变构EGFR抑制剂及其使用方法 |
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| 申请号 | CN202080092238.5 | 申请日 | 2020-11-11 | 公开(公告)号 | CN115066240A | 公开(公告)日 | 2022-09-16 |
| 申请人 | 达纳-法伯癌症研究所股份有限公司; | 发明人 | N·S·格雷; D·A·斯科特; D·黑普纳; T·格罗; C·A·库里斯; C·托; 黄世充; 胡永波; S·斯特劳德; T·贝耶特; M·艾克; | ||||
| 摘要 | 本公开涉及充当表皮生长因子受体(EGFR)的变构 抑制剂 的化合物；包含所述化合物的药物组合物；及 治疗 或 预防 包括癌症和其他增值性 疾病 在内的激酶介导的病症的方法。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种式I的化合物： |
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| 说明书全文 | 变构EGFR抑制剂及其使用方法[0002] 本发明是在美国国立卫生研究院(NIH)授予的第R01 CA201049号拨款的政府支持下完成的。政府对本发明享有一定的权利。 [0003] 相关申请的交叉引用 [0004] 本申请要求2019年11月11日递交的美国临时申请第62/933,776号和2020年5月27日递交的美国临时申请第63/030,655号的优先权，其内容整体并入本文。 背景技术[0005] 表皮生长因子受体(EGFR、Erb‑B1)属于受体酪氨酸激酶家族，其可介导正常和恶性细胞的增殖、分化和存活(Arteaga，C.L.，J.Clin.Oncol.19，2001，32‑40)。EGFR的失调牵涉在许多类型的人类癌症中，在至少70％的人类癌症中存在该受体的过表达(Seymour， L.K.，Curr.Drug Targets 2，2001，117‑133)，包括非小细胞肺癌、乳腺癌、胶质瘤、头颈部鳞状细胞癌和前列腺癌(Raymond，E.，等人，Drugs 60(Supp1.1)，2000，15‑23，讨论41‑2； Salomon，D.S.，等人，Crit.Rev.Oncol.Hematol.19，1995，183‑232；Voldborg B.R.，等人，Ann.Oncol.8，1997，1197‑1206)。因此，EGFR已成为设计和开发可特异性结合和抑制癌细胞中受体酪氨酸激酶活性和信号转导途径的诊断和治疗剂的有吸引力的靶标。例如，EGFR酪 氨酸激酶(EGFR‑TK)可逆抑制剂 已被FDA批准用于NSCLC和晚期胰腺癌的治疗。 其他抗‑EGFR靶向分子也已获得批准，包括拉帕替尼和 [0006] 表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)是EGFR突变晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的有效临床疗法(Mok，T.S.，等人，N.Engl.J.Med.361，2009，947‑57；Paez，J.G.，等人，Science 304，2004，1497‑500；Lynch，T.J.，等人，N.Engl.J.Med.350，2004， 2129‑39；Rosell，R.，等人，Lancet Oncol.13，2012，239‑46)。若干随机临床试验已证实，当用作晚期EGFR突变NSCLC的初始全身治疗时，以反应率(RR)和无进展生存期(PFS)衡量， EGFR TKIs比化疗更有效(Mok，T.S.，等人，N.Engl.J.Med.361，2009，947‑57；Rosell，R.，等人，Lancet Oncol.13，2012，239‑46；Sequest，L.V.等人，J.Clin.Oncol.31，2013，3327‑34； Wu，Y.L.，等人，Lancet Oncol.15，2014，213‑22；Maemondo，M.，等人，N.Engl.J.Med.362， 2010，2380‑8；Zhou，C.，等人，Lancet Oncol.12，2011，735‑42；Mitsudomi，T.，等人，Lancet Oncol.11，2010，121‑8)。然而，绝大多数患者在用EGFR TKI成功治疗后会出现疾病进展。在 60％的患者中检测到的最常见的获得性耐药性机制是EGFR中T790位置处的继发性突变 (T790M)(Yu，H.A.，等人，Clin.Cancer Res.19，2013，2240‑7)。这种突变导致ATP亲和力的增加，从而使得可逆EGFR TKI吉非替尼和厄洛替尼与EGFR TKI结构域的结合更困难(Yun C.H.，等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 105，2008，2070‑5)。 [0007] 已经出现了用于抑制含有EGFR T790M的癌症的共价EGFR抑制剂。然而，在肺癌患者中，阿法替尼仅对未接受过治疗的EGFR突变癌症有效并且在已对吉非替尼或厄洛替尼产 生耐药性的NSCLC患者中的RR小于10％(Miller，V.A.，等人，Lancet Oncol.13，2012，528‑ 38)。阿法替尼是突变型和野生型(WT)EGFR的强效抑制剂。WT EGFR的抑制会导致毒性，包括皮疹和腹泻，这会限制在患者中将阿法替尼剂量升级到抑制EGFRT790M所需的剂量的能力。 不可逆嘧啶EGFR抑制剂，包括工具化合物WZ4002及临床化合物CO‑1686和AZD9291，克服了阿法替尼的许多限制(Zhou，W.，等人，Nature 462，2009，1070‑4；Walter，A.O.，等人，Cancer Discov.3，2013，1404‑15；Cross，D.A.E.，等人，Cancer Discov.4，2014，1046‑61)。 它们不仅对EGFR T790M更强效，而且相对于WTEGFR选择性抑制突变体，并因此与阿法替尼 相比应导致增加的临床疗效和较小的毒性(Zhou，W.，等人；Walter A.O.，et al，Cross，D.A.E.，等人)。 [0008] 然而，所有目前的EGFR TKI都靶向ATP位点，并且虽然第三代不可逆抑制剂可克服T790M，但它们都因C797S突变而变得无能，这种突变已经在接受过治疗的患者中出现。西妥昔单抗是一种阻断受体二聚化的抗‑EGFR抗体，在EGFR突变NSCLC中无效，因为激酶的突变活化实际上在受体二聚化的“下游”。因此，需要抑制EGFR的替代策略。目前，尚无具有靶向突变EGFR的替代作用机制的合适化合物。因此，需要具有靶向突变EGFR的替代作用机制的 强效小分子EGFR抑制剂。 发明内容[0009] 在一个方面，本文提供了式I的化合物： [0010] [0011] 或其药学上可接受的盐； [0012] 其中： [0013] A和A’各自独立地为CH、CR8或N； [0015] X和Y各自独立地为N、CH或CR3； [0016] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0017] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代； [0018] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任选地被一个、两个或三个R6取代； [0019] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0020] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0021] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑77 元杂环基)，其中所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0022] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0023] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0024] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0025] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0026] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN。 [0027] 在另一个方面本文提供了式II的化合物： [0028] [0029] 或其药学上可接受的盐； [0030] 其中 [0031] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0032] X和Y各自独立地为C、CH或CR3； [0033] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0034] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代； [0035] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任6 选地被一个、两个或三个R取代； [0036] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0037] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0038] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R7取代一次、两次或三次； [0039] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0040] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0041] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0042] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0043] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN；并且 [0044] n为1或2。 [0045] 在又一方面，本文提供了式III的化合物： [0046] [0047] 或其药学上可接受的盐； [0048] 其中 [0049] 为任选地双键； [0050] B和D各自独立地为C或N； [0051] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0052] X和Y各自独立地为N、CH或CR3； [0053] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0054] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代； [0055] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任6 选地被一个、两个或三个R取代； [0056] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0057] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0058] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑77 元杂环基)，其中所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0059] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0060] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0061] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0062] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0063] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN。 [0064] 在一个方面，本文提供了一种治疗癌症或增殖性疾病的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或包含本文公开的化合物和药学上可接受的载 体的药物组合物。在一个实施方案中，癌症为肺癌、乳腺癌、胶质瘤、鳞状细胞癌或前列腺癌。在另一个实施方案中，所述方法还包括向受试者施用第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在另一个实施方案中，所述受试者为人。 [0065] 本公开还提供了一种试剂盒，其包含能够抑制EGFR活性的化合物，所述化合物选自本发明公开的化合物或其药学上可接受的盐，及关于在治疗癌症中的使用的说明书。在 一个实施方案中，试剂盒还包含用于进行测试以确定受试者EGFR中是否具有活化突变或 EGFR中是否具有抗性突变的部件。在另一个实施方案中，试剂盒还包含第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。 [0066] 发明详述 [0067] 定义 [0068] 下面列出了用于描述本文公开的化合物和组合物的各种术语的定义。这些定义适用于如整个本说明书和权利要求书中所使用的术语，在特定情况下另有限制除外，这些术 语或单独地或作为一个更大的组的一部分使用。 [0069] 除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。通常，本文使用的命名法及细胞培养、分子遗传学、有机化学和肽化学中的实验室程序是本领域熟知和常用的那些。 [0070] 如本文所用，冠词“一个(a/an)”是指一个或不止一个(即，至少一个)该冠词的语法对象。举例来说，“一个要素”指的是一个要素或不止一个要素。此外，术语“包括(including和其他形式如include、includes和included)”的使用不是限制性的。 [0071] 如本文所用，术语“约”将为本领域普通技术人员所理解并将在一定程度上随使用其的上下文而变化。如本文所用，在提及可测量值如量、持续时间等时，术语“约”意在涵盖在指定值的基础上±20％或±10％的变化，包括±5％、±1％和±0.1％，因为这样的变化对于实现所公开的方法是适宜的。 [0072] 如本文所用，术语“施用”等是指向受试者提供治疗剂。本领域存在多种施用治疗剂的技术，包括但不限于静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、眼、肺和局部施用。 [0073] 术语“治疗(treat/treated/treating/treatment)”包括减少或减轻至少一种与所治疗的状态、病症或疾病相关或由所治疗的状态、病症或疾病引起的症状。在某些实施方案中，治疗包括使有效量的本文公开的化合物与野生型或突变EGFR接触以针对与癌症有关 的病况。 [0074] 如本文所用，术语“预防(prevent/prevention)”指的是如果没有病症或疾病发生则没有病症或疾病发展，或者如果已经有病症或疾病发展则没有进一步地病症或疾病发展。还考虑了预防与病症或疾病相关的一些或全部症状的能力。 [0076] 如本文所用，术语“有效量”、“药学上有效量”和“治疗有效量”是指无毒但足以提供所需生物学结果的药剂的量。该结果可以是疾病的病征、症状或病因的减少或减轻，或生物系统的任何其他期望的改变。任何个体情况下的适宜治疗量可由本领域普通技术人员使用常规实验确定。 [0077] 如本文所用，术语“药学上可接受的”是指不会消除化合物的生物活性或性质并且相对无毒的材料如载体或稀释剂，即，所述材料可施用于个体而不会引起不希望的生物学效应或以有害方式与包含其的组合物的任何组分相互作用。 [0078] 如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过将现有的酸或碱部分转化为其盐形式而被修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基如胺的无机酸盐或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱金属盐或有机盐；等 等。本公开的药学上可接受的盐包括由例如无毒的无机或有机酸形成的母体化合物的常规 无毒盐。本公开的药学上可接受的盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母体化 合物合成。通常，这样的盐可通过使游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量量的适宜碱 或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常优选非水介质比如乙 醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。表述“药学上可接受的盐”不限于单盐或1∶1盐。例如，“药学上可接受的盐”还包括双盐，如双盐酸盐。合适的盐的列表见于Remington的 Pharmaceutical Sciences，17th ed.，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，1985，p.1418和Journal of Pharmaceutical Science，66，2(1977)中，其各通过引用整体并入本文。 [0079] 如本文所用，术语“前药”是指将在体内经历代谢活化而产生活性药物的前体化合物。因此，例如，本文提供的化合物的前药在施用于受试者时将经历代谢活化而生成化合物。 [0080] 如本文所用，术语“组合物”或“药物组合物”是指在本公开内有用的至少一种化合物与药学上可接受的载体的混合物。药物组合物便于将化合物施用于患者或受试者。本领域存在多种施用化合物的技术，包括但不限于静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、眼、肺和局部施用。 [0081] 如本文所用，术语“药物组合”指的是由不止一种活性成分的混合或组合而产生的产品并包括活性成分的固定和非固定组合。术语“固定组合”指的是活性成分例如本公开的化合物和活性助剂均以单一实体或剂量的形式同时施用于患者。术语“非固定组合”指的是活性成分例如本公开的化合物和活性助剂均作为分开的实体同时、并行或无特定时间限制地依序施用于患者，其中这样的施用在患者体内提供治疗有效水平的两种化合物。后者也 适用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或更多种活性成分。 [0082] 如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指的是药学上可接受的材料、组合物或载体，如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或包封材料，所述材料涉及在本公开内有用的化合物在患者体内或向患者的携带或运输中以便所述化合物可实现其预期的功能。通常，这样的构建体从身体的一个器官或部分携带或运输 至身体的另一个器官或部分。每种载体必须是在与制剂的其他成分(包括在本公开内有用 的化合物)相容的意义上“可接受的”，并且对患者无害。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉末状黄芪胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；藻酸；无热原水；等渗盐水； 林格氏液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；及药物制剂中采用的其他无毒相容物质。 [0083] 如本文所用，“药学上可接受的载体”还包括任何和所有包衣、抗细菌和抗真菌剂、及吸收延迟剂等，其与在本公开内有用的化合物的活性相容，并且对患者是生理学上可接受的。也可向组合物中掺入补充活性化合物。“药学上可接受的载体”还可包括本文公开的化合物的药学上可接受的盐。可包含在药物组合物中的其他另外的成分是本领域已知的并 见述于例如Remington的Pharmaceutical Sciences(Genaro，Ed.，Mack Publishing Co.， 1985，Easton，PA)中，其通过引用并入本文。 [0084] 如本文所用，术语“EGFR”是指表皮生长因子受体(或者称为ErbB‑1或HER1)并可指野生型受体或指含有一个或多个突变的受体。 [0085] 如本文所用，术语“HER”或Her”是指ErbB受体酪氨酸激酶家族的成员，包括EGFR、ERBB2、HER3和HER4。 [0086] 如本文所用，术语“变构位点”是指EGFR上非ATP结合位点的位点，如以EGFR的晶体结构为特征的位点。“变构位点”可以是靠近ATP结合位点的位点，如以EGFR的晶体结构为特征的位点。例如。例如，一个变构位点包括表皮生长因子受体(EGFR)的以下氨基酸残基中的一个或多个：Lys745、Leu788、Ala743、Cys755、Leu777、Phe856、Asp855、Met766、Ile759、Glu762和/或Ala763。 [0087] 如本文所用，术语“防止EGFR二聚体形成的药剂”或其重复(iterations)是指将防止二聚体形成的药剂，其中“激活剂”亚单元的C端半段结构(C‑lobe)撞击“受体”亚单元的N端半段结构(N‑lobe)。防止EGFR二聚体形成的药剂的实例包括但不限于西妥昔单抗、曲妥珠单抗、帕尼单抗和Mig6。 [0088] 如本文所用，除非另有说明，否则术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分指的是具有指定的碳原子数的直链或支链烃(即，C1‑C6烷基指的是具有一至六个碳原子的烷基)并包括直链和支链。实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基和己基。C1‑C6烷基的其他实例包括乙基、甲基、异丙基、异丁基、正戊基和正己基。 [0089] 如本文所用，术语“卤代烷基”是指如上定义的被一个或多个卤素取代基所取代的烷基基团，其中烷基和卤素为如本文所定义。举例来说，卤代烷基包括氯甲基、三氟甲基、溴乙基、氯氟乙基等。 [0090] 如本文所用，术语“烷氧基”是指基团‑O‑烷基，其中烷基为如本文所定义。举例来说，烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。 [0091] 如本文所用，术语“烷基胺”是指基团‑NH‑烷基，其中烷基如本文所定义。举例来说，烷基胺包括甲胺、乙胺、异丙胺、正丙胺、正丁胺、仲丁胺、叔丁胺等。 [0092] 如本文所用，术语“卤代烷氧基”是指基团‑O‑卤代烷基，其中卤代烷基为如本文所定义。举例来说，卤代烷氧基包括氯甲氧基、三氟甲氧基、溴乙氧基、氯氟乙氧基等。 [0093] 如本文所用，术语“烯基”是指衍生自烃部分的一价基团，所述烃部分在某些实施方案中含有二至六个或二至八个碳原子并具有至少一个碳‑碳双键。烯基基团可以是或可以不是与另一个基团的连接点。术语“烯基”包括但不限于乙烯基、1‑丙烯基、1‑丁烯基、庚烯基、辛烯基等。 [0094] 如本文所用，术语“炔基”是指衍生自烃部分的一价基团，所述烃部分在某些实施方案中含有二至六个或二至八个碳原子并具有至少一个碳‑碳三键。炔基基团可以是或可以不是与另一个基团的连接点。术语“炔基”包括但不限于乙炔基、1‑丙炔基、1‑丁炔基、庚炔基、辛炔基等。 [0095] 如本文所用，除非另有说明，否则术语“卤素(halo/halogen)”单独地或作为另一取代基的一部分指的是氟、氯、溴或碘原子，优选氟、氯或溴，更优选氟或氯 [0096] 如本文所用，术语“环烷基”指的是具有1、2或3个环的完全饱和的非芳族碳环系统，其中这样的环可以是稠合的。术语“稠合”指的是通过使两个相邻的原子与第一个环共用(即，共享)而存在(即，连接或形成)第二个环。环烷基还包括双环结构，其本质上可以是桥连的或螺环的，其中双环内的每个单独的环具有3‑8个原子。术语“环烷基”包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、双环[3.1.0]己基、螺[3.3]庚基和双环[1.1.1]戊基。 [0097] 如本文所用，术语“环烯基”指的是具有1、2或3个环的部分饱和的非芳族碳环系统，其中这样的环可以是稠合的，并且其中至少一个环含有sp2碳‑碳键。术语“环烯基”包括但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、双环[3.1.0]己烯基、螺[3.3]庚烯基和双环[1.1.1]戊烯基。 [0098] 如本文所用，术语“杂环基”或“杂环烷基”指的是含有1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子并具有1、2或3个环的非芳族碳环系统，其中这样的环可以是稠合的，其中稠合在上文定义。杂环基还包括双环结构，其本质上可以是桥连的或螺环的，其中双环内的每个单独的环具有3‑8个原子并含有0、1或2个N、O或S原子。术语“杂环基”包括环状酯(即，内酯)和环状酰胺(即，内酰胺)，还具体包括但不限于环氧基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基(即，噁烷基)、吡喃基、二噁烷基、氮杂环丙基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、2，5‑二氢‑1H‑吡咯基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、硫代吗啉基、1，3‑噁嗪基、1，3‑噻嗪基、2‑氮杂双环‑[2.1.1]己基、5‑氮杂双环[2.1.1]己基、6‑氮杂双环[3.1.1]庚基、2‑氮杂双环[2.2.1]‑庚基、3‑氮杂双环[3.1.1]庚基、2‑氮杂双环[3.1.1]庚基、3‑氮杂双环[3.1.0]‑己基、2‑氮杂双环‑[3.1.0]己基、3‑氮杂双环[3.2.1]辛基、8‑氮杂双环[3.2.1]辛基、3‑氧杂‑7‑氮杂双环[3.3.1]‑壬基、3‑氧杂‑9‑氮杂双环[3.3.1]壬基、2‑氧杂‑5‑氮杂双环‑[2.2.1]庚基、6‑氧杂‑3‑氮杂双环[3.1.1]庚基、2‑氮杂螺[3.3]庚基、2‑氧杂‑6‑氮杂螺[3.3]庚基、2‑氧杂螺[3.3]‑庚基、2‑氧杂螺[3.5]壬基、3‑氧杂螺[5.3]‑壬基和8‑氧杂双环[3.2.1]辛基。 [0099] 如本文所用，术语“芳族”是指具有一个或多个多不饱和环并具有芳族特性的碳环或杂环，即具有(4n+2)个离域π(pi)电子，其中n为整数。 [0100] 如本文所用，术语“芳基”指的是含有1、2或3个环的芳族碳环系统，其中这样的环可以是稠合的，其中稠合在上文定义。如果环是稠合的，则环中之一必须是完全不饱和的并且稠合的环可以是完全饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的。术语“芳基”包括但不限于苯基、萘基、茚满基和1，2，3，4‑四氢萘基。在一些实施方案中，芳基基团具有6个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团具有六至十个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团具有六至十六个碳原子。 [0101] 如本文所用，术语“杂芳基”指的是含有1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子并具有1、2或3个环的芳族碳环系统，其中这样的环可以是稠合的，其中稠合在上文定义。术语“杂芳基”包括但不限于呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑并[1，2‑a]吡啶基、吡唑并[1，5‑a]吡啶基、5，6，7，8‑四氢异喹啉基、5，6，7，8‑四氢喹啉基、6，7‑二氢‑5H‑环戊并[b]吡啶基、6，7‑二氢‑5H‑环戊并[c]吡啶基、1，4，5，6‑四氢环戊并[c]吡唑基、2， 4，5，6‑四氢环戊并[c]吡唑基、5，6‑二氢‑4H‑吡咯并[1，2‑b]吡唑基、6，7‑二氢‑5H‑吡咯并[1，2‑b][1，2，4]三唑基、5，6，7，8‑四氢‑[1，2，4]三唑并[1，5‑a]吡啶基、4，5，6，7‑四氢吡唑并[1，5‑a]吡啶基、4，5，6，7‑四氢‑1H‑吲唑基和4，5，6，7‑四氢‑2H‑吲唑基。 [0102] 应理解，如果芳基、杂芳基、环烷基或杂环基部分可通过不同的环原子(即，示出或描述时未指明具体的连接点)键合或以其他方式连接到指定的部分，则意指所有可能的点，无论是通过碳原子还是例如三价氮原子。例如，术语“吡啶基”指的是2‑、3‑或4‑吡啶基，术语“噻吩基”指的是2‑或3‑噻吩基，等等。 [0103] 如本文所用，术语“取代的”指的是原子或原子团已替代氢作为连接至另一基团的取代基。 [0104] 如本文所用，术语“任选取代的”指的是所提及的基团可以是取代的或未取代的。在一个实施方案中，所提及的基团任选被零个取代基取代，即所提及的基团是未取代的。在另一个实施方案中，所提及的基团任选被一个或多个另外的基团所取代，所述另外的基团 单独且独立地选自本文描述的基团。 [0105] 化合物 [0106] 本文提供了为表皮生长因子受体(EGFR)的变构抑制剂的化合物，其可用于治疗激酶介导的病症，包括癌症和其它增殖性疾病。 [0107] 在一个方面，本文提供了式I的化合物： [0108] [0109] 或其药学上可接受的盐； [0110] 其中： [0111] A和A’各自独立地为CH、CR8或N； [0112] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0113] X和Y各自独立地为N、CH或CR3； [0114] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0115] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代； [0116] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任6 选地被一个、两个或三个R取代； [0117] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0118] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0119] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑77 元杂环基)，其中所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0120] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0121] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0122] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0123] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0124] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN。 [0125] 在另一个方面，本文提供了式I的化合物，或其药学上可接受的盐，其中 [0126] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3卤烷基)、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0127] 其中所有其他变量如上所定义。 [0128] 在一个实施方案中，式I的化合物为式Ia的化合物： [0129] [0130] 或其药学上可接受的盐。 [0131] 在式Ia的一个实施方案中，R3为C6‑C10芳基或5‑6元杂芳基，二者任选地被R5取代一3 5 5 次。在式Ia的另一个实施方案中，R为C6‑C10芳基任选地被R 取代一次，其中R为5‑7元杂环 7 基、C6‑C10芳基、3‑10元环烷基或5‑6元杂芳基，所有这些任选地被R取代一次。在式Ia的又 3 5 5 一个实施方案中，R为苯基任选地被R取代一次，其中R为5‑7元杂环基、C6‑C10芳基、3‑10元 7 3 环烷基或5‑6元杂芳基，所有这些任选地被R取代一次。在式Ia的又一个实施方案中，R 为 5 5 7 C6‑C10芳基任选地被R 取代一次，其中R为5元杂环基任选地被R取代一次。在式Ia的一个实 7 施方案中，R3为苯基任选地被哌啶取代一次，其中哌啶被R取代一次。 [0132] 在另一个实施方案中，式I的化合物为式Ib的化合物： [0133] [0134] 或其药学上可接受的盐。 [0135] 在又一个实施方案中，Z为CH。在又一个实施方案中，Z为N。在一个实施方案中，Z为6 CF。在另一个实施方案中，R在每次出现时独立地为羟基或卤素。 [0136] 在又一个实施方案中，R1选自苯并咪唑、咪唑并吡嗪、嘌呤、咪唑、吡唑、三唑和咪1 唑并吡啶。在又一个实施方案中，R选自以下： [0137] [0138] 所有这些任选地被一个、二个或三个R8取代。 [0139] 在另一个实施方案中，R6为羟基、卤素或两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑6 10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。在一个实施方案中，R为羟基、 6 氟或或两个R 与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷 6 6 基或3‑10元环烷基。在又一个实施方案中，R为羟基。在又一个实施方案中，R 为氟。在另一 6 6 个实施方案中，R为氯。在一个实施方案中，具有两个R为羟基和氟。在另一个实施方案中， 6 6 具有两个R为羟基和氯。在又一个实施方案中，两个R与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。 [0140] 在一个实施方案，式I的化合物选自表1中的化合物。 [0141] 表1. [0142] [0143] [0144] [0145] 或其药学上可接受的盐。 [0146] 在一个实施方案，式I的化合物选自表2中的化合物。 [0147] 表2. [0148] [0149] [0150] [0151] [0152] [0153] [0154] [0155] 或其药学上可接受的盐。 [0156] 在实施方案中，本文提供的化合物112‑117在实施例中，本文提供的化合物112‑117对于每个指定氘原子具有至少3500(每个指定氘原子52.5％氘掺入量)、至少4000(60％ 氘掺入量)、至少4500(67.5％氘掺入量)、至少5000(75％氘掺入量)、至少5500(82.5％氘掺入量)，至少6000(90％氘掺入量)、至少6333.3(95％氘掺入量)、至少6466.7(97％氘掺入 量)、至少6600(99％氘掺入量)或至少6633.3(99.5％氘掺入量)的同位素富集因子。 [0157] 在化合物112‑117的实施方案中，每个特别地指定为氘的位置具有至少95％氘掺入量。 [0158] 在另一个方面，本文提供式II的化合物： [0159] [0160] 或其药学上可接受的盐； [0161] 其中 [0162] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0163] X和Y各自独立地为C、CH或CR3； [0164] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0165] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代； [0166] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任6 选地被一个、两个或三个R取代。 [0167] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0168] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0169] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑77 元杂环基)，其中所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0170] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0171] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0172] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0173] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0174] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN；并且 [0175] n为1或2。 [0176] 在式II的另一个方面 [0177] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)、O(CH2)0‑3‑(4‑7元杂环基)和(CH2)0‑3‑(4‑7元杂环基)，其中所述烷基、烷氧基、芳基、杂芳基或杂环基各自7 任选地被R取代一次、两次或三次； [0178] 其中所有其他变量如上所定义。 [0179] 在一个实施方案中，式II的化合物为式IIa的化合物： [0180] [0181] 或其药学上可接受的盐。 [0182] 在又一个方面，本文提供式X的化合物： [0183] [0184] 或其药学上可接受的盐； [0185] 其中 [0186] A为O或S； [0187] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0188] X和Y各自独立地为N，CH或CR3； [0189] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0190] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代； [0191] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任6 选地被一个、两个或三个R取代； [0192] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0193] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0194] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)、O(CH2)0‑3‑(4‑7元杂环基)和(CH2)0‑3‑(4‑7元杂环基)，其中所述烷基、烷氧基、芳基、杂芳基或杂环基各自7 任选地被R取代一次、两次或三次； [0195] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0196] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0197] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0198] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0199] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN；并且 [0200] n为1或2。 [0201] 在式IIa的一个实施方案中，R3为C6‑C10芳基或5‑6元杂芳基，二者任选地被R5取代3 5 5 一次。在式IIa的另一个实施方案中，R为C6‑C10芳基任选地被R取代一次，其中R为5‑7元杂 7 环基、C6‑C10芳基、3‑10元环烷基或5‑6元杂芳基，所有这些任选地被R 取代一次。在式IIa的 3 5 5 又一个实施方案中，R为苯基任选地被R取代一次，其中R为5‑7元杂环基、C6‑C10芳基、3‑10 7 3 元环烷基或5‑6元杂芳基，所有这些任选地被R取代一次。在式IIa的又一个实施方案中，R 5 5 7 为C6‑C10芳基任选地被R 取代一次，其中R为5元杂环基任选地被R取代一次。在式IIa的一 3 7 个实施方案中，R为苯基任选地被哌啶取代一次，其中哌啶被R取代一次。 [0202] 在另一个实施方案中，式II的化合物为式IIb的化合物： [0203] [0204] 或其药学上可接受的盐。 [0205] 在另一个实施方案中，式II的化合物为式IIc的化合物： [0206] [0207] 或其药学上可接受的盐。 [0208] 在又一个实施方案中，其中R6在每次出现时独立地为羟基、卤素或两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。在另6 6 一个实施方案中，R为羟基、氟或或两个R与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、 6 6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。在又一个实施方案中，R 为羟基。在又一个 6 6 6 实施方案中，R为氟。在另一个实施方案中，R为氯。在一个实施方案中，具有两个R为羟基 6 6 和氟。在另一个实施方案中，具有两个R为羟基和氯。在又一个实施方案中，两个R 与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。 [0209] 在式II、IIa和IIb的实施方案中，R1选自苯并咪唑、咪唑并吡嗪、嘌呤、咪唑、吡唑、1 三唑和咪唑并吡啶。在一个实施方案中，R选自以下： [0210] [0211] 所有这些任选地被一个、二个或三个R8取代。 [0212] 在另一个实施方案中，R3为苯基或C2‑C3炔基，其中所述苯基任选地被R5取代一次4 3 5 或两次，并且炔基任选地被R 取代一次或两次。在又一个实施方案中，R 为苯基任选地被R 3 4 取代一次或两次。在又一个实施方案中，R为C2‑C3炔基任选地被R取代一次或两次。在一个 3 5 5 实施方案中，R为苯基任选地被R取代一次或两次，并且R 选自哌啶、吡啶和硫代吗啉二氧 7 化物，所有这些任选地被R取代一次或两次。 [0213] 在另一个实施方案中，式II的化合物选自表3中的化合物。 [0214] 表3. [0215] [0216] [0217] [0218] [0219] [0220] [0221] [0222] [0223] 或其药学上可接受的盐。 [0224] 在又一个实施方案中，式II的化合物选自表4中的化合物。 [0225] 表4. [0226] [0227] 或其药学上可接受的盐。 [0228] 在实施方案中，本文提供的化合物112‑117在实施例中，本文提供的化合物112‑117对于每个指定氘原子具有至少3500(每个指定氘原子52.5％氘掺入量)、至少4000(60％ 氘掺入量)、至少4500(67.5％氘掺入量)、至少5000(75％氘掺入量)、至少5500(82.5％氘掺入量)，至少6000(90％氘掺入量)、至少6333.3(95％氘掺入量)、至少6466.7(97％氘掺入 量)、至少6600(99％氘掺入量)或至少6633.3(99.5％氘掺入量)的同位素富集因子。 [0229] 在化合物112‑117的实施方案中，每个特别地指定为氘的位置具有至少95％氘掺入量。 [0230] 在另一个实施方案中，式X的化合物选自表5中的化合物： [0231] 表5. [0232] [0233] [0234] [0235] [0236] 或其药学上可接受的盐。 [0237] 在又一个方面，本文提供式III的化合物： [0238] [0239] 或其药学上可接受的盐； [0240] 其中 [0241] 为任选地双键； [0242] B和D各自独立地为C或N； [0243] W和Z各自独立地为N、CH、C‑卤基、C‑(C1‑C3烷基)或C‑(C1‑C3烷氧基)； [0244] X和Y各自独立地为N、CH或CR3； [0245] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0246] 条件是W、X、Y或Z中的至少之一为CH； [0247] R1选自6‑10元芳基、5‑10元杂芳基、3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任8 选地被一个、二个或三个R取代。 [0248] R2选自6‑10元芳基，5‑10元杂芳基，3‑10元杂环烷基和3‑10元环烷基，所有这些任6 选地被一个、两个或三个R取代。 [0249] R3在每次出现时独立地选自卤素、OR4、NR4R4、SO2R4、SO2NHR4、NHSO2R4、C(O)OR4、C(O)4 4 NHR 、C(O)R 、C1‑C6烷基、C2‑C6烯基、C2‑C6炔基、3‑7元环烷基，C4‑C7环烯基，C6‑C10芳基，5‑6 4 元杂芳基和5‑7元杂环基，其中烷基、烯基或炔基各自任选地被R取代一次、两次或三次，并 5 且其中芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0250] R4在每次出现时独立地选自H、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中所述芳基、5 杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0251] R5在每次出现时独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑10元环烷基、卤素、COOH、C(O)O(C1‑C6烷基)、O(CH2)1‑3‑OH、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、OH、CN、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑77 元杂环基)，其中所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0252] R6在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN； [0253] 可替代地，两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基； [0254] R7在每次出现时独立地选自取代基，所述取代基独立地选自C1‑C6烷基、C1‑C6卤烷基、C1‑C6烷氧基、C1‑C6卤烷氧基、卤素、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、SO2NH2、SO2NH(C1‑C6烷基)、SO2N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑2‑OH、C(O)(CH2)1‑2‑OH、C(O)(C1‑C6烷基)和C(O)O(C1‑C6烷基)； [0255] 可替代地，两个R7与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基；并且 [0256] R8在每次出现时独立地选自C1‑C3烷基、C1‑C3卤烷基、C1‑C3烷氧基、C1‑C3卤烷氧基、C1‑C3烷基胺、3‑6元环烷基、卤素、OH、NO2、NH2、NH(C1‑C6烷基)、N(C1‑C6烷基)2、(CH2)1‑4OH、S(O)0‑2H、S(O)0‑2NH2或CN。 [0257] 在另一个方面，本文提供式III的化合物，或其药学上可接受的盐，其中 [0258] R4在每次出现时独立地选自H、C1‑C6烷基、(CH2)0‑3‑(C3‑C7环烷基)、(CH2)0‑3‑(C4‑C7环烯基)、(CH2)0‑3‑(C6‑C10芳基)、(CH2)0‑3‑(5‑6元杂芳基)和(CH2)0‑3‑(5‑7元杂环基)，其中5 所述芳基、杂芳基或杂环基各自任选地被R取代一次、两次或三次； [0259] 其中所有其他变量如上所定义。 [0260] 在一个实施方案中，式III的化合物为式IIIa的化合物： [0261] [0262] 或其药学上可接受的盐。 [0263] 在式IIIa的一个实施方案中，R3为C6‑C10芳基或5‑6元杂芳基，二者任选地被R5取代3 5 5 一次。在式IIIa的另一个实施方案中，R 为C6‑C10芳基任选地被R取代一次，其中R 为5‑7元 7 杂环基、C6‑C10芳基、3‑10元环烷基或5‑6元杂芳基，所有这些任选地被R 取代一次。在式 3 5 5 IIIa的又一个实施方案中，R 为苯基任选地被R取代一次，其中R 为5‑7元杂环基、C6‑C10芳 7 基、3‑10元环烷基或5‑6元杂芳基，所有这些任选地被R取代一次。 [0264] 在式IIIa的又一个实施方案中，R3为C6‑C10芳基任选地被R5取代一次，其中R5为5元7 3 杂环基任选地被R取代一次。在式IIIa的一个实施方案中，R为苯基任选地被哌啶取代一 7 次，其中哌啶被R取代一次。 [0265] 在另一个实施方案中，式III的化合物为式IIIb的化合物： [0266] [0267] 或其药学上可接受的盐。 [0268] 在又一个实施方案中，式III的化合物为式IIIc的化合物： [0269] [0270] 或其药学上可接受的盐。 [0271] 在又一个实施方案中，R1选自苯并咪唑、咪唑并吡嗪、嘌呤、咪唑、吡唑、三唑和咪1 唑并吡啶。在一个实施方案中，R选自以下： [0272] [0273] 所有这些任选地被一个、二个或三个R8取代。 [0274] 在另一个实施方案中，Y为CR3和R3为6‑10元芳基被R5取代一次或两次。在又一个实施方案中，Z为CF。在又一个实施方案中，Z为CH。在又一个实施方案中，Z为N。 [0275] 在另一个实施方案中，R6为羟基、卤素或两个R6与其所连接的原子一起可以形成5‑6 10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。在一个实施方案中，R为羟基、 6 氟或或两个R 与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷 6 6 基或3‑10元环烷基。在又一个实施方案中，R为羟基。在又一个实施方案中，R 为氟。在另一 6 6 个实施方案中，R为氯。在一个实施方案中，具有两个R为羟基和氟。在另一个实施方案中， 6 6 具有两个R为羟基和氯。在又一个实施方案中，两个R与其所连接的原子一起可以形成5‑10元杂芳基、6‑10元芳基、3‑10元杂环烷基或3‑10元环烷基。 [0276] 在一个实施方案，式III的化合物选自表6中的化合物。 [0277] 表6. [0278] [0279] [0280] 或其药学上可接受的盐。 [0281] 在式I、II和III的实施方案，R7为C1‑C3烷基。 [0282] 本文公开的化合物可以互变异构体和光学异构体(例如，对映异构体、非对映异构体、非对映异构体混合物、外消旋混合物等)存在。 [0283] 本领域通常熟知，将在体内转化以提供本文所公开的化合物的任何化合物为本公开的范围内的前药。 [0284] 本文提供的化合物还可以包括中间体或最终化合物中出现的所有原子同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的那些原子。例如，氢的同位素包括氚和氘。本发明化合物的一个或多个组成原子可以被天然或非天然丰度的原子的同位素替代或取代。在 一些实施方案中，所述化合物包含至少一个氘原子。例如，本公开的化合物中的一个或多个氢原子可以被氘替代或取代。在一些实施方案中，所述化合物包含两个或更多个氘原子。在一些实施方案中，所述化合物包括1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11或12个氘原子。本领域已知用于将同位素包括到有机化合物中的合成方法(Deuterium Labeling in Organic Chemistry by Alan F.Thomas(New York，N.Y.，Appleton‑Century‑Crofts，1971；The Renaissance of H/D Exchange by Jens Atzrodt，Volker Derdau，Thorsten Fey和 Jochen Zimmermann，Angew.Chem.Int.Ed.2007，7744‑7765；The Organic Chemistry of Isotopic Labelling by James R.Hanson，Royal Society of Chemistry，2011)。同位素标记的化合物可用于各种研究，例如NMR光谱、代谢实验和/或测定。 [0285] 在本文提供的化合物中，没有具体特别地为特定同位素的任何原子表示代表该原子的任何稳定同位素。除非另有说明，当一个位置被特别地指定为“H”或“氢”时，该位置被理解为在其天然丰度同位素组合物中具有氢。此外，除非另有说明，当一个位置被特别地指定为“D”或“氘”时，该位置被理解为具有氘的丰度比氘的天然丰度大至少3000倍的氘，其为 0.015％(即，至少45％氘掺入量)。 [0286] 在一个方面，本文提供了一种药物组合物，其包含本文公开的任何一种所述化合物或其药学上可接受的盐及至少一种药学上可接受的载体。 [0287] 在一个实施方案中，所述组合物还包含第二活性剂。在另一个实施方案中，第二活性剂选自MEK抑制剂、PI3K抑制剂和mTor抑制剂。在又一个实施方案中，第二活性剂防止受试者中EGFR二聚体形成。在另一个实施方案中，第二活性剂选自西妥昔单抗、曲妥单抗和帕尼单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，所述ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0288] 在另一个方面，本文提供了药物组合物，其包含本公开的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。在另一个方面，药物组合物还包含第二活性剂和药学上可 接受的载体，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂 为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。 [0289] 与EGFR中的变构位点结合的化合物，如本公开的化合物(例如，本文公开的式的化合物)，任选地与第二活性剂组合，能够调节EGFR活性，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，本公开的化合物能够在没有第二活性剂(例如，抗体如西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗)的情况下抑制或降低EGFR活性。在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合。在一个实施方案中，第二活性剂防止EGFR二聚体形成和/或能够抑制或降低EGFR活性。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕 尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0290] 治疗方法 [0291] 在一个方面，本文提供了一种在有需要的个体中治疗癌症的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I的化合物。在一个实施方案中，癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、子宫内膜癌、甲状腺癌、胶质瘤、鳞状细胞癌和前列腺癌。在另一个实施方案中，所述癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。 [0292] 在另一个方面，本文提供了一种在有需要的个体中抑制激酶的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I的化合物。在一个实施方案中，所述激酶为EGFR。 [0293] 在还另一个方面，本文提供了一种在有此需要的个体中治疗或预防激酶介导的病症的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I的化合物。在一个实施方案中，激酶介导的病症对EGFR靶向疗法具有抗性。在另一个实施方案中，治疗EGFR的疗法选自吉非替尼、厄洛替尼、奥希替尼、CO‑1686和WZ4002。 [0294] 在一些实施方案中，本公开的化合物能够调节(例如，抑制或降低)含有一个或多个突变的EGFR的活性。在一些实施方案中，突变EGFR含有选自T790M、L718Q、L844V、V948R、L858R、I941R、C797S和Del的一个或多个突变。在其他实施方案中，突变EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自Del/L718Q、Del/L844V、Del/T790M、Del/T790M/L718Q、Del/T790M/L844V、L858R/L718Q、L858R/L844V、L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、Del/T790M、Del/T790M/C797S、L858R/T790M/C797S和L858R/T790M/L718Q。在其他实施方案中，突变EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自Del/L844V、L858R/L844V、L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M。在其他实施方案中，突变EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M。 [0295] 在一些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合能够调节(例如，抑制或降低)含有一个或多个突变的EGFR的活性，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，突变EGFR含有选自T790M、L718Q、L844V、V948R、L858R、I941R、C797S和Del的一个或多个突变。在其他实施方案中，突变EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自DEL/ L718Q、DEL/L844V、DEL/T790M、DEL/T790M/L718Q、DEL/T790M/L844V、L858R/L718Q、L858R/L844V、L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、DEL/T790M、DEL/T790M/C797S、L858R/T790M/C797S和L858R/T790M/L718Q。在其他实施方案中，突变EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自Del/L844V、L858R/L844V、L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M。在其他实施方案中，突变EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂 为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单 抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼、吉非替尼或厄洛替尼。 [0296] 在一些实施方案中，本公开的化合物能够调节(例如，抑制或降低)含有一个或多个突变的EGFR的活性，但不影响野生型EGFR的活性。 [0297] 在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合能够调节(例如，抑制或降低)含有一个或多个突变的EGFR的活性但不影响野生型EGFR的活性，其中所述第二活性剂 防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼 单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0298] 调节含有一个或多个突变(如本文描述的那些)的EGFR但不调节野生型EGFR提供了一种治疗、预防或改善疾病的方法，所述疾病包括但不限于癌症和转移、炎症、关节炎、系统性红斑狼疮、皮肤相关病症、肺病症、心血管疾病、缺血、神经退行性病症、肝病、胃肠道病症、病毒和细菌感染、中枢神经系统病症、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化、脊髓损伤和周围神经病。 [0299] 在一些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR更高的抑制。在某些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于 野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、 50倍或100倍的抑制。在各种实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高高达1000倍的抑制。在各种实施方案中，本公开的 化合物表现出相对于野生型EGFR对具有本文所述突变的组合(例如，L858R/T790M、L858R/ T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M)的EGFR高高达1倍的抑制。 [0300] 在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR更高的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二 聚体形成。在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型 EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或 100倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在各种实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的 EGFR高高达1000倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在各种实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对具有本文所述突变的组合 (例如，L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、DEL/T790M、DEL/T790M/C797S和L858R/T790M)的EGFR高高达10000倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体 形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0301] 在一些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高约2倍至约10倍的抑制。在各种实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高约10倍至约100倍的 抑制。在各种实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如 本文所述的突变的EGFR高约100倍至约1000倍的抑制。在各种实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高约1000倍至约 10000倍的抑制。 [0302] 在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高约2倍至约10倍的抑制，其中所述第二活性 剂防止EGFR二聚体形成。在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相 对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高约10倍至约100倍的抑制， 其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活 性剂组合表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR高约100倍 至约1000倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在其他实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突 变的EGFR高约1000倍至约10000倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在其他实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止 EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方 案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0303] 在某些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少2倍的抑制。在某些实施方案中，本公开的化合物表现出相 对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少3倍的抑制。在某些实施 方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的 EGFR高至少5倍的抑制。在某些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/1941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/ C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少10倍的抑制。在某些实施方案中，本公开的 化合物表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/ T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少25倍 的抑制。在某些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/ T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少50倍的抑制。在某些实施方案中，本公开的化合物表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少100倍的抑制。 [0304] 在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/ T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少2倍的抑制，其中所述第二活性剂防 止EGFR二聚体形成。在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于 野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/ T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少3倍的抑制，其中所述第 二活性剂防止EGFR二聚体形成。在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表 现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/ C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少5倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活 性剂组合表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/ T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少10倍 的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、 L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至 少25倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在某些实施方案中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对具有选自L L858R/T790M、L858R/ T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少50倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在某些实施方案 中，本公开的化合物与第二活性剂组合表现出相对于野生型EGFR对具有选自L858R/T790M、L858R/T790M/I941R、L858R/T790M/C797S、Del/T790M、Del/T790M/C797S和L858R/T790M的突变组合的EGFR高至少100倍的抑制，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0305] 在一些实施方案中，EGFR活性的抑制由IC50量度。 [0306] 在一些实施方案中，EGFR活性的抑制由EC50量度。 [0307] 在一些实施方案中，本公开的化合物对EGFR的抑制可经由生化测定法测量。作为示意性和非限制性实例，可使用均相时间分辨荧光(HTRF)测定法使用本文公开的条件和实 验参数确定EGFR活性的抑制。HTRF测定法可例如采用约1μM的底物(例如，生物素‑Lck‑肽底物)浓度；约0.2nM至约40nM的EGFR(突变体或WT)浓度；和约0.000282μM至约50μM的抑制剂浓度。在这些条件下筛选的本公开的化合物可例如表现出约1nM至＞1μM、约1nM至约400nM、约1nM至约150nM、约1nM至约75nM、约lnM至约40nM、约1nM至约25nM、约1nM至约15nM、或约 1nM至约10nM的IC50值。在某些实施方案中，在上述条件下筛选的用于抑制具有选自L858R/T790M、L858R和T790M的突变或组合的EGFR的本公开的化合物可例如表现出约1nM至＞1μM、约1nM至约400nM、约1nM至约150nM、约1nM至约75nM、约1nM至约40nM、约1nM至约25nM、约1nM至约15nM、或约1nM至约10nM的IC50值。 [0308] 在一些实施方案中，本公开的化合物与EGFR中的变构位点结合。在一些实施方案中，本公开的化合物与选自Lys745、Leu788和Ala 743的表皮生长因子受体(EGFR)的至少一个氨基酸残基相互作用。在其他实施方案中，本公开的化合物与选自Cys755、Leu777、 Phe856和Asp855的表皮生长因子受体(EGFR)的至少一个氨基酸残基相互作用。在其他实施 方案中，本公开的化合物与选自Met766、Ile759、Glu762和Ala763的表皮生长因子受体 (EGFR)的至少一个氨基酸残基相互作用。在其他实施方案中，本公开的化合物与选自 Lys745、Leu788和Ala 743的表皮生长因子受体(EGFR)的至少一个氨基酸残基；选自 Cys755、Leu777、Phe856和Asp855的表皮生长因子受体(EGFR)的至少一个氨基酸残基；及选自Met766、Ile759、Glu762和Ala763的表皮生长因子受体(EGFR)的至少一个氨基酸残基相 互作用。在其他实施方案中，本公开的化合物不与选自Met793、Gly796和Cys797的表皮生长因子受体(EGFR)的任何氨基酸残基相互作用。 [0309] 在一些实施方案中，本公开提供了包含变构激酶抑制剂的化合物，其中所述化合物为相对于野生型EGFR对耐药EGFR突变体更强效的抑制剂。例如，相对于野生型EGFR，所述化合物在抑制耐药EGFR突变体的激酶活性方面的效力可强至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或约100倍。在一些实施方案中，耐药EGFR突变体对一种或多种已知的EGFR抑制剂具有抗性，所述抑制剂包括但不限于吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑ 387785和奥希替尼。 [0310] 在一些实施方案中，耐药EGFR突变体包含致敏突变，如Del和L858R。 [0311] 在一些实施方案中，本公开提供了包含变构激酶抑制剂的化合物与第二活性剂的组合，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成，其中所述化合物为相对于野生型EGFR对 耐药EGFR突变体更强效的抑制剂。例如，相对于野生型EGFR，所述化合物与第二活性剂的组合在抑制耐药EGFR突变体的激酶活性方面的效力可高至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或约100倍，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，耐药EGFR突变体对一种或多种已知的EGFR抑制剂具有抗性，所述抑制剂包括但不限于吉非替尼、厄洛 替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼。在一些实施方案中，耐药EGFR突变体包含致敏突变，如Del和L858R。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单 抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0312] 在一些实施方案中，本公开提供了一种包含变构激酶抑制剂的化合物，其中所述化合物抑制携带致敏突变(例如，Del和L858R)和耐药突变(例如，T790M、L718Q、C797S和 L844V)的耐药EGFR突变体的激酶活性，相对于携带致敏突变但不携带耐药突变的EGFR突变 体，效力(例如，如由IC50所量度)差异小于10倍。