催化ATP的γ磷酸根向蛋白底物的酪氨酸残基转移的酶，蛋白-酪氨 酸激酶(PTKs)，是控制细胞增殖和分化的信号途径的关键组分。PTKs可 以细分成两大家族，受体酪氨酸激酶(RTKs)和非受体酪氨酸激酶 (NRTKs)。RTKs横跨质膜，并且含有结合配体的细胞外结构域和具有催 化活性和调节序列的细胞内部分。大多数RTKs，像肝细胞生长因子受体 c-met拥有单个多肽链并且在配体不存在时是单体形式。配体结合到RTKs 的细胞外部分，使单体形式的受体二聚，从而导致胞质部分的特定酪氨 酸残基的自磷酸化(评论文章参见：Blume-Jensen，P.和Hunter，T.，Nature 411 (2001)355-365；Hubbard，S.R.等，J.Biol.Chem.273(1998)11987-11990； Zwick，E.等，Trends Mol.Med.8(2002)17-23)。通常，酪氨酸自磷酸化或 者刺激受体固有的催化激酶活性，或者产生含磷酸酪氨酸-识别结构域如 Src同源物2(SH2)结构域或含磷酸酪氨酸-结合(PTB)结构域的下游信号 蛋白的补充位点。
蛋白酪氨酸激酶在细胞内信号转导途径中起关键作用，所述的细胞 内信号转导途径导致不同的细胞响应，例如增殖，凋亡和分化。因此这 些酶成为开发新型疗法的首要靶目标，所述新型疗法设计用于阻断癌细 胞增殖、转移、血管生成并且促进凋亡。在临床开发方面进展最大的策 略是以生长因子受体酪氨酸激酶为靶目标的单克隆抗体。但是，使用小 分子酪氨酸激酶抑制剂可以比单克隆抗体具有显著的理论优势。小分子 抑制剂可以具有更好的组织穿透性，可以对细胞内靶位点和突变靶位点 具有活性，并且可以设计成具有口服生物利用度。几种先导化合物已经 显示出对这样的靶位点的有希望的活性，所述靶位点如EGFR(血管内皮 细胞生长因子受体)和bcr-abl。
肝细胞生长因子受体c-met是由其转化NIH 3T3小鼠成纤维细胞的能 力在N-甲基-N’-亚硝基胍处理的人成骨肉瘤细胞细胞系(MUNG-HOS)中 作为激活的致癌基因被首次识别的。c-met原癌基因(位于染色体7上)编 码的受体是由50kDa(α)链和145kDa(β)链通过二硫键以190kDa的αβ复 合物形式组成的两条链的蛋白。α链暴露在细胞表面，而β链横跨细胞膜 并且具有细胞内酪氨酸激酶结构域。这种细胞内酪氨酸激酶结构域的存 在使c-met成为细胞表面分子的受体酪氨酸激酶(RTK)家族的一员。
肝细胞生长因子(HGF)，也称作Scatter Factor(SF)，是在不同细胞和 组织中引发多种响应的多官能细胞因子。由于其最初的发现和表征， HGF/SF已经成为深入研究的对象，特别是关于其在癌症发展和进行中的 角色。大量证据指出其作为癌发生、癌侵入和转移调节剂的作用(评论文 章参见：Herynk，M.H.和Radinsky，R.，In Vivo 14(2000)587-596；Jiang，W. 等，Crit.Rev.Oncol.Hematol.29(1999)209-248；Longati，P.等，Curr.Drug Targets 2(2001)41-55；Maulik，G.等，Cytokine Growth Factor Rev.13(2002) 41-59；Parr，C.和Jiang，W.G.，Histol.Histopathol.16(2001)251-268。
HGF/SF结合到并且诱导成熟c-met受体β链的酪氨酸磷酸化。据认 为这种事件促进了含有src同源物(SH)区域的细胞内信号蛋白如PLC-γ、 Ras-GAP、PI-3激酶pp60c-src和GRB-2Socs复合物与活化受体的结合。 每种含SH2的蛋白可以活化不同的信号磷酸肽的子集，从而引发细胞内 的不同响应。
C-met突变体已经在遗传和散发性人乳突状肾癌中进行了充分描述， 并且已经在卵巢癌、幼年肝细胞癌、转移性头和颈鳞状细胞癌和胃癌中 有报道。C-met还在非小细胞肺癌和小细胞肺癌细胞中，在胸、结肠和前 列腺瘤中过表达。由于c-met看来似乎在各种肿瘤的肿瘤发生中起重要作 用，已经采用了各种抑制策略来治疗性地靶向这种受体酪氨酸激酶。
在许多经过证明的临床前实验中已经显示了抑制蛋白-酪氨酸激酶c- met对于抑制肿瘤生长和侵入的有效性(例如：Abounader，R.等，J.Natl. Cancer Inst.91(1999)1548-1556；Laterra，J.等，Lab.Invest.76(1997)565- 577；Tomioka，D.，Cancer Res.61(2001)7518-7524；Wang，R.等，J.Cell Biol. 153(2001)1023-1033)。
WO 96/18626描述了酪氨酸激酶和c-met激酶的抑制剂，这些抑制剂 是2-(2，6-二氯苯基)-4-苯基-5-(吡啶-4-基)-1H-咪唑的衍生物(实施例5、6 和55)。但是它们具有不适宜的细胞色素P450相互作用。
现在发现根据本发明的化合物避免了这种缺点，其具有良好溶解度， 是c-met激酶的有效抑制剂。
发明概述
本发明涉及通式(I)的化合物，

其中
W是-N＝；并且
X是氢；
Y是氢或基团A2-R；
A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；
R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二 乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基； 氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基； O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或 3-甲基噻吩-2-基；
n是1或2；并且
Z表示一种或两种取代基，所述取代基独立地选自：卤素；羟基；烯 丙氧基；甲基；C1-C3-烷氧基，其任选被吡啶基取代；甲氧甲氧基； (2-甲氧乙氧基)甲氧基；甲硫基；乙氧甲氧基；亚甲二氧基；乙炔基； 三甲代甲硅烷基乙炔基和任选被卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲 二氧基、羧基或乙氧基取代的苄氧基；
或者备选地，
W是-CH＝；并且
X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3； CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；
A1表示C1-C3-亚烷基；
Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；
R1选自：氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧 基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3- 二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基； 2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；
Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺； -CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基， 并且
在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或 NR3R4；
R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二 羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；
