IL-8 수용체 길항제

ＩＬ-8 수용체 길항제

호중구 친화제/활성 단백질-1 (NAP-1), 단핵구 유도 호중구 화학주성 인자 (MDNCF), 호중구 활성화 인자 (NAF), 및 T-세포 임파구 화학주성 인자와 같은 많은 상이한 명칭이 인터루킨-8 (IL-8)에 적용되어 왔다. 인터루킨-8은 호중구 세포, 호염기성 세포, 및 T-세포의 부분집합이다. 이것은 대식세포, 섬유아세포, TNF, IL-1α, IL-1β 또는 LPS에 노출된 내피 및 상피 세포를 포함하는 다수의 핵형성 세포, 및 LPS 또는 FMLP와 같은 화학주성 인자에 노출될 경우 호중구 세포 자체에 의해 생성된다 [엠. 바지올리니 (M. Baggiolini) 등, J. Clin. Invest. 84, 1045 (1989); 제이. 슈로더 (J. Schroder) 등, J. Immunol. 139, 3474 (1987) 및 J. Immunol. 144, 2223 (1990); 스트리터 (Strieter) 등, Science 243, 1467 (1989) 및 J. Biol. Chem. 264, 10621 (1989); 및 카사텔라 (Cassatella) 등, J. Immunol. 148, 3216 (1992)].

또한, Groα, GROβ, GROγ 및 NAP-2는 케모카인 (Chemokine) α 부류에 속한다. IL-8과 같이, 이러한 케모카인 역시 상이한 명칭으로 명명되어 왔다. 예를 들면, GROα, GROβ 및 GROγ는 각기 MGSA (멜라노마 성장 자극 활성)α, β 및 γ로 명명되어 왔다 [리치몬드 (Richmond) 등, J. Cell Physiology 129, 375 (1986) 및 창 (Chang) 등의 J. Immunol 148, 451 (1992) 참조]. CXC 동인 바로 앞에 ELR 동인을 갖는 α-부류의 모든 케모카인은 IL-8B 수용체에 결합한다.

IL-8, Groα, GROβ, GORγ, NAP-2 및 ENA-78은 생체 외에서 다수의 기능을 자극한다. 이들 모두는 호중구 세포에 대하여 화학 친화성을 갖는 반면, IL-8 및 GROα는 T-임파구 및 호염기성 세포 화학주성 활성을 나타내었다. 또한, IL-8은 정소 및 정소외의 개체 GRO-α 모두로부터의 호염기성 세포로부터 히스타민 방출을 유도할 수 있고, 또한 IL-8은 호중구로부터 리소좀 효소 방출 및 호흡 파열을 유도할 수 있다. 또한, IL-8은 새로 단백질을 합성하지 않고 호중구 세포 상에서 Mac-1 (CD11b/CD18)의 표면 발현을 증가시키는 것이 관찰되었다. 이것은 혈관 내피 세포에 대한 호중구 세포의 접착성의 증가에 기인한 것일 수 있다. 많은 공지된 질병은 광범위한 호중구 세포 침입을 특징으로 한다. IL-8, Groα, GROβ, GROγ 및 NAP-2가 호중구 세포의 축적 및 활성을 촉진시키기 때문에, 이러한 케모카인은 건선 및 류머티즘성 관절염을 포함하여 광범위한 급성 및 만성 염증성 질병에 관련되어 왔다 [바지올리니 등, FEBS Lett. 307, 97 (1992); 밀러 (Miller) 등, Crit. Rev. Immunol. 12, 17 (1992); 오펜하임 (Oppenheim) 등, Annu. Rev. Immunol. 9, 617 (1991); 사이쯔 (Seitz) 등, J. Clin. Invest. 87, 463 (1991); 밀러 등, Am. Rev. Respir. Dis. 146, 427 (1992); 도넬리 (Donnely) 등, Lancet 341, 643 (1993)]. 또한, ELR 케모카인 (CXC 동인 바로 앞에 아미노산 ELR 동인을 함유하는 것)이 지혈에 관련되어 왔다 [스트리터 등, Science 258, 1798 (1992)].

생체 외에서, IL-8, Groα, GROβ, GROγ 및 NAP-2는 7 개의 트랜스 멤브레인인 G-단백질 결합 부류의 수용체에 결합되고 이를 활성화시킴으로써 특히 IL-8 수용체, 가장 현저하게는 B-수용체에 결합함으로써 호중구 세포 형상 변화, 화학주성, 입자 방출 및 호흡 파열을 유도한다 [토마스 (Thomas) 등의 J. Biol. Chem. 266, 14839 (1991); 및 홀메스 (Holmes) 등, Science 253, 1278 (1991)]. 이러한 수용체 부류의 구성원에 대한 펩티드가 아닌 소분자 길항제의 개발이 선행되어 왔다 [알. 프리딩거 (R. Freidinger)의 Progress in Drug Research, Vol. 40, pp. 33-98, Birkhauser Verlag, Basel 1993 참조]. 따라서, IL-8 수용체는 신규 항염증제의 개발에 대해 유망한 목표를 나타낸다.

두 가지 친화도가 높은 사람 IL-8 수용체 (77 % 상동 관계)가 서술되어 왔는데, 그 중 하나는 높은 친화성으로 IL-8에만 결합하는 IL-8Rα이고, 다른 하나는 IL-8에 대해서 뿐만 아니라 GRO-α, GROβ, GROγ 및 NAP-2에 대해 높은 친화성을 갖는 IL-8Rβ이다 [홀메스 등, supra; 머피 (Murphy) 등, Science 253, 1280 (1991); 리 (Lee) 등, J. Biol. Chem. 267, 16283 (1992); 라로사 (LaRosa) 등, J. Biol. Chem. 267, 25402 (1992); 및 게일 (Gayle) 등, J. Biol. Chem. 268, 7283 (1993) 참조].

이러한 분야에는 IL-8α 또는 IL-8β 수용체에 결합할 수 있는 화합물에 대한 치료의 필요성이 남아있다. 따라서, IL-8 생성 증가와 관련된 증상 (호중구 세포 및 T-세포 부분집합의 염증 자리로의 화학주성이 원인임)은 IL-8 수용체 결합의 억제제인 화합물서 이득을 얻는다.

발명의 요약

본 발명은 IL-8α 또는 β 수용체에 결합하는 케모카인 매개 질병의 치료 방법을 제공하는 것으로, 상기 방법은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염의 유효량을 투여하는 것으로 이루어진다. 특히, 케모카인은 IL-8이다.

또한, 본 발명은 이를 필요로하는 포유 동물에서 IL-8이 그의 수용체에 결합하는 것을 억제하는 방법에 관한 것으로, 상기 포유 동물에게 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물을 유효량 투여하는 것으로 이루어진다.

본 발명에 유용한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염은 하기 구조를 나타낸다:

식 중,

X는 산소 또는 황이고;

R은 이온화 가능한 수소 및 10 이하의 pKa를 갖는 관능기이고;

R ₁ 은 독립적으로 수소; 할로겐; 니트로; 시아노; 할로치환 C _1-10 알킬; C _1-10 알킬; C _2-10 알케닐; C _1-10 알콕시; 할로치환 C _1-10 알콕시; 아지드; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) _t R ₄ ; 히드록시; 히드록시 C _1-4 알킬; 아릴; 아릴 C _1-4 알킬; 아릴옥시; 아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로아릴; 헤테로아릴알킬; 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬; 헤테로아릴 C _1-4 알킬옥시; 아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로시클릭 C _2-10 알케닐; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ R ₅ ; C _2-10 알케닐 C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₁₀ ; S(O) ₃ H; S(O) ₃ R ₈ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)OR ₁₁ (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)OR ₁₂ ; (CR ₈ R ₈ ) _q OC(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ C(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NHS(O) ₂ R ₁₇ ; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) ₂ NR ₄ R ₅ 로부터 선택되거나, 두 개의 R ₁ 잔기가 함께 O-(CH ₂ ) _s O- 또는 5원 내지 6원 불포화 고리를 형성할 수 있고 (여기서, q는 0, 또는 1 내지 10의 정수이고, s는 1 내지 3의 정수이고, t는 0, 또는 1 또는 2의 정수이고, v는 0 또는 1 내지 4의 정수임);

n은 1 내지 3의 정수이고;

m은 1 내지 3의 정수이고;

w는 1 내지 3의 정수이고;

R ₄ 및 R ₅ 는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬이거나, 이들이 결합되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 또는 황으로부터 선택된 추가의 헤테로원자를 임의로 포함할 수 있는 5원 내지 7원 고리를 형성하고;

Y는 독립적으로 수소; 할로겐; 니트로; 시아노; 할로치환 C _1-10 알킬; C _1-10 알킬; C _2-10 알케닐; C _1-10 알콕시; 할로치환 C _1-10 알콕시; 아지드; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) _t R ₄ ; 히드록시; 히드록시 C _1-4 알킬; 아릴; 아릴 C _1-4 알킬; 아릴옥시; 아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로아릴; 헤테로아릴알킬; 헤테로아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로시클릭; 헤테로시클릭 C _1-4 알킬; 아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로시클릭 C _2-10 알케닐; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ R ₅ ; C _2-10 알케닐 C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₁₀ ; S(O) ₃ H; S(O) ₃ R ₈ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)OR ₁₁ ; C(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)OR ₁₂ ; (CR ₈ R ₈ ) _q OC(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ C(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NHS(O) ₂ R _d , (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) ₂ NR ₄ R ₅ 로부터 선택되거나, 두 개의 Y 잔기가 함께 O-(CH ₂ ) _s O- 또는 5원 내지 6원 불포화 고리를 형성할 수 있고;

R ₆ 및 R ₇ 은 독립적으로 수소 또는 C _1-4 알킬기이거나, 이들이 결합되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 또는 황으로부터 선택된 추가의 헤테로원자를 임의로 포함할 수 있는 5원 내지 7원 고리를 형성하고;

R ₈ 은 수소 또는 C _1-4 알킬이고;

R ₁₀ 은 C _1-10 알킬 C(O) ₂ R ₈ 이고;

R ₁₁ 은 수소, C _1-4 알킬, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로시클릭 또는 임의로 치환된 헤테로시클릭 C _1-4 알킬이고;

R ₁₂ 는 수소, C _1-10 알킬, 임의로 치환된 아릴 또는 임의로 치환된 아릴알킬이고;

R ₁₃ 및 R ₁₄ 는 독립적으로 수소 또는 C _1-4 알킬이고;

R ₁₇ 은 C _1-4 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬 (여기서, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로시클릭 고리는 모두 임의로 치환될 수 있음)이고;

Rd는 NR ₆ R ₇ , 알킬, 아릴 C _1-4 알킬, 아릴 C _2-4 알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C _1-4 알킬, 헤테로아릴 C _2-4 알케닐, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬 (여기서, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로시클릭 고리는 모두 임의로 치환될 수 있음)이고;

E는

화학식 Ⅱ의 화합물은 하기의 구조로 나타내진다:

식 중, Y는 임의로 치환된 C _1-10 알킬, 임의로 치환된 C _2-10 알케닐 또는 임의로 치환된 C _2-10 알키닐이고, 다른 변수들은 상기 화학식 I에 정의된 바와 같다.

본 발명은 페닐 우레아 화합물의 신규한 기, 그의 제조 방법, IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 및 ENA-78 매개 질병 치료에서의 그의 용도 및 이러한 치료에 사용하기 위한 제약 조성물에 관한 것이다.

화학식 I 및 Ⅱ의 화합물은 IL-8 또는 IL-8α 또는 β 수용체에 결합하는 다른 케모카인의 억제가 필요한 사람 이외의 포유 동물의 수의학적 치료와 관련되어 사용될 수도 있다. 동물에서 치료 또는 예방을 위하여 치료할 필요가 있는 케모카인 매개 질병은 본 명세서의 <치료 방법> 섹션에 기재되어 있는 질병들을 포함한다.

화학식 I 및 Ⅱ의 화합물에서, R은 10 미만, 바람직하게는 약 3 내지 9, 보다 바람직하게는 약 3 내지 7의 pKa를 가지며 이온화 가능한 수소를 제공하는 임의의 관능기인 것이 적합하다. 이러한 관능기로는 히드록시, 카르복실산, 티올, SR ₂ , OR ₂ , NH-C(O)Ra, C(O)NR ₆ R ₇ , 화학식 NHS(O) ₂ Rb, S(O) ₂ NHRc, NHC(X ₂ )NHRb의 치환 술폰아미드, 또는 테트라졸릴을 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

X ₂ 는 산소 또는 황이 적합하고, 바람직하게는 산소이다.

R ₂ 는 치환된 아릴, 헤테로아릴, 또는 그 고리가 10 이하의 pKa를 갖는 이온화 가능한 수소를 제공하는 관능기를 갖는 헤테로시클릭 고리인 것이 적합하다.