在一些实施方案中，效力差异小于约9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或2倍。 [0313] 在其他实施方案中，本公开提供了一种包含变构激酶抑制剂的化合物与第二活性剂的组合，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成，其中所述化合物与所述第二活性剂 的组合抑制携带致敏突变(例如，Del和L858R)和耐药突变(例如，T790M、L718Q、C797S和 L844V)的耐药EGFR突变体的激酶活性，相对于携带致敏突变但不携带耐药突变的EGFR突变 体，效力(例如，如由IC50所量度)差异小于10倍。在一些实施方案中，效力差异小于约9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或2倍。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。 在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0314] 在一些实施方案中，本公开提供了一种包含变构激酶抑制剂的化合物，其中所述化合物在抑制含有一个或多个如本文所述的突变如T790M、L718Q、L844V、L858R、C797S和Del的EGFR的活性方面比一种或多种已知的EGFR抑制剂(包括但不限于吉非替尼、厄洛替 尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼)更强效。例如，所述化合物在抑制含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR的活性方面的效力(例如，如由IC50所量度)可比吉 非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼强至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或约100倍。 [0315] 在其他实施方案中，本公开提供了一种包含变构激酶抑制剂的化合物与第二活性剂的组合，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成，其中所述化合物与所述第二活性剂 的组合在抑制含有一个或多个如本文所述的突变如T790M、L718Q、L844V、L858R、C797S和Del的EGFR的活性方面比一种或多种已知的EGFR抑制剂(包括但不限于吉非替尼、厄洛替 尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼)更强效。例如，所述化合物与第二活性剂的组合在抑制含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR的活性方面的效力(例如，如 由IC50所量度)可比吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼强至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或约100倍，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0316] 在一些实施方案中，本公开提供了一种包含变构激酶抑制剂的化合物，其中所述化合物在抑制野生型EGFR的活性方面不如一种或多种已知的EGFR抑制剂(包括但不限于吉 非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼)强效。例如，所述化合物在抑制野生型EGFR的活性方面的效力(例如，如由IC50所量度)可比吉非替尼、厄洛替 尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼低至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、 50倍或约100倍。 [0317] 在其他实施方案中，本公开提供了一种包含变构激酶抑制剂的化合物与第二活性剂的组合，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成，其中所述化合物与所述第二活性剂 的组合在抑制野生型EGFR的活性方面不如一种或多种已知的EGFR抑制剂(包括但不限于吉 非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼)强效。例如，所述化合物与第二活性剂的组合在抑制野生型EGFR的活性方面的效力(例如，如由IC50所量度)可 比吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI‑272、CL‑387785和奥希替尼低至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或约100倍，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0318] 抑制剂的效力可通过EC50值确定。如在基本上相似的条件下测定的，具有较低EC50值的化合物相对于具有较高EC50值的化合物是更强效的抑制剂。在一些实施方案中，基本上相似的条件包括体外或体内测定EGFR依赖性磷酸化水平(例如，在表达野生型EGFR、突变EGFR或其任何片段的3T3细胞中)。 [0319] 抑制剂的效力也可通过IC50值确定。如在基本上相似的条件下测定的，具有较低IC50值的化合物相对于具有较高IC50值的化合物是更强效的抑制剂。在一些实施方案中，基本上相似的条件包括体外或体内测定EGFR依赖性磷酸化水平(例如，在表达野生型EGFR、突变EGFR或其任何片段的3T3细胞中)。 [0320] EGFR致敏突变包括但不限于L858R、G719S、G719C、G719A、L861Q、外显子19中的缺失和/或外显子20中的插入。耐药EGFR突变体可具有但不限于包含T790M、T854A、L718Q、C797S或D761Y的耐药突变。 [0321] 野生型EGFR与含有一个或多个如本文所述的突变的EGFR之间的选择性也可使用细胞增殖测定法来测量，其中细胞增殖依赖于激酶活性。例如，可使用用合适型式的野生型EGFR(如VIII；含WT EGFR激酶结构域)转染的鼠Ba/F3细胞，或者用L858R/T790M、Del/ T790M/L718Q、L858R/T790M/L718Q、L858R/T790M/C797S、Del/T790M/C797S、L858R/T790M/I941R或外显子19缺失/T790M转染的Ba/F3细胞。在抑制剂浓度范围(10μM、3μM、1.1μM、 330nM、110nM、33nM、11nM、3nM、1nM)下进行增殖测定法并计算EC50。 [0322] 测量对EGFR活性的影响的一种替代方法是测定EGFR磷酸化。可将野生型或突变(L858R/T790M、Del/T790M、Del/T790M/L718Q、L858R/T790M/C797S、Del/T790M/C797S、 L858R/T790M/I941R或L858R/T790M/L718Q)EGFR转染到NIH‑3T3细胞(其通常不表达内源性 EGFR)中并可测定抑制剂(使用如上所述的浓度)抑制EGFR磷酸化的能力。将细胞暴露于递 增浓度的抑制剂达6小时并用EGF刺激10分钟。使用磷酸特异性(Y1068)EGFR抗体通过蛋白 质印迹(Western Blotting)测定对EGFR磷酸化的作用。 [0323] 在另一个方面，本公开涉及一种与EGFR中的变构位点结合的化合物，其中所述化合物表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变(例如，L858R/T790M、 Del/T790M、Del/T790M/L718Q、L858R/T790M/C797S、Del/T790M/C797S、L858R/T790M/I941R或L858R/T790M/L718Q)的EGFR高2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍、100倍或1000倍的抑制。 [0324] 在其他实施方案中，本公开提供了一种与EGFR中的变构位点结合的化合物与第二活性剂的组合，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成，其中所述化合物与所述第二活 性剂的组合表现出相对于野生型EGFR对含有一个或多个如本文所述的突变(例如，L858R/ T790M、Del/T790M、Del/T790M/L718Q、Del/T790M/C797S、L858R/T790M/C797S、L858R/ T790M/1941R或L858R/T790M/L718Q)的EGFR高2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍、100倍或1000倍的抑制。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0325] 在又一个方面，本公开提供了一种抑制表皮生长因子受体(EGFR)的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。在一 些实施方案中，所述方法还包括施用第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形 成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案 中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0326] 在另一个方面，本文提供了一种治疗或预防疾病的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中， 所述疾病由激酶介导。在进一步地实施方案中，激酶包含突变的半胱氨酸残基。在进一步地实施方案中，突变的半胱氨酸残基位于EGFR中相当于Cys 797的位置中或附近，包括Jak3、Blk、Bmx、Btk、HER2(ErbB2)、HER4(ErbB4)、Itk、Tec和Txk中的此类位置。在一些实施方案中，所述方法还包括施用第二活性剂，其中所述第二活性剂防止激酶的二聚体形成。在一些实施方案中，防止激酶二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西 妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0327] 在一些实施方案中，所述疾病由EGFR介导(例如，EGFR在疾病的开始或发展中起作用)。在一些实施方案中，所述疾病由Her‑激酶介导。在进一步地实施方案中，Her‑激酶为HER1、HER2或HER4。 [0328] 在某些实施方案中，所述疾病对已知的EGFR抑制剂有抗性，包括但不限于吉非替尼、厄洛替尼、奥希替尼、CO‑1686或WZ4002。在某些实施方案中，进行诊断测试以确定疾病是否与EGFR中的活化突变相关。在某些实施方案中，进行诊断测试以确定疾病是否与携带 活化突变和/或耐药突变的EGFR相关。活化突变包括但不限于L858R、G719S、G719C、G719A、L718Q、L861Q、外显子19中的缺失和/或外显子20中的插入。耐药EGFR突变体可具有但不限于包含T790M、T854A、L718Q、C797S或D761Y的耐药突变。诊断测试可包括测序、焦磷酸测序、PCR、RT‑PCR或本领域技术人员已知的可检测核苷酸序列的类似分析技术。 [0329] 在某些实施方案中，所述疾病为癌症或增殖性疾病。 [0330] 在进一步地实施方案中，所述疾病为肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤或实体瘤。在进一步地实施方案中，所述疾病为肺癌、乳腺癌、胶质瘤、鳞状细胞癌或前列腺癌。在仍进一步地实施方案中，所述疾病为非小细胞肺癌。 [0331] 在某些实施方案中，所述疾病对已知的EGFR抑制剂有抗性，包括但不限于吉非替尼、厄洛替尼、奥希替尼、CO‑1686或WZ4002。在某些实施方案中，进行诊断测试以确定疾病是否与EGFR中的活化突变相关。在某些实施方案中，进行诊断测试以确定疾病是否与携带 活化突变和/或耐药突变的EGFR相关。活化突变包括但不限于L858R、G719S、G719C、G719A、L718Q、L861Q、外显子19中的缺失和/或外显子20中的插入。耐药EGFR突变体可具有但不限于包含T790M、T854A、L7180、C797S或D761Y的耐药突变。诊断测试可包括测序、焦磷酸测序、PCR、RT‑PCR或本领域技术人员已知的可检测核苷酸序列的类似分析技术。 [0332] 在还另一个方面，本文提供了一种治疗激酶介导的病症的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中， 所述化合物为HER1、HER2或HER4的抑制剂。在其他实施方案中，向受试者施用另外的治疗 剂。在其他实施方案中，化合物和另外的治疗剂同时或依序施用。 [0333] 在另一个方面，本公开提供了一种治疗激酶介导的病症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐和第二活性剂， 其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，所述化合物为HER1、HER2或HER4的抑制剂。在其他实施方案中，向受试者施用另外的治疗剂。在其他实施方案中，化合物、防止EGFR二聚体形成的第二活性剂和另外的治疗剂同时或依序施用。在一些实施方案 中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0334] 在其他实施方案中，所述疾病为癌症。在进一步地实施方案中，癌症为肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤或实体瘤。在进一步地实施方案中，所述疾病为肺癌、乳腺癌、胶质瘤、鳞状细胞癌或前列腺癌。在仍进一步地实施方案中，所述疾病为非小细胞肺癌。 [0335] 在另一个方面，本文提供了一种治疗癌症的方法，其中癌症细胞包含活化的EGFR，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。 [0336] 在另一个方面，本文提供了一种治疗癌症的方法，其中癌症细胞包含活化的EGFR，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐和第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活 性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0337] 在某些实施方案中，所述EGFR活化选自EGFR的突变、EGFR的扩增、EGFR的表达和EGFR的配体介导活化。 [0338] 在进一步地实施方案中，EGFR的突变选自G719S、G719C、G719A、L858R、L861Q、外显子19缺失突变和外显子20插入突变。 [0339] 在又一个方面，本文提供了一种在受试者中治疗癌症的方法，其中所述受试者被鉴定为需要EGFR抑制以治疗癌症，所述方法包括向所述受试者施用有效量的本文公开的化 合物或其药学上可接受的盐。 [0340] 在某些实施方案中，鉴定为需要EGFR抑制的受试者对已知的EGFR抑制剂有抗性，包括但不限于吉非替尼、厄洛替尼、奥希替尼、CO‑1686或WZ4002。在某些实施方案中，进行诊断测试以确定受试者是否在EGFR中具有活化突变。在某些实施方案中，进行诊断测试以 确定受试者是否具有携带活化突变和/或耐药突变的EGFR。活化突变包括但不限于L858R、 G719S、G719C、G719A、L718Q、L861Q、外显子19中的缺失和/或外显子20中的插入。耐药EGFR突变体可具有但不限于包含T790M、T854A、L718Q、C797S或D761Y的耐药突变。诊断测试可包括测序、焦磷酸测序、PCR、RT‑PCR或本领域技术人员已知的可检测核苷酸序列的类似分析技术。 [0341] 在一个方面，本文提供了一种在受试者中预防对已知的EGFR抑制剂(包括但不限于吉非替尼、厄洛替尼、奥希替尼、CO‑1686或WZ4002)的抗性的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。 [0342] 在另一个方面，本文提供了一种在疾病中预防对已知的EGFR抑制剂(包括但不限于吉非替尼、厄洛替尼、奥希替尼、CO‑1686或WZ4002)的抗性的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的本文公开的化合物或其药学上可接受的盐和第二活性剂，其中所述第 二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为 抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。 [0343] 在本文公开的方法的一个实施方案中，受试者为人。 [0344] 在另一个方面，本公开提供了一种本文公开的化合物或其药学上可接受的盐，其用于制造用于治疗或预防其中EGFR起作用的疾病的医药。 [0345] 在一个方面，本文提供了一种治疗或预防选自以下的病况的方法：自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖性和过度增殖性疾病、免疫介导的疾病、骨疾病、代谢疾病、神经和神经退行性疾病、心血管疾病、激素相关疾病、过敏症、哮喘和阿尔茨海默氏病。在其他实施方案中，所述病况选自增殖性病症和神经退行性病症。 [0346] 本公开的一个方面提供了可用于治疗以过度或异常细胞增殖为特征的疾病、病症和病况的化合物。这样的疾病包括但不限于增殖性或过度增殖性疾病和神经退行性疾病。 增殖性和过度增殖性疾病的实例包括但不限于癌症。术语“癌症”包括但不限于以下癌症： 乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食道癌、喉癌、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、结直肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化的癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓病症、淋巴病症、霍奇金氏病、毛细胞癌、口腔和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口腔癌、咽癌、小肠癌、结肠癌、直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌、慢性骨髓性白血病(CML)和白血病。术语“癌症”包括但不限于以下癌症：骨髓瘤、淋巴瘤或选自胃癌、肾癌、头颈癌、口咽癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌、肝癌、非霍奇金氏淋巴瘤和肺癌的癌症。 [0347] 术语“癌症”是指由恶性肿瘤细胞的增殖引起的任何癌症，如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤等。例如，癌症包括但不限于间皮瘤、白血病和淋巴瘤如皮肤T‑细胞淋巴瘤(CTCL)、非皮肤外周T‑细胞淋巴瘤、与人类T‑细胞嗜淋巴细胞病毒(HTLV)相关的淋巴瘤如成人T‑细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、B‑细胞淋巴瘤、急性非淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、霍奇金氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、成人T‑细胞白血病淋巴瘤、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)或肝细胞癌。其他实例包括骨髓增生异常综合征、儿童实体瘤如脑肿瘤、神经母细胞瘤、成视网膜细胞瘤、Wilms肿瘤、骨肿瘤和软组织肉瘤、常见的成人实体瘤如头颈癌(例如，口腔癌、喉癌、鼻咽癌和食道癌)、泌尿生殖道癌(例如，前列腺癌、膀胱癌、肾癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌)、肺癌(例如，小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、乳腺癌、胰腺癌、黑色素瘤和其他皮肤癌、胃癌、脑肿瘤、与Gorlin综合征有关的肿瘤(例如，成神经管细胞瘤、脑膜瘤等)和肝癌。可由主题化合物治疗的癌症的另外的示例性形式包括但不限于骨骼肌或平滑肌癌、胃癌、小肠癌、直肠癌、唾液腺癌、子宫内膜癌、肾上腺癌、肛门癌、直肠癌、甲状旁腺癌和垂体癌。 [0348] 本文描述的化合物可用于预防、治疗和研究的另外的癌症有例如结肠癌、家族性腺瘤性息肉病性癌和遗传性非息肉病性结直肠癌或黑色素瘤。此外，癌症包括但不限于唇 癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺癌(甲状腺髓样癌和甲状腺乳头状癌)、肾癌、肾实质癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、睾丸癌、尿道癌、黑色素瘤、脑肿瘤如胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、脑膜瘤、成神经管细胞瘤和外周原始神经外胚层肿 瘤、胆囊癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、畸胎瘤、成视网膜细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、颅咽管瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤、尤因氏肉瘤和浆细胞瘤。在本公开的一个方面，本公开提供了一种或多种本公开的化合物在 制造用于治疗癌症的医药中的用途，所述癌症包括但不限于本文公开的各种类型的癌症。 [0349] 在一些实施方案中，本公开的化合物可用于治疗癌症，如结直肠癌、甲状腺癌、乳腺癌和肺癌；和骨髓增殖性病症，如真性红细胞增多症、血小板增多症，伴骨髓纤维化的髓样化生、慢性髓性白血病、慢性粒单核细胞白血病、嗜酸细胞增多综合征、幼年型粒单核细胞白血病和系统性肥大细胞病。在一些实施方案中，本公开的化合物可用于治疗造血功能障碍，特别是急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性早幼粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病(ALL)。 [0350] 如本文所提供，术语“癌细胞”包括受任何一种上述病况困扰的细胞。 [0351] 本公开还提供了一种治疗或预防细胞增殖性病症如增生、异型增生和癌前病变的方法。异型增生是病理学家在活检中可识别的癌前病变的最早形式。主题化合物可出于防 止所述增生、异型增生或癌前病变继续发展或变成癌性的目的施用。癌前病变的实例可发 生在皮肤、食管组织、乳腺和宫颈上皮内组织中。 [0352] 神经退行性疾病的实例包括但不限于肾上腺脑白质营养不良(ALD)、亚历山大病、阿尔珀氏病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩性侧索硬化(Lou Gehrig病)、共济失调性毛细血管扩张症、Batten病(也称为Spielmeyer‑Vogt‑Sjogren‑Batten病)、牛海绵状脑病(BSE)、 Canavan病、Cockayne综合征、皮质基底节变性、Creutzfeldt‑Jakob病、家族性致命性失眠、额颞叶变性、亨廷顿病、HIV相关痴呆、肯尼迪病、克腊伯氏病、路易体痴呆、神经疏螺旋体病(neuroborreliosis)、Machado‑Joseph病(3型脊髓小脑性共济失调)、多系统萎缩症、多发性硬化、发作性睡眠、Niemann Pick病、帕金森氏病、Pelizaeus‑Metzbacher病、皮克氏病、原发性侧索硬化症、朊病毒病、进行性核上性麻痹、Refsum′s病、Sandhoff病、Schilder病、恶性贫血继发的脊髓亚急性联合变性、Spielmeyer‑Vogt‑Sjogren‑Batten病(也称为 Batten病)、脊髓小脑共济失调(具有不同特征的多种类型)、脊髓性肌萎缩症、Steele‑ Richardson‑Olszewski病、脊髓痨和中毒性脑病。 [0353] 本公开的另一个方面提供了一种治疗选自增殖性或过度增殖性疾病或神经退行性疾病的疾病或减轻其严重性的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的化 合物或包含化合物的药学上可接受的组合物。在其他实施方案中，所述方法还包括施用第 二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为 西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0354] 本公开的化合物和组合物作为EGFR激酶抑制剂的活性可体外、体内或在细胞系中测定。体外测定包括确定对激酶活性或活化激酶的ATPase活性的抑制的测定法。备选的体 外测定法量化抑制剂与蛋白激酶结合的能力并可或通过在结合之前放射性标记抑制剂、分 离抑制剂/激酶复合物和测定结合的放射性标记的量或通过进行其中新的抑制剂与和已知 的放射性配体结合的激酶一起孵育的竞争实验来测量。用于测定本公开中用作各种激酶的 抑制剂的化合物的详细条件将在下文实施例中阐述。 [0355] 根据前述内容，本公开还提供了一种在需要这样的治疗的受试者中预防或治疗任何上述疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本公开的化合物 或其药学上可接受的盐和任选地第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。 对于任何上述用途，所需剂量将随施用方式、待治疗的具体病况和期望的效果而异。 [0356] 在其他实施方案中，所述化合物和防止EGFR二聚体形成的所述第二活性剂同时或依序施用 [0357] 施用/剂量/制剂 [0358] 用于口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除了活性化合物外，液体剂型可还含有本领域常用的惰性稀释剂，如例如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3‑丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和失水山梨糖醇的脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀释剂外，口服组合物还可包含辅助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和增香剂。 [0359] 可注射配制剂(例如，无菌可注射水性或油脂性混悬剂)可根据已知技术使用合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌可注射配制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的 稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液剂、混悬剂或乳剂，例如在1，3‑丁二醇中的溶液剂。可采用的可接受的媒介物和溶剂有水、林格氏液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。另外，通常采用无菌的非挥发性油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可采用任何温和的非挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，在注射剂的制备中使用脂肪酸如油酸。 [0360] 为了延长药物的作用，常需要减慢药物从皮下或肌内注射的吸收。这可通过使用水溶性较差的结晶或非晶材料的液体悬浮体来实现。然后，药物的吸收速率取决于其溶解 速率，溶解速率又可能取决于晶体大小和结晶形式。或者，通过将药物溶解或悬浮在油媒介物中来实现肠胃外施用的药物形式的延迟吸收。 [0361] 用于直肠或阴道施用的组合物优选为栓剂，其可通过将本公开的化合物与合适的无刺激性赋形剂或载体如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，所述赋形剂或载体在环 境温度下为固体但在体温下为液体，因此将在直肠或阴道腔中熔化并释放活性化合物。 [0362] 类似类型的固体组合物也可用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，使用赋形剂如乳糖或奶糖和高分子量聚乙二醇等。 [0363] 所述活性化合物也可呈具有一种或多种如上所述赋形剂的微囊化形式。固体剂型片剂、糖衣丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可制备为具有包衣和外壳，如肠溶衣、释放控制包衣和药物配制领域中熟知的其他包衣。在这样的固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性稀 释剂如蔗糖、乳糖或淀粉混合。除惰性稀释剂外，这样的剂型还可按常规做法包含另外的物质，例如压片润滑剂和其他压片助剂如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型还可包含缓冲剂。 [0364] 用于局部或透皮施用本公开的化合物的剂型包括软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶剂、散剂、溶液剂、喷雾剂、吸入剂或贴剂。在无菌条件下将活性组分与药学上可接受的载体和可能需要的任何所需防腐剂或缓冲剂混合。眼科制剂、滴耳剂、眼软膏、散剂和溶液剂也涵盖在本公开的范围内。 [0366] 除了本公开的化合物外，散剂和喷雾剂还可含有赋形剂如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物。喷雾剂可另外含有惯用喷射剂如氯氟烃。 [0367] 透皮贴剂具有向身体提供化合物的受控递送的附加优点。这样的剂型可通过将化合物溶解或分配在适当的介质中来制备。也可使用吸收增强剂来增加化合物穿过皮肤的通 量。可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制速率。 [0368] 根据本公开的治疗方法，通过以实现期望的结果所需要的量和时间向受试者如人或其他动物施用治疗有效量的本公开的化合物来在受试者中治疗或预防病症。如本文所 用，本公开的化合物的术语“治疗有效量”指的是足以减少受试者中病症的症状的化合物的量。如医学领域中充分理解的，本公开的化合物的治疗有效量将处于适用于任何医学治疗 的合理收益/风险比下。 [0369] 通常，本公开的化合物将以治疗有效量经由本领域已知的任何常见和可接受的方式单独地或与一种或多种治疗剂组合地施用。治疗有效量可随疾病的严重程度、受试者的 年龄和相对健康状况、所用化合物的效力及其他因素而差别很大。通常，使用约0.03至 2.5mg/kg体重的日剂量据指示会全身性地获得令人满意的结果。在较大的哺乳动物例如人 中，指示的日剂量在约0.5mg至约100mg的范围内，方便地以例如每天至多四次的分次剂量 或以延迟形式施用。用于口服施用的合适单位剂型包含大约1至50mg活性成分。 [0370] 在某些实施方案中，本公开的化合物的治疗量或剂量可在约0.1mg/Kg至约500mg/Kg、或者约1至约50mg/Kg的范围内。通常，根据本公开的治疗方案包括每天以单剂量或多剂量向需要这样的治疗的患者施用约10mg至约1000mg的本公开的一种或多种化合物。治疗量 或剂量也将随施用途径和与其他药剂共同使用的可能性而异。 [0371] 在改善受试者的状况后，如果需要，可施用维持剂量的本公开的化合物、组合物或组合。随后，可根据症状将施用的剂量或频率或两者降低至保持改善的状况的水平；当症状已减轻至期望的水平时，应停止治疗。然而，一旦疾病症状复发，受试者可能需要长期的间歇治疗。 [0372] 然而，应理解，本公开的化合物和组合物的总日用量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。对于任何特定患者的具体抑制剂量将取决于多种因素，包括所治疗的病 症和病症的严重程度；采用的具体化合物的活性；采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；采用的具体化合物的施用时间、施用途径和排泄速率；治疗的持续时间；与所采用的具体化合物组合或同时使用的药物；和医学领域中公知的类似因素。 [0373] 本公开还提供了一种药物组合，例如试剂盒，其包含a)第一药剂，其为呈游离形式或药学上可接受的盐形式的如本文所公开的本公开的化合物，和b)至少一种活性助剂。试剂盒可包含关于其施用的说明书。 [0374] 在某些实施方案中，这些组合物任选地还包含一种或多种另外的治疗剂。例如，防止EGFR二聚体形成的药剂、化疗剂或其他抗增殖剂可与本公开的化合物组合以治疗增殖性疾病和癌症。 [0375] 可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括但不限于：离子交换剂；氧化铝；硬脂酸铝；卵磷脂；血清蛋白，如人血清白蛋白；缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸或山梨酸钾；饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物；水；盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白；磷酸氢二钠；磷酸氢钾；氯化钠；锌盐；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯基吡咯烷酮；聚丙烯酸酯；蜡； 聚乙烯聚氧乙烯嵌段聚合物；羊毛脂；糖如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉末状黄芪胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类，如丙二醇或聚乙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂； 缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏液；乙醇；和磷酸盐缓冲溶液。此外，根据配制人员的判断，无毒相容的润滑剂如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁和着色 剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中。可将蛋白激酶抑制剂或其药用盐配制成用于向动物或人施用的药物组合物。这些包含有效治 疗或预防蛋白激酶介导的病况的量的蛋白抑制剂和药学上可接受的载体的药物组合物是 本公开的其他实施方案。 [0376] 试剂盒 [0377] 在一个方面，本文提供了一种试剂盒，其包含能够抑制激酶活性的化合物，所述化合物选自本文公开的一种或多种化合物或其药学上可接受的盐；和关于在治疗癌症中的使用的说明书。在某些实施方案中，试剂盒还包含用于进行测试以确定受试者EGFR中是否具 有活化和/或耐药突变的部件。 [0378] 在另一个方面，本公开提供了一种试剂盒，其包含能够抑制EGFR活性的化合物，所述化合物选自本文公开的化合物或其药学上可接受的盐。 [0379] 在另一个方面，本公开提供了一种试剂盒，其包含能够抑制激酶活性的化合物，所述化合物选自本文公开的一种或多种化合物或其药学上可接受的盐；第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成；和关于在治疗癌症中的使用的说明书。在某些实施方 案中，试剂盒还包含用于进行测试以确定受试者EGFR中是否具有活化和/或耐药突变的部 件。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。在进一步地实施方案 中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。 [0380] 在另一个方面，本公开提供了一种试剂盒，其包含能够抑制EGFR活性的化合物，所述化合物选自本文公开的化合物或其药学上可接受的盐；和第二活性剂，其中所述第二活性剂防止EGFR二聚体形成。在一些实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为抗体。 在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗、曲妥珠单抗或 帕尼单抗。在进一步地实施方案中，防止EGFR二聚体形成的第二活性剂为西妥昔单抗。在一个实施方案中，所述第二活性剂为ATP竞争性EGFR抑制剂。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂是奥希替、吉非替尼或厄洛替尼。在另一个实施方案中，ATP竞争性EGFR抑制剂为奥希替尼。 [0381] 本公开通过以下实施例和合成方案进一步说明，这些实施例和合成方案不应解释为将本公开的范围或精神限制于本文所述的具体程序。应理解，提供这些实施例是为了说 明某些实施方案而不意图由此限制本公开的范围。还应理解，在不背离本公开的精神和/或所附权利要求的范围的情况下，可采取本领域技术人员可想到的各种其他实施方案、修改 及其等同物。 实施例 [0382] 本申请通过以下实施例进一步说明，以下实施例不应解释为进一步地限制。除非另有说明，否则本公开的实践将采用本领域技术范围内的有机合成、细胞生物学、细胞培养和分子生物学的常规技术。 [0383] 缩写 [0384] ACN 乙腈 [0385] dba 二苯亚甲基丙酮 [0386] DCM 二氯甲烷 [0387] DIPEA 二异丙基乙胺 [0388] DMF 二甲基甲酰胺 [0389] DMSO 二甲基亚砜 [0391] EtOAc 乙酸乙酯 [0392] EtOH 乙醇 [0393] HATU 1‑[双(二甲基氨基)亚甲基]‑1H‑1，2，3‑三唑[4，5‑b]吡啶鎓3‑氧化物六氟磷酸盐 [0394] LDA 二异丙氨基锂 [0395] MeOH 甲醇 [0396] SPhos 2‑二环己基膦基‑2′，6′‑二甲氧基联苯 [0397] TBTU 2‑(1H‑苯并三唑‑1‑基)‑1，1，3，3‑四甲基四氟硼酸酯 [0398] TEA 三乙胺 [0399] TFA 三氟乙酸 [0400] THF 四氢呋喃 [0401] XPhos 2‑二环己基膦基‑2′，4′，6′‑三异丙基联苯 [0402] 实施例1：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(3‑氟苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物026)的制备 [0403] 方案1. [0404] [0405] 步骤1. 2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑(3‑氟苯基)乙酸甲酯 [0406] [0407] 向2‑氨基‑2‑(3‑氟苯基)乙酸甲酯(4.00g，21.8mmol)在DMF(109mL)中的溶液中加入DIPEA(10.6mL，61.0mmol)。反应混合物在室温下搅拌5分钟后，加入5‑溴‑2‑(溴甲基)苯甲酸甲酯(6.71g，21.8mmol)。反应混合物在80℃下加热过夜。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用己0‑20％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化+合物(4.75g，58％)。MS m/z：379.1[M+1]。 [0408] 步骤2. 2‑(3‑氟苯基)‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸甲酯 [0409] [0410] 将2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑(3‑氟苯基)乙酸甲酯(4.13g，10.9mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(4.91g， 16.3mmol)、1.0M碳酸钠(21.8mL，21.8mmol)和二噁烷(109mL)的混合物在氮气下脱气两次。 加入[1，1′双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(0.534g，0.654mmol)和XPhos(0.519g，1.09mmol)，然后将反应在氮气下再脱气一次。反应混合物在100℃下加热 2小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用二氯甲烷萃取两次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用0‑80％的乙+ 腈/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得到标题化合物(4.17g，81％)。MS m/z：473.2[M+1]。 [0411] 步骤3. 2‑(3‑氟苯基)‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸 [0412] [0413] 将2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑(3‑氟苯基)乙酸甲酯(4.13g，10.9mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(4.91g， 16.3mmol)、1.0M碳酸钠(21.8mL，21.8mmol)和二噁烷(109mL)的混合物在氮气下脱气两次。 加入[1，1′双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(0.534g，0.654mmol)和XPhos(0.519g，1.09mmol)，然后将反应在氮气下再脱气一次。反应混合物在100℃下加热 2小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用二氯甲烷萃取两次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用0‑80％的乙+ 腈/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得到标题化合物(4.17g，81％)。MS m/z：473.2[M+1]。 [0414] 步骤4：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(3‑氟苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(026) [0415] [0416] 向2‑(3‑氟苯基)‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸(0.100g，0.218mmol)、1，2‑二氨基苯(0.053g，0.491mmol)和HATU(0.166g，0.436mmol)在DMF(4.4mL)中的溶液中加入DIPEA(0.150mL，0.872mmol)。在室温搅拌过夜后，向反应混合物中加入饱和氯化钠溶液。过滤收集所得固体并用水洗涤，得到酰胺中间体，得到酰胺中间+体，其无需进一步纯化即可用于下一步反应。MS m/z：549.3[M+1]。 [0417] 向上述酰胺中间体中加入乙酸(5mL)。在80℃下搅拌过夜后，减压除去溶剂。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用0‑80％的乙腈/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得到标题化合物 1 (18mg，17％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：8.22‑8.26(m，1H)，7.89‑7.97(m，2H)，7.63‑7.71(m，3H)，7.52‑7.63(m，2H)，7.44‑7.51(m，1H)，7.36(d，2H)，7.16‑7.26(m，5H)，6.96(s，1H)， 4.92(d，1H)，4.31(d，1H)，2.89‑2.98(m，2H)，2.53‑2.66(m，1H)，2.24(s，3H)，2.01‑2.10(m，+ 2H)，1.66‑1.81(m，4H)；MS m/z：531.3[M+1]。 [0418] 通过与实施例1类似的方法由起始物料2‑(3‑氟苯基)‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸和吡啶‑2，3‑二胺制备化合物025： [0419] [0420] 实施例2：2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(1H‑咪唑并[4，5‑c]吡啶‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(化合物015)的制备 [0421] 方案2. [0422] [0423] 步骤1. 2‑溴‑4‑氟‑1‑(甲氧基甲氧基)苯 [0424] [0425] 在0℃下向2‑溴‑4‑氟‑苯酚(100g，523mmol)在THF(1L)中的溶液中加入氰化钠(23.0g，575mmol，60％在矿物油中)4小时，然后加入甲氧基甲基氯化物(44.9mL，601mmol)。 在室温下搅拌10小时后，用水淬灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用1‑10％的乙 1 酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(80g，65％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.30(dd，1H)， 7.12(dd，1H)，6.97(m，1H)，5.07‑5.24(m，2H)，3.46‑3.62(m，3H)。 [0426] 步骤2. 2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑氧代‑乙酸乙酯 [0427] [0428] 在‑78℃下向2‑溴‑4‑氟‑1‑(甲氧基甲氧基)苯(80.0g，340mmol)在THF(1L)中的溶液中滴加正丁基锂(2.5M在己烷中，142mL，357mmol)。在‑78℃下搅拌1小时后，将反应混合物插管加到草酸二乙酯(74.4g，510mmol)在THF(500mL)中的预冷(‑78℃)溶液中加入完成后，让反应混合物温热至室温。用水淬灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用10％的 1 乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(70g，80％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.57(dd， 1H)，7.26‑7.31(m，1H)，7.18‑7.23(m，1H)，5.15(s，2H)，4.37‑4.43(m，2H)，3.46‑3.50(m， 3H)，1.35‑1.41(m，3H)。 [0429] 步骤3. 2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑羟基亚氨基‑乙酸乙酯 [0430] [0431] 向羟胺盐酸盐(37.9g，546mmol)在乙醇(500mL)中的溶液中加入2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑氧代‑乙酸乙酯(70.0g，273mmol)和乙酸钠(44.7g，132mmol)。在80℃下搅拌2.5小时后，减压除去溶剂并将所得残余物在水和二氯甲烷之间分配。用另外的二氯甲烷萃取水相。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合1 物(68g，92％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：9.76(br s，1H)，7.17‑7.23(m，1H)，7.07‑7.14(m， 2H)，5.10(s，2H)，4.31‑4.39(m，2H)，3.44‑3.48(m，3H)，1.35‑1.40(m，3H)。 [0432] 步骤4. 2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯 [0433] [0434] 向雷尼镍(1.46g，25.0mmol)在EtOH/THF(650mL，4/1)中的溶液中加入(650mL，4/1)2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑羟基亚氨基‑乙酸乙酯(34.0g，125mmol)。抽空烧瓶，用氢气回填，并将反应混合物在氢气气氛(50psi)下于70℃下搅拌24小时。反应混合物通过硅藻土垫过滤，硅藻土垫用乙醇洗涤数次。减压浓缩滤液并通过硅胶色谱法纯化，用 1 33％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(30.6g，48％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ： 7.23(dd，1H)，7.04‑7.08(m，2H)，5.14‑5.18(m，2H)，4.66(s，1H)，3.92‑4.12(m，2H)，3.37(s，3H)，1.06‑1.22(m，3H)。 [0435] 步骤5. 2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯 [0436] [0437] 向2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯(30.6g，118mmol)在DMF(300mL)中的溶液中加入DIPEA(58.4mL，354mmol)。反应混合物在室温下搅拌5分钟后，加入5‑溴‑2‑(溴甲基)苯甲酸甲酯(32.6g，106mmol)。反应混合物在100℃下加热10小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用33％的乙酸乙酯/石油 1 醚洗脱，得到标题化合物(35g，66％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.00(d，1H)，7.63(dd，1H)， 7.22‑7.36(m，1H)，7.10‑7.19(m，1H)，6.94‑7.08(m，2H)，6.36‑6.54(m，1H)，5.06‑5.21(m， 2H)，4.72(d，1H)，4.13‑4.34(m，2H)，3.94(d，1H)，3.31‑3.45(m，3H)，1.24‑1.28(m，3H)；MS + m/z：453.8[M+1]。 [0438] 步骤6. 2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸乙酯 [0439] [0440] 将2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸乙酯(5.34g，11.8mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(4.60g，15.3mmol)、碳酸钠(3.12g，29.5mmol)和二噁烷/水(125mL，4/1)的混合物在氮气下脱气两次。加入[1，1′双(二苯基膦)‑二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.44g，1.77mmol)，然后将反应在氮气下再脱气一次。反应混合物在100℃下加热2小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑15％的甲醇/二氯+ 甲烷洗脱，得到标题化合物(4.91g，76％)。MS m/z：547.3[M+1]。 [0441] 步骤7. 2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸 [0442] [0443] 向2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸乙酯(4.91g，8.98mmol)在THF/MeOH/水(90mL，1/1/1)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(1.50g，35.9mmol)。在室温下搅拌2小时后，减压除去溶剂，用浓盐酸中和所得残余物。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑45％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗+脱，得到标题化合物(4.01g，86％)。MS m/z：519.3[M+1]。 [0444] 步骤8. 2‑[[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑(1H‑咪唑并[4，5‑c]吡啶‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0445] [0446] 向2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)‑苯基]‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基]乙酸(0.200g，0.385mmol)、3，4‑二氨基吡啶(0.084g，0.770mmol)和HATU(0.219g，0.577mmol)在DMF(4mL)中的溶液中加入DIPEA(0.265mL，1.53mmol)。在室温下搅拌2小时后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤两次，有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用0‑50％的ACN/含有+0.1％甲酸的水洗脱，得到酰胺中间体(172mg，73％)，为白色固体。MS m/z：610.3[M+1]。 [0447] 向上述酰胺中间体(0.172g，0.282mmol)中加入乙酸(3.66mL)。在80℃下搅拌30分钟后，减压除去溶剂。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用0‑40％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱。合并产物级分并减压浓缩以除去有机溶剂。残余水溶液用饱和碳酸氢钠溶液碱化，并用乙酸乙酯萃取两次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标+ 题化合物(143mg，86％)。MS m/z：592.3[M+1]。 [0448] 步骤9. 2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(1H‑咪唑并[4，5‑c]吡啶‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(化合物015) [0449] [0450] 向2‑[[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑(1H‑咪唑并[4，5‑c]吡啶‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.143g，0.241mmol)在二氯甲烷(5.2mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，0.6mL，2.40mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂。向残余物中加入乙醚并经由过滤分离所得固体，得到标题化合物(131mg，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：10.52(br s，1H)，10.09(s，1H)，9.31(br s，1H)，8.50(d，1H)，8.00(d， 1H)，7.84‑7.89(m，2H)，7.62‑7.68(m，3H)，7.30(d，2H)，7.01‑7.09(m，2H)，6.91‑6.96(m， 1H)，6.85(m，1H)，4.74(d，1H)，4.16(d，1H)，3.38‑3.50(m，2H)，2.92‑3.08(m，2H)，2.74‑+ 2.85(m，1H)，2.66‑2.73(m，3H)，1.84‑2.08(m，4H)；MS m/z：548.3[M+1]。 [0451] 通过与实施例2类似的方法由起始物料2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯和5‑溴‑2‑(溴‑甲基)‑苯甲酸甲酯或5‑溴‑2‑(溴甲基)烟酸甲酯和相应的硼酸酯和二氨基芳基制备以下化合物： [0452] [0453] [0454] [0455] 通过与实施例2类似的方法由起始物料2‑氨基‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯和5‑溴‑2‑(溴‑甲基)‑苯甲酸甲酯或6‑(溴甲基)‑3‑氯‑2‑氟苯甲酸甲酯和相应的硼酸酯和二氨基芳基制备以下化合物： [0456] [0457] [0458] 实施例3：2‑[(R)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1酮和2‑[(S)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑ 6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮的制备 [0459] (化合物022和023) [0460] [0461] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)‑苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(0.600g，1.02mmol)在饱和碳酸氢钠溶液和乙酸乙酯之间分配。水相用另外的乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过具备Chiralpak IA柱的制备型SFC纯化，用45％(0.3％TEA/MeOH)/55％CO2在10MPa下洗脱以分离对映异构体。每个分离的对映异构体的手性中心的绝对构型 20 1 是未知的。第一洗脱峰(022)(120mg，22％收率，94：6er)；[a] D‑34.2°(c＝0.12，MeOH)；H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.02(s，1H)，7.84‑7.90(m，1H)，7.52‑7.63(m，5H)，7.36(d， 2H)，7.20‑7.27(m，2H)，7.14(s，1H)，6.97‑7.05(m，1H)，6.86‑6.91(m，1H)，6.73‑6.79(m， 1H)，4.76(d，1H)，4.26(d，1H)，2.99‑3.08(m，2H)，2.56‑2.66(m，1H)，2.35(s，3H)，2.21(m， 2H)，1.77‑1.94(m，4H)；MS m/z：547.2[M+1]+。第二洗脱峰(023)(154mg，28％收率，89： 20 1 11er)；[a] D+28.0°(c＝0.1，MeOH)；H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.02(s，1H)，7.84‑ 7.89(m，1H)，7.52‑7.64(m，5H)，7.36(d，2H)，7.20‑7.27(m，2H)，7.14(s，1H)，6.96‑7.06(m， 1H)，6.86‑6.92(m，1H)，6.74‑6.79(m，1H)，4.76(d，1H)，4.27(d，1H)，3.00‑3.09(m，2H)，+ 2.56‑2.68(m，1H)，2.36(s，3H)，2.23(m，2H)，1.78‑1.94(m，4H)；MS m/z：547.3[M+1]。 [0462] 实施例4：6‑[2‑(6‑氨基‑3‑吡啶基)乙炔基]‑2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物012)的制备 [0463] 方案3. [0464] [0465] 步骤1. 2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸 [0466] [0467] 向2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸乙酯(22.0g，48.6mmol)在THF/MeOH/水(300mL，1/1/1)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(6.10g，145mmol)。在室温下搅拌3小时后，减压除去溶剂并用HCl(1M)将所得残余物调节至 1 pH 3。过滤收集所得固体并用水洗涤，得到标题化合物(18.2g，88％)。H NMR(400MHz， CDCl3)δ：8.20(br s，1H)，7.90(d，1H)，7.56(dd，1H)，7.19(s，1H)，6.94‑7.15(m，3H)，6.35(s，1H)，5.03‑5.10(m，2H)，4.63(d，1H)，3.89(d，1H)，3.27‑3.36(m，3H)。 [0468] 步骤2. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮 [0469] [0470] 向2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸(18.2g，42.9mmol)、1，2‑二氨基苯(9.27g，85.8mmol)和HATU(32.6g，85.8mmol)在DMF(200mL)中的溶液中加入DIPEA(30.3mL，42.4mmol)。在室温下搅拌10小时后，反应混合物用乙酸乙酯稀释并用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤两次，有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压 浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用NH4OH/MeOH/DCM(1/5/100)洗脱，得到酰胺中间体 1 (15.5g，70％)，为黄色固体。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：9.72(s，1H)，7.88(d，1H)，7.75‑ 7.85(m，1H)，7.51‑7.69(m，1H)，7.08‑7.23(m，4H)，6.89‑6.96(m，1H)，6.74(dd，1H)，6.53‑ 6.60(m，1H)，6.31(s，1H)，5.11‑5.27(m，2H)，4.85(br s，2H)，4.62(d，1H)，3.94‑4.08(m， 1H)，3.25(s，3H)。 [0471] 向上述酰胺中间体(15.5g，30.1mmol)中加入乙酸(150mL)。在80℃下搅拌30分钟后，减压除去溶剂。用饱和碳酸氢钠溶液中和反应混合物，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物用乙酸乙酯重结晶，得到标题化合物 + (12.5g，84％)。MS m/z：497.3[M+1]。 [0472] 步骤3. 6‑[2‑(6‑氨基‑3‑吡啶基)乙炔基]‑2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮 [0473] [0474] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮(0.150g，0.302mmol)、5‑乙炔基吡啶‑2‑胺(0.071g，0.604mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.012g，0.017mmol)、碘化酮(I)(0.006g，0.030mmol)和TEA/DMF(3mL，1/1)的混合物在氮气下脱气两次。反应混合物在100℃下加热过夜。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取两次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用5‑100％的ACN/含有0.1％的甲酸洗脱，得到标题化合+ 物(66g，41％)。MS m/z：534.2[M+1]。 [0475] 步骤4. 6‑[2‑(6‑氨基‑3‑吡啶基)乙炔基]‑2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物012) [0476] [0477] 向6‑[2‑(6‑氨基‑3‑吡啶基)乙炔基]‑2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮(0.066g，0.123mmol)在二氯甲烷(2.6mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，0.305mL，1.22mmol)。在室温下搅拌2小时后，减压除去溶剂。粗产物通过反1 相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得到标题化合物(6mg，10％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：8.16(s，1H)，7.68‑7.78(m，2H)，7.59‑7.64(m，1H)，7.44‑7.56(m， 3H)，7.11‑7.19(m，2H)，7.00‑7.09(m，1H)，6.77‑6.97(m，3H)，6.43‑6.48(m，3H)，4.70‑4.86+ (m，1H)，4.20‑4.36(m，1H)；MS m/z：490.2[M+1]。 [0478] 通过与实施例4类似的方法由起始物料2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮和相应的乙炔制备以下化合物： [0479] [0480] [0481] 实施例5：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氧‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(化合物032)的制备 [0482] 方案4. [0483] [0484] 步骤1：3‑氯‑2‑氟‑6‑甲基‑苯甲酸 [0485] [0486] 在‑70℃下向1‑氯‑2‑氟‑4‑甲基‑苯(10.0g，69.1mmol)在THF(100mL)中的溶液中滴加LDA(2M in THF，36.2mL，72.5mmol)。在‑70℃下搅拌0.5小时后，向反应混合物中加入CO2(9.10g)并在相同温度下搅拌1小时。温热至室温后，减压除去溶剂。向残余物中加入水，混合物用乙酸乙酯洗涤两次。用HCl(1M)将水相调节至pH 1，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物(3.5g，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：13.38(br s，1H)，7.51‑7.58(m，1H)，7.16(d，1H)，2.33(s，3H)。 [0487] 步骤2：3‑氯‑2‑氟‑6‑甲基‑苯甲酸甲酯 [0488] [0489] 在0C下向3‑氯‑2‑氟‑6‑甲基‑苯甲酸(3.50g，18.5mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入草酰氯(4.69g，37.0mmol)。在相同温度下搅拌0.5小时后，减压除去溶剂。将残余物溶解在甲醇(20mL)中，并加入三乙胺(7.47g，74.0mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂，粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用3％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物1 (1.9g，51％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：7.60‑7.66(m，1H)，7.20(d，1H)，3.90(s，3H)，2.32(s，3H)。 [0490] 步骤3：6‑(溴甲基)‑3‑氯‑2‑氟‑苯甲酸甲酯 [0491] [0492] 向3‑氯‑2‑氟‑6‑甲基‑苯甲酸甲酯(1.90g，9.37mmol)在四氯化碳(20mL)中的溶液中加入N‑溴代琥珀酰亚胺(1.66g，9.37mmol)和过氧化苯甲酰(0.452g，1.87mmol)。在80℃下搅拌12小时，减压除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用1％的乙酸乙酯/石油醚洗1 脱，得到标题化合物(0.9g，34％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.45‑7.52(m，1H)，7.19(d，1H)， 4.62(s，2H)，4.02(s，3H)。 [0493] 步骤4：2‑(6‑氯‑7‑氟‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸乙酯 [0494] [0495] 向2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯(1.06g，4.14mmol)在DMF(15mL)中的溶液中加入DIPEA(1.23g，9.57mmol)。反应混合物在室温搅拌5分钟后，加入6‑(溴甲基)‑3‑氯‑2‑氟‑苯甲酸甲酯(0.900g，3.19mmol)。反应混合物在100℃下加热1小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用33％的乙酸乙+ 酯/石油醚，得到标题化合物(800mg，59％)。MS m/z：426.1[M+1]。 [0496] 步骤5：2‑(6‑氯‑7‑氟‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸 [0497] [0498] 向2‑(6‑氯‑7‑氟‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基‑甲氧基)苯基]乙酸乙酯(0.800g，1.87mmol)在THF/MeOH/水(15mL，1/1/1)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.314g，7.48mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂，并用HCl(1M)将所得残余物调节至pH3。过滤收集所得固体并用水洗涤，得到标题化合物(750mg，定量)。MSm/z：398.0[M+ +1]。 [0499] 步骤6：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑氯‑7‑氟‑异吲哚啉‑1‑酮 [0500] [0501] 向2‑(6‑氯‑7‑氟‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基‑甲氧基)苯基]乙酸(0.750g，1.88mmol)、1，2‑二氨基苯(0.213g，1.97mmol)和HATU(1.07g，2.82mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入DIPEA(0.728g，5.64mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配。水相用另外的乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到酰胺中间体(800mg，87％)，其无需进一步纯化即可用+于下一步反应。MS m/z：488.3[M+1]。 [0502] 向上述酰胺中间体中加入乙酸(15mL)。在80℃下搅拌0.5小时后，减压除去溶剂。用饱和碳酸氢钠溶液中和反应混合物，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物用乙酸乙酯重结晶，得到标题化合物(550mg，72％)。MS m/z： + 470.0[M+1]。 [0503] 步骤7：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0504] [0505] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑氯‑7‑氟‑异吲哚啉‑1‑酮(0.550g，1.17mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(0.385g，1.28mmol)、碳酸钠(0.487g，3.51mmol)、SPhos(0.192g，0.468mmol)、Pd2(dba)3(0.321g，0.351mmol)和二噁烷(10mL)的混合物在氮气下脱气两次。 反应混合物在105℃下加热4小时。冷却至室温后，减压除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法+ 纯化，用10％的甲醇/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(120mg，17％)。MS m/z：609.3[M+1]。 [0506] 步骤8：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(化合物032) [0507] [0508] 向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.120g，0.197mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，0.985mL，3.94mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂。向残余物中加入乙醚并经由过滤分离所得固体，得到标题化合物(112mg，94％)。1H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：10.51(br s，1H)，10.29(br s，1H)，7.74‑7.82(m，1H)，7.65‑7.73(m，2H)，7.49‑7.59(m，3H)，7.35‑7.49(m，4H)，6.97‑7.22(m，4H)，4.80(d，1H)，4.25(d，1H)，3.48‑3.51(m，2H)，3.03‑3.13(m，2H)，2.85‑2.93(m，1H)，2.73‑2.81(m，3H)，1.91‑2.15(m，4H)；MS m/z：565.3+ [M+1]。 [0509] 实施例6：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑（1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]吲唑(035)和2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]吲唑‑2‑基]甲基]‑4‑氟‑苯酚；盐酸盐(034)的制备 [0510] 方案5. [0511] [0512] 步骤1. 2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸乙酯 [0513] [0514] 向2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸(0.900g，4.88mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中加入硫酸(0.983mL，18.5mmol)。在70℃下搅拌2小时后，减压除去溶剂，所得残余物用乙酸乙酯稀释，并用饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合1 物(900mg，93％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.01‑6.90(m，2H)，6.85‑6.77(m，1H)，3.81(s， 3H)，3.72(s，3H)，3.66‑3.61(m，2H)。 [0515] 步骤2. 2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸甲酯 [0516] [0517] 向2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸甲酯(0.900g，5.44mmol)在四氯化碳(20mL)中的溶液中加入N‑溴代琥珀酰亚胺(0.968g，5.44mmol)和过氧化苯甲酰(0.109g，0.454mmol)。在80℃下搅拌16小时后，减压除去溶剂。粗化合物通过硅胶柱色谱纯化，用12％的乙酸乙 1 酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(1.2g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.42(dd，1H)， 6.98‑7.07(m，1H)，6.83(dd，1H)，5.90‑5.80(m，1H)，3.87(s，3H)，3.82(s，3H)。 [0518] 步骤3. 2‑(6‑溴‑7‑氟‑吲唑‑2‑基)‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸 [0519] [0520] 向2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸甲酯(0.579g，2.09mmol)和6‑溴‑7‑氟‑1H‑吲唑(0.450g，2.09mmol)在乙腈(15mL)中的溶液中加入碳酸铯(0.814g，2.50mmol)。在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌1小时后，将反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配。水相用另外的乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓+缩，得到酯中间体。MS m/z：412.9[M+1]。 [0521] 向上述中间体在THF/MeOH/水(15mL，1/1/1)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.336g，8.01mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂并将所得残余物在水和乙酸乙酯之间分配。用5％柠檬酸将水相调节至pH 3，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用35％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(280mg，26％)。1H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：8.57(d，1H)，7.53(d，+ 1H)，7.38‑7.11(m，4H)，6.82(s，1H)，3.82(s，3H).MS m/z：398.8[M+1]。 [0522] 步骤4. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)甲基]‑6‑溴‑7‑氟‑吲唑[0523] [0524] 向2‑(6‑溴‑7‑氟‑吲唑‑2‑基)‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸(0.280g，0.704mmol)、1，2‑二氨基苯(0.091g，0.844mmol)和TBTU(0.270g，0.844mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入DIPEA(0.091g，0.704mmol)。在室温下搅拌16小时后，将反应混合物在饱和氯化钠和乙酸乙酯之间分配。水相用乙酸乙酯萃取三次，合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用35％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到酰+ 胺中间体。MS m/z：488.8[M+1]。 [0525] 向上述酰胺中间体中加入乙酸(15mL)。在80℃下搅拌30分钟后，减压除去溶剂。反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次，有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物(330mg，67％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ：10.75(br s，1H)，8.20(d，1H)，7.67(s，1H)，7.56(s，1H)，7.46‑7.36(m，1H)，7.29‑7.20(m，2H)，7.07(dd，1H)，7.00+(dd，1H)，6.90‑6.99(m，1H)，6.75(dd，1H)，6.64(s，1H)，3.69(s，3H)；MS m/z：470.8[M+1]。 [0526] 步骤5. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]吲唑(化合物035) [0527] [0528] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)甲基]‑6‑溴‑7‑氟‑吲唑(0.200g，0.426mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(0.140g，0.468mmol)、碳酸钠(0.146g，1.06mmol)、[1，1′双‑(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(0.047g，0.064mmol)和二噁烷/水(8mL，4/1)的混合物在氮气下脱气。反应混合物在100℃下加热20小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用6％的甲醇/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(150mg，62％)。1H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：12.67(s，1H)，8.58(d，1H)，7.60‑7.65(m，3H)，7.49‑7.57(m，3H)， 7.37(d，2H)，7.14‑7.33(m，5H)，6.98(m，1H)，3.80(s，3H)，2.99‑3.14(m，2H)，2.56‑2.65(m，+ 1H)，2.19‑2.42(m，5H)，1.68‑1.91(m，4H)；MS m/z：564.3[M+1]。 [0529] 步骤6. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]吲唑‑2‑基]甲基]‑4‑氟‑苯酚；盐酸盐(化合物034) [0530] [0531] 在0℃下向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)甲基]‑7‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]吲唑(0.150g，0.266mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液中加入三溴化硼(0.666g，2.66mmol)。在室温下搅拌2小时后，反应混合物用二氯甲烷稀释并倒入冰水中。水相用二氯甲烷萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。 粗产物通过反向HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水(0.05％HCl改性剂)洗脱，得到标题化合物 1 (25mg，30％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：10.10‑10.47(m，2H)，8.65(d，1H)，7.51‑7.72(m， 6H)，7.29‑7.42(m，4H)，7.11‑7.23(m，2H)，6.99(m，1H)，6.90(m，1H)，3.48‑3.57(m，2H)，+ 3.00‑3.14(m，2H)，2.76‑2.93(m，4H)，1.92‑2.10(m，4H)；MS m/z：550.3[M+1]。 [0532] 通过与实施例6类似的方法由起始物料2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基苯基)乙酸甲酯或2‑溴‑2‑苯基乙酸甲酯和相应的双环制备以下实施例： [0533] [0534] [0535] [0536] [0537] 化合物067和068：2‑[(R)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮和2‑[(S)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮 [0538] [0539] 2‑[(rac)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)‑苯基]异喹啉‑1‑酮；二盐酸盐(069，0.050g，0.079mmol)通过具备Chiral Technologies Chiralpak IG(5micron 250x10mm)柱(在40℃下)的制备型SPC纯化，用55％ (0.3％TEA/MeOH)/45％CO2在BPR 10MPa下洗脱以分离对映异构体。每个分离的对映异构体 的手性中心的绝对构型是未知的。第一洗脱峰(067)(17.0mg，38％收率，98.5：1.5er)；[α 20 1 ] D‑12.9(c＝0.31，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：12.6‑12.9(m，1H)，9.9‑10.2(m，1H)，8.28(d， 1H)，7.94(s，1H)，7.82(dd，1H)，7.74(d，2H)，7.65(s，1H)，7.54(br s，2H)，7.39(d，2H)， 7.29(d，1H)，7.19(br dd，2H)，7.1(m，1H)，6.89(dd，1H)，6.6‑6.7(m，2H)，2.88(d，2H)，2.5‑+ 2.6(m，1H)，2.20(s，3H)，1.9‑2.1(m，2H)，1.6‑1.8(m，4H)；MS m/z：559.3[M+1]。第二洗脱 20 1 峰(068)(14.1mg，31％收率，1.5：98.5er)；[α] D+14.1(c＝0.64，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ： 12.6‑12.9(m，1H)，9.9‑10.2(m，1H)，8.28(d，1H)，7.94(s，1H)，7.82(dd，1H)，7.74(d，2H)， 7.65(s，1H)，7.54(br s，2H)，7.39(d，2H)，7.29(d，1H)，7.19(br dd，2H)，7.1(m，1H)，6.89(dd，1H)，6.6‑6.7(m，2H)，2.88(d，2H)，2.5‑2.6(m，1H)，2.20(s，3H)，1.9‑2.1(m，2H)，1.6‑+ 1.8(m，4H)；MS m/z：559.3[M+1]。 [0540] 化合物065和066：2‑[(R)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑8‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮和2‑[(S)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑8‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮的制备 [0541] [0542] 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑8‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮；盐酸盐(070，0.012g，0.020mmol)通过具备Phenomenex Lux Cellulose‑4柱的制备型SPC纯化，用55％(0.3％TEA/MeOH)/45％CO2在10MPa下洗脱以分离对映异构体。每个分离的对映异构体的手性中心的绝对构型是未知的。第一洗脱峰(065) 20 1 (3mg，27％收率，100：0er)；[α] D‑13.3(c＝0.37，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：12.69(br s， 1H)，9.95(br s，1H)，7.68‑7.73(m，3H)，7.37‑7.58(m，4H)，7.32(d，2H)，7.22(d，1H)，7.08‑ 7.16(m，2H)，6.99‑7.07(m，1H)，6.80‑6.86(m，1H)，6.56‑6.63(m，2H)，2.81(d，2H)，2.45‑+ 2.50(m，1H)，2.13(s，3H)，1.85‑1.96(m，2H)，1.57‑1.73(m，4H)；MS m/z：577.3[M+1]。第二 20 1 洗脱峰(066)(4mg，36％收率，100：0er)；[α] D+14.8(c＝0.27，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ： 12.69(br s，1H)，9.98(br s，1H)，7.68‑7.73(m，3H)，7.38‑7.58(m，4H)，7.32(d，2H)，7.22(d，1H)，7.08‑7.18(m，2H)，6.99‑7.06(m，1H)，6.80‑6.86(m，1H)，6.56‑6.63(m，2H)，2.81(d，2H)，2.45‑2.52(m，1H)，2.13(s，3H)，1.83‑1.96(m，2H)，1.57‑1.73(m，4H)；MS m/z： + 577.3[M+1]。 [0543] 实施例7：3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮；盐酸盐(化合物006)的制备 [0544] 方案6. [0545] [0546] 步骤1. 2‑[(2‑氨基‑5‑溴‑苯甲酰基)氨基]‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑乙酸乙酯 [0547] [0548] 向2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯(10.0g，38.8mmol)和6‑溴‑2，4‑二氢‑1H‑3，1‑苯并噁嗪‑2，4‑二酮(10.3g，42.6mmol)在THF(80mL)中的溶液中加入三乙胺(7.85g，77.6mmol)。在40℃下搅拌3小时后，减压除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法 1 纯化，用25％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(5g，28％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：8.95(d，1H)，7.77(d，1H)，7.29(dd，1H)，7.15‑7.22(m，3H)，6.69(d，1H)，6.57(s，2H)， 5.99(d，1H)，5.19‑5.27(m，2H)，4.09‑4.18(m，2H)，3.38(s，3H)，1.14‑1.18(m，3H)。 [0549] 步骤2. 2‑(6‑溴‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯 [0550] [0551] 2‑[(2‑氨基‑5‑溴‑苯甲酰基)氨基]‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸乙酯(5.25g，11.5mmol)在三乙氧基甲烷(20mL)中的溶液在110℃下搅拌22小时。冷却至室温后，减压除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用10‑33％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标1 题化合物(2.2g，41％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：8.25‑8.29(m，2H)，8.02(dd，1H)，7.66(d，1H)，7.26‑7.37(m，2H)，7.14‑7.21(m，1H)，6.68(s，1H)，5.17‑5.25(m，2H)，4.22‑4.30(m，2H)，3.26(s，3H)1.15‑1.25(m，3H)。 [0552] 步骤3. 2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基]乙酸乙酯 [0553] [0554] 将2‑(6‑溴‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸乙酯(2.2g，4.72mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(1.98g，6.60mmol)、碳酸钾(1.96g，14.1mmol)和二噁烷/水(20mL，4/1)的混合物在氮气下脱气。加入[1，1′双(二苯基膦)‑二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(0.690g，0.944mmol)，然后将反应在氮气下再脱气一次。反应混合物于105℃下加热3小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑15％的甲醇/二氯甲烷洗+ 脱，得到标题化合物(1.8g，68％)。MS m/z：560.4[M+1]。 [0555] 步骤4. 2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基]乙酸 [0556] [0557] 向2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)‑苯基]‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基]乙酸乙酯(1.80g，3.21mmol)在THF/MeOH/水(30mL，1/1/1)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.404g，9.62mmol)。在室温下搅拌3小时后，减压除去溶剂，并用HCl(1M)将所得残余物调节至pH 3。过滤收集所得固体并用水洗涤，得到标题化合物(1.5g，+ 88％)。MS m/z：532.1[M+1]。 [0558] 步骤5. 3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮 [0559] [0560] 向2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑2‑[6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)‑苯基]‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基]乙酸(0.900g，1.69mmol)、1，2‑二氨基苯(0.218g，2.02mmol)和HATU(0.962g，2.53mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入DIPEA(0.545g，4.22mmol)。在室温下搅拌10小时后，向反应混合物中加入饱和氯化钠。过滤收集所得固体并用水洗涤。粗产物通过硅+ 胶柱色谱法纯化，用0‑10％的甲醇/二氯甲烷洗脱，得到酰胺中间体。MS m/z：622.3[M+1]。 [0561] 向上述酰胺中间体中加入乙酸(8mL)。在80℃下搅拌3小时后，减压除去溶剂。用饱和碳酸氢钠溶液中和反应混合物，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物用乙酸乙酯重结晶，得到标题化合物(170mg，50％)。MS m/z： + 604.3[M+1]。 [0562] 步骤6. 3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)‑苯基]喹唑啉‑4‑酮；盐酸盐(化合物006) [0563] [0564] 向3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮(0.120g，0.198mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，0.495mL，1.98mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂。向残余物中加入乙 1 醚，过滤分离所得固体，得到标题化合物(160mg，91％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：10.28‑ 10.48(m，2H)，8.38(s，1H)，8.29(s，1H)，8.22(d，1H)，7.75‑7.86(m，3H)，7.68(m，2H)，7.59(s，1H)，7.34‑7.45(m，4H)，7.20(m，1H)，6.96‑7.06(m，2H)，3.47‑3.54(m，2H)，3.00‑3.15+ (m，2H)，2.75‑2.92(m，4H)，1.92‑2.13(m，4H)；MS m/z：560.3[M+1]。 [0565] 通过与实施例7类似的方法由起始物料2‑(6‑溴‑4‑氧代‑喹唑啉‑3‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯和相应的硼酸酯，或由2‑氨基‑2‑苯基乙酸酯制备以下化合物： [0566] [0567] 实施例8：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基(1，4，5，6‑四氢环戊烷并[c]吡唑‑3‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物033)的制备 [0568] 方案7. [0569] [0570] 步骤1. 2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]乙腈 [0571] [0572] 向1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑甲醛(3.25g，11.5mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中加入2‑(氨基甲基)‑5‑溴苯甲酸盐酸盐(3.25g，11.5mmol)、DIPEA(4.73mL，28.7mmol)和三甲基硅烷氰化物(1.35g，13.7mmol)。反应混合物在75℃下加热16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取 三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用1‑20％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(1.77g，32％)。MS m/z： + 488.2[M+1]。 [0573] 步骤2. 2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]乙酸 [0574] [0575] 在冰浴下向2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]乙腈(0.950g，1.94mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中滴加氢氧化锂水溶液(2M，4.85mL，9.70mmol)。在100℃下搅拌2小时后，反应混合物用水稀释并用乙酸调节至pH 5。水相用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过C18柱色谱法纯化，用0‑70％的ACN/含有10mM乙酸铵的水+ 洗脱，得到标题化合物(420mg，43％)。MS m/z：507.1[M+1]。 [0576] 步骤3：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮 [0577] [0578] 向2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]乙酸(0.250g，0.494mmol)、1，2‑二氨基苯(0.120g， 1.11mmol)和HATU(0.377g，0.987mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入DIPEA(0.342mL， 1.97mmol)。在室温下搅拌5小时后，向反应混合物中加入饱和氯化钠。过滤收集所得固体并用水洗涤，得到酰胺中间体，其无需进一步纯化即可用于下一步反应。MS m/z：597.2[M+1+ ]。 [0579] 向上述酰胺中间体中加入乙酸(8mL)。在80℃下搅拌1小时后，减压除去溶剂。粗产物通过C18柱色谱纯化，用0‑100％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱，得到标题化合物+ (220mg，58％)。MS m/z：579.2[M+1]。 [0580] 步骤4. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮[0581] [0582] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮(0.100g，0.173mmol)、1‑甲基‑4‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]哌啶(0.060g，0.199mmol)、碳酸钠(0.024g，0.222mmol)在二噁烷/水(4.5mL，7/2)中的混合物在氮气下脱气。加入[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(0.028g，0.035mmol)，然后将反应 在氮气下再脱气一次。反应混合物在105℃下加热1.5小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过C18柱色谱纯化，用0‑100％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱，得到标题化+ 合物(88mg，76％)。MS m/z：673.4[M+1]。 [0583] 步骤5. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基(1，4，5，6‑四氢环戊烷并[c]吡唑‑3‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物033) [0584] [0585] 向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.087g，0.129mmol)在水(0.464mL)中的溶液中加入三氟乙酸(2mL)。在室温下搅拌过夜后，减压除 去溶剂。粗产物通过C18柱色谱纯化，用0‑100％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱，得到标题 1 化合物(44mg，63％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：12.56(br s，1H)，8.20(s，1H)，7.87‑7.98(m，2H)，7.64‑7.75(m，3H)，7.47‑7.62(m，2H)，7.37(d，2H)，7.12‑7.24(m，2H)，6.85(s，1H)， 4.92(d，1H)，4.35(d，1H)，2.98‑3.05(m，2H)，2.54‑2.66(m，3H)，2.27‑2.38(m，5H)，2.14‑+ 2.27(m，3H)，1.89‑2.01(m，1H)，1.69‑1.86(m，4H)；MS m/z：543.4[M+1]。 [0586] 通过与实施例8类似的方法由起始物料2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]乙酸和吡啶‑2，3‑二胺制备化合物031： [0587] [0588] 实施例9：3‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基)‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑4(3H)‑酮2，2，2‑三氟乙酸酯(化合物009)的制备[0589] 方案8. [0590] [0591] 步骤1. 3‑氨基‑6‑溴吡啶甲酸甲酯 [0592] [0593] 将3‑氨基吡啶甲酸甲酯(650mg，4.27mmol)在H2SO4(207mL，4mmol)和水(13mL)中的混合物用溴(200mL，4.27mmol)在乙酸(800mL)中的溶液在一分钟内逐滴处理。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，并用10N NaOH碱化至pH 6。将混合物用EtOAc萃取三次。合并有机萃取物，用饱和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，用 1 0‑60％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(600mg，61％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)dppm + 7.45(d，1H)7.22(d，1H)6.89(s，2H)3.82(s，3H)；MS m/z：232.9[M+1]。 [0594] 步骤2. 3‑氨基‑6‑溴吡啶甲酸 [0595] [0596] 3‑氨基‑6‑溴吡啶甲酸甲酯(600mg，2.6mmol)、氢氧化锂一水合物(600mg 14.3mmol)在THF(6mL)、MeOH(1.5mL)和水(1.5mL)中的混合物在室温下搅拌45分钟。减压除去溶剂。将残余物溶解在水(20mL)中并用2N HCl调节至pH 6。过滤收集白色固体，用冷水洗 1 涤，并干燥，得到标题化合物(400mg，71％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)d ppm7.19(d，1H)7.43+ (d，1H)；MS m/z：218.9[M+1]。 [0597] 步骤3. 2‑(3‑氨基‑6‑溴吡啶酰胺)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯[0598] [0599] 3‑氨基‑6‑溴吡啶甲酸(167mg，0.77mmol)、2‑氨基‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(237mg，0.92mmol)、HATU(585mg，1.54mmol)和DIPEA(401mL，2.31mmol)在脱气DMF(2mL)中的混合物在60℃下搅拌1小时。冷却后，将反应混合物倒入饱和盐水(20mL)中，并用EtOAc萃取三次。合并有机萃取物，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，用0‑55％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物(315mg，90％)。MS m/z：458.0[M+1+]。 [0600] 步骤4. 2‑(6‑溴‑4‑氧代吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑3(4H)‑基)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基)乙酸乙酯 [0601] [0602] 在密封小瓶中的2‑(3‑氨基‑6‑溴吡啶酰胺)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基)乙酸乙酯(315mg，0.68mmol)在原甲酸三乙酯(4mL)中的混合物在微波中于210℃下加热2小时。冷却后，减压除去过量的原甲酸三乙酯，残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑65％的乙 1 酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(310mg，98％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)dppm8.37(s， 1H)8.06‑8.09(m，2H)7.36(dd，1H)7.25‑7.32(m，1H)7.17‑7.23(m，1H)6.71(s，1H)5.19‑+ 5.25(m，2H)4.27(q，2H)3.29(s，3H)1.19‑1.23(m，3H)；MS m/z：468.0[M+1]。 [0603] 步骤5. 2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)‑2‑(6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑4‑氧代吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑3(4H)‑基)乙酸 [0604] [0605] 将2‑(6‑溴‑4‑氧代吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑3(4H)‑基)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(310mg，0.73mmol)、1‑甲基‑4‑(4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基)哌啶(265mg，0.88mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM(119mg，0.146mmol)和碳酸钠(232mg，2.19mmol)在二噁烷∶水(4∶1，7.5mL)中的混合物在氮气下于100℃下加热24小时。冷却后，将反应混合物过滤，浓缩滤液，通过反相HPLC纯化，用0‑80％的ACN/水(0.035％TFA 1 改性剂)洗脱，得到标题化合物(151mg，39％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)d ppm 9.36(br s， 1H)8.43(d，1H)8.33(d，1H)8.20(m，3H)7.44(d，2H)7.41(dd，1H)7.24‑7.33(m，1H)7.19(dd， 1H)6.67(s，1H)5.25(d，1H)5.22(d，1H)3.56(d，2H)3.28(s，3H)3.11(m，2H)2.91(m，1H)2.84+ (d，3H)2.03‑2.13(m，2H)1.81‑1.96(m，2H).MS m/z：533[M+1]。 [0606] 步骤6. 3‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)甲基)‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑4(3H)‑酮 [0607] [0608] 2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)‑2‑(6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑4‑氧代吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑3(4H)‑基)乙酸(75mg，0.14mmol)、邻苯二胺(31mg，0.28mmol)、HATU(106mg，0.28mmol)和DIPEA(156mL，0.90mmol)在脱气DMF(3mL)中的混合物在60℃下搅拌1.5小时。反应混合物通过反相HPLC纯化，用0‑80％的ACN/水(0.035％TFA改性剂)洗脱，得+ 到酰胺中间体。MS m/z：623.7[M+1]。 [0609] 将上述酰胺中间体溶解在乙酸(5mL)中并在110℃下加热1小时。减压除去过量乙+ 酸，得到标题化合物，其无需进一步纯化即可用。MS m/z：605.4[M+1]。 [0610] 步骤7. 3‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基)‑6‑(4‑(1‑甲基哌叮‑4‑基)苯基)吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑4(3H)‑酮2，2，2‑三氟乙酸酯(化合物009) [0611] [0612] 3‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基)甲基)‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)吡啶并[3，2‑d]嘧啶‑4(3H)‑酮的上述物料用5mL的1∶1DCM/TFA处理6小时。减压除去溶剂，残余物通过反相HPLC纯化，用0‑80％的ACN/水(0.035％TFA改性剂)洗1 脱，得到标题化合物(14mg，15％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)d ppm 10.20(s，1H)9.30(br s， 1H)8.46(d，1H)8.31(s，1H)8.23(d，1H)8.21(d，2H)7.58(m，3H)7.43(d，2H)7.24(m，2H)7.17(m，1H)6.94(dd，1H)6.80(m，1H)3.55(d，2H)3.10(m，2H)2.90(m，，1H)2.85(d，3H)2.08(m，+ 2H)1.87(m，2H)；MS m/z：561.3[M+1]。 [0613] 通过与实施例9类似的方法由起始物料相应的胺和酸制备以下化合物： [0614] [0615] [0616] 通过与实施例9类似的方法由起始物料2‑氨基‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯和相应的酸制备以下化合物： [0617] [0618] [0619] 化合物077：3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑5‑甲氧基‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮；二盐酸盐 [0620] 方案9 [0621] [0622] 步骤1. 6‑氨基‑N‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑3‑溴‑2‑甲氧基‑苯甲酰胺 [0623] [0624] 向6‑溴‑5‑甲氧基‑2，4‑二氢‑1H‑3，1‑苯并噁嗪‑2，4‑二酮(0.350g，1.28mmol)在THF(30mL)中的溶液中加入2‑氨基‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)‑乙酸乙酯(0.385g，1.28mmol)。在70℃下搅拌12小时后，将反应混合物减压浓缩，并通过反相HPLC纯化，用0‑ 1 100％的ACN/水(0.035％TFA改性剂)洗脱，得到标题化合物(0.21g，31％)。H NMR(DMSO‑d6)δ：12.28‑12.38(m，1H)，9.34‑9.45(m，1H)，7.52‑7.60(m，1H)，7.39‑7.48(m，1H)，7.26‑7.32(m，2H)，7.13‑7.20(m，4H)，6.83(d，1H)，6.46(d，1H)，6.11(s，2H)，5.24(d，1H)，5.17(d，+ 1H)，3.62(s，3H)，3.26(s，3H)；MS m/z：529.1[M+1]。 [0625] 步骤2. 3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑5‑甲氧基‑喹唑啉‑4‑酮 [0626] [0627] 6‑氨基‑N‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑甲基]‑3‑溴‑2‑甲氧基‑苯甲酰胺(0.200g，0.377mmol)在原甲酸三乙酯(20mL)中的混合物在210℃下加热2小时。冷却至室温后，反应混合物减压浓缩，通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水1 (0.035％TFA改性剂)洗脱，得到标题化合物(0.14g，69％)。H NMR(DMSO‑d6)δ：12.88(br s， 1H)，8.18‑8.32(m，1H)，7.94‑8.14(m，1H)，7.59‑7.75(m，2H)，7.47‑7.56(m，1H)，7.38‑7.47(m，1H)，7.23(d，4H)，6.76‑6.96(m，1H)，5.10‑5.26(m，2H)，3.82(s，3H)，3.13(s，3H)；MS m/+ z：539.1[M+1]。 [0628] 步骤3. 3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑5‑甲氧基‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮 [0629] [0630] 3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑5‑甲氧基‑喹唑啉‑4‑酮(0.100g，0.185mmol)、1‑甲基‑4‑(4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基)哌啶(0.056g，0.185mmol)、Pd(dppf)Cl2(0.014g，0.019mmol)和碳酸钾(0.050g，0.370mmol)在二噁烷∶DMF∶水(1∶1∶1，10mL)中的溶液中在氮气下于100℃下加热 12小时。冷却后，反应混合物过滤，滤液减压浓缩，通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水 1 (0.035％TFA改性剂)洗脱，得到标题化合物(0.085g，73％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.27‑8.37(m，2H)，8.11‑8.19(m，1H)，7.81‑7.90(m，1H)，7.70‑7.74(m，1H)，7.59‑7.64(m，4H)，7.35‑7.43(m，2H)，7.28‑7.31(m，2H)，7.19‑7.25(m，1H)，6.82‑6.88(m，1H)，5.17‑ 5.25(m，2H)，3.60‑3.68(m，2H)，3.53(s，3H)，3.11‑3.25(m，5H)，2.93‑2.97(m，4H)，1.98‑+ 2.24(m，4H)；MS m/z：634.5[M+1]。 [0631] 步骤4. 3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑5‑甲氧基‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮；二盐酸盐 [0632] [0633] 向3‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑5‑甲氧基‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]喹唑啉‑4‑酮(0.075g，0.118mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入HCl/甲醇(4M，0.590mL，2.36mmol)。在室温下搅拌12小时后，减压除去溶剂。粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水(0.05％HCl改性剂)洗脱，得到标题化合物(0.026g，1 37％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.41(s，1H)，7.92(d，1H)，7.73‑7.82(m，2H)，7.52‑ 7.69(m，6H)，7.37‑7.45(m，2H)，7.21‑7.35(m，2H)，6.99‑7.07(m，1H)，3.60‑3.68(m，2H)， 3.53(s，3H)，3.15‑3.26(m，2H)，2.89‑3.05(m，4H)，1.98‑2.20(m，4H)；MS m/z：590.7[M+1+ ]。 [0634] 化合物078：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑硫酮；二盐酸盐 [0635] 方案10 [0636] [0637] 步骤1. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑硫酮；二盐酸盐 [0638] [0639] 向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(1.00g，1.82mmol)甲苯(20mL)中的溶液中加入Lawesson试剂(3.68g，9.10mmol)。在120℃下搅拌72小时后，减压除去溶剂。粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％ 1 的ACN/水(0.05％HCl改性剂)洗脱，得到标题化合物(0.026g，3％)。H NMR(DMSO‑d6)δ： 10.33‑10.99(m，2H)，7.96‑8.21(m，2H)，7.63‑7.90(m，6H)，7.36‑7.54(m，4H)，7.14‑7.24(m，1H)，6.92‑7.16(m，2H)，5.08‑5.26(m，1H)，4.40‑4.57(m，1H)，3.00‑3.14(m，3H)，2.86‑+ 2.98(m，2H)，2.80(s，3H)，1.96‑2.19(m，4H)；MS m/z：563.1[M+1]。 [0640] 化合物083和084：2‑[(R)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑硫酮和2‑[(S)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑硫酮的制备 [0641] [0642] 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑硫酮；二盐酸盐(0.013g，0.020mmol)通过具备Phenomenex Lux Cellulose‑4柱的制备型SFC纯化，用45％(0.3％TEA/MeOH)/55％CO2在10MPa下洗脱以分离对映异构体。每个分离的对映异构体的手性中心的绝对构型是未知的。第一个洗脱峰(083) 20 1 (4mg，31％收率，100：0er)；[α] D‑88.9(c＝0.18，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：12.74(br s， 1H)，10.06(br s，1H)，8.06(s，1H)，7.93(d，1H)，7.73(d，1H)，7.45‑7.69(m，5H)，7.39(d， 2H)，7.08‑7.26(m，3H)，6.88‑6.98(m，1H)，6.62‑6.71(m，1H)，5.08‑5.20(m，1H)，4.38‑4.49(m，1H)，2.85‑2.94(m，2H)，2.53‑2.57(m，1H)，2.21(s，3H)，1.94‑2.06(m，2H)，1.66‑1.83+ 20 (m，4H)；MS m/z：563.3[M+1] 。第二洗脱峰(084)(4mg，31％收率，99：1er)；[α] D+56.0(c＝ 1 0.25，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：12.74(br s，1H)，10.08(br s，1H)，8.06(s，1H)，7.93(d， 1H)，7.73(d，1H)，7.44‑7.69(m，5H)，7.39(d，2H)，7.08‑7.24(m，3H)，6.89‑7.00(m，1H)， 6.60‑6.71(m，1H)，5.07‑5.20(m，1H)，4.37‑4.51(m，1H)，2.84‑2.95(m，2H)，2.53‑2.58(m，+ 1H)，2.21(s，3H)，1.93‑2.06(m，2H)，1.64‑1.84(m，4H))；MS m/z：563.2[M+1]。 [0643] 化合物085：2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0644] 方案11 [0645] [0646] 步骤1. 2‑甲基‑N‑[(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)亚甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺 [0647] [0648] 向4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑甲醛(5.00g，45.4mmol)和2‑甲基丙烷‑2‑亚磺酰胺(8.25g，68.1mmol)在THF(80mL)中的溶液中加入原钛酸四乙酯(15.5g，68.1mmol)。在75℃下搅拌16小时后，用水淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑100％的乙酸乙酯/石油醚 1 洗脱，得到标题化合物(3g，31％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：10.13‑10.62(m，1H)，8.41(s， 1H)，6.76‑7.04(m，1H)，2.19‑2.45(m，3H)，1.09‑1.25(m，9H)；MS m/z：214.2[M+1]。 [0649] 步骤2.N‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺 [0650] [0651] 在‑78℃下向2‑甲基‑N‑[(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)亚甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺(2.30g，10.7mmol)在THF(50mL)中的溶液中滴加5‑氟‑2‑甲氧基苯基溴化镁在THF(0.5M，64.0mL，32.0mmol)中的溶液。在室温下搅拌16小时后，将反应混合物倒入饱和氯化铵溶液中，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。 粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑10％甲醇/乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(0.5g， + 14％)。MS m/z：340.1[M+1]。 [0652] 步骤3.(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲胺 [0653] [0654] 在0℃下向N‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺(0.560g，1.64mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，1.23mL，4.92mmol)。在室温下搅拌16小时后，减压除去溶剂，得到标题化合物(0.385g，定量)，其无+ 需进一步纯化即可用于下一步反应。MS m/z：236.0[M+1]。 [0655] 步骤4. 6‑溴‑2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]异吲哚啉‑1‑酮 [0656] [0657] 向(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲胺(0.380g，1.61mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入DIPEA(1.31mL，8.04mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入5‑溴‑2‑(溴甲基)‑苯甲酸甲酯(0.495g，1.61mmol)。反应混合物在90℃下加热16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑100％的乙1 酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(0.28g，40％)。H NMR(DMSO‑d6)δ：11.76‑12.10(m， 1H)，7.75‑7.84(m，2H)，7.50‑7.60(m，1H)，7.17‑7.26(m，1H)，7.02‑7.13(m，1H)，6.88‑6.96(m，1H)，6.74‑6.83(m，1H)，6.56(s，1H)，4.64‑4.75(m，1H)，3.96‑4.08(m，1H)，3.72(d，3H)， 2.10(d，3H)。 [0658] 步骤5. 2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0659] [0660] 6‑溴‑2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]异吲哚啉‑1‑酮(0.280g，0.650mmol)、1‑甲基‑4‑(4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基)哌啶(0.293g，0.975mmol)、Pd(dppf)Cl2(0.024g，0.033mmol)和碳酸钾(0.271g，1.95mmol)在二噁烷∶水(9∶1，5mL)中的混合物在氮气下于100℃下加热16小时。冷却后，将反应混合物过滤，滤液减压浓缩，通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水ACN/水(0.05％+ HCl改性剂)洗脱，得到标题化合物(0.2g，59％)。MS m/z：525.3[M+1]。 [0661] 步骤6. 2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0662] [0663] 在0℃下向2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.150g，0.285mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中加入三溴化硼(0.713g，2.85mmol)。在室温下搅拌2小时后，反应混合物用二氯甲烷稀释并倒入冰水中。水相用二氯甲烷萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩.粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得到1 标题化合物(0.068g，47％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：11.81‑12.07(m，1H)，10.05(br s， 1H)，7.80‑7.95(m，2H)，7.59‑7.6(m，3H)，7.35(d，2H)，6.96‑7.08(m，1H)，6.53‑6.90(m， 4H)，4.72(d，1H)，4.10(d，1H)，2.89(d，2H)，2.53‑2.57(m，1H)，2.21(s，3H)，1.90‑2.12(m，+ 5H)，1.62‑1.80(m，4H)；MS m/z：511.4[M+1]。 [0664] 通过与化合物085类似的方法由起始物料(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲胺和6‑(溴甲基)‑3‑氯‑2‑氟苯甲酸甲酯制备以下化合物： [0665] [0666] [0667] 化合物086：2‑[(3‑氟苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0668] [0669] 通过与化合物085类似的方法由起始物料2‑甲基‑N‑[(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)亚1 甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺和3‑氟苯基溴化镁制备标题化合物。H NMR(DMSO‑d6)δ：11.80‑ 12.26(m，1H)，8.19(s，1H)，7.86‑7.96(m，2H)，7.63‑7.71(m，3H)，7.41‑7.49(m，1H)，7.37(d，2H)，7.15‑7.23(m，1H)，7.02‑7.12(m，2H)，6.72(s，1H)，4.82(d，1H)，4.28(d，1H)，2.93‑ 3.01(m，2H)，2.56‑2.62(m，1H)，2.29(s，3H)，2.09‑2.19(m，5H)，1.67‑1.84(m，4H)；MS m/z： + 495.3[M+1] [0670] 化合物087：2‑[(4，5‑二甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0671] [0672] 通过与化合物085类似的方法由起始物料4，5‑二甲基‑1H‑咪唑‑2‑甲醛和2‑甲基1 丙烷‑2‑亚磺酰胺制备标题化合物。H NMR(DMSO‑d6)δ：11.75(br s，1H)，10.19(br s，1H)， 7.84‑7.89(m，2H)，7.59‑7.70(m，3H)，7.36(d，2H)，6.98‑7.08(m，1H)，6.80‑6.91(m，2H)， 6.72(s，1H)，4.69(d，1H)，4.13(d，1H)，2.89(d，2H)，2.45‑2.49(m，1H)，2.21(s，3H)，1.94‑+ 2.12(m，8H)，1.63‑1.84(m，4H)；MS m/z：525.3[M+1] [0673] 化合物088：2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(2‑甲基‑1H‑咪唑‑5‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；二盐酸盐 [0674] [0675] 通过与化合物085类似的方法由起始物料2‑甲基‑1H‑咪唑‑5‑甲醛和2‑甲基丙烷‑1 2‑亚磺酰胺制备标题化合物。H NMR(DMSO‑d6)δ：10.54(br s，1H)，10.11(br s，1H)，7.86‑ 7.99(m，2H)，7.62‑7.75(m，3H)，7.33‑7.44(m，3H)，7.05‑7.15(m，1H)，6.87‑7.01(m，2H)， 6.75(s，1H)，4.54(d，1H)，4.22(d，1H)，3.49‑3.52(m，2H)，2.99‑3.12(m，2H)，2.70‑2.91(m，+ 4H)，2.54(s，3H)，1.94‑2.10(m，4H)；MS m/z：511.2[M+1] [0676] 化合物089：2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(5‑甲基‑4H‑1，2，4‑三唑‑3‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐 [0677] 方案12 [0678] [0679] 步骤1. 2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑乙酰肼 [0680] [0681] 向2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酸乙酯(0.900g，1.98mmol)在乙醇(30mL)中的溶液中加入肼(0.618mL，19.7mmol)。在80℃下搅1 拌16小时后，将反应混合物减压浓缩，得到标题化合物(0.75g，86％)。H NMR(DMSO‑d6)δ： 9.62(s，1H)，8.92(br s，2H)，7.73‑7.89(m，2H)，7.52(d，1H)，7.04‑7.25(m，3H)，6.11(s，+ 1H)，5.02‑5.20(m，2H)，4.63(d，1H)，3.88(d，1H)，3.19(s，3H)；MS m/z：438.1[M+1]。 [0682] 步骤2. 6‑溴‑2‑[[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑(5‑甲基‑4H‑1，2，4‑三唑‑3‑基)甲基]异吲哚啉‑1‑酮 [0683] [0684] 向2‑(6‑溴‑1‑氧代‑异吲哚啉‑2‑基)‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]乙酰肼(0.400g，0.912mmol)和乙亚氨基胺盐酸盐(0.258g，2.73mmol)在丁醇(80mL)中的混悬液中加入叔丁醇钾/THF(1M，2.73mL，2.73mmol)。反应混合物在120℃下加热16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑10％的甲醇/二氯甲烷洗1 脱，得到标题化合物(0.185g，44％)。H NMR(DMSO‑d6)δ：13.63(br s，1H)，7.72‑7.86(m， 2H)，7.54(d，1H)，7.09‑7.25(m，2H)，6.81‑6.98(m，2H)，5.14(d，2H)，4.65(d，1H)，3.95‑+ 4.08(m，1H)，3.21(s，3H)，2.34(s，3H)；MS m/z：461.0[M+1]。 [0685] 步骤3. 2‑[[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑(5‑甲基‑4H‑1，2，4‑三唑‑3‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0686] [0687] 6‑溴‑2‑[[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑(5‑甲基‑4H‑1，2，4‑三唑‑3‑基)甲基]异吲哚啉‑1‑酮(0.100g，0.216mmol)、[4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基]硼酸(0.057g，0.259mmol)、Pd(dppf)Cl2(0.016g，0.022mmol)和碳酸钠(0.071g，0.648mmol)在二噁烷∶水(4∶1，5mL)中的溶液在氮气下于100℃下加热16小时。冷却后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用15％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(0.07g，58％)。 + MS m/z：556.3[M+1]。 [0688] 步骤4. 2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(5‑甲基‑4H‑1，2，4‑三唑‑3‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐 [0689] [0690] 通过与实施例076、步骤4类似的方法由起始物料2‑[[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]‑(5‑甲基‑4H‑1，2，4‑三唑‑3‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮1 制备标题化合物。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.02(d，1H)，7.85‑7.93(m，1H)，7.60‑ 7.69(m，3H)，7.41(d，2H)，7.03‑7.10(m，2H)，6.87‑6.99(m，2H)，4.76(d，1H)，4.24(d，1H)， 3.64(d，2H)，3.14‑3.25(m，2H)，2.86‑3.01(m，4H)，2.62(s，3H)，2.00‑2.21(m，4H)；MS m/z： + 512.4[M+1]。 [0691] 实施例10：3‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(苯基)甲基)‑5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)喹唑啉‑4(3H)‑酮2，2，2‑三氟乙酸酯(化合物003)的制备 [0692] 方案13. [0693] [0694] 步骤1. 6‑氨基‑3‑溴‑2‑氟苯甲酸 [0695] [0696] 6‑氨基‑3‑溴‑2‑氟苯甲腈(2.56mg，11.8mmol)、氢氧化锂一水合物(4.99g，118mmol)和水(70mL)的混合物加热回流1小时。冷却后，用6N HCl将溶液处理至pH 4。过滤 1 所得沉淀，用水洗涤，干燥，得到标题化合物(2.51g，92％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)dppm + 7.39(dd，1H)6.57(dd，1H)；MS m/z：234.0[M+1]。 [0697] 步骤2. 6‑溴‑5‑氟喹唑啉‑4(3H)‑酮 [0698] [0699] 6‑氨基‑3‑溴‑2‑氟苯甲酸(950mg，4.0mmol)和甲酰胺(20mL)的混合物在160℃下加热8小时。冷却后，将反应混合物倒入水中(100mL)并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用1 0‑35％的EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物(490mg，50％)。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)d ppm + 8.13(d，1H)8.05(dd，1H)7.45(dd，1H)；MS m/z：241.9[M+1]。 [0700] 步骤3. 2‑(6‑溴‑5‑氟‑4‑氧代喹唑啉‑3(4H)‑基)‑2‑苯乙酸甲酯 [0701] [0702] 向6‑溴‑5‑氟喹唑啉‑4(3H)‑酮(440mg，1.9mmol)和Cs2CO3(1.20g，3.7mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入2‑溴‑2‑苯乙酸甲酯(349mL，2.2mmol)，混合物在30℃加热1小时。冷却后，将反应混合物倒入水(250mL)中并用EtOAc萃取三次。合并有机萃取物，用饱和盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用0‑30％的EtOAc/己1 烷洗脱，得到标题化合物(290mg，39％)。H NMR(500MHz，CDCl3‑d)d ppm 7.82‑7.91(m，2H)+ 7.45‑7.52(m，3H)7.33‑7.43(m，3H)6.72(s，1H)3.88(s，3H)；MS m/z：390.0[M+1]。 [0703] 步骤4. 2‑(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑4‑氧代喹唑啉‑3(4H)‑基)‑2‑苯乙酸 [0704] [0705] 通过与实施例9、步骤5类似的方法由起始物料2‑(6‑溴‑5‑氟‑4‑氧代喹唑啉‑3(4H)‑基)‑2‑苯乙酸甲酯和1‑甲基‑4‑(4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑1 基)苯基)哌啶制备标题化合物。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)dppm 9.35(br s，1H)8.11(s，1H) 7.94‑7.99(m，1H)7.60(m，3H)7.52‑7.56(m，2H)7.43‑7.51(m，3H)7.40(m，2H)6.49(s，1H) 3.56(d，2H)3.06‑3.16(m，2H)2.84(d，4H)2.05‑2.13(m，2H)1.80‑1.93(m，2H)；MS m/z： + 472.2[M+1]。 [0706] 步骤5. 3‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(苯基)甲基)‑5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)喹唑啉‑4(3H)‑酮2，2，2‑三氟乙酸酯(化合物003) [0707] [0708] 通过与实施例9、步骤6类似的方法由起始物料2‑(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)1 苯基)‑4‑氧代喹唑啉‑3(4H)‑基)‑2‑苯乙酸制备标题化合物。H NMR(500MHz，DMSO‑d6)dppm 9.29(br s，1H)8.32(s，1H)7.94‑8.03(m，1H)7.56‑7.64(m，5H)7.54(s，1H)7.44‑7.49(m， 3H)7.35‑7.42(m，4H)7.17‑7.29(m，2H)3.50‑3.59(m，2H)3.04‑3.16(m，2H)2.84(m，4H)+ 2.04‑2.13(m，2H)1.79‑1.93(m，2H)；MS m/z：544.3[M+1] [0709] 实施例11：中间体的制备 [0710] 方案14. [0711] [0712] 步骤1. 4‑(4‑溴‑2‑氟‑苯基)‑1‑甲基‑哌啶‑4‑醇 [0713] [0714] 在‑70℃下向4‑溴‑2‑氟‑1‑碘‑苯(24.0g，79.7mmol)在THF(400mL)中的溶液中滴加正丁基锂(2.5M在己烷中，31.9mL，79.7mmol)。在‑70℃下搅拌30min后，滴加1‑甲基哌啶‑4‑酮(9.01g，79.7mmol)在THF(20mL)中的溶液。在‑70℃下搅拌1小时后，将反应混合物倒入饱和氯化铵溶液中，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用5‑66％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标+ 题化合物(13.0g，57％)。MS m/z：289.8[M+1]。 [0715] 步骤2. 4‑(4‑溴‑2‑氟‑苯基)‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶 [0716] [0717] 4‑(4‑溴‑2‑氟‑苯基)‑1‑甲基‑哌啶‑4‑醇(13.0g，45.1mmol)和6M HCl(70mL)的混合物在85℃下加热过夜。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中，用饱和碳酸氢钠将反应混合物调节至pH 8，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用5‑66％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题+化合物(4.0g，31％)。MS m/z：271.7[M+1]。 [0718] 步骤3. 4‑[2‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶 [0719] [0720] 将4‑(4‑溴‑2‑氟‑苯基)‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶(3.00g，11.1mmol)、4，4，5，5‑四甲基‑2‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷(2.81g，11.1mmol)、[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)(0.812g，1.11mmol)、乙酸钾(3.26g，33.3mmol)和二噁烷(30mL)的混合物在氮气下脱气两次。反应混合物在90℃下加热16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用5‑50％ 1 的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(3.0g，85％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ： 7.49(dd，1H)，7.27‑7.40(m，2H)，6.01‑6.03(m，1H)，3.18‑3.21(m，2H)，2.72‑2.80(m，2H) 2.57‑2.65(m，2H)，2.43(s，3H)1.30‑1.39(m，12H)。 [0721] 步骤4. 4‑[2‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑1‑甲基‑哌啶 [0722] [0723] 向钯(10％碳，1.10g，0.945mmol)在甲醇(200mL)中的溶液中加入4‑[2‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶(3.00g， 9.45mmol)。