一类蛋白降解剂及其药物组合物和用途

专利类型 发明公开 法律事件 公开; 实质审查;
专利有效性 实质审查 当前状态 实质审查
申请号 CN202410774107.5 申请日 2024-06-14
公开(公告)号 CN119143748A 公开(公告)日 2024-12-17
申请人 中国科学院上海药物研究所; 申请人类型 科研院所
发明人 胡有洪; 陈奕; 曾艳萍; 丁健; 沈倩倩; 方艳芬; 第一发明人 胡有洪
权利人 中国科学院上海药物研究所 权利人类型 科研院所
当前权利人 中国科学院上海药物研究所 当前权利人类型 科研院所
省份 当前专利权人所在省份:上海市 城市 当前专利权人所在城市:上海市浦东新区
具体地址 当前专利权人所在详细地址:上海市浦东新区张江祖冲之路555号 邮编 当前专利权人邮编:201203
主IPC国际分类 C07D417/14 所有IPC国际分类 C07D417/14C07D471/04C07D487/04C07D475/02C07D519/00A61K31/517A61K31/519A61K31/538A61P29/00A61P19/02A61P37/06A61P17/06A61P17/02A61P17/00A61P37/08A61P11/00A61P11/06A61P9/00A61P9/10A61P9/04A61P13/12A61P31/04A61P31/18A61P19/10A61P35/00A61P35/02A61P25/16A61P25/28A61P25/14A61P21/00
专利引用数量 0 专利被引用数量 0
专利权利要求数量 10 专利文献类型 A
专利代理机构 北京金信知识产权代理有限公司 专利代理人 李维盈;
摘要 本 发明 公开一类蛋白降解剂及其药物组合物和用途。本发明将式(A)所示结构作为LC3B招募化合物,通过将式(A)所示结构,特别是2,4‑喹唑啉二 酮 类结构与目标蛋白的配体连接得到蛋白降解剂,可以实现目标蛋白的自噬降解,产生 生物 学效应,进行相关 疾病 的 治疗 和 预防 。所述蛋白降解剂可以用于治疗、预防和/或改善与CDK、EZH2、或RAS相关疾病。
权利要求

1.式(1)所示的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,
LCBM‑Linker‑POIL  (1);
其中:
LCBM表示与LC3结合的部分;为式(A)所示的结构,
其中:
1 2
Y和Y各自独立地选自O或S;
Ar环选自C6‑C10芳基或5‑10元杂芳基;
1
R为Ar环上的n个取代基,n选自0‑4的整数;
1
各个R各自独立地选自卤素、‑CN、‑OH、‑NH2、‑NO2、‑COOH、无取代或取代的C1‑C20烷基、无取代或取代的C1‑C20烷基、C1‑C20烷基‑NH‑、(C1‑C20烷基)(C1‑C20烷基)N‑、C1‑C20烷氧基羰基‑NH‑、无取代或取代的C3‑C16环烷基、无取代或取代的3‑16元杂环基、无取代或取代的C6‑C14芳基、无取代或取代的5‑15元杂芳基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、‑NH2、‑OH中的一个或多个取代基所取代;
2
R选自氢、无取代或取代的C1‑C20烷基、基C1‑C20烷基、(C1‑C6烷基)(C1‑C6烷基)N‑C1‑C16烷基、C1‑C6烷基‑NH‑C1‑C16烷基、无取代或取代的C3‑C16环烷基、无取代或取代的C3‑C16环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的3‑16元杂环烷基、无取代或取代的3‑10元杂环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的C6‑C14芳基、无取代或取代的5‑15元杂芳基、无取代或取代的C6‑C14芳基C1‑C6烷基、无取代或取代的5‑15元杂芳基C1‑C6烷基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基、羟基、C1‑C3烷基、C1‑C3烷氧基、三氟甲基中的一个或多个取代基所取代;
其中所述杂芳基和杂环基中含有1‑4个选自N、O和S中的杂原子
表示从此处连接至linker;
Linker表示共价连接部分;
POIL表示与CDK或者EZH2或者RAS结合的目标蛋白配体部分。
2.根据权利要求1所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,式(A)中,
1
各个R各自独立地选自卤素、‑CN、‑OH、‑NH2、‑NO2、‑COOH、无取代或取代的C1‑C10烷基、无取代或取代的C1‑C10烷氧基、C1‑C10烷基‑NH‑、(C1‑C10烷基)(C1‑C10烷基)N‑、C1‑C10烷氧基羰基‑NH‑、无取代或取代的C3‑C10环烷基、无取代或取代的3‑10元杂环基、无取代或取代的C6‑C10芳基、无取代或取代的5‑10元杂芳基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、‑NH2、‑OH中的一个或多个取代基所取代;和/或
2
R选自氢、无取代或取代的C1‑C10烷基、氨基C1‑C10烷基、(C1‑C6烷基)(C1‑C6烷基)N‑C1‑C10烷基、C1‑C6烷基‑NH‑C1‑C10烷基、无取代或取代的C3‑C10环烷基、无取代或取代的C3‑C10环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的3‑10元杂环烷基、无取代或取代的3‑10元杂环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的C6‑C10芳基、无取代或取代的5‑10元杂芳基、无取代或取代的C6‑C10芳基C1‑C6烷基、无取代或取代的5‑10元杂芳基C1‑C6烷基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、‑NH2、‑OH、C1‑C3烷基、C1‑C3烷氧基、三氟甲基中的一个或多个取代基所取代。
3.根据权利要求1或2所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,
式(A)所示结构选自下式(A‑1)所示结构:
其中,Ar环选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基;
1
R为Ar环上的n个取代基,n选自0‑2的整数,优选地,n为0或1;
1
各个R各自独立地选自卤素、‑NO2、‑COOH、无取代或取代的C1‑C6烷基、无取代或取代的C1‑C6烷氧基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、‑NH2、‑OH中的一个
1
或多个取代基所取代;优选地,R选自卤素、‑NO2、甲基、甲氧基;
2
R选自氢、无取代或取代的C1‑C10烷基、无取代或取代的C3‑C10环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的3‑10元杂环基C1‑C6烷基、无取代或取代的C6‑C10芳基、无取代或取代的5‑10元杂芳基、无取代或取代的C6‑C10芳基C1‑C6烷基、无取代或取代的5‑10元杂芳基C1‑C6烷基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基、羟基、C1‑C3烷基、C1‑C3烷
2
氧基、三氟甲基中的一个或多个取代基所取代;优选地,R 选自氢、乙基、特戊基、环己基甲基、N‑甲基哌啶甲基、N,N‑二甲基胺乙基、苯基、苄基、被甲氧基或三氟甲基取代的苄基、苯乙基、吡啶基、N‑甲基吡唑基。
4.根据权利要求1‑3任一项所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,
式(A)所示结构选自如下结构:
5.根据权利要求1所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,
POIL表示与CDK结合的目标蛋白配体部分,所述CDK包括CDK1,CDK2,CDK3,CDK4,CDK5,CDK6,CDK7,CDK8,CDK9,CDK10,CDK11,CDK12,CDK13,CDK14,CDK15,CDK16,CDK17,CDK18,CDK19,CDK20,CDK21,优选为CDK9,CDK7,CDK2,CDK4,CDK6;或
POIL部分为CDK探针、CDK抑制剂、EZH2探针、EZH2抑制剂、RAS探针、RAS抑制剂,包括下列化合物:
6.根据权利要求1所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,
Linker为化学键或包含1‑50个,优选2‑16个原子的直链或支链亚烷基或饱和环状烷基结构,其中的1个或多个碳原子,特别是1‑6个,更特别是1或2个碳原子任选地被杂原子代a a a
替,所述杂原子选自O、S、NRa、PRa,优选为O、S或NR ,更优选为O或NR ,特别是O,其中,R为H或C1‑C3烷基;或者,其中的1个或多个碳原子,特别是1‑6个,更特别是1或2个碳原子任选地被‑C(=O)‑、‑C(=S)‑、‑S(=O)‑、‑SO2‑、或具有0到4个杂原子的3到6元环代替,所述杂原子选自O、S、N、P;
优选地,Linker选自:
‑(CH2)n‑、‑(CH2CH2O)m‑(CH2)n‑、‑CO‑(CH2)n‑、
其中,各个n独立地为选自1‑20的整数,优选为1‑16的整数,更优选为1‑8的整数;
各个m独立地为1‑10的整数,优选为1‑6的整数,更优选为1‑2的整数;
p为0‑10的整数,优选为0‑6的整数,更优选为0‑2的整数;
进一步优选地,Linker选自如下结构:
7.根据权利要求1‑6任一项所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,式(1)所示的蛋白降解剂选自以下结构:
其中,n为1‑16的整数,优选为l‑8的整数;
m为1‑6的整数,优选为1或2;
1 2
R、R的定义如权利要求1_4任一项所述。
8.根据权利要求1‑7任一项所述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,其特征在于,所述蛋白降解剂选自以下结构:
9.一种药物组合物,其包含治疗有效量的选自权利要求1‑8任一项所述蛋白降解剂、或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药中的一种或多种,以及任选存在的药学上可接受的载体。
10.权利要求1‑8任一项所述蛋白降解剂,或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,或者权利要求8所述药物组合物以下一种或多种的用途:
a.在制备用于降解CDK9、cyclin T1、CDK9‑cyclin T1复合物、EZH2、EED、SUZ12、EZH1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、cyclin H、cyclin A2、cyclin E1、cyclin D1或RAS中一种或多种蛋白的产品中的用途;
b.在制备用于治疗、预防和/或改善CDK或EZH2或RAS相关疾病或病症的药物中的用途。

说明书全文

一类蛋白降解剂及其药物组合物和用途

[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2023年6月14日提交的申请号为202310710665.0,发明名称为“一类蛋白降解剂及其药物组合物和用途”的中国专利申请的优先权,该申请的全部内容通过引用整体并入本文,其程度如同完全记载在本文中一样。

技术领域

[0003] 本发明涉及医药技术领域,涉及一类蛋白降解剂及其药物组合物和它们在制备用于治疗预防和/或改善与CDK、EZH2或RAS相关疾病的药物中的用途。技术背景
[0004] 靶向蛋白降解是一种十分有潜生物机制研究工具和治疗手段。通过直接降解靶蛋白,可以克服靶标蛋白突变产生的耐药问题,也可以发挥抑制剂所没有的致病蛋白的非酶功能清除的作用。在过去的二十多年里,PROTAC技术取得了长足的发展,已有数个PROTAC候选药物进入了临床研究。但PROTAC技术依然面临E3泛素连接酶耐药性出现以及依赖于泛素蛋白酶体系统但细胞内仍有许多物质并不是该蛋白酶体清除的底物等问题。
[0005] 因此,仍然需要开发用于降解靶蛋白的新型蛋白降解技术。

发明内容

[0006] 发明人以在细胞中有分布的CDK9为初步筛选降解剂片段,发现在式(A)所示结构的1‑位引入连接链,与CDK9的配体相连接,得到了一系列对CDK9‑cyclin T1复合物具有降解作用的化合物,并明确其可以通过招募LC3B实现CDK9的自噬降解。同样地,将相关代表性式(A)所示结构降解片段与其他靶点的结合片段(例如EZH2,RAS或其他CDK抑制剂等)相连接,均降解相关蛋白,说明该结构具有蛋白降解的广谱性。因此,本发明首次提出了式(A)所示结构可以作为LC3B招募化合物,通过将式(A)所示结构,特别是2,4‑喹唑啉二类结构与目标蛋白的配体连接得到蛋白降解剂,可以实现目标蛋白的自噬降解,产生生物学效应,进行相关疾病的治疗和预防。
[0007] 鉴于此,本发明的目的之一在于提供一类蛋白降解剂。
[0008] 本发明的目的之二在于提供上述蛋白降解剂的制备方法。
[0009] 本发明的目的之三在于提供包含上述蛋白降解剂的药物组合物。
[0010] 本发明的目的之四在于提供上述蛋白降解剂或药物组合物在制备用于治疗、预防和/或改善与CDK、EZH2、或RAS相关疾病的药物中的用途。
[0011] 为了实现本发明的上述目的,采用以下技术方案:
[0012] 本发明第一方面提供了一种蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,所述蛋白降解剂包括:
[0013] 至少一个可以与LC3结合的部分(LC3 Binding Moiety,以下有时简称LCBM部分);
[0014] 至少一个可以与CDK或EZH2或RAS结合的目标蛋白配体(Protein Of Interest Ligand,以下有时简称POIL)部分;以及,
[0015] 连接部分linker,其用于将所述LCBM部分各自独立地与所述POIL部分共价连接。
[0016] 本发明中,LC3指的是微管相关蛋白1A/1B‑轻链3(microtubule‑associated protein light chain 3),其是一种可溶性蛋白,分子量约为17kDa。LC3普遍存在于哺乳动物组织和培养细胞,是自噬(真核细胞的回收系统)的关键组分。其在自噬体生物合成过程中掺入自噬体的内外膜。因此,LC3是自噬(尤其是自噬体形成)的特异性标志物。
[0017] CDK指的是丝酸/苏氨酸激酶家族的细胞周期蛋白依赖激酶。
[0018] EZH2指的是Enhancer of zeste homologue 2。
[0019] RAS指的是RAS蛋白。
[0020] 在具体的实施方式中,本发明提供式(1)所示的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,[0021] LCBM‑Linker‑POIL  (1);
[0022] 其中:
[0023] LCBM表示可以与LC3结合的部分;
[0024] Linker表示共价连接部分;
[0025] POIL表示可以与CDK或者EZH2或者RAS结合的目标蛋白配体部分。
[0026] 上述LCBM部分和POIL部分可以各自独立地选自小分子化合物。
[0027] 在一些实施方案中,LCBM部分和POIL部分的分子量各自独立地为约100‑约2000Da,优选为约100‑约1000Da,例如约100‑约900Da、约100‑约800Da、约100‑约700Da、约
100‑约600Da、约100‑约500Da。
[0028] LCBM部分可以连接一个或多个POIL部分,反之亦然。在存在多于一个POIL部分的情况下,POIL部分可以各自独立地选择,各个POIL部分之间可以相同,也可以不同。在一些实施方案中,存在多个针对相同靶标的POIL部分。即使针对相同靶标,也可以根据需要在一个分子中使用多个相同或各自不同的POIL部分。当使用多于一个POIL部分的情况下,所用的linker也可以各自独立地选择。
[0029] LCBM部分
[0030] 该部分表示可以与LC3结合的部分,是指对于LC3蛋白具有亲和力的部分。
[0031] 在一些实施方案中,LCBM部分为式(A)所示结构,
[0032]
[0033] 其中:
[0034] Y1和Y2各自独立地选自O或S;
[0035] Ar环选自C6‑C10芳基或5‑10元杂芳基;
[0036] R1为Ar环上的n个取代基,n选自0‑4的整数,例如0,1,2,3,4;
[0037] 各个R1各自独立地选自卤素、氰基(‑CN)、羟基(‑OH)、氨基(‑NH2)、硝基(‑NO2)、羧基(‑COOH)、无取代或取代的C1‑C20烷基、无取代或取代的C1‑C20烷基、C1‑C20烷基‑NH‑、(C1‑C20烷基)(C1‑C20烷基)N‑、C1‑C20烷氧基羰基‑NH‑、无取代或取代的C3‑C16环烷基、无取代或取代的3‑16元杂环基、无取代或取代的C6‑C14芳基、无取代或取代的5‑15元杂芳基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基(‑NH2)、羟基(‑OH)中的一个或多个取代基所取代;
[0038] R2选自氢、无取代或取代的C1‑C20烷基、氨基C1‑C20烷基、(C1‑C6烷基)(C1‑C6烷基)N‑C1‑C16烷基、C1‑C6烷基‑NH‑C1‑C16烷基、无取代或取代的C3‑C16环烷基、无取代或取代的C3‑C16环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的3‑16元杂环烷基、无取代或取代的3‑10元杂环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的C6‑C14芳基、无取代或取代的5‑15元杂芳基、无取代或取代的C6‑C14芳基C1‑C6烷基、无取代或取代的5‑15元杂芳基C1‑C6烷基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基、羟基、C1‑C3烷基(例如甲基)、C1‑C3烷氧基(例如甲氧基)、三氟甲基中的一个或多个取代基所取代;
[0039] 表示从此处连接至linker。
[0040] 在一些实施方案中,式(A)中,各个R1各自独立地选自卤素、氰基(‑CN)、羟基(‑OH)、氨基(‑NH2)、硝基(‑NO2)、羧基(‑COOH)、无取代或取代的C1‑C10烷基、无取代或取代的C1‑C10烷氧基、C1‑C10烷基‑NH‑、(C1‑C10烷基)(C1‑C10烷基)N‑、C1‑C10烷氧基羰基‑NH‑、无取代或取代的C3‑C10环烷基、无取代或取代的3‑10元杂环基、无取代或取代的C6‑C10芳基、无取代或取代的5‑10元杂芳基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基(‑NH2)、羟基(‑OH)中的一个或多个取代基所取代。
[0041] 在一些实施方案中,式(A)中,R2选自氢、无取代或取代的C1‑C10烷基、氨基C1‑C10烷基、(C1‑C6烷基)(C1‑C6烷基)N‑C1‑C10烷基、C1‑C6烷基‑NH‑C1‑C10烷基、无取代或取代的C3‑C10环烷基、无取代或取代的C3‑C10环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的3‑10元杂环烷基、无取代或取代的3‑10元杂环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的C6‑C10芳基、无取代或取代的5‑10元杂芳基、无取代或取代的C6‑C10芳基C1‑C6烷基、无取代或取代的5‑10元杂芳基C1‑C6烷基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基、羟基、C1‑C3烷基(例如甲基)、C1‑C3烷氧基(例如甲氧基)、三氟甲基中的一个或多个取代基所取代。
[0042] 本文中,杂芳基和杂环基中可以含有1‑4个,例如1‑2个选自N、O和S中的杂原子
[0043] 在一些实施方案中,式(A)所示结构选自下式(A‑1)所示结构:
[0044]
[0045] 其中,Ar环选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基;
[0046] R1为Ar环上的n个取代基,n选自0‑2的整数,例如0,1,2;
[0047] 各个R1各自独立地选自卤素、硝基、羧基、无取代或取代的C1‑C6烷基、无取代或取代的C1‑C6烷氧基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基、羟基中1
的一个或多个取代基所取代;优选地,n为0或1;R选自卤素、硝基、甲基、甲氧基;
[0048] R2选自氢、无取代或取代的C1‑C10烷基、无取代或取代的C3‑C10环烷基C1‑C6烷基、无取代或取代的3‑10元杂环基C1‑C6烷基、无取代或取代的C6‑C10芳基、无取代或取代的5‑10元杂芳基、无取代或取代的C6‑C10芳基C1‑C6烷基、无取代或取代的5‑10元杂芳基C1‑C6烷基,所述取代是指所限定基团中的一个或多个氢被选自卤素、氨基、羟基、C1‑C3烷基(例如甲基)、C1‑C3烷氧基(例如甲氧基)、三氟甲基中的一个或多个取代基所取代;优选2
地,R选自氢、乙基、特戊基、环己基甲基、N‑甲基哌啶甲基、N,N‑二甲基胺乙基、苯基、苄基、被甲氧基或三氟甲基取代的苄基、苯乙基、吡啶基、N‑甲基吡唑基。
[0049] 在一些实施方案中,式(A)所示结构选自如下结构:
[0050]
[0051] POIL部分
[0052] 该部分表示可以与CDK或EZH2或RAS结合的部分,是指能够与CDK或EZH2或RAS发生相互作用的部分,即POIL部分针对的靶标为CDK或EZH2或RAS。
[0053] 所述CDK包括CDK1,CDK2,CDK3,CDK4,CDK5,CDK6,CDK7,CDK8,CDK9,CDK10,CDK11,CDK12,CDK13,CDK14,CDK15,CDK16,CDK17,CDK18,CDK19,CDK20,CDK21及其所述CDK的所有亚型。
[0054] 在一些实施方案中,POIL部分能够与CDK9结合。
[0055] 在一些实施方案中,POIL部分能够与CDK7结合。
[0056] 在一些实施方案中,POIL部分能够与CDK2结合。
[0057] 在一些实施方案中,POIL部分能够同时与CDK2、CDK4、CDK6结合。
[0058] 在一些实施方案中,POIL部分能够与CDK5结合。
