技術分野
本発明は、新規な構造を有する機能性ペプチド核酸モノマーおよびその製造方法に関する。
背景技術
核酸は生物の遺伝情報を司るＤＮＡおよびＲＮＡである。 これに対して、ペプチド核酸（ＰＮＡ）とは、核酸の糖リン酸骨格をＮ−（２−アミノエチル）グリシン骨格に変換した修飾核酸である（図１）。 ＤＮＡ／ＲＮＡの糖リン酸骨格は中性条件で負電荷を帯びていて相補鎖間の静電的な反発があるが、ＰＮＡの背骨構造はもともと電荷を持たないので静電的な反発がない。 そのためＰＮＡは従来の核酸と比較して、高い二重鎖形成能をもち、高い塩基配列認識能を持つ。 さらにＰＮＡは生体内ヌクレアーゼ・プロテアーゼに対し非常に安定で分解されないので、アンチセンス分子として遺伝子治療に応用することが検討されている。
従来のＤＮＡを媒体にしていた技術をＰＮＡ化することにより、これまで克服できなかったＤＮＡの欠点を補うことが可能となった。 例えば、遺伝情報の体系的な解析を高速に且つ大量に行うための「ＤＮＡマイクロアレイ技術」および塩基配列を特異的に認識したことを蛍光発光により検出できるプローブとして最近開発された「モレキュラービーコン」に応用することが可能である。 これらはいずれも酵素耐性に乏しいＤＮＡを媒体とするため、これらの技術を用いるに際しては厳密なサンプリングが要求される。 この要求を満たすことが、前記の技術を高度化する上での鍵となっている。
一方ＰＮＡは酵素に対し完全な耐性を持つので、ＤＮＡマイクロアレイ技術およびモレキュラービーコンにおいてＰＮＡをＤＮＡに代用することによって、前記技術の欠点が克服され、さらに長所が引き出されるものと期待されている。
ＤＮＡマイクロアレイ技術およびモレキュラービーコン以外にもＰＮＡ化することにより発展が期待される分野は数多いが、それらにおいてはＰＮＡの効率的な機能化、すなわちＰＮＡモノマーへの機能性分子の効率的な導入による新規なＰＮＡモノマーの設計が必要である。
ＰＮＡオリゴマーの合成方法には通常の固相ペプチド合成法を用いるので、ＰＮＡモノマーユニットをＰＮＡの背骨構造によって分類すると、Ｆｍｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットとｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットの２種類が含まれる（図２）。
Ｆｍｏｃ型ＰＮＡモノマーユニットの合成方法は既に確立されており、しかもそのオリゴマーの合成は一般的なＤＮＡ自動合成機によって可能であるため、下記のルート

によって、少量スケールでの合成が可能となっている。

当初ＰＮＡには下記のようなｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニット

が採用され、その後より効率のよい合成方法

が確立された。 しかし、前述したように取り扱いが容易なＦｍｏｃ型が開発されたため、ｔＢｏｃ型の使用頻度は減少している。

しかし、グアニン・チミン・シトシン・アデニン４種類の核酸塩基以外の機能性分子を導入する際、例えば光機能性分子を導入する際には、導入する機能性分子がアルカリ条件に不安定な場合が多いので、アルカリ条件を使用しないｔＢｏｃ型ＰＮＡ背骨構造の有用性は高い。 「ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン及びアミノ酸誘導体の製造方法」に関しては、本発明者らが特願２０００−２６８６３８として既に特許出願中である。

これ以外にも、光機能性オリゴＰＮＡのモノマーユニットの合成例は過去に５例が知られている。 これら全てが上記ルートを用いているが、その収率については記載がないか、または極めて低いものでしかない（Ｐｅｔｅｒ Ｅ．Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｇｅｒａｌｄ Ｈａａｉｍａｎ，Ａｎｎｅ Ｂ．Ｅｌｄｒｕｐ ＰＣＴ Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．（１９９８）ＷＯ ９８５２９５ Ａ１ １９９８１１２６，Ｔ．Ａ．Ｔｒａｎ，Ｒ．−Ｈ．Ｍａｔｔｅｒｎ，Ｂ．Ａ．Ｍｏｒｇａｎ（１９９９）Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｒｅｓ，５３，１３４−１４５，Ｊｅｓｐｅｒ Ｌｏｈｓｅ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，８，５０３−５０９，Ｈａｎｓ−ｇｅｏｒｇ Ｂａｔｚ，Ｈｅｎｒｉｋ Ｆｒｙｄｅｎｌｕｎｄ Ｈａｎｓｅｎ，ｅｔ ａｌ．Ｐｃｔ Ｉｎｔ．Ａｐｐｌ．（１９９８）ＷＯ ９８３７２３２ Ａ２ １９９８０８２７，Ｂｒｕｃｅ Ａ� ��ｍｉｔａｇｅ，Ｔｒｏｅｌｓ Ｋｏｃｈ，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，２６，７１５−７２０，Ｈａｎｓ−ｇｅｏｒｇ Ｂａｔｚ，Ｈｅｎｒｉｋ Ｆｒｙｄｅｎｌｕｎｄ Ｈａｎｓｅｎ，ｅｔ ａｌ．）。 また、用いられる化合物の構造がアルカリ性条件に比較的安定であることが特徴的であるため、アルカリ性条件に不安定な発色団が付くと、前記従来法と類似の方法、すなわち下記ルートＡ

