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唾液酸转移酶抑制剂及其用途

阅读：303发布：2020-07-02

专利汇可以提供唾液酸转移酶抑制剂及其用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且在此揭示新颖的唾液酸转移酶 抑制剂 、组合物，及其用来制备与唾液酸转移酶活化相关 疾病 和/或症状(如癌症、免疫疾病或发炎疾病)的药品的用途。，下面是唾液酸转移酶抑制剂及其用途专利的具体信息内容。

1.一种具有式(1)结构的化合物：
和
其药学上可接受盐类或其溶合物，其中，
n为1至4的整数；
A、B和C分别是6或7饱和环或未饱和碳环(carbon cyclic ring)、高内酯或高内酰胺，其中饱和或未饱和碳环、高内酯或高内酰胺可视需要而带有一或多个氟基或羟基取代基；
X1是O或N；或者是，X1是氟基，R1为不存在；
R1是选自于以下所组成的群组中：无、H、
R3是选自于以下群组中：甲基、甲氧基、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、或
R3和与其相邻的碳原子及氮原子共同形成一五员杂环；
Ra和Rb分别是H或C1-6烷基；
R2是COOH、CH(COOH)COOH或COX2(CH2CH2O)mCH2CH2N3，
X2是O或N，且m是1至4的整数；以及
Ar是选自于以下群组中：H、
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具有如式(1-1)的结构
其中，
p是1至4的整数；以及
Ar是选自于以下群组中：
3.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，在式(1-1)化合物中，p是2且Ar是
4.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，在式(1-1)化合物中，p是3且Ar是
5.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具式(1-2)的结构，
其中，
X2是O或N；和
R3是选自于以下群组中：CH3、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、
或
R3和与其相邻的碳原子及氮原子共同形成一五员杂环；
Ra和Rb分别是H或C1-6烷基。
6.如权利要求5所述的化合物，其特征在于，在式(1-2)中，X2是O、R3是RaCOOH，和Ra是H。
7.如权利要求5所述的化合物，其特征在于，在式(1-2)中，X2是N、R3是RaCOOH，且Ra是H。
8.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具有式(1-3)的结构，
其中，
R1是选自于以下群组中：
9.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具式(1-4)的结构，
其中，
是一单键或双键；
R3是选自于以下群组中：CH2OH、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、以及
Ar是选自于以下群组中：H、
10.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，该化合物具式(1-5)的结构，
其中，
R3是CH2COOH或CH2CH2COOH；以及
Ar是H、
11.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具式(1-6)的结构，
其中，
A、B和C分别是六员饱和碳环且带有至少一氟基；
X1是H、O或氟基，且当X1是氟基时，R1为不存在；
R1为不存在、H或 以及
R3是CH2COOH或
12.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具式(1-7)的结构
其中，
X3是O或N。
13.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，该化合物具式(1-8)的结构，
其中，
X4是O或N；且
R4是H或OH。
14.如权利要求所述的化合物1，其特征在于，该化合物具式(1-9)的结构，
15.如权利要求所述的化合物1，其特征在于，该式(1-1)至(1-3)化合物是一种唾液酸转移酶抑制剂，其可抑制α2,3(N)-唾液酸转移酶ST3GALIII或α2,6(N)-唾液酸转移酶ST6GALI，但无法抑制α2,3(O)-唾液酸转移酶ST3GALI。
16.一种药学组合物，包含：
一有效量的如权利要求1-15所述的化合物、其盐类或其溶合物；以及
一药学上可接受赋形剂.
17.一种治疗患有与唾液酸转移酶活化相关疾病的个体的方法，包含对该个体投予如权利要求16所述的药学组合物，以减轻或减缓该疾病的症状。
18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，该疾病是癌、发炎疾病或免疫疾病。
19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，该癌是转移性癌。
20.如权利要求18所述的方法，其特征在于，该癌是选自于以下群组中：乳癌、子宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌、黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、脑瘤、肺癌、肝癌、淋巴瘤、神经上皮瘤、肾癌、膀胱癌、胰脏癌、前列腺癌、胃癌、大肠癌、子宫癌、淋巴系造血系统肿瘤、骨髓性白血病、甲状腺癌、甲状腺滤泡癌、骨髓增生不良症候群(MDS)、原发性间叶瘤、畸胎瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、胶质母细胞瘤、角化棘皮瘤、间变性大细胞淋巴瘤、食道鳞状细胞癌、滤泡树突状细胞癌、肠癌、肌肉侵袭性癌症、精囊肿瘤、表皮癌、脾癌症、头颈部和癌症、胃癌、骨癌、视网膜癌、胆管癌、小肠癌、唾液腺癌、子宫肉瘤、睪丸癌、结缔组织癌、骨髓增生异常、华氏巨球蛋白血症、鼻咽癌、神经内分泌癌、间皮瘤、血管肉瘤、卡波西氏肉瘤、食道癌、输卵管癌、腹膜癌、浆液性乳头状苗勒氏癌、恶性腹水、胃肠道间质瘤(GIST)、李弗劳明症候群或希佩尔-林道症候群(VHL)。
21.如权利要求20所述的方法，其特征在于，该淋巴系造血系统肿瘤是白血病，急性淋巴性白血病，慢性淋巴性白血病、B细胞淋巴瘤、伯奇氏淋巴瘤、多发性骨髓瘤、何杰金氏淋巴瘤或非何杰金氏淋巴瘤。
22.如权利要求20所述的方法，其特征在于，该原发性间叶瘤是纤维肉瘤或横纹肌肉瘤。
23.如权利要求18所述的方法，其特征在于，该免疫疾病是类风湿关节炎、银屑病关节炎、全身性红斑狼疮、重症肌无力、第一型糖尿病、肾小球性肾炎、自体免疫性甲状腺炎、僵直性脊椎炎、全身性硬化症、多发性硬化症、全身性过敏、药物过敏、昆虫叮咬过敏、移植排斥反应、修格连氏症候群或人免疫缺陷病毒感染。
24.如权利要求18所述的方法，其特征在于，该发炎疾病是糖尿病视网膜病变、增殖性视网膜病变、皮肤炎、湿疹、异位性皮肤炎、过敏性接触皮肤炎、荨麻疹、坏死性血管炎、表皮血管炎、过敏性血管炎、嗜酸性肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、嗜酸性筋膜炎、克隆氏症、溃疡性结肠炎、过敏性肺炎、嗜酸细胞性肺炎、延迟性过敏反应、间质性肺病(ILD)、特发性肺纤维化、ILD相关的类风湿性关节炎、黄斑部水肿、气喘或过敏性鼻炎。
25.如权利要求17所述的方法，其特征在于，该药学组合物包含如权利要求3所述的化合物。
26.如权利要求17所述的方法，其特征在于，该药学组合物包含如权利要求4所述的化合物。
27.如权利要求17所述的方法，其特征在于，该药学组合物包含如权利要求6所述的化合物。
28.如权利要求17所述的方法，其特征在于，该药学组合物包含如权利要求7所述的化合物。

说明书全文

唾液酸转移酶抑制剂及其用途

相关发明参照

[0001] 本申请案主张2015年8月27日提出申请的美国临时申请案62/210,975的申请日，该案内容在此并入本文。

发明背景

1.技术领域
[0003] 本揭示内容大致是关于唾液酸转移酶抑制剂的领域。在此，提出多种可抑制唾液酸转移酶的化合物。此外，本揭示内容亦提供抑制唾液酸转移酶的方法，和用以治疗涉及唾液酸化的疾病和/或症状的方法。
[0004] 2.相关技艺说明
[0005] 唾液酸含有多种抗原决定位，且已知其与诸如粘附和发炎作用等多种生物过程相关。再者，肿瘤细胞的恶性程度也与糖复合物(glycoconjugate)的唾液酸化多寡有关。近年来，亦有相关研究指出，唾液酸化和淋巴球活化及免疫功能的相关联。
[0006] 合成唾液酸化糖类时，是在唾液酸转移酶的催化下，使供体(即，胞苷单磷酸-唾液酸(cytidine monophosphate(CMP)-sialic acid))上的唾液酸，转移至糖蛋白或糖脂质的近端(subterminal)糖上，上述反应可透过α2,6-键合连接至N-乙酰胺基半乳糖(N-
acetylgalactosamine，GalNAc)或N-乙酰胺基葡萄糖(N-acetylglucosamine，GlcNAc)、透过α2,3-键合连接至半乳糖(galactose，Gal)或透过α2,8-键合连接至其他唾液酸以形成多唾液酸。
[0007] 由于唾液酸转移酶可影响多种不同的生理现象(如，发炎作用和癌症进程)，因此，本领域致力于发展有效的唾液酸转移酶抑制剂。过去几年间，本领域发展的唾液酸转移酶抑制剂主要着重于开发CMP类供体与受体的类似物，然而，仅有少部分的类似物能够穿透细胞膜，此一缺陷也阻碍了该多个类似物于生物和临床上的应用。
[0008] 有鉴于此，本领域亟需一种改良的唾液酸转移酶抑制剂，其不仅能够抑制唾液酸转移酶活性，亦具有膜穿透性；因此，该多个抑制剂能作为先导化合物，用以发展治疗与唾液酸化相关疾病和/或症状的医药品。

发明内容

[0009] 本揭示内容至少一部分是基于意外发现特定的石胆酸(lithocholic acid)衍生物，能有效抑制唾液酸转移酶活性；因此，可利用该多个石胆酸衍生物作为先导化合物，开发能够治疗与唾液酸转移酶相关疾病和/或症状(例如，癌症、免疫疾病或发炎疾病)的医药品。
[0010] 因此，本揭示内容第一方式是提供具有下列式(1)结构的化合物：，及其药学上可接受盐类和溶合物，其中，
n是1至4的整数；
A、B和C分别是六员或七员饱和或未饱和碳环、高内酯(homolactone)或高内酰胺
(homolactam)，其中所述的饱和或未饱和碳环、高内酯或高内酰胺可视需要而带有一或多
个氟基或羟基取代基；
X1是O或N；或者是，若R1不存在时，X1是氟基；
R1是选自于以下群组中：无、H、
R3是选自于以下群组中：甲基、甲氧基、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、
或
R3和与其相邻的碳原子及氮原子共同形成一五员杂环；
Ra和Rb分别是H或C1-6烷基；
R2是COOH、CH(COOH)COOH或COX2(CH2CH2O)mCH2CH2N3，
X2是O或N，且m是1至4的整数；以及
Ar是选自于以下群组中：H、
[0011] 在某些实施方式中，所述化合物为式(1-1)的化合物：其中，
p是1至4的整数；以及
Ar是选自于以下群组中：
[0012] 在其他实施方式，所述化合物为式(1-2)的化合物：，其中，
X2是O或N；
R3是选自于以下群组中：CH3、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、
或R3和与其相邻的碳原子及氮原子共同形成一五员
杂环；以及
Ra和Rb分别是H或C1-6烷基。
[0013] 在某些实施方式中，所述化合物为式(1-3)的化合物：，其中R1是选自于以下群组中：
[0014] 在又一实施方式中，所述化合物为式(1-4)的化合物：其中， 是一单键或双键；
R3是选自于以下群组中：CH2OH、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、
[0015] 在某些实施方式中，所述化合物是式(1-5)的化合物：其中R3是CH2COOH或CH2CH2COOH。
[0016] 在其他实施方式中，所述化合物是式(1-6)的化合物：，其中，
A、B和C分别是六员饱和碳环且带有至少一氟基取代基；
X1是H、O或氟基，且其中当X1是氟基时，R1为无、H或 以及
R3是CH2COOH或
[0017] 在又一实施方式中，所述化合物为式(1-7)的化合物：其中X3是O或N。
[0018] 在某些实施方式中，所述化合物为式(1-8)的化合物：其中，X4是O或N；以及R4是H或OH。
[0019] 在又一实施方式，所述化合物是式(1-9)的化合物：
[0020] 因此，本揭示内容第二方式提供能够用以抑制唾液酸转移酶活性的组合物。所述组合物能够用以治疗与唾液酸转移酶活化相关的疾病和/或症状。所述组合物包含一有效
量的式(1)化合物、其盐类或溶合物；以及一药学上可接受赋形剂。
[0021] 式(1)化合物的含量占药学组合物总重约0.1％至99％(重量％)。在某些实施方式中，式(1)化合物占药学组合物总重的至少约1％(重量％)。在特定实施方式中，式(1)化合物占药学组合物总重的至少约5％(重量％)。在另一些实施方式中，式(1)化合物占药学组
合物总重的至少约10％(重量％)。在又另一些实施方式中，式(1)化合物占药学组合物总重的至少约25％(重量％)。
[0022] 依据某些较佳实施方式，所述药学组合物更包含一化疗药剂、一抗发炎剂或一免疫抑制剂。
[0023] 再者，本揭示内容第三方式是提供一种治疗与唾液酸转移酶活化相关疾病和/或症状的方法。所述方法包含施用本发明组合物至亟需治疗的个体，以减缓或减轻与所述疾
病和/或症状相关的征状。
[0024] 在某些实施方式中，所述与唾液酸转移酶活化相关的疾病和/或症状可以是癌症、免疫疾病或发炎疾病。
[0025] 本揭示内容的一或多个实施方式，将详述于下文实施方式中。透过以下的详细说明与附随的权利要求书将可更了解上述本揭示内容的特征。
【图式简单说明】
[0026] 为让本发明的上述与其他目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，所附图式的说明如下：
[0027] 图1为柱形图，其显示依据本揭示内容一实施方式，FCW34和FCW66对于MDA-MB-231细胞迁徙的影响；
[0028] 图2A是直线图，其显示依据本揭示内容一实施方式，FCW34对于抑制腹腔注射MDA-MB-231细胞的实验动物定量结果；
[0029] 图2B是直线图，其显示FCW34对于图2A实验动物肿瘤体积的影响；
[0030] 图3的柱形图显示依据本揭示内容一实施方式，借由SNA凝集素染色法测定生长于葡萄糖或果糖培养基中的PANC-1细胞，评估FCW34对于唾液酸转移酶的影响；
[0031] 图4为直方图，其显示依据本揭示内容一实施方式，FCW34对于抑制生长于葡萄糖或果糖培养基中的PANC-1细胞迁徙的影响；
[0032] 图5的照片显示依据本揭示内容一实施方式，FCW34对于注射生长于含葡萄糖或果糖PANC-1细胞的实验动物的影响，其中(A)为实验动物的生物荧光(bioluminescence)IVIS
影像，以及(B)为肝脏切片组织染色的结果，所述肝脏切片是取自于生长于含葡萄糖或果糖培养基中的PANC-1细胞所造成的肿瘤病灶处；
[0033] 图6为依据本揭示内容一实施方式所示的FCW551对于PANC-1和LN细胞所产生的细胞毒性；
[0034] 图7为依据本揭示内容一实施方式所示的FCW551对于(A)PANC-1和LN细胞侵袭影响的柱形图；和(B)PANC-1和LN细胞迁徙影响的柱形图；
[0035] 图8A为折线图，其显示依据本揭示内容一实施方式，FCW393对于移植原发性黑色素瘤实验动物体重的影响；
[0036] 图8B为折线图，其显示FCW393对于图8A的实验动物中肿瘤体积的影响；
[0037] 图9为柱形图，其显示FCW393对于图8A的实验动物的(A)淋巴结、(B)胸腺和(C)脾脏重量的影响；
[0038] 图10为柱形图，分别显示FCW393对于图8A的实验动物的(A)白血球(white blood cells,WBC)、(B)红血球(red blood cells,RBC)、(C)血小板、(D)血红素(hemoglobin,
HGB)、(E)血容比(hematocrit,HCT)、(F)平均血球容积(mean corpuscular volume,MCV)、(G)平均血球素容积(mean corpuscular hemoglobin,MCH)和(H)红血球血红素平均浓度
(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)计量或含量的影响；
[0039] 图11为柱形图，分别显示FCW393对于图8A的实验动物的(A)天门冬胺酸转胺酶(aspartate aminotransferase,AST)、(B)丙胺酸转胺酶(analine aminotransferase
(ALT)、(C)白蛋白、(D)三酸甘油脂(triglyceride)、(E)血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、(F)肌酸酐(creatinine)和(G)尿酸(uric acid)的影响；
[0040] 图12为柱形图，分别显示依据本揭示内容一实施方式，FCW393对于抑制转移性黑色素瘤的影响，本试验的结果是基于(A)第7天和(B)第14天对于患有转移性黑色素瘤实验
动物的生物荧光IVIS影像定量结果，以及(C)FCW393对于荧光酶影响的柱形图；
[0041] 图13为柱形图，其显示FCW393对于图12实验动物(A)淋巴结、(B)胸腺和(C)脾脏重量的影响；
[0042] 图14为柱形图，分别显示FCW393对于图12实验动物的(A)白血球(white blood cells,WBC)、(B)红血球(red blood cells,RBC)、(C)血小板、(D)血红素(hemoglobin,
HGB)、(E)血容比(hematocrit,HCT)、(F)平均血球容积(mean corpuscular volume,MCV)、(G)平均血球素容积(mean corpuscular hemoglobin,MCH)和(H)红血球血红素平均浓度
(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)计量或含量的影响；以及
[0043] 图15为柱形图，分别显示FCW393对于图12的实验动物的(A)天门冬胺酸转胺酶(aspartate aminotransferase,AST)、(B)丙胺酸转胺酶(analine aminotransferase,
ALT)、(C)白蛋白、(D)三酸甘油脂(triglyceride)、(E)血尿素氮(blood urea nitrogen,
BUN)、(F)肌酸酐(creatinine)和(G)尿酸(uric acid)的影响。
发明说明
[0044] 为了使本揭示内容的叙述更加详尽与完备，下文针对了本发明的实施方式与具体实施例提出了说明性的描述；但这并非实施或运用本发明具体实施例的唯一形式。实施方
式中涵盖了多个具体实施例的特征以及用以建构与操作该多个具体实施例的方法步骤与
其顺序。然而，亦可利用其他具体实施例来达成相同或均等的功能与步骤顺序。
[0045] 1.定义
[0046] 为便于说明，在此统一说明本文内部使用到的名词。除非另有定义，否则所有本文中使用到的技术或科学名词，其与本发明领域所属具有普通技艺人士所理解的意义相同。
[0047] 除非本说明书另有定义，所述“烷基”一词是指具有1至20个碳原子，且为直链、支链和/或环状(“环烷基”)的烃基(如，1-10、1-9、1-8、1-7、1-6、1-5、1-4、1-3、1-2或1个碳原子)。举例而言，烷基包含甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、2-异丙基-3甲基丁基、戊基、戊-2-基、己基、异己基、庚基、庚-2-基、4,4-二甲基戊基、辛基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基和十二烷基。环烷基结构可以是单环或多环，且其实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。除非另有定义，每一个烷基团彼此分别被取代或不被取代；亦即，其可以是无取代基的烷基(unsubstituted alkyl)或带有一或多个取代基的烷基(substituted alkyl)。在特定的实施方式中，所述烷基团是不带有取代基的C1–10烷基；较佳为不带有取代基的C1–6烷基。在一较佳的实施方式中，所述烷基团是正己基。
[0048] 除非另有定义，当利用“取代(substituted)”一词来描述一化学结构或化学基团时，是指所述结构或基团的衍生物，其中有一或多个氢原子被一或多个以下基团取代：烷氧基、烷酰氧基、烷基、芳香基、卤素、卤烷基或羟基。除非本说明书另有定义，于一系列名词前记载一或多个形容词时，应当被解释为该形容词适用于每一个名词。举例而言，“不经取代或带有取代基的烷基、烯基、芳香基或杂芳基(optionally substituted alky,alkenyl,
aryl,or heteroaryl)”与“不经取代或带有取代基的烷基、不经取代或带有取代基的烯基、不经取代或带有取代基的芳香基或不经取代或带有取代基的杂芳基(optionally 
substituted alky,optionally substituted alkenyl,optionally substituted aryl,
or optionally substituted heteroaryl)”的意思相同。
[0049] 需要注意的是，若未特定指明一结构的立体化学部分或一部分结构(例如，以粗线或虚线表示的部分)，则应将此结构或部分结构解释为可涵盖所有的立体异构物。同样地，当化合物含有一或多个不对称中心，但其名称并未具体定义该多个不对称中心所能涵盖的
立体化学结构时，则应将该化合物的范围解释成可涵盖其纯的光学异构物及由该多个光学
异构物所组成的混合物。再者，图中所示具有不饱和价数的任一原子，均假设其可连接足够的氢原子使其价数达到饱和。此外，在价数允许的情况下，可一实线及与其平行的虚线表示的化学键合涵盖单键和双键(如，芳香族)。
[0050] “个体(subject)”或“患者(patient)”等词是指可利用本发明方法治疗的动物，包含人类。除非特别指明，“个体”或“患者”涵盖雄性与雌性动物。再者，在此所述“个体”或“患者”涵盖任何的能接受本发明方法治疗的哺乳类。
[0051] 所述“施用(如administered、administering、administration)”一词是指本发明制剂(如，化合物或组合物)的传递方式，其包含但不限于：静脉内、肌肉内、腹膜内、动脉内、皮下或穿皮膜传递。
[0052] 在此处，“有效量(effective amount)”一词是指一成分的用量在一定期间内足以招致所欲的反应或效果，即，能有效治疗疾病。以治疗感染为例，所谓有效是指一药剂(如，化合物或组合物)能够降低、预防、延缓或治愈感染的相关症状。一药剂的有效量不必然能够治愈一疾病或症状，但能延缓、阻碍或预防疾病或症状的发生，或延缓疾病或症状相关的病征。所述治疗有效量可分成一、二或更多剂量于单一施用剂量型式，且可于一指定期间内施用一次、二次或更多次。
[0053] 所述“治疗(treatment)”一词是能够达到所欲的药学和/或生理学效果；例如，抑制唾液酸转移酶活化。上述的效果是指能够部分或完全地治愈或预防个体出现所述疾病的症状。所述“治疗”包含预防、治疗或减缓一哺乳类的疾病，尤其是人类。所述治疗包含：(1)预防(如，预防用药)、治疗或减缓一个体的疾病或症状(如，感染)，其中所述个体可能易于罹患该疾病但尚未被确诊；(2)抑制一疾病(即，降低发展出与该疾病、异常和/或病症相关的病理变化的风险)；或(3)治愈一疾病(即，减少与所述疾病相关的症状)。再者，在本揭示内容特定的实施方式中，将有效量的本发明化合物)施用至患者时，相较于一般未经处理的患者，其能够减缓或减轻与唾液酸转移酶活化疾病相关的一或多个症状、或与该疾病相关
的一或多个症状的严重程度和/或该疾病的进程。在较的实施方式中，将本发明化合物施用至患有与唾液酸转移酶活化相关疾病的患者，以减轻或减缓与所述疾病相关的一或多个症
状，以达到治疗所述疾病的目的。
[0054] 此外，除非特定指明其单复数，否则本说明书所用的单数形式(如“a,”“an,”和“the”)涵盖复数型。
[0055] 2.本发明唾液酸转移酶抑制剂
[0056] 本揭示内容至少一部分是基于意外的发现部分石胆酸衍生物，特别是式(1)化合物，能够预防唾液酸转移酶活化，因此，本揭示内容石胆酸衍生物可以作为发展用以治疗与唾液酸转移酶活化相关疾病和/或症状(如，癌症、免疫疾病或发炎疾病)医药品的先导化合物。
[0057] 本揭示内容石胆酸衍生物为式(1)化合物，及其药学上可接受盐类和其溶和物，其中，
n为1至4的整数；
A、B和C分别是六员或七员饱和或未饱和碳环(carbon cyclic ring)、高内酯或高内酰
胺，其中饱和或未饱和碳环、高内酯或高内酰胺可视需要而被一或多个氟基或羟基取代；
X1是O或NH；或者是，当R1不存在时，X1是氟基；
R1是选自于以下所组成的群组中：无、H、
R3是选自于以下群组中：甲基、甲氧基、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、
或者是R3和与其相邻的碳原子及
氮原子共同形成一五员杂环；
Ra和Rb分别是H或C1-6烷基；
R2是COOH、CH(COOH)COOH或COX2(CH2CH2O)mCH2CH2N3，
X2是O或N，且m是1至4的整数；以及
Ar是选自于以下群组中：H、
[0058] 在某些实施方式中，所述化合物是式(1-1)化合物：其中p是1至4的整数；以及Ar是选自于以下群组中：
[0059] 在一实施方式中，所述化合物是式(1-1)化合物，其中p是2且Ar是
[0060] 在其他实施方式中，所述化合物是式(1-1)化合物，其中p是3且Ar是
[0061] 在某些实施方式中，所述化合物是式(1-2)化合物：其中X2是O或N；
R3是选自于以下群组中：CH3、RaCOOH、RaNH2、RaNHC(NH2)＝NH、RaSRb、
或R3和与其相邻的碳原子及氮
原子共同形成一五员杂环；以及
Ra和Rb分别是H或C1-6烷基。
[0062] 依据一较佳的实施方式，在式(1-2)化合物中，X2是N且R3是-CH2COOH。
[0063] 在某些实施方式中，所述化合物是式(1-3)的化合物：其中，R1是选自于以下群组中：
[0064] 在又一实施方式中，所述化合物是式(1-4)的化合物：其中， 是一单键或双键；以及R3是选自于以下群组中：CH2OH、RaCOOH、RaNH2、RaNHC
(NH2)＝NH、RaSRb、
[0065] 在某些实施方式中，所述化合物是式(1-5)的化合物：其中，R3是CH2COOH或CH2CH2COOH。
[0066] 在其他实施方式中，所述化合物是式(1-6)的化合物：其中，A、B和C分别是六员饱和碳环且带有至少一氟基取代基；X1是H、O或氟基，且当X1
是氟基时，R1为无、H或 以及R3是CH2COOH或
[0067] 在其他实施方式中，所述化合物是式(1-7)的化合物：其中X3是O或N。
[0068] 在部分实施方式中，所述化合物是式(1-8)的化合物：其中X4是O或N；且R4是H或OH。
[0069] 在又一实施方式中，所述化合物是式(1-9)的化合物，
[0070] 本发明化合物可包含一或多个立体中心；因此，所述化合物可以是镜像异构物(enantiomers)的消旋混合物(racemic mixtures)或非镜像异构物(diastereomers)的混
合物。因此，本发明涵盖该多个化合物单一立体异构物形式(如，镜像异构物、非镜像异构物)及其消旋混合物，和/或上述的组合。于制备式(1-1)至(1-9)的化合物的镜像异构物时，可以利用不对称合成法或镜像分离法，该多个方法利用特定的旋旋光性化合物作为起始材
料，以得到预期的立体异构物。或者是，可利用常规分离技术得到式(1-1)至(1-9)的化合物的立体异构物，上述分离技术包含但不限于：透过结晶、色谱分析以及利用分离剂
(resolving agent)加以分离。举例而言，从外消旋混合物中分离出镜像异构物的较佳方法为利用高效液相层析(high performance liquid chromatography,HPLC)。或者是，也可使消旋混合物和分离剂(resolving agent)反应，让其中一种镜像异构物可溶于分离剂中而
另外一种镜像异构物保持析出的状态，进而使两镜像异构物彼此分离。本发明亦包含所述
式(1-1)至(1-9)的化合物的构型异构物(如，顺式和/或反式异构物，无论是否包含双键)，包括异构物所的混合物、纯异构物或实质上为纯异构物的形式。再者，本发明更包含本揭示内容化合物的异构物，无论是混合物(admixture)或纯化合物(pure form)或基本上纯化合
物(substantially pure form)的形式存在，例如，顺式和反式异构物。
[0071] 在较佳的实施方式中，本发明所揭示的化合物是唾液酸转移酶抑制剂。在特定的实施方式中，本揭示内容的化合物可选择性地抑制α2,3(N)-唾液酸转移酶ST3GALIII和α2,
6(N)-唾液酸转移酶ST6GALI，但不会抑制α2,3(O)-唾液酸转移酶ST3GALI。
[0072] 本发明化合物1-94的结构分别揭示如下：
[0073] 式(1-1)至(1-9)所述化合物皆为石胆酸的衍生物，可利用本揭示内容实施例所揭示方法合成。
[0074] 2.石胆酸衍生物的用途
[0075] 本揭示内容的范围涵盖了治疗患有与唾液酸转移酶活化相关疾病和/或症状个体的方法。所述方法包含以下步骤：施用一有效量的式(1)化合物(特别是式(1-1)至(1-9)化
合物)至所述个体，以减缓或减轻与唾液酸转移酶活化相关疾病和/或症状的病征。
[0076] 所述与唾液酸转移酶活化相关疾病和/或症状包含但不限于：癌症、免疫疾病或发炎疾病。
[0077] 癌症是指一群细胞具备自主生长的能力，其特征为细胞快速增殖的异常状态或状况，有时会造成肿瘤转移。举例而言，所述癌症包含但不限于：恶性肿瘤和肉瘤，如，乳癌、子宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌、黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、脑瘤、肺癌、肝癌、淋巴瘤、神经上皮细胞瘤、肾癌、膀胱癌、胰脏癌、前列腺癌、胃癌、大肠癌、子宫癌、淋巴系造血系统肿瘤、骨髓性白血病、甲状腺癌、甲状腺滤泡癌、骨髓增生不良症候群(MDS)、原发性间叶瘤、畸胎瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、胶质母细胞瘤、角化棘皮瘤、间变性大细胞淋巴瘤、食道鳞状细胞癌、滤泡树突状细胞癌、肠癌、肌肉侵袭性癌症、精囊肿瘤、表皮癌、脾癌症、头颈部和癌症、胃癌、骨癌、视网膜癌、胆管癌、小肠癌、唾液腺癌、子宫肉瘤、睪丸癌、结缔组织癌、骨髓增生异常、华氏巨球蛋白血症、鼻咽癌、神经内分泌癌、间皮瘤、血管肉瘤、卡波西氏肉瘤、食道癌、输卵管癌、腹膜癌、浆液性乳头状苗勒氏癌、恶性腹水、胃肠道间质瘤(GIST)、李弗劳明症候群或希佩尔-林道症候群(VHL)。淋巴系造血系统肿瘤如白血病、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、B细胞淋巴瘤、伯奇氏淋巴瘤、多发性骨髓瘤、何杰金氏淋巴瘤或非何杰金氏淋巴瘤；而该原发性间叶瘤是纤维肉瘤或横纹肌肉瘤。
[0078] 所述癌症是转移性癌症或抗药性癌症。在一实施方式中，所述癌症是转移性乳癌。在其他实施方式中，所述癌症是转移性胰脏癌。
[0079] 所述发炎性疾病可以是局部性或全身性、急性或慢性发炎反应。所述发炎疾病的实例包含视网膜病变(例如，糖尿病视网膜病变或增殖性视网膜病变)、炎性皮肤病(例如，皮肤炎、湿疹、异位性皮肤炎、过敏性接触皮肤炎、荨麻疹、坏死性血管炎、表皮血管炎、过敏性血管炎、嗜酸性肌炎、多发性肌炎、皮肌炎、嗜酸性筋膜炎)、炎性肠疾病(例如，克隆氏症和溃疡性结肠炎)、过敏性肺部疾病(例如，过敏性肺炎、嗜酸细胞性肺炎、延迟性过敏反应、间质性肺病(interstitial lung disease，ILD)、特发性肺纤维化、ILD相关的类风湿性关节炎)、黄斑部水肿、气喘或过敏性鼻炎。
[0080] 所述免疫疾病的病征为免疫系统的过度反应或反应低下。实施例包含但不限于：自体免疫疾病(例如，类风湿关节炎、银屑病关节炎、全身性红斑狼疮、重症肌无力、第一型糖尿病、肾小球性肾炎、自体免疫性甲状腺炎、僵直性脊椎炎、全身性硬化症或多发性硬化症)、急性和慢性炎症(例如，全身性过敏反应、过敏反应、药物过敏、昆虫叮咬过敏或移植排斥反应)、修格连氏症候群或人免疫缺陷病毒感染。
[0081] 本发明一实施方式涵盖一种治疗患有癌症个体的方法，其包含施用一有效量的本发明化合物，特别是式(1-1)至(1-9)化合物，以减轻或减缓与癌症相关的一或多个病征。
[0082] 在其他实施方式中，本发明涵盖一种用以治疗患患有免疫或发炎疾病的个体的方法，所述方法包含：施用一有效量的本揭示内容化合物至所述个体，特别是式(1-1)至(1-9)化合物，以减轻或减缓与免疫或发炎疾病相关的一或多个病征。
[0083] 本发明化合物的施用剂量和施用方案会因多种因素而不同，例如，欲治疗、预防或处置的适应症不同，或是患者年龄、性别或状况的不同皆会影响。上述因素所造成的影响为所属技术领域中已知的，且可以借由常规性试验确认。一般而言，式(1-1)至(1-9)化合物施用至个体的量为约1-100毫克/公斤体重，例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、
41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、
66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、
91、92、93、94、95、96、97、98、99或100毫克/公斤体重；较佳为约20-80毫克/公斤体重，例如，
20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、
45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、
70、71、72、73、74、75、76、77、78、79或80毫克/公斤体重；更佳为约40-60毫克/公斤体重，如，
40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59或60毫克/公斤体重。
所述施用量可以于一日内以单一剂量施用，或分成多剂量施用，例如，每日施以2、3或4次剂量。式(1-1)至(1-9)化合物实际的施用量会依据个体的症状以及生理条件(如，患者年龄、性别或病史等)有所不同，且可依照临床医师其通常经验决定。
[0084] 在某些实施方式中，所述方法更包含于施用式(1-1)至(1-9)化合物之前、之后或同时，对该个体施用其他化疗药剂、抗发炎剂或免疫抑制剂。
[0085] 所述化疗药剂的实例包含但不限于：博来霉素(Bleomycin)、布舍瑞林(Buserelin)、补束克(Busulfan)、卡培他滨(Capecitabine)、卡铂定(carboplatin)、卡莫司汀(Carmustine)、氯芥苯丁酸(chlorambucil)、顺铂(cisplatin)、克拉屈滨
(Cladribine)、氯屈磷酸盐(Clodronate)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、醋酸环丙孕酮
(cyproterone)、阿糖胞苷(Cytarabine)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、放线菌素
(Dactinomycin)、道诺霉素(Daunorubicin)、乙烯雌酚(diethylstilbestrol)、多烯紫杉醇(Docetaxel)、艾霉素(Doxorubicin)、泛艾霉素(Epirubicin)、雌莫司汀(Estramustine)、依妥普赛(etoposide)、依西美坦(Exemestane)、非格司亭(Filgrastim)、氟达拉宾
(Fludarabine)、氟氢可地松(Fludrocortisone)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、氟每特隆
(Fluoxymesterone)、氟塔酰胺(Flutamide)、吉西他滨(Gemcitabine)、戈舍瑞林
(Goserelin)、羟脲素(hydroxyurea)、埃达鲁比辛(Idarubicin)、依弗酰胺(Ifosfamide)、伊马替尼(Imatinib)、干扰素α(Interferon  Alfa)、莫地肯(Mnotecan)、利妥唑
(Letrozole)、留可佛林(Leucovorin)、利普安(Leuprolide)、左旋咪唑(Levamisole)、洛莫司汀(Lomustine)、盐酸甲氮芥(Mechlorethamine)、甲羟助孕酮(Medroxyprogesterone)、美皆斯妥(Megestrol)、霉法兰(Melphalan)、硫醇嘌呤(mercaptopurine)、美司钠(Mesna)、甲氨蝶呤(methotrexate)、丝裂霉素(mitomycin)、迈杜坦(Mitotane)、迈杜葱酮
(Mitoxantrone)、氟他胺(Nilutamide)、奥曲肽(Octreotide)、益乐铂(Oxaliplatin)、紫杉醇(Paclitaxel)、裴米卓耐特(Pamidronate)、喷司他丁(Pentostatin)、普卡霉素
(Plicamycin)、卟吩姆(Porfimer)、普卡巴嗪(procarbazine)、雷替曲塞(Raltitrexed)、利妥昔单抗(Rituximab)、链霉佐菌素(streptozocin)、他莫昔芬(Tamoxifen)、替莫唑胺
(Temozolomide)、坦尼坡赛(Teniposide)、睪固酮(testosterone)、硫鸟嘌呤
(thioguanine)、沙奥特帕(Thiotepa)、托普替肯(Topotecan)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、视网酸(Tretinoin)、长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春地辛
(Vindesine)、长春瑞滨(Vinorelbine)及其类似物。
[0086] 所述抗发炎剂的实例包含但不限于：邻胺苯甲酸(anthranilic acids)、阿司匹灵5-乙酰水杨酸(aspirin(5-acetylsalicylic acid))、醋氯芬酸(aclofenac)、阿洛普令
(aloxiprin)、阿伯森(aproxen)、阿司匹灵(aspirin)、阿西美辛(acemetacin)、呱氨托美丁(amtolmetin)、阿扎丙酮(azapropazone)、贝诺酯(benorilate)、苯恶洛芬
(benoxaprofen)、盐酸苄达明(benzydamine hydrochloride)、溴芬酸(bromfenac)、丁苯羟酸(bufexamac)、布替布芬(butibufen)、卡布洛芬(carprofen)、塞来昔布(celecoxib)、胆碱水杨酸(choline salicylate)、氯尼辛(clonixin)、脱氧舒林酸(desoxysulindac)、二氟尼索(diflunisal)、安乃近(dipyrone)、屈昔康(droxicam)、艾特多雷克(etodolac)、依托芬那酯(etofenamate)、依他昔布(etoricoxib)、芬布芬(fenbufen)、芬必酸(felbinac)、芬替酸(fentiazac)、芬普洛芬(fenoprofen)、氟菲那密酸(flufenamic acid)、夫洛非宁
(floctafenine)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚洛芬(indoprofen)、伊索昔康
(isoxicam)、酮咯酸(ketoralac)、氯诺昔康(lomoxicam)、洛索洛芬(loxoprofen,利克飞龙(licofelone)、非普地醇(fepradinol)、迈菲那密酸(mefenamic acid)、柳酸镁(magnesium salicylate)、甲氯菲那密酸(meclofenamic acid)、美洛西卡(meloxicam)、马尼氟酯
(morniflumate)、尼氟酸(niflumic acid)、尼美苏来(nimesulide)、奥沙普秦
(oxaprozen)、丁二苯吡唑二酮(phenylbutazone)、匹洛西卡(piroxicam)、吡酮洛芬
(piketoprofen)、吡洛札克(priazolac)、吡洛芬(pirprofen)、异丙胺替比林
(propyphenazone)、普罗喹宗(proquazone)、罗非昔布(rofecoxib)、双水杨酸酯
(salalate)、水杨酸酰胺(salicylamide)、水杨酸(salicylic acid)、水杨酸钠(sodium 
salicylate)、硫代水杨酸钠(sodium thiosalicylate)、舒林达酸(sulindac)、舒洛芬
(suprofen)、托美汀(tolmetin)、天诺西坎(tenoxicam)、曲马朵(tramadol)、替尼达普
(tenidap)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、水杨酸三乙醇胺(trolamine salicylate)或佐美酸(zomepirac)等。
[0087] 免疫抑制剂的实例包含但不限于：硫唑嘌呤(azathioprine)、蒽环类药物(anthracyclines)、博来霉素(bleomycin)、环孢霉素(cyclosporin)、环磷酸酰胺
(cyclophosphamide)、环孢霉素A(cyclosporine A)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、硫醇嘌呤(mercaptopurine)、丝裂霉素C(mitomycin C)、胺甲叶酸(methotrexate)、他克莫司
(Tacrolimus)或雷帕霉素(Sirolimus)等。
[0088] 4.药学组合物
[0089] 本揭示内容亦涵盖一种药学组合物，其是用以治疗与唾液酸转移酶活化相关的疾病和/或症状。所述药学组合物包含一治疗有效量或预防有效量的式(1)化合物；以及一药
学上可接受赋形剂。
[0090] 本发明式(1)化合物的含量占药学组合物总重约0.1％至99％(重量％)。在某些实施方式中，式(1)化合物占药学组合物总重的至少1％(重量％)。在特定实施方式中，式(1)化合物占药学组合物总重的至少5％(重量％)。在另一些实施方式中，式(1)化合物占药学
组合物总重的至少10％(重量％)。在又另一些实施方式中，式(1)化合物占药学组合物总重的至少25％(重量％)。
[0091] 可利用适当的制药流程制备本发明药学组合物，例如，“Remington’s Pharmaceutical Sciences,17th edition,ed.Alfonoso R.Gennaro,Mack Publishing 
Company,Easton,Pa(1985)”所揭示的内容。所述药学上可接受赋形剂具有生物兼容性，且可与本发明制剂中其他成分兼容。
[0092] 依据某些可视需要而实施方式，所述药学组合物更包含化疗药剂、抗发炎剂或免疫抑制剂。
[0093] 所述化疗药剂的实例包含但不限于：博来霉素(Bleomycin)、布舍瑞林(Buserelin)、补束克(Busulfan)、卡培他滨(Capecitabine)、卡铂定(carboplatin)、卡莫司汀(Carmustine)、氯芥苯丁酸(chlorambucil)、顺铂(cisplatin)、克拉屈滨
(Cladribine)、氯屈磷酸盐(Clodronate)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、醋酸环丙孕酮
(cyproterone)、阿糖胞苷(Cytarabine)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、放线菌素
(Dactinomycin)、道诺霉素(Daunorubicin)、乙烯雌酚(diethylstilbestrol)、多烯紫杉醇(Docetaxel)、艾霉素(Doxorubicin)、泛艾霉素(Epirubicin)、雌莫司汀(Estramustine)、依妥普赛(etoposide)、依西美坦(Exemestane)、非格司亭(Filgrastim)、氟达拉宾
(Fludarabine)、氟氢可地松(Fludrocortisone)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、氟每特隆
(Fluoxymesterone)、氟塔酰胺(Flutamide)、吉西他滨(Gemcitabine)、戈舍瑞林
(Goserelin)、羟脲素(hydroxyurea)、埃达鲁比辛(Idarubicin)、依弗酰胺(Ifosfamide)、伊马替尼(Imatinib)、干扰素α(Interferon  Alfa)、莫地肯(Mnotecan)、利妥唑
(Letrozole)、留可佛林(Leucovorin)、利普安(Leuprolide)、左旋咪唑(Levamisole)、洛莫司汀(Lomustine)、盐酸甲氮芥(Mechlorethamine)、甲羟助孕酮(Medroxyprogesterone)、美皆斯妥(Megestrol)、霉法兰(Melphalan)、硫醇嘌呤(mercaptopurine)、美司钠(Mesna)、甲氨蝶呤(methotrexate)、丝裂霉素(mitomycin)、迈杜坦(Mitotane)、迈杜葱酮
(Mitoxantrone)、氟他胺(Nilutamide)、奥曲肽(Octreotide)、益乐铂(Oxaliplatin)、紫杉醇(Paclitaxel)、裴米卓耐特(Pamidronate)、喷司他丁(Pentostatin)、普卡霉素
(Plicamycin)、卟吩姆(Porfimer)、普卡巴嗪(procarbazine)、雷替曲塞(Raltitrexed)、利妥昔单抗(Rituximab)、链霉佐菌素(streptozocin)、他莫昔芬(Tamoxifen)、替莫唑胺