R ₆ 및 R ₇ 은 독립적으로 수소 또는 C _1-4 알킬기이거나, 이들이 결합되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 또는 황으로부터 선택된 추가의 헤테로원자를 임의로 포함할 수 있는 5원 내지 7원 고리를 형성한다. 이러한 헤테로 고리는 본 명세서에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

Ra는 알킬, 아릴, 아릴 C _1-4 알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭, 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬 잔기인 것이 적합하며, 이들 모두는 하기에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

Rb는 NR ₆ R ₇ , 알킬, 아릴, 아릴 C _1-4 알킬, 아릴 C _2-4 알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로아릴 C _2-4 알케닐, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬, 또는 헤테로시클릭 C _2-4 알케닐 잔기, 캄포르인 것이 적합하며, 이들은 모두 할로겐; 니트로; CF ₃ 과 같은 할로 치환 C _1-4 알킬; 메틸과 같은 C _1-4 알킬; 메톡시와 같은 C _1-4 알콕시; NR ₉ C(O)Ra; C(O)NR ₆ R ₇ , S(O) ₃ H, 또는 C(O)OC _1-4 알킬에 의해 임의로 1회 내지 3회 독립적으로 치환할 수 있다. Rb가 헤테로아릴 고리인 경우, 이것은 임의로 치환된 티아졸, 임의로 치환된 티에닐, 또는 임의로 치환된 퀴놀리닐 고리인 것이 바람직하다.

R ₉ 는 수소 또는 C _1-4 알킬인 것이 적합하며, 수소인 것이 바람직하다. Rb 잔기 상의 치환기가 NR ₉ C(O)Ra인 경우, Ra는 메틸과 같은 알킬기인 것이 바람직하다.

Rc는 수소, 알킬, 아릴, 아릴 C _1-4 알킬, 아릴 C _1-4 알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로아릴 C _1-4 알케닐, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬, 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알케닐 잔기인 것이 바람직하며, 이들은 모두 할로겐, 니트로, 할로치환 C _1-4 알킬, C _1-4 알킬, C _1-4 알콕시, NR ₉ C(O)Ra, C(O)NR ₆ R ₇ , S(O) ₃ H, 또는 C(O)OC _1-4 알킬에 의해 임의로 1회 내지 3회 독립적으로 치환될 수 있다. Rc는 임의로 치환된 페닐인 것이 바람직하다.

R이 OR ₂ 또는 SR ₂ 잔기일 때, 당업자라면 아릴 고리가 필요한 이온화 가능한 수소를 함유하여야 한다는 것을 인식할 것이다. 또한, 아릴 고리는 독립적으로 추가의 이온화 가능한 기를 함유할 수 있는 1 내지 3 개의 기에 의하여 추가로 치환될 수 있으며, 이러한 기로는 할로겐, 니트로, 할로치환 C _1-4 알킬, C _1-4 알킬, C _1-4 알콕시, 히드록시, SH, C(O)NR ₆ R ₇ , NH-C(O)Ra, NHS(O) ₂ Rb, S(O) ₂ NR ₆ R ₇ , C(O)OR ₈ , 또는 테트라졸릴 고리를 들 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

관능기 R은 아릴, 헤테로아릴 또는 SR ₂ 또는 OR ₂ 에서와 같은 헤테로시클릭 잔기 고리 상에 치환기로서 직접적으로 또는 간접적으로의 황산 이외의 것이다.

화학식 I의 화합물에서, R ₁ 은 독립적으로 수소; 할로겐; 니트로; 시아노; CF ₃ 과 같은 할로치환 C _1-10 알킬; 메틸, 에틸, 이소프로필, 또는 n-프로필과 같은 C _1-10 알킬; C _2-10 알케닐; 메톡시 또는 에톡시와 같은 C _1-10 알콕시; 트리플루오로메톡시와 같은 할로치환 C _1-10 알콕시; 아지드; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) _t R ₄ (여기서, t는 0, 1 또는 2임); 히드록시; 메탄올 또는 에탄올과 같은 히드록시 C _1-4 알킬; 페닐 또는 나프틸과 같은 아릴; 벤질과 같은 아릴 C _1-4 알킬; 페녹시와 같은 아릴옥시; 벤질옥시와 같은 아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로아릴; 헤테로아릴알킬; 헤테로아릴 C _1-4 알킬옥시; 아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로시클릭 C _2-10 알케닐; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ R ₅ ; C _2-10 알케닐 C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₁₀ ; S(O) ₃ H; S(O) ₃ R ₈ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)OR ₁₁ ; C(O)OR ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)OR ₁₂ ; (CR ₈ R ₈ ) _q OC(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ C(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NHS(O) ₂ R ₁₇ ; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) ₂ NR ₄ R ₅ 로부터 선택되거나, 두 개의 R ₁ 잔기가 함께 O-(CH ₂ ) _s O- 또는 5원 내지 6원 불포화 고리 (여기서, s는 1 내지 3의 정수임)를 형성할 수 있는 것이 바람직하다. 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭알킬, 및 헤테로시클릭알케닐 잔기는 모두 하기에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

q는 0 또는 1 내지 10의 정수인 것이 적합하다.

R ₁ 이 디옥시 결합을 형성할 때, s는 1이 바람직하다. R ₁ 이 추가의 불포화 고리를 형성할 때, 이것은 나프탈렌 고리 시스템을 형성하는 6원인 것이 바람직하다. 이러한 나프탈렌 고리는 독립적으로 상기 정의된 바와 같은 다른 R ₁ 잔기에 의해 1회 내지 3회 치환될 수 있다.

R ₄ 및 R ₅ 는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬이거나, 이들이 결합되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 또는 황으로부터 선택된 추가의 헤테로원자를 임의로 포함할 수 있는 5원 내지 7원 고리를 형성하는 것이 적합하다.

R ₈ 은 독립적으로 수소 또는 C _1-4 알킬로부터 선택되는 것이 적합하다.

R ₁₀ 은 CH ₂ C(O) ₂ H 또는 CH ₂ C(O) ₂ CH ₃ 과 같은 C _1-10 알킬 C(O) ₂ R ₈ 인 것이 적합하다.

R ₁₁ 은 수소, C _1-4 알킬, 아릴, 아릴 C _1-4 알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬인 것이 적합하다.

R ₁₂ 는 수소, C _1-10 알킬, 임의로 치환된 아릴 또는 임의로 치환된 아릴알킬인 것이 적합하다.

R ₁₇ 은 C _1-4 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬 (여기서, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로시클릭 고리는 모두 임의로 치환될 수 있음)인 것이 적합하다.

R ₁ 은 할로겐, 시아노, 니트로, CF ₃ , C(O)NR ₄ R ₅ , 알케닐 C(O)NR ₄ R ₅ , C(O)R ₄ R ₁₀ , 알케닐 C(O)OR ₁₂ , 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴 알케닐, 또는 S(O)NR ₄ R ₅ 인 것이 바람직하고, 둘 다 수소이거나 이 중 하나가 페닐인 것이 바람직하다. R ₁ 에 대한 고리 치환은 페닐 고리의 4-위치에서인 것이 바람직하다.

R이 OH, SH 또는 NHS(O) ₂ Rb일 때, R ₁ 은 3-위치 또는 4-위치에서 치환되거나, 3,4-위치에서 이중치환되는 것이 바람직하다. 치환기는 전자 흡인 잔기가 적합하다. R이 OH, SH 또는 NSO ₂ Rb일 때, R ₁ 은 니트로, 할로겐, 시아노, 트리플루오로메틸기, C(O)NR ₄ R ₅ 인 것이 바람직하다.

R이 카르복실산일 때, R ₁ 은 수소이거나, 4-위치에서 치환되는 것이 바람직하며, 트리플루오로메틸 또는 클로로에 의해 치환되는 것이 보다 바람직하다.

화학식 I의 화합물에서, 벤젠 고리는 E 기에 의해 임의로 치환될 수 있다. E가 존재하지 않는다면, 별표 (*)로 표시된 두 부분은 수소 또는 R ₁ 기일 수 있다. E 고리는 별표로 나타냄으로써 그의 부착점에 의해 표시된다. 또한, E 고리는 포화 또는 불포화 고리 어디에서든지 독립적으로 R ₁ 잔기에 의해 치환될 수 있다.

E는

화학식 I의 화합물에서, R ₁₃ 및 R ₁₄ 는 독립적으로 수소, 본 명세서에 정의된 바와 같이 직쇄 또는 분지쇄일 수 있는 C _1-4 알킬이고, v는 0 또는 1 내지 4의 정수이며, 바람직하게는 0이다.

화학식 I의 화합물에서, n이 1 내지 3의 정수인 포화 고리 시스템은 6원 고리 시스템인 것이 바람직하다. 고리 시스템은 하기에 정의된 Y에 의해 임의로 치환된다.

화학식 I의 화합물에서, Y는 독립적으로 수소; 할로겐; 니트로; 시아노; 할로치환 C _1-10 알킬; C _1-10 알킬; C _2-10 알케닐; C _1-10 알콕시; 할로치환 C _1-10 알콕시; 아지드; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) _t R ₄ ; 히드록시; 히드록시 C _1-4 알킬; 아릴; 아릴 C _1-4 알킬; 아릴옥시; 아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로아릴; 헤테로아릴알킬; 헤테로아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬; 아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로시클릭 C _2-10 알케닐; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ R ₅ ; C _2-10 알케닐 C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₁₀ ; S(O) ₃ H; S(O) ₃ R ₈ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)OR ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)OR ₁₂ ; (CR ₈ R ₈ ) _q OC(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ C(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NHS(O) ₂ R _d , (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) ₂ NR ₄ R ₅ 로부터 선택되거나, 두 개의 Y 잔기가 함께 O-(CH ₂ ) _s O- 또는 5원 내지 6원 불포화 고리를 형성하는 것이 바람직하다. Y가 디옥시 결합을 형성할 때, s는 1인 것이 바람직하다. Y가 추가의 불포화 고리를 형성할 때, 이것은 나프틸렌 고리 시스템을 형성하는 6원인 것이 바람직하다. 이러한 나프틸렌 고리는 상술한 바와 같이 다른 Y 잔기에 의해 1회 내지 3회 치환될 수 있다. 상술한 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭알킬, 및 헤테로시클릭알케닐 잔기는 모두 본 명세서에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

Rd는 NR ₆ R ₇ , 알킬, 아릴 C _1-4 알킬, 아릴 C _2-4 알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴-C _1-4 알킬, 헤테로아릴 C _2-4 알케닐, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬, 또는 헤테로시클릭 C _2-4 알케닐 잔기인 것이 적합하며, 상술한 아릴, 아릴알킬, 아릴알케닐, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로시클릭 및 헤테로시클릭알킬, 및 헤테로시클릭알케닐 잔기는 모두 본 명세서에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.

Y는 수소, 페닐과 같은 아릴; 페녹시와 같은 아릴옥시; 벤질 또는 펜에틸과 같은 아릴알킬; 또는 벤질옥시 또는 펜에틸옥시와 같은 아릴알킬옥시가 바람직하다. Y는 6원 고리의 2'-위치에서 단일치환되는 것이 보다 바람직하다. R이 OH, SH, 또는 NSO ₂ Rb일 때, Y는 2'-위치 또는 3'-위치에서 단일치환되는 것이 바람직하며, 4'-위치는 치환되지 않는 것이 바람직하다. 고리가 이중치환된다면, R이 OH, SH 또는 NSO ₂ Rb일 때, 치환체는 모노시클릭 고리의 2' 또는 3' 위치에 있는 것이 바람직하다. R ₁ 및 Y 모두가 수소일 수 있지만, 고리의 적어도 하나는 치환되는 것이 바람직하다.

화학식 I의 화합물에서, X는 산소 또는 황인 것이 적합하며, 산소인 것이 바람직하다.

화학식 I의 화합물의 예로는 하기를 포함한다:

N-시클로헥실-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

(+/-)-트랜스-N-(2-벤질옥시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-트랜스-(2-히드록시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아 (융점 144.6 내지 145.2 ℃)

N-트랜스-(2-벤즈옥시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아 (융점 53.4 내지 54.4 ℃)

N-트랜스-(2-메톡시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아 (융점 88.8 내지 89.6 ℃)

본 발명의 또다른 실시 양태는 이하에 서술될 바와 같은 화학식 Ⅱ의 신규 화합물, 또는 그의 제약상 허용 가능한 염에 관한 것이며, 이것은 치료를 필요로하는 포유 동물에서 IL-8이 그의 수용체에 결합하는 것을 억제하는 데 유효하다. 본 발명은 또한 화학식 Ⅱ의 화합물 및 제약상 허용 가능한 희석제 또는 담체로 이루어지는 제약 조성물에 관한 것이다. 또한, 화학식 Ⅱ의 화합물은 케모카인이 IL-8α 또는 β 수용체에 결합하여 일어나는 케모카인 매개 질병의 치료에 유용하며, 이 방법은 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염을 유효량 투여하는 것으로 이루어진다. 화학식 I 및 Ⅱ의 화합물은 <치료 방법> 섹션에서 상호 교환적으로 사용된다.

