环烷基酮基哌啶速激肽受体拮抗剂

                      发明背景

P物质是天然存在的隶属于速激肽肽家族的十一肽，后者是因为 它们促进血管外平滑肌组织的收缩活动故得此称谓。速激肽以其保 守的羧基末端序列而著称。除了P物质之外，已知哺乳动物的速激 肽包括神经激肽A和神经激肽B。目前的命名法将P物质、神经激 肽A和神经激肽B的受体分别称为神经激肽-1(NK-1)、神经激肽-2 (NK-2)和神经激肽-3(NK-3)。速激肽，尤其是P物质的拮抗剂，在 治疗以速激肽，尤其是P物质的活性过度的存在为特征的临床病症 中是有用的，所述病症包括中枢神经系统紊乱、伤害感受(nociception) 和疼痛、胃肠道紊乱、膀胱功能紊乱和呼吸性疾病。试图提供P物 质和其它速激肽的肽受体的拮抗剂，以更有效地治疗以上提到的多 种病症和疾病。

                      发明简述

本发明涉及用作神经激肽-1(NK-1)受体拮抗剂和速激肽尤其是 P物质的抑制剂的某些氨基内酰胺化合物。本发明还涉及包含这些作 为活性成分的化合物的药用制剂和化合物及其制剂在治疗包括呕 吐、尿失禁、抑郁和焦虑的某些病症中的应用。

                      发明详述

本发明涉及式I化合物及其药学上可接受的盐和各非对映异构 体：

其中：

Q选自：

(1)氢，

(2)C1-6烷基，和

(3)C1-6烷基-OH；

R1选自被R1a、R1b和R1c取代的以下基团：

(1)环戊基，

(2)环己基，和

(3)环戊烯酮，

其中R1a、R1b和R1c独立选自：

(a)氢，

(b)C1-6烷基，

(c)(C1-6烷基)-苯基，

(d)(C1-6烷基)-羟基，

(e)(C1-6烷基)-(C1-4烷氧基)，

(f)羟基，

(g)氧代，

(h)C1-6烷氧基，

(i)苯基-C1-3烷氧基，

(j)苯基，

(k)-CN，

(l)卤代，

(m)-NR9R10，其中R9和R10独立选自：

(I)氢，

(II)C1-6烷基，

(III)苯基，

(IV)(C1-6烷基)-苯基，

(V)(C1-6烷基)-羟基，和

(VI)(C1-6烷基)-(C1-4烷氧基)，

(n)-NR9-COR10，

(o)-NR9-CO2R10，

(p)杂环，其中杂环选自：

(A)咪唑基，

(B)异唑基，

(C)二唑基，

(D)唑基，

(E)吡嗪基，

(F)吡唑基，

(G)哒嗪基，

(H)吡啶基，

(I)嘧啶基，

(J)吡咯基，

(K)喹啉基，

(L)四唑基，和

(M)三唑基，

且其中杂环为未取代的或被C1-6烷基或卤代取代；

(q)未取代的或被C1-6烷基取代的-环戊烯酮，

(r)-NR9-环戊烯酮，其中环戊烯酮是未取代的或被C1-6烷基取 代，

(s)-CO-NR9R10，

(t)-SO-NR9R10，

(u)-SO2-NR9R10，

(v)-COR9，和

(w)-CO2R9；

R6、R7和R8独立选自：

(1)氢，

(2)C1-6烷氧基，

(3)卤代，

(4)未取代的或被一或多个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：

(a)羟基，

(b)氧代，

(c)C1-6烷氧基，

(d)苯基-C1-3烷氧基，

(e)苯基，

(f)-CN，

(g)卤代，

(h)-NR9R10，

(i)-NR9-COR10，

(j)-NR9-CO2R10，

(k)-CO-NR9R10，

(l)-COR9，

(m)-CO2R9，

(5)羟基，

(6)-CN，

(7)-CF3，

(8)-NO2，

(9)-SR14，其中R14是氢或C1-6烷基，

(10)-SOR14，

(11)-SO2R14，

(12)-NR9-COR10，

(13)-CO-NR9-COR10，

(14)-NR9R10，

(15)-NR9-CO2R10，

(16)-COR9，和

(17)-CO2R9；

R11、R12和R13独立选自：

(1)氢，

(2)未取代的或被一或多个选自下列的取代基取代的C1-6烷基：

(a)羟基，

(b)氧代，

(c)C1-6烷氧基，

(d)苯基-C1-3烷氧基，

(e)苯基，

(f)-CN，

(g)卤代，

(h)-NR9R10，

(i)-NR9-COR10，

(j)-NR9-CO2R10，

(k)-CO-NR9R10，

(l)-COR9，

(m)-CO2R9；

(3)卤代，

(4)-CN，

(5)-CF3，

(6)-NO2，

(7)羟基，

(8)C1-6烷氧基，

(9)-COR9，和

(10)-CO2R9。

本发明实施方案包括式Ia化合物及其药学上可接受的盐和其各 对映异构体和非对映异构体：

其中R1和X在本文中定义。

本发明实施方案包括式Ib化合物及其药学上可接受的盐和其各 对映异构体和非对映异构体：

其中R1在本文中定义。

本发明实施方案包括式Ic化合物及其药学上可接受的盐和其各 对映异构体和非对映异构体：

其中R1a、R1b和R1c在本文中定义。

本发明实施方案包括式Id化合物及其药学上可接受的盐和其各 对映异构体和非对映异构体：

其中R1a、R1b和R1c在本文中定义。

本发明实施方案包括其中Q是选自下列基团的化合物：

(1)氢，和

(2)甲基。

在此实施方案中，本发明包括其中Q是甲基的化合物。

本发明实施方案包括其中R1是被R1a、R1b和R1c取代的环戊 基的化合物。

本发明实施方案包括其中R1是被R1a、R1b和R1c取代的环己 基的化合物。

本发明实施方案包括其中R1a、R1b和R1c独立选自下列基团 的化合物：

(a)氢，

(b)杂环，其中杂环选自：

(A)二唑基，

(B)吡嗪基，

(C)吡啶基，

(D)嘧啶基，和

(E)三唑基；

且其中杂环为未取代的或被C1-6烷基或卤代所取代；

(c)未取代的或被C1-6烷基取代的-环戊烯酮。

在此实施方案中，本发明包括化合物，其中R1a、R1b和R1c 中的两个是氢，并且R1a、R1b和R1c中的一个独立选自：

(a)杂环，其中杂环选自：

(A)二唑基，

(B)吡嗪基，

(C)吡啶基，

(D)嘧啶基，和

(E)三唑基，

且其中杂环为未取代的或被甲基或溴代取代；

(b)未取代的或被甲基取代的-环戊烯酮。

本发明实施方案包括其中R6、R7和R8是独立选自下列基团的 化合物：

(1)氢，和

(2)-CF3。

在此实施方案中，本发明包括其中R6、R7和R8与其连接的苯 环基一起形成3，5-二(三氟甲基)苯环的化合物。

本发明实施方案包括其中R11、R12和R13是独立选自下列基 团的化合物：

(1)氢，和

(2)氟代。

在此实施方案中，本发明包括其中R11、R12和R13与其连接 的苯环一起形成4-氟苯环的化合物。

本发明特别的实施方案，包括选自在本文实施例的目标化合物 的化合物及其药学上可接受的盐和其单一的对映异构体和非对映异 构体。

本发明化合物可含一个或多个不对称中心，并且因此可出现外 消旋体和外消旋体的混合物、单个的对映异构体、非对映异构体的 混合物和各非对映异构体。根据在分子上的不同取代基的性质，可 存在额外的不对称中心。每次这样的不对称中心将独立产生两个光 学异构体，并且所有可能的以混合物形式出现的光学异构体和非对 映异构体和如纯的或部分纯化的化合物均打算包括在本发明的范围 内。本发明意欲包括这些化合物的所有这样的异构形式。式I显示此 类化合物的没有优选的立体化学的结构。如本领域已知的，通过对 本文公开的方法学的适当的修改，可实现对这些非对映异构体的独 立合成或它们的色谱分离。如果必需，用含已知绝对构型的不对称 中心的试剂衍生，通过结晶产物或结晶中间体的x-线晶体照相术， 可确定它们的绝对立体化学。如果需要，可使化合物的消旋体混合 物分离，以分离出各对映异构体。可用本领域熟知的方法进行分离， 诸如使化合物的消旋体混合物与对映异构体纯的化合物偶联，形成 非对映异构体的混合物，随后用标准方法，诸如分级结晶或色谱法 分离各非对映异构体。使用对映异构体纯的酸或碱，经偶联反应常 常形成盐。然后，通过使额外的手性残余物裂解，可将非对映异构 体衍生物转化为纯对映异构体。也可通过本领域熟知的、采用手性 固定相的色谱方法，直接使化合物的外消旋体混合物分离。作为选 择，通过本领域熟知方法，通过采用已知构型的光学纯的起始原料 或试剂进行立体有择合成，可得到化合物的任何对映异构体。

