本发明涉及新型的取代的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物，含有该 衍生物的药物组合物、其治疗用途、特别是用于治疗脑缺血的用途。 本发明也涉及这种衍生物的制备方法。

在法国，脑血管疾病(每年新增150,000新病例)是死亡的第三大因 素，是成年人失去劳动能力的主要原因。缺血性和出血性中风分别占 所有脑血管意外的80％和20％。为了降低脑血管疾病的发病和死亡率， 缺血性中风是必须解决的一个重要治疗课题。现在，不仅在治疗、而 且在防止急性局部缺血方面都取得了进展。因此，在治疗这种病症时， 对于危险因素的识别和处理是很必要的，将这一点紧记心中非常重 要。

对于脑缺血的药物治疗基于各种不同的策略。第一种策略包括通 过预防危险因素(高血压，高胆甾醇血，糖尿病，心房纤维性颤动，等) 或者预防血栓症，特别是借助于抗血小板药物或者抗凝剂的作用 (Gorelick 2002)(Adams 2002)来防止脑缺血反应事故的发生。

第二种策略包括治疗急性期局部缺血，以便减弱其长期的后果 (Lutsep和Clark，2001)。

脑缺血的病理生理学可以被描述为：缺血性半影，即处于其中神 经元坏死的缺血性病灶与完整的神经组织之间的中间带，如果不进行 多次灌注液或者如果神经保护不充分的话，是在几天时间内导致神经 元死亡的病理生理学级联位。第一种情况，即在最初的几个小时内发 生的情况，是大量释放谷氨酸盐，从而导致神经元去极化并发生脑水 肿。钙流入到细胞内，诱导线粒体损坏，导致释放出自由基，并诱发 那些促进神经元膜降解的酶。钙的流入和自由基的形成随后又会激活 某些转录因子，如NF-KB。所述活化诱导炎性过程，比如诱发内皮附 着蛋白质，缺血性病灶的多核嗜中性渗透，小神经胶质活化，诱发类 似于II型一氧化氮(NO)合酶或者II型环加氧酶等的酶。这些炎性过程 导致释放出对于细胞具有毒性的NO或前列腺素类激素。这些过程在一 起导致产生引起不可逆损害的细胞调亡调亡现象(Dirnagl，ladecola等 人，1999)。

预防神经保护的概念是以在举例说明缺血性耐受性的动物模型中 取得的试验数据为基准的。事实上，在用实验方法促使脑局部缺血之 前使用的各种不同的步骤都减弱了后者的严重程度。各式各样的刺激 都可以诱发脑部缺血耐受性：预处理(在延长的局部缺血之前的短暂的 局部缺血)；热应力；给以小剂量的细菌脂多糖(Bordet，Deplanque等 人，2000)。

所述刺激诱发那些能激活引起保护机制的信号的耐受性机制。已 经鉴别出了不同的引发机制：细胞活素，炎症性途径，自由基，NO， ATP-依赖型钾通道，腺苷。所观察到的在早期事件开始一直到脑缺血 耐受性之间的滞后时间源自于对蛋白质合成的需要。已经有各种类型 的蛋白质被表明能诱发缺血性耐受性：热休克蛋白质，抗氧化酶和抗 调亡蛋白质(Nandagopal，Dawson等人，2001)。

因此，现实中真正需要那些能够防止脑血管意外如动脉粥样硬 化，糖尿病，肥胖症等的危险因素的发展，不仅能够提供预防性神经 保护作用，同时也能够在急性期脑缺血中提供活性神经保护的化合 物。

苯氧芳酸广泛用于治疗高甘油三酸酯血症。它们在高胆甾醇血中 也具有疗效。苯氧芳酸具有多向性作用机理。它们激活一类涉及到协 调担负脂质运输或代谢的蛋白质的表达的核受体(PPAR)。苯氧芳酸作 用机理的多向性性质源自于PPAR靶标基因的多样性。事实上，苯氧 芳酸能够校正血浆脂质浓度，并因此而降低动脉粥样硬化的产生，但 是它们在血管壁和血栓症方面也显示出消炎性能(Fruchart，Staels等 人，2001)。

PPAR(α，β，γ)属于受激素激活的核受体族。当通过与它们的配 体结合而被激活时，它们与类视色素-X-受体(RXR)杂二聚，并结合到 位于靶标基因的启动者序列中的″过氧物酶体增生反应元件(PPRE)″ 上。PPAR与PPRE的结合引起靶基因的表达(Fruchart，staels等人， 2001)。

尽管除了其表达仿佛普遍存在的PPARβ之外，它们全都显示某种 程度的组织专一性，但PPAR分布在各式各样的器官中。PPARα的表 达在肝脏和肠腔中特别高，而PPARγ则主要在脂肪组织和脾中表达。3 种亚型(α，β，γ)是在中枢神经系统细胞中表达的，更具体地讲，比如 少突神经胶质细胞和星形细胞表达PPARα亚型(Kainu，Wikstrom等人， 1994)。

PPAR的靶基因控制着脂质和葡萄糖的代谢作用。但是，近来的 发现认为，PPAR参与其他的生物进程，即，通过其配体的活化，PPAR 导致那些调节炎性过程、抗氧化酶、血管生成、细胞增殖和分化、细 胞调亡调亡、iNOS活性、MMP酶和TIMP的基因的转录活性发生变化 (Smith，Dipreta等人，2001；Clark，2002)。比如，PPARα和γ的活化 引起表皮角质化细胞增殖中止并促使其分化(Ellis，Varani等人，2000； Komuves，Hanley等人，2000)。

自由基起作用的病理学范围非常宽，包括过敏症、肿瘤的产生和 生长，心血管疾病(动脉粥样硬化，局部缺血)，基因和代谢失调(糖尿 病)，传染性和变性疾病(阿尔茨海默氏病，帕金森氏症，朊病毒等)， 以及眼科病症(Mates，Perez-Gomez等人，1999)。

活性氧物种(ROS)是在常规胞腔起作用的过程中生成的。ROS包 括羟基(OH)、过氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和一氧化氮(NO)。所 述物种非常不稳定，并且，由于它们的高化学反应性，而构成细胞生 物机能的一种危害。它们诱发脂质过氧化作用、某些酶的氧化以及导 致其发生降解的蛋白质非常广泛的氧化。预防脂质过氧化作用是好氧 有机物的重要过程，因为过氧化产物可能会促使DNA损伤。因此，天 然抗氧化剂防御对于自由基物种的生成、加工和消除之间的平衡的反 调节或者调节将导致形成对细胞或者生物体有害的的过程。

ROS是通过抗氧化剂体系加工的，所述抗氧化剂体系包括酶催化 组分和非酶催化组分，其中酶体系由若干种具有以下特性的酶组成：

-过氧化物歧化酶(SOD)通过将过氧化物自由基转化为过氧化物而 破坏过氧化物自由基。随后，所述过氧化物通过另一个酶体系起作用。 低水平的SOD通过需氧呼吸连续不断地生成。在人体中已经鉴别出3 类SOD，每一类都包含有Cu、Zn、Fe、Mn、或Ni作为辅因子。这三 种形式的人体SOD分布如下：胞质体Cu-Zn SOD，线粒体Mn-SO和细 胞外SOD。

-过氧化氢酶在把过氧化氢(H2O2)转化为水和氧气方面非常有效。 过氧化氢在好氧有机物中被酶催化发生分解代谢。过氧化氢酶也催化 各种氢过氧化物(ROOH)的还原。

-谷胱甘肽过氧化物酶使用硒作为辅因子，并通过使用谷胱甘肽 而催化氢过氧化物(ROOH和H2O2)的还原，从而保护细胞免受氧化性 损伤。

非酶催化的抗氧化剂防御体系包括被合成或者通过饮食供给的分 子。

抗氧化剂分子存在于不同的细胞室中。比如，去除污染酶会消除 自由基，对于细胞寿命来说是很重要的。3种最主要的抗氧化剂化合 物是类胡萝卜素，维生素C和维生素E(Gilgun-Sherki，Melamed等人， 2001)。

为了避免由脑缺血及其综合效果诱发的细胞调亡现象，本发明人 研制出新型的化合物，它们能够防止先前所述的危险因素的发展，并 能够发挥预防性的神经保护活性，同时也能够在急性期脑缺血过程中 提供活性神经保护。

本发明人还发现，本发明的化合物同时显示PPAR活化剂、抗氧 化剂和消炎性能，因此所述化合物对于脑缺血具有重要的治疗或预防 能力。

因此，本发明涉及新型的取代的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物， 含有该衍生物的药物组合物、其治疗用途，特别是用于治疗脑缺血的 用途。

因此，本发明旨在提供具有改进处方和令人满意的治疗效果的新 型的取代的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物。

这些及其他的目的尤其是通过以下发明实现的，即，所述发明把 由下式(I)表示的取代的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮衍生物、其光学和几何 异构体、外消旋体、互变异构体、盐、水合物和混合物作为其发明目 的：

其中：

X1表示卤素，或-R1基团，或相当下式-G1-R1的基团，

X2表示氢原子，或硫代亚硝基，或羟基，或未取代的烷氧基，或 烷基羰氧基，或硫醇基，或烷基硫基团，或烷基羰基硫基团，X2也可 以表示连接到丙烯链的碳3上的氧或硫原子以便形成2-苯基-4H-1-苯 并吡喃-4-酮类型衍生物(这一选择在式(I)中由虚线表示)，

X3表示-R3基团，或相当于下式-G3-R3的基团，

X4表示卤素，或硫代亚硝基，或-R4基团，或相当于下式-G4-R4 的基团，

X5表示-R5基团，或相当于下式-G5-R5的基团，

X6是氧原子或氮原子，在X6为氮原子的情况下，它带有氢原子 或羟基或烷氧基，

R1，R3，R4，R5相同或不同，表示氢原子或被至少一个取代基 取代或未取代的烷基，所述取代基是以下定义的族1或族2的一部分，

G1，G3，G4，G5相同或不同，表示氧或硫原子，

其中至少一个基团X1，X3，X4或X5相当于式-G-R，和

其中至少一个基团R1，R3，R4或R5以具有至少一个选自族1 或族2的取代基的烷基形式存在，所述烷基直接连接到环上或与根据 式-GR的基团G相连，

族1的取代基选自式-COOR6的羧基和式-CONR6R7的氨基甲酰 基，

族2的取代基选自式-SO3H的磺酸基和式-SO2NR6R7的磺酰胺基，

R6和R7相同或不同，表示氢原子或可以被至少一个族1或2的基 团取代的烷基，

以下由式(I)表示的化合物不包括在内，其中：

-X1、X2、X3和X5各自表示氢原子，X6表示氧原子，X4表 示相当于-O-CR8R9-COOR10的基团，其中R8和R9相同或不同，表示 C1-C2烷基(包括一个或两个碳原子)，R10表示氢原子或C1-C7烷基(包 括一个或七个碳原子)，

-X2、X3和X5各自表示氢原子，X1表示卤素原子或-R1或 -G1R1基团，其中R1表示未取代的C1-C2烷基，G1表示氧原子，X6 表示氧原子，X4表示相当于-O-CR11R12-COOR10的基团，其中R11和R12 相同或不同，表示C1-C2烷基，R10表示氢原子或C1-C7烷基，和

-X2表示氢原子，X1表示-G1R1基团，其中G1表示氧原子， R1表示CH2COOH。

本发明也包括式(I)化合物的前药，其在对患者给药后，转化为式 (I)的化合物和/或显示与式(I)化合物类似治疗活性的式(I)化合物的代谢 产物。

本发明也将药物组合物作为其目的，所述药物组合物，在药物学 可接受的载体中，包括至少一种诸如以上定义的式(I)化合物，这一式(I) 化合物有可能与另一种活性治疗剂相结合。

