选择性糖苷酶抑制剂及其用途
阅读：442发布：2020-08-03
专利汇可以提供选择性糖苷酶抑制剂及其用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了用于选择性抑制糖苷酶的具有提高的渗透性的化合物，该化合物的前药以及包含该化合物或该化合物的前药的药物组合物。本发明还提供了 治疗 与O-GlcNAcase不足或过表达、O-GlcNAc累积或不足有关的 疾病 和病症的方法。，下面是选择性糖苷酶抑制剂及其用途专利的具体信息内容。
1.通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
其中：
R1和R2为H，或者R1为H且R2为F，或者R1为F且R2为H，或者R1为OR3且R2为H；
每一R3独立地为H或C1-6酰基；
R4为H且R5为OR3，或者R4为OR3且R5为H；
R6为H、F或OR3；
每一R7独立地为H或F；
每一R8独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
两个所述R8基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
条件是当R6为OR3时，则每一R7为H；且
条件是R1或R6不为OR3。
2.如权利要求1所述的化合物，其中：
R1和R2为H，或者R1为H且R2为F，或者R1为F且R2为H，或者R1为OH且R2为H；
R4为H；
R5为OH；
R6为H或OH；并且
每一R8独立地选自：H、CH3、CH2CH3、(CH2)2CH3、CH2CH＝CH2和CH2C≡CH，或者NR82为吖丁啶-1-基，
条件是当R6为OH时，则每一R7为H；
条件是R1或R6不为OH。
3.如权利要求1所述的化合物，其中R1、R2、R6和R7中的至少一个为F。
4.通式(Ia)的化合物或其药物可接受的盐：
其中：
R1和R2为H，且R6为F；或者R1为H且R2为F，且R6为H、F或OR3；或者R1为F且R2为
6 3 1 3 2 6
H，且R 为H、F或OR ；或者R 为OR 且R 为H，且R 为F；
3
每一R 独立地为H或C1-6酰基；
7
每一R 独立地为H或F；
8
每一R 独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中所述C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
8
两个所述R 基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H。
5.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物为表1所述的化合物。
6.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自：
(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5R，6S，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6S，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6S，7aR)-2-氨基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(丙基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7R，7aR)-2-(乙胺基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(丙基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7S，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-比喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(氟甲基)-2-(丙基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(丙-2-炔-1-基氨 基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(丙基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5S，6S，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5S，6S，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5S，6R，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇；
(3aR，5R，6S，7R，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5S，6R，7R，7aR)-7-氟-5-(氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5S，6R，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-7-氟-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5S，6R，7S，7aR)-5-(二氟甲基)-7-氟-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7S，7aR)-2-(乙胺基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7S，7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
(3aR，5R，6R，7S，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(丙基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇；
或任一前述化合物的药物可接受的盐。
7.如权利要求1所述化合物，其中所述化合物为前药。
8.如权利要求1至7中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物选择性抑制O-糖蛋白2-乙酰胺基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)。
9.如权利要求1至8中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物选择性结合O-GlcNAcase。
10.如权利要求1至9中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物选择性抑制
2-乙酰胺基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(O-GlcNAc)的裂解。
11.如权利要求9所述的化合物，其中所述O-GlcNAcase为哺乳动物O-GlcNAcase。
12.如权利要求1至11中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物基本上不抑制哺乳动物β-氨基己糖苷酶。
13.药物组合物，其包含与药物可接受的载体组合的权利要求1至12中任一权利要求所述的化合物或其药物可接受的盐。
14.选择性抑制有需要的个体中的O-GlcNAcase的方法，所述方法包括向所述个体给予有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
其中：
1 2 1 2 1 2 1 3 2
R 和R 为H，或者R 为H且R 为F，或者R 为F且R 为H，或者R 为OR 且R 为H；
3
每一R 独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5
R 为H且R 为OR，或者R 为OR 且R 为H；
6 3
R 为H、F或OR ；
7
每一R 独立地为H或F；
8
每一R 独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中所述C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
8
两个所述R 基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；并且
1 6 3
条件是R 或R 不为OR。
15.提升有需要的个体中的O-GlcNAc水平的方法，所述方法包括向所述个体给予有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
其中：
1 2 1 2 1 2 1 3 2
R 和R 为H，或者R 为H且R 为F，或者R 为F且R 为H，或者R 为OR 且R 为H；
3
每一R 独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5
R 为H且R 为OR，或者R 为OR 且R 为H；
6 3
R 为H、F或OR ；
7
每一R 独立地为H或F；
8
每一R 独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中所述C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
8
两个所述R 基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；并且
1 6 3
条件是R 或R 不为OR。
16.治疗有需要的个体中由O-GlcNAcase调节的疾病状态的方法，所述方法包括向所述个体给予有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
其中：
R1和R2为H，或者R1为H且R2为F，或者R1为F且R2为H，或者R1为OR3且R2为H；
每一R3独立地为H或C1-6酰基；
R4为H且R5为OR3，或者R4为OR3且R5为H；
R6为H、F或OR3；
每一R7独立地为H或F；
每一R8独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
两个所述R8基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且
1 6 3
条件是R 或R 不为OR。
17.如权利要求16所述的方法，其中所述疾病状态选自下述的一种或多种：炎性疾病，过敏，哮喘，过敏性鼻炎，过敏性肺疾病，过敏性肺炎，嗜酸性肺炎，迟发型过敏，动脉粥样硬化，间质性肺疾病(ILD)，特发性肺纤维化，与类风湿性关节炎相关的ILD，全身性红斑狼疮，强直性脊柱炎，全身性硬化症，干燥综合征，多发性肌炎或皮肌炎，全身性过敏或过敏反应，药物过敏，昆虫叮咬过敏，自体免疫疾病，类风湿性关节炎，干癣性关节炎，多发性硬化症，格巴二氏综合征，全身性红斑狼疮，重症肌无力，肾小球肾炎，自体免疫性甲状腺炎，移植排斥，同种异体移植排斥，移植物抗宿主疾病，炎性肠病，克罗恩病，溃疡性结肠炎，脊椎关节病，硬皮病，银屑病，T-细胞介导的银屑病，炎性皮肤病，皮肤炎，湿疹，异位性皮肤炎，过敏性接触皮肤炎，荨麻疹，血管炎，坏死性、皮肤性和过敏性血管炎，嗜酸性肌炎，嗜酸性筋膜炎，实体器官移植排斥，心脏移植排斥，肺移植排斥，肝移植排斥，肾移植排斥，胰移植排斥，肾同种异体移植，肺同种异体移植，癫痫，疼痛，纤维肌痛，中风，神经保护作用。
18.治疗有需要的个体中选自神经变性疾病、tau蛋白病、癌症和应激的疾病状态的方法，所述方法包括向所述个体给予有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
其中：
1 2 1 2 1 2 1 3 2
R 和R 为H，或者R 为H且R 为F，或者R 为F且R 为H，或者R 为OR 且R 为H；
3
每一R 独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5
R 为H且R 为OR，或者R 为OR 且R 为H；
6 3
R 为H、F或OR ；
7
每一R 独立地为H或F；
8
每一R 独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
8
两个所述R 基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且
1 6 3
条件是R 或R 不为OR。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述疾病状态选自下述的一种或多种：阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、带有认知功能障碍的肌萎缩性侧索硬化症(ALSci)、嗜银颗粒性痴呆、布鲁伊特症、皮质基底节变性(CBD)、拳击员痴呆、伴随钙化的弥漫性神经元纤维缠结、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与染色体17有关的伴随帕金森症的额颞叶痴呆(FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克症、瓜德罗普帕金森症、哈勒沃登-施帕茨症(伴随脑铁堆积1型的神经变性)、多系统萎缩、强直性肌营养不良、尼曼-皮克氏症(C型)、苍白球脑桥黑质变性、关岛复合型帕金森氏症-痴呆症、皮克氏症(PiD)、脑炎后帕金森症(PEP)、朊病毒病(包括库贾氏症(CJD)、变异性库贾氏症(vCJD)、致死性家族性失眠症和库鲁病)、进行性超皮质胶质细胞增生、进行性核上性麻痹(PSP)、理查德森氏综合征、亚急性硬化性全脑炎、唯神经缠结性痴呆症、亨廷顿氏症、帕金森氏症、精神分裂症、轻度认知障碍(MCI)、神经病变(包括周围神经病变、自主神经病变、神经炎和糖尿病性神经病变)或青光眼。
20.如权利要求18所述的方法，其中所述应激为心脏病症。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述心脏病症选自下述的一种或多种：缺血；出血；低血容积性休克；心肌梗塞；介入性心脏病学程序；心脏搭桥手术；纤维蛋白溶解疗法；
血管成形术；和支架置入。
22.如权利要求14至21中任一权利要求所述的方法，其中所述化合物选自表1所述化合物中的一种或多种。
23.如权利要求14至22中任一权利要求所述的方法，其中所述给予增加所述个体的O-GlcNAc水平。
24.如权利要求14至23中任一权利要求所述的方法，其中所述个体为人类。
25.有效量的通式(I)化合物或其药物可接受的盐的化合物在制备药物中的用途：
其中：
1 2 1 2 1 2 1 3 2
R 和R 为H，或者R 为H且R 为F，或者R 为F且R 为H，或者R 为OR 且R 为H；
3
每一R 独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5
R 为H且R 为OR，或者R 为OR 且R 为H；
6 3
R 为H、F或OR ；
7
每一R 独立地为H或F；
8
每一R 独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
8
两个所述R 基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且
1 6 3
条件是R 或R 不为OR。
26.如权利要求25所述的用途，其中所述药物用于选择性抑制O-GlcNAcase，用于增加O-GlcNAc的水平，用于治疗由O-GlcNAcase调节的疾病状态，或用于治疗神经变性疾病、tau蛋白病、癌症或应激。
27.用于筛选O-GlcNAcase的选择性抑制剂的方法，所述方法包括：
(a)将第一样品与受试化合物接触；
(b)将第二样品与通式(I)的化合物接触，
其中：
1 2 1 2 1 2 1 3 2
R 和R 为H，或者R 为H且R 为F，或者R 为F且R 为H，或者R 为OR 且R 为H；
3
每一R 独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5
R 为H且R 为OR，或者R 为OR 且R 为H；
6 3
R 为H、F或OR ；
7
每一R 独立地为H或F；