[0059] 在一些实施方案中,POIL部分能够与EZH2结合。
[0060] 在一些实施方案中,POIL部分能够同时与EZH2、EED、SUZ12、EZH1结合。
[0061] 在一些实施方案中,POIL部分能够与RAS结合。
[0062] 在一些实施方案中,POIL部分可以为已上市或文献已报道的CDK探针、CDK抑制剂、EZH2探针、EZH2抑制剂、RAS探针、RAS抑制剂,包括但不限于下列化合物:
[0063]
[0064] Linker
[0065] Linker为用于连接LCBM部分和POIL部分的连接部分,其可以是化学键或基团。
[0066] Linker可以是刚性的,也可以是柔性的。在一些优选的实施方案中,Linker是柔性的。
[0067] 在一些实施方案中,Linker为化学键。本文中,Linker为化学键,表示LCBM部分和POIL部分直接相连。
[0068] 在另一些实施方案中,Linker为包含1‑50,优选2‑16(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16),进一步优选2‑8(例如2、3、4、5、6、7、8)个原子的直链或支链亚烷基或饱和环状烷基结构,其中的1个或多个(例如2、3、4、5、6个)碳原子,特别是1或2个碳原a a a a
子任选地被杂原子代替,所述杂原子选自O、S、NR、PR,优选为O、S或NR,更优选为O或NR ,a
特别是O,其中,R 为H或C1‑C3烷基;或者,其中的1个或多个碳原子,特别是1‑6个,更特别是
1或2个碳原子任选地被‑C(=O)‑、‑C(=S)‑、‑S(=O)‑、‑SO2‑或具有0到4个杂原子的3到6元环代替,所述杂原子选自O、S、N、P。
[0069] 在一些实施方案中,Linker选自:
[0070] ‑(CH2)n‑、‑(CH2CH2O)m‑(CH2)n‑、‑CO‑(CH2)n‑、
[0071] 其中,各个n独立地为选自1‑20的整数(例如n可以为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20),优选为1‑16的整数、1‑10的整数、1‑8的整数;
[0072] 各个m独立地为1‑10的整数(例如m可以为1、2、3、4、5、6、7、8、9或10),优选为1‑6的整数、1‑2的整数;
[0073] p为0‑10的整数,优选为0‑6的整数,更优选为0‑2的整数。
[0074] 在一些实施方案中,Linker选自如下结构:
[0075]
[0076] 在一些实施方案中,POIL部分通过碳原子或者杂原子与linker共价连接。所述杂原子选自氧、硫、氮、磷。本领域技术人员可以根据这三部分的结构选择合适的反应用于连接。
[0077] 在一些实施方案中,所述蛋白降解剂选自如下的任一结构:
[0078]
[0079]
[0080]
[0081]
[0082]
[0083] 其中,各个n独立地为1‑16的整数(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16),优选为1‑8的整数(例如1、2、3、4、5、6、7、8);
[0084] 各个m独立地为1‑6的整数(例如1、2、3、4、5或6),优选为1或2;
[0085] R1、R2的定义同上。
[0086] 在一些实施例中,所述蛋白降解剂为CDK9、cyclin T1和/或CDK9‑cyclin T1复合物的降解剂,选自如下结构:
[0087]
[0088]
[0089]
[0090]
[0091]
[0092] 在一些实施例中,所述蛋白降解剂为CDK2、cyclin A2、cyclin E1、CDK4、CDK5、CDK6、cyclin D1、CDK7、CDK9或cyclin T1中的一种或多种的降解剂,选自如下结构:
[0093]
[0094]
[0095] 在一些实施例中,所述蛋白降解剂为EZH2,EED,SUZ12,EZH1,CDK2,CDK4,CDK6,CDK7,cyclinH,cyclin A2、cyclin E1、cyclin D1或RAS中的一种或多种的降解剂,选自如下结构:
[0096]
[0097]
[0098]
[0099]
[0100]
[0101]
[0102]
[0103] 本发明中的术语定义如下:
[0104] 如本文所用,“卤素”可以为氟、氯、溴或碘,优选为氟、氯、溴。
[0105] 如本文所用,单独或者作为复合基团的一部分的术语“C1‑C20烷基”是指具有1‑20个碳原子的直链或支链烷基,例如“C1‑C10烷基”、“C1‑C6烷基”、“C1‑C4烷基”、“C1‑C3烷基”等。其具体实例可以包括甲基、乙基、丙基、正丙基、异丙基、丁基、正丁基、异丁基、叔丁基、1‑甲基‑丁基、1‑乙基‑丁基、戊基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、特戊基、己基、正己基、
1‑甲基戊基、2‑甲基戊基、4‑甲基‑2‑戊基、3,3‑二甲基丁基、2‑乙基丁基以及类似基团,但不限于此。
[0106] 如本文所用,术语“C1‑C20烷氧基”是指RO‑基团,其中R为如上所述的C1‑C20烷基,例如“C1‑C10烷氧基”、“C1‑C6烷氧基”、“C1‑C4烷氧基”、“C1‑C3烷氧基”等。烷氧基的具体实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、正己氧基、异己氧基、3‑甲基戊氧基、3,3‑二甲基丁氧基、2‑乙基丁氧基等。
[0107] 如本文所用,单独或者作为复合基团的一部分的术语“C3‑C16环烷基”是指包含3‑16个碳原子的完全饱和的环状类化合物基团,例如“C3‑C10环烷基”、“C3‑C7环烷基”、“C3‑C6环烷基”、“C4‑C6环烷基”等,其具体实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
[0108] 如本文所用,单独或者作为复合基团的一部分的术语“3‑15元杂环基”是指环上含有1至4个,例如1至3个、1至2个选自氮、氧、硫中的杂原子的3‑15元环烷基团,其具体实例包括环氧乙烷、四氢咪唑、四氢呋喃等。
[0109] 如本文所用,单独或者作为复合基团的一部分的术语“C6‑C14芳基”是指具有6至14个碳原子的单环或多环芳基,例如“C6‑C10芳基”,实例如苯基、基,优选为苯基。
[0110] 如本文所用,单独或者作为复合基团的一部分的术语“5‑15元杂芳基”是指环上具有5‑15个原子并且环上含有1至4个选自氮、氧、硫的杂原子的单环或多环(例如双环或三环)芳香环或芳香基团,优选为“5‑10元杂芳环”、“5‑6元杂芳环”、“4‑5元杂芳基”。具体实例包括吡咯基,呋喃基,噻吩基,咪唑基,吡唑基,噁唑基,吡啶‑2‑基,吡啶‑3‑基,吡啶_4‑基,嘧啶‑4‑基,嘧啶‑5‑基,吡嗪‑2‑基,异噁唑基,噻唑基,异噻唑基,三唑基,噁二唑基,噻二唑基,吡啶基,哒嗪基,嘧啶基,吡嗪基,吲哚基,异吲哚基,吲唑基,苯并三唑基,苯并噻吩基,异苯并噻吩基,苯并呋喃基,苯并异呋喃基,苯并咪唑基,苯并噁唑基,苯并异噁唑基,苯并噻唑基,苯并异噻唑基,苯并噻二唑基,吲哚嗪基,喹啉基、异喹啉基、嘌呤基,咪唑并吡啶基,咪唑并嘧啶基,咪唑并吡嗪基,咪唑并哒嗪基,咪唑并三嗪基,吡唑并吡啶基,吡唑并嘧啶基,吡唑并吡嗪基,吡唑并三嗪基,吡咯并吡啶基,吡咯并嘧啶基,吡咯并哒嗪基,吡咯并吡嗪基和吡咯并三嗪基等,优选为吡唑基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基。
[0111] 如本文所用,“药学上可接受的盐”包括式(I)化合物的阴离子盐和阳离子盐,例如式(1)化合物与酸或形成的盐;例如式(1)化合物的无机酸有机酸盐;优选地,所述无机酸包括盐酸氢溴酸氢碘酸硫酸硝酸磷酸、碳酸、高氯酸;优选地,所述有机酸包括甲酸、乙酸、丙酸、草酸丙二酸琥珀酸、富酸、马来酸、乳酸、苹果酸、柠檬酸、枸橼酸、酒石酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、谷氨酸、双羟萘酸;或者式(1)化合物的的无机碱或有机碱盐;例如式(I)化合物的碱金属的盐、碱土金属的盐、铵盐;优选地,所述碱金属包括钠、、锂、铯,所述碱土金属包括镁、、锶,例如所述有机碱包括三烷基胺、吡啶、喹啉、哌啶、咪唑、甲基吡啶、二甲氨基吡啶、二甲基苯胺、N‑烷基吗啉、1,5‑二氮杂双环[4.3.0]壬烯‑5、1,8‑二氮杂双环[5.4.0]十一碳烯‑7、1,4‑二氮杂双环[2.2.2]辛烷;优选地,所述三烷基胺包括三甲胺、三乙胺、N,N‑二异丙基乙胺;优选地,所述N‑烷基吗啉包括N‑甲基吗啉。
[0112] 本发明的化合物可以含有手性中心,照此可以存在不同的异构形式。如本文所用的“异构体”指具有相同分子式、但是原子的排列和构型有区别的不同化合物。如本文所用,“立体异构体”包括非对映异构体、对映异构体和外消旋物,几何异构体,构象异构体(包括旋转异构体和阻转异构体)。
[0113] 本发明另一方面,提供了一种蛋白降解剂的制备方法,所述方法包括LC3结合部分的合成方法及通过共价连接将可以与LC3结合的部分与可以与CDK和EZH2和RAS结合的部分连接起来的步骤。
[0114] 实现连接的反应类型包括亲核取代反应、mitsunobu反应、缩合反应等,但不限于此。
[0115] 在一些实施方案中,蛋白降解剂的药学上可接受的盐,可以通过将蛋白降解剂溶于相应的酸饱和的醇溶液或乙酸乙酯溶液或二氧六环溶液中进行反应而制备,例如:将蛋白降解剂溶于氯化氢饱和的甲醇溶液,室温搅拌30分钟,将溶剂蒸干,即可制得相应的蛋白降解剂的盐酸盐。但本发明不限于此,本领域技术人员可以根据蛋白降解剂的性质采用任何适合的成盐方式。
[0116] 本发明再一方面,提供了一种药物组合物,其包含治疗有效量的选自上述蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药中的一种或多种以及任选存在的药学上可接受的载体。
[0117] 所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体,例如:稀释剂,如等;填充剂,如淀粉蔗糖等;粘合剂,如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮;湿润剂,如甘油;崩解剂,如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠;吸收促进剂,如季铵化合物;表面活性剂,如十六烷醇;吸附载体,如高岭土和皂粘土;润滑剂,如滑石粉、硬脂酸钙和硬脂酸镁和聚乙二醇等。另外,还可以在上述药物组合物中加入其它辅剂,如香味剂和甜味剂等。
[0118] 本发明的蛋白降解剂或其组合物可以以常规制剂形式口服或肠胃外给药至患者,所述常规制剂形式为,比如,胶囊、微囊、片剂、颗粒剂、散剂、锭剂、丸剂、栓剂、注射剂、混悬剂、糖浆、贴剂、乳膏剂、洗剂、软膏剂、凝胶、喷雾剂、溶液和乳剂。适合的制剂可以使用常规的有机或无机添加剂,通过通常采用的方法制备,所述有机或无机添加剂为,比如,赋形剂(例如,蔗糖、淀粉、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖纤维素、滑石、磷酸钙或碳酸钙)、粘合剂(例如,纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、聚丙基吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、阿拉伯胶、聚乙二醇、蔗糖或淀粉)、崩解剂(例如,淀粉、羧甲基纤维素、羟丙基淀粉、低取代的羟丙基纤维素、碳酸氢钠、磷酸钙或柠檬酸钙)、润滑剂(例如,硬脂酸镁、轻质无水酸、滑石或月桂基硫酸钠)、矫味剂(例如,柠檬酸、薄荷醇、甘氨酸或橘子粉)、防腐剂(例如,苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯)、稳定剂(例如,柠檬酸、柠檬酸钠或乙酸)、助悬剂(例如,甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或硬脂酸)、分散剂(例如,羟丙基甲基纤维素)、稀释剂(例如,水)和底蜡(例如,可可脂、白凡士林或聚乙二醇)。
[0119] 可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如,以注射剂形式用药时,可给药单次推注、团注和/或连续输注,等等。例如,可随时间给药数个分剂量,或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。例如,可随时间给药数个分剂量,或可依据治疗情况而按比例减少或增加剂量。要注意,剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化,且可包括单次或多次剂量。一般地,治疗的剂量是变化的,这取决于所考虑的事项,例如:待治疗患者的年龄、性别和一般健康状况;治疗的频率和想要的效果的性质;组织损伤的程度;症状的持续时间;以及可由各个医师调整的其它变量。要进一步理解,对于任何特定个体,具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。可以通过临床领域的普通技术人员容易地确定所述药物组合物的施用量和施用方案。例如,本发明的蛋白降解剂或其组合物可以以分剂量每天4次至每7天给药1次,给药量可以是例如0.01~1000mg/次。可以一次或多次施用需要的剂量,以获得需要达到的结果。也可以以单位剂量形式提供根据本发明的药物组合物。
[0120] 本发明另一方面提供了上述的蛋白降解剂或其药学上可接受的盐、立体异构体、溶剂化物、多晶型、互变异构体、同位素化合物、代谢产物或前药,或者药物组合物在制备用于降解CDK9、cyclin T1、CDK9‑cyclin T1复合物、EZH2、EED、SUZ12、EZH1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、cyclin H、cyclin A2、cyclin E1、cyclin D1或RAS中一种或多种蛋白,特别是同时降解CDK9和cyclin T1,EZH2、EED、SUZ12和EZH1,CDK2、CDK4和CDK6,CDK5、以及cyclin A2、cyclin E1和cyclin D1的产品的用途。该产品可以作为药物,也可用于临床前或实验室研究,例如作为相关蛋白降解或对应通路研究的试剂使用。
[0121] 本发明另一方面提供了上述的蛋白降解剂或药物组合物在制备用于治疗、预防和/或改善CDK或EZH2或RAS相关疾病或病症的药物中的用途。
[0122] 本发明另一方面提供了上述的蛋白降解剂在用于治疗、预防和/或改善CDK或EZH2或RAS相关疾病或病症中的用途。
[0123] 上述CDK或EZH2或RAS相关疾病或病症包含但不限于如下:
[0124] 炎症:如关节炎,类湿性关节炎,脊椎关节病,痛风性关节炎,骨关节炎,青少年关节炎和其他关节炎病症等;皮肤相关病症:如皮癣,湿疹,烧伤,皮炎,神经炎症等;过敏,疼痛,发热;部疾病:如肺部炎症,成人呼吸窘迫综合征,肺部肉瘤病,哮喘,矽肺病,慢性肺部炎症疾病,和慢性阻塞性肺病(COPD)等;心血管疾病:如动脉硬化,心肌梗塞(包括心肌梗塞后适应症),血栓形成,充血性心力衰竭,心脏再灌注损伤等;以及与高血压和/或心力衰竭相关的并发症,如血管器官损伤,再狭窄,心肌病;中风,包括缺血性和出血性中风;再灌注损伤;局部缺血,包括中风和脑局部缺血,以及由心脏/冠状动脉旁路、神经变性疾病、肝病或肾炎引起的局部缺血;胃肠道病症:如炎症性肠病,克罗恩病,胃炎,肠易激综合征,溃疡性结肠炎,溃疡性疾病,胃溃疡,病毒和细菌感染等;败血症:包括败血性休克,革兰氏阴性败血症等;疟疾;脑膜炎;HIV感染;机会性感染;继发于感染或恶性肿瘤的恶病质;继发于获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的恶病质,AIDS,ARC (AIDS相关综合征);疱疹病毒感染引起的肌痛;流行性感冒;自身免疫性疾病;移植物抗宿主反应和同种异体移植排斥反应;
骨吸收疾病;骨质疏松症;多发性硬化症;癌症:如白血病,淋巴瘤,结肠直肠癌,脑癌,骨癌,上皮细胞来源的肿瘤(上皮癌),基底细胞癌,腺癌,胃肠癌,唇癌,口腔癌,食道癌,小肠癌,胃癌,结肠癌,肝癌,膀胱癌,胰腺癌,卵巢癌,宫颈癌,肺癌,乳腺癌,皮肤癌,鳞状细胞和/或基底细胞癌,前列腺癌,肾细胞癌和其他已知影响全身上皮细胞的癌症,慢性髓性白血病(CML),急性髓性白血病(AML)和急性早幼粒细胞白血病(APL);中枢神经系统疾病:包括具有炎性或凋亡组分的中枢神经系统疾病,阿尔茨海默病,帕金森病,亨廷顿病,肌萎缩侧索硬化,脊髓损伤和周围神经病,或B细胞淋巴瘤等。
[0125] 此外,通过借助本申请的蛋白降解剂(例如本文所述的那些)的LC3介导的自噬降解调节细胞内CDK或EZH2或RAS的量,本发明也为治疗、预防或改善CDK或EZH2或RAS在其中起作用的疾病或病症提供了新的范例。
[0126] 本发明提供的蛋白降解剂,或本发明的药物组合物还可以与用于治疗或预防肿瘤的其他治疗剂联用。
[0127] 本发明具有以下有益效果:
[0128] 本发明提供了一系列对LC3具有招募作用的含2,4‑喹唑啉二酮类的小分子,得到了一系列对于CDK9以及cyclin T1或EZH2、EED、SUZ12以及EZH1或CDK2/4/6以及cyclin A2/E1/D1或RAS或CDK2或CDK7以及cyclin H具有降解作用的蛋白降解剂,这些降解剂体现了优异的抗肿瘤活性,并且,本发明也提供了一种降解蛋白复合物的手段。
[0129] 在上文中已经详细地描述了本发明,但是上述实施方式本质上仅是例示性,且并不欲限制本发明。此外,本文并不受前述现有技术或发明内容或以下实施例中所描述的任何理论的限制。附图说明
[0130] 图1示出了代表性化合物诱导CDK9和Cyclin T1蛋白降解并下调Mcl‑1蛋白的Western Blot实验结果,其中A为100nM的化合物Y33、Y35、Y41、Y44、Y45处理WSU‑DLCL2细胞,B为1μM的化合物Y1、Y2、Y3、Y4、Y5处理WSU‑DLCL2细胞。
[0131] 图2中A示出了代表性化合物Y2、Y3诱导CDK9和LC3B的结合,图2中B示出了化合物Y35的降解效果可以被自噬晚期抑制剂巴弗洛霉素A1(BafA1)抑制,表明了自噬‑溶酶体降解途径。
[0132] 图3示出了化合物Y44、Y82‑Y86在100nM浓度下诱导CDK9和Cyclin T1蛋白降解并下调Mcl‑1蛋白的Western Blot实验结果。
[0133] 图4中A示出了化合物Y53在系列浓度(0.1μM,1μM,10μM)下对CDK2的降解效果;图4中B示出了化合物Y67在10μM浓度下对CDK7以及相应cyclin H的降解效果;图4中C示出了化合物Y62对CDK2及其相应的cyclin A2、cyclin E1和CDK6及其相应cyclin D1的降解效果;图4中D示出了在10μM浓度下Y59,Y60,Y61对CDK2/4/6以及相应的cyclin A2/E1/D1的降解效果。
[0134] 图5中A示出了化合物Y47、Y50在10μM浓度下对EZH2、EED、SUZ12复合物以及EZH1的降解效果;图5中B示出了化合物Y50、Y87‑Y89在10μM浓度下对EZH2、EED、SUZ12复合物以及EZH1的降解效果。
[0135] 图6示出了化合物Y69对Ras蛋白的降解效果,其具有时间和浓度依赖性,同时也可以下调相关蛋白pERKT202/Y204和ERK的水平。
[0136] 图7示出了代表性化合物诱导CDK2、cyclin A2、cyclin E1、CDK4、CDK5、CDK6、cyclin D1、CDK7、CDK9和Cyclin T1蛋白降解的Western Blot实验结果,其中A为100nM的化合物Y83、Y95、Y96处理WSU‑DLCL2细胞,B为100nM的化合物Y84、Y100‑Y106处理WSU‑DLCL2细胞。

具体实施方式

[0137] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明,需要说明的是,提供以下实施例仅出于说明目的并不构成对本发明要求保护范围的限制。
[0138] 除特殊说明外,在实施例中所采用的原料、试剂、方法等均为本领域常规的原料、试剂、方法。
[0139] 在以下实施例中,核磁共振氢谱用BrukerAMX‑400型核磁共振仪记录,化学位移δ的单位为ppm。如无特别说明,所有反应溶剂均按照常规方法进行纯化。柱层析用硅胶(200‑300目)为青岛海洋化工分厂生产。薄层层析使用GF254高效板,为烟台化工研究所生产。制备型薄层层析板由中国科学院上海药物研究所制备,固定相采用GF254(HG/T2354‑92)硅胶和羧甲基纤维素钠(800‑1200)制备,分别为青岛海洋化工有限公司和中国医药(集团)上海化学试剂公司生产。如无特别标注,所有溶剂均为分析纯试剂,所用试剂均购自国药集团化学试剂有限公司。采用碘、紫外荧光等方法显色。减压蒸除有机溶剂旋转蒸发仪中进行。
[0140] 实施例1蛋白降解剂Y1的合成
[0141]
[0142] 第一步
[0143] 将2‑氨基‑4‑氯苯甲酸甲酯(1.0g,5.39mmol)溶于27mL无水乙腈中,加入乙氧羰基异硫氰酸酯(0.8mL,6.47mmol),室温搅拌过夜,原料消耗完后加入苄胺(0.9mL,8.08mmol)和1‑(3‑二甲胺丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI,2.1g,10.78mmol),室温搅拌24小时,旋去乙腈之后溶于乙酸乙酯中,之后乙酸乙酯相用1M盐酸洗两遍,水洗一遍,无水硫酸钠干1
燥,旋去乙酸乙酯,乙醚打浆得Y1a(白色固体,1.5g,收率77.8%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.90(s,1H),8.12(d,J=8.5Hz,1H),7.58‑7.51(m,2H),7.36‑7.24(m,
4H),7.20(d,J=1.8Hz,1H),5.46(s,2H),4.27(q,J=7.1Hz,2H),1.39(t,J=7.1Hz,3H).[0144] 第二步
[0145] 将Y1a(1.5g,4.19mmol)溶于51ml甲醇中,加入1M氢氧化钠水溶液8mL,回流2小时,旋去甲醇,加入二氯甲烷,二氯甲烷层水洗一遍,饱和氯化钠水溶液洗一遍,无水硫酸钠干1
燥,硅胶柱层析,得到Y1b(白色固体,150mg,收率12.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ
9.27(s,1H),8.09(d,J=8.5Hz,1H),7.53(d,J=7.4Hz,2H),7.37‑7.30(m,3H),7.21(dd,J=8.6,1.8Hz,1H),7.07(d,J=1.8Hz,1H),5.26(s,2H).
