本发明涉及包括因渗透剂适合性而能够透入屏障中的孔的分子排列的制 剂，尽管所述孔的平均直径小于渗透剂的平均直径。所述渗透剂可以输送活 性剂，或者能够在所述渗透剂进入所述孔后使活性剂透过孔。本发明特别涉 及所述制剂的新型添加剂诸如稠度增量剂、抗氧化剂或杀菌剂。本发明进一 步涉及这类制剂的制备方法和用途，其中所述的活性剂选自皮质类固醇。最 后，本发明涉及一种用于制备所有这类制剂的方法。

任何药物作用的功效均是一种多参数函数，其中药物的内在功效、累积 量以及消除动力学特性均起作用。尽管前者完全由药物的化学组成来决定， 但是后两个参数对药剂的盖仑派医学特性敏感且还取决于药剂的施用部位和 比例。

在医学以及药物工业上，选择正确的药物施用方式和类型与发现合适的 活性剂同样重要。例如，如果经表皮给予的药物不能够进入和/或通过皮肤屏 障，尽管它具有较高的内在功效，那么这类药物也没有实用价值。这一结论 对于易于进入皮肤而消除过快以致于不能完全产生所需的生物作用的药物而 言也同样真实。在每种情况中，使药剂最佳化可能有帮助作用。设计改进的 盖仑制剂远比发明相应的新化学个体更快速且费用更为低廉。

本领域中已经公知给由两亲物质构成的膜添加表面活性剂可以改变膜对 多孔屏障中的孔的适合性。此外，已经建议可以将这一事实通过将活性剂混 入由至少一层或多层两亲分子或两亲载体物质构成的相应膜包围的微型液滴 和/或结合在其上并悬浮于合适的液体介质中而用于使活性剂转运入皮肤和/ 或通过皮肤。这些制剂以自动最佳化活性剂载体为基础，所述的载体可以借 助于其对孔的极高适合性而透入诸如皮肤这样的多孔屏障。这一内容更具体 地描述在我们早期的申请EP475160B1、PCT/EP96/04526、 PCT/EP98/5539和PCT/EP98/6750中，将这些文献的内容引入本文作为参考。

然而，尽管上述引用的现有技术已经教导了包括高度适合局部给药的适 于使活性剂转运入和/或通过诸如人体皮肤这样的屏障的活性剂载体的制 剂，但是这些制剂仍然能够按照特定盖仑派医学特性最佳化以便提高储存和 应用的实用性。这在涉及某些诸如制剂的粘度、对氧化性降解的化学耐受性 和/或制剂的微生物稳定性这样的盖仑派医学特性的情况中具有特别的真实 性。

为了避免重复治疗，例如鉴于可能引起的副作用，且为了获得较高的局 部活性剂浓度，当通过扩大所用制剂的施用面积和/或层厚度可以达到这一目 的时，有必要适当调节制剂的粘度。因此改变制剂的粘度是一种避免连续治 疗许多次或者使活性剂粘度适当提高的适宜方式。

与储存相关的难题最常见的是因制剂对其成分的氧化性降解缺乏化学耐 受性而产生的。当制剂与环境的空气中的氧气接触时，上述难题显然不仅对 施用前制剂在容器内部的储存过程中来说是重要的，而且对在施用部位上的 施用过程中来说也是重要的。与制剂成分相关的任何氧化过程不仅可以使载 体和活性剂分子降解且由此持续破坏载体和活性剂的特性，而且甚至可导致 形成自由基，这些自由基随后进一步对载体和活性剂分子发生化学侵蚀且由 此导致制剂中的成分的降解加速。确保适当储存和应用始终与防止制剂成分 的氧化性降解相关。

另一种与储存相关的难题在于防止制剂受到诸如细菌和真菌这样的微生 物影响，因为这种情况可导致载体成分和相关的活性剂发生降解。微生物损 害不仅降低或消除载体透入的能力和活性剂的活性，而且可以进一步导致药 物施用过程中产生严重的副作用。因此，所述制剂不仅应在应用前的储存过 程中防止它受到微生物影响，而且一旦需要因施用药物的目的而打破容器时 也应保持其不受影响。

上述涉及活性剂难以转运入和/或通过皮肤的难题以及进一步涉及盖仑 派医学特性的难题对许多皮质类固醇皮肤用药来说是十分常见的。盐皮质类 固醇和糖皮质激类固醇(下文更一般地统称为术语“皮质类固醇”)约占目前 可在柜台上销售的所有皮肤用药的三分之一。例如，为了局部治疗炎症疾病， 通常使用皮质类固醇，而且尤其是在治疗基于过敏的症状中将皮质类固醇广 泛用于系统性疗法。

因此就最有效的皮质类固醇活性剂而言每平方厘米给予几微克剂量直到 就药物能效较低而言每平方厘米给予几毫克的情况十分常见。过度接受这种 限制降低了浓度驱动药物透入皮肤的功效在治疗上可接受的水平以下；过度 接受这类药物的用量可以导致不可耐受的局部乃至全身性副作用，或者不能 单纯通过传统的盖仑制剂实现。

例如，通过提高表皮药物浓度可以增加药物转运入皮肤的比率；通过生 产局部缓释型药物可以解决活性剂消除过快的难题。然而，在皮肤上使用高 度浓缩的药物溶液会引起活性剂沉淀在皮肤上的危害且更为可能的是产生不 需要的副作用。例如，许多缓释制剂具有的较高的潜在皮肤刺激性是使用这 类药物进行成功治疗的严重障碍。主要原因之一在于目前使用的皮肤软膏或 乳剂一般含有至少0.1％且有时达5％的活性组分以及相对较高用量的皮肤 渗透促进剂以便流体化，即使皮肤“软化”，然而，这也对皮肤有害。这在 重复使用这类药物和/或将这类药物高度浓缩时尤其是真实的，它通常产生诸 如皮肤萎缩这样的严重的副作用，然后迫使治疗中断。即使为获得足够的活 性剂浓度而必需重复治疗所引起的不需要的严重副作用能够得到避免，但传 统盖仑制剂一般也缺乏生物作用功效和期限。

鉴于上文所述的困难和难题，需要拥有一种以高度适合性活性剂载体为 基础的制剂，它比传统洗剂或乳剂形式的类似药物更为有效且可以产生比所 述类似药物更长的所需生物功能，而由重复治疗引起的严重副作用可以得到 减少乃至消除。此外，需要拥有一种以能够使皮质类固醇活性剂转运入和/ 或通过皮肤的高度适合性活性剂载体为基础的制剂，其中可以将该制剂的粘 度进行调节以便能够扩大施用面积和/或层厚度，从而避免重复治疗。如果在 储存和应用过程中能够防止这种制剂的氧化性降解和微生物损害，那么它也 是极为需要的。

本发明的目的在于解决上述难题。尤其是解决有关特别最佳化的高度适 合性活性剂载体的储存和应用方面的难题。

本发明的另一个目的是在关于充分控制经皮和/或皮内转运这类药物的 转运皮质类固醇制剂方面克服现有技术的缺陷。此外，将皮质类固醇制剂的 粘度进行调节并防止它们受到氧化性降解和微生物的损害。

本发明的另一个目的是提供一种制备这类无创伤用制剂的方法。

在所附的独立权利要求中限定了本发明对这些目的的解决方法。

从属权利要求的主题提供了使用特殊特性的便利解决方法。

如上所述，在本文引用的参考文献中已经描述了以高度适合性活性剂载 体为基础的制剂的制备方法和用途。从这些文献中可以一般性地了解到向某 些这类制剂中添加稠度增量剂和抗氧化剂(例如，参见PCT/EP96/04526； 权利要求18)。然而，该文献教导的内容是一种一般性的原则，没有任何实 用价值，因为它显然缺乏对应用的任何说明。例如，它对添加能够调节制剂 中药物应用剂量的稠度增量剂来说尤其真实。对于本领域技术人员来说，因 为主要关注最终的药物作用，所以这种添加过程显然可以不受简单试验和误 差法或偶然因素的影响。此外，适当选择所添加的抗氧化剂或杀菌剂的类型 和用量是必不可少的，因为它显然会影响制剂的储存和应用。

从现有技术中得知将皮质类固醇用作与高度适合性活性剂载体结合的活 性剂(参见PCT/EP96/04526；权利要求15；PCT/EP91/01596的实施例173 -175)。不过，就所述的添加剂而言，该公开文献为将所述活性剂加入所述 活性剂载体提供了不超过一般性的原则而没有任何进一步的说明，然而，它 对于药物的施用来说是必不可少的。因此，所述的现有技术仅一般性地教导 了将皮质类固醇用作评价孔透入率的测试用活性剂，而没有教导以含皮质类 固醇的高度适合性活性剂载体为基础的可用皮肤用药产品的制备方法。它由 混入高度适合性载体的氢化可的松总量说明(PCT/EP91/01596的实施例173 -175：10微克/约100mg干重的活性剂载体)。以制剂总干重为基准，约 0.1/mille氢化可的松的极低相对比例远未达到有治疗作用的药物浓度且也远 未达到本申请中给出的任何皮质类固醇浓度。