(Temozolomide)、坦尼坡赛(Teniposide)、睪固酮(testosterone)、硫鸟嘌呤
(thioguanine)、沙奥特帕(Thiotepa)、托普替肯(Topotecan)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、视网酸(Tretinoin)、长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春地辛
(Vindesine)、长春瑞滨(Vinorelbine)及其类似物。
[0094] 所述抗发炎剂的实例包含但不限于：邻胺苯甲酸(anthranilic acids)、阿司匹灵5-乙酰水杨酸(aspirin(5-acetylsalicylic acid))、醋氯芬酸(aclofenac)、阿洛普令
(aloxiprin)、阿伯森(aproxen)、阿司匹灵(aspirin)、阿西美辛(acemetacin)、呱氨托美丁(amtolmetin)、阿扎丙酮(azapropazone)、贝诺酯(benorilate)、苯恶洛芬
(benoxaprofen)、盐酸苄达明(benzydamine hydrochloride)、溴芬酸(bromfenac)、丁苯羟酸(bufexamac)、布替布芬(butibufen)、卡布洛芬(carprofen)、塞来昔布(celecoxib)、胆碱水杨酸(choline salicylate)、氯尼辛(clonixin)、脱氧舒林酸(desoxysulindac)、二氟尼索(diflunisal)、安乃近(dipyrone)、屈昔康(droxicam)、艾特多雷克(etodolac)、依托芬那酯(etofenamate)、依他昔布(etoricoxib)、芬布芬(fenbufen)、芬必酸(felbinac)、芬替酸(fentiazac)、芬普洛芬(fenoprofen)、氟菲那密酸(flufenamic acid)、夫洛非宁
(floctafenine)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚洛芬(indoprofen)、伊索昔康
(isoxicam)、酮咯酸(ketoralac)、氯诺昔康(lomoxicam)、洛索洛芬(loxoprofen,利克飞龙(licofelone)、非普地醇(fepradinol)、迈菲那密酸(mefenamic acid)、柳酸镁(magnesium salicylate)、甲氯菲那密酸(meclofenamic acid)、美洛西卡(meloxicam)、马尼氟酯
(morniflumate)、尼氟酸(niflumic acid)、尼美苏来(nimesulide)、奥沙普秦
(oxaprozen)、丁二苯吡唑二酮(phenylbutazone)、匹洛西卡(piroxicam)、:吡酮洛芬
(piketoprofen)、吡洛札克(priazolac)、吡洛芬(pirprofen)、异丙胺替比林
(propyphenazone)、普罗喹宗(proquazone)、罗非昔布(rofecoxib)、双水杨酸酯
(salalate)、水杨酸酰胺(salicylamide)、水杨酸(salicylic acid)、水杨酸钠(sodium 
salicylate)、硫代水杨酸钠(sodium thiosalicylate)、舒林达酸(sulindac)、舒洛芬
(suprofen)、托美汀(tolmetin)、天诺西坎(tenoxicam)、曲马朵(tramadol)、替尼达普
(tenidap)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、水杨酸三乙醇胺(trolamine salicylate)或佐美酸(zomepirac)等。
[0095] 免疫抑制剂的实例包含但不限于：硫唑嘌呤(azathioprine,蒽环类药物(anthracyclines)、博来霉素(bleomycin)、环孢霉素(cyclosporin)、环磷酸酰胺
(cyclophosphamide)、环孢霉素A(cyclosporine A)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、硫醇嘌呤(mercaptopurine)、丝裂霉素C(mitomycin C)、胺甲叶酸(methotrexate)、他克莫司
(Tacrolimus)或雷帕霉素(Sirolimus)等。
[0096] 本发明式(1)化合物可被配制成单一剂型，可经由口服、粘膜(如，经鼻(intranasal)、舌下(sublingual)、阴道(vaginal)、经颊(buccal)和/或直肠
(endorectal))和/或肠胃外(parenteral；如，皮下注射(subcutaneous)、静脉注射
(intravenous)、肌肉内注射(intramuscular)或弹丸注射(bolus injection))。所述剂型
的实例包含但不限于：片剂(tablets)、锭剂(caplets)、胶囊(capsules；例如，软式弹性明胶胶囊(soft elastic gelatin capsules))、扁囊剂(cachets)、口含片(troches)、菱形钉剂(lozenges)、分散剂(dispersions)、栓剂(suppositories)、软膏(ointments)、粥状敷剂(cataplasms；又称，糊剂(poultices))、贴剂(pastes)、粉末(powders)、敷料(dressings)、乳霜(creams)、膏剂(plasters)、溶液(solutions)、贴片(patches)、气雾剂(aerosols；如，鼻喷剂或吸入剂)或凝胶(gels)。可将本发明的式(1)化合物被制成液态的药学组合物，如
无菌溶液、悬浮液(如，水溶性或非水溶性液体悬浮液、水包油乳剂或油包水乳剂)和酏剂
(elixirs)；再者，所述液态药学组合物可经由口服、静脉内、肌肉内、皮下或腹腔注射等途径施用。
[0097] 可针对不同的施用途径来调制本发明的化合物。举例而言，若以口服方式施用，则需涂覆一肠衣膜保护本发明的化合物，以避免本发明的化合物经过肠胃道时被降解。所述配方亦可还有其他成分，使其能将有效成分传递至作用位置。举例而言，化合物可以利用脂质体配方，以避免有效成分遭受酶降解、在循环系统中传送，并且使有效成分通过细胞膜传送至胞内位置。
[0098] 另外，水溶性较差的化合物可添加溶解剂、乳化剂和表面活性剂配置成液体剂型(和适于再配置的剂型)。所述添加剂包含但不限于，环糊精(cyclodextrin)和非水溶液溶
剂；所述非水溶液溶剂包含但不限于：乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)、生物兼容性油(biocompatible oils)(如，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油、甘油、四氢呋喃甲醇(tetrahydrofurfuryl alcohol)、聚乙二醇、山梨糖醇酐的脂肪酸酯(fatty acid esters of sorbitan)和以上化合物的混合物(如，DMSO和玉米油的混合
物)。
[0099] 于不同配方中，本发明化合物的含量取决于给药途径。举例来说，相较于慢性治疗，急性治剂型通常含有大量的一或多种活性化合物。相似地，相较于口服剂型，肠道剂型所含的一或多个活性化合物的量较低。此外，本发明亦涵盖其他施用途径所使用的剂型。
[0100] 4.1口服剂型
[0101] 可将本发明的药学组合物调制为适用于口服的组合物；此种配方的实施例包含但不限于：咀嚼片(chewable tablets)、片剂、胶囊和调味糖浆。可根据众所接受的药学制备方法来制备上述口服剂型，如Remington’s Pharmaceutical Sciences(18th ed.,Mack 
Publishing,Easton PA(1990))中所述的制备方法。所述口服剂型的制备方法如下：根据相关领域已知的技术，将预设量的活性成分和一或多种药学上可接受的赋型剂混合。
[0102] 片剂和胶囊为最常见的口服剂型，其可以被配制成液体或固体剂型。一般而言，片剂和胶囊借由混合活性成分与液体载体或磨碎的固体载体，再加压至预设形式。再者，固体剂型可含有崩解剂，以增加溶解率；且固体剂型亦可含有润滑剂。
[0103] 4.2不经肠胃道的剂型
[0104] 不经肠胃道的剂型的施用途径包含但不限于：皮下注射、静脉注射(含弹丸注射)、肌肉内注射与腹膜内注射。为达到此目的，不经肠胃道的剂型必须是无菌的，以避免患者遭受微生物感染。适合用以制造无菌注射溶液或悬浮液的稀释剂或溶剂，包含但不限于：1,3-丁二醇、甘露醇、水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。脂肪酸(例油状酸及其甘油酯衍生物)亦可用来制备注射用剂型；此外，天然药学上可接受油类(例如，橄榄油或蓖麻油)也同样适用。所述油溶液或悬浮液亦可含有醇类稀释剂或羧甲基纤维素或类似的分散剂。亦可使用在制备药学上可接受剂型时常用得其他表面活性剂(如，Tweens或Spans或其他类似的乳化
剂)或生物可用率增强剂，来制备所述剂型。
[0105] 4.3穿皮膜剂型
[0106] 穿皮膜剂型可应用至局部和穿膜(transmuscosal)等施用途径；其包含但不限于：眼药水溶液(ophthalmic solutions)、喷雾剂、气雾剂、乳霜、乳液、软膏、凝胶、溶液、悬浮液和皮肤贴片等。皮肤贴片包含“储液型(reservoir type)”和“基质型(matrix type)”的贴片，所述贴片可施用于皮肤且经一特定贴附期间后，活性成分能穿透皮肤进入人体体内。
[0107] 适用局部施用的剂型可包含多种已知适用于皮肤的惰性赋形剂。举例而言，一般惰性赋形剂可以是水、乙醇、聚乙烯四氢咯酮、丙二醇、矿物油、硬脂醇和成胶物质。上述的多种剂型和赋形剂皆为药学领域已知的。再者，上述的各种剂型并不影响本发明组合物的
效力。
[0108] 本发明药学组合物可以被制成多种粘膜应用的剂型，以透过穿膜途径给药，例如，口腔和/或舌下剂型使药物可以通过口腔粘膜。本发明的剂型亦可包含多种药学上可接受的生物可降解聚合赋形剂，其可以提供适当的粘附特性及药物释放功能，且与欲施用的活
性化合物和其他口腔和/或舌下剂型中的其他成分兼容。一般而言，所述聚合赋形剂可以粘附至口腔粘膜潮湿的表面。所述聚合赋形剂包含但不限于：丙烯酸聚合物及其共聚物；水解聚乙烯醇；聚乙烯氧化物；聚丙烯酸酯；乙烯聚合物及其共聚物；聚乙烯吡咯烷酮；葡聚糖；
瓜尔胶；果胶；淀粉；以及纤维素聚合物。
[0109] 下文提出多个实验例来说明本发明的某些方式，以利本发明所属技术领域中具有通常知识者实作本发明，且不应将该多个实验例视为对本发明范围的限制。据信已知技艺
者在阅读了此处提出的说明后，可在不需过度解读的情形下，完整利用并实践本发明。
实施例
[0111] 材料与方法
[0112] 细胞株和培养方法
[0113] 本揭示内容所使用的细胞株包含：转移性人类乳癌细胞；MDA-MB-231；人类胰脏上皮样细胞株PANC-1；以及淋巴滋养细胞株(lymphatic-tropic cell line)LN。除非另有说明，每一细胞株培养于杜氏改良培养基(Dulbecco’s modified Eagle media,DMEM)(添加
10％胎牛血清、100IU/毫升的盘林西林、100微克/毫升链霉素以及2mM谷氨酸盐)，培养环境为37℃，含5％CO2的环境。
[0114] 建立LN细胞株
[0115] 将5x105个PANC-1细胞原位注射至SCID小鼠的胰脏以建立LN细胞株。经一个月后，可在淋巴结发现转移的癌细胞，再将其从淋巴结分离出来。将从淋巴结分离出的癌细胞的
基因体DNA萃取出来并进行基因型分析，以确认LN细胞确实是从PANC-1细胞所衍生出来的
(数据未揭示于此)。以实时PCR(real-time PCR)和西方墨点法进行细胞表面分析，结果证
实LN细胞上的α-2,3唾液酸和α-2,6唾液酸确实显著过度表现(数据未揭示于此)。
[0116] 实验动物
[0117] 无胸腺小鼠(BALB/cAnN.Cg-Foxn1nu/CrlNarl；4-5周龄)购自于实验动物中心(BioLASCO Taiwan Co.,Ltd)。小鼠可自由食用实验室的标准鼠饲料和蒸馏水，且饲养环境的光：暗循环期间为12小时：12小时，饲养温度维持在22±2℃。
[0118] 唾液酸转移酶活性分析
[0119] 本实验中的酶活性分析涵盖大鼠ST3Gal(I)、大鼠ST3Gal(III)和人类ST6Gal(I)。大鼠ST3Gal(I)和大鼠ST3Gal(III)购自 人类ST6Gal(I)购自
RnDSystems.com。
[0120] 唾液酸转移酶抑制分析的操作流程如下：以逆向(reverse-phase)HPLC来测定最终产物—唾液酸糖(sialylated saccharides)的含量，来决定酶活性。分析混合物含有以
下成分：200mM MES缓冲液；100mM NaCl；0.5mM EDTA；0.01％Triton X-100；1.4mU 
ST3GALI；2.5mM T-抗原；1mM CMP-Neu5Ac和不同浓度的唾液酸转移酶抑制剂，混合物的总体积为50微升。将所述分析混合物置于37℃，15分钟，接着加热至101℃并维持10分钟以使反应停止。以反相HPLC分离唾液酸化产物。利用非线性回归方程式处理初始速率数据，以计算得到动力学数据。
[0121] 唾液酸转移酶抑制分析(α2,6-N-ST)的操作流程如下：以逆向(reverse-phase)HPLC来测定最终产物—唾液酸糖(sialylated saccharides)的含量，来决定酶活性。分析
混合物含有以下成分：200mM MES缓冲液；100mM NaCl；0.5mM EDTA；0.01％Triton X-100；
1.4mU ST6GALI；2.5mM T-抗原；1mM CMP-Neu5Ac和不同浓度的唾液酸转移酶抑制剂，混合物的总体积为50微升。所述分析混合物置于37℃，15分钟，接着加热至101℃10分钟停止反应。以反相HPLC分析分离唾液酸化产物。利用非线性回归方程式处理初始速率数据，以计算得到动力学数据。
[0122] 此实验例中以Lith-O-Asp和AL-10作为控制组，已知Lith-O-Asp和AL-10对于唾液酸转移酶(ST)抑制效果较低。
[0123] 敲除(knockdown)ST3GAL(III)基因表现
[0124] 将人类乳癌细胞接种至6孔盘上，汇合(confluent)程度为40-60％。将抗人类ST3GALIII的siRNA(Invitrogen,序列如下表)溶解于DEPC水中(最终浓度为20μM)。
以Opti-MEM培养基稀释Lipofectamine RNAiMAX转染试剂，同样地以Opti-MEM培养基
稀释siRNA，再以1:1比例混合经稀释的siRNA及Lipofectamine RNAiMAX转染试剂，并添加
至细胞中。经72小时，收集细胞并进行分析。
[0125] 转移盘迁徙(Transwell Migration)分析
[0126] 本实验例利用转移盘(transwell)进行细胞迁徙分析，将经基质胶(Matrigel)固定的聚碳酸酯过滤器(polycarbonate filter)(8-μm孔；Millicell；Millipore,
Billerica,Mass)插入转移盘中。将经本发明化合物(依所指定的浓度)处理或未处理的细
胞以无血清培养基培养24小时，再接种至转移盘的上方腔室(每腔室5×105个细胞)，接着
进行分析(6小时)。迁徙的细胞会穿透过滤器至转移盘的下层，以苏木溶液进行细胞染色。
以棉棒擦拭位于膜层上方的细胞。于200X放大视野下拍摄位于膜层下方的迁徙细胞影像，
并进行定量。
[0127] MTT分析
[0128] MTT分析是一种比色分析法用以测定酶活性(即，还原酶)，在活细胞中，所述酶可以还原3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基溴化四唑(3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-
2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)，使黄色的四唑(tetrazole)转变成紫色的三苯基
甲脂(formazan)。此一还原反应仅发生于存活的细胞；因此，MTT分析通常是用来评估细胞存活率及增殖。简而言之，添加试验化合物(10或20μM)至细胞中处理48或72小时。接着，添加MTT染剂(500微克/毫升)，进行反应4小时，再以500微升的异丙醇终止试验。以分光亮度计测定溶液在波长570nm下的吸光值。
[0129] 抑制BALB/c小鼠中MDA-MB-231细胞肿瘤的生成
[0130] 在实验第0天，将1×106个MDA-MB-231细胞以皮下注射的方式注射至BALB/c小鼠(4-5周龄)的乳腺脂肪垫中。待小鼠中的肿瘤尺寸生长至100mm3，接着随机将动物分派至3
组(n＝6-8/组)：肿瘤(载体)控制组以及两种本发明化合物(如，FCW34或FCW66)(10毫克/公斤)处理组。将本发明化合物腹腔注射(i.p.)至小鼠体内，每三日一次。以IVIS影像系统观察肿瘤的生长和转移状况，于第60天收集转移的肿瘤组织，利用标卡尺测量肿瘤体积(V)，并利用以下公式计算：V＝(L×W2)/2，其中L是长度和W是宽度。
[0131] 抑制SCID小鼠胰脏肿瘤的生长
[0132] 在第0天，将1×105个人类胰脏细胞PANC-1原位注射至SCID小鼠(6周龄)中，其中人类胰脏细胞PANC-1培养于含葡萄糖或果糖的培养基，且该多个细胞经由或未经由本发明
化合物处理(例如，FCW34，5μM)。以生物荧光IVIS影像分析观察肿瘤的进程，于14周后以颈椎脱位法牺牲实验动物，分别采集肿瘤和肝脏切片，以SNA凝集素进行组织染色分析，并
FACS分析测量2,6-唾液酸化程度。
[0133] 抑制C57BL小鼠黑色素瘤的生长
[0134] 在第0天，将5×105个原发性黑色素瘤细胞(即，B16-F10/Luc细胞)皮下注射或静脉注射至6只C57BL小鼠(3-6周龄)中；接着，使肿瘤成长，经7天后产生原发性或转移性黑色素瘤动物模型。接着，将试验化合物(如，FCW393；10毫克/公斤)经腹腔注射至实验动物中，每三日一次，实验共进行至第26天。利用标卡尺测量肿瘤体积，并以下列公式计算：体积＝宽度2×长度×0.52。每日测量动物的平均体重(body weight,BW)，参照预设剂量和给药时
间，按照体重比例调整试验化合物(即，FCW393)腹腔注射的浓度。经试验化合物处理后，牺牲小鼠并测定小鼠的白血球(WBC)、红血球(RBC)、血小板(PLT)、血红素(HGB)、血容比
(HCT)、平均血球容积MCV)、平均血球素容积(MCH)和红血球血红素平均浓度(MCHC)含量；测定小鼠淋巴结、胸腺和脾脏的重量；以及测定小鼠的天门冬胺酸转胺酶(aspartate 
aminotransferase,AST)、丙胺酸转胺酶(analine aminotransferase,ALT)、白蛋白、三酸甘油脂、血尿素氮(BUN)、肌酸酐和尿酸。
[0135] 统计分析
[0136] 在此，除非另有指明，所有数据皆以平均值±标准偏差(mean±standard deviation)表示。利用ANOVA变异分析并以Bonferroni校正，进行多重比较分析。几率值P＜
0.05代表具有显著差异。
[0137] 实施例1合成式(1)化合物
[0138] 依据以下流程图所示的步骤合成式(1)化合物，合成而得的多种化合物分以NMR光谱确认。
[0139] 1.1合成化合物1至15
[0140] 一般而言，添加N3连接符至石胆酸的羧基上，以制成化合物1至15(即，式(1-1)化合物)，其中依据流程图2所示的步骤，将化合物1-1-9与N3连接符(即，化合物1a至1e)反应。
所述N3连接符是依据流程图1所示的步骤合成。
[0141] 流程图1：试剂和条件：(a)NaN3，EtOH，回流，16小时(1a 90％，1b 85％，1c 90％，8d 96％，8e 
92％)，(b)TBDPSCl，咪唑(imidazole)，DMF，0℃至室温，12小时(6d 45％，6e 33％)，(c)MsCl，N-甲基吗福林(N-methyl morpholine)，THF，0℃至室温，3小时(7d 95％，7e 92％)，(d)TBAF(1M；溶于THF)，THF，0℃至室温，12小时(1d 90％，1e 85％)。
[0142] 合成化合物1a至1e
[0143] 化合物1a至1e分别依据以下所示的一般步骤1或2所制成。
[0144] 通用步骤1：添加NaN3(24.0mmol)至10毫升含经卤素取代的乙醇(8.0mmol)的EtOH溶液。加热所述反应，并回流16小时。反应混合物以水处理。于乙酸乙酯(ethyl acetate,EA)(3X)萃取后，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(brine)(2X)清洗，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，减压浓缩产生粗产物。将残余物以快速管柱色谱分析纯化，产生油状产物。
[0145] 通用步骤2：将咪唑(Imidazole)(2.57mmol)添加至搅拌中的二元醇化合物(5.15mmol)溶液(溶剂：5毫升的二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF))(0℃)。所述反应于0℃下，持续搅拌1小时；接着，滴加叔丁基(氯)二苯基硅烷(tert-butyl(chloro)
diphenylsilane,TBDPSCl)(2.57mmol)至反应中，于室温下持续搅拌12小时。再以H2O终止
混合物反应。于EA(3X)萃取后，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，减压浓缩产生粗产物。将残余物以快速管柱色谱分析纯化，得到TBDPS保护的醇类(油状)。
[0146] 将N-甲基吗福林(N-methyl morpholine)(2.51mmol)滴加至搅拌中的TBDPS保护的醇类(1.68mmol)溶液(溶剂：10毫升的干燥四氢呋喃(dry tetrahydrofuran,THF)(0℃)。
将反应置于0℃，持续搅拌30分钟，再滴加甲磺酰氯(methanesulfonyl chloride)
(3.35mmol)。所述反应于室温下，搅拌3小时。再以H2O终止反应。于EA(3X)萃取后，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，减压浓缩产生粗产物。将残余物以快速管柱色谱分析纯化，得到TBDPS保护的醇类(含甲磺酸酯OMs离去基)的化合物
(油状)。
[0147] 合成化合物1a
[0148] 如一般步骤Ⅰ所述：产率90％(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.75(t,J＝4.8Hz,2H),3.41(t,J＝4.8Hz,2H),2.02(s,1H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ61.4,53.5。
[0149] 合成化合物1b
[0150] 如一般步骤Ⅰ所述：产率85％(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.63-3.62(m,2H),3.58(t,J＝4.8Hz,2H),,3.49(t,J＝4.8Hz,2H),3.31(t,J＝4.8Hz,2H),2.86(s,1H).13C 
NMR(100MHz,CDCl3):δ72.2,69.6,61.3,50.4.HRMS calcd for C4H10O2N3(M+H)+,
132.0773；found,132.0774.。
[0151] 合成化合物1c
[0152] 如一般步骤Ⅰ所述：产率90％(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.71-3.66(m,4H),3.63-3.61(m,4H),3.59-3.54(m,3H),3.34(t,J＝4.8Hz,1H),2.66-2.64(m,1H).13C NMR
(100MHz,CDCl3):δ72.5,71.2,70.5,70.2,61.4,50.6.HRMS calcd for C6H14O3N3(M+H)+,
176.1035；found,176.1034。
[0153] 合成化合物1d
[0154] 如一般步骤Ⅱ所述：产率40％(4步骤)(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.65(t,J＝4.8Hz,2H),3.61-3.59(m,10H),3.54-3.52(m,2H),3.32(t,J＝4.8Hz,2H),2.77(brs,1H)
.13C NMR(100MHz,CDCl3):δ72.4,70.6,70.5,70.4,70.2,69.9,61.6,50.5.HRMS calcd 
for C8H18O4N3(M+H)+,220.1297；found,220.1300。
[0155] 合成化合物1e
[0156] 如一般步骤Ⅱ所述：产率24％(4步骤)(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.72(t,J＝4.4Hz,2H),3.68-3.66(m,14H),3.61-3.59(m,2H),3.40(t,J＝5.2Hz 2H),2.42(s,brs,
1H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ72.6,70.6,70.5,70.1,69.9,61.6,50.6.HRMS calcd for 
C10H22O5N3(M+H)+,264.1559；found,264.1555。
[0157] 流程图2:试剂和条件：(a)Fmoc-L-Asp(O-tBu)-OH，DCC，DMAP，CH2Cl2，室温，8小时(50％)；(b)1a or 1b or 1c or 1d or 1e，DCC，DMAP，CH2Cl2，室温，3小时(10a 88％，10b 86％，10c 80％，
10d 71％，10e 75％)；(c)DBU，CH2Cl2，室温，2小时(11a 93％，11b 92％，11c 85％，11d 
81％，11e 80％)；(d)NBD-Cl，NaHCO3，THF-EtOH，室温，2天(12aA 48％，12bA 35％，12cA 
40％，12dA 38％，12eA 40％)；(e)对硝苯甲酸(p-nitrobenzoic acid)或2-(7-甲氧基-2-氧代-2H-苯并哌喃-4-基)乙酸(2-(7-methoxy-2-oxo-2H-chromen-4-yl)acetic acid)，
HBTU，DIPEA，CH2Cl2，室温，3小时(12aB 98％，12bB 95％，12cB 85％，12dB 90％，12eB 
88％，12aC 95％，12bC 90％，12cC 88％，12dC 93％，12eC 85％)；(f)TFA，H2O，CH2Cl2，室温，2小时(1 85％，2 82％，3(FCW34)91％，4(FCW66)88％，5 85％，6 80％，7 82％，8 90％，
9 82％，10 84％，11 90％，12 82％，13 85％，14 80％，15 82％)。
[0158] 合成化合物1-1-9
[0159] 将石胆酸(LA)(13.3mmol)和Fmoc-L-Asp(O-tBu)-OH(15.9mmol)溶于150毫升CH2Cl2溶液，并持续搅拌，再添 加N ,N '-二环己基碳二亚胺(N ,N '-
dicyclohexylcarbodiimide,DCC)(15.9mmol)和4-二甲基胺吡啶(4-
dimethylaminopyridine,DMAP)(4.0mmol)。在室温下，持续搅拌反应8小时。于反应后，过滤移除固体。以CH2Cl2(3X)萃取滤液，以水(2X)和卤水(2X)清洗合并的有机层，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，最后进行减压浓缩得到粗产物。得到的残留物以快速管柱色谱分析纯化，使产物呈粉状。
[0160] 合成化合物10a至10e
[0161] 取一烧瓶，将化合物1-1-9(1.30mmol)和N3连接符(即，任一化合物1a至1e)(1.69mmol)混合于30毫升的CH2Cl2溶液中，接着添加DCC(1.69mmol)和DMAP(0.39mmol)至混合液中。所述反应在室温下，持续搅拌3小时。于反应后，过滤移除固体。以CH2Cl2(3X)萃取滤液，以水(2X)和卤水(2X)清洗合并的有机层，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，最后进行减压浓缩得到粗产物。得到的残留物以快速管柱色谱分析纯化，使产物呈粉状(化合物10a至
10e)。
[0162] 合成化合物11a至11e
[0163] 取10毫升Fmoc保护的化合物10a至10d(0.84mmol)溶液(溶剂：CH2Cl2)，并进行搅拌，添加1,8-二吖双环[5.4.0]十一-7-烯(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene,DBU)
(1.00mmol)得到一混合物，所述反应在室温下，持续搅拌2小时。将反应物浓缩以快速管柱色谱分析纯化得到化合物11a至11e。
[0164] 合成化合物12aA至12eA
[0165] 取10毫升含游离胺化合物11a至11e(0.67mmol)和硝基苯并二唑氯化物(nitrobenzoxadiazole chloride,NBD-Cl)(0.81mmol)溶液(溶剂：THF)，并持续搅拌，添加
10毫升EtOH、NaHCO3(1.35mmol)。在室温下，将反应物置于避光处，持续搅拌2天。接着以H2O处理反应物。再以EA(3X)萃取，以H2O(2X)和卤水(2X)清洗合并的有机层，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，最后进行减压浓缩得到粗产物。得到的残留物以快速管柱色谱分析纯化，得到化合物12aA至12eA。
[0166] 合成化合物12aB至12eB
[0167] 取10毫升含游离胺化合物11a至11e(0.31mmol)和硝基苯甲酸(硝苯甲酸,NB)(0.37mmol)溶液(溶剂：CH2Cl2)，并持续搅拌，滴加O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸(O-(benzotriazol-1-yl)-N,N,N’,N’-tetramethyluronium 
hexafluorophosphate,HBTU)(0.46mmol)和N,N-二异丙基乙胺(N,N-
diisopropylethylamine,DIPEA)(0.92mmol)。反应于室温下，持续搅拌3小时。接着以H2O处理反应物。再以CH2Cl2(3X)萃取，以H2O(2X)和卤水(2X)清洗合并的有机层，接着以MgSO4干燥，再进行过滤，最后进行减压浓缩得到粗产物。得到的残留物以快速管柱色谱分析纯化得到目标产物(即，化合物12aB至12eB)。
[0168] 合成化合物12aC至12eC
[0169] 合成化合物12aC至12eC的步骤与合成化合物12aB至12eB的步骤类似，除了本实验例的反应物是以7-甲氧基香豆素-4-乙酸(7-methoxycoumarin-4-acetic acid)取代硝基
苯甲酸。
[0170] 合成化合物1-15
[0171] 借由移除化合物12aA至12eA、12aB至12eB、12aC至12eC中的tBu保护基团来制备化合物1-5、6-10和11-15。一般而言，将经tBu保护的化合物(0.1mmol)溶于5毫升的三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)和ddH2O(100微升)，接着，在室温下持续搅拌反应混合物2小时。以旋转蒸发器去除TFA溶液。所述粗产物以反相HPLC纯化(RP-HPLC)(溶剂A：水+0.1％
TFA；溶剂B：乙腈(acetonitrile)+0.05％TFA)，再以冷冻干燥得到最终产物(油或固体)。
[0172] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-叠氮乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1氢-环戊[α]菲基-3基)氧基)-3-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-
4-基)氨)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-
azidoethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]
phenanthren-3-yl)oxy)-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)-4-oxobu
[0173] 产率17％(5步骤)(粉末)，mp 78-79℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.46(d,J＝8.4Hz,1H),6.97(d,J＝8.4Hz,1H),6.26(d,J＝8.4Hz,1H),4.87-4.80(m,2H),4.23(t,J＝
4.8Hz,2H),3.46(t,J＝4.8Hz,2H),3.21-3.06(m,2H),2.42-2.34(m,1H),2.29-2.21(m,
1H),1.95-1.89(m,1H),1.86-1.75(m,5H),1.67-1.64(m,1H),1.55-1.52(m,2H),1.50-1.29
(m,8H),1.28-1.20(m,3H),1.16-0.97(m,6H),0.91-0.88(sd,J＝6.4Hz,6H),0.62(s,3H)
.13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.2,173.3,168.6,144.3,143.8,142.3,135.7,125.5,
100.0,77.8,62.9,56.4,55.9,52.6,49.8,42.7,41.9,40.5,40.1,35.7,35.3,34.8,34.6,
32.0,31.1,30.9,28.1,26.9,26.4,26.3,24.2,23.3,20.8,18.2,12.0.HRMS calcd for 
C36H48N7O9(M－H)－,722.3514；found,722.3510。
[0174] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1氢-环戊[a]菲基-3基)氧基)-3-((7-硝苯
[c][1,2,5]唑-4-基)氨)-4-氧丁酸)((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-
(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-
cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)
amino)-4-oxobutanoic acid)(化合物2)
[0175] 产率11％(5步骤)(粉末)，mp 75-76℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.45(d,J＝8.4Hz,1H),7.02(d,J＝7.6Hz,1H),6.27(d,J＝8.4Hz,1H),44.86-4.81(m,2H),4.22(t,J＝
4.8Hz,2H),3.70-3.65(m,4H),3.37(t,J＝4.8Hz,2H),3.20-3.05(m,2H),2.40-2.33(m,
1H),2.27-2.19(m,1H),1.94-1.91(m,1H),1.86-1.73(m,5H),1.67-1.64(m,1H),1.54-1.52
(m,2H),1.44-1.29(m,8H),1.27-1.19(m,3H),1.15-0.97(m,6H),0.90-0.86(sd,J＝6.4Hz,
6H),0.61(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.5,173.5,168.7,144.3,143.8,142.3,
135.8,125.3,100.0,77.7,70.0,69.2,63.3,56.4,56.0,52.6,50.6,42.7,41.9,40.5,
40.0,35.7,35.3,34.8,34.5,32.0,31.1,30.9,28.1,26.9,26.4,26.3,24.1,23.2,20.8,
18.2,12.0.HRMS calcd for C38H52N7O10(M－H)－,766.3776；found,766.3767。
[0176] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-
((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-
((R)-5-(2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-
dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-((7-nitrobenzo
[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)-4-oxobutanoic acid)(化合物3)–FCW34
[0177] 产率12％(5步骤)(粉末)，mp 71-73℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.46(d,J＝8.8Hz,1H),6.98(d,J＝6.0Hz,1H),6.27(d,J＝8.8Hz,1H),4.87-4.81(m,2H),4.21(t,J＝
5.2Hz,2H),3.71-3.66(m,8H),3.38(t,J＝5.2Hz,2H),3.19-3.05(m,2H),2.40-2.32(m,
1H),2.26-2.18(m,1H),1.95-1.92(m,1H),1.86-1.72(m,5H),1.67-1.63(m,1H),1.55-1.52
(m,2H),1.45-1.29(m,8H),1.27-1.19(m,3H),1.15-0.97(m,6H),0.91-0.87(sd,J＝6.4Hz,
6H),0.61(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.5,172.9,168.6,144.3,143.8,142.3,
135.7,125.4,100.0,77.7,70.7,70.6,70.1,69.3,63.4,56.4,55.9,52.6,50.7,42.7,
41.9,40.5,40.1,35.7,35.3,34.8,34.6,32.0,31.9,31.1,30.9,28.2,26.9,26.5,26.4,
26.3,24.2,23.3,20.8,18.3,12.0.HRMS calcd for C40H57N7O11Na(M+Na)+,834.4014；
found,834.4014。
[0178] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1-叠氮基-13-氧代-3,6,9,12-四氧十七烷-16-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-((7-硝苯[c]
[1,2,5]唑-4-基)氨)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1-
azido-13-oxo-3,6,9,12-tetraoxaheptadecan-16-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-
1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-
yl)amino)-4-oxobutanoic acid)(化合物4)-FCW66
[0179] 产率10％(5步骤)(油)，H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.44(d,J＝8.5Hz,1H),7.16(brs,1H),6.26(d,J＝8.0Hz,1H),4.81(brs,2H),4.19(t,J＝4.5Hz,2H),3.68-3.64(m,
12H)3.70(t,J＝5.0Hz,2H),3.14-3.07(m,2H),2.37-2.31(m,1H),2.24-2.18(m,1H),1.92-
1.90(m,1H),1.85-1.72(m,5H),1.64(brs,1H),1.53-1.52(m,2H),1.43-1.27(m,8H),1.25-
1.19(m,3H),1.13-0.96(m,6H),0.89-0.85(sd,J＝6.0Hz,6H),0.60(s,3H).13C NMR
(125MHz,CDCl3):δ174.4,172.8,168.8,144.3,143.8,142.6,135.8,125.2,100.1,77.6,
70.7,70.6,70.5,70.0,69.2,63.4,56.4,55.9,52.9,50.7,42.7,41.9,40.5,40.1,35.7,
35.3,34.8,34.6,32.0,31.1,30.9,28.1,26.9,26.4,26.3,24.1,23.3,20.8,18.3,
12.0.HRMS calcd for C42H60N7O12(M－H)－,854.4300；found,854.4293。
[0180] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1叠氮基-16-氧代-3,6,9,12,15-戊氧杂二十烷-19-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-((7-硝
苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-
1-azido-16-oxo-3,6,9,12,15-pentaoxaicosan-19-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-
1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-
yl)amino)-4-oxobutanoic acid)(化合物5)
[0181] 产率10％(5步骤)(油)，1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.44(d,J＝8.5Hz,1H),6.26(d,J＝7.5Hz,1H),4.81(brs,2H),4.20(t,J＝4.5Hz,2H),3.68-3.63(m,16H)3.37(t,J＝
4.5Hz,2H),3.14-3.06(m,2H),2.37-2.31(m,1H),2.24-2.18(m,1H),1.92-1.90(m,1H),
1.85-1.75(m,5H),1.65(brs,1H),1.52-1.51(m,2H),1.40-1.31(m,8H),1.22-1.19(m,3H),
1.13-0.96(m,6H),0.89-0.86(sd,J＝6.0Hz,6H),0.60(s,3H).13C NMR(125MHz,CDCl3):δ
174.4,168.8,144.3,143.8,142.6,135.8,125.1,100.1,77.5,70.6,70.5,70.0,69.2,
63.4,56.5,55.9,53.0,50.7,42.7,41.9,40.5,40.1,35.7,35.3,34.8,34.6,32.0,31.0,
30.9,28.1,26.9,26.4,26.3,24.1,23.2,20.8,18.3,12.0.HRMS calcd for C44H64N7O13
(M－H)－,898.4562；found,898.4556。
[0182] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2叠氮基乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(4-硝基苯酰胺基)-4-氧
丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-azidoethoxy)-5-
oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)
oxy)-3-(4-nitrobenzamido)-4-oxobutanoic acid)(化合物6)
[0183] 产率32％(5步骤)(粉末)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.29(d,J＝8.4Hz,2H),7.97(d,J＝8.4Hz,2H),7.37(d,J＝7.6Hz,1H),5.00-4.97(m,1H),4.86-4.80(m,1H),4.24(t,J
＝5.2Hz,2H),3.47(t,J＝5.2Hz,2H),3.17(dd,J＝17.4Hz,4.0Hz,1H),3.06(dd,J＝
17.2Hz,4.0Hz,1H),2.43-2.36(m,1H),2.31-2.23(m,1H),1.98-1.95(m,1H),1.91-1.80(m,
5H),1.68-1.66(m,1H),1.57-1.54(m,2H),1.43-1.37(m,8H),1.30-1.23(m,3H),1.19-0.98
(m,6H),0.93-0.91(sd,J＝7.6Hz,6H),0.65(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.0,
169.8,165.2,149.9,139.1,128.4,123.8,62.8,56.4,55.9,49.8,49.3,42.7,41.9,40.4,
40.0,35.7,35.3,34.8,34.5,32.0,31.0,30.8,28.1,26.9,26.4,26.2,24.1,23.2,20.8,
18.2,12.0.HRMS calcd for C37H51N5O9Na(M+Na)+,732.3584；found,732.3593。