[0146] 第三步
[0147] 将Ylb(50mg,0.17mmol)溶于1mL DMF中,加入1,2‑二溴乙烷(60μL,0.70mmol),碳酸钾(48mg,0.35mmol),室温搅拌过夜,加入乙酸乙酯和水,乙酸乙酯层用水洗4遍,饱和氯1
化钠水溶液洗一遍,无水硫酸钠干燥,硅胶柱层析,得到Y1c(白色固体,35mg,收率50.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.21(d,J=8.4Hz,1H),7.55‑7.49(m,2H),7.36‑7.23(m,5H),
5.26(s,2H),4.47(t,J=7.5Hz,2H),3.61(t,J=7.5Hz,2H).
[0148] 第四步
[0149] 将Y1c(49mg,0.12mmol)溶于1mL DMF中,加入SNS‑032(47mg,0.12mmol),二异丙基乙胺(DIPEA,62μL,0.37mmol),室温搅拌过夜,原料消耗完全后,加入乙酸乙酯和水,乙酸乙酯层用水洗4次,饱和氯化钠水溶液洗一次,无水硫酸钠干燥,硅胶柱层析,得到Y1(白色固1
体,20mg,收率23.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.40(s,1H),8.19(d,J=8.5Hz,
1H),7.55‑7.47(m,2H),7.39(s,1H),7.36‑7.30(m,3H),7.28‑7.21(m,2H),6.61(s,1H),
5.27(s,2H),4.26(t,J=6.9Hz,2H),3.99(s,2H),3.09(d,J=11.1Hz,2H),2.69(t,J=
6.9Hz,2H),2.45‑2.34(m,1H),2.26‑2.15(m,2H),1.94一1.80(m,4H),1.26(s,9H).[0150] 实施例2蛋白降解剂Y2的合成
[0151]
[0152] 合成方法同实施例1,将1,2‑二溴乙烷换成1,3‑二溴丙烷,得到蛋白降解剂Y2(白1
色固体,收率63.4%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.30(s,1H),8.18(d,J=8.5Hz,
1H),7.56‑7.50(m,2H),7.44(d,J=1.8Hz,1H),7.36(s,1H),7.35‑7.30(m,2H),7.29‑7.25(m,1H),7.22(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),5.27(s,2H),4.18(t,J=7.2Hz,2H),
3.97(s,2H),3.02(d,J=10.5Hz,2H),2.51‑2.39(m,3H),2.03‑1.88(m,8H),1.26(s,9H).[0153] 实施例3蛋白降解剂Y3的合成
[0154]
[0155] 合成方法同实施例1,将1,2‑二溴乙烷换成1,4‑二溴丁烷,得到蛋白降解剂Y3(白1
色固体,收率38.3%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.57(s,1H),8.19(d,J=8.5Hz,
1H),7.54‑7.46(m,2H),7.36(s,1H),7.34‑7.25(m,4H),7.22(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),5.27(s,2H),4.18‑4.11(m,2H),3.98(s,2H),3.04(d,J=11.1Hz,2H),2.56‑2.39(m,3H),2.18‑2.03(m,2H),2.01‑1.90(m,4H),1.84‑1.73(m,2H),1.72‑1.62(m,2H),1.26(s,9H).
[0156] 实施例4蛋白降解剂Y4的合成
[0157]
[0158] 合成方法同实施例1,将1,2‑二溴乙烷换成1,5‑二溴戊烷,得到蛋白降解剂Y4(白1
色固体,收率47.0%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.26(s,1H),8.19(d,J=8.4Hz,
1H),7.54‑7.49(m,2H),7.36(s,1H),7.35‑7.26(m,3H),7.23(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.17(d,J=1.8Hz,1H),6.61(s,1H),5.27(s,2H),4.13‑4.06(m,2H),3.98(s,2H),3.03(d,J=
11.3Hz,2H),2.47‑2.36(m,3H),2.14‑2.00(m,2H),1.98‑1.87(m,4H),1.81‑1.71(m,2H),
1.68‑1.56(m,2H),1.51‑1.38(m,2H),1.26(s,9H).
[0159] 实施例5蛋白降解剂Y5的合成
[0160]
[0161] 合成方法同实施例1,将1,2‑二溴乙烷换成三乙二醇双对甲苯磺酸酯,得到蛋白降1
解剂Y5(白色固体,收率69.8%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.64(s,1H),8.15(d,J=8.4Hz,1H),7.53‑7.48(m,3H),7.35(s,1H),7.34‑7.24(m,3H),7.20(dd,J=8.5,1.7Hz,
1H),6.60(s,1H),5.31‑5.30(m,1H),5.26(s,2H),4.30(t,J=5.5Hz,2H),3.97(s,2H),3.82(t,J=5.5Hz,2H),3.64‑3.60(m,2H),3.59‑3.53(m,4H),3.03‑2.96(m,2H),2.56(t,J=
5.8Hz,2H),2.42‑2.31(m,1H),2.12‑2.02(m,2H),1.97‑1.79(m,4H),1.25(s,9H).[0162] 实施例6蛋白降解剂Y6的合成
[0163]
[0164] 第一步
[0165] 将4‑氯靛红酸酐(500mg,2.53mmol),苯胺(231μL,2.53mmol)溶于13mL二氯甲烷中,回流30分钟,加入N,N′‑羰基二咪唑(CDI,451mg,2.78mmol),回流3小时,旋干二氯甲烷,1
加入乙醇,打浆,抽滤,得到Y6a(白色固体,230mg,收率33.3%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ
11.70(s,1H),7.94(d,J=8.4Hz,1H),7.52‑7.40(m,3H),7.35‑7.22(m,4H)。
[0166] 第二步
[0167] 将Y6a(230mg,0.84mmol),1,2‑二溴乙烷(364μL,4.22mmol)溶于4mL DMF中,加入碳酸钾(234mg,1.69mmol),室温搅拌过夜,加入乙酸乙酯和水,乙酸乙酯层用水洗4次,饱和氯化钠洗1次,无水硫酸钠干燥,硅胶柱层析,得到化合物Y6b(白色固体,163mg,收率1
50.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.23(d,J=8.4Hz,1H),7.59‑7.46(m,3H),7.37‑
7.26(m,4H),4.51(t,J=7.4Hz,2H),3.67(t,J=7.4Hz,2H)。
[0168] 第三步
[0169] 将Y6b(85mg,0.22mmol)溶于1mL DMF中,加入SNS‑032(85mg,0.22mmol),DIPEA1
(111μL,0.67mmol),60℃搅拌过夜,得到化合物Y6(白色固体,58mg,收率38.1%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.98(s,1H),8.05(d,J=8.5,2.9Hz,1H),7.41‑7.34(m,2H),
7.34‑7.28(m,1H),7.26‑7.17(m,2H),7.15‑7.06(m,4H),6.44(s,1H),4.19‑4.08(m,2H),
3.81(s,2H),2.99‑2.88(m,2H),2.63‑2.52(m,2H),2.30‑2.17(m,1H),2.11‑1.98(m,2H),
1.80‑1.66(m,4H),1.09(s,9H)。
[0170] 实施例7蛋白降解剂Y7的合成
[0171]
[0172] 合成方法同实施例6,将苯胺换成苯乙胺,得到蛋白降解剂Y7(白色固体,收率1
35.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.75(s,1H),8.19(d,J=8.4Hz,1H),7.38(s,
1H),7.36‑7.30(m,5H),7.27‑7.22(m,2H),6.61(s,1H),4.36‑4.20(m,4H),3.98(s,2H),
3.13(d,J=10.9Hz,2H),3.03‑2.96(m,2H),2.75‑2.64(m,2H),2.43(s,1H),2.31‑2.19(m,
2H),2.01‑1.86(m,4H),1.27(s,9H)。
[0173] 实施例8蛋白降解剂Y8的合成
[0174]
[0175] 合成方法同实施例6,将苯胺换成4‑甲氧基苄胺,得到蛋白降解剂Y8(白色固体,收1
率35.1%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.36(s,1H),8.18(d,J=8.4Hz,1H),7.53‑
7.46(m,2H),7.38(s,1H),7.32‑7.30(m,1H),7.22(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),6.91‑6.83(m,
2H),6.61(s,1H),5.21(s,2H),4.31‑4.21(m,2H),3.99(s,2H),3.79(s,3H),3.11(d,J=
11.0Hz,2H),2.73‑2.66(m,2H),2.47‑2.35(m,1H),2.28‑2.16(m,2H),1.96‑1.84(m,4H),
1.26(s,9H)。
[0176] 实施例9蛋白降解剂Y9的合成
[0177]
[0178] 合成方法同实施例6,将苯胺换成4‑(三氟甲基)苄胺,得到蛋白降解剂Y9(白色固1
体,收率30.1%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.10(s,1H),8.19(d,J=8.5Hz,1H),
7.65‑7.57(m,4H),7.36(s,1H),7.34(s,1H),7.26(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),
5.32(s,2H),4.26(t,J=7.0Hz,2H),3.99(s,2H),3.10(d,J=11.1Hz,2H),2.74‑2.66(m,
2H),2.47‑2.35(m,1H),2.27‑2.15(m,2H),1.95‑1.83(m,4H),1.26(s,9H)。
[0179] 实施例10蛋白降解剂Y10的合成
[0180]
[0181] 合成方法同实施例6,将苯胺换成4‑甲氨基吡啶,得到蛋白降解剂Y10(白色固体,1
收率11.0%)。H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ8.53‑8.48(m,2H),8.17(d,J=8.5Hz,1H),
7.64(d,J=1.8Hz,1H),7.46‑7.42(m,2H),7.36(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.33(s,1H),6.70(s,1H),5.30(s,2H),4.37(t,J=6.7Hz,2H),4.01(s,2H),3.13(d,J=11.7Hz,2H),2.72(t,J=6.7Hz,2H),2.54‑2.42(m,1H),2.20(t,J=11.2Hz,2H),1.90‑1.72(m,4H),1.25(s,9H)。
[0182] 实施例11蛋白降解剂Y11的合成
[0183]
[0184] 合成方法同实施例6,将苯胺换成3‑氨甲基吡啶,得到蛋白降解剂Y11(白色固体,1
收率11.4%)。H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ8.69(d,J=2.1Hz,1H),8.46(d,J=4.9Hz,
1H),8.18(d,J=8.5Hz,1H),7.96(d,J=7.8Hz,1H),7.61(d,J=1.7Hz,1H),7.44(dd,J=
8.0,5.0Hz,1H),7.37‑7.32(m,2H),6.69(s,1H),5.29(s,2H),4.36(t,J=6.6Hz,2H),4.01(s,2H),3.10(d,J=11.4Hz,2H),2.70(t,J=6.6Hz,2H),2.53‑2.42(m,1H),2.19(t,J=
11.6Hz,2H),1.87‑1.81(m,2H),1.79‑1.68(m,2H),1.26(s,9H)。
[0185] 实施例12蛋白降解剂Y12的合成
[0186]
[0187] 合成方法同实施例6,将苯胺换成2‑氨甲基吡啶,得到降解剂Y12(白色固体,收率1
21.2%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.21(s,1H),8.46‑8.41(m,1H),8.06(d,J=8.4Hz,
1H),7.75(td,J=7.7,1.8Hz,1H),7.71(d,J=1.8Hz,1H),7.41‑7.35(m,2H),7.31(d,J=
7.9Hz,1H),7.26‑7.21(m,1H),6.73(s,1H),5.25(s,2H),4.26(t,J=6.3Hz,2H),4.06(s,
2H),2.98(d,J=10.9Hz,2H),2.57(t,J=6.3Hz,2H),2.48‑2.38(m,1H),2.01(t,J=
11.4Hz,2H),1.72(d,J=12.5Hz,2H),1.57‑1.45(m,2H),1.17(s,9H)。
[0188] 实施例13蛋白降解剂Y13的合成
[0189]
[0190] 合成方法同实施例6,将苯胺换成4‑(氨基甲基)‑1‑甲基吡唑,得到降解剂Y13(白色固体,收率10.0%)。
[0191] 实施例14蛋白降解剂Y14的合成
[0192]
[0193] Y14a的合成方法同实施例6,将第一步中苯胺换成2,4‑二甲氧基苄胺,得到Y14a1
(白色固体,收率46.4%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.64(s,1H),8.20(d,J=
8.4Hz,1H),7.37(s,1H),7.33(d,J=1.7Hz,1H),7.24(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),6.98(d,J=
8.4Hz,1H),6.61(s,1H),6.47(d,J=2.4Hz,1H),6.43(dd,J=8.4,2.4Hz,1H),5.26(s,2H),
4.28(t,J=6.8Hz,2H),3.98(s,2H),3.85(s,3H),3.78(s,3H),3.09(d,J=11.3Hz,2H),
2.71(t,J=6.8Hz,2H),2.44‑2.32(m,1H),2.25‑2.15(m,2H),1.94‑1.81(m,4H),1.26(s,
9H)。
[0194] 将Y14a(95mg,0.13mmol)溶于lmL三氟乙酸中,回流24小时,加水,析出白色固体,1
抽滤得Y14(白色固体,50mg,收率65.7%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.48‑11.52(m,2H),
7.98(d,J=8.4Hz,1H),7.60(d,J=1.8Hz,1H),7.38(s,1H),7.31(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),
6.73(s,1H),4.16(t,J=6.4Hz,2H),4.05(s,2H),2.99(d,J=11.0Hz,2H),2.56‑2.52(m,
2H),2.47‑2.40(m,1H),2.07‑1.97(m,2H),1.79‑1.70(m,2H),1.61‑1.48(m,2H),1.17(s,
9H)。
[0195] 实施例15蛋白降解剂Y15的合成
[0196]
[0197] 合成方法同实施例6,将第一步中苯胺换成乙胺(2M,THF)反应得到化合物Y15a,进1
而继续第二步、第三步反应得到降解剂Y15(白色固体,收率20.0%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.42(s,1H),8.18(d,J=8.4Hz,1H),7.38(s,1H),7.35‑7.31(m,1H),7.23(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),4.30‑4.23(m,2H),4.15(q,J=7.0Hz,2H),3.99(s,
2H),3.13(d,J=11.1Hz,2H),2.75‑2.67(m,2H),2.50‑2.39(m,1H),2.30‑2.18(m,2H),
1.97‑1.86(m,4H),1.30(t,J=7.1Hz,3H),1.26(s,9H)。
[0198] 实施例16蛋白降解剂Y16的合成
[0199]
[0200] 合成方法同实施例6,将苯胺换成特戊胺,得到降解剂Y16(白色固体,收率1
36.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.50(s,1H),8.17(d,J=8.4Hz,1H),7.38(s,
1H),7.32(d,J=1.8Hz,1H),7.22(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),4.26(t,J=7.0Hz,
2H),4.04(s,2H),3.98(s,2H),3.19‑3.08(m,2H),2.69(t,J=6.9Hz,2H),2.47‑2.37(m,
1H),2.28‑2.14(m,2H),1.96‑1.84(m,4H),1.26(s,9H),0.99(s,9H).