此外，即使获得了更加系统性的药物作用，或者获得了更为局部的药物 作用，但现有技术并没有教导如何实现皮质类固醇的特殊应用。因此，分别 解决所用以高度适合性活性剂载体为基础的皮质类固醇皮肤用药的系统性和 非系统性药物作用难题是必要的，因为这是本申请需要做的工作。

此外，一般来说，局部非全身给予和主要全身给予皮质类固醇皮肤用药 伴随的问题在于：类似于氢化可的松这样的更为缓慢起作用的活性剂仅表现 出相相当短和弱的活性，而诸如泼尼卡酯(prednicarbat)或去炎松衍生物这 样的更为近期开发的相关活性剂更为有效且起作用的时间较长，但它们对身 体却更为有害，因为如果以高度浓缩和/或重复施用它们，则它们可以引起严 重的副作用。

与此相反，可以将由高度适合性活性剂载体介导的局部皮质类固醇的转 运进行系统性改变，由此显著减少乃至避免了严重的副作用。根据确切施用 条件和载体设计的不同，100％-5％以下的局部给予的药物可以沉积入最 外侧的皮肤区域。低面积剂量有利于药物保留在皮肤内，而较大量的药物易 于分布到全身循环系统。在通过所述载体单一经表皮给予皮质类固醇后能够 达到有治疗意义的血药浓度，同时可将血药浓度水平保持在百分之几以下。

令人意外的是，与从皮质类固醇选择的活性剂一起使用这类高度适合 性活性剂载体以提供从未有过的小单位面积剂量的生物有效性的产品。正 如下文所说明的，当通过高度适合性活性剂载体在完整皮肤上给予所有测 试用皮质类固醇时，它们均产生了功效(2-10倍)和作用期限(达5倍) 。与现有技术含有皮质类固醇的软膏和乳剂相反，在高度适合性活性剂载 体中含有少量皮质类固醇足以达到良好的药物生物作用。

一般来说，从表面擦掉物质可缩短常用乳剂或洗剂的治疗作用。本发 明的另一个优点在于使用以高度适合性活性剂载体为基础的制剂没有观察 到这类问题，由此这类制剂可以产生远高于相应的标准药物的生物作用。 这是因为这类高度适合性活性剂载体可以使药物储存在存活皮肤部分中而 不是停留在皮肤表面上。本发明特性的特征在于：一种包括因渗透剂适合 性而能够透入屏障中的孔的分子排列的制剂，尽管所述孔的平均直径小于 渗透剂的平均直径，但条件是所述渗透剂可以输送活性剂，或者能够在渗 透剂进入孔后使活性剂透过孔，该制剂包括至少一种稠度增量剂和/或至少 一种抗氧化剂和/或至少一种杀菌剂，其中所述稠度增量剂的用量使所述制 剂粘度增加到高于相应未增稠制剂的粘度至5Nm/s的最大值以便能够在施 用区域上分布并保留在其上，所述抗氧化剂的用量可以使氧化指数的增量 每6个月减少100％以下，所述杀菌剂的用量可以在4天的期限后使制剂总 量每g添加的1百万个病菌的细菌计数就需氧细菌而言下降至100个以下， 就肠道细菌而言下降至10个以下，而就铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌而 言下降至1个以下。由此能够将制剂的储存期和应用期延长并有利地增加 制剂的实用性。

如果按照使制剂的粘度增加至1Nm/s且更优选增加至0.2Nm/s的用量 添加所述的至少一种稠度增量剂，那么该技术方案是优选的。

此外，如果按照使氧化指数的增量每12个月减少100％以下且更优选 每12个月减少50％以下的用量添加所述的至少一种抗氧化剂，那么该技术 方案是优选的。

对于包括大豆磷脂酰胆碱作为主要降解物质的制剂来说，使氧化指数 增量每12个月减少0.45个单位以下、优选减少0.22个单位以下且甚至更优 选减少0.1个单位以下。

在本发明的优选的实施方案中，按照下述用量添加所述的至少一种杀菌 剂：该用量可以在3天的期限后、更优选在1天的期限后使制剂总量每g添 加的1百万个病菌的细菌计数就需氧细菌而言下降至100个以下、就肠道细 菌而言下降至10个以下而就铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌而言下降至1 个以下。

如果抗氧化剂选自下列物质，那么它是优选的：合成的酚类抗氧化剂， 诸如丁基化羟基茴香醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)和二叔丁基苯酚 (LY178002、LY256548、HWA-131、BF-389、CI-986、PD-127443、 E-5119、BI-L-239XX等)、叔丁基氢醌(TBHQ)、棓酸丙酯(PG)、1- O-己基-2，3，5-三甲基氢醌(HTHQ)；芳香胺类(二苯胺、对烷硫基邻茴香胺、 乙二胺衍生物、咔唑、四氢茚并吲哚)；酚类和酚酸类(愈创木酚、氢醌、香 草醛、棓酸及其酯类、原儿茶酸、奎尼酸、丁香酸、鞣花酸、水杨酸、去甲 二氢愈创木酸(NDGA)、丁子香酚)；生育酚类(包括(α、β、γ、δ生育 酚)及其衍生物诸如生育酚酰化产物(例如乙酸生育酚酯、月桂酸生育酚酯、 肉豆蔻酸生育酚酯、棕榈酸生育酚酯、油酸生育酚酯、亚油酸生育酚酯等或 任意其它合适的硫辛酸生育酚酯))、生育酚-POE-琥珀酸酯；trolox和相应的 酰胺和硫代羧酰胺类似物；抗坏血酸及其盐、异抗坏血酸、(2或3或6)- o-烷基抗坏血酸类、抗坏血酸酯类(例如6-o-月桂酰基-L-抗坏血酸、6-o-肉 豆蔻酰基-L-抗坏血酸、6-o-棕榈酰基-L-抗坏血酸、6-o-油酰基-L-抗坏血酸 或6-o-亚油酰基-L-抗坏血酸等)。此外，可以有利地使用各种干扰氧化的药 物、包括但不限于：非甾类消炎药(NSAIDs，诸如吲哚美辛、双氯酚酸钠、 甲灭酸、氟芬那酸、保泰松、羟基保泰松、乙酰水杨酸、萘普生、双氟尼酸、 布洛芬、酮基布洛芬、炎痛喜康、青霉胺、二硫青霉胺、伯氨喹、米帕林、 氯喹、羟氯喹、硫唑嘌呤、苯巴比妥、对乙酰氨基酚；氨基水杨酸类和衍生 物；甲氨喋呤、丙丁酚；抗心律失常药(胺碘酮、茚丙胺、阿索卡诺)、氨溴 索、他莫昔芬、b-羟基他莫昔芬；钙拮抗剂(硝苯地平、尼索地平、尼莫地 平、尼卡地平、尼伐地平)；β-受体阻断剂(阿替洛尔、普萘洛尔、奈必洛尔)； 还可以使用优选氧化的化合物，诸如亚硫酸氢钠、焦亚硫酸氢钠、硫脲；螯 合剂，诸如EDTA、GDTA、甲磺酸去铁胺；混合型内源性防御系统，诸如 转铁蛋白、乳铁蛋白、铁蛋白、血浆铜兰蛋白(cearuloplasmin)、触珠蛋白、 血凝乳酶(haemopexin)、清蛋白、葡萄糖、泛醌醇-10；酶抗氧化剂，诸如超 氧化物歧化酶和具有类似活性的金属配合物，包括过氧化氢酶、谷胱甘肽过 氧化物酶以及少量复合物分子诸如β-胡萝卜素、胆红素、尿酸；类黄酮(黄 酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、查耳酮类(Chacones)、花 色素苷类)、N-乙酰半胱氨酸、美司钠、谷胱甘肽、硫组氨酸衍生物、三唑 类；单宁类、肉桂酸、羟基肉桂酸及其酯类(香豆酸类和酯类、咖啡酸及其 酯类、阿魏酸、(异)绿原酸、芥子酸)；香料提取物(例如来自丁子香、肉 桂、一串红、迷迭香、肉豆蔻、oregamo、众香子、肉豆蔻)；鼠尾草酸、鼠 尾草酚、卡斯酸(carsolic acid)、迷迭香酸、迷迭香二酚(rosmaridiphenol)、 2，5-二羟苯甲酸、阿魏酸；燕麦粉提取物，诸如avenanthramide 1和2；硫醚 类、二硫醚类、亚砜类、四硫化烷基秋兰姆；肌醇六磷酸、甾类衍生物(例 如U74006F)；色氨酸代谢物(例如3-羟基犬尿氨酸、3-羟基-2-氨基苯甲 酸)；和有机硫属元素化物。

