Merck硅胶60，230-400目，梯度洗脱95/5二氯甲烷/甲醇)获得 1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-乙基]-3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-脲(37mg，18％)；ES-HRMS m/e理论值C17H16F4N6O2S(M+H)+ 445.1065，实测值445.1065.

实施例92

合成3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-1-甲基-1-[2-(3-三氟甲基-苯氧 基)-乙基]脲

步骤1：将甲胺盐酸盐(380mg，5.57mmol)在四氢呋喃(10mL)中的 混合物用N，N-二异丙基乙基胺(1.44g，11.15mmol)和3-(2-溴乙氧基)苯并 三氟化物(300mg，1.11mmol)处理。将反应混合物在回流下搅拌2天。此 时，将反应通过加入水猝灭。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物用饱和氯 化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤和真空浓缩。快速色谱法(Merck 硅胶60，230-400目，95/5二氯甲烷/甲醇)获得甲基-[2-(3-三氟甲基-苯氧 基)-乙基]-胺(110mg，45％)，为黄色固体。在样品上获得的NMR谱图与 它的结构相一致。

步骤2：将三光气(750mg，2.51mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物 在氮气氛下在25℃用吡啶(400mg，5.00mol)缓慢处理，接着通过添加漏 斗缓慢加入甲基-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基]胺(110mg，0.50mmol)在 二氯甲烷(2mL)中的溶液。将反应混合物在25℃搅拌过夜。此时，将反应 用1N盐酸水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真 空浓缩，获得甲基-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基]胺-1-碳酰氯(0.90g， 64％)，为金黄色油。

步骤3：将7-甲氧基-噻唑[5，4-d]嘧啶-2-基胺(60mg，0.30mmol)在四 氢呋喃(6mL)中的混合物在氮气氛下在25℃用氢化钠(20mg，0.40mmol) 处理。将反应混合物在65℃搅拌30分钟。此时，将反应用N，N-二异丙基 乙基胺(130mg，1.00mmol)和甲基-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基]胺-1-碳 酰氯(90mg，0.32mmol)处理。将混合物在65℃搅拌过夜。此时，真空浓 缩反应，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机物用2N盐酸水溶液和饱和 氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速色谱法(Merck 硅胶60，230-400目，95/5二氯甲烷/甲醇)获得3-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-1-甲基-1-[2-(3-三氟甲基-苯氧基)-乙基]脲(40mg，28％)，为淡 棕色固体；LRMS：C17H16F3N5O3S(M+H)+，m/z＝427。在样品上获得的 NMR谱图与它的结构相一致。

实施例93

合成4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶 -2-基)-酰胺

步骤1：向4-甲氧基-3-硝基吡啶(5.0g，32.44mmol)在乙醇(100mL)中 的混合物加入10％披钯木炭催化剂(200mg)。使得获得的混合物在氢气氛 下(50psi)在室温振荡6小时。TLC(50％乙酸乙酯/己烷)指示原材料完全 消耗。过滤通过硅藻土以去除催化剂并浓缩，获得3-氨基-4-甲氧基吡啶(4.0 g，32.44mmol，100％产率)，为暗红色油。

步骤2：向在冰浴中冷却的磁力搅拌的3-氨基-4-甲氧基吡啶(4.45g， 35.89mmol)在12N HCl(25mL)中的混合物加入过氧化氢(5.3g，46.65 mmol，30％溶液)。使得反应缓慢升温至室温并搅拌1小时。TLC(50％乙 酸乙酯/己烷)指示原材料的完全消耗。将反应混合物缓慢倒入饱和碳酸氢 钠溶液(400mL)以中和反应，并用乙酸乙酯萃取。将获得的有机层用饱和 氯化钠溶液洗涤并通过硫酸镁干燥。过滤和浓缩，获得3-氨基-2-氯-4甲氧 基吡啶(4.56g，28.77mmol，80％产率)，为橙色固体。