본 발명에 유용한 화학식 Ⅱ의 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염은 하기 구조에 의해 나타나진다:

<화학식 Ⅱ>

식 중,

X는 산소 또는 황이고;

R은 이온화 가능한 수소 및 10 이하의 pKa를 갖는 관능기이고;

R ₁ 은 독립적으로 수소; 할로겐; 니트로; 시아노; 할로치환 C _1-10 알킬; C _1-10 알킬; C _2-10 알케닐; C _1-10 알콕시; 할로치환 C _1-10 알콕시; 아지드; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) _t R ₄ ; 히드록시; 히드록시 C _1-4 알킬; 아릴; 아릴 C _1-4 알킬; 아릴옥시; 아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로아릴; 헤테로아릴알킬; 헤테로시클릭; 헤테로시클릭 C _1-4 알킬; 헤테로아릴 C _1-4 알킬옥시; 아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로아릴 C _2-10 알케닐; 헤테로시클릭 C _2-10 알케닐; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ R ₅ ; C _2-10 알케닐 C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₅ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)NR ₄ R ₁₀ ; S(O) ₃ H; S(O) ₃ R ₈ ; (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)R ₁₁ ; C _2-10 알케닐 C(O)OR ₁₁ (CR ₈ R ₈ ) _q C(O)OR ₁₂ ; (CR ₈ R ₈ ) _q OC(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NR ₄ C(O)R ₁₁ ; (CR ₈ R ₈ ) _q NHS(O) ₂ R ₁₇ ; (CR ₈ R ₈ ) _q S(O) ₂ NR ₄ R ₅ 로부터 선택되거나, 두 개의 R ₁ 잔기가 함께 O-(CH ₂ ) _s O- 또는 5원 내지 6원 불포화 고리를 형성할 수 있고 (여기서, q는 0, 또는 1 내지 10의 정수이고, s는 1 내지 3의 정수이고, t는 0, 또는 1 또는 2의 정수임);

m은 1 내지 3의 정수이고;

R ₄ 및 R ₅ 는 독립적으로 수소, 임의로 치환된 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭, 헤테로시클릭 C _1-4 알킬이거나, 이들이 결합되어 있는 질소와 함께 산소, 질소 또는 황으로부터 선택된 추가의 헤테로원자를 임의로 포함할 수 있는 5원 내지 7원 고리를 형성하고;

Y는 임의로 치환된 C _1-10 알킬, 임의로 치환된 C _2-10 알케닐 또는 임의로 치환된 C _2-10 알키닐이고;

R ₈ 은 독립적으로 수소 또는 C _1-4 알킬이고;

R ₁₀ 은 C _1-10 알킬 C(O) ₂ R ₈ 이고;

R ₁₁ 은 수소, C _1-4 알킬, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 임의로 치환된 헤테로시클릭 또는 임의로 치환된 헤테로시클릭 C _1-4 알킬이고;

R ₁₂ 는 수소, C _1-10 알킬, 임의로 치환된 아릴 또는 임의로 치환된 아릴알킬이고;

R ₁₇ 은 C _1-4 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬 (여기서, 아릴, 헤테로아릴 및 헤테로시클릭 고리는 모두 임의로 치환될 수 있음)이고;

E는

단, R이 OH이고 R ₁ 이 4-니트로이고, E가 결합일 때, Y는 에톡시카르보닐-2-에틸 프로필, 1-이소프로필 2-벤질옥시에틸, 2-에톡시카르보닐 에틸, 에틸이소프로필 에테르, 1-메틸-2-페닐벤즈옥시에틸, 1-메틸-2-페닐벤즈옥시에틸, 2-카르복시에틸 또는 1-페닐-2-벤즈옥시에틸이 아니다.

화학식 Ⅱ의 화합물에서, 변수 R, R ₁ , X, m, q, t, s, R ₄ , R ₅ , R ₈ , R ₁₀ , R ₁₁ , R ₁₂ , R ₁₇ 및 E 등은 상기 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.

화학식 Ⅱ의 화합물에 있어서, Y는 임의로 치환된 C _1-10 알킬, 임의로 치환된 C _2-10 알케닐, 또는 임의로 치환된 C _2-10 알키닐 잔기인 것이 적합하다. 이러한 알킬, 알케닐 및 알키닐 잔기는 할로겐; 니트로; 시아노; 트리플루오로메틸과 같은 할로치환 C _1-10 알킬; C _1-10 알콕시; 할로치환 C _1-10 알콕시; S(O) _t R ₄ ; 히드록시; 히드록시 C _1-4 알킬; 아릴옥시; 아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로아릴옥시; 헤테로아릴 C _1-4 알킬옥시; 헤테로시클릭; 헤테로시클릭 C _1-4 알킬; 헤테로시클릭 옥시; 헤테로시클릭 C _1-4 알킬옥시; NR ₄ R ₅ ; C(O)NR ₄ R ₅ ; C(O)NR ₄ R ₁₀ ; S(O) ₃ H; S(O) ₃ R8; C(O)R ₁₁ ; C(O)OR ₁₂ ; OC(O)R ₁₁ ; 및 NR ₄ C(O)R ₁₁ 에 의해 임의로 1회 이상, 바람직하게는 1회 내지 3회 독립적으로 치환될 수 있다.

Y는 임의로 치환된 C _2-10 알케닐 또는 임의로 치환된 C _2-10 알키닐이며, 또한 이들 잔기는 상기 잔기에 더하여, 하기에 정의되는 임의로 치환된 아릴; 임의로 치환된 아릴 C _1-4 알킬; 임의로 치환된 헤테로아릴; 및 임의로 치환된 헤테로아릴알킬로 임의로 치환될 수 있다.

Y는 알릴, C _1-10 알킬, 에톡시 카르보닐 에틸, 디메틸아세탈, 2-메톡시 이소프로필, 또는 2-메톡시 에틸인 것이 바람직하다.

화학식 Ⅱ의 화합물의 예로는 하기의 것들을 포함한다:

N-알릴-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

Nt-부틸-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-[2-(에톡시카르보닐)프로필]-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-이소프로필-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(1-(에톡시카르보닐)에틸)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(디메틸아세탈)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(2-메톡시에틸)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(2-벤질옥시프로필)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(2-메톡시이소프로필)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(1-카르보닐-2-메틸프로필)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(1,1-디메틸-2-벤즈옥시에틸)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(1,2-디메틸-2-벤즈옥시에틸)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

N-(2-벤젠술포닐아미노-4-시아노페닐)-N'-(이소프로필)우레아

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(2-메톡시에틸)우레아

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(2-벤질옥시프로필)우레아

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(2-메톡시이소프로필)우레아

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(1-카르보닐-2-메틸프로필)우레아

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(1,2-디메틸-2-벤즈옥시에틸)우레아

N-(2-벤젠술포닐아미노-4-시아노페닐)-N'-(이소프로필)우레아

본 명세서에 사용된 "임의로 치환된"은 달리 정의되지 않는다면, 플루오르, 염소, 브롬 또는 요오드와 같은 할로겐; 히드록시; 히드록시 치환 C _1-10 알킬; 메톡시 또는 에톡시와 같은 C _1-10 알콕시; 메틸 티오, 메틸 술피닐 또는 메틸 술포닐과 같은 S(O)m'C _1-10 알킬 (여기서, m'는 0, 1 또는 2임); 아미노, NR ₄ R ₅ 기에서와 같은 단일치환 또는 이중치환 아미노; NHC(O)R ₄ ; C(O)NR ₄ R ₅ ; C(O)OH; S(O) ₂ NR ₄ R ₅ ; NHS(O) ₂ R ₁₅ ; 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필 또는 t-부틸과 같은 C _1-10 알킬; CF ₃ 과 같은 할로치환 C _1-10 알킬; 페닐과 같은 임의로 치환된 아릴, 또는 벤질 또는 펜에틸과 같은 임의로 치환된 아릴알킬, 임의로 치환된 헤테로시클릭, 임의로 치환된 헤테로시클릭알킬, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴 알킬기를 의미하는 것이며, 이러한 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로시클릭 잔기는 모두 할로겐; 히드록시; 히드록시 치환 알킬; C _1-10 알콕시; S(O)m'C _1-10 알킬; 아미노, NR ₄ R ₅ 기에서와 같은 단일치환 및 이중치환 아미노; C _1-10 알킬, 또는 CF ₃ 과 같은 할로치환 C _1-10 알킬에 의해 1회 내지 2회 치환될 수 있다.

R ₁₅ 는 C _1-4 알킬, 아릴, 아릴 C _1-4 알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴 C _1-4 알킬, 헤테로시클릭 또는 헤테로시클릭 C _1-4 알킬인 것이 적합하다.

제약상 허용 가능한 염은 당업자에게 공지되어 있으며, 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 메탄 술폰산, 에탄 술폰산, 아세트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 락트산, 옥살산, 숙신산, 푸마르산, 말레산, 벤조산, 살리실산, 페닐아세트산 및 만델린산과 같은 무기 또는 유기산의 염기성 염을 포함하는 것이 적합하다. 또한, 화학식 I의 화합물의 제약상 허용 가능한 염은 예를 들어 치환기가 카르복시 잔기를 포함한다면 제약상 허용 가능한 양이온을 사용하여 형성할 수 있다. 제약상 허용 가능한 양이온은 당업자에게 공지되어 있으며, 알칼리, 알칼리토, 암모늄 및 4급 암모늄 양이온을 포함하는 것이 적합하다.

본 명세서에서 사용된 하기의 용어들은 다음을 의미한다:

·"할로"는 클로로, 플루오로, 브로모 및 요오도와 같은 모든 할로겐을 의미한다.

·"C _1-10 알킬" 또는 "알킬"은 모두 사슬 길이가 달리 제한되지 않는다면 1 내지 10 개 탄소 원자의 직쇄 및 분지쇄 라디칼을 의미하며, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 2급-부틸, 이소-부틸, 3급-부틸, n-펜틸 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

·본 명세서에서 사용된 용어 "시클로알킬"은 바람직하게는 탄소수 3 내지 8의 시클릭 라디칼을 의미하며, 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

·본 명세서에서 사용된 용어 "알케닐"은 모든 경우에서 그에 대한 사슬 길이가 제한되지 않는다면 탄소수 2 내지 10의 직쇄 또는 분지쇄 라디칼을 의미하며, 에테닐, 1-프로페닐, 2-프로페닐, 2-메틸-1-프로페닐, 1-부테닐, 2-부테닐 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

·"아릴"은 페닐 및 나프틸을 의미한다.

·"헤테로아릴"은 (그 자체 또는 "헤테로아릴옥시" 또는 "헤테로아릴 알킬"과 혼합하여) 하나 이상의 고리가 N, O 또는 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 5원 내지 10원 방향족 고리 시스템을 의미하며, 피롤, 피라졸, 푸란, 티오펜, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴나졸리닐, 피리딘, 피리미딘, 옥사졸, 티아졸, 티아디아졸, 트리아졸, 이미다졸 또는 벤즈이미다졸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

·"헤테로시클릭"은 (그 자체 또는 "헤테로시클릭알킬"과 혼합하여) 하나 이상의 고리가 N, O 또는 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 부분적으로 불포화된 4원 내지 10원 고리 시스템을 의미하며, 피롤리딘, 피페리딘, 피페라진, 모르폴린, 테트라히드로피란 또는 이미다졸리딘을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

·용어 "아릴알킬" 또는 "헤테로아릴알킬" 또는 "헤테로시클릭알킬"은 달리 지시되지 않는다면 상술한 바와 같이 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로시클릭 잔기에 결합된 C _1-10 알킬을 의미한다.

·"술피닐"은 상응하는 황의 산화물 S(O)를 의미하고, 용어 "티오"는 술파이드를 의미하며, "술포닐"은 완전히 산화된 S(O) ₂ 잔기를 의미한다.

·본 명세서에 사용된 "둘 이상의 R ₁ 잔기 (또는 두 개의 Y 잔기)는 함께 5원 또는 6원 불포화 고리를 형성할 수 있다"는 C ₆ 시클로알케닐 (예를 들면, 헥센)과 같은 부분적으로 불포화된 6원 고리 또는 C ₅ 시클로알케닐 잔기 (예를 들면, 시클로펜텐)가 결합된 나프틸렌 고리 시스템, 또는 페닐 잔기의 형성을 의미한다. E 고리가 존재하는 경우, 두 개의 R ₁ 잔기는 다른 고리를 형성하지 않는 것으로 인식된다.