特别地，BHA或BHT的优选浓度为0.001-2重量％、更优选0.0025 -0.2重量％，且最优选0.005-0.02重量％；TBHQ和PG的优选浓度为 0.001-2重量％、更优选0.005-0.2重量％，且最优选0.01-0.02重量 ％；生育酚的优选浓度为0.005-5重量％、更优选0.01-0.5重量％，且 最优选0.05-0.075重量％；抗坏血酸酯类的优选浓度为0.001-5重量％、 更优选0.005-0.5重量％，且最优选0.01-0.15重量％；抗坏血酸的优选 浓度为0.001-5重量％、更优选0.005-0.5重量％，且最优选0.01-0.1 重量％；亚硫酸氢钠或焦亚硫酸氢钠的优选浓度为0.001-5重量％、更优 选0.005-0.5重量％，且最优选0.01-0.15重量％；硫脲的优选浓度为 0.0001-2重量％、更优选0.0005-0.2重量％，且最优选0.001-0.01重 量％、最典型的是0.005重量％；半胱氨酸的优选浓度为0.01-5重量％、 更优选0.05-2重量％，且最优选0.1-1.0重量％、最典型的是0.5重量 ％；一硫代甘油的优选浓度为0.01-5重量％、更优选0.05-2重量％， 且最优选0.1-1.0重量％、最典型的是0.5重量％；NDGA的优选浓度为 0.0005-2重量％、更优选0.001-0.2重量％，且最优选0.005-0.02重 量％、最典型的是0.01重量％；谷胱甘肽的优选浓度为0.005-5重量％、 更优选0.01-0.5重量％，且最优选0.05-0.2重量％、最典型的是0.1重 量％；EDTA的优选浓度为0.001-5重量％、更优选0.005-0.5重量％， 且最优选0.01-0.2重量％、最典型的是0.05-0.975重量％；柠檬酸的优 选浓度为0.001-5重量％、更优选0.005-3重量％，且最优选0.01-0.2重 量％、最典型的是0.3-2重量％。

在本发明的优选的实施方案中，所述的杀菌剂选自：短链醇类，包括乙 醇和异丙醇、氯丁醇、苄醇、氯苄醇、二氯苄醇、六氯苯酚(hexachlorophene)； 酚类化合物，诸如甲酚、4-氯-间甲酚、对氯间二甲苯酚、二氯苯酚 (dichlorophene)、六氯苯酚(hexachlorophene)、聚乙烯吡咯烷酮碘；对羟基苯 甲酸酯、特别是对羟基苯甲酸烷基酯诸如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸 乙酯、对羟基苯甲酸丙酯或对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸苄酯；酸类， 诸如山梨酸、苯甲酸及其盐；季铵化合物，诸如烷铵盐，例如其澳化物、诸 如苯扎氯铵或苯扎澳铵这样的苄烷铵盐、十六烷三甲铵盐例如十六烷三甲基 澳化铵、phenoalkecinium盐诸如溴化度米芬、十六烷基氯化吡啶和其它 盐；还有汞化合物，诸如乙酸苯汞、硼酸苯汞或硝酸苯汞、乙基汞硫代水杨 酸钠、氯己定或其葡糖酸盐；或来源于生物的任意具有抗菌活性的化合物； 或它们的混合物。

在特别优选的实施方案中，乙醇、丙醇、丁醇或苄醇这样的短链醇类的 体相浓度达到10w％、更优选达到5重量％，且最优选0.5-3重量％的范 围，氯丁醇的体相浓度优选在0.3-0.6重量％的范围；此外，对羟基苯甲酸 甲酯这样的对羟丙基苯甲酸酯类的体相浓度在0.05-0.2重量％的范围；对 羟基苯甲酸丙酯的体相浓度在0.002-0.02重量％的范围；山梨酸的体相浓 度在0.05-0.2重量％的范围；而苯甲酸的体相浓度优选在0.1-0.5重量％ 的范围；酚类，二氯苯氧氯酚的体相浓度在0.1-0.3重量％的范围；且氯己 定的体相浓度优选在0.01-0.05重量％的范围。

此外，如果稠度增量剂选自下列物质，那么它是优选的：诸如部分醚化 的纤维素衍生物这样的药物上可接受的亲水性聚合物，包括羧甲基纤维素、 羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素或甲基纤维素；完全合成 的亲水性聚合物，包括聚丙烯酸酯类、聚甲基丙烯酸酯类、聚(羟乙基)甲 基丙烯酸酯、聚(羟丙基)甲基丙烯酸酯、聚(羟丙基甲基)甲基丙烯酸酯、 聚丙烯腈、甲代烯丙基磺酸盐、聚乙烯类、聚氧乙烯类、聚乙二醇类、聚乙 二醇-丙交酯、聚乙二醇-二丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇类、聚(丙 基甲基丙烯酰胺)、富马酸丙二醇-乙二醇共聚物、伯洛沙姆类、聚天冬酰胺、 (肼交联的)透明质酸、硅氧烷；天然树胶，包括藻酸盐、鹿角菜胶、瓜耳 胶、明胶、西黄蓍胶、(酰胺化的)果胶、黄原胶、脱乙酰壳多糖、胶原蛋 白、琼脂糖；它们的混合物和进一步的衍生物或共聚物和/或其它药物上可或 至少是生物上可接受的聚合物。特别地，所述聚合物的重量百分数在0.05％ -10％的范围、更优选在0.1-5％的范围、更优选在0.25％-3.5％的范 围，且最优选在0.5-2％的范围。

已经发现：如果按照使制剂的粘度增加至未增稠的相应制剂的粘度以 上，优选增加至1Nm/s且更优选增加至0.2Nm/s的用量添加所述的稠度增量 剂，那么这种粘度是最适合的。

在本发明的另一个方面中，提供了一种包括因渗透剂适合性而能够透入 屏障中的孔的分子排列的制剂，尽管所述孔的平均直径小于渗透剂的平均直 径，条件是所述渗透剂可以输送活性剂，或者能够在渗透剂进入孔后使活性 剂透过孔，与所述渗透剂结合的活性剂是糖皮质类固醇或盐皮质类固醇(皮 质类固醇)；该制剂的特征在于皮质类固醇的相对含量占该制剂总干重的0.1 重量％以上。如果如上文所述向制剂中加入至少一种稠度增量剂和/或至少一 种抗氧化剂和/或至少一种杀菌剂，那么该技术方案是优选的。

该皮质类固醇优选自二丙酸别氯地米松(alclonetasone)、安西奈德、倍 氯美松双丙酸酯、倍他米松、倍他米松-17-戊酸酯、倍他米松-17，21-二戊酸 酯、倍他米松-21-乙酸酯、倍他米松-21-丁酸酯(buytrate)、倍他米松-21- 丙酸酯、倍他米松-21-戊酸酯、倍他米松苯甲酸酯、二丙酸倍他米松、戊酸 倍他米松、布地缩松、丙酸倍氯他索、丁酸倍氯他索、去氧可的松、皮质酮、 可的松、17-乙酸可的松、21-去氧倍他米松、17-丙酸21-去氧倍他米松、去 氧皮质酮、丙缩羟强龙、去羟米松、地塞米松、双醋二氟松、戊酸二氟米松、 氟二氯松、特戊酸二氟美松、氟轻松、醋酸氟轻松、氟考丁酯、氟考龙、9-α- 氟可的松、9-α-氟氢可的松、9-α-氟强的松龙、醋酸氟甲叉龙、丙酮缩氟氢 羟龙、氯氟舒松、氢化可的松、17-乙酸氢化可的松、17-丁酸氢化可的松、 17-丙酸氢化可的松、17-戊酸氢化可的松、21-乙酸氢化可的松、21-丁酸氢 化可的松、21-丙酸氢化可的松、21-戊酸氢化可的松、17-α-羟孕酮、醋酸 甲强龙、糠酸毛他松、泼尼松龙、泼尼松、17-乙酸泼尼松、17-戊酸泼尼松、 黄体酮、去炎松、醋酸曲安缩松。