抽空烧瓶，用氢气回填，并让反应混合物在氢气气氛(30psi)下于30℃下搅拌16小时。反应混合物通过硅藻土垫过滤，硅藻土垫用甲醇洗涤数次。减压浓缩滤液，得到标题 1 化合物(2.7g，85％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：7.49(d，1H)，7.26‑7.36(m，2H)，3.00‑ 3.10(m，2H)，2.83‑2.98(m，1H)，2.37(s，3H)，2.18‑2.31(m，2H)，1.79‑1.89(m，4H)，1.27‑ 1.39(m，12H)。 [0724] 方案SM‑1 [0725] [0726] 步骤1. 3‑甲基‑6‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑3‑氮杂双环‑[4.1.0]庚烷 [0727] [0728] 在0℃下向二乙基锌(1M在己烷中，10.0mL，10.0mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入二碘甲烷(2.67g，10.0mmol)。在相同温度下搅拌0.5小时后，向反应混合物中滴加4‑(1‑甲基‑1，2，3，6‑四氢吡啶‑4‑基)苯基硼酸频哪醇酯(0.500g，1.67mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液。在室温下搅拌18小时后，将反应混合物倒入饱和氯化铵溶液中，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用5‑50％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(0.310g，59％)。MS + m/z：314.2[M+1]。 [0729] 方案SM‑2 [0730] [0731] 步骤1. 5‑乙基‑6‑碘‑3H‑喹唑啉‑4‑酮 [0732] [0733] 向6‑氨基‑2‑乙基‑3‑碘苯甲酸(3.50g，12.0mmol)在乙醇(70mL)中的溶液中加入甲脒乙酸(5.94g，57.1mmol)，反应混合物在95℃下加热6小时。冷却至室温后，过滤收集所1 得固体，用乙醇洗涤，得到标题化合物(2.10g，58％)。H NMR(DMSO‑d6)δ：8.19(d，1H)，8.06(s，1H)，7.26(d，1H)，3.41‑3.59(m，2H)，1.04‑1.16(m，3H)。 [0734] 实施例12：2‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基‑d)‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)异吲哚啉‑1‑酮(化合物036)的制备 [0735] 方案15. [0736] [0737] 2‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基)‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)异吲哚啉‑1‑酮(101mg，0.185mmol)在CD3OD(10g)和D2O(1mL)中搅拌，以得到非均相混1 合物。然后加入甲酸(40uL，1.07mmol)，所得溶液搅拌过夜。16小时后，反应溶液的 H NMR(甲醇‑d4)表明，基于在7.16ppm处的次甲基峰的积分面积，在次甲基碳上约50％氘掺入量。 1 反应加热至50℃并另外搅拌8小时，用H NMR(甲醇‑d4)表明>90％氘掺入量。加入另外40uL 1 甲酸(1.07mmol)，反应在氮气气氛下于50℃下另外搅拌6小时。H NMR(甲醇‑d4)表明在次甲基碳上100％氘参入量。向反应溶液中加入DCl溶液(100uL，35weight％in D2O)。10分钟后，浓缩反应溶液，残余物真空干燥过夜，得到96mg白色固体。 [0738] 粗产物通过硅胶色谱柱法纯化，用100％乙酸乙酯至60％乙酸乙酯/40％[10％1 (28％氨水/水)/90％MeOH]洗脱，得到标题化合物，为白色粉末。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.02(s，1H)，7.84‑7.90(m，1H)，7.52‑7.63(m，5H)，7.33‑7.39(m，2H)，7.20‑7.27(m， 2H)，6.97‑7.05(m，1H)，6.86‑6.91(m，1H)，6.73‑6.79(m，1H)，4.76(d，1H)，4.26(d，1H)， 2.99‑3.08(m，2H)，2.56‑2.66(m，1H)，2.35(s，3H)，2.21(m，2H)，1.77‑1.94(m，4H)；MS m/z： 548.3[M+1]+。 [0739] 通过与实施例12的方法制备化合物037和038。然后粗产物在Jasco半制备SFC上使用Chiralpak IA(10x250mm 5micron)纯化，用45％(0.3％TEA/MeOH)/55％CO2在背压调节 器(BPR)值为10MPa下和流速10mL/min洗脱，以分离对应异构体。每个分离的对映异构体的 1 手性中心的绝对构型是未知的。第一洗脱峰(27.4mg，27％)；H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.02(s，1H)，7.84‑7.90(m，1H)，7.52‑7.63(m，5H)，7.33‑7.39(m，2H)，7.20‑7.27(m，2H)， 6.97‑7.05(m，1H)，6.86‑6.91(m，1H)，6.73‑6.79(m，1H)，4.76(d，1H)，4.26(d，1H)，2.99‑ 3.08(m，2H)，2.56‑2.66(m，1H)，2.35(s，3H)，2.21(m，2H)，1.77‑1.94(m，4H)；MS m/z：548.3+ 1 [M+1]。第二洗脱峰(31mg，28％)；H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.02(s，1H)，7.84‑7.89(m，1H)，7.52‑7.64(m，5H)，7.36(d，2H)，7.20‑7.27(m，2H)，6.96‑7.06(m，1H)，6.86‑6.92(m，1H)，6.74‑6.79(m，1H)，4.76(d，1H)，4.27(d，1H)，3.00‑3.09(m，2H)，2.56‑2.68(m，1H)，+ 2.36(s，3H)，2.23(m，2H)，1.78‑1.94(m，4H)；MS m/z：548.3[M+1]。 [0740] 实施例13：2‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)methyl‑d)‑6‑(4‑(1‑甲基哌叮‑4‑基)苯基)异吲哚啉‑1‑酮‑3，3‑d2(化合物039)的制备 [0741] 方案16. [0742] [0743] 2‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基)‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)异吲哚啉‑1‑酮(24.5mg，0.047mmol)在CD3OD(1g)中搅拌。加入D2O(0.5mL)和碳酸钠1 (9.84mg，0.093mmol)，混合物在密封小瓶中在50℃下搅拌18小时。反应混合物的H NMR(甲醇‑d4)表明，基于在7.16ppm处的次甲基峰的积分面积，在次甲基碳上＞95％氘掺入量，在 1 内酰胺亚甲基碳上的约60％氘参入量。反应在60℃下另外搅拌48小时。反应混合物的 H NMR(甲醇‑d4)表明次甲基碳和内酰胺亚甲基碳均完全氘代。反应冷却至室温，然后加入35重量％的DCl在D2O(50uL，0.48mmol)中的溶液。搅拌几分钟后，浓缩反应，残余物通过硅胶色谱法纯化，用100％的DCM至100％(10％7N NH3/MeOH/DCM)洗脱，得到标题化合物(18mg， 1 70％)，为白色粉末。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δppm12.08‑13.11(m，1H)9.72‑10.71(m，1H) 7.86‑7.92(m，2H)7.60‑7.69(m，3H)7.52(br s，2H)7.35(d，J＝8.19Hz，2H)7.17(br dd，J＝ 5.81，3.00Hz，2H)7.01‑7.11(m，1H))6.91(dd，J＝8.80，4.77Hz，1H)6.80(dd，J＝9.41， 3.06Hz，1H)3.05‑3.21(m，1H)2.87(br d，J＝11.25Hz，2H)1.87‑2.06(m，2H)2.19(s，3H)+ 1.62‑1.81(m，4H)；MS m/z：550.3[M+1]。 [0744] 实施例14：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑[2‑(二甲基‑氨基)乙氧基]苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(化合物040) [0745] 方案17 [0746] [0747] 步骤1.N‑(1H‑苯并咪唑‑2‑yl亚甲基)‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺 [0748] [0749] 向1H‑1，3‑苯并二唑‑2‑甲醛(75.0g，513mmol)和2‑甲基‑2‑丙亚磺酰胺(93.2g，769mmol)在THF(1L)中的溶液中加入乙醇钛(IV)(175g，769mmol)。在75℃下搅拌16小时后，加入水，反应混合物用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。向残余物中加入乙酸乙酯和石油醚(1/1)的溶液，过滤分离所得固体，得到 1 标题化合物(65g，51％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：10.92(s，1H)，8.70‑8.91(m，1H)，7.89(d， 1H)，7.53(d，1H)，7.37(dd，2H)，1.19‑1.32(m，9H)。 [0750] 步骤2.N‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺 [0751] [0752] 在‑65℃下向2‑溴‑4‑氟‑1‑(甲氧基甲氧基)苯(84.6g，360mmol)在THF(600mL)中的溶液中滴加正丁基锂(2.5M在己烷中，158mL，396mmol)。在‑65℃下搅拌20分钟后，将反应混合物插管加到N‑(1H‑苯并咪唑‑2‑yl亚甲基)‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺(45.0g，180mmol)在THF(1100mL)中的预冷(‑65℃)溶液中。在‑65℃下搅拌40分钟后，将反应混合物温热至15℃。反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取三次。用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱 1 法纯化，用33‑100％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(40g，38％)。H NMR (400MHz，CDCl3)δ：11.26(s，1H)，7.32‑7.77(m，2H)，7.14‑7.23(m，3H)，7.10(dd，1H)，6.87‑ 7.02(m，1H)，5.96(d，1H)，5.13(d，1H)，4.93‑5.05(m，2H)，3.29(s，3H)，1.27‑1.41(m，9H)。 [0753] 步骤3. 1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲胺 [0754] [0755] 在0℃下向N‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺(30.0g，73.9mmol)在甲醇(600mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，55.2mL，221mmol)。在室温下搅拌15小时后，反应混合物用水稀释，用饱和碳酸氢钠溶液调节至pH 8。水相用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并 1 减压浓缩，得到标题化合物(30.0g，定量)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.56(s，2H)，7.19‑7.26(m，2H)，7.06‑7.12(m，2H)，6.89‑6.97(m，1H)，5.64(s，1H)，5.12(d，2H)，3.32‑3.41(m，3H)+ .MS m/z：302.3[M+1]。 [0756] 步骤4. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮 [0757] [0758] 向1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲胺(23.0g，76.3mmol)在DMF(250mL)中的溶液中加入DIPEA(37.5mL，228mmol)。反应混合物在室温下搅拌5分钟后，然后加入5‑溴‑2‑(溴甲基)‑苯甲酸甲酯(28.1g，91.5mmol)。反应混合物在90℃下加热16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、1 盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物(29.5g，78％)。H NMR (400MHz，DMSO‑d6)δ：12.69(s，1H)，7.87(d，1H)，7.80(dd，1H)，7.54‑7.64(m，2H)，7.47(d， 1H)，7.13‑7.25(m，4H)，7.09(s，1H)，6.92(dd，1H)，5.10‑5.22(m，2H)，4.74(d，1H)，4.17(d，+ 1H)，3.14‑3.23(m，3H)；MS m/z：496.1[M+1]。 [0759] 步骤5. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑[2‑(二甲基氨基)乙氧基]苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0760] [0761] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮(160mg，0.322mmol)、N‑[2‑(二甲基氨基)乙基]‑N‑甲基‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯胺(132mg，0.436mmol)、碳酸钠(89.0mg，0.840mmol)和二噁烷/水(5mL，4/1)的混合物在氮气下脱气两次。加入[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(41.1mg，0.050mmol)，然后将反应混合物在氮气下再脱气一次。反应混合物在100℃下加热2小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三 次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩.粗产物通过反相HPLC纯 1 化，用0‑55％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱，得到标题化合物(101mg，53％)。H NMR (400MHz，methanol‑d4)δ：8.00(s，1H)，7.84(dd，1H)，7.51‑7.64(m，5H)，7.19‑7.27(m，4H)， 7.09‑7.17(m，1H)，7.05(d，2H)，6.86(dd，1H)，5.06‑5.19(m，2H)，4.70(d，1H)，4.28(d，1H)，+ 4.16(m，2H)，3.20(s，3H)，2.80(m，2H)，2.36(s，6H)；MS m/z：581.3[M+1]。 [0762] 步骤6. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑[2‑(二甲基氨基)‑乙氧基]苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(化合物040) [0763] [0764] 向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑[2‑(二甲基氨基)乙氧基]苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.108g，0.185mmol)在二氯甲烷(3.97mL)中的溶液中加入HCl/己烷(4M，0.462mL，1.85mmol)。在室温下搅拌1小时后，减压除去溶剂。向残余物1 中加入乙醚，过滤分离所得固体，得到标题化合物(91mg，86％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ： 10.37(br s，1H)，10.22(br s，1H)，7.83‑7.89(m，2H)，7.60‑7.69(m，5H)，7.34‑7.45(m， 2H)，7.01‑7.13(m，5H)，6.94(dd，1H)，4.71(d，1H)，4.35(t，2H)，4.19(d，1H)，3.42‑3.49(m，+ 2H)，2.79(d，6H)；MS m/z：537.3[M+1]。 [0765] 实施例15：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物049) [0766] 方案18 [0767] [0768] 步骤1.tert‑butyl 3‑[4‑[2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑3‑氧代‑异吲哚啉‑5‑基]苯基]氮杂环丁‑1‑甲酸叔丁酯 [0769] [0770] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮(191mg，0.384mmol)、3‑[4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑ 1‑氮杂环丁甲酸叔丁酯(158mg，0.441mmol)、碳酸钠(105mg，0.990mmol)和二噁烷/水(9mL， 4/1)的混合物在氮气下脱气两次。加入[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(62.7mg，0.077mmol)，然后将反应混合物在氮气下再脱气一次。反应混合物在100℃下加热1小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化， 1 用0‑75％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(164mg，66％)。H NMR(400MHz， methanol‑d4)δ：8.08(s，1H)，7.89‑7.96(m，1H)，7.68‑7.75(m，2H)，7.45‑7.67(m，5H)， 7.21‑7.31(m，4H)，7.12‑7.19(m，1H)，6.86‑6.93(m，1H)，5.12‑5.19(m，2H)，4.75(d，1H)， 4.36‑4.45(m，2H)，4.33(d，1H)，3.96‑4.04(m，2H)，3.90(d，1H)，3.23(s，3H)，1.50(s，9H)； + MS m/z：649.3[M+1]。 [0771] 步骤2. 6‑[4‑(氮杂环丁‑3‑基)苯基]‑2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮 [0772] [0773] 向3‑[4‑[2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基]甲基]‑3‑氧代‑异吲哚啉‑5‑基]苯基]氮杂环丁‑1‑甲酸叔丁酯(164mg，0.252mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入乙醇73.5μL，1.26mmol)和溴化锌(283mg，1.26mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物加入到1NNaOH溶液和甲醇的混合物中，过滤分离所得固体，得到标题化合物+ (44mg，32％)。MS m/z：549.3[M+1]。 [0774] 步骤3. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑氮杂环丁‑3‑基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0775] [0776] 向6‑[4‑(氮杂环丁‑3‑基)苯基]‑2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮(45mg，0.082mmol)在甲醇(0.983mL)中的溶液中加入甲醛(37％在水中，60.9μL，0.164mmol)。反应混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入氰基硼氢化钠(10.3mg，91.5mmol)。反应混合物在室温下搅拌5小时。用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应混合物并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩.粗产物通过反相HPLC纯化，用10‑100％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱，得到标题化 1 合物(14mg，30％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.57(s，1H)，8.07(d，1H)，7.89‑7.96(m， 1H)，7.53‑7.74(m，5H)，7.44‑7.49(m，2H)，7.22‑7.29(m，4H)，7.10‑7.18(m，1H)，6.85‑6.91(m，1H)，5.13‑5.18(m，2H)，4.75(d，1H)，4.33(d，1H)，4.04‑4.14(m，2H)，3.91‑4.03(m，1H)，+ 3.59‑3.73(m，2H)，3.23(s，3H)，2.65(s，3H)；MS m/z：563.3[M+1]。 [0777] 步骤4. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(化合物049) [0778] [0779] 向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(14.0mg，0.0248mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，62.0μL，0.248mmol)。在室温下搅拌过夜后，减压除去溶剂。粗产物通过反相HPLC纯化，用10‑100％的ACN/含有0.1％甲酸的水洗脱，得到标题化合物(3mg，23％)。1 H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：8.06(s，1H)，7.88‑7.94(m，1H)，7.68‑7.74(m，2H)，7.63‑ 7.67(m，1H)，7.52‑7.61(m，2H)，7.44‑7.51(m，2H)，7.23‑7.29(m，2H)，7.16(s，1H)，7.00‑ 7.07(m，1H)，6.89‑6.95(m，1H)，6.75‑6.81(m，1H)，4.74‑4.82(m，1H)，4.29(d，1H)，4.09‑+ 4.19(m，2H)，3.94‑4.06(m，1H)，3.70‑3.80(m，2H)，2.70(s，3H)；MS m/z：519.2[M+1]。 [0780] 实施例16：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)氧基苯基]异吲哚啉‑1‑酮；二盐酸盐(化合物056) [0781] 方案19 [0782] [0783] 步骤1. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)异吲哚啉‑1‑酮 [0784] [0785] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮(6.30g，12.6mmol)、双(频哪醇)二硼(3.19g，12.6mmol)、乙酸钾(3.70g，37.8mmol)和二噁烷(160mL)的混合物在氮气下脱气两次。加入[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(0.921mg，1.26mmol，然后将反应混合物在氮气下再脱气一次。反应混合物在100℃下加热12小时。冷却至室温后，反应混合物通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液 1 并用乙酸乙酯和石油醚(1/1)的混合物研磨，得到标题化合物(5.10g，75％)。H NMR (400MHz，CDCl3)δ：11.78(br s，1H)，8.17(s，1H)，7.89(d，1H)，7.75(s，1H)，7.35‑7.47(m， 2H)，7.16‑7.26(m，4H)，6.94(dd，2H)，4.75‑4.83(m，2H)，4.69(d，1H)，4.45(d，1H)，2.98(s，+ 3H)，1.33(d，12H)；MS m/z：544.1[M+1]。 [0786] 步骤2. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)氧基苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0787] [0788] 将2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)异吲哚啉‑1‑酮(0.309g，0.569mmol)、3‑(4‑碘苯氧基)‑1‑甲基氮杂环丁(0.150g，0.518mmol)、碳酸钾(0.215g，1.55mmol)和二噁烷/水(6mL，10/1)的混合物在氮气下脱气两次。加入[1，1′‑双(二苯基‑膦)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物(75.3mg，0.259mmol)，然后将反应混合物在氮气下再脱气一次。反应混合物在105℃下加热4小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯+ 化，用11％的甲醇/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(150mg，50％)。MS m/z：579.1[M+1]。 [0789] 步骤3. 2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)氧基苯基]异吲哚啉‑1‑酮；二盐酸盐(化合物056) [0790] [0791] 向2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基氮杂环丁‑3‑基)氧基苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.150g，0.259mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，3.0mL，12.0mmol)。在室温下搅拌3小时后，减压除去溶剂。粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水(0.05％HCl改性剂)洗脱，得到标题化合物(22mg，15％)。1 H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：10.59‑10.96(m，1H)，10.28(br s，1H)，7.91‑7.96(m，2H)，7.67‑ 7.77(m，5H)，7.46(s，2H)，7.07‑7.22(m，3H)，6.96‑7.05(m，3H)，5.02‑5.30(m，1H)，4.70‑ 4.84(m，2H)，4.39‑4.47(m，1H)，4.22‑4.33(m，2H)，4.04‑4.12(m，1H)，2.92(m，3H)；MS m/z： + 535.2[M+1]。 [0792] 通过与实施例14类似的方法由起始物料2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮和相应的硼酸酯制备以下实施例： [0793] [0794] [0795] [0796] 通过与实施例14类似的方法由起始物料相应的卤素‑取代苯酚和硼酸酯制备以下实施例。在与亚磺酰胺反应之前，相应的苯酚被甲氧基甲基衍生物保护。 [0797] [0798] [0799] 通过与实施例14类似的方法由起始物料相应的醛和硼酸酯制备以下实施例： [0800] [0801] 通过与实施例2类似的方法由起始物料2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯和5‑溴‑2‑(溴‑甲基)‑苯甲酸甲酯或6‑溴‑3‑(溴甲基)吡啶甲酸甲酯；和相应的二氨基芳基制备以下实施例； [0802] [0803] [0804] [0805] 通过与实施例6类似的方法由起始物料2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)乙酸甲酯和相应的双环制备以下实施例： [0806] [0807] 通过与实施例6类似的方法由起始物料2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑甲氧基苯基)乙酸甲酯或2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯和相应的双环制备以下实施例： [0808] [0809] [0810] [0811] 通过与实施例7类似的方法由起始物料2‑氨基‑2‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]乙酸乙酯和相应的硼酸酯和酸制备以下实施例： [0812] [0813] 通过与实施例8类似的方法由起始物料2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑5，6‑二氢‑4H‑环戊烷并[c]吡唑‑3‑基]甲基]‑6‑溴‑异吲哚啉‑1‑酮和5‑乙炔基吡啶‑2‑胺与实施例4、步骤3类似的方式制备以下实施例： [0814] [0815] 通过与实施例16类似的方法由起始物料2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑[5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基]甲基]‑6‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)异吲哚啉‑1‑酮和相应的芳基卤化物制备以下化合物： [0816] [0817] [0818] 实施例17：4‑[3‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)‑苯基]‑1‑甲基‑哌啶的制备 [0819] 方案20 [0820] [0821] 步骤1. 4‑(4‑溴‑3‑氟‑苯基)‑1‑甲基‑3，6‑二氧‑2H‑吡啶 [0822] [0823] 将1‑溴‑2‑氟‑4‑碘苯(10.0g，33.2mmol)、1‑甲基‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)‑1，2，3，6‑四氢吡啶(7.40g，33.2mmol)、碳酸钠(10.9g，99.6mmol)、[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)(2.42g，3.32mmol)和二噁烷/水(100mL，4/1)的混合物在氮气下脱气两次。反应混合物在100℃下加热16小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用50‑67％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化1 合物(7.00g，78％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：7.51‑7.59(m，1H)，7.25‑7.31(m，1H)， 7.13‑7.23(m，1H)，6.21‑6.24(m，1H)，3.10‑3.16(m，2H)，2.67‑2.75(m，2H)2.52‑2.61(m，+ 2H)，2.39(s，3H)；MS m/z：271.8[M+1]。 [0824] 步骤2. 4‑[3‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶 [0825] [0826] 将4‑(4‑溴‑3‑氟‑苯基)‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶(1.00g，3.70mmol)、4，4，5，5‑四甲基‑2‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷(1.40g，5.55mmol)、[1，1′‑双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)(0.541g，0.740mmol)、乙酸钾(1.08g，11.1mmol)和二噁烷(20mL)的混合物在氮气下脱气两次。反应混合物在100℃下加热3小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用50‑ 1 100％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(0.432g，37％)。H NMR(400MHz， methanol‑d4)δ：7.60‑7.68(m，1H)，7.22‑7.27(m，1H)，7.06‑7.13(m，1H)，6.20‑6.27(m， 1H)，3.16‑3.23(m，2H)，2.74‑2.81(m，2H)，2.57‑2.64(m，2H)，2.44(s，3H)，1.34(s，12H)；MS + m/z：318.1[M+1]。 [0827] 步骤3. 4‑[3‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑1‑甲基‑哌啶 [0828] [0829] 向钯(10％碳，0.900g，0.851mmol)在甲醇(54mL)中的溶液中加入4‑[3‑氟‑4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基]‑1‑甲基‑3，6‑二氢‑2H‑吡啶(2.70g， 8.51mmol)。抽空烧瓶，用氢气回填，并让反应混合物在氢气气氛(50psi)下于30℃下搅拌48小时。反应混合物通过硅藻土垫过滤，硅藻土垫用甲醇洗涤数次。减压浓缩滤液，得到标题 1 化合物(1.89g，70％)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：7.61‑7.67(m，1H)，7.06‑7.11(m， 1H)，6.89‑7.00(m，1H)，2.98‑3.11(m，2H)，2.53‑2.69(m，1H)，2.37(s，3H)2.16‑2.27(m，+ 2H)，1.72‑1.93(m，4H)1.35(s，12H)；MS m/z：320.1[M+1]。 [0830] 实施例18：7‑氟‑2‑[(R)‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮和7‑氟‑2‑[(S)‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(094和095)的制备 [0831] [0832] 7‑氟‑2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(5‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(093，0.020g，0.038mmol)通过具备Chiral Technologies Chiralpak IA(5micron 250x10mm)柱(在40℃下)的制备型SFC纯化，用45％(0.3％TEA/MeOH)/55％CO2在10MPa下洗脱以分离对映异构体。第一洗脱峰(094)(6mg，30％收率，100： 20 1 0er)；[α] D‑78.3(c＝0.035，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：11.77‑12.05(m，1H)，10.08(br s， 1H)，7.65‑7.74(m，1H)，7.43‑7.50(m，3H)，7.37(d，2H)，6.97‑7.07(m，1H)，6.77‑6.88(m， 2H)，6.73(s，1H)，6.53‑6.65(m，1H)，4.73(d，1H)，4.09(d，1H)，2.88(d，2H)，2.41‑2.49(m，+ 1H)，2.20(s，3H)，2.12(s，3H)，1.94‑2.03(m，2H)，1.64‑1.81(m，4H)；MS m/z：529.3[M+1] 。 