では効率良く合成できないと予想される。

そのため、例えば光機能性ＰＮＡモノマーのような機能性ＰＮＡモノマーの開発とともに、ＰＮＡモノマーを効率的に機能化する技術の確立が強く望まれている。

発明の開示

したがって、本発明は、上記の問題を解消した新規な機能性ＰＮＡモノマーおよびその効率的な合成方法の提供を目的とする。

本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、下記ルートＢ

に示すように、ＰＮＡ背骨構造にｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミン誘導体６を用いて１のペンタフルオロフェニル基を含む活性エステル体５と縮合してほぼ定量的に光機能性ＰＮＡモノマー４を合成することに成功した。

さらに本発明者らは、下記ルートＣ

に示すように、ＰＮＡ背骨構造にω−アミノ酸誘導体８を用いて１のペンタフルオロフェニル基を含む活性エステル体７と縮合してほぼ定量的に光機能性ＰＮＡモノマー４を合成することにも成功した。

上記ルートＢおよびＣにより、本発明者らは、上記課題を解決することを見出し本発明を完成するに至った。

すなわち本発明は、下記一般式（Ｉ）

（式中、Ａは

であり、Ｂは

であり、ＲはＨ、ＮＯ

_２ 、ＮＨ

_２ 、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ

_３ Ｎａ

_２であり、ｎは１〜４の整数である。 ただし、Ａが

である場合、Ｂは

である）で表される化合物に関する。

また、本発明は、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法に関する。

さらに、本発明は、活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）

（式中、Ａは

であり、ＲはＨ、ＮＯ

_２ 、ＮＨ

_２ 、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ

_３ Ｎａ

_２であり、ｎは１〜４の整数である）

で表される基を、エステル結合を形成するカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。

また、本発明は、活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。

さらに、本発明は、活性エステルを製造する方法であって、機能性分子のカルボン酸誘導体と、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物との反応を含むことを特徴とする、前記方法に関する。

また、本発明は、機能性分子のカルボン酸誘導体を製造する方法であって、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸との反応を含むことを特徴とする、前記方法に関する。

またさらに、本発明は、機能性分子から該機能性分子の誘導体を製造し、該機能性分子の誘導体から機能性分子のカルボン酸誘導体を製造し、該機能性分子のカルボン酸誘導体から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造することを含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、下記ａ）〜ｃ）：

ａ）前記機能性分子のカルボン酸誘導体の製造において、機能性分子の誘導体と脂肪族カルボン酸とを反応させること；

ｂ）前記活性エステルの製造において、機能性分子のカルボン酸誘導体とペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基を有する化合物とを反応させること；および、

ｃ）前記機能性ＰＮＡモノマーの製造において、ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチルアミンを、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させること；

の１または２以上を含むことを特徴とする、前記方法に関する。

さらにまた、本発明は、下記一般式（ＩＩＩ）

（式中、Ｒ

^１は水素原子または炭素数１〜５の直鎖若しくは分枝鎖状のアルキル基、ｍは１〜１１の整数を表す）

で表されるω−アミノ酸誘導体を機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入することよりなる機能性ＰＮＡモノマーの製造方法であって、該機能性分子の誘導体が活性エステルであることを特徴とする、前記製造方法に関する。

そして、本発明は、活性エステルが、下記一般式（ＩＩ）

（式中、Ａは

であり、ＲはＨ、ＮＯ

_２ 、ＮＨ

_２ 、ＮＨＣｂｚ、Ｂｒ、Ｆ、ＣｌまたはＳＯ

_３ Ｎａ

_２であり、ｎは１〜４の整数である）

で表される基を、直接または脂肪鎖あるいはペプチド鎖を介して、エステル結合を形成するカルボニル基に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。