本发明也涉及至少一种式(I)化合物在制备用于治疗脑血管病，如 脑缺血或突发脑出血的药物组合物方面的用途。

最后，本发明的目的在于制备式(I)化合物的方法。

在本发明的范围内，以上定义的由式(I)表示的衍生物可以采用顺 式或反式构型。

有利的是，基团X3、X4和X5中没有一个表示氢原子。满足这 一定义的式(I)化合物构成通族(II)的化合物。

有利的是，基团X3、X4和X5中有一个或两个表示氢原子，X1 表示未取代的烷基。满足这一定义的式(I)化合物构成通族(III)的化合 物。

有利的是，基团X3、X4和X5中有一个或两个表示氢原子，X2 表示硫代亚硝基、或烷基羰氧基、或硫醇基、或烷基硫基、或烷基羰 基硫基团，X2也可以表示连接到丙烯链的碳3上的氧或硫原子以便 形成2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮类型衍生物(这一选择在式(I)中由虚线 表示)。满足这一定义的式(I)化合物构成通族(IV)的化合物。

有利的是，基团X3、X4和X5中有一个或两个表示氢原子，X1、 X3、X4或X5中至少有一个为GR形式，其中G是硫原子。满足这 一定义的式(I)化合物构成通族(V)的化合物。

有利的是，基团X3、X4和X5中有一个或两个表示氢原子，X1、 X3、X4或X5中至少有一个为-G-R形式，其中G是氧原子，R是被 其中R6不是氢原子的族1的取代基取代的烷基。满足这一定义的式(I) 化合物构成通族(VI)的化合物。

有利的是，基团X3、X4和X5中有一个或两个表示氢原子，X1、 X3、X4或X5中至少有一个为GR形式，其中G是氧原子，R是被以 上定义的磺酰胺基取代的烷基。满足这一定义的式(I)化合物构成通族 (VII)的化合物。

有利的是，X4是硫代亚硝基、或-R4基团、或相当于式-G4-R4 的基团。其中X4满足这一定义的式(I)衍生物构成其中G4和R4如上 定义的由通式(VIII)表示的衍生物。

有利的是，X2是硫代亚硝基、或羟基、或烷氧基、或硫醇基、 或烷基硫基团。其中X2满足这一定义的式(I)衍生物构成由通式(IX) 表示的衍生物。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(X)，其中X4为 硫代亚硝基、或-R4基团、或相当于式-G4-R4的基团，X2是硫代亚 硝基、或羟基、或烷氧基、或硫醇基、或烷基硫基团，G4和R4定义 如上。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XI)，其中X1 表示-R1基团或相当于式-G1-R1的基团，其中R1是被属于族1的取 代基取代的烷基，G1和族1的取代基定义如上。

更优选，本发明的另一个目的涉及以上定义的由式(XI)表示的衍 生物，其特征在于X1是-G1-R1基团。

甚至更优选，本发明的另一个目的涉及以上定义的由式(XI)表示 的衍生物，其特征在于X1是-G1-R1基团，其中G1是氧原子。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XII)，其中X1 表示-R1基团或相当于式-G1-R1的基团，其中R1是被属于族2的取 代基取代的烷基，G1和族2的取代基定义如上。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XIII)，其中X3 表示-R3基团或相当于式-G3-R3的基团，其中R3是被属于族1的取 代基取代的烷基，G3和族1的取代基定义如上。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XIV)，其中X3 表示-R3基团或相当于式-G3-R3的基团，其中R3是被属于族2的取 代基取代的烷基，G3和族2的取代基定义如上。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XV)，其中X4 表示-R4基团或相当于式-G4-R4的基团，其中R4是被属于族1的取 代基取代的烷基，G4和族1的取代基定义如上。

更优选，本发明的另一个目的涉及以上定义的由式(XV)表示的衍 生物，其特征在于X4是-G4-R4基团。

甚至更优选，本发明的另一个目的涉及以上定义的由式(XV)表示 的衍生物，其特征在于X4是-G4-R4基团，其中G4是氧原子。

甚至更优选，本发明的另一个目的涉及以上定义的由式(XV)表示 的衍生物，其特征在于X4是-G4-R4基团，其中G4是氧原子，X3和 X5分别一方面表示R3或G3R3，另一方面表示R5或G5R5，其中R3 和R5为带有族1的取代基的烷基，所述族1的取代基定义如上。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XVI)，其中X4 表示-R4基团或相当于式-G4-R4的基团，其中R4是被属于族2的取 代基取代的烷基，G4和族2的取代基定义如上。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XVII)，其中X1 表示卤素。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XVIII)，其中X1 表示-R1基团，其中R1是被至少一个属于以上定义的族1或族2的取 代基取代或未取代的C1-C4烷基。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XIX)，其中X1 表示-G1R1基团，其中R1是被至少一个属于以上定义的族1或族2 的取代基取代或未取代的C1-C3烷基。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XX)，其中X1 表示-R1基团，其中R1是被至少一个属于以上定义的族1或族2的取 代基取代或未取代的C5-C24烷基。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XXI)，其中X1 表示-G1R1基团，其中R1是被至少一个属于以上定义的族1或族2 的取代基取代或未取代的C4-C24烷基。

本发明其他有利的由式(I)表示的衍生物具有通式(XXII)，其中X6 表示氧原子。

本发明的另一个目的涉及由式(I)表示的衍生物，其特征在于X4 是-G4-R4基团，R4定义如上，X3和X5分别一方面表示R3或G3R3， 另一方面表示R5或G5R5，其中R3和R5为带有族1的取代基的烷 基，所述族1的取代基定义如上。

本发明的另一个目的涉及式(I)的衍生物，其中X1、X3、X4或X5 表示OC(CH3)2COOR6，R6定义如上。

本发明的另一个目的涉及式(I)的衍生物，其中X1、X3、X4或X5 表示SC(CH3)2COOR6，R6定义如上。

根据本发明，术语“烷基”表示饱和烃官能团，为直链、支链或 环状，卤代或未卤代的，更具体地具有1-24个，优选1-10个碳原子， 如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，叔丁基，戊基，新戊 基，正己基。特别优选包含一个或两个碳原子或包含2-7个碳原子的 基团。尤其优选甲基和乙基。

术语“硫代亚硝基”是指通过硫原子连接到芳环上的亚硝基。

术语“卤素”表示氯原子、溴原子、碘原子或氟原子。

术语“烷氧基”表示通过氧原子连接到环上的烷基链。烷基链定 义如前。

术语“烷基硫”是指通过硫原子(硫醚键)连接到芳环上的烷基 链。烷基链定义如前。

根据本发明的具体实施方案，优选的化合物在下面用其相应的化 学式表示：

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮， 和1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯- 1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮，和1-[2- 羟基苯基]-3-[4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-甲基羰氧基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮，和1-[2-甲基羰氧基苯基]-3-[4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-1-羟基亚氨基丙-2- 烯，和1-[2-羟基苯基]-3-[4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-1-羟基 亚氨基丙-2-烯：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二叔丁基-4-羟基苯基] 丙-2-烯-1-酮，1-[2-羟基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二叔 丁基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧 基苯基]-3-[3，5-二叔丁基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2，-C2H5

1-[2-羟基苯基]-3-[3-羧基二甲基甲氧基-4-羟基-5-叔丁基苯基]丙- 2-烯-1-酮，和1-[2-羟基苯基]-3-[3-异丙氧基羰基二甲基甲氧基-4-羟基 -5-叔丁基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3-羧基二甲基甲氧基-4-羟基-5-叔丁基苯 基]丙-2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3-异丙氧基羰基二甲基甲 氧基-4-羟基-5-叔丁基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基苯基]-3-[3-羧基二甲基甲基-4-羟基-5-叔丁基苯基]丙-2- 烯-1-酮，和1-[2-羟基苯基]-3-[3-异丙氧基羰基二甲基甲基-4-羟基-5-叔 丁基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3-羧基二甲基甲基-4-羟基-5-叔丁基苯基] 丙-2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3-异丙氧基羰基二甲基甲基-4- 羟基-5-叔丁基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H、-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-异丙氧基羰基二 甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-异丙氧基羰基二甲 基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-羟基苯基] 丙-2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5- 二甲氧基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，4-二羟基-5-羧基二甲基甲氧基苯基]丙- 2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，4-二羟基-5-异丙氧基羰基二甲 基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙 -2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二 甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙- 2-烯-1-酮，和1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲 基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮(化合物15)：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯- 1-酮，和1-[2-羟基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基 苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基苯基]-3-[3-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮，和1-[2- 羟基苯基]-3-[3-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮，和1-[2-羟 基苯基]-3-[4-异丙氧基羰基二甲基甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮(化合物18)：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-巯基-4-甲氧基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮，和1-[2-巯基-4-甲氧基苯基]-3-[4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[4-庚基苯基]-3-[3-甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮，和1-[4-庚基苯基]-3-[3-甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮：

R＝-H，-CH(CH3)2

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二溴-4-羟基苯基]丙- 2-烯-1-酮，

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3-羟基苯基]丙-2-烯-1- 酮，

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1- 酮，

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1- 酮，

1-[2，4-二羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮，

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮，

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮，

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-氯苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-氯-2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯- 1-酮，

1-[4-甲硫基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-氯苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-羧基二甲基甲硫基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[2-羟基-4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙- 2-烯-1-酮，

1-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮，

1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮，

1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮，

1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮，

1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮，

2-(3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基)-7-氯-4H-1-苯并 吡喃-4-酮，

2-(3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基)-7-氯-4H-1-苯并吡喃-4- 酮，

1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧 基苯基]丙-2-烯-1-酮，

1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮，

1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮，

1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯- 1-酮，

1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮，

1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮，

1-[2-羟基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮。

本发明的方法包括，在碱性介质或酸性介质中，使至少一种式(A) 表示的化合物与至少一种式(B)表示的化合物接触，式(A)和(B)是：

其中，X1、X2、X3、X4和X5定义如上。

在酸性或碱性介质中进行所述反应的条件是本领域技术人员能够 实现的，并且有多种变化。

所述两种化合物有利的是以化学计量比接触。接触优选在室温(约 18-25℃)和大气压下进行。

在碱性介质中，反应优选在强碱的存在下进行，如碱土金属氢氧 化物如氢氧化钠，或碱金属醇化物如乙醇钠。

在酸性介质中，反应优选在强酸如盐酸的存在下进行。

反应路线可以如下表示：

在碱性介质中的合成可以按如下方式进行：

将1摩尔当量的酮(化合物(A))和1摩尔当量的醛(化合物(B))溶于 20摩尔当量氢氧化钠的氢醇溶液中。混合物在室温下(约18-25℃)搅 拌约18小时。然后，尤其是用盐酸将介质酸化(特别是到pH约为2)。 通过在反应介质蒸发之后进行沉淀或固/液萃取，可以得到希望的取代 的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮。然后，可以将其用硅胶色谱或结晶法纯化。

在酸性介质中的合成可以按如下方式进行：

将1摩尔当量的酮(化合物(A))和1摩尔当量的醛(化合物(B))溶于 饱和有盐酸气的乙醇溶液中。混合物在室温下搅拌约6小时。除去溶 剂，特别是用真空蒸发法除去溶剂。取代的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮用 硅胶色谱纯化。

制备式(I)化合物的方法使得化合物的制备涉及到如下的原料和中 间体化合物。本发明也将某些提供给本发明的原料和得到的中间体化 合物作为其目的。

所述化合物(原料和中间体)更特别地选自以下组：

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化合 物1)，

4-乙氧基羰基二甲基甲硫基乙酰苯(原料12)，

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体 化合物2)，

1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体 化合物3)，

1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体 化合物4)，

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间 体化合物5)，

2-(3，5-二甲基-4-羟基苯基)-7-氯-4H-1-苯并吡喃-4-酮(中间体化合 物6)，

1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮(中间体化合物7)，

1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化 合物)，

1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化合 物8)。

本发明的另一个目的涉及到任何在药学可接受的载体中含有至少 一种以上定义的式(I)化合物的药物组合物。

通过有利的方式，这种药物组合物可用于治疗或预防脑血管疾 病，更具体而言是脑缺血或脑出血事件。事实上，令人惊奇地发现， 式(I)化合物显示出PPAR活化剂、抗氧剂和抗炎性能，并在脑缺血方 面具有预防和急性神经保护活性。