在本发明的一个特定实施方案中，将渗透剂悬浮于或分散于被一层或几 层膜样包衣层包裹的液滴形式的极性液体中，所述的包衣层包括至少两种类 型或形式的具有聚集倾向的两亲物质，条件是所述的至少两种物质在所述液 体中的溶解度相差至少10倍，或者当更易溶物质是均匀聚集体形式或是所述 两种物质的任意组合物为不均匀聚集体形式时，所述的物质具有的优选平均 直径小于仅含低溶解性物质的均匀聚集体的平均直径；或者条件是存在的更 易溶性物质降低接近热能的膜样包衣层的平均弹性能。

此外，优选更易溶性物质倾向于使液滴增溶且这类物质的含量达到 99mol-％的增溶浓度，或者在未增溶的液滴中相当于达到99mol-％的饱和浓 度，无论何种浓度均较高。如果更易溶性物质的含量低于50％、尤其是低于 40％，且最优选低于30％所述物质的相应增溶浓度，那么它可以是有利的。 如果更易溶性物质的含量低于80％、优选低于65％，且最优选低于50％液 滴中所述物质的所述饱和浓度，那么它通常也是有利的。

在本发明的许多极为优选的实施方案中，在聚集的物质中几乎不溶的是 脂类或脂类样物质、尤其是极性脂类；而更易溶于悬浮液体并可增加液滴适 合性的物质属于表面活性剂类、或者具有表面活性剂样特性。本发明的一个 特定实施方案由脂类或脂类样物质(它们来源于生物或相应的合成脂类或其 任意修饰物)构成，所述的脂类优选属于符合下列一般结构式的纯磷脂类：

其中R1和R2是脂族链，一般是C10-20-酰基或C10-20-烷基或部分不饱和的 脂肪酸残基，特别是油酰基、棕榈油酰基、反式油酰基、亚油基、亚麻基、 亚麻酰基、花生四烯酰基、11-十八碳烯基(vaccinyl)、月桂酰基、肉豆蔻 酰基、棕榈酰基或硬脂酰基链；且其中R3是氢、2-三甲氨基-1-乙基、2-氨 基-1-乙基、C1-4烷基、被羧基取代的C1-5-烷基、被羟基取代的C2-5-烷基、被 羧基和羟基取代的C2-5-烷基、或被羧基和氨基取代的C1-5-烷基、肌醇、鞘氨 醇或所述物质的盐，所述脂类也包括甘油酯类、类异戊二烯脂类、丝氨酸 或甾醇、含硫或碳水化合物的脂类或任意其它形成双层的脂类，特别是半 质子化液体脂肪酸类；所述的脂类选自包括选自下列物质的组：磷脂酰胆 碱类、磷脂酰乙醇胺类、磷脂酰甘油类、磷脂酰肌醇类、磷脂酸类、磷脂 酰丝氨酸类、鞘磷脂类和其它鞘磷脂类；糖鞘脂类(包括脑苷类、神经酰 胺解聚己糖苷类、硫苷脂类、鞘缩醛磷脂类)；神经节苷脂类和其它糖脂类 或合成脂类，特别是相应的鞘氨醇衍生物或任意其它的糖脂类；由此可以 使两种相似或不同的链通过酯基与主链(当是二酰基和二烯酰基化合物时 )连接或通过醚基与主链连接(当是二烷基脂类时)。

如果表面活性剂或表面活性剂样物质是下列物质，那么它是优选的：非 离子型、两性离子、阴离子型或阳离子型表面活性剂，尤其是脂肪酸或脂肪 醇、烷基-三/二/甲基铵盐、烷基硫酸盐、一价胆酸盐、脱氧胆酸盐、甘氨胆 酸盐、甘氨脱氧胆酸盐、牛磺脱氧胆酸盐、牛磺胆酸盐等；酰基-或烷酰基- 二甲基胺氧化物、尤其是十二烷基二甲基胺氧化物；烷基-或烷酰基-N-甲基 葡糖酰胺；N-烷基-N，N-二甲基甘氨酸；3-(酰基二甲铵)-烷磺酸酯；N-酰基-磺 基三甲铵乙内酯；聚乙二醇-辛基苯基醚、尤其是九乙二醇-辛基苯基醚；聚乙 烯-酰基醚，尤其是九乙烯十二烷基醚；聚乙二醇-异酰基醚、尤其是八乙二 醇-异十三基醚；聚乙烯-酰基醚，尤其是八乙烯十二烷基醚；聚乙二醇-脱水山 梨醇酰基酯诸如聚乙二醇-20-单月桂酸酯(Tween20)或聚乙二醇-20-脱水 山梨醇单油酸酯(Tween80)；聚羟基乙烯酰基醚，尤其是聚羟基乙烯月桂基 醚、聚羟基乙烯肉豆蔻酰基醚、聚羟基乙烯鲸蜡基硬脂酰基醚或聚羟基乙 烯油酰基醚，正如聚羟基乙烯4或6或8或10或12等的月桂基醚(作为 Brij系列形式)或相应的酯形式那样，例如聚羟基乙烯-8-硬脂酸酯(Myri45 )、聚羟基乙烯月桂酸酯或聚羟基乙烯油酸酯型；或聚乙氧基化蓖麻油40；脱 水山梨醇一烷基化物(例如阿勒赛尔(Arlacel)或斯潘(Span))、尤其是脱水山梨 醇单月桂酸酯；酰基-或烷酰基-N-甲基葡糖酰胺、尤其是癸酰基-或十二酰基 -N-甲基葡糖酰胺；烷基硫酸酯(盐)，例如月桂基硫酸酯或油酰基硫酸酯、 脱氧胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钠、油酸钠、酒石酸钠、脂肪酸盐诸如反式油 酸钠、亚油酸钠、月桂酸钠溶血磷脂诸如亚正十八烷基(＝油酰基)-甘油磷脂 酸、亚正十八烷基(＝油酰基)-磷酰甘油或亚正十八烷基(＝油酰基)-磷酰丝氨酸； 正酰基-、例如月桂基-或油酰基-甘油基磷脂酸；月桂基-或油酰基-磷酰基甘 油或月桂基-或油酰基-磷酰基丝氨酸；正十四烷基甘油基磷脂酸、正十四烷 基甘油基磷酰基甘油、正十四烷基甘油基磷酰基丝氨酸；相应的棕榈油酰基 溶血磷脂、反式油酰基溶血磷脂、11-十八碳烯基溶血磷脂或相应的短链磷 脂；或者是表面活性多肽。

如果所述渗透剂的平均直径选择30nm-500nm、优选40nm-250n、 更优选50nm-200nm，且最优选60nm-150nm，那么通常可以使活性剂 载体的渗透率达到最大值。

如果所述渗透剂的平均直径大于屏障内所述孔的平均直径2-25倍、优 选大于所述孔的平均直径2.25-15倍、更优选大于所述孔的平均直径2.5 -8倍，且最优选大于所述孔的平均直径3-6倍，那么根据渗透剂与孔大 小之间的相对比例通常可以使活性剂载体的渗透率最佳化。

本发明特定实施方案的特征在于人和动物皮肤用的制剂中所有载体液滴 的干重为总制剂量的0.01重量％-40重量％、特别是0.1重量％-30重量 ％、特别优选0.5重量％-20重量％，且最优选1重量％-10重量％。

如果将所述制剂施用在人和动物粘膜上，那么制剂中所有载体液滴的干 重选择总制剂量的0.0001重量％-30重量％范围是有利的。

就制备制剂而言，根据载体混悬液pH的不同而使制剂稳定性达到最大 限度的需要，如果载体混悬液的pH为4-10、优选5-9且甚至更常见的 是达到8.5，那么它是优选的。

一种用于制备本发明体内用无创伤制剂的方法，该方法包括使用至少一 种两亲物质、至少一种极性液体、至少一种边缘活性物质或表面活性剂、至 少一种占所述制剂总干重0.1重量％以上用量的皮质类固醇和如果可能的一 起形成所述制剂的常用组分。

此外，如果将至少一种边缘活性物质或表面活性剂、至少一种两亲物质、 至少一种亲水性液体和活性剂溶解以形成一种溶液且如果需要将它们分别混 合，然后合并所得的(部分)混合物或溶液以便随后通过诸如振荡、搅拌、 振动、匀化、超声处理、剪切、冷冻和熔化或使用简易驱动加压的过滤这样 的机械能的作用而形成可与所述活性剂结合和/或混合的渗透剂，那么该技术 方案是优选的。