如本领域专业技术人员所理解的，本文所用的卤代或卤素意欲 包括氟代、氯代、溴代和碘代。类似地，如在C1-6烷基中的C1-6 被定义为以直链或支链排列的具有1、2、3、4、5或6个碳的基团， 这样的C1-6烷基具体包括甲基、乙基、正-丙基、异-丙基、正-丁基、 异-丁基、叔-丁基、戊基和己基。称为被取代基独立取代的基团可被 多个这样的取代基独立取代。

术语“药学上可接受的盐”指自包括无机或有机碱和无机或有 机酸的药学上可接受的无毒碱或酸制备的盐。衍生自无机碱的盐包 括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰盐，亚锰、钾、钠、锌 盐等。特别优选铵、钙、镁、钾和钠盐。为固体形式的盐可以多于 一种的晶体结构存在，还可以水合物的形式存在。衍生自药学上可 接受的有机无毒碱的盐包括伯、仲和叔胺盐，取代的胺包括天然存 在的取代胺、环胺和碱性离子交换树脂，诸如精氨酸、甜菜碱、咖 啡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二 甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-吗啉、N-乙基哌啶、葡萄 糖胺、氨基葡萄糖胺、组氨酸、海巴明、异丙基胺、赖氨酸、甲基 葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可 碱、三乙胺、三甲基胺、三丙基胺、氨基丁三醇等。当本发明化合 物是碱性时，可从药学上可接受的无毒酸，包括无机和有机酸制备 盐。这样的酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙 烷磺酸、反丁烯二酸、葡萄糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺 酸、乳酸、顺丁烯二酸、苹果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、粘酸、硝酸、 扑酸、泛酸、磷酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、对-甲苯磺酸等。特别 优选的是苯磺酸、柠檬酸、氢溴酸、盐酸、顺丁烯二酸、反丁烯二 酸、丁二酸和酒石酸。应该理解的是，如本文所用的，提及本发明 化合物时意味着还包括药学上可接受的盐。

作为例证的本发明是在实施例和本文中公开的化合物的应用。 本发明中的具体的化合物包括选自下列实施例中公开的化合物和其 药学上可接受的盐以及其各非对映异构体的化合物。

本发明化合物在预防和治疗各种以存在活性过度的速激肽，尤 其是P物质为特征的临床病症中是有用的。因此，例如，速激肽， 尤其是P物质的活性过度涉及多种中枢神经系统障碍。这样的障碍 包括心境障碍，诸如抑郁或更具体地是抑郁症，例如，单次发作性 或复发性重度抑郁症与情绪恶劣性障碍，或双相情感障碍，例如， 双相情感障碍I型、双相情感障碍II型和循环性障碍；焦虑症，诸 如伴有或不伴有广场恐怖症的恐慌症、没有恐慌症病史的广场恐怖 症、特殊恐惧症(specific phobias)，例如，特定的动物恐惧症、社交 恐惧症、强迫症、包括创伤后应激障碍和急性应激障碍的应激障碍， 以及广泛性焦虑症；精神分裂症和其它精神障碍，例如，精神分裂 症样障碍、分裂情感性障碍、妄想症、短暂性精神障碍、共患精神 病(感应性精神病)和伴有妄想或幻觉的精神病；谵妄(delerium)、痴呆 和记忆缺失和其它认知或神经退化性障碍，诸如阿尔茨海默氏病、 老年性痴呆、阿尔茨海默氏病型痴呆、血管性痴呆以及其它痴呆， 例如，由于HIV疾病、头部外伤、帕金森氏病、亨廷顿氏病、皮克 病、Creutzfeldt-Jakob病，或由于多病因性引起的痴呆；帕金森氏病 和其它锥体外系运动障碍诸如药物引起的运动障碍，例如，精神抑 制药所致的震颤性麻痹、精神抑制药所致的恶性综合征、精神抑制 药所致的急性肌张力障碍、精神抑制药所致的急性静坐不能、精神 抑制药所致的迟发性运动障碍和药物引起的姿势维持性震颤 (tremour)；由使用酒精、苯丙胺(或苯丙胺样物质)、咖啡因、大麻、 可卡因、迷幻剂、吸入剂和气雾剂抛射剂、烟碱、鸦片类、phenylglycidine 衍生物、镇静剂、催眠剂和抗焦虑药引起的物质相关性障碍，所述 物质相关性障碍包括依赖和滥用、沉迷、戒断、沉迷谵妄、戒断谵 妄、持续性痴呆、精神病、心境障碍、焦虑症、性功能障碍和睡眠 障碍；癫痫症；唐氏(Down′s)综合征；脱髓鞘疾病诸如MS和ALS 和其它神经病理学障碍诸如周围神经病变，例如糖尿病性和化学治 疗引起的神经病变和带状疱疹后神经痛、三叉神经痛、分节的或肋 间神经痛和其它神经痛；和由于的急性或慢性脑血管损伤的脑血管 病诸如脑梗塞、蛛网膜下出血或脑水肿。

速激肽，尤其是P物质的活性还涉及伤害感受和疼痛。因此本 发明化合物将应用于预防或治疗以疼痛为主要症状的疾病和病症， 所述疾病和病症包括软组织和外周组织损伤，诸如急性外伤、骨关 节炎、类风湿性关节炎、肌肉-骨骼疼痛，特别是外伤的肌肉-骨骼疼 痛、脊椎疼痛、肌筋膜疼痛综合征、头痛、外阴切开术后疼痛和烧 伤；深部和内脏疼痛，诸如心脏疼痛、肌肉疼痛、眼睛疼痛、口面 部疼痛，例如，牙痛，腹部疼痛、妇科疼痛，例如，痛经和分娩疼 痛；与神经和神经根损伤有关的疼痛，诸如与外周神经障碍，例如， 神经卡压(entrapment)和臂丛根性撕脱伤、切断手术、周围神经病变、 三叉神经痛、非典型面痛、神经根损伤和蛛网膜炎有关的疼痛；与 癌肿有关的疼痛，常常指的是癌症疼痛；中枢神经系统疼痛，诸如 由于脊髓或脑干损伤引起的疼痛；低位背部疼痛；坐骨神经痛；强 直性脊柱炎、痛风和伤痕疼痛。

速激肽，尤其是P物质的拮抗剂还可用于治疗呼吸性疾病，特 别是那些与粘液分泌过多有关的呼吸性疾病，诸如慢性阻塞性气道 疾病、支气管肺炎、慢性支气管炎、囊性纤维变性以及哮喘、成年 呼吸窘迫综合征和支气管痉挛；炎性疾病诸如炎性肠病、银屑病、 纤维组织炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、皮肤搔痒和晒伤；变态 反应疾病诸如湿疹和鼻炎；超敏反应性病症诸如毒常春藤(poison ivy)；眼科疾病诸如结膜炎、春季结膜炎等；与细胞增殖有关的眼科 病症诸如增生性玻璃体视网膜病变；皮肤病诸如接触性皮炎、特应 性皮炎、风疹和其它湿疹样皮炎。速激肽，尤其是P物质的拮抗剂 还可用于治疗包括乳腺肿瘤、神经成神经节细胞瘤和小细胞癌症诸 如小细胞肺癌的肿瘤。