[0184] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(4-硝基苯
甲酰胺)-4-氧丁酸)((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-
azidoethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-
cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(4-nitrobenzamido)-4-oxobutanoic acid)
(化合物7)
[0185] 产率30％(5步骤)(粉末)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.26(d,J＝8.8Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝6.8Hz,1H),4.97-4.95(m,1H),4.83-4.77(m,1H),4.21(t,J
＝4.6Hz,2H),3.70-3.64(m,4H),3.37(t,J＝5.2Hz,2H),3.16-3.02(m,2H),2.40-2.33(m,
1H),2.27-2.19(m,1H),1.95-1.92(m,1H),1.89-1.74(m,5H),1.65-1.63(m,1H),1.55-1.52
(m,2H),1.40-1.27(m,8H),1.24-1.20(m,3H),1.16-1.00(m,6H),0.90-0.87(sd,J＝6.4Hz,
6H),0.62(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.4,169.8,165.3,149.9,139.1,128.4,
123.8,70.0,69.2,63.2,56.4,56.0,50.6,49.3,42.7,41.9,40.4,40.1,35.7,35.3,34.9,
34.6,32.0,31.1,30.9,28.1,26.9,26.4,26.3,24.1,23.3,20.8,18.3,12.0.HRMS calcd 
for C39H55N5O10Na(M+Na)+,776.3847；found,776.3840。
[0186] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-
(4-硝基苯甲酰胺)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-
(2-azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-
1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(4-nitrobenzamido)-4-oxobutanoic 
acid)(化合物8)
[0187] 产率24％(5步骤)(粉末)，mp 52-53℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.27(d,J＝8.8Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(d,J＝7.2Hz,1H),4.98-4.95(m,1H),4.83-4.77
(m,1H),4.20(t,J＝4.8Hz,2H),3.70-3.65(m,8H),3.37(t,J＝4.8Hz,2H),3.16-3.00(m,
2H),2.39-2.32(m,1H),2.26-2.18(m,1H),1.95-1.92(m,1H),1.89-1.73(m,5H),1.66-1.64
(m,1H),1.55-1.52(m,2H),1.40-1.26(m,8H),1.23-1.16(m,3H),1.14-0.96(m,6H),0.90-
0.87(sd,J＝6.4Hz,6H),0.62(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.4,169.8,165.2,
149.8,139.1,128.4,123.8,70.7,70.6,70.1,69.3,63.4,56.4,56.0,50.7,49.3,42.7,
41.9,40.4,40.1,35.7,35.3,34.9,34.6,32.0,31.1,30.9,28.1,27.0,26.4,26.3,24.1,
23.3,20.8,18.3,12.0.HRMS calcd for C41H59N5O11Na(M+Na)+,820.4109；found,
820.4103。
[0188] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1叠氮基-13-氧代-3,6,9,12-四氧杂十七烷-16-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(4-硝基苯
甲酰胺)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1-azido-13-oxo-3,
6,9,12-tetraoxaheptadecan-16-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]
phenanthren-3-yl)oxy)-3-(4-nitrobenzamido)-4-oxobutanoic
[0189] 产率21％(5步骤)(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.27(d,J＝8.8Hz,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(d,J＝7.6Hz,1H),4.7-4.96(m,1H),4.80-4.79(m,1H),3.72-3.58(m,
14H),3.38(t,J＝4.8Hz,2H),3.18-2.98(m,2H),2.36-2.33(m,1H),2.27-2.20(m,1H),
1.95-1.92(m,1H),1.89-1.78(m,5H),1.67-1.66(m,1H),1.55-1.52(m,2H),1.40-1.34(m,
8H),1.23-1.17(m,3H),1.15-0.97(m,6H),0.91-0.87(sd,J＝4.0Hz,6H),0.62(s,3H).13C 
NMR(100MHz,CDCl3):δ175.3,174.4,169.9,165.3,149.8,139.1,128.5,123.8,72.4,70.6,
70.5,70.2,70.0,69.2,63.4,61.6,56.4,55.9,50.6,49.3,42.7,41.9,40.4,40.1,36.1,
35.7,35.4,34.9,34.6,32.0,30.9,30.7,28.2,27.0,26.3,24.1,23.3,20.9,18.3,
12.0.HRMS calcd for C43H63N5O12Na(M+Na)+,864.4371；found,864.4362。
[0190] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1叠氮基-16-氧代-3,6,9,12,15-戊氧杂二十烷-19-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(4-硝基
苯甲酰胺)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1-azido-13-oxo-
3,6,9,12-tetraoxaheptadecan-16-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta
[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(4-nitrobenzamido)-4-oxobutanoic acid)(化合物10)
[0191] 产率22％(5步骤)(油)，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.25(d,J＝8.4Hz,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(d,J＝6.4Hz,1H),4.95(brs,1H),4.78(brs,1H),4.18(t,J＝4.0Hz,
2H),3.63-3.62(m,16H),3.35(t,J＝4.4Hz,2H),3.14-2.97(m,2H),2.37-2.30(m,1H),
2.24-2.16(m,1H),1.93-1.90(m,1H),1.84-1.76(m,5H),1.64-1.62(m,1H),1.53-1.51(m,
2H),1.39-1.33(m,8H),1.25-1.19(m,3H),1.15-0.94(m,6H),0.89-0.86(sd,J＝6.4Hz,
6H),0.60(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.4,169.9,165.2,149.8,139.1,128.5,
123.8,70.6,70.5,70.4,69.9,69.1,63.4,56.4,55.9,50.6,49.4,42.7,41.9,40.4,40.0,
35.7,35.3,34.8,34.5,32.0,31.1,30.8,28.1,26.9,26.4,26.2,24.1,23.2,20.8,18.2,
12.0.HRMS calcd for C45H67N5O13Na(M+Na)+,908.4633；found,908.4630。
[0192] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2叠氮基乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(2-(7-甲氧基2-氧代-
2H-苯并哌喃-4-基)乙酰胺基)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-
((R)-5-(2-azidoethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-
cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(2-(7-methoxy-2-oxo-2H-chromen-4-yl)
acetamido)-4-oxobutanoic acid)(化合物11)
[0193] 产率35％(5步骤)(粉末)，mp 151-152℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.58(d,J＝8.8Hz,1H),7.31(d,J＝7.6Hz,1H),6.83(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),6.73(d,J＝2.4Hz,1H),
6.28(s,1H),4.78-4.70(m,2H),4.21(t,J＝5.0Hz,2H),3.82(s,3H),3.74(s,2H),3.45(t,J
＝5.0Hz,2H),3.03-2.87(m,2H),2.41-2.33(m,1H),2.28-2.20(m,1H),1.93-1.91(m,1H),
1.84-1.74(m,5H),1.61-1.53(m,2H),1.49-1.46(m,1H),1.39-1.27(m,8H),1.23-1.14(m,
4H),1.10-0.93(m,5H),0.89-0.88(sd,J＝4.4Hz,6H),0.61(s,3H).13C NMR(100MHz,
CDCl3):δ174.3,174.0,169.8,167.9,163.0,161.5,155.4,149.9,126.0,112.9,112.8,
112.5,101.0,62.8,56.3,55.9,55.8,49.8,49.2,42.7,41.9,40.4,40.0,39.7,35.8,35.3,
34.9,34.5,32.0,31.1,30.9,28.1,27.0,26.4,26.3,24.1,23.3,20.8,18.2,12.0.HRMS 
calcd for C42H56N4O10Na(M+Na)+,799.3894；found,799.3890。
[0194] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(2-(7-甲
氧基2-氧代-2H-苯并哌喃-4-基)乙酰胺基)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,
14S)-17-((R)-5-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-
dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(2-(7-methoxy-
2-oxo-2H-chromen-4-yl)acetamido)-4-oxobutanoic acid)(化合物12)
[0195] 产率29％(5步骤)(粉末)，mp 142-143℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.58(d,J＝9.2Hz,1H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),6.83(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),6.73(d,J＝2.4Hz,1H),
6.28(s,1H),4.77-4.70(m,2H),4.21(t,J＝4.8Hz,2H),3.82(s,3H),3.74(s,2H),3.69-
3.64(m,4H),3.36(t,J＝4.8Hz,2H),3.02-2.87(m,2H),2.40-2.32(m,1H),2.26-2.18(m,
1H),1.93-1.91(m,1H),1.83-1.74(m,5H),1.61-1.46(m,3H),1.39-1.26(m,8H),1.23-1.10
(m,4H),1.08-0.94(m,5H),0.88-0.86(sd,J＝6.0Hz,6H),0.60(s,3H).13C NMR(100MHz,
CDCl3):δ174.3,169.8,167.9,162.9,161.5,155.4,149.9,126.0,112.9,112.7,112.5,
101.0,70.0,69.2,63.2,56.3,56.0,55.8,50.6,49.1,42.7,41.9,40.4,40.0,39.7,35.7,
35.3,34.8,34.5,32.0,31.1,30.9,28.1,26.9,26.4,26.2,24.1,23.3,20.8,18.2,
12.0.HRMS calcd for C44H60N4O11Na(M+Na)+,843.4156；found,843.4147。
[0196] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-
(2-(7-甲氧基2-氧代-2H-苯并哌喃-4-基)乙酰胺基)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,
10S,13R,14S)-17-((R)-5-(2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-
10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(2-(7-
methoxy-2-oxo-2H-chromen-4-yl)acetamido)-4-oxobutanoic acid)(化合物13)。
[0197] 产率25％(5步骤)(粉末)，mp 134-135℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.57(d,J＝8.8Hz,1H),7.36(d,J＝7.2Hz,1H),6.82(dd,J＝8.8Hz,2.0Hz,1H),6.72(d,J＝2.0Hz,1H),
6.27(s,1H),4.77-4.69(m,2H),4.20(t,J＝4.8Hz,2H),3.81(s,3H),3.74(s,2H),3.70-
3.64(m,8H),3.36(t,J＝5.2Hz,2H),3.02-2.85(m,2H),2.38-2.31(m,1H),2.25-2.17(m,
1H),1.92-1.90(m,1H),1.82-1.73(m,5H),1.57-1.44(m,3H),1.38-1.25(m,8H),1.22-1.13
(m,4H),1.08-0.93(m,5H),0.87-0.86(sd,J＝5.2Hz,6H),0.60(s,3H).13C NMR(100MHz,
CDCl3):δ174.4,174.3,169.8,168.0,162.9,161.5,155.3,149.9,126.0,113.0,112.7,
112.5,100.9,70.6,70.5,70.0,69.2,63.3,56.3,56.0,55.7,50.6,49.1,42.7,41.9,40.3,
40.0,39.6,35.7,35.3,34.8,34.5,32.0,31.2,30.9,28.1,26.9,26.3,26.2,24.1,23.2,
20.8,18.2,12.0.HRMS calcd for C46H64N4O12Na(M+Na)+,887.4418；found,887.4417。
[0198] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1叠氮基-13-氧代-3,6,9,12-戊氧杂二十烷-16-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(2-(7-甲氧
基2-氧代-2H-苯并哌喃-4-基)乙酰胺基)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,
14S)-17-((R)-1-azido-13-oxo-3,6,9,12-tetraoxaheptadecan-16-yl)-10,13-
dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(2-(7-methoxy-
2-oxo-2H-chromen-4-yl)acetamido)-4-oxobutanoicacid)(化合物14)
[0199] 产率21％(5步骤)(粉末)，mp 126-127℃，1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.57(d,J＝9.0Hz,1H),7.34(d,J＝7.5Hz,1H),6.83(dd,J＝9.0Hz,2.0Hz,1H),6.72(d,J＝2.0Hz,1H),
6.27(s,1H),4.77-4.69(m,2H),4.19(t,J＝4.5Hz,2H),3.82(s,3H),3.74(s,2H),3.68-
3.64(m,12H),3.36(t,J＝4.5Hz,2H),3.02-2.85(m,2H),2.37-2.31(m,1H),2.24-2.17(m,
1H),1.92-1.90(m,1H),1.82-1.74(m,5H),1.60-1.45(m,3H),1.37-1.26(m,8H),1.25-1.10
(m,4H),1.07-0.93(m,5H),0.87-0.86(sd,J＝6.5Hz,6H),0.60(s,3H).13C NMR(125MHz,
CDCl3):δ174.3,174.0,169.8,167.9,163.0,161.4,155.4,149.8,126.0,113.0,112.7,
112.5,101.0,70.7,70.6,70.5,70.0,69.2,63.4,56.4,56.0,55.8,50.7,49.2,42.7,41.9,
40.4,40.0,39.7,35.8,35.3,34.9,34.6,32.0,31.2,30.9,28.1,27.0,26.4,26.3,24.1,
23.3,20.8,18.3,12.0.HRMS calcd for C48H68N4O13Na(M+Na)+,931.4681；found,
931.4681。
[0200] (3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S)-17-((R)-1叠氮基-16-氧代-3,6,9,12,15-戊氧杂二十烷-19-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氧基)-3-(2-(7-
甲氧基2-氧代-2H-苯并哌喃-4-基)乙酰胺基)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,8R,9S,10S,
13R,14S)-17-((R)-1-azido-16-oxo-3,6,9,12,15-pentaoxaicosan-19-yl)-10,13-
dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)oxy)-3-(2-(7-methoxy-
2-oxo-2H-chromen-4-yl)acetamido)-4-oxobutanoic acid)(化合物15)
[0201] 产率21％(5步骤)(粉末)，mp 113-114℃，1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.57(d,J＝8.5Hz,1H),7.34(d,J＝7.0Hz,1H),6.82(dd,J＝9.0Hz,2.0Hz,1H),6.73(d,J＝2.0Hz,1H),
6.27(s,1H),4.75-4.71(m,2H),4.18(t,J＝5.0Hz,2H),3.81(s,3H),3.73(s,2H),3.67-
3.62(m,16H),3.35(t,J＝5.0Hz,2H),3.01-2.85(m,2H),2.37-2.31(m,1H),2.23-2.17(m,
1H),1.92-1.90(m,1H),1.79-1.73(m,5H),1.59-1.44(m,3H),1.35-1.26(m,8H),1.25-1.10
(m,4H),1.07-0.92(m,5H),0.87-0.85(sd,J＝6.5Hz,6H),0.59(s,3H).13C NMR(125MHz,
CDCl3):δ174.2,169.8,167.9,162.9,161.3,155.4,149.7,126.0,113.1,112.7,112.5,
101.0,76.6,70.7,70.6,70.6,70.5,70.0,69.2,63.4,56.3,56.0,55.7,50.7,49.2,42.7,
41.9,40.4,40.0,39.7,35.8,35.3,34.9,34.5,32.0,31.2,30.9,28.1,26.9,26.4,26.3,
24.1,23.2,20.8,18.3,12.0.HRMS calcd for C50H72N4O14Na(M+Na)+,975.4943；found,
975.4945。
[0202] 1.2合成化合物16至27
[0203] 依照流程图3至8所示的步骤合成化合物16至27(即，化合物式(1-2))，其中流程图3至6揭示化合物α-3-NH2的修饰；流程图7和8揭示了石胆酸(LA)的α-3-NH2上氨基酸侧链的修饰。
[0204] 流程图3:试剂和条件:(a)溴丙烯(allyl bromide)，K2CO3，DMF，100℃，12小时，99％，(b)I2，
PPh3，咪唑，CH2Cl2，0℃至室温，3小时，74％，(c)NaN3，DMF，120℃，12小时，99％。
[0205] 流程图4:试剂和条件：(a)90％甲酸(formic acid)，120℃，12小时，99％，(b)(Boc)2O，DMAP，t-BuOH，CH2Cl2，室温，1小时，60％，(c)K2CO3，EtOH-CH2Cl2，室温，4小时，99％，(d)I2，PPh3，咪唑，CH2Cl2，0℃至室温，3小时，82％，(e)NaN3，DMF，120℃，12小时，99％。
[0206] 流程图5：试剂和条件：(a)PPh3，THF-H2O，室温，12小时，72％，(b)Boc-L-Asp(O-tBu)，HBTU，
DIPEA，CH2Cl2，室温，2小时，95％，(c)TFA，H2O，CH2Cl2，室温，3小时，90％。
[0207] 流程图6：试剂和条件：(a)PPh3，THF-H2O，室温，12小时，72％，(b)Fmoc-L-Asp(O-tBu)，HBTU，
DIPEA，CH2Cl2，室温，3小时，93％，(c)DBU，CH2Cl2，室温，0.5小时，92％，(d)NBD-Cl，NaHCO3，THF，EtOH，室温，2天，42％，(e)Pd(PPh3)4，PhSiH3，CH2Cl2，室温，2小时，95％，(f)TFA，H2O，CH2Cl2，室温，3小时，1-2-20，90％；16，88％；17，85％，(g)1C，DCC，DMAP，CH2Cl2，室温，6小时，72％，(h)1-2-26，HBTU，DIPEA，CH2Cl2，室温，2小时，95％，(i)TfN3溶于CH2Cl2，CuSO4·
5H2O，K2CO3，MeOH，H2O，0℃至室温，16小时，92％，(j)PPh3，Et2O-THF-1M HCl(aq)，室温，12小时，88％。
[0208] 加入丙烯基保护基的一般步骤
[0209] 持续搅拌下，将K2CO3(45.53mmol)和溴丙烯(16.70mmol)逐滴加入至20毫升的LA(15.18mmol)的溶液(溶剂：DMF)。所述反应于100℃下，持续搅拌12小时。反应后过滤去除固体、浓缩过滤物，接着以CH2Cl2(3X)进行萃取，再以H2O(2X)和卤水(2X)清洗合并的有机层，以MgSO4干燥，再进行过滤，经减压浓缩得到粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化，产生目标粉末状产物。
[0210] 碘化的一般步骤
[0211] 持续搅拌下，I2(60.71mmol)和咪唑(124.46mmol)添加至125毫升的PPh3(54.64mmol)的溶液(溶剂：CH2Cl2；0℃)。所述反应于0℃下持续搅拌30分钟，接着逐渐滴加
125毫升的化合物1-2-1(15.18mmol)的溶液(溶剂：CH2Cl2)。所述反应置于室温下3小时。再将Na2S2O3(aq)加入反应混合物中使反应停止。经CH2Cl2(3X)萃取后，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，再以MgSO4干燥，进行过滤，经减压浓缩得到粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化得到化合物1-2-2。
[0212] 形成叠氮化物的一般步骤
[0213] 持续搅拌下，将NaN3(33.73mmol)添加至30毫升的化合物1-2-2(11.24mmol)溶液(溶剂：DMF)。所述反应于120℃下持续搅拌12小时。经反应后，过滤去除固体，浓缩过滤物，接着以CH2Cl2(3X)萃取，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，并以MgSO4干燥，再进行过滤，接着减压浓缩得到粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化得到油状化合物1-2-3。
[0214] 保护CHO的一般步骤
[0215] 取一烧瓶，添加LA(13.28mmol)至30毫升的90％甲酸中，接着于120℃下持续搅拌12小时。过滤收集固体，再以水清洗。减压浓缩使固定干燥产生化合物1-2-7。
[0216] 加入t-Bu保护基的一般步骤
[0217] 将(Boc)2O(13.62mmol)和DMAP(2.04mmol)添加至持续搅拌的化合物1-2-7(6.81mmol)溶液(溶剂：30毫升CH2Cl2和30毫升的叔丁醇)。所述反应于室温下持续搅拌1小时，接着将反应物浓缩，再以快速管柱层析纯化得到化合物1-2-8。
[0218] 合成化合物1-2-9
[0219] 持续搅拌下，将K2CO3(34.56mmol)添加至化合物1-2-8(4.32mmol)溶液(溶剂：20毫升CH2Cl2和40毫升EtOH溶液)。所述反应于室温下持续搅拌4小时。于反应后，过滤去除固体，浓缩过滤物，接着以CH2Cl2(3X)萃取，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，再以MgSO4干燥后进行过滤，减压浓缩产生粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化得到油状化合物1-2-9。
[0220] 去除CHO保护基团的一般步骤
[0221] 将K2CO3(34.56mmol)添加至一含化合物1-2-8(4.32mmol)的20毫升CH2Cl2和40毫升EtOH的溶液。所述反应持续搅拌4小时。于反应后过滤去除固体，浓缩过滤物并以CH2Cl2(3X)进行萃取，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，再以MgSO4干燥，进行过滤，最后进行减压浓缩得到粗产品。将残留物以快速管柱层析纯化得到油状化合物1-2-9。
[0222] 将酰胺还原为胺的一般步骤
[0223] 持续搅拌下，将PPh3(80.18mmol)添加至化合物1-2-3(40.09mmol)溶液(溶剂：60毫升H2O和180毫升THF)。于室温下持续搅拌所述反应12小时，再进行浓缩，以CH2Cl2(3X)萃取，合并的有机层以H2O(2X)和卤水(2X)清洗，再以MgSO4干燥，进行过滤，减压浓缩得到粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化得到油状化合物1-2-15。
[0224] 去除丙烯基保护基团的一般步骤
[0225] 持续搅拌下，将Pd(Ph3)4(0.46mmol)和苯基硅烷(9.20mmol)逐滴至化合物1-2-18(4.60mmol)溶液(溶剂：60毫升CH2Cl2)。在室温下，持续搅拌所述反应2小时，接着进行浓缩，再以快速管柱层析纯化，得到化合物1-2-19。
[0226] 去除Boc保护基团
[0227] 将经Boc保护的化合物(0.1mmol)溶于5毫升TFA(添加100μL ddH2O)，接着于室温下持续搅拌反应混合物3小时，浓缩反应物再以快速管柱层析纯化，得到标的化合物。
[0228] 将胺转化至叠氮的一般步骤
[0229] 于反应前，需新鲜制备TfN3，具体步骤参照如下：将6摩尔当量NaN3受体(222.67mmol)溶于最小体积的水(40毫升)中并冷却至0℃。添加等体积的CH2Cl2(40毫升)，接着缓慢添加Tf2O(111.34mmol)至持续搅拌的溶液中。将反应物密封并于0℃下持续搅拌2
小时。小心添加饱和的NaHCO3至持续搅拌的混合物中，待CO2不再释出后，将混合物移至分液漏斗内。以CH2Cl2清洗水相二次，以饱和的NaHCO3清洗合并的有机层。直接使用CH2Cl2溶液中的TfN3，而未进一步将其纯化。双氨化合物1-2-23(37.11mmol)、K2CO3(44.53mmol)和
CuSO4·5H2O(0.37mmol)溶于水(30毫升)。在剧烈搅拌下，一次性添加新鲜制备的TfN3溶液。
缓慢加入甲醇(100毫升)，于室温下持续搅拌16小时，再利用真空浓缩。添加1N HCl使水溶液酸化至pH2，再以乙烯乙酸(EA)(3X)进行萃取。合并的有机层以MgSO4干燥，再进行过滤，减压浓缩得到粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化得到油状化合物1-2-25。
[0230] 将叠氮还原成胺的一般步骤
[0231] 持续搅拌下，将PPh3(20.97mmol)溶液(溶剂：33毫升的Et2O)逐滴加入至一持续搅拌、且含有化合物1-2-25(20.97mmol)的溶液(溶剂：33毫升Et2O、6.6毫升THF和26.4毫升1N HCl(aq))。在室温下，持续搅拌反应12小时，浓缩反应物，并以CH2Cl2(3X)萃取粗产品，以H2O(2X)和卤水(2X)清洗有机层，再以MgSO4干燥，进行过滤，最后经减压浓缩得到粗产品。所述残留物以快速管柱层析纯化得到油状化合物1-2-26。
[0232] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-2-氨-3-羧酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-2-amino-3-
carboxypropanamido)-10,13-dimeth ylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-
17-yl)pentanoic acid)。1-2-14(litho-N-Asp)
[0233] mp 158-160℃，1H NMR(400MHz,MeOD):δ4.07-4.01(m,1H),3.72-3.65(m,1H),2.82-2.68(m,2H),2.35-2.29(m,1H),2.24-2.16(m,1H),2.04-2.01(m,1H),1.95-1.78(m,
5H),1.62-1.59(m,2H),1.48-1.42(m,6H),1.34-1.22(m,6H),1.18-1.04(m,6H),0.98(s,
3H),0.95(d,J＝6.4Hz,3H),0.70(s,3H).13C NMR(100MHz,MeOD):δ178.3,174.5,168.7,
58.1,57.7,51.9,51.4,44.0,42.0,41.6,37.4,37.3,37.1,36.8,35.8,34.2,32.4,32.1,
29.3,28.3,27.7,25.4,24.1,22.1,18.9,12.6.HRMS calcd for C28H47N2O5(M+H)+,
491.3485；found,491.3480。
[0234] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-3-羧基-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)丙酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-
3-((S)-3-carboxy-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)propanamido)-
10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoic 
acid)。1-2-20(FCW402)
[0235] mp 134-136℃，1H NMR(400MHz,MeOD):δ8.53(d,J＝8.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),6.42(d,J＝8.8Hz,1H),3.76-3.65(m,1H),3.08-2.96(m,2H),2.35-2.27(m,
1H),2.22-2.14(m,1H),2.00-1.94(m,1H),1.93-1.73(m,5H),1.61-1.53(m,2H),1.43-1.35
(m,7H),1.33-1.22(m,5H),1.15-0.99(m,6H),0.95(s,3H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.67(s,
3H).13C NMR(100MHz,MeOD):δ178.2,170.8,146.1,145.8,145.5,125.0,102.2,58.1,
57.7,56.1,51.5,44.1,44.0,41.9,41.6,37.3,37.2,36.8,35.8,34.1,32.5,32.2,29.3,
28.3,27.7,25.3,24.1,22.0,18.9,12.6.HRMS calcd for C34H46N5O8(M－H)－,652.3346；
found,652.3339。
[0236] (3S)-4-(((3R,5R,10S,13R)-17-((R)-5-(2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氨)-3-((7-硝苯[c]
[1,2,5]唑-4-基)氨)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,10S,13R)-17-((R)-5-(2-(2-(2-
azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-
cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)amino)-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-
yl)amino)-4-oxobutanoic acid)。化合物16(FCW393)。
[0237] mp 80-81℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.37(s,1H),7.77(s,1H),7.01(s,1H),6.35(s,1H),4.87-4.76(m,1H)4.21(s,2H),3.80-3.66(m,9H),3.38(s,2H),3.14-3.06(m,
2H),2.35-2.30(m,1H),2.23-2.16(m,1H),1.79-1.72(m,7H),1.46-1.09(m,13H),1.02-
0.98(m,3H),0.86(s,3H),0.79(d,J＝4.0Hz,3H),0.74-0.67(m,3H)0.53(s,3H).13C NMR
(100MHz,CDCl3):δ174.8,173.2,168.2,144.3,143.7,142.8,136.4,124.5,100.8,70.6,
70.5,70.0,69.2,63.5,56.5,56.1,54.1,50.7,50.4,42.6,42.3,40.4,40.1,35.7,35.6,
35.3,34.4,32.9,31.2,30.9,28.1,27.3,26.9,26.2,24.0,23.4,20.7,18.2,11.9.HRMS 
calcd for C40H58N8O10Na(M+Na)+,833.4174；found,833.4181。
[0238] (3S)-4-(((3R,5R,10S,13R)-17-((R)-5-((2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基)氨)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氨)-3-((7-硝苯[c]
[1,2,5]唑-4-基)氨)-4-氧丁酸((3S)-4-(((3R,5R,10S,13R)-17-((R)-5-((2-(2-(2-
azidoethoxy)ethoxy)ethyl)amino)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-
dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)amino)-3-((7-
nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)-4-oxobutanoic acid)。化合物17
(FCW551)
[0239] mp 90-91℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.33(d,J＝8.8Hz,1H),7.89(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(d,J＝8.0Hz,1H),6.51(t,J＝4.8Hz,1H),6.35(d,J＝8.8Hz,1H),4.85-4.76(m,
1H),3.85-3.76(m,1H),3.67-3.61(m,6H),3.54(t,J＝5.2Hz,2H),3.44-3.42(m,2H),3.38
(t,J＝5.2Hz,2H),3.10(d,J＝5.2Hz,2H),2.28-2.21(m,1H),2.06-1.96(m,1H),1.84-1.55
(m,6H),1.49-1.42(m,2H),1.39-1.30(m,2H),1.24-1.12(m,8H),1.04-0.86(m,5H),0.82
(s,3H),0.71(d,J＝5.6Hz,3H),0.67-0.51(m,3H),0.46(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ
175.4,173.0,167.9,144.3,143.5,142.9,136.6,124.0,100.5,70.4,70.1,70.0,69.6,
56.5,56.2,54.3,50.6,50.2,42.4,42.2,40.2,40.1,39.5,36.2,35.7,35.6,35.4,34.3,
33.6,32.6,31.8,28.1,27.0,26.8,26.1,23.9,23.3,20.6,18.1,11.8.HRMS calcd for 
C40H58N9O9(M－H)－,808.4358；found,808.4358。
[0240] 流程图7：试剂和条件：(a)不同的氨基酸，HBTU，DIPEA，CH2Cl2，室温，3小时，1-2-16：a，99％，b，
95％，c，90％，d，75％，e，96％，f，98％，g，82％，h，91％，i，62％，(b)Pd(Ph3)4，PhSiH3，CH2Cl2，室温，2小时，(c)1C，DCC，DMAP，CH2Cl2，室温，12小时，1-2-17：a，74％，b，65％，c，
73％，d，72％，e，60％，f，68％，g，70％，h，60％，i，55％(二步骤)，(d)DBU，CH2Cl2，室温，1小时，1-2-18：a，98％，b，88％，c，90％，d，92％，e，85％，f，88％，g，91％，h，85％，i，90％(e)NBD-Cl，NaHCO3，THF，EtOH，室温，2天，1-2-19：a，33％，b，35％，c，42％，d，38％，e，35％，f，
38％，g，40％，h，31％，i，30％，(f)TFA，H2O，CH2Cl2，室温，3小时，1-2-21：b，92％，f，95％，g，
85％，h，80％，(g)TFA，TIPS，H2O，CH2Cl2，室温，4小时，1-2-21：d，88％，41i，85％。
[0241] 流程图8：试剂和条件：(a)Fmoc-Pro-OH，HBTU，DIPEA，CH2Cl2，室温，3小时，1-2-16j，98％，(b)Pd(Ph3)4，PhSiH3，CH2Cl2，室温，2小时，(c)1C，DCC，DMAP，CH2Cl2，室温，12小时，1-2-17j，78％(二步骤)，(d)DBU，CH2Cl2，室温，1小时，1-2-18j，98％，(e)NBD-Cl，NaHCO3，THF，EtOH，室温，
2小时，27，88％。
[0242] 去除Trt保护基团的一般步骤
[0243] 将化合物1-2-19d(即，经Trt保护的化合物)(0.1mmol)溶解于10毫升TFA，添加ddH2O(500μL)和TIPS(0.2mmol)至10毫升CH2Cl2中，将上述二种溶液混合得到一混合物，于室温下持续搅拌4小时进行反应，接着，浓缩反应物以快速管柱层析纯化得到标的化合物1-
2-20d(或化合物19)。
[0244] 去除Pbf保护基的一般步骤
[0245] 所述化合物1-2-19i(即，经Pbf保护化合物)(0.05mmol)溶于5毫升TFA，将ddH2O(250μL)和TIPS(0.1mmol)添加至5毫升CH2Cl2中，将上述二种溶液混合得到一混合物，于室温下持续搅拌4小时进行反应，接着浓缩反应物，并以快速管柱层析纯化得到目标化合物1-
2-20i(或化合物23)。
[0246] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-二甲基-3-((S)-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)丙酰胺)十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸
酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-dimethyl-3-
((S)-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)propanamido)
hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoate.1-2-19a)。1-2-19a
(化合物18)
[0247] mp 69-70℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.44(d,J＝8.4Hz,1H),6.91(d,J＝6.4Hz,1H),6.15(d,J＝8.4Hz,1H),5.95(d,J＝8.0Hz,1H),4.30(brs,1H),4.21(t,J＝4.8Hz,2H),
3.86-3.77(m,1H),3.70-3.65(m,8H),3.37(t,J＝4.8Hz,2H),2.38-2.31(m,1H),2.25-2.17
(m,1H),1.92-1.89(m,1H),1.86-1.71(m,6H),1.64(d,J＝6.8Hz,3H),1.50-1.45(m,2H),
1.42-1.25(m,6H),1.23-1.12(m,6H),1.07-0.94(m,5H),0.90(s,3H),0.86(d,J＝6.4Hz,
3H),0.60(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.4,169.4,144.3,143.9,142.3,135.9,
125.0,100.1,70.7,70.6,70.1,69.3,63.4,56.7,56.1,53.7,50.7,50.1,42.7,42.3,40.6,
40.2,35.7,35.6,35.3,34.5,33.4,31.1,30.9,28.2,27.8,26.9,26.3,24.1,23.5,20.8,
19.1,18.3,12.0.HRMS calcd for C39H58N8O8Na(M+Na)+,789.4275；found,789.4280.
