本发明涉及一种从苦参中制备可用于医药原料的苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱的生产工艺。

苦参是一种常用中草药，历代本草著作中多有记述，系豆科槐属植物苦参(Sophora flavscens Alt.)的干燥根，具有清热、除湿、杀虫、利尿等作用；我国广泛分布，资源丰富，苦参中所含生物碱成份被认为是其中的主要生物活性成份，目前已从苦参中分离鉴定了十七种生物碱成份，主要为：槐果碱(Sophocarpine)，苦参碱(matrine)，槐定碱(sophoridine)，氧化苦参碱(oxymatrine)，氧化槐果碱(oxysophcarpine)，这五中生物碱占总生物碱的90％以上，药理实验和临床应用证明，苦参及其制剂可治疗急性菌痢、滴虫病、支气管哮喘及喘息型支气管炎、水肿及腹水、治疗皮肤病、心率失常和病毒性心肌炎、催眠和治疗躁狂症，特别是氧化苦参碱可以治疗肿瘤放疗、化疗引起的白细胞低下及其它原因引起的白细胞减少症，慢性乙肝和丙肝，在应用于临床时，要求氧化苦参碱原料药纯度在98％以上；槐定碱对多种动物移植瘤有抗癌活性，临床对绒癌恶性葡萄胎、肺癌、消化道癌抗癌作用明显而稳定，是一种很有价值的抗癌新药。
目前大多从苦豆子中提取苦参碱、氧化苦参碱或槐定碱，从苦参中提取苦参碱、氧化苦参碱或槐定碱的文献报道不多，且都是从苦参中一次只能提取一种生物碱，例如CN1073681A，公开日为1993年6月30日，报道了用冷冻真空法从苦参中提取苦参碱的方法，从苦参中一次提取苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱的文献报道至今未发现，且传统的制备工艺，程序复杂，成本高，难以形成工业化规模生产，也不能达到98％以上的纯度，极大的妨碍了苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱在制药和临床上的应用。

本发明的目的是提供一种从苦参中同时制备苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱的新工艺，且工艺简单、成本低、提纯度高。
本发明是通过以下方案实现的：从苦参中提取总生物碱是根据植物中所含生物碱与酸成盐后极易溶于水的原理，将粉碎的苦参用稀硫酸润湿，使其中的生物碱成盐，再用足量水将成盐后的生物碱提取出来，将水蒸发掉，使总生物碱成膏状；再根据总生物碱在游离状态下易溶于有机溶剂，难溶于水的原理，将总生物碱用氢氧化钠碱化，使生物碱成为游离状态，再将其中的氧化苦参碱和氧化槐果碱还原成苦参碱和槐果碱，通过有机溶剂萃取，使生物碱转移到有机相，然后用酸进行反萃取，使生物碱从有机相转入水相中，并以盐的形式存在；用碱游离出生物碱时，苦参碱首先结晶出来；母液经过分离还可得到苦参碱、槐定碱；经重结晶，得苦参碱和槐定碱产品；苦参碱经过氧化后，可生成氧化苦参碱。因此过量的苦参碱与过氧化氢进行氧化反应，即可得到氧化苦参碱，而且使过氧化氢全部转化成水，物料中不带入其它杂质；再减压浓缩除去大部分水，结晶、重结晶，得到氧化苦参碱产品。
本发明具体生产方法如下：1.将苦参干燥粉碎，粒度为10-60目，用0.5％H2SO4润湿，放置2小时以上。将润湿的原料装入不锈钢多功能提取罐，在80℃以下，用水提取3次，3次用水量共计为苦参原料的10倍，合并提取液，料渣弃去；
2.提取液用双效蒸发器浓缩成浸膏状，比重≥1.2；3.浸膏用碱液碱化至PH≥9，再加入还原剂，用薄层层析检查其中氧化苦参碱和氧化槐果碱的斑点消失为止；4.经过上述3处理的浸膏用有机溶剂萃取至浸膏中无生物碱检出为止，水层弃去，有机溶剂萃取液用酸液反萃取，直至有机层无生物碱反应为止，使生物碱全部转入水层，分离出水层，有机溶剂可反复用；5.含有生物碱的水层用碱液碱化至PH＝10-11，溶液分层，下层水弃去，上层总生物碱膏，放置，结晶出苦参碱，过滤，得苦参碱粗品；6.母液经7级以上反流分布层析分离，还可得苦参碱粗品和槐定碱粗品，合并5、6所得苦参碱粗品，反复重结晶，得苦参碱产品，槐定碱粗品经重结晶，得槐定碱产品；7.将上述6所得苦参碱产品和过氧化氢加入反应器，50℃下溶化，60℃反应至过氧化氢消耗完全，80℃以下浓缩反应液至有结晶颗粒出现，加入丙酮结晶，再用丙酮重结晶，得氧化苦参碱产品。
其中还原剂为焦亚硫酸钠；碱液为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钠；有机溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯中的一种；酸液反萃取所用的酸为硫酸或盐酸。
本发明薄层层析测定的具体方法是：取薄层层析专用硅胶G，用2％NaOH溶液调制成乳膏状，制成薄层板，在100℃活化1小时，将槐定碱、氧化苦参碱和苦参碱的样品及其对照品点于薄层板底部，以氯仿∶丙酮∶甲醇＝3∶2∶1为展开剂，进行薄层层析，再用改良的碘化铋钾试剂显色，Rf值分别为槐定碱0.67，氧化苦参碱0.29，苦参碱0.79。