速激肽，尤其是P物质的拮抗剂还可用于治疗胃肠道(GI)紊乱， 包括炎性病症和GI道疾病诸如胃炎、胃十二指肠溃疡、胃癌、胃淋 巴瘤，与内脏的神经元控制有关的病症、溃疡性结肠炎、克罗恩氏 病、肠易激惹综合征和包括急性、迟发性或预期性呕吐(anticipatory emesis)的呕吐，诸如由化疗、射线、毒素、病毒或细菌感染、妊娠、 前庭障碍，例如，晕动病、眩晕症、头昏和梅尼尔氏症，手术、偏 头痛、颅内压变化、胃-食管反流疾病、酸性消化不良、过量饮食或 饮酒、胃酸过多引起的呕吐，水性腹泄或胃液反流、胃灼热，例如， 短暂的、夜间发作的或餐食诱导的胃灼热，和消化不良。

速激肽，尤其是P物质的拮抗剂还可用于治疗多种其它病症， 包括应激相关的躯体障碍；反射性交感神经营养不良诸如肩/手综合 征；不良的免疫反应诸如移植组织的排异和与免疫功能增强或抑制 相关的病症诸如系统性红斑狼疮；由细胞因子化疗导致的血浆外泄、 膀胱功能紊乱诸如膀胱炎、膀胱逼尿肌反射亢进、尿频和尿失禁， 包括预防或治疗伴急迫性尿失禁、尿急和尿频症状的膀胱过度活动 症；致纤维性和胶原性疾病诸如硬皮病和嗜酸细胞性肝吸虫病；由 血管舒张和血管痉挛疾病引起的血流障碍诸如绞痛、血管性头痛、 偏头痛和雷诺氏(Reynaud′s)病；和由前述任何病症引起的或与前述任 何病症相关的疼痛或伤害感受，尤其是在偏头痛中的疼痛传播。本 发明化合物还在治疗上述病症的合并症中，特别是在治疗合并术后 疼痛以及术后恶心和呕吐的病症中具有价值。

本发明化合物特别地用于预防或治疗包括急性、迟发性或预期 性呕吐的呕吐，诸如由化疗、射线、毒素、妊娠、前庭障碍、运动、 手术、偏头痛和颅内压变化引起的呕吐。例如，本发明化合物任选 与其它止吐剂联合应用，以预防与包括高剂量顺铂的中度或高度催 吐中心(emetogenic)癌症化疗的初次和重复过程相关的急性和迟发性 的恶心和呕吐。最特别的是，本发明化合物用于治疗由包括那些常 规用于癌症化疗的抗肿瘤(细胞毒性)药引起的呕吐和由其它药剂，例 如咯利普兰(rolipram)引起的呕吐。这样的化疗药物的实例包括烷化 剂，例如，乙烯亚胺化合物，烷基磺酸盐和其它具有烷化活性的化 合物诸如亚硝基脲、顺铂和达卡巴嗪；抗代谢剂，例如，叶酸、嘌 呤或嘧啶拮抗剂；有丝分裂抑制剂，例如，长春花生物碱和鬼臼毒 素的衍生物；和细胞毒性抗生素。化疗药物的具体实例，由例如D.J. Stewart在Nausea and Vomiting：Recent Research and Clinical Advances， Eds.J.Kucharczyk等，CRC Press Inc.，Boca Raton，Florida，USA(1991) 第177-203页，特别是在第188页中描述。通常使用的化疗药物包括 顺铂、达卡巴嗪(DTIC)、放线菌素D、氮芥、链脲佐菌素(streptozocin)、 环磷酰胺、卡氯芥(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、多柔比星(阿霉素)、 道诺霉素、甲基苄肼、丝裂霉素、阿糖胞苷、依托泊苷、甲氨蝶呤、 5-氟尿嘧啶、长春碱、长春新碱、博来霉素和苯丁酸氮芥[R.J.Gralla 等在Cancer Treatment Reports(1984) 68(1)，163-172]。本发明的再一 方面包括本发明化合物在哺乳动物中实现时间生物学(生理昼夜节律 相移(phase-shifting))效应和减轻生理昼夜节律紊乱中的应用。本发明 还涉及本发明化合物在哺乳动物中阻断对光的相移作用中的应用。

本发明还涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐在哺乳动物 中增强或改善睡眠质量以及预防和治疗睡眠障碍和睡眠干扰中的应 用。特别地，本发明通过增加睡眠效率和增强睡眠维持状态，提供 增强或改善睡眠质量的方法。另外，本发明提供在哺乳动物中预防 和治疗睡眠障碍和睡眠干扰的方法，所述方法包括给予本发明化合 物或其药学上可接受的盐。本发明用于治疗睡眠障碍，包括可由心 理原因引起的“难以入眠”及“无法维持睡眠”(Disorders of Initiating and Maintaining Sleep)("DIMS″)，如心理障碍(特别是与焦虑有关)的 结果，由药物和酒精滥用(特别是在戒断阶段)、儿童起病的DIMS、 夜间肌肉抽动、纤维肌痛(firomyalgia)、肌肉疼痛、睡眠呼吸暂停和 不宁腿以及如在衰老过程中所见的非特异性REM干扰所引起的睡眠 障碍。

本发明特别优选的实施方案是，在需要此治疗的患者(人或伴侣 动物)中，通过给予本发明化合物，治疗呕吐、尿失禁、抑郁或焦虑。

本发明涉及制备药物的方法，所述药物在哺乳动物中在其受体 位点上拮抗P物质的作用或阻断神经激肽-1受体，所述方法包括将 本发明化合物与药用载体或稀释剂混合。本发明还涉及制备药物的 方法，所述药物在哺乳动物中治疗与速激肽过量有关的生理性紊乱， 所述方法包括将本发明化合物与药用载体或稀释剂混合。

本发明还提供治疗或预防与速激肽，尤其是P物质过量相关的 生理性紊乱的方法，所述方法包括给予需要治疗的患者以减少速激 肽的量的本发明化合物或包含本发明化合物的组合物。如在本文中 所用的，术语“治疗”或“处理”指在罹患病症或表现其临床指征 的患者(人或动物)中，给予本发明化合物以减少、改善或消除提到的 疾病病症的症状或者潜在的病因。术语“预防”或“防止”指在易 于或倾向于罹患所述病症的患者(人或动物)中，给予本发明化合物以 减少、改善或消除提到的疾病病症发生的风险或可能性。

本发明化合物用于在需要治疗的哺乳动物中，治疗胃肠道紊乱、 中枢神经系统障碍、炎性疾病、疼痛或偏头痛和哮喘中拮抗速激肽， 尤其是P物质。此活性可通过下列试验加以证实。

受体在COS中的表达：为了在COS中瞬时表达克隆的人神经 激肽-1受体(NK1R)，通过插入氨苄青霉素抗性基因(从BLUESCRIPT SK+核苷酸1973至2964)到Sac II位点，将人NK1R的cDNA克隆 入衍生自pCDM8(INVITROGEN)的表达载体pCDM9中。通过在800 ul的转染缓冲液(135mM NaCl，1.2mM CaCl2，1.2mM MgCl2，2.4mM K2HPO4，0.6mM KH2PO4，10mM葡萄糖，10mM HEPES pH 7.4) 中使用IBI GENEZAPPER(IBI，New Haven，CT)在260V和950uF下 进行电穿孔，可将20ug的质粒DNA转染入1千万个COS细胞中。 试验前，于37℃、5％CO2中，将细胞在10％胎牛血清、2mM谷氨 酰胺、100U/ml青霉素-链霉素和90％DMEM培养基(GIBCO，Grand Island，NY)中培养三天。