8
每一R 独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者
8
两个所述R 基团与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且
1 6 3
条件是R 或R 不为OR ；
(c)测定所述第一和第二样品中O-GlcNAcase的抑制水平，
其中如果所述受试化合物与所述通式(I)的化合物比较时表现出相同或更大的O-GlcNAcase抑制，则所述受试化合物为O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
选择性糖苷酶抑制剂及其用途
发明领域
[0001] 本申请涉及选择性抑制糖苷酶的化合物及其用途。
[0002] 发明背景
[0003] 许多不同的细胞蛋白(核和细胞质两者)是通过添加经由O-糖苷键连接的单糖1
2-乙酰胺基-2-脱氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷(β-N-乙酰葡糖胺)而转译后修饰 。此修饰通常被称为O-连接的N-乙酰葡糖胺或O-GlcNAc。负责使β-N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)转译后连接至许多核细胞质蛋白的特异性丝氨酸和苏氨酸残基的酶为O-GlcNAc转移酶
2-5 6，
(OGT) 。被称为糖蛋白2-乙酰胺基-2-脱氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)
7
的第二酶除去此转译后修饰以释出蛋白，使得O-GlcNAc-修饰在蛋白寿命期间发生多次动
8
态循环 。
2-乙酰胺基-2-脱氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷(β-N-乙酰葡糖胺)而转译后修饰 。此修饰通常被称为O-连接的N-乙酰葡糖胺或O-GlcNAc。负责使β-N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)转译后连接至许多核细胞质蛋白的特异性丝氨酸和苏氨酸残基的酶为O-GlcNAc转移酶
2-5 6，
(OGT) 。被称为糖蛋白2-乙酰胺基-2-脱氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)
7
的第二酶除去此转译后修饰以释出蛋白，使得O-GlcNAc-修饰在蛋白寿命期间发生多次动
8
态循环 。
[0004] O-GlcNAc-修饰的蛋白调节许多不同的重要细胞功能，包括例如转录9-12、蛋白酶13 14 15-17
体降解 和细胞信号转导 。在许多结构蛋白上也发现了O-GlcNAc 。例如，其已在许多
18，19 6，20
细胞骨架蛋白上被发现，包括神经丝蛋白 、突触蛋白 、突触蛋白-特异性网格蛋白装
7 14 21，22
配蛋白AP-3 和锚定蛋白G 。已在脑中发现丰富的O-GlcNAc修饰 。其还已经在明确涉及许多疾病病因学的蛋白上被发现，包括阿尔茨海默病(AD)和癌症。
体降解 和细胞信号转导 。在许多结构蛋白上也发现了O-GlcNAc 。例如，其已在许多
18，19 6，20
细胞骨架蛋白上被发现，包括神经丝蛋白 、突触蛋白 、突触蛋白-特异性网格蛋白装
7 14 21，22
配蛋白AP-3 和锚定蛋白G 。已在脑中发现丰富的O-GlcNAc修饰 。其还已经在明确涉及许多疾病病因学的蛋白上被发现，包括阿尔茨海默病(AD)和癌症。
[0005] 例如，完全确立的是，AD和许多相关tau蛋白病变，包括唐氏综合征、皮克氏症、尼曼-皮克氏C型症和肌萎缩性侧索硬化症(ALS)，部分地以神经原纤维缠结(NFT)的发展为特征。这些NFT为成对螺旋丝样结构(PHF)的聚集体且由异常形式的细胞骨架蛋白“tau”组成。tau通常稳定微管的重要细胞网络，其为神经元内分配蛋白和营养素所必需的。然而，在AD患者中，tau变得过度磷酸化，扰乱其正常功能，形成PHF且最终聚集形成NFT。在人脑中发现了tau的6种同种型。在AD患者中，tau的所有6种同种型皆在NFT中被发现23，24
且所有6种皆显著地过度磷酸化 。在健康的脑组织中的tau仅携带2或3个磷酸酯基
25，26
团，而在AD患者脑中发现的tau平均携带8个磷酸酯基团 。在AD患者脑中的NFT水
27，28
平与痴呆症的严重性之间明确的相似性强力地支撑tau功能障碍在AD中的关键作用 。
tau的这种过度磷酸化的确切原因仍然难以捉摸。据此，相当大的努力曾致力于：a)阐明
29
tau过度磷酸化的分子生理基础 ；及b)确定能限制tau过度磷酸化的策略，希望这些策略
30-33
能停止或甚至逆转阿尔茨海默病的进展 。到目前为止，一些证据迹象表明许多激酶的上
21，34，35 21
调可能涉及tau的过度磷酸化 ，虽然最近已提出这种过度磷酸化的替代基础 。
且所有6种皆显著地过度磷酸化 。在健康的脑组织中的tau仅携带2或3个磷酸酯基
25，26
团，而在AD患者脑中发现的tau平均携带8个磷酸酯基团 。在AD患者脑中的NFT水
27，28
平与痴呆症的严重性之间明确的相似性强力地支撑tau功能障碍在AD中的关键作用 。
tau的这种过度磷酸化的确切原因仍然难以捉摸。据此，相当大的努力曾致力于：a)阐明
29
tau过度磷酸化的分子生理基础 ；及b)确定能限制tau过度磷酸化的策略，希望这些策略
30-33
能停止或甚至逆转阿尔茨海默病的进展 。到目前为止，一些证据迹象表明许多激酶的上
21，34，35 21
调可能涉及tau的过度磷酸化 ，虽然最近已提出这种过度磷酸化的替代基础 。
[0006] 具体地，已出现通过tau上的O-GlcNAc水平来调节tau的磷酸酯水平。在tau上存在的O-GlcNAc激励了使O-GlcNAc水平与tau磷酸化水平相关联的研究。在该领域的兴趣起源于以下的观察：已发现O-GlcNAc修饰出现在很多在胺基酸残基已知经历磷酸化36-38
的蛋白上 。与此观察一致的是，已发现增加磷酸化水平导致O-GlcNAc水平降低，而相
39
反地，O-GlcNAc水平增加与磷酸化水平降低相关联 。O-GlcNAc与磷酸化之间的这种互反
40 4
关系已被称为“阴-阳(Yin-Yang)假设”，且已通过酶OGT 与用于从蛋白除去磷酸酯基
41
团的磷酸酶形成功能性复合物的发现而得到强力的生化支持 。与磷酸化相同，O-GlcNAc为能够在蛋白寿命期间被除去和重建数次的动态修饰。建议地，已将编码O-GlcNAcase的
7，42
基因标定成与AD连接的染色体位点 。在人AD脑中的过度磷酸化tau具有明显比健康
21
人脑中所发现的更低的O-GlcNAc水平 。已表明来自患有AD的人脑的可溶性tau蛋白的
21
O-GlcNAc水平明显低于那些来自健康脑部的可溶性tau蛋白的O-GlcNAc水平 。还表明，
21
来自患病脑部的PHF完全毫无任何O-GlcNAc修饰 。tau的这种低糖化的分子基础是未知的，虽然其可能起源于增加的激酶活性和/或参与加工O-GlcNAc的酶之一的功能障碍。在小鼠的PC-12神经细胞和脑组织切片两者中支持该后一观点，使用了非选择性N-乙酰葡萄
21
糖胺酶抑制剂增加tau O-GlcNAc水平，此时观察到磷酸化水平降低 。这些集合结果的含意是通过维持AD患者中的健康O-GlcNAc水平(诸如通过抑制O-GlcNAcase的作用)，应该能阻断tau的过度磷酸化和tau过度磷酸化的所有相关影响，包括形成NFT和下游影响。
然而，因为β-氨基己糖苷酶的适当功能化至关重要，所以阻断O-GlcNAcase作用的用于AD治疗的任何潜在的治疗介入必须避免伴随的两种氨基己糖苷酶A和B的抑制作用。
的蛋白上 。与此观察一致的是，已发现增加磷酸化水平导致O-GlcNAc水平降低，而相
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反地，O-GlcNAc水平增加与磷酸化水平降低相关联 。O-GlcNAc与磷酸化之间的这种互反
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关系已被称为“阴-阳(Yin-Yang)假设”，且已通过酶OGT 与用于从蛋白除去磷酸酯基
41
团的磷酸酶形成功能性复合物的发现而得到强力的生化支持 。与磷酸化相同，O-GlcNAc为能够在蛋白寿命期间被除去和重建数次的动态修饰。建议地，已将编码O-GlcNAcase的
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基因标定成与AD连接的染色体位点 。在人AD脑中的过度磷酸化tau具有明显比健康
21
人脑中所发现的更低的O-GlcNAc水平 。已表明来自患有AD的人脑的可溶性tau蛋白的
21
O-GlcNAc水平明显低于那些来自健康脑部的可溶性tau蛋白的O-GlcNAc水平 。还表明，
21
来自患病脑部的PHF完全毫无任何O-GlcNAc修饰 。tau的这种低糖化的分子基础是未知的，虽然其可能起源于增加的激酶活性和/或参与加工O-GlcNAc的酶之一的功能障碍。在小鼠的PC-12神经细胞和脑组织切片两者中支持该后一观点，使用了非选择性N-乙酰葡萄
21
糖胺酶抑制剂增加tau O-GlcNAc水平，此时观察到磷酸化水平降低 。这些集合结果的含意是通过维持AD患者中的健康O-GlcNAc水平(诸如通过抑制O-GlcNAcase的作用)，应该能阻断tau的过度磷酸化和tau过度磷酸化的所有相关影响，包括形成NFT和下游影响。
然而，因为β-氨基己糖苷酶的适当功能化至关重要，所以阻断O-GlcNAcase作用的用于AD治疗的任何潜在的治疗介入必须避免伴随的两种氨基己糖苷酶A和B的抑制作用。
[0007] 神经元不储存葡萄糖，因此脑部依赖由血液供给的葡萄糖来维持其基本的代谢功43
能。尤其地，已表明脑内的葡萄糖摄取及代谢随着老化而降低 。在AD患者的脑内发生显
44
著降低的葡萄糖利用性且被认为是神经变性的潜在原因 。这种AD脑中的降低的葡萄糖
45-47 48，49 50，51
供给的基础 被认为起源于降低的葡萄糖输送 、受损的胰岛素信号转导 和降低的
52
血流量 之一。
能。尤其地，已表明脑内的葡萄糖摄取及代谢随着老化而降低 。在AD患者的脑内发生显
44
著降低的葡萄糖利用性且被认为是神经变性的潜在原因 。这种AD脑中的降低的葡萄糖
45-47 48，49 50，51
供给的基础 被认为起源于降低的葡萄糖输送 、受损的胰岛素信号转导 和降低的
52
血流量 之一。
[0008] 按照这种受损的葡萄糖代谢，值得注意的是进入细胞中的所有葡萄糖中2-5％被分流至己糖胺生物合成路径中，由此调节该路径的最终产物(尿苷二磷酸-N-乙酰葡萄糖53
胺(UDP-GlcNAc))的细胞浓度 。UDP-GlcNAc为核细胞质酶O-GlcNAc转移酶(OGT)的底
2-5
物 ，其用于转译后添加GlcNAc至许多核细胞质蛋白的特异性丝氨酸和苏氨酸残基中。
57，58 54，55 41，56
OGT通过其三十四肽重复(TPR)域 识别许多其底物 及结合伴侣 。如上所述，
6，7
O-GlcNAcase 除去这种转译后修饰，以释出蛋白，使得O-GlcNAc-修饰在蛋白寿命期间发
8 10，37，38，59
生多次动态循环 。已经在若干蛋白中已知的磷酸化位点上发现了O-GlcNAc ，包括
60
tau和神经丝 。另外，OGT表现出不寻常的动力学行为，使其对细胞内UDP-GlcNAc底物浓
41
度极其敏感，并因此对葡萄糖供给极其敏感 。
胺(UDP-GlcNAc))的细胞浓度 。UDP-GlcNAc为核细胞质酶O-GlcNAc转移酶(OGT)的底
2-5
物 ，其用于转译后添加GlcNAc至许多核细胞质蛋白的特异性丝氨酸和苏氨酸残基中。
57，58 54，55 41，56
OGT通过其三十四肽重复(TPR)域 识别许多其底物 及结合伴侣 。如上所述，
6，7
O-GlcNAcase 除去这种转译后修饰，以释出蛋白，使得O-GlcNAc-修饰在蛋白寿命期间发
8 10，37，38，59
生多次动态循环 。已经在若干蛋白中已知的磷酸化位点上发现了O-GlcNAc ，包括
60
tau和神经丝 。另外，OGT表现出不寻常的动力学行为，使其对细胞内UDP-GlcNAc底物浓
41
度极其敏感，并因此对葡萄糖供给极其敏感 。
[0009] 与己糖胺生物合成路径的已知性质、OGT的酶性质及O-GlcNAc与磷酸化之间的互44
反关系一致的是，已证明脑中降低的葡萄糖利用率造成tau过度磷酸化 。因此，逐渐受损的葡萄糖输送和代谢(无论其原因如何)造成O-GlcNAc降低和tau(及其他蛋白)的过度磷酸化。据此，抑制O-GlcNAcase应补偿在健康个体以及患有AD或相关神经变性疾病的患者的脑内与年龄相关的葡萄糖代谢受损。
反关系一致的是，已证明脑中降低的葡萄糖利用率造成tau过度磷酸化 。因此，逐渐受损的葡萄糖输送和代谢(无论其原因如何)造成O-GlcNAc降低和tau(及其他蛋白)的过度磷酸化。据此，抑制O-GlcNAcase应补偿在健康个体以及患有AD或相关神经变性疾病的患者的脑内与年龄相关的葡萄糖代谢受损。
[0010] 这些结果暗示调节tau O-GlcNAc水平的机制功能不全在形成NFT和相关神经变61
性中可能非常重要。阻断tau过度磷酸化作为治疗上有用的介入的良好支持 来自最近的研究，其表明当藏匿人类tau的转基因小鼠被激酶抑制剂处理时，其未发展出典型的运动
33 32
缺陷 ，而在另一实例中 ，表明不可溶性tau的降低的水平。这些研究提供了在这种疾病的小鼠模型中降低tau磷酸化水平与减轻AD样行为症状之间清晰的关联。事实上，tau过
62
度磷酸化的药理调节被广泛认定为治疗AD和其他神经变性病症的有效治疗策略 。
性中可能非常重要。阻断tau过度磷酸化作为治疗上有用的介入的良好支持 来自最近的研究，其表明当藏匿人类tau的转基因小鼠被激酶抑制剂处理时，其未发展出典型的运动
33 32
缺陷 ，而在另一实例中 ，表明不可溶性tau的降低的水平。这些研究提供了在这种疾病的小鼠模型中降低tau磷酸化水平与减轻AD样行为症状之间清晰的关联。事实上，tau过
62
度磷酸化的药理调节被广泛认定为治疗AD和其他神经变性病症的有效治疗策略 。
[0011] 限制tau过度磷酸化的小分子O-GlcNAcase抑制剂已被考虑用于治疗AD和有关63
tau蛋白病 。具体地，O-GlcNAcase抑制剂thiamet-G已涉及在培养的PC-12细胞中病理
63
相关位点上的tau磷酸化的降低 。此外，向健康Sprague-Dawley大鼠口服给予thiamet-G
63
已涉及在大鼠皮质和海马体两者中Thr231、Ser396和Ser422上降低的tau磷酸化 。
tau蛋白病 。具体地，O-GlcNAcase抑制剂thiamet-G已涉及在培养的PC-12细胞中病理
63
相关位点上的tau磷酸化的降低 。此外，向健康Sprague-Dawley大鼠口服给予thiamet-G
63
已涉及在大鼠皮质和海马体两者中Thr231、Ser396和Ser422上降低的tau磷酸化 。
[0012] 还有大量的证据表明O-GlcNAc蛋白修饰的增加的水平提供对心脏组织中应激反应的病效应的保护，所述病原效应包括由局部缺血、出血、低血容量性休克和钙反常所引起的应激。例如，由给予葡糖胺而活化己糖胺生物合成路径(HBP)已证明在局部缺血/再灌64-70 71-73 74 64，74
注 、创伤性出血 、低血容量性休克 和钙反常 的动物模型中发挥保护效应。此
64，65，67，70，
外，强力的证据表明这些心脏保护效应通过提升的蛋白O-GlcNAc修饰水平而介导
72，75-78
。还存在的证据是O-GlcNAc修饰在包括帕金森氏症和亨廷顿氏症在内的各种神经变
79
性疾病中发挥作用 。
注 、创伤性出血 、低血容量性休克 和钙反常 的动物模型中发挥保护效应。此
64，65，67，70，
外，强力的证据表明这些心脏保护效应通过提升的蛋白O-GlcNAc修饰水平而介导
72，75-78
。还存在的证据是O-GlcNAc修饰在包括帕金森氏症和亨廷顿氏症在内的各种神经变
79
性疾病中发挥作用 。
[0013] 人类有三种编码裂解糖共轭物的末端β-N-乙酰葡糖胺残基的酶的基因。这些中的第一种编码O-GlcNAcase。O-GlcNAcase为糖苷水解酶的家族84中的一员，其包括来自如人的原核生物病原的各种有机体的酶(对于糖苷水解酶的家族分类，参见Coutinho，P.M.&Henrissat，B.(1999)Carbohydrate-Active Enzymes server在URL：http://afmb.27，28
cnrs-mrs.fr/CAZY/上 )。O-GlcNAcase用于水解除去转译后修饰的蛋白的丝氨酸
