一株可降组胺的耐盐耐糖菌株及其应用

申请号 CN202311766014.X 申请日 2023-12-14 公开(公告)号 CN117660264A 公开(公告)日 2024-03-08
申请人 四川轻化工大学; 舍得酒业股份有限公司; 发明人 童文华; 徐浩然; 杨莹; 李东旭; 邹永芳; 黄丹; 罗惠波;
摘要 本 发明 公开了从白酒大曲中分离得到的一种可降组胺的耐盐耐糖菌株Lactobacillus plantarum SQ1,保藏在中国普通 微 生物 菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC NO.28432。研究结果表明该菌株的最适生长 温度 为37℃,可在pH 3‑9的环境生存,在 葡萄糖 浓度4%‑12%生长良好,NaCl浓度1%~7%下正常生长, 发酵 可产 风 味物质40种,其代谢产物对某些致病菌具有抑制作用。将该菌接种至酸奶中进行共发酵后,酸奶中组胺有明显降低,其降解率为(41.74±1.86)%。该研究中的 植物 乳杆菌SQ1可应用于酸奶或其它耐糖耐盐食品发酵过程中,用以降低食品中组胺的含量,提升食品健康 水 平。
权利要求

1.一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,该菌株保藏在中国普通生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC NO.28432,保藏日期为2023年9月12日。
2.根据权利要求1所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1温度耐受范围为21‑41℃,且在25‑41℃生长良好,其最适生长温度为37℃。
4.根据权利要求1所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1的pH耐受性为pH 3~9,在pH 4~8生长良好,在pH 6时菌株生长繁殖最快。
5.根据权利要求1所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1在NaCl浓度1%~7%范围内可以正常生长,在NaCl浓度1%~5%生长良好。
6.根据权利要求1所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1在葡萄糖浓度4%~12%可以良好生长。
7.一种如权利要求1‑6中任意一项所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1的筛选方法,其特征是,包括以下步骤:
一)采样:从成品大曲的各个及中心部位各取10g样品,磨碎混合均匀,得大曲样品;
二)富集:称取5g步骤1)得到的大曲样品,装入250mL三角瓶中,加入50mL无菌生理盐,摇匀,在37℃、180r/min条件下摇床培养24h,制成菌悬液;
三)筛选:用无菌生理盐水对步骤2)制成的菌悬液进行系列梯度稀释,分别取1mL倍数‑3 ‑4 ‑5 ‑6
为10 、10 、10 、10 的菌悬液,在筛选培养基上进行涂布,每个梯度做三个平行,将涂布好的培养皿在35℃培养箱中,倒置培养72h;
四)纯化:观察筛选培养基上的菌落及溶圈大小,挑取溶钙圈较大的菌落在MRS固体培养基上划线,在35℃培养箱中培养24h,重复三次,得到目的菌株的单菌落;将获得的单菌落接种于MRS斜面培养基中,编号,保存备用;
其中,筛选培养基为:胰蛋白胨1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,肉膏1%,磷酸氢二0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,琼脂粉
2%,酸钙2%,溴甲酚紫0.04%,pH 6.5,115℃,20min;
MRS固体培养基为:胰蛋白胨1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾
0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,琼脂粉2%,pH 6.5;
MRS液体培养基为:胰蛋白胨1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾
0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,pH 6.5,115℃,20min。
8.一种如权利要求1所述的植物乳杆菌SQ1在酸奶中降低组胺含量的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1接种于酸奶中,发酵72h测定其中组胺含量,与接种前对照组酸奶中组胺含量相比最高降解率可达(41.74±
1.86)%。
10.根据权利要求1所述的一株可降组胺的植物乳杆菌SQ1,其特征是,所述植物乳杆菌SQ1发酵液中,可产生醇类,类,酸类,酯类,吡嗪类,吡咯类等40种功能性味物质。

说明书全文

一株可降组胺的耐盐耐糖菌株及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及生物技术领域,涉及一株可降组胺的菌株,具体是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)SQ1。