そしてまた、本発明は、活性エステルが、ペンタフルオロフェノキシ基またはスクシンイミドオキシ基をカルボニル炭素に有することを特徴とする、前記製造方法に関する。

そしてさらに本発明は、機能性分子から活性エステルを製造し、該活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーを製造すること含む、機能性分子から機能性ＰＮＡモノマーを製造する方法において、前記機能性分子からの活性エステルの製造が、ｍ−メチルレッドとスクシンイミドオキシ基を含む化合物とを反応させること、および／または前記活性エステルから機能性ＰＮＡモノマーの製造が、一般式（ＩＩＩ）で表されるベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体を、活性エステルである機能性分子の誘導体と反応させ、機能性分子をＰＮＡモノマーに導入すること、を含むこと特徴とする、前記方法に関する。

ここで、本発明による方法と従来の方法とを比較することによって本発明の特徴を詳細に説明する。

ｔＢｏｃ型ＰＮＡモノマーユニット４の合成は通常下記のルートＡが用いられる。

即ち、１と２を脱水縮合して３を合成した後、３をアルカリ加水分解することにより４を得る方法である。 グアニン・チミン・シトシン・アデニン４種類の核酸塩基を導入する場合もこの方法を用いる。 これ以外の機能性分子（表１に挙げる既知化合物のこと）を導入する際にも、ルートＡが用いられている。 ところが、一般に光機能性分子はアルカリ条件に不安定な場合が多いので、ルートＡを用いると収率良く４を得ることができない。 そこで従来のＰＮＡ背骨構造２を用いて縮合するのではなく、２を先に加水分解した６を用いることにした。 ６は１と同様な遊離カルボン酸基を内包しており分子内脱水縮合反応が引き起こる可能性があるため、ＤＣＣなどの縮合剤による直接的な脱水縮合反応は利用できない。 そこで１をペンタフルオロフェノールにて活性エステル体５に変換した後、６と反応させることにより６の遊離カルボン酸基と２級アミノ基が分子内縮合しないように工夫した（ルートＢ）。 これにより４が定量的に得られるようになった。 このように、光機能性分子を活性エステル化して６と反応させ４を合成する方法は前例がなく、今後の多種多様な光機能性ＰＮＡモノマーの合成に不可欠な手段であるといえる。

また、ルートＣに用いる、下記一般式（ＩＩＩ）

（式中、Ｒ

^１は水素原子または炭素数１〜５の直鎖若しくは分枝鎖状のアルキル基、ｍは１〜１１の整数を表す）

で表されるベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体には予めリンカー（カルボキシルアミノ酸）が結合しているため、当該誘導体は汎用性に富んでおり、活性エステル体を当該誘導体と反応させることによって、１工程で目的とする機能性ＰＮＡモノマーユニットが得られる。 しかも、ベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体も、多くの市販品を用いることができる。 したがって、当該ルートＣは、比較的高価な光機能性分子を対象とする場合に特に有効である。

一方、スルホン酸クロリド系および立体障害が大きいメチルレッド等の光機能性分子のＰＮＡモノマー化は、ルートＢによってより好適に行われる。

したがって、本発明のルートＢおよびルートＣによる合成法を適宜選択することによって、多種多様な機能性ＰＮＡモノマーを合成することができる。

本発明によれば、例えば、Ｎａｐｈｔｈａｌｉｍｉｄｅ型、Ｆｌａｖｉｎ型、Ｄａｂｃｙｌ型、Ｂｉｏｔｉｎ型、ＦＡＭ型、Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ型、ＴＡＭＲＡ型、ＲＯＸ型、ＨＡＢＡ型、Ｐｙｒｅｎｅ型、Ｃｏｕｍａｒｉｎ型のような光機能性モノマーユニットが得られる。 また、これら以外の光機能性モノマーユニットおよび光機能性モノマーユニット以外の機能性モノマーユニットを得ることも可能である。

発明を実施するための形態

光機能性モノマーユニットの合成に関しては、例えば化合物４ａの合成、

において従来は機能性分子のカルボン酸誘導体１ａとＰＮＡ背骨構造２ａを脱水縮合して３ａを合成したあとで、アルカリ加水分解して目的の４ａを得ていた（ルートＡ）。 ところが１ａのフラビン骨格は酸には安定であるがアルカリ性条件で容易に分解し６，７−ｄｉｍｅｔｈｙｌｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅｄｉｏｎｅになってしまうので、例え３ａが合成できても４ａを効率よく得ることは不可能である。 そこで１ａを活性エステル体５ａに変換して６ａと反応させたところ、４ａは８５％の収率でほぼ定量的に反応が進行するようになった（ルートＢ）。

また、化合物４ｂの合成

において、ナフタルイミド誘導体３ｂも該当する１ｂと２ｂから４４％の収率で得られたが、次のアルカリ加水分解により得られる４ｂはわずか４％であった（ルートＡ）。 そこで１ｂを活性エステル体５ｂに変換して６ｂと反応させたところ、４ｂは７５％の収率で反応が進行するようになった（ルートＢ）。