1，6，7，80，81
和苏氨酸残基的O-GlcNAc 。与O-GlcNAc存在于许多细胞内蛋白上一致的是，酶
14，82 16，21，83 22，84
O-GlcNAcase在数种疾病的病因学中发挥作用，包括II型糖尿病 、AD 和癌症 。
18，19
虽然有可能在较早前分离了O-GlcNAcase ，但是在约20年后才理解其用于从蛋白的丝
6 7
氨酸和苏氨酸残基裂解O-GlcNAc的生化作用 。最近，已将O-GlcNAcase克隆 、部分表征
20 20
且提议具有作为组织蛋白乙酰转移酶的额外活性 。然而，对于这种酶的催化机制理解得很少。
cnrs-mrs.fr/CAZY/上 )。O-GlcNAcase用于水解除去转译后修饰的蛋白的丝氨酸
1，6，7，80，81
和苏氨酸残基的O-GlcNAc 。与O-GlcNAc存在于许多细胞内蛋白上一致的是，酶
14，82 16，21，83 22，84
O-GlcNAcase在数种疾病的病因学中发挥作用，包括II型糖尿病 、AD 和癌症 。
18，19
虽然有可能在较早前分离了O-GlcNAcase ，但是在约20年后才理解其用于从蛋白的丝
6 7
氨酸和苏氨酸残基裂解O-GlcNAc的生化作用 。最近，已将O-GlcNAcase克隆 、部分表征
20 20
且提议具有作为组织蛋白乙酰转移酶的额外活性 。然而，对于这种酶的催化机制理解得很少。
[0014] 其他两种基因(HEXA和HEXB)编码了催化糖共轭物的末端β-N-乙酰葡糖胺残基的水解裂解的酶。HEXA和HEXB的基因产物主要产生两种二聚物同功酶，分别为氨基己糖苷酶A和氨基己糖苷酶B。氨基己糖苷酶A(αβ)(杂二聚物同功酶)是由α-与β-亚单元组成的。氨基己糖苷酶B(ββ)(均二聚物同功酶)是由两个β亚单元所组成的。两种亚单元α-和β-亚单元携有高水平的排序一致性。将这两种酶分类成糖苷水解酶的家族20的成员且通常位于溶酶体内。这些溶酶体β-氨基己糖苷酶的适当功能化对人类发展至关重要，事实是由不幸的遗传病(戴萨克斯症(Tay-Sach’s)和山德霍夫氏病)强调，85
这两种病症分别起源于氨基己糖苷酶A和氨基己糖苷酶B的功能障碍 。这些酶不足引起糖脂质和糖共轭物累积在溶酶体中，导致神经受损和变形。有机体水平的神经节苷脂的累
86
积的有害影响仍未被揭露 。
这两种病症分别起源于氨基己糖苷酶A和氨基己糖苷酶B的功能障碍 。这些酶不足引起糖脂质和糖共轭物累积在溶酶体中，导致神经受损和变形。有机体水平的神经节苷脂的累
86
积的有害影响仍未被揭露 。
[0015] 由于这些β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的生物学重要性，所以糖苷酶的小分子抑制剂87-90 91
已经受到极大的关注 ，同时作为用于阐明这些酶在生物学方法中及开发潜在的治疗应用中的作用的工具。使用小分子控制糖苷酶功能提供若干与基因敲除研究相比的优点，包括快速改变剂量或完全撤销治疗的能力。
已经受到极大的关注 ，同时作为用于阐明这些酶在生物学方法中及开发潜在的治疗应用中的作用的工具。使用小分子控制糖苷酶功能提供若干与基因敲除研究相比的优点，包括快速改变剂量或完全撤销治疗的能力。
[0016] 然而，开发阻断哺乳动物糖苷酶(包括O-GlcNAcase)功能的抑制剂的主要挑战为大量的功能相关酶存在于较高等的真核细胞的组织中。因此，使用非选择性抑制剂研究一种特定酶的细胞和有机体生理作用是复杂的，因为复杂的表型源自这样的功能相关酶的伴随性抑制。对于β-N-乙酰氨基葡糖苷酶，用于阻断O-GlcNAcase功能的许多化合物是非特异性的且有效地用于抑制溶酶体β-氨基己糖苷酶。
[0017] 已用于细胞和组织两者内的O-GlcNAc转译后修饰研究的β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的一些更佳表征的抑制剂为链脲霉素(STZ)、2’-甲基-α-D-葡糖吡喃并[2，1-d]-Δ2’-噻唑啉(NAG-噻唑啉)和O-(2-乙酰胺基-2-脱氧基-D-葡萄亚吡喃糖
14，92-95
(glucopyranosylidene)氨基N-苯基氨基甲酸酯(PUGNAc) 。
14，92-95
(glucopyranosylidene)氨基N-苯基氨基甲酸酯(PUGNAc) 。
[0018] STZ被长期用作致糖尿病化合物，因为其对β-胰岛细胞具特别有害的影响96。96，97 98
STZ通过细胞DNA的烷基化作用 以及产生包括氧化氮的基团种类 两者而发挥其细
99
胞毒效应。所产生的DNA链断裂促进聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的活化作用 ，具有
100，101
耗损细胞NAD+水平并最终导致细胞死亡的净效应 。而其他研究者已经提出STZ毒
92，102
性为O-GlcNAcase的不可逆抑制的结果，其在β-胰岛细胞内高度表达 。然而，已由
103，104
两个独立研究小组提出此假设的问题 。因为在蛋白上的细胞O-GlcNAc水平是响应
105
许多形式的细胞应激反应而增加的 ，所以有可能STZ通过诱发细胞应激反应而非通过O-GlcNAcase上的任何特定且直接的作用而导致蛋白上O-GlcNAc-修饰水平增加。事实上，
106
Hanover和同事们已表明STZ是差且低选择性的O-GlcNAcase抑制剂 ，虽然已由其他人
107
提出STZ用于不可逆地抑制O-GlcNAcase ，但是没有该作用模式的明确论证。最近，已表
108
明STZ并非不可逆地抑制O-GlcNAcase 。
STZ通过细胞DNA的烷基化作用 以及产生包括氧化氮的基团种类 两者而发挥其细
99
胞毒效应。所产生的DNA链断裂促进聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的活化作用 ，具有
100，101
耗损细胞NAD+水平并最终导致细胞死亡的净效应 。而其他研究者已经提出STZ毒
92，102
性为O-GlcNAcase的不可逆抑制的结果，其在β-胰岛细胞内高度表达 。然而，已由
103，104
两个独立研究小组提出此假设的问题 。因为在蛋白上的细胞O-GlcNAc水平是响应
105
许多形式的细胞应激反应而增加的 ，所以有可能STZ通过诱发细胞应激反应而非通过O-GlcNAcase上的任何特定且直接的作用而导致蛋白上O-GlcNAc-修饰水平增加。事实上，
106
Hanover和同事们已表明STZ是差且低选择性的O-GlcNAcase抑制剂 ，虽然已由其他人
107
提出STZ用于不可逆地抑制O-GlcNAcase ，但是没有该作用模式的明确论证。最近，已表
108
明STZ并非不可逆地抑制O-GlcNAcase 。
[0019] 已发现NAG-噻唑啉为家族20氨基己糖苷酶的有效抑制剂90，109，并且最近发现为108
家族84 O-GlcNAcases的有效抑制剂 。虽然有效，但是在复杂的生物环境中使用NAG-噻唑啉的缺点在于其缺乏选择性且因此扰乱多种细胞过程。
家族84 O-GlcNAcases的有效抑制剂 。虽然有效，但是在复杂的生物环境中使用NAG-噻唑啉的缺点在于其缺乏选择性且因此扰乱多种细胞过程。
[0020] PUGNAc为遭遇缺乏选择性的相同问题的另一化合物，但仍享有作为人类6，110 111
O-GlcNAcase 和家族20人类β-氨基己糖苷酶 两者的抑制剂的用途。发现由Vasella和同事们开发的这种分子为来自白刀豆(Canavalia ensiformis)、鲁氏毛霉(Mucor rouxii)的β-N-乙酰氨基葡糖苷酶和来自牛肾的β-氨基己糖苷酶的有效竞争性抑制剂
88
。还已证明在创伤性出血的大鼠模型中给予PUGNAc降低了炎前细胞因子TNF-α和IL-6
112
的循环程度 。还已表明在淋巴细胞活化的基于细胞的模型中给予PUGNAc降低了细胞因
113
子IL-2的产生 。后续的研究已经表明可将PUGNAc用于动物模型中以减少在左冠状动脉
114
阻塞之后的心肌梗塞大小 。具特殊意义的事实是通过在创伤性出血的大鼠模型中给予
112，115
PUGNAc(O-GlcNAcase的抑制剂)而提升O-GlcNAc水平改善了心脏功能 。此外，与未治疗的细胞相比，通过在使用新生大鼠心室肌细胞的局部缺血/再灌注伤害的细胞模型中
116
用PUGNAc进行治疗而提升O-GlcNAc水平改善了细胞生存力且减少了坏死及凋亡 。
O-GlcNAcase 和家族20人类β-氨基己糖苷酶 两者的抑制剂的用途。发现由Vasella和同事们开发的这种分子为来自白刀豆(Canavalia ensiformis)、鲁氏毛霉(Mucor rouxii)的β-N-乙酰氨基葡糖苷酶和来自牛肾的β-氨基己糖苷酶的有效竞争性抑制剂
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。还已证明在创伤性出血的大鼠模型中给予PUGNAc降低了炎前细胞因子TNF-α和IL-6
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的循环程度 。还已表明在淋巴细胞活化的基于细胞的模型中给予PUGNAc降低了细胞因
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子IL-2的产生 。后续的研究已经表明可将PUGNAc用于动物模型中以减少在左冠状动脉
114
阻塞之后的心肌梗塞大小 。具特殊意义的事实是通过在创伤性出血的大鼠模型中给予
112，115
PUGNAc(O-GlcNAcase的抑制剂)而提升O-GlcNAc水平改善了心脏功能 。此外，与未治疗的细胞相比，通过在使用新生大鼠心室肌细胞的局部缺血/再灌注伤害的细胞模型中
116
用PUGNAc进行治疗而提升O-GlcNAc水平改善了细胞生存力且减少了坏死及凋亡 。
[0021] 最近，已经提出选择性O-GlcNAcase抑制剂NButGT在局部缺血/再灌注和细胞应117
激(包括氧化应激)的基于细胞的模型中表现出保护活性 。该研究建议使用O-GlcNAcase抑制剂提升蛋白O-GlcNAc水平，由此预防心脏组织中应激的病原效应。
激(包括氧化应激)的基于细胞的模型中表现出保护活性 。该研究建议使用O-GlcNAcase抑制剂提升蛋白O-GlcNAc水平，由此预防心脏组织中应激的病原效应。
[0022] 在2006年9月8日以WO2006/092049公开的于2006年3月1日提交的国际专利申请PCT/CA2006/000300、在2008年3月6日以WO2008/025170公开的于2007年8月
31日提交的国际专利申请PCT/CA2007/001554、在2010年2月4日以WO2010/012106公开的于2009年7月31日提交的国际专利申请PCT/CA2009/001087、在2010年2月4日以WO2010/012107公开的于2009年7月31日提交的国际专利申请PCT/CA2009/001088及在
2010年4月8日以WO2010/037207公开的于2009年9月16日提交的国际专利申请PCT/
CA2009/001302描述了O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
31日提交的国际专利申请PCT/CA2007/001554、在2010年2月4日以WO2010/012106公开的于2009年7月31日提交的国际专利申请PCT/CA2009/001087、在2010年2月4日以WO2010/012107公开的于2009年7月31日提交的国际专利申请PCT/CA2009/001088及在
2010年4月8日以WO2010/037207公开的于2009年9月16日提交的国际专利申请PCT/
CA2009/001302描述了O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
[0023] 发明简述
[0024] 本发明部分提供了选择性抑制糖苷酶的化合物、该化合物的前药、该化合物和该前药的用途、包含该化合物或该化合物前药的药物组合物，以及治疗与O-GlcNAcase不足或过表达和/或O-GlcNAc累积或不足有关的疾病和病症的方法。
[0025] 在一方面中，本发明提供了通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
[0026]
[0027] 其中R1和R2可以为H，或者R1可以为H且R2可以为F，或者R1可以为F且R2可1 3 2 3 4
以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 6 3 7
且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可以独立
8
地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至
8
最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7 1 6 3
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。
以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 6 3 7
且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可以独立
8
地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至
8
最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7 1 6 3
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。
[0028] 在可选择的实施方案中，本发明提供了通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
[0029]
[0030] 其中R1和R2可以为H，且R6可以为H、F或OR3；或者R1可以为H且R2可以为F，且6 3 1 2 6 3 1
R 可以为H、F或OR ；或者R 可以为F且R 可以为H，且R 可以为H、F或OR ；或者R 可以
3 2 6 3 4
为OR 且R 可以为H，且R 可以为H或F；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 7 8
且R 可以为OR ；或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式
8
取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立
6 3
地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；条件是当R 为OR 时，
7
则每一R 为H。
R 可以为H、F或OR ；或者R 可以为F且R 可以为H，且R 可以为H、F或OR ；或者R 可以
3 2 6 3 4
为OR 且R 可以为H，且R 可以为H或F；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 7 8
且R 可以为OR ；或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式
8
取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立
6 3
地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；条件是当R 为OR 时，
7
则每一R 为H。
[0031] 在可选择的实施方案中，本发明提供了通式(Ia)的化合物或其药物可接受的盐：
[0032]
[0033] 其中R1和R2可以为H，且R6可以为F；或者R1可以为H且R2可以为F，且R6可以为H、F或OR3；或者R1可以为F且R2可以为H，且R6可以为H、F或OR3；或者R1可以为OR3且R2可以为H，且R6可以为F；每一R3可以独立地为H或C1-6酰基；每一R7可以独立地为H或F；每一R8可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R8基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；条件是当R6为OR3时，则各R7为H。
[0034] 在可选择的实施方案中，本发明提供了通式(Ib)的化合物或其药物可接受的盐：