[0248] 2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)丙酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸酯(2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)
propanamido)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)
pentanoate)。1-2-19c(化合物20)
[0249] mp 64-65℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.13(brs,1H),6.28(d,J＝8.0Hz,1H),6.17(d,J＝8.4Hz,1H),4.30-4.27(m,1H),4.19(t,J＝4.8Hz,2H),
3.84-3.78(m,1H),3.69-3.64(m,8H),3.36(t,J＝4.8Hz,2H),3.12(dd,J＝6.4,12.8Hz,
1H),3.04(dd,J＝6.4,12.8Hz,1H),2.36-2.29(m,1H),2.24-2.14(m,1H),1.90-1.87(m,
1H),1.84-1.73(m,5H),1.68-1.59(m,2H),1.50-1.39(m,3H),1.34(s,9H),1.30-1.13(m,
9H),0.89(s,5H),0.84(d,J＝6.4Hz,3H),0.58(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.2,
167.3,144.3,143.7,142.2,135.8,125.4,100.4,70.7,70.6,70.0,69.2,63.4,57.2,56.5,
56.0,50.7,50.3,43.7,42.7,42.3,40.5,40.1,35.7,35.2,34.5,33.3,31.1,30.9,30.8,
28.1,27.7,26.9,26.3,24.1,23.4,20.7,18.2,12.0.HRMS calcd for C42H66N8O8SNa(M+Na)+,877.4617；found,877.4654。
[0250] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-二甲基-3-((S)-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)-3-苯丙酰胺)十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-
基)戊酸酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-
dimethyl-3-((S)-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)-3-
phenylpropanamido)hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)
pentanoate)。1-2-19e(化合物25)
[0251] mp 65-66℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.40(d,J＝8.4Hz,1H),7.36-7.25(m,5H),6.91(d,J＝6.8Hz,1H),6.14(d,J＝8.4Hz,1H),5.55(d,J＝8.0Hz,1H),4.49-4.46(m,1H),
4.20(t,J＝4.8Hz,2H),3.72-3.65(m,9H),3.37(t,J＝4.8Hz,2H),3.30(dd,J＝6.0,
13.6Hz,1H),3.18(dd,J＝6.0,13.6Hz,1H),2.38-2.31(m,1H),2.25-2.15(m,1H),1.92-
1.89(m,1H),1.83-1.72(m,6H),1.50-1.47(m,1H),1.44-1.41(m,3H),1.40-1.36(m,1H),
1.33-1.21(m,5H),1.19-1.15(m,3H),1.03-0.91(m,6H),0.87(d,J＝6.0Hz,3H),0.85(s,
3H),0.59(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.3,167.8,144.2,143.9,142.4,135.8,
135.2,129.3,129.2,127.8,100.3,70.7,70.6,70.1,69.3,63.4,59.3,56.6,56.0,50.7,
50.0,42.7,42.2,40.5,40.2,39.2,35.7,35.3,34.5,33.3,31.1,30.9,28.2,27.4,26.9,
26.3,24.1,23.4,20.7,18.2,12.0.HRMS calcd for C45H62N8O8Na(M+Na)+,865.4588；
found,865.4579。
[0252] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-二甲基-3-(1-(7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)吡咯啶-2-甲酰)十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸
酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-dimethyl-3-
(1-(7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)pyrrolidine-2-carboxamido)
hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoate)。1-2-19j(化合物27)
[0253] mp 62-64℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.37(d,J＝9.2Hz,1H),6.08(d,J＝9.2Hz,1H),6.02(s,1H),4.20(t,J＝4.8Hz,2H),3.86-3.65(m,10H),3.37(t,J＝4.8Hz,2H),2.52-
2.14(m,8H),1.90-1.87(m,1H),1.81-1.68(m,4H),1.64-1.61(m,1H),1.58-1.54(m,1H),
1.48-1.46(m,1H),1.37-1.10(m,13H),1.04-0.90(m,5H),0.86(d,J＝4.0Hz,3H),0.84(s,
3H),0.58(s,3H).13C NMR(125MHz,CDCl3):δ174.3,169.6,144.8,144.4,143.5,135.4,
123.0,102.3,70.7,70.6,70.1,69.3,65.7,63.4,56.6,56.1,50.7,50.0,42.7,42.3,40.6,
40.2,35.7,35.3,34.5,33.2,31.7,31.2,31.0,28.2,27.6,26.8,26.3,24.1,23.4,20.8,
18.2,12.0.HRMS calcd for C41H60N8O8Na(M+Na)+,815.4426；found,815.4429。
[0254] (4S)-5-(((3R,5R,10S,13R)-17-((R)-5-(2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-氧代戊烷-2-基)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-3-基)氨)-4-((7-硝苯[c]
[1,2,5]唑-4-基)氨)-5-氧戊酸((4S)-5-(((3R,5R,10S,13R)-17-((R)-5-(2-(2-(2-
azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)-5-oxopentan-2-yl)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-
cyclopenta[a]phenanthren-3-yl)amino)-4-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-
yl)amino)-5-oxopentanoic acid)。1-2-20b(化合物21)
[0255] mp 77-78℃，1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.38(d,J＝8.0Hz,1H),8.05(brs,1H),6.98(brs,1H),6.27(d,J＝8.0Hz,1H),4.48-4.46(m,1H),4.22(t,J＝4.5Hz,2H),3.87-
3.81(m,1H),3.71-3.66(m,8H),3.38(t,J＝4.5Hz,2H),2.68-2.63(m,2H),2.36-2.32(m,
3H),2.22-2.20(m,1H),1.84-1.52(m,7H),1.45-1.15(m,14H),1.01-0.90(m,4H),0.86(s,
3H),0.81(d,J＝5.5Hz,3H),0.70-0.69(m,1H),0.54(s,3H).13C NMR(125MHz,CDCl3):δ
176.9,174.7,169.1,144.4,143.7,143.3,136.6,124.3,100.4,70.7,70.6,70.1,69.2,
63.5,58.0,56.6,56.1,50.7,50.2,42.6,42.3,40.5,40.1,35.7,35.6,35.3,34.4,33.0,
31.2,31.0,30.1,28.2,27.5,27.3,26.9,26.2,24.1,23.4,20.7,18.2,11.9.HRMS calcd 
for C41H60N8O10Na(M+Na)+,847.4324；found,847.4342。
[0256] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((R)-3-巯基-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)丙酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-
17-基)戊酸酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((R)-
3-mercapto-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)propanamido)-10,13-
dimethylhe xadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoate)。1-2-20d
(化合物19)
[0257] mp 68-69℃，1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.20(d,J＝4.5Hz,1H),6.40(d,J＝7.0Hz,1H),6.24(d,J＝8.0Hz,1H),4.50-4.41(m,1H),4.20(t,J＝4.0Hz,
2H),3.83-3.65(m,10H),3.37(t,J＝4.0Hz,2H),3.22-3.19(m,1H),3.05-2.98(m,1H),
2.35-2.31(m,1H),2.23-2.20(m,1H),1.88-1.86(m,1H),1.78-1.62(m,6H),1.49-1.43(m,
3H),1.32-1.18(m,10H),1.04-0.95(m,6H),0.88(s,3H),0.83(d,J＝6.0Hz,3H),0.57(s,
3H).13C NMR(125MHz,CDCl3):δ174.6,166.9,144.3,143.9,142.4,136.0,125.2,100.9,
70.7,70.6,70.2,69.3,63.6,59.3,56.7,56.0,50.7,50.4,42.7,42.4,40.6,40.2,35.7,
35.4,34.6,33.4,31.1,30.9,28.2,27.9,27.3,26.9,26.3,24.2,23.5,20.8,18.3,
12.1.HRMS calcd for C39H58N8O8SNa(M+Na)+,821.3996；found,821.3990。
[0258] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-3-(4-羟苯)-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)丙酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲
基-17-基)戊酸酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-3-
((S)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)
propanamido)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)
pentanoat)。1-2-20f(化合物24)
[0259] mp 72-73℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.34(d,J＝8.4Hz,1H),7.19(d,J＝4.4Hz,1H),7.04(d,J＝8.4Hz,2H),6.71(d,J＝8.4Hz,2H),6.43(d,J＝4.4Hz,1H),6.15(d,J＝
8.4Hz,1H),4.56-4.41(m,1H),4.17(t,J＝5.2Hz,2H),3.84-3.73(m,1H),3.70-3.63(m,
8H),3.36(t,J＝5.2Hz,2H),3.18(d,J＝5.2Hz,2H),2.36-2.28(m,1H),2.24-2.16(m,1H),
1.86-1.80(m,1H),1.73-1.58(m,5H),1.55-1.48(m,1H),1.42-1.34(m,4H),1.25-1.20(m,
5H),1.15-1.10(m,5H),0.99-0.87(m,3H),0.84-0.81(m,9H),0.55(s,3H).13C NMR
(100MHz,CDCl3):δ174.7,168.7,155.8,144.2,143.8,143.1,136.4,130.4,126.5,124.1,
116.0,100.4,70.6,70.5,70.0,69.2,63.5,59.5,56.5,56.0,50.6,50.1,42.6,42.2,40.4,
40.1,38.4,35.6,35.3,34.4,33.1,31.1,30.9,28.2,27.3,26.9,26.2,24.0,23.4,20.7,
18.2,11.9.HRMS calcd for C45H62N8O9Na(M+Na)+,881.4532；found,881.4567。
[0260] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)丙酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊
[a]菲基-17-基)戊酸酯([00260]
(4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-3-(1H-
indol-3-yl)-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)propanamido)-10,
13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoate)。1-2-
20g(化合物26)
[0261] mp 86-87℃，1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.63(s,1H),8.30(d,J＝8.5Hz,1H),7.59(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(t,J＝7.5Hz,1H),
7.06(t,J＝7.5Hz,1H),7.04(d,J＝2.0Hz,1H),6.13(d,J＝8.5Hz,2H),4.63-4.50(m,1H),
4.19(t,J＝5.0Hz,2H),3.74-3.59(m,9H),3.50(dd,J＝6.0,14.5Hz,1H),3.43(dd,J＝6.0,
14.5Hz,1H),3.36(t,J＝5.0Hz,2H),2.32-2.27(m,1H),2.21-2.14(m,1H),1.84-1.81(m,
1H),1.76-1.60(m,4H),1.43-1.29(m,5H),1.25-1.02(m,10H),0.95-0.86(m,4H),0.83(s,
3H),0.80(d,J＝6.5Hz,3H),0.76-0.70(m,2H),0.53(s,3H).13C NMR(125MHz,CDCl3):δ
174.5,169.2,144.1,143.6,142.8,136.3,136.2,127.0,124.4,123.6,122.6,120.0,
118.3,111.6,108.9,100.5,70.5,70.4,70.0,69.2,63.4,58.4,56.5,55.9,50.6,50.2,
42.7,42.5,42.1,40.3,40.0,35.5,35.2,34.3,32.7,31.1,30.8,29.0,28.1,27.1,26.8,
26.1,24.0,23.3,20.6,18.1,11.9.HRMS calcd for C47H63N9O8Na(M+Na)+,904.4692；
found,904.4696。
[0262] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-6-氨-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)己酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-
基)戊酸酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-6-
amino-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)hexanamido)-10,13-
dimethylhexade cahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoate)。1-2-20h
(化合物22)
[0263] mp 84-85，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.26(d,J＝6.0Hz,1H),8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.91(brs,2H),7.27(brs,1H),6.29-6.22(m,1H),4.21(t,J＝4.8Hz,2H),3.71-3.65
(m,9H),3.37(t,J＝4.8Hz,2H),3.03-2.99(m,1H),2.70-2.65(m,3H),2.35-2.33(m,1H),
2.25-2.18(m,1H),2.04-2.02(m,2H),1.84-1.54(m,10H),1.42-1.16(m,13H),0.94-0.83
(m,12H),0.57(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.5,169.7,144.2,143.8,137.1,
123.1,115.2,100.3,70.7,70.6,70.1,69.2,63.5,58.2,56.4,56.2,50.7,50.4,42.6,
42.5,40.4,40.0,39.5,35.7,35.4,34.5,32.9,31.9,31.4,31.0,28.2,27.3,27.0,26.7,
26.3,24.1,23.5,22.3,20.8,18.2,12.0.HRMS calcd for C42H66N9O8(M+H)+,824.5028；
found,824.5016。
[0264] (4R)-2-(2-(2叠氮基乙氧基)乙氧基)乙基-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-5-胍-2-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)戊酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-
基)戊酸酯((4R)-2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethyl-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((S)-5-
guanidino-2-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)pentanamido)-10,13-
dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoate)。1-2-19j
(化合物23)
[0265] mp 78-79℃，1H NMR(500MHz,d6-DMSO):δ9.26(s,1H),8.58(d,J＝6.5Hz,1H),8.22(s,1H),7.70(s,1H),7.38-6.95(m,3H),6.27(d,J＝6.5Hz,1H),4.30-4.20(m,1H),
4.10(t,J＝6.0Hz,2H),3.71-3.64(m,2H),3.60-3.54(m,8H),3.11(t,J＝6.0Hz,2H),2.35-
2.29(m,1H),2.23-2.17(m,1H),1.92-1.90(m,3H),1.80-1.78(m,2H),1.72-1.68(m,3H),
1.58-1.52(m,3H),1.43-1.42(m,1H),1.39-1.27(m,7H),1.21-1.18(m,6H),0.88(s,3H),
0.85(d,J＝5.5Hz,3H),0.59(s,3H).13C NMR(125MHz,d6-DMSO):δ173.4,168.6,158.5,
156.7,144.5,144.1,137.9,121.9,99.9,70.6,69.8,69.7,69.4,68.4,63.1,57.4,56.2,
55.7,50.0,49.0,43.6,42.3,41.9,40.4,35.6,35.4,34.8,34.3,32.8,30.6,28.7,27.8,
27.2,26.7,26.2,25.4,23.9,23.3,20.4,18.1,11.9.HRMS calcd for C42H64N11O8(M－
H)－,850.4939；found,850.4932。
[0266] 1.3合成化合物28至40
[0267] 化合物28至40(即，式(1-3)化合物)是依据流程图9所示的步骤合成。
[0268] 流程图9：试剂和条件：(a)不同的R1-Cl(a-d)，NEt3，1-BuO小时120℃，12小时(b)TFA，H2O，
CH2Cl2，室温，3小时(c)R1-Cl(e)，Pd2(dba)3，P(tBu)3HBF4，Cs2CO3，1,4-二恶烷，120℃，4小时(d)TFA，H2O，CH2Cl2，室温，3小时(e)不同的R1-Cl(f-i)，DIPEA，CH2Cl2，室温，6小时(f)TFA，H2O，CH2Cl2，室温，3小时。
[0269] SN-R1反应的一般步骤
[0270] 将化合物1-2-12(1.02mmol)、R1-Cl(1.02mmol)和NEt3(2.04mmol)溶于10毫升1-丁醇中，并将该混合物于120℃下，持续搅拌12小时，以进行反应。所述反应物经过浓缩，再经快速管柱层析纯化，得到目标化合物。
[0271] 胺化的一般步骤
[0272] 持续搅拌下，将Pd2(dba)3(0.10mmol)、P(tBu)3HBF4(0.20mmol)和Cs2CO3(2.04mmol)添加至化合物1-2-12(1.02mmol)和R1-Cl(1.02mmol)溶液(溶剂：1,4-二恶烷溶
液)。所述混合物置于120℃下，持续搅拌4小时。接着，进行浓缩将得到的产物以快速管柱层析进行纯化，进而得到标的化合物。
[0273] 形成磺胺的一般步骤
[0274] 持续搅拌下，逐渐滴加DIPEA(1.67mmol)至化合物1-2-12(1.02mmol)和R1-C(1.02mmol)溶液(溶剂：10毫升CH2Cl2)中。所述反应混合物于室温下，持续搅拌6小时。接着，进行浓缩将得到的产物以快速管柱层析，进行纯化得到标的化合物。
[0275] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-二甲基-3-((7-硝苯[c][1,2,5]唑-4-基)氨)十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸([00275]
(4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-dimethyl-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxad 
iazol-4-yl)amino)hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoic 
acid)。.1-2-22a(化合物28)
[0276] mp 137-139℃，1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.45(d,J＝8.8Hz,1H),6.22(d,J＝8.0Hz,1H),6.16(d,J＝8.8Hz,1H),3.72-3.66(m,1H),2.42-2.34(m,1H),2.28-2.20(m,
1H),2.02-1.73(m,7H),1.62-1.52(m,2H),1.50-1.36(m,5H),1.35-1.22(m,5H),1.21-1.01
(m,7H),0.99(s,3H),0.90(d,J＝6.4Hz,3H),0.64(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ
179.1,144.4,144.0,142.9,136.6,123.5,98.6,56.5,56.0,54.1,42.7,42.5,40.7,40.1,
35.8,35.6,35.3,34.8,33.0,30.8,30.7,28.1,27.2,27.0,26.3,24.1,23.5,20.9,18.2,
12.0.HRMS calcd for C30H41N4O5(M-H)－,537.3077；found,537.3085。
[0277] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((3-氯-1,4-二氧-1,4-二氢萘-2-基)氨)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((3-chloro-
1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-2-yl)a mino)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-
cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentan oic acid)。1-2-22b(化合物32)
[0278] mp 120-122℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.12(d,J＝7.2Hz,1H),8.00(d,J＝7.2Hz,1H),7.69(t,J＝7.2Hz,1H),7.59(t,J＝7.2Hz,1H),6.01(brs,1H),4.45-4.35(m,
1H),2.42-2.34(m,1H),2.28-2.20(m,1H),2.02-1.94(m,1H),1.89-1.72(m,6H),1.69-1.61
(m,1H),1.59-1.47(m,2H),1.43-1.23(m,10H),1.18-1.02(m,6H),0.94(s,3H),0.90(d,J＝
6.4Hz,3H),0.63(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ180.6,179.5,176.8,143.5,134.9,
132.9,132.3,129.7,126.8,56.5,56.0,53.8,42.7,42.3,40.6,40.1,35.8,35.5,35.4,
35.3,34.6,30.9,30.8,29.6,28.1,27.1,26.4,24.2,23.4,20.8,18.2,12.0.HRMS calcd 
for C34H43NO4Cl(M-H)－,564.2881；found,564.2872。
[0279] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((2-chloro-6,
7-dimethoxyquinazolin-4-yl)amino)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta
[a]phenanthren-17-yl)pentanoic acid)。1-2-22c(化合物33)
[0280] mp 178-180℃，1H NMR(400MHz,d6-DMSO):δ8.00(d,J＝3.6Hz,1H),7.63(s,1H),7.04(s,1H),4.21-4.10(m,1H),3.90(s,3H),3.87(s,3H),2.27-2.20(m,1H),2.14-2.06(m,
1H),1.99-1.73(m,6H),1.66-1.64(m,2H),1.50-1.48(m,5H),1.41-1.35(m,4H),1.26-1.15
(m,4H),1.12-1.04(m,5H),0.94(s,3H),0.87(d,J＝6.0Hz,3H),0.62(s,3H).13C NMR
(100MHz,d6-DMSO):δ174.9,159.1,155.1,154.4,148.4,147.1,106.8,106.4,102.4,56.2,
56.1,55.8,55.7,50.4,42.3,42.0,35.7,35.3,34.9,34.3,33.1,32.5,30.8,30.6,27.7,
26.7,26.2,23.8,23.2,20.4,18.1,11.8.HRMS calcd for C34H48N3O4Cl(M+H)+,598.3406；
found,598.3396。
[0281] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((3-喹恶啉-2-基)氨)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-((3-chloroquinoxalin-2-yl)
amino)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)
pentanoic acid)。1-2-22d(化合物34)
[0282] mp 118-120℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.79-7.73(m,2H),7.59(t,J＝8.4Hz,1H),7.40(t,J＝8.4Hz,1H),5.69-5.67(m,1H),4.15-4.09(m,1H),2.43-2.35(m,1H),2.29-
2.21(m,1H),1.98-1.95(m,1H),1.92-1.73(m,6H),1.58-1.55(m,2H),1.40-1.36(m,6H),
1.35-1.00(m,11H),0.97(s,3H),0.91(d,J＝6.4Hz,3H),0.64(s,3H).13C NMR(125MHz,
CDCl3):δ179.3,146.5,139.0,138.0,135.7,130.9,128.0,125.5,124.4,56.6,56.0,51.8,
42.8,42.3,40.7,40.2,35.9,35.6,35.3,34.7,33.4,30.8,28.2,27.6,27.1,26.4,24.2,
23.5,20.9,18.3,12.1.HRMS calcd for C32H45N3O2Cl(M+H)+,538.3194；found,538.3205。
[0283] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-二甲基-3-(喹啉-2-基氨)十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-dimethyl-3-(quinolin-2-ylamino)
hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoic acid)。1-2-22e(化合
物30)
[0284] mp 140-142℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.05(d,J＝9.2Hz,1H),7.82(d,J＝9.2Hz,1H),7.67-7.62(m,2H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),6.85(d,J＝
9.6Hz,1H),3.46-3.44(m,1H),2.42-2.34(m,1H),2.31-2.19(m,1H),2.03-1.92(m,3H),
1.89-1.76(m,4H),1.70-1.52(m,3H),1.48-1.21(m,11H),1.18-1.00(m,5H),0.96(s,3H),
0.90(d,J＝6.4Hz,3H),0.63(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ179.3,152.8,143.2,
137.7,133.0,128.0,124.8,120.5,118.1,109.5,55.9,55.8,54.0,42.8,42.7,40.4,39.8,
35.9,35.8,35.3,34.8,33.2,31.0,30.8,28.1,27.3,27.2,26.3,24.1,23.6,20.9,18.2,
12.0.HRMS calcd for C33H47N2O2(M+H)+,503.3638；found,503.3638。
[0285] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-(5-氯苯[c][1,2,5]唑e-4-磺酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸。((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-(5-chlorobenzo[c]
[1,2,5]oxadiazole-4-sulfonamido)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]
phenanthren-17-yl)pentanoic acid)。1-2-22f(化合物36)
[0286] mp 128-130℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.96(d,J＝9.2Hz,1H),7.47(d,J＝9.2Hz,1H),,5.49(d,J＝7.6Hz,1H),3.39-3.29(m,1H),2.41-2.33(m,1H),2.27-2.19(m,
1H),1.92-1.90(m,1H),1.87-1.66(m,5H),1.58-1.50(m,2H),1.42-1.08(m,15H),1.06-
0.95(m,3H),0.89(d,J＝6.4Hz,3H),0.86(s,3H),0.60(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ
179.3,148.0,146.5,138.3,135.7,128.2,120.6,56.4,55.9,54.9,45.7,42.7,42.4,40.4,
40.0,35.7,35.6,35.3,34.4,34.3,30.8,30.7,28.7,28.1,26.8,26.2,24.1,23.3,20.7,
18.2,12.0.HRMS calcd for C30H42N3O5ClSNa(M+Na)+,614.2456；found,614.2422。
[0287] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-(5-(二甲胺基)萘-1-磺酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-(5-(dimethylamino)
naphthalene-1-sulfonamido)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]
phenanthren-17-yl)pentanoic acid)。1-2-22g(化合物37)
[0288] mp 136-138℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.55(d,J＝8.8Hz,1H),8.47(d,J＝8.8Hz,1H),8.29(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),7.62-7.56(m,2H),7.38(d,J＝7.6Hz,1H),6.75
(s,1H),4.97(d,J＝6.4Hz,1H),3.09(s,6H),2.39-2.31(m,1H),2.25-2.17(m,1H),1.92-
1.88(m,1H),1.86-1.56(m,5H),1.55-1.48(m,1H),1.43-1.16(m,12H),1.14-0.95(m,7H),
0.86(d,J＝6.0Hz,3H),0.80(s,3H),0.57(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ179.5,147.0,
136.6,129.6,128.7,128.5,127.7,124.7,122.2,116.3,56.3,55.9,54.2,45.9,42.6,
42.5,40.3,40.0,35.8,35.6,35.3,34.6,34.3,30.9,30.7,28.8,28.1,26.8,26.2,24.1,
23.3,20.7,18.2,11.9.HRMS calcd for C36H53N2O4S(M+H)+,609.3726；found,609.3718。
[0289] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-(苯[b]噻吩-2-磺酰胺)-10,13-二甲基十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-3-(benzo[b]thiophene-2-
sulfonamido)-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)
pentanoic acid)。1-2-22h(化合物38)
[0290] mp 132-134℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.86-7.82(m,3H),7.48-7.41(m,2H),4.88(d,J＝7.6Hz,1H),3.30-3.21(m,1H),2.41-2.34(m,1H),2.27-2.19(m,1H),1.92-1.89
(m,1H),1.86-1.68(m,5H),1.65-1.60(m,1H),1.53-1.46(m,2H),1.43-1.21(m,10H),1.17-
1.12(m,2H),1.09-0.91(m,5H),0.88(d,J＝6.4Hz,3H),0.85(s,3H),0.60(s,3H).13C NMR
(100MHz,CDCl3):δ179.9,142.5,141.6,137.6,128.8,127.0,125.5,125.3,122.6,56.3,
55.9,54.5,42.6,42.5,40.4,40.0,35.8,35.7,35.2,34.5,34.3,30.9,30.7,28.8,28.1,
26.8,26.2,24.1,23.3,20.7,18.2,11.9.HRMS calcd for C32H45NO4S2Na(M+Na)+,
594.2682；found,594.2684。
[0291] (4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-二甲基-3-(喹啉-8-磺酰胺)十六氢-1H-环戊[a]菲基-17-基)戊酸((4R)-4-((3R,5R,10S,13R)-10,13-dimethyl-3-(quinoline-8-
sulfonamido)hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)pentanoic acid)。
1-2-22i(化合物39)
[0292] mp 138-140℃,1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.02(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.41(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),8.25(dd,J＝1.6,8.4Hz,1H),8.02(dd,J＝1.2,8.4Hz,1H),7.63(t,J＝
7.6Hz,1H),7.54(dd,J＝4.4,8.0Hz,1H),6.21(brs,1H),3.11-3.06(m,1H),2.41-2.33(m,
1H),2.27-2.19(m,1H),1.89-1.87(m,1H),1.85-1.74(m,2H),1.73-1.49(m,4H),1.47-1.14
(m,12H),1.10-0.95(m,7H),0.88(d,J＝6.0Hz,3H),0.78(s,3H),0.58(s,3H).13C NMR
(100MHz,CDCl3):δ178.9,150.9,143.3,137.5,137.0,132.9,130.5,128.8,125.7,122.1,
56.4,55.9,54.6,42.7,42.4,40.4,40.1,35.7,35.3,34.5,34.4,30.8,28.6,28.1,26.9,
26.2,24.1,23.4,20.7,18.2,12.0.HRMS calcd for C33H47N2O4S2(M+H)+,567.3251；found,
567.3267。
[0293] 1.4合成化合物41至48
[0294] 化合物41至48(即，式(1-3)化合物)依据流程图10至19所示的步骤合成
[0295] 流程图10：
[0296] 合成化合物1-3-1
[0297] 依序添加砒啶(23.90mmole)和乙酸酐(acetic anhydride)(31.86mmole)至石胆酸(LA)(8mmole)溶液(溶剂：20毫升的二氯甲烷溶液)，将反应混合物置于室温下，持续搅拌
24小时。接着，进行浓缩得到的残留物溶解于二氯甲烷(DCM)(30毫升)中，接着依序以水(2x 
30毫升)和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干燥有机层，接着进行过滤，以及蒸发干燥。最终得到的残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，70：30)得到标的产物1-3-1
(65％)。
[0298] 化合物1-3-1：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ＝4.72(m,1H),2.39-2.23(m,2H),2.00(s,3H),1.95(d,J＝11.8Hz,1H),1.85-1.75(m,5H),1.72-1.69(m,1H),1.65-1.55(m,2H),
1.43-1.31(m,8H),1.23-1.20(m,2H),1.08-0.99(m,6H),0.92-0.88(m,6H),0.63(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝180.03,170.66,74.36,56.43,55.98,55.92,42.69,41.83,40.35,40.08,
35.73,35.24,34.97,34.52,32.19,30.91,30.70,28.10,26.95,26.57,26.25,24.11,
23.26,21.41,20.77,18.18,11.98。
[0299] 合成化合物1-3-2
[0300] 将3α-乙酰氧基-5β-胆烷-24-二十酸(3α-acetoxy-5β-cholan-24-oic acid)1-3-1(2.38mmole)溶液(溶剂为：含含碘苯二乙酸(IBDA)(1.60mmole)和碘(1.45mmole)的CCl4
(10毫升))在回流温度下以200-W钨丝灯照射45分钟。接着，再添加碘苯二乙酸(1.50mmole)和碘(1.45mmole)，于同温下照射2小时。以硫代硫酸钠(2x 30毫升)和水(2x 30毫升)清洗
反应混合物。以硫酸钠干燥有机层、过滤，蒸发干燥。残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，90：10)以得到标的产物1-3-2(70％)。
[0301] 化合物1-3-2：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ＝4.73-4.67(m,1H)3.28-3.26(m,1H),3.08-3.06(m,1H),2.00(s,3H),1.85-1.95(m,1H),1.82-1.77(m,4H),1.75-1.67(m,1H),
1.53-1.50(m,4H),1.40-1.35(m,7H),1.24-1.20(m,3H),1.14-1.10(m,2H),1.04-1.00(m,
4H),0.90-0.88(m,6H),0.64(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝170.56,74.33,56.44,55.85,
42.79,41.83,40.36,40.30,40.09,37.15,36.41,35.73,34.98,34.53,32.20,28.14,
26.98,26.58,26.26,24.09,23.28,21.42,20.77,17.79,12.00,5.09。
[0302] 合成化合物1-3-3
[0303] 将H5IO6(6.38mmole)添加至1-3-2(6.00mmole)溶液(溶剂：CCl4(15毫升)、乙腈(15毫升)和水(26毫升))，持续搅拌15分钟。添加RuCl3.H2O(0.30mmole)，将反应混合物置于室温下，持续搅拌24小时。将所述反应物冷却至0℃，在剧烈搅拌反应物下，添加Et2O，持续搅拌10分钟。所述混合物以Et2O(2x 30毫升)萃取，以水清洗有机层(2x 30毫升)。以硫酸钠干燥有机层、过滤，接着蒸发干燥。所述残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，70：30)以得到标的产物1-3-3(57％)。
[0304] 化合物1-3-3：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ＝4.72-4.66(m,1H),2.46(d,J＝12.2Hz,1H),2.01(s,3H),1.95-1.90(m,2H),1.88-1.77(m,4H),1.75-1.65(m,1H),1.56-1.50(m,
2H),1.43-1.35(m,7H),1.27-1.16(m,5H),1.10-1.04(m,4H),0.99-0.94(m,3H),0.84(s,
3H)0.64(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝179.12,170.66,74.38,56.47,55.97,42.77,41.82,
41.26,40.34,39.97,35.74,34.97,34.53,33.56,32.19,29.64,28.25,26.94,26.57,
26.25,24.10,23.26,21.41,20.75,19.45。
[0305] 合成化合物1-3-4
[0306] 将具有Boc保护基的酐(13.34mmole)和DMAP(2mmole)依序加入含1-3-3(6.67mmole)溶液(溶剂：30毫升的叔丁醇)，将反应混合物置于室温下持续搅拌1小时。接
着，进行浓缩，并将残留物溶于DCM(40毫升)中，以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)依序清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，并蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-3-4(74％)。
[0307] 化合物1-3-4：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ＝4.70-4.68(m,1H),2.31(d,J＝10.7Hz,1H),2.00(s,3H),1.96-1.93(m,1H),1.86-1.76(m,7H),1.65-1.57(m,2H),1.42(s,9H),
1.40-1.34(m,4H),1.26-1.20(m,5H),1.21-1.07(m,2H),1.05-1.00(m,4H),0.99(d,J＝
5.9Hz,3H),0.90(s,3H)0.65(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝173.07,170.63,79.91,74.39,
56.52,56.17,42.82,41.88,40.39,40.06,35.78,35.02,34.57,33.78,32.24,29.68,
28.21,28.14,27.00,26.62,26.29,24.14,21.45,20.80,19.37,12.04。
[0308] 合成化合物1-3-5
[0309] 将化合物1-3-4(4.88mmole)溶于甲醇溶液(40毫升)中，再添加甲氧基钠(sodium methoxide)(14.65mmole)，将反应混合物置于室温持续搅拌12小时。接着，进行浓缩，将残留物溶于DCM(30毫升)中，依序以水(2×30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫
酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：
20)得到标的产物1-3-5(60％)。
[0310] 化合物1-3-5：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ＝3.62-3.57(m,1H),2.31(d,J＝10.7Hz,1H),1.92-1.86(m,1H),1.84-1.74(m,7H),1.65-1.57(m,2H),1.42(s,9H),1.40-1.34(m,
4H),1.26-1.20(m,5H),1.21-1.07(m,2H),1.05-1.00(m,4H),0.99(d,J＝5.9Hz,3H),0.90
(s,3H)0.65(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝173.07,79.90,71.83,56.51,56.12,42.80,
42.76,42.06,40.39,40.07,36.42,35.81,35.31,34.54,33.79,30.52,29.67,28.21,
28.13,27.15,26.36,24.14,23.33,20.77,19.35,12.02。
[0311] 合成SVM-101
[0312] 流程图11：
[0313] 将化合物1-3-5(0.477mmole)溶于HCl(5毫升)中，所述反应混合物置于75℃下持续搅拌12小时。反应物以NaOH溶液中和，再以乙酸乙酯萃取。依序以水和(2×30毫升)和饱
和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗有机层。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终的残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，70：30)得到标的产物SVM101(60％)。
[0314] 合成化合物41至48
[0315] 流程图12：
[0316] 合成化合物1-3-6、1-3-8、1-3-10、1-3-12和1-3-14的一般步骤
[0317] 将化合物1-3-5(0.238mmole)添加至相应的Fmoc保护氨基酸(0.286mmole)溶液(溶剂：5毫升二氯甲烷)，持续搅拌10分钟。接着，将DMAP(0.34mmole)添加至含DCC
(0.382mmole)溶液(溶剂：5毫升DCM)，并在室温下持续搅拌1-2小时。将反应物过滤，再依序以水(2x 20毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗过滤物。以硫酸钠干燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-3-6、
1-3-8、1-3-10、1-3-12和1-3-14(75-90％).