カルボン酸誘導体である１ａおよび１ｂの製造には、脂肪族カルボン酸、好ましくは直鎖の脂肪族カルボン酸を用いる。

また、ＰＮＡのアミノ基末端に導入するモノマーの製造には、スクシンイミド基を有する活性エステルが好適に用いられる。

なお、ルートＣに用いる一般式（ＩＩＩ）のω−アミノ酸誘導体として、そのアミノ酸部分におけるカルボニル炭素上の炭素鎖の長さが炭素数１〜１１のものが用いられるが、一般にＰＮＡはＤＮＡとのハイブリッドを期待しているので、立体的にＤＮＡに類似している誘導化が望ましい。 この点を考慮すると、カルボキシルアミノ酸をリンカーとして利用する場合、アミノ酸部分がＺ−グリシンであるものが最適である。

光機能性オリゴＰＮＡの合成方法としては、Ｆｍｏｃ法とｔＢｏｃ法が用いられる。 Ｆｍｏｃ法はアルカリ性試薬による脱保護過程を含んでおり、光機能性オリゴＰＮＡの設計には不適切である。 一方、ｔＢｏｃ法はその合成過程にアルカリ条件を使用しないので光機能性オリゴＰＮＡの合成方法として適している。 したがって、本発明によるＰＮＡモノマーをｔＢｏｃ法に適用すれば、光機能性オリゴＰＮＡの合成が効率的に行えるようになる。

実施例

以下に実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれに限られるものではない。

（実施例１）

２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル２−（５，７，８−トリメチル−１，３−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−２，４−ジアザフェナジン−２−イル）アセテート（５ａ）の合成４ａ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。 この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。 有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製し５ａ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）Ｃ

_２１ Ｈ

_１４ Ｏ

_４ Ｎ

_４ Ｆ

_５ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］の計算値は４８１．０９３４，実測値は４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．

（実施例２）

２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル））−２−（５，７，８−トリメチル−１，３−ジオキソ（２，５−ジヒドロ−２，４−ジアザフェナジン−２−イル）アセチルアミノ）酢酸（４ａ）の合成５ａ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）と６ａ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製し４ａ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ

_３ ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）及び７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）及び７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）及び４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）及び４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４及び３．５２（２Ｈ），３．３８及び３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）及び２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）及び２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）及び１．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）Ｃ

_２４ Ｈ

_３１ Ｏ

_７ Ｎ

_６ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］の計算値は５１５．２２５２，実測値は５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．

（実施例３）

Ｎ−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２'−カルボニル）グリシン（１ｃ）の合成メチルレッド（１．３５ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−１０％ アセトン／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し、橙色針状晶として１ｃのｔ−ブチルエステル誘導体（１．０５ｇ，５５％）を得た。 これ（７６５ｍｇ，２ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し、赤色針状晶として１ｃ（５４９ｍｇ，８４％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．９９（ｂｒｔ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．４２（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．１０（ｓ，６Ｈ）；

^１３ Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）ｄ １６７．６１，１５３．３９，１５０．８６，１４３．３０，１３２．４９，１３１．４７，１２９．３８，１２７．６９，１２６．２８，１１６．２４，１１１．６３，４３．２０，４０．２４．

（実施例４）

２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニルＮ−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２'−カルボニル）グリシネート（５ｃ）の合成１ｃ（３２６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し橙色粉末として５ｃ（４４９ｍｇ，９１％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ １０．１４（ｂｒｔ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，６Ｈ）．

（実施例５）

２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル）−２−（４−ジメチルアミノアゾベンゼン−２'−カルボニルアミノ）アセチルアミノ）酢酸（４ｃ）の合成５ｃ（２４６ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）と６（１０９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（８５μＬ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し４ｃ（２２５ｍｇ，７２％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．９９（ｓ）及び９．８５（ｓ）（１Ｈ），８．３−７．６（ｍ，４Ｈ），７．４−７．２（ｍ，２Ｈ），６．６７（ｓ）及び６．５９（ｓ）（２Ｈ），５．６２（ｓ）及び５．２７（ｓ）（１Ｈ），４．３５（ｓ）及び４．２０（ｓ）（２Ｈ），３．９９及び３．９０（２Ｈ），３．５（ｂｒｓ）及び３．３（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．２（ｂｒｓ）及び３．０（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．９９（ｓ）及び２．８７（ｓ）（６Ｈ），１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）．

１ｃから４ｃに至るルートは下記の通りであった。

（実施例６）

Ｎ−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２'−カルボニル）グリシン（１ｄ）の合成ＨＡＢＡ（１．２１ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し、橙色粉末として１ｄのｔ−ブチルエステル誘導体（１．７３ｇ，９７％）を得た。 これ（１．０７ｇ，３ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し、橙色粉末として１ｄ（０．８９ｇ，９９％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ １０．４５（ｂｒｔ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｔ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）；