R3，R4独立地选自：氢；C1-C6-烷基或
一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且 含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；
Y氢或基团A2-R；
A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；
R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二 乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基； 氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基； O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或 3-甲基噻吩-2-基；
n是1或2；并且
Z如果n是1，其表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基；并且 如果n是2，一个取代基表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基，且 第二个取代基独立地选自：卤素；羟基；烯丙氧基；甲基；C1-C3-烷 氧基；甲氧甲氧基；(2-甲氧乙氧基)甲氧基；甲硫基；乙氧甲氧基； 亚甲二氧基；乙炔基；三甲代甲硅烷基乙炔基；和
它们的可药用盐。
令人惊奇地发现：当在咪唑环的2-位上存在2，6-二氯苯基或-吡啶基 残基时，本发明化合物由于c-met抑制作用而特殊地具有药物和抗肿瘤发 生活性。
发明详述
优选的与R1、R2、R3、R4和A2有关的C1-C6-烷基是甲基、乙基和丙 基。
优选的与Q1、R和Z有关的C1-C6-烷氧基是甲氧基、乙氧基或异丙 氧基。
优选的由R3和R4一起形成的环体系表示1-吡咯烷基-、哌啶子基-、 吗啉代-或4-甲基哌嗪-1-基。
优选X＝A1-Q表示-CH2OH或-CH2-CH2-OH。
优选X＝-O-A1-Q1是-O-CH2-CH2-OH；-O-CH2-COOH或-O-CH2-CN。
Y＝A2-R的优选基团是2-羟基乙基；3-羟基丙基；2-甲氧基乙基；3- 甲氧基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；(R)-3-羟基 丁基；(S)-3-羟基丁基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基丙基；(CH2)3COOH；2-(4- 甲基哌嗪-1-基)乙基；3-羟基-2，2-二甲基丙基；
3-羟基-1-苯基丙基；3-叔丁氧基乙基；2-氨基乙基；3-氨基丙基；4-氨基 丁基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨基)丙基；3-(吡咯烷-1- 基)丙基；CH2COOH；(CH2)2COOH；CH(C2H5)COOH；(CH2)3COOC(CH3)3； (CH2)2-N-COOC(CH3)3；(CH2)3-N-COOC(CH3)3；(CH2)2-O-(CH2)2-N(CH3)2； (CH2)2-O-(CH2)2-NH2；(CH2)2-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-S-(CH2)3-N(CH3)2； (CH2)3-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)3-S-(CH2)3-N(CH3)2；(1，2，4-三唑-1-基)乙 基；3-(1，2，4-三唑-3-基)丙基；
卤素是氟、氯、溴或碘。
优选n是1，并且所述的取代基Z位于3-或4-位。如果Z表示被吡 啶基取代的甲氧基；苄氧基或取代的苄氧基，则优选Z位于3-位。
特别优选的是通式(I)的化合物和它们的可药用盐，其中W是-N＝；Z 选自：3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基；3-(2-甲氧乙 氧基)甲氧基；3-甲硫基；3-乙氧甲氧基；3，4-亚甲基二氧基或任选被卤素、 甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的3-苄氧基.
还特别优选的是通式(I)的化合物，其中
W是-N＝；
X是氢；
Y表示2-羟基乙基；3-羟基丙基；2-甲氧基乙基；3-甲氧基丙基；(R)-2，3- 二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；(R)-3-羟基丁基；(S)-3-羟基 丁基；3-羟基-2，2-二甲基丙基；2-吗啉基乙基；
3-吗啉基丙基；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；3-羟基-1-苯基丙基；
2-氨基乙基；3-氨基丙基；4-氨基丁基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；
3-(N，N-二甲基氨基)丙基；3-(吡咯烷-1-基)丙基；CH2COOH； (CH2)2COOH；(CH2)3COOH；CH(C2H5)COOH；(CH2)2-O-(CH2)2-N(CH3)2； (CH2)2-O-(CH2)2-NH2；(CH2)2-S-(CH2)2-N(CH3)2；(CH2)2-S-(CH2)3-N(CH3)2； (CH2)3-S-(CH2)2-N(CH3)2或(CH2)3-S-(CH2)3-N(CH3)2；
n是1；并且
Z选自：3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基或任选被 卤素、甲氧基、氰基、硝基、亚甲二氧基、羧基或乙氧基取代的3- 苄氧基。
还特别优选的是通式(I)的化合物，其中
W是-N＝；
X是氢；
Y是2-羟基乙基；3-羟基丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基- 1-丙基；2-吗啉基乙基；3-吗啉基丙基；2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基；2- 氨基乙基；3-氨基丙基；2-(N，N-二甲基氨基)乙基；3-(N，N-二甲基氨 基)丙基或3-(吡咯烷-1-基)丙基；
n是1；并且
Z选自：3-氯；4-氯；3-溴；3-碘；3-乙炔基；3-甲氧甲氧基或 任选被卤素、甲氧基或氰基取代的3-苄氧基。
这样的化合物例如：
2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-[3-羟基丙基-氨基]嘧啶-4- 基)-N-1H-咪唑。
本发明的另一实施方案是式(I)的化合物，其中
W是-CH＝；
X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；
CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；
A1表示C1-C3-亚烷基；
Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；
R1选自；氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧 基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3- 二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基； 2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；
Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺； -CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，
并且
在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或 NR3R4；
R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二 羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；
R3，R4独立地选自：氢；C1-C6-烷基或一起形成5～7元的饱和或不饱 和环，该环被甲基任选取代并且含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；
Y是3-羟基丙基；并且
Z是任选被卤素、甲氧基或氰基取代的3-苄氧基。
本发明的再一实施方案是式(I)的化合物，其中
W是-CH＝；
X是氢；或OR1；
R1选自：氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧 基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3- 二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基； 2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；
A1表示C1-C3-亚烷基；
Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺；C1-C6- 烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，并且
在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基；
Y是3-羟基丙基；并且
Z是3-苄氧基。
本发明的再一实施方案是式(I)的化合物，其中
W是-CH＝；
X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；
CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；
A1表示C1-C3-亚烷基；
Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；
R1选自：氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧 基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3- 二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基；
2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；
Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺； -CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，
并且
在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或 NR3R4；
R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二 羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；
R3，R4独立地选自：氢；C1-C6-烷基或
一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且 含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；
Y是氢或基团A2-R；
A2是C1-C5-亚烷基，其可以被C1-C6-烷基；苯基或被羟基任选取代；
R表示羟基；直链或支链C1-C6-烷氧基；氨基；二甲基氨基；二 乙基氨基；叔丁氧基羰基氨基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；三唑基； 氰基；哌啶子基；1-吡咯烷基；吗啉代；4-甲基哌嗪-1-基； O-A1-NR3R4；S-A1-NR3R4；4-羧基苯基；呋喃-3-基；噻吩-2-基或 3-甲基噻吩-2-基；
n是1；并且
Z表示被吡啶基取代的C1-C3-烷氧基。
本发明的再一实施方案是式(I)的化合物，其中
W是-CH＝；
X是氢；OR1；SR2；(SO)R2；(SO2)R2；CH2-S-CH2-C(O)2-CH2-CH3；
CH2-S-(CH2)2-OH或基团A1-Q；
A1表示C1-C3-亚烷基；
Q是OR1；SR2；SOR2；SO2R2；NR3R4；NHCH2CH2NR3R4或卤素；
R1选自：氢；C1-C3-烷基；烯丙基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧 基-1-丙基；(R)-2，3-二羟基-1-丙基；(S)-2，3-二羟基-1-丙基；1，3- 二羟基-2-丙基；3-羟基-2-羟甲基-1-丙基；2-甲氧基乙氧基甲基； 2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或基团A1-Q1；
Q1表示C1-C2-烷氧基；氰基；羧基；C1-C6-烷氧羰基；酰胺； -CO-NR3R4；C1-C6-烷硫基；C1-C6-烷基亚磺酰基；C1-C6-烷基磺酰基，
并且
在A1表示1，2-亚乙基-或1，3-亚丙基的情况下，Q1是羟基或 NR3R4；
R2是C1-C6-烷基；二甲基膦酰基甲基；2，3-环氧基-1-丙基；2，3-二 羟基-1-丙基；2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基甲基或A1-Q1；
R3，R4独立地选自：氢；C1-C6-烷基或
一起形成5～7元的饱和或不饱和环，该环被甲基任选取代并且 含有一个或两个独立地选自N或O的杂原子；
Y是3-羟基丙基；
n是1；并且
Z是吡啶-2-基甲氧基；吡啶-3-基甲氧基或吡啶-4-基甲氧基。
这样的化合物例如：
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟 基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑，
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟 基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑，和
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟 基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑。
式(I)表示2-(2，6-二氯苯基)-4-苯基-5-(4-嘧啶基)-1H-咪唑，这些化合 物是2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-4-(4-嘧啶基)-1H-咪唑的互变异构体。两种 互变异构体表示相同的结构，它们的命名可以互换，并且两种互变异构 体都是本发明的一部分。本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳 原子，并且可以以外消旋体、外消旋混合物以及单独的非对映异构体形 式出现，所有可能的异构体，包括光学异构体，都包含在本发明的范围 内。