[0318] 合成化合物1-3-7、1-3-9、1-3-11、1-3-13和1-3-15的一般步骤
[0319] 添加DBU(0.218mmole)至化合物1-3-6、1-3-8、1-3-10、1-3-13和1-3-15(0.218mmole)溶液(溶剂：10毫升二氯甲烷)，于室温下持续搅拌1小时。浓缩反应物，接着以快速管柱层析纯化，得到化合物1-3-7、1-3-9、1-3-11、1-3-13和1-3-15(80-91％)。
[0320] 流程图13：
[0321] 流程图14：
[0322] 流程图15：
[0323] 流程图16：
[0324] 合成化合物1-3-17和1-3-22
[0325] 将咪唑(6.33mmole)添加至化合物1-3-16或1-3-23(2.43mmole)溶液(溶剂：10毫升DMF)，持续搅拌10分钟。缓慢添加TBDPS-Cl(6.091mmole)，将反应混合物置于室温下持续搅拌16小时。浓缩所述反应物，将残留物溶于乙酸乙酯(20毫升)，并依序以水(2×20毫升)
和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。将得到的产物溶于甲醇：水(70：30)的溶液(10毫升)中，再添加K2CO3(6.090mmole)，置于室温下持续搅拌2小时。去除甲醇：水，接着，将残留物溶于DCM(20毫升)，以及以和10％柠檬酸水溶液酸化至PH 2，以DCM萃取。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸干，最终残留物以管柱层析纯化(甲醇/DCM，80：20)得到标的产物1-3-17或1-3-22(60％)。
[0326] 流程图17：
[0327] 流程图18：
[0328] 合成化合物1-3-21
[0329] 于0℃下，添加1.25M的NaOH(5毫升)溶液至含化合物1-3-20(3.35mmole)的二恶烷(10毫升)溶液，持续搅拌10分钟。于同温下，在30分钟内，缓慢添加含Boc-酐(3.35mmole)的二恶烷溶液(5毫升)，将反应混合物置于室温下，持续搅拌12小时。浓缩反应物，将浆样产物溶于水(50毫升)中，再以己烷(3X 20毫升)清洗。以10％HCl溶液酸化水层至PH 2，再以DCM萃取。以硫酸钠干燥有机层，过滤，和蒸干，终残留物以管柱层析纯化(甲醇/DCM，80：20)得到标的产物1-3-21(70％)。
[0330] 合成化合物1-3-18、1-3-22和1-3-25的一般步骤
[0331] 将化合物1-3-5(0.238mmole)溶于相应Boc保护氨基酸(0.286mmole)溶液(溶剂：二氯甲烷(5毫升))，持续搅拌10分钟。将DMAP(0.34mmole)添加至含DCC(0.382mmole)溶液
(溶剂：二氯甲烷(5毫升))(5毫升)，并于室温下持续搅拌1-2小时。过滤反应物，依序以水(2x 20毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗过滤物。以硫酸钠干燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析(己烷/乙酸乙酯，80：20)纯化得到标的产物1-3-18、1-3-
22和1-3-25(50-80％)。
[0332] 流程图19
[0333] 处理最终产物
[0334] 于0℃下，将化合物1-3-7、1-3-9、1-3-11、1-3-13、1-3-15、1-3-18、1-3-22、和1-3-25(0.107mmole)溶于TFA(5毫升)中，添加水(50μL)，将反应混合物置于室温下持续搅拌3小时。以旋转蒸发器移除TFA溶液，以饱和NaHCO3溶液中和残留物，以膜透析，再以反相HPLC纯化得到标的化合物(如，白色固体)。
[0335] 化合物SVM-101：MP＝137-138℃,1H NMR(DMSO-D6,400MHz):δ＝4.47-4.45(m,1H),2.30(dd,J＝2.5Hz,J＝14.2Hz,2H),1.92-1.90(m,1H),1.80-1.74(m,4H),1.65-1.60
(m,2H),1.58-1.51(m,2H),1.35-1.30(m,6H),1.21-1.15(m,7H),1.04-1.02(m,3H),0.92
(d,J＝6.2Hz,3H),0.86(s,3H),0.63(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝174.57,70.28,56.48,
55.88,42.71,41.93,41.59,36.68,35.80,35.55,34.61,33.44,30.75,28.15,27.28,
26.53,24.19,23.65,20.78,19.77,12.24。HPLC条件:滞留时间＝10.70分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱:Vydac C18。
[0336] 化合物41(SVM-102)：158-159℃,1H NMR(DMSO-D6,500MHz):δ＝4.73(m,1H),4.25(m,1H),2.88(dd,J＝3.9Hz,J＝16.7Hz,2H),2.30-2.27(m,1H),1.84-1.75(m,6H),1.61-
1.49(m,4H),1.44-1.35(m,5H),1.21-1.08(m,10H),0.92-0.90(m,6H),0.63(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝174.53,171.17,168.24,76.39,56.36,55.90,49.06,42.69,41.59,41.45,
35.70,34.71,34.62,34.53,33.40,31.92,28.12,26.94,26.30,24.12,23.29,20.78,
19.76,12.20.HRMS m/z calcd for C27H44NO6,478.3169；found 478.3175(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝10.70分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：Vydac C18。
[0337] 化合物47(SVM-103)：MP＝204-205℃,1H NMR(CD3OD,400MHz):δ＝7.39-7.34(m,3H),7.28-7.26(m,2H),4.80-4.76(m,1H),4.26(t,J＝7.1Hz,1H),3.20(d,J＝7.1Hz,2H),
2.41-2.40(m,1H),2.05-2.02(m,1H),1.98-1.83(m,6H),1.62-1.52(m,3H),1.47-1.21(m,
11H),1.12-1.07(m,4H),1.06(d,J＝8Hz,3H),1.03(s,3H),0.73(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝175.94,168.07,133.97,129.08,128.62,127.45,76.91,56.49,56.06,42.51,41.73,
40.97,40.30,39.93,36.22,35.69,34.39,34.17,33.44,31.61,27.79,26.59,26.00,
25.81,23.73,22.18,20.42,18.51,10.97；HRMS m/z calcd for C32H48NO4,510.3590；found 
510.3600(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝19.75分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+
0.05％TFA、管柱：Kromasil300-5C4。
[0338] 化合物48(SVM-104)：,1H NMR(CD3OD,500MHz):δ＝7.57(d,J＝10Hz,1H),7.40(d,J＝10Hz,1H),7.19(s,1H),7.14(t,J＝5Hz,1H),7.08(t,J＝7.5Hz,1H),4.72-4.67(m,1H),4.26(t,J＝5Hz,1H),3.39-3.37(m,2H),2.43-2.41(m,1H),2.03-2.01(m,1H),1.95-1.85
(m,4H),1.79-1.67(m,2H),1.63-1.59(m,1H),1.45-1.36(m,6H),1.34-1.29(m,3H),1.26-
1.19(m,4H),1.15-1.10(m,2H),1.06-0.99(m,5H),0.92(s,3H),0.72(s,3H)；13C NMR
(125MHz):δ＝177.58,170.09,138.42,128.54,122.57,123.12,120.42,119.24,112.79,
107.96,78.51,57.96,57.66,55.01,44.09,43.37,42.60,41.82,41.46,37.27,36.02,
35.74,35.06,32.12,29.40,28.17,27.96,27.57,27.17,25.32,22.01,20.13,12.57；HRMS 
m/z calcd for C34H49N2O4,549.3692；found 549.3699(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝20.45分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：Kromasil 300-5C4。
[0339] 化合物42(SVM-105)：MP＝149-150℃,1H NMR(CD3OD/DMSO-D6,500MHz):4.75-4.71(m,1H),3.96(t,J＝7Hz,1H),2.43-2.36(m,2H),2.29-2.27(m,1H),2.06-2.01(m,2H),
1.91-1.89(m,1H),1.85-1.74(m,6H),1.52-1.49(m,2H),1.42-1.33(m,6H),1.18-1.04(m,
5H),1.01-0.94(m,4H),0.89(d,J＝6Hz,1H),0.86(s,3H),0.60(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝175.54,173.81,168.49,77.06,56.41,56.01,51.97,42.56,41.84,41.07,40.36,39.91,
35.75,34.53,34.31,33.48,31.79,28.95,27.89,26.73,26.10,25.36,23.83,22.44,
+
20.54,18.75,11.20；HRMS m/z calcd for C28H46NO6,492.3325；found 492.3320(M+H) 。
HPLC条件：滞留时间＝8.45分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：
Kromasil 300-5C4。
[0340] 化合物46(SVM-106)：MP＝219-220℃,1H NMR(CD3OD,500MHz):δ＝4.02(t,J＝6.4Hz,1H),2.96(t,J＝7.9Hz,2H),2.43(d,J＝11.4Hz,1H),2.01-1.88(m,9H),1.75-1.68
(m,3H),1.62-1.45(m,10H),1.34-1.28(m,3H),1.21-1.11(m,6H),1.01(d,J＝6Hz,3H),
0.98(s,3H),0.73(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝177.57,170.02,78.60,58.06,57.67,
54.00,44.11,43.47,42.60,42.01,41.52,40.40,37.34,36.07,35.85,35.04,33.34,
31.23,29.39,28.24,28.17,27.71,27.64,25.33,23.85,23.24,22.07,20.12,12.59；HRMS 
m/z calcd for C29H51N2O4,491.3849；found 491.3840(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝19.80分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：Kromasil 300-5C4。
[0341] 化合物43(SVM-107)：MP＝165-166℃,1H NMR(CD3OD,500MHz):δ＝4.07(t,J＝3.6Hz,1H),3.98(dd,J＝3.5Hz,J＝11Hz,2H),2.42(d,J＝11.3Hz,1H),2.04-1.85(m,7H),
1.77-1.73(m,1H),1.63-1.60(m,2H),1.54-1.43(m,6H),1.33-1.12(m,9H),1.01(d,J＝
13
6.1Hz,3H),0.98(s,3H),0.73(s,3H)；C NMR(125MHz):δ＝177.57,168.55,78.59,60.89,
58.04,57.64,56.35,44.10,43.46,42.60,41.97,41.50,37.33,36.07,35.83,35.05,
33.31,29.39,28.25,27.64,27.57,23.85,22.06,20.11,12.59；HRMS m/z calcd for 
C26H44NO5,450.3219；found 450.3227(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝19.70分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：Kromasil 300-5C4。
[0342] 化合物45(SVM-108)：MP＝129-130℃,1H NMR(CD3OD,500MHz):δ＝4167(t,J＝6.4Hz,1H),2.66-2.63(m,2H),2.43(d,J＝11.3Hz,1H),2.23-2.14(m,2H),2.13(s,3H),
2.04-1.86(m,7H),1.76-1.74(m,1H),1.63-1.61(m,2H),1.54-1.48(m,6H),1.35-1.28(m,
13
3H),1.24-1.09(m,6H),1.01(d,J＝6.1Hz,3H),0.98(s,3H),0.73(s,3H)；C NMR(125MHz):
δ＝177.58,170.00,78.69,58.01,57.62,53.10,44.10,43.45,42.60,41.98,41.49,37.33,
36.06,35.84,35.05,33.32,31.05,30.26,29.40,28.24,27.68,27.63,25.33,23.85,
22.07,20.11,15.17,12.59；HRMS m/z calcd for C28H48NO4S,494.3304；found 494.3295(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝19.25分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：Kromasil 300-5C4。
[0343] 化合物44(SVM-109)：MP＝181-182℃,1H NMR(CD3OD,500MHz):δ＝4.26-4.22(m,1H),3.84(d,J＝4.6Hz,1H),2.42(d,J＝11.2Hz,1H),2.04-1.88(m,8H),1.77-1.75(m,1H),
1.63-1.60(m,2H),1.51-1.45(m,6H),1.33(d,J＝6.5Hz,3H),1.32-1.30(m,3H),1.26-1.08
(m,6H),1.01(d,J＝6.1Hz,3H),0.98(s,3H),0.73(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝177.56,
168.84,78.54,66.60,60.15,58.03,57.63,44.10,43.45,42.58,41.98,41.50,37.33,
36.07,35.84,35.05,33.32,29.40,28.24,27.63,27.56,25.33,23.86,22.06,20.82,
20.11,12.59；HRMS m/z calcd for C27H46NO5,464.3376；found 464.3372(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝18.25分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA、B)100％ACN+0.05％TFA、管柱：
Kromasil 300-5C4。
[0344] 1.5合成化合物49至52
[0345] 依据流程图20至23所示的步骤合成合物49至52
[0346] 流程图20：
[0347] 合成化合物1-3-1
[0348] 依序添加砒啶(7.966mmole，3eq)和乙酸酐(10.62mmole，4eq)至含石胆酸LA(2.655mmole，1eq)溶液(溶剂：二氯甲烷)，将反应混合物置于室温下持续搅拌4小时，将残留物溶于二氯甲烷(30毫升)，在依序以水(2x30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。
所述有机层以硫酸钠干燥、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，70：30)得到标的产物1-3-1(65％)。
[0349] 合成化合物1-3-2
[0350] 将1-3-1(1.72mmole，1eq)溶液(含含IBDA(5.17mmole，0.65eq)、碘(1.72mmole，1eq)的；溶剂：CCl4(10毫升))于回流温度下，以200-W钨丝灯照射45分钟。再添加IBDA
(0.65eq)和碘(0.5eq)并于同温下持续照射2小时。所述反应混合物依序以硫代硫酸钠(2x 
30毫升)和水(2x 30毫升)清洗。以硫酸钠干燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，90：10)得到标的产物1-3-2(70％)。
[0351] 合成化合物1-3-3
[0352] 将1-3-2(1.20mmole，1eq)溶液(含丙烯酸甲酯(2.4mmole，1.2eq)、三(三甲基甲硅烷基)硅烷(tris(trimethylsilyl)silane,TTMSS)(2.4mmole，1.2eq)(自由基媒介)和AIBN(5mol％)；溶剂：甲苯(toluene)(10毫升))置于氮气环境下，70℃，加热2小时。浓缩反应物，将残留物溶于二氯甲烷(30毫升)，并以水清洗(2x 30毫升)。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析(己烷/乙酸乙酯，95：5)纯化，得到标的产物1-3-3
(64％)。
[0353] 合成化合物1-3-4
[0354] 将化合物1-3-3(0.77mmole，1eq)溶于甲醇溶液(10毫升)，再添加1N氢氧化钠(2.31mmole，3eq)，将反应混合物进行回流5小时。浓缩反应物，将残留物溶于水(30毫升)，再以乙醚清洗(2x 30毫升)。以6％HCl酸化水层，以乙醚清洗(2×20毫升)。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥得到标的产物1-3-4(91％)。
[0355] 合成化合物1-3-5
[0356] 依序将砒啶(2.07mmole，3eq)和乙酸酐(2.76mmole，4eq)添加至含双高石胆酸(bishomolithocholic acid)1-3-4(0.69mmole，1eq)溶液(溶剂：二氯甲烷)。将反应混合物置于室温下持续搅拌4小时。浓缩反应物，将残留物溶于二氯甲烷(30毫升)，再依序以水(2×30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干燥有机层、过滤，以及蒸发干
燥。最终残留物以管柱层析(己烷/乙酸乙酯，70：30)纯化，得到标的产物1-3-5(65％)。
[0357] 合成化合物1-3-6
[0358] 依序添加Boc-酐(0.9mmole，2eq)和DMAP(0.14mmole，0.3eq)至1-3-5(0.45mmole，1eq)溶液(溶剂：丁叔醇)，反应混合物在室温下持续搅拌1小时。浓缩反应物，将残留物溶于DCM(40毫升)中，再依序以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干
燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-3-6(74％)。
[0359] 合成化合物1-3-7
[0360] 将化合物1-3-6(0.33mmole，1eq)溶于甲醇(10毫升)中，再添加甲氧基钠(1.98mmole，6eq)，将反应混合物置于室温下持续搅拌5小时。浓缩反应物，残留物溶于DCM(30毫升)中，再依序以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干燥
有机层、过滤，以及蒸发干燥。所述最终残留物以管柱层析(己烷/乙酸乙酯，80：20)纯化，得到标的产物1-3-7(60％)。
[0361] 合成化合物49(RS203)
[0362] 流程图21
[0363] 添加化合物1-3-7(0.2mmole，1eq)至相应Fmoc保护氨基酸(0.24mmole，1.2eq)溶液(溶剂：二氯甲烷(5毫升))，持续搅拌10分钟。依序添加N,N'-二环己碳二亚胺(DCC)溶液(0.32mmole，1.6eq；溶剂：二氯甲烷(5毫升))和DMAP(0.06mmole，0.3eq)至上述搅拌中的溶液；接着，将反应混合物于室温下持续搅拌1-2小时。过滤反应物，依序以水(2×20毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。利用硫酸钠干燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析(己烷/乙酸乙酯，80：20)纯化，得到标的产物1-3-8(75-90％)。
[0364] 添加DBU(0.16mmole，1eq)至含化合物1-3-8(0.16mmole，1eq)溶液(溶剂：二氯甲烷(10毫升))，接着，将反应混合物置于室温下持续搅拌1小时。浓缩反应物，并以快速管柱层析纯化得到标的化合物1-3-9(80-91％)。
[0365] 在0℃下，将化合物1-3-9(0.13mmole，1eq)溶于TFA(5毫升)中，添加水溶液(50μL)，将反应混合物置于室温下持续搅拌3小时。利用旋转蒸发器去除TFA溶液，再以NaHCO3饱和溶液进行中和，进行膜透析，再以反相HPLC纯化得到标的化合物49(RS203)(如，白色固
体)。
[0366] 合成RS201
[0367] 流程图22
[0368] 将化合物1-3-7(0.2mmole，1eq)添加至含相应Fmoc保护氨基酸(0.24mmole，1.2eq)的二氯甲烷(5毫升)溶液，持续搅拌10分钟。添加DMAP(0.06mmole，0.3eq)至搅拌中的含DCC(0.32mmole，1.6eq)的DCM溶液(5毫升)，将反应混合物于室温下持续搅拌1-2小时。
过滤所述反应物，再依序以水(2x 20毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠
干燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-3-10(75-90％)。
[0369] 添加DBU(0.16mmole，1eq)至化合物1-3-10(0.16mmole，1eq)溶液(溶剂：二氯甲烷(10毫升))，于室温下持续搅拌1小时。浓缩所述反应物，得到的产物以快速管柱层析纯化得到标的化合物1-3-11(80-91％)。
[0370] 于0℃下，将化合物1-3-11(0.12mmole，1eq)溶于TFA(5毫升)，添加水溶液(50微升)，所述反应混合物置于室温下持续搅拌3小时。以旋转蒸发器去除TFA溶液，再以NaHCO3饱和溶液进行中和，并进行膜透些，再以反相HPLC纯化得到标的化合物50(RS201)(白色固
体)。
[0371] 合成化合物52(RS202)
[0372] 流程图23
[0373] 添加化合物1-3-7(0.2mmole，1eq)至相应Fmoc保护氨基酸(0.24mmole，1.2eq)溶液(溶剂二氯甲烷(5毫升))，并持续搅拌10分钟。接着，添加DMAP(0.06mmole，0.3eq)至搅拌中DCC(0.32mmole，1.6eq)溶液(溶剂：DCM溶液(5毫升))，将反应混合物置于室温下持续搅拌1-2小时。过滤反应物，过滤物再依序以水(2x 20毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清
洗。以硫酸钠干燥有机层、过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-3-12(75-90％)。
[0374] 将DBU(0.16mmole，1eq)添加至化合物1-3-12(0.16mmole，1eq)溶液(溶剂：二氯甲烷(10毫升))，于室温下持续搅拌1小时。浓缩反应物，得到的产物以快速管柱层析纯化，得到标的化合物1-3-13(80-91％)。
[0375] 在0℃下，将化合物1-3-13(0.12mmole，1eq)溶于TFA(5毫升)，并添加水(50μL)，将反应混合物置于室温下持续搅拌3小时。利用旋转蒸发器去除TFA溶液，再以NaHCO3饱和溶液中和，进行膜透析，并以反相HPLC纯化得到标的化合物52(RS202)(白色固体)。
[0376] 1.6合成化合物51至57
[0377] 依据流程图24至28所示的步骤合成化合物51至57(或式(1-5)化合物)。
[0378] 流程图24：
[0379] 合成化合物1-5-1
[0380] 添加丙二酸二乙酯(diethylmalonate)(17.5mmole)至NaH(15mmole)悬浮液(溶剂：30毫升的干燥THF)，并加热至40℃。缓慢添加化合物1-3-2(5mmole)溶液(溶剂：THF)，将反应混合物置于90℃下，持续搅拌6小时。以乙酸乙酯稀释反应物，再依序以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-5-1(70％)。
[0381] 合成化合物1-5-2
[0382] 将化合物1-5-1(1克)溶于甲醇(10毫升)中，添加40％NaOH溶液(1毫升)，将反应混合物于氮气下回流6小时。离心浓缩反应物，以5％HCl溶液酸化悬浮液，进行过滤得到固体化合物，再以水清洗。真空干燥白色固态物数小时，得到产物1-5-2(75％)。所述化合物再以反相HPLC纯化，以进行生物性研究。
[0383] 合成化合物1-5-3
[0384] 依序添加砒啶(23.90mmole)和乙酸酐(31.86mmole)至化合物1-5-2(8mmole)溶液(溶剂：二氯甲烷(20毫升))，将反应混合物置于室温下持续搅拌24小时。浓缩反应物，将残留物溶于DCM(30毫升)，再依序以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫
酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，70：
30)得到标的产物1-5-3(65％)。
[0385] 合成化合物1-5-4
[0386] 依序添加Boc-酐(Boc-anhydride)(13.34mmole)和DMAP(2mmole)至1-5-3(6.67mmole)溶液(溶剂：叔丁醇(30毫升))。将反应混合物置于室温下搅拌1小时。浓缩反应物，将残留物溶于DCM(40毫升)，依序以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清
洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-5-4(74％)。
[0387] 合成化合物1-5-5
[0388] 将化合物1-5-4(4.88mmole)溶于甲醇(40毫升)中，再添加甲氧基钠(14.65mmole)，接着将反应混合物置于室温下搅拌12小时。浓缩反应物，再将残留物溶于
DCM(30毫升)，接着，依序以水(2x 30毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠
干燥有机层，过滤，和蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-5-5(60％)。
[0389] 流程图25：
[0390] 流程图26
[0391] 流程图27
[0392] 流程图28
[0393] 合成化合物1-5-6、1-5-8、1-5-10和1-5-1的一般步骤
[0394] 添加化合物1-5-5、1-5-11(0.346mmole)至相应Fmoc保护氨基酸(0.510mmole)溶液(溶剂：二氯甲烷(10毫升))，并持续搅拌10分钟。将DMAP(0.102mmole)添加至搅拌中的
DCC(0.553mmole)的溶液(溶剂：DCM(5毫升))；接着，将反应混合物置于室温下持续搅拌1小时。过滤反应物，再依序以水(2x 20毫升)和饱和氯化钠溶液(2×20毫升)清洗。以硫酸钠干燥有机层，过滤，以及蒸发干燥。最终残留物以管柱层析纯化(己烷/乙酸乙酯，80：20)得到标的产物1-5-6、1-5-8、1-5-10和1-5-13(80-90％)。
[0395] 合成化合物1-5-7、1-5-9、1-5-11和1-5-14的一般步骤
[0396] 添加DBU(0.288mmole)至化合物1-5-6，1-5-8，1-5-10或1-5-13(0.288mmole)溶液(溶剂：二氯甲烷溶液(10毫升))，将其置于室温下搅拌1小时。浓缩反应物，以快速管柱层析进行纯化，得到标的化合物1-5-7、1-5-9、1-5-11和1-5-14(90-93％)。
[0397] 合成化合物1-5-12的一般步骤
[0398] 将化合物1-5-11(0.250mmole)溶于THF：MeOH(1：1)混合物(5毫升)中，接着依序添加NaHCO3(0.375mmole)和NBD-Cl(0.275mmole)，于室温下搅拌24小时(置于暗处)。浓缩反应物，将得到的产物以管柱层析纯化得到标的化合物1-5-12(30％)。
[0399] 合成化合物53、54、55、56和57
[0400] 于0℃下，将化合物1-5-7、1-5-9、1-5-11、1-5-12或1-5-14(0.107mmole)溶于TFA(5毫升)中，添加水溶液(50μL)，将反应混合物置于室温下持续搅拌3小时。以旋转蒸发器去除TFA溶液，以NaHCO3饱和溶液中和残留物，进行膜透析，以反相HPLC纯化得到白色固体化合物。
[0401] 化合物1-5-1：1H NMR(CDCl3,300MHz):δ＝4.71-4.67(m,1H),4.22-4.13(m,4H),3.25(t,J＝7.1Hz,1H),1.95(s,3H),1.92-1.86(m,2H),1.82-1.72(m,4H),1.68-1.53(m,
2H),1.49-1.36(m,8H),1.28-1.19(m,10H),1.14-1.04(m,6H),0.92-0.88(m,6H),0.63(s,
3H)。
[0402] 化合物1-5-5：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ＝3.62-3.56(m,1H),3.04(t,J＝7.6Hz,1H),1.94-1.92(m,1H),1.82-1.78(m,4H),1.75-1.68(m,7H),1.43(s,18H),1.37-1.35(m,
7H),1.23-1.21(m,5H),1.10-1.01(m,6H),0.92-0.88(m,6H),0.63(s,3H)；13C NMR
(100MHz):δ＝169.41,169.30,81.43,72.21,56.80,56.20,54.73,43.01,40.78,40.46,
36.82,36.19,35.79,35.68,34.90,33.60,30.91,27.53,26.74,25.56,24.52,23.68,
21.14,18.87,12.32。
[0403] 化合物54：1H NMR(MeOD,500MHz):δ＝4.88-4.86(m,1H),3.19(m,1H),2.56-2.51(m,2H),2.19-2.12(m,2H),2.04-1.88(m,6H),1.76-1.74(m,2H),1.62-1.47(m,11H),1.30-
1.20(m,4H),1.19-1.08(m,7H),0.98-0.96(m,6H),0.70(s,3H)；13C NMR(100MHz):δ＝
175.68,173.89,173.84,169.89,78.72,57.99,57.46,53.58,44.01,43.47,41.98,41.60,
37.33,36.94,36.07,35.84,34.68,33.31,30.55,29.31,28.27,27.66,27.62,26.90,
26.86,25.36,23.86,22.09,19.92,12.52,HRMS m/z calcd for C31H50NO8,564.3528；found 
564.3536(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝16.51分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA，B)100％ACN+
0.05％TFA，管柱：Kromasil 300-5C4。
[0404] 化合物55：1H NMR(MeOD,500MHz):δ＝4.87-4.85(m,1H),4.08-4.05(m,1H),2.56-2.51(m,1H),2.19-2.12(m,2H),2.04-1.88(m,6H),1.77-1.75(m,2H),1.61-1.59(m,2H),
1.54-1.45(m,8H),1.42-1.31(m,3H),1.29-1.08(m,7H),0.98-0.96(m,6H),0.70(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝175.64,173.75,173.72,169.89,78.73,57.99,57.46,53.57,44.02,
43.49,41.99,41.61,37.34,36.95,36.08,35.84,34.71,33.28,30.55,29.32,28.24,
27.65,26.92,25.37,23.87,22.10,19.18,12.59,HRMS m/z calcd for C31H50NO8,
564.3544；found 564.3536(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝16.47分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA，B)100％ACN+0.05％TFA，管柱：Kromasil 300-5C4。
[0405] 化合物53：1H NMR(MeOD,500MHz):δ＝4.91-4.83(m,1H),4.27-4.05(t,J＝4Hz,1H),3.22-3.19(m,1H),3.04-2.93(m,2H),2.03-2.01(m,1H),1.97-1.90(m,5H),1.75-1.71
(m,2H),1.61-1.59(m,2H),1.51-1.42(m,8H),1.29-1.22(m,3H),1.20-1.11(m,7H),0.98-
0.96(m,6H),0.70(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝173.72,173.66,173.00,169.12,78.79,
58.00,57.49,50.90,44.02,43.47,41.98,41.61,37.33,36.93,36.05,35.84,35.11,
34.71,33.21,29.31,28.27,27.51,26.81,25.36,23.86,22.09,19.18,12.60,HRMS m/z 
calcd for C30H47NO8,550.3376；found 550.3380(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝18.72分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA，B)100％ACN+0.05％TFA，管柱：Kromasil 300-5C4。
[0406] 化合物57：1H NMR(MeOD,500MHz):δ＝8.53(d,J＝8.5Hz,1H),6.53(d,J＝9Hz,1H),4.82-4.76(m,1H),3.23(t,J＝7Hz,1H),3.15-3.04(m,2H),3.04-2.93(m,1H),1.94-
1.77(m,6H),1.74-1.68(m,2H),1.56-1.35(m,10H),1.24-1.19(m,3H),1.11-0.96(m,6H),
0.93-0.92(m,6H),0.63(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝173.65,173.45,173.38,171.02,
146.00,145.54,137.98,124.95,78.06,57.85,57.36,53.58,43.93,43.45,41.88,41.53,
37.25,36.93,36.83,36.11,35.79,34.79,33.32,29.28,27.59,26.84,25.32,23.88,
22.05,19.18,12.56,HRMS m/z calcd for C36H48N4O11,713.3395；found 713.3398(M+H)+。
HPLC条件：滞留时间＝18.75分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA，B)100％ACN+0.05％TFA，管柱：
Kromasil 300-5C4。
[0407] 化合物56：1H NMR(MeOD,500MHz):δ＝4.79-4.72(m,2H),4.24-4.22(m,1H),3.20(t,J＝7.5Hz,1H),3.02-2.98(m,1H),2.90-2.77(m,3H),2.03-2.00(m,1H),1.95-1.85(m,
5H),1.75-1.68(m,2H),1.60-1.55(m,2H),1.46-1.41(m,8H),1.31-1.21(m,4H),1.20-1.09
(m,6H),0.97-0.96(m,6H),0.69(s,3H)；13C NMR(125MHz):δ＝174.04,173.99,173.79,
173.44,171.42,169.62,77.59,57.90,57.43,51.30,50.30,44.01,43.51,41.97,41.60,
37.36,36.95,36.79,36.70,36.15,35.85,34.67,33.39,29.32,28.30,27.65,26.93,
25.37,23.91,22.10,19.18,12.58,HRMS m/z calcd for C34H53N2O11,665.3655；found 
665.3649(M+H)+。HPLC条件：滞留时间＝18.75分。溶剂：A)100％水+0.1％TFA，B)100％ACN+
0.05％TFA，管柱：Kromasil 300-5C4。
[0408] 1.7合成化合物58至70
[0409] 依据流程图29至33所示的步骤合成化合物58至64(或式(1-4)化合物)，化合物65至70是依据流程图34至40所示的步骤合成。
[0410] 流程图29
[0411] 合成化合物1-4-1
[0412] 将5.0克的石胆酸(13.28mmol)置于圆底烧瓶(round ended flask)(100毫升)的底部，添加甲醇和硫酸(200μL，8M)，让混合物在室温下反应3小时，直至混合物呈澄清透明。
浓缩澄清的溶液以减少其体积，接着，添加水至经浓缩的溶液以沈淀产物，以去离子水清洗得到白色固态化合物1-4-1(5.00克，96％)。
[0413] 化合物1-4-1：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.63(s,3H),3.58(m,1H),2.32(m,1H),2.18(m,1H),1.92(m,1H),1.84(m,2H),1.78(t,J＝3.1Hz,1H),1.75(t,J＝3.0Hz,1H),1.70
(t,J＝8.4Hz,1H),1.63(m,1H),1.50(s,4H),1.38(m,5H),1.3(t,J＝6.9Hz,2H),1.25(m,
2H),1.20(d,J＝11.0Hz,2H),1.13(m,1H),1.08(s,1H),1.03(m,2H),0.96(m,1H),0.90(s,
4H),0.86(s,2H),0.61(s,3H)。
[0414] 合成化合物1-4-2
[0415] 将化合物1-4-1(2.0克，5.12mmol)、Ph3P(2.69克，10.24mmol)和4-硝苯甲酸(nitrobenzoic acid)(1.03克，6.13mmol)添加至100毫升圆底烧瓶中，再添加30毫升甲苯，将混合物置于冰浴中，直至反应混合物冷却至0℃，接着，添加偶氮二甲酸二乙酯(diethyl azodicarboxylate)，使混合物的颜色转变成橘色，让反应进行24小时使反应温度回复至室温。
[0416] 浓缩产物以去除未反应的甲苯，接着，将浓缩的产物溶于二氯甲烷中，再以卤水萃取二次。将得到的有机层以Na2SO4干燥，再以管柱层析纯化，得到一白色非晶型固体(即，化合物1-4-2)(2.0克，72％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.40。
[0417] 化合物1-4-2：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.26(d,J＝8.8Hz,2H),8.17(d,J＝8.8Hz,2H),5.34(s,1),3.63(s,3H),2.33(m,1H),2.19(m,1H),2.07(m,1H),1.95(t,J＝6.2Hz,
1H),1.84(m,2H),1.72(m,3H),1.59(m,4H),1.38(t,J＝6.5Hz,4H),1.33(d,J＝3.1Hz,1H),
1.29(m,2H),1.23(t,J＝5.9Hz,2H),1.17(m,2H),1.11(d,J＝9.5Hz,1H),1.04(m,3H),0.99
(s,3H),0.89(d,J＝6.4Hz,3H),0.62(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ174.9,164.1,
150.6,136.7,130.7,123.6,13.0,56.7,56.1,42.9,10.3,10.1,37.9,35.8,35.4,35.1,
31.2,31.2,31.1,30.8,28.3,26.6,26.3,25.3,24.3,24.2,21.3,18.4,12.2。
[0418] 合成化合物1-4-3
[0419] 将化合物1-4-2(2.0毫克，3.71mmol)、甲醇(40毫升)、和KOH(200微升，40％)混合于锥形瓶中，进行搅拌，并将混合物加热至60℃，反应3小时。
[0420] 浓缩产物去除未反应的甲醇，接着，将浓缩的产物溶于二氯甲烷中，以碳酸氢钠萃取二次。收集有机层，再以卤水萃取，合并收集的有机层，以Na2SO4干燥，再以管柱层析(乙酸乙酯/己烷＝1：9)纯化，得到白色非晶型固体，或者是化合物1-4-3(500毫克，35％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.20.m.p.＝194-196℃。
[0421] 化合物1-4-3：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.09(m,1H),2.36(m,1H),2.23(m,1H),1.95(m,2H),1.81(m,3H),1.68(t,J＝4.8Hz,1H),1.55(m,2H),1.45(s,2H),1.36(m,6H),
1.25(m,6H),1.14(m,2H),1.03(m,4H),0.93(s,3H),0.90(d,J＝6.4Hz,3H),0.63(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ179.1,67.4,56.8,56.2,43.0,40.4,39.9,36.8,35.8,35.5,35.3,
33.7,31.0,30.1,29.9,28.4,28.0,26.8,26.4,24.4,24.1,21.3,18.4,12.3。
[0422] HRMS(ESI)calculated for C24H39O3(M-H)-375.2899；found 375.2900。
[0423] 流程图30
[0424] 合成化合物1-4-6
[0425] 将石胆酸(4.00毫克，10.6mmol)溶于二氯甲烷(100毫升)中，并置于250毫升的圆底烧瓶，添加砒啶(3.43毫升，42.5mmol)，待砒啶溶解，接着添加乙酸酐(3.01毫升，
31.9mmol)，让混合物于室温下反应4小时。
[0426] 浓缩产物去除残余的砒啶和乙酸酐。将浓缩产物溶于二氯甲烷中，再以6％HCl萃取二次，收集和合并有机层，以碳酸氢钠萃取二次，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷＝1：9to 3：7)，真空干燥得到白色非晶型固体，或是化合物1-4-4(2.9毫克，
65％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.45。
[0427] 合成化合物1-4-5
[0428] 将化合物1-4-4(4.0克，9.55mmol)溶于叔丁醇(200毫升)中，并置于圆底烧瓶中，添加(Boc)2O(4.09毫升，19.11mmol)和DMAP(350毫克，2.87mmol)，让混合物于室温下反应3小时。
[0429] 浓缩产物去除残余的叔丁醇。将浓缩产物溶于二氯甲烷中，以水萃取二次，收集及合并有机层，以Na2SO4干燥，再以管柱层析(乙酸乙酯/己烷＝1：9)纯化，真空干燥产生白色非晶型固体，或是化合物1-4-5(2800毫克，62％).TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.80。
[0430] 合成化合物1-4-6
[0431] 将化合物1-4-5(5.0克，10.53mmol)溶于甲醇(200毫升)中，并置于圆底烧瓶，添加NaOCH3(5.69克，105.3mmol)，让混合物置于室温下反应2小时。
[0432] 浓缩产物去除残留的甲醇。将浓缩产物溶于二氯甲烷中，以水萃取二次，收集合并的有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷＝2：8)，真空干燥得白色非晶型固体，或是化合物1-4-6(3.8克，83％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.55。
[0433] 化合物1-4-6：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.59(m,1H),2.23(m,1H),2.10(m,1H),1.93(m,1H),1.82(m,3H),1.72(m,2H),1.64(s,1H),1.52(s,5H),1.41(s,8H),1.36(t,J＝
4.3Hz,6H),1.24(m,5H),1.09(m,6H),0.95(s,2H),0.88(d,J＝7.6Hz,2H),0.62(s,3H)。
[0434] 合成化合物1-4-7
[0435] 混合化合物1-4-6(2.0克，4.62mmol)、Ph3P(1.82克，6.93mmol)和4-硝苯甲酸(910毫克，5.55mmol)于250毫升圆底烧瓶中，使化合物溶解，添加100毫升干燥甲苯，将混合物置于冰浴上直至混合物冷却至0℃，接着，添加偶氮二甲酸二乙酯直至混合物变成橘色，让反应进行24小时直到反应混合物回复至室温。
[0436] 浓缩产物以去除未反应甲苯，接着将浓缩产物溶于二氯甲烷中，以卤水萃取二次。收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷＝1：9)，得到白色非晶型固体化合物1-4-7(2.0克，75％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.40。
[0437] 合成化合物1-4-8
[0438] 将化合物1-4-7(2.0毫克，3.43mmol)、甲醇(40毫升)和KOH(200μL，40％)混合于锥形瓶中，搅拌并加热所述混合物至60℃，让混合物反应3小时。
[0439] 浓缩产物以去除未反应甲醇，接着将浓缩产物溶于二氯甲烷，再以碳酸氢钠萃取二次。收集有机层，以卤水萃取，合并收集的有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析(乙酸乙酯/己烷＝1：9)纯化得到白色非晶型固体(化合物1-4-8)(600毫克，40％)。
[0440] 化合物1-4-8：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.07(s,1H),2.15(m,1H),1.94(m,2H),1.75(m,4H),1.52(m,3H),1.40(s,9H),1.34(m,6H),1.23(m,6H),1.10(m,4H),1.00(m,3H),
0.92(s,3H),0.87(d,J＝6.4Hz,3H),0.61(s,3H)。
[0441] 13C NMR(100MHz,CDCl3):δ173.7,79.8,66.9,56.6,56.1,42.7,40.3,39.8,36.5,35.6,35.3,35.1,33.5,32.5,31.1,29.9,28.2,27.8,26.7,26.3,24.2,23.9,21.1,19.3,
12.1。
[0442] 流程图31
[0443] 流程图32
[0444] 流程图33
[0445] 合成化合物1-4-9
[0446] 混合化合物1-4-8(500毫克，1.155mmol)和二氯甲烷(25毫升)添加至圆底烧瓶中，使化合物溶解，接着添加Fmoc-L-Asp-tert-butyl(620毫克，1.5mmol)，DCC(240毫克，
2.671mmol)和DMAP(45毫克，0.347mmol)，将混合物置于室温下反应1小时。.