背景技术

[0002] 酸奶经过乳酸菌发酵制成,成品中含有大量相应的活性微生物,其中的基酸和肽更容易被人体消化吸收。市场上酸奶制品多以凝固型、搅拌型和添加各种果汁果酱等辅料的果味型为多。其不但保留了奶的所有优点,而且某些方面经加工过程还扬长避短,成为更加适合于人类食用的营养保健品
[0003] 生物胺是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称。生物胺按照组成成分可以分成两类:单胺和多胺。在日常生活中常见的有组胺、酪胺、腐胺、亚精胺、色胺、苯乙胺、尸胺、精胺等八种。组胺归属于生物胺中的第三类杂环族胺,是食品中游离组氨酸经组氨酸脱羧酶分解产生的一种胺类物质,也是一些出口产食品中一项重要的质量检测指标。其分子式为C5H9N3。组胺也是自体活性物质之一,在体内由组氨酸脱羧基而成,组织中的组胺是以无活性的结合型存在于肥大细胞和嗜性粒细胞的颗粒中,皮肤、支气管粘膜、肠粘膜和神经系统中含量较多。当机体受到理化刺激或发生过敏反应时,可引起这些细胞脱颗粒,导致组胺释放,与组胺受体结合而产生生物效应。
[0004] 目前,在食品的生产过程中控制组胺的方法主要是添加香辛料,食品添加剂,或者对原辅料进行气调保鲜,低温贮藏,超高压处理等化学,物理方法。这些方法都会对食品品质产生一定的影响,利用发酵剂降低组胺具有源头上的抑制作用,高效安全。已有的对比文件(CN113373097A)公开了一种降低生物胺的植物乳杆菌及其在香肠生产中的应用,其中对于组胺的降解率达到了41.95%;对比文件(CN111363699A)也公开了一种降低生物胺的植物乳杆菌及其在果酒中的应用。已有研究表明植物乳杆菌由于其无害的性质和对发酵产品特性的改善而被广泛应用于食品发酵,植物乳杆菌通过其代谢产物拮抗食源性致病菌(细菌、真菌)。植物乳杆菌还可改善食品味,保存和/或增强产品的营养成分。而已知植物乳杆菌应用于酸奶或除香肠和果酒以外其它耐糖或耐盐食品中降低组胺的相关报道较少。