^１３ Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ １７１．１８，１６６．４４，１６１．５４，１４９．１３，１４５．３４，１３３．２０，１３１．０９，１３０．１８，１２９．６１，１２５．８６，１１６．００，１１５．８８，４１．６０．

（実施例７）

２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニルＮ−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２'−カルボニル）グリシネート（５ｄ）の合成１ｄ（２９９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ アセトン／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し橙色粉末として５ｄ（４６ｍｇ，１０％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．６７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０２（ｂｒｔ，１Ｈ），７．８−７．７（ｍ，３Ｈ），７．６−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）．

（実施例８）

２−（Ｎ−（２−（（ｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ）エチル）−２−（４−ヒドロキシアゾベンゼン−２'−カルボニルアミノ）アセチルアミノ）酢酸（４ｄ）の合成５ｄ（３７ｍｇ，８０μｍｏｌ）と６（１８ｍｇ，８０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にジイソプロピルエチルアミン（１４μＬ，８０μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し４ｄ（１３ｍｇ，３３％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．７７（ｓ）及び９．５９（ｓ）（１Ｈ），８．２６（ｓ）及び８．１４（ｓ）（２Ｈ），７．９−７．６（ｍ，２Ｈ），７．６−７．３（ｍ，２Ｈ），７．０−６．６（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ）及び５．０５（ｓ）（１Ｈ），４．４０（ｓ）及び４．２４（ｓ）（２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．６−３．３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｓ）及び３．０２（ｓ）（２Ｈ），１．２８（ｓ）及び１．１８（ｓ）（９Ｈ）．

１ｄから４ｄに至るルートは下記の通りであった。

（実施例９）

ＦＡＭ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（３０．３ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＦＡＭ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２５０μＬ，２．０ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−２５％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、黄色粉末としてＦＡＭ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（６９．８ｍｇ，１００％）を得た。 ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ６３４［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_３２ Ｈ

_３２ Ｏ

_１１ Ｎ

_３ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］６３４．１９５９，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６３４．２０３４．

（実施例１０）

ＴＡＭＲＡ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（５．８ｍｇ，２１μｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＴＡＭＲＡ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５ｍｇ，９．５μｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２０μＬ，１４０μｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−３０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、赤紫色粉末としてＴＡＭＲＡ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（６ｍｇ，１００％）を得た。 ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ６８８［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_３６ Ｈ

_４２ Ｏ

_９ Ｎ

_５ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］６８８．２９０４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６８８．２９９３．

（実施例１１）

ＲＯＸ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（４．９ｍｇ，１８μｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（５ｍＬ）に５，６−ＲＯＸ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（５ｍｇ，８μｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（２０μＬ，１４０μｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−３０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、紫色粉末としてＲＯＸ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（６ｍｇ，１００％）を得た。 ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ７９２［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_４４ Ｈ

_５０ Ｏ

_９ Ｎ

_５ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］７９２．３５３０，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ７９２．３６１５．

（実施例１２）

２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｎ−（４−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２'−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎａｔｅ ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐの合成ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３２６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し橙色粉末としてｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（４４９ｍｇ，９１％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ １０．１４（ｂｒｔ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｓ，６Ｈ）．

（実施例１３）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２'−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成ｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（２４６ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）と

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１０９ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（８５μＬ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製しｏ−ＭＲ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（２２５ｍｇ，７２％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．９９（ｓ）ａｎｄ ９．８５（ｓ）（１Ｈ），８．３−７．６（ｍ）（４Ｈ），７．４−７．２（ｍ）（２Ｈ），６．６７（ｓ）ａｎｄ ６．５９（ｓ）（２Ｈ），５．６２（ｓ）ａｎｄ ５．２７（ｓ）（１Ｈ），４．３５（ｓ）ａｎｄ ４．２０（ｓ）（２Ｈ），３．９９ ａｎｄ ３．９０（２Ｈ），３．５（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．３（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．２（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．０（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．９９（ｓ）ａｎｄ ２．８７（ｓ）（６Ｈ），１．２５（ｂｒｓ，９Ｈ）．

（実施例１４）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−４'−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｄａｂｃｙｌ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（ｐ−ＭＲ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ）の合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）のｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ溶液（１０ｍＬ）にｄａｂｃｙｌ Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ（１４５ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（６００μＬ，４．５ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−４％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、赤褐色粉末としてＤａｂｃｙｌ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１８４ｍｇ，９０％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．１８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），５．７６（ｓ）ａｎｄ ５．３０（ｓ）（２Ｈ），４．２２（ｂｒｓ）ａｎｄ ４．０５（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．７３（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．４９（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．４７（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．２９（ｂｒｓ）（２Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ）；ＦＡＢＭＳ ｍ／ｚ ５２７［（Ｍ＋Ｈ