[0447] 过滤所述溶液，去除沈淀物，以蒸馏水萃取过滤物二次，收集及合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(乙酸乙酯/己烷＝1：9)，得到白色非晶型固体，或是化合物1-4-9(760毫克，79％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.45。
[0448] 化合物1-4-9：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.74(d,J＝7.5Hz,2H),7.58(t,J＝6.4Hz,2H),7.38(t,J＝7.4Hz,2H),7.30(t,J＝7.4Hz,2H),5.84(d,J＝8.5Hz,1H),5.14(s,1H),
4.55(m,1H),4.34(m,2H),4.22(m,1H),2.86(m,1H),2.21(m,1H),2.10(m,1H),1.94(m,2H),
1.82(m,2H),1.71(s,1H),1.58(m,5H),1.43(s,9H),1.41(s,9H),1.34(d,J＝5.7Hz,3H),
1.27(s,4H),1.23(s,3H),1.20(s,2H),1.14(m,2H),1.02(m,3H),0.96(s,1H),0.92(s,3H),
0.89(s,2H),0.84(s,1H),0.62(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ173.8,170.3,170.2,
156.2,144.1,144.1,143.9,141.4,141.4,127.8,127.8,127.2,127.2,125.3,125.3,
120.1,120.1,81.9,80.0,72.8,67.4,56.7,56.2,50.9,47.3,42.9,40.3,40.1,37.8,37.6,
35.8,35.4,35.0,32.7,31.2,31.0,30.5,28.3,28.3,28.3,28.2,28.2,28.2,26.6,26.3,
25.1,24.3,24.1,21.2,18.4,12.1.HRMS(ESI)calculated for C51H71NO8Na(M+Na)+
848.5077；found 848.5079。
[0449] 合成化合物58
[0450] 混合化合物1-4-9(200毫克，0.242mmol)和二氯甲烷(20毫升)于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加DBU(40微升，0.242mmol)，让混合物于室温下反应0.5小时。
[0451] 接着，进行浓缩并以快速管柱层析纯化(己烷：己烷/EA＝3：7冲洗管柱)，得到白色非晶型固体化合物1-4-10(130毫克，90％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝4：6)：Rf＝0.45。
[0452] 将化合物1-4-10(100毫克，0.165mmol)溶于TFA(3毫升)，并置于50毫升圆底烧瓶中，接着添加去离子水(60微升)，让混合物于室温下反应3小时。浓缩产物以去除残余的
TFA，得到粗化合物58(60毫克，70％)，接着将粗化合物以HPLC纯化得到白色非晶型固体化合物58。
[0453] M.P.＝143-145℃
[0454] 化合物58：1H NMR(400MHz,MeOH-d4):δ5.21(s,1H),4.30(t,J＝5.2Hz,1H),2.99(m,2H),2.26(m,2H),2.05(m,2H),1.92(m,2H),1.80(m,1H),1.64(m,5H),1.45(m,6H),1.29
(m,4H),1.18(m,3H),1.08(m,3H),0.99(s,3H),0.95(d,J＝6.4Hz,3H),0.70(s,3H)；13C NMR(100MHz,MeOH-d4):δ174.2,172.8,169.0,75.8,57.9,57.6,50.8,44.0,41.5,41.2,38.8,
37.1,36.8,36.0,35.0,32.4,32.1,31.9,31.4,29.3,27.6,27.9,25.9,25.3,24.3,,22.3,
18.9,12.6.HRMS(ESI)calculated for C28H46NO6(M+H)+492.3325；found 492.3323。
[0455] 合成化合物1-4-12
[0456] 将化合物1-4-8(500毫克，1.155mmol)及二氯甲烷(25毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使该化合物溶解，接着，添加Fmoc-D-Asp-tert-butyl(620毫克，1.5mmol)、DCC(240毫克，2.671mmol)和DMAP(45毫克，0.347mmol)将混合物至于室温下反应1小时。
[0457] 过滤溶液，去除沉淀物，以去离子水萃取过滤物二次，收集并合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(1：9)冲洗管柱)，得到白色非晶型固体(即，化合物1-4-12)(780毫克，82％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.45。
[0458] 化合物1-4-12：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.73(d,J＝7.5Hz,2H),7.58(t,J＝6.0Hz,2H),7.38(t,2H),7.29(m,2H),5.85(d,J＝8.5Hz,1H),5.15(s,1H),4.56(t,J＝
4.2Hz,1H),4.38(m,2H),4.22(d,J＝7.2Hz,1H),2.85(m,2H),2.15(m,2H),1.84(m,6H),
1.57(m,4H),1.44(s,9H),1.41(s,9H),1.36(m,3H),1.24(m,6H),1.12(m,3H),1.01(m,4H),
0.93(s,3H),0.88(d,J＝6.4Hz,3H),0.62(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ173.8,170.3,
170.2,156.2,144.1,143.9,143.9,141.4,141.4,127.8,127.8,127.2,127.2,125.4,
125.4,125.3,125.3,120.1,120.1,81.9,80.0,72.8,67.4,56.2,56.2,50.9,47.3,42.9,
40.0,37.9,37.6,35.8,35.4,34.0,32.7,31.2,30.6,28.3,28.3,28.3,28.2,28.2,28.2,
26.5,26.2,24.9,24.3,24.1,21.2,18.4,12.2.HRMS(ACPI)calculated for C51H71NO8Na(M+Na)+848.5077；found 848.5081。
[0459] 合成化合物60
[0460] 将化合物1-4-12(200毫克，0.242mmol)和二氯甲烷(20毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着，缓慢添加DBU(40微升，0.242mmol)，使混合物于室温下反应
0.5小时。进行浓缩，并以快速管柱层析进行纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(3：7)冲洗管柱)，真空干燥得到白色非晶型固体化合物1-4-13(130毫克，90％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝4：6)：Rf＝0.45。
[0461] 将化合物1-4-13(100毫克，0.165mmol)和TFA(3毫升)混合于50毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加去离子水(60微升)，让混合物在室温下反应3小时。浓缩产物以去除残余的TFA，得到粗化合物60(60毫克毫克，70％)，再以HPLC纯化得到白色非晶型固体化合物60。熔点＝184-186℃。
[0462] 化合物60：:1H NMR(400MHz,MeOH-d4):δ5.21(s,1H),4.31(t,J＝4.9Hz,1H),3.00(m,2H),2.26(m,2H),2.06(m,2H),1.86(m,3H),1.64(m,5H),1.46(m,6H),1.31(m,4H),1.13
(m,6H),1.00(s,3H),0.95(d,J＝6.6Hz,3H),0.70(s,3H)；13C NMR(100MHz,MeOH-d4):δ
178.2,172.8,169.0,75.7,57.9,57.6,50.8,44.0,41.5,41.2,38.8,37.1,36.8,36.0,
35.0,32.4,32.1,31.8,31.6,29.3,27.6,27.3,25.7,25.3,24.3,22.3,18.9,12.6；HRMS
(ESI)calculated for C28H46NO6(M+H)+492.3325；found 492.3333。
[0463] 合成化合物1-4-15
[0464] 将化合物1-4-8(200毫克，0.242mmol)和二氯甲烷(25毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加Fmoc-L-Glu-tert-butyl(640毫克，1.5mmol)、DCC(240毫克，2.671mmol)和DMAP(45毫克，0.347mmol)，让混合物于室温下反应1小时。
[0465] 过滤溶液，去除沉淀物，以水萃取过滤物二次，收集并合并，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度己烷：乙酸乙酯/己烷(1：9)洗提管柱)得到白色非晶型固体(即，化合物1-4-15)(800毫克，84％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.45。
[0466] 化合物1-4-15：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.72(d,J＝7.3Hz,2H),7.56(m,2H),7.36(t,J＝7.4Hz,2H),7.27(t,J＝7.46Hz,2H),5.55(d,J＝7.9Hz,1H),5.10(s,1H),4.35(t,J＝7.0Hz,2H),4.18(t,J＝7.0Hz,1H),2.23(m,4H),1.94(m,3H),1.83(m,3H),1.70(m,2H),
1.56(m,5H),1.42(s,9H),1.41(s,9H),1.35(t,J＝4.4Hz,3H),1.31(d,J＝4.0Hz,1H),1.24
(d,5H),1.10(m,4H),1.00(d,J＝8.3Hz,3H),0.92(s,3H),0.84(d,J＝11.7Hz,3H),0.61(s,
3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ173.7,172.0,171.4,156.0,143.9,143.7,143.7,141.2,
141.2,127.7,127.7,127.0,127.0,125.1,125.1,119.9,119.9,80.7,76.7,72.6,67.0,
56.6,56.5,56.0,53.7,47.1,42.7,40.1,39.9,37.5,36.5,35.6,35.2,34.8,33.5,32.5,
31.0,29.7,28.1,28.1,28.1,28.0,28.0,28.0,26.4,26.1,24.9,24.1,23.8,21.0,18.3,
12.0；；HRMS(ESI)calculated for C52H73NO8Na(M+Na)+862.5234；found 862.5229。
[0467] 合成化合物59
[0468] 将化合物1-4-15(200毫克，0.238mmol)和二氯甲烷(20毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，缓慢添加DBU(40微升，0.238mmol)，让混合物于室温下反应0.5小时。进行浓缩，并以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(3：7)洗提管柱)产物，真空干燥得到白色非晶型固体化合物1-4-16(140毫克，90％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝
4：6)：Rf＝0.45。
[0469] 将化合物1-4-16(100毫克，0.161mmol)和TFA(3毫升)混合于50毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加去离子水(60微升)，让混合物于室温下反应3小时。浓缩产物以去除残余的TFA，得到粗化合物59(60毫克，70％)，再以HPLC纯化得到白色非晶型固体化合物59。熔点＝145-147℃。
[0470] 化合物59：1H NMR(400MHz,MeOH-d4):δ5.23(s,1H),4.09(t,J＝6.6Hz,1H),2.55(m,2H),2.32(m,1H),2.15(m,4H),2.02(m,1H),1.92(m,2H),1.80(d,J＝6.8Hz,1H),1.65
(m,4H),1.54(s,1H),1.48(m,6H),1.32(m,4H),1.20(m,3H),1.09(m,3H),1.00(s,3H),0.94
(d,J＝6.5Hz,3H),0.69(s,3H)；13C NMR(100MHz,MeOH-d4):δ178.3,175.4,170.0,75.7,
57.9,57.6,53.4,44.0,41.5,41.2,39.0,37.1,36.8,36.1,32.4,32.1,31.9,31.6,30.4,
29.3,27.6,27.3,26.9,25.9,25.3,24.3,22.3,18.8,12.6；HRMS(ESI)calculated for 
C29H48NO6(M+H)+506.3482；found 506.3481。
[0471] 合成化合物1-4-18
[0472] 将化合物1-4-8(500毫克，1.155mmol)和二氯甲烷(25毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着，添加Fmoc-D-Glu-tert-butyl(640毫克，1.5mmol)、DCC(240毫克，2.671mmol)和DMAP(45毫克，0.347mmol)，让混合物在室温下反应1小时。
[0473] 过滤所述溶液，去除沉淀物，以蒸馏水萃取过滤物二次，收集合并有机层，以Na2SO4干燥，再以管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(1：9)洗提管柱)得到白色非晶型固体(即，化合物1-4-18)(780毫克，82％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.45。
[0474] 化合物1-4-18：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.73(d,J＝7.5Hz,2H),7.55(d,J＝7.2Hz,2H),7.36(t,J＝7.4Hz,2H),7.27(t,J＝7.4Hz,2H),5.57(d,J＝8.2Hz,1H),5.11(s,
1H),4.35(m,2H),4.18(t,J＝7.0Hz,1H),2.33(s,2H),2.21(m,2H),2.09(m,2H),1.94(d,J
＝12.7Hz,4H),1.82(m,2H),1.72(m,2H),1.63(d,J＝12.8Hz,2H),1.54(m,3H),1.43(s,
9H),1.41(s,9H),1.34(s,3H),1.27(d,J＝3.3Hz,2H),1.21(s,2H),1.12(d,J＝11.8Hz,
3H),1.06(d,J＝9.8Hz,1H),1.00(d,J＝7.8Hz,3H),0.92(s,3H),0.87(d,J＝6.3Hz,3H),
0.61(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3):δ173.6,172.0,171.4,156.0,143.9,b143.7,143.7,
141.2,141.2,127.7,127.7,127.0,127.0,125.1,125.1,119.9,119.9,80.7,76.8,72.5,
67.0,56.6,56.5,56.0,53.7,47.1,42.7,40.1,39.9,37.3,36.5,35.6,35.2,34.8,33.5,
32.5,31.0,29.7,28.1,28.1,28.1,28.0,28.0,28.0,26.4,26.1,24.9,24.1,23.8,21.1,
18.3,12.0；HRMS(ESI)calculated for C52H73NO8Na(M+Na)+862.5234；found 862.5229。
[0475] 合成化合物61
[0476] 将化合物1-4-18(200毫克，0.238mmol)和二氯甲烷(20毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着，缓慢添加DBU(40微升，0.238mmol)，让混合物在室温下反应
0.5小时。接着，进行浓缩再以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(3：7)洗提管柱)产物，真空干燥产生白色非晶型固体(即，化合物1-4-19)(140毫克，90％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝4：6)：Rf＝0.45。
[0477] 将化合物1-4-19(100毫克，0.161mmol)和TFA(3毫升)混合于50毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加去离子水(60微升)，让混合物在室温下反应3小时。浓缩产物去除残留的TFA，得到粗化合物61(60毫克，70％)，再以HPLC纯化得到白色非晶型固体化合物
61。熔点＝159-161℃。
[0478] 化合物61：1H NMR(400MHz,MeOH-d4):δ5.24(s,1H),4.11(t,J＝6.8Hz,1H),2.57(m,2H),2.32(m,1H),2.15(m,4H),1.90(m,4H),1.64(m,5H),1.47(m,6H),1.31(m,4H),1.13
(m,6H),1.00(s,3H),0.94(d,J＝6.4Hz,3H),0.70(s,3H)；13C NMR(100MHz,MeOH-d4):δ
178.3,175.5,170.0,75.7,57.9,57.6,53.4,44.0,41.5,41.2,38.9,37.1,36.8,36.1,
32.4,32.1,31.9,31.6,30.5,29.3,27.6,27.3,27.0,25.9,25.3,24.3,22.3,18.8,12.6；
HRMS(ESI)calculated for C29H48NO6(M+H)+506.3482；found 506.3485。
[0479] 合成化合物62
[0480] 将化合物化合物1-4-13(200毫克，0.331mmol)和二氯甲烷(25毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着，添加Fmoc-D-Asp-tert-butyl(160毫克，0.37mmol)、HBTU(165毫克，0.431mmol)和DiPEA(180微升，0.993mmol)，让混合物至于室温下反应2小
时。
[0481] 浓缩去除残留的DMF，将浓缩产物溶解于二氯甲烷，接着以NaHCO3萃取溶液二次，收集并合并有机层，以Na2SO4进行干燥，并以管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(3：7)洗提管柱)得到白色非晶型固体化合物1-4-21(220毫克，65％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.45。
[0482] 化合物1-4-21：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.72(d,J＝7.5Hz,2H),7.55(d,J＝7.3Hz,2H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),7.36(t,J＝7.4Hz,2H),7.27(t,J＝7.4Hz,2H),5.98(d,
J＝8.3Hz,1H),5.11(s,1H),4.72(m,1H),4.57(d,J＝6.6Hz,1H),4.36(d,J＝7.2Hz,2H),
4.20(t,J＝7.1Hz,1H),2.90(m,2H),2.74(m,1H),2.63(m,1H),2.21(m,1H),2.09(m,1H),
1.92(m,2H),1.81(m,2H),1.70(m,1H),1.55(m,4H),1.43(s,9H),1.41(s,9H),1.38(s,9H),
1.36(s,2H),1.32(s,3H),1.23(m,5H),1.11(m,3H),0.99(m,4H),0.91(s,3H),0.87(d,J＝
6.4Hz,3H),0.60(s,3H)。
[0483] 将化合物1-4-21(200毫克，0.203mmol)和二氯甲烷(20毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，接着，缓慢添加DBU(30微升，0.203mmol)，让混合物于室温下反应0.5小时。进行浓缩，再以快速管柱层析纯化(以二氯甲烷/甲醇(9：1)洗提管柱)，真空干燥得到白色非晶型固体化合物1-4-22(145毫克，90％)。TLC(二氯甲烷/甲醇＝8：2)：Rf＝0.70。
[0484] 将化合物1-4-22(100毫克，0.129mmol)和TFA(3毫升)混合于50毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着，添加去离子水(60微升)，让混合物于室温下反应3小时。浓缩产物以去除残余的TFA，得到粗化合物62(60毫克，70％)，再以HPLC纯化得到白色非晶型固体化合物62。熔点＝155-157℃。
[0485] 化合物62：1H NMR(400MHz,MeOH-d4):δ5.11(s,1H),4.81(t,J＝5.5Hz,1H),4.26(m,1H),2.87(m,3H),2.33(m,1H),2.19(m,1H),2.03(m,2H),1.91(m,2H),1.78(m,1H),1.63
(m,5H),1.46(m,6H),1.31(m,5H),1.12(m,6H),1.00(s,3H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H),0.69
(s,3H)；13C NMR(100MHz,MeOH-d4):δ178.2,173.7,172.9,171.2,169.3,74.3,57.9,57.5,
51.0,50.7,44.0,41.6,41.3,38.9,37.1,36.8,36.3,36.0,32.4,32.1,32.0,31.7,31.5,
29.3,27.6,27.4,25.9,25.3,24.4,22.3,18.9,12.6；HRMS(MALDI)calculated for 
C32H50N2O9Na(M+Na)+629.3414；found 629.3431。
[0486] 合成化合物63
[0487] 将化合物1-4-10(200毫克，0.331mmol)和THF/ethanol＝1：1(20毫升)溶液混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加NBD-Cl(73毫克，0.365mmol)、NaHCO3(42毫克，0.497mmol)，让混合物于室温下反应24小时。
[0488] 浓缩所述产物，将浓缩后的产物溶于二氯甲烷中，以水萃取二次，收集并合并有机层，再以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(1：9)洗提管柱)，得到白色非晶型固体，或是化合物1-4-24(90毫克，35％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.45。
[0489] 将化合物1-4-24(90毫克，0.129mmol)和TFA(3毫升)混合于圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加去离子水(60微升)，让混合物于室温下反应3小时。浓缩产物去除残留的TFA，得到粗化合物63(60毫克，70％)，再以HPLC纯化得到白色非晶型固体化合物63。熔点＝
138-140℃。
[0490] 化合物63：
[0491] 1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.57(d,J＝8.7Hz,1H),6.60(d,J＝8.7Hz,1H),5.15(s,2H),3.12(m,2H),2.27(m,4H),2.00(m,2H),1.79(m,2H),1.59(m,3H),1.46(m,4H),
13
1.33(m,8H),1.17(m,2H),1.04(m,3H),0.93(m,3H),0.70(d,J＝5.5Hz,3H),0.66(s,3H)；C 
NMR(100MHz,Methanol-d4):δ176.7,172.2,170.5,169.2,144.5,136.3,75.7,73.1,73.0,
68.8,56.3,56.0,42.4,41.9,39.9,39.6,37.3,35.5,35.2,34.3,34.2,30.8,30.5,30.2,
30.0,27.7,25.9,25.7,24.3,23.7,22.6,22.3,20.7,17.3；HRMS(MALDI)calculated for 
C34H46N4O9Na(M+Na)+677.3162；found 677.3181。
[0492] 合成化合物64
[0493] 将化合物1-4-16(200毫克，0.323mmol)和THF/乙醇＝1：1溶液(20毫升)混合于100毫升圆底烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加NBD-Cl(72毫克，0.356mmol)、NaHCO3(41毫克，
0.485mmol)，让混合物于室温下反应24小时，此时溶液呈黄色。
[0494] 将产物浓缩，接着将浓缩后的产物溶于二氯甲烷中，以水萃取二次，收集并合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析进行纯化(以梯度浓度的己烷：乙酸乙酯/己烷(1：9)洗提管柱)得到黄色非晶型固体化合物1-4-26(100毫克，40％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.45。
[0495] 1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.53(d,J＝8.2Hz,1H),6.32(d,J＝8.2Hz,1H),5.21(m,1H),4.57(m,1H),2.57(s,2H),2.31(m,3H),2.06(m,4H),1.80(m,5H),1.59(m,8H),1.44(t,
J＝10.0Hz,18H),1.28(t,J＝26.0Hz,18H),1.07(m,8H),0.86(m,11H),0.66(s,3H)。
[0496] 将化合物1-4-26(100毫克，0.1495mmol)和TFA(3毫升)混合于50毫升圆底烧瓶中，使化合物溶解，接着添加2％去离子水(60微升)，让混合物于室温下反应3小时。浓缩产物以去除残留的TFA，得到粗化合物64(60毫克，70％)，再以HPLC纯化得到黄色非晶型固体化合物64。熔点＝195-197℃。
[0497] 流程图34试剂和条件：
(a)溴丙烯，Cs2CO3，DMF，室温，6小时，96％；(b)Ac2O，砒啶，DCM，室温，17小时，65％；(c)MsCl，砒啶，0℃-室温，5小时，74％；和(d)KOAc，DMPU，125℃，4小时，80％。
[0498] 流程图35
[0499] 流程图36
[0500] 流程图37
[0501] 合成化合物1-4-30
[0502] 将脱氧胆酸(2.00克，5.09mmol)和无水DMF(8毫升)溶解于100毫升双颈瓶(double-necked flask)中，接着添加Cs2CO3(1.66克，5.09mmol)和烯丙基溴化物(ally 
bromide)(3.1毫升，35.87mmol)，让混合物至于室温下反应6小时或者是直至溴甲酚绿
(Bromocresol Green)指示剂呈蓝色，即代表反应完成。过滤去除残留物，收集过滤物，真空干燥去除残留的DMF。将产物溶解于乙酸乙酯(EA)中，接着以二次蒸馏水萃取二次。收集并合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷，自1：6至1：1洗提管柱)，得到白色非晶型固体或化合物1-4-28(2.11克，95％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝5：5)：
Rf＝0.75。
[0503] 将化合物1-4-31(2.00克，4.63mmol)和无水DCM(15毫升)混合于100毫升双颈瓶中，并使化合物溶解，再添加乙酸酐(1.75毫升，18.55mmol)，接着逐滴砒啶(1.5毫升，
18.60mmol)，让混合物于室温下反应17小时。真空干燥去除残留的砒啶和/或乙酸酐，将产物溶于DCM中，以6％HCl萃取二次。收集并合并有机层，接着以NaHCO3萃取二次，收集并合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：5至3：7)洗提管柱)，得到粘性液体化合物1-4-29(1.43克，65％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.55。
[0504] 将化合物1-4-29(1.50克，3.16mmol)和砒啶(10毫升)混合于100毫升双颈瓶中，并使化合物溶解，将其置于冰浴上，接着缓慢滴加甲磺酰氯(0.74毫升，9.56mmol)，混合物的反应温度自0℃升温至室温，让混合物于室温下反应5小时。当反应完成，真空干燥去除残留的砒啶，并将产物溶解于DCM中，以6％HCl萃取二次。收集并合并有机层，接着以NaHCO3萃取二次，收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，并以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：
5至3：7)洗提管柱)，得到粘性液体化合物1-4-30(1.43克，65％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：
8)：Rf＝0.55.熔点＝95-97℃。
[0505] 化合物1-4-30：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.88(m,1H),5.28(dd,J＝17.2,1.6Hz,1H),5.20(dd,J＝10.4,1.6Hz,1H),5.08(s,1H),4.67(m,1H),4.54(d,J＝6.0Hz,2H),3.03
(s,3H),2.40-2.15(m,2H),1.99(s,3H),1.97-1.60(m,9H),1.59-1.39(m,8H),1.35-0.99
(m,7H),0.96(d,J＝6.4Hz,3H),0.89(s,3H),0.73(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ173.9,
170.8,132.5,118.4,85.3,74.3,65.2,48.9,47.4,46.2,42.0,39.9,36.0,35.4,35.0,
34.4,34.2,32.6,31.3,31.0,27.7,27.3,27.2,26.6,26.0,23.7,23.3,21.7,17.9,12.6；
HRMS-ESI：calculated for C30H48O7SNa(M+Na)+,575.3018；found,575.3022。
[0506] 合成化合物1-4-31
[0507] 将 化合 物1 - 4- 3 0 (2 .0 0克 ，3 .62 mm o l) 和六 甲 基磷 酰 胺(hexamethylphosphoramine,HMPA)(15毫升)混合于100毫升双颈瓶中，并使化合物溶解，接着添加醋酸钾(5.33克，54.3mmol)。将混合物加热至约100℃，接着使其反应5小时。将产物溶于EA，接着以6％HCl萃取溶液二次。收集并合并有机层，以MgSO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：25)洗提管柱)，得到油状化合物1-4-31(1.2克，73％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝1：9)：Rf＝0.60。
[0508] 合成EY-22
[0509] 将化合物1-4-31(1.5克，3.32mmol)和干燥THF(15毫升)混合于100毫升双颈瓶中，并使化合物溶解，依序滴加Pd(Ph3)4(0.12克，0.10mmol)和吗福林(morpholine)(5.74毫升，
66.40mmol)，让混合物置于室温下反应2小时或直至混合物的颜色呈金黄色，即代表反应完成。真空干燥去除残留的DMF。将产物溶解于DCM中，以6％HCl萃取溶液二次。收集并合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：20至3：7)洗提管柱)得到油化合物1-4-33(1.2克，90％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.50。
[0510] 将化合物1-4-33(0.2克，0.48mmol)和甲醇(8毫升)混合于50毫升锥形瓶中，并使化合物溶解，接着，添加NaOMe(0.13克，2.40mmol)，让混合物于室温下反应1小时。反应完成后，真空干燥去除残留的甲醇，将产物溶于DCM中，以二次蒸馏水萃取溶液。收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：9至2：1)洗提管柱)，得到白色非晶型固体或化合物EY-22(117毫克，65％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝1：1)：Rf＝0.50。
[0511] 以HPLC纯化化合物EY-22，冷冻干燥产生白色固体化合物EY-22。
[0512] 熔点＝155-157℃。
[0513] 化合物EY-22：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ6.07(dd,J＝10.4,2.8Hz,1H),5.40(d,J＝10.4Hz,1H),3.62(m,1H),2.4-2.18(m,3H),1.96-1.62(m,7H),1.60-1.38(m,6H),1.37-
13
1.10(m,8H),0.99(d,J＝6.4Hz,3H),0.86(s,3H),0.71(s,3H)；C NMR(100MHz,CDCl3)：δ
179.8,138.9,125.8,72.0,53.8,52.1,45.2,43.4,41.4,37.2,36.1,35.4,35.2,34.6,
31.2,30.9,30.6,28.6,28.3,25.7,23.9,23.2,18.5,16.9；HRMS-ESI：calculated for 
C24H37O3(M-H)－,373.2743；found,373.2750。
[0514] 流程图38试剂和条件：
(a)(Boc)2O，DMAP，t-BuOH，室温，1小时，60％；(b)NaOMe，MeOH，室温，1小时，66％；(c)Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH，DCC，DMAP，DCM，室温，18小时，76％；(d)Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH，DCC，DMAP，DCM，室温，18小时，73％；(e)DBU，DCM，室温，1小时，91％；和(f)DBU，DCM，室温，1小时，
75％。
[0515] 流程图39试剂和条件：
(a)NBD-Cl，NaHCO3，THF；EtOH(1：1)，室温，48小时r，26％；(b)TFA，ddH2O，DCM，室温，4小时，90％；(c)4-硝苯甲酸，HBTU，DiPEA，dry DMF，室温，24小时，95％；(e)TFA，ddH2O，DCM，室温，4小时，85％；(f)TFA，ddH2O，DCM，室温，4小时，88％。
[0516] 流程图40试剂和条件：
(a)NBD-Cl，NaHCO3，THF；EtOH(1：1)，室温，48小时，68％；(b)TFA，dd H2O，DCM，室温，4小时，91％；(c)4-硝苯甲酸，HBTU，DiPEA，dry DMF，室温，24小时，815％；(e)TFA，dd H2O，DCM，室温，4小时，93％；(f)TFA，dd H2O，DCM，室温，4小时，84％。
[0517] 合成化合物1-4-36
[0518] 将化合物1-4-33(1.5克，3.6mmol)和t-BuOH(10毫升)混合于100毫升双颈瓶内，并使化合物溶解，依序添加(Boc2)O(1.54毫升，7.2mmol)、DMAP(0.13克，1.08mmol)。让混合物于室温下反应1小时。反应完成后，真空干燥移除残留的t-BuOH。将产物溶于DCM中，接着以二次蒸馏水萃取溶液二次。收集并合并有机层，以Na2SO4干燥，再以管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：EA/己烷(1：25)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-34(1.0克，60％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝1：7)：Rf＝0.70。
[0519] 将化合物1-4-34(0.2克，0.48mmol)和甲醇(10毫升)混合于100毫升烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加NaOMe(0.57克，10.60mmol)，让混合物于室温下反应1小时。当反应完成，真空干燥去除残留的甲醇，再将产物溶于DCM中，以二次蒸馏水萃取溶液二次。收集及合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：25至1：10)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-35(0.6克，66％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝1：9)：Rf＝0.30。
[0520] 将Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH(0.63克，1.53mmol)，以及由10毫升的DCM和2％THF100毫升组成的混合物置于100毫升烧瓶中，再添加化合物1-4-35(0.60克，1.39mmol)、DCC(0.57克，2.78mmol)，以及DMAP(54毫克，0.42mmol)，让混合物于室温下反应18小时。