[0035]1 2 6 3 1 3 2
[0036] 其中R 和R 可以为H，且R 可以为H或OR ；或者R 可以为OR 且R 可以为H，且6 3 8
R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被
8
一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代。
R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被
8
一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代。
[0037] 在可选择的实施方案中，本发明提供了通式(I)的化合物或其药物可接受的盐：
[0038]
[0039] 其中R1可以为H、F或OR3；R2可以为H或F；每一R3可以独立地为H或C1-6酰基；R4可以为H；R5可以为OR3；R6可以为H、F或OR3；每一R7可以独立地为H或F；每一R8可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R8基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地
1 3
被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；条件是当R 为OR 时，则
2 6 3 7 1 6 3 1
R 为H；且条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR ；且条件是R 或
2
R 不为F。
1 3
被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；条件是当R 为OR 时，则
2 6 3 7 1 6 3 1
R 为H；且条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR ；且条件是R 或
2
R 不为F。
[0040] 在可选择的实施方案中，化合物可以为前药；化合物可以选择性抑制O-糖蛋白2-乙酰胺基-2-脱氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)；化合物可以选择性结合O-GlcNAcase(例如哺乳动物O-GlcNAcase)；化合物可以选择性抑制2-乙酰胺基-2-脱氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷(O-GIcNAc)的裂解；化合物可以基本上不抑制哺乳动物β-氨基己糖苷酶。
[0041] 在可选择的实施方案中，通式(Ia)或通式(Ib)的化合物可以具有提高的渗透性。
[0042] 在其他方面中，本发明提供了药物组合物，其包括与药物可接受的载体组合的本发明的化合物。
[0043] 在其他方面中，本发明提供了通过向个体给予有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐而选择性抑制O-GlcNAcase，或抑制有需要的个体的O-GlcNAcase，或增加O-GlcNAc水平，或治疗有需要的个体的神经变性疾病、tau蛋白病、癌症或应激的方法：
[0044]
[0045] 其中R1和R2可以为H，或者R1可以为H且R2可以为F，或者R1可以为F且R21 3 2 3 4
可以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以
5 3 4 3 5 6 3 7
为H且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可
8
以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲
8
基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的
6 3 7 1 6 3
取代基形式取代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。疾病状态可以为阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、带有认知功能障碍的肌萎缩性侧索硬化症(ALSci)、嗜银颗粒性痴呆、布鲁伊特症(Bluit disease)、皮层基底节变性(CBD)、拳击员痴呆、伴随钙化的弥漫性神经元纤维缠结、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与染色体17有关的伴随帕金森症的额颞叶痴呆(FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克症(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、瓜德罗普(Guadeloupean)帕金森症、哈勒沃登-施帕茨症(Hallevorden-Spatz disease)(伴随脑铁堆积1型的神经变性)、多系统萎缩、强直性肌营养不良、尼曼-皮克氏症(C型)、苍白球脑桥黑质变性(Pallido-ponto-nigral degeneration)、关岛复合型帕金森氏症-痴呆症(Parkinsonism-dementia complex of Guam)、皮克氏症(PiD)、脑炎后帕金森症(PEP)、朊病毒病(包括库贾氏症(CJD)、变异性库贾氏症(vCJD)、致死性家族性失眠症和库鲁病(Kuru))、进行性超皮质胶质细胞增生(Progressive supercortical gliosis)、进行性核上性麻痹(PSP)、理查德森氏综合征(Richardson’s syndrome)、亚急性硬化性全脑炎、唯神经缠结性痴呆症(Tangle-only dementia)、亨廷顿氏症、帕金森氏症、精神分裂症、轻度认知障碍(MCI)、神经病变(包括周围神经病变、自主神经病变、神经炎和糖尿病性神经病变)或青光眼。应激可以为心脏病症，例如缺血；出血；低血容积性休克；心肌梗塞；介入性心脏病学程序；心脏搭桥手术；纤维蛋白溶解疗法；血管成形术；或支架置入。
可以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以
5 3 4 3 5 6 3 7
为H且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可
8
以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲
8
基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的
6 3 7 1 6 3
取代基形式取代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。疾病状态可以为阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、带有认知功能障碍的肌萎缩性侧索硬化症(ALSci)、嗜银颗粒性痴呆、布鲁伊特症(Bluit disease)、皮层基底节变性(CBD)、拳击员痴呆、伴随钙化的弥漫性神经元纤维缠结、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与染色体17有关的伴随帕金森症的额颞叶痴呆(FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克症(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、瓜德罗普(Guadeloupean)帕金森症、哈勒沃登-施帕茨症(Hallevorden-Spatz disease)(伴随脑铁堆积1型的神经变性)、多系统萎缩、强直性肌营养不良、尼曼-皮克氏症(C型)、苍白球脑桥黑质变性(Pallido-ponto-nigral degeneration)、关岛复合型帕金森氏症-痴呆症(Parkinsonism-dementia complex of Guam)、皮克氏症(PiD)、脑炎后帕金森症(PEP)、朊病毒病(包括库贾氏症(CJD)、变异性库贾氏症(vCJD)、致死性家族性失眠症和库鲁病(Kuru))、进行性超皮质胶质细胞增生(Progressive supercortical gliosis)、进行性核上性麻痹(PSP)、理查德森氏综合征(Richardson’s syndrome)、亚急性硬化性全脑炎、唯神经缠结性痴呆症(Tangle-only dementia)、亨廷顿氏症、帕金森氏症、精神分裂症、轻度认知障碍(MCI)、神经病变(包括周围神经病变、自主神经病变、神经炎和糖尿病性神经病变)或青光眼。应激可以为心脏病症，例如缺血；出血；低血容积性休克；心肌梗塞；介入性心脏病学程序；心脏搭桥手术；纤维蛋白溶解疗法；血管成形术；或支架置入。
[0046] 在其他方面中，本发明提供了通过向个体给予有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐而治疗有需要的个体的O-GlcNAcase介导的疾病状态的方法，该疾病状态不包括神经变性疾病、tau蛋白病、癌症或应激：
[0047]1 2 1 2 1 2
[0048] 其中R 和R 可以为H，或者R 可以为H且R 可以为F，或者R 可以为F且R 可1 3 2 3 4
以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 6 3 7
且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可以独立
8
地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个
8
至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取
6 3 7 1 6 3
代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。在某些实施方案中，疾病状态可以为炎性或过敏性疾病，例如哮喘，过敏性鼻炎，过敏性肺疾病，过敏性肺炎，嗜酸性肺炎，迟发型过敏，动脉粥样硬化，间质性肺疾病(ILD)(例如特发性肺纤维化，或与类风湿性关节炎相关的ILD，全身性红斑狼疮，强直性脊柱炎，全身性硬化症，干燥综合征(Sjogren’s syndrome)，多发性肌炎或皮肌炎)；全身性过敏或过敏反应，药物过敏，昆虫叮咬过敏；自体免疫疾病，例如类风湿性关节炎，干癣性关节炎，多发性硬化症，格巴二氏综合征，全身性红斑狼疮，重症肌无力，肾小球肾炎，自体免疫性甲状腺炎，移植排斥，包括同种异体移植排斥或移植物抗宿主疾病；炎性肠病，例如克罗恩病和溃疡性结肠炎；脊椎关节病；硬皮病；银屑病(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病如皮肤炎、湿疹、异位性皮肤炎、过敏性接触皮肤炎、荨麻疹；血管炎(例如坏死性、皮肤性和过敏性血管炎)；嗜酸性肌炎(eosinphilic myotis)和嗜酸性筋膜炎；移植排斥，特别但不限于实体器官移植，例如心脏、肺、肝、肾和胰移植(例如肾和肺同种异体移植)；癫痫；疼痛；纤维肌痛；中风，例如中风后的神经保护作用。
1 2 1 2 1
以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 6 3 7
且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可以独立
8
地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个
8
至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取
6 3 7 1 6 3
代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。在某些实施方案中，疾病状态可以为炎性或过敏性疾病，例如哮喘，过敏性鼻炎，过敏性肺疾病，过敏性肺炎，嗜酸性肺炎，迟发型过敏，动脉粥样硬化，间质性肺疾病(ILD)(例如特发性肺纤维化，或与类风湿性关节炎相关的ILD，全身性红斑狼疮，强直性脊柱炎，全身性硬化症，干燥综合征(Sjogren’s syndrome)，多发性肌炎或皮肌炎)；全身性过敏或过敏反应，药物过敏，昆虫叮咬过敏；自体免疫疾病，例如类风湿性关节炎，干癣性关节炎，多发性硬化症，格巴二氏综合征，全身性红斑狼疮，重症肌无力，肾小球肾炎，自体免疫性甲状腺炎，移植排斥，包括同种异体移植排斥或移植物抗宿主疾病；炎性肠病，例如克罗恩病和溃疡性结肠炎；脊椎关节病；硬皮病；银屑病(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病如皮肤炎、湿疹、异位性皮肤炎、过敏性接触皮肤炎、荨麻疹；血管炎(例如坏死性、皮肤性和过敏性血管炎)；嗜酸性肌炎(eosinphilic myotis)和嗜酸性筋膜炎；移植排斥，特别但不限于实体器官移植，例如心脏、肺、肝、肾和胰移植(例如肾和肺同种异体移植)；癫痫；疼痛；纤维肌痛；中风，例如中风后的神经保护作用。
1 2 1 2 1
[0049] 在可选择的实施方案中，R 和R 可以为H，或者R 可以为H且R 可以为F，或者R2 1 3 2 3
可以为F且R 可以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰
4 5 3 4 3 5 6 3
基；R 可以为H且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每
7 8
一R 可以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或
8
甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取
6 3 7 1 6 3
代基形式取代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。给药可以增加个体中的O-GlcNAc水平。该个体可以为人类。
可以为F且R 可以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰
4 5 3 4 3 5 6 3
基；R 可以为H且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每
7 8
一R 可以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或
8
甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取
6 3 7 1 6 3
代基形式取代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。给药可以增加个体中的O-GlcNAc水平。该个体可以为人类。
[0050] 在其他方面中，本发明提供了有效量的通式(I)的化合物或其药物可接受的盐在制备药物中的用途：
[0051]
[0052] 其中R1和R2可以为H，或者R1可以为H且R2可以为F，或者R1可以为F且R2可以为H，或者R1可以为OR3且R2可以为H；每一R3可以独立地为H或C1-6酰基；R4可以为H且R5可以为OR3，或者R4可以为OR3且R5可以为H；R6可以为H、F或OR3；每一R7可以独立地为H或F；每一R8可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R8基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；条件是当R6为OR3时，则每一R7为H；且条件是R1或R6不为OR3。药物可以用于选择性抑制O-GlcNAcase，用于增加O-GlcNAc水平，用于治疗由O-GlcNAcase调节的疾病状态，用于治疗神经变性疾病、tau蛋白病、癌症或应激。
[0053] 在其他方面中，本发明提供了用于筛选O-GlcNAcase的选择性抑制剂的方法，该方法通过(a)将第一样品与受试化合物接触；(b)将第二样品与通式(I)的化合物接触；
[0054]
[0055] 其中R1和R2可以为H，或者R1可以为H且R2可以为F，或者R1可以为F且R2可1 3 2 3 4
以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 6 3 7