通式(I)的化合物可以通过通式(VI)或(VII)的化合物与胺Y-NH2，其中 W、X、Y、n和Z具有此前定义的含义，在80～180℃范围内的温度下 反应，然后分离所述的化合物而制备。优选使用化学计量比量的或者过 量的所述胺。反应可以在没有溶剂的情况下进行，或者在如二噁烷、二 甲氧基乙烷或甲苯的溶剂中进行。

通式(VI)和(VII)的化合物可以通过氧化由通式(V)表示的硫醚的硫醚 基而获得。为了获得通式(VI)的亚砜，优选使用3-氯过苯甲酸进行氧化。 为了合成通式(VII)的砜，优选使用过硫酸氢钾制剂TM。
通式(V)的硫醚

可以通过通式(IV)化合物的N-脱氧而获得。这种反应优选使用溴乙酸乙 酯在三乙胺存在下进行(Somei，M.和Tsuchiya，M.，Chem.Pharm.Bull.29 (1981)3145-3157)。备选地，该步还原可以通过在二甲基甲酰胺中使用亚 磷酸三乙酯而实现。
通式(IV)的化合物可以通过通式(III)化合物与通式(II)化合物反应而获 得，其中取代基W、X和Z具有此前定义的含义。该反应是缩合反应， 优选在氨存在下使用已知的用于其它醛的方法进行。

本发明的另一实施方案是采用上述方法，使用通式(II)的化合物，其 中取代基X具有此前定义的含义，来制造通式(I)的化合物。
2，6-二氯苯甲醛是制造本发明通式(I)化合物的有用中间体。2，6-二氯- 3-羟基苯甲醛和2，6-二氯-4-羟基苯甲醛是现有技术已知的。已经从3-羟 基苯甲醛合成了2，6-二氯-3-羟基苯甲醛(Gust，R.和Schoenenberg，H.，Eur.J. Med.Chem.28(1993)103-115)，但是该方法需要使用高毒性的氯气并且 由于过氧化而产生副产物。本发明中公开的方法(实施例A2)避免了这些 缺点。2，6-二氯-4-羟基苯甲醛可以从3，5-二氯苯酚通过Reimer-Tiemann 反应(Baldwin，J.J.等，J.Med.Chem.22(1979)687-693)或通过溴化/格氏反 应顺序(WO 01/44154)制备。Reimer-Tiemann方法由于非常低的产率(＜4％) 而不能经济地制备；另外，要求使用氯仿也造成了相当大的生态问题。 其它已知的通过溴化/格氏反应顺序的反应总共要求4步，包括用溴进行 化学计量比的溴化和使用有毒的氯甲基甲基醚来保护苯酚。另外，总产 率只有40％。
本发明提供制造2，6-二氯-3-羟基苯甲醛和2，6-二氯-4-羟基苯甲醛的 改进方法。该方法的特征在于，用锂碱金属化保护的2，4-二氯苯酚或3，5- 二氯苯酚，接着与甲酸的酯或酰胺反应，并且去保护和分离所述化合物。 合适的锂碱是甲基锂、正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂、二异丙基酰胺 锂或双三甲代甲硅烷基酰胺锂，优选丁基锂。适宜的溶剂是乙醚、四氢 呋喃或1，2-二甲氧基乙烷，优选四氢呋喃。金属化步骤在-100℃～-60℃、 优选在-80℃～-70℃进行。合适的保护基是三异丙基硅烷基、叔丁基二 甲基硅烷基或苯基二甲基硅烷基，优选三异丙基硅烷基。合适的甲酸衍 生物是甲酸甲酯、甲酸乙酯、二甲基甲酰胺或N-甲酰哌啶，优选二甲基 甲酰胺。该方法还可用于制造根据本发明的2，6-二氯-3-羟甲基苯甲醛和 2，6-二氯-4-羟甲基-苯甲醛。
此前使用的术语“可药用的盐”是指保持了式(I)化合物生物效力和性质 的常规酸加成盐或碱加成盐，这些盐是从合适的无毒有机或无机酸、或 者有机或无机碱形成的。酸加成盐的实例包括那些衍生自无机酸的盐， 所述无机酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸， 以及衍生自有机酸的盐，所述有机酸如对甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸， 草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，富马酸等。碱加成盐的实例包 括衍生自铵，钾，钠和季铵的氢氧化物的盐，例如衍生自氢氧化四甲基 铵的盐。将药物化合物(例如药物)化学改性成盐是药物化学家众所周 知的技术，以得到改善的化合物的物理或化学稳定性，吸湿性，流动性 或溶解度(参见例如H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，(第6版，1995)196和1456-1457页)。
可以将式(I)化合物和式(I)化合物的可药用盐用作药物，例如以药物 制剂形式用作药物。所述药物制剂可以口服，例如以片剂、包衣片剂、 糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或悬浮剂形式口服。但是，还可 以进行直肠给药，例如以栓剂形式，或者可以肠胃外给药，例如以注射 液形式。
可以用药学惰性的无机或有机载体加工式(I)化合物而制备药物制 剂。例如，可以使用乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其盐 等，作为用于片剂、包衣片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的这种载体。软明 胶胶囊的合适载体为，例如植物油，蜡，脂肪，半固体和液体多元醇等。 但是，根据活性物质的自身性质，软明胶胶囊通常不需要载体。制造溶 液或糖浆的合适载体为，例如水，多元醇，甘油，植物油等。栓剂的合 适载体为，例如天然或硬化油，蜡，脂肪，半液体和液体多元醇等。
此外，药物制剂还可以包含防腐剂，增溶剂，稳定剂，湿润剂，乳 化剂，甜味剂，着色剂，食用香料，用于改变渗透压的盐，缓冲剂，掩 蔽剂或抗氧化剂。它们还可以包含其他有治疗价值的物质。
含有式(I)化合物或其可药用盐和治疗惰性载体的药物也是本发明的 一个目的，它们的制备方法也是本发明的一个目的，该方法包括将一种 或多种式(I)化合物和/或可药用盐，以及如果需要，一种或多种其它的有 治疗价值的物质，连同一种或多种治疗惰性载体一起，制成盖仑氏给药 形式。
由于它们作为酪氨酸激酶抑制剂、优选c-met激酶抑制剂的活性，通 式(I)的化合物是用于治疗癌症和与提高的c-met受体或相关激酶受体表达 有关的其它疾病的疗法的有价值的成分。
因此，根据本发明的化合物的剂量可以在宽限度内变化，并且还必 须在每个具体病例中根据个体需要调整。在口服给药的情况下，成年人 的剂量的变化范围可以是从每天约0.01mg到约1,000mg的通式(I)化合物 或其可药用盐的相应量。日剂量可以以单剂量或者分剂量形式给药，另 外，当发现有必须治疗的迹象时，可以超过上限。
以下实施例和制备例举例说明了本发明，但是无限制其范围的含义。
实施例
A取代的2，6-二氯苯甲醛的合成
实施例A1
2，6-二氯-4-羟基苯甲醛(A1)
制备3，5-二氯三异丙基甲硅烷氧基苯(A1.1)
于0℃在1小时内向200g 3，5-二氯苯酚和330ml 2，6-二甲基吡啶的 3.0升无水CH2Cl2溶液中加入400g三异丙基-甲硅烷基三氟甲磺酸酯， 并且将混合物在此温度再搅拌3小时。在用1.0升水水解后，将有机层用 饱和NaCl洗涤，MgSO4干燥，并且蒸发至干(70℃/80毫巴)。残余物置 于石油醚中，并且通过二氧化硅过滤，得到360g(92％)A1.1无色油状物。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)δ＝1.03-1.15(m，18H，CH3)；1.16-1.35(m，3H， CH)；6.73-6.80(m，2H，CH芳族)；6.92-6.98(m，1H，CH芳族)