화학식 I 및 Ⅱ의 화합물은 합성 공정을 적용하여 수득할 수 있으며, 이들 중 일부는 하기의 도식에 예시되어 있다. 이러한 도식에서 제공되는 합성 방법은 이 도식에서 개요된 반응과 호환성이 있게 하기 위하여, 적합하게 보호된 임의의 치환기를 사용하여 반응되는 각종 상이한 R, R ₁ 및 아릴기를 갖는 화학식 I 및 Ⅱ의 화합물을 생성하는데 사용할 수 있다. 이러한 경우, 연속적인 탈보호 공정은 일반적으로 공지된 천연 화합물을 얻을 수 있게 한다. 일단 우레아 핵이 형성되면, 당업계에 공지되어 있는 관능기 상호 전환을 위한 표준 기술을 적용하여 이러한 화학식을 갖는 추가의 화합물을 제조할 수 있다. 도식들은 단지 화학식 I의 화합물 (w = 2)에 대해서만 나타나 있으나, 이것은 단지 예시를 위한 것이다.

<도식 1>

알콕시 아민은 상응하는 알켄으로부터 합성할 수 있다. 알켄은 화학량론적인 양의 과염소산나트륨과 같은 산화제의 존재 하에 mCPBA와 같은 과산 또는 망간 (살렌)과 같은 금속 에폭시화 촉매를 사용하여 에폭시화할 수 있다. 이어서, 에폭시를 메탄올 또는 DMF와 같은 극성 용매 중에서 소듐 아지드를 사용하여 개환시켜 트랜스 아지도 알콜을 형성할 수 있다. 알콜은 트리에틸 아민 또는 수소화나트륨과 같은 염기의 존재 하에 벤질 브롬화물과 같은 알킬화제를 사용하여 알킬화시킬 수 있다. 또한, 알콜은 미쯔노부 (Mitsunobu) 조건을 사용하여 시스 알콜로 전환시킬 수 있다. 이어서, 아지드를 에탄디티올, 트리페닐포스핀 또는 리튬 알루미늄 수소화물과 같은 다양한 시약 하에서 환원시켜 도식 1의 화합물 2를 형성할 수 있다. 벤질 브롬화물 대신 알킬 및 치환된 알킬 브롬화물을 사용할 수 있다.

<도식 2>

a) TBSCl, 이미드 b) 트리포스겐, NaHCO ₃ c)도식 1의 화합물 2, 톨루엔 d) Et ₃ N, HF, CH ₃ CN

2-히드록시 아닐린은 DMF (도식 2)와 같은 비양성자성 용매 중의 3급(부틸)디메틸실릴 클로라이드 및 이미다졸과 같은 당업계에 공지된 시약으로 보호할 수 있다. 이어서, 아닐린을 중탄산나트륨과 같은 염기의 존재 하에 트리포스겐 또는 카르보닐 디이미다졸과 같은 포스겐과 반응시켜 이소시아네이트 (화합물 4)를 형성할 수 있다 (또는, 티오포스겐과 반응시켜 티오이소시아네이트를 형성할 수 있음). 이어서, 상기 이소시아네이트를 도식 1에서 개요된 방법에 의해 통상적으로 시판되거나 합성할 수 있는 목적하는 아민 (도식 1의 화합물 2)과 축합시킬 수 있다. 계속하여, 화합물을 트리에틸아민 히드로플루오라이드와 같은 표준 조건에 의해 탈보호시켜 우레아 (화합물 5)를 형성할 수 있다.

<도식 3>

별법으로, 우레아는 시판되는 히드록시아닐린 및 상응하는 이소시아네이트로부터 합성할 수 있다 (도식 3). 상기 이소시아네이트는 시판되거나 중탄산나트륨과 같은 염기의 존재 하에 트리포스겐 또는 카르보닐 디이미다졸과 같은 아민 및 포스겐으로부터 합성할 수 있다.

도식 3의 화합물 6으로 나타낸 오르토 치환 페닐 우레아는 통상적으로 시판되는 오르토 치환 아닐린 [위스콘신주 밀워키 소재의 알드리히 케미칼 캄파니 (Aldrich Chemical Co.)]을 비양성자성 용매 (DMF, 톨루엔) 중에서 통상적으로 시판되는 임의로 치환된 아릴 이소시아네이트 (위스콘신주 밀워키 소재의 알드리히 케미칼 캄파니)와 축합시키는 것을 포함하는 표준 조건에 의해 제조할 수 있다. 1-(RSO ₂ NH) ₂ -(NH ₂ )Ph가 통상적으로 시판되지 않는 경우, 이것은 통상적으로 시판되는 RSO ₂ Cl을 트리에틸 아민과 같은 염기의 존재 하에 상응하는 2-페닐렌 디아민과 반응시키거나 비양성자성 용매 (메틸렌 클로라이드 또는 DMF) 중의 NaH와 반응시켜 제조할 수 있다.

<도식 4>

목적하는 2-치환 아닐린 (도식 4에서 화합물 10)이 통상적으로 시판되지 않는다면, 상응하는 니트로 화합물은 23 ℃에서 표준 질화 조건 (HNO ₃ 또는 BF ₄ NO ₃ 사용) 하에서 도식 4의 화합물 9로부터 제조할 수 있다. 니트로 화합물은 EtOH 중의 SnCl ₂ (또는 H ₂ /Pd 또는 LiAlH ₄ )를 사용하여 상응하는 아닐린으로 환원시킨다.

<도식 5>

목적하는 2-아미노 벤젠티올 (도식 5에서 화합물 11)이 통상적으로 시판되지 않는다면, 이것은 산화제 (예를 들면, 브롬)의 존재 하에 페닐 아닐린을 티오시아네이트 음이온과 반응시켜 합성하여 2-아미노벤즈티아졸을 형성할 수 있다. 계속하여, 상기 티아졸은 양성자성 용매 (즉, EtOH)의 존재 하에 NaOH와 같은 강염기를 사용하여 목적하는 2-아미노 벤젠티올 (도식 5의 화합물 12)로 가수분해시킬 수 있다.

화학식 Ⅱ의 화합물의 제조 방법 :

<도식 6>

알콕시아민이 통상적으로 시판되지 않는다면, 알킬 클로라이드 및 수소화나트륨과 같은 염기를 사용하여 알킬화하여 상응하는 아미노 알콜로부터 합성하여 도식 6의 화합물 2를 합성할 수 있다. 별법으로, 알콕시 아민은 도식 7의 상응하는 알켄으로부터 합성할 수 있다. 알켄은 과산과 같은 표준 조건 하에, 또는 망간 (살렌)과 같은 금속 촉매의 존재 하에 과염소산나트륨과 같은 화학량론적인 양의 산화제를 사용하여 에폭시화할 수 있다. 계속하여, 상기 에폭시드는 소듐 아지드와 같은 아지드염에 의해 개환시켜 도식 7의 화합물 4를 형성할 수 있다. 계속하여, 상기 히드록시 아지드를 염기 (예를 들면, 트리에틸 아민 또는 수소화나트륨)의 존재 하에 알킬 할로겐화물 (HX)을 사용하여 알킬화시킬 수 있다. 마지막으로, 아지드는 티올, 트리아릴포스핀과 같은 표준 조건 하에, 또는 팔라듐 촉매를 사용하여 수소화하여 환원시켜 도식 7의 화합물 7을 형성할 수 있다.

<도식 7>

일단, 목적하는 알킬 아민 (YNH ₂ )이 합성된 후에는, 우레아를 다양한 방법으로 합성할 수 있다. 이러한 상이한 방법 중 몇몇이 이하에 기재되어 있다.

<도식 8>

2-히드록시 아닐린은 DMF와 같은 비양성자성 용매 중의 3급(부틸)디메틸실릴 클로라이드 및 이미다졸과 같이 당업계에 공지된 시약에 의해 보호할 수 있다 (도식 8). 이어서, 아닐린을 중탄산나트륨과 같은 염기의 존재 하에 트리포스겐 또는 카르보닐 디이미다졸과 같은 포스겐과 반응시켜 이소시아네이트 (도식 8의 화합물 7)를 형성할 수 있다. 계속하여, 상기 이소시아네이트를 시판되거나 도식 1 및 2에서 개요된 방법에 의해 합성할 수 있는 목적하는 아민 (YNH ₂ )과 축합시킬 수 있다. 이어서, 보호된 페닐을 트리에틸 아민 히드로플루오라이드와 같은 표준 조건에 의해 탈보호시켜 우레아 (도식 8의 화합물 8)를 형성할 수 있다.

<도식 9>

별법으로, 우레아는 통상적으로 시판되는 히드록시아닐린 및 상응하는 이소시아네이트로부터 합성할 수 있다 (도식 9). 상기 이소시아네이트는 시판되는 것을 구입하거나, 중탄산나트륨과 같은 염기의 존재 하에 트리포스겐 또는 카르보닐 디이미다졸과 같은 아민 및 포스겐으로부터 합성할 수 있다. 1-(RSO ₂ NH) ₂ -(NH ₂ )Ph가 통상적으로 시판되지 않는 경우, 이것은 통상적으로 시판되는 RSO ₂ Cl을 트리에틸 아민과 같은 염기의 존재 하에 상응하는 2-페닐렌 디아민과 반응시키거나 비양성자성 용매 (메틸렌 클로라이드 또는 DMF) 중의 NaH와 반응시켜 제조할 수 있다.

<도식 10>

별법으로, 이소시아네이트는 쿠르티우스 (Curtius) 재배열 (dppa 및 트리에틸 아민, 또는 옥살릴 클로라이드 후에 소듐 아지드)을 사용하여 상응하는 카르복실산으로부터 합성할 수 있다 (도식 10). 이어서, 상기 이소시아네이트를 시판되는 히드록시 아닐린과 축합시켜 우레아 (도식 10의 화합물 12)를 형성한다.

<도식 11>

목적하는 히드록시 아닐린이 시판되지 않는다면, 질산 또는 니트로조늄 테트라플루오로보레이트와 같은 질화제를 사용하여 상응하는 페놀을 질화시켜 합성할 수 있다. 이어서, 상기 니트로기는 염화주석, 또는 수소 및 탄소 상 팔라듐과 같은 당업계의 표준 조건을 사용하여 히드록시 아닐린을 형성하도록 환원시켜 히드록시 아닐린 (도식 11의 화합물 14)을 형성할 수 있다.

<도식 12>

목적하는 2-아미노 벤젠티올 (도식 12의 화합물 14)이 시판되지 않는다면, 산화제 (예를 들면, 브롬)의 존재 하에 페닐 아닐린을 티오시아네이트와 반응시켜 합성하여 2-아미노 벤즈티아졸을 형성할 수 있다. 이어서, 상기 티아졸을 양성자성 용매 (즉, EtOH) 중에서 NaOH와 같은 강염기를 사용하여 목적하는 2-아미노 벤젠티올 (도식 10의 화합물 12)로 가수분해할 수 있다.

화학식 I 및 Ⅱ의 화합물의 제약상 허용 가능한 염은 공지된 방식으로, 예를 들면 적합한 용매의 존재 하에 적합한 양의 산 또는 염기로 처리하여 수득할 수 있다.

시아노 니트로페놀 중간체의 합성은 하기에 기재된 바와 같이 생성할 수 있다. 구리 (I) 시안화물을 사용하여 아릴 할로겐화물을 아릴 시아노 유도체로 전환하는 다수의 방법이 적용되어 왔다. 그러나, 히드록시기를 갖는 아릴 고리에 대한 어떠한 실시예도 현재 언급되고 있지 않다. 공지된 결과를 사용하여 시아노 페놀 잔기를 수득하기 위한 몇몇 시도는 실패하였다. 170 ℃ 이상, 예를 들면 180 내지 210 ℃의 공지된 승온 조건의 사용은 시아노 잔기에 할로겐을 치환시키지 못하였다. 또한, DMF 및 피리딘과 같은 표준 염기는 목적하는 생성물을 제공하지 못하였다. 2-아미노-5-플루오로페놀, 2-니트로-5-플루오로페놀, 2-니트로-5-메틸-6-브로모페놀과 같은 중간체는 플루오르를 염소 또는 브롬으로 변화시키고, 구리 (I) 시안화물을 사용하여 시험하였다. 저온, 예를 들면 100 ℃ 미만, 바람직하게는 60 내지 약 80 ℃에서 표준 공정에서보다 감소된 시간 동안, 예를 들면 18 시간 미만, 바람직하게는 약 4 내지 6 시간 동안 디메틸포름아미드와 2-니트로-5-메틸-6-브로모페놀과 같은 브롬 유도체를 사용하고, 촉매량의 디메틸아미노 피리딘이 있는 트리에틸아민과 구리 (I) 시안화물을 사용하여 목적하는 생성물을 제조하였다.

