技术领域
[0001] 本
发明涉及一种多糖的提取方法，具体涉及一种从螳螂中提取多糖的方法。背景技术：
[0002] 学名螳螂，亦称刀螂，无
脊椎动物，属肉食性昆虫。
[0003] 螳螂多糖由于含有吸
电子基团，因此具有较高的还原能
力，主要表现为对DPPH自由基有较高的清除能力，同时对其他自由基也有不低的清除率。而针对受到自由基
氧化损伤的细胞，螳螂多糖能通过对该损伤细胞进行保护，进而有效增加损伤细胞的存活率。
[0004] 多糖是由糖苷键结合的糖链，一般不溶于
水，但可以通过
水解最终得到可溶性小分支多糖，也可以通过
有机溶剂进行提取。自然中天然多糖多存在于
植物与昆虫的
支撑结构或是作为
生物体的
能源贮备以及充当其他特殊功能的活性组分。昆虫中提取的多糖大多为壳多糖，起支撑作用，且性质较为稳定。虽然昆虫多糖提取难度较大，但由于其
稳定性，因此其具有优越的保湿性能与保护细胞的性能。
[0005] 而关于螳螂成分提取，尤其是螳螂多糖的提取方面的技术尚未见报道。发明内容：
[0006] 本发明的目的在于，提供一种从螳螂中提取多糖的方法，以解决上述技术问题。本发明通过从螳螂中提取多糖，达到充分利用自然资源的目的。
[0007] 为实现上述目的，本发明提供如下方案：
[0008] 本发明提供一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0009] (1)将螳螂洗净烘干，用中药
粉碎机对螳螂进行粉碎，过45～60目筛，得到螳螂干粉；
[0010] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：(5～8)加入乙醚，在室温下浸泡4～6h，过滤，滤液经
旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于50～55℃下干燥备用；
[0011] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：10～20加入稀
碱液，恒温水浴提取3～5h，重复3次，过滤，合并滤液，再加入HCl将滤液的PH调至中性，离心，收集上清液；
[0012] (4)将步骤(3)收集的上清液经
真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/(4～6)，得到浓缩液；
[0013] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入5～8倍体积的80～95％
乙醇，缓慢搅拌后，放置恒温箱中静置过夜，次日离心收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤2～3次，即得粗多糖；
[0014] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入8～12倍的去离子水，加入适量的生物
碳沉淀1～2d后，过滤，收集滤液；
[0015] (7)将步骤(6)收集的滤液用
透析膜透析1～3d后，过滤，
冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0016] 进一步的，所述步骤(3)加入的稀碱液为0.1mol/L的NaOH。
[0017] 进一步的，所述步骤(3)中离心条件：转速为3500～5000r/min，时间为15～20分钟。
[0018] 进一步的，所述步骤(4)中浓缩条件：真空度为0.6～0.8MPa，
温度为45～50℃。
[0019] 进一步的，所述步骤(5)中恒温箱的温度为3～5℃，离心条件：转速为3000～4500r/min，时间为15～25min。
[0020] 进一步的，所述步骤(7)中透析膜的截止分子量为9000～12000。
[0021] 进一步的，所述螳螂多糖还可以应用于
饲料中。
[0022] 进一步的，所述螳螂多糖可以用于制备
鸟饲料。
[0023] 进一步的，本发明还提供一种鸟饲料，包括以下重量份的组分：谷子15～30份，稗子15～20份，黄粉虫5～15份，玉米粒10～15份，螳螂多糖1～3份，鸡蛋壳0.5～1.5份，砂砾0.1～1份，松子仁1～5份，花生仁1～3份，胡萝卜1～5份，苜蓿多糖1～3份。
[0024] 与
现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
[0025] (1)本发明通过采用碱法对细胞进行破壁处理，进而促进螳螂多糖的游离，提高螳螂多糖的提取率；
[0026] (2)本发明通过透析法进行过滤，能得到纯度比传统过滤更高的螳螂多糖，此外还通过使用具有多孔结构的
生物炭，在过滤过程中对色素及其他杂质进行
吸附，进一步提高螳螂多糖的纯度；
[0027] (3)本发明还进一步提供了应用于鸟饲料的配方，具有显著提高免疫力的功能。
具体实施方式
[0028] 下面结合具体
实施例对本发明做进一步的详细说明。
[0029] 实施例1
[0030] 一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0031] (1)将螳螂洗净烘干，用中药粉碎机对螳螂进行粉碎，过50目筛，得到螳螂干粉；
[0032] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：6.5加入乙醚，在室温下浸泡5h，过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于53℃下干燥备用；
[0033] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：15加入0.1mol/L的NaOH，恒温水浴提取4h，重复3次，过滤，合并滤液，再加入HCl将滤液的PH调至中性，离心转速为4500r/min，时间为18分钟，收集上清液；
