序号 专利名 申请号 申请日 公开(公告)号 公开(公告)日 发明人
1 一种级联酶催化反应体系及其制备方法与应用 CN202510109620.7 2025-01-23 CN120041435A 2025-05-27 方晓红; 刘学娇; 刘巧玲
发明涉及生物催化技术领域,具体涉及一种级联酶催化反应体系及其制备方法与应用,该级联酶催化反应体系包括流动界面,以及修饰于所述流动界面表面的级联酶;所述级联酶包括上游酶和下游酶,所述上游酶的反应产物可作为下游酶的反应底物。通过加入上游酶的反应底物,发生级联催化反应,可使得所述级联酶产生自发相互作用,从而在流动界面表面形成簇状分布,由此可显著提高系统的整体催化效率。
2 一种固定化酶转化枣中蔗糖为葡聚糖的方法及富含葡聚糖的枣汁和应用 CN202510120744.5 2025-01-24 CN119955755A 2025-05-09 桑亚新; 彭凯歌; 赵芳坤; 蒲元浩; 孟庆泳
发明提供了一种固定化酶转化枣中蔗糖为葡聚糖的方法及富含葡聚糖的枣汁和应用,具体属于果汁制备技术领域。本发明固定化酶转化枣中蔗糖为葡聚糖的方法包括以下步骤:将固定化葡聚糖蔗糖酶与枣汁混合,进行糖转化,离心弃沉淀,得到富含葡聚糖的枣汁;编码所述葡聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述方法能够高效的将蔗糖转化为葡聚糖,在降低容易利用糖的同时产生葡聚糖。
3 一种酶法生产没食子酸及其制备工艺 CN202510034090.4 2025-01-09 CN119639832A 2025-03-18 梁绮雯; 王雅洁; 范岩
发明涉及没食子酸技术领域,具体公开一种酶法生产没食子酸及其制备工艺。所述酶法生产没食子酸的制备工艺包括:制备改性魔芋葡甘聚糖;将单宁溶解于中,加入改性魔芋葡甘聚糖,恒温水浴搅拌,得到预处理单宁溶液;制备改性嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢;将改性嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢、预处理单宁溶液混合,搅拌,调节体系pH值,恒温水浴搅拌,离心,收集上清液,干燥,得到没食子酸。本发明制备的没食子酸产品收率高,纯度高且稳定,制备成本低,适于大规模推广生产。
4 双固定化重组酵母工程菌的构建方法、工程菌、催化剂及在合成莱苞迪糖苷中的应用 CN202411563759.0 2024-11-05 CN119391746A 2025-02-07 李益民; 袁文杰
发明公开了一种双固定化重组酵母工程菌的构建方法、工程菌、催化剂及在合成莱苞迪糖苷中的应用,涉及双固定化重组酵母菌株制备及莱苞迪糖苷合成技术领域。该发明以酵母为底盘细胞,构建有序自组装的多酶级联体表面展示系统,偶联无载体固定化和UDPG原位再生技术,得到了酶与菌体双固定化的新型酵母全细胞催化剂。该催化剂使用廉价的甜菊糖苷(St)、莱苞迪苷A(Reb A)为底物,无需额外添加昂贵的UDPG,即可高效经济一锅法合成莱苞迪糖苷(Reb D/M)。合成过程无需细胞破碎、酶分离纯化和固定化等繁琐操作,避免了物质跨膜运输阻、传质阻力以及胞内酶对产物解等现有技术中的瓶颈难题。该催化剂具备重复利用性,通过菌株复壮可实现连续、高强度的莱苞迪糖苷生物合成,为其工业化应用提供了强有力的技术支撑
5 一种具有合成果聚糖能的非基因修饰益生菌及其构建方法和应用 CN202411409305.8 2024-10-10 CN119286844A 2025-01-10 桑亚新; 彭凯歌; 赵芳坤; 高洁; 张雪娇
发明提供了一种具有合成果聚糖能的非基因修饰益生菌及其构建方法和应用,具体属于生物技术领域。本发明具有合成果聚糖能力的非基因修饰益生菌表面结合有含乳酸乳球菌肽聚糖解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶;所述益生菌包括乳酸菌。本发明获得的非基因修饰益生菌具有合成果聚糖的能力,并且合成的果聚糖纯度较高。本发明利用非基因修饰的方式赋予乳酸菌新的功能,避免了因为转基因引起的争议。
6 一种富含果聚糖的枣汁的制备方法及富含果聚糖的枣汁和应用 CN202411409595.6 2024-10-10 CN119257198A 2025-01-07 桑亚新; 赵芳坤; 彭凯歌; 孟庆泳; 蒲元浩