且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可以独立
8
地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至
8
最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7 1 6 3
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR ；c)测定第一和第二样品中的O-GlcNAcase的抑制水平，其中若受试化合物与通式(I)的化合物比较时表现出相同或更大的O-GlcNAcase抑制，则该受试化合物为O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H
5 3 4 3 5 6 3 7
且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一R 可以独立
8
地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至
8
最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代；
6 3 7 1 6 3
条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR ；c)测定第一和第二样品中的O-GlcNAcase的抑制水平，其中若受试化合物与通式(I)的化合物比较时表现出相同或更大的O-GlcNAcase抑制，则该受试化合物为O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
[0056] 本发明的概述并不需要描述本发明的所有特征。
[0057] 详述
[0058] 本发明部分地提供了能够抑制O-糖蛋白2-乙酰胺基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)的新颖化合物。在某些实施方案中，O-GlcNAcase为哺乳动物O-GlcNAcase，例如大鼠、小鼠或人类O-GlcNAcase。
[0059] 在某些实施方案中，本发明的化合物中的一个或多个表现出提高的渗透性。渗透性可以使用各种标准实验技术评定，包括但不限于原位灌注、离体组织扩散、体外细胞单层(例如Caco-2细胞、MDCK细胞、LLC-PK1细胞)及人造细胞膜(例如PAMPA检定法)；用于测量有效渗透性(Peff)或表观渗透性(Papp)的合适方法综述在例如Volpe的The AAPS Journal，2010，12(4)，670-678中。在某些实施方案中，当在用于测定Peff或Papp的这些试验中的一种或多种中进行测试时，本发明的化合物中一个或多个表现出提高的渗透性。在某些实施方案中，表现出提高的渗透性的化合物表现出较大的口服吸收性。在某些实施方案中，表现出提高的渗透性的化合物在体内给予时表现出较高的脑部穿透性。在某些实施方案中，表现出提高的渗透性的化合物在体内给予时实现较高的脑部浓度。在某些实施方案中，表现出提高的渗透性的化合物在体内给予时表现出较高的脑部/血浆浓度比。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示所测量的Peff或Papp与例如在WO 2006/092049或WO2008/025170中所公开的适合的参考化合物相比，以10％至100％的任何值或以10％至
100％的任何整数值增加，例如10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或超过100％，或增加1倍、2倍或3倍或更多倍。适合的参考化合物可以为例如(3aR，5R，
6S，7R，7aR)-5-(羟甲基)-2-丙基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇，或(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇，或(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示在以下所述用于测定LLC-PK1细胞中的Papp的试验中可测量的Papp值(亦即大于0的值)。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示在以下所述用于测定在LLC-PK1细胞中的Papp的试验-6
中大于2×10 cm/s的Papp值。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示在以下所述用于测-6
定在LLC-PK1细胞中的Papp的试验中大于1×10 cm/s的Papp值。在可替换的实施方案中，-6
“提高的渗透性”表示在以下所述用于测定在LLC-PK1细胞中的Papp的试验中2×10 cm/s-6
至30×10 cm/s之间的Papp值。
100％的任何整数值增加，例如10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或超过100％，或增加1倍、2倍或3倍或更多倍。适合的参考化合物可以为例如(3aR，5R，
6S，7R，7aR)-5-(羟甲基)-2-丙基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇，或(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
2-d]噻唑-6，7-二醇，或(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示在以下所述用于测定LLC-PK1细胞中的Papp的试验中可测量的Papp值(亦即大于0的值)。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示在以下所述用于测定在LLC-PK1细胞中的Papp的试验-6
中大于2×10 cm/s的Papp值。在某些实施方案中，“提高的渗透性”表示在以下所述用于测-6
定在LLC-PK1细胞中的Papp的试验中大于1×10 cm/s的Papp值。在可替换的实施方案中，-6
“提高的渗透性”表示在以下所述用于测定在LLC-PK1细胞中的Papp的试验中2×10 cm/s-6
至30×10 cm/s之间的Papp值。
[0060] 在某些实施方案中，本发明的化合物在抑制O-GlcNAcase中表现出优异的选择性。在某些实施方案中，本发明的化合物中的一个或多个对O-GlcNAcase比β-氨基己糖苷酶更具选择性。在某些实施方案中，与哺乳动物β-氨基己糖苷酶相比，化合物中的一个或多个选择性抑制哺乳动物O-GlcNAcase的活性。在某些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂基本不抑制β-氨基己糖苷酶。在某些实施方案中，β-氨基己糖苷酶为哺乳动物β-氨基己糖苷酶，例如大鼠、小鼠或人类β-氨基己糖苷酶。“选择性”抑制O-GlcNAcase的化合物为抑制O-GlcNAcase的活性或生物功能，但基本不抑制β-氨基己糖苷酶的活性或生物功能的化合物。例如，在某些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂选择性抑制2-乙酰胺基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(O-GlcNAc)从多肽的裂解。在某些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂选择性结合O-GlcNAcase。在某些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂抑制tau蛋白的过度磷酸化和/或抑制NFT的形成。“抑制(inhibits)”、“抑制(inhibition)”或“抑制(inhibiting)”表示以10％至90％之间的任何值，或以30％至60％之间的任何整数值而降低，或降低超过100％，或降低1倍、2倍、5倍、10倍或更多倍。应理解的是，抑制不需要完全的抑制作用。在某些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂提升或提高O-GlcNAc水平，例如在细胞、组织或器官中(例如脑、肌肉或心(心脏)组织中)和动物中O-GlcNAc-修饰的多肽或蛋白水平。“提升”或“提高”表示以10％至90％之间的任何值，或以30％至60％之间的任何整数值增加，或增加超过100％，或增加1倍、2倍、5倍、10倍、15倍、25倍、50倍、100倍或更多倍。在某些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂表现出10至100000的范围内，或100至100000的范围内，或1000至100000的范围内，或至少10、20、50、100、200、500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、
5000、6000、7000、10,000、25,000、50,000、75,000或在上述范围内或约上述范围的任何值的如本文所述的选择性比。
5000、6000、7000、10,000、25,000、50,000、75,000或在上述范围内或约上述范围的任何值的如本文所述的选择性比。
[0061] 本发明化合物中的一个或多个具体地通过与O-GlcNAcase酶的交互作用而体内提升在O-GlcNAc-修饰的多肽或蛋白上的O-GlcNAc水平，并且有效地治疗需要或响应O-GlcNAcase活性抑制的疾病状态。
[0062] 在某些实施方案中，本发明化合物中的一个或多个可用作导致tau磷酸化和NFT形成的降低的作用剂。在某些实施方案中，化合物中的一个或多个因此可用于治疗阿尔茨海默病和相关tau蛋白病。在某些实施方案中，化合物中的一个或多个因此能够通过增加tau O-GlcNAc水平而降低tau磷酸化和减少NFT形成来治疗阿尔茨海默病和相关tau蛋白病。在某些实施方案中，化合物中的一个或多个产生O-GlcNAc-修饰的多肽或蛋白上的O-GlcNAc修饰水平增加，并因此可用于治疗响应这样的O-GlcNAc修饰增加的病症；这些病症包括但不限于神经变性、炎症、心血管和免疫调节疾病。在某些实施方案中，化合物还由于与抑制糖苷酶酶活性的能力有关的其他生物活性而为有用的。在可替换的实施方案中，本发明化合物中的一个或多个在研究O-GlcNAc在细胞和有机体水平下的生理作用方面是有价值的工具。
[0063] 在可替换的实施方案中，本发明提供了提高或提升动物个体(例如兽医或人类个体)中的蛋白O-GlcNAc修饰水平的方法。在可替换的实施方案中，本发明提供了选择性抑制动物个体(例如兽医或人类个体)中的O-GlcNAcase酶的方法。在可替换的实施方案中，本发明提供了在动物个体(例如兽医或人类个体)中抑制tau多肽磷酸化或抑制NFT形成的方法。
[0064] 在具体的实施方案中，本发明提供了由通式(I)概述的化合物及其盐、前药和对映异构体形式：
[0065]1 2 1 2 1
[0066] 如式(I)中所述：R 和R 可以为H，或者R 可以为H且R 可以为F，或者R 可以2 1 3 2 3
为F且R 可以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5 6 3
R 可以为H且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一
7 8
R 可以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲
8
基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代
6 3 7 1 6 3
基形式取代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。
1 9 9
为F且R 可以为H，或者R 可以为OR 且R 可以为H；每一R 可以独立地为H或C1-6酰基；
4 5 3 4 3 5 6 3
R 可以为H且R 可以为OR，或者R 可以为OR 且R 可以为H；R 可以为H、F或OR ；每一
7 8
R 可以独立地为H或F；每一R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或多个氟、OH或甲
8
基以一个至最大数量的取代基形式取代，或者两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代
6 3 7 1 6 3
基形式取代；条件是当R 为OR 时，则每一R 为H；且条件是R 或R 不为OR。
1 9 9
[0067] 在某些实施方案中，通式(I)所述的R 可以为H、F、OH或OC(O)R，其中R 可以为1
H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H、F或OH。
2
H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H、F或OH。
2
[0068] 在某些实施方案中，通式(I)所述的R 可以为H或F。3 9 9
[0069] 在某些实施方案中，通式(I)中所述的R 可以为H或C(O)R，其中R 可以为H、C1-63
烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H。
4 9 9
烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H。
4 9 9
[0070] 在某些实施方案中，通式(I)中所述的R 可以为H、OH或OC(O)R，其中R 可以为4
H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H或OH。
5 9 9
H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H或OH。
5 9 9
[0071] 在某些实施方案中，通式(I)所述的R 可以为H、OH或OC(O)R，其中R 可以为H、5
C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H或OH。
6 9 9
C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H或OH。
6 9 9
[0072] 在某些实施方案中，通式(I)中所述的R 可以为H、F、OH或OC(O)R，其中R 可以6
为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H、F或OH。
7
为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在某些实施方案中，R 可以为H、F或OH。
7
[0073] 在某些实施方案中，通式(I)所述的每一R 可以独立地为H或F。8
[0074] 在某些实施方案中，通式(I)所述的每一R 可以独立地为H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选地被一个或8
多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基被取代。在某些实施方案中，每一R 可以独立地为H、CH3、CH2CH3、(CH2)2CH3、CH2CH＝CH2或CH2C＝CH。
8
多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基被取代。在某些实施方案中，每一R 可以独立地为H、CH3、CH2CH3、(CH2)2CH3、CH2CH＝CH2或CH2C＝CH。
8
[0075] 在某些实施方案中，通式(I)所述的两个R 基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环，所述环任选独立地被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基被取代。8
[0076] 在某些实施方案中，通式(I)所述的NR2可以为任选取代的 其中X可以10 10 10 10 10
为CR 2、NR 、O、C＝O、O(C＝O)、(C＝O)O、NR (C＝O)或(C＝O)NR ；其中每一R 可
8
