本发明涉及化合物合成方法，具体是涉及吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍
生物的全合成方法。
背录技术
研究表明，从多种海绵中分离得到的吡咯杂环生物碱aldisin (6，7-二氢 -1仏5//-吡咯并[2，3^]氮杂卓-4，8-二酮）类化合物（徐石海；曾陇梅；苏镜娱，分 桥漱试学叛，1998，/7，32〜34.),具有显著抗脂质过氧化作用（唐效礼；许实波; 徐石海；^房秀潘学逮叛，1998， W， 148 ~ 150)，能有效地清除'0和OH及 DPPH(二苦味酰基），是自由基的清除剂。此外，离体实验证明，它们还具有 独特的强心作用一一有正性肌力作用，对正常动物的离体心脏也不增加心率， 其在心血管系统药物中具有明显的优势。鉴于aldisin具有上述双重作用，如能 开发成药物，应当比目前常用的治疗心血管药物的适用范围更广泛，更有临床 应用价值。
Hirokazu Annoura等曾报道3-bromoaldisin的合成方法（Hirokazu Annoura and Toshio Tatsuoka， r"/v^ec^o"丄e仏，1995， 36, 413 ~ 416)，其方法是：以甲苯 作溶剂，在60'C条件下2-吡咯甲酸与二氯亚砜反应1小时，制得2-吡咯甲酰氯， 然后以三乙胺为缚酸剂，2-吡咯甲酰氯与^-丙氨酸甲酯室温下反应3小时生成 ^(2-吡咯甲酰基)-/?-丙氨酸甲酯，再与W-溴代丁二酰亚胺（NBS)在室温下进 行溴代反应2小时生成AK5-溴-2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸甲酯，后者经水解，在 多聚磷酸作用下，在100'C反应1小时，获得少量的3-bromoaldisin,总产率为 11,5%。
Hirokazu Annoura报道的合成方法是以2-吡咯甲酸为原料经五步反应备成 目标化合物，存在以下不足：（1) 2-吡咯甲酸价格昂贵；（2) 2-吡咯甲酸经 酰氯化生成的酰化剂2-吡咯甲酰氯难保存，并需要毒性较大的甲苯作溶剂：（3)
W-溴代丁二酰亚胺（NBS)价格昂贵，以其作溴化剂溴代产物收率低，仅为56%;
(4) NBS作溴化剂与W-(2-吡咯甲酰基)-P-丙氨酸甲酯作用，产物为^-(5-溴-2-吡咯甲酰基)-p-丙氨酸甲酯，后者在多聚磷酸作用下进行环化反应，反应过程 中部分溴从吡咯环的a-位转移到々-位从而生成产物；（5)多聚磷酸为粘稠体， 反应物不易分散（溶解不均匀）；（6)3-bromoaldisin总产率较低，仅为11.5%。 此外，aldisin的另一溴代衍生物2,3-dibromoaldisin未见有合成的报道。

本发明的目的在于提供一种吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物的全合成 方法，所合成的两种溴代吡咯杂环生物碱3-bromoaldisin和2，3-dibromoaldisin 具有潜在抗心血管疾病活性。
本发明所述的吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物的全合成方法，包括以 下步骤.，
A) 酰基化反应：以吡咯为起始原料，经酰基化反应生成2-三氯乙酰基吡
咯；
B) 溴代反应：15〜35'C下，2-三氯乙酰基吡咯与溴反应，生成溴代2-三 氯乙酰基吡咯；
C) 缩合反应：15〜35'C下，y?-丙氨酸甲酯与溴代2-三氯乙酰基吡咯反应3
〜8小时，制得溴代AK2-吡咯甲酰基)-尽丙氨酸甲酯；
D) 水解反应：步骤C所得产物经水解得溴代A42-吡咯甲酰基)-yff-丙氨酸；
E) 环化反应：以三氯氧磷作脱水剂，步骤D所得产物在三氯氧磷回流状 态下反应0.5 ~ 1小时，生成吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物。
吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物为3-bromoaldisin的合成方法：
所述的步骤B中，2-三氯乙酰基吡咯与溴的摩尔比为1 : 1,反应时间为0.5 小时，生成的溴代2-三氯乙酰基吡咯为4-溴-2-三氯乙酰基吡咯；
所述的步骤C所制得的溴代W-(2-吡咯甲酰基)弄丙氨酸甲酯为7^-(4-溴-2-吡咯甲酰基)-)ff-丙氨酸甲酯；
所述的步骤D所制得的溴代W-(2-吡咯甲酰基)-广丙氨酸为W-(4-溴-2-吡咯 甲酰基)---丙氨酸；
所述的步骤E所生成的吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物为吡咯杂环生 物碱3-bromoaldisin。
吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物为2，3-dibromoaldisin的合成方法：
所述的步骤B中，2-三氯乙酰基吡咯与溴的摩尔比为1 : 2，反应时间为1 小时，生成的溴代2-三氯乙酰基吡咯为4,5-二溴-2-三氯乙酰基吡咯；
所述的步骤C所制得的溴代W-(2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸甲酯为^(4,5-二溴 -2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸甲酯；
所述的步骤D所制得的溴代iV-(2-吡咯甲酰基)弄丙氨酸为^(4，5-二溴-2-吡咯甲酰基)^-丙氨酸；
所述的步骤E所生成的吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物为吡咯杂环生 物碱2，3-dibromoaldisin。
本发明的有益效果在于：与原有合成方法相比较，本发明所述的全合成方 法以吡咯替代2-吡咯甲酸为起始原料，经五步反应合成目标化合物，所需原料 简单易得，反应条件温和，反应时间短，成本低，操作简便安全，产品纯度高， 产率也高，产物3-bromoaldisin和2，3-dibromoaldisin的总产率分别为36.4%和 35.5% (以起始原料吡咯计）。
本发明所人工合成的两个生物碱都是根据aldisin的结构进行设计并加以全 合成，用于寻找和筛选有更好生物活性的化合物，以便开发治疗心血管治病药 物或该类药物的前体。研究表明，许多生物活性物质中，溴的存在使其生物活 性如抗肿瘤、抗菌活性等明显提高，例如，从海绵中发现的许多含溴吡咯环结 构的生物碱显示出特有的药理活性，包括c-erbB-2激酶和cdk4激酶抑制剂，a-肾上腺素受体阻断剂，血清素激活受体的对抗药物，抗组胺药物，肌动球蛋白 ATPase激活药物等[Rino Ragno, Garland R. Marshall, Roberto, et al.， Antibacterial Pyrroles: Synthesis, Anti-Mycobacterium Tuberculosis Activity and QSAR Studies, 5i'oor戸!c 3-bromoaldisin和2，3-dibromoaldisin，希望得到适用范围广、活性更好，更有临 床应用价值的特效新药。3-bromoaldisin和2,3-dibromoaldisin的抗脂质过氧化 作用和《—葡萄糖苷酶抑制作用等药理实验正在进行中。
附图说明
图1为本发明的合成路线示意图。

本发明所述的吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物的全合成方法，如图1 所示，包括以下步骤：
A) 酰基化反应：以吡咯为起始原料，经酰基化反应生成2-三氯乙酰基吡 咯（I);图1中，采用的酰基化试剂为Cl3C-COCl (i),也可采用其他酰基化试剂。
B) 溴代反应：15〜35'C下，2-三氯乙酰基吡咯（I)与溴（ii)反应，生成
溴代2-三氯乙酰基吡咯（II);
C) 縮合反应：15〜35'C下，y?-丙氨酸甲酯（iii)与溴代2-三氯乙酰基吡咯 (II)反应3〜8小时，制得溴代iV-(2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸甲酯（III);
D) 水解反应：步骤C所得产物经水解得溴代AK2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸
(IV);
E) 环化反应：以三氯氧磷作脱水剂，步骤D所得产物在三氯氧磷（v)回 流状态下反应0.5 ~ 1小时，生成吡咯杂环生物碱aldisin的溴代衍生物（V)。
如图1所示，两个取代基X和Y，当X-H且Y-Br时，最终产物为 3-b譲oaldisin (Va);当X = Br且Y = Br时，最终产物为2，3-dibromoaldisin (Vb)。
实施例一：3-bromoaldisin的全合成
(1) 2-三氯乙酰基吡咯（I)的合成
合成方法参考Bailey报道的方法（Denis M. Bailey; Robert E. Johnson; and Noel F. Albertson, Org.办",，1971, KoUJ， 100.)。粗产物用正己烷重结晶，得灰 色片状2-三氯乙酰基吡咯晶体7.14g，产率84%，熔点74〜75'C，与Bailey的 报道相符。该灰色片状晶体为2-三氯乙酰基吡咯（1)。
(2) 4-溴-2-三氯乙酰基吡咯（IIa)的合成