如果使用所述的两亲物质或将它们溶于生理上相容的可以是水或易与水 混溶的极性液体或将它们与极性溶液一起溶于溶剂化介导剂，那么该技术方 案是优选的。

进一步优选的是将所述的两亲物质溶于高度挥发性醇类、尤其是溶于乙 醇或溶于药物上可接受的有机溶剂，然后尤其是通过在制备最终制剂前蒸发 而将所述溶剂除去。

如果所述的极性溶液含有至少一种边缘活性物质或表面活性剂，那么它 也是有利的。

为了制备本发明的制剂，进一步优选的是通过下列方法形成所述的渗透 剂：通过将所需的物质加入液相；反相蒸发；注入或透析；如果必要在诸如 振荡、搅拌、尤其是高速搅拌、振动、匀化、超声处理、剪切、冷冻和熔化； 或使用简易驱动压力进行过滤、尤其是低度(1MPa)或中度(达到10MPa) 驱动压力的过滤。

如果通过过滤使所述渗透剂形成，所述过滤物质具有的孔大小为0.01μm -0.8μm、优选0.02μm-0.3μm，且最优选0.05μm-0.15μm，由此可以依次 或并联使用几种滤器，那么该技术方案是便利的。

此外，如果在所述渗透剂形成后、例如在将药物溶于诸如乙醇、1-和2- 丙醇、苄醇、丙二醇、聚乙二醇(分子量：200-400D)或甘油所得到的溶 液注入混悬介质后，使所述活性剂和渗透剂至少部分结合，所述的渗透剂可 以预先使用相应的或某些其它合适的制备方法来制成或与药物注射液同时 制成，如果需要可以使用所述药物和至少某些渗透剂组分的共溶液；那么该 技术方案是优选的。

如果在施用所述制剂前制备与活性剂分子结合和/或与活性剂混合的所 述渗透剂，如果便利，可以它们可以由合适的浓缩物或冻干物制成，那么该 技术方案可能是有利的。

如果皮质类固醇的含量占总渗透剂干重的相对重量％(rw％)为0.1重 量％-20重量％、更优选0.25重量％-10重量％，最优选0.5重量％-5重 量％，那么它是优选的。

如果所述的皮质类固醇是去炎松或其衍生物之一、诸如醋酸曲安缩松， 那么优选其相对含量占装载药物的载体的总干重的2重量％以下、更优选1 重量％以下且最典型的是0.5重量％以下。

此外，如果所述的皮质类固醇是氢化可的松或其衍生物之一，那么优选 其相对含量占装载药物的载体的总干重的20重量％以下、更优选12.5重量 ％优以下且最典型的是5重量％以下。

此外，如果所述的皮质类固醇地塞米松或其衍生物之一，那么优选其相 对含量占装载药物的载体的总干重的15重量％以下、更优选10重量％优以 下且最典型的是5重量％以下。

如果所述的皮质类固醇是氯氟美松或其衍生物之一、诸如丙酸氯氟美 松，那么同样优选的是其相对含量占装载药物的载体的总干重的15重量％以 下、更优选10重量％优以下且最典型的是5重量％以下。

本发明的优选特征在于所述皮质类固醇的含量低于最大饱和值，将所述 的最大饱和值定义为皮质类固醇开始在载体内部或外部结晶时的皮质类固醇 含量，这类最大值取决于包括载体和活性剂分子的两亲分子之间的相互作 用，且通常在主要载体成分和所述皮质类固醇的膜/或油/水分配系数差异中 常常反映出的两亲分子之间的相互作用、或者涉及载体与皮质类固醇分子之 间分子大小上的错配，具有较低适合性的药物一般具有较低的饱和值。

如果为了加快药物的作用，那么有利的是加入一种渗透促进剂，它优选 自1-酰基-氮杂环庚-2-酮类(azones)、1-酰基-葡糖苷类、1-酰基-聚氧乙烯 类、1-酰基-糖类、2-正酰基-环己酮类、2-正酰基-1，3-二氧戊环类 (SEPA)、1，2，3-三酰基-甘油类、1-链烷醇类、1-链烷酸类、1-烷基-乙酸 酯类、1-烷基胺类、1-烷基-正烷基聚氧乙烯类、1-烷基烷基化物、正烷基- β-D-硫葡糖苷类、1-烷基甘油类、1-烷基-丙二醇类、1-烷基-聚氧乙烯类、 (1-烷基-)2-吡咯烷酮类、烷基-乙酰乙酸酯类、亚烷基二醇类、烷基-甲基-亚 砜类(烷基-DMSO)、烷基-丙酸酯类、烷基硫酸酯类、二酰基琥珀酸酯类、 二酰基-N，N-二甲氨基乙酸酯类(DDAA)、二酰基-N，N-二甲氨基异丙酸酯 类(DDAIP)、苯基-烷基胺类。

这种渗透促进剂的添加与在诸如本领域中的软膏和洗剂这样的传统盖仑 制剂中添加渗透促进剂不可比拟，添加这种渗透促进剂的目的在于皮肤的流 化作用。在这种情况中，添加渗透促进剂可以加快药物的作用，使药物作用 在活性剂载体与周围环境之间的分布加快。这种渗透促进剂的含量基本上不 适于流化皮肤以便增加活性剂载体的孔渗透率且由此与现有技术区别开来。

如果优选所用促进剂的体相浓度就1-辛基-丙二醇而言达到并在5％左 右、就1-[2-(癸硫基)乙基]氮杂环庚-2-酮(＝HPE-101)而言为6-10％、 就1-十二烷醇而言＜10％、就1-十二烷基氮杂环庚-2-酮(＝azone)而言＜10 ％、就2-正壬基-1，3-二氧戊环(SEPA)而言在10％左右、就2-正辛基环己 酮而言≤10％且优选在10％左右、就DMSO而言达到20％、就乙醇而言在 5％-40％、就乙二醇而言在10％或10％以上的范围、就乙酸乙酯而言达 到30％、就甘油而言为5-50％、就异丙醇而言达到75％、就肉豆蔻酸异 丙酯而言为1-20％、就油酸和油醇而言为1-20％，优选20％，就油基 -聚氧乙烯-醚而言约为1％、就丙二醇而言至少为10％；那么它是优选的。

关于这些范围的防止误解的说明是各种皮肤渗透促进剂的相对和绝对功 效不同，这使得难以绝对比较。一般来说，促进剂在皮肤中的浓度决定促进 作用的成功与否。然而，一般要考虑到或在文献中引用的是促进剂在皮肤上 的标定浓度。两种数值通常相差几个数量级、对药物促进剂的添加敏感且还 可以随应用条件的不同而改变。例如，就促进剂通过皮肤快速扩散或蒸发而 言，皮肤表面上过小的促进剂储备就可导致物质缺失。它也可以改变最终系 统的特性。

本发明的优选特征在于：如果需要所述的皮质类固醇在例如包括全身体 在内的深皮下组织如肌肉或关节、组织或者就是远端组织产生治疗作用，那 么以能够施用相当于由每单位面积施用的渗透剂总干重所表示的相应面积剂 量的制剂用量添加所述的皮质类固醇，所述的面积剂量为0.1mgcm-2-15mg cm-2、更优选0.5mgcm-2-10mgcm-2、特别优选0.75mgcm-2-5mgcm-2， 且最优选1mgcm-2-2.5mgcm-2。

本发明的另一个优选特征在于：如果需要所述的皮质类固醇主要产生局 部治疗作用、即浅层治疗作用而非全身治疗作用，那么以能够按照由每单位 面积施用的渗透剂总干重所表示的面积剂量施用制剂的用量添加所述的皮质 类固醇，所述的面积剂量为1μgcm-2-250μgcm-2、更优选2.5μgcm-2-100 μgcm-2、甚至更优选5μgcm-2-50μgcm-2，且最优选7.5μgcm-2-20μg cm-2。

如果将所述制剂的稠度和如果必要的其它特性进行适当选择以便能够特 别是通过使用喷雾器、spender、滚柱或海绵将该制剂喷雾、涂抹、滚动或 用海绵擦拭在施用区域上，那么该技术方案是优选的。

本发明的另一个优选特征在于：为了通过本发明所述的渗透剂以无创伤 方式施用皮质类固醇，如果需要所述的皮质类固醇在例如包括全身体在内的 深皮下组织如肌肉或关节、组织或者远端组织产生治疗作用，那么将由每单 位面积施用的渗透剂总干重所表示的面积剂量选择为0.1mgcm-2-15mg cm-2、优选0.5mgcm-2-10mgcm-2、特别优选0.75mgcm-2-5mgcm-2， 且最优选1mgcm-2-2.5mgcm-2。

另外，如果为了通过本发明所述的渗透剂以无创伤方式施用皮质类固 醇，那么为获得主要局部治疗作用、即浅层治疗作用而非全身治疗作用，将 由每单位面积施用的渗透剂总干重所表示的面积剂量选择为1μgcm-2-250 μgcm-2、优选2.5μgcm-2-100μgcm-2、更优选5μgcm-2-50μgcm-2，且 最优选7.5μgcm-2-20μgcm-2。

