技术领域
[0001] 本
发明涉及中药技术领域，尤其涉及山羊角的鉴定方法。
背景技术
[0002] 山羊角为
牛科动物山羊的角，宰杀山羊时，锯取其角，晒干可得。山羊角在中药材中的形态呈扭曲长圆锥形，一边凸起，较厚，一边略平，长10～30cm，角基直径3～7cm，表面棕色、棕黑色或淡棕色，先端具纵纹或纵裂纹。自基部向上有7～15个较密集的波状环脊，脊间距约0.5cm。基部切面类长卵形，无角塞，质坚硬，气微腥，味淡。
[0003]
现有技术中，山羊角的鉴定方式为具有经验的中药师通过人工观察品闻后与上述性状比对，缺乏客观的鉴定方法。
发明内容
[0004] 本发明的主要目的在于提供一种山羊角的鉴定方法，通过该鉴定方法能够对山羊角进行客观鉴定，提高山羊角鉴定结果的准确性。
[0005] 为实现本发明的目的，本发明提供的山羊角的鉴定方法包括如下步骤：
[0006] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.25-1.0g，加
有机溶剂10-40mL，提取处理后，过滤，滤液浓缩至2mL；
[0007] 对照品溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.25-1.0g，加
有机溶剂10-40mL，提取处理后，过滤，滤液浓缩至2mL；
[0008] 薄层色谱鉴定：吸取所述供试品溶液和所述对照品溶液各2-25μL，分别点于同一薄层色谱板上，以环己烷-乙酸乙酯体积比4:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以
显色剂10％
硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置紫外光下检视，所述供试品溶液的色谱与所述对照品溶液色谱相应的
位置上，显相同
颜色的
荧光斑点时，判定所述供试品含有山羊角。
[0009] 优选地，所述山羊角的鉴定方法包括以下步骤：
[0010] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.3-0.7g，加有机溶剂15-30mL，提取处理后，过滤，滤液浓缩至2mL；
[0011] 对照品溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.3-0.7g，加有机溶剂15-30mL，提取处理后，过滤，滤液浓缩至2mL；
[0012] 薄层色谱鉴定：吸取所述供试品溶液和所述对照品溶液各5-20μL，分别点于同一薄层色谱板上，以环己烷-乙酸乙酯体积比4:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置紫外光下检视，所述供试品溶液的色谱与所述对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点时，判定所述供试品含有山羊角。
[0013] 优选地，所述山羊角的鉴定方法包括以下步骤：
[0014] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.5g，加有机溶剂20mL，提取处理后，过滤，滤液浓缩至2mL；
[0015] 对照品溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.5g，加有机溶剂20mL，提取处理后，过滤，滤液浓缩至2mL；
[0016] 薄层色谱鉴定：吸取所述供试品溶液和所述对照品溶液各10μL，分别点于同一薄层色谱板上，以环己烷-乙酸乙酯体积比4:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置紫外光下检视，所述供试品溶液的色谱与所述对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点时，判定所述供试品含有山羊角。
[0017] 优选地，所述有机溶剂可以是如下任一个：
[0018] 乙醚、沸程为30-60℃的石油醚以及沸程为60-90℃的石油醚。
[0019] 优选地，所述提取处理包括：
[0020] 超声提取20-60min；
[0021] 或者是，加热回流提取2-3h。
[0022] 优选地，所述供试品粉末以及所述山羊角对照药材粉末的制备方法为，将所述供试品粉末以及所述山羊角对照药材粉末分别
研磨，研磨粉末过50目筛。
[0023] 本发明
实施例提出的一种山羊角的鉴定方法，该山羊角的鉴定方法包括，制备供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液由山羊角标准品制得。将山羊角供试品溶液和对照品溶液分别取样于同一薄层色谱板上，并将薄层色谱板放置在存有展开剂的容器中展开，取出薄层色谱板晾干，喷上显示剂，加热至斑点显色清晰，在紫外光下检视，比较供试品溶液的色谱和对照品溶液的色谱中相对应的位置上的荧光斑点是否显示相同颜色，当显示颜色相同时，可得出该供试品中含有山羊角的鉴定结果。通过薄层色谱法，将供试品中的分离开的显色成分与标准的山羊角比对。由于，供试品与山羊角标准对照品的处理方法完全相同，且在同一薄层色谱板中展开显色，所以根据比对结果可以明确得出该供试品是否为山羊角，可见本发明中山羊角的鉴定方法具有操作简单、准确率高等优点。
附图说明
[0024] 图1是本发明山羊角的鉴定方法第一实施例的色谱图；
[0025] 图2是本发明山羊角的鉴定方法第六实施例的色谱图；
[0026] 图3是本发明山羊角的鉴定方法第七实施例的第一色谱图；
[0027] 图4是本发明山羊角的鉴定方法第七实施例的第二色谱图；
[0028] 图5是本发明山羊角的鉴定方法第七实施例的第三色谱图；
[0029] 图6是本发明山羊角的鉴定方法第七实施例的第四色谱图。
[0030] 本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
[0031] 应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0032] 本发明试验方法及参数：
[0033] 1、试验材料
[0034] 表1山羊角样品表
[0035]
[0037] 薄层色谱
数码相机成像系统(佳能)，普通
硅胶G预制板(德国MACHEREY-NAGEL有限公司，批号：006052，规格：200*200mm)，普通硅胶G预制板(青岛海洋化工厂分厂，批号：0130616，规格：200*200mm)，普通硅胶G预制板(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂，批号：
080603，规格：10×10cm)；环已烷，乙酸乙酯，硫酸，乙醇，二氯甲烷，正丁醇，
冰醋酸，乙醚，茚三
酮均为分析纯。
[0038] 对照药材：山羊角对照药材，经广东省科学院昆虫研究所鉴定为工作对照药材[0039] 供试品：供试品如上表1所示的序号1-5的山羊角。
[0040] 供试品粉末：将供试品研磨
粉碎后过50目筛得供试品粉末。
[0041] 山羊角对照药材粉末：将山羊角对照药材研磨粉碎后过50目筛得山羊角对照药材粉末。
[0042] 实施例一
[0043] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.5g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0044] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.5g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0045] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0046] 点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样10μL。
[0047] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0048] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0049] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0050] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0051] 色谱识别：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0052] 此外，供试品溶液的制备方法还可以是如下中其他方法：取所述供试品粉末0.5g，加乙醚20mL，加热回流2h，过滤，滤液浓缩至2mL；或者是，取所述供试品粉末0.5g，加石油醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL，其中，所述石油醚的沸程为30～60℃；或者是，取所述供试品粉末0.5g，加石油醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL，其中，所述石油醚的沸程为60～90℃。
[0053] 试验色谱图如图1所示，图中1-5分别对应表示表1中序号1-5的山羊角，6为山羊角对照药材。由图1可知，试验采用的五种不同批号的山羊角的色谱与山羊角对照药材的色谱的相应位置上显示相同颜色的斑点，且RF值较佳。因此，采用本实施例中的薄层色谱法鉴定山羊角的方法客观可行。