本发明也涉及以上定义的化合物在制备用于治疗或预防人或动物 的方法中的药物组合物的用途。

本发明也涉及式(I)的化合物在制备用于治疗性或预防性治疗脑血 管疾病，特别是脑缺血的药物组合物方面的用途，所述式(I)化合物包 括以下式(I)化合物，其中：

-X1、X2、X3和X5各自表示氢原子，X6表示氧原子，X4表 示相当于-O-CR8R9-COOR10的基团，其中R8和R9相同或不同，表示 C1-C2烷基，R6表示氢原子或C1-C7烷基，

-X2、X3和X5各自表示氢原子，X1表示卤素原子或-R1或- G1R1基团，其中R1表示未取代的C1-C2烷基，G1表示氧原子，X6 表示氧原子，X4表示相当于-O-CR11R12-COOR10的基团，其中，R11和 R12相同或不同，表示C1-C2烷基，R10表示氢原子或C1-C7烷基，和

-X2表示氢原子，X1表示-G1R1基团，其中G1表示氧原子， R1表示CH2COOH。

本发明也涉及治疗脑血管疾病，特别是脑缺血的方法，包括给予 患者，特别是人有效剂量的以上定义的化合物或药物组合物，其包括 以下通式(I)的化合物，其中：

-X1、X2、X3和X5各自表示氢原子，X6表示氧原子，X4表 示相当于-O-CR8R9-COOR10的基团，其中R8和R9相同或不同，表示 C1-C2烷基，R6表示氢原子或C1-C7烷基，

-X2、X3和X5各自表示氢原子，X1表示卤素原子或-R1或- G1R1基团，其中R1表示未取代的C1-C2烷基，G1表示氧原子，X6 表示氧原子，X4表示相当于-O-CR11R12-COOR10的基团，其中，R11和 R12相同或不同，表示C1-C2烷基，R10表示氢原子或C1-C7烷基，和

-X2表示氢原子，X1表示-G1R1基团，其中G1表示氧原子，R1 表示CH2COOH。

优选，用于治疗脑血管疾病，特别是脑缺血的方法，包括给予患 者，特别是人有效剂量的以上定义的式(I)化合物或药物组合物，不包 括以下通式(I)的化合物，其中：

-X1、X2、X3和X5各自表示氢原子，X6表示氧原子，X4表 示相当于-O-CR8R9-COOR10的基团，其中R8和R9相同或不同，表示 C1-C2烷基，R10表示氢原子或C1-C7烷基，

-X2、X3和X5各自表示氢原子，X1表示卤素原子或-R1或- G1R1基团，其中R1表示未取代的C1-C2烷基，G1表示氧原子，X6 表示氧原子，X4表示相当于-O-CR11R12-COOR10的基团，其中R11和R12 相同或不同，表示C1-C2烷基，R10表示氢原子或C1-C7烷基，和

-X2表示氢原子，X1表示-G1R1基团，其中G1表示氧原子，R1 表示CH2COOH。

本发明的药物组合物有利的是，包括一种或多种药学上可接受的 赋形剂或载体。实例包括与所述药学用途相容并且本领域技术人员公 知的生理盐水、生理等渗压缓冲液等。组合物可以包含一种或多种选 自分散剂、助溶剂、稳定剂、防腐剂等的试剂或载体。可以用于制剂(流 体和/或可注射制剂和/或国体制剂)的试剂或载体尤其是甲基纤维素、 羟甲基纤维素、羧甲基纤维素、聚山梨醇酯80，甘露糖醇、明胶、乳 糖、植物油、阿拉伯胶等。组合物也可以通过确保延长和/或延迟释放 的药学形式或设备配制成注射悬浮液、胶体、油剂、片剂、栓剂、粉 剂、胶囊、gelules等形式。对于这类制剂，有利的是使用诸如纤维素、 碳酸盐或淀粉的试剂。

本发明的化合物或组合物可以通过不同的方式和不同的形式给 药。例如，它们可以通过口服或通过身体组织给药，如经静脉内、肌 内、皮下、眼、动脉内等途径给药。对于注射来说，化合物通常配制 成液体悬浮液形式，其可以通过例如注射器或通过输液注入。应理解， 注射速率和/或注射剂量可以由本领域技术人员根据病人、病症、给药 方法等来确定。通常，化合物的给药剂量为每次给药1微克-2克，优 选每次给药0.1微克-1克。根据情况，可以每天给药或一天重复给药 数次。此外，本发明的组合物可以另外包括其他的活性成分或试剂。

附图说明

图1-1，1-2，1-3：通过铜(Cu)来评价化合物2、化合物3、化合物12、 化合物14和化合物17对LDL氧化的抗氧化性能。

图1-1示出了随着时间的推移测量形成共轭二烯的实验结果。可 以看出，用浓度为10-4M试验化合物孵化LDL延迟了共轭二烯的形成。 当用化合物3、化合物12、化合物14和化合物17孵化LDL时，与单 独用铜的111分钟相比，迟滞期分别为132、145、134和203分钟。 当用化合物2孵化LDL时，迟滞期大于480分钟。形成共轭二烯的迟 滞是抗氧化剂的特性。

图1-2示出了在不同的处理后形成二烯的速率。在铜的存在下， 用LDL孵化化合物时，减缓了形成共轭二烯的速率。这一速率，当单 独用铜时为2nmol/min/mg LDL，当在10-4M化合物17的存在下孵化 LDL时，为1.7nmol/min/mg LDL，而对于10-4M化合物2来说，没有 测得(因为太低而不能测到)。

图1-3代表随着时间的推移形成的共轭二烯的最大量。用铜孵化 LDL时，每毫克LDL形成348nmol共轭二烯；用10-4M化合物2孵 化时，共轭二烯的形成降低84％(每毫克LDL形成54.4nmol)。在化合 物3和17的存在下，共轭二烯的形成分别为每毫克LDL 303和 327nmol。

图1-4，1-5，1-6：通过铜(Cu)来评价化合物18、化合物19、化合物 21和化合物22对LDL氧化的抗氧化性能。

图1-4表明，用浓度为10-4M试验化合物孵化LDL延迟了共轭二 烯的形成。当用化合物18、化合物19或化合物22孵化LDL时，与 单独用铜的178分钟相比，迟滞期分别为241、182、和241分钟(从 实验测定结果得知)。当用化合物21孵化LDL时，迟滞期大于480分 钟。形成共轭二烯的迟滞是抗氧化剂的特性。

图1-5示出了在不同的处理后形成二烯的速率。单独用铜时，形 成共轭二烯的速率为1.6nmol/min/mg LDL，当在10-4M化合物18的 存在下孵化LDL时，为1.4nmol/min/mg LDL，当在化合物22的存在 下孵化LDL时，为1.3nmol/min/mg LDL，而对于10-4M化合物21来 说，没有测得(因为太低而不能测到)。

图1-6代表随着时间的推移形成的共轭二烯的最大量。用铜孵化 LDL时，每毫克LDL形成353nmol共轭二烯；用10-4M化合物21孵 化时，抑制了共轭二烯的形成。在化合物18、19和22的存在下，共 轭二烯的形成分别为每毫克LDL 305、345和345nmol。

图1-7，1-8：通过铜(Cu)来评价化合物25和化合物28对LDL氧 化的抗氧化性能。

图1-7示出了随着时间的推移测量形成共轭二烯的实验结果。可 以看出，用浓度为10-4M试验化合物孵化LDL延迟了共轭二烯的形成。 当用化合物25和化合物29孵化LDL时，与单独用铜的82分钟相比， 迟滞期分别为120和135分钟(从实验测定得到)。

图1-8代表随着时间的推移形成的共轭二烯的最大量。用铜孵化 LDL时，每毫克LDL形成393nmol共轭二烯；在化合物25的存在下， 该值为每毫克LDL 378nmol。

图1-9，1-10，1-11：通过铜(Cu)来评价化合物31、化合物33和化 合物35对LDL氧化的抗氧化性能。

图1-9示出了随着时间的推移测量形成共轭二烯的实验结果。可 以看出，用浓度为10-4M试验化合物孵化LDL延迟了共轭二烯的形成。 当用化合物31、化合物33和化合物35孵化LDL时，与单独用铜的80 分钟相比，迟滞期分别为139、247和149分钟(从实验测定得出)。形 成共轭二烯的迟滞是抗氧化剂的特性。

图1-10示出了在不同的处理后形成二烯的速率。在铜的存在下， 用LDL孵化化合物时，减缓了形成共轭二烯的速率。这一速率，当单 独用铜时为1.9nmol/min/mg LDL，当在10-4M化合物31的存在下孵 化LDL时，为1.6nmol/min/mg LDL，当在化合物33的存在下孵化LDL 时，为0.8nmol/min/mg LDL，而当在化合物35的存在下孵化LDL时， 则为1.5nmol/min/mg LDL。

图1-11代表随着时间的推移形成的共轭二烯的最大量。用铜孵 化LDL时，每毫克LDL形成298nmol共轭二烯，与此相比，在化合 物33的存在下时，则为每毫克LDL 257nmol。

图1-12，1-13，1-14：通过铜(Cu)来评价化合物37、化合物38和化 合物41对LDL氧化的抗氧化性能。

图1-12示出了随着时间的推移测量形成共轭二烯的实验结果。 可以看出，用浓度为10-4M试验化合物孵化LDL延迟了共轭二烯的形 成。当用化合物37、化合物38和化合物41孵化LDL时，与单独用 铜的120分钟相比，迟滞期分别为196、284和411分钟(从实验测定 得出)。

图1-13示出了在不同的处理后形成二烯的速率。在铜的存在下， 用LDL孵化化合物时，减缓了形成共轭二烯的速率。这一速率，当单 独用铜时为1.8nmol/min/mg LDL，当在10-4M化合物37的存在下孵 化LDL时，为1.49nmol/min/mg LDL，当在化合物38的存在下孵化LDL 时，为0.71nmol/min/mg LDL，而当在化合物41的存在下孵化LDL 时，则为0.54nmol/min/mg LDL。

图1-14代表随着时间的推移形成的共轭二烯的最大量。用铜孵 化LDL时，每毫克LDL形成372nmol共轭二烯，与此相比，在化合 物37、38和41的存在下时，则分别为每毫克LDL 338nmol、每毫克 LDL 244nmol和每毫克LDL 71nmol。

形成共轭二烯的迟滞期、形成二烯的速率的降低以及形成的二烯 总量的降低均是抗氧化剂的特性。

图2-1，2-2，2-3，2-4，2-5，2-6：在PPARα/Gal4转活化体系中评价本 发明化合物的PPARα拮抗性能

用不同的化合物在浓度为10、30和100μM或1、10和100μM 下将RK13细胞孵化24小时。结果用不同处理后的诱导因子(相对于 未处理细胞的荧光信号)表示。诱导因子越高，PPARα拮抗活性越有 效。

图2-1：

结果示出了化合物3、化合物4、化合物7、化合物8和化合物9 的诱导因子。这些诱导因子值示于下表2-1。

表2-1

结果表明，在浓度为30μM时，化合物3产生了最大27倍的诱 导，化合物4在100μM时的最大诱导因子是60，在30μM时为22， 在10μM时为4。化合物7在100μM时的最大诱导因子是50。化合物 8在100μM时，用最大诱导因子10来活化体系。化合物9在最高浓 度100μM下，其诱导因子为28。