13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)δ＝12.7(CH)；18.0(CH3)；119.0，121.6(CH 芳族)；135.2，157.4(C芳族)。
2，6-二氯-4-羟基苯甲醛(A1)和2，6-二氯-4-三异丙基甲硅烷氧基-苯甲醛 (A1.2)的制备
在氮气下保持低于-65℃的温度，向360g A1.1的2.6升无水四氢呋 喃溶液中加入440ml正丁基锂(2.7M己烷溶液)。在-70℃搅拌2小时后， 在保持温度低于-65℃的情况下加入120ml无水二甲基甲酰胺。将混合 物温热至室温过夜。在加入700ml 4M HCl后，将混合物在室温剧烈搅 拌1小时。然后进行相分离(加入固体NaCl也许是必要的)，并且将有机 层用硫酸钠干燥并真空缩减。沉淀物用甲苯/四氢呋喃重结晶，得到154g (70％)A1，m.p.229-230℃。
1H-NMR(250MHz，DMSO-D6)δ＝6.94(s，2H，CH芳族)；10.25(s，1H， CH＝O)，11.46(s(宽)，1H，OH)
13C-NMR(62.9MHz，DMSO-D6)δ＝117.0(CH芳族)；120.7，137.8，162.1(C 芳族)；187.2(CH＝O)。
实施例A2
(3，5-二氯-4-甲酰基苯氧基)乙酸乙酯(A2)的制备
将2.87g(15mmol)A1、2.76g(16.5mmol)溴乙酸乙酯和2.90g(21 mmol)碳酸钾在50ml无水丙酮中的混合物在60℃搅拌3小时。在过滤 和除去溶剂后，残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇100∶2)。产量： 3.55g(86％)A2，无色固体。
1H-NMR(250MHz，CDCl3)：δ＝1.32(t，7.2Hz，3H，CH3)；4.30(q，7.2Hz，2 H，CH2)；4.68(s，2H，CH2)；6.92(s，2H，CH芳族)；10.41(s，1H，CH＝O)。
13C-NMR(62.9MHz，CDCl3)：δ＝14.3(CH3)；62.1，65.5(CH2)；116.4(CH 芳族)；123.8，139.2，160.9(C芳族)；167.3(C＝O)；187.8(CH＝O)。
B“Weinreb”-型酰胺的合成
实施例B1
3-苄氧基-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B1)
于10℃向136.8g(0.60mol)3-苄氧基苯甲酸的1200ml二氯甲烷悬 浮液中加入60.6g(0.6mol)三乙胺。在保持10℃～15℃的温度下加入 64.8g(0.60mol)氯甲酸乙酯(ethyl chloroformiate)的100ml二氯甲烷溶 液，历时15分钟。在搅拌40分钟并且加入58.2g(0.60mol)N，O-二甲基 羟胺盐酸盐后，于10～15℃加入60.6g(0.60mol)三乙胺溶液，历时20 分钟。在另外搅拌30分钟后，加入水，并且将有机层用硫酸钠干燥。真 空分馏得到131.9g(81％)B1。
MS：273(API+)。
实施例B2
3-羟基-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B2)
向100g(0.37mol)B1的750ml四氢呋喃溶液中加入10g Pd/C(10％)，并且将混合物在大气压下氢化2小时。滤出催化剂，将滤液蒸发， 得到66.0g B2(98％)。
MS：182(API+)，180(API-)。
实施例B3
3-(2-吡啶基甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B3)
向1.21g(10.0mmol)B2、2.89g(11.0mmol)三苯膦和1.20g(11.0 mmol)吡啶-2-甲醇的30ml无水四氢呋喃溶液中加入1.92g(11.0mmol) 偶氮二羧酸二乙酯的5ml无水四氢呋喃溶液，将混合物在室温搅拌2小 时。在除去溶剂后，经过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯2∶1)得到2.81g B3浅 黄色油状物(72％产率，认为30mol％的氧化三苯膦杂质(由NMR测量))。 由于该具体实例中杂质分离的问题，用PS-结合的三苯膦重复试验，得到 58％产率的纯B3。
MS：M＝273(API+)
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝3.25(s，3H，CH3)；3.45(s，3H，OCH3)；5.15(s， 2H，OCH2)；6.98-7.04(m，1H)；7.12-7.28(m，4H)；7.40-7.48(m，1H)； 7.60-7.68(m，1H)；8.46-8.56(m，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，CDCl3)δ＝34.3(CH3)；61.5(OCH3)；71.0(OCH2)； 114.9，117.6，121.3，121.8，123.2，129.7，135.9*，137.3，149.6，157.3*，158.3*(C 芳族H)；169.9(C＝O)。(*＝季碳)。
实施例B4
3-(3-吡啶基甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B4)
与实施例B3所述的反应类似，但是使用3-吡啶基甲醇进行反应，得 到81％产率的B4。
MS：M＝273(API+)
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝3.24(s，3H，CH3)；3.53(s，3H，OCH3)； 5.20(s，2H，OCH2)；7.12-7.24(m，3H)；7.34-7.48(m，2H)；7.84-7.92(m， 1H)；8.52-8.60(m，1H)；8.68-8.72(m，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，DMSO-D6)δ＝33.7(CH3)；61.1(OCH3)；67.4 (OCH2)；114.1，117.3，120.5，124.0，129.7，132.8，136.1，136.2，149.5，149.6， 157.9(C芳族H)；169.0(C＝O)。
实施例B5
3-(4-吡啶基甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(B5)
与实施例B3所述的反应类似，但是使用4-吡啶基甲醇进行反应，得 到82％产率的B5。
MS：M＝273(API+)
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝3.24(s，3H，CH3)；3.51(s，3H，OCH3)； 5.24(s，2H，OCH2)；7.12-7.22(m，3H)；7.34-7.41(m，1H)；7.42-7.48(m， 2H)；8.52-8.64(m，2H)。
13C-NMR(100.6MHz，DMSO-D6)δ＝33.7(CH3)；61.0(OCH3)；67.9 (OCH2)；114.1，117.3，120.7，122.1，129.8，136.3，146.4，150.1，157.7(C芳族 H)；169.0(C＝O)。
C“乙酮”的合成
实施例C1
1-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C1)