[0521] 过滤和移除残留物，收集过滤物，以及以二次蒸馏水萃取过滤物二次。收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷，自1：30至1：15洗提管柱)，得到化合物1-4-36的白色固体(0.87克，76％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.55。
[0522] 合成化合物69(EY-36)
[0523] 将化合物1-4-36(0.65克，0.793mmol)和DCM(8毫升)混合于100毫升双颈瓶中，并使化合物溶解，接着添加DBU(0.12毫升，0.79mmol)，让混合物于室温下反应1小时，所述溶液呈淡黄色。当反应完成，真空移除残留的溶剂，以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：0至1：1)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-37(430毫克，91％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.35。
[0524] 将化合物1-4-37(0.43克，0.71mmol)和8毫升THF/乙醇(1：1)混合物混合于100毫升烧瓶中，使化合物熔解，接着添加NaHCO3(119毫克，1.42mmol)和NBD-Cl(156毫克，
0.78mmol)，让混合物置于室温下反应48小时，使反应混合物呈金黄色。浓缩产物，再以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：EA/己烷(1：10)洗提管柱)，得到黄色固体化合物1-4-38(140毫克，26％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.70。
[0525] 将化合物1-4-38(0.14克，0.18mmol)和DCM(10毫升)混合于50毫升烧瓶中，使化合物溶解，接着添加TFA(2毫升)和2％二次蒸馏水，让混合物于室温下反应4小时。反应完成
后，真空干燥移除残留的TFA，得到固体化合物69(EY-36)(106毫克，90％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.30。
[0526] 化合物69(EY-36)进一步以HPLC纯化，接着以冷冻干燥得到白色固体化合物69或EY-36。
[0527] 熔点＝188-190℃。
[0528] 化合物69(EY-36)：1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ8.52(d,J＝8.8Hz,1H),6.51(d,J＝8.8Hz,1H),6.07(dd,J＝10.4,2.8Hz,1H),5.37(d,J＝10.4Hz,1H),4.80(m,2H),3.08(m,
2H),2.40-2.15(m,3H),2.0-1.67(m,7H),1.67-1.40(m,5H),1.39-1.24(m,6H),1.20-1.06
13
(m,3H),1.00(d,J＝6.4Hz,3H),0.89(s,3H),0.71(s,3H)；C NMR(100MHz,(CD3)2CO)：δ
175.4,172.4,170.0,145.6,145.1,145.0,139.7,137.5,126.1,124.9,101.7,76.9,54.5,
54.4,52.9,45.8,44.0,41.8,36.8,36.4,35.8,35.4,35.2,33.5,31.8,31.3,29.1,28.7,
27.2,26.2,24.0,23.7,18.8,17.1；HRMS-ESI：calculated for C34H44N4O9Na(M+Na)+,
675.3006；found,675.3008。
[0529] 合成化合物65(EY-37)
[0530] 将化合物1-4-37(0.20克，0.24mmol)和DCM(5毫升)混合于50毫升烧瓶中，使化合物溶解，接着添加TFA(2毫升)和2％二次蒸馏水，让混合物置于室温反应4小时。真空干燥
后，移除残留的TFA，得到固体化合物65(EY-37)(103毫克，88％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：
7)：Rf＝0.25。
[0531] 进一步以HPLC纯化化合物65(EY-37)，冷冻干燥得到化合物65的白色固体或EY-37。
[0532] 熔点＝164-166℃。
[0533] 化合物65：1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ6.14(dd,J＝10.4,2.8Hz,1H),5.44(d,J＝10.4Hz,1H),4.85(s,1H),4.28(dd,J＝6.0,4.4Hz,1H),3.04(dd,J＝18.0,6.0Hz,1H),2.96
(dd,J＝18.0,4.4Hz,1H),2.40-2.18(m,3H),2.06-1.74(m,7H),1.71-1.45(m,6H),1.43-
1.10(m,8H),1.03(d,J＝6.4Hz,3H),0.93(s,3H),0.77(s,3H)；13C NMR(100MHz,CD3OD)：δ
178.2,172.9,169.1,140.3,126.2,78.6,55.2,53.6,50.8,46.4,44.6,42.5,37.4,36.2,
35.9,35.8,35.0,33.8,32.3,32.1,29.6,29.2,27.5,26.7,24.2,24.1,19.0,17.2；HRMS-
ESI：calculated for C28H44NO6(M+H)+,490.3169；found,490.3176。
[0534] 合成化合物67(EY-39)
[0535] 在50毫升的烧瓶中，混和4-硝苯甲酸(57毫克，0.34mmol)和干燥DMF(10毫升)，并使4-硝苯甲酸溶解于其中，接着添加HBTU(129毫克，0.34mmol)和DiPEA(0.15毫升，
0.84mmol)，再添加化合物1-4-37，让混合物置于室温下反应24小时。反应完成后，真空干燥移除残留的TFA，再将产物溶解于EA中，接着以ddH2O和NaCl溶液萃取溶液二次，收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：9至2：8)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-39(0.2克，95％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.50。
[0536] 在50毫升的烧瓶中，混合化合物1-4-39(0.20克，0.27mmol)和DCM(5毫升)，并使化合物溶解，接着添加TFA(2毫升)和2％二次蒸馏水，让混合物于室温下反应4小时。反应完成后，真空干燥移除残留的TFA，得到化合物67(EY-39)的固体(150毫克，85％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.35。
[0537] 以HPLC纯化化合物67(EY-39)，冷冻干燥产生化合物67的白色固体或EY-39。
[0538] 熔点＝127-129℃。
[0539] 化合物67：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.29(d,J＝8.4Hz,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.26(s,1H),6.08(dd,J＝10.4,2.4Hz,1H),5.36(d,J＝10.4Hz,1H),4.96(m,1H),4.80
(m,1H),3.19(dd,J＝17.6,4.0Hz,1H),3.03(dd,J＝17.6,4.4Hz,1H),2.50-2.15(m,3H),
2.0-1.65(m,7H),1.64-1.40(m,6H),1.39-1.05(m,8H),0.99(d,J＝6.4Hz,3H),0.88(s,
3H),0.72(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ180.6,176.2,170.0,165.7,150.1,139.2,
139.1,128.7,128.7,125.4,124.1,124.1,77.0,53.8,52.1,49.5,45.2,43.3,41.1,36.3,
36.1,35.2,34.8,34.5,32.8,31.2,30.8,28.6,28.0,26.4,25.6,23.8,23.2,18.5,16.8；
HRMS-ESI：calculated for C35H46N2O9Na(M+Na)+,661.3101；found,661.3093。
[0540] 合成化合物1-4-40
[0541] 将Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH(1.0克，2.35mmol)和由10毫升的DCM和2％THF组成的混合物混合于100毫升烧瓶，使Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH溶解，接着添加化合物1-4-35(0.93克，
1.97mmol)和DCC(0.65克，3.15mmol)，再添加DMAP(72毫克，0.59mmol)，让混合物于室温下反应18小时。
[0542] 过滤及移除残余物，收集过滤物，以二次蒸馏水萃取过滤物二次。收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，再以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：40至1：15)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-40(1.2克，73％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.65。
[0543] 合成化合物68(EY-43)
[0544] 将化合物1-4-40(0.22克，0.26mmol)和DCM(8毫升)混合于50毫升烧瓶中，使化合物溶解，接着缓慢添加DBU(39微升，0.26mmol)，让混合物于室温下反应1小时，此时反应溶液呈淡黄色。反应完成后，真空干燥去除残留的DCM，接着，以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：10至1：1)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-41(120毫克，75％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：Rf＝0.20。
[0545] 将4-硝苯甲酸(38毫克，0.23mmol)和DCM(8毫升)混合于50毫升烧瓶中，接着添加HBTU(87毫克，0.23mmol)和DiPEA(0.1毫升，0.57mmol)，再添加化合物1-4-41，让混合物于室温下反应24小时。反应完成后，真空干燥去除残留的TFA，以ddH2O和DCM萃取产物溶液二次，收集和合并有机层，以Na2SO4干燥，接着以管柱层析纯化(以梯度浓度的EA/己烷(1：10至
1：8)洗提管柱)，得到白色固体化合物1-4-42(118毫克，81％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝2：8)：
Rf＝0.45。
[0546] 将化合物1-4-42(118毫克，0.15mmol)和DCM(5毫升)混合于50毫升烧瓶中，使化合物溶解，接着添加TFA(2毫升)和2％二次蒸馏水，让混合物室温下反应4小时。反应完成后，真空干燥去除残留的TFA，得到固体化合物68(EY-43)(91毫克，93％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.40。
[0547] 以HPLC纯化化合物68(EY-43)，冷冻干燥得到化合物68的固体或EY-43。
[0548] 熔点＝110-112℃。
[0549] 化合物68：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.28(d,J＝8.4Hz,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.11(d,J＝7.2Hz,1H),6.09(dd,J＝10.4,2.4Hz,1H),5.38(d,J＝10.4Hz,1H),4.80
(m,2H),2.06-2.03(m,7H),2.00-1.66(m,7H),1.65-1.40(m,7H),1.35-1.05(m,7H),1.00
13
(d,J＝6.4Hz,3H),0.89(s,3H),0.72(s,3H)；C NMR(100MHz,CDCl3)：δ180.3,178.3,
171.5,165.8,150.0,139.2,139.2,128.6,128.6,125.4,124.0,124.0,76.7,53.8,52.9,
52.0,45.2,43.3,41.1,36.1,35.2,34.9,34.5,32.9,31.1,30.9,30.4,28.6,28.0,27.2,
26.7,25.6,23.7,23.1,18.5,16.8；HRMS-ESI：calculated for C36H48N2O9Na(M+Na)+,
675.3258；found,675.3255。
[0550] 合成化合物70
[0551] 将化合物1-4-37(0.43克，0.71mmol)和8毫升的THF/乙醇(1：1)混合于100毫升烧瓶中，并使化合物溶解，接着添加NaHCO3(100毫克，1.2mmol)和NBD-Cl(140毫克，
0.70mmol)，让混合物于室温下反应48小时，此时反应混合物呈金黄色。浓缩，再以快速管柱层析纯化(以梯度浓度的己烷：EA/己烷(1：10)洗提管柱)产生黄色固体化合物1-4-43(310
毫克，68％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.75。
[0552] 将化合物1-4-43(0.31克，0.40mmol)和DCM(8毫升)混合于50毫升烧瓶中，使化合物溶解，接着添加TFA(2毫升)和2％二次蒸馏水，让混合物于室温下反应4小时。反应完成
后，以真空干燥去除残留的TFA，得到固体化合物70(EY-45)(245毫克，91％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.30。
[0553] 进一步以HPLC纯化化合物70(EY-45)，再进行冷冻干燥得到化合物70或EY-45的白色固体。
[0554] 熔点＝214-216℃。
[0555] 化合物70：1H NMR(400MHz,(CD3)2CO)：δ8.55(d,J＝8.8Hz,1H),8.19(d,J＝8.0Hz,1H),6.51(d,J＝8.8Hz,1H),6.11(dd,J＝10.4,2.8Hz,1H),5.42(d,J＝10.4Hz,1H),4.83
(m,2H),2.64(t,J＝7.2Hz,2H),2.50-2.17(m,5H),2.02-1.70(m,7H),1.68-1.37(m,7H),
1.36-1.10(m,7H),1.02(d,J＝6.8Hz,3H),0.91(s,3H),0.75(s,3H)；13C NMR(100MHz,
(CD3)2CO)：δ175.1,174.3,170.9,145.6,145.2,145.1,139.7,137.5,126.1,125.0,101.4,
76.8,57.2,54.5,53.0,45.9,44.0,41.8,36.8,35.8,35.4,35.2,33.6,31.8,31.3,30.4,
29.1,28.7,27.4,27.3,26.2,24.0,23.7,18.8,17.1；HRMS-ESI：calculated for C35H45N4O9-
(M-H) ,665.3187；found,665.3190。
[0556] 合成化合物66
[0557] 将化合物1-4-41(157毫克，0.25mmol)和DCM(5毫升)混合于50毫升烧瓶中，使化合物混合，接着添加TFA(2毫升)和2％二次蒸馏水，让混合物于室温下反应4小时。反应完成
后，真空干燥移除残留的TFA，得到固体化合物66(EY-46)(108毫克，84％)。TLC(乙酸乙酯/己烷＝3：7)：Rf＝0.30。
[0558] 进一步以HPLC纯化化合物66(EY-46)，接着冷冻干燥得到化合物66或EY-46的白色固体。
[0559] 熔点＝233-235℃。
[0560] 化合物66：1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ6.15(dd,J＝10.4,2.8Hz,1H),5.45(d,J＝10.4Hz,1H),4.85(s,1H),4.07(t,J＝6.8Hz,1H),2.54(m,2H),2.40-2.08(m,5H),2.07-
1.73(m,7H),1.72-1.43(m,7H),1.40-1.12(m,7H),1.03(d,J＝6.4Hz,3H),0.94(s,3H),
0.77(s,3H)；13C NMR(100MHz,CD3OD)：δ178.2,176.0,170.0,140.3,126.3,78.5,55.1,
53.6,53.6,46.4,44.6,42.5,37.4,36.3,35.9,35.9,33.9,32.3,32.2,30.9,29.6,29.2,
+
27.6,27.0,26.7,24.2,24.1,19.0,17.2；HRMS-ESI：calculated for C29H46NO6(M+H) ,
504.3325；found,504.3316。
[0561] 1.8合成化合物71至87
[0562] 依据流程图41至49所示的步骤合成化合物71至87。
[0563] 流程图41：试剂和条件：(a)H2SO4，MeOH，97％，(b)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，30％，(c)DAST，CH2Cl2，－78℃，45％，(d)KOH，MeOH，80℃，86％。
[0564] 流程图42：试剂和条件：(a)H2SO4，MeOH，96％，(b)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，53％，(c)CrO3，AcOH，83％，(d)DAST，80℃，55％，(e)KOH，MeOH，80℃，80％，(f)H2SO4，MeOH，99％，(g)DAST，CH2Cl2，－78℃，46％，(h)KOH，MeOH，80℃，83％。
[0565] 流程图43：试剂和条件：(a)H2SO4，MeOH，87％，(b)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，59％，(c)CrO3，AcOH，64％，(d)DAST，80℃，76％，(e)KOH，MeOH，80℃，88％，(f)H2SO4，MeOH，99％，(g)DAST，CH2Cl2，－78℃，86％，(h)KOH，MeOH，80℃，80％。
[0566] 流程图44：试剂和条件：(a)H2SO4，MeOH，99％，(b)CrO3，AcOH，40％，(c)DAST，80℃，76％，(d)KOH，MeOH，80℃，90％，(e)DAST，CH2Cl2，-78℃，37％，(f)KOH，MeOH，80℃，95％。
[0567] 流程图45：试剂和条件：(a)CrO3，AcOH，58％，(b)DAST，80℃，34％，(c)KOH，MeOH，80℃，93％。
[0568] 流程图46：试剂和条件：(a)CrO3，AcOH，63％，(b)DAST，80℃，70％，(c)KOH，MeOH，80℃，90％。
[0569] 流程图47：试剂和条件：(a)H2SO4，MeOH，98％，(b)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，30％，(c)PCC，CH2Cl2，69％，(d)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，53％，(e)DAST，80℃，53％，(f)KOH，MeOH，80℃，89％。
[0570] 流程图48：试剂和条件：(a)H2SO4，MeOH，99％，(b)PDC，CH2Cl2，72％，(c)DAST，80℃，25％，(d)KOH，MeOH，80℃，72％，(e)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，22％，(f)PDC，CH2Cl2，77％，(g)DAST，80℃，56％，(h)KOH，MeOH，80℃，92％。
[0571] 流程图49：试剂和条件：(a)选择性氟试剂(selectfluor)，85℃，24小时(b)LiAl(OtBu)3，THF，室
温，1小时(c)KOH，MeOH，H2O，(d)Ac2O，砒啶，CH2Cl2，室温，24小时(e)(Boc)2O，DMAP，t-BuOH，室温，4小时，80％，(f)NaOMe，MeOH，60℃，6小时，92％，(g)Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH，DCC，DMAP，CH2Cl2，室温，6小时，85％，(h)DBU，CH2Cl2，室温，1小时，87％，(i)1.NBD-Cl，NaHCO3，THF，EtOH，室温，48小时、2.TFA，H2O，CH2Cl2，室温，2小时24％(二步骤)。
[0572] 化合物71/72：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ4.58,4.40(dm,dm,2JF7H7β＝48Hz,2JF7H7α＝48Hz,1H),3.59-3.48(m,m,isomer1+isomer2,1H),2.41-2.33(m,m,isomer 1+
isomer 2,1H),2.27-2.19(m,m,isomer 1+isomer 2,1H),1.99-1.79(m,m,isomer 1+
isomer 2,7H),1.71-1.62(m,m,isomer 1+isomer 2,4H),1.53-1.41(m,m,isomer 1+
isomer 2,5H),1.36-1.26(m,m,isomer 1+isomer 2,5H),1.19-1.02(m,m,isomer 1+
isomer 2,5H),0.94,0.87(s,s,isomer 1+isomer2,3H),0.91(d,J＝6.3Hz,isomer 1+
isomer 2,3H),0.65,0.63(s,s,isomer 1+isomer 2,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ
179.2,93.8〔d,1J(19F,13C)＝171Hz〕,91.2〔d,1J(19F,13C)＝171Hz〕,71.9,71.4,55.7,
55.2,50.1,43.2,42.7,42.5,42.4,41.8,41.6,40.9,39.9,39.5,39.2,39.0,38.7,38.6,
37.2,35.3,35.2,35.1,34.6,34.1,33.8,33.7,33.6,32.6,32.4,30.9,30.8,30.4,30.2,
28.3,28.1,25.9,23.5,23.3,22.5,21.0,20.6,18.3,12.0,11.7(two isomer)；19F NMR
(376MHz,CDCl3)：δ-172.49(s,1F),-186.53(s,1F)(two isomer)；HRMS-ESI：calculated for C24H38FO3(M－H)－,393.2805；found,393.2797。
[0573] 化合物73：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.55-3.50(m,1H),2.43-2.35(m,1H),2.27-2.25(m,1H),2.16-1.97(m,3H),1.83-1.75(m,4H),1.70-1.67(m,5H),1.57-1.45(m,4H),
1.34-1.27(m,3H),1.24-1.05(m,5H),0.93(s,3H),0.92(d,J＝7.1Hz,3H),0.65(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ179.2,124.6〔t,1J(19F,13C)＝243.2Hz〕,71.3,55.0,48.6,43.1,
41.8〔t,2J(19F,13C)＝22.6Hz〕,41.2〔d,3J(19F,13C)＝10.5Hz〕,39.4,37.2,37.0〔d,3J(19F,13C)＝8.9Hz〕,36.2〔t,2J(19F,13C)＝23.1Hz〕,35.3,34.7,34.3,30.9,30.8,30.1,
28.3,25.3,22.6,20.9,18.3,11.8；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-84.39(d,2J(19F,19F)＝
236.9Hz,1F),-101.21(d,2J(19F,19F)＝240.6Hz,1F)；HRMS-FAB：calculated for 
C24H38F2O3Na(M+Na)+,435.2686；found,435.2687。
[0574] 化合物77：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ4.82(dm,2JF3αH3β＝48.8Hz,1H),2.42-2.34(m,1H),2.28-2.20(m,1H),2.25-1.92(m,3H),1.92-1.76(m,6H),1.72-1.57(m,3H),1.56-1.44(m,5H),1.44-1.32(m,5H),1.27-1.10(m,4H),0.98(s,3H),0.92(d,J＝6.4Hz,3H),
0.66(s,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)：δ179.8,124.9〔t,1J(19F,13C)＝243.8Hz〕,89.3〔t,
1J(19F,13C)＝166.3Hz〕,55.0,48.7,,43.2,41.8〔t,2J(19F,13C)＝22.5Hz〕,39.5,36.5
〔d,3J(19F,13C)＝8.8Hz〕,36.3〔d,3J(19F,13C)＝10.5Hz〕,35.6〔t,2J(19F,13C)＝
22.9Hz〕,35.2,34.5,32.5〔d,3J(19F,13C)＝4.4Hz〕,32.3〔d,3J(19F,13C)＝4.1Hz〕,30.8〔t,2J(19F,13C)＝20.0Hz〕,29.6,28.3,25.7〔t,2J(19F,13C)＝21.1Hz〕,25.3〔d,3J(19F,
13C)＝3.4Hz〕,23.0,21.2,18.3,11.8；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-83.99(d,2J(19F,19F)＝240.6Hz,1F),-101.15(d,2J(19F,19F)＝240.6Hz,1F),-184.9(s,1F)；HRMS-FAB：
calculated for C24H38F3O2(M+H)+,415.2820；found,415.2824。
[0575] 化合物74：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.65-3.57(m,1H),2.44-2.40(m,2H),2.32-2.24(m,1H),1.99-1.70(m,5H),1.67-1.53(m,6H),1.53-1.36(m,5H),1.36-1.18(m,5H),
1.18-1.02(m,3H),0.98(d,J＝6.0Hz,3H),0.90(s,3H),0.79(s,3H)；13C NMR(125MHz,
CDCl3)：δ178.3,126.5〔t,1J(19F,13C)＝249.0Hz〕,71.6,52.5〔d,3J(19F,13C)＝7.1Hz〕,
49.2〔t,2J(19F,13C)＝20.5Hz〕,47.8,41.6,37.2〔d,3J(19F,13C)＝9.4Hz〕,36.2,35.1,
34.7,34.1,33.2,31.3〔t,2J(19F,13C)＝25.3Hz〕,31.2,30.1〔d,3J(19F,13C)＝9.4Hz〕,
26.9,26.3,25.5,23.1,23.0,18.9,18.8,10.5；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-90.8(d,2J
(19F,19F)＝229.4Hz,1F),-111.9(d,2J(19F,19F)＝229.4Hz,1F)；HRMS-ESI：calculated for C24H37F2O3(M－H)－,411.2711；found,411.2714。
[0576] 化合物78：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ4.86(dm,2JF3αH3β＝48.8Hz,1H),2.44-2.32(m,1H),2.32-2.24(m,1H),1.92-1.83(m,5H),1.83-1.70(m,5H),1.62-1.47(m,7H),1.47-1.22(m,6H),1.19-0.99(m,3H),0.99-0.95(m,6H),0.80(s,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)：δ
179.3,126.5〔t,1J(19F,13C)＝245.1Hz〕,89.8〔t,1J(19F,13C)＝165Hz〕,52.7,49.3〔t,2J(19F,13C)＝21.3Hz〕,47.8,36.6〔d,3J(19F,13C)＝9.3Hz〕,36.5,34.4,34.4〔d,3J(19F,
13C)＝7.6Hz〕,33.2,31.6〔t,2J(19F,13C)＝25.8Hz〕,31.5,31.3,30.2,30.0,26.4,26.0,
25.8〔t,2J(19F,13C)＝21.3Hz〕,25.2,23.3,23.0,18.9〔d,3J(19F,13C)＝10.9Hz〕,10.5；
19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-90.93(d,2J(19F,19F)＝229.4Hz,1F),-111.97(d,2J(19F,
19F)＝229.4Hz,1F),-182.70(s,1F)；HRMS-FAB：calculated for C24H39F3O2Na(M+Na)+,
437.2643；found,437.2658。
[0577] 化合物79：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.42-2.34(m,1H),2.28-2.20(m,1H),2.15-1.94(m,2H),1.85-1.45(m,5H),1.66-1.56(m,3H),1.46-1.34(m,5H),1.29-1.23(m,5H),
1.17-1.05(m,5H),0.95(s,3H),0.90(d,J＝6.4Hz,3H),0.64(s,3H)；13C NMR(100MHz,
CDCl3)：δ180.1,124.6〔t,1J(19F,13C)＝238.5Hz〕,56.4,55.9,42.8,40.0,39.9,35.2,
35.3,34.5,34.5〔t,2J(19F,13C)＝18.5Hz〕,33.1,33.0,31.0,30.7,29.3〔t,2J(19F,13C)＝24.5Hz〕,28.1,26.1,26.0,24.1,22.8,21.1,18.2,12.1；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-
88.24(d,2J(19F,19F)＝233.1Hz,1F),-99.4(d,2J(19F,19F)＝233.1Hz,1F)；HRMS-ESI：
calculated for C24H37F2O2(M－H)-,395.2762；found,395.2768。
[0578] 化合物76：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ4.85(dm,2JF3αH3β＝49.2Hz,1H),2.41-2.33(m,1H),2.23-2.19(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.82-1.72(m,3H),1.69-1.57(m,4H),1.39-1.32(m,7H),1.23-1.11(m,3H),1.11-1.01(m,4H),1.19-1.13(m,3H),0.94(s,3H),0.90(d,
J＝6.4Hz,3H),0.63(s,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)：δ179.6,90.2〔d,1J(19F,13C)＝
165.4Hz〕,56.6,56.0,42.8,40.2,39.9,36.9,35.6,35.3,34.8,31.7,31.5,30.9,30.8,
30.2,28.2,26.3,26.1,24.2,23.7,21.1,18,3,12.1；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-182.1(s,
1F)；HRMS-FAB：calculated for C24H40FO2(M+H)+,379.3016；found,379.3012。
[0579] 化合物78：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.42-2.35(m,1H),2.29-2.21(m,1H),2.18-1.98(m,3H),1.90-1.73(m,8H),1.73-1.58(m,3H),1.48-1.36(m,4H),1.36-1.06(m,7H),
0.99(s,3H),0.92(d,J＝6.4Hz,3H),0.66(s,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)：δ179.3,124.3〔t,1J(19F,13C)＝243.1Hz〕,123.5〔t,1J(19F,13C)＝240Hz〕,55.0,48.5,43.2,41.7〔t,2J(19F,13C)＝22.4Hz〕,39.3,39.2〔t,2J(19F,13C)＝11.6Hz〕,36.5〔d,3J(19F,13C)＝
8.7Hz〕,35.3〔t,2J(19F,13C)＝23.3Hz〕,35.2,34.3,32.4〔d,3J(19F,13C)＝9.0Hz〕,30.8,
30.7,29.1〔t,2J(19F,13C)＝22.9Hz〕,28.3,25.3,25.3,22.1,21.2,18.3,11.8；19F NMR
(376MHz,CDCl3)：δ-87.7(d,2J(19F,19F)＝240.6Hz,1F),-89.7(d,2J(19F,19F)＝
231.88Hz,1F),-101.27(d,2J(19F,19F)＝169.2Hz,1F),-101.9(d,2J(19F,19F)＝
157.9Hz,1F)；HRMS-ESI：calculated for C24H35F4O2(M－H)－,431.2573；found,431.2586。
[0580] 化合物81：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.44-2.40(m,1H),2.28-2.24(m,1H),2.12-1.91(m,1H),1.90-1.83(m,4H),1.75-1.67(m,5H),1.63-1.56(m,4H),1.48-1.40(m,5H),
1.34-1.07(m,5H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H),0.95(s,3H),0.80(s,3H)；13C NMR(125MHz,
CDCl3)：δ179.9,126.2〔t,1J(19F,13C)＝246.1Hz〕,124.1〔t,1J(19F,13C)＝239.4Hz〕,
52.5,52.4,49.2〔t,2J(19F,13C)＝20.4Hz〕,47.8,39.6〔d,3J(19F,13C)＝8.8Hz〕,36.6〔d,
3J(19F,13C)＝9.1Hz〕,34.4〔t,2J(19F,13C)＝22.3Hz〕,34.1,33.2,32.8〔d,3J(19F,13C)＝9.1Hz〕,31.5〔t,2J(19F,13C)＝25.8Hz〕,31.4,30.2,29.1〔t,2J(19F,13C)＝23.6Hz〕,
26.3,25.8,25.1,23.0,22.4,18.9〔d,3J(19F,13C)＝10.6Hz〕,10.5；19F NMR(376MHz,
CDCl3)：δ-88.8(d,2J(19F,19F)＝233.1Hz,1F),-91.0(d,2J(19F,19F)＝233.1Hz,1F),-
99.7(d,2J(19F,19F)＝233.1Hz,1F),-111.9(d,2J(19F,19F)＝233.1Hz,1F)；HRMS-ESI：
calculated for C24H35F4O2(M－H)－,431.2573；found,431.2568。
[0581] 化合物73：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.65-3.57(m,1H),2.41-2.34(m,1H),2.28-2.20(m,1H),1.98-1.91(m,2H),1.90-1.74(m,5H),1.73-1.42(m,6H),1.41-1.31(m,4H),
1.30-1.20(m,2H),1.19-1.01(m,5H),0.94(d,J＝4.6Hz,3H),0.91(d,J＝6.37Hz,3H),0.65
(s,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)：δ179.5,125.0〔t,1J(19F,13C)＝244.5Hz〕,70.4,55.8〔d,3J(19F,13C)＝11.7Hz〕,49.1〔t,2J(19F,13C)＝18.5Hz〕,42.8,39.8,39.6,35.7〔d,3J(19F,13C)＝5.5Hz〕,35.2,35.2〔t,2J(19F,13C)＝20.5Hz〕,33.0〔d,3J(19F,13C)＝
9.5Hz〕,32.8,31.0,30.7,29.8,28.0,27.9,24.1〔d,3J(19F,13C)＝7.17Hz〕,24.0,22.5,
20.4,18.2,11.9；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-87.5(d,J＝210.6Hz,1F),-91.1(d,J＝
240.6Hz,1F)。
[0582] 化合物82：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ2.40-2.33(m,1H),2.32-2.25(m,1H),2.18-1.90(m,5H),1.89-1.86(m,5H),1.83-1.74(m,4H),1.74-1.53(m,3H),1.44-1.24(m,5H),
1.00(s,3H),0.98(dm,3H),0.84(s,3H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ180.1,125.3〔t,1J
(19F,13C)＝245.0Hz〕,123.7〔t,1J(19F,13C)＝243.8Hz〕,123.1〔t,1J(19F,13C)＝
240Hz〕,49.4〔t,2J(19F,13C)＝20.5Hz〕,46.7,45.2,40.7〔t,2J(19F,13C)＝21.8Hz〕,39.0〔t,2J(19F,13C)＝10.2Hz〕,23.3〔t,2J(19F,13C)＝23.3Hz〕,33.9,33.7〔d,3J(19F,13C)＝
9.2Hz〕,33.0,32.2〔d,3J(19F,13C)＝9.2Hz〕,31.5,31.4〔t,2J(19F,13C)＝26.5Hz〕,30.0,