在250 mL圆底烧瓶中加入3.2 g2-三氯乙酰基吡咯（1)， lOOmLCCU和2 mg碘，磁力搅拌下缓慢滴加0.8mLBr2的30mLCCU溶液，0.5h滴完，维持 温度25〜30'C,继续搅拌0.5h， TLC跟踪反应。终止反应，滴加20。/。Na2CO3 水溶液至pH-7〜8,过滤除去不溶物，分出有机层，水相用10mL的CCU 萃取，合并有机相，无水Na2S04干燥；减压蒸出CCU，粗产物经C2H5OH : H20 =5 : 1 ( K/ K)作溶剂重结晶，得浅灰色片状晶体4.08g，收率94.6 %。熔点136 ~ 138 。C，与Bdanger的报道(P. Bdanger， r"ra/t"ra" Le". 1979, 27， 2505 ~ 2508.)相符。该浅灰色片状晶体为4-溴-2-三氯乙酰基吡咯（IIa)。
(3) A44-溴-2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸甲酯（HIa)的合成
50 mL圆底烧瓶中加入1.4 gy?-丙氨酸甲酯盐酸盐、2.92 g 4-溴-2-三氯乙酰 基吡咯（Ha)和15mL乙酸乙酯，搅拌下滴加2mL三乙胺，室温下反应4小 时。减压蒸出乙酸乙酯，粗产物用95%乙醇重结晶，得浅黄色晶体2.33g,收 率84.7%，熔点78〜79'C。该浅黄色晶体为iV-(4-溴-2-吡咯甲酰基)-^-丙氨酸 甲酯（nia)。
(4) A^(4-漠-2-吡咯甲酰基H?-丙氨酸（IVa)的合成 W-(4-溴-2-吡咯甲酰基)弄丙氨酸甲酯（IHa) 2.75 g, 10 % NaOH水-乙醇
溶液30mL，室温下搅拌8小时，滴加10%盐酸至微酸性，过滤除去不溶物，
水溶液用乙酸乙酯萃取，无水Na2S04干燥；蒸除溶剂，固体剩余物用95%乙 醇重结晶，得棕色棱形晶体2.52g,产率97%，熔点156〜157'C。该棕色棱形 晶体为AH4-溴-2-吡咯甲酰基),丙氨酸（IVa)。 (5) 3-bromoa】disin (Va)的合成 50mL二口瓶，装上带CaCl2干燥管的回流冷凝管，加入10mL三氯氧磷， 和1.31 giV-(4-溴-2-吡咯甲酰基hff-丙氨酸（IVa),加热回流30min;反应物冷 却至40 ~ 50'C，加入到25 g碎冰-水中，搅拌下滴加10 % NaOH水溶液至中性， 用乙酸乙酯萃取，无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，剩余物用甲醇重结晶，得无 色晶体0.67 g，产率55.8 %,熔点238 ~ 240 'C。该无色晶体为3-bromoaldisin (Va)o
实施例二： 2,3-dibromoaldisin的全合成
(1) 2-三氯乙酰基吡咯（1)的合成
合成方法参考Bailey报道的方法（Denis M. Bailey; Robert E. Johnson; and Noel F. Albertson， Org. S"" 1971, Fo/.5;， 100.)。粗产物用正己烷重结晶，得灰 色片状2-三氯乙酰基吡咯晶体7.14g，产率84%,熔点74〜75'C,与Bailey的 报道相符。该灰色片状晶体为2-三氯乙酰基吡咯（1)。
(2) 4，5-二溴-2-三氯乙酰基吡咯（Hb)的合成
在250 mL圆底烧瓶中加入3.2g 2-三氯乙酰基吡咯（U 100 mL CCU和2 mg 碘，磁力搅拌下缓慢滴加1.6mLBr2的30mLCCl4溶液，lh滴完，维持温度 25~30°C，继续搅拌1.5h， TLC跟踪反应。终止反应，滴加20 % Na2C03水 溶液至pH = 7~8，过滤除去不溶物，分出有机层，水相用10 mL的CCU萃取， 合并有机相，无水Na2S04干燥：减压蒸出CCU，粗产物经C2H5OH : H20 = 4 : 1 ( K)作溶剂重结晶，得淡黄色片状晶体5.52 &收率98.4 %熔点116 ~ 117'C。该淡黄色片状晶体为4,5-二漠-2-三氯乙酰基吡咯（IIb)。
(3) iV-(4,5-二溴-2-吡咯甲酰基)+丙氨酸甲酯（IIIb)的合成 50mL圆底烧瓶中加入1.4g/?-丙氨酸甲酯盐酸盐、3.7 g4，5-二溴-2-三氯乙
酰基吡咯（lib)和15mL乙酸乙酯，搅拌下滴加2mL三乙胺，室温下反应3 小时。减压蒸出乙酸乙酯，粗产物用95%乙醇重结晶得浅黄色晶体3.11 g,收 率88.3 %，熔点78 ~ 79 'C。该浅黄色晶体为W-(4，5-二溴-2-吡咯甲酰基)-"-丙 氨酸甲酯（IHb)。
(4) iV-(4,5-二溴-2-吡咯甲酰基)^-丙氨酸（IVb)的合成 ^-(4,5-二溴-2-吡咯甲酰基)-^丙氨酸甲酯（HIb) 3.54 g， 10%NaOI^_K-