在CHO中稳定表达：为了建立表达克隆的人NK1R的稳定的细 胞系，将cDNA亚克隆入载体pRcCMV(INVITROGEN)。通过使用IBI GENEZAPPER(IBI)于300V和950uF下，在补充有0.625mg/ml鲱 鱼精子DNA的800ul的转染缓冲液中电穿孔，可将20ug的质粒DNA 转染入CHO细胞中。将转染的细胞在37℃下、于5％CO2的CHO 培养基[10％胎牛血清，100U/ml青霉素-链霉素，2mM谷氨酰胺， 1/500次黄嘌呤-胸苷(ATCC)，90％IMDM培养基(JRH BIOSCIENCES， Lenexa，KS)，0.7mg/ml G418(GIBCO)]中培养直至可见集落。分离 每一集落并繁殖。选择具有最高数量的人NK1R的细胞克隆以用于 后续应用诸如药物筛选。

采用COS或CHO的试验方案：在或者COS或者CHO细胞中 表达的人NK1R的结合试验，基于应用125I-P物质(125I-SP，得自DU PONT，Boston，MA)作为与未标记的P物质或结合于人NK1R的任何 其它配体竞争的放射性标记的配体。通过非酶的溶液(SPECIALTY MEDIA，Lavallette，NJ)和再悬浮于适当体积的结合缓冲液(50mM Tris pH 7.5，5mM MnCl2，150mM NaCl，0.04mg/ml枯草杆菌肽，0.004 mg/ml亮抑酶肽，0.2mg/ml BSA，0.01mM磷酰二肽 (phosphoramidon))，使COS或CHO的单层细胞培养分散，这样200ul 的细胞悬液产生约10,000cpm的特异性125I-SP结合(约50,000至 200,000个细胞)。在结合试验中，将200ul的细胞加入含20ul的1.5 至2.5nM的125I-SP和20ul未标记的P物质或任何其它受试化合物 的试管中。将试管温和振摇，与4℃或室温下培养1小时。通过用0.1 ％聚乙烯亚胺预湿的GF/C滤器(BRANDEL，Gaithersburg，MD)，将结 合的放射性与未结合的放射性分离。用3ml清洗缓冲液(50mM Tris pH 7.5，5mM MnCl2，150mM NaCl)洗涤滤器三次并用γ计数器测定 其放射性。通过测定IP3降解产物的肌醇单磷酸盐的积聚物，还可检 测在表达人NK1R的CHO细胞中由NK1R对磷脂酶C的活化作用。 将CHO细胞接种于12-孔板中，每孔250,000个细胞。在CHO培养 基培养4天后，通过过夜培养使细胞荷载0.025uCi/ml的3H-肌醇。 通过用磷酸缓冲盐水洗涤，将细胞外的放射性去除。将LiCl加入孔 中使最终浓度为0.1mM，含或不含受试化合物，并且继续于37℃ 培养15min。将P物质加入孔中使最终浓度为0.3nM以激活人 NK1R。于37℃培养30min后，除去培养基并加入0.1N HCl。使每 个孔于4℃下经超声处理并且用CHCl3/甲醇(1∶1)提取。将水相施加 于1ml Dowex AG 1X8离子交换柱。用0.1N甲酸随后用0.025M甲 酸铵-0.1N甲酸洗涤柱。用0.2M甲酸铵-0.1N甲酸洗脱肌醇单磷酸 盐，并且用β计数器定量测定。具体地，可通过这些试验证实本发 明化合物的固有的速激肽受体拮抗剂活性。下列实施例的化合物在 0.05nM-10μM的浓度范围具有前述试验中的活性。还可通过由Lei， 等， British J.Pharmacol.， 105，261-262(1992)公开的试验，证实本化合 物的活性。

依据进一步的或可选的方面，本发明提供用作组合物的本发明 化合物，所述组合物可给予需要的患者减低其体内的速激肽或P物 质的量。

如在本文所用的术语“组合物”，意欲包括含有预定量或比例 的特定成分的产物，以及任何直接或间接由特定量的特定成分组合 产生的产物。与药用组合物有关的该术语，意欲包括含一个或多个 活性成分和任选包括惰性成分的载体的产物，以及任何直接或间接 由任何两个或更多个成分组合、络合或聚合，或由一个或多个成分 分离，或由一个或多个成分的其它类型的反应或相互作用产生的产 物。总之，通过将活性成分与液体载体或细分散的固体载体或两者 均匀地和紧密地混合，然后，如果需要，使产物成型为想要的制剂， 制备药用组合物。在药用组合物中，包含对疾病过程或病况足以产 生想要的效应的量的活性目标化合物。因此，本发明药用组合物包 含任何由本发明化合物和药学上可接受的载体混合而制备的组合 物。至于“药学上可接受的”，其指的是载体、稀释剂或赋形剂必 须与制剂中的其它成分相兼容并且对其接受者无害。

可依据本领域任何已知的制备药用组合物的方法，制备意欲口 服使用的药用组合物，并且这样的组合物可含一个或多个选自甜味 剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的辅料，以提供药学上精致的和可口 的制剂。片剂包含与适合于制备片剂的无毒的药学上可接受的赋形 剂相混合的活性成分。这些赋形剂可为例如，惰性稀释剂，诸如碳 酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；粒化剂和崩解剂，例如， 玉米淀粉或褐藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯树胶，以及 润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可不经包衣或可采 用已知技术包衣以延迟其在胃肠道的崩解和吸收，并由此提供在较 长期间的持续作用。口服使用的药用组合物还可呈现为硬明胶胶囊， 其中的活性成分与惰性固体稀释剂，例如，碳酸钙、磷酸钙或高岭 土相混合，或者作为软明胶胶囊，其中的活性成分与水或油性介质， 例如花生油、液体石蜡或橄榄油相混合。水性混悬剂含与适合于制 备水性混悬剂的赋形剂相混合的活性成分。通过将活性成分悬浮于 适合的油中，可配制油性混悬剂。也可采用水包油乳剂。适合于通 过加入水制备水性混悬剂的可分散的散剂和颗粒剂，提供与分散剂 或湿润剂、悬浮剂和一个或多个防腐剂相混合的活性成分。

本化合物的药用组合物可以灭菌可注射的水性或油性混悬剂的 形式呈现。还可以适于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。对 于局部应用，可使用含有本发明化合物的乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、 溶液剂或混悬剂等。本发明化合物还可配制用于吸入给药。还可采 用本领域已知的方法通过透皮贴片给予本发明化合物。

含有本发明化合物的组合物可以单位剂型呈现，并且可采用药 学领域任何熟悉的方法制备。术语“单位剂型”意指单一剂量，其 中全部的活性成分和非活性成分于适合的系统内组合，这样，患者 或将该药物给予患者的人可打开单个的容器或包装提取全部包含在 此的剂量，并且不与和其一起的两个或更多个容器或包装中的任何 成分相混合。单位剂型的典型实例为用于口服给药的片剂或胶囊剂、 用于注射的单一剂量小瓶或用于直肠给药的栓剂。这些所列的单位 剂型并非打算以任何方式进行限制，仅表示单位剂型在药学领域中 的典型实例。含有本发明化合物的组合物还可以药剂盒的形式存在， 由此可与指导患者或将该药物给予患者的人配制实际剂型的说明书 一起，提供两个或多个成分，这些成分可以是活性成分或非活性成 分、载体、稀释剂等。这样的药剂盒可提供在其中含有的所有必需 的原料和成分，或它们可包含用于使用或配制必须通过患者或将该 药物给予患者的人独立获得的原料或成分的说明书。

至于“药学上可接受的”，其指的是载体、稀释剂或赋形剂必 须与制剂中的其它成分相兼容并且对其接受者无害。

术语化合物“给药”或“给予”化合物应该理解为，意指以可 导入到患者身体的形式的有用治疗方式和有效治疗量，将本发明化 合物提供给需要治疗的患者，所述形式包括，但不限于：口服剂型， 诸如片剂、胶囊剂、糖浆剂、混悬剂等；可注射剂型，诸如IV、IM 或IP等；透皮剂型，包括乳膏、凝胶剂、散剂或贴片剂；口颊含片 剂型；吸入性粉剂、喷雾剂、混悬剂等；和直肠栓剂。术语“有效 治疗量”指本发明化合物在适合的组合物中，和在适合的剂型中的 足以治疗或预防所提及的疾病病症的量。