28.9〔t,2J(19F,13C)＝23.1Hz〕,26.0,24.1,24.0,21.8,19.1〔d,3J(19F,13C)＝10.2Hz〕,
10.5；19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-85.4(d,J＝244.4Hz,1F),-90.2(d,J＝244.4Hz,1F),-
93.1(d,J＝244.4Hz,1F),-101.4(d,J＝244.4Hz,1F),-102.1(d,J＝236.9Hz,1F),-111.74
(d,J＝236.9Hz,1F)；HRMS-FAB：calculated for C24H34F6O2Na(M+Na)+,491.2361；found,
491.2376。
[0583] 化合物75：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ3.58-3.48(m,1H),2.46-2.37(m,1H),2.34-3.24(m,1H),2.21-1.96(m,3H),1.92-1.83(m,4H),1.79-1.61(m,7H),1.61-1.43(m,3H),
1.38-1.09(m,5H),0.98(d,J＝6.0Hz,3H),0.95(s,3H),0.83(s,3H)；13C NMR(100MHz,
CDCl3)：δ177.8,125.5〔t,1J(19F,13C)＝248.7Hz〕,124.0〔t,1J(19F,13C)＝248.7Hz〕,
71.1,49.4〔t,2J(19F,13C)＝20.4Hz〕,46.7,45.2,40.9〔d,3J(19F,13C)＝16.7Hz〕,40.8〔t,2J(19F,13C)＝21.5Hz〕,37.1,36.1〔t,2J(19F,13C)＝21.6Hz〕,34.5,34.2〔t,2J(19F,
13C)＝10.2Hz〕,33.9,33.0,31.2〔t,2J(19F,13C)＝22.5Hz〕,30.1〔d,3J(19F,13C)＝
12.5Hz〕,30.0,29.7,26.0,24.1,22.3,19.1〔d,3J(19F,13C)＝10.9Hz〕,10.5；19F NMR
(376MHz,CDCl3)：δ-85.1(d,J＝244.4Hz,1F),-93.0(d,J＝244.4Hz,1F),-101.3(d,J＝
244.4Hz,1F),-111.8(d,J＝244.4Hz,1F)；HRMS-ESI：calculated for C24H35F4O3(M－H)－,
447.2522；found,447.2515。
[0584] 化合物86：1H NMR(500MHz,DMSO)：δ4.71(ddd,J＝4.7Hz,1H),3.97(m,1H),2.26-2.05(m,2H),1.89(d,J＝10.0Hz,1H),1.83-1.74(m,2H),1.71-1.49(m,4H),1.49-1.29(m,
8H),1.29-0.98(m,9H),0.93(s,3H),0.86(d,3H),0.61(s,3H)；13C NMR(125MHz,DMSO)：δ
175.3,91.7,90.3,66.2,66.1,56.2,56.0,42.6,41.3,41.2,41.1,37.4,37.3,35.5,35.2,
31.2,31.1,29.1,28.1,26.2,26.1,25.9,24.2,23.7,21.2,20.3,18.5,12.3。
[0585] 化合物84：1H NMR(500MHz,DMSO)：δ4.99(d,J＝4.8Hz,1H),4.47(td,J＝51.1Hz,1H),3.47-3.30(m,1H),2.27-2.05(m,2H),1.94-1.87(d,J＝12.0,1H),1.85-1.75(m,1H),
1.73-1.51(m,6H),1.47-0.98(m,16H),0.92(s,3H),0.86(d,J＝6.6Hz,3H),0.61(s,3H)；
13C NMR(125MHz,DMSO)：δ175.3,95.5,94.1,73.0,72.8,56.2,55.9,47.0,46.9,42.6,
42.1,37.5,37.4,35.4,35.2,34.3,31.2,31.1,28.1,28.0,27.9,26.0,24.2,23.3,20.8,
18.5,12.3。
[0586] 化合物87：1H NMR(500MHz,DMSO)：δ8.59(d,J＝8.5Hz,1H),8.19(d,J＝9.23Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),5.44-5.32(br,1H),5.39-5.21(br,1H),5.02-4.84(ddd,J＝
46.9Hz,1H),3.24(d,J＝2.3Hz,2H),2.36-2.25(m,2H),2.24-2.13(m,2H),1.98-1.91(d,J
＝9.87Hz,1H),1.85-1.70(m,3H),1.68-1.33(m,10H),1.32-1.04(m,9H),0.91(d＝J＝
6.7Hz,3H),0.73(s,3H),0.65(s,3H)；13C NMR(125MHz,DMSO)：δ174.1,171.0,168.7,
144.6,144.1,136.3 124.0,101.3,88.3,86.9,71.8,71.7,56.1,56.0,42.7,42.6,42.4,
41.2,39.8,36.8,36.7,35.3,35.1,35.0,30.8,30.2,27.8,25.2,23.7,23.0,22.9,22.4,
20.9,19.7,17.7,11.4。
[0587] 化合物85：1H NMR(500MHz,DMSO)：δ9.03(d,J＝9.05Hz,1H),8.58-8.45(m,1H),7.11(d,J＝8.8Hz,1H),5.71-5.58(m,1H),5.47-5.31(m,1H),5.38-5.18(td,J＝51.3Hz,
1H),3.70(d,J＝5.7Hz,2H),2.85-2.74(m,2H),2.71-2.60(m,2H),2.46-2.39(m,1H),2.38-
2.13(m,7H),2.13-1.80(m,9H),1.86-1.52(m,11H),1.48(s,3H),1.39(d,J＝6.4Hz,3H),
1.14(s,3H)；13CNMR(125MHz,DMSO)：δ174.1,170.8,169.1,144.6,144.1,136.4,124.2,
100.9,91.0,89.6,77.7,77.5,56.1,56.0,53.1,47.2,47.1,42.3,42.0,39.8,37.0,35.3,
35.2,33.4,30.8,30.2,27.8,25.5,23.8,22.2,20.6,20.3,17.7,11.4。
[0588] 1.9合成化合物88至94
[0589] 依据流程图50至52所示的步骤合成化合物88至94(或式(1-7)、(1-8)和(1-9)化合物)。
[0590] 流程图50：
[0591] 流程图51：
[0592] 流程图52：
[0593] 合成化合物88、90和92
[0594] 依据已知的酮胆碱(ketocholine)(化合物1-7-1、1-8-1和1-7-4)的Bayer-Viliger氧化反应，利用三氟乙酸(trifluoroperacetic acid)合成高丝胺酸内酯(化合物
88、90和92；流程图37)。利用酮胆碱(化合物1-7-1、1-8-1和1-7-4)Bayer-Viliger氧化反应进行环扩增，合并一额外的氧原子得到内酯(lactone)。本反应完整保留构型和区域选择
性，提供可信赖的化合物合成设计。因此，利用Baeyer-Villiger酮胆碱氧化反应得到的1-
7-2、1-8-2、1-7-5内酯，以快速管柱层析纯化。在此是利用与公开文献类似的制备步骤
(Peterson等人，Tetrahedron，51，9467-9486(1995))以甲醇氢氧化钡皂化内酯，接着以浓盐酸酸化，再以乙酸乙酯萃取，以卤水清洗，真空并蒸发干燥得到化合物88、90和92。
[0595] Baeyer-Villiger氧化反应的一般步骤
[0596] 于0℃下，将酮胆烷酸甲酯(0.66mmol)(溶剂：二氯甲烷(12毫升))溶液添加至三氟乙酸溶液(溶剂：二氯甲烷)中。所述三氟乙酸溶液的制备在0℃下添加三氟乙酸酐(4.5毫
升)至30％过氧化氢(0.75毫升)溶液(溶剂：二氯甲烷(12毫升))。所述混合物于0℃搅拌2小时，接着，使混合物回温至室温并维持4小时。以二氯甲烷(30毫升)稀释反应混合物，再以饱和碳酸氢钠溶液、卤水溶液清洗，以无水硫酸钠干燥，接着，进行浓缩。残留物以管柱层析纯化(以乙酸乙酯/己烷(2/1)洗提)得到内酯(lactone)(82％)。
[0597] 内酯皂化的一般步骤
[0598] 混合内酯(0.11mmol)、八水氢氧化钡(barium hydroxide octahydrate)(粉末3.5gm)和MeOH(5毫升)得到一混合物，并于室温下搅拌97小时。以卤水(3毫升)稀释白色悬
浮液，再以1M HCl酸化得到清澈溶液(pH＝3-4)。以ith EtOAc(2x 50+2x 20)萃取水溶液，以卤水(20毫升)清洗合并有机萃取物，干燥，真空浓缩，以氯仿清洗，产率为80-90％。
[0599] 甲基3α-乙酰氧基-8-氧杂7-氧代-B-同-5β-胆烷(1-7-2)。Rf＝0.25(hexane/EtOAc,2:1).1H NMR(400MHz,CDCl3)4.62-4.58(m,H-3ax.),4.11(dd,J＝9.2and 10.0Hz,H-
8ax),3.55(s,CH3O),2.95(br.d,J＝15.0Hz,H-6),2.30-2.05(m,3H),1.95-1.07(m,24H,
steroidal CH and CH2),0.98(s,CH3-19),0.81(d,J＝6.8Hz,CH3-21),0.56(s,CH3-18).13C NMR(75MHz,CDCl3)35.2(C-1),26.2(C-2),72.3(C-3),31.4(C-4),41.2(C-5),35.2(C-6),
173.6(C-7),79.2(C-8),39.7(C-9),37.2(C-10),22.6(C-11),38.1(C-12),42.9(C-13),
54.1(C-14),24.7(C-15),27.4(C-16),55.4(C-17),11.2(C-18),23.1(C-19),34.7(C-20),
17.9(C-21),30.5(C-22),30.6(C-23),174.0(C-24),51.1(CH3-O),170.0(AcO)。
[0600] 甲基3α-乙酰氧基-13-氧杂12-氧代-C-同-5β-胆烷(1-8-2)。Rf＝0.30(hexane/EtOAc,2:1).1H NMR(400MHz,CDCl3)4.67-4.59(m,H-3ax.),3.57(s,CH3O),2.52(br.d,J＝
12.0Hz,H-11),2.37-2.25(m,3H),1.92(s,3H,CH3CO),1.84-1.02(m,24H,steroidal CH 
13
and CH2),0.95(d,J＝6.5Hz,CH3-21),0.8(s,CH3-18). C NMR(75MHz,CDCl3)14.3,17.0,
20.3,20.5,21.0,22.1,23.8,25.5,25.8,26.2,26.3,29.9,30.5,31.6,33.9,34.5,35.2,
36.2,37.3,38.8,40.8,51.2,54.9,55.1,73.4(C-3),87.2(C-13),170.5(AcO),174.2(C-
12),175.2(C-24)。
[0601] 甲基3α,7α-二乙酰氧基-13-氧杂12-氧代-B-同-5β-胆烷(1-7-5)。Rf＝0.30(hexane/EtOAc,2:1).1H NMR(400MHz,CDCl3)4.60(br.d,J＝2.0Hz,H-7)4.46-4.39(m,1H,
H-3ax.),3.49(s,CH3O),2.52(br.d,J＝13.2Hz,H-11),2.37-2.25(m,4H),2.10-0.99(m,
30H,steroidal CH and CH2,2Ac),0.88(d,J＝6.6Hz,CH3-21),0.76(s,CH3-18).13C NMR
(75MHz,CDCl3)14.2,17.0,21.0,21.7,23.7,24.7,26.3,29.9,30.4,30.6,32.7,33.8,
34.2,34.7,35.1,35.6,39.8,40.6,49.8,51.1,55.0,71.0(C-3),73.1(C-3),86.2(C-13),
169.7(AcO),170.1(C-12),173.9(C-24)。
[0602] 3α-羟基-8-氧杂7-氧代-B-同-5β-胆烷二十酸(88)。产率90％；Rf＝0.23(dichloromethane/MeOH,5:1).Mp.212-213℃ 1H NMR(400MHz,acetone-d6)4.40(dd,J＝
9.2and 10.0Hz,H-8ax),3.59-3.54(m,H-3ax.),3.20(br.d,J＝14.8Hz,H-6),2.35-2.19
(m,3H),1.99-1.26(m,22H,steroidal CH and CH2),1.12(s,CH3-19),0.96(d,J＝6.4Hz,
CH3-21),0.72(s,CH3-18).13C NMR(100MHz,acetone-d6)36.3(C-1),28.4(C-2),70.9(C-
3),35.8(C-4),41.1(C-5),31.7(C-6),173.9(C-7),79.5(C-8),39.4(C-9),37.0(C-10),
23.2(C-11),38.4(C-12),42.6(C-13),55.7(C-14),25.7(C-15),28.4(C-16),56.7(C-17),
11.9(C-18),23.9(C-19),36.3(C-20),18.6(C-21),31.2(C-22),31.3(C-23),175.0(C-
24).HRMS calcd for C24H37O5(M–H)-,405.2641；found,405.2635。
[0603] 3α-羟基-13-氧杂12-氧代-C-同-5β-胆烷二十酸(90)。产率80％；Rf＝0.21(dichloromethane/MeOH,5:1).Mp.102-103℃.1H NMR(400MHz,MeOH-d4)3.56-3.50(m,H-
3ax.),2.37-2.17(m,4H),2.00--1.20(m,20H,steroidal CH and CH2),1.05(d,J＝5.6Hz,
CH3-21),0.93(s,CH3-19),0.82(s,CH3-18).13C NMR(100MHz,MeOH-d4)17.8,20.3,23.9,
25.8,26.6,28.1,31.7,31.9,32.0,35.7,36.5,37.2,37.6,43.2,52.9,54.4,72.4(C-3),
+
82.2(C-13),178.3(C-12),179.0(C-24).HRMS calcd for C24H37O5(M+Na) ,429.2617；
found,429.2613。
[0604] 3α,7α-Di羟基-13-氧杂12-氧代-C-同-5β-胆烷二十酸(92)。产率85％；Rf＝0.2(dichloromethane/MeOH,5:1).Mp.99-101℃.1H NMR(400MHz,MeOH-d4)3.70(d,J＝2.4Hz,H-7)3.44-3.39(m,H-3ax.),2.7.-2.5(m,2H),2.40--1.26(m,26H,steroidal CH and CH2,
CH3-19),1.05(d,J＝6.4Hz,CH3-21),0.91(s,CH3-18).13C NMR(100MHz,MeOH-d4)14.7,
17.8,22.6,25.1,26.0,26.5,31.3,31.9,32.3,33.7,35.5,36.3,37.3,40.4,42.5,43.7,
51.7,57.0,68.7(C-7),72.5(C-3),88.9(C-13),178.1(C-12and C-24).HRMS calcd for 
C24H38O6(M–H)-,421.2590；found,421.2583。
[0605] 合成化合物89、91和93
[0606] 依据标准反应条件(Iuliano等人，Tetrahedron：Asymmetry 2001，12，2811-2825)将化合物1-7-1、1-8-11-7-4(流程图38)转化成相应的肟化合物1-7-3、1-8-3和1-7-6。于0℃下，化合物1-8-3和1-7-6以SOCl2/THF进行贝克慢转位(Beckmann rearrangement)，至相应的1-7-7、1-8-4和1-7-8内酯化合物，接着，于室温下，与LiOH反应24小时，转换得到化合物89、91和93。
[0607] 合成肟(1-7-3，1-8-3，和1-7-6)的一般步骤
[0608] 将醋酸钠(1.03克，13.42mmol，5.75eq.)和盐酸羟胺(0.288克，4.13mmol，2eq.)添加至酮(1.0克，1eq.)溶液(溶剂：甲醇(20毫升))中。回流搅拌反应混合物6小时。真空干燥去除溶剂，将残留物溶于CH2Cl2。以水清洗有机溶液，以Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，粗产品以乙醇溶液再结晶，得到纯肟化合物(产率90％)。
[0609] 贝克曼转位的一般步骤(1-7-7，1-8-4，1-7-8)
[0610] 将新鲜蒸馏的亚硫酰氯(1.5毫升)与4毫升干燥THF混合，将此溶液逐渐滴加至肟(1-7-3，1-8-3或1-7-6，355毫克，0.77mmol)溶液(12毫升干燥THF)中，冷却并置于0℃。之后，于0–10℃下，搅拌反应混合物并持续1小时；接着，于氩气及室温环境下置放4小时。将混合物倾注至冰水上，以NH3溶液中和，再以二氯甲烷萃取。以水及饱和卤水清洗有机层，以无水Na2SO4干燥。减压浓缩并蒸发干燥溶剂，得到固体残留物，再以硅胶管柱层析(以己烷/
EtOAc(1：2)洗提管柱)得到347毫克(80％)白色固体析出物。
[0611] 酯水解的一般步骤(89、91和93)
[0612] 将含1-7-7、1-8-4或1-7-8(100毫克，0.21mmol)(溶剂：THF–甲醇1：2(7毫升))溶液添加至LiOH(91毫克，2.2mmol，10eq.)溶液(1毫升)中。将混合物于室温下搅拌24小时。以10％HCl溶液酸化。减压浓缩去除溶剂，再添加乙酸乙酯(20毫升)。以卤水清洗有机溶液，以MgSO4干燥，再进行蒸发干燥。以乙酸乙酯再结晶固体残留物得到标的化合物(89、91和93)(产率：70至80％)。
[0613] 甲基3α-乙酰氧基-7-异亚硝基-5β-胆烷-24-酸酯(1-7-3)。Rf＝0.43(hexane/EtOAc,5:1).1H NMR(400MHz,CDCl3):7.35(br.S,1H,NOH),4.75-4.65(m,1H,H-3ax.),3.65
(s,CH3O),3.08(dd,J＝2.0and 12.8Hz,H-6),2.34-2.15(m,4H),2.05-1.10(m,24H,
steroidal CH and CH2,Ac),1.07(s,CH3-19),0.91(d,J＝6.4Hz,CH3-21),0.66(s,CH3-18)
.13C NMR(100MHz,CDCl3,δ):12.2,18.5,21.2,21.5(CH3CO),23.3,25.4,26.4,27.5,28.2,
31.1,31.2,32.8,34.3,35.4,35.6,39.2,42.4,42.9,43.1,44.6,49.5,51.6(CH3O),55.0,
73.4(C3),161.0(C＝NOH),170.7(CH3C＝O)；174.8(24C＝O)。
[0614] 甲基3α-乙酰氧基-8-氮杂-7-氧代-B-同-5β-胆烷(1-7-7)。Rf＝0.16(hexane/EtOAc,1:1).1H NMR(400MHz,CDCl3)5.37(br.s.,1H,NH),4.79-4.72(m,H-3 ax.),3.65(s,
CH3O),3.31(dd,J＝6.0 and 9.6 Hz,H-8 ax),2.92(br.d,J＝14.4 Hz,H-6),2.34-2.13
(m,3H),1.97(s,3H,Ac),1.97-1.08(m,24H,steroidal CH and CH2),1.06(s,CH3-19),0.91
(d,J＝6.4 Hz,CH3-21),0.66(s,CH3-18).13C NMR(100 MHz,CDCl3,δ):11.6,18.3,21.4,
21.9,23.2,25.2,26.6,27.7,29.8,30.9,31.1,31.5,35.2,36.3,36.8,38.5,38.841.0,
41.7,42.7,51.6,51.9,54.7,55.7,73.1(C3),170.5(CH3C＝O)；174.5(C7),175.5(24 C＝
O).HRMS calcd for C27H43NO5(M+Na)+,484.3039；found,484.3036。
[0615] 甲基3α-乙酰氧基-13-氮杂-12-氧代-C-同-5β-胆烷(1-8-4)。Rf＝0.16(hexane/EtOAc,1:1).1H NMR(400 MHz,CDCl3)6.00(br.s.,1H,NH),4.79-4.72(m,H-3 ax.),3.65(s,
CH3O),2.38-2.22(m,3H),1.98-1.14(m,29H,steroidal CH and CH2,CH3,CH3CO),1.03(d,J
＝6.4 Hz,CH3-21),0.86(s,CH3-18).13C NMR(1100 MHz,CDCl3)15.0,18.0,21.4,22.7,
25.9,26.6,26.8,26.83,27.0,29.8,30.3,30.9,32.1,34.8,35.1,35.7,37.0,37.0,40.0,
41.4,51.6,56.5,58.6,58.6,60.7,74.0(C-3),170.7(AcO),174.2(C-12),176.6(C-24)
.HRMS calcd for C27H43NO5(M+Na)+,484.3039；found,484.3031.
[0616] 甲基3α，7α-di乙酰氧基-13-氮杂-12-氧代-C-同-5β-胆烷(1-7-8)。Rf＝0.14(hexane/EtOAc,1:1).1H NMR(400 MHz,CDCl3)6.00(br.s.,1H,NH),4.89(br.d,J＝2.8 Hz,
H-7)4.60-4.53(m,1H,H-3 ax.),3.65(s,CH3O),2.45-2.19(m,4H),2.05-1.10(m,36H,
steroidal CH and CH2,CH3,2 Ac),0.87(d,J＝6.4 Hz,CH3-21),0.83(s,CH3-18).13C NMR
(100 MHz,CDCl3)14.6,18.0,21.4,21.6,22.3,25.8,26.3,26.8,29.8,30.3,30.6,30.9,
31.1,32.9,34.8,35.3,35.6,35.8,36.2,40.4,41.9,51.7,53.1,56.7,60.2,71.9(C-3),
73.8(C-7),170.2(AcO),170.2(AcO),170.7(AcO),174.1(C-12),176.2(C-24).HRMS calcd 
for C29H45NO7(M+Na)+,542.3094；found,542.3099。
[0617] 3α-羟基-8-氮杂-7-氧代-B-同-5β-胆烷二十酸(化合物89)。产率79.5；Rf＝0.45(dichloromethane/MeOH,10:1).Mp.285-286 ℃ 1H NMR(400MHz,MeOH-d4)3.61-3.58(m,H-3 ax.),3.44(dd,J＝10.0 and 10.4 Hz,H-8 ax),3.10(br.d,J＝14.0 Hz,H-6),2.36-
2.17(m,2H),2.03-1.18(m,21H,steroidal CHand CH2),1.10(s,CH3-19),0.97(d,J＝6.4 
Hz,CH3-21),0.73(s,CH3-18).13C NMR(100MHz,MeOH-d4)36.4(C-1),28.6(C-2),71.6(C-
3),36.3(C-4),41.5(C-5),31.9(C-6),178.0(C-7),53.4(C-8),39.9(C-9),37.4(C-10),
23.5(C-11),39.6(C-12),42.8(C-13),55.0(C-14),25.9(C-15),28.6(C-16),56.9(C-17),
11.8(C-18),25.9(C-19),37.44(C-20),18.7(C-21),30.9(C-22),28.6(C-23),178.7(C-
24).HRMS calcd for C24H39NO4(M–H)-1,404.2801；found,404.2805。
[0618] 3α-羟基-13-氮杂-12-氧代-C-同-5β-胆烷二十酸(化合物91)。产率70％。Rf＝0.42(dichloromethane/MeOH,10:1).Mp.154-156℃ 1H NMR(400MHz,MeOH-d4)3.59-3.50
(m,H-3ax.),2.56-2.24(m,4H),2.04--1.20(m,25H,steroidal CH and CH2,CH3-19),1.08
(d,J＝6.4Hz,CH3-21),0.91(s,CH3-18).13C NMR(100MHz,MeOH-d4)15.0,17.8,23.1,25.8,
26.8,27.7,27.9,31.4,31.6,36.1,36.4,36.7,36.9,37.4,39.1,41.2,42.9,56.8,59.6,
62.0,72.1(C-3),179.7(C-12and C-24).HRMS calcd for C24H39NO4(M–H)-1,404.2801；
found,404.2803。
[0619] 3α,7α-二羟基-13-氮杂-12-氧代-C-同-5β-胆烷二十酸(化合物93)。产率80％；Rf＝0.25(dichloromethane/MeOH,10:1).Mp.263-264℃ 1H NMR(400MHz,MeOH-d4)3.86(d,J＝2.8Hz,H-7)3.43-3.37(m,H-3ax.),2.56(t,J＝12.8Hz,H-11),2.39-1.28(m,25H,
13
steroidal CH and CH2,CH3-19),1.08(d,J＝6.4Hz,CH3-21),0.91(s,CH3-18). C NMR
(100MHz,MeOH-d4)14.7,17.8,22.6,26.7,27.2,31.5,31.8,33.3,35.9,36.1,36.7,37.3,
40.4,42.6,44.5,54.1,57.0,61.6(C-13),69.0(C-7),72.6(C-3),177.7(C-12and C-24)
.HRMS calcd for C24H39NO5(M+H)+-,422.2906；found,422.2902。
[0620] 合成化合物1-7-9
[0621] 在-20℃下，将2M的TMSCHN2溶液(溶剂：己烷(0.65毫升，1.31mmol))逐滴至搅拌中的1-7-1(211毫克，0.474mmol)溶液(含BF3·Et2O(250微升，1.98mmol)；溶剂：干燥CH2Cl2溶液(20毫升))。所述混合物于-15℃下搅拌3小时。将反应混合物倾注至冰水中，再以AcOEt萃取。利用卤水清洗萃取物，以Na2SO4干燥，再进行蒸发，得到浅黄色残留物。将残留物溶于Et2O(70毫升)，添加硅胶(1.2克)和2N HCl(0.3毫升)。将混合物于室温下搅拌3小时，再添加Na2SO4(500毫克)。以玻璃纤维膜过滤，再进行蒸发，将残留物溶于甲醇(10毫升)，以及于氮气充填和室温下，直接与对甲苯磺酰肼(71毫克，0.474mmol，1eq.)反应，并持续搅拌10小时。过滤混合物，再以冷甲醇清洗固体。减压蒸发得到苯磺酰腙(tosylhydrazone)。于氩气环境下，将残留物溶于氯仿(15毫升)，并冷却至0℃。逐滴儿茶酚溶液(4.5毫升，1.0M，溶剂为THF，4.43mmol，10eq.)。于0℃下，将得到的混合物持续搅拌10小时。添加部分醋酸钠(1.2克，8.86mmol)。使混合物回温至室温(30分钟)，接着进行加热及回流8小时。冷却反应混合物至室温，再进行过滤。以二氯甲烷(10毫升)清洗固体，蒸发合并的过滤物，减压浓缩使其干燥。将残留物以硅胶管柱色谱分析纯化(以含5％乙酸乙酯的己烷洗提)得到化合物1-7-9(白色固体)(130毫克，33％，3步骤)。
[0622] 甲基3α-乙酰氧基-8-碳-B-同-5β-胆酸(1-7-9)。Rf＝0.52(hexane/EtOAc,10:1).1H NMR(400MHz,CDCl3):4.75-4.67(m,1H,H-3ax.),3.63(s,CH3O),2.37-2.15(m,2H),2.00
(s,3H,Ac),1.98-1.00(m,28H,steroidal CH and CH2),0.89(s,CH3-19),0.86(d,J＝
6.4Hz,CH3-21),0.62(s,CH3-18).13C NMR(100MHz,CDCl3,δ):11.8,18.3,21.3,21.5 23.6,
23.9,26.1,27.3,27.6,29.7,30.0,30.9,31.0,32.8,33.6,35.4,37.1,37.5,38.7,40.1,
42.3,43.1,45.9,51.4(CH3O),56.0,56.4,74.2(C3),170.6(Ac),174.7(24C＝O)。
[0623] 合成化合物94
[0624] 将化合物1-7-9(130毫克，0.29mmol)溶于乙醇(10毫升)中，以20％KOH(10毫升)回流6小时。冷却至室温，以6N HCl进行酸化，直至沈淀形成。以CH2Cl2(20毫升×3)萃取悬浮液。合并有机萃取物，真空干燥移除溶剂，以乙酸乙酯/己烷再结晶得到白色固体化合物94(80毫克，70％)。
[0625] 3α-羟基-8-碳-B-同-5β-胆烷二十酸(化合物94)。Rf＝0.62(hexane/EtOAc,1:2).Mp.204-206℃.1H NMR(400MHz,CDCl3):3.59-3.54(m,1H,H-3ax.),2.35-2.10(m,2H),
2.05-1.11(m,28H,steroidal CH and CH2),0.87(s,6H,CH3-19and CH3-21).13C NMR
(100MHz,CDCl3,δ):12.3,18.9,22.5,24.5,24.7,27.1,28.6,31.3,31.9,33.1,34.2,34.4,
37.0,38.5,38.56,39.0,39.7,41.5,43.4,44.4,47.6,57.6 57.7,72.4(C3),181.1(24C＝
O)。
[0626] 实施例2实施例1化合物的特性分析
[0627] 2.1化合物1-5可选择性抑制α2,3(N)-唾液酸转移酶ST3GALIII或α2,6(N)-唾液酸转移酶ST6GALI，但不会抑制2,3(O)-唾液酸转移酶ST3GALI。
[0628] 依据材料与方法所示的步骤测定本发明化合物对于唾液酸转移酶α2,3(N)-唾液酸转移酶ST3GALIII、α2,6(N)-唾液酸转移酶ST6GALI、2,3(O)-唾液酸转移酶ST3GALI活性的影响，结果示于表1。
[0629] 表1的数据证实，化合物1-5、6-10和11-15对于ST6GALI展现相对的抑制活性，其IC50值为3-7μM(表1)。类似的结果可见于化合物2aA–2eA，其亦为具有潜力的ST3GALIII抑制剂，IC50值为0.77-1.74μM。此外，依据实验结果意外的发现化合物1-5在浓度高达500μM下，任一化合物都不会抑制ST3GALI，在最高浓度1mM下，才对于ST3GALI产生适当的抑制活性。
化合物1-5对于ST3GALIII的抑制常数为ST3GALI的287至649倍(或575至1299倍)。三种LA系
列类似物(即，化合物1-5、6-10和11-15)对于ST6GALI的抑制能力为ST3GALI的2数量级
(orders of magnitude；即，102)。以上结果显示分别拥有EG或PEG链接单元的化合物1-5、
6-10和11-15可作为抑制剂且能够选择性的抑制ST3GALIII和ST6GALI，而不会抑制ST3GALI
修饰N连结(N-linked)聚糖上的α2,3-和α2,6-唾液酸蛋白。
[0630] 表1本发明酸转移酶抑制剂的抑制能力和专一性a于浓度500μM测定的抑制百分率
b于浓度1mM测定的抑制百分率
c未测定
d选择性比例的计算是在浓度500M下，ST抑制剂对于2,3-O-ST3GAL的影响
e选择性比例的计算是在浓度1mM下，ST抑制剂对于2,3-O-ST3GAL的影响
[0631] 2.2 FCW34和FCW66可抑制乳癌细胞迁徙
[0632] 在此实施例中，利用转移盘分析测定本化合物FCW34和FCW66对于癌症细胞行动力的影响。
[0633] 简而言之，以2-30μM FCW34或FCW66处理乳癌细胞，再进行转移盘迁徙分析，接着，让细胞侵袭至腔室的底层，实验进行16小时。化合物3(FCW34)和4(FCW66)对于细胞迁徙的IC50值分别为10.64+0.09μM和12.01±0.13μM(数据未显示)。
[0634] 为了寻找化合物3或化合物4对于乳癌细胞迁徙抑制效果的媒介，本实验例依据材料与方法所述的步骤剔除MDA-MD-231细胞的ST3GAL(III)基因进行试验。定量的结果示于
图1。
[0635] 如图1所示，ST3GAL(III)的表现量降低能显著抑制MDA-MD-231细胞的迁徙活性，相同的结果发生在利用FCW34或FCW66(20μM)处理的MDA-MD-231细胞。综合以上结果，可以得知FCW34或FCW66是借由抑制唾液酸转移酶(即，ST3GAL(III))，达到抑制MDA-MD-231细胞迁徙的效果。
[0636] 2.3 FCW34抑制乳癌生成
[0637] 依据材料与方法步骤所示的人类MDA-MB-231乳癌裸鼠模型，测定唾液酸转移酶抑制剂对于肿瘤生长和迁徙的效果。将MDA-MB-231/Luc细胞(5x 106细胞)原位注射至裸鼠乳
腺脂肪垫。接着，于第20天，分别施用FCW34和载体至裸鼠中，每三日以生物荧光及IVIS影像分析评估肿瘤体积。结果示于图2A和2B。
[0638] 如图2A的结果显示，在控制组小鼠或以载体处理的小鼠中，该多个小鼠于实验过程中生物荧光量持续上升，代表小鼠体内的肿瘤持续的生长；以FCW34(10毫克/公斤/小鼠/
3天)处理的小鼠，生物荧光量相对较低，由此可见该组小鼠的肿瘤生长受到抑制。于实验第
60天，牺牲实验动物分别摘取及测量各别肿瘤的重量，以证实前述的结果。图2B的结果可以证实施用FCW34的MDA-MB-231乳癌细胞小鼠，能够抑制癌症细胞的生长，再者，于生化试验、血液试验和体重测量的结果，可以得知FCW34对于小鼠不会产生毒性作用(数据未揭示于
此)。
[0639] 2.4 FCW34能抑制胰脏癌细胞的侵袭和/或迁徙
[0640] 在此实施例中，利用体外转移盘分析和活体胰脏癌细胞小鼠动物模型测定FCW34对于抑制胰脏癌细胞迁徙和/或侵袭的效果。
[0641] 将PANC-1细胞培养于含葡萄糖或果糖的培养基，并经/未经本发明化合物(即，FCW34或AL10，其可作为阳性控制组)处理，接着以SNA凝集素染色并借由FACS分析，测定2,
6-唾液酸化的量。实验结果发现，生长在含果糖培养基中的PANC-1细胞，高度表现2,6-唾液酸化，而施用化合物3或AL10的细胞其2,6-唾液酸化的程度显著降低。
[0642] 依据体外转移盘分析的结果显示，生长于含果糖培养基的PANC-1细胞具有较高的侵袭能力，而经FCW34处理的细胞，降低了由含葡萄糖培养基或含果糖培养基所诱导的侵袭能力(图4)。
[0643] 依据胰脏肿瘤小鼠模型的结果可以得知，注射培养于含果糖的PANC-1细胞的小鼠肿瘤的发展比注射培养于葡萄糖的PANC-1细胞的小鼠肿瘤生长快；再者，在注射经FCW34前处理的PANC-1细胞的小鼠中，其肿瘤停止生长，具有显著的抑制效果(图5)。此外，结果显示，在实验动物肝切片的组织分析中，生长于含果糖培养基的PANC-1细胞于小鼠肝脏中产
生转移的病灶，然而，以FCW34处理可以抑制转移发生(表2)。
[0644] 表2胰脏癌小鼠肝脏病灶
[0645] 2.5 FCW551对于PANC-1和LN细胞无显著细胞毒性
[0646] 依据材料与方法所示的MTT分析步骤测定FCW551对于PANC-1和LN细胞的细胞毒性。结果示于图6。
[0647] 由图6的结果证实，以不同剂量的FCW551(1、5、10、25和50μM)处理PANC-1和LN细胞24和48小时，不会产生细胞毒性。
[0648] 2.6 FCW551能抑制PANC-1和LN细胞侵袭和/或迁徙
[0649] 在此实施例中，测定FCW551对于抑制胰脏癌细胞迁徙和/或侵袭的能力。简而言之，分别以1和20μM FCW551处理PANC-1和LN细胞24和48小时后，再进行细胞迁徙和侵袭分析。结果示于图7。
[0650] 图7的结果证实，相较于PANC-1细胞，LN细胞有较高的迁徙和侵袭能力；且经FCW551处理能大幅度降低其迁徙和侵袭能力。
[0651] 实施例3 FCW393对于黑色素瘤的影响
[0652] 在此实施例中，测定FCW393(或化合物16)对于移植原发性黑色素瘤细胞动物的影响；分别测定动物的体重；肿瘤尺寸；淋巴结、胸线和脾脏的重量；以及分别测定动物肝脏、肾脏和血管系统的功能；以及测定发炎程度和/或压力指标。结果示于图8-15。
[0653] 3.1 FCW393对于原发性黑色素瘤小鼠的影响
[0654] 如图8A和8B的结果显示，相较于控制组动物，FCW393能够抑制肿瘤的生长，其中肿瘤体积减少约1/3(图8A)，同时对于实验动物的体重并无显著的影响(图8B)。同样地，FCW393对于实验动物的淋巴结、胸腺或脾脏的重量无显著影响(图9)。
[0655] 再者，经FCW393处理后，相较于控制组，白血球(WBC)计数的量上升2倍(图10，A)，对于其他红血球、血小板、血红素、血容比、平均血球容积(MCV)、平均血球素容积(MCH)和红血球血红素平均浓度(MCHC)计量没有影响(图10，B至H)。
[0656] FCW393对于发炎性指标(即，白蛋白)无影响(图11，C)，且对于血管系统和肾脏功能亦无影响(图11，D、E和F)。关于肝脏功能，FCW393对于丙胺酸转胺酶(ALT)不会有影响，但会降低天门冬胺酸转胺酶(AST)(图11，A和B)。此外，于FCW393处理后，压力标记(即，尿酸)会轻微的增加(图11，G)。
[0657] 3.2 FCW393对于黑色素瘤小鼠转移的影响
[0658] 在此实施例中，测定FCW393对于黑色素瘤小鼠的影响，结果示于图12至15。
[0659] 依据患有转移性黑色素瘤实验动物于实验第7天和第14天的生物荧光IVIS影像的定量结果，证实FCW393会抑制肿瘤生长(图12，A和B)。以荧光酶直接测量法确认上述观察的结果(图12，C)。
[0660] 相似的结果示于实施例3.1，FCW393对于实验动物的淋巴结、胸腺或脾脏重量没有影响(图13)；且对于WBC、RBC、血小板、HGB、HCT、MCV、MCH和MCHC亦无影响(图14)。
[0661] 再者，FCW393不会影响发炎指标或压力指标，亦不会影响肝脏、肾脏或血管系统的功能(图15)。
[0662] 综上所示，上述实施例的结果证实本发明的化合物为唾液酸转移酶(ST)抑制剂，且其中部分化合物能选择性的抑制2,3(N)-唾液酸转移酶ST3GALIII或α2,6(N)-唾液酸转
移酶ST6GALI，但不会抑制α2,3(O)-唾液酸转移酶ST3GALI。此外，上述的结果证实ST抑制剂有潜力能够发展成为抗癌药剂以治疗癌症，且特别是转移性癌症。
[0663] 虽然上文实施方式中揭示/公开了本发明的具体实施例，然其并非用以限定本发明，本发明所属技术领域中具有通常知识者，在不悖离本发明的原理与精神的情形下，当可对其进行各种更动与修饰，因此本发明的保护范围当以附随权利要求书所界定者为准。
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