_＋ ］．

（実施例１５）

Ｎ−（４−Ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２'−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎｅ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨの合成ＨＡＢＡ（１．２１ｇ，５ｍｍｏｌ）とｔ−ブチルグリシン塩酸塩（８８０ｍｇ，５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にトリエチルアミン（７３２μＬ，５．２５ｍｍｏｌ）を加えたあと、氷冷下ＤＣＣ（１．１３ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加え３０分、さらに室温で１５時間攪拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し、橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨのｔ−ブチルエステル誘導体（１．７３ｇ，９７％）を得た。 これ（１．０７ｇ，３ｍｍｏｌ）に蟻酸（５０ｍＬ）を加え室温で２日攪拌し、減圧濃縮し蟻酸を除いたあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し、橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨ（０．８９ｇ，９９％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ １０．４５（ｂｒｔ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｔ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）；

^１３ Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ １７１．１８，１６６．４４，１６１．５４，１４９．１３，１４５．３４，１３３．２０，１３１．０９，１３０．１８，１２９．６１，１２５．８６，１１６．００，１１５．８８，４１．６０．

（実施例１６）

２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｎ−（４−Ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２'−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｉｎａｔｅ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐの合成ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２９９ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（２７６ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＤＣＣ（３０８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−５％ Ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し橙色粉末としてＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（４６ｍｇ，１０％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．６７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０２（ｂｒｔ，１Ｈ），７．８−７．７（ｍ，３Ｈ），７．６−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，２Ｈ）．

（実施例１７）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｈｙｄｒｏｘｙａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−２'−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成ＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−ＯＰｆｐ（３７ｍｇ，８０μｍｏｌ）と

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１８ｍｇ，８０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１４ｍＬ，８０μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−３０％ ＭｅＯＨ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製しＨＡＢＡ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１３ｍｇ，３３％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ９．７７（ｓ）ａｎｄ ９．５９（ｓ）（１Ｈ），８．２６（ｓ）ａｎｄ ８．１４（ｓ）（２Ｈ），７．９−７．６（ｍ，２Ｈ），７．６−７．３（ｍ，２Ｈ），７．０−６．６（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ）ａｎｄ ５．０５（ｓ）（１Ｈ），４．４０（ｓ）ａｎｄ ４．２４（ｓ）（２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．６−３．３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｓ）ａｎｄ ３．０２（ｓ）（２Ｈ），１．２８（ｓ）ａｎｄ １．１８（ｓ）（９Ｈ）．

（実施例１８）

２，３，４，５，６−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ２−（５，７，８−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１，３−ｄｉｏｘｏ−２，５−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，４−ｄｉａｚａｐｈｅｎａｚｉｎ−２−ｙｌ）ａｃｅｔａｔｅ Ｆｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐの合成Ｆｌａｖｉｎ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。 この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。 有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＦｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_２１ Ｈ

_１４ Ｏ

_４ Ｎ

_４ Ｆ

_５ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］４８１．０９３４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．

（実施例１９）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（５，７，８−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１，３−ｄｉｏｘｏ（２，５−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，４−ｄｉ−ａｚａｐｈｅｎａｚｉｎ−２−ｙｌ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｆｌａｖｉｎ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｆｌａｖｉｎ−ＯＰｆｐ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）と

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＦｌａｖｉｎ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−Ｏ� ��（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ

_３ ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）ａｎｄ ７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）ａｎｄ ７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）ａｎｄ ４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）ａｎｄ ４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４ ａｎｄ ３．５２（２Ｈ），３．３８ ａｎｄ ３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）ａｎｄ ２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）ａｎｄ ２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）ａｎｄ １．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_２４ Ｈ

_３１ Ｏ

_７ Ｎ

_６ ［（Ｍ＋Ｈ）

_＋ ］５１５．２２５２，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．

（実施例２０）

２'，３'，４'，５'，６'−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ １，３−Ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ−ＯＰｆｐの合成ＮＩ−ＯＨ（１９２ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（１５２ｍｇ，０．８３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＤＣＣ（１５５ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え、この反応液を室温で１５時間撹拌した。 反応液を濾過し濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）により精製し赤色粉末としてＮＩ−ＯＰｆｐ（２７７ｍｇ，８７％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ８．６４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ）．

（実施例２１）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成ＮＩ−ＯＰｆｐ（２１１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）と

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１２０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（８７μＬ，０．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−２０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＮＩ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ

_６ ）δ ８．４７（ｍ，４Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝８．３，７．３Ｈｚ，２Ｈ），４．７３（ｓ，２Ｈ）；