步骤3：向磁力搅拌的4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-碳酰氯 (465mg，1.51mmol)在丙酮(15mL)中的混合物加入硫氰酸铵(105mg， 1.39mmol)。在回流下搅拌反应30分钟。加入3-氨基-2-氯-4甲氧基吡啶 (200mg，1.26mmol)，使得反应在回流下继续搅拌过夜。TLC(50％乙酸乙 酯/己烷)指示原材料的完全消耗。将反应倒入水中，将水层用乙酸乙酯萃 取。将获得的有机层用2N HCl(2X)和饱和氯化钠溶液洗涤，然后通过硫 酸镁干燥。通过快速色谱法纯化，获得1-(2-氯-4-甲氧基-吡啶-3-基)-3-[4- 羟基-4-(3-三氟甲基苯基)-哌啶-1-羰基]-硫脲(100mg，0.20mmol，16％产 率)，为淡黄色固体。(LRMS：C20H20ClF3N4O3S(M+H)+，m/z＝488。在 样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤4：向1-(2-氯-4-甲氧基-吡啶-3-基)-3-[4-羟基-4-(3-三氟甲基苯基)- 哌啶-1-羰基]-硫脲(100mg，0.20mmol)在THF(10mL)中的磁力搅拌的混 合物加入氢化钠(10mg，0.25mmol，60％，在矿物油中的分散体)。将反应 在回流下搅拌过夜。TLC(80％乙酸乙酯/己烷)指示原材料完全消耗。将 反应倒入水中，将水层用乙酸乙酯萃取。将获得的有机层用2N HCl(2X) 和饱和氯化钠溶液洗涤，然后通过硫酸镁干燥。通过快速色谱法纯化，获 得4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶 -2-基)-酰胺(20mg，0.04mmol，22％产率)，为淡黄色固体。(LRMS： C20H19F3N4O3S(M+H)+，m/z＝452.

实施例94

将8-三氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉(30mg，0.15mmol，RO4993861-000)在 乙腈(5mL)中的混合物用(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-氨基甲酸苯 基酯(45mg，0.15mmol)处理。在回流下搅拌混合物2小时。此时，将反 应倒入饱和碳酸氢钠水溶液。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物用饱和氯 化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速色谱法(Merck 硅胶60，230-400目，98/2二氯甲烷/甲醇)获得8-三氟甲基-3，4-二氢-1H- 异喹啉-2-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(23mg，38％)，为淡 棕色固体。LRMS：C17H14F3N5O2S(M+H)+，m/z＝409。在样品上获得 的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例95

将6-三氟-1，2，3，4-四氢-异喹啉(50mg，0.25mmol)在乙腈(10mL)中 的混合物用(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-氨基甲酸苯基酯745mg， 0.25mmol)处理。将混合物在回流下搅拌2小时。此时，将反应倒入饱和 碳酸氢钠水溶液。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物用饱和氯化钠水溶液 洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速色谱法(Merck硅胶60， 230-400目，98/2二氯甲烷/甲醇)获得6-三氟甲基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2- 羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(15mg，15％)，为白色固体。 LRMS：C17H14F3N5O2S(M+H)+，m/z＝409。在样品上获得的NMR谱图 与它的结构相一致。

实施例96

合成(3-氯-苯基)-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪-1- 基]-乙酸甲酯

步骤1：将(3-氯-苯基)-乙酸甲酯(2.0g，10.8mmol)，N-溴琥珀酰亚胺 (1.95g，11.0mmol)和3滴氢溴酸(48％溶液)在氯仿(100mL)中的混合物在 回流下加热3天。加入另外量的N-溴琥珀酰亚胺和氢溴酸以驱动反应完 成。将反应混合物浓缩至干燥，置入二氯甲烷中，装载到硅胶柱上。用10％ 乙酸乙酯/己烷洗脱，获得溴-(3-氯-苯基)-乙酸甲酯(1.95g，69％产率)，为 无色油。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺三氟乙 酸盐(1.56g，3.82mmol)，二异丙基乙基胺(2.7mL，15.5mmol)在N，N-二 甲基甲酰胺(15mL)中的混合物在室温下搅拌30分钟。向该混合物中加入 碳酸钾(0.8g，5.8mmol)和溴-(3-氯-苯基)-乙酸甲酯(1.0g，3.8mmol)，将获 得的混合物室温搅拌过夜。过滤和浓缩，获得固体，将其溶解在甲醇中并 吸收到2g硅胶上。将硅胶装载到Isco 120g柱上，使用05％甲醇/二 氯甲烷洗脱，获得(3-氯-苯基)-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲 酰基)-哌嗪-1-基]-乙酸甲酯，为白色粉末；LRMS：C20H21ClN6O4S(M+H)+， m/z＝477。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例97