从以上的内容不难看出本发明的优点是：1一次投料可同时得三种产品，大大降低了成本2工艺简单，适合工业化生产3质量好、无杂质、纯度高，三种产品均达到98％以上为了更好地说明本发明的优点，通过以下实验加以说明：实验一取本发明所得氧化苦参碱0.5公斤，按(1998)国药标字001号进行检验，所得结果如下；检验项目         标准规定               检验结果[性状]    成为白色或类白色结晶性粉末    白色结晶性粉末[鉴别]           (1)应为正反应          正反应(2)应为正反应          正反应[检查]水分             不得过8.5％            7.5％炽灼残渣         不得过0.4％            符合规定重金属           不得过万分之十         符合规定有关物质％       应符合规定             符合规定[含量测定]    按干燥品计不得少于98.0％  99.5％结论：本品按(1998)国药标字001号检验上述项目，结果符合规定。
实验二取本发明所得苦参碱0.8公斤，按国家药品标准WS-10001-(HD-0047)2002进行检验，所得结果如下：检验项目             标准规定               检验结果
[性状]                本品为白色针状结晶或      白色针状结晶性粉末结晶性粉末、无臭、味苦    无臭、味苦比旋度(25℃+)         31.0-36.0                 34.3[鉴别]                (1)、(2)呈正反应          (1)、(2)正反应[检查]碱度(PH)              9.5-10.5                  10.4溶液的澄清度与颜色    符合规定                  符合规定氧化物％              ≤0.01                    符合规定干燥失重％            ≤1.0                     符合规定炽灼残渣％            ≤0.1                     符合规定重金属                ≤20ppm                   符合规定有关物质％            ≤2.0                     0.6[含量测定]      按干燥品计98.0％-101.0％        99.5％结论：本品按国家药品标准WS-10001-(HD-0047)2002进行检验，符合规定。
实验三取本发明所得槐定碱0.3公斤参照苦参碱的方法(目前尚无法定标准)进行检验，结果如下；检验项目                     检验结果[性状]                       白色针状结晶[鉴别]                       (1)、(2)正反应[检查]干燥失重％                   0.8炽灼残渣％                   0.01
重金属                       10ppm有关物质％                   0.5[含量测定]                   按干燥品计算98.8％结论：符合规定。
附图说明
图1是制备苦参碱、槐定碱的工艺流程图图2是制备氧化苦参碱的工艺流程图实施例：选西北产优质苦参，干燥，粉碎40目，得苦参粉200公斤，用0.5％H2SO4溶液100L润湿，放置2小时以上，装入2000L不锈钢多功能提取罐中，第一次加入800L水，加热75±5℃，保持此温度，强制水循环2小时，滤出溶液；第二次向多功能提取罐中加入600L水，加热75±5℃，保持此温度，强制水循环2小时，滤出溶液；第三次再向多功能提取罐中加入500L水，加热75±5℃，保持此温度，强制水循环2小时，滤出溶液；合并三次提取液，滤取清液，用双效蒸发器在80℃，-0.08MPa以下真空条件下浓缩，蒸发除去水，使之成浸膏状，比重≥1.2，得浸膏95公斤，收率为47.5％；浸膏加入片状氢氧化钠调至PH≥9，再加入还原剂焦亚硫酸钠使薄层层析检查浸膏中无氧化苦参碱和氧化槐果碱斑点为止；浸膏用二氯甲烷萃取6次，每次150L至无生物碱反应为止；二氯甲烷萃取液用8％的盐酸溶液反萃取至无生物碱反应为止；使生物碱全部转入水层，分离出水层，有机溶剂可反复用；含有生物碱的水层用氢氧化钠碱化至PH＝10-11，溶液分层，下层水弃去，上层为总生物碱膏；总生物碱膏放置过夜，即结晶出苦参碱，过滤得苦参碱粗品；母液经7级以上反流分布层析分离，还可得到苦参碱粗品和槐定碱粗品，合并两次所得苦参碱粗品，经反复重结晶，得苦参碱纯品1.42公斤，含量98.3％(按干燥品计)，含水量19.7％。
槐定碱粗品经重结晶，得槐定碱产品0.2公斤，含量98.5％(按干燥品计)，含水量1.2％。
将上述所得苦参碱纯品1.4公斤，加入过氧化氢600ml，水浴50℃加热溶解后，水浴60℃加热反应，同时搅拌，每2小时检查过氧化氢含量，直至溶液中无过氧化氢检出时反应终止；用真空减压浓缩器，以80℃水为热源，-0.08MPa以下真空条件下，将反应液浓缩至有结晶析出，加入丙酮1500ml，搅拌均匀，放置至室温，结晶析出，滤出结晶，得氧化苦参碱粗品；再用丙酮重结晶，过滤，真空干燥得氧化苦参碱产品0.95公斤，含量98.5％(按干燥品计)，含水量6.5％，总得率为0.475％。