发明提供了一种富含果聚糖的枣汁的制备方法及富含果聚糖的枣汁和应用,具体属于果汁制备技术领域。本发明所述富含果聚糖的枣汁的制备方法包括以下步骤:将固定化果聚糖蔗糖酶与枣汁混合,进行糖转化,离心弃沉淀,得到富含果聚糖的枣汁;编码所述果聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述制备方法能够高效的将枣汁中蔗糖转化为果聚糖,在降低容易利用糖(蔗糖)含量的同时转化为果聚糖。
7 一株重组枯草芽孢杆菌、发酵液的制备方法、固定化细胞及制备方法和合成D-塔格糖的方法与应用 CN202411783519.1 2024-12-06 CN119242551A 2025-01-03 李方华; 杜倩; 黄欣; 聂志瑄; 董晶宁; 刘杰; 马静; 朱兴浩
发明属于生物技术领域,具体涉及一株重组枯草芽孢杆菌、发酵液的制备方法、固定化细胞及制备方法和合成D‑塔格糖的方法与应用。本发明提供了一株重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLCY‑012,保藏编号为CGMCC No.31950。本发明的重组枯草芽孢杆菌BLCY‑012能够发酵产生D‑塔格糖‑4‑差向异构酶,D‑塔格糖‑4‑差向异构酶为胞内酶,D‑塔格糖‑4‑差向异构酶能够以D‑果糖作为原料制备D‑塔格糖,利用重组枯草芽孢杆菌BLCY‑012制备固定化细胞,以固定化细胞作为酶载体,转化D‑果糖为D‑塔格糖,转化率可达到28%~32%,转化率高。
8 一种二肽合成酶突变体、其重组体及在高浓度底物连续循环催化中的应用 CN202211481398.6 2022-11-24 CN116179499B 2024-10-22 范超; 齐佳琨; 洪皓; 刘军; 刘明; 吴文忠
发明公开了一种二肽合成酶突变体、其重组体及在高浓度底物连续循环催化中的应用,通过二肽合成酶突变基因与辅助侵染蛋白残基突变体的基因的融合表达,构建出外泌的固定化酶,所述辅助侵染蛋白残基突变体,其基酸序列如SEQ ID NO.4所示;所述二肽合成酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;该酶可在中性pH和室温下与其生产细胞结合,完成一步纯化‑固定化过程,形成稳定性提高的酶以及连续催化生产,为酶法工业化生产提供有效途径。该突变体耐受的pH域广,与活性酶进行融合表达,融合表达后的酶同时具有催化活性域与固定化能,具有广泛的工业化应用场景。
9 一种基于花粉壁微凝胶的复合微球固定化PGase酶的制备方法 CN202411086677.1 2024-08-08 CN118792295A 2024-10-18 邓乾春; 邓紫玙; 陈尚文; 彭登峰; 唐小倩; 黄亚文
发明公开了一种复合微球固定化蛋白质酰胺酶的制备方法,它包括以下步骤:首先,将向日葵花粉洗干净后进行脱脂解,使花粉水合并溶胀形成多孔结构的花粉壁微凝胶;然后,将花粉壁微凝胶与海藻酸钠溶液混合,以CaCl2为交联剂制备复合空白微球;最后,用EDC/NHS对复合空白微球进行活化并加入到PGase溶液中,恒温摇床震荡并进行抽真空处理,过滤,洗涤后得到复合微球固定化PGase。本发明制备的固定化PGase使用方便,能重复回收,并且还具有很高的负载量和酶活性,在蛋白产业应用方面具有很高的潜
10 一种纳米藻壳光学生物传感器的构建及尿酸检测应用 CN202410680306.X 2024-05-29 CN118620990A 2024-09-10 杨雪薇; 龙思如
发明提供了一种纳米藻壳光学生物传感器的构建方法,构建带T8tag/R5tag标签的重组尿酸化酶T8‑Uox/R5‑Uox,并将其与Cu‑DF进行连接;所述T8‑Uox、R5‑Uox的DNA序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了一种上述方法构建的纳米铜硅藻壳光学生物传感器及其在尿酸检测中的应用。本发明将二氧化硅亲和肽引入尿酸氧化酶,构建重组尿酸氧化酶;该二氧化硅亲和肽序列可编码亲和硅藻壳silaffin3的肽段,具备将UOx靶向固定至硅藻硅质外壳的能;通过将修饰后的重组尿酸氧化酶固定在纳米铜硅藻壳构建生物传感器,可有效提高检测灵敏度。
11 一种强化寒冷湿地脱氮性能的固定化耐冷菌剂的制备方法 CN202011334942.5 2020-11-24 CN112430593B 2024-08-30 路晏红; 王彦堂; 刘畅