4-[1-(3-氯-苯基)-2-羟基-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基)-酰胺

将(3-氯-苯基)-[4-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酰基)-哌嗪 -1-基]-乙酸甲酯(100mg，0.21mmol)在四氢呋喃(3mL)中的0℃混合物 加入氢化铝锂(25mg，0.66mmol)。将混合物升温至室温，搅拌2小时。 LCMS分析指示原材料和产物的混合物。将反应使用Feiser′s条件后加工， 然后将获得的粗产物使用反相HPLC纯化，获得4-[1-(3-氯-苯基)-2-羟基- 乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺，为白色粉末； LRMS：C19H21ClN6O3S(M+H)+，m/z＝449。在样品上获得的NMR谱图 与它的结构相一致。

实施例98

4-[2-甲氧基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺

步骤1：将(3-三氟甲基-苯基)-乙酸甲酯(6.0g，25.9mmol)和N-溴琥珀 酰亚胺(9.2g，51.7mmol)和几滴氢溴酸(48％ solution)在氯仿(250mL)中的 混合物回流加热2天。浓缩反应混合物至干燥，置入二氯甲烷中，装载到 硅胶柱上。用5％乙酸乙酯/己烷洗脱，获得溴-(3-三氟甲基-苯基)-乙酸甲 酯(3.0g，39％产率)，为无色油。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相 一致。

步骤2：将哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.80g，9.68mmol)，碳酸钾(2.0g，14.5 mmol)和溴-(3-三氟甲基-苯基)-乙酸甲酯(3.0g，9.65mmol)在N，N-二甲基 甲酰胺(40mL)中的混合物室温搅拌过夜。浓缩，获得粗制物质，其在二 氯甲烷和水之间分配。通过硫酸镁干燥有机层，并浓缩，获得油。将粗制 油装载到Isco 120g柱，用20％乙酸乙酯/己烷洗脱，获得4-[乙氧基羰基 -(3-三氟甲基-苯基)-甲基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.0g，74％产率)，为无色油。 在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤3：将4-[乙氧基羰基-(3-三氟甲基-苯基)-甲基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯 (2.10g，5.05mmol)在四氢呋喃(30mL)中的0℃溶液滴加氢化铝锂(1M， 在四氢呋喃中，7.57mL，7.57mmol)。将混合物在0℃搅拌2小时。用乙酸 乙酯猝灭过量LAH，将混合物与十水合硫酸钠搅拌10分钟。将淤浆过滤， 将滤液在乙酸乙酯和水之间分配。用硫酸镁干燥有机层。过滤，浓缩，获 得粗制物，将其装载到硅胶柱上。用40％乙酸乙酯/己烷洗脱，获得4-[2- 羟基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.4g，74％产率)，为 无色油。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤4：将4-[2-羟基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯 (200mg，0.53mmol)在四氢呋喃(5mL)和N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的 0℃混合物加入氢化钠(60％，在矿物油中，70mg，1.75mmol)，接着加入碘 甲烷(230mg，1.62mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时。将反应用饱和氯 化铵水溶液猝灭，在乙酸乙酯和水之间分配。用硫酸镁干燥有机层。过滤， 浓缩，获得粗制油，将其装载到硅胶柱上。用50％乙酸乙酯/己烷洗脱， 获得4-[2-甲氧基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(190mg， 92％产率)，为无色油。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤5：4-[2-甲氧基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯 (150mg，0.387mmol)在纯三氟乙酸(3mL)中的混合物在室温下搅拌1小 时。浓缩混合物至干燥，并在高真空下抽吸，获得1-[2-甲氧基-1-(3-三氟 甲基-苯基)-乙基]-哌嗪三氟乙酸盐，为一种油。将该物质在不进一步纯化 下用于下一步骤。