发明内容

[0005] 针对现有技术的不足,本发明的目的是提供一种降低组胺的植物乳杆菌菌株。植物乳杆菌SQ1较好的耐酸,耐盐,抑菌等特性,可用于酸奶的发酵过程中,降低酸奶中组胺的含量,改善酸奶的风味,有益于人体健康。
[0006] 本发明的技术目的通过以下技术方案实现:
[0007] 第一方面,提供了一种降低组胺的植物乳杆菌菌株,具体是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)SQ1;
[0008] 所述植物乳杆菌SQ1保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC NO.28432,保藏日期为2023年9月12日。
[0009] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0010] SEQ ID NO:1植物乳杆菌SQ1的16S rDNA的核苷酸序列为
[0011]
[0012]
[0013] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1在NaCl浓度1%~7%可以正常生长,在NaCl浓度1%~5%良好。
[0014] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1的pH耐受性为pH 3~9,在pH 4~8生长良好,在pH 6时菌株生长繁殖最快。
[0015] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1在葡萄糖浓度4%‑12%可以生长良好。
[0016] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1温度耐受范围为21‑41℃,且在25‑41℃生长良好,其最适生长温度为37℃。
[0017] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1对于溶血葡萄球菌,假单胞菌,大肠杆菌有抑制作用,对酵母菌没有抑制作用。
[0018] 第二方面,提供了如第一方面所述的植物乳杆菌SQ1在发酵酸奶中降低组胺的应用。
[0019] 进一步的,所述植物乳杆菌SQ1为实验菌株,选取市场中常见的四种品牌酸奶,命名为A/B/C/D,测定其中组胺含量,选取测得组胺含量最高的酸奶产品,并取250mL的锥形瓶若干,分别装入100mL的酸奶,做三个平行,分别标号1、2、3。然后在锥形瓶中接种筛选出的植物乳杆菌。原始酸奶中组胺含量作为空白对照,即不接菌,其余条件一致,37℃震荡培养72h后取出测定组胺含量。
[0020] 更进一步的,将所述植物乳杆菌SQ1种子液,接种于酸奶中,发酵72h测定其中组胺含量,与原始酸奶组胺含量对比所述植物乳杆菌SQ1酸奶中最高降解率可达(41.74±1.86)%。
[0021] 第三方面,所述植物乳杆菌SQ1的筛选过程包括下述内容:
[0022] 采样:从某酒厂对大曲取样,并将大曲混匀,得大曲样品;富集:称取5g步骤一)得到的大曲样品,装入250mL三瓶中,加入50mL无菌生理盐水,摇匀,在37℃、180r/min条件下摇床培养24h,制成菌悬液;筛选:用无菌生理盐水对步骤2)制成的菌悬液进行系列梯度‑3 ‑4 ‑5 ‑6稀释,分别取100μL稀释倍数为10 、10 、10 、10 的菌悬液,在筛选培养基上进行涂布,每个梯度做三个平行,将涂布好的培养皿在35℃培养箱中,倒置培养72h;纯化:观察筛选培养基上的菌落及溶圈大小,挑取溶钙圈较明显的菌落在MRS培养基上划线,在35℃培养箱中培养24h,重复三次,得到目的菌株的单菌落;将获得的单菌落接种于MRS斜面培养基中,编号,保存备用;
[0023] 其中,筛选培养基为:胰蛋白胨1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,琼脂粉2%,酸钙2%,溴甲酚紫0.04%,pH 6.5,115℃,20min
[0024] MRS固体培养基为:胰蛋白胨1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,琼脂粉2%,pH6.5;
[0025] MRS液体培养基为:胰蛋白胨1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,pH 6.5,115℃,20min;
[0026] 第四方面,将植物乳杆菌SQ1接种于MRS液体培养基中发酵后,通过GC‑MS检测,在发酵液中检测到醇类,类,酸类,酯类,吡嗪类,吡咯类等挥发性风味物质。植物乳杆菌SQ1能够代谢这些功能性风味物质,将其应用于发酵食品生产中,将会对产品品质本身及人体健康均产生有益影响。
[0027] 本发明中涉及的植物乳杆菌SQ1,其分类命名为:植物乳杆菌Lactobacillus plantarum,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏编号CGMCC NO.28432,保藏日期为2023年9月12日。
[0028] 与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
[0029] 1)本发明从白酒大曲中筛选出一种植物乳杆菌SQ1,该菌株经生长环境适应性进化,有利于后期利用基因工程、代谢工程、合成生物学等分子生物学手段对其进行改造以提高其降低组胺的能,进一步降低酸奶中组胺的含量;
[0030] 2)本发明植物乳杆菌SQ1在pH 3‑9范围内可以正常生长,且具有一定的耐盐,耐糖和抑致病菌性;
[0031] 3)本发明植物乳杆菌SQ1可应用于酸奶发酵过程中,将其应用在酸奶生产过程中可以降低酸奶中组胺的含量;
[0032] 4)本发明植物乳杆菌SQ1发酵产生多种风味物质,有利于酸奶风味的多样性的提升;
[0033] 5)通过对植物乳杆菌SQ1在酸奶中发酵,前后对比得到该植物乳杆菌SQ1在酸奶中对于组胺的降解率在(41.74±1.86)%。附图说明
[0034] 为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0035] 图1是本发明实施例中植物乳杆菌SQ1的生物学鉴定图(a:形态学特征实物图b:革兰氏染色c:电镜扫描图);
[0036] 图2是本发明实施例中植物乳杆菌SQ1的基因测序鉴定图(a:16S rDNA电泳图b:系统发育树图);
[0037] 图3是本发明实施例中组胺标准曲线图;
[0038] 图4是本发明实施例中组胺标准品液相色谱图;
[0039] 图5是本发明实施例中植物乳杆菌SQ1生长曲线;
[0040] 图6是本发明实施例中植物乳杆菌的生长特性检测图(a:盐耐受性b:pH耐受性c:糖耐受性d:温度耐受性);
[0041] 图7是本发明实施例中植物乳杆菌SQ1风味物质检验结果图;
[0042] 图8是本发明实施例中植物乳杆菌SQ1的抑菌性效果图(a:溶血葡萄球菌抑制效果图b:假单胞菌抑制效果图c:大肠杆菌抑制效果图d:酵母菌抑制效果图)。