发明涉及一种强化寒冷湿地脱氮性能的固定化耐冷菌剂的制备方法,包括以下步骤:1)采用SBR法进行耐冷化菌群的富集培养,2)制备菌悬液,3)耐冷氨氧化菌群的固定:将巴西固氮螺菌与普通小球藻复配得到小球藻复配溶液,然后将海藻酸钠溶液和小球藻复配溶液混合均匀作为包埋载体,加入污泥生物炭形成凝胶剂,然后在凝胶剂中加入菌悬液,混合均匀并静置3~4h后缓慢滴加到交联剂中,交联18~24h后用去离子洗涤3遍;将本发明制备的固定化菌藻小球应用于冬季寒冷湿地,显著提升了寒冷条件下湿地系统的脱氮除磷能,显著改善人工湿地冬季运行效果差、污染物处理效果差等问题。
12 一种基于噬菌体及巯基磁珠生物催化合成酶的固定化方法 CN202410582064.0 2024-05-11 CN118516344A 2024-08-20 高嵩; 徐渺; 卞赢莹; 果波; 王佩; 骆波; 陈裕康
发明涉及酶固定化技术领域,具体公开了一种基于噬菌体及巯基磁珠生物催化合成酶的固定化方法,该方法将T4噬菌体衣壳与磁性颗粒结合在一起,用于固定化生物催化合成酶,T4噬菌体衣壳是一种天然纳米粒子,由主要衣壳蛋白gp23和两种非必要蛋白组成,即高抗原性外衣壳蛋白(Hoc,155个拷贝/衣壳)和小外衣壳蛋白(Soc,870个拷贝/衣壳)。本发明将酶设计成Hoc或Soc的融合蛋白,并通过亲和反应自组装到T4噬菌体表面的Hoc或Soc结合位点阵列中,作为安全环保的纳米颗粒,具有高比表面积的纳米颗粒;固定化酶的阵列显示;酶三维结构和活性的良好保持等优点。使用该磁性载体固定化的BnLTA酶具有回收方式简单高效的特点。
13 一种精酸酶突变体、其重组体及其在连续催化中的应用 CN202211481396.7 2022-11-24 CN116179521B 2024-04-30 齐佳琨; 范超; 洪皓; 刘军; 吴文忠
发明公开了一种精酸酶突变体、其重组体及其在连续催化中的应用,该精氨酸酶与辅助侵染蛋白残基突变体基因的融合表达后,构建出外泌的固定化酶,能够外泌到培养基中,在温度和偏中性的pH下与其生产细胞结合。本发明利用其与自身生产细胞一步纯化‑固定化的功能,获得稳定性提高的活性酶,为酶法工业化生产提供有效途径。该突变体耐受的pH域宽,解决了原始蛋白残基与活性酶融合表达最适pH不匹配的难点,且融合表达后的酶同时具有催化活性域与固定化能,具有广泛的工业化应用场景。
14 一种乳外囊泡包埋活性益生菌的制备方法和应用 CN202311412531.7 2023-10-30 CN117467656A 2024-01-30 易华西; 郝林林; 林凯; 张喆; 公丕民; 刘同杰; 张兰威
发明属于生物医药材料领域,涉及一种乳外囊泡包埋活性益生菌的制备方法和应用,牛乳外囊泡包埋益生菌包括益生菌,以及包覆于益生菌表面的功能化牛乳外囊泡;其制备方法包括以下步骤:提取牛乳外囊泡,将磷脂‑聚乙二醇‑苯酸与牛乳外囊泡按照质量比混合孵育,使磷脂‑聚乙二醇‑苯硼酸完全连接到牛乳外囊泡上,得到表面修饰苯硼酸基团的功能化牛乳外囊泡;将益生菌发酵培养,得到益生菌菌泥;将复溶得到的益生菌菌液与功能化牛乳外囊泡按照体积比混合孵育,制备得到牛乳外囊泡包埋的益生菌体系。本发明适用于多种益生菌口服药物的开发和利用,提供了益生菌输送系统未来可能的新发展策略。
15 利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用 CN202210643367.X 2022-06-09 CN114958822B 2023-10-27 董维亮; 刘婧媛; 王彤; 周小力; 周杰
发明涉及利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用,取待成膜菌株和粘细菌分别培养后,离心制成菌悬液;将待成膜菌株和粘细菌的菌悬液共同转接至成膜培养基培养,形成菌膜;所述成膜培养基为CYE培养基、CYE稀释培养基或MSM培养基;所述CYE稀释培养基为稀释50倍的CYE培养基。发明固定化菌膜采用了一种通过结合黏细菌建立生物粘附膜结构提高外源微生物菌群的降解效率和环境稳定性的新策略。降解菌群经过生物粘附成膜后,其对环境变化的耐受性显著提高,尤其是对酸性条件和高底物浓度环境的鲁棒性更强。生物膜结构为降解体系提供的保护,有助于建立多种微生物的共存关系,并起到保护和维稳结构的作用。