如果以无创伤方式施用与本发明所述的渗透剂结合或包裹入本发明渗透 剂的皮质类固醇，那么有利的是通过喷雾、涂抹、滚动或用海绵擦拭施用在 施用区域上且特别是通过使用喷雾器、spender、滚柱或海绵来完成上述步 骤。

本发明制剂的优选用途是用于治疗炎症疾病、皮肤病、肾衰或肝衰、肾 上腺功能不全、抽吸综合征、贝赫切特综合征、咬伤和螫伤、诸如冷血细胞 凝集素疾病、溶血性贫血、嗜酸细胞增多症、发育不全性贫血、巨球蛋白血 症、血小板减少性紫癜(trombocytopenic purpura)这样的血液病；此外，用 于控制骨疾病、脑水肿、科根综合征、先天性肾上腺增生、诸如苔藓、皮肤 红斑狼疮、多肌痛风湿病、多肌炎和皮肌炎这样的结缔组织疾病、癫痫、诸 如白内障、格雷夫斯眼病、血管瘤、疱疹感染、神经病变、视网膜血管炎、 巩膜炎这样的眼部疾病；用于某些诸如肠炎病、恶心和食管损伤这样的胃肠 道疾病；用于血钙过多、例如眼部感染(诸如传染性单核细胞增多症)这样 的感染；用于川崎病、重症肌无力、诸如带状疱疹后神经痛这样的各种疼痛 综合征；用于多神经病、胰腺炎、诸如哮喘这样的呼吸疾病；用于控制类风 湿性疾病和骨关节炎、鼻炎、结节病、诸如脱发、湿疹、多形红斑、苔藓、 天疱疮和类天疱疮、银屑病、坏疽性脓皮病、荨麻疹这样的皮肤病、甲状腺 疾病和血管疾病。

下列实施例和附图所示的体外和体内研究结果应用来说明本发明的范围 但不用来设定或描述其限定范围。

实施例1-4：

组成：

73.2mg，64.5mg，54.8mg，37.7mg  大豆磷脂酰胆碱(SPC)

26.8mg，35.5mg，45.2mg，62.3mg  聚山梨醇酯(Tween 80)

1mg/g                           醋酸曲安缩松

899mg                           磷酸盐缓冲液(10mM，pH6.5)

制备方法：

将不同的SPC和醋酸曲安缩松的用量(如上所述)溶于50mL氯仿和 50mL甲醇。在氮气流中将保温(约40摄氏度)的溶剂蒸发并在室温下将残 余物真空干燥。将特定用量的Tween80和磷酸盐缓冲液加入脂类薄膜上并将 所得的粗混悬液进行超声处理以便制备较小的混合型脂类小泡。所得的混悬 液应是乳白色和淡黄色的，需要将其进行几分钟的超声处理并使其稳定至少 1天。在制备完成后的24小时内使用测试样品。

生物和/或特性实验：

使用该混悬液和所有下列混悬液进行如下所述的操作。

实施例4-5：

组成：

37.74mg     大豆磷脂酰胆碱(SPC)

62.26mg     Tween 80

0.4mg       醋酸曲安缩松

26.25mg     苄醇

4.47g       50mM磷酸盐缓冲液，pH6.5

0.3mg       丙丁酚

0.3mg       甲磺酸去铁胺

制备方法：

将SPC、丙丁酚和醋酸曲安缩松溶于氯仿/甲醇混合物。如实施例1所 述制备干燥的脂类混合物。将甲磺酸去铁胺、Tween80和894.23mg缓冲液 加入到干燥脂类中。将所得的混悬液搅拌过夜。如果如此进行选择，那么在 向该混悬液中加入26.25mg苄醇在3.58g缓冲液中的溶液后，将该混合物压 过200nm的聚碳酸膜且然后使用足以超过得到可接受流速的压力压过 50nm的膜。所得的颗粒直径低于150nm。

实施例6：

组成：

37.74mg    SPC

62.26mg    Tween80

35mg       乙醇

0.4mg      醋酸曲安缩松

26.25mg    苄醇

4.47g      磷酸盐缓冲液(50mM，pH6.5)

0.3mg      丙丁酚

0.3mg      甲磺酸去铁胺

制备方法：

将SPC、丙丁酚和醋酸曲安缩松溶于乙醇。加入甲磺酸去铁胺、Tween 80、5.25mg苄醇和894.23mg缓冲液。将所得的混悬液搅拌过夜。第2天向 该混悬液中加入21mg苄醇溶于3.58g缓冲液所得到的溶液。将该混悬液第一 次压过200nm孔的聚碳酸酯膜且然后压过50nm的膜。这使颗粒半径在60nm 左右。

通过HPLS对制剂稳定性的分析提示丙丁酚和甲磺酸去铁胺的存在有利 于混悬液的化学稳定性。

实施例7-14：

组成：

88.1g，87.4g，86.6g，85.75g    大豆磷脂酰胆碱(SPC)

11.9g，12.6g，13.4g，14.25g    胆酸钠(NaChol)

80g                            乙醇

0.5g                           醋酸曲安缩松

加至1000g                      磷酸盐缓冲液(pH 7.1)

制备方法：

将SPC和醋酸曲安缩松溶于乙醇，另外向其中加入NaChol(仅部分溶 解)。在加入缓冲液后，将所得的混浊发白的混悬液搅拌过夜。为了得到最终 大小的小泡，将该混悬液：在压力下压过200nm的膜且然后压过100nm的膜；

2)通过高压匀化器(以低压范围例如以200psi运转)处理而得到乳白色的 最终混悬液。

通过用缓冲液(含有0.5V-％苄醇)将该混悬液分别稀释成5重量％和2 重量％的最终总脂浓度而由如上所述制备的制备物来制备两种可选择的制 剂。

实施例15-49：

组成：

377.4mg                 大豆磷脂酰胆碱(SPC)

622.6mg                 Tween 80

50mg                    苄醇

9000mg                  50mM磷酸盐缓冲液，pH6.5

a)12.5mg，25mg，50mg    倍他米松

b)12.5mg，25mg，50mg    二丙酸倍他米松

c)12.5mg，25mg，50mg    17-戊酸倍他米松

d)12.5mg，25mg，50mg    17-丙酸氟氯美松

e)12.5mg，25mg，50mg    地塞米松或

f)25mg，50mg，75mg      氢化可的松

g)12.5mg，25mg，50mg    泼尼卡酯

h)0.75mg，12.5mg，25mg  去炎松

制备方法：

将SPC和所选择的皮质类固醇溶于乙醇。在加入也含有Tween80和苄 醇的缓冲液后，将所得的高度混浊的混悬液剧烈混合至少24小时且更优选 剧烈混合几天。然后将该混悬液压过200nm的膜，如果需要则重复几次。所 得的仍然相对较大的小泡混悬液倾向于随时间沉淀，不过，可以通过涡旋或 另一种缓慢混合的方法方便地将其重新匀化。为了得到具有较小最终大小的 小泡和由此更为稳定的混悬液，将其最终压过100nm的膜是有用的。(具有 给出的最高药物浓度的小泡可以含有一定的混悬液形式的药物、可能是小泡 包裹的药物结晶形式。)

实施例50：

组成：

347mg     大豆磷脂酰胆碱(SPC)

623mg     Tween 80

30mg      十二烷基硫酸钠(SDS)

50mg      苄醇

9000mg    50mM磷酸盐缓冲液，pH6.5

25mg      17-丙酸氟氯美松

制备方法：

除加入溶于缓冲液的SDS以便在靶器官内起药物分布促进剂的作用 外，如上述实施例中所述制备皮质类固醇混悬液。

在人体皮肤变白试验中，含有SDS的制剂明显比不含SDS的制剂起作 用更为迅速。

下文描述了使用以高度适用的活性剂载体即几种皮质类固醇的高度适 用的和柔顺性的脂类小泡(转运体(TransfersomesTM)；参照上文引用的参考文 献)为基础的含水洗剂样制剂在体外和体内进行的某些前期临床实验。已经 证实在单独施用转运体(Transfersomes)形式的活性剂后，这些新型的以载体 为基础的制剂可在皮肤中产生所需的药物浓度。根据所用的载体的量的不 同，定位(皮内)或局部和系统性(全身)转运是可能的。

皮质类固醇转运的新概念可将使用这类药物的局部疗法的不良副作用 的危害降低。这因剂量降低和不同的药物转运机理而是可能的：转运体形式 的皮质类固醇因起阻止作用的较大的载体大小而不能够直接透过血管。这类 药物由此被限制在胞内空间，其中它们可以产生其所需的生物功能。(仅当 以大量施用它们时，这类治疗剂才可以首先通过淋巴管且然后通过血液循环 分布到全身。)