图2-2：

结果示出了化合物11、化合物12、化合物13、化合物14和化 合物17的诱导因子。这些诱导因子值示于下表2-2。

表2-2

结果表明，在浓度为100μM时，化合物11产生了最大10倍的 诱导，化合物12在100μM时的最大诱导因子是22，在30μM时为8， 在10μM时为1。化合物13和14在不同的测试浓度下所具有诱导因 子在1.1-1.5之间。化合物17在100μM时，用最大诱导因子85来活 化体系，且在100μM浓度下，其最小诱导因子为13.8。

图2-3：

结果示出了化合物19、化合物20、化合物21和化合物22的诱 导因子。这些诱导因子值示于下表2-3。

表2-3

结果表明，在浓度为10μM时，化合物19产生了最大15.6倍的 诱导，化合物20在10μM时的最大诱导因子是53。化合物21在不同 的测试浓度下所具有诱导因子在0.8-22之间。化合物22在10μM时， 用最大诱导因子50来活化体系。

图2-4：

结果示出了化合物23、化合物24、化合物25、化合物26和化 合物29的诱导因子。这些诱导因子值示于下表2-4。

表2-4

化合物23在10μM下具有最大诱导因子3.6，化合物24在10μM 下具有最大诱导因子11。化合物25根据测试浓度，用7-21之间的诱 导因子活化体系。化合物26在10μM浓度下具有最大诱导因子7.8， 而化合物29在1和10μM下的诱导因子分别为28和25。

图2-5：

结果示出了化合物31和化合物33的诱导因子。这些诱导因子值 示于下表2-5。

表2-5

化合物31在10μM下用诱导因子15.5活化体系。而化合物33在 1、10和100μM下的诱导因子分别为22、44和77。

图2-6：

结果示出了化合物37、化合物38和化合物41的诱导因子。这 些诱导因子值示于下表2-6。

表2-6

对于化合物37、38和41来说，在10μM浓度下的最大诱导因子 分别为27、22和31。

这些结果表明，试验的本发明的化合物显示出PPARα配体活性， 因此能够进行其转录活化。

图2-7：在PPARγ/Gal4转活化体系中评价本发明化合物的PPARγ 拮抗性能

用不同的化合物在浓度为1、10和100μM下将RK13细胞孵化24 小时。结果用不同处理后的诱导因子(相对于未处理细胞的荧光信号)。 诱导因子越高，PPARα拮抗活性越有效。

图中结果示出了化合物17、化合物33和化合物29的诱导因子。 这些诱导因子值示于下表2-7。

表2-7

结果表明，化合物17在10μM时具有最大诱导因子25。化合物 33在100μM时具有最大诱导因子45.6，而化合物29则在10μM时具 有最大诱导因子33.9。

这些结果表明，试验的本发明的化合物显示出PPARγ配体活性， 因此能够进行其转录活化。

图3-1和3-2：评价本发明化合物的急性和预防性神经保护性能

图3-1：预防性神经保护

该图示出了在对大脑中动脉进行管腔内堵塞60分钟，接着在杀死 前进行24小时多次灌注之后测定的梗塞体积，单位为立方毫米。图3-1 示出了用3组C57Black/6小鼠观察到的梗塞体积。这些动物组中有两个 组在堵塞之前通过强饲法用化合物进行了14天的处理，使用化合物15 时，剂量为200mg/公斤/天，用化合物42时，剂量为200mg/公斤/天。

可以看出，未处理动物的梗塞体积为37立方毫米，与此相比，对 于用化合物42进行处理的动物来说为24立方毫米，用化合物15时为32 立方毫米。

图3-2：急性神经保护

图3-2示出了用3组C57Black/6小鼠观察到的梗塞体积。堵塞后， 对动物用化合物处理72小时，用化合物15时剂量为200mg/公斤/天，用 化合物42时剂量为200mg/公斤/天。

可以看出，在未处理的动物中，全部校准的梗塞体积为50立方毫 米，与此相比，用化合物42处理的动物为39立方毫米，用化合物15处 理时为43立方毫米。

图3-1和3-2中提供的结果表明了化合物作为神经保护化合物的 效能。所述化合物在预防性治疗和急性治疗方面是有活性的。

从以下实施例中，本发明的其他方面和优点将变得显而易见，给 出这些实施例仅仅是为了说明而非限定。

实施例

根据以下列出的通用方法制备本发明的化合物。

本发明的通用合成方法描述：

1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮的合成：

其中，X1为OH、Cl、Br、-SCH3、-OC6H13、-C7H15、 OC(CH3)2COOR6、SC(CH3)2COOR6；

X2为H、O(2-苯基-4-H-1-苯并吡喃-4-酮)、OCH3、OH；

X4为OH、Cl、Br、-SCH3、OC(CH3)2COOR6、SC(CH3)2COOR6；

X3和X5为CH3、C(CH3)3、OCH3、OH、OC(CH3)2COOR6；

X6为CH2CH3、H。

通用方法1：

在酸性介质中合成1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮：

将酮(1当量)和醛(1当量)溶于饱和有盐酸气的乙醇溶液中。反应 在室温下搅拌约6小时，然后用真空蒸发除去溶剂。1，3-二苯基丙-2- 烯-1-酮通过硅胶色谱纯化。

通用方法2：

在碱性介质中合成1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮：

将酮(1当量)和醛(1当量)溶于氢氧化钠(20当量)的水醇溶液中。 混合物在室温下搅拌18小时。用盐酸将介质酸化到pH＝2。

通过在反应介质蒸发之后进行沉淀或固/液萃取得到希望的取代 的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮。用硅胶色谱或再结晶法对其进行纯化。

通用方法3：

在乙醇钠的存在下合成取代的1，3-二苯基丙-2-烯-1-酮：

将钠(1当量)溶于无水乙醇中。加入酮(1当量)和醛(1当量)。反 应混合物在室温下搅拌12小时，然后加入2N氢氧化钠(5当量)。混 合物在100℃保持12小时。通过加入6N盐酸水溶液将反应介质酸化。 用真空蒸发除去溶剂。残余物经硅胶色谱或再结晶法纯化。

苯酚的O-烷基化和苯硫酚的S-烷基化

通用方法4：

X1为Cl、Br、-SCH3、-OC6H13、-C7H15；

X2为H、O(2-苯基-4-H-1-苯并吡喃-4-酮)、OCH3；

X3和X5为CH3；

R6为CH2CH3、H。

将苯酚(1当量)溶于乙腈中。然后加入卤化衍生物(1-10当量)和碳 酸钾(5当量)。将反应介质在回流下有力搅拌约10小时。过滤除去盐， 真空蒸发脱除溶剂和多余的试剂，目的产物通过硅胶色谱法纯化。

叔丁酸酯的酸性水解

通用方法5：

其中：X3和X5为CH3；

X2为H、O(2-苯基-4-H-1-苯并吡喃-4-酮)、OCH3；

X1为Cl、Br、-SCH3、-OC6H13、-C7H15；

将叔丁酸酯(1当量)溶于二氯甲烷中，加入三氟乙酸(10当量)， 混合物在室温下搅拌12小时。所得产物通过硅胶色谱或再结晶法纯化。

用于合成本发明化合物的原料的合成

原料1：2’-羟基-4’-(乙氧基羰基二甲基甲氧基)乙酰苯：

由2’，4’-二羟基乙酰苯和溴代异丁酸乙酯(1当量)根据先前所述的 通用方法4合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸 乙酯＝9∶1)

1H NMR CDCl3δppm：1.25(t，J＝7.17Hz，3H)，1.67(s，6H)，2.56(S，3H)， 4.24(q，J＝7.17Hz，2H)，6.27(d，J＝2.55Hz，1H)，6.37(dd，J＝2.55Hz，J＝8.72 Hz1H)，7.62(d，J＝8.72Hz，1H)，12.6(信号，1H)。

参考文献：US 3,629,290(1970)，Fisons Pharmaceutical

原料2：乙酸3-氯苯基酯

将3-氯苯酚溶于二氯甲烷中，加入三乙胺(1当量)和乙酸酐(2当 量)。混合物在室温下搅拌5小时。真空蒸发除去溶剂。将蒸发残余物 吸收在二氯甲烷中，经硫酸镁干燥，并通过真空蒸发除去溶剂。通过 硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝95∶5)。

1H NMR CDCl3δppm：2.29(s，3H)，6.99-7.33(m，4H)。

原料3：4’-氯-2’-羟基乙酰苯

将乙酸3-氯苯基酯(原料2)与三氯化铝(3当量)混合。混合物在200 ℃加热1小时。将反应介质冷却到室温然后倒入到冰中。水相用二氯 甲烷萃取，经硫酸镁干燥，然后真空蒸发。

通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝95∶5)。

1H NMR CDCl3δppm：3.41(S，3H)，6.81(dd，J＝8.82Hz，J＝1.47Hz 1H)，6.91(d，J＝1.47Hz，1H)，7.60(d，8.82Hz，1H)，12.33(s，1H)。

参考文献：Chen等人，J Chem Soc，1958，146-148。

原料4：4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛

由4-羟基苯甲醛与溴代异丁酸乙酯根据先前所述的通用方法4合 成该化合物。

通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.20(t，J＝6.96Hz，3H)，1.67(s，6H)，

4.21(q，J＝6.96Hz，2H)，6.89(d，J＝8.91Hz，1H)，7.79(d，J＝8.94Hz，2H)，9.87 (S，1H)。

原料5：3，5-二甲氧基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛

由3，5-二甲氧基-4-羟基苯甲醛与溴代异丁酸乙酯根据先前所述的 通用方法4合成该化合物。

通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝8∶2)。

1H NMR CDCl3δppm：1.33(t，J＝7.29Hz，3H)，1.50(s，6H)， 3.84(s，6H)，4.27(q，J＝7.29Hz，2H)，7.08(s，2H)，9.86(S，1H)。

原料6：3，5-二甲基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛

由3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛与溴代异丁酸乙酯根据先前所述的通 用方法4合成该化合物。

通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝95∶5)。

1H NMR CDCl3δppm：1.37(t，J＝7.14Hz，3H)，1.50(s，6H)， 2.29(s，6H)，4.30(q，J＝7.14Hz，2H)，7.54(s，2H)，9.88(S，1H)。

原料7：3-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛

由3-羟基苯甲醛与溴代异丁酸乙酯根据先前所述的通用方法4合 成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.24(t，J＝7.27Hz，3H)，1.62(s，6H)，

4.25(q，J＝7.27Hz，2H)，7.11(m，1H)，7.31(m，1H)，7.40(t，J＝8.19Hz，1H)， 7.49(m，1H)，9.93(S，1H)。

原料8：4-乙氧基羰基二甲基甲硫基苯甲醛

将4-甲硫基苯甲醛(1当量)溶于二氯甲烷中并将溶液冷却到0℃。 加入少量间氯过苯甲酸(1.5当量)。反应通过薄层色谱跟踪。可以加入 另外的间氯过苯甲酸以使原料消失。用过滤除去沉淀。加入氢氧化钙 (1.5当量)，并将混合物再搅拌15分钟。过滤除去固体，滤液经硫酸 镁干燥，之后通过真空蒸发除去二氯甲烷。将蒸发残余物吸收在乙酸 酐中，然后回流加热30分钟并蒸发至干。残余物吸收在甲醇/三乙胺 溶液中，室温搅拌15分钟，然后真空蒸发除去溶剂。将油状残余物 吸收在饱和氯化铵水溶液中，然后用二氯甲烷萃取。有机相经硫酸镁 干燥，并真空蒸发。

所得4-巯基苯甲醛中间体不经进一步纯化就投入使用。根据通用 方法4将其烷基化，得到4-乙氧基羰基二甲基甲硫基苯甲醛。通过硅 胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.22(t，J＝7.46Hz，3H)，2.60(s，6H)，

4.15(q，J＝7.46Hz，2H)，7.53(d，J＝8.38Hz，2H)，7.88(d，J＝8.39Hz，2H)， 9.99(S，1H)。

参考文献：Young NR，Gauthier J Y.，Coombs W.，(1984)， Tetrahedron Letters，25(17)：1753-1756。