^１３ Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）ｄ １６７．８４，１６３．５９，１３４．２０，１３１．４４，１３１．３９，１２８．１１，１２６．７８，１２２．００，６１．５９，４１．４４，１４．２９；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ（Ｃ

_１６ Ｈ

_１３ ＮＯ

_４ ）Ｈ

^＋ ２８４．２９３３，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４５６．１７６７；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３３３ｎｍ．

（実施例２２）

２'，３'，４'，５'，６'−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ １，３−Ｄｉｏｘｏ−５−ｎｉｔｒｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ（ＮＯ

_２ ）−ＯＰｆｐの合成ＮＩ（ＮＯ

_２ ）−ＯＨ（１００ｍｇ，３１８μｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（７０．２ｍｇ，３８１μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にＥＤＣ（７３．２ｍｇ，３８２μｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１２時間撹拌した。 この反応液を減圧濃縮し、残渣を水・クロロホルム系で分配抽出した。 有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮したあと、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２．５％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＮＩ（ＮＯ

_２ ）−ＯＰｆｐ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ８．０７（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_２１ Ｈ

_１４ Ｏ

_４ Ｎ

_４ Ｆ

_５ ［（Ｍ＋Ｈ）

_＋ ］４８１．０９３４，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ４８１．０９５０；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．

（実施例２３）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（１，３−ｄｉｏｘｏ−５−ｎｉｔｒｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＯ

_２ ）−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成ＮＩ（ＮＯ

_２ ）−ＯＰｆｐ（１００ｍｇ，２０８μｍｏｌ）と

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（４５．４ｍｇ，２０８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３６．３μＬ，２０８μｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（１０−５０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＮＩ（ＮＯ

_２ ）−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１３０ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ

_３ ＯＤ）δ ７．９４（ｓ）ａｎｄ ７．８６（ｓ）（１Ｈ），７．８０（ｓ）ａｎｄ ７．７５（ｓ）（１Ｈ），５．０３（ｓ）ａｎｄ ４．８８（ｓ）（２Ｈ），４．１７（ｓ）ａｎｄ ４．１３（ｓ）（３Ｈ），３．６４ ａｎｄ ３．５２（２Ｈ），３．３８ ａｎｄ ３．２６（２Ｈ），２．５８（ｓ）ａｎｄ ２．５６（ｓ）（３Ｈ），２．４６（ｓ）ａｎｄ ２．４４（ｓ）（３Ｈ），１．４６（ｓ）ａｎｄ １．４１（ｓ）（９Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ，ＮＢＡ／ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_２４ Ｈ

_３１ Ｏ

_７ Ｎ

_６ ［（Ｍ＋Ｈ）

^＋ ］５１５．２２５２，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５１５．２２７３；ＵＶ λｍａｘ（ＤＭＦ）３９０，４６０（ｎｍ）．

（実施例２４）

５−Ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔｉｃ Ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨの合成ＮＩ（ＮＨ

_２ ）−ＯＨ（１００ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）をｐｙｒｉｄｉｎｅ（３ｍＬ）とＡｃ

_２ Ｏ（３ｍＬ）に溶かし、室温で１５時間撹拌した。 減圧濃縮したあとｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅで洗い、ろ過・乾燥させＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨ（１０３．２ｍｇ，８９％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ

_６ ）δ ８．７９（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ）．

（実施例２５）

２'，３'，４'，５'，６'−Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ５−Ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ）−ａｃｅｔａｔｅ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐの合成ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＨ（９７ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）とＰｆｐＯＨ（６３ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＤＣＣ（７１ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を０°Ｃで１時間室温で１５時間撹拌した。 この反応液をろ過後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマト法（０−２０％ ａｃｅｔｏｎｅ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐ（１４０ｍｇ，９５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ８．９６（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），５．２７（ｓ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ）．

（実施例２６）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（５−ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏ−１，３−ｄｉｏｘｏ−１Ｈ−ｂｅｎｚ［ｄｅ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−２（３Ｈ））ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＮＩ（ＮＨＡｃ）−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成ＮＩ（ＮＨＡｃ）−ＯＰｆｐ（１４０ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）と

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（６７ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（５４μＬ，０．３０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。 これを減圧濃縮し残渣をシリカゲルカラムクロマト法（２−２０％ ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ

_３ ）により精製しＮＩ（ＮＨＡｃ）−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１１７ｍｇ，８５％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ

_６ ）δ ８．４−７．３（ｍ，５Ｈ），５．０５（ｂｒｓ）ａｎｄ ４．９０（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．７６（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．５４（ｂｒｓ）（２Ｈ），３．６４（ｓ）ａｎｄ ３．４９（ｓ）（２Ｈ），３．５４（ｂｒｓ）ａｎｄ ３．４１（ｂｒｓ）（２Ｈ），２．１５（ｓ）ａｎｄ ２．０４（ｓ）（３Ｈ），１．４８（ｓ）ａｎｄ １．４５（ｓ）（９Ｈ）