[0201] 实施例17蛋白降解剂Y17的合成
[0202]
[0203] 合成方法同实施例6,将苯胺换成N,N‑二甲基乙二胺,得到降解剂Y17(白色固体,1
收率19.0%)。H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ8.15(d,J=8.5Hz,1H),7.60(d,J=1.7Hz,
1H),7.35‑7.29(m,2H),6.70(s,1H),4.34(t,J=6.9Hz,2H),4.25(t,J=6.8Hz,2H),4.00(s,2H),3.18‑3.11(m,2H),2.71(t,J=6.8Hz,4H),2.55‑2.45(m,1H),2.38(s,6H),2.26‑
2.17(m,2H),1.93‑1.75(m,4H),1.26(s,9H).
[0204] 实施例18蛋白降解剂Y18的合成
[0205]
[0206] 合成方法同实施例6,将苯胺换成环己甲胺,得到降解剂Y18(白色固体,收率1
39.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.18(d,J=8.5Hz,1H),7.38(s,1H),7.32(d,J=
1.8Hz,1H),7.23(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),4.26(t,J=7.0Hz,2H),4.00‑3.94(m,4H),3.12(d,J=11.2Hz,2H),2.70(t,J=7.0Hz,2H),2.47‑2.36(m,1H),2.28‑2.19(m,
2H),1.96‑1.81(m,5H),1.77‑1.59(m,6H),1.27(s,9H),1.15‑1.03(m,2H).[0207] 实施例19蛋白降解剂Y19的合成
[0208]
[0209] 合成方法同实施例6,将苯胺换成(1‑甲基_4‑哌啶)甲胺,得到降解剂Y19(白色固1
体,收率4.0%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.17(d,J=8.4Hz,1H),7.35(s,1H),7.30(d,J=1.7Hz,1H),7.23(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),6.60(s,1H),4.26(t,J=6.6Hz,2H),4.04(d,J=6.9Hz,2H),3.97(s,2H),3.14‑3.00(m,4H),2.51‑2.35(m,4H),2.25‑2.13(m,4H),
1.96‑1.57(m,9H),1.25(s,9H).
[0210] 实施例20蛋白降解剂Y20的合成
[0211]
[0212] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到降解剂1
Y20(白色固体,收率24.3%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.66(s,1H),8.27(dd,J=
7.9,1.6Hz,1H),7.74‑7.66(m,1H),7.54‑7.49(m,2H),7.38(s,1H),7.35‑7.22(m,5H),6.61(s,1H),5.32‑5.28(m,2H),4.31(t,J=7.2Hz,2H),3.99(s,2H),3.13‑3.05(m,2H),2.70(t,J=7.2Hz,2H),2.47‑2.35(m,1H),2.25‑2.17(m,2H),1.93‑1.82(m,4H),1.25(s,9H).[0213] 实施例21蛋白降解剂Y21的合成
[0214]
[0215] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成靛红酸酐,苯胺换成乙胺(2M,THF),得1
到降解剂Y21(白色固体,收率34.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.58(s,1H),8.27(dd,J=7.9,1.6Hz,1H),7.73‑7.66(m,1H),7.38(s,1H),7.32‑7.24(m,5H),6.61(s,1H),
4.31(t,J=7.4Hz,2H),4.18(q,J=7.0Hz,2H),3.98(s,2H),3.13(d,J=11.4Hz,2H),2.71(t,J=7.4Hz,2H),2.47‑2.37(m,1H),2.23(dt,J=11.0,6.0Hz,2H),1.98‑1.85(m,4H),
1.32(t,J=7.0Hz,3H),1.27(s,9H).
[0216] 实施例22蛋白降解剂Y22的合成
[0217]
[0218] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成5‑氯‑1H‑苯并[d][1,3]噁嗪‑2,4‑二1
酮,苯胺换成苄胺,得到降解剂Y22(白色固体,收率13.4%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.17(s,1H),7.57‑7.51(m,3H),7.37(s,1H),7.36‑7.29(m,3H),7.27‑7.21(m,2H),
6.61(s,1H),5.28(s,2H),4.31(t,J=7.1Hz,2H),3.98(s,2H),3.07(d,J=11.2Hz,2H),
2.68(t,J=7.0Hz,2H),2.42‑2.32(m,1H),2.25‑2.13(m,2H),1.95‑1.77(m,4H),1.27(s,
9H).
[0219] 实施例23蛋白降解剂Y23的合成
[0220]
[0221] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成5‑氯靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到降1
解剂Y23(白色固体,收率12.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ9.92(s,1H),8.24(d,J=2.5Hz,1H),7.64(dd,J=8.9,2.6Hz,1H),7.53‑7.49(m,2H),7.36(s,1H),7.35‑7.31(m,
2H),7.27‑7.22(m,1H),6.61(s,1H),5.28(s,2H),4.32‑4.23(m,2H),3.98(s,2H),3.07(d,J=11.1Hz,2H),2.74‑2.63(m,2H),2.41‑2.31(m,1H),2.27‑2.14(m,2H),1.96‑1.77(m,4H),
1.27(s,9H).
[0222] 实施例24蛋白降解剂Y24的合成
[0223]
[0224] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成3‑氯靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到降1
解剂Y24(白色固体,收率14.2%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.15(s,1H),8.10(dd,J=
7.8,1.7Hz,1H),7.89(dd,J=7.9,1.6Hz,1H),7.38(s,1H),7.37‑7.28(m,5H),7.24‑7.19(m,1H),6.72(s,1H),5.12(s,2H),4.58(t,J=6.2Hz,2H),4.06(s,2H),2.61‑2.51(m,2H),
2.37‑2.25(m,1H),1.89(t,J=11.3Hz,2H),1.57(d,J=12.6Hz,2H),1.28‑1.20(m,2H),
1.17(s,9H).
[0225] 实施例25蛋白降解剂Y25的合成
[0226]
[0227] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成6‑甲氧基‑1H‑苯并[d][1,3]恶嗪‑2,4‑1
二酮,苯胺换成苄胺,得到降解剂Y25(白色固体,收率19.3%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ
12.22(s,1H),7.68(t,J=8.5Hz,1H),7.39(s,1H),7.34‑7.28(m,4H),7.25‑7.19(m,1H),
7.05(d,J=8.6Hz,1H),6.89(d,J=8.5Hz,1H),6.72(s,1H),5.09(s,2H),4.24(t,J=
6.7Hz,2H),4.06(s,2H),3.85(s,3H),2.97(d,J=10.8Hz,2H),2.56(t,J=6.7Hz,2H),
2.48‑2.40(m,1H),2.01(t,J=11.3Hz,2H),1.77‑1.68(m,2H),1.62‑1.49(m,2H),1.17(s,
9H).
[0228] 实施例26蛋白降解剂Y26的合成
[0229]
[0230] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成5‑甲氧基靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得1
到降解剂Y26(白色固体,收率31.4%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),7.54‑7.47(m,2H),7.43‑7.38(m,2H),7.34‑7.30(m,4H),7.27‑7.20(m,1H),6.72(s,1H),5.16(s,2H),
4.25(t,J=6.6Hz,2H),4.06(s,2H),3.83(s,3H),2.97(d,J=10.9Hz,2H),2.56(t,J=
6.6Hz,2H),2.48‑2.39(m,1H),2.05‑1.95(m,2H),1.72(d,J=12.6Hz,2H),1.59‑1.48(m,
2H),1.17(s,9H).
[0231] 实施例27蛋白降解剂Y27的合成
[0232]
[0233] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成7‑甲氧基‑1H‑苯并[D][1,3]恶嗪‑2,4‑1
二酮,苯胺换成苄胺,得到降解剂Y27(白色固体,收率28.8%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ
12.22(s,1H),8.00(d,J=9.4Hz,1H),7.39(s,1H),7.35‑7.28(m,4H),7.26‑7.19(m,1H),
6.95‑6.89(m,2H),6.72(s,1H),5.13(s,2H),4.27(t,J=6.5Hz,2H),4.06(s,2H),3.93(s,
3H),2.99(d,J=10.8Hz,2H),2.58(t,J=6.6Hz,2H),2.47‑2.39(m,1H),2.01(t,J=
11.2Hz,2H),1.73(d,J=12.6Hz,2H),1.63‑1.46(m,2H),1.17(s,9H).
[0234] 实施例28蛋白降解剂Y28的合成
[0235]
[0236] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成3‑甲氧基靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得1
到降解剂Y28(白色固体,收率32.1%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.19(s,1H),7.71(dd,J=7.8,1.5Hz,1H),7.47(dd,J=8.3,1.5Hz,1H),7.39(s,1H),7.35‑7.26(m,6H),7.25‑7.19(m,1H),6.72(s,1H),5.13(s,2H),4.48(t,J=6.7Hz,2H),4.06(s,2H),3.93(s,3H),2.79(d,J=10.9Hz,2H),2.58‑2.52(m,2H),2.44‑2.33(m,1H),2.02‑1.93(m,2H),1.72‑1.64(m,
2H),1.50‑1.37(m,2H),1.18(s,9H).
[0237] 实施例29蛋白降解剂Y29的合成
[0238]
[0239] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成4‑甲基靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到1
降解剂Y29(白色固体,收率11.3%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),7.96(d,J=
8.0Hz,1H),7.39(s,1H),7.37(s,1H),7.34‑7.28(m,4H),7.26‑7.21(m,1H),7.14(d,J=
8.2Hz,1H),6.72(s,1H),5.14(s,2H),4.28‑4.22(m,3H),4.06(s,2H),2.99(d,J=10.9Hz,
2H),2.60‑2.55(m,2H),2.47‑2.45(m,4H),2.06‑1.97(m,2H),1.76‑1.69(m,2H),1.59‑1.48(m,2H),1.17(s,9H).
[0240] 实施例30蛋白降解剂Y30的合成
[0241]
[0242] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成4‑溴靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到降1
解剂Y30(白色固体,收率27.6%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.21(s,1H),7.97(d,J=
8.4Hz,1H),7.81(d,J=1.7Hz,1H),7.49(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.39(s,1H),7.35‑7.31(m,4H),7.27‑7.20(m,1H),6.72(s,1H),5.13(s,2H),4.27(t,J=6.2Hz,2H),4.06(s,2H),
2.97(d,J=11.1Hz,2H),2.56(t,J=6.1Hz,2H),2.47‑2.39(m,1H),2.04‑1.95(m,2H),
1.76‑1.67(m,2H),1.59‑1.46(m,2H),1.17(s,9H).
[0243] 实施例31蛋白降解剂Y31的合成
[0244]
[0245] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成4‑氟靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到降1
解剂Y31(白色固体,收率20.1%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),8.17‑8.10(m,
1H),7.49‑7.43(m,1H),7.39(s,1H),7.34‑7.30(m,4H),7.26‑7.21(m,1H),7.19‑7.14(m,
1H),6.72(s,1H),5.14(s,2H),4.29‑4.20(m,2H),4.06(s,2H),2.98(d,J=11.2Hz,2H),
2.59‑2.54(m,2H),2.36‑2.31(m,1H),2.05‑1.95(m,2H),1.75‑1.67(m,2H),1.56‑1.45(m,
2H),1.17(s,9H).
[0246] 实施例32蛋白降解剂Y32的合成
[0247]
[0248] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成4‑硝基靛红酸酐,苯胺换成苄胺,得到1
降解剂Y32(白色固体,收率25.6%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.21(s,1H),8.33‑8.28(m,
2H),8.06(dd,J=8.7,1.9Hz,1H),7.39(s,1H),7.37‑7.30(m,4H),7.28‑7.21(m,1H),6.72(s,1H),5.16(s,2H),4.34(t,J=6.2Hz,2H),4.06(s,2H),2.99(d,J=10.8Hz,2H),2.62(t,J=6.1Hz,2H),2.47‑2.39(m,1H),2.09‑1.97(m,2H),1.72(d,J=12.7Hz,2H),1.60‑1.45(m,2H),1.17(s,9H).
[0249] 实施例33蛋白降解剂Y33的合成
[0250]
[0251] 合成方法同实施例6,将苯胺换成乙胺(2M in THF),1,2‑二溴乙烷换成1,3二溴乙1
烷,得到降解剂Y33(白色固体,收率33.4%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.21(s,1H),8.03(d,J=8.4Hz,1H),7.66(d,J=1.8Hz,1H),7.37(s,1H),7.31(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),6.70(s,1H),4.10(t,J=7.0Hz,2H),4.03(s,2H),3.95(q,J=7.0Hz,2H),2.85(d,J=10.9Hz,
2H),2.46‑2.38(m,1H),2.36‑2.27(m,2H),1.90‑1.69(m,6H),1.65‑1.53(m,2H),1.18‑1.10(m,12H).
[0252] 实施例34蛋白降解剂Y34的合成
[0253]
[0254] 合成方法同实施例6,将1,2‑二溴乙烷换成1,3二溴乙烷,得到降解剂Y34(白色固1
体,收率39.1%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),8.04(d,J=8.3Hz,1H),7.75(s,
1H),7.51‑7.27(m,6H),6.70(s,1H),4.11(t,J=7.0Hz,2H),4.03(s,2H),2.88(d,J=
10.9Hz,2H),2.46‑2.40(m,1H),2.39‑2.32(m,2H),1.92‑1.72(m,6H),1.65(t,J=11.8Hz,
2H),1.15(s,9H).
[0255] 实施例35蛋白降解剂Y35的合成
[0256]
[0257] 合成方法同实施例6,将苯胺换成4‑甲氨基吡啶,1,2‑二溴乙烷换成1,3二溴乙烷,1
得到降解剂Y35(白色固体,收率26.0%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.23(s,1H),8.53‑
8.45(m,2H),8.07(d,J=8.5Hz,1H),7.75(d,J=1.8Hz,1H),7.42‑7.35(m,2H),7.32‑7.25(m,2H),6.72(s,1H),5.15(s,2H),4.14(t,J=6.9Hz,2H),4.06(s,2H),2.87(d,J=10.2Hz,
2H),2.47‑2.40(m,1H),2.37‑2.31(m,2H),1.92‑1.71(m,6H),1.68‑1.54(m,2H),1.17(s,
9H).
[0258] 实施例36蛋白降解剂Y36的合成
[0259]
[0260] 合成方法同实施例6,将4‑氯靛红酸酐换成5‑甲氧基‑[1,3]苯并恶嗪‑2,4‑二酮,苯胺换成4‑甲氨基吡啶,1,2‑二溴乙烷换成1,3二溴乙烷,得到降解剂Y36(白色固体,收率1
38.9%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.24(s,1H),8.51‑8.43(m,2H),7.69(t,J=8.5Hz,
1H),7.39(s,1H),7.27‑7.22(m,2H),7.14(d,J=8.6Hz,1H),6.92(d,J=8.5Hz,1H),6.73(s,1H),5.10(s,2H),4.13(t,J=7.3Hz,2H),4.06(s,2H),3.85(s,3H),2.87(d,J=11.1Hz,
2H),2.47‑2.41(m,1H),2.36(t,J=6.8Hz,2H),1.92‑1.70(m,6H),1.66‑1.53(m,2H),1.18(s,9H).
[0261] 实施例37蛋白降解剂Y37的合成
[0262]
[0263] Y37a的合成方法同实施例6中Y6a的合成,将第一步中苯胺换成4‑甲氨基吡啶得到1
Y37a(白色固体,收率15.9%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ11.73(s,1H),8.53‑8.42(m,2H),
7.95(d,J=8.5Hz,1H),7.30一7.26(m,3H),7.24(d,J=2.0Hz,1H),5.09(s,2H).[0264] 第一步
[0265] 将Y37a(500mg,1.74mmol),4‑羟基环己甲酸甲酯(550mg,3.48mmol),三苯基膦(912mg,3.48mmol)溶于10mL无水四氢呋喃中,于浴下滴加偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD,0.7mL,3.48mmol),然后升至室温搅拌过夜,旋干四氢呋喃,硅胶柱层析,得到Y37b与三苯氧磷的混合物500mg,无色油状。
[0266] 第二步
[0267] 上步所得混合物溶于3mL甲醇中,加入3mL水,一水合氢氧化锂(245mg,5.84mmol),1
室温搅拌过夜,得到Y37c 200mg。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.09(s,1H),8.54‑8.41(m,
2H),8.09(d,J=8.5Hz,1H),7.54(d,J=2.0Hz,1H),7.43(dd,J=8.5,2.1Hz,1H),7.28‑
7.19(m,2H),5.38‑5.31(m,1H),5.24(s,2H),2.32‑2.20(m,1H),1.86‑1.77(m,2H),1.69‑
1.54(m,4H),1.43‑1.27(m,2H).
[0268] 第三步
[0269] 将SNS‑032(50mg,0.13mmol),Y37c(60mg,0.14mmol),‑(7‑氮杂苯并三氮唑)‑N,N,N′,N′‑四甲基脲六氟磷酸酯(HATU,75mg,0.20mmol),DIPEA(70μL,0.39mmol)溶于2mL二氯1
甲烷中,室温搅拌2小时,硅胶柱层析,得到降解剂Y37(白色固体,80mg,收率85.7%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.33(s,1H),8.53‑8.47(m,2H),8.09(d,J=8.5Hz,1H),7.54(d,J=2.0Hz,1H),7.43(dd,J=8.5,2.1Hz,1H),7.40(s,1H),7.29‑7.26(m,2H),6.72(s,1H),
5.49‑5.39(m,1H),5.27‑5.19(m,2H),4.42(d,J=12.9Hz,1H),4.06(s,2H),3.99(d,J=
13.6Hz,1H),3.04(t,J=12.7Hz,1H),2.82‑2.64(m,2H),2.63‑2.53(m,1H),1.98‑1.78(m,
4H),1.76‑1.62(m,2H),1.57‑1.32(m,6H),1.18(s,9H).