原料9：4’-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯

由4’-羟基乙酰苯与溴代异丁酸乙酯根据先前所述的通用方法4 合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.17(t，J＝5.64Hz，3H)，1.61(s，6H)，2.50(s，3H)， 4.18(q，J＝5.64Hz，2H)，6.78(d，J＝8.82Hz，2H)，7.83(d，J＝8.81Hz，2H)。

原料10：乙酸3-溴苯基酯

将3-溴苯酚溶于二氯甲烷中，加入三乙胺(1当量)和乙酸酐(2当 量)。混合物在室温下搅拌5小时。真空蒸发除去溶剂。将蒸发残余物 吸收在二氯甲烷中，经硫酸镁干燥，并通过真空蒸发除去溶剂。通过 硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝95∶5)。

1H NMR CDCl3δppm：2.30(s，3H)，7.0-7.4(m，4H)。

原料11：2’-羟基-4’-溴乙酰苯

将乙酸3-溴苯基酯(原料10)与三氯化铝(3当量)混合。混合物在200 ℃加热1小时。将反应介质冷却到室温然后倒入到冰中。水相用二氯 甲烷萃取，经硫酸镁干燥，然后真空蒸发。通过硅胶色谱纯化(洗脱液： 环己烷/乙酸乙酯＝95∶5)。

1H NMR CDCl3δppm：2.59(s，3H)，7.01(d，J＝8.5Hz，1H)， 7.13(s，1H)，7.55(d，J＝8.5Hz，1H)，12.33(s，1H)。

原料12：4’-乙氧基羰基二甲基甲硫基乙酰苯

将4’-甲硫基乙酰苯(1当量)溶于二氯甲烷中并将溶液冷却到0℃。 加入少量间氯过苯甲酸(1.5当量)。反应通过薄层色谱跟踪。可以加入 另外的间氯过苯甲酸以使原料消失。用过滤除去沉淀。加入氢氧化钙 (1.5当量)，并将混合物再搅拌15分钟。过滤除去固体，滤液经硫酸 镁干燥，之后通过真空蒸发除去二氯甲烷。将蒸发残余物吸收在乙酸 酐中，然后回流加热30分钟并蒸发至干。残余物吸收在甲醇/三乙胺 溶液中，室温搅拌15分钟，然后真空蒸发除去溶剂。将油状残余物 吸收在饱和氯化铵水溶液中，然后用二氯甲烷萃取。有机相经硫酸镁 干燥，并真空蒸发。

所得4’-巯基乙酰苯中间体不经进一步纯化就投入使用。根据通 用方法4将其烷基化，得到4’-乙氧基羰基二甲基甲硫基乙酰苯。通过 硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.21(t，J＝7.32Hz，3H)，1.51(s，6H)，2.59(s，3H)， 4.12(q，J＝7.32Hz，2H)，7.51(d，J＝8.40Hz，2H)，7.79(d，J＝8.40Hz，2H)。

参考文献：Young NR，Gauthier J Y.，Coombs W.，(1984)， Tetrahedron Letters，25(17)：1753-1756。

用于合成本发明化合物的中间体化合物的合成

中间体化合物1：

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4-氯乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的通用方 法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯 ＝95∶5)。

1H NMR CDCl3δppm：2.30(s，6H)，7.32(s，2H)， 7.34(d，J＝15.25Hz，1H)，7.47(d，J＝8.86Hz，2H)，7.75(d，J＝15.26Hz，1H)， 7.97(d，J＝8.86Hz，2H)。

中间体化合物2：

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-甲硫基乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的 通用方法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸 乙酯＝8∶2)。

1H NMR DMSO δppm：2.22(s，6H)，2.54(s，3H)， 7.36(d，J＝8.20Hz，2H)，7.48(s，2H)，7.62(d，J＝15.7Hz，1H)， 7.74(d，J＝15.7Hz，1H)，8.10(d，J＝8.20Hz，2H)，8.92(s，1H)。

中间体化合物3：

1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-甲氧基乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的 通用方法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸 乙酯＝8∶2)。

1H NMR DMSO δppm：2.39(s，6H)，2.22(s，6H)，7.58(s，2H)，7.67- 7.62(m，3H)，7.82(d，J＝15.5Hz，1H)，8.17(d，1H)，12.96(s，1H)。

中间体化合物4：

1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4-己氧基乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的通 用方法1合成该化合物。希望的化合物从反应介质中沉淀出来，干燥， 然后不经进一步纯化就用于后续反应。

1H NMR DMSOδppm：0.88(m，3H)，1.28-1.43(m，6H)，1.72(m，2H)， 2.21(s，6H)，4.05(t，J＝6.42Hz，2H)，7.40(d，J＝8.43Hz，2H)，7.48(s，2H)， 7.57(d，J＝15.24Hz，1H)，7.72(d，J＝15.24Hz，1H)，8.12(d，J＝8.43Hz，2H)， 8.89(s，1H)。

中间体化合物5：

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-氯-2’-羟基乙酰苯(原料3)与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据 先前所述的通用方法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(甲苯：10)。

1H NMR DMSO δppm：2.21(s，6H)，7.1(m，2H)，7.55(s，2H)， 7.72(d，J＝15.4Hz，1H)，7.80(d，J＝15.4Hz，1H)，8.25(d，J＝9.0Hz，1H)， 9.09(s，1H)，13.04(s，1H)。

中间体化合物6：

2-(3，5-二甲基-4-羟基苯基)-7-氯-4H-1-苯并吡喃-4-酮

由1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中 间体化合物5)根据以下方法合成该化合物：

将1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮溶 于二甲基亚砜中，加入碘晶体，并将混合物回流10分钟。

使反应介质回到室温，水解。将沉淀干燥，先用硫代硫酸钠溶液、 再用水冲洗。

纯化时先溶解在二氯甲烷中，然后通过加入庚烷沉淀。

1H NMR DMSO δppm：2.25(s，6H)，6.87(s，1H)，7.51(d，J＝8.55Hz，1H)， 7.73(s，2H)，7.98(m，2H)。

参考文献：Doshi AG，S.P.，Ghiya BJ(1986).Indian J Chem Sect B 25：759。

中间体化合物7：

1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

由4’-氯-2’-甲氧基乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所 述的通用方法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/ 乙酸乙酯＝85∶15)。

1H NMR DMSO δppm：2.21(s，6H)，3.90(s，3H)，7.12(m，1H)， 7.23(d，J＝15.5Hz，1H)，7.29(s，J＝1.80Hz，1H)，7.38(d，J＝15.5Hz，1H)， 7.41(s，2H)，7.48(d，J＝7.98Hz，1H)。

中间体化合物8：

1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化合 物8)

由4’-溴乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的通用 方法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯 ＝85∶15)。

1H NMR DMSO δppm：2.30(s，6H)，7.32(s，2H)，7.56-7.66(m，3H)， 7.75(d，J＝15.27Hz，1H)，7.90(d，J＝8.70Hz，2H)，9.82(s，1H)。

中间体化合物9：

1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-庚基乙酰苯与3，5-二甲基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的通 用方法1合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙 酯＝85∶15)。

1H NMR DMSO δppm：0.84(s，3H)，1.25(m，8H)，1.60(m，2H)， 2.21(s，6H)，2.65(t，J＝7.50Hz，2H)，7.35(d，J＝8.02Hz，1H)，7.48(s，2H)， 7.60(d，J＝15.48Hz，1H)，7.71(d，J＝15.48Hz，1H)，8.05(d，J＝8.02Hz，2H)， 8.92(s，1H)。

本发明化合物的合成：

化合物1：

1-[2-羟基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二叔丁基-4-羟 基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-(乙氧基羰基二甲基甲氧基)乙酰苯(原料1)与3，5-二 丁基-4-羟基苯甲醛根据先前所述的通用方法1合成该化合物。通过硅 胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.25(t，J＝7.11Hz，3H)，1.45(s，18H)，1.70(s，6H)， 4.26(q，J＝7.11Hz，2H)，5.63(s，1H)，6.33(d，J＝2.37Hz，1H)， 6.42(dd，J＝8.8Hz，J＝2.37Hz，1H)，7.41(d，J＝15.39Hz，1H)，7.5(s，2H)， 7.83(d，J＝8.8Hz，1H)，7.88(J＝15.39Hz，1H)，13.5(s，1H)。

化合物2：

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二叔丁基-4-羟基苯基] 丙-2-烯-1-酮

由1-[2-羟基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二叔丁基-4- 羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(化合物1)根据以下方法合成该化合物：

将酯溶于乙醇中，加入1N的氢氧化钠溶液，并将混合物在回流 下保持10小时。通过加入12N盐酸将介质酸化，然后用乙酸乙酯萃 取。有机层经硫酸镁干燥，然后真空蒸发。通过制备HPLC纯化(反相 RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.49(s，18H)，1.73(s，6H)，5.62(s，1H)， 6.44(d，J＝15.5Hz，1H)，7.01(m，2H)，7.57(t，1H)，7.81(d，J＝15.5Hz，1H)， 7.87(d，2H)，7.93(d，1H)，8.26(d，1H)

MS(ES-MS)：453.2(M-1)

化合物3：

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-氯乙酰苯与4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛(原 料9)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗 脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.58(s，6H)，6.87(d，J＝8.54Hz，2H)， 7.05(dd，J＝8.54Hz，1.83Hz，1H)，7.09(d，J＝1.2Hz，1H)，7.90-7.80(m，4H)， 8.25(m，8.52Hz，1H)，12.84(s，1H)，13.26(s，1H)

MS(ES-MS)：359.0(M-1)

化合物4：

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基乙酰苯与4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛(原料4)根 据先前所述的通用方法2合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液： 环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.58(s，6H)，6.88(d，2H)，7.01(m，2H)，7.57(t 1H)，7.81(d，J＝15.5Hz，1H)，7.87(d，2H)，7.93(d，J＝15.5Hz，1H)，8.26(d，1H) 12.69(s，1H)

MS(ES-MS)：325.1(M-1)

化合物5：

1-[2-羟基苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮

由2’-羟基乙酰苯与3，5-二甲氧基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯 甲醛(原料5)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。通过硅胶色谱 纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.35(s，6H)，3.80(s，6H)，7.00-7.03(m，2H)，7.25 (s，2H)，7.59(t，1H，J＝8.07Hz，1H)，7.81(d，J＝15.5Hz，1H)，8.00(d，J＝15.5 Hz，1H)，8.31(d，J＝8.07Hz，1H)，12.36(s，1H)，12.69(s，1H)

MS(ES-MS)：385.3(M-1)

化合物6：

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲氧基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-氯乙酰苯(原料3)与3，5-二甲氧基-4-乙氧基羰基二 甲基甲氧基苯甲醛(原料5)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。 通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.34(s，6H)，3.80(s，6H)，7.08(dd，J＝1.77Hz， 1H)，7.12(d，J＝1.77Hz，1H)，7.24(s，2H)，7.79(d，J＝15.4Hz，1H)，7.93(d，J＝ 15.4Hz，1H)，8.27(d，J＝8.3Hz，1H)，12.36(s，1H)，12.69(s，1H)

MS(ES-MS)：419.0(M-1)

化合物7：

1-[2-羟基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙- 2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-氯乙酰苯(原料3)与3，5-二甲基-4-乙氧基羰基二甲 基甲氧基苯甲醛(原料6)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。通 过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSOδppm：1.39(s，6H)，2.22(s，6H)，7.07(m，1H)，7.12(d，J＝ 2.07Hz，1H)，7.61(s，2H)，7.74(d，J＝15.5Hz，1H)，7.87(d，J＝15.5Hz，1H)，8.26 (d，1H)，12.76(s，1H)

MS(ES-MS)：387.1(M-1)

化合物8：

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二溴-4-羟基苯基]丙- 2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料1)与3，5-二溴 -4-羟基基苯甲醛根据先前所述的通用方法2合成该化合物。通过硅胶 色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR CDCl3δppm：1.60(s，6H)，6.24(d，J＝2.47Hz，1H)，6.43(dd，J＝ 2.47Hz，J＝8.52Hz，1H)，7.70(d，J＝15.5Hz，1H)，7.96(d，J＝15.5Hz，1H)，8.22 (s，2H)，8.34(d，J＝9.16Hz，1H)，13.34(s，1H)

MS(ES-MS)：498.6(M-1)

化合物9：

1-[2-羟基苯基]-3-[3-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基乙酰苯与3-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛(原料7)根 据先前所述的通用方法2合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液： 环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.56(s，6H)，6.91(dd，J＝8.01Hz，J＝2.47Hz， 1H)，7.03-6.99(m，2H)，7.41-7.36(m，2H)，7.60-7.52(m，2H)，7.77(d，J＝15.5Hz， 1H)，8.00(d，J＝15.5Hz，1H)，8.31(dd，J＝8.63Hz，J＝1.85Hz，1H)，12.47(s， 1H)，13.17(s，1H)

MS(ES-MS)：325.8(M-1)

化合物10：

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料1)与3-羟基 基苯甲醛根据先前所述的通用方法2合成该化合物。通过硅胶色谱纯 化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.60(s，6H)，6.25(d，J＝2.47Hz，1H)，6.43(dd，J ＝2.47Hz，9.09Hz，1H)，6.89(m，1H)，7.35-7.24(m，3H)，7.73(d，1H)，7.92(d，J ＝15.5Hz，1H)，8.27(d，J＝15.5Hz，1H)，13.21(s，1H)，13.39(s，1H).