本发明化合物可与对本发明的速激肽和P物质抑制剂具有辅助 作用(complimentary effect)的另一种物质联合给予。因此，在预防或 治疗呕吐中，本发明化合物可与其它止吐剂，特别是5HT3受体拮抗 剂，诸如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼、帕洛司琼(palenosetron)和 zatisetron，皮质类固醇，诸如地塞米松或GABAB受体激动剂，诸如 巴氯芬联合使用。同样地，对于预防或治疗偏头痛，本发明化合物 可与其它抗偏头痛剂，诸如麦角胺或5HT1激动剂，特别是舒马曲坦、 那拉曲坦、佐米曲普坦或利扎曲普坦联合使用。

应该认识到，为了治疗抑郁或焦虑，本发明化合物可与其它抗 抑郁药或抗焦虑药联合使用，所述其它抗抑郁药或抗焦虑药有例如 去甲肾上腺素再摄取抑制剂、选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)、 单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)、单胺氧化酶可逆性抑制剂(RIMAs)、5- 羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRIs)、α-肾上腺素能受体拮 抗剂、非典型抗抑郁药、苯二氮类、5-HT1A激动剂或拮抗剂，特别 是5-HT1A部分激动剂、促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)拮抗剂及其 药学上可接受的盐。为了治疗或预防饮食障碍，包括肥胖、神经性 贪食症和强迫饮食障碍，本发明化合物可与其它食欲减退剂联合使 用。应该认识到，为了治疗或预防疼痛或伤害感受或炎性疾病，本 发明化合物可与抗炎药或镇痛剂联合使用，所述抗炎药或镇痛剂有 例如阿片(受体)激动剂、脂肪氧合酶抑制剂，诸如5-脂肪氧合酶抑制 剂、环氧合酶抑制剂，诸如环氧合酶-2抑制剂、白介素抑制剂，诸 如白介素-1抑制剂、NMDA拮抗剂、一氧化氮抑制剂或一氧化氮合 成抑制剂、非甾体类抗炎药或抑制细胞因子的抗炎药。

应该认识到，当使用本文描述的任何联合用药时，本发明化合 物和其它活性剂两者将在合理的时间周期内给予患者。化合物可在 相同的药学上可接受的载体内并可因此同时给予。它们可在分开的 药用载体内诸如同时服用的常规口服剂型。术语“联合”还指化合 物以分开的剂型提供并且依次给予的情况。因此，通过实例，一个 活性成分可作为片剂给药，然后，在合理的时间周期内，可以以或 者口服剂型诸如片剂或者快速溶解的口服剂型给予第二个活性成 分。至于“快速溶解的口服制剂”是指当将药物放置在患者的舌头 上其在约10秒内溶解的口服释放形式的制剂。而“合理的时间周期” 是指不超过约1小时的时间周期。即，例如，如果提供作为片剂的 第一个活性成分，那么，在一小时内，应该给予或者相同类型的剂 型或者提供有效传递药物的另一种剂型的第二个活性成分。

可将本发明化合物以将提供最佳药学功效的剂量，给予需要此 种治疗的患者(人和动物，包括伴侣动物，诸如狗、猫和马)。应该认 识到，在任何具体应用中需要使用的剂量在不同患者之间是不同的， 不仅依所选择的具体化合物或组合物，而且依给药途径、被治疗的 病症的性质、患者的年龄和状况、同时使用的治疗药物或患者所采 纳的特别的饮食以及本领域专业技术人员认可的其它因素不同而 异，适当的剂量最终由主治医师决定。

在治疗与速激肽过量相关的病症中，本发明化合物或其药学上 可接受的盐的适合剂量水平约为每天0.001至50mg/kg，具体约为每 天0.01至约25mg/kg，诸如每天从约0.05至约10mg/kg。剂量范围 将通常为每个患者每天约0.5至1000mg，可单次给予或多次给药。 优选地，剂量范围将为每个患者每天约0.5mg至500mg；更优选为 每个患者每天约0.5mg至200mg；并且尤其更优选为每个患者每天 约5mg至50mg。本发明化合物或其药学上可接受的盐的特别的给 药剂量，包括1mg、5mg、10mg、30mg、100mg和500mg。可以 含约0.5mg至1000mg活性成分；更优选含约0.5mg至500mg活 性成分；或0.5mg至250mg活性成分；或1mg至100mg活性成分 的制剂提供本发明的药用组合物。用于治疗或预防速激肽过量的特 别的药用组合物包含约1mg、5mg、10mg、30mg、100mg和500mg 的活性成分。

在以下实施例中详细说明了用于制备本发明化合物的多种方 法。起始原料和所需的中间体在某些情况下是商业上可获得的，或 可依据文献中的方法或如在本文详细说明的方法制备。使用仪器， 在或者CDCl3或者CD3OD中，场强度400或500MHz下，获得所 有NMR光谱(化学位移以δ报告)。使用Agilent 1100 Series HPLC联 合Waters Micromass ZQ质谱仪，获得HPLC/MS分析。HPLC RP柱 为Waters Exterra MS-C18(5μm)3.0×50mm柱，用10-100％乙腈/水(两 者均含0.05％TFA)梯度洗脱超过3.75min，运行时间5.50min。于210 nM进行UV监测。保留时间(Rt)基于MS数据以分钟报告。报告的 m/e值通常为母分子离子，如所指明的，当100％离子不是母离子时 除外。用指定的Chiracel 25×250mm柱进行制备型手性HPLC，按每 分钟9mL，用指定百分比的异丙醇/庚烷溶剂混合物洗脱。保留时间 (Rt)基于210或254nm监测的UV色谱数据以分钟报告。

                       实施例1

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1- 羧酸叔丁酯

步骤A：3-(4-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯

向配备填充氩气的气囊的圆底烧瓶中装载5.0g(25.1mmol)N- BOC 4-哌啶酮、2.89g叔丁醇钠(30.1mmol)、0.056g乙酸钯(0.30mmol) 和0.183g 2-(二环己基膦)-2’-甲基联苯(0.5mmol)。加入150mL THF， 随后加入4-氟代-1-溴苯。在5次排空/氩气循环后，将反应加热至80℃ 计24hr。冷却至室温后，用氯化铵饱和(水)溶液使反应混合物猝灭， 通过硅藻土垫过滤，并用大量的乙酸乙酯漂洗该垫。分离各层后， 用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩和经硅胶(1-15％ EtOAc/己烷线性梯度；然后15％EtOAc/己烷)纯化。提供标题化合 物。1H-NMR(CDCl3)：δ1.53(s，9H)，2.54-2.64(m，2H)，3.40-3.60(m， 2H)，3.64-3.76(m，1H)，4.18-4.40(m，2H)，7.07(dd，2H，J＝9，9Hz)，7.17 (dd，2H，J＝6，9Hz)ppm。

步骤B：反式-3-(4-氟苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯

向得自步骤A的、冷却(-78℃)的4.61g(15.7mmol)的酮于200mL 乙醚的溶液中，加入1.0M的LAH(于THF中)溶液。将反应于此温 度下搅拌7hr，此时连续加入H2O(0.72mL)、5N NaOH(0.72mL)和 H2O(2.16mL)使反应猝灭。使该混合物温热至室温过夜。然后将该 反应混合物通过硅藻土垫过滤，用大量的EtOAc漂洗，真空浓缩， 粗残余物经硅胶(用从10至40％EtOAc/己烷的线性梯度洗脱)纯化， 得到更多极性的反式-非对映异构体。作为选择，粗残余物经20％ EtOAc/己烷再结晶得到纯的反式-非对映异构体。1H-NMR(CDCl3)：δ 1.50(s，9H)，2.05-2.12(m，1H)，2.58-2.66(m，1H)，2.70-3.00(m，3H)， 3.85(ddd，1H，J＝5，11，11Hz)，4.00-4.30(m，2H)，7.05-7.12(m，2H)， 7.24-7.30(m，2H)ppm。