具体实施方式

[0043] 为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合附图1‑8及实施例1‑2,对本发明进行进一步详细说明。
[0044] 实施例1:菌株SQ1的筛选与分离
[0045] 一)采样、富集及筛选
[0046] 将称取5g的大曲样品,装入锥形瓶,加入50mL无菌水,混匀,在180r/min 35℃条件‑3 ‑6下培养24h制成菌悬液,吸取1mL菌悬液以10倍法稀释至适当梯度(10 ~10 )。吸取100μL新鲜菌悬液滴到筛选培养基中涂布,置于35℃的恒温培养箱中倒置培养72h。
[0047] 二)分离纯化
[0048] 观察筛选培养基菌落形态,挑取溶钙圈明显,表面光滑、中间隆起,白色或者乳白色的菌落初步判定这些菌落为乳酸菌。将上述挑选及鉴定之后的菌株采用平板划线的方法,多次进行划线培养,直到得到单个菌落为止,得到纯的乳酸菌后。再将将单菌落转接于MRS斜面培养基,编号、保存备用。
[0049] 筛选培养基:胰蛋白胨1%,酵母浸粉1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰0.005%,琼脂粉2%,碳酸钙2%,溴甲酚紫0.04%,pH 6.5,115℃,20min。
[0050] MRS液体培养基:胰蛋白胨1%,酵母浸粉1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰
0.005%,pH6.5,115℃,20min。
[0051] MRS固体培养基:胰蛋白胨1%,酵母浸粉1%,葡萄糖2%,吐温‑80 0.1%,牛肉膏1%,磷酸氢二钾0.2%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸氢二铵0.2%,硫酸镁0.02%,硫酸锰
0.005%,琼脂粉2%,pH6.5。
[0052] 实施例2:SQ1相关16S rDNA鉴定与生物学特性研究
[0053] 一)鉴定
[0054] 经过形态学特征观察初步判断为革兰氏阳性菌
[0055] 将待测菌株接种于10mL MRS液体培养基中,37℃、180r/min条件下振荡培养24h后,取1mL菌液,离心收集菌体。采用脱核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)提取试剂盒提取基因组,用1%琼脂糖凝胶电泳检测提取基因组的质量。将完整且纯度高的基因组DNA适当稀释作为DNA模板,采用16S rDNA通用引物1492R:GGTTACCTTGTTACGACTT(SEQ ID NO:2)和16S‑27F:AGAGTTTGATCCTGGCTCAG(SEQ ID NO:3)进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增,扩增体系(共50μL):Prime STAR 25μL,DNA引物F(5.37nmol/OD)1μL,引物R(5.7nmol/OD)1μL,加入ddH2O 23μL。扩增程序:98℃ 10min,98℃ 30s,55℃ 30s,72℃ 150s共24个循环;72℃ 5min终止反应。将PCR扩增产物送至擎科生物公司进行测序。
[0056] 再由16S rDNA分子生物学鉴定测序结果与NCBI数据库进行序列对比,与实验菌株亲缘关系最近的Lactobacillus plantarum strain KLDS 1.0728相似度为99.0%,并利用MEGA7.0.26软件构建系统发育树,确定该菌株为植物乳杆菌并命名为Lactobacillus plantarum SQ1,见图1和图2。
[0057] 二)组胺标准曲线绘制
[0058] 准确称取组胺标准品10mg,用0.1mol/L的HCL定容至100mL,分别制备成1.0、5.0、10.0、20.0、40.0mg/L系列浓度的生物胺标准溶液,利用高效液相色谱仪测定峰面积。以标准溶液浓度(g/L)为横坐标,以峰面积为纵坐标绘制标准曲线,并作线性回归方程。如图3所
2
示,其回归方程Y=25.953X+9.5093,相关系数R=0.9997,这表明两者线性关系极好。
[0059] 三)组胺含量的测定
[0060] 将筛选得到的植物乳杆菌活化3代,按2%接种量接种至pH 5.5,含组胺的30mLMRS培养基中,35℃培养48h,以未接种的MRS培养基为对照,4000r/min离心10min,测定上清液中生物胺含量,并按式(1)计算组胺降解率。
[0061] A=(ω‑ω1/ω)×100%        (1)
[0062] 式中:
[0063] A———组胺降解率,%;
[0064] ω———对照组组胺含量,mg/kg;
[0065] ω1———处理组组胺含量,mg/kg。
[0066] 将上述处理后的样液进行检测,将获得的待测样品谱图与组胺标准品谱图对比,保留时间相同的即为组胺,并通过标准曲线线性回归方程获得对应组胺的含量,以标准溶液浓度(mg/L)为横坐标,以峰面积为纵坐标绘制标准曲线,并作线性回归方程。见图4。