실시예에서, 모든 온도는 섭씨 (℃) 온도이다. 질량 스펙트럼은 달리 지시되지 않는다면 고속 원자 충격법을 사용하는 VG Zab 질량 분광계 상에서 수행하였다. ¹ H-NMR (이하, "NMR"이라고 함) 스펙트럼은 각기 브루커 (Bruker) AM 250 또는 Am 400 분광계를 사용하여 250 ㎒ 또는 400 ㎒에서 기록하였다. 다중도는 s = 단일, d = 이중, t = 삼중, q = 사중, m = 다중을 의미하고, br은 광범위한 신호를 나타낸다. Sat.는 포화 용액을, equiv.는 주된 반응물에 대한 시약의 상대적인 몰량의 백분율 (당량)을 나타낸다.

플래쉬 크로마토그래피는 머크 실리카 겔 (Merck Silica gel) 60 (230 내지 400 메쉬) 상에서 수행한다.

<합성예>

이제, 본 발명은 하기 실시예를 참고로 서술될 것이며, 이 실시예는 단지 예시적이며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다. 모든 온도는 섭씨 온도이고, 본 명세서에서 사용된 모든 용매는 시판되는 최고순도의 것이고, 모든 반응은 달리 지시되지 않는다면 아르곤 분위기 중에서 무수 조건 하에 수행한다.

실시예

일반적인 방법 A: N-페닐, N'-페닐 우레아의 합성

디메틸 포름아미드 (1 ㎖) 중의 페닐 이소시아네이트 (1.0 당량)의 용액에 상응하는 아닐린 (1.0 당량)을 가하였다. 반응 혼합물을 반응이 완결될 때까지 (24 내지 48 시간) 80 ℃에서 교반한 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 각각의 개별 화합물에 대한 정제, 수율 및 스펙트럼 특성이 하기에 나타나 있다.

일반적인 방법 B: 술폰아미드의 합성

오르토 치환 아닐린 (1 당량), 트리에틸 아민 (1 당량) 및 목적하는 술포닐 클로라이드 (1 당량)를 메틸렌 클로라이드에 합하고, 혼합이 완결될 때까지 (12 내지 36 시간) 약 23 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물 및 메틸렌 클로라이드 사이에 분배하였다. 유기층을 분리하고, 황산 마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 각 화합물의 정제물이 하기에 기재되어 있다.

<실시예 1>

N-시클로헥실-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

톨루엔 중의 시클로헥실 이소시아네이트 (400 ㎎, 3.19 mmol)의 용액에 2-아미노-5-니트로페놀 (492 ㎎, 3.19 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 24 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시켰다. 생성물을 톨루엔으로 침전시켜 정제하고 여과하였다 (752 ㎎, 93 %). 융점 185.0 내지 186.0 ℃, EI-MS m/z 280 (M+H) ⁺ .

<실시예 2>

트랜스-N-(2-벤질옥시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

a) 2-아지도시클로헥실알콜의 제조

메탄올/물 (61 ㎖/6 ㎖) 중의 시클로헥센 산화물 (2 g, 20.4 mmol), 소듐 아지드 (1.86 g, 30.6 mmol) 및 암모늄 클로라이드 (2.16 g, 40.8 mmol)의 혼합물을 16 시간 동안 72 ℃까지 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켰다. 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 및 물 사이에 분배하였다. 유기층을 MgSO ₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 순수 생성물을 수득하였다 (2.3 g, 80 %). EI-MS m/z 242 (M+H) ⁺ .

b) 트랜스-2-벤질옥시시클로헥실아지드의 제조

THF (10 ㎖) 중의 2-아지도시클로헥실알콜 (1 g, 7.1 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (284 ㎎, 7.1 mmol)을 가하였다. 10 분 후에, 벤질 브롬화물 (0.84 ㎖, 7.1 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 환류에서 16 시간 동안 가열한 후 실온까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 NaHCO ₃ (수성) 사이에 분배시켰다. 유기층을 MgSO ₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시키고, 생성되는 액체를 실리카 겔 (헥산:에틸 아세테이트; 10:1) 상에서 크로마토그래피하여 생성물을 수득하였다 (1.4 g, 85 %). EI-MS m/z 232 (M+H) ⁺ .

c) 트랜스-2-벤질옥시시클로헥실아민의 제조

메탄올 (12 ㎖) 중의 아지드 (350 ㎎, 1.51 mmol) 용액에 디티오트레이톨 (0.76 ㎖, 7.55 ㎖) 및 트리메틸 아민 (0.63 ㎖, 4.53 ㎖)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 에테르 (20 ㎖)에 용해시키고 에테르/HCl로 처리하였다. 유기층을 분리하였다. 유기층을 pH가 7 내지 8이 될 때까지 염기화한 후, 에테르로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, MgSO ₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 생성물을 수득하였다 (101 ㎎, 33 %). EI-MS m/z 206 (M+H) ⁺ .

d) 트랜스-N-(2-벤질옥시시클로헥실)-N'-(2-3급부틸디메틸실릴옥시-4-니트로페닐)우레아의 제조

톨루엔 중의 2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로아닐린 (200 ㎎, 0.74 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (0.13 ㎖, 0.89 ㎖) 및 트리포스겐 (88.4 ㎎, 0.3 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 이것을 실온까지 냉각시키고 모든 용매를 증발시켰다. DMF (1 ㎖) 중의 트랜스-2-벤질옥시시클로헥실아민 (101 ㎎, 0.49 mmol)을 잔사에 가하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 (헥산:에틸 아세테이트; 5:1) 상에서 크로마토그래피하여 생성물을 수득하였다 (100 ㎎, 41 %). EI-MS m/z 500 (M+H) ⁺ .

e) 트랜스-N-(2-벤질옥시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

아세토니트릴 (2 ㎖) 중의 트랜스-N-(2-벤질옥시시클로헥실)-N'-(2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로페닐)우레아 (100 ㎎, 0.2 mmol)의 용액에, 트리에틸아민 히드로플루오라이드 (0.1 ㎖, 0.6 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물 사이에 분배시켰다. 유기층을 MgSO ₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 생성물을 수득하였다 (73 ㎎, 95 %). EI-MS m/z 386 (M+H) ⁺ .

상술한 바와 동일한 방법을 사용하여, 하기 화합물을 제조하였다.

<실시예 3>

N-트랜스-(2-히드록시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

융점: 144.6 내지 145.2 ℃

<실시예 4>

N-트랜스-(2-벤즈옥시시클로페닐)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

융점: 53.4 내지 54.4 ℃

<실시예 5>

N-트랜스-(2-메톡시시클로헥실)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

융점: 88.8 내지 89.6 ℃

<실시예 6>

N-(1,1-디메틸-2-벤즈옥시에틸)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아

융점: 111.9 내지 112.3 ℃

<실시예 7>

N-알릴-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

톨루엔 중의 알릴 이소시아네이트 (400 ㎎, 4.03 mmol)의 용액에 2-아미노-5-니트로페놀 (621 ㎎, 4.03 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 24 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시켰다. 생성물을 톨루엔으로 침전시켜 정제하고 여과하였다 (644 ㎎, 67 %). 융점 135 내지 136.4 ℃, EI-MS m/z 238 (M+H) ⁺ .

<실시예 8>

Nt-부틸-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

톨루엔 중의 t-부틸 이소시아네이트 (400 ㎎, 4.04 mmol)의 용액에 2-아미노-5-니트로페놀 (622 ㎎, 4.04 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 24 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시켰다. 생성물을 톨루엔으로 침전시켜 정제하고 여과하였다 (864 ㎎, 85 %). 융점 99.0 내지 101.1 ℃, EI-MS m/z 254 (M+H) ⁺ .

<실시예 9>

N-[2-(에톡시카르보닐)에틸]-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

톨루엔 중의 2-이소시아네이트 프로피오네이트 (372 ㎎, 2.6 mmol)의 용액에 2-아미노-5-니트로페놀 (400 ㎎, 2.6 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 24 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시켰다. 생성물을 톨루엔으로 침전시켜 정제하고 여과하였다 (678 ㎎, 88 %). 융점 114.6 내지 115.8 ℃, EI-MS m/z 298 (M+H) ⁺ .

<실시예 10>

N-이소프로필-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아의 제조

톨루엔 중의 이소프로필 이소시아네이트 (221 ㎎, 2.6 mmol)의 용액에 2-아미노-5-니트로페놀 (400 ㎎, 2.6 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 24 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시켰다. 생성물을 톨루엔으로 침전시켜 정제하고 여과하였다 (570 ㎎, 92 %). 융점 159.8 내지 161.4 ℃, EI-MS m/z 240 (M+H) ⁺ .

<실시예 11>

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(디메틸아세탈)우레아의 제조

톨루엔 중의 2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로아닐린 (200 ㎎, 0.75 mmol)의 용액에 트리포스겐 (84 ㎎, 0.3 mmol) 및 트리에틸아민 (0.13 ㎖, 0.9 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시키고, 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 DMF (1 ㎖)에 용해시키고, 아미노아세트알데히드 디메틸아세탈 (0.08 ㎖, 0.75 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 (50 % 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (117 ㎎, 55 %). EI-MS m/z 286.2 (M+H) ⁺ , 융점 168.3 내지 169.0 ℃.

<실시예 12>

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(2-메톡시에틸)우레아의 제조

톨루엔 (5 ㎖) 중의 2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로아닐린 (200 ㎎, 0.75 mmol)의 용액에 트리포스겐 (84 ㎎, 0.3 mmol) 및 트리에틸아민 (0.13 ㎖, 0.9 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시키고, 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 DMF (1 ㎖)에 용해시키고, 2-메톡시에틸아민 (56.3 ㎎, 0.75 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 (50 % 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (95 ㎎, 50 %). EI-MS m/z 256.2 (M+H) ⁺ , 융점 190.0 내지 190.7 ℃.

<실시예 13>

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(2-벤질옥시프로필)우레아의 제조

톨루엔 (10 ㎖) 중의 2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로아닐린 (300 ㎎, 1.125 mmol)의 용액에 트리포스겐 (126 ㎎, 0.45 mmol) 및 트리에틸아민 (0.195 ㎖, 1.35 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시키고, 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 DMF (1 ㎖)에 용해시키고, 2-벤질옥시프로필아민 (185.6 ㎎, 1.125 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 (50 % 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (160 ㎎, 41 %). EI-MS m/z 346.4 (M+H) ⁺ , 융점 64.6 내지 65.2 ℃.

<실시예 14>

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(2-메톡시이소프로필)우레아의 제조

톨루엔 (5 ㎖) 중의 2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로아닐린 (200 ㎎, 0.75 mmol)의 용액에 트리포스겐 (84 ㎎, 0.3 mmol) 및 트리에틸아민 (0.13 ㎖, 0.9 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시키고, 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 DMF (1 ㎖)에 용해시키고, 2-메톡시이소프로필아민 (66.8 ㎎, 0.75 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 (50 % 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (80 ㎎, 40 %). EI-MS m/z 270.2 (M+H) ⁺ , 융점 170.9 내지 171.5 ℃.

<실시예 15>

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(1-카르보닐-2-메틸프로필)우레아의 제조

a) N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-1-(에톡시카르보닐)-2-메틸프로필)우레아의 제조

DMF (1.0 ㎖) 중의 2-이소시아네이토-3-메틸부티레이트 (333 ㎎, 1.95 mmol)의 용액에 2-히드록시-4-니트로아닐린 (300 ㎎, 1.95 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (420 ㎎, 66 %). EI-MS m/z 326 (M+H) ⁺ .

b) N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(1-카르보닐-2-메틸프로필)우레아의 제조

에탄올/물 (10 ㎖/1 ㎖) 중의 N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-{1-(에톡시카르보닐)-2-메틸프로필)우레아 (200 ㎎, 0.62 mmol)의 용액에 수산화나트륨 (123 ㎎, 3.1 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 환류 온도에서 16 시간 동안 교반하였다. 계속하여, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 모든 용매를 증발시켰다. HCl 3N을 가하여 pH를 1이 되게 하였다. 황색 고상물이 침전되었고, 이것을 여과하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (86 ㎎, 47 %). EI-MS m/z 298.3 (M+H) ⁺ . 융점 168.4 내지 169.2 ℃.