[0054] 实施例二
[0055] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.25g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0056] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.25g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0057] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0058] 点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样10μL。
[0059] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0060] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0061] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0062] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0063] 色谱识别：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0064] 实施例三
[0065] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.3g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0066] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.3g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0067] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0068] 点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样10μL。
[0069] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0070] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0071] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0072] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0073] 色谱识别：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0074] 实施例四
[0075] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.7g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0076] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.7g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0077] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0078] 点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样10μL。
[0079] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0080] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0081] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0082] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0083] 色谱识别：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0084] 实施例五
[0085] 供试品溶液的制备：取供试品粉末1.0g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0086] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末1.0g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0087] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0088] 点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样10μL。
[0089] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0090] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0091] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0092] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0093] 色谱识别：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0094] 实施例六
[0095] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.5g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0096] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.5g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0097] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0098] 点样：供试品溶液分别点样2、5、10、15、20、25μL，对照品溶液点样10μL。
[0099] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0100] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0101] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0102] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0103] 图2所示为本实施例的色谱图，1-5分别对应点样量为2、5、10、15、20、25μL的供试品，6点样10μL的山羊角对照药材。由图2可知，当供试品溶液点样量小于10μL时，色谱图中的荧光斑点显示不清晰，供试品溶液点样量大于或等于10μL时，色谱图中的荧光斑点显示较为清晰。导致上述现象的原因通常是由于用于薄层色谱分离的物质含量较低。然而，薄层色谱分析时，点样量过高导致溶液中物质难以分离，荧光斑点过大，相互影响色谱显示。综上可得，在本发明的山羊角的鉴定方法中最佳点样量10μL。
[0104] 实施例七
[0105] 取供试品与对照药材溶液各10μl分别于提取后的第1天、第2天、第3天、第4天点样。
[0106] 供试品溶液的制备：取供试品粉末0.5g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为供试品溶液。
[0107] 对照药材溶液的制备：取山羊角对照药材粉末0.5g，加乙醚20mL，超声处理30min，过滤，滤液浓缩至2mL作为对照品溶液。
[0108] 薄层色谱板：普通硅胶G预制板。
[0109] 点样：供试品溶液与对照品溶液分别点样10μL，其中，供试品溶液制备后第1天、第2天、第3天、第4天进行点样操作。
[0110] 展开剂：环己烷-乙酸乙酯(体积比为4:1)。
[0111] 展开方式：上行展开，展距为8cm。
[0112] 显色剂：喷10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑点清晰。
[0113] 检视：置紫外光(365nm)下。
[0114] 图3、图4、图5和图6分别为供试品溶液制备后第1天、第2天、第3天和第4天的色谱图。图3、图4、图5和图6中1-5分别对应表示表1中序号1-5的山羊角，6为山羊角对照药材。由图3、图4、图5和图6可得，在供试品溶液制备后4天内进行色谱鉴定均可显示清晰荧光斑点，因此，供试品溶液在制备后4天内物化特性稳定，即供试品溶液以及所述对照品溶液制备完成后1-4天内进行薄层色谱鉴定，鉴定结果有效。