[0034] (4)将步骤(3)收集的上清液在真空度为0.7MPa，48℃真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液；
[0035] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入6.5倍体积的90％乙醇，缓慢搅拌后，放置4℃恒温箱中静置过夜，次日4000r/min离心20min，收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤3次，即得粗多糖；
[0036] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入10倍的去离子水，加入适量的生物碳沉淀1.5d后，过滤，收集滤液；
[0037] (7)将步骤(6)收集的滤液用分子量为10000的透析膜透析2d后，过滤，冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0038] 实施例2
[0039] 一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0040] (1)将螳螂洗净烘干，用中药粉碎机对螳螂进行粉碎，过45目筛，得到螳螂干粉；
[0041] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：5加入乙醚，在室温下浸泡4h，过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于50℃下干燥备用；
[0042] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：10加入0.1mol/L的NaOH，恒温水浴提取3h，重复3次，过滤，合并滤液，再加入HCl将滤液的PH调至中性，离心转速为3500r/min，时间为15分钟，收集上清液；
[0043] (4)将步骤(3)收集的上清液在真空度为0.6MPa，45℃真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/5，得到浓缩液；
[0044] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入5倍体积的80％乙醇，缓慢搅拌后，放置3℃恒温箱中静置过夜，次日3000r/min离心15min，收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤2次，即得粗多糖；
[0045] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入8倍的去离子水，加入适量的生物碳沉淀1d后，过滤，收集滤液；
[0046] (7)将步骤(6)收集的滤液用分子量为9000的透析膜透析1d后，过滤，冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0047] 实施例3
[0048] 一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0049] (1)将螳螂洗净烘干，用中药粉碎机对螳螂进行粉碎，过60目筛，得到螳螂干粉；
[0050] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：8加入乙醚，在室温下浸泡6h，过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于55℃下干燥备用；
[0051] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：20加入0.1mol/L的NaOH，恒温水浴提取5h，重复3次，过滤，合并滤液，再加入HCl将滤液的PH调至中性，离心转速为5000r/min，时间为20分钟，收集上清液；
[0052] (4)将步骤(3)收集的上清液在真空度为0.8MPa，50℃真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/6，得到浓缩液；
[0053] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入8倍体积的95％乙醇，缓慢搅拌后，放置5℃恒温箱中静置过夜，次日4500r/min离心25min，收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤3次，即得粗多糖；
[0054] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入12倍的去离子水，加入适量的生物碳沉淀2d后，过滤，收集滤液；
[0055] (7)将步骤(6)收集的滤液用分子量为12000的透析膜透析3d后，过滤，冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0056] 实施例4
[0057] 一种鸟饲料，包括以下重量份的组分：谷子30份，稗子15份，黄粉虫5份，玉米粒15份，螳螂多糖1份，鸡蛋壳1.5份，砂砾0.1份，松子仁1份，花生仁3份，胡萝卜1份，苜蓿多糖3份。
[0058] 实施例5
[0059] 一种鸟饲料，包括以下重量份的组分：谷子30份，稗子15份，黄粉虫15份，玉米粒10份，螳螂多糖3份，鸡蛋壳0.5份，砂砾1份，松子仁5份，花生仁3份，胡萝卜5份，苜蓿多糖1份。
[0060] 对比例1
[0061] 一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0062] (1)将螳螂洗净烘干，用中药粉碎机对螳螂进行粉碎，过50目筛，得到螳螂干粉；
[0063] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：6.5加入乙醚，在室温下浸泡5h，过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于53℃下干燥备用；