在动物体和人体中测定的数据提示；如果将几种广泛使用的皮质类固 醇以转运体的混悬液形式涂布在皮肤上，那么基本上可以防止它们达到血 液。可以认为这种现象依赖于使药物载体通过皮肤渗透屏障的极高的转运 体膜可变形性。在渗透过程和内渗排除过程中的良好控制能够基本上将转 运体皮质类固醇的生物作用仅限制在接近受治疗的皮肤上。由乳剂/洗剂或 转运体中的皮质类固醇诱发的不同血管收缩间接地支持了这一结论。高度 可变形载体的应用将皮质类固醇的功效比以前的商品制剂提高到一个数 量级。这一事实还改善了成品药物的安全性。(在总施用药物量达到血液中固 有的氢化可的松的量之前，转运体介导的地塞米松或醋酸曲安缩松在受治疗 的皮肤表面的成功治疗所需的剂量面积必须达到1.5m2。)

体外透入研究

各种药物和药物载体制剂通过人工转运屏障的不同透入能力清楚地证明 了超可变形性转运体相对于例如标准脂质体的优点。尽管后者几乎完全不能 通过这类人工‘皮肤屏障’，但是转运体基本上可以无阻碍地通过这类屏障中 的细小的通道。下列表解释了这种性能。

表1：装载皮质类固醇的转运体、脂质体和胶囊透入孔的能力(相对于 水)小于静压影响下的渗透剂大小3-4倍。a)

          制剂   低压(0.2MPa)   高压(0.9MPa) 胶囊     1.1±0.1     1.1±0.1 脂质体     ≤0.0001     ≤0.001 转运体     ≤0.001     1±0.1 含氢化可的松的脂质体     ≤0.0001     ≤0.001 含氢化可的松的转运体     ≤0.001     1.1±0.1 含地塞米松的转运体     ≤0.001     1.1±0.1 含醋酸曲安缩松的转运体     ≤0.001     1.1±0.1

a)人工屏障由通过100nm直径孔开孔的聚碳酸酯膜组成。脂质体和转运体具 有可比拟的大小。所述的转运功效相当于在相同条件下(分别通过HPLC和 重量法)测定的聚集物与水转运比率之比。

当施用于完整皮肤表面上时，磷脂混悬液对皮肤无害。相反，据报导某 些磷脂制剂可改善老龄化皮肤的水合作用(且由此对视觉外观的影响程度较 小)。磷脂混悬液对皮肤也没有刺激性，其至少有30％达到降解。

通常按照含有可与经非肠道(≤75mg/注射)或口服(≤150mg/天)使用 相比拟的脂类量的用量来使用以转运体为基础的皮质类固醇制剂。就人体应 用而言，建议的转运体皮质类固醇的每日剂量相对较低(≤25mg)，而氢化 可的松除外；其中对于全身疗法来说可能需要的剂量稍高。

涂抹在皮肤上以转运体为基础的皮质类固醇制剂剂型中的总磷脂量总是 低于0.5g/天。它还低于平均健康人血浆中磷脂酰胆碱浓度天然可变性的10 ％。根据下面给出的这些数据，可以根据载体观点推断以转运体为基础的皮 质类固醇皮肤用药是一种极其安全的产品。

根据活性剂的观点，局部施用可与身体内产生的皮质类固醇量(每天12- 30mg氢化可的松)相比拟的最大皮质类固醇用量(就地塞米松或醋酸曲安缩 松而言为1mg/天且就氢化可的松而言低于20mg)。分别就高效和低效药物而 言，面积剂量通常在0.1μgcm-2-1μgcm-2。然而，正如从下表中可以观察 到的，仅表皮下用药物的微量部分能够出现在循环中。

表2：小鼠(测定的)和人(计算的)的血液和‘内皮’中皮质类固醇 浓度的比例。

  剂量(μg   cm-2)   氢化可的   松(小鼠)   氢化可的   松(人)   地塞米松   (小鼠)   地塞米松   (人)   醋酸曲安   缩松(小鼠)   醋酸曲安缩   松(人)   0.5   0   0   0   0   1.3   0.02   0.00007   4.9   0.012   0.000004   0.1   0.00003   13.2   0.04   0.00011   20.6   0.03   0.0001   49.5   0.015   0.000005   0.25   0.00009

因此，可以预计以转运体为基础的皮质类固醇比目前这类药物的市售制 剂的副作用低(即使有的话)。一方面，这是由于来自集中在受治疗组织的转 运体的更为有利的药物生物分布所导致的。另一方面，来自载体的药物能够 被属于皮质类固醇疗法主要天然靶物之一的强力增生的细胞吸收相对较高的 比例。(甚至可能极低剂量的转运体的皮质类固醇就可消除重复使用这类治疗 剂后皮肤萎缩的问题。)

就评价转运体的皮质类固醇的实用价值而言，甚至更为相关的是在下列 部分中描述的经验证的动物试验中获得的结果。

临床前期研究

本研究中所用的所有物质均为药用级。大豆磷脂酰胆碱(SPC)商购自 Lipoid KG(Ludwigshafen，德国)或Nattermann Phospholipids-Rhone-Polenc Rorer(K ln，德国)且纯度为95％以上。在上述引用的欧洲专利中具体描 述的剩余成分来自Henkel(Duüsseldorf，德国)或CPC(Hamburg，德国)。 活性组分(地塞米松、氢化可的松、醋酸曲安缩松)商购自Synopharm (Hamburg，德国)。杀菌剂、螯合剂(chellators)和抗氧化剂来自Ciba-Geigy (Basel，瑞士)或Synopharm。注射用等级的双蒸水商购自当地药房。将来 自当地药房的商品药物制剂用作对照(氢化可的松：Hydrocortisone-Wolff (Wolff，Bielefeld)；地塞米松：Anemul(Pharmasal，Gr felfing)；醋酸曲 安缩松：Volon A Lotio N(Squibb-Hayden，München)和Delphicort-霜 (Lederle，Wolfrashausen)))。

载体(转运体)混悬液形式的药物。用商购自Amersham或ICN的氚化 皮质类固醇标记生物分布研究中所用的制剂。通过以适当量将所有脂类溶于 甲醇/氯仿(1/1 v/v)并在真空中制备干燥混合型脂类薄膜来制备用于动物 的制剂(≤10Pa；≥12小时)。在制备人用药物的过程中完全避免有潜在危害的 有机溶剂的应用或干燥。

制剂含有0.01重量％-0.5重量％的特定皮质类固醇/mL载体混悬液。 后者主要由终浓度为0.5重量％-5重量％的磷脂酰胆碱(SPC)组成。将 这种脂类溶于缓冲液并匀化(对于动物实验来说：在4℃下用钛微小管头 (Heat Systems W 380，美国)超声处理30分钟；对于人体疗法来说，通过 其它机械方式进行)。至少一种载体成分的特征在于其膜的加溶量，而它正是 Transfersome设计的基本原理和上述申请人引用的专利申请中所需要的。始 终将这类影响膜(embrane)的物质以亚溶解浓度混入载体。它可确保载体 的高可变性而不会危害Transfersome小泡的完整性，这是因为两者对于药物 载体通过角质层高效转运来说是必需的。使用光子关联能谱法(90°，ALV- 5000 ALV-Laser Vertriebsgesellschaft，Langen，德国)测定最终小泡的大小且它 一般在100nm-200nm。为了实验用途，如果合适，将脂类混悬液稀释。分 别给出了更为具体的描述和特征数据。

体内实验主要包括保持在标准实验室条件下的8-12周龄NMRI小鼠 (3-5只/悬挂式笼、标准的随意饮食和饮水、12小时光照/黑暗方案)。在 一般性注射麻醉药的条件下进行应激或疼痛操作。

生物分布。在实验前1天用一把剪刀将选择的皮肤部位上的毛发剪成 ≤2mm长。将上背侧上的准确施用部位标记并用微量移液管将适当量(0.5μL -25μL)的药物制剂施用在该皮肤上。用相同移液管头一侧使分布均匀后， 使施用的药物制剂干燥。

用玻璃毛细管从尾端取血样(20μL)。8小时后，通过心脏穿刺处死动物 并破坏经处理的皮肤区域并谨慎切开。通过5次胶带剥离收集角质层的最外 层。随后，制备残余的皮肤组织和其它器官样品、将其脱色并用于放射性计 数。