将2.1ml(15mmol)二异丙基胺溶解在70ml无水四氢呋喃中并冷却 至-75℃，加入9.4ml的正丁基锂溶液(1.6M，15mmol)，历时10分钟。 在-75℃搅拌15分钟后，于-75℃在10分钟内加入1.69g(12mmol)2-甲 硫基-4-甲基嘧啶的5ml无水四氢呋喃溶液，再将混合物搅拌15分钟。 然后于-75℃在10分钟内加入2.73g(7mmol)B3(70％纯度)的5ml无水 四氢呋喃溶液。将混合物在-75℃搅拌1小时，然后使其温热到室温，最 后倾倒在100ml乙酸乙酯/水(1∶1)中。水层用50ml乙酸乙酯萃取，并且 将合并的有机层用硫酸钠干燥。真空除去溶剂，经过硅胶柱色谱(正庚烷/ 乙酸乙酯3∶1)得到1.52g(62％)C1。(用NMR在CDCl3中于400MHz测 得的酮-烯醇比率约为30∶70)。
MS：M＝352(API+)，350(API-)。
实施例C2
1-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C2)
类似于实施例C1中所述的反应，但是开始于B4，得到60％产率的 C2。
MS：M＝352(API+)，350(API-)。
实施例C3
1-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C3)
类似于实施例C1中所述的反应，但是开始于B5，得到55％产率的 C3。
MS：M＝352(API+)，350(API-)。
实施例C4
1-(3-苄氧基苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-乙酮(C4)
类似于实施例C1中所述的反应，但是开始于B1，得到89％产率的 C4。
MS：M＝351(API+)，349(API-)。
D“酮肟”的合成
实施例D1
1-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基-亚氨基乙酮 (D1)
将1.50g(4.3mmol)C1溶解在18.6ml冰醋酸(glacial acid)、15.0ml 四氢呋喃和2.0ml水的混合物中。在冷却至5℃后，在保持温度在5℃～ 10℃之间的情况下加入353mg(5.1mmol)亚硝酸钠的3.5ml水溶液。撤 去冷却，在室温下搅拌混合物2小时。在真空除去溶剂后，加入35ml水 和240ml乙酸乙酯。用3N NaOH将pH调节到8。进行相分离，水层用 50ml乙酸乙酯萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，并且真空除去溶剂。
产量：1.61g(99％)D1。
MS：M＝381(API+)，379(API-)
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝2.17(s，3H，SCH3)；5.25(s，2H，OCH2)； 7.30-7.35(m，1H)；7.36-7.42(m，3H)；7.47-7.54(m，2H)；7.62-7.65(m，1H)； 7.78-7.85(m，1H)；8.52-8.55(m，1H)；8.68-8.72(m，1H)；12.80(宽，1H， OH)。
13C-NMR(100.6MHz，DMSO-D6)δ＝13.6(SCH3)；70.9(OCH2)；111.7，113.8， 121.6，122.0，122.1，123.4，131.0，136.4*，137.3，149.5，154.0*，156.5*，158.7， 158.9*，159.3*，171.8*；193.3*(C＝O).(*＝季碳)。
实施例D2
1-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基-亚氨基乙酮 (D2)
进行与实施例C1中所述的类似的反应，但是开始于C2，得到92％ 产率的D2。
MS：M＝381(API+)，379(API-)
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝2.19(s，3H，SCH3)；5.23(s，2H，OCH2)； 7.32-7.46(m，4H)；7.46-7.56(m，1H)；7.58-7.68(m，1H)；7.84-7.92(m， 1H)；8.50-8.56(m，1H)；8.64-8.72(m，2H)。
实施例D3
1-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基-亚氨基乙酮 (D3)
进行与实施例C1中所述的类似的反应，但是开始于C3，得到97％ 产率的D3。
MS：M＝381(API+)，379(API-)
1H-NMR(400MHz，DMSO-D6)δ＝2.18(s，3H，SCH3)；5.27(s，2H，OCH2)； 7.36-7.43(m，3H)；7.43-7.49(m，2H)；7.49-7.55(m，1H)；7.61-7.68(m，1H)； 8.54-8.63(m，2H)；8.68-8.74(m，1H)；12.78(s，1H，OH)。
实施例D4
1-(3-苄氧基苯基)-2-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-2-羟基亚氨基乙酮(D4)
进行与实施例C1中所述的类似的反应，但是开始于C4，得到86％ 产率的D4。
MS：M＝380(API+)，378(API-)
1H-NMR(250MHz，DMSO-D6)δ＝2.19(s，3H SCH3)；5.17(s，2H，OCH2)； 7.24-7.53(m，9H)；7.59-7.69(m，1H)；8.63-8.72(m，1H)；12.83(宽，1H， OH)。
13C-NMR(62.9MHz，DMSO-D6)δ＝13.6(SCH3)；69.9(OCH2)；111.7，113.7， 121.6，122.1，128.1，128.3，128.8，130.9，136.5*，136.9*，154.0*，158.6，159.1*， 159.4*，171.8*；193.5*(C＝O).(*＝季碳)。
E“N-羟基咪唑”的合成
实施例E1
2-(2，6-二氯-4-[乙氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5- (2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E1)
将1.60g(4.2mmol)D1、1.40g(5.0mmol)A2和3.25g(42mmol)乙 酸铵在40ml乙酸中的混合物在105℃搅拌3.5小时。蒸馏除去溶剂，将 残余物在40ml冰水和60ml乙酸乙酯之间分配，并且用浓氨水调节到pH 8。水层用乙酸乙酯萃取，将合并的有机层用MgSO4干燥并且蒸发至干， 得到3.60g浅棕色缓慢凝固的油状物，该油状物不经进一步纯化直接用 于下一步骤(实施例F1)。
MS：M＝638(API+)，636(API-)。
实施例E2
2-(2，6-二氯-4-[乙氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5- (2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E2)
进行与实施例E1中所述的类似的反应，但是开始于D2，得到橙色 油状的E2。
MS：M＝638(API+)，636(API-)。
实施例E3
2-(2，6-二氯-4-[乙氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5- (2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪唑(E3)
进行与实施例E1中所述的类似的反应，但是开始于D3，得到黄色 固体E3。
MS：M＝638(API+)，636(API-)。
实施例E4