以独立地为H或C1-4烷基；并且n可以为0至3的整数。在某些实施方案中，NR2可以为任选取代的1-吖丙啶基、1-吖丁啶基、1-吡咯烷基、1-哌啶基、吗啉-4-基、1-哌嗪基、吖丁
8
啶-2-酮-1-基、吡咯烷-2-酮-1-基或哌啶-2-酮-1-基。在某些实施方案中，NR2可以为 或
为CR 2、NR 、O、C＝O、O(C＝O)、(C＝O)O、NR (C＝O)或(C＝O)NR ；其中每一R 可
8
以独立地为H或C1-4烷基；并且n可以为0至3的整数。在某些实施方案中，NR2可以为任选取代的1-吖丙啶基、1-吖丁啶基、1-吡咯烷基、1-哌啶基、吗啉-4-基、1-哌嗪基、吖丁
8
啶-2-酮-1-基、吡咯烷-2-酮-1-基或哌啶-2-酮-1-基。在某些实施方案中，NR2可以为 或
[0077] 在本发明的具体实施方案中，通式(I)的化合物包括表1所述的化合物。
[0078] 表1
[0079]
[0080]
[0081]
[0082]
[0083]
[0084] 如本领域技术人员所认识到的，上述通式(I)也可以另外如下所示：
[0085]
[0086] 如本文所用，单数形式“一(a)”、“一”和“该(the)”包括复数指示物，除非上下文另有明确规定。例如，“一个化合物”是指一个或多个这样的化合物，而“所述酶”包括特定的酶，以及本领域技术人员已知的其他家族成员和其同等物。
[0087] 在整个申请中，预期的是，术语“化合物”或“化合物类”是指本文所讨论的化合物且包括该化合物的前体和衍生物(包括被酰基保护的衍生物)以及该化合物、前体和衍生物的药物可接受的盐。本发明还包括该化合物的前药，包含该化合物和药物可接受的载体的药物组合物，以及包含该化合物的前药和药物可接受的载体的药物组合物。
[0088] 本发明化合物可以包含一个或多个不对称中心且因此出现外消旋体和外消旋混合物、单对映异构体、非对映异构混合物及单个的非对映异构体。额外的不对称中心可以取决于分子上的各种取代基的性质而存在。每个这样的不对称中心将独立地产生两种光学异构体，并且意欲使混合物中及以纯或部分纯的化合物存在的所有可能的光学异构体和非对映异构体都包括在本发明的范围内。在本说明书中所述而未指明特定立体化学性的化合物的任何化学式、结构或名称意在包括任何及所有存在的上述异构体及其任何比例的混合物。当指明立体化学性时，则本发明意在包括纯形式或作为与其他异构体任何比例的混合物的一部分的形式的特定异构体。
[0089] 某些基团可以被任选地取代，如本文所述。适合的取代基包括：H、烷基(C1-6)、烯基(C2-6)或炔基(C2-6)，每一个可以任选地含有一个或多个选自O、S、P、N、F、Cl、Br、I或B的杂原子，并且每一个可以进一步被取代，例如被＝O取代；或者酰基、烷基-、烯基-或炔基-的任选取代形式及其在烷基、烯基或炔基部分含有杂原子的形式。其他适合的取代基包括＝O、＝NR、卤素、CN、CF3、CHF2、NO2、OR、SR、NR2、N3、COOR和CONR2，其中R为H或烷基、环烷基、烯基或炔基。当被取代的原子为C时，则除了上述列举的取代基以外，取代基可以包括卤素、OOCR、NROCR，其中R为H或上述取代基。
[0090] 例如，在上述通式(I)中，每一C1-6酰基、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以独立任选地被一个或多个取代基形式取代。在某些实施方案中，通式(I)中的每一C1-6酰基、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以被一个或多个以下取代基形式取代：无9
机取代基；磷基；卤素；＝O；＝NR ；OR；任选地含有一个或多个P、N、O、S、N、F、Cl、Br、I或
9 9
B且任选地被卤素取代的C1-6烷基或C2-6烯基；CN；任选取代的羰基；NR2；C＝NR ；任选取
9
代的碳环状环或杂环状环，其中R 可以为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在可替换的实施方案中，每一C1-6酰基、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代。在可替换的实施方案中，在通式(I)中的任选取代的C1-6酰基、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以独立地包含一个或多个选自P、O、S、N、F、Cl、Br、I或B的杂原子。
机取代基；磷基；卤素；＝O；＝NR ；OR；任选地含有一个或多个P、N、O、S、N、F、Cl、Br、I或
9 9
B且任选地被卤素取代的C1-6烷基或C2-6烯基；CN；任选取代的羰基；NR2；C＝NR ；任选取
9
代的碳环状环或杂环状环，其中R 可以为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在可替换的实施方案中，每一C1-6酰基、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个或多个氟、OH或甲基以一个至最大数量的取代基形式取代。在可替换的实施方案中，在通式(I)中的任选取代的C1-6酰基、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以独立地包含一个或多个选自P、O、S、N、F、Cl、Br、I或B的杂原子。
[0091] “烷基”是指只由碳和氢原子组成的、不含不饱和且包含例如1个至10个碳原子(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子)并且通过单键与分子的其余部分连接的直链或支链烃链基团。除非在说明书中另有具体规定，则烷基可以任选地被一个或多个如本文所述的取代基取代。除非本文另有具体规定，应理解的是，取代可以发生在烷基的任何碳上。
[0092] “烯基”是指只由碳和氢原子所组成、含至少一个双键且包含例如2个至10个碳原子(例如2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子)并且通过单键或双键与分子的其余部分连接的直链或支链烃链基团。除非在说明书中另有具体规定，烯基可以任选地被一个或多个如本文所述的取代基取代。除非本文另有具体规定，应理解的是，取代可以发生在烯基的任何碳上。
[0093] “炔基”是指只由碳和氢原子所组成、含至少一个叁键且包含例如2个至10个碳原子的直链或支链烃链基团。除非在说明书中另有具体规定，炔基可以任选地被一个或多个如本文所述的取代基取代。
[0094] “芳基”是指苯基，包括6个碳原子的芳族环。除非本文另有具体规定，则术语“芳基”表示包括被一个或多个如本文所述的取代基任选取代的芳基。
[0095] “杂芳基”是指在环中含一个或多个杂原子(例如N、O、S)的单芳族环基团，包括例如5-6元，例如5元或6元。杂芳基的实例包括呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、1，2，3-噁二唑、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、1，3，4-噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、1，3，5-三嗪、咪唑。除非本文另有具体规定，则术语“杂芳基”表示包括被一个或多个如本文所述的取代基任选取代的杂芳基。
[0096] “酰基”是指式-C(O)Ra的基团，其中Ra为C1-10烷基或C3-15环烷基，如本文所述。烷基或环烷基可以如本文所述而任选取代。
[0097] “烷氧基”是指式-ORb的基因，其中Rb为C1-10烷基，如本文所述。烷基可以如本文所述而任选取代。
[0098] “环烷基”是指只由碳和氢原子组成、具有例如3个至15个碳原子以及为饱和且通过单键与分子的其余部分连接的稳定单价单环、双环或三环的烃基团。除非在本文另有具体规定，则术语“环烷基”意在包括如本文所述而任选取代的环烷基。
[0099] “卤素”是指溴、氯、氟、碘等。在某些实施方案中，适合的卤素包括氟或氯。
[0100] 在某些实施方案中，两个如通式(I)所述的R8基团可以与同它们所连接的氮原子连接在一起形成环。在这些实施方案中，“环”是指3至6元的可以为饱和或单不饱和的稳定含氮单环基团。在可替换的实施方案中，环可以包含C、H和N原子。在其他实施方案中，环可包含杂原子，例如O和S。在这些实施方案中的环的实例包括1-吖丙啶基、1-吖丁啶基、1-吡咯烷基、2，5-二氢-1H-吡咯-1-基、1-哌啶基、1，2，3，6-四氢吡啶-1-基、吗啉-4-基、硫代吗啉-4-基、1-哌嗪基、吖丁啶-2-酮-1-基、吡咯烷-2-酮-1-基、哌啶-2-酮-1-基、
1，2-氧氮杂环丁烷-2-基、异噁唑烷-2-基和1，2-噁嗪烷(oxazinan)-2-基。在这些实施方案中的环可以如本文所述而任选取代。
1，2-氧氮杂环丁烷-2-基、异噁唑烷-2-基和1，2-噁嗪烷(oxazinan)-2-基。在这些实施方案中的环可以如本文所述而任选取代。
[0101] “任选的”或“任选地”表示随后描述的情况事件可能会或可能不会发生，并且该描述包括其中该事件或情况发生一或多次的实例以及其中不发生的实例。例如，“任选取代的烷基”表示烷基可以被取代或可以不被取代，并且该描述包括取代的烷基和不具有取代的烷基两者，并且该烷基可以被一次或多次取代。任选取代的烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基等，并包括环烷基如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等；任选取代的烯基的实例包括烯丙基、巴豆基、2-戊烯基、3-己烯基、2-环戊烯基、2-环己烯基、2-环戊烯基甲基、2-环己烯基甲基等。在某些实施方案中，任选取代的烷基和烯基包括C1-6烷基或烯基。
[0102] 治疗适应症
[0103] 本发明提供了治疗由O-GlcNAcase酶或由O-GlcNAc-修饰的蛋白水平直接或间接调节的疾病状态的方法，例如，通过O-GlcNAcase酶的抑制或通过O-GlcNAc-修饰的蛋白水平的提升而受益的疾病状态。这样的疾病状态包括但不限于青光眼、精神分裂症、tau蛋白病如阿尔茨海默病、神经变性疾病、心血管疾病、与炎症相关的疾病、与免疫抑制相关的疾病和癌症。本发明化合物中的一个或多个也可用于治疗与O-GlcNAcase不足或过表达或O-GlcNAc累积或耗损有关的疾病或病症，或响应糖苷酶抑制疗法的任何疾病或病症。这样的疾病和病症包括但不限于青光眼、精神分裂症、神经变性病症如阿尔茨海默病(AD)，或癌症。这样的疾病和病症还可以包括与酶OGT累积或不足有关的疾病或病症。还包括保护或治疗表达被O-GlcNAc残基修饰的蛋白的靶细胞的方法，所述修饰的失调导致疾病或病变。如本文所用，术语“治疗”包括治疗、预防以及改善。
[0104] 在可替换的实施方案中，本发明提供了提高或提升动物个体(例如兽医或人类个体)中的蛋白O-GlcNAc修饰水平的方法。这种O-GlcNAc水平的提升能够用于预防或治疗阿尔茨海默病；预防或治疗其他神经变性疾病(例如帕金森氏症、亨廷顿氏症)；提供神经保护效应；预防心脏组织损伤；以及治疗与炎症或免疫抑制相关的疾病。
[0105] 在可替换的实施方案中，本发明提供了选择性抑制动物个体(例如兽医或人类个体)中的O-GlcNAcase酶的方法。
[0106] 在可替换的实施方案中，本发明提供了抑制动物个体(例如兽医或人类个体)中的tau多肽磷酸化或抑制动物个体(例如兽医或人类个体)中的NFT形成的方法。因此，本发明化合物可用于研究和治疗AD及其他tau蛋白病。
[0107] 本发明方法通常是通过向有需要的个体给予本发明的化合物，或通过使细胞或样品与本发明的化合物(例如包含治疗有效量的通式(I)的化合物的药物组合物)接触而实现的。更具体地，它们可用于治疗其中涉及O-GlcNAc蛋白修饰的调节的病症，或任何本文所述的疾病状态。目标疾病状态包括阿尔茨海默病(AD)和相关神经变性tau蛋白病，其中微管相关蛋白tau的异常过度磷酸化涉及疾病发病机理。在某些实施方案中，化合物可以通过维持tau上的提升的O-GlcNAc水平而用于阻断tau的过度磷酸化，由此提供治疗益处。
[0108] 治疗与毒性tau物种累积相关的病理(例如阿尔茨海默病和其他tau蛋白病)的118-120
化合物的有效性可以通过测试化合物在疾病的确立细胞中 和/或转基因动物模型中
32，33
阻断毒性tau物种形成的能力来确认。
化合物的有效性可以通过测试化合物在疾病的确立细胞中 和/或转基因动物模型中
32，33
阻断毒性tau物种形成的能力来确认。
[0109] 可以用本发明化合物治疗的tau蛋白病包括：阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、带有认知功能障碍的肌萎缩性侧索硬化症(ALSci)、嗜银颗粒性痴呆、布鲁伊特症、皮层基底节变性(CBD)、拳击员痴呆、伴随钙化的弥漫性神经元纤维缠结、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与染色体17有关的伴随帕金森症的额颞叶痴呆(FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克症、瓜德罗普帕金森症、哈勒沃登-施帕茨症(伴随脑铁堆积1型的神经变性)、多系统萎缩、强直性肌营养不良、尼曼-皮克氏症(C型)、苍白球脑桥黑质变性、关岛复合型帕金森氏症-痴呆症、皮克氏症(PiD)、脑炎后帕金森症(PEP)、朊病毒病(包括库贾氏症(CJD)、变异性库贾氏症(vCJD)、致死性家族性失眠症和库鲁病(Kuru))、进行性超皮质胶质细胞增生、进行性核上性麻痹(PSP)、理查德森氏综合征、亚急性硬化性全脑炎、唯神经缠结性痴呆症和青光眼。
[0110] 本发明化合物中的一个或多个还可用于治疗与组织损伤或应激反应、刺激细胞或促进细胞分化相关的疾病状态。因此，在某些实施方案中，本发明化合物可用于在涉及心脏组织应激的各种疾病状态或医疗程序中提供治疗益处，所述疾病状态或医疗程序包括但不限于缺血；出血；低血容积性休克；心肌梗塞；介入性心脏病学程序；心脏搭桥手术；纤维蛋白溶解疗法；血管成形术；或支架置入。
[0111] 治疗与细胞应激(包括缺血，出血，低血容积性休克，心肌梗塞和其他心血管病105，116，117
症)相关的病理的化合物的有效性可以通过测试化合物在确立的细胞应激试验 中
70，114 72，112，115
预防细胞损伤以及在局部缺血-再灌注 和创伤性出血 的动物疾模型中预防组
织损伤并促进功能恢复的能力来确认。
症)相关的病理的化合物的有效性可以通过测试化合物在确立的细胞应激试验 中
70，114 72，112，115
预防细胞损伤以及在局部缺血-再灌注 和创伤性出血 的动物疾模型中预防组
织损伤并促进功能恢复的能力来确认。
[0112] 选择性抑制O-GlcNAcase活性的化合物可以用于治疗与炎症相关的疾病，其包括但不限于炎性或过敏性疾病，例如哮喘，过敏性鼻炎，过敏性肺疾病，过敏性肺炎，嗜酸性肺炎，迟发型过敏，动脉粥样硬化，间质性肺疾病(ILD)(例如特发性肺纤维化，或与类风湿性关节炎相关的ILD，全身性红斑狼疮，强直性脊柱炎，全身性硬化症，干燥综合征，多发性肌炎或皮肌炎)；全身性过敏或过敏反应，药物过敏，昆虫叮咬过敏；自体免疫疾病，例如类风湿性关节炎，干癣性关节炎，多发性硬化症，格巴二氏综合征，全身性红斑狼疮，重症肌无力，肾小球肾炎，自体免疫性甲状腺炎，移植排斥，包括同种异体移植排斥或移植物抗宿主疾病；炎性肠病，例如克罗恩病和溃疡性结肠炎；脊椎关节病；硬皮病；银屑病(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病如皮肤炎、湿疹、异位性皮肤炎、过敏性接触皮肤炎、荨麻疹；血管炎(例如坏死性、皮肤性和过敏性血管炎)；嗜酸性肌炎，嗜酸性筋膜炎；以及癌症。
[0113] 此外，影响蛋白O-GlcNAc修饰水平的化合物可用于治疗与：免疫抑制(例如在进行化学疗法、放射疗法的个体中)、提高创伤痊愈和烧伤治疗、自体免疫疾病的疗法或其他药物疗法(例如皮质类固醇疗法)、或治疗自体免疫疾病和接枝/移植排斥中使用的常规药物组合(其引起免疫抑制)；或由于受体功能先天不足或其他原因而导致的免疫抑制相关的疾病。
[0114] 本发明化合物中的一个或多个可用于治疗神经变性疾病，包括帕金森氏症和亨廷顿氏症。可以治疗的其他疾病状态为那些触发、影响或或以任何其他方式与O-GlcNAc转译后蛋白修饰水平相关的疾病状态。预期本发明化合物中的一个或多个可用于治疗这样的疾病状态并特别但不限于与蛋白上O-GlcNAc水平已确立关联的下述：移植排斥，特别为但不限于实体器官移植，例如心脏、肺、肝、肾和胰移植(例如肾和肺同种异体移植)；癌症，特别但不限于乳癌、肺癌、前列腺癌、胰脏癌、结肠癌、直肠癌、膀胱癌、肾癌、卵巢癌以及非霍奇金淋巴瘤和黑色素瘤；癫痫、疼痛、纤维肌痛或中风，例如用于中风后的神经保护作用。