（実施例２７）

Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ Ｎ−４−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−３'−ｃａｒｂｏｎａｔｅ ｍ−ＭＲ−ＯＳｕの合成ｍ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｒｅｄ（ｍ−ＭＲ−ＯＨ；１１０ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）とＮ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ（６０ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（７ｍＬ）にＤＣＣ（１００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を０°Ｃで加え、この反応液を３０分したあと室温で１５時間撹拌した。 この反応液をろ過し、減圧蒸留して、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ

_２ Ｃｌ

_２ ）に付して、橙色粉末としてｍ−ＭＲ−Ｏｓｕ（１２４ｍｇ；８２％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ

_３ ）δ ８．５９（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｔ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｓ，６Ｈ），２．９３（ｂｒｓ，４Ｈ）．

（実施例２８）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（４−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−３'−ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｍ−ＭＲ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（５０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）にｍ−ＭＲ−ＯＳｕ（７３ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（３５０μＬ，２．７ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−１０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、橙色粉末としてｍ−ＭＲ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（９５ｍｇ，１００％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．２６（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｂｒｔ）ａｎｄ ６．７４（ｂｒｔ）（１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，２Ｈ），３．９９（ｓ）ａｎｄ ３．８９（ｓ）（２Ｈ），３．４４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４−３．２５（ｂｒｓ，４Ｈ），３．０７（ｓ，６Ｈ），１．３９（ｓ）ａｎｄ １．３７（ｓ）（９Ｈ）．

（実施例２９）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−Ｎ'−（（１−ｐｙｒｅｎｙｌ−ｎ−ｂｕｔｙｌ）ｇｌｙｃｙｌ））ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｐｙｒｅｎｅ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（２５ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にＰｙｒｅｎｅ−ＯＳｕ（３９ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（１３８μＬ，１．０ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−１０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、淡黄色粉末としてＰｙｒｅｎｅ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（３０ｍｇ，６１％）を得た。 ＨＲＭＳ（ＦＡＢ

^＋ ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ

_３１ Ｈ

_３５ Ｏ

_６ Ｎ

_３ Ｎａ［（Ｍ＋Ｎａ）

^＋ ］５６８．２５２６，ｏｂｓｅｒｖｅｄ ５６８．２４２９．

（実施例３０）

２−（Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ）−２−（７−ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｃｏｕｍａｒｉｎ−３−ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｇｌｙｃｙｌ）ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｃｏｕｍａｒｉｎ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨの合成Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（１２．７ｍｇ，０．０４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）にｃｏｕｍａｒｉｎ−ＯＳｕ（１５ｍｇ，０．０４２ｍｍｏｌ）とｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（５５．５μＬ，０．４ｍｍｏｌ）を順番に加え、室温で１５時間撹拌した。 反応終了後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（０−２０％ ＭｅＯＨ／ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）に付し、黄色粉末としてＣｏｕｍａｒｉｎ−Ｇｌｙ−

^Ｂｏｃ ＰＮＡ−ＯＨ（２３ｍｇ，１００％）を得た。

^１ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ８．６８（ｓ）ａｎｄ ８．６６（ｓ）（１Ｈ），７．７０ ａｎｄ ７．６９（ｅａｃｈ ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ）（１Ｈ），６．８９（ｂｒｔ）ａｎｄ ６．７５（ｂｒｔ）（１Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），４．２５（ｂｒｄ）ａｎｄ ４．０７（ｂｒｄ）（２Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．９８（ｓ）ａｎｄ ３．８９（ｓ）（２Ｈ），３．４８（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），３．３５（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｂｒｑ）ａｎｄ ３．０７（ｂｒｑ）（２Ｈ），１．３７（ｓ）ａｎｄ １．３６（ｓ）（９Ｈ），１．１４（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）．

産業上の利用可能性

本発明による新規な機能性ＰＮＡモノマーは、遺伝子治療などに用いられるＰＮＡの構築に用いることができる。 また、本発明によれば、機能性ＰＮＡモノマーの、互いに相補的な２つの合成ルートＢ及びＣによって、機能性分子のＰＮＡへの効率的な導入が可能になる。 したがって、本発明は、Ｂｏｃ型モノマーユニットあるいはベンジルオキシカルボニル−ω−アミノ酸誘導体を用いた、機能性ＰＮＡモノマーユニットの工業的合成等の産業において利用することができる。

【図面の簡単な説明】

図１は、ＤＮＡとＰＮＡの構造および荷電の状況の違いを表す図である。

図２は、２種類のＰＮＡモノマーユニットの構造を表す図である。