[0270] 实施例38蛋白降解剂Y38的合成
[0271]
[0272] 第一步
[0273] 将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸(5.0g,36.20mmol),苄胺(5.9mL,54.30mmol)溶于90mL二氯甲烷中,加入DIPEA(18.9mL,108.60mmol),HATU(17.9g,47.06mmol),室温搅拌过夜,硅胶柱层析,得到Y38a(淡黄色油状,5.6g,收率68.6%)。
[0274] 第二步
[0275] 将Y38a(5.6g,24.82mmol)溶于62mL乙腈中,加入Boc2O(6.5g,29.8mmol),对二甲氨基吡啶(DMAP,303mg,2.48mmol),室温搅拌过夜,Y38a消耗完全后,抽滤,得到Y38b(3.2g,1
白色固体,收率51.3%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ11.64(s,1H),8.51(dd,J=4.3,1.4Hz,
1H),7.71‑7.59(m,2H),7.37‑7.21(m,5H),5.11(s,2H).
[0276] 第三步
[0277] 将Y38b(300mg,1.18mmol)溶于4mL DMF中,加入1,3‑二溴丙烷(0.7mL,7.11mmol),碳酸钾(327mg,2.37mmol),室温搅拌过夜,加入乙酸乙酯和水,乙酸乙酯层用水洗4遍,饱和氯化钠水溶液洗1遍,无水硫酸钠干燥,硅胶柱层析,得到Y38c(白色固体,392mg,收率1
88.4%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.57(d,J=4.3Hz,1H),8.03(d,J=8.6Hz,1H),7.79(dd,J=8.7,4.4Hz,1H),7.39‑7.22(m,5H),5.16(s,2H),4.22(t,J=7.2Hz,2H),3.67‑3.63(m,2H),2.21‑2.12(m,2H).
[0278] 第四步
[0279] 将Y38c(100mg,0.27mmol)溶于2mL DMF中,加入SNS‑032(91.5mg,0.24mmol),DIPEA(140μL,0.80mmol),60℃搅拌过夜,加入乙酸乙酯和水,乙酸乙酯层用水洗4遍,饱和氯化钠水溶液洗1遍,无水硫酸钠干燥,硅胶柱层析,得到Y38(白色固体,112mg,收率1
63.5%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),8.62‑8.47(m,1H),8.25‑8.03(m,1H),
7.88‑7.67(m,1H),7.49‑7.19(m,6H),6.81‑6.66(m,1H),5.17(s,2H),4.14(t,J=7.2Hz,
2H),4.08‑4.04(m,2H),2.82(d,J=10.9Hz,2H),2.47‑2.38(m,1H),2.38‑2.31(m,2H),
1.89‑1.68(m,6H),1.63‑1.45(m,2H),1.18(s,9H)。
[0280] 实施例39蛋白降解剂Y39的合成
[0281]
[0282] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成4‑氨基吡啶‑3‑羧酸,得到降1
解剂Y39(白色固体,收率27.2%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),9.10(s,1H),
8.73(d,J=5.9Hz,1H),7.58(d,J=6.1Hz,1H),7.47‑7.13(m,6H),6.73(s,1H),5.14(s,
2H),4.17‑4.09(m,2H),4.06(s,2H),2.86‑2.76(m,2H),2.45‑2.30(m,3H),1.89‑1.66(m,
6H),1.59‑1.42(m,2H),1.18(s,9H).
[0283] 实施例40蛋白降解剂Y40的合成
[0284]
[0285] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成3‑氨基异烟酸,得到降解剂1
Y40(白色固体,收率16.9%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.22(s,1H),9.07(s,1H),8.53(d,J=5.0Hz,1H),7.93(d,J=5.0Hz,1H),7.39(s,1H),7.37‑7.22(m,5H),6.73(s,1H),5.16(s,2H),4.24(t,J=7.1Hz,2H),4.06(s,2H),2.82(d,J=10.9Hz,2H),2.46‑2.32(m,3H),
1.89‑1.79(m,4H),1.75‑1.67(m,2H),1.59‑1.45(m,2H),1.18(s,9H).
[0286] 实施例41蛋白降解剂Y41的合成
[0287]
[0288] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成2‑氨基烟酸,得到降解剂Y411
(白色固体,收率23.4%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.20(s,1H),8.77(dd,J=4.8,1.9Hz,
1H),8.43(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.41‑7.22(m,7H),6.72(s,1H),5.15(s,2H),4.32(t,J=
7.2Hz,2H),4.06(s,2H),2.81(d,J=10.9Hz,2H),2.45‑2.29(m,3H),1.89‑1.74(m,4H),
1.72‑1.65(m,2H),1.52‑1.39(m,2H),1.18(s,9H).
[0289] 实施例42蛋白降解剂Y42的合成
[0290]
[0291] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成4‑氨基嘧啶‑5‑羧酸,得到降1
解剂Y42(白色固体,收率7.9%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.20(s,1H),9.22(d,J=
7.1Hz,2H),7.41‑7.36(m,3H),7.34‑7.23(m,3H),6.73(s,1H),5.13(s,2H),4.26(t,J=
7.1Hz,2H),4.06(s,2H),2.79(d,J=10.9Hz,2H),2.44‑2.30(m,3H),1.88‑1.73(m,4H),
1.71‑1.63(m,2H),1.47‑1.33(m,2H),1.18(s,9H).
[0292] 实施例43蛋白降解剂Y43的合成
[0293]
[0294] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成3‑氨基吡嗪‑2‑羧酸,得到降1
解剂Y43(白色固体,收率6.1%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.21(s,1H),8.81(d,J=
2.4Hz,1H),8.64(d,J=2.3Hz,1H),7.42‑7.36(m,3H),7.34‑7.23(m,3H),6.72(s,1H),5.17(s,2H),4.27(t,J=7.2Hz,2H),4.06(s,2H),2.81(d,J=10.9Hz,2H),2.44‑2.30(m,3H),
1.88‑1.76(m,4H),1.72‑1.65(m,2H),1.52‑1.39(m,2H),1.18(s,9H).
[0295] 实施例44蛋白降解剂Y44的合成
[0296]
[0297] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成2‑氨基烟酸,苄胺换成乙胺的1
盐酸盐,得到降解剂Y44(白色固体,收率4.6%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.20(s,1H),
8.75(dd,J=4.8,1.8Hz,1H),8.41(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.38(s,1H),7.35(dd,J=7.7,
4.8Hz,1H),6.73(s,1H),4.32(t,J=7.2Hz,2H),4.06(s,2H),4.00(q,J=7.0Hz,2H),2.84(d,J=10.9Hz,2H),2.46‑2.33(m,3H),1.89‑1.77(m,4H),1.76‑1.65(m,2H),1.54‑1.39(m,
2H),1.23‑1.16(m,12H).
[0298] 实施例45蛋白降解剂Y45的合成
[0299]
[0300] 合成方法参照实施例38,将3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成2‑氨基烟酸,苄胺换成4‑甲氨1
基吡啶,得到降解剂Y45(白色固体,收率6.7%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.20(s,1H),
8.80(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.51‑8.49(m,2H),8.44(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),7.42‑7.37(m,2H),7.35‑7.31(m,2H),6.73(s,1H),5.17(s,2H),4.33(t,J=7.2Hz,2H),4.06(s,2H),
2.83(d,J=11.0Hz,2H),2.47‑2.32(m,3H),1.90‑1.77(m,4H),1.74‑1.67(m,2H),1.55‑
1.42(m,2H),1.19(s,9H).
[0301] 实施例46蛋白降解剂Y46的合成
[0302]
[0303] Y46a的合成参考Y38a,将第一步中3‑氨基吡啶‑2‑羧酸换成2‑氨基烟酸,苄胺换成1
乙胺盐酸盐,得到Y46a(白色固体,收率66.0%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ11.95(s,1H),
8.63(dd,J=4.7,1.9Hz,1H),8.31(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.28(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),
3.93(q,J=7.0Hz,2H),1.16(t,J=7.0Hz,3H).
[0304] 第一步
[0305] 将Y46a(500mg,2.62mmol),1,2‑乙二醇(974mg,15.69mmol),三苯基膦(1.4g,5.23mmol)溶于10mL无水四氢呋喃中,冰浴下滴加DIAD,滴加完毕后升至室温搅拌过夜,硅胶柱层析,得到Y46b和三苯氧磷的混合物。(无色油状,881mg)。
[0306] 第二步
[0307] 将上步所得Y46b溶于12mL二氯甲烷中,冰浴下加入戴斯‑马丁氧化剂(1.44g,1
3.40mmol),0℃搅拌5小时,硅胶柱层析,得到Y46c(白色固体,305mg,收率34.9%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.68(s,1H),8.68(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.45(dd,J=7.8,1.9Hz,
1H),7.39(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),5.12(s,2H),3.99(q,J=7.1Hz,2H),1.18(t,J=7.1Hz,
3H).
[0308] 第三步
[0309] 将Y46c(13mg,0.06mmol),C24a(20mg,0.04mmol)溶于1mL二氯乙烷(DCE)中,加入一滴醋酸,室温搅拌30分钟后加入三乙酰氧基氢化钠(24mg,0.11mmol),室温搅拌30分钟,加入二氯甲烷和水,二氯甲烷层水洗2次,饱和氯化钠水溶液洗1次,无水硫酸钠干燥,硅1
胶柱层析,得到降解剂Y46(白色固体,17mg,收率60.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ
8.67(dd,J=4.7,1.9Hz,1H),8.52‑8.47(m,2H),8.39(s,1H),7.83‑7.75(m,2H),7.72‑7.70(m,1H),7.61(s,1H),7.22(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),6.72(d,J=8.8Hz,1H),6.03(s,1H),
4.96‑4.85(m,1H),4.65(d,J=5.9Hz,2H),4.60(t,J=6.8Hz,2H),4.17(q,J=7.0Hz,2H),
3.62‑3.56(m,4H),2.82(t,J=6.8Hz,2H),2.79‑2.74(m,4H),2.25(s,3H),2.08(s,3H),
1.62(d,J=6.6Hz,6H),1.31(t,J=7.0Hz,3H).
[0310] 实施例47蛋白降解剂Y47的合成
[0311]
[0312] 合成方法参照实施例46,将1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到降解剂Y47(白色固1
体,收率56.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.25(s,1H),8.68‑8.65(m,1H),8.50‑
8.46(m,2H),8.41(s,1H),7.97(t,J=5.9Hz,1H),7.78(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),7.73(s,
1H),7.60(s,1H),7.24‑7.19(m,1H),6.69(d,J=8.9Hz,1H),5.94(s,1H),4.96‑4.83(m,
1H),4.66(d,J=5.8Hz,2H),4.49‑4.42(m,2H),4.23‑4.10(m,2H),3.61‑3.54(m,4H),2.62‑
2.54(m,6H),2.43(s,3H),2.18(s,3H),2.05‑1.98(m,2H),1.61(d,J=6.6Hz,6H),1.32(t,J=7.0Hz,3H).
[0313] 实施例48蛋白降解剂Y48的合成
[0314]
[0315] 合成方法参照实施例46,将1,2‑乙二醇换成1,4‑丁二醇,得到降解剂Y48(白色固1
体,收率33.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.44(s,1H),8.66(dd,J=4.8,2.0Hz,
1H),8.53‑8.46(m,2H),8.42(s,1H),8.00(t,J=5.8Hz,1H),7.79(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),
7.74(d,J=1.3Hz,1H),7.60(s,1H),7.21(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),6.70(d,J=8.9Hz,1H),
5.95(s,1H),4.96‑4.81(m,1H),4.66(d,J=5.8Hz,2H),4.46‑4.35(m,2H),4.21‑4.12(m,
2H),3.66‑3.57(m,4H),2.64‑2.58(m,4H),2.51(t,J=7.6Hz,2H),2.43(s,3H),2.18(s,
3H),1.87‑1.77(m,2H),1.74‑1.63(m,2H),1.60(d,J=6.6Hz,6H),1.31(t,J=7.1Hz,3H).[0316] 实施例49蛋白降解剂Y49的合成
[0317]
[0318] 合成方法参照实施例46,将1,2‑乙二醇换成1,5‑戊二醇,得到降解剂Y49(白色固1
体,收率60.0%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.66(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.51(d,J=2.5Hz,1H),8.48(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),8.40(s,1H),7.84(t,J=6.0Hz,1H),7.80(dd,J=8.9,2.5Hz,1H),7.72(d,J=1.2Hz,1H),7.60(s,1H),7.21(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),6.72(d,J=8.8Hz,1H),6.01(s,1H),4.99‑4.83(m,1H),4.65(d,J=5.8Hz,2H),4.43‑4.29(m,
2H),4.16(q,J=7.0Hz,2H),3.69‑3.61(m,4H),2.69‑2.62(m,4H),2.51‑2.44(m,5H),2.23(s,3H),1.84‑1.74(m,2H),1.72‑1.64(m,2H),1.61(d,J=6.6Hz,6H),1.53‑1.43(m,2H),
1.31(t,J=7.1Hz,3H).
[0319] 实施例50蛋白降解剂Y50的合成
[0320]
[0321] 合成方法参照实施例46,将1,2‑乙二醇换成二乙二醇,得到降解剂Y50(白色固体,1
收率65.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.65(dd,J=4.8,2.0Hz,1H),8.51‑8.46(m,
2H),8.41(s,1H),7.91(t,J=5.9Hz,1H),7.80(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),7.73(d,J=1.2Hz,
1H),7.60(s,1H),7.22(dd,J=7.8,4.7Hz,1H),6.69(d,J=8.9Hz,1H),5.99(s,1H),4.97‑
4.83(m,1H),4.70‑4.56(m,4H),4.16(q,J=7.0Hz,2H),3.84(t,J=5.9Hz,2H),3.73(t,J=
5.4Hz,2H),3.61‑3.55(m,4H),2.66‑2.56(m,6H),2.45(s,3H),2.21(s,3H),1.61(d,J=
6.6Hz,6H),1.30(t,J=7.0Hz,3H).
[0322] 实施例51蛋白降解剂Y51的合成
[0323]
[0324] 合成方法参照实施例46,将Y46a换成7‑氯‑3‑乙基喹唑啉‑2,4(1H,3H)‑二酮,1,2‑1
乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到降解剂Y51(白色固体,收率30.0%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.51(d,J=2.5Hz,1H),8.42(s,1H),8.18(d,J=8.4Hz,1H),7.91(t,J=
6.0Hz,1H),7.81(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),7.74(s,1H),7.61(s,1H),7.47(d,J=1.7Hz,1H),
7.23(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),5.99(s,1H),4.98‑4.81(m,1H),4.67(d,J=5.9Hz,2H),4.23(t,J=7.1Hz,2H),4.16(q,J=7.1Hz,2H),3.75‑3.66(m,4H),2.72‑
2.65(m,4H),2.59(t,J=6.6Hz,2H),2.46(s,3H),2.22(s,3H),2.06‑2.00(m,2H),1.62(d,J=6.6Hz,6H),1.31(t,J=7.0Hz,3H).
[0325] 实施例52蛋白降解剂Y52的合成
[0326]
[0327] 合成方法参照实施例46,将Y46a换成7‑氯‑3‑(吡啶‑4‑基甲基)喹唑啉‑2,4(1H,1
3H)‑二酮,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到降解剂Y52(白色固体,收率34.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.62‑8.55(m,2H),8.51(s,1H),8.43(s,1H),8.20(d,J=8.5Hz,
1H),7.89‑7.77(m,2H),7.71(s,1H),7.61(s,1H),7.51(s,1H),7.40‑7.34(m,2H),6.74(d,J=8.9Hz,1H),5.99(s,1H),5.27(s,2H),4.97‑4.83(m,1H),4.66(d,J=5.8Hz,2H),4.25(t,J=7.1Hz,2H),3.80‑3.65(m,4H),2.79‑2.55(m,6H),2.46(s,3H),2.24(s,3H),2.10‑2.01(m,2H),1.62(d,J=6.6Hz,6H).
[0328] 实施例53蛋白降解剂Y53的合成
[0329]
[0330] 合成方法参照实施例46,将C24a换成SY‑5609a,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到1
降解剂Y53(白色固体,收率70.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.86(d,J=21.9Hz,
1H),8.73‑8.41(m,4H),8.06(d,J=26.7Hz,1H),7.66‑7.41(m,1H),7.23‑7.11(m,1H),
6.48‑6.21(m,1H),4.57‑4.37(m,2H),4.33‑4.23(m,1H),4.20‑4.10(m,2H),2.76‑2.42(m,
4H),2.17‑2.07(m,6H),2.03‑1.56(m,6H),1.35‑1.21(m,5H).
[0331] 实施例54蛋白降解剂Y54的合成
[0332]
[0333] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422a,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到1
降解剂Y54(白色固体,收率72.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.71‑8.62(m,2H),
8.53‑8.46(m,2H),8.29(d,J=8.6Hz,1H),8.24(d,J=2.3Hz,1H),7.89(t,J=1.6Hz,1H),
7.70(dd,J=10.8,1.8Hz,1H),7.56(dd,J=8.7,2.4Hz,1H),7.21(dd,J=7.8,4.7Hz,1H),
4.99‑4.86(m,1H),4.67(s,2H),4.46(t,J=7.3Hz,2H),4.17(q,J=7.0Hz,2H),3.09(d,J=
11.0Hz,2H),2.65‑2.43(m,3H),2.15‑1.97(m,4H),1.88‑1.69(m,4H),1.61(d,J=7.0Hz,
6H),1.31(t,J=7.0Hz,3H).
[0334] 实施例55蛋白降解剂Y55的合成
[0335]
[0336] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422a,1,2‑乙二醇换成1,5‑戊二醇,得到1
降解剂Y55(白色固体,收率60.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.71(s,1H),8.67(dd,J=4.8,2.0Hz,1H),8.51‑8.45(m,2H),8.29(d,J=8.6Hz,1H),8.27(d,J=2.3Hz,1H),
7.89(t,J=1.6Hz,1H),7.70(dd,J=10.8,1.8Hz,1H),7.59(dd,J=8.7,2.4Hz,1H),7.21(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),4.98‑4.87(m,1H),4.67(s,2H),4.42‑4.33(m,2H),4.16(q,J=
7.0Hz,2H),3.14(d,J=11.1Hz,2H),2.60‑2.52(m,1H),2.46(t,J=7.9Hz,2H),2.17‑2.07(m,2H),1.92‑1.75(m,6H),1.72‑1.65(m,2H),1.61(d,J=7.0Hz,6H),1.52‑1.42(m,2H),
1.31(t,J=7.1Hz,3H).