[0115] 药物&兽医组合物、剂量和给药
[0116] 包含本发明化合物或根据本发明而使用的化合物的药物组合物涵括在本发明的范围内。在某些实施方案中，提供了包含有效量的通式(I)化合物的药物组合物。
[0117] 通式(I)的化合物及其药物可接受的盐、对映异构体、溶剂化物和衍生物是有用的，因为它们在动物(包括人类)中具有药物活性。在某些实施方案中，本发明的化合物中的一个或多个当向个体给予时在血浆中是稳定的。
[0118] 在某些实施方案中，可以提供与任何其他活性剂或药物组合物组合的本发明化合物或根据本发明而使用的化合物，其中这样的组合疗法可用于调节O-GlcNAcase活性，以治疗例如神经变性、炎症、心血管或免疫调节疾病，或本文所述的任何疾病状态。在某些实施方案中，可以提供与一种或多种可用于预防或治疗阿尔茨海默病的作用剂组合的本发明化合物或根据本发明而使用的化合物。这样的作用剂的实例包括但不限于：
[0119] ●乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)，如Aricept (多奈哌齐)、Exelon (卡巴拉汀)、Razadyne (Razadyne ER Reminyl Nivalin 加兰他敏)、Cognex (他克林)、Dimebon、石杉碱A、非色林(Phenserine)、Debio-9902 SR(ZT-1 SR)、扎那哌齐(TAK0147)、更斯的明、NP7557等；
[0120] ●NMDA受体拮抗剂，如Namenda (Axura Akatinol Ebixa 美金刚胺)、Dimebon、SGS-742、奈拉美生、Debio-9902 SR(ZT-1SR)等；
TM
TM
[0121] ●γ-分泌酶抑制剂和/或调节剂，如Flurizan (他氟比尔(Tarenflurbil)、MPC-7869、R-氟比洛芬)、LY450139、MK 0752、E2101、BMS-289948、BMS299897、BMS-433796、LY-411575、GSI-136等；
[0122] ●β-分泌酶抑制剂，如ATG-Z1、CTS-21166等；
[0123] ●α-分泌酶活化剂，如NGX267等；
[0124] ●淀粉样蛋白-β聚集和/或纤维化抑制剂，如AlzhemedTM(3APS、高牛磺酸(Tramiprosate)、3-胺 基-1-丙 烷 磺酸 )、AL-108、AL-208、AZD-103、PBT2、Cereact、ONO-2506PO、PPI-558等；
[0125] ●tau聚集抑制剂，如亚甲蓝等；
[0126] ●微管稳定剂，如AL-108、AL-208、紫杉醇等；
[0127] ●RAGE抑制剂，如TTP488等；
[0128] ●5-HT1a受体拮抗剂，如扎利罗登、来考佐坦等；
[0129] ●5-HT4受体拮抗剂，如PRX-03410等；
[0130] ●激酶抑制剂，如SRN-003-556、amfurindamide、LiCl、AZD1080、NP031112、SAR-502250等；
[0131] ●人源单克隆抗-Aβ抗体，如巴匹珠单抗(AAB-001)、LY2062430、RN1219、ACU-5A5等；
[0132] ●淀粉样蛋白疫苗，如AN-1792、ACC-001等；
[0133] ●神经保护剂，如施普善、AL-108、AL-208、石杉碱A等；
[0134] ●L-型钙通道拮抗剂，如MEM-1003等；
[0135] ●烟碱受体拮抗剂，如AZD3480、GTS-21等；
[0136] ●烟碱受体激动剂，如MEM 3454、奈非西坦等；
[0137] ●过氧化物酶体增殖剂-活化受体(PPAR)γ激动剂，如Avandia (罗格列酮)等；
[0138] ●磷酸二酯酶IV(PDE4)抑制剂，如MK-0952等；
[0139] ●激素替代疗法，如雌激素(普雷马林)等；
[0140] ●单胺氧化酶(MAO)抑制剂，如NS2330、雷沙吉兰(Azilect )、TVP1012等；
[0141] ●AMPA受体调节剂，如安帕来斯(CX 516)等；
[0142] ●神经生长因子或NGF增效剂，如CERE-110(AAV-NGF)、T-588、T817MA等；
[0143] ●预防由脑下垂体释放促黄体激素(LH)的作用剂，如亮丙瑞林(VP-4896)等；
[0144] ●GABA受体调节剂，如AC-3933、NGD 97-1、CP-457920等；
[0145] ●苯二氮受体反向激动剂，如SB-737552(8-8510)、AC-3933等；
[0146] ●去甲肾上腺素释放作用剂，如T-588、T-817MA等。
[0147] 应理解的是，本发明的化合物或根据本发明而使用的化合物与阿尔茨海默病作用剂的组合不限于本文所述的实例，但包括与可用于治疗阿尔茨海默病的任何作用剂的组合。本发明的化合物或根据本发明而使用的化合物与其他阿尔茨海默病作用剂的组合可以单独或联合给药。可以在给予其他作用剂之前、同时或之后给予一种作用剂。
[0148] 在可替换的实施方案中，可以“前药”或被保护的形式供给化合物，其在向个体给予之后释放化合物。例如，化合物可以携带保护基团，所述保护基团通过在体液中(例如在血液中)水解而分裂，因此释放活性化合物，或在体液中被氧化或还原，以释放化合物。因此，“前药”是指可以在生理条件下或通过溶剂分解而转化成本发明的生物活性化合物的化合物。因此，术语“前药”是指本发明化合物的药物可接受的代谢前体。当向有需要的个体给予时，前药可以是惰性的，但在体内转化成本发明的活性化合物。通常，前药通过例如在血液中水解在体内快速转化以得到本发明的母体化合物。前药化合物常在个体中提供溶解度、组织相容性或延释的优点。
[0149] 术语“前药”还意在包括任何共价结合的载体，其当向个体给予这样的前药时在体内释放本发明的活性化合物。本发明化合物的前药可以通过修饰存在于本发明化合物中的官能团而制备，所述修饰的方式为使得修饰以惯常操作或在体内裂解成本发明的母体化合物。前药包括其中羟基、氨基或巯基与任何基团结合的本发明化合物，当向哺乳动物个体给予本发明化合物的前药时，所述基团裂解而分别形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的实例包括但不限于在本发明化合物的一个或多个中的醇的乙酸盐、甲酸盐和苯甲酸盐衍生物，以及胺官能团的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物等。
[0150] 前药的讨论可见于“Smith and Williams’Introduction to the Principles of Drug Design(史密斯和威廉姆斯介绍药物设计原理)，”H.J.Smith，Wright，第二版，London(1988)；Bundgard，H.，Design of Prodrugs( 前 药 设 计 )(1985)，pp.7-9，21-24(Elsevier，Amsterdam)；The Practice of Medicinal Chemistry(药物化学实践)，Camille G.Wermuth等人，Ch 31，(Academic Press，1996)；ATextbook of Drug Design and Development(药物设计与开发教科书)，P.Krogsgaard-Larson和H.Bundgaard，eds.Ch 5，pgs 113 191(Harwood Academic Publishers，1991)；Higuchi，T.等人，“Pro-drugs as Novel Delivery Systems(作为新颖递送体系的前药)，”A.C.S.Symposium Series，Vol.14；或Bioreversible Carriers in Drug Design(药物设计中的生物可逆载体)，ed.Edward B.Roche，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987中，其均全部并入本文作为参考。
[0151] 本发明化合物中的一个或多个的适合的前药形式包括其中如通式(I)所述的一3
个或多个R 为(CO)R的实施方案，其中R为任选取代的烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基。在
3
这些情况中，酯基团可以在体内(例如体液中)水解，释放其中每一R 为H的活性化合物。
3
本发明的优选前药实施方案包括其中一个或多个R 为C(O)CH3的通式(I)的化合物。
个或多个R 为(CO)R的实施方案，其中R为任选取代的烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基。在
3
这些情况中，酯基团可以在体内(例如体液中)水解，释放其中每一R 为H的活性化合物。
3
本发明的优选前药实施方案包括其中一个或多个R 为C(O)CH3的通式(I)的化合物。
[0152] 本发明的化合物或根据本发明而使用的化合物能够在脂质体、佐剂或任何药物可接受的载体、稀释剂或赋形剂的存在下以适于向个体(例如哺乳动物，例如人类、牛、绵羊等)给药的形式单独提供或与其他化合物组合地提供。若需要，使用本发明化合物的治疗可以与更多常规且现有的用于本文所述治疗适应症的治疗组合。可以长期或间歇地提供本发明的化合物。“长期”给药是指以与短时间模式相反的连续模式给予化合物以将最初的治疗效果(活性)维持延长时段。“间歇”给药为不连续进行而不中断的，反而在本质上是循环的治疗。应当理解，如本文所用的术语“给药(administration)”、“可给药(administrable)”或“给药(administering)”表示向需要治疗的个体给予本发明的化合物。
[0153] “药物可接受的载体、稀释剂或赋形剂”包括但不限于已由例如美国食品和药物管理局或其他政府机构批准为可接受地用于人类或家畜的任何佐剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、调味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。
[0154] 可将本发明化合物以药物可接受的盐形式给药。在这样的情况中，本发明的药物组合物可以包含这样的化合物的盐，优选为本领域已知的生理上可接受的盐。在某些实施方案中，如本文所使用，术语“药物可接受的盐”表示包含以其盐形式使用的通式I化合物的活性成分，尤其是当与活性成分的游离形式或其他先前所公开的盐形式相比，所述盐形式赋予活性成分改进的药代动力学性质时。
[0155] “药物可接受的盐”包括酸和碱加成盐两者。“药物可接受的酸加成盐”是指那些保留游离碱的生物有效性和性质的盐，其不是生物学或在其他方面不希望的，并且由下述形成，无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，以及有机酸，例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
[0156] “药物可接受的碱加成盐”是指那些保留游离酸的生物有效性和性质的盐，其不是生物学或在其他方面不希望的。这些盐是由添加无机碱或有机碱至游离酸而制备。源自无机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。优选地，无机盐为铵盐、钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。源自有机碱的盐包括但不限于下述的盐：
伯胺、仲胺、叔胺、取代的胺(包括自然存在的取代的胺)、环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲胺基乙醇、2-二乙胺基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等。特别优选的有机碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。
伯胺、仲胺、叔胺、取代的胺(包括自然存在的取代的胺)、环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲胺基乙醇、2-二乙胺基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等。特别优选的有机碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。
[0157] 因此，术语“药物可接受的盐”包含所有可接受的盐，包括但不限于乙酸盐、乳糖酸盐、苯磺酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、苹果酸盐、碳酸氢盐、马来酸盐、硫酸氢盐、扁桃酸盐、酒石酸氢盐、甲磺酸盐、硼酸盐、甲基溴化物、溴化物、甲基亚硝酸盐、依地酸钙、甲基硫酸盐、樟脑磺酸盐、粘酸盐、碳酸盐、萘磺酸盐、氯化物、硝酸盐、克拉维酸盐、N-甲基葡糖胺、柠檬酸、铵盐、二盐酸盐、油酸盐、依地酸盐、草酸盐、乙二磺酸盐、双羟萘酸盐(双羟萘酸盐(embonate))、依托酸盐、棕榈酸盐、乙磺酸盐(esylate)、泛酸盐、富马酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、葡庚糖酸盐、多半乳糖醛酸盐、葡萄糖酸、水杨酸、谷氨酸盐(glutame)、硬脂酸盐、乙醇酰基阿散酸盐、硫酸盐、己基间苯二酚盐、次醋酸盐、醇胺(hydradamine)、琥珀酸盐、氢溴酸盐、鞣酸盐、盐酸盐、酒石酸盐、羟基萘甲酸盐、8-氯茶碱盐(teoclate)、碘化物、甲苯磺酸盐、异硫代硫酸盐(isothionate)、三乙碘化物、乳酸盐、panoate、戊酸盐等。
[0158] 本发明化合物的药物可接受的盐能够用作用于改进溶解度或水解特性的剂型，或用于缓释或前药制剂中。本发明化合物的药物可接受的盐也可包括那些由阳离子如钠、钾、铝、钙、锂、镁、锌以及由碱如氨、乙二胺、N-甲基谷氨酸、赖胺酸、精胺酸、鸟胺酸、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、二乙醇胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙胺、二乙胺、哌嗪、三(羟甲基)氨基甲烷和四甲基氢氧化铵形成的盐。
[0159] 药物制剂通常会包括一或多种制剂给药方式可接受的载体，所述给药方式为注射、吸入、局部给药、灌洗或适于所选治疗的其他方式。适合的载体为本领域已知的用于这样的给药方式的载体。
[0160] 适合的药物组合物可以以本领域已知的方法配制，并且其给药方式及剂量由熟练的从业者来决定。对于肠胃外给药，可以将化合物溶解在无菌水中或盐水中或用于给予非水溶性化合物的药物可接受的溶媒中，例如那些用于维生素K的溶媒。对于肠内给药，以片剂、胶囊或溶解于液体形式中给予化合物。片剂或胶囊可以为肠包衣的或在用于缓释的剂型中。许多适合的制剂是已知的，包括封装要释放的化合物的聚合物或蛋白微粒、软膏、凝胶、水凝胶或能够局部或区域地使用以给予化合物的溶液。可使用缓释贴片或植入物提供延长时段的释放。熟练的从业者已知的许多技术描述于Alfonso Gennaro的Remington：the Science & Practice of Pharmacy(雷明顿药物科学与实践)，第20版，Williams & Wilkins，(2000)中。用于胃肠外给药的制剂可以含有例如赋形剂、聚亚烷基二醇如聚乙二醇、植物来源的油或氢化萘。可以使用生物相容的、生物可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物控制化合物的释放。用于调节性化合物的其他潜在有用的肠胃外递送体系包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物颗粒、渗透泵、可植入输注体系和脂质体。用于吸入的制剂可以含有诸如乳糖的赋形剂，或可以为含有例如聚氧乙烯-9-月桂醚、甘胆酸盐和脱氧胆酸盐的水溶液，或可以为用于以滴鼻剂或凝胶形式给药的油溶液。
[0161] 本发明的化合物或药物组合物可以经口或非经口给药，例如肌肉内、腹膜内、静脉内、脑池内注射或输液、皮下注射、经皮或经黏膜途径。在某些实施方案中，本发明或用于本发明的化合物或药物组合物可以利用医疗装置或设备而给药，所述医疗装置或设备例如植入物、移植物、义肢、支架等。可以设计旨在含有且释放这样的化合物或组合物的植入物。实例可以为由适于使化合物在一段时间内释放的聚合物材料制成的植入物。可以单独或作为与药物可接受的载体的混合物而给予化合物，例如作为固体制剂如片剂、胶囊、颗粒剂、粉剂等；液体制剂如糖浆、注射液等；注射液、滴剂、栓剂、阴道栓。在某些实施方案中，本发明或用于本发明的化合物或药物组合物可以通过吸入喷雾、鼻、阴道、直肠、舌下或局部途径而给药，并且可单独或一起配制于含有适于各种给药途径的常规无毒性药物可接受的载体、佐剂和溶媒的合适的单位剂量制剂中。