步骤6：将1-[2-甲氧基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪三氟乙酸盐 (160mg，0.40mmol)和二异丙基乙基胺(0.35mL，2.0mmol)在乙腈(10 mL)中的混合物在70℃加热10分钟。在冷却至室温后，将(7-甲氧基-噻唑 并[5，4-d]嘧啶-2-基)-氨基甲酸苯基酯(120mg，0.40mmol)加入上述溶液。 回流搅拌混合物3小时。LCMS分析指示原材料完全消耗。浓缩反应，将 粗制物使用反相HPLC纯化，获得4-[2-甲氧基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]- 哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(81mg，41％产率)，为 白色粉末。LRMS：C21H23F3N6O3S(M+H)+，m/z＝497。在样品上获得的 NMR谱图与它的结构相一致。

实施例99

4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(7-甲氧基-5-甲硫基-噻唑并[5，4-d] 嘧啶-2-基)-酰胺

步骤1：将4，6-二羟基-2-甲基硫代嘧啶(10.0g，63.22mmol)在1小时内 在0℃加入发烟硝酸(30mL)。在0℃搅拌红色溶液另外1小时，然后倒在 冰上，获得淡棕色固体，将其滤出和用水以及二乙醚洗涤。真空干燥该固 体，获得4，6-二羟基-2-甲硫基-5-硝基嘧啶(9.30g，72％)，为淡棕色固体。 LRMS：C5H5N3O4S(M+H)+，m/z＝203。在样品上获得的NMR谱图与它 的结构相一致。

步骤2：将4，6-二羟基-2-甲硫基-5-硝基嘧啶(9.30g，45.81mmol)，磷 酰氯(40mL)和二乙基苯胺(12mL)的混合物回流1小时。在部分蒸发后， 将液体倒在冰上，获得棕色固体，将其过滤和用水洗涤。将固体真空干燥， 获得4，6-二氯-2-甲硫基-5-硝基嘧啶(10.5g，95％)，为棕色固体。LRMS： C5H3Cl2N3O2S(M+H)+，m/z＝240。在样品上获得的NMR谱图与它的结 构相一致。

步骤3：将4，6-二氯-2-甲硫基-5-硝基嘧啶(5.25g，21.88mmol)在甲醇 (40mL)中的混合物用甲醇钠(1.3g，24.06mmol)处理。将混合物室温搅拌 3小时。此时，将反应倒在冰上，获得棕色固体，将其过滤和用水洗涤。 真空干燥固体，获得4-氯-6-甲氧基-2-甲硫基-5-硝基嘧啶(4.40g，85％)， 为棕色固体。LRMS：C6H6Cl1N3O3S(M+H)+，m/z＝235。在样品上获得 的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤4：将4-氯-6-甲氧基-2-甲硫基-5-硝基嘧啶(4.40g，18.68mmol)在 乙酸(30mL)中的混合物用硫氰酸铵(2.84g，37.37mmol)处理。将混合物在 85℃搅拌6小时。在部分蒸发后，将液体倒在冰上，获得棕色固体，将其 过滤和用水洗涤。真空干燥固体，获得4-甲氧基-2-甲硫基-5-硝基-6-硫氰 酸根合(thicyanato)-嘧啶(2.20g，46％)，为棕色固体。LRMS：C7H6N4O3S2 (M+H)+，m/z＝258。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤5：将4-甲氧基-2-甲硫基-5-硝基-6-硫氰酸根合-嘧啶(2.20g，8.53 mmol)在乙酸(30mL)中的混合物在冰水浴中冷却，逐份加入铁粉(1.43g， 25.58mmol)。在完成加入后，将混合物在60℃搅拌4小时。然后将反应 冷却至室温，过滤和倒在冰上，获得淡棕色固体，将其过滤和用水和二乙 醚洗涤。将固体真空干燥，获得7-甲氧基-5-甲硫基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2- 基胺(1.60g，82％)，为淡棕色固体。LRMS：C7H8N4OS2(M+H)+，m/z ＝228。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤6：将磁力搅拌的7-甲氧基-5-甲硫基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基胺 (500mg，2.19mmol)在四氢呋喃(20mL)中的混合物在氮气氛下在25℃用 氢化钠(60％悬浮液，在矿物油中，265mg，6.58mmol)处理。在50℃搅拌反 应混合物1小时。此时，将反应冷却至室温和用N，N-二异丙基乙基胺(850 mg，6.58mmol)和4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-碳酰氯(810mg， 2.63mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌3天。此时，真空浓缩反应， 倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机物用2N盐酸水溶液和饱和氯化钠水 溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤和真空浓缩。快速色谱法(Merck硅胶60， 230-400目，98:2二氯甲烷/甲醇)获得4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1- 羧酸(7-甲氧基-5-甲硫基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(375mg，34％)，为 红色固体。LRMS：C20H20F3N5O3S2(M+H)+，m/z＝499。在样品上获得的 NMR谱图与它的结构相一致。