[0337] 实施例56蛋白降解剂Y56的合成
[0338]
[0339] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422a,1,2‑乙二醇换成二乙二醇,得到降1
解剂Y56(白色固体,收率52.8%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.68‑8.61(m,2H),
8.51‑8.44(m,2H),8.29(d,J=8.6Hz,1H),8.24(d,J=2.3Hz,1H),7.90(t,J=1.6Hz,1H),
7.70(dd,J=10.9,1.9Hz,1H),7.56(dd,J=8.6,2.4Hz,1H),7.21(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),
4.99‑4.86(m,1H),4.67(s,2H),4.64(t,J=5.9Hz,2H),4.16(q,J=7.1Hz,2H),3.85(t,J=
5.9Hz,2H),3.73(t,J=5.6Hz,2H),3.07(d,J=11.2Hz,2H),2.62(t,J=5.7Hz,2H),2.53‑
2.43(m,1H),2.16‑2.07(m,2H),1.84‑1.75(m,4H),1.61(d,J=7.0Hz,6H),1.31(t,J=
7.0Hz,3H).
[0340] 实施例57蛋白降解剂Y57的合成
[0341]
[0342] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422a,1,2‑乙二醇换成二缩三乙二醇,得1
到降解剂Y57(白色固体,收率61.8%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.72(s,1H),8.65‑
8.61(m,1H),8.50‑8.43(m,2H),8.29(d,J=8.6Hz,1H),8.26‑8.23(m,1H),7.89(s,1H),
7.74‑7.67(m,1H),7.62‑7.55(m,1H),7.21(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),4.99‑4.86(m,1H),4.67(s,2H),4.62(t,J=6.2Hz,2H),4.15(q,J=7.1Hz,2H),3.85(t,J=6.2Hz,2H),3.77‑3.55(m,6H),3.14(d,J=11.3Hz,2H),2.67(t,J=5.9Hz,2H),2.58‑2.47(m,1H),2.26‑2.17(m,
2H),1.93‑1.78(m,4H),1.61(d,J=7.0Hz,6H),1.30(t,J=7.1Hz,3H).
[0343] 实施例58蛋白降解剂Y58的合成
[0344]
[0345] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422a,1,2‑乙二醇换成1,8‑辛二醇,得到1
降解剂Y58(白色固体,收率61.8%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.76(s,1H),8.66(dd,J=4.7,2.0Hz,1H),8.51‑8.44(m,2H),8.33‑8.25(m,2H),7.89(t,J=1.6Hz,1H),7.70(dd,J=10.8,1.8Hz,1H),7.59(dd,J=8.7,2.4Hz,1H),7.20(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),4.98‑
4.85(m,1H),4.67(s,2H),4.40‑4.29(m,2H),4.16(q,J=7.0Hz,2H),3.17(d,J=11.2Hz,
2H),2.61‑2.50(m,1H),2.49‑2.41(m,2H),2.20‑2.10(m,2H),1.97‑1.84(m,4H),1.79‑1.69(m,2H),1.64‑1.55(m,8H),1.46‑1.24(m,11H).
[0346] 实施例59蛋白降解剂Y59的合成
[0347]
[0348] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422b,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到1
降解剂Y59(白色固体,收率41.1%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.66(dd,J=4.8,
1.9Hz,1H),8.57(s,1H),8.48(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),8.39(d,J=3.8Hz,1H),8.33(d,J=
8.7Hz,1H),8.23(d,J=2.3Hz,1H),7.55(dd,J=8.7,2.4Hz,1H),7.47(s,1H),7.31(dd,J=
11.3,1.8Hz,1H),7.21(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),4.45(t,J=7.3Hz,2H),4.38(t,J=4.4Hz,
2H),4.25‑4.13(m,3H),3.33(t,J=4.4Hz,2H),3.14‑3.03(m,2H),2.62‑2.43(m,3H),2.13‑
1.96(m,4H),1.88‑1.67(m,4H),1.31(t,J=7.0Hz,3H),1.26(d,J=6.5Hz,6H).[0349] 实施例60蛋白降解剂Y60的合成
[0350]
[0351] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422b,1,2‑乙二醇换成1,5‑戊二醇,得到1
降解剂Y60(白色固体,收率64.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.68(dd,J=4.8,
1.9Hz,1H),8.49(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.41‑8.33(m,2H),8.26‑8.08(m,2H),7.61(d,J=
8.7Hz,1H),7.48(s,1H),7.34‑7.30(m,1H),7.22(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),4.44‑4.34(m,
4H),4.28‑4.09(m,3H),3.49‑3.08(m,3H),2.84‑2.18(m,4H),2.06‑1.58(m,8H),1.56‑1.41(m,2H),1.35‑1.25(m,11H).
[0352] 实施例61蛋白降解剂Y61的合成
[0353]
[0354] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422b,1,2‑乙二醇换成二乙二醇,得到降1
解剂Y61(白色固体,收率59.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.70‑8.64(m,1H),8.49(d,J=7.5Hz,1H),8.37(d,J=3.8Hz,1H),8.34(d,J=8.7Hz,1H),8.20‑8.17(m,1H),8.10‑
8.03(m,1H),7.56(d,J=8.9Hz,1H),7.48(s,1H),7.32(d,J=11.7Hz,1H),7.22(dd,J=
7.9,4.8Hz,1H),4.65(t,J=5.9Hz,2H),4.40(t,J=4.4Hz,2H),4.29‑4.09(m,3H),3.86(t,J=5.9Hz,2H),3.82‑3.70(m,1H),3.34(t,J=4.4Hz,2H),3.18‑3.00(m,1H),2.57(d,J=
51.1Hz,2H),2.24‑2.01(m,2H),1.94‑1.59(m,4H),1.36‑1.15(m,12H).
[0355] 实施例62蛋白降解剂Y62的合成
[0356]
[0357] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422b,1,2‑乙二醇换成二缩三乙二醇,得1
到降解剂Y62(白色固体,收率65.2%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.92(s,1H),8.76‑8.72(m,1H),8.62(d,J=3.9Hz,1H),8.40(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),8.20‑8.17(m,1H),8.12(d,J=8.7Hz,1H),7.61(d,J=8.7Hz,1H),7.49(s,1H),7.36(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),7.19(d,J=12.0Hz,1H),4.44(t,J=6.5Hz,2H),4.31(t,J=4.2Hz,2H),4.20‑4.11(m,1H),3.98(q,J=7.4Hz,2H),3.69(t,J=6.5Hz,2H),3.60‑3.54(m,2H),3.52‑3.44(m,4H),3.33‑3.29(m,
2H),2.96(s,1H),2.46(s,1H),2.10‑1.97(m,2H),1.82‑1.56(m,3H),1.23‑1.12(m,13H).[0358] 实施例63蛋白降解剂Y63的合成
[0359]
[0360] 合成方法参照实施例46,将C24a换成NUV‑422b,1,2‑乙二醇换成1,8‑辛二醇,得到1
降解剂Y63(白色固体,收率60.9%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ9.26(s,1H),8.65(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.45(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),8.42(d,J=3.8Hz,1H),8.37‑8.31(m,2H),7.57(dd,J=8.6,2.4Hz,1H),7.44(s,1H),7.32‑7.24(m,1H),7.18(dd,J=7.8,
4.7Hz,1H),4.39‑4.27(m,4H),4.23‑4.07(m,3H),3.34‑3.22(m,4H),2.67‑2.48(m,3H),
2.38‑2.24(m,2H),2.14‑1.99(m,2H),1.95‑1.84(m,2H),1.80‑1.59(m,4H),1.43‑1.32(m,
8H),1.29(t,J=7.1Hz,3H),1.25(d,J=6.5Hz,6H).
[0361] 实施例64蛋白降解剂Y64的合成
[0362]
[0363] 合成方法参照实施例46,将C24a换成SY‑5102,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得到1
降解剂Y64(白色固体,收率79.9%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.64(s,1H),8.80‑
8.53(m,3H),8.45(d,J=7.6Hz,1H),7.83(d,J=33.5Hz,1H),7.27‑7.09(m,2H),6.37(d,J=58.6Hz,1H),4.56‑4.22(m,3H),4.14(q,J=7.0Hz,2H),2.73‑2.23(m,12H),2.02‑1.91(m,2H),1.89‑1.58(m,4H),1.33‑1.22(m,3H).
[0364] 实施例65蛋白降解剂Y65的合成
[0365]
[0366] 合成方法参照实施例46,将C24a换成SY‑5102,1,2‑乙二醇换成1,5‑戊二醇,得到1
降解剂Y65(白色固体,收率55.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ11.13(s,1H),8.76‑
8.53(m,3H),8.46(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.88(d,J=27.1Hz,1H),7.27‑7.15(m,2H),6.15(s,1H),4.41‑4.28(m,3H),4.21‑4.08(m,3H),2.59‑2.53(m,3H),2.46‑2.39(m,3H),1.94‑
1.40(m,11H),1.33‑1.22(m,7H).
[0367] 实施例66蛋白降解剂Y66的合成
[0368]
[0369] 合成方法参照实施例46,将C24a换成SY‑5102,1,2‑乙二醇换成二乙二醇,得到降1
解剂Y66(白色固体,收率6.3%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.36(s,1H),8.79‑8.50(m,3H),8.43(s,1H),7.91(d,J=29.9Hz,1H),7.27‑7.24(m,1H),7.20‑7.12(m,1H),6.15‑
6.05(m,1H),4.66‑4.57(m,2H),4.30‑4.20(m,1H),4.19‑4.06(m,2H),3.89‑3.76(m,2H),
3.74‑3.61(m,2H),2.78‑2.52(m,8H),2.45(s,3H),2.40‑2.32(m,1H),1.84‑1.64(m,3H),
1.62‑1.54(m,1H),1.30‑1.25(m,3H).
[0370] 实施例67蛋白降解剂Y67的合成
[0371]
[0372] 合成方法参照实施例46,将C24a换成SY‑5102,1,2‑乙二醇换成二缩三乙二醇,得1
到降解剂Y67(白色固体,收率41.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.96(s,1H),
8.75‑8.51(m,3H),8.45(d,J=7.9Hz,1H),7.87(d,J=31.6Hz,1H),7.25(d,J=8.0Hz,1H),
7.18(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),6.18(s,1H),4.59(t,J=6.0Hz,2H),4.29(s,1H),4.18‑4.08(m,2H),3.82(t,J=6.2Hz,2H),3.72‑3.65(m,3H),3.62‑3.52(m,3H),2.81‑2.37(m,12H),
1.88‑1.58(m,4H),1.34‑1.22(m,3H).
[0373] 实施例68蛋白降解剂Y68的合成
[0374]
[0375] 合成方法参照实施例46,将C24a换成SY‑5102,1,2‑乙二醇换成1,8‑辛二醇,得到1
降解剂Y68(白色固体,收率31.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ10.99(s,1H),8.77‑
8.53(m,3H),8.47(dd,J=7.8,1.8Hz,1H),7.88(d,J=33.3Hz,1H),7.25(d,J=8.2Hz,1H),
7.19(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),6.12(s,1H),4.33(t,J=7.8Hz,3H),4.16(q,J=7.1Hz,2H),
2.82‑2.28(m,12H),1.88‑1.79(m,2H),1.77‑1.64(m,4H),1.55‑1.44(m,2H),1.42‑1.24(m,
11H).
[0376] 实施例69蛋白降解剂Y69的合成
[0377]
[0378] 第一步
[0379] 氮气保护下向7‑氯‑8‑氟吡啶并[4,3‑d]嘧啶‑2,4(1H,3H)‑二酮(500mg,2.32mmol)中加入N,N‑二异丙基乙胺(1.80mL,11.60mmol),体系冰浴下加入氧氯化磷(4.96mL,53.35mmol),之后置于50℃下反应3h,反应结束后70℃旋尽氧氯化磷,二氯甲烷稀释后,冰水洗一次,旋干,得Y69a(棕色状物,585.56mg,2.32mmol),未进行进一步纯化,直接投下一步。
[0380] 第二步
[0381] _40℃下,向溶于10mL二氯甲烷的Y69a溶液中滴加N,N‑二异丙基乙胺(DIEA,2.71mL,15.54mmol),之后滴加3,8‑二氮杂双环[3.2.1]辛烷‑3‑羧酸叔丁酯(492mg,
2.32mmol)的二氯甲烷溶液,滴加完毕后反应0.5h,TLC监测反应完全,饱和氯化钠水溶液洗
1
涤,无水硫酸钠干燥,柱层析得到Y69b(黄色固体,695mg,两步收率70%,)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.84(s,1H),4.54(d,2H),4.40(d,2H),3.73(m,2H),1.99(d,J=5.9Hz,
2H),1.67(d,J=7.7Hz,2H),1.52(s,9H).
[0382] 第三步
[0383] 向2‑氨基烟酸(10g,72.40mmol)中加入120mL的二氯甲烷,之后加入HATU(35.78g,94.12mmol)和DIEA(31.53mL,180.99mmol),15min后加入乙胺盐酸盐(7.08g,86.88mmol),室温反应16小时,旋干用于投下一步。
[0384] 第四步
[0385] 取上步产物于单口瓶中加入90mL的1,4‑二氧六环,之后加入N,N′‑羰基二咪唑(17.61g,108.60mmol)和DIEA(25.22mL,144.80mmol),120℃回流反应16h,TLC监测反应完全,静置冷却至室温析出晶体,过滤用DCM洗涤,滤饼旋干得到产物Y46a(白色固体,7.20g,1
收率52%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ11.93(s,1H),8.61(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.30(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.27(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),3.91(q,J=7.0Hz,2H),1.14(t,J=
7.0Hz,3H).
[0386] 第五步
[0387] 取Y69c(150mg,784.56μmol)和碳酸钾(110.60mg,800.25μmol)溶于5mL的N,N‑二甲基甲酰胺中,5min后加入2‑溴乙醇(111μL,1.58mmol),室温反应16h后,向体系中加入水和乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯用饱和氯化钠水溶液洗涤,无水硫酸钠干燥,柱层析得到产物1
Y69d(白色固体,103mg,收率56%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.72(dd,J=4.8,2.0Hz,
1H),8.39(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),7.40‑7.28(m,1H),4.79(t,J=6.0Hz,1H),4.34(t,J=
6.7Hz,2H),3.97(q,J=7.0Hz,2H),3.63(q,J=6.5Hz,2H),1.17(t,J=7.0Hz,3H).[0388] 第六步
[0389] 氮气保护下,将Y69d(85.68mg,364.24μmol)溶于5mL干燥的四氢呋喃,之后冰浴下慢慢加入氢化钠(14.57mg,wt60%,364.24μmol),10min后加入5mL的Y69b(130mg,303.53μmol)的四氢呋喃溶液,移至室温反应16h,TLC监测Y69b消耗完全,向反应体系中加水和乙酸乙酯萃取,饱和氯化钠水溶液洗涤,无水硫酸钠干燥,柱层析得到产物Y69e(浅黄色固体,1
109mg,收率57%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.86(s,1H),8.61(dd,J=4.8,1.8Hz,1H),
8.33(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.29(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),4.71(dd,J=13.9,4.9Hz,4H),
4.42(d,J=12.7Hz,2H),4.20(s,2H),3.89(q,J=7.0Hz,2H),3.57(d,J=12.6Hz,2H),1.76(s,2H),1.55(d,J=7.7Hz,2H),1.46(s,9H),1.05(t,J=7.0Hz,3H).
[0390] 第七步
[0391] 氩气保护下,将Y69e溶于3mL甲苯中,加入500μL的水,加入磷酸钾(101mg,478.41μmol)和((2‑氟‑6‑(甲氧基甲氧基)‑8‑(4,4,5,5‑四甲基‑1,3,2‑二氧杂硼硼烷‑2‑基)萘‑1‑基)乙炔基)三异丙基硅烷(90mg,175.42μmol),最后加入甲磺酸(2‑二环己基膦基‑2′,6′‑二异丙氧基‑1,1′‑联苯基)(2‑氨基‑1,1′‑联苯‑2‑基)钯(II))(13.4mg,15.95μmol),换气三次,TLC监测反应,直接旋干,柱层析,得到化合物Y69f(52mg),未进一步分离,直接投下一步。
[0392] 第八步
[0393] 在氮气保护下,将Y69f(52mg)溶于干燥的N,N‑二甲基甲酰胺中,之后加入氟化铯,室温反应1h,TLC监测反应,加入水和乙酸乙酯,萃取三次,乙酸乙酯层用饱和氯化钠水溶液洗涤,无水硫酸钠干燥,旋干有机层,之后在氮气保护下冰浴下向其中加入盐酸二氧六环溶1
液,TLC监测反应,制备分离,得到化合物Y69(黄色固体,8mg)。H NMR(400MHz,Methanol‑d4)δ8.97(s,1H),8.58(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.40(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.85(dd,J=
9.2,5.7Hz,1H),7.35‑7.33(m,1H),7.33‑7.19(m,3H),4.84(s,3H),4.62(d,J=16.6Hz,
2H),4.01(q,J=7.0Hz,2H),3.82(s,2H),3.74(d,J=12.2Hz,2H),3.34(d,J=1.0Hz,1H),
3.33(s,2H),1.89(dd,J=22.0,8.9Hz,4H),1.15(t,J=7.0Hz,3H).
[0394] 实施例70蛋白降解剂Y82的合成
[0395]
[0396] 第一步
[0397] 将Y46a(1.0g,5.23mmol),3‑羟基丙酸甲酯(816.8mg,7.85mmol),三苯基膦(2.7g,10.46mmol)溶于15mL无水四氢呋喃中,冰浴下滴加DIAD(2.0mL,10.46mmol),滴加完毕后升
1
至室温过夜,旋蒸除去四氢呋喃,硅胶柱层析,得到Y82b(白色固体,1.58g,收率100%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.74(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.41(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),7.37(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),4.55‑4.43(m,2H),3.97(q,J=7.0Hz,2H),3.59(s,3H),2.75‑2.64(m,2H),1.17‑1.13(m,3H).
[0398] 第二步
[0399] 将Y82b(1.58g,5.69mmol)溶于10mL甲醇中,加入10mL水,一水合氢氧化锂(716.4mg,17.07mmol),室温搅拌过夜,旋蒸除去甲醇,用1N稀盐酸调pH至4,析出白色固体,
1
抽滤得到Y82c(白色固体,514.1mg,收率34.7%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.75(dd,J=
4.8,1.9Hz,1H),8.40(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.36(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),4.45(dd,J=
8.7,7.0Hz,2H),3.97(q,J=7.0Hz,2H),2.68‑2.55(m,2H),1.17‑1.13(m,3H).[0400] 第三步
[0401] 将KI‑ARV‑03(20.0mg,0.08mmol)溶于1mL二氯甲烷中,加入HATU(44.0mg,0.12mmol),DIPEA(0.04mL,0.23mmol),Y82c(24.4mg,0.09mmol)室温搅拌3小时,硅胶柱层
1
析得到Y82(无色油状,8mg,收率17.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.68(dd,J=
4.8,1.9Hz,1H),8.50(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.95(d,J=2.2Hz,1H),7.25(dd,J=7.8,
4.8Hz,1H),6.45‑6.41(m,2H),6.26(d,J=6.9Hz,1H),5.82(s,1H),4.68(t,J=7.1Hz,2H),
4.50‑4.38(m,1H),4.26‑4.12(m,3H),2.81‑2.68(m,4H),2.45‑2.36(m,1H),2.34‑2.25(m,
1H),2.23‑2.15(m,1H),2.14‑2.04(m,1H),1.88‑1.72(m,3H),1.70‑1.55(m,1H),1.31(t,J=7.1Hz,3H),1.03(t,J=7.4Hz,3H).