对于使用猪皮肤进行的实验来说，将20×30cm2的完整厚度的器官切开 并固定在湿组织上。然后标记1cm2的几个测试区域并进一步如体内部分中所 述进行处理。

最常见的是通过测定对因局部给予皮质类固醇而以化学方式诱发的水 肿的抑制作用来测试小鼠体内的生物作用。为了这一目的，首先通过腹膜内 注射10μLg-1体重的含有6mL0.9％NaCl、1mL Ketavet100(Parke-Davis， Berlin，FRG)和0.25mL Rompun(Bayer，Leverkusen，德国)的混合物使试验 动物麻醉。在一只耳的内侧涂抹适当量的药物制剂并使其干燥。此时，用棉 拭子从耳部擦去表面的制剂。在给定的时间麻醉试验小鼠并将花生四烯酸的 乙醇溶液(1/2 V/V，10\muL)施用在相同的耳部区域。通过用千分尺测量耳 的厚度(我们的方法)或通过称重处死小鼠的耳(原始方法)来确定小鼠耳 部水肿的改变情况(相对于未治疗但受攻击的小鼠耳部水肿的改变情况而 言)。这些测定试验产生了类似的结果。所有数值均为至少3次独立测定值 的平均值且误差带得到了这些平均值的标准差。

人体研究

按照科学文献的要求，通常通过所谓的‘皮肤变白’试验来测试不同皮 质类固醇制剂在人体中的生物功效。如果这类试验因下面给出的原因而用于 测试相应的药物溶液，那么它并不适用于研究以载体为基础的皮质类固醇。 尽管如此，还是将局部血管收缩试验用于比较皮质类固醇对啮齿动物和人体 皮肤的作用的动力学特性。

在由三人志愿者组成的试验中，以不同剂量将测试用制剂施用在并列一 排的一侧臂上。通过使用高精度微量吸移管涂布各自1cm2的区域。然后通过 外观检查确定这些各皮肤区域内血管收缩的情况(至少由不了解药物施用方 式的独立观察者确定至少一次)并根据充分确定的方角或边缘的数量来确定 皮肤变白的评分。

当与鼠皮肤比较时，证实人体皮肤对局部给药转运体形式的皮质类固醇 有相似的反应：在约7小时后，血管收缩(皮肤变白)作用达到其最大值的 50％且在t≥8小时时达到饱和值。观察到高生物活性持续了至少32小时，最 终在36小时-48小时内观察到下降至50％的水平，条件是所给药的药物剂 量在1μgcm-2左右(图4)。

在局部给药商品乳剂形式的醋酸曲安缩松后观察到了皮肤变白的相似 进展，但并不是在药物剂量超过1μgcm-2之前。在施用乳剂后早期(8≤时间 /小时≤16)的皮肤苍白(palor)较深(较白)且看起来比皮质类固醇-转运体- 介导的血管收缩的情况快。在我们的意见中，这是由于与Transfersome相关 的药物进入毛细血管的能力受到限制所导致的。在商品制剂形式的药物中并 未遇到这种现象，这些商品制剂形式的药物以单体(或至少是解离的)形式 通过皮肤扩散并位于皮肤上。它说明了(所需)抑制水肿作用快速发作和血 管收缩延缓(十分不需要)，这是药物溢出进入血液循环的标志。(转运体- 介导的水肿抑制作用的相对钝化表现也是由于一个受试人的反应性较差所 导致的，该受试者对转运体形式的药物的反应较慢且对低剂量的商品乳剂完 全没有反应，在药物的平均作用时间过程中没有观察到后者缺乏作用。)

结果

来自有代表性实验的结果如附图中所示。

附图1中的上组说明了商品乳剂(空心符号)形式和高度适合的脂类小 泡(转运体)(实心符号)形式的氢化可的松的抑制水肿的生物活性。数据 得出了从3-4只动物测定的平均值且误差带代表相应的标准差。

图1的下组表示局部水肿抑制试验中评价的商品乳剂形式(空心符号) 和转运体混悬液形式(实心符号)的氢化可的松在16小时作用后剂量与作 用的关系。(因作用动力学的剂量依赖性得到剂量最大值与作用关系的曲线 (另外参见附图2)。)

从附图1中可以观察到：以转运体(TransfersomesTM)为基础的氢化可的 松制剂的生物作用显著超过含有类似药物的更常用的乳剂样制剂-单位面 积上给予的药物剂量越低，则产生的治疗有效性越高。这些数据提示能够制 备并以极佳商业前景销售(水)洗剂样的含有0.1％药物的氢化可的松制剂。 这种从未有过的低含量活性剂可以减少副作用的危害。

图2中的上组说明了商品乳剂形式(空心符号)或转运体形式(实心符 号)的地塞米松对花生四烯酸诱发的水肿的抑制作用作为对整体鼠皮肤给药 后时间的函数。在两种情况中，在给药8小时后从施用部位上擦去过量的药 物。

下组表示单位面积剂量的改变对地塞米松介导的对鼠耳模型皮肤水肿的 抑制作用的影响。(不同的符号产生来自不同实验系列的结果；进一步的具体 内容参见附图1。)

从图2中的结果显然可以看出：当对受攻击的皮肤进行局部测试时，地 塞米松因其较高的内在功效而产生远强于氢化可的松生物作用。将地塞米松 混入超可变性活性剂载体转运体这一过程进一步改善了这种治疗优势。当将 过量药物从受治疗的皮肤部位上除去时，使用转运体的有益效果是最明显的 (正如实际期限中所示)。预计仅含有0.02％地塞米松(‘强’)或含有0.005 ％左右地塞米松(‘缓和’)的转运体形式药物制剂是合适的皮肤治疗作用所 必需的。

图3中的上组说明了商品洗剂形式(空心符号)或转运体形式(实心符 号)的醋酸曲安缩松在鼠耳模型中的抗水肿生物活性，而下组表示施用在完 整鼠皮肤上的转运体形式的醋酸曲安缩松(实心符号，两种不同制剂和试验 系列)、商品乳剂(空心方块)形式的醋酸曲安缩松或商品洗剂(空心圆圈) 形式的醋酸曲安缩松的剂量与作用关系曲线。

商品形式的醋酸曲安缩松的生物功效由此低于转运体混悬液形式的药物 的生物功效10倍。后者还将治疗作用的期限延长了同样的数量级。与转运体 地塞米松相比，超可变性活性剂载体中的醋酸曲安缩松产生了稍强而持续作 用中等偏下的生物功能。以转运体为基础的商品制剂的预测药物浓度为0.005 ％-0.02％。

图4表示在表皮给药转运体(上组)或商品乳剂(下组)形式醋酸曲安 缩松后完整人体皮肤中的血管收缩(变白试验)作为时间的函数。

由此可以看出以转运体形式使用的高效皮质类固醇对人体皮肤的‘治疗 作用’显著优于常用醋酸曲安缩松乳剂的治疗作用。用转运体单独局部给药 可确保良好的生物功能持续1天以上，剂量为1μgcm-2。当商品乳剂使‘深 度变白’的期限相当短时，以转运体为基础的制剂介导逐步递增和长期的表 浅的血管收缩。这表示药物从以载体为基础的制剂中溢出而进入循环的量减 少(另外参见下两页上的图)。

在图5中，表示哺乳动物皮肤中不同药物的渗透分布。在小鼠体内(左 侧组)和猪皮肤内(右侧组)测定数据。空心符号代表使用商品乳剂的测定 值，而实心符号代表使用装载地塞米松的转运体的混悬液的测定值。

用于携带皮质类固醇的转运体在皮肤中的应用使药物在皮肤中的渗透分 布变得平缓。当与使用类似药物的商品制剂获得的结果进行比较时，相对药 物浓度在较深的皮肤区域中增加。

图6说明借助于转运体在完整表面上给药后皮质类固醇在皮肤中的累积 量(保留量)。(和△相当于皮肤内部和外部区域且◇是它们的总和。)

结果是转运体使经表皮内给药入存活皮肤中的比例相对较高。

图7说明使用转运体将皮质类固醇经皮输送入全身循环的情况。

全身输送要求选择合适的最佳活性剂载体(良好的转运体)以及合适的 单位面积剂量。减少单位面积剂量可提高表皮用载体给药部位上的相对药物 浓度。

在图8中，表示了通过鼠耳水肿试验测试的各种醋酸曲安缩松制剂的相 对功效。比较装填该药物的两种不同类型的转运体(上组)、商品乳剂(下组) 和常用脂质体(下组)的生物活性。后两组数据甚至在0.1等级上也没有统 计学上的显著性差异。

为了使皮内药物转运的功效达到最大限度并获得良好的生物作用，必需 使用特别最佳化的有专利权的活性剂载体，即转运体。用简单的常用脂质体 产品取代这类高可变性转运体产生了并不优于使用商品乳剂(或洗剂)获得 的结果。