16 基于T4噬菌体衣壳的L-苏缩酶固定化及可循环生物催化的方法 CN202310288818.7 2023-03-23 CN116286766A 2023-06-23 高嵩; 果波; 王佩; 曹阳; 邵小芙; 马超; 徐渺; 骆波; 何小聪
发明提供一种基于T4噬菌体衣壳的L‑苏缩酶固定化及可循环生物催化的方法。本发明实现了以T4噬菌体衣壳为载体的BnLTA酶自组装高拷贝数固定化,保证了固定化酶的原有的空间构象。在5次重复使用后酶活回收率为75%,且具有广泛的底物适应性,在工业中具有应用价值。同时也建立了一种广泛的基于T4噬菌体的展示平台,为酶的固定化研究提供了基础
17 利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用 CN202210643367.X 2022-06-09 CN114958822A 2022-08-30 董维亮; 刘婧媛; 王彤; 周小力; 周杰
发明涉及利用黏细菌构建生物粘附固定化菌膜的方法及其应用,取待成膜菌株和粘细菌分别培养后,离心制成菌悬液;将待成膜菌株和粘细菌的菌悬液共同转接至成膜培养基培养,形成菌膜;所述成膜培养基为CYE培养基、CYE稀释培养基或MSM培养基;所述CYE稀释培养基为稀释50倍的CYE培养基。发明固定化菌膜采用了一种通过结合黏细菌建立生物粘附膜结构提高外源微生物菌群的降解效率和环境稳定性的新策略。降解菌群经过生物粘附成膜后,其对环境变化的耐受性显著提高,尤其是对酸性条件和高底物浓度环境的鲁棒性更强。生物膜结构为降解体系提供的保护,有助于建立多种微生物的共存关系,并起到保护和维稳结构的作用。
18 一种快速形成厌颗粒污泥的方法 CN202011379999.7 2020-12-01 CN112410259B 2022-07-08 郝安琪; 邱沪生; 袁鹏; 杜宛霖; 李萌
发明公开了一种快速形成厌颗粒污泥的方法,通过投加一种表面富含糖被的少动鞘醇单胞菌(NZHB‑L1)来达到快速促进污泥颗粒化。少动鞘氨醇单胞菌(NZHB‑L1)表面糖被有利于其他菌体附着在该生物的表面,形成大的颗粒,从而快速沉降。厌氧颗粒污泥中主要包括甲烷八叠球菌和甲烷丝菌,甲烷八叠球菌组分多时,处理的负荷更高,降解的速度更快。但是甲烷八叠球菌粒径小,密度小,很容易损失。甲烷八叠球菌很容易负载在本发明投加的微生物细菌表面,从而形成大颗粒的菌体,加速了菌体的沉降速率,有效的阻止了甲烷八叠球菌的损失,提高了系统的有机负荷率。
19 一种强化寒冷湿地脱氮性能的固定化耐冷菌剂的制备方法 CN202011334942.5 2020-11-24 CN112430593A 2021-03-02 路晏红; 王彦堂; 刘畅
发明涉及一种强化寒冷湿地脱氮性能的固定化耐冷菌剂的制备方法,包括以下步骤:1)采用SBR法进行耐冷化菌群的富集培养,2)制备菌悬液,3)耐冷氨氧化菌群的固定:将巴西狐单螺菌与普通小球藻复配得到小球藻复配溶液,然后将海藻酸钠溶液和小球藻复配溶液混合均匀作为包埋载体,加入污泥生物炭形成凝胶剂,然后在凝胶剂中加入菌悬液,混合均匀并静置3~4h后缓慢滴加到交联剂中,交联18~24h后用去离子洗涤3遍;将本发明制备的固定化菌藻小球应用于冬季寒冷湿地,显著提升了寒冷条件下湿地系统的脱氮除磷能,显著改善人工湿地冬季运行效果差、污染物处理效果差等问题。
20 一种用于肿瘤干细胞培养的压应加载装置及其应用方法 CN202011084666.1 2020-10-12 CN112143650A 2020-12-29 宋关斌; 唐艳萍; 马迪; 罗庆
发明公开了一种用于肿瘤干细胞培养的压应加载装置及其应用方法,属于细胞生物力学技术领域,其包括培养盒和压力控制装置;培养盒具有培养腔且培养腔上部活动连接有盒盖,培养腔内装有至少一个培养板,培养板上设置有多个用于容纳培养基和包埋有肿瘤干细胞的凝胶球的孔位;压力控制装置包括气管、微调针安全阀及压力表,压力控制装置通过四通连接件的第一端与盒盖连接并与培养腔连通,气管与四通连接件的第二端连接,安全阀与四通连接件的第三端连接,压力表与四通连接件的第四端连接,微调针阀设置在气管上。本发明可同时载入多个不同基质刚度的凝胶球样品,具有基质刚度的并行测试功能,能够对压力等参数进行调控,性能稳定、操作简单。
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