[0402] 实施例71蛋白降解剂Y83的合成
[0403]
[0404] 合成方法参考实施例70,将KI‑ARV‑03换成化合物754,得到化合物Y83(白色固体,1
收率79.8%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.07(s,1H),8.75(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.41(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.23(s,1H),7.97(s,1H),7.84(d,J=7.6Hz,1H),7.68(s,1H),
7.43(d,J=7.6Hz,1H),7.36(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),4.49‑4.43(m,2H),4.02‑3.92(m,4H),
3.57‑3.39(m,2H),2.88(s,2H),2.46(t,J=7.5Hz,2H),1.89(s,2H),1.76(s,2H),1.27(s,
6H),1.26‑1.15(m,7H).
[0405] 实施例72蛋白降解剂Y84的合成
[0406]
[0407] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物754,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得1
到化合物Y84(无色油状,收率22.9%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.95(s,1H),8.80‑
8.67(m,1H),8.63(dd,J=4.8,2.0Hz,1H),8.45(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),8.11(s,1H),7.97(s,1H),7.21(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),7.17(s,1H),4.46(t,J=6.6Hz,2H),4.12(q,J=
7.0Hz,2H),3.93(s,2H),3.80‑3.65(m,1H),2.95(t,J=7.2Hz,2H),2.92(s,2H),2.89‑2.81(m,1H),2.29‑2.11(m,6H),1.63‑1.49(m,2H),1.40‑1.29(m,8H),1.27(t,J=7.0Hz,3H).[0408] 实施例73蛋白降解剂Y85的合成
[0409]
[0410] 合成方法参考实施例70,将KI‑ARV‑03换成化合物627,得到化合物Y85(白色固体,1
收率57.3%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.17(s,1H),8.74(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.40(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.27(s,1H),7.82(d,J=7.6Hz,1H),7.52(s,1H),7.44‑7.32(m,
2H),7.22(dd,J=8.4,6.7Hz,1H),7.08(dd,J=11.5,2.4Hz,1H),6.89(td,J=8.4,2.5Hz,
1H),4.45(t,J=7.6Hz,2H),3.98(q,J=7.0Hz,2H),3.77(s,3H),3.58‑3.47(m,1H),3.46‑
3.36(m,1H),2.45(t,J=7.7Hz,2H),1.95‑1.84(m,2H),1.80‑1.66(m,2H),1.28‑1.11(m,
7H).
[0411] 实施例74蛋白降解剂Y86的合成
[0412]
[0413] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物627,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇,得1
到化合物Y86(白色固体,收率20.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.89(s,1H),8.67(dd,J=4.9,1.9Hz,1H),8.50(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.21(s,1H),7.68(s,1H),7.25(dd,J=7.8,4.9Hz,1H),7.13(dd,J=8.3,6.6Hz,1H),6.80‑6.71(m,3H),4.49(t,J=6.6Hz,2H),
4.16(q,J=7.0Hz,2H),3.84‑3.68(m,4H),2.85(t,J=6.7Hz,2H),2.79‑2.68(m,1H),2.22‑
2.09(m,6H),1.46‑1.34(m,4H),1.30(t,J=7.4Hz,3H).
[0414] 实施例75蛋白降解剂Y87的合成
[0415]
[0416] 第一步
[0417] 将2‑氨基烟酸(2.0g,14.48mmol)溶于36mL DCM中,加入HATU(7.2g,18.82mmol)和DIPEA(5.0mL,180.99mmol),15分钟后加入4‑甲氨基吡啶(1.9g,17.38mmol),室温搅拌16小时,TLC监测反应完全。得到Y87a,旋干用于投下一步。
[0418] 第二步
[0419] 取上步产物于单口瓶中,加入36mL 1,4‑二氧六环,之后加入CDI(2.4g,14.50mmol)和DIPEA(2.5mL,14.50mmol),110℃回流反应16小时,TLC监测反应完全。静置冷
1
却至室温析出固体,过滤,滤饼用DCM洗涤,滤饼旋干得到粗品Y87b(白色固体,4.4g)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.14(s,1H),8.66(dd,J=4.8,1.8Hz,1H),8.49(d,2H),8.33(dd,J=7.8,1.9Hz,1H),7.33‑7.29(m,3H),5.10(s,2H).
[0420] 第三步
[0421] 将Y87b(1.0g,3.90mmol)溶于20mL DMF中,依次加入K2CO3(1.1g,7.90mmol)、2,2′‑二溴二乙醚(3.0mL,23.60mmol),室温反应约5小时。反应完全后,加入水和乙酸乙酯,乙酸乙酯层用水洗3次,后用饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥。硅胶柱层析得到化合物Y87c(油1
状液体,67.0mg,收率10.6%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.78(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),
8.50‑8.48(m,2H),8.43(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),7.40(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),7.33‑7.30(m,2H),5.16(s,2H),4.47(t,J=6.3Hz,2H),3.78‑3.72(m,4H),3.49(t,J=5.6Hz,2H).[0422] 第四步
[0423] 将Y87c(136.0mg,0.34mmol)溶于2mL DMF中,加入C24a(168.0mg,0.34mmol)、K2CO3(93.0mg,0.67mmol),60℃反应约4小时。TLC监测反应完全后,硅胶柱层析分离纯化得到蛋1
白降解剂Y87(白色固体,7.0mg,收率2.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.30(s,
1H),8.67(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.56‑8.52(m,2H),8.48(td,J=3.6,1.9Hz,2H),8.40(s,
1H),7.95(t,J=5.8Hz,1H),7.76(dd,J=8.8,2.6Hz,1H),7.71(s,1H),7.58(s,1H),7.36‑
7.33(m,2H),7.23(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),6.65(d,J=8.9Hz,1H),5.91(s,1H),5.24(s,
2H),4.87(p,J=6.6Hz,1H),4.67‑4.60(m,4H),3.82(t,J=5.8Hz,2H),3.69(t,J=5.6Hz,
2H),3.58‑3.51(m,4H),2.60‑2.50(m,6H),2.41(s,3H),2.15(s,3H),1.58(d,J=6.6Hz,
6H).
[0424] 实施例76蛋白降解剂Y88的合成
[0425]
[0426] 合成方法参考实施例75,将2‑氨基烟酸换成4‑氨基嘧啶‑5‑羧酸,4‑甲氨基吡啶换1
成乙胺盐酸盐,得到化合物Y88(白色固体,收率36.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ
9.28(s,1H),9.11(s,1H),8.47(d,J=2.6Hz,1H),8.40(s,1H),8.02(t,J=5.8Hz,1H),7.76(dd,J=8.9,2.6Hz,1H),7.73(s,1H),7.58(s,1H),6.65(d,J=8.9Hz,1H),5.93(s,1H),
4.88(p,J=6.6Hz,1H),4.64(d,J=5.8Hz,2H),4.56(t,J=5.7Hz,2H),4.12(q,J=7.1Hz,
2H),3.82(t,J=5.7Hz,2H),3.69(t,J=5.5Hz,2H),3.55(t,J=5.0Hz,4H),2.59‑2.53(m,
6H),2.41(s,3H),2.15(s,3H),1.59(s,3H),1.57(s,3H),1.28(t,J=7.0Hz,3H).[0427] 实施例77蛋白降解剂Y89的合成
[0428]
[0429] 合成方法参考实施例75,将2‑氨基烟酸换成4‑氨基嘧啶‑5‑羧酸,4‑甲氨基吡啶换1
成苄胺,得到化合物Y89(白色固体,收率28.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ9.31(s,
1H),9.12(s,1H),8.49(d,J=2.5Hz,1H),8.41(s,1H),8.01(t,J=5.8Hz,1H),7.78(dd,J=
8.9,2.6Hz,1H),7.74(d,J=1.3Hz,1H),7.60(s,1H),7.54‑7.51(m,1H),7.51‑7.50(m,1H),
7.35‑7.29(m,3H),6.66(d,J=8.8Hz,1H),5.94(s,1H),5.24(s,2H),4.89(p,J=6.7Hz,
1H),4.66(d,J=5.8Hz,2H),4.58(t,J=5.7Hz,2H),3.82(t,J=5.7Hz,2H),3.68(t,J=
5.6Hz,2H),3.57‑3.52(m,4H),2.56‑2.50(m,6H),2.43(s,3H),2.16(s,3H),1.61(s,3H),
1.59(s,3H).
[0430] 实施例78蛋白降解剂Y90的合成
[0431]
[0432] 合成方法参考实施例46,将乙二醇换成二乙二醇,C24a换成EPZ6438a,得到化合物1
Y90(白色固体,收率60.1%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.62(dd,J=4.8,1.9Hz,
1H),8.44(dd,J=7.8,2.0Hz,1H),7.48‑7.42(m,2H),7.32(d,J=7.9Hz,3H),7.29(d,J=
1.8Hz,1H),7.22‑7.15(m,2H),5.91(s,1H),4.60(t,J=5.9Hz,2H),4.56(d,J=5.8Hz,2H),
4.13(q,J=7.1Hz,2H),3.98‑3.92(m,2H),3.80(t,J=5.9Hz,2H),3.66(t,J=5.6Hz,2H),
3.52(s,2H),3.32(td,J=11.3,3.1Hz,2H),3.10(q,J=7.0Hz,2H),3.06‑2.98(m,1H),
2.57‑2.46(m,8H),2.40(s,3H),2.35(s,3H),2.12(s,3H),1.76‑1.63(m,4H),1.34‑1.20(m,
5H),0.90(t,J=6.9Hz,3H).
[0433] 实施例79蛋白降解剂Y91的合成
[0434]
[0435] 合成方法参考实施例46,将乙二醇换成1,5‑戊二醇,C24a换成EPZ6438a,得到化合1
物Y91(白色固体,收率60.0%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.57(s,1H),8.63(dd,J=4.8,2.0Hz,1H),8.44(dd,J=7.7,2.0Hz,1H),7.46‑7.40(m,2H),7.33‑7.29(m,3H),7.28(d,1H),7.22(t,J=5.8Hz,1H),7.18(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),5.89(s,1H),4.54(d,J=
5.8Hz,2H),4.36‑4.28(m,2H),4.17‑4.11(m,2H),3.96‑3.90(m,2H),3.52(s,2H),3.35‑
3.26(m,2H),3.08(q,J=7.0Hz,2H),3.04‑2.95(m,1H),2.54(s,6H),2.46‑2.39(m,2H),
2.38(s,3H),2.33(s,3H),2.09(s,3H),1.78‑1.55(m,8H),1.45‑1.36(m,2H),1.30‑1.23(m,
5H),0.88(t,J=6.9Hz,3H).
[0436] 实施例80蛋白降解剂Y92的合成
[0437]
[0438] 合成方法参考实施例46,将乙二醇换成1,4‑丁二醇,C24a换成EPZ6438a,得到化合1
物Y92(白色固体,收率63.6%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.66(s,1H),8.62(dd,J=4.7,1.9Hz,1H),8.44(dd,J=7.8,2.0Hz,1H),7.42(d,J=8.2Hz,2H),7.33‑7.29(m,3H),
7.28‑7.26(m,1H),7.21(t,J=5.8Hz,1H),7.17(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),5.89(s,1H),4.55(d,J=5.8Hz,2H),4.38‑4.31(m,2H),4.12(t,J=6.9Hz,2H),3.97‑3.90(m,2H),3.50(s,
2H),3.30(td,J=11.3,3.0Hz,2H),3.09(q,J=7.0Hz,2H),3.04‑2.96(m,1H),2.49(s,6H),
2.41(d,J=7.7Hz,2H),2.38(s,3H),2.33(s,3H),2.09(s,3H),1.78‑1.55(m,8H),1.28‑
1.26(m,2H),1.25(s,3H),0.88(t,J=6.9Hz,3H).
[0439] 实施例81蛋白降解剂Y93的合成
[0440]
[0441] 合成方法参考实施例46,将乙二醇换成1,3‑丙二醇,C24a换成EPZ6438a,得到化合1
物Y93(白色固体,收率59.2%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.62(dd,J=4.7,2.0Hz,
1H),8.45(dd,J=7.7,2.0Hz,1H),7.44(d,J=8.0Hz,2H),7.36‑7.31(m,3H),7.29(d,J=
2.1Hz,1H),7.20‑7.16(m,2H),5.90(s,1H),4.56(d,J=5.8Hz,2H),4.41(t,J=7.3Hz,2H),
4.14(q,J=7.1Hz,2H),3.98‑3.92(m,2H),3.53(s,2H),3.32(td,J=11.2,3.0Hz,2H),3.10(q,J=7.0Hz,2H),3.05‑2.97(m,1H),2.60‑2.45(m,8H),2.40(s,3H),2.35(s,3H),2.11(s,
3H),1.97(p,J=7.2Hz,2H),1.75‑1.64(m,4H),1.32‑1.24(m,5H),0.89(t,J=6.9Hz,3H).[0442] 实施例82蛋白降解剂Y94的合成
[0443]
[0444] 合成方法参考实施例46,C24a换成EPZ6438a,得到化合物Y94(白色固体,收率1
71.9%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ12.66(s,1H),8.61(dd,J=4.8,2.0Hz,1H),8.44(dd,J=7.8,2.0Hz,1H),7.43(d,J=8.2Hz,2H),7.34‑7.30(m,3H),7.28(d,1H),7.23(t,J=5.8Hz,1H),7.18(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),5.90(s,1H),4.55(d,J=5.8Hz,2H),4.50(t,J=7.0Hz,2H),4.13(q,J=7.0Hz,2H),3.96‑3.90(m,2H),3.51(s,2H),3.31(td,J=11.3,
3.0Hz,2H),3.09(q,J=7.0Hz,2H),3.04‑2.96(m,1H),2.70(t,J=7.0Hz,2H),2.63(s,4H),
2.47(s,4H),2.39(s,3H),2.34(s,3H),2.09(s,3H),1.72‑1.60(m,4H),1.28(t,J=7.0Hz,
3H),0.89(t,J=7.0Hz,3H).
[0445] 实施例83蛋白降解剂Y95的合成
[0446]
[0447] 将Y46a(300.0mg,1.57mmol),4‑羟基环己甲酸甲酯(496.5mg,3.14mmol),三苯基膦(823.1mg,3.14mmol)溶于4mL四氢呋喃中,氮气保护,0℃下滴加DIAD(0.6mL,3.14mmol),滴加完毕后室温过夜,旋蒸除去四氢呋喃,硅胶柱层析,得到Y95a(白色固体,455.4mg,收率87.6%)。
[0448] 将Y95a(455.4mg,1.37mmol)溶于2.5mL甲醇和2.5mL水中,加入氢氧化锂(173.0mg,4.12mmol),室温条件下搅拌过夜,旋蒸除去有机溶剂,加入水,溶清后,用1N盐酸
1
调pH至4~5,析出白色固体,抽滤得到Y95b(白色固体,315.6mg,收率72.4%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ12.19(s,1H),8.83‑8.65(m,1H),8.52‑8.24(m,1H),7.48‑7.24(m,1H),
5.48‑5.17(m,1H),4.05‑3.85(m,2H),2.69‑2.54(m,2H),2.27‑1.99(m,2H),1.80‑1.41(m,
4H),1.21‑1.08(m,3H).
[0449] 将Y95b(50.0mg,0.16mmol),化合物754(63.5mg,0.16mmol),HATU(71.9mg,0.19mmol)和DIPEA(0.04mL,0.24mmol)溶于1mL二氯甲烷中,室温搅拌过夜,硅胶柱层析,得
1
到Y95(白色固体,57.0mg,收率51.5%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.71‑8.57(m,
2H),8.51‑8.43(m,1H),8.34‑8.14(m,2H),7.97(s,1H),7.25‑7.14(m,1H),7.04‑6.90(m,
1H),5.79‑5.51(m,1H),4.19‑4.09(m,2H),4.05‑3.94(m,3H),3.87‑3.67(m,1H),3.25‑3.12(m,1H),3.01‑2.81(m,3H),2.22‑2.12(m,2H),1.88‑1.60(m,6H),1.53‑1.37(m,8H),1.35(s,6H),1.32‑1.26(m,3H).
[0450] 实施例84蛋白降解剂Y96的合成
[0451]
[0452] 合成方法参考实施例83,4‑羟基环己甲酸甲酯换成顺式‑3‑羟基环丁基羧酸甲酯,1
得到化合物Y96(白色固体,收率72.5%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.09(s,1H),8.74(d,J=4.7Hz,1H),8.39(d,J=7.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.97(s,1H),7.76(d,J=7.7Hz,1H),
7.67(s,1H),7.53‑7.44(m,1H),7.41‑7.30(m,1H),6.23‑6.09(m,1H),4.04‑3.89(m,4H),
3.67‑3.44(m,2H),3.21‑3.05(m,3H),2.88(s,2H),2.36(t,J=10.1Hz,2H),2.00‑1.78(m,
4H),1.34‑1.22(m,10H),1.18(t,J=7.0Hz,3H).
[0453] 实施例85蛋白降解剂Y97的合成
[0454]
[0455] 合成方法参考实施例83,4‑羟基环己甲酸甲酯换成反式‑3‑羟基环丁基羧酸甲酯,1
得到化合物Y97(白色固体,收率63.7%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.08(s,1H),8.69(dd,J=4.7,1.9Hz,1H),8.38(dd,J=7.7,2.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.96(s,1H),7.67(s,1H),
7.63(d,J=7.8Hz,1H),7.45(d,J=7.6Hz,1H),7.34(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),5.39‑5.25(m,
1H),4.01‑3.90(m,4H),3.64‑3.42(m,2H),3.01‑2.84(m,4H),2.79‑2.66(m,1H),2.00‑1.73(m,4H),1.33‑1.22(m,10H),1.17(t,J=7.0Hz,3H).