<실시예 16>

N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(1,2-디메틸-2-벤즈옥시에틸)우레아의 제조

a) 1-메틸-2-히드록시프로필아지드의 제조

메탄올/물 (83 ㎖/8 ㎖) 중의 시스-2,3-에폭시부탄 (2 g, 27.74 mmol)의 용액에 소듐 아지드 (2.7 g, 41.61 mmol) 및 암모늄 클로라이드 (2.97 g, 55.48 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 환류 온도에서 16 시간 동안 교반하였다. 계속하여, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 MgSO ₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 목적하는 생성물을 수득하였다 (2.6 g, 82 %). EI-MS m/z 88 (M ⁺ -N ₂ ) ⁺ .

b) 1-메틸-2-벤질옥시프로필아지드의 제조

THF (10 ㎖) 중의 1-메틸-2-히드록시프로필아지드 (700 ㎎, 6.09 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (60 %, 243 ㎎, 6.09 mmol)을 가하였다. 10 분 후에, 벤질 브롬화물 (0.72 ㎖, 6.09 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 환류 온도에서 16 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 NaHCO ₃ (수성) 사이에 분배시켰다. 유기층을 MgSO ₄ 상에서 건조시키고, 여과하였다. 용매를 증발시키고, 생성되는 고체를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (950 ㎎, 76 %). EI-MS m/z 178 (M ⁺ -N ₂ ) ⁺ .

c) 1-메틸-2-벤즈옥시프로필아민의 제조

에테르 (10 ㎖) 중의 1-메틸-2-벤즈옥시프로필아지드 (300 ㎎, 1.46 mmol) 용액에 수소화 알루미늄 리튬 (167 ㎎, 4.38 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 계속하여, 물 0.17 ㎖, 15 % NaOH 0.2 ㎖ 및 물 0.42 ㎖를 가하였다. 고체를 여과하였다. 액체를 감압 하에서 농축시켜 목적하는 생성물을 수득하였다 (240 ㎎, 92 %). EI-MS m/z 180 (M ⁺ ).

d) N-(2-히드록시-4-니트로페닐)-N'-(1,2-디메틸-2-벤즈옥시에틸)우레아의 제조

톨루엔 (10 ㎖) 중의 2-3급-부틸디메틸실릴옥시-4-니트로아닐린 300 ㎎, 1.125 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (0.195 ㎖, 1.35 mmol) 및 트리포스겐 (126 ㎎, 0.45 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 이것을 실온까지 냉각시키고 모든 용매를 증발시켰다. 잔사를 DMF (1 ㎖) 중에 용해시켰다. 1-메틸-2-벤즈옥시프로필아민 (200 ㎎, 1.12 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (235 ㎎, 59 %). EI-MS m/z 360.4 (M ⁺ ).

<실시예 17>

N-(2-벤젠술포닐아미노-4-시아노페닐)-N'-(이소프로필)우레아의 제조

a) 3,4-디아미노 벤조니트릴의 제조

4-아미노 3-니트로-벤조니트릴 (5.0 g, 0.03 몰)을 에틸 아세테이트에 용해시킨 후, 10 % Pd/C 2.5 g으로 처리하였다. 반응 혼합물을 수소로 플러슁한 후, 23 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 완결되지 않았으므로 10 % Pd/C 0.5 g을 더 가하였다. 2 시간 후, 반응이 완결되었다. 용액을 셀라이트를 통하여 여과하고, 농축시키고 추가의 정제 없이 사용하였다 (4.67 g).

b) 벤젠술포닐아미노-4-시아노아닐린의 제조

메틸렌 클로라이드 중의 3,4 디아미노 벤조니트릴 (10.7 g, 0.08 mmol)의 용액을 23 ℃에서 18 시간 동안 페닐 술포닐 클로라이드 (2 당량, 0.16 몰) 및 트리에틸 아민 (2 당량, 0.16 몰)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 물 및 메틸렌 클로라이드 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용액을 여과하고 50 ㎖까지 농축시키고, 고체를 헥산으로 침전시켰다. 상기 고체를 테트라히드로푸란에 용해시키고, 메탄올 중의 25 % NaOMe로 처리하였다. 반응이 5 분 후에 완결되었다. 반응 혼합물을 염화 암모늄 용액을 사용하여 pH 7까지 산성화시킨 후, 메틸렌 클로라이드로 추출하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 50 ㎖까지 농축시켰다. 헥산을 가하여 목적물을 백색 고상물로서 침전시켰다 (19.7 g).

c) N-(2-벤젠술포닐아미노-4-시아노페닐)-N'-(이소프로필)우레아의 제조

DMF (0.5 ㎖) 중의 이소프로필이소시아네이트 (31.2 ㎎, 0.37 mmol)의 용액에 2-벤젠술포닐아미노-4-시아노아닐린 (100 ㎎, 0.37 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 생성되는 액체를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 목적하는 생성물을 수득하였다 (85 ㎎, 65 %). EI-MS m/z 359.4 (M ⁺ ).

<치료 방법>

화학식 I 및 Ⅱ의 화합물, 또는 그의 제약상 허용 가능한 염은 사람 또는 다른 포유 동물에서 이러한 포유 동물의 세포에 의한 과도한 또는 억제되지 않은 IL-8 사이토킨, 예를 들면 단핵구 및(또는) 대식세포 (이에 제한되지는 않음)의 생성, 또는 유형 I 또는 유형 Ⅱ 수용체로 명명되기도 하는 IL-8α 또는 β 수용체에 결합하는 다른 케모카인에 의해 고통을 받고 있거나 이로 인하여 야기된 질병을 치료 또는 예방하기 위한 약제의 제조에 사용할 수 있다.

따라서, 본 발명은 IL-8α 또는 β 수용체에 결합하여 일어나는 케모카인 매개 질병의 치료 방법을 제공하는 것으로, 상기 방법은 화학식 I 또는 Ⅱ의 화합물, 또는 그의 제약상 허용 가능한 염을 유효량 투여하는 것으로 이루어진다. 특히, 케모카인은 IL-8, GROα, GROβ, CORγ, NAP-2 또는 ENA-78이 있다.

본 발명에서는, 화학식 I 및 Ⅱ의 화합물은 화학식 I의 화합물로 언급한다.

화학식 I의 화합물은 사이토킨 기능, 특히 IL-8, GROα, GROβ, CORγ, NAP-2 및 ENA-78의 기능을 억제하기에 충분한 양으로 투여하여 이들을 정상 농도의 생리적인 기능까지 생물학적으로 조절하거나, 몇몇 경우에는 정상 이하의 농도까지 조절하여 질병을 개선시킨다. 본 발명의 환경에서, IL-8, GROα, GROβ, CORγ, NAP-2 및 ENA-78의 비정상적인 농도는 예를 들면, (ⅰ) 1 ㎖ 당 1 피코그램 (pg) 이상의 유리 IL-8; (ⅱ) 상기 정상적인 생리학적 농도 이상의 IL-8, GROα, GROβ, CORγ, NAP-2 및 ENA-78을 치료하는 세포; 또는 (ⅲ) IL-8, GROα, GROβ, CORγ, NAP-2 및 ENA-78 각각을 치료하는 세포 또는 조직 중에 상기 기본적인 농도 이상으로 존재하는 IL-8, GROα, GROβ, CORγ, NAP-2 및 ENA-78을 치료하는 세포로 이루어진다.

과도하거나 억제되지 않은 IL-8 생성이 질병을 악화시키고(악화시키거나) 질병을 초래하는 것에 관여되는 질병이 많이 있다. 케모카인 매개 질병은 건선, 아토피성 피부염, 관절염, 천식, 만성 폐색성 폐 질병, 성인 호흡 곤란 증후군, 염증성 대장 질병, 크론 (Crohn) 질병, 궤양성 대장염, 졸중, 패혈증성 쇽, 내독소 쇽, 그람 네가티브 패혈증, 독성 쇽 증후군, 심장 및 신장성 재관류 손상, 사구체신염, 혈전증, 이식 조직과 숙주와의 반응, 알츠하이머 질병, 타가 이식 거부 반응, 말라리아, 재발협착증, 혈관 형성 또는 원하지 않은 조혈성 숙주 세포 방출을 포함한다.

이러한 질병은 주로 대량의 호중구 세포 침입, T-세포 침입 또는 신혈관 성장의 특징이 있고, 호중구 세포의 염증 자리로의 화학주성 또는 내피 세포의 방향성 성장의 원인인 IL-8, GROα, GROβ, GROγ 또는 NAP-2 생성의 증가와 관련된다. 다른 감염성 사이토킨 (IL-1, TNF 및 IL-6)과는 달리, IL-8, GROα, GROβ, GROγ 또는 NAP-2는 호중구 세포 화학주성, 엘라스타제 (이에 제한되지는 않음) 방출을 포함하는 효소 방출 뿐만 아니라 과산화물 생성 및 활성화를 향상시키는 특성을 갖는다. α-케모카인, 특히 IL-8 유형 I 또는 Ⅱ 수용체를 통해 작용하는 GROα, GROβ, GROγ 또는 NAP-2는 내피 세포의 방향성 성장을 촉진시킴으로써 종양의 신혈관 형성을 촉진시킬 수 있다. 따라서, IL-8 유도 화학주성 또는 활성의 억제는 호중구 세포 침입을 직접 감소시킬 수 있다.

또한, 최근의 증거는 HIV 감염의 치료시 케모카인의 기능을 나타내고 있다 [리틀만 (Littleman) 등의 Nature 381, pp. 661 (1996) 및 코우프 (Koup) 등의 Nature 381, pp. 667 (1996) 참조].

또한, 본 발명은 화학식 I의 케모카인 수용체 길항제 화합물에 의한 CNS 손상이 가능하다고 여겨지는 개체에서의 급성 경화의 치료 수단 뿐만 아니라 예방 수단을 제공한다.

상술한 CNS 손상은 외과 수술에 의한 것과 같은 개방성 또는 관통성 두부 외상, 또는 두부 영역의 손상에 의한 것과 같은 폐쇄성 두부 외상 모두를 포함한다. 또한, 이러한 정의의 범주 내에는 특히 두뇌 영역에서의 허혈성 발작이 포함된다.

허혈성 발작은 통상적으로 색전, 트롬비 또는 국부 아테롬성 혈관 폐쇄의 결과로서 특히 두뇌 영역으로의 불충분한 혈액 공급으로 인한 병소 신경학상 질환으로서 정의될 수 있다. 여기에서 염증성 사이토킨의 기능이 나타났고, 본 발명은 이러한 손상의 잠재적인 치료 수단을 제공한다. 이와 같은 급성 손상에 대한 치료는 비교적 효과가 없었다.

TNF-α는 내피 백혈구 결합 분자 발현을 포함하는 전(前)염증성 작용이 있는 사이토킨이다. 백혈구는 허혈성 두뇌 손상부에 침입하므로, TNF 농도를 억제 또는 감소시키는 화합물이 허혈성 두뇌 손상의 치료에 유용할 수 있다. 문헌 [류 (Liu) 등의 Stoke, Vol. 25., No. 7, pp. 1481-88 (1994)]의 개시 내용이 본 명세서에 참고로 포함된다.

폐쇄성 두부 손상의 모델 및 5-LO/CO 혼합 약제를 사용한 치료가 문헌 [쇼하미 (Shohami) 등의 J. of Vaisc & Clinical Physiology and Phamacology, Vol. 3, No. 2, pp. 99-107 (1992)]에 기재되어 있으며, 그의 개시 내용이 본 명세서에 참고로 포함된다. 부종 형성을 감소시키는 치료가 이러한 동물 치료에서 기능적 성과를 향상시키는 것으로 밝혀졌다.

화학식 I의 화합물은 호중구 세포 화학 주성 및 활성화의 감소에 의해 입증된 바와 같이, IL-8α 또는 β 수용체에 결합하는 IL-8이 이러한 수용체에 결합하는 것을 억제하기에 충분한 양으로 투여된다. 화학식 I의 화합물이 IL-8 결합의 억제제라는 발견은 본 명세서에서 설명되는 생체외 수용체 결합 분석에 있는 화학식 I의 화합물의 효과를 근거로 한다. 몇몇 경우, 화학식 I의 화합물은 재조합 유형 I 및 유형 Ⅱ IL-8 수용체 모두의 이중 억제제임이 밝혀졌다. 상기 화합물이 단 하나의 수용체의 억제제인 것이 바람직하며, 유형 Ⅱ의 억제제인 것이 보다 바람직하다.