步骤C：2，2，2-三氯乙亚氨酸(1S)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙基酯

使25.82g(100mmol)的(1S)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙醇于200 mL无水乙醚的溶液，在氮气氛下冰/水浴中冷却。加入纯净的3mL(20 mmol，0.2equiv)DBU至反应烧瓶中，然后将该混合物于0℃下搅拌 10min。在15min内缓慢逐滴加入15mL(150mmol，1.5equiv.)三氯 乙腈。将反应物于0℃下搅拌2hr，在此时间反应物变为深黄色。使 用冷浴(＜35℃)于真空下去除挥发物，得到浅褐色可流动的液体，分 两批经硅胶(3”×10”板)柱色谱法，用己烷/EtOAc(9/1)然后己烷 /EtOAc(4/1)洗脱纯化。合并产物流分并在真空下去除溶剂，得到浅 黄色油状标题化合物。1H-NMR(CDCl3)：δ：1.74(d，3H，6.5Hz)，6.07(q， 1H，6.5Hz)，7.82(s，1H)，7.86(s，2H)，8.40(br.s，1H)ppm。

步骤D：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向得自步骤B的、冷却(-5℃)的9.0g反式-外消旋的醇(30.05mmol) 于环己烷-1，2-二氯乙烷(360mL)的2∶1混合物中的溶液中，加入24.53 g的(1S)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙基-2，2，2-三氯乙烷亚氨酸酯 (ethanimidoate)(61.0mmol)随后加入54％(于乙醚中)HBF4(0.5mL)。 18hr后，加入额外的0.5mL HBF4并且使反应维持在-5℃再进行6hr， 此时用EtOAc稀释反应混合物。用饱和的NaHCO3溶液、盐水洗涤 有机层，经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。粗残余物经硅胶(使用 1-15％EtOAc/己烷的线性梯度洗脱)纯化。如此得到所需的非对映异 构体和起始醇。1H-NMR(CDCl3)：δ1.35(d，3H，J＝7Hz)，1.50(s，9H)， 1.56-1.64(m，1H)，2.16-2.24(m，1H)，2.66-2.90(m，3H)，3.39(ddd，1H，J ＝5，11，11Hz)，3.90-4.40(m，2H)，4.54(q，1H，J＝7Hz)，6.92(dd，2H.J＝ 9，9Hz)，7.01(dd，2H，J＝6，9Hz)，7.30(s，2H)，7.73(s，1H)ppm。

步骤D：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)氯化哌啶

向得自步骤C的2.5g的N-BOC保护的哌啶(4.66mmol)于10mL EtOAc溶液中加入饱和的HCl(于EtOAc中)溶液。使溶液静置3hr， 此时真空下去除挥发物。用乙醚研磨粗盐以达高纯度。为了得到游 离碱形式，将HCl盐悬浮于DCM中并用饱和的NaHCO3溶液处理。 用DCM提取水层。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩， 粗残余物经硅胶(用10％甲醇/DCM洗脱)纯化，提供游离碱形式的标 题化合物(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)哌啶)。1H-NMR(CD3OD)：δ1.29(d，3H，J＝7Hz)，1.53(dddd，1H，J ＝5，13，13，13Hz)，2.30-2.37(m，1H)，2.55-2.70(m，3H)，2.90-2.95(m， 1H)，3.47(ddd，1H，J＝5，11，11Hz)，4.69(q，1H，J＝7Hz)，6.84(dd，2H， J＝9，9Hz)，7.03(dd，2H，J＝6，9Hz)，7.41(s，2H)，7.73(s，1H)ppm。

                         实施例2

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)-1-{[顺 式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己基]羰基}哌啶

步骤A：顺式-4-氨基环己烷羧酸苄基酯

经加热于14mL苄醇和4M HCl(于二氧六环中)中的2.3g顺式- 4-氨基环己烷羧酸至115℃计2天制备标题化合物。待冷却至室温， 用烧结漏斗收集形成的白色沉淀并用大量乙醚洗涤。得到4.1g的HCl 盐。经用2eq的5N NaOH处理HCl盐，随后用DCM提取水层数次， 得到游离碱形式。干燥(Na2SO4)有机层，过滤，真空浓缩和高真空 下干燥。1H-NMR(CD3OD)：δ1.36-1.42(m，2H)，1.60-1.74(m，4H)， 2.05-2.10(m，2H)，2.56-2.62(m，1H)，2.76-2.84(m，2H)，5.15(s，2H)， 7.30-7.40(m，5H)ppm。

步骤B：顺式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己烷羧酸苄基酯

从步骤A的0.6g中间体(2.56mmol)、0.728g的N′-[(1E)-(二甲 基氨基)亚甲基]-N，N-二甲基亚肼基甲酰胺(5.12mmol)和0.05g对甲苯 磺酸，制备标题化合物。将反应剂溶解于15mL甲苯中，并且加热 至112℃计24hr。待冷却至室温，用烧结漏斗收集形成的白色沉淀 并用大量的(1∶1)甲苯/己烷洗涤。如此得到标题化合物。1H-NMR (CD3OD)：δ1.70-1.95(m，4H)，1.98-2.18(m，2H)，1.18-2.30(m，2H)， 2.95-3.10(m，1H)，4.20-4.30(m，1H)，5.20(s，2H)，7.20-7.44(m，5H)， 8.51(s，2H)ppm。

步骤C：顺式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己烷羧酸

将步骤B的0.15g中间体(0.5263mmol)与0.075g 10％Pd/碳混 合，制备标题化合物。将固体悬浮于10mL甲醇中，并且将烧瓶与 配备填充氢的气囊的3通旋塞阀相连。在数次排空/氢气循环后，于 1个氢气压下搅拌反应2hr。通过硅藻土垫小心过滤反应物并用大量 的甲醇漂洗该垫。真空下去除挥发物以提供标题化合物，无需进一 步纯化即可用。1H-NMR(CD3OD)：δ1.72-1.82(m，2H)，1.92-2.10(m， 4H)，2.18-2.26(m，2H)，4.29(dddd，1H，J＝4，4，11，11Hz)，8.81(s，2H) ppm。

步骤D：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)-1-{[顺式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己基]羰基}哌啶

将0.060g(0.1376mmol)的(3aS，4S，5R，7aS)-5-{(1S)-1-[3，5-二(三氟 甲基)苯基]乙氧基}-4-(4-氟苯基)八氢-2H-异吲哚-2-羧酸叔丁酯(步骤 D)、0.031g的顺式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己烷羧酸(0.1583mmol)、 0.040g EDC(0.2064mmol)和0.017g DMAP(0.1376mmol)于2mL DCM中混合，制备标题化合物。使反应静置24hr，此时用DCM稀 释反应混合物并用饱和的NaHCO3和盐水序贯洗涤。有机混合物经 Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。粗残余物经硅胶(用10％甲醇的DCM 洗脱)纯化。如此得到标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ1.31-1.33(m， 3H)，1.40-1.60(m，1H)，1.62-2.11(m，6H)，2.18-2.50(m，3H)，2.58-2.78 (m，2H)，2.90-3.10(m，1H)，3.20-3.30(m，1H)，3.60-3.68(m，1H)，3.82- 4.20(m，1H)，4.30-4.50(m，1H)，4.62-4.78(m，1H)，6.87-6.92(m，2H)， 7.07-7.14(m，2H)，7.43(s，2H)，7.76(s，1H)，8.64(s，2H)ppm。MS： (MH)+613。

                         实施例3

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)-1-{[反 式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己基]羰基}哌啶

步骤A：(反式-4-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}- 3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环己基)氨基甲酸叔丁酯