[0456] 实施例86蛋白降解剂Y98的合成
[0457]
[0458] 合成方法参考实施例83,将Y46a换成Y15a,4‑羟基环己甲酸甲酯换成顺式‑3‑羟基1
环丁基羧酸甲酯,得到化合物Y98(白色固体,收率82.9%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.09(s,1H),8.24(s,1H),8.03(d,J=8.5Hz,1H),7.97(s,1H),7.83(d,J=7.7Hz,1H),7.67(s,
1H),7.52(d,J=2.0Hz,1H),7.47(d,J=7.7Hz,1H),7.39(dd,J=8.4,2.0Hz,1H),5.53‑
5.43(m,1H),4.09‑4.00(m,2H),3.95(s,2H),3.70‑3.44(m,3H),3.20‑2.97(m,2H),2.89(s,
2H),2.62‑2.53(m,2H),2.46‑2.36(m,2H),1.98‑1.89(m,2H),1.87‑1.80(m,2H),1.32‑1.18(m,11H).
[0459] 实施例87蛋白降解剂Y99的合成
[0460]
[0461] 合成方法参考实施例83,将Y46a换成Y37a,4‑羟基环己甲酸甲酯换成顺式‑3‑羟基1
环丁基羧酸甲酯,得到化合物Y99(白色固体,收率76.1%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.09(s,1H),8.57‑8.50(m,2H),8.23(s,1H),8.07(d,J=8.5Hz,1H),7.97(s,1H),7.78(d,J=
7.8Hz,1H),7.67(s,1H),7.57(d,J=2.1Hz,1H),7.47(d,J=8.2Hz,1H),7.43(dd,J=8.5,
2.1Hz,1H),7.32‑7.27(m,2H),5.49‑5.38(m,1H),5.23(s,2H),3.94(s,2H),3.66‑3.42(m,
2H),2.96‑2.82(m,3H),2.50‑2.45(m,2H),2.29‑2.18(m,2H),1.97‑1.88(m,2H),1.85‑1.76(m,2H),1.33‑1.17(m,10H).
[0462] 实施例88蛋白降解剂Y100的合成
[0463]
[0464] 合成方法参考实施例46,将化合物C24a换成化合物754,1,2‑乙二醇换成4‑羟基环己酮,省略实施例46的第二步,即羟基转化为基的步骤,得到化合物Y100(白色固体,收率1
6.1%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.69‑8.57(m,1H),8.52‑8.41(m,1H),8.15(s,
1H),8.06(s,1H),7.49‑7.33(m,1H),7.24‑7.15(m,1H),5.79‑5.36(m,1H),4.17‑4.07(m,
2H),3.96(s,2H),3.88‑3.74(m,1H),3.31‑3.14(m,1H),3.03(s,2H),2.87‑2.69(m,1H),
2.50‑2.17(m,6H),2.06‑1.62(m,8H),1.49‑1.39(m,2H),1.36(s,6H),1.32‑1.24(m,3H).[0465] 实施例89蛋白降解剂Y101的合成
[0466]
[0467] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物754,1,2‑乙二醇换成4‑羟甲基环己酮,省略实施例46的第二步,即羟基转化为醛基的步骤,得到化合物Y101(白色固体,收率1
34.8%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.12(d,J=2.6Hz,1H),8.73(d,J=4.8Hz,1H),8.41(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.21(d,J=2.1Hz,1H),7.97(s,1H),7.70(d,J=2.6Hz,1H),7.54‑
7.46(m,1H),7.40‑7.31(m,1H),4.28(d,J=7.2Hz,1H),4.14(d,J=7.1Hz,1H),4.05‑3.96(m,2H),3.96(s,2H),3.54‑3.42(m,2H),3.18‑2.98(m,2H),2.88(s,2H),2.19‑1.67(m,
10H),1.65‑1.55(m,1H),1.52‑1.36(m,3H),1.34‑1.22(m,8H),1.17(t,J=7.0Hz,3H).[0468] 实施例90蛋白降解剂Y102的合成
[0469]
[0470] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物754,1,2‑乙二醇换成3‑(羟甲基)环丁‑1‑酮,省略实施例46的第二步,即羟基转化为醛基的步骤,得到化合物Y102(白色固体,1
收率19.3%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.95‑8.72(m,1H),8.67‑8.59(m,1H),8.52‑
8.43(m,1H),8.16(d,J=3.5Hz,1H),8.00(d,J=4.4Hz,1H),7.25‑7.14(m,1H),7.09‑6.90(m,1H),4.54(d,J=8.0Hz,1H),4.45(d,J=6.3Hz,1H),4.21‑4.09(m,2H),3.97(s,2H),
3.81‑3.67(m,1H),3.40‑3.24(m,1H),2.93(s,2H),2.83‑2.63(m,1H),2.55‑2.39(m,2H),
2.30‑2.07(m,7H),1.71‑1.43(m,3H),1.41‑1.22(m,12H).
[0471] 实施例91蛋白降解剂Y103的合成
[0472]
[0473] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物754,1,2‑乙二醇换成二乙二醇得到化1
合物Y103(白色固体,收率43.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.95(s,1H),8.76‑
8.66(m,1H),8.63(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.46(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.13(s,1H),7.96(s,1H),7.21(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),7.11(s,1H),4.59(t,J=5.8Hz,2H),4.13(q,J=
7.0Hz,2H),3.94(s,2H),3.83(t,J=5.8Hz,2H),3.76(t,J=5.0Hz,2H),3.73‑3.67(m,1H),
2.95‑2.88(m,4H),2.75‑2.65(m,1H),2.19‑2.02(m,4H),1.48‑1.21(m,13H).[0474] 实施例92蛋白降解剂Y104的合成
[0475]
[0476] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物754得到化合物Y104(白色固体,收率1
68.6%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.13(s,1H),8.75(d,J=4.6Hz,1H),8.45(d,J=7.7Hz,
1H),8.22(s,1H),7.96(s,1H),7.66(s,1H),7.54(s,1H),7.45‑7.34(m,1H),4.55‑4.40(m,
2H),4.04‑3.96(m,2H),3.94(s,2H),3.20‑2.95(m,4H),2.88(s,2H),2.07‑1.88(m,4H),
1.34‑1.12(m,13H).
[0477] 实施例93蛋白降解剂Y105的合成
[0478]
[0479] 第一步
[0480] 将Y46a(1.0g,5.23mmol),顺_4‑(BOc‑氨基)环己醇(1.4g,6.28mmol),三苯基膦(2.7g,10.46mmol)溶于13mL无水四氢呋喃中,冰浴下滴加DIAD(2mL,10.46mmol),滴加完毕1
后,室温过夜,旋蒸除去有机溶剂,硅胶柱层析,得到Y105a粗品(白色固体,2.7g)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.75(dd,J=4.7,2.0Hz,1H),8.40(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),7.35(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),6.79(d,J=8.1Hz,1H),5.37‑5.21(m,1H),4.93‑4.85(m,1H),3.96(q,J=7.0Hz,2H),2.64‑2.53(m,2H),1.89(d,J=12.5Hz,2H),1.66(d,J=12.3Hz,2H),1.40(s,
9H),1.36‑1.29(m,2H),1.24‑1.21(m,3H).
[0481] 第二步
[0482] 将Y105a(2.7g,7.04mmol)溶于18mL二氯甲烷中,加入8.8mL 4M HCl乙酸乙酯溶1
液,室温搅拌过夜,得到Y105b(白色固体,428.3mg)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.74(dd,J=
4.7,2.0Hz,1H),8.40(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),7.35(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),5.41‑5.22(m,
1H),3.96(q,J=7.0Hz,2H),2.69‑2.53(m,3H),1.95‑1.80(m,2H),1.71‑1.55(m,2H),1.24‑
1.18(m,2H),1.16(t,J=7.1Hz,3H).
[0483] 第三步
[0484] 将5‑氯_4‑碘吡啶‑2‑胺(375.0mg,1.47mmol)溶于无水二氯甲烷中,冰浴下滴加三光气(148.7mg,0.50mmol)的二氯甲烷溶液,滴加三乙胺(0.4mL,2.95mmol),室温反应至原料消耗完全。旋干溶剂,加入甲苯,Y105b(425.0mg,1.47mmol),三乙胺(0.4mL,2.95mmol),100℃反应4小时,加水,乙酸乙酯萃取,旋干,硅胶柱层析,得到Y105c(白色固体,550.0mg,
1
收率65.6%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ10.15(s,1H),9.18(s,1H),8.76(dd,J=4.7,
2.0Hz,1H),8.41(dd,J=7.7,2.0Hz,1H),8.31(s,1H),8.26(s,1H),7.36(dd,J=7.7,
4.8Hz,1H),5.49‑5.26(m,1H),3.97(q,J=6.9Hz,2H),3.62‑3.48(m,1H),2.74‑2.57(m,
2H),2.09‑1.99(m,2H),1.76‑1.67(m,2H),1.47‑1.30(m,2H),1.25‑1.10(m,3H).[0485] 第四步
[0486] 将Y105c(200.0mg,0.35mmol),5,5‑二甲基‑3‑(4,4,5,5‑四甲基‑1,3,2‑二氧硼杂环戊烷‑2‑基)‑5,6‑二氢_4H‑吡咯并[1,2_b]吡唑(110.6mg,0.42mmol),Pd(dppf)Cl2(14.4mg,0.02mmol),碳酸钾(721.5mg,0.88mmol)溶于2mL二氧六环和2mL水中,60℃搅拌过夜,反应完毕后,往反应体系中加水,乙酸乙酯萃取,硅胶柱层析,得到Y105(白色固体,1
46.7mg,收率23.0%)。H NMR(400MHz,DMSO‑d6)δ9.12(s,1H),8.76(dd,J=4.8,2.0Hz,1H),
8.41(dd,J=7.7,2.0Hz,1H),8.24(s,1H),7.98(s,1H),7.70(s,1H),7.51(d,J=7.5Hz,
1H),7.36(dd,J=7.7,4.7Hz,1H),5.45‑5.26(m,1H),4.04‑3.90(m,4H),3.67‑3.54(m,1H),
2.90(s,2H),2.76‑2.61(m,2H),2.08‑2.01(m,2H),1.77‑1.67(m,2H),1.46‑1.33(m,2H),
1.28(s,6H),1.17(t,J=7.0Hz,3H).
[0487] 实施例94蛋白降解剂Y106的合成
[0488]
[0489] 合成方法参考实施例46,将C24a换成化合物754a,1,2‑乙二醇换成1,3‑丙二醇得1
到化合物Y106(白色固体,收率35.7%)。H NMR(400MHz,Chloroform‑d)δ8.83(s,1H),8.65(dd,J=4.8,1.9Hz,1H),8.46(dd,J=7.7,1.9Hz,1H),8.24(s,1H),8.02(s,1H),7.21(dd,J=7.7,4.8Hz,1H),4.49(t,J=6.5Hz,2H),4.17‑4.07(m,3H),3.96(s,2H),3.00‑2.91(m,
4H),2.90‑2.83(m,1H),2.31‑2.21(m,2H),2.01‑1.90(m,2H),1.84‑1.71(m,2H),1.69‑1.54(m,2H),1.34(s,6H),1.29‑1.25(m,5H).
[0490] 生物活性测试例
[0491] 测试例1:细胞IC50测定
[0492] 在96孔板的每个孔中,用100μl含不同浓度(最高浓度为10μM,3倍稀释,共8个梯度浓度)的本发明化合物或阳性对照药物的新鲜培养基接种10000个WSU‑DLCL2细胞(人弥漫大B淋巴瘤细胞)。细胞与化合物孵育72小时后,每孔加入10μL Cell Counting Kit‑8(CCK8,购自李记生物),37℃孵育2h后,用SpectraMAX190(Molecular Devices)在450nm处测量各孔的吸光度,用SoftMax Pro计算IC50值。结果见表1。
[0493] 阳性对照化合物采用SNS‑032和THAL‑SNS‑032,结构如下。
[0494]
[0495] 表1化合物对WSU‑DLCL2细胞的抑制活性
[0496] 化合物 IC50(nM) 化合物 IC50(nM) 化合物 IC50(nM)Y1 511 Y2 230 Y3 425
Y4 1122 Y5 3187 Y6 287
Y7 1169 Y8 404 Y9 886
Y10 126 Y11 127 Y12 85
Y13 107 Y14 407 Y15 273
Y16 1875 Y17 131 Y18 1477
Y19 164 Y22 438 Y23 506
Y24 660 Y25 144 Y26 401
Y27 308 Y28 292 Y29 455
Y30 433 Y31 389 Y32 131
Y33 <4 Y34 102 Y35 <4
Y36 1685 Y37 >10000 Y38 15
Y39 55 Y40 55 Y41 188
Y45 13 SNS‑032 285 THAL‑SNS‑032 <5
[0497] 测试例2:Western Blot实验
[0498] CDK可以和cyclin(细胞周期蛋白)结合形成异二聚体,其中CDK为催化亚基,cyclin为调节亚基,不同的cyclin‑CDK复合物,通过CDK活性,催化不同底物磷酸化,而实现对细胞周期不同时相的推进和转化作用。
[0499] 多梳抑制性复合体2(Polycomb repressive complex 2,PRC2)是组蛋白甲基转移酶复合体,包括EZH2(或EZH1)、EED和SUZ12三个核心亚基。PRC2的失调与血液系统及实体肿瘤的发生、进展及不良预后相关。通常认为EZH2是PRC2复合物主要催化亚单元,通过其SET结构域催化组蛋白H3赖氨酸27的三甲基化修饰(H3K27me3),从而来保持下游靶基因的沉默状态。EZH2在多种癌症中存在过表达或者功能获得性突变,EZH2抑制剂在癌症治疗方面的作用已在临床上得到验证。
[0500] 上述蛋白和Ras蛋白均可作为肿瘤治疗的靶点。因此,本测试例研究了本发明的降解剂对CDK9、CDK2、CDK2/4/6、CDK5、CDK7、EZH2、EED、SUZ12、EZH1、Ras及其相关蛋白的降解效果。具体方法如下:
[0501] 适量WSU‑DLCL2细胞、U‑2932细胞或GP2D细胞(人结肠癌细胞)种板于6孔板,加药处理(药物以及药物浓度见对应图1‑7)后离心收集细胞以备后续试验,根据细胞的量加入相应量的1X上样缓冲液(成分:50mM Tris‑HCI(pH6.8),2%(W/V)SDS,0.1%(W/V)BPB(溴酚兰),10%(V/V)甘油,0.1M β‑疏基乙醇),裂解后100℃煮样20min。吸取相同体积的样品,进行SDS‑PAGE电泳,电泳结束后,利用金斯瑞快转仪将凝胶上的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上,根据蛋白的大小剪下相应的条带,用含有5%脱脂奶粉的TBST封闭1h,4℃孵育一抗过夜。用TBST洗脱多余一抗,每次十分钟共三次,在室温下孵育二抗1h,再用TBST洗脱多余二抗,每次十分钟共三次。最后利用Bio‑Rad发色仪对条带进行发色和拍照。
[0502] 结果见图1、图2的B、图3、图4、图7(WSU‑DLCL2细胞),以及,图5的A(WSU‑DLCL2细胞)和B(U‑2932细胞),图6(GP2D细胞)。
[0503] CDK9主要参与转录调控过程,由CDK9和cyclin(T1、T2a、T2b、K)组成的异源二聚体参与组成正性转录延长因子(P‑TEFb)。CDK9有2种亚型(CDK9 42和CDK9 55),约有80%的CDK9与cyclinT1结合。图1中A显示,化合物Y44、Y45、Y41、Y35、Y33可以在100nM浓度下降解CDK9的两个亚型,即CDK9 55和CDK9 42,也可以降解cyclin T1,并且下调CDK9下游蛋白Mcl‑1的水平。而CDK9抑制剂SNS‑032不具有蛋白降解的作用,阳性对照THAL‑SNS‑032可以降解CDK9,但是不能降解cyclin T1以及下调Mcl‑1的水平。图1中B显示,在1μM浓度下,化合物Y1‑Y5可以有效降解CDK9和cyclin T1,下调Mcl‑1水平。
[0504] 图2中B显示,在100nM浓度下,化合物Y35可以有效诱导CDK9和cyclin T1的降解,下调CDK9下游蛋白Mcl‑1的水平;而用Y35和自噬抑制剂巴弗洛霉素A1(BafA1)共同处理细胞时,可以导致Y35对CDK9和cyclin T1的降解作用消失。
[0505] 图3显示在100nM浓度下,化合物Y44、Y82‑Y86可以降解CDK9,其中Y44、Y83和Y84还可以在降解CDK9的同时降解cyclin T1,下调Mcl‑1的水平。
[0506] 图4中A显示,与CDK2抑制剂SY‑5609a相比,降解剂Y53可以有效降解CDK2。图4中B显示,化合物Y67可以在10μM浓度下降解CDK7和cyclin H的水平。图4中C显示化合物Y62可以在10μM浓度下降解CDK2和CDK6及其相应的cyclinA2/E1/D1。图4中D显示化合物Y59‑Y61可以在10μM浓度下降解CDK2/4/6及其相应的cyclinA2/E1/D1。
[0507] 图5中A显示,化合物Y47和Y50可以降解EZH2、EED、SUZ12、EZH1,效应强于阳性对照MS177(CAS号:2225938‑86‑1,EZH2小分子降解剂),EZH2抑制剂C24没有显示降解作用。图5中B显示,在10μM浓度下,Y50、Y87‑Y89可以有效降解EZH2、EED、SUZ12、EZH1,效应强于阳性对照MS177。
[0508] 图6显示化合物Y69可以在10μM浓度下降解Ras,下调pERK的水平。
[0509] 图7中A显示,在100nM浓度下,化合物Y83、Y95、Y96可以有效诱导CDK2、cyclin A2、cyclin E1、CDK5、CDK6、cyclin D1、CDK7、CDK9和cyclin T1中多个蛋白的降解。图7中B显示,在100nM浓度下,化合物Y84、Y100‑Y106可以有效诱导CDK2、cyclin A2、cyclin E1、CDK4、CDK5、CDK6、cyclin D1、CDK7、CDK9和cyclin T1中多个蛋白的降解。
[0510] 测试例3:Co‑Immunoprecipitates实验
[0511] 用化合物处理后,将WSU‑DLCL2细胞与补充有磷酸酶抑制剂(购自Roche,货号:4906845001)和蛋白酶抑制剂混合物(购自Roche,货号:04693132001)的NP‑40(购自Beyotime,货号:P0013F)在冰上裂解1小时,并在4℃下以12000g离心10分钟。使用BCA蛋白分析试剂盒(Thermo Scientific,23225)测量上清液中蛋白浓度,并将等量的蛋白质与一抗(Normal Rabbit IgG(购自Cell Signaling Technology,货号:2729),CDK9兔mAb(购自Abclonal,货号:A11145)在4℃下过夜,然后加入蛋白质A/G磁珠(购自Thermo Scientific,货号:88803)并在4℃下再孵育4小时。免疫沉淀用NP‑40和PBS各洗涤3次,然后用SDS‑PAGE上样缓冲液煮沸并进行免疫印迹。
[0512] 结果见图2的A。在1μM浓度下,Y2和Y3可以增加CDK9和LC3B的相互作用。
[0513] 图2中A和B共同证明了这类化合物LC3B依赖的自噬‑溶酶体降解通路。
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