본 명세서에서 사용된 용어 "IL-8 매개 질병"은 IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 및 ENA-78이 IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 또는 ENA-78 자체를 생성시키거나, 다른 모노카인을 방출시키는 IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 또는 ENA-78에 의해 중요한 기능을 하는 질병을 의미하며, 예를 들면 IL-1, IL-6 또는 TNF가 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 따라서, 예를 들면, IL-1이 주성분이고 그의 생성 또는 작용이 IL-8에 반응하여 악화되거나 분비되는 질병은 IL-8에 의해 매개된 질병으로 고려할 수 있다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "케모카인 매개 질병"은 IL-8α 또는 β 수용체에 결합하는 케모카인이 중요한 기능을 하는 질병을 의미하며, 예를 들면 IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 또는 ENA-78이 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 이것은 IL-8이 IL-8 자체에 의해, 또는 다른 모노카인이 방출되도록 하는 IL-8에 의해 중요한 기능을 하는 질병을 포함할 수 있으며, 예를 들면 IL-1, IL-6 또는 TNF가 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 따라서, 예를 들면, IL-1이 주성분이고 그의 생성 또는 작용이 IL-8에 반응하여 악화되거나 분비되는 질병은 IL-8에 의해 매개된 질병으로 고려할 수 있다.

본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "사이토킨"은 세포의 기능에 영향을 미치는 분비된 폴리펩티드를 의미하며, 면역성, 염증성 또는 조혈 반응에서 세포들간의 상호 작용을 조절하는 분자이다. 사이토킨은 어떤 세포가 이들을 생성하느냐에 관계 없이 모노카인 및 림포카인을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 예를 들면, 모노카인은 일반적으로 대식세포 및(또는) 단핵구와 같은 단핵 세포에 의해 분비되는 것을 의미한다. 그러나, 많은 다른 세포가 천연 살인 세포, 섬유아세포, 호염기성 세포, 호중구 세포, 내피 세포, 두뇌 성상 세포, 골수 기질 세포, 경막 각질세포 및 B-임파구 세포를 생성하기도 한다. 림포카인은 일반적으로 임파구에 의해 생성되는 것을 의미한다. 사이토킨의 예로는 인터루킨-1 (IL-1), 인터루킨-6 (IL-6), 인터루킨 (IL-8), 종양 탈저 인자-α (TNF-α) 및 종양 탈저 인자-β(TNF-β)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "케모카인"은 상기의 "사이토킨"과 유사하게 세포의 기능에 영향을 미치는 분비된 폴리펩티드를 의미하며, 면역성, 염증성 또는 조혈 반응에서 세포들간의 상호 작용을 조절하는 분자이다. 케모카인은 주로 세포 트랜스 멤브레인을 통해 분비되며, 특정 백혈구 및 백혈구, 호중구 세포, 단핵구, 대식세포, T-세포, B-세포, 내피 세포 및 평활근 세포의 화학주성 및 활성화를 초래한다. 케모카인의 예로는, IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2, ENA-78, IP-10, MIP-1α, MIP-β, PF4 및 MCP 1, 2 및 3이 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

치료시에 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용 가능한 염을 사용하기 위하여, 이것은 통상적으로 표준의 제약 실제에 따라 제약 조성물로 제제화된다. 따라서, 본 발명은 비독성인 화학식 I의 화합물 유효량, 및 제약상 허용 가능한 담체 또는 희석제로 이루어진 제약 조성물에 관한 것이다.

화학식 I의 화합물, 그의 제약상 허용 가능한 염 및 이를 포함하는 제약 조성물은 약물 투여에 통상적으로 사용되는 경로에 의해, 예를 들면, 경구, 국소, 비경구 투여 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 화학식 I의 화합물은 화학식 I의 화합물을 통상의 절차에 따라 표준 제약상 담체와 혼합하여 제조된 통상의 투여형으로 투여될 수 있다. 또한, 화학식 I의 화합물은 공지된 제2의 치료학적 활성 화합물과 혼합하여 통상의 투여량으로 투여될 수 있다. 이러한 절차는 목적하는 제제에 적합하게 성분을 혼합, 과립화 및 압착 또는 용해시키는 것을 포함할 수 있다. 제약성 허용 가능한 담체 또는 희석제의 형태 및 특성은 이것과 혼합되는 활성 성분의 양, 투여 경로 및 다른 공지된 변수에 의해 규정된다. 담체(들)는 제제의 다른 성분과 혼화성이 있는 "허용 가능한" 것이어야 하며, 그의 수용체에 해로워서는 안된다.

사용된 제약 담체는 예를 들면 고상 또는 액상일 수 있다. 고상 담체의 예로는, 락토오스, 백도토, 수크로오스, 활석, 젤라틴, 우무, 펙틴, 아카시아, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등이 있다. 액상 담체의 예로는, 시럽, 피넛 오일, 올리브 오일, 물 등이 있다. 유사하게, 담체 또는 희석제는 당업계에 공지된 지연형 물질, 예를 들면 글리세릴 모노-스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트를 단독으로 또는 왁스와의 혼합물을 포함할 수 있다.

다양한 제약 제제를 사용할 수 있다. 따라서, 고상 담체를 사용하는 경우, 제제는 경질의 젤라틴 캡슐에 포함시켜 분말 또는 펠릿형으로 또는 트로키 또는 로젠지 형으로 타정될 수 있다. 고상 담체의 양은 광범위하게 변할 수 있지만 약 25 ㎎ 내지 약 1 g이 바람직하다. 액상 담체를 사용하는 경우, 제제는 시럽, 유제, 연질 젤라틴 캡슐, 앰플 또는 비수성 액상 현탁제와 같은 멸균 주사성 액체 형태일 수 있다.

화학식 I의 화합물은 국소적으로, 즉 비전신성 투여에 의해 투여될 수 있다. 이것은 화학식 I의 화합물을 상피 또는 구강에 외부적으로 도포하고, 상기 화합물이 과도하게 혈류에 들어가지 않도록 이것을 귀, 눈 및 코에 점적 주입하는 것을 포함한다. 이와는 달리, 전신 투여는 경구, 정맥내, 복막내 및 근육내 투여를 의미한다.

국소 투여에 적합한 제제는 예를 들면 도포제, 로션, 크림, 연고 또는 페이스트와같이 피부를 통하여 염증 자리로 침투하기에 적합한 액상 또는 반액상 제제, 및 눈, 귀 또는 코에 투여하기에 적합한 점적제를 포함한다. 국소 투여용 활성 성분은 제제의 0.001 내지 10 중량%, 예를 들면 1 중량% 내지 2 중량%로 이루어질 수 있다. 상기 성분은 제제의 10 중량%일 수 있으나, 5 중량% 이하로 이루어지는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 0.1 내지 1 중량%일 수 있다.

본 발명에 따른 로션은 피부 또는 눈에 도포하기에 적합한 것을 포함한다. 눈에 사용되는 로션은 임의로 살균제를 함유하는 살균 수용액을 포함할 수 있으며, 점적제의 제조 방법과 유사한 방법으로 제조할 수 있다. 또한, 피부에 도포하기 위한 로션 또는 도포제는 예를 들면 알콜 또는 아세톤과 같은 건조를 촉진시키고 피부를 냉각시키기 위한 약제 및(또는) 글리세롤 또는 오일, 예를 들면 비버 오일 또는 아라키스 오일과 같은 보습제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 크림, 연고 또는 페이스트는 외부 도포용 활성 성분의 반고상 제제이다. 이들은 미세 분할되거나 분말화된 형태의 활성 성분을 단독으로, 또는 수성 또는 비수성 유체 중의 용액 또는 현탁액 중에서 유성 또는 비유성 주약과 적합한 기계를 사용하여 혼합하여 제조할 수 있다. 주약은 경질, 연질 또는 액상 파라핀과 같은 탄화수소, 글리세롤, 밀랍, 금속 비누; 고무풀; 아몬드, 옥수수, 아라키스, 비버 또는 올리브유와 같은 천연 오일; 양모지 또는 그의 유도체, 또는 스테린산 또는 올레산과 같은 지방산, 및 프로필렌 글리콜 또는 매크로겔과 같은 알콜을 포함할 수 있다. 제제는 소르비탄 에스테르 또는 그의 폴리옥시에틸렌 유도체와 같은 음이온성, 양이온성 또는 비이온성 계면활성제와 같은 임의의 적합한 계면활성제를 포함할 수 있다. 천연 검과 같은 현탁제, 셀룰로오스 유도체 또는 실리카성 규소와 같은 무기 물질, 및 라놀린과 같은 다른 성분이 포함될 수도 있다.

본 발명에 따른 점적제는 살균 수성 또는 유성 액제 또는 현탁제를 포함할 수 있고, 살균제 및(또는) 살진균제 및(또는) 다른 적합한 보존제 및 바람직하게는 계면활성제를 포함하는 적합한 수용액 중에 활성 성분을 용해시켜 제조할 수 있다. 생성되는 용액을 여과하여 정제하고, 적합한 용기로 이동시킨 후, 밀봉하고, 오토클레이브 시키거나, 98 내지 100 ℃에서 30 분 동안 유지시켜 살균한다. 별법으로, 용액을 여과하고, 무균 기술에 의해 용기로 이동시켜 살균시킬 수 있다. 점적제에 포함시키기에 적합한 살균제 및 살진균제는 페닐머큐릭 나이트레이트 또는 아세테이트 (0.002 %), 벤즈알코늄 클로라이드 (0.01 %) 및 클로르헥시딘 아세테이트 (0.01 %)이다. 유성 용액의 제조에 적합한 용매는 글리세롤, 묽은 알콜 및 프로필렌 글리콜이다.

화학식 I의 화합물은 비경구 투여, 즉 정맥내, 근육내, 피하, 비강내, 직장내, 질내 또는 복막내 투여가 가능하다. 일반적으로, 피하 및 근육내 유형의 비경구 투여가 바람직하다. 각 투여에 대한 적합한 투여형은 통상의 기술에 의해 제조될 수 있다. 또한, 화학식 I의 화합물은 흡입 투여, 즉 비강내 및 경구 흡입 투여가 가능하다. 이러한 투여에 적합한 투여형, 예를 들면 에어로졸 제제 또는 측정 투여량 흡입기는 통상의 기술에 의해 제조할 수 있다.

본 명세서에 기재된 화학식 I의 화합물의 모든 사용 방법에 있어서, 1일 경구 투여 섭생은 총 체중의 약 0.01 내지 약 80 ㎎/㎏이 바람직하다. 1일 비경구 투여 섭생은 총 체중의 약 0.001 내지 약 80 ㎎/㎏이 바람직하다. 1일 국소 투여 섭생은 1일 1회 내지 4회, 바람직하게는 1일 2회 또는 3회 투여될 때 0.1 ㎎ 내지 150 ㎎이 바람직하다. 1일 흡입 투여 섭생은 1일 당 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 1 ㎎/㎏이 바람직하다. 또한, 당업자라면 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염의 최적량 및 개별적인 투여 간격은 치료할 증상, 투여 형태, 투여 경로 및 투여 자리, 특히 치료할 환자의 상태 및 정도를 고려하여 결정할 수 있고, 이러한 최적치는 통상적인 기술에 의해 결정할 수 있음을 이해할 것이다. 또한, 당업자라면, 치료의 최적 과정, 즉 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용 가능한 염의 규정된 일수 동안 1일 당 투여 횟수는 통상적인 과정의 치료 결정 시험법을 사용하여 확인할 수 있음을 이해할 것이다.

이제, 본 발명은 하기의 생물학적 실시예를 참고로 기술될 것이며, 하기 실시예는 단지 예시적일 뿐이며, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 여겨져서는 안된다.

생물학적 실시예

본 발명의 화합물의 IL-8 및 GRO-α 케모카인 억제 효과를 하기 생체외 분석에 의해 평가하였다.