MS(ES-MS)：341(M-1)

化合物11：

1-[2-羟基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯- 1-酮

由2’-羟基乙酰苯与3，5-二甲基-4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲 醛(原料6)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶 色谱(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)，然后用制备HPLC(反相RP18， Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.57(s，6H)，2.31(s，6H)，6.96(t，J＝8.17Hz，1H)， 7.04(d，J＝8.72Hz，1H)，7.35(s，2H)，7.49(t，J＝8.2Hz，1H)，7.58(d，J＝15.8 Hz，1H)，7.84(d，J＝15.8Hz，1H)，7.94(d，J＝8.7Hz，1H)，12.87(s，1H)

MS(ES-MS)：353.1(M-1)

化合物12：

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1- 酮

由2’-羟基-4’-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料1)与4-甲硫 基苯甲醛根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶 色谱(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)，然后用制备HPLC(反相RP18， Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.3)。

1H NMR DMSO δppm：1.60(s，6H)，2.54(s，3H)，6.25(d，1H)，6.43(dd，J＝ 2.47Hz，1H)，7.33(d，J＝8.56Hz，2H)，7.8(d，15.5Hz，1H)，7.86(d，J＝8.56Hz， 2H)，7.98(d，J＝15.5Hz，1H)，8.29(d，J＝9.1Hz，1H)，13.34(s，1H)

MS(ES-MS)：373.1(M-1)

化合物13：

1-[2，4-二羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’，4’-二羟基乙酰苯与4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛(原料 4)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱(洗 脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)，然后用制备HPLC(反相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：34∶66∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.57(s，6H)，6.29(d，J＝2.16Hz，1H)，6.41(dd，J＝ 9.18Hz，J＝2.16Hz，1H)，6.86(d，J＝8.64Hz，2H)，7.75(d，J＝15.67Hz，1H)， 7.83-7.88(m，3H)，8.19(d，J＝9.18Hz，1H)，10.74(s，1H)，13.53(s，1H)

MS(maldi-Tof)：343.1(M+1)

化合物14：

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-羟基乙酰苯与4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲醛(原料4)根 据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱(洗脱 液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)，然后用制备HPLC(反相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：34∶66∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.56(s，6H)，6.85(d，J＝8.63Hz，2H)，6.90(d，J＝ 9.21Hz，2H)，7.63(d，J＝15.54Hz，1H)，7.78(m，3H)，8.05(d，J＝8.61Hz，2H)， 10.40(s，1H)，13.22(s，1H)

MS(maldi-Tof)：327.1(M+1)

Compound 15：

化合物15：

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

由1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化 合物1)和溴代异丁酸异丙酯根据先前所述的通用方法4合成该化合 物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSOδppm：1.25(d，J＝6.06Hz，6H)，1.39(s，6H)，5.00(sept， J＝6.06Hz，1H)，7.57(s，2H)，7.62(d，J＝8.40Hz，2H)，7.64(d，J＝15.8Hz，1H)， 7.81(d，J＝15.8Hz，1H)，8.16(d，J＝8.40Hz，2H).

MS(Maldi-Tof)：415.1(M+1)

化合物16：

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

由1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化 合物1)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化合 物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

化合物17：

1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮

由1-[4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮(化合物16)根据先前所述的通用方法5合成该化合物。通 过硅胶色谱纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98∶2)。

1H NMR DMSO δppm：1.39(s，6H)，2.22(s，6H)，7.58(s，2H)，7.67-7.62 (m，3H)，7.82(d，J＝15.5Hz，1H)，8.17(d，1H)，12.96(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：373.3(M+1)

化合物18：

1-[2-羟基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-氯苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基-4’-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料1)与4-氯苯 甲醛根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱 (洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)，然后用制备HPLC(反相RP18， Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.60(s，6H)，6.25(d，J＝2.47Hz，1H)，6.45(dd，J ＝2.47Hz，J＝9.12Hz，1H)，6.55(d，J＝8.55Hz，2H)，7.82(d，J＝15.54Hz，1H)， 7.97(d，J＝8.55Hz，2H)，8.03(d，J＝15.54Hz，1H)，8.29(d，J＝9.12Hz，1H)， 13.20(s，1H)，13.39(s，1H)

MS(ES-MS)：359.0(M-1)

化合物19：

1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮

由2’-羟基乙酰苯和4-乙氧基羰基二甲基甲硫基苯甲醛(原料8)根 据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱(洗脱 液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.44(s，6H)，6.99-7.05(m，1H)，7.52(d，J＝8.1 Hz，2H)，7.58(m，1H)，7.83(d，J＝15.5Hz，1H)，7.92(d，J＝8.1Hz，1H)，8.09(d， J＝15.5Hz，1H)，8.26(dd，J＝1.62，J＝8.6Hz，1H)，12.47(s，1H)，12.78(s，1H) MS(Maldi-Tof)：242.9(M+1)

化合物20：

1-[4-氯-2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-氯-2’-羟基乙酰苯(原料3)和4-乙氧基羰基二甲基甲硫基苯 甲醛(原料8)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅 胶色谱(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18， Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.43(s，6H)，7.05(dd，J＝1.7Hz，J＝8.46Hz，1H)， 7.11(d，J＝2.25Hz，1H)，7.51(d，J＝7.92Hz，2H)，7.82(d，J＝15.8Hz，1H)，7.89 (d，J＝7.9Hz，2H)，8.05(d，J＝15.2Hz，1H)，8.23(d，J＝8.46Hz，1H)，12.57(s， 1H)，12.78(s，1H).

MS(Maldi-Tof)：377.0(M-1)

化合物21：

1-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯- 1-酮

由4-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料9)和3，5-二甲基-4-羟 基苯甲醛根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶 色谱(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18， Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.60(s，6H)，2.21(s，6H)，6.91(d，J＝9.09Hz，2H)， 7.48(s，2H)，7.57(d，J＝15.12Hz，1H)，7.70(d，J＝15.63Hz，1H)，8.09(d，J＝ 9.06Hz，2H)，8.9(s，1H)，13.29(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：355.2(M+1)

化合物22：

1-[4-甲硫基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-甲硫基乙酰苯(原料12)和4-乙氧基羰基二甲基甲氧基苯甲 醛(原料9)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶 色谱(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18， Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.57(s，6H)，2.57(s，3H)，6.86(d，J＝8.94Hz，2H)， 7.41(d，J＝8.40Hz，2H)，7.69(d，J＝15.2Hz，1H)，7.84-7.78(m，3H)，8.09(d，J＝ 8.4Hz，2H)，13.21(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：357.2(M-1)

化合物23：

1-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-氯苯基]丙-2-烯-1-酮

由4-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料9)和4-氯苯甲醛根据 先前所述的通用方法3合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱(洗脱液： 二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18，Licrospher 12μm， 洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.72(s，6H)，6.97(d，J＝8.61Hz，2H)，7.39(d，J＝ 8.25Hz，2H)，7.50(d，J＝15.72Hz，1H)，7.57(d，J＝8.61Hz，2H)，7.77(d，J＝ 15.72Hz，1H)，7.99(d，J＝8.61Hz，2H)，13.30(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：345.1(M+1)

化合物24：

1-[4-羧基二甲基甲基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-乙氧基羰基二甲基甲硫基乙酰苯(原料12)和4-甲硫基苯甲 醛根据先前所述的通用方法3合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱(洗 脱液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.46(s，6H)，2.54(s，3H)，7.33(d，J＝8.61Hz，2H)， 7.59(d，J＝8.10Hz，2H)，7.73(d，J＝15.66Hz，1H)，7.85(d，J＝8.10Hz，2H)， 7.92(d，J＝15.66Hz，1H)，8.13(d，8.10Hz，2H)，12.85(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：373.1(M+1)

化合物25：

1-[2-羟基-4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙- 2-烯-1-酮

由4’-溴-2’-羟基乙酰苯(原料11)与3，5-二甲基-4-乙氧基羰基二甲 基甲氧基苯甲醛(原料6)根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯 化时先用硅胶色谱(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反 相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.39(s，6H)，2.22(s，6H)，7.20(dd，J＝2.16，J＝ 8.55Hz，1H)，7.25(d，J＝1.59Hz，1H)，7.60(s，2H)，7.73(d，J＝15.51Hz，1H)， 7.86(d，J＝15.51Hz，1H)，8.16(d，J＝8.58Hz，1H)，12.70(s，1H)，13.30(s，1H)

MS(ES-MS)：432.9(M-1)

化合物26：

1-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]-3-[4-甲硫基苯基]丙-2-烯-1-酮

由4’-乙氧基羰基二甲基甲氧基乙酰苯(原料9)和4-甲硫基苯甲醛 根据先前所述的通用方法2合成该化合物。纯化时先用硅胶色谱(洗脱 液：二氯甲烷/甲醇＝95∶5)，然后用制备HPLC(反相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇-三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.60(s，6H)，2.53(s，3H)，6.93(d，J＝9.00Hz， 2H)，7.32(d，J＝8.49Hz，2H)，7.68(d，J＝15.51Hz，1H)，7.82(d，J＝8.52Hz，2H)， 7.89(d，J＝15.51Hz，1H)，8.13(d，9.00Hz，2H)，13.30(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：355.0(M+1)

化合物27：

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮

由1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间 体化合物2)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化 合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝8∶2)。

化合物28：

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮

由1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间 体化合物2)和溴代异丁酸异丙酯根据先前所述的通用方法4合成该化 合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

1H NMR DMSO δppm：1.25(d，J＝6.18Hz，6H)，1.39(s，6H)，2.18(s， 6H)，2.57(s，3H)，4.99(sept，J＝6.18Hz，1H)，7.40(d，J＝8.28Hz，2H)，7.58(s， 2H)，7.62(d，J＝15.5Hz，1H)，7.82(d，J＝15.5Hz，1H)，8.10(d，J＝8.28Hz， 2H)，12.97(s，1H)

MS(Maldi-Tof)：427.1(M+1)

化合物29：

1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮

由1-[4-甲硫基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙氧基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮(化合物28)根据先前所述的通用方法5合成该化合物。通 过硅胶色谱纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98∶2)。

1H NMR DMSO δppm：1.39(s，6H)，2.22(s，6H)，2.57(s，3H)，7.40(d，J＝ 8.55Hz，2H)，7.57(s，2H)，7.62(d，J＝15.5Hz，1H)，7.83(d，J＝15.5Hz，1H)， 8.10(d，J＝8.55Hz，2H)，12.97(s，1H)