将得自实施例1步骤E的中间体(93mg，0.2133mmol)与反式-4- [(叔-丁氧基羰基)氨基]环己烷羧酸(67mg，0.2773mmol)、EDC(82mg， 0.4266mmol)和DMAP(5mg，0.0427mmol)于3mL DCM中混合并于 室温下保持。用DCM稀释反应混合物并用饱和的NaHCO3和盐水 序贯洗涤。有机混合物经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。粗残余物 经硅胶(用10％甲醇的DCM洗脱)纯化。如此得到标题化合物。1H-NMR (CD3OD)：δ1.15-2.05(m，23H)，2.36-2.50(m，1H)，2.50-2.78(m，3H)， 3.18-3.40(m，1H)，3.60-3.66(m，2H)，3.84-3.92(m，1H)，4.12-4.20(m， 1H)，4.40-4.50(m，1H)，4.64-4.78(m，3H)，6.86-6.94(m，2H)，7.06-7.16 (m，2H)，7.42-7.46(m，2H)，7.77(bs，1H)ppm。MS：(MH)+661。

步骤B：反式-4-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3- (4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环己胺

将得自实施例3步骤A的中间体(110mg，0.1664mmol)溶解于2 mL EtOAc中，随后加入过量的HCl于EtOAc中的饱和溶液。使反 应混合物于室温下静置3hr，此时真空下去除挥发物。用NaHCO3 饱和溶液处理粗盐，用DCM提取所得的水层数次。合并的有机层经 Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，且粗残余物经硅胶板纯化，并用9∶1 DCM-甲醇洗脱。MS：(MH)+561。

步骤C：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)-1-{[反式-4-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环己基]羰基}哌啶

将实施例3步骤B的中间体(13mg，0.0232mmol)与N′-[(1E)-(二 甲基氨基)亚甲基]-N，N-二甲基亚肼基甲酰胺(7mg，0.0463mmol)和2 mg对甲苯磺酸混合。将反应剂溶解于5mL的甲苯中并加热至112℃。 待冷却至室温，真空下去除挥发物，粗残余物经硅胶(95∶5 DCM-甲 醇)纯化。如此获得6mg的标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ1.30-1.40 (m，3H)，1.40-2.10(m，7H)，2.10-2.32(m，2H)，2.38-2.46(m，1H)，2.58- 3.00(m，4H)，3.24-3.40(m，2H)，3.60-3.72(m，1H)，3.90-4.80(m，3H)， 6.80-6.94(m，2H)，7.06-7.20(m，2H)，7.40-7.46(m，2H)，7.77(s，1H)， 8.58-8.65(m，2H)ppm。MS：(MH)+613。

                        实施例4

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)-1- {[(1R，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

步骤A：((1R，3R)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)氨基甲酸叔丁酯

将实施例1步骤E的盐酸盐中间体(60mg，0.12mmol)悬浮于2 mL DCM中，随后加入62mg的二异丙基乙基胺(0.48mmol)。5分钟 后，加入(1R，3R)-3-[(叔-丁氧基羰基)氨基]环戊烷羧酸(44mg，0.19 mmol)、EDC(46mg，0.24mmol)和DMAP(3mg，0.02mmol)。依据在 实施例3步骤A中的程序进行后处理和纯化。如此得到标题化合物。

MS：(MH)-57 591。

步骤B：((1R，3R)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)胺

使实施例4步骤A的中间体(69mg，0.1068mmol)与HCl在实施 例3步骤B中描述的一般条件下反应。如此得到标题化合物。MS： (MH)+547。

步骤C：(3S，4)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)-1-{[(1R，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

按在实施例3步骤C中描述的通用方法，将实施例6步骤B的 中间体(40mg，0.07mmol)与N′-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N，N-二甲 基亚肼基甲酰胺(21mg，0.15mmol)和1mg对甲苯磺酸混合。如此得 到标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ1.31(d，3H，J＝7Hz)，1.40-1.62(m， 2H)，1.82-2.10(m，2H)，2.10-2.48(m，4H)，2.50-2.80(m，2H)，3.18-3.30 (m，2H)，3.40-3.70(m，2H)，3.94-4.24(m，2H)，4.40-4.90(m，3H)，6.82- 6.94(m，2H)，7.20-7.36(m，2H)，7.43(s，2H)，7.76(s，1H)，8.60-8.67(m， 2H)ppm。MS：(MH)+599。

                          实施例5

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)-1- {[(1R，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

步骤A：((1R，3S)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)氨基甲酸叔丁酯

将实施例1步骤E的盐酸盐中间体(50mg，0.10mmol)悬浮于2 mL DCM中，随后加入52mg的二异丙基乙基胺(0.40mmol)。5分 钟后，加入(1S，3S)-3-[(叔-丁氧基羰基)氨基]环戊烷羧酸(34mg，0.15 mmol)、EDC(38mg，0.20mmol)和DMAP(3mg，0.02mmol)。依据在 例如3步骤A中的程序进行后处理和纯化。如此得到标题化合物。

1H-NMR(CD3OD)：δ1.30-1.36(m，3H)，1.38-1.50(m，9H)，1.70-2.15(m， 4H)，2.36-2.48(m，1H)，2.56-2.78(m，3H)，3.16-3.28(m，2H)，3.60-3.70 (m，1H)，3.90-4.04(m，2H)，4.16-4.44(m，1H)，4.64-4.78(m，2H)，6.86- 6.94(m，2H)，7.06-7.16(m，2H)，7.44(s，2H)，7.77(s，1H)ppm。MS： (MH)-55 591。

步骤B：((1R，3S)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)胺

使实施例7步骤A的中间体(42mg)与HCl在实施例3步骤B中 描述的一般条件下反应。如此得到标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ 1.28-1.34(m，3H)，1.38-1.58(m，2H)，1.60-1.84(m，2H)，1.88-2.16(m， 3H)，2.35-2.48(m，1H)，2.56-2.78(m，2H)，3.16-3.30(m，2H)，3.36-3.72 (m，1H)，3.90-4.24(m，1H)，4.40-4.80(m，2H)，6.84-6.92(m，2H)，7.04- 7.16(m，2H)，7.40-7.46(m，2H)，7.75(s，1H)ppm。MS：(MH)+547。

步骤C：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)-1-{[(1S，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

按在实施例3步骤C中描述的通用方法，将实施例7步骤B的 中间体(23mg，0.042mmol)与N′-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N，N-二甲 基亚肼基甲酰胺(12mg，0.084mmol)和1mg对甲苯磺酸混合。如此 得到标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ1.28-1.40(m，4H)，1.42-1.64(m， 2H)，1.78-2.20(m，4H)，2.24-2.50(m，2H)，2.52-2.80(m，2H)，3.20-3.40 (m，1H)，3.44-3.58(m，1H)，3.60-3.68(m，1H)，3.92-4.24(m，1H)，4.42- 4.78(m，2H)，6.84-6.92(m，2H)，7.04-7.14(m，2H)，7.40-7.42(m，2H)， 7.75(s，1H)，8.62-8.65(m，2H)ppm。MS：(MH)+599。

                        实施例6

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)-1- {[(1R，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

步骤A：((1S，3R)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)氨基甲酸叔丁酯

将实施例1步骤E的盐酸盐中间体(50mg，0.10mmol)悬浮于2 mL DCM中，随后加入52mg的二异丙基乙基胺(0.40mmol)。5分 钟后，加入(1R，3S)-3-[(叔-丁氧基羰基)氨基]环戊烷羧酸(34mg，0.15 mmol)、EDC(38mg，0.20mmol)和DMAP(3mg，0.02mmol)。依据在 例如3步骤A中的程序进行后处理和纯化。如此得到标题化合物。

1H-NMR(CD3OD)：δ1.28-1.40(m，3H)，1.40-1.50(m，9H)，1.50-1.98(m， 4H)，2.00-2.26(m，1H)，2.36-2.48(m，1H)，2.58-2.80(m，2H)，3.10-3.30 (m，2H)，3.60-3.70(m，1H)，3.84-4.22(m，2H)，4.40-4.80(m，2H)，6.86- 6.94(m，2H)，7.06-7.15(m，2H)，7.44(s，2H)，7.77(s，1H)ppm。MS： (MH)+647。

步骤B：((1S，3R)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)胺

使实施例8步骤A的中间体(44mg)与HCl在实施例3步骤B描 述的一般条件下反应。如此得到标题化合物。MS：(MH)+547。

步骤C：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)-1-{[(1R，3S)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