[0067] (1)组胺标准品的制备:准确称取组胺标准品10mg,用0.1mol/L 的HCL定容至100mL,分别制备成1.0、5.0、10.0、20.0、40.0mg/L系列浓度的生物胺标准溶液。
[0068] (2)样品衍生化:取上述中离心后的菌液750μL于2mL EP管中,加入150μL饱和碳酸钠溶液和750μL丹磺酰氯,震荡混匀,45℃水浴30min,加入150μL氨水,混匀,再加入200μL乙腈,混匀,离心,过0.22μm滤膜,待测。
[0069] (3)高效液相色谱(HPLC)分析:HPLC洗脱梯度如表1所示。流动相A为水,B为乙腈;色谱柱为华普C18柱(250mm×4.6mm×5.0μm);流速1.0mL/min;柱温40℃;进样体积20μL;紫外检测波长235nm。
[0070] 表1 HPLC洗脱梯度
[0071]
[0072] 四)植物乳杆菌SQ1的生长特性检测
[0073] 由图5可以得出,该菌的对数生长期较长,在0h‑4h时,该菌生长缓慢,处于延滞期。在4h‑22h时,菌体生长迅速,此时该菌处于对数生长期,在22h时该菌株的OD600nm达到最大值。22h以后,菌株生长速率平缓,进入稳定期。
[0074] 由图6a可以得出,NaCl含量为1%‑7%时,菌体可正常生长,在NaCl浓度1%~5%良好,但NaCl含量越高,菌体生长情况越差,耐受最高的NaCl含量为7%,而在NaCl含量为9%‑13%时,该菌生长受到强烈抑制。该菌可应用于含盐量较高的发酵食品中,如:发酵香肠、泡菜以及海鱼类食品等。
[0075] 由图6b可以得出,在pH 1‑6时,随着pH升高,OD600nm上升,该菌生长情况越好;在pH 6‑9时,随着pH升高生长状况逐步下降。由此可知,该菌在pH 3‑9时均可生长,在pH 4‑8生长状况良好;其最适生长pH为6;其耐最低pH为3,其生长的pH较低,可应用于酒类,酸奶和醋等发酵饮料中。
[0076] 由图6c可以得出,在葡萄糖含量为4%‑14%时,随着葡萄糖含量的增加,菌体生长情况越差。在葡萄糖含量为8%时,OD600nm大幅下降,高糖含量造成的高渗透压环境抑制了该植物乳杆菌生长。在葡萄糖含量为14%时,此时菌体生长受到强烈抑制,基本不生长。由此可知,在葡萄糖含量为4%‑12%的范围内,该植物乳杆菌可以正常生长,其最高耐葡萄糖含量为12%,可应用于奶酪,酸奶等甜度较高的食品中。
[0077] 由图6d可以得出,在21℃‑37℃范围内,随温度增加,该植物乳杆菌的生长情况越好,在37℃时OD600nm达到最大。在41℃时,OD600nm略有下降,相对于37℃来说,41℃时菌体生长受到了一定程度的抑制。由此可以得出,在21℃‑41℃范围内,该植物乳杆菌可以正常生长,在25‑41℃生长良好,其最适生长温度为37℃。
[0078] 五)植物乳杆菌SQ1的挥发性风味物质检测
[0079] 将植物乳杆菌SQ1接种于MRS液体培养基中,37℃,180rpm/min培养24h制作成种子液,后以10%的接种量将其接种到MRS液体培养基中以37℃,180rpm/min培养24h发酵;通过GC‑MS检测,在植物乳杆菌SQ1的发酵液中检测到40种挥发性风味物质,见表2,其中含有醇,醛,酸,酯,吡嗪,吡咯等物质。吡嗪类化合物可做食用香料。三甲基吡嗪是近年来发展起来的一种高档香料,是重要的香精和烟用香精原料。其中吡咯和苯乙醛等都是可用于合成有机物和香料等的原料。SQ1能够代谢产生这些功能性风味物质,将其应用于发酵食品生产中,将会对产品品质及人体健康均产生有益影响。见图7。
[0080] 表2 40种挥发性风味物质名称及相对含量
[0081]
[0082] 六)植物乳杆菌SQ1的抑菌性试验
[0083] 采用牛津杯法,以实验室保存的溶血葡萄球菌、大肠杆菌、假单胞菌、酵母菌为指示菌来研究该植物乳杆菌的抑菌作用。抑菌研究结果显示,溶血葡萄球菌、假单胞菌、大肠杆菌的透明圈较明显,说明该植物乳杆菌的发酵代谢产物对溶血葡萄球菌、假单胞菌、大肠杆菌均具有较好的抑制作用,而酵母菌中几乎没有透明圈,说明该植物乳杆菌对酵母菌基本没有抑制作用。见图8。
[0084] 七)接种植物乳杆菌对酸奶中组胺含量的影响
[0085] 根据筛选测定的结果,将植物乳杆菌SQ1作为本实验后续的实验菌株,将培养了24h的植物乳杆菌作为种子液,接种至组胺含量最高的酸奶D中,发酵72h后取出,并测定其中组胺含量。结果根据公式(1)计算得知,植物乳杆菌对于酸奶中的组胺的有降解作用,对比加入菌株和未加入菌株的发酵液的组胺降解率可得出植物乳杆菌对酸奶中降解率可达(41.74±1.86)%。根据加入菌株和未加入菌株的组胺含量测定,显示植物乳杆菌对组胺的降解有明显的作用。
[0086] 以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
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