20 1 第二洗脱峰(095)(6mg，30％收率，97.8：2.2er)；[α] D+55.3(c＝0.038，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：11.78‑12.05(m，1H)，10.06(br s，1H)，7.66‑7.75(m，1H)，7.44‑7.51(m，3H)， 7.38(d，2H)，6.97‑7.07(m，1H)，6.77‑6.88(m，2H)，6.73(s，1H)，6.52‑6.65(m，1H)，4.74(d， 1H)，4.10(d，1H)，2.89(d，2H)，2.41‑2.49(m，1H)，2.21(s，3H)，2.13(s，3H)，1.94‑2.05(m，+ 2H)，1.64‑1.82(m，4H)；MS m/z：529.3[M+1]。 [0833] 实施例19：2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐(103) [0834] 方案21 [0835] [0836] 步骤1. 2‑甲基‑N‑[[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]亚甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺[0837] [0838] 向5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑甲醛(9.80g，59.7mmol)和2‑甲基丙烷‑2一亚磺酰胺(10.8g，98.5mmol)在THF(300mL)中的溶液中加入原钛酸四乙酯(20.4g，89.5mmol)。在75℃下搅拌5小时，将反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑100％的乙酸乙1 酯/石油醚洗脱，得到标题化合物(9.6g，60％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：11.34(br s，1H)，+ 8.52(s，1H)，7.49(s，1H)，1.16(s，9H)；MS m/z：267.9[M+1]。 [0839] 步骤2. 2‑甲基‑N‑[[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]亚甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺 [0840] [0841] 在0℃下向2‑甲基‑N‑[[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]亚甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺(9.60g，35.9mmol)在DMF(200mL)中的溶液中加入氰化钠(1.29g，53.8mmol)。在相同温度下搅拌15分钟后，加入2‑(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯(8.96g，53.8mmol)。在室温下搅拌2小时后，用水淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑10％的乙酸乙酯/石油醚洗1 脱，得到标题化合物(6.5g，46％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.65(s，1H)，7.60(s，1H)，5.90(d，1H)，5.71(d，1H)，3.50‑3.68(m，2H)，1.28(s，9H)，0.87‑0.97(m，2H)，‑0.01‑0.01(m，+ 9H)；MS m/z：398.0[M+1]。 [0842] 步骤3.N‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑咪唑‑2‑基]甲基]‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺 [0843] [0844] 在‑78℃下向2‑甲基‑N‑[[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]亚甲基]丙烷‑2‑亚磺酰胺(6.50g，16.3mmol)在THF(100mL)中的溶液中加入5‑氟‑2‑甲氧基苯基溴化镁在THF(0.5M，97.8mL，48.9mmol)中的溶液。在室温下搅拌16小时后，将反应混合物倒入饱和氯化铵溶液中，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩.粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/含有10mM乙 1 酸铵的水洗脱，得到标题化合物(1.9g，22％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.24‑7.33(m，1H)， 6.93‑7.07(m，2H)，6.84(dd，1H)，6.15(d，1H)，5.17‑5.26(m，2H)，4.92(d，1H)，3.85(s，3H)， 3.24‑3.45(m，2H)，1.21(s，9H)，0.74‑0.89(m，2H)，‑0.06‑0.00(m，9H)；MS m/z：524.1[M+1+ ]。 [0845] 步骤4.(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)‑咪唑‑2‑基]甲胺 [0846] [0847] 在0℃下向N‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基硅烷基‑乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]甲基]‑2‑甲基‑丙烷‑2‑亚磺酰胺(1.90g，3.62mmol)在甲醇(80mL)中的溶液中加入HCl/甲醇(4M，9.05mL，36.2mmol)。在室温下搅拌2小时后，减压除去溶剂。粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得到标题化合物(1.1g，1 73％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.24‑7.33(m，1H)，6.90‑6.98(m，1H)，6.79‑6.89(m，2H)， 5.63(s，1H)，5.02‑5.13(m，2H)，3.85(s，3H)，3.24‑3.41(m，2H)，0.70‑0.86(m，2H)，‑0.03+ (s，9H)；MS m/z：420.0[M+1]。 [0848] 步骤5. 5‑溴‑2‑[[[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]甲基]氨基]甲基]苯甲酸甲酯 [0849] [0850] 向(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]甲胺(1.05g，2.50mmol)和5‑溴‑2‑(溴甲基)苯甲酸甲酯(0.846g，2.75mmol)在DMF(50mL)中的溶液中加入DIPEA(2.05mL，12.5mmol)。反应混合物在90℃下加热1小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机萃取物，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物(1.61g，定量)，其无需进一步纯化即可用+于下一步反应。MS m/z：646.0[M+1]。 [0851] 步骤6. 6‑溴‑2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮 [0852] [0853] 向5‑溴‑2‑[[[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]甲基]氨基]甲基]苯甲酸甲酯(1.61g，2.49mmol)在甲苯(50mL)中的溶液中加入三甲基铝(0.179g，2.49mmol。反应混合物在90℃下加热16小时。冷却至室温后，减压除去溶剂。粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/含有10mM乙酸铵的水洗脱，得1 到标题化合物(1.2g，78％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.98(d，1H)，7.65(dd，1H)，7.29‑7.35(m，2H)，7.26(s，1H)，7.18(dd，1H)，6.98‑7.07(m，1H)，6.86(dd，1H)，5.59(d，1H)，5.22(d， 1H)，4.96(d，1H)，4.06(d，1H)，3.75‑3.84(m，3H)，3.21‑3.44(m，2H)，0.53‑0.78(m，2H)，‑+ 0.12‑0.00(m，9H)；MS m/z：614.1[M+1]。 [0854] 步骤7. 6‑溴‑2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮 [0855] [0856] 在0℃下向6‑溴‑2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1‑(2‑三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)咪唑‑2‑基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮(0.540g，0.878mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入HCl(12M，10.0mL，120mmol)水溶液。在室温下搅拌4小时后，减压除去溶剂并冻干，1 得到标题化合物(0.425g，定量)。H NMR(400MHz，methanol‑d4)δ：7.94(d，1H)，7.69‑7.82(m，2H)，7.48(d，1H)，7.07‑7.29(m，2H)，6.82‑7.03(m，2H)，4.65(d，1H)，4.13‑4.18(m，1H)，+ 3.79(s，3H)；MS m/z：485.9[M+1]。 [0857] 步骤8. 2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮 [0858] [0859] 6‑溴‑2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]甲基]异吲哚啉‑1‑酮(0.425g，0.878mmol)、1‑甲基‑4‑(4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基)哌啶(0.403g，1.34mmol)、Pd(dppf)Cl2(0.032g，0.044mmol)和碳酸钾(0.372g， 2.68mmol)的混合物在二噁烷∶水(9∶1，10mL)中的混合物在氮气下于100℃下加热2小时。冷却后，将反应混合物过滤，滤液减压浓缩，通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑15％甲醇/二氯甲烷 1 洗脱，得到标题化合物(0.3g，58％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.94(d，1H)，7.72‑7.79(m， 1H)，7.45‑7.55(m，3H)，7.32‑7.41(m，4H)，6.96‑7.07(m，1H)，6.89‑6.95(m，1H)，6.71‑6.82(m，1H)，4.82‑4.96(m，1H)，4.34‑4.53(m，1H)，3.57‑3.67(m，3H)，2.99‑3.09(m，2H)，2.48‑ 2.63(m，1H)，2.34‑2.39(m，4H)，2.07‑2.16(m，3H)，1.86‑1.97(m，2H)；MS m/z：579.3[M+1+ ]。 [0860] 步骤9. 2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮；盐酸盐 [0861] [0862] 在0℃下向2‑[(5‑氟‑2‑甲氧基‑苯基)‑[5‑(三氟甲基)‑1H‑咪唑‑2‑基]甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(0.250g，0.432mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入三溴化硼(0.407g，4.32mmol)。在室温下搅拌1小时后，用二氯甲烷稀释反应混合物，并倒入冰水中。水相用二氯甲烷萃取三次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩.粗产物通过反相HPLC纯化，用0‑100％的ACN/水(0.05％HCl改性剂)洗1 脱，得到标题化合物(0.122g，50％)。H NMR(400MHz，DMSO‑d6)δ：10.58(br s，1H)，9.98(br s，1H)，7.88‑7.96(m，2H)，7.80(d，1H)，7.63‑7.76(m，3H)，7.36(d，2H)，7.02‑7.12(m，1H)， 6.84‑6.98(m，2H)，6.70(dd，1H)，4.67(d，1H)，4.12(d，1H)，3.49(d，2H)，2.99‑3.16(m，2H)， 2.80‑2.89(m，1H)，2.77(d，3H)，1.96‑2.12(m，4H)；MS m/z：565.5[M+1]+。 [0863] 实施例20：2‑[(R)‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮和2‑[(S)‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(104和105)的制备[0864] [0865] 2‑[(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)‑(4‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异吲哚啉‑1‑酮(085，0.020g，0.039mmol)通过具备Technologies Chiralpak IA(5micron250x10mm)柱(在40℃下)的制备型SFC纯化，用35％(0.3％TEA/MeOH)/65％CO2在12MPa下洗脱以分离对映异构体。每个分离的对映异构体的手性中心的绝对构型是未知的。 20 1 第一洗脱峰(104)(6.5mg，33％收率，97.9：2.1er)；[α] D‑88.2(c＝0.0465，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：11.74‑12.04(m，1H)，10.06(br s，1H)，7.84‑7.88(m，2H)，7.64(br d，J＝ 8.2Hz，3H)，7.35(d，J＝8.2Hz，2H)，7.02(td，J＝8.5，3.1Hz，1H)，6.51‑6.90(m，4H)，4.72(br d，J＝17.7Hz，1H)，4.11(br d，J＝17.4Hz，1H)，2.88(br d，J＝10.9Hz，2H)，2.20(s，+ 3H)，2.08‑2.17(m，3H)，1.92‑2.02(m，2H)，1.59‑1.81(m，4H)；MS m/z：511.3[M+1]。第二洗 20 1 脱峰(105)(7.3mg，37％收率，97.7：2.3er)；[α] D+67.3(c＝0.049，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：11.74‑12.20(m，1H)，10.08(br s，1H)，7.82‑7.90(m，2H)，7.65(br d，J＝8.2Hz，3H)， 7.36(d，J＝8.2Hz，2H)，7.02(td，J＝8.6，3.2Hz，1H)，6.52‑6.91(m，4H)，4.72(d，J＝ 17.9Hz，1H)，4.11(d，J＝17.9Hz，1H)，2.88(br d，J＝11.1Hz，2H)，2.21(s，3H)，2.13(s，+ 3H)，1.98(td，J＝11.3，2.1Hz，2H)，1.59‑1.84(m，4H)；MS m/z：511.3[M+1]。 [0866] 实施例21：6‑[(R)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑2‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑5H‑吡咯并[3，4‑b]吡啶‑7‑酮和6‑[(S)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑2‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑5H‑吡咯并[3，4‑b]吡啶‑7‑酮(106和107)的制备 [0867] [0868] 6‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑2‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]‑5H‑吡咯并[3，4‑b]吡啶‑7‑酮(028，0.020g，0.037mmol)通过具备Chiral Technologies Chiralpak IA(5micron 250x10mm)柱(在40℃下)的制备型SFC纯化，用55％ (0.3％TEA/MeOH)/45％CO2在10MPa下洗脱以分离对映异构体。每个分离的对映异构体的手 20 性中心的绝对构型是未知的。第一洗脱峰(106)(2.8mg，14％收率，98.5：1.5er)；[α] D‑ 1 12.3(c＝0.06，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：7.96‑8.09(m，4H)，7.39‑7.51(m，2H)，7.33(d，J＝ 8.3Hz，2H)，7.06‑7.16(m，2H)，6.94‑7.06(m，2H)，6.83(dd，J＝8.9，4.8Hz，1H)，6.76(dd，J＝9.3，3.1Hz，1H)，4.72(d，J＝17.9Hz，1H)，4.14(br d，J＝17.7Hz，1H)，2.75‑2.86(m，2H)，+ 2.13(s，3H)，1.91(td，J＝11.0，1.5Hz，2H)，1.56‑1.78(m，4H)；MS m/z：548.3[M+1]。第二 20 1 洗脱峰(107)(6.1mg，30％收率，97.2：2.8er)；[α] D+21.8(c＝0.055，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6)δ：12.56(br s，1H)，9.92(br s，1H)，7.94‑8.13(m，4H)，7.46‑7.57(m，1H)，7.36‑7.44(m，1H)，7.33(d，J＝8.3Hz，2H)，7.11(br s，2H)，7.00‑7.05(m，1H)，6.99(s，1H)，6.84(dd，J＝8.9，4.8Hz，1H)，6.75(dd，J＝9.3，3.1Hz，1H)，4.73(d，J＝17.9Hz，1H)，4.11(d，J＝ 17.9Hz，1H)，2.73‑2.88(m，2H)，2.13(s，3H)，1.80‑1.97(m，2H)，1.53‑1.78(m，4H)；MS m/z： + 548.3[M+1]。 [0869] 通过与化合物069类似的方法由起始物料2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯和相应的硼酸酯制备以下实施例： [0870] [0871] [0872] 通过与化合物070类似的方法由起始物料2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯和相应的硼酸酯制备以下实施例： [0873] [0874] 实施例22：2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑氚‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮(112) [0875] 方案22 [0876] [0877] Rac‑2‑(1H‑1，3‑苯二唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基]‑1，2‑二氢异喹啉‑1‑酮(069，20.4mg，0.0365mmol)溶解在具有搅拌棒的小瓶中的无水四氢呋喃(1ml)中。然后在搅拌下加入氧化氘(350μL，19.3mmol)，然后加入N，N‑二异丙1 基乙胺(38.1μL，219μmol)。反应小瓶密封，反应在70℃下搅拌60小时。反应溶液的 HNMR(DMSO‑d6)表明，基于在约7.67ppm处的次甲基峰消失，在次甲基碳上约100％氘掺入量。将反应冷却至室温并减压除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑15％的(7NNH3/甲 1 醇)/DCM洗脱，得到标题化合物(14mg，68％)。H NMR(DMSO‑d6，400MHz)δ：11.9‑13.5(m，1H)， 9.6‑10.9(m，1H)，8.28(d，1H)，7.94(s，1H)，7.81(d，1H)，7.7‑7.8(m，2H)，7.54(br s，2H)， 7.3‑7.4(m，2H)，7.29(d，1H)，7.19(br dd，2H)，7.08(dt，1H)，6.88(dd，1H)，6.6‑6.7(m， 2H)，2.88(br d，2H)，2.5‑2.7(m，1H)，2.20(s，3H)，1.9‑2.0(m，2H)，1.6‑1.8(m，4H)；MS m/]+ z：560.3[M+1 。 [0878] 通过与实施例22类似的方法由起始物料2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑8‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮(070)制备以下实施例： [0879] [0880] 实施例23：2‑[(S)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑氘‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮和2‑[(R)‑1H‑苯并咪唑‑2‑基‑氘‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮(114和115)的制备 [0881] 方案23 [0882] [0883] Rac‑2‑(1H‑1，3‑苯二唑‑2‑基)(5‑氟‑2‑羟基苯基)甲基]‑6‑[4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基]‑1，2‑二氢异喹啉‑1‑酮(069，50mg，0.090mmol)溶解在具有搅拌棒的小瓶中的无水四氢呋喃(2ml)中。然后在搅拌下加入氧化氘(1000μL，55.4mmol)，然后加入N，N‑二异丙1 基乙胺(62.2μL，358μmol)。反应小瓶密封，反应在70℃下搅拌60小时。反应溶液的 HNMR(DMSO‑d6)表明，基于在约7.67ppm处的次甲基峰消失，在次甲基碳上约100％氘掺入量。将反应冷却至室温，然后蒸发保留粗产物，将其溶解在5ml THF中。在搅拌下滴加75uL的35重量％DCl在D2O中的溶液。10分钟后，浓缩反应溶液，将残余物真空干燥过夜，得到粗产物，为双DCI盐。粗产物在Jasco半制备SFC上使用Chiralpak IG(10x250mm 5micron)纯化，用55％(0.3％TEA/MeOH)/45％CO2在背压调节器(BPR)值为10MPa和流速7mL/min洗脱，以分离对映 异构体。每个分离的对映异构体的手性中心的绝对构型是未知的。第一洗脱峰(114) 20 1 (19.7mg，37％，100：0er)；[α] D‑13.6(c＝0.0515，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6，400MHz)δ：11.9‑ 13.5(m，1H)，9.6‑10.9(m，1H)，8.28(d，1H)，7.94(s，1H)，7.81(d，1H)，7.7‑7.8(m，2H)，7.54(br s，2H)，7.3‑7.4(m，2H)，7.29(d，1H)，7.19(br dd，2H)，7.08(dt，1H)，6.88(dd，1H)， 6.6‑6.7(m，2H)，2.88(br d，2H)，2.5‑2.7(m，1H)，2.20(s，3H)，1.9‑2.0(m，2H)，1.6‑1.8(m，+ 20 4H)；MS m/z：560.3[M+1]。第二洗脱峰(115)(18.8mg，36％，99.7：0.3er)；[α] D+14.2(c＝ 1 0.0705，MeOH)；H NMR(DMSO‑d6，400MHz)δ：11.9‑13.5(m，1H)，9.6‑10.9(m，1H)，8.28(d， 1H)，7.94(s，1H)，7.81(d，1H)，7.7‑7.8(m，2H)，7.54(br s，2H)，7.3‑7.4(m，2H)，7.29(d， 1H)，7.19(br dd，2H)，7.08(dt，1H)，6.88(dd，1H)，6.6‑6.7(m，2H)，2.88(br d，2H)，2.5‑+ 2.7(m，1H)，2.20(s，3H)，1.9‑2.0(m，2H)，1.6‑1.8(m，4H)；MS m/z：560.3[M+1]。 [0884] 通过与实施例23类似的方法由起始物料2‑[1H‑苯并咪唑‑2‑基‑(5‑氟‑2‑羟基‑苯基)甲基]‑8‑氟‑6‑[4‑(1‑甲基‑4‑哌啶基)苯基]异喹啉‑1‑酮(070)制备以下实施例。每个分离的对映异构体的手性中心的绝对构型是未知的。 [0885] [0886] 实施例24：2‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑2H‑吲唑‑2‑基)甲基)‑4‑氟苯酚(118) [0887] 方案24 [0888] [0889] 步骤1. 2‑(6‑溴‑5‑氟‑2H‑吲唑‑2‑基)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯 [0890] [0891] 向6‑溴‑5‑氟‑2H‑吲唑(360mg，1.67mmol)和碳酸铯(651mg，2.09mmol)在CH3CN(16mL)中的混悬液中加入2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯(513mg，1.67mmol)，混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌16小时。混合物在水和乙酸乙酯之间分配，水相用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。合并有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并通过硅胶色谱法纯化，用(0‑20％EtOAc/己烷)洗脱，得到标题化合物(204mg，19％)，为固体。 1 H NMR(CDC13‑d)δ：8.00(d，1H)，7.92(s，1H)，7.31(d，1H)，7.20(dd，1H)，7.13(m，1H)，7.11(d，1H)，6.80(s，1H)，5.18(d，1H)，5.14(d，1H)，3.86(s，3H)，3.35(s，3H)；MS m/z：442.8[M++ 1]。 [0892] 步骤2. 2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)‑2‑(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑2H‑吲唑‑2‑基)乙酸 [0893] [0894] 将2‑(6‑溴‑5‑氟‑2H‑吲唑‑2‑基)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)‑苯基)乙酸甲酯(205mg，0.47mmol)、1‑甲基‑4‑(4‑(4，4，5，5‑四甲基‑1，3，2‑二氧杂硼杂环戊烷‑2‑基)苯基)哌啶(147mg，0.49mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM(38mg，0.047mmol)和碳酸钠(149mg，1.41mmol)在二噁烷∶水(3∶1，3mL)中的混合物脱气并用氮气再充溢三次。混合物在氮气下于100℃下加热4小时。冷却后，过滤反应混合物并通过反相HPLC纯化，用0‑80％的ACN/水 1 (0.035％TFA改性剂)洗脱，得到标题化合物(117mg，48％)。H NMR(DMSO‑d6)δ：9.35(br s， 1H)，8.47(s，1H)，7.72(d，1H)，7.56(m，3H)，7.36(d，2H)，7.27(m，1H)，7.22(dd，1H)，7.16(dd，1H)，6.83(s，1H)，5.25(d，2H)，5.22(d，2H)，3.56(d，2H)，3.32(s，3H)，3.11(m，2H)，+ 2.87(m，1H)，2.84(d，3H)，2.08(m，2H)，1.87(m，2H)；MS m/z：521.9[M+1]。 [0895] 步骤3.N‑(2‑氨基苯基)‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)‑2‑(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑2H‑吲唑‑2‑基)乙酰胺 [0896] [0897] 2‑(6‑溴‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)‑2‑(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑2H‑吲唑‑2‑基)乙酸(117mg，0.48mmol)、苯‑1，2‑二胺(156mg，1.44mmol)、HATU(365mg，0.96mmol)、DIEA(250mL，1.44mmol)和脱气DMF(3mL)的混合物搅拌1小时。反应混合物通过 1 反相HPLC纯化，用0‑80％的ACN/水(0.035％TFA改性剂)洗脱，得到标题化合物。H NMR (DMSO‑d6)δ：9.92(s，1H)，9.33(br s，1H)，8.31(s，1H)，7.73(d，1H)，7.57(m，3H)，7.36(d， 2H)，7.29(m，1H)，7.27(dd，1H)，7.18(dd，1H)，7.01(dd，1H)，6.99(s，1H)，6.96(m，1H)，6.74(d，1H)，6.58(m，1H)，5.24(d，1H)，5.19(d，1H)，3.55(d，2H)，3.25(s，3H)，3.11(m，2H)，2.87(m，1H)，2.84(d，3H)，2.08(m，2H)，1.86(m，2H)。 [0898] 步骤4. 2‑((1H‑苯并[d]咪唑‑2‑基)(5‑氟‑6‑(4‑(1‑甲基哌啶‑4‑基)苯基)‑2H‑吲唑‑2‑基)甲基)‑4‑氟苯酚(118) [0899] [0900] 来自步骤3的物料在AcOH(5mL)中于100℃下加热1小时。减压除去溶剂，并将残余物溶解在1∶1TFA∶DCM(5mL)中5小时。反应混合物通过反相HPLC纯化，用0‑80％的ACN/水 1 (0.035％TFA改性剂)洗脱，得到标题化合物(39mg，13％超过3个步骤)。H NMR(DMSO‑d6)δ： 10.18(br s，1H)，9.36(br s，1H)，8.46(s，1H)，7.71(d，1H)，7.59(d，2H)，7.57(m，4H)，7.35(d，2H)，7.24(m，2H)，7.12(dd，1H)，6.93(dd，1H)，6.87(dd，1H)，3.54(d，2H)，3.10(m，2H)，+ 2.86(m，1H)，2.84(d，3H)，2.08(m，2H)，1.86(m，2H)；MS m/z：550.0[M+1]。 [0901] 通过与实施例24类似的方法由起始物料2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯和相应的双环制备以下实施例： [0902] [0903] 方案25 [0904] [0905] 步骤1. 2‑溴‑2‑(5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸甲酯 [0906] [0907] 向5‑氟‑2‑(甲氧基甲氧基)苯乙酸甲酯(5.00g，21.9mmol)在氯仿(80mL)中的溶液中加入N‑溴代琥珀酰亚胺(4.66g，26.2mmol)和过氧化苯甲酰(0.530g，2.19mmol)。在80℃下搅拌16小时后，减压除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用0‑5％的乙酸乙酯/石油1 醚洗脱，得到标题化合物(2.4g，36％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：7.31(dd，1H)，6.97‑7.03(m，1H)，6.87‑6.95(m，1H)，5.76(s，1H)，5.12(d，2H)，3.72(s，3H)，3.41(s，3H)。 [0908] 实施例25：基于HTRF的EGFR生化测定法 [0909] 使用均相时间分辨荧光(HTRF)测定法(Cisbio)进行EGFR生化活性测量。首先用D300数字液体分配器(HP)将抑制剂和DMSO标准物分配到空的黑色低容量384孔板 (Corning)。所有反应均在室温下进行并用Multidrop Combi试剂分配(ThermoFisher)将溶 液加到板中。反应混合物(终体积10μL)在反应缓冲液(50mM HEPES pH 7.0、5mM MgCl2、1mM MnCl2、0.01％BSA、2mM TCEP、0.1mM NaVO4)中含有1μM的酪氨酸激酶肽‑生物素底物和突变EGFR。调节酶浓度以适应不同的激酶活性(L858R 0.1nM，L858R/T790M 0.02nM)。将酶反应溶液(2×浓度，5μL)加到含有化合物的384孔板中并孵育30分钟。加入5μL ATP至100μM的终浓度来引发酶反应并反应20分钟。加入10μL在含有EDTA的检测缓冲液中的磷酸酪氨酸抗 体‑铕(III)穴状化合物(体积比为1比180)和链霉亲和素‑XL665(46.7nM)来淬灭反应，然后在室温下孵育1小时，并用PHERAstar读板器读取(激发＝337nm，发射＝620nm和665nm)。三份平行地由抑制曲线(从1.0μM至0.130nM的11点曲线或从1.0μM至0.130pM的23点曲线)确 定IC50值，在GraphPad Prism 7.0d中进行非线性最小二乘拟合。基于HTRF的EGFR生化测定法的结果汇总在下表7中。 [0910] 表7. [0911] [0912] [0913] [0914] [0915] [0916] 实施例26：Ba/F3细胞增殖模型 [0917] 先前已描述了EGFR突变体L858R、Del E746 A750、L858R/T790M、Del E746_A750/T790M、L858R/T790M/C797S和Del/T790M/C797S Ba/F3细胞(Zhou，W.等人Nature 462， 2009，1070‑1074)。所有细胞系均保持在补充有10％FBS、100单位/mL青霉素、100单位/mL链霉素的RPMI 1640(Cellgro；Mediatech Inc.，Herndon，CA)中。根据制造商的说明，使用Quick Change定点诱变试剂盒(Stratagene；La Jolla，CA)经由定点诱变引入EGFR I941R 突变。所有构建体均通过DNA测序确认。使用Cre‑重组系统(Agilent Technologies， SantaClara，CA)将构建体穿梭到逆转录病毒载体JP1540中。然后按照标准方案用逆转录病毒感染Ba/F3细胞，如前所述(Zhou等人，Nature 2009)。通过在嘌呤霉素(2μg/ml)中选择来获得稳定的克隆。 [0918] 通过Cell Titer Glo测定法(Promega，Madison，WI)评估生长和生长的抑制并根据制造商的说明进行。Cell Titer Glo测定法是一种基于发光的方法，用于根据存在的ATP的定量来确定活细胞的数目，存在的ATP与存在的代谢活性细胞的量成正比。将不同EGFR基因型的Ba/F3细胞暴露于作为单药或与1μg/ml西妥昔单抗组合的化合物达72小时并如先前 已确立的那样(Zhou等人，Nature 2009)根据经验确定每个实验使用的细胞数目。所有实验点在384孔板中三份平行地设置并且所有实验重复至少三次。使用光谱仪检测发光信号并 使用针对Windows的5.0版GraphPad Prism(GraphPad Software；www.graphpad.com)以图 形方式显示数据。使用具有S型剂量反应的非线性回归模型拟合曲线。测量的IC50值示于下表8中。 [0919] 表8. [0920] [0921] [0922] [0923] [0924] 所公开的主题不限于本文描述的具体实施方案和实施例的范围。实际上，根据前面的描述和附图，除了所描述的那些外对本公开的各种修改对于本领域技术人员将变得显 而易见。此类修改意在落在附随的权利要求书的范围内。 [0925] 本文引用的所有参考文献(例如，出版物或专利或专利申请)通过整体引用并出于所有目的并入本文，其程度就好像每一个单独的参考文献(例如，出版物或专利或专利申 请)被明确地且一个一个单独地指示通过整体引用出于所有目的并入一样。其他实施方案 在以下权利要求内。 |
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