수용체 결합 분석:

특이적 활성도가 2000 Ci/mmol인 [ ¹²⁵ I]IL-8 (사람 재조합)을 일리노이주 알링톤 하이츠 소재 아머샴 코퍼레이션 (Amersham Corp.)에서 얻었다. Gro-α는 NEN - New England Nuclear로부터 얻었다. 모든 다른 화학 물질은 분석용 등급이었다. 고농도의 재조합 사람 IL-8 유형 α 및 β 수용체를 상기 문헌 [홀메스 등, Science, 253, 1278 (1991)]에 기재되어 있는 바와 같이 챠이니스 햄스터 난소 세포에 개별적으로 발현시켰다. 상기 챠이니스 햄스터 난소 멤브레인을 상술한 프로토콜 [하오우어 (Haour) 등, J. Biol Chem., 249 pp.2195 - 2205 (1974)]에 따라 균질화시켰다. 예외적으로, 균질 완충액을 10 mM Tris-HCl, 1 mM MgSO ₄ , 0.5 mM EDTA (에틸렌-디아민테트라 아세트산), 1 mM PMSF (α-톨루엔술포닐 플루오라이드), 0.5 ㎎/ℓ 류펩틴, pH 7.5로 바꾸었다. 멤브레인 단백질 농도를 표준으로서 송아지 혈청 알부민을 사용하여 피어스 캄파니 (Pierce Co.)의 극소 분석 키트를 사용하여 측정하였다. 모든 분석을 96-웰 마이크로 플레이트 포맷에서 수행하였다. 각각의 반응 혼합물은 20 mM 비스-트리스프로판 및 0.4 mM 트리스 HCl 완충액 (pH 8.0, 1.2 mM MgSO ₄ , 0.1 mM EDTA, 25 mM NaCl 및 0.03 % CHAPS 함유) 중에 ¹²⁵ I IL-8 (0.25 nM) 또는 ¹²⁵ I Gro-α 및 0.5 ㎍/㎖의 IL-8Rα 또는 1.0 ㎍/㎖의 IL-8Rβ 멤브레인을 함유하였다. 또한, DMSO에 미리 용해되어 있던 관련 약물 또는 화합물을 가하여 0.01 nM 및 100 μM 사이의 최종 농도에 이르게 하였다. ¹²⁵ I-IL-8을 가하여 분석을 개시하였다. 실온에서 1 시간 후, 플레이트를 1 % 폴리에틸렌이민/0.5 % BSA로 블로킹한 유리 섬유 필터매트 상에서 Tomtec 96-웰 수확기를 사용하여 수확하고, 25 mM NaCl, 10 mM Tris HCl, 1 mM MgSO ₄ , 0.5 mM EDTA, 0.03 % CHAPS (pH 7.4)를 사용하여 3회 세척하였다. 계속하여, 필터를 건조시키고, 베타플레이트 액상 신틸레이션 계수기 상에서 계수하였다. 재조합 IL-8 Rα, 또는 유형 I 수용체는 본 명세서에서 허용되지 않는 수용체로 언급되며, 재조합 IL-8 Rβ, 또는 유형 Ⅱ 수용체는 허용 가능한 수용체로 언급된다.

합성예의 실시예 1 내지 17에서 언급된 화학식 I의 시험된 화합물 모두는 IL-8 수용체 억제에 대한 허용 가능한 모델에서 약 45 내지 약 2 ㎍/㎖ 미만의 IC ₅₀ 을 나타내었다. 화합물 N-트랜스-(2-벤질옥시시클로헥실)-N'-((2-벤젠술포닐아미노)-4-시아노페닐))우레아; N-(에틸이소프로필에테르)-N'-(2-히드록시-4-니트로-페닐)우레아; 및 N-(2-카르복시에틸)-N'-(2-히드록시-4-니트로페닐)우레아 화합물이 실시예 6의 화합물과 마찬가지로 상기 분석에서 비활성인 것이 밝혀졌다.

화학주성 분석:

이들 화합물의 생체외 억제 특성을 문헌 [Current Protocols in Immunology, vol I, Suppl 1, Unit 6.12.3.]에 기재되어 있는 호중구 세포 화학 주성 분석에 따라 측정하였고, 상기 문헌의 모든 개시 내용이 참고로 본 명세서에 포함된다. 호중구 세포를 문헌 [Current Protocols in Immunology, vol I, Suppl 1, Unit 7.23.1.]에 기재되어 있는 바와 같이 사람 혈액으로부터 단리시켰고, 상기 문헌의 모든 개시 내용이 참고로 본 명세서에 포함된다. 화학 친화제 IL-8, GRO-α, GRO-β, GRO-γ 및 NAP-2를 0.1 내지 100 nM의 농도에서 48-다중웰 챔버 [메릴랜드주 캐빈 존 소재 뉴로 프로브 (Neuro Probe) 제조]의 하부 챔버에 넣었다. 두 개의 챔버를 5 ㎛ 폴리카르보네이트 필터로 분리시켰다. 본 발명의 화합물을 시험할 때, 이들은 세포를 상부 챔버에 가하기 바로 직전에 세포 (0.001 내지 1000 nM)와 혼합하였다. 5 % CO ₂ 가 있는 습윤 항온기 내에서 약 37 ℃에서 약 45 내지 90 분 동안 항온시켰다. 항온 기간의 마지막에, 폴리카르보네이트 멤브레인을 제거하고, 윗부분을 세척하고, 멤브레인을 Diff Quick 착색 지침서 [미국 일리노이주 맥거 파크 소재의 박스터 프로덕츠 (Baxter Products) 제조]를 사용하여 착색시켰다. 케모카인에 대해 화학주성을 갖는 세포를 현미경을 사용하여 시각적으로 계수하였다. 일반적으로, 각 시료에 대해 4 개의 시야가 계수되며, 이 수는 이주한 세포의 평균 수를 나타내기 위하여 평균하였다. 각 시료를 3회 시험하고, 각 화합물을 적어도 4 회 반복하였다. 특정 세포에 대해서는 (양성 대조군 세포) 어떠한 화합물도 가하지 않았고, 이들 세포는 세포의 최대 화학주성 반응을 나타내었다. 음성 대조군 (비자극)이 바람직한 경우, 하부 챔버에 케모카인을 가하지 않았다. 양성 대조군과 음성 대조군의 차이가 세포의 화학주성 활성을 나타낸다.

엘라스타제 방출 분석:

본 발명의 화합물이 사람 호중구 세포로부터의 엘라스타제 방출을 방지하는 능력이 있는지에 대해 시험하였다. 호중구 세포를 문헌 [Current Protocols in Immunology, vol I, Suppl 1, Unit 7.23.1.]에 기재되어 있는 바와 같이 사람 혈액으로부터 단리시켰다. 링거스 (Ringer's) 용액 (NaCl 118, KCl 4.56, NaHCO ₃ 25, KH ₂ PO ₄ 1.03, 글루코스 11.1, HEPES 5 mM, pH 7.4)에 현탁된 PMNs 0.88×10 ⁶ 세포를 50 ㎕ 부피의 96-웰 플레이트의 각 웰에 넣었다. 이 플레이트에 부피 50 ㎕의 시험 화합물 (0.001 내지 1000 nM), 50 ㎕ (20 ㎍/㎖) 부피의 시토칼라신 B 및 50 ㎕ 부피의 링거스 완충액을 가하였다. 이들 세포를 5 분 동안 가온시키고 (37 ℃, 5 % CO ₂ , 95 % RH), 최종 농도 0.01 내지 1000 nM의 IL-8, GROα, GROβ, GROγ 또는 NAP-2를 가하였다. 반응을 45 분 동안 진행시킨 후, 96-웰 플레이트를 원심분리시키고 (800 g×5 분), 상등액 100 ㎕를 제거하였다. 이 상등액을 제2의 96-웰 플레이트에 가한 후, 인공 엘라스타제 기질 (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC, 캘리포니아주 라 졸라 소재 노바 바이오켐 (Nova Biochem) 제조)을 6 ㎍/㎖의 최종 농도까지 인산 완충 염수에 용해시켰다. 즉시, 플레이트를 형광 96-웰 플레이트 판독기 (메사츄세츠주 베드포드 소재의 사이토플루오르 2350, 밀리포어 (Cytofluor 2350, Milipore))에 넣고, 문헌 [나카지마 (Nakajima) 등, J. Biol Chem 254 4027 (1979)]에 기재된 방법에 따라 3 분 간격으로 자료를 수집하였다. PMNs로부터 방출된 엘라스타제의 양은 MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC 분해 속도를 측정하여 계산하였다.

외상성 두뇌 손상에서의 TNF-α 분석:

본 분석은 특정 두뇌 영역에서 종양 탈저 인자 mRNA의 발현을 시험하였고, 래트에서 측위 유체-타진 외상성 두뇌 손상 (TBI)을 실험적으로 유도하였다. 성인 스프라그-덜리 래트 (n = 42)를 소듐 펜토바비탈 (60 ㎎/㎏, 초기)을 사용하여 마취시키고, 좌측 측두두골 피질 (n = 18)에 집중되도록 보통 정도의 (2.4 atm.) 측위 유체-타진 두뇌 손상을 가하거나, "sham" 처리 (손상 없는 마취 또는 외과 수술, n = 18)를 수행하였다. 동물을 손상된 지 1, 6 및 24 시간 후에 목을 잘라 희생시키고, 두뇌를 제거하고, 좌측 (손상됨) 측두 피질 (LC), 대측성 우측 피질의 상응하는 영역 (RC), 손상된 측두 피질에 인접한 피질 (LA), 우측 피질에서 상응하는 인접 영역 (RA), 좌측 융기부 (LH) 및 우측 융기부 (RH)의 조직 시료를 준비하였다. 모든 RNA를 단리시키고, 북향 착색 혼성을 수행하고, TNF-α 양성 대조군 RNA (대식세포 = 100 %)에 대해 상대적으로 정량화하였다. 표시된 TNF-α mRNA 발현의 증가가 손상된 지 1 시간 후에 외상된 대뇌 반구의 LH (sham 처리와 비교, 양성 대조군 104±17 %, p < 0.05), LC (105±21 %, p < 0.05) 및 LA (69±8 %, p < 0.01)에서 관찰되었다. 또한, TNF-α mRNA 발현의 증가가 손상된 지 6 시간 후에 LH (46±8 %, p < 0.05), LC (30±3 %, p < 0.01) 및 LA (32±3 %, p < 0.01)에서 관찰되었고, 이것은 24 시간 내에 분해하였다. 대측성 대뇌 반구에서, TNF-α mRNA의 발현이 손상된 지 1 시간 후에 RH (46±2 %, p < 0.01), RC (4±3 %) 및 RA (22±8 %)에서 증가하였고, 손상된 지 6 시간 후에 RH (28±11 %), RC (7±5 %) 및 RA (26±6 %, p < 0.05)에서 증가하였으나, 24 시간 후에는 증가하지 않았다. sham (손상 없는 외과 수술) 처리 동물 또는 천연 동물에서는, 대뇌 반구의 6 개의 대뇌 영역 어디에서도, 어느 때에도 TNF-α mRNA의 발현에서 일관적인 변화가 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 시상 근처의 유체-타진 두뇌 손상 이후에, TNF-α mRNA의 일시적인 발현이 비외상성 대뇌 반구 영역을 포함하는 특정 두뇌 영역에서 변질됨을 나타낸다. TNF-α가 신경 성장 요인 (NGF)을 유도하고, 활성화된 성상 세포로부터 다른 사이토킨의 방출을 자극하기 때문에, TNF-α의 유전자 발현에서 이러한 후-외상 변질이 CNS 외상에 대한 급성 및 재생성 반응 모두에서 중요한 역할을 한다.

IL-β mRNA에 대한 CNS 손상 모델

이 분석은 특정 두뇌 영역에서 인터루킨-1β (IL-1β) mRNA의 국부적 발현을 특징으로 하며, 래트에서 측위 유체-타진 외상성 두뇌 손상 (TBI)을 실험한다. 성인 스프라그-덜리 래트 (n = 42)를 소듐 펜토바비탈 (60 ㎎/㎏, 초기)을 사용하여 마취시키고, 좌측 측두두골 피질 (n = 18)에 집중되도록 보통 정도의 (2.4 atm.) 측위 유체-타진 두뇌 손상을 가하거나, "sham" 처리 (손상 없는 마취 또는 외과 수술, n = 18)를 수행하였다. 동물을 손상된 지 1, 6 및 24 시간 후에 목을 잘라 희생시키고, 두뇌를 제거하고, 좌측 (손상됨) 측두 피질 (LC), 대측성 우측 피질에서 상응하는 영역 (RC), 손상된 측두 피질에 인접한 피질 (LA), 우측 피질에서 상응하는 인접 영역 (RA), 좌측 융기부 (LH) 및 우측 융기부 (RH)의 조직 시료를 준비하였다. 모든 RNA를 단리시키고, 북향 착색 혼성을 수행하고, 두뇌 조직 IL-1β mRNA의 양을 동일한 겔 상에 적재된 IL-1β 양성 대식세포 RNA의 방사능에 대한 백분율로 나타내었다. 두뇌가 손상된 지 1 시간 후, IL-1β mRNA의 발현이 상당히 두드러지게 증가됨이 손상된 대뇌 반구의 LC (sham 동물과 비교, 양성 대조군 20.0±0.7 %, n = 6, p < 0.05), LH (24.5±0.9 %, p < 0.05) 및 LA (21.5±3.1 %, p < 0.05)에서 관찰되었고, 이것은 손상된 지 6 시간 후까지 LC (4.0±0.4 %, n = 6, p < 0.05) 및 LH (5.0±1.3 %, p < 0.05)에서 증가된 상태로 남아있었다. sham 처리 동물 또는 천연 동물에서는, 각각의 두뇌 영역 어디에서도 IL-1β mRNA의 발현이 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 TBI 이후에, IL-1β mRNA의 일시적인 발현이 특정 두뇌 영역에서 국부적으로 자극됨을 나타낸다. IL-1β과 같은 사이토킨에서의 이러한 국부적인 변화는 후-외상에서 중요한 역할을 한다.

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