2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-羟基-咪 唑(E4)
进行与实施例E1中所述的类似的反应，但是开始于D4和3，5-二氯 吡啶-4-甲醛(J.Med.Chem.44(2001)997)，得到E4橙色固体。
MS：M＝536(API+)，534(API-)。
F“N-H咪唑”的合成
实施例F1
2-(2，6-二氯-4-[甲氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5- (2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F1)
将3.59g(4.2mmol)E1、1.41g(8.4mmol)溴乙酸甲酯和2.85g(28 mmol)三乙胺在80ml甲醇中的混合物于60℃搅拌过夜。在真空除去溶 剂后，经过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/异己烷3∶1)得到2.08g(81％)纯F1(甲 醇中的酯交换)。
MS：M＝608(API+)，606(API-)。
实施例F2
2-(2，6-二氯-4-[甲氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5- (2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F2)
进行与实施例F1中所述的类似的反应，但是开始于E2，得到65％F2。
MS：M＝608(API+)，606(API-)。
实施例F3
2-(2，6-二氯-4-[甲氧基羰基甲氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲基-氧基)苯基)-5- (2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F3)
进行与实施例F1中所述的类似的反应，但是开始于E3，得到66％F3。 MS：M＝608(API+)，606(API-)。
实施例F4
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲硫 基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F4)
于0℃向在氮气下的2.07g(3.3mmol)F1的50ml无水THF溶液中 加入LiAlH4(1M THF溶液)，直至用HPLC检测不到F1。在用0.5ml水 进行水解并除去溶剂后，将残余物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇9∶1)， 得到93％F4。
MS：M＝580(API+)，578(API-)。
实施例F5
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲硫 基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F5)
进行与实施例F4中所述的类似的反应，但是开始于F2，得到64％F5。 MS：M＝580(API+)，578(API-)。
实施例F6
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲硫 基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(F6)
进行与实施例F4中所述的类似的反应，但是开始于F3，得到69％F6。 MS：M＝580(API+)，578(API-)。
实施例F7
2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑 (F7)
进行与实施例F1中所述的类似的反应，但是开始于E4，得到66％F7。
MS：M＝520(API+)，518(API-)。
G“N-H咪唑锍”和“N-H咪唑砜”的合成
实施例G1
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲基 亚磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G1)
在-40℃向1.20g(2.1mmol)F4在300ml乙酸乙酯和50ml二氯甲烷 中的溶液中加入0.70g(3.1mmol)间氯过苯甲酸的20ml乙酸乙酯溶液， 历时10分钟。在此温度下1小时后，使混合物温热至室温并且搅拌过夜。 洗涤混合物(饱和NaHCO3水溶液/饱和Na2CO3水溶液1∶1)，MgSO4干燥 并且蒸发至干，得到1.21g G1粗品，其不经进一步纯化直接使用。
MS：M＝596(API+)，594(API-)。
实施例G2
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲基 亚磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G2)
进行与实施例G1中所述的类似的反应，但是开始于F5，得到G2。
MS：M＝596(API+)，594(API-)。
实施例G3
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-甲基 亚磺酰基嘧啶-4-基)-N-H-咪唑(G3)
进行与实施例G1中所述的类似的反应，但是开始于F6，得到G3。
MS：M＝596(API+)，594(API-)。
实施例G4
2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-N-H-咪唑 (G4)
将2.38g(4.6mmol)F7悬浮在200ml甲醇中，在室温下于20分钟内 加入5.62g(9.1mmol)OxoneTM溶液。在室温下搅拌过夜后，真空除去甲 醇，将残余物置于乙酸乙酯中。有机层用NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4 干燥并且蒸发至干。粗的G4(47％)不经进一步纯化直接使用。
MS：M＝552(API+)，550(API-)。
H“N-H咪唑氨基嘧啶”的合成
实施例H1
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(2-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟 基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H1)
将1.21g(2.0mmol)G1和3.1g(40.6mmol)3-氨基-1-丙醇加热到 110℃60分钟。采用制备型HPLC/MS，在RP18(甲醇-水-梯度)上纯化， 得到510mg(42％)H1。
MS：M＝607(API+)，605(API-)。
实施例H2
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(3-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟 基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H2)
进行与实施例H1中所述的类似的反应，但是开始于G2，得到50％ H2。
MS：M＝607(API+)，605(API-)。
实施例H3
2-(2，6-二氯-4-[2-羟基乙氧基]苯基)-4-(3-(4-吡啶基甲氧基)苯基)-5-(2-[3-羟 基丙基氨基]嘧啶-4-基)-N-1H-咪唑(H3)
进行与实施例H1中所述的类似的反应，但是开始于G3，得到32％ H3。
MS：M＝607(API+)，605(API-)。