[0064] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：15加入水，恒温水浴提取4h，重复3次，过滤，合并滤液，离心转速为4500r/min，时间为18分钟，收集上清液；
[0065] (4)将步骤(3)收集的上清液在真空度为0.7MPa，48℃真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液；
[0066] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入6.5倍体积的90％乙醇，缓慢搅拌后，放置4℃恒温箱中静置过夜，次日4000r/min离心20min，收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤3次，即得粗多糖；
[0067] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入10倍的去离子水，加入适量的生物碳沉淀1.5d后，过滤，收集滤液；
[0068] (7)将步骤(6)收集的滤液用分子量为10000的透析膜透析2d后，过滤，冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0069] 对比例2
[0070] 一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0071] (1)将螳螂洗净烘干，用中药粉碎机对螳螂进行粉碎，过50目筛，得到螳螂干粉；
[0072] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：6.5加入乙醚，在室温下浸泡5h，过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于53℃下干燥备用；
[0073] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：15加入0.1mol/L的NaOH，恒温水浴提取4h，重复3次，过滤，合并滤液，再加入HCl将滤液的PH调至中性，离心转速为4500r/min，时间为18分钟，收集上清液；
[0074] (4)将步骤(3)收集的上清液在真空度为0.7MPa，48℃真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液；
[0075] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入6.5倍体积的90％乙醇，缓慢搅拌后，放置4℃恒温箱中静置过夜，次日4000r/min离心20min，收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤3次，即得粗多糖；
[0076] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入10倍的去离子水，过滤，收集滤液；
[0077] (7)将步骤(6)收集的滤液用分子量为10000的透析膜透析2d后，过滤，冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0078] 对比例3
[0079] 一种从螳螂中提取多糖的方法，包括如下步骤：
[0080] (1)将螳螂洗净烘干，用中药粉碎机对螳螂进行粉碎，过50目筛，得到螳螂干粉；
[0081] (2)取步骤(1)的螳螂干粉，按料液比1：6.5加入乙醚，在室温下浸泡5h，过滤，滤液经旋转蒸发仪浓缩回收乙醚，将除杂后的螳螂干粉于53℃下干燥备用；
[0082] (3)取步骤(2)中除杂后的螳螂干粉，按料液比1：15加入0.1mol/L的NaOH，恒温水浴提取4h，重复3次，过滤，合并滤液，再加入HCl将滤液的PH调至中性，离心转速为4500r/min，时间为18分钟，收集上清液；
[0083] (4)将步骤(3)收集的上清液在真空度为0.7MPa，48℃真空旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/4，得到浓缩液；
[0084] (5)往步骤(4)的浓缩液中加入6.5倍体积的90％乙醇，缓慢搅拌后，放置4℃恒温箱中静置过夜，次日4000r/min离心20min，收集沉淀，再用无水乙醇对沉淀洗涤3次，即得粗多糖；
[0085] (6)往步骤(5)的粗多糖中加入10倍的去离子水，过滤，收集滤液，冷冻干燥后得到螳螂多糖。
[0086] 螳螂多糖含量评价
[0087] 为更好地证明本发明所提供的一种螳螂多糖提取方法具有优异的效果，选取实施例1、2、3与对比例1、2、3的提取方法分别提取螳螂多糖，对螳螂多糖含量进行下表所述测定。
[0088] 表1：实施例1-3和对比例1-3的性能测试结果：
[0089]
[0090] 结果表明：
[0091] 从表1中可以看出，由本发明的螳螂多糖提取方法所提取出来的螳螂多糖含量均较高，且优于对比例。未采用碱法对螳螂进行细胞破壁处理的对比例1与实施例1相比，螳螂多糖含量明显较低，表明碱法处理能够有较好的提取效果，可以帮助螳螂多糖的提，从而达到更好的提取效率；未使用生物炭进行处理的实施例2与对比例1相比，螳螂多糖的纯度明显较低，表明使用具有多孔结构的生物炭，在过滤过程中对色素及其他杂质进行吸附，能够进一步提高螳螂多糖的纯度；未使用生物炭处理也未通过透析法进行过滤的实施例3与对比例1相比，螳螂多糖的纯度明显低，表明使用生物炭在过滤过程中能够对其他杂质进行吸附，同时用透析法进行过滤，能够明显提高螳螂多糖提取的纯度。
[0092] 上面以举例方式对本发明进行了说明，但本发明不限于上述具体实施例，凡基于本发明所做的任何改动或变型均属于本发明要求保护的范围。