实施例100

4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(5-羟基-7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧 啶-2-基)-酰胺

步骤1：将磁力搅拌的4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(7-甲氧 基-5-甲硫基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(375mg，0.75mmol)在甲醇 (20mL)中的混合物在冰水浴中冷却，用钨酸钠二水合物(135mg，0.04 mmol)、接着过氧化氢(30％溶液，10mL)处理。将反应混合物升温至室温， 搅拌2小时。然后将反应倒入水中，用二氯甲烷萃取。将有机物用饱和氯 化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，获得4-羟基-4-[3-(三 氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(5-甲磺酰基-7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)- 酰胺(251mg，63％)，为红色固体。LRMS：C20H20F3N5O5S2(M+H)+，m/z ＝499。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将磁力搅拌的4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(5-甲磺 酰基-7-甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(250mg，0.47mmol)在THF (10mL)和水(5mL)中的混合物用2N KOH水溶液(0.5mL，0.94mmol)处 理。将反应混合物在75℃搅拌4小时。将反应冷却至室温，倒入水中， 和用二氯甲烷萃取。将有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥， 过滤和真空浓缩，获得4-羟基-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-羧酸(5-羟基-7- 甲氧基-噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-酰胺(32mg，15％)，为白色固体。 LRMS：C19H18F3N5O4S2(M+H)+，m/z＝469。在样品上获得的NMR谱图 与它的结构相一致。

实施例101

3-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶 -2-基)-酰胺

步骤1：将磁力搅拌的(1-氯羰基-吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(820 mg，3.30mmol)在丙酮(15mL)中的混合物在氮气氛下在25℃用硫氰酸铵 (240mg，3.15mmol)处理。将反应混合物回流搅拌30分钟。此时，用3- 氨基-2-氯-4甲氧基吡啶(440mg，2.78mmol)处理反应。将反应混合物回 流过夜。此时，真空浓缩反应，倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机物用 2N盐酸水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤和真空 浓缩。快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，98:2二氯甲烷/甲醇)获得 [1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基]-氨基甲酸 叔丁酯(160mg，15％)，为淡黄色固体。LRMS：C17H23N5O4S(M+H)+， m/z＝393。在样品上获得的NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将[1-(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-3- 基]-氨基甲酸叔丁酯(160mg，0.41mmol)在三氟乙酸(6mL)和二氯甲烷(6 mL)中的混合物在25℃搅拌30分钟。此时，将反应真空浓缩以提供红色 油。将该油用乙醚研制，获得3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b] 吡啶-2-基)-酰胺的三氟乙酸盐(160mg，99％)，为淡棕色固体。