实施例H4
2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-(3-苄氧基苯基)-5-(2-[3-羟基丙基-氨基]嘧啶-4- 基)-N-1H-咪唑(H4)
进行与实施例H1中所述的类似的反应，但是开始于G4，得到68％ H4。
MS：M＝547(API+)，545(API-)。
实施例J：c-met自活化激酶试验(AKA)
试验原理：
C-met是涉及肿瘤转移、增殖/凋亡和血管生成的典型酪氨酸激酶。 该试验是使用磷酸-酪氨酸特异性抗体测量c-met的磷酸化的ELISA型试 验。
将已知具有高c-met含量的人结肠腺癌HT29的细胞溶解产物通过抗 -hHGF受体抗体(抗-hHGFR)结合到微量滴定板(MTP)的孔中。使用磷酸- 酪氨酸小鼠IgG和POD标记的山羊抗-小鼠IgG检测体系，在测试化合 物存在或不存在下，检测c-met的ATP-磷酸化。使用传统的POD底物 TMB，使用450nm/620nm的吸收来计算酶活性。
材料：
板：96孔聚苯乙烯板(NUNC)链菌抗生素-涂布的微量滴定板 细胞系/溶胞产物：HT29(ATCC HTB-38)，将人结肠腺癌(汇合：2.5×105细 胞/cm2)用PBS洗涤，并且在冰上用溶胞缓冲液温育10分钟。收集上清 液，用TBS稀释。溶胞产物在液氮中速冻，在-80℃储存。
试剂(除非另外声明，所有工作溶液都保持在4℃)：
抗-hHGFR检测储液：50μg/ml(R&D Systems，Cat.No.BAF 358)抗体最终 浓度：1μg/ml
p-Tyr(PY99)小鼠储液：200μg/ml(Santa Cruz Biotechnology，单克隆IgG2b Cat.No.SC-7020)最终浓度：0.2μg/ml
山羊-抗-小鼠IgG：2ml(BIO RAD，Cat.No.170-6516)，(H+L)-HRP共轭物；
最终浓度：1∶2000
封闭试剂：用于ELISA的Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.1112589，以 1∶10稀释在TBS中
ATP：腺苷-5’-三磷酸，储液10mM，储液10mM(Roche Diagnostics GmbH， Cat.No.127531)，最终浓度：40μM
TBS：Tris-缓冲的盐水，50mM TRIS pH 7.5(Roche Diagnostics GmbH， Cat.No.708976)，150mM NaCl(SIGMA，Cat.No.S-3014)
洗涤缓冲液TBS-T：Tris-缓冲的盐水，50mM TRIS pH 7.5 150mM NaCl， 含0.5％吐温20
激酶缓冲液：Tris-缓冲的盐水，50mM TRIS pH 7.5，100mM NaCl，60mM MgCl2(SIGMA Chemical Company，Cat.No.M-1028)
溶胞缓冲液：50mM TRIS pH 7.5，含1％Nonidet P40(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.1754599)0.5％脱氧胆酸(SIGMA Chemical Company，Cat.No. D-6750)，最终浓度：1mM 1mM PMSF储液70mM(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No.83709140μl/ml Complete(Roche Diagnostics GmbH，Cat.No. 1836145)，最终浓度：40μl/ml
TMB：四甲基联苯胺(Intergen Company，Cat.No.91000)
样品：10mM DMSO溶液(于-20℃储存)，室温解冻。
程序：
1.将50μl抗-hHGFR检测抗体的封闭试剂溶液加入至试验板上(最终 浓度1μg/ml)，在MTP振荡器上于室温温育试验板60分钟。
2.从试验板上除去抗-hHGFR检测抗体溶液。
3.向试验板每孔加入250μl封闭试剂，在4℃温育试验板20小时。
4.从试验板上除去封闭试剂。
5.加入50μl HT29溶胞产物，在MTP振荡器上于4℃温育试验板180 分钟。
6.用每孔2×200μl TBS缓冲液的量洗涤试验板。
7.向试验板加入40μl在激酶缓冲液中的0.2％DMSO。
8.加入40μl样品溶液(溶解在激酶缓冲液中-最终浓度22.5μM)。
9.将样品溶解在MTP中(1∶3比率)。
10.将10μl溶解在激酶缓冲液中的ATP(200μM)加入到样品中(最终浓 度40μM ATP)。阳性对照：加入40μl激酶缓冲液+10μl 200μM ATP。 阴性对照：加入40μl激酶缓冲液+10μl不含ATP的激酶缓冲液。在 MTP振荡器上于室温温育试验板60分钟。
11.用每孔2×200μl TBS缓冲液和2×200μl封闭液的量洗涤试验板。
12.将50μl P-Tyr(PY99)小鼠单克隆IgG2b的封闭试剂溶液(最终浓度 200ng/ml)加入到试验板，在MTP振荡器上于4℃温育试验板过夜。
13.用每孔2×200μl TBS缓冲液和2×200μl封闭试剂的量洗涤试验板。
14.加入50μl山羊抗-小鼠IgG(H+L)-HRP共轭物的封闭试剂溶液 (1∶2000比率)，在MTP振荡器上于室温温育试验板60分钟。
15.用每孔6×200μl TBS-T缓冲液的量洗涤试验板。
16.加入50μl TMB溶液，在MTP振荡器上于室温温育30分钟，加 入25μl 1M H2SO4。
17.测量450nm/620nm处的光密度(E)。
18.如下计算％抑制率：
1-[(E样品-E阴性对照)/(E阳性对照-E阴性对照)×100]
当用上述试验测试时，本发明试剂的激酶抑制的典型IC50值范围为 约1nM～约100nM：   样品   IC50C-met[nM]   H4   23   H1   22   H2   32   H3   54
实施例K：片剂配方(湿法造粒)
项目  成分                      mg/片
1.式(I)化合物         5      25     100    500
2.乳糖无水DTG         125    105    30     150
3.Sta-Rx1500          6      6      6      30
4.微晶纤维素          30     30     30     150
5.硬脂酸镁            1      1      1      1
合计                  167    167    167    831
制造方法：
1、混合1、2、3和4项，并用纯水造粒。
2、在50℃下干燥颗粒。
3、让颗粒通过合适的磨粉设备。
4、加入第5项并混合3分钟；在合适的压力机上压缩。
实施例L：胶囊配方
项目  成分                 mg/胶囊
1.式(I)化合物     5      25      100     500
2.含水乳糖        159    123     148     ---
3.玉米淀粉        25     35      40      70
4.滑石            10     15      10      25
5.硬脂酸镁        1      2       2       5
合计              200    200     300     600
制造方法：
1、在合适的混合器中混合1、2、和3项30分钟。
2、加入4和5项并混合3分钟。
3、填充到合适的胶囊中。
                       参考文献目录
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