乙醇溶液30mL，室温下搅拌8小时，滴加10%盐酸至微酸性，过滤除去不溶 物，水溶液用乙酸乙酯萃取，无水Na2S04干燥；蒸除溶剂，固体剩余物用95% 乙醇重结晶，得棕色棱形晶体3.32g，产率93.5%,熔点205〜207。C。该棕色 棱形晶体为W-(4，5-二溴-2-吡咯甲酰基)+丙氨酸（IVb)。
(5) 2,3-dibromoaldisin (Vb)的合成
50mL二口瓶，装上带CaCl2干燥管的回流冷凝管，加入10mL三氯氧磷， 和1.78 gAK4，5-二溴-2-吡咯甲酷基)+丙氨酸(IVb),加热回流30min;反应 物冷却至40〜50'C，加入到25g碎冰-水中，搅拌下滴加10。/。NaOH水溶液至 中性，用乙酸乙酯萃取，无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，剩余物用甲醇重结晶， 得无色晶体0.85 g，产率52.6 %，熔点260 ~ 262 'C 。该无色晶体为 2，3-dibromoaldisin (Vb)。
实施例三：3-bromoaldisin (Va)的鉴定实验 3-bromoaldisin的表征：
无色晶体，m. p.: 238 ~ 240 'C. m. p.: 238 ~ 240 'C. 'H NMR ( 300MHz，
DMSO-d6 ) (5: 12.53 ( brs， 1H， PyNH )， 8.47 (t, «/= 4.8Hz， 1H， CONH )， 7.19 ( d， J - 2.7Hz, 1H， PyH )， 3.35 ~ 3.31 ( m， 2H, 8-CH2 )， 2.74 ~ 2.71 ( m， 2H， 9-CH2 ); IR ( KBr.)v: 3439, 3202， 3068, 1688， 1649， 1479, 1211 cm — '; FABMS加々（％ ): 243， 245 ( [ M + H ] + , 6, 5.5 ). Anal, calcd. for C8H7BrN202: C 39.53， H 2.90， N11.53; found C 39.71， H 2.76, N 11.61.
结构分析：IR谱中，3439处的吸收为吡咯环N—H的伸縮振动吸收，1688 处强而尖的吸收归属于芳香酮羰基的伸缩振动，而3202， 1649, 1423和1211 则为与仲酰胺结构相关的吸收。FABMS谱中可见其两个[M + H ]峰，即243 和245峰，强度分别是6%和5.5%，表明Va分子结构中有一个溴原子。将化 合物Va的1H NMR数据与徐效华等[XU Xiao-Hua, CHEN Xia, LIAO Ren-An， Isolation and crystal structure of 2-dibromoaldisin, C/n'wese J. S&wcf. CTie/w,, 2001, 20(3)， 173 ~ 175.]从中国南海海绵Phacellia fusca Schmidt中分离得到的化合物
2- bromoaldisin的相应数据进行比较可见，在化合物Va中，Sh7.19相皮于与C2 相连的氢。根据以上分析，结合元素分析结果，可以推断化合物Va是
3- bromoaldisin。
实施例四：2，3-dibromoaldisin (Vb)的鉴定实验 2，3-dibromoaldisin的表征：
黄色晶体，m. p.: 260 ~ 262 。C. lH NMR ( 300MHz， DMSO-c4 ) <5: 13.45 (brs, 1H， PyNH )， 8.54 ( brs, 1H, CONH ), 3.38 ~ 3.33 ( m， 2H, 8-CH2 ), 2.76 ~ 2.72 ( m, 2H, 9-CH2 ); IR ( KBr )v: 3345， 3110， 1647, 1471， 1418， 1207 cm _】； FABMS w々（％ ): 321， 323， 325 ( [ M + H ] + , 3， 5, 2.5 ). Anal, calcd. for C8H6Br2N202: C 29.85， H 1.88， N 8.70; found C 29.62， H 1.75， N 8.71.
结构分析：化合物Vb的IR谱中，3345处的吸收为吡咯环N—H的伸缩振
动吸收，1647处强而尖的吸收归属于芳香酮羰基的伸缩振动，而1418，和1207 则为与仲酰胺结构相关的吸收。其FABMS谱中有三个[M + H]峰，即321、 323 和325峰，强度分别是3%、 5%和2.5%,表明分子结构中存在两个溴原子。 比较Vb与Va的'H NMR谱，可见Vb比Va少了一个低场峰（5H7.19)，即分 子结构中少了一个吡咯环上的氢。根据以上分析，结合元素分析结果，可以证 明化合物Vb是2，3-dibromoaldisin。