步骤3：将3-氨基-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-酰 胺的三氟乙酸盐(160mg，0.39mmol)在甲醇中的悬浮液用N，N-二异丙基乙 基胺(0.28mL，1.57mmol)处理。在25℃搅拌反应30分钟。然后真空去 除甲醇。然后将4-氟-3-(三氟甲基)苯甲醛(0.08mL，0.59mmol)和甲苯加入 烧瓶，将获得的混合物在60℃搅拌1小时，然后真空浓缩。将该步骤重 复直至反应混合物在溶解在甲苯中时变得均匀。在最终浓缩以去除甲苯 后，将反应混合物用二氯乙烷(15mL)稀释，然后用乙酸(94mg)和三乙 酰氧基硼氢化钠(250mg，1.18mmol)处理。将获得的反应混合物在25℃ 搅拌过夜。此时，将反应混合物倒入1N NaOH中，萃取到二氯甲烷中。 将有机物用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。 快速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，98:2二氯甲烷/甲醇)获得无色油。 将该油溶解在二乙醚中，然后真空浓缩，获得3-(4-氟-3-三氟甲基-苄基氨 基)-吡咯烷-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-酰胺(19mg，25％)， 为白色固体。LRMS：C20H19F4N5O2S(M+H)+，m/z＝469。在样品上获 得的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例102

4-(3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-酰胺。

步骤1：将磁力搅拌的三光气(365mg，1.23mmol)在四氢呋喃(20mL) 中的混合物在氮气氛下用吡啶(485mg，6.15mmol)通过注射器缓慢处理。 然后将获得的白色悬浮液通过添加漏斗在10分钟内用1-(3-三氟甲基-苄基) 哌嗪(1.0g，4.10mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液处理。在25℃搅拌反 应混合物过夜。此时，将反应过滤以去除固体。然后将滤液真空浓缩。快 速色谱法(Merck硅胶60，230-400目，60:40己烷/乙酸乙酯获得4-(3-三氟 甲基-苄基)-哌嗪-1-碳酰氯(350mg，28％)，为澄清油。在样品上获得的 NMR谱图与它的结构相一致。

步骤2：将磁力搅拌的4-(3-三氟甲基-苄基)-哌嗪-1-碳酰氯(500mg， 1.630mmol)在丙酮(20mL)中的混合物在氮气氛下在25℃用硫氰酸铵 (115mg，1.49mmol)处理。将反应混合物回流搅拌30分钟。此时，将反应 用3-氨基-2-氯-4甲氧基吡啶(215mg，1.34mmol)处理。将反应混合物回 流过夜。此时，真空浓缩反应，倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机物用 饱和氯化钠水溶液洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速色谱法 (Merck硅胶60，230-400目，75:25己烷/乙酸乙酯)获得4-(3-三氟甲基-苄 基)-哌嗪-1-羧酸(7-甲氧基-噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-酰胺(35mg，15％)，为 白色固体。LRMS：C20H20F3N5O2S(M+H)+，m/z＝451。在样品上获得 的NMR谱图与它的结构相一致。

实施例103

在表达人腺苷A2B受体的CHO.K1细胞中对于NECA-诱导的环AMP生 产的抑制活性

在该测定中使用用人腺苷A2B受体cDNA 4b稳定转染的中国仓鼠卵 巢(CHO.K1)细胞。将细胞在5％CO2/95％ O2气氛下、在37℃、在DMEM 和D-MEM/F-12(1:1混合物)培养基(Invitrogen，格兰德岛，NY)中培养，所 述培养基含有10％胎牛血清(Invitrogen，格兰德岛，NY)，100U/mL青霉素 (Invitrogen，格兰德岛，NY)，100U/mL链霉素(Invitrogen，格兰德岛，NY)，1 mg/mL G418(Invitrogen，格兰德岛NY)和0.2mg/mL潮霉素B(Invitrogen， Carlsbad，CA)。将实验培养物作为单层在384-孔组织培养板上培养(0.06ml/ 孔-7500细胞/孔)。每孔用0.1mL Krebs缓冲液洗涤1次。向每孔加入 50uL的Krebs缓冲液，其含有100uM磷酸二酯酶抑制剂4-(3-丁氧基-4- 甲氧基苄基)-2-咪唑烷酮、100nM NECA(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)， 0.02％ BSA级分V(罗氏生化(Roche Biochemicals))，测试化合物(适当浓 度)。DMSO的终浓度是1.1％。在温育30-45min后，将各孔排空，用纸 巾吸干以去除残余溶液。将来自DiscoverX的用于贴壁细胞的HitHunterTM cAMP测定试剂盒用于裂解细胞，并测量cAMP浓度。实施例1-102的化 合物显示的IC50值在约1纳摩尔至10毫摩尔范围内，优选地1钠摩尔至1 毫摩尔范围内。具体的代表性的实施例在以下表I中列出。