按在实施例3步骤C中描述的通用方法，将实施例8步骤B的 中间体(25mg，0.046mmol)与N′-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N，N-二甲 基亚肼基甲酰胺(13mg，0.09mmol)和1mg对甲苯磺酸混合。此提供 21mg标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ1.24-1.40(m，4H)，1.42-1.62 (m，2H)，1.96-2.16(m，3H)，2.18-2.50(m，3H)，2.56-2.82(m，2H)，3.18- 3.30(m，2H)，3.60-3.70(m，1H)，3.90-4.24(m，1H)，4.40-4.80(m，2H)， 6.86-6.94(m，2H)，7.06-7.16(m，2H)，7.43(s，2H)，7.76(s，1H)，8.67-8.71 (m，2H)ppm。MS：(MH)+599。

                         实施例7

(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基)-1- {[(1S，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

步骤A：((1R，3S)-3-{[(3D，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)氨基甲酸叔丁酯

将实施例1步骤E的盐酸盐中间体(50mg，0.10mmol)悬浮于2 mL DCM中，随后加入52mg的二异丙基乙基胺(0.40mmol)。5分 钟后，加入(1S，3R)-3-[(叔-丁氧基羰基)氨基]环戊烷羧酸(34mg，0.15 mmol)、EDC(38mg，0.20mmol)和DMAP(3mg，0.02mmol)。依据在 例如3步骤A中的程序进行后处理和纯化。如此得到标题化合物。

MS：(MH)-100 547。

步骤B：((1R，3S)-3-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧 基}-3-(4-氟苯基)哌啶-1-基]羰基}环戊基)胺

使实施例9步骤A的中间体(67mg)与HCl在实施例3步骤B描 述的一般条件下反应。如此得到标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ 1.30-1.48(m，3H)，1.42-1.80(m，3H)，1.80-2.08(m，3H)，2.12-2.22(m， 1H)，2.38-2.50(m，1H)，2.58-2.80(m，2H)，3.18-3.30(m，1H)，3.36-3.48 (m，1H)，3.62-3.70(m，1H)，3.90-4.24(m，1H)，4.42-4.78(m，2H)，6.86- 6.94(m，2H)，7.06-7.16(m，2H)，7.44(s，2H)，7.77(s，1H)ppm。MS： (MH)+547。

步骤C：(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯 基)-1-{[(1S，3R)-3-(4H-1，2，4-三唑-4-基)环戊基]羰基}哌啶

按在实施例3步骤C中描述的通用方法，将实施例9步骤B的 中间体(36mg，0.07mmol)与N′-[(1E)-(二甲基氨基)亚甲基]-N，N-二甲 基亚肼基甲酰胺(19mg，0.13mmol)和1mg对甲苯磺酸混合。如此得 到标题化合物。1H-NMR(CD3OD)：δ1.25-1.40(m，3H)，1.40-1.65(m， 1H)，1.80-2.80(m，8H)，3.20-3.50(m，3H)，3.60-3.70(m，1H)，3.90-4.80 (m，4H)，6.84-6.94(m，2H)，7.03-7.18(m，2H)，7.40-7.44(m，2H)，7.75(s， 1H)，8.70(s，2H)ppm。MS：(MH)+599。

                         实施例8

4-(4-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4-氟苯基) 哌啶-1-基]甲基}哌啶-1-基)嘧啶

步骤A：1-(2-氯嘧啶-4-基)哌啶-4-羧酸甲基酯

将1.43g哌啶-4-羧酸甲基酯(10mmol)与2.01g 2，4-二氯嘧啶 (13.5mmol)和3.04g三乙胺于50mL甲醇中混合。将反应加热至80℃ 计24hr。真空下去除挥发物，并且将粗残余物经硅胶纯化，用40-60％ EtOAc/己烷线性梯度洗脱。如此得到标题化合物。1H-NMR(CDCl3)：δ 1.72-1.82(m，2H)，2.00-2.07(m，2H)，2.65(tt，1H，J＝4，11Hz)，3.14(ddd， 2H，J＝3，11，14Hz)，3.74(s，3H)，4.22(bs，2H)，6.42(d，1H，J＝7Hz)， 8.05(d，1H，J＝7Hz)ppm。

步骤B：1-嘧啶-4-基哌啶-4-羧酸甲基酯

将得自实施例11步骤A的中间体(1.8g，7.06mmol)与400mg的 10％Pd/碳混合并悬浮于20mL甲醇中。此烧瓶配备填充氢的气囊， 与3通旋塞阀相连。在数次排空/氢气吹洗循环后，于1个氢气压下 搅拌反应物2hr。通过硅藻土垫小心过滤混合物并用大量的甲醇漂洗 该垫。真空下去除挥发物，用乙醚研磨粗固体以达高纯度。如此得 到标题化合物。1H-NMR(CDCl3)：δ1.90-2.00(m，1H)，2.13(dd，1H，J＝ 2，11Hz)，2.78(dddd，1H，J＝5，5，9，9Hz)，3.48(dd，2H，J＝11，11Hz)， 3.74(s，3H)，3.90-4.20(m，1H)，4.60-5.0(m，1H)，6.89(d，1H，J＝8Hz)， 8.24*d，1H，J＝8Hz)，8.62(s，1H)J＝ppm。

步骤C：1-嘧啶-4-基哌啶-4-醛

将得自实施例11步骤B的中间体(825mg，3.75mmol)溶解于10 mL DCM中，并使该溶液冷却至-78℃，随后缓慢逐滴加入1.0M的 DIBAL-H(于甲苯中)溶液。20分钟后，将溶液温热至0℃，维持2hr。 然后用NaHCO3水溶液猝灭反应并搅拌2hr。反应混合物通过硅藻 土垫过滤并用大量的DCM漂洗。用盐水洗涤有机混合物，经Na2SO4 干燥，过滤，真空浓缩。粗残余物经硅胶纯化，用EtOAc洗脱。如 此得到标题化合物。1H-NMR(CDCl3)：δ1.71(dddd，2H，J＝5，10，10， 14Hz)，2.05(dddd，2H，J＝4，4，4，14Hz)，2.61(dddd，1H，J＝5，5，10， 10Hz)，3.23(ddd，2H，J＝3，10，13Hz)，4.26(d，2H，J＝13Hz)，6.54(d， 1H，J＝6Hz)，8.23(d，1H，J＝6Hz)，8.63(s，1H)，9.74(s，1H)ppm。

步骤D：4-(4-{[(3S，4S)-4-{(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基}-3-(4- 氟苯基)哌啶-1-基]甲基}哌啶-1-基)嘧啶

依据实施例10步骤A中描述的通用方法，将实施例1步骤E 中的中间体的游离碱形式(106mg，0.2442mmol)与得自实施例11步 骤C的55mg中间体(0.3053mmol)于5mL THF中混合，随后逐滴 加入97mg异丙醇钛(IV)(0.10mmol)。如此得到标题化合物。1H-NMR (CD3OD)：δ1.34(d，3H，J＝7Hz)，1.34-1.50(m，1H)，2.00-2.20(m，2H)， 2.32-2.42(m，1H)，2.64(bd，1H，J＝12Hz)，3.08-3.30(m，5H)，3.37(bt， 1H，J＝8Hz)，3.66-3.74(m，1H)，3.82(bd，1H，J＝12Hz)，4.28(d，1H，J＝ 14Hz)，4.73(q，1H，J＝7Hz)，5.17(d，1H，J＝14Hz)，6.94(dd，2H，J＝9， 9Hz)，7.10-7.20(m，3H)，7.43(s，2H)，7.78(s，1H)，8.15(dd，1H，J＝2， 8Hz)，8.66(s，1H)ppm。MS：(MH)+611。

                          表1

使用前述方法，但取代如在前述实施例中描述的适当取代的试 剂，合成表1中的化合物。所需的起始原料为商业上可获得的、文 献中描述的或通过有机合成领域技术人员无需过多实验而易于合成 的。

虽然本发明已经描述并参考其某些具体实施方案进行说明，本 领域技术人员应该认识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下， 可对方法和方案进行各种改编、变化、修改、取代、删除或增加。