MS(ES-MS)：383.3(M-1)

化合物30：

1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮

由1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间 体化合物3)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化 合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

化合物31：

1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮

由1-[2-甲氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基 苯基]丙-2-烯-1-酮(化合物30)根据先前所述的通用方法5合成该化合 物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98∶2)。

1H NMR DMSOδppm：1.38(s，6H)，2.19(s，6H)，3.93(s，3H)，7.05(m， 1H)，7.20(d，J＝8.31Hz，1H)，7.25(d，J＝15.5Hz，1H)，7.37(d，J＝15.5Hz，1H)， 7.39(s，2H)，7.46(d，J＝7.2Hz，1H)，7.53(m，1H)，12.93(s，1H)

MS(ES-MS)：367.1(M-1)

化合物32：

1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮

由1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间 体化合物4)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化 合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝95∶5)。

化合物33：

1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯 -1-酮

由1-[4-己氧基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮(化合物32)根据先前所述的通用方法5合成该化合物。通 过用甲醇再结晶进行纯化。

1H NMR DMSO δppm：0.88(t，J＝6.33Hz，3H)，1.30(m，4H)，1.39(s， 6H)，1.44(m，2H)，1.73(m，2H)，2.22(s，6H)，4.06(t，J＝6.30Hz，2H)，7.06(d，J＝ 8.61Hz，2H)，7.56(s，2H)，7.58(d，J＝15.5Hz，1H)，7.82(d，J＝15.5Hz，1H)， 8.13(d，J＝6.61Hz，2H)

MS(ES-MS)：437.2(M-1)

化合物34：

2-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-7-氯-4H-1-苯并 呋喃-4-酮

由2-(3，5-二甲基-4-羟基苯基)-7-氯-4H-1-苯并吡喃-4-酮(中间体化 合物6)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化合 物。通过用二氯甲烷/庚烷的混合溶剂再结晶进行纯化。

化合物35：

2-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]-7-氯-4H-1-苯并呋喃-4- 酮

由2-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]-7-氯-4H-1- 苯并呋喃-4-酮(化合物34)根据先前所述的通用方法5合成该化合物。

通过制备HPLC纯化(反相RP18，Licrospher 12μm，洗脱液：水-甲醇 -三氟乙酸：22∶78∶0.1)。

1H NMR DMSO δppm：1.24(s，6H)，2.28(s，6H)，7.02(s，1H)，7.56(dd，J ＝8.71Hz，J＝1.75Hz，1H)，7.85(s，2H)，8.03(d，J＝1.75Hz，1H)，8.06(d，J＝ 8.71Hz，1H)

MS(Maldi-Tof)：387.1(M+1)

化合物36：

1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧 基苯基]丙-2-烯-1-酮

由1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮(中间体化合物7)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通 用方法4合成该化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙 酯＝9∶1)。

化合物37：

1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

由1-[2-甲氧基-4-氯苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲 氧基苯基]丙-2-烯-1-酮(化合物36)根据先前所述的通用方法5合成该 化合物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98∶2)。

1H NMR DMSOδppm：1.38(s，6H)，2.19(s，6H)，3.89(s，3H)，7.12(dd，J ＝7.98Hz，J＝1.71Hz，1H)，7.23(d，J＝15.56Hz，1H)，7.29(s，J＝1.71Hz，1H)， 7.38(d，J＝15.7Hz，1H)，7.41(s，2H)，7.48(d，J＝7.98Hz，1H)

MS(ES-SM)：401.2(M-1)

化合物38：

1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮

由1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体 化合物9)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化合 物。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

化合物39：

1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯- 1-酮

由1-[4-庚基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯 基]丙-2-烯-1-酮(化合物38)根据先前所述的通用方法5合成该化合物。 通过硅胶色谱纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98∶2)。

1H NMR DMSO δppm：0.85(m，3H)，1.30-1.24(m，8H)，1.39(s，6H)，1.60 (m，2H)，2.22(s，6H)，2.67(t，2H，J＝7.4Hz)，7.37(d，J＝8.04Hz，2H)，7.57(s， 2H)，7.62(d，J＝15.66Hz，1H)，7.82(d，J＝15.69Hz，1H)，8.07(d，J＝8.07Hz， 2H)

MS(ES-MS)：435.3(M-1)

化合物40：

1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

由1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羟基苯基]丙-2-烯-1-酮(中间体化 合物8)和溴代异丁酸叔丁酯根据先前所述的通用方法4合成该化合物。 通过硅胶色谱纯化(洗脱液：环己烷/乙酸乙酯＝9∶1)。

化合物41：

1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1- 酮

由1-[4-溴苯基]-3-[3，5-二甲基-4-叔丁氧基羰基二甲基甲氧基苯基] 丙-2-烯-1-酮(化合物40)根据先前所述的通用方法5合成该化合物。通 过硅胶色谱纯化(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98∶2)。

1H NMR DMSOδppm：1.39(s，6H)，2.22(s，6H)，7.58(s，2H)，7.65(d，J＝ 15.39Hz，1H)，7.84-7.77(m，3H)，8.09(d，J＝8.19Hz，1H)，13.01(s，1H)

MS(ES-MS)：417.2(M-1)

化合物42：

1-[2-羟基苯基]-3-[3，5-二甲基-4-异丙基氧羰基二甲基甲氧基苯基]丙 -2-烯-1-酮

将1-[2-羟基苯基]-3-[4-羧基二甲基甲氧基苯基]丙-2-烯-1-酮(化合 物4，1当量)溶于二氯甲烷中。加入二氯甲基甲基醚(3当量)，并把混 合物在回流下保持8小时。通过真空蒸发除去溶剂和过量的试剂。残 余物吸收在异丙醇(50当量)中，在室温下搅拌12小时，然后真空蒸发 除去异丙醇。通过硅胶色谱纯化(洗脱液：甲苯/乙酸乙酯＝7∶3)。

1H NMR CDCl3δppm：1.21(d，J＝6.09Hz，6H)，1.65(s，6H)，5.10(sept，J ＝6.10Hz，1H)，6.86(d，J＝8.65Hz，2H)，6.95(m，1H)，7.02(dd，J＝8.65Hz，J＝ 1.53Hz，1H)，7.48(m，1H)，7.54(d，J＝15.25Hz，1H)，7.57(d，J＝8.65Hz，2H)， 7.87(d，J＝15.25Hz，1H)，7.93(d，J＝8.40Hz，1H)，12.94(signal exchangeable D2O，1H)

MS(Maldi-Tof)：369.1(M+1)

实施例2：本发明化合物的抗氧化剂性能评价

1.保护免受铜的LDL氧化：

本发明的试验化合物，其制备已在上述实施例中进行了描述。

LDL氧化是一种重要的变化，在动脉粥样硬化的形成与发展中起 着主要的作用(Jurgens，Hoff等人，1987)。以下方法用来举例说明化 合物的抗氧化剂性能。除非另有陈述，试剂都来自Sigma(St Quentin， France)。

LDL根据Lebeau等人描述的方法制备(Lebeau，Furman等人， 2000)。

在碳酸氢盐缓冲液(pH值＝9)中制备浓度为10-2M的试验化合物溶 液，并在PBS中稀释，使对于1％(V/V)的乙醇总浓度来说，最后浓度 为0.1-100μM。

在氧化之前，先通过透渗析从LDL制剂中脱除EDTA。然后，通 过向160微升LDL(125微克蛋白质/毫升)和20微升的试验化合物溶液中 加入100微升16.6μM的CuSO4溶液而进行氧化。在形成二烯烃，即观 察到的物种之后，对于用化合物进行了处理但是其中存在或不存在铜 的样品的条件下，测定其在234nm处的光密度。测定在234nm处的光 密度时，使用自动调温的分光光度计(Tecan Ultra 380)，每10分钟测定 一次，测定8小时。一式三份进行分析。当与对照样品比较时，化合 物引起较长的停滞期、且氧化速率和形成的二烯烃量降低时，该化合 物被认为具有抗氧化剂活性。本发明人证明，本发明的化合物具有至 少一种以上所述的抗氧化剂性能，这表明本发明的化合物具有固有的 抗氧化剂活性。

图1-1、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-7、1-8、1-9、1-10、1-11、 1-12、1-13和1-14的典型结果举例说明了本发明化合物2、3、4、5、6、 7、8、9、10、14、17、18、19、21、22、25、29、31、33、35、37、 38和41的抗氧化剂性能。

2.由本发明的化合物带来的保护免受脂质过氧化作用的评价：

本发明的试验化合物，其制备已在上述实施例中进行了描述。

通过TBARS法测定LDL氧化。

根据先前所述相同的原理，用CuSO4氧化LDL，并如下所述测定 脂质过氧化作用：

通过分光光度法测定TBARS，使用将碘化物过氧化为碘的依赖于 脂质的过氧化作用测定脂质的过氧化氢化作用。结果可以表示为nmol 的丙二醛(MDA)或nmol过氧化氢化物/毫克蛋白质。

通过测定抑制共轭二烯的形成所得到的上述结果由测定LDL脂质 过氧化作用的实验来证实。本发明的化合物也能有效地保护LDL免受 由铜(氧化剂)引起的脂质过氧化作用。

实施例3：本发明化合物在细胞培养物上的抗氧化剂性能测定：

培养方法：

神经元，成神经细胞瘤(人)和PC12细胞(大鼠)是用于这类研究的 细胞系。PC12细胞是由嗜铬细胞瘤制备的，已经由Greene和Tischler进 行了表征(Greene和Tischler，1976)。这些细胞通常用于研究神经元的 分化，信号转导和神经元死亡。如先前所述(Farinelli，Park等人，1996)， 在完全的补充有10％马血清和5％胎牛血清的RPMI介质(Invitrogen)中 生长PC12细胞。

也使用内皮和平滑肌细胞的(初级)培养物。细胞由Promocell (Promocell GmBH，Heidelberg)获得，并根据供应商的说明书进行培养。

用从5-300μM的不同剂量的化合物对细胞进行处理24小时。然后 采集细胞，并通过定量PCR评价靶基因表达的增加。

mRNA的测定：

mRNA是从用或者不用本发明的化合物培养的细胞中提取的。根 据供应商的指导，用Absolutely RNART-PCR小量制备试剂盒 (Stratagene，France)的试剂进行提取。然后，通过光谱测定法对mRNA 进行试验，并通过定量的RT-PCR，用Light Cycler Fast Start DNA Master Sybr Green I试剂盒(Roche)在Light Cycler System(Roche，France)中进 行定量。把对于编码抗氧化酶过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶和 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)基因特定的引子对(Primer pairs)用作探针， 对于β-肌动蛋白和cyclophilin基因特定的引子对用作对照探针。结果表 明，当对细胞用本发明的化合物进行处理时，在所用的不同类型的细 胞中，通过定量RT-PCR所测定的抗氧化酶基因的mRNA表达增加。 氧化应力的控制：

在培养的细胞中测定氧化物种：

利用荧光跟踪氧化，随后出现荧光信号，借此来评价化合物的抗 氧化剂性能。在用化合物处理的细胞中，以如下方式测定放出的荧光 信号强度的降低：对于如先前所述培养的PC12细胞(黑色的96孔板， 底部透明，Falcon)，用增加剂量的H2O2(0.25mM-1mM)在无血清培养 液中培养2和24小时。培养后，除去介质，在37℃下，在5％CO2的气 氛中，用处于PBS中的10μM二氯二氢荧光素双醋酸盐溶液(DCFDA， Molecular Probes，Eugene，USA)孵化30分钟。然后用PBS冲洗所述细 胞。用荧光计(Tecan Ultra 384)测定在495nm激发波长和535nm发射波 长下的由氧化跟踪发出的荧光。结果可以表示为相对于氧化对照物的 保护百分比。