表I

  实施例 IC50(μM) 1 0.005 10 0.030 16 0.197 27 1.560 31 0.009 48 0.009 54 1.462 57 0.052 62 0.218 67 0.051 76 0.073 87 0.002 89 0.004 95 0.115

实施例A

可以以常规方式制备含有下列成分的薄膜包衣片剂：

成分                           每片

核：

式(I)化合物                    10.0mg        200.0mg

微晶纤维素                     23.5mg        43.5mg

无水乳糖                       60.0mg        70.0mg

聚乙烯吡咯烷酮K30              12.5mg        15.0mg

淀粉羟乙酸钠                   12.5mg        17.0mg

硬脂酸镁                       1.5mg         4.5mg

(核重)                         120.0mg       350.0mg

薄膜包衣

羟丙基甲基纤维素               3.5mg         7.0mg

聚乙二醇6000                   0.8mg         1.6mg

滑石                           1.3mg         2.6mg

氧化铁(Iron oxyde)(黄色)       0.8mg         1.6mg

二氧化钛                       0.8mg         1.6mg

筛分活性成分，与微晶纤维素混和，将混合物用聚乙烯吡咯烷酮的水 溶液制粒。将颗粒与淀粉羟乙酸钠和硬脂酸镁混和并且压制，分别获得120 或350mg的核。将所述核用上述薄膜包衣的水溶液/悬浮液包衣。

实施例B

可以以常规方式制备含有下列成分的胶囊：

成分                                              每胶囊

式(I)化合物                                        25.0mg

乳糖                                               150.0mg

玉米淀粉                                           20.0mg

滑石                                               5.0mg

筛分各组分并混合和填充到2#胶囊中。

实施例C

注射液可以具有下列组成：

式(I)化合物                                     3.0mg

聚乙二醇400                                     150.0mg

乙酸                                            至获得最终pH为5.0

注射液用水                                      加至1.0ml

将活性成分溶解在聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。通过 乙酸将pH调节至5.0。通过加入剩余量的水将体积调节至1.0ml。将溶液 过滤，使用适当过量装入小瓶中，并灭菌。

实施例D

可以以常规方式制备含有下列成分的软明胶胶囊：

胶囊内容物

式(I)化合物                               5.0mg

黄蜡                                      8.0mg

氢化大豆油                                8.0mg

部分氢化植物油                            34.0mg

大豆油                                    110.0mg

胶囊内容物重量                            165.0mg

明胶胶囊

明胶                                      75.0mg

甘油85％                                  32.0mg

Karion 83                                 8.0mg(干物质)

二氧化钛                                  0.4mg

氧化铁黄                                  1.1mg

将活性成分溶解在其它成分的温热熔融体中，将混合物填充到适当尺 寸的软明胶胶囊中。按照常用方法处理填充的软明胶胶囊。

实施例E

可以以常规方式制备含有下列成分的小药囊：

式(I)化合物                              50.0mg

乳糖，细粉                               1015.0mg

微晶纤维素(AVICEL PH 102)                1400.0mg

羧甲基纤维素钠                           14.0mg

聚乙烯吡咯烷酮K30                        10.0mg

硬脂酸镁                                 10.0mg

调味添加剂                               1.0mg

将活性成分与乳糖、微晶纤维素和羧甲基纤维素钠混合，用聚乙烯吡 咯烷酮在水中的混合物制粒。将颗粒与硬脂酸镁和调味添加剂混合并装入 小药囊。