与未处理的细胞相比，用本发明的化合物孵化的细胞，荧光强度 降低。这些发现表明，本发明的化合物在受到氧化应力的细胞中，会 促进对产生氧化性物种的抑制程度。先前描述的抗氧化剂性能在诱发 培养细胞的抗自由基保护方面也很有效。

脂质过氧化作用的测定：

按如下方式测定化合物对于培养细胞中脂质过氧化作用的保护作 用(细胞模型参见上文所述)：如先前所述处理不同的细胞系和原代细 胞培养物，处理后，收集细胞上层清液，并将细胞溶解和回收，以用 于测定蛋白质浓度。脂质过氧化作用的测定如下：

通过使用硫代巴比土酸(TBA)测定脂质过氧化作用，其与醛如丙 二醛(MDA)发生脂质过氧化反应。处理后，收集细胞上层清液(900微 升)，加入90微升2，6-二叔丁基对甲酚(Morliere，Moysan等人，1991)。 将1毫升处于0.25M HCl中的0.375％的TBA溶液也加入到反应介质中， 其中所述HCl中含有15％的三氯乙酸。将混合物在80℃下加热15分钟， 用冰冷却，并用丁醇萃取有机相。在Shimazu 1501荧光光谱分析仪 (Shimadzu Corporation，Kyoto，Japan)上，对有机相通过分光荧光法 进行分析(λexc＝515nm，λem＝550nm)。TBARS可以表示为使用四乙氧基 丙烷作为标准的MDA当量。结果校正为蛋白质浓度。

在用本发明的化合物处理过的细胞中，观察到的脂质过氧化作用 的降低证实了上述结果。本发明的化合物有利地显示出固有的抗氧化 剂性能，使得氧化应力得以减慢和/或受到抑制。本发明人也用实验说 明，本发明的化合物能够诱发编码抗氧化酶的基因的表达。本发明化 合物的这些特定的特征使得细胞能更有效地对抗氧化应力，因此可防 止自由基诱发的损坏。

实施例4：体外评价本发明化合物的PPAR活化作用

投入试验的具有羧酸官能团的本发明的化合物，其制备已在上述 实施例中进行了描述。

被两种主要类型的药物，苯氧芳酸和格列酮(glitazones)活化的 PPAR子族的核受体广泛用于临床治疗血脂异常(dyslipidemias)和糖 尿病---它们在脂质和葡萄糖的体内平衡中起着重要的作用。以下试验 数据表明，本发明的化合物体外活化PPARα和PPARγ。

PPAR的活化试验是在体外、在RK13成纤维细胞系中进行的，测 定的是由酵母gal4转录因子的DNA结合功能区和不同PPAR的配体结合 功能区组成的嵌合体的转录活性。然后，根据以下方法在细胞系中证 实后面的这些结果：

以RK13细胞为例：

a.培养方法：

RK13细胞来自于ECACC(Porton Down，UK)，并在补充有10％(V/V) 胎牛血清，100U/ml青霉素(Gibco，Paisley，UK)和2mM L-谷氨酸盐 (Gibco，Paisley，UK)的DMEM介质中生长。培养介质每隔一天更换 一次。细胞保存在37℃下，保存在湿润的95％空气/5％CO2的气氛中。

b.用于转染的质体的描述

Raspe，Madsen等人对质体pG5TkpGL3、pRL-CMV、pGal4- hPPARα、pGal4-hPPARγ和pGal4-φ已经有过描述(1999)。pGal4-mPPARα 和pGal4-hPPARγ的构造是通过克隆到PCR-放大的DNA片段的pGal4-φ 矢量得到的，其中所述DNA片段相当于人体PPARα和PPARγ核受体的 DEF功能区。

c.转染

将RK13细胞种在24孔培养皿中，每孔5×104个细胞，并根据先前 描述的方法(Raspe，Madsen等人，1999)，用所述质体pG5TkpGL3(50ng/ 孔)、表达载体pGal4-φ、pGal4-mPPARα、pGal4-hPPARα、pGal4- hPPARγ(100ng/孔)以及转染率控制矢量pRL-CMV(1ng/孔)转染2小时， 然后用试验化合物孵化36小时。当实验结束时，将细胞溶解(Gibco， Paisley，UK)，用Dual-LuciferaseTM Reporter Assay System试剂盒 (Promega，Madison，WLUSA)，根据供应商的说明书，如先前描述的 那样测定荧光素酶活性。然后用Bio-Rad Protein Assay(Bio-Rad， Munich，Germany)，根据供应商的指导，测定细胞提取物的蛋白质含 量。

本发明人用实验说明，用本发明的化合物处理并用pGal4-hPPARα 质体转染的细胞中，荧光素酶活性增加。所述荧光素酶活性的诱发表 明了本发明的化合物是PPARα活化剂。

图2-1、2-2、2-3、2-4、2-5、2-6给出的结果举例说明了本发明化 合物3、4、7、8、9、11、12、13、14、17、19、20、21、22、23、24、 25、26、29、31、33、37、38、41的PPARα活化剂性能。

本发明人用实验说明，用本发明的化合物处理并用pGal4-hPPARγ 质体转染的细胞中，荧光素酶活性增加。所述荧光素酶活性的诱发表 明，本发明的化合物是PPARγ活化剂。

图2-7给出的结果表明了本发明化合物17、33和29的PPARγ活化剂 性能。

实施例5：本发明化合物的消炎性能评价

在许多神经系统紊乱，包括多发性硬化，阿尔茨海默氏病和帕金 森氏症，脑缺血和头外伤中观察炎症性反应，发炎也是神经变性的一 个重要因素。在中风中，胶质细胞第一反应中的一种反应是释放细胞 活素和自由基。细胞活素和自由基的这种释放导致脑发生炎症性反 应，这可能会导致神经元死亡(Rothwell，1997)。

如本发明以上所述，培养细胞系和初级细胞。

在蒸馏水中重新组成LPS细菌内毒素(大肠杆菌0111:B4)(Sigma， France)并在40℃下储存。将细胞用1微克/毫升LPS处理24小时。为了 避免其他因子的干扰，完全改变培养介质。

TNF-α是对应力(例如氧化应力)产生炎症性反应的一个重要因 素。为了评价由于LPS剂量的增加而受刺激产生的TNF-α分泌，除去 受激化细胞的培养介质并用EUSA-TNF-α试剂盒(lmmunotech，France) 测定TNF-α。将样品稀释50倍，以便使其处于标准曲线范围之内(Chang， Hudson等人，2000)。

按照如下所述表征本发明化合物的消炎性能：完全改变细胞培养 介质，并用试验化合物将细胞孵化2小时，之后，将LPS加入到培养介 质中，使最终浓度为1微克/毫升。培养24小时后，采出细胞上层清液， 并且当不立即处理时，将其储存在-80℃。将细胞溶解，并根据供应商 的指导，用Bio-Rad Protein Assay试剂盒(Bio-Rad，Munich，Germany) 定量测定蛋白质。

测定通过用试验化合物进行处理而诱发的TNF-α分泌作用的降 低，可以将其表示为pg/ml/微克蛋白质，以及作为相对于对照物的百 分比。这些结果表明，本发明的化合物具有消炎性能。

实施例6：在脑缺血-多次灌注模型中评价本发明化合物的神经保护作 用

预防模型：

1.动物的处理

1.1动物和所述化合物的给药

C57黑色/6小鼠(野生型)用于这一实验。

将动物保持在12小时光照/黑暗循环下，温度为20C±3℃。水和 食物可随意用。记录食物的摄入和重量的增加。

将本发明的化合物(200毫克/公斤/天)或者载体(0.5％的羧基纤维素 (CMC))通过强饲法给予所述动物，给药14天，之后在大脑中动脉中诱 发局部缺血。

1.2通过大脑中动脉的管腔内堵塞而进行诱发局部缺血/多次灌注

通过腹腔内注射300毫克/公斤水合氯醛而使动物麻醉。插入直肠 探针，将体温维持在37±0.5℃。实验全程监测血压。

在外科显微镜下，通过颈部正中切口暴露右边颈动脉。从根部绑 扎翼突腭动脉，并在颈外动脉中进行动脉切开术，以便插入锦纶单丝， 它轻轻地前进到颈总动脉处，然后进入到颈内动脉中，以便堵塞大脑 中动脉的根部。1小时后，将细丝取出以允许多次灌注。

2.测定脑部梗塞体积：

在多次灌注后24小时，将预先用或没用化合物处理的动物用过度 剂量的戊巴比妥对其施无痛致死术。

将脑快速冷冻并切开。切面用甲酚紫着色。脑切面中未染色的区 域被认为已被梗塞损伤。测定面积，并通过以下公式计算梗塞体积和 两个半球：(校准的梗塞体积＝梗塞体积-(右半球体积-左半球体积))以 抵偿脑水肿。

经过处理的动物的脑切面分析表明，其与未处理的动物相比，梗 塞体积有明显的下降。当在局部缺血之前对动物给以本发明的化合物 (预防作用)时，它们能够诱发神经保护。

图3-1给出了一例结果，其表明了本发明化合物15和42的预防神 经保护性能。

3.抗氧化酶活性的测定：

将小鼠脑冷冻、粉碎并化为粉末，然后再悬浮在生理盐水中。此 时按以下作者描述的那样，测定不同酶的活性：过氧化物歧化酶(Flohe 和Otting，1984)；谷胱甘肽过氧化物酶(Paglia和Valentine，1967)；谷 胱甘肽还原酶(Spooner，Delides等人，1981)；谷胱甘肽-S-转移酶(Habig 和Jakoby，1981)；过氧化氢酶(Aebi，1984)。

在用本发明化合物处理的动物的脑标本中，所述不同的酶的活性 增加。

治疗期或者急性期治疗模型

1.通过大脑中动脉的管腔内堵塞而进行诱发局部缺血/多次灌注

诸如先前描述的动物用于这一实验。

通过腹腔内注射300毫克/公斤水合氯醛而使动物麻醉。插入直肠 探针，将体温维持在37±0.5℃。实验全程监测血压。

在外科显微镜下，通过颈部正中切口暴露右边颈动脉。从根部绑 扎翼突腭动脉，并在颈外动脉中进行动脉切开术，以便插入锦纶单丝， 它轻轻地前进到颈总动脉处，然后进入到颈内动脉中，以便堵塞大脑 中动脉的根部。1小时后，将细丝取出以允许多次灌注。

2.动物的处理：

对最先进行局部缺血-多次灌注的动物，在多次灌注一次或多次 后，通过口服或者全身性途径用本发明的化合物进行处理。

3.测定脑部梗塞体积：

在多次灌注后72小时，将预先用或没用化合物处理的动物用过度 剂量的戊巴比妥对其施无痛致死术。

将脑快速冷冻并切开。切面用甲酚紫着色。脑切面中未染色的区 域被认为是已被梗塞损伤。测定面积，并通过以下公式计算梗塞体积 和两个半球：(校准的梗塞体积＝梗塞体积-(右半球体积-左半球体积)) 以抵偿脑水肿。

在治疗性处理(急性期处理)的情况下，用本发明的化合物进行了 处理的动物比未经处理的动物具有较少的脑损害。事实上，当在局部 缺血-多次灌注一次或多次后给以本发明的化合物时，梗塞体积较小。

图3-2给出了一例结果，其表明了本发明化合物15和42的急性神 经保护性能。

在不同试验性模型中使用本发明的化合物表明，所述新型化合物 具有固有的抗氧化剂活性，能够延迟和减少氧化应力的作用，此外还 能诱发编码抗氧化酶的基因的表达，这与它们的抗氧化剂性能一起， 增强其保护作用，免受细胞培养物中自由基的侵害。另外，本发明的 化合物还显示消炎活性，并能够活化PPARα核受体。

最后，含有酯官能团或羧酸官能团的本发明的化合物在动物局部 缺血-多次灌注模型中的应用表明，其具有有效的神经保护作用，既有 预防性治疗作用，又有治疗性治疗作用。

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