[0162] 本发明化合物可用于治疗动物，包括小鼠、大鼠、马、牛、绵羊、狗、猫和猴子。然而，本发明化合物也能用于其他有机体，如鸟类物种(例如鸡)。本发明化合物中的一个或多个也可有效地用于人类。术语“个体”或在本文另外称为“患者”，其旨在述及已经成为治疗、观察或实验目标的动物，优选为哺乳动物，最优选为人类。然而，本发明的化合物、方法和药物组合物中的一个或多个可用于治疗动物。因此，如本文所用，“个体”可以为人类、非人类的灵长类动物、大鼠、小鼠、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫等。个体可能疑似患有需要调节O-GlcNAcase活性的疾病状态或处于患有该疾病状态的风险中。
[0163] 本发明的化合物的“有效量”包括治疗有效量或预防有效量。“治疗有效量”是指在剂量下和经必要的时段而有效达到所需治疗结果的量，所述治疗结果例如抑制O-GlcNAcase、提升O-GlcNAc水平、抑制tau磷酸化或本文所述的任何疾病状态。治疗有效量的化合物可以随着诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及化合物在个体中引发所需反应的能力的因素而改变。可以调整剂量方案以提供最优治疗反应。治疗有效量也为其中化合物的任何毒性或有害效应被治疗上有利的效应超过的量。“预防有效量”是指在剂量下和经必要的时段而有效达到所需预防结果的量，所述预防结果例如抑制O-GlcNAcase、提升O-GlcNAc水平、抑制tau磷酸化或本文所述的任何疾病状态。典型地，预防剂量在疾病的早期阶段之前或期间用于个体，使得预防有效量可以低于治疗有效量。化合物的治疗或预防有效量的适合范围可以为0.1nM至0.1M、0.1nM至0.05M、0.05nM至15μM或0.01nM至10μM的任何整数。
[0164] 在可替换的实施方案中，在其中需要调节O-GlcNAcase活性的疾病状态的治疗或预防中，适当的剂量水平通常为每天每公斤个体体重约0.01mg至500mg，并且能够以单剂量或多剂量给药。在某些实施方案中，剂量水平为每天约0.1mg/kg至约250mg/kg。应理解的是，任何具体患者的具体剂量水平和剂量频率可以改变且会取决于许多因素，包括所用的具体化合物的活性、化合物的代谢稳定性和作用长度、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药方式和时间、分泌速率、药物组合、具体疾病状态的严重性及患者接受的治疗。
[0165] 应注意的是，剂量值可随要缓解的疾病状态的严重性而改变。对于任何具体个体，具体剂量方案可根据个体需要及管理或监督给予组合物的人员的专业判断而随时间调整。本文所述的剂量范围仅为示例，并且不限制可由从业者所选择的剂量范围。在组合物中的活性化合物的量可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重的因素而改变。可调整剂量方案以提供最优的治疗反应。例如，可给予单一丸剂，可随时间分多次剂量给予，或可根据治疗情况的紧急状态将剂量按比例减少或增加。可有利地配制剂量单位形式的肠胃外组合物以便于给药和剂量均匀。通常，应在不引起大量毒性的情况下使用本发明化合物，并且如本文所述，化合物中的一个或多个表现出适于治疗用途的安全特性。能够使用标准技术测定本发明化合物的毒性，例如通过在细胞培养物或实验动物中测试并测定治疗指数，即，LD50(50％群体的致死剂量)与LD100(100％群体的致死剂量)之比。然而，在某些情况下，例如在严重的疾病状况中，可能需要给予大量过量的组合物。
[0166] 在通式(I)的化合物中，原子可表现为其天然同位素丰度，或原子中的一个或多个可以人为方式富集具有相同原子数但原子量或质量数与自然界中主要发现的原子量或质量数不同的特定同位素。本发明意在包括通式(I)化合物的所有适合的同位素变体。例1 2 3
如，氢(H)的不同的同位素形式包括氕(H)、氘(H)和氚(H)。氕为自然界中发现的主要的氢同位素。富集氘可提供某些治疗优势，例如增加体内半衰期或减少剂量要求，或可提供化合物以用作表征生物学样品的标准物。富集同位素的通式(I)化合物可以由本领域技术人员公知的常规技术或由与本文方案和实施例中所述的那些方法类似的方法，使用适当的富集同位素的试剂和/或中间体来制备，而没有过度实验。
如，氢(H)的不同的同位素形式包括氕(H)、氘(H)和氚(H)。氕为自然界中发现的主要的氢同位素。富集氘可提供某些治疗优势，例如增加体内半衰期或减少剂量要求，或可提供化合物以用作表征生物学样品的标准物。富集同位素的通式(I)化合物可以由本领域技术人员公知的常规技术或由与本文方案和实施例中所述的那些方法类似的方法，使用适当的富集同位素的试剂和/或中间体来制备，而没有过度实验。
[0167] 其他用途和试验
[0168] 通式(I)的化合物可用于调节糖苷酶酶、优选O-GlcNAcase酶活性的化合物的筛选试验。受试化合物抑制O-GlcNAc从模型底物的O-GlcNAcase-依赖性裂解的能力可使用如本文所述或本领域技术人员已知的任何试验而测量。例如，可使用本领域已知的荧光或基于UV的试验。“受试化合物”为任何自然存在或人为衍生的化学化合物。受试化合物可以包括但不限于肽、多肽、合成有机分子、自然存在的有机分子和核酸分子。受试化合物能够与已知化合物(例如通式(I)的化合物)“竞争”，例如通过干扰O-GlcNAc的O-GlcNAcase-依赖性裂解的抑制或通过干扰由通式(I)化合物诱导的任何生物反应。
[0169] 当与通式(I)化合物或其他参考化合物比较时，受试化合物通常能够表现出10％至200％或超过500％的任何调节值。例如，受试化合物可表现出至少10％至200％的任何正或负整数调节值，或至少30％至150％的任何正或负整数调节值，或至少60％至100％的任何正或负整数调节值，或超过100％的任何正或负整数调节值。为负调节剂的化合物通常相对于已知化合物会降低调节，而为正调节剂的化合物通常相对于已知化合物会增加调节。
[0170] 通常，受试化合物从天然产物或合成(或半合成)提取两者的大型库或本领域已知方法的化学库而确定。药物发现及开发领域的技术人员应理解，受试萃取物或化合物的确切来源对本发明方法并非至关重要。因此，实际上能够使用本文所述的示例性方法筛选任何数量的化学萃取物或化合物。这样的萃取物或化合物的实例包括但不限于基于植物-、真菌-、原核生物-或动物-的萃取物、发酵液和合成化合物，以及现有化合物的修饰物。许多方法也可导致随机或直接合成(例如半合成或全合成)任何数量的化学化合物，包括但不限于基于糖-、脂质-、肽-和核酸-的化合物。合成化合物库是商购的。或者，细菌、真菌、植物和动物萃取物形式的天然化合物库可自许多来源商购，包括Biotics(Sussex，UK)、Xenova(Slough，UK)、Harbor Branch Oceanographic Institute(Ft.Pierce，FL，USA)和PharmaMar，MA，USA。另外，若需要，天然或合成生产的库是根据本领域已知方法而生产的，例如通过标准萃取和分馏方法。此外，若需要，任何库或化合物可使用标准的化学、物理或生化方法容易地修饰。
[0171] 当发现粗萃取物调节O-GlcNAc的O-GlcNAcase-依赖性裂解的抑制或由通式(I)化合物所诱导的任何生物反应时，则有必要进一步分馏正引导萃取物以分离为所观察到的效果的原因的化学成分。因此，萃取、分馏和纯化方法的目标为仔细表征并确定在具有O-GlcNAcase-抑制活性的粗萃取物内的化学实体。本文所述用于检测化合物混合物的的活性的相同试验可用于纯化活性组分并测试其衍生物。这样的由不同成分形成的萃取物的分馏和纯化方法是本领域已知的。若需要，被证实为有用的治疗剂的化合物根据本领域已知的方法化学地修饰。确定为具有治疗、预防、诊断或其他价值的化合物随后可使用如本文所述的本领域已知的适合的动物模型进行分析。
[0172] 在某些实施方案中，化合物中的一个或多个可用于开发动物模型，以用于研究与O-GlcNAcase不足、O-GlcNAcase过表达、O-GlcNAc累积、O-GlcNAc耗损有关的疾病或病症，以及用于研究与O-GlcNAcase不足或过表达或O-GlcNAc累积或耗损有关的疾病或病症的治疗。这样的疾病和病症包括神经变性疾病，包括阿尔茨海默病和癌症。
[0173] 本文描述了本发明的各种可替代的实施方案和实施例。这些实施方案和实施例是示例性的，而不应解释为限制本发明的范围。实施例
[0174] 以下实施例旨在例示本发明的实施方案，而不旨在以限制方式进行解释。
[0175] 缩写
[0176] ABCN＝1，1’-偶氮双(环己烷-甲腈)
[0177] AcCl＝乙酰氯
[0178] AcOH＝乙酸
[0179] BCl3＝三氯化硼
[0180] BnBr＝苄基溴
[0181] Boc2O＝二碳酸二叔丁酯
[0182] BzCl＝苯甲酰氯
[0183] DAST＝二乙氨基三氟化硫
[0184] DCM＝二氯甲烷
[0185] DIPEA＝二异丙基乙胺
[0186] DMAP＝4-二甲基氨基吡啶
[0187] DMF＝N，N-二甲基甲酰胺
[0188] DMP＝迪斯-马丁(Dess-Martin)过碘烷
[0189] Et3N＝三乙胺
[0190] Et2O＝二乙醚
[0192] TBAF＝四正丁基氟化铵
[0193] TFA＝2，2，2-三氟乙酸
[0194] THF＝四氢呋喃
[0195] Thio-CDI＝1，1’-硫代羰基二咪唑
[0196] 实施例1
[0197] (3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0198]
[0199] 向在15℃下冷却的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(35.0g，141mmol)的DMF(300mL)悬浮液中添加DIPEA(6.0mL)、Boc2O(61.5g，282mmol)和MeOH(6.0mL)。将混合物在室温下搅拌16小时，然后添加MeOH(50mL)。将反应混合物在约35℃下减压浓缩。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶1的EtOAc/己烷，然后1∶5的MeOH/DCM)纯化，然后从EtOAc/己烷中重结晶，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-二羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，
7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(31.5g，64％产率)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.12(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.23-4.22(m，1H)，4.17-4.14(m，1H)，
3.91-3.86(m，2H)，3.81-3.77(m，3H)，3.59-3.55(m，1H)，3.17-3.16(m，1H，OH)，1.53(s，
9H)，1.16(t，J＝7.0Hz，3H)。
7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(31.5g，64％产率)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.12(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.23-4.22(m，1H)，4.17-4.14(m，1H)，
3.91-3.86(m，2H)，3.81-3.77(m，3H)，3.59-3.55(m，1H)，3.17-3.16(m，1H，OH)，1.53(s，
9H)，1.16(t，J＝7.0Hz，3H)。
[0200] 向上述材料(5.0g，14.4mmol)的DMF(25mL)溶液中添加咪唑(1.57g，23.1mmol)和TBDMSCl(2.82g，18.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30小时，并用EtOAc(100mL)稀释。将有机物用饱和NH4Cl、盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥并浓缩。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.08g，76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.12(d，J＝6.7Hz，1H)，4.25(t，J＝6.2Hz，1H)，4.16(t，J＝6.4Hz，1H)，4.10-4.04(m，
2H)，3.91-3.85(m，3H)，3.65-3.62(m，1H)，1.55(s，9H)，1.26(t，J ＝ 7.0Hz，3H)，0.89(s，
9H)，0.08(s，6H)。
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.08g，76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.12(d，J＝6.7Hz，1H)，4.25(t，J＝6.2Hz，1H)，4.16(t，J＝6.4Hz，1H)，4.10-4.04(m，
2H)，3.91-3.85(m，3H)，3.65-3.62(m，1H)，1.55(s，9H)，1.26(t，J ＝ 7.0Hz，3H)，0.89(s，
9H)，0.08(s，6H)。
[0201] 向0℃的上述材料(1.15g，2.5mmol)、碘化四丁基铵(0.092g，0.25mmol)的DMF(25mL)溶液中添加NaH(60％，0.3g，7.5mmol)，然后添加对甲氧基苄基氯(1.02mL，7.5mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌6小时，用Et2O(50mL)稀释并用水(5mL)淬灭。将醚层用饱和NH4Cl、盐水进一步洗涤，在无水Na2SO4上干燥并浓缩。将比为1∶2的两种产物：((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-7-((4-甲氧基苄基)氧基)-5-((4-甲氧基苯氧基)甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯和((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)
1
(乙基)氨基甲酸叔丁酯的混合物分别分离(1.6g，66％)，如 HNMR所示。
1
(乙基)氨基甲酸叔丁酯的混合物分别分离(1.6g，66％)，如 HNMR所示。
[0202] 0℃下，向上述混合物(1.58g，2.26mmol)的THF(15mL)溶液中添加1M TBAF溶液(4.0mL，4mmol)，然后将混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc(50mL)稀释，将有机层用饱和NH4Cl洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到黏性固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(羟甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基
1
甲酸叔丁基乙酯(0.75g，56％)。H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.30(d，J＝8.6，2H)，7.15(d，J＝8.6，2H)，6.88-6.80(m，4H)，6.01(d，J＝6.9Hz，1H)，4.64(d，J＝11.8Hz，1H)，4.59(d，J ＝ 11.8Hz，1H)，4.48-4.45(m，1H)，4.37-4.34(ddd，J ＝ 6.8，3.6，1.28Hz，1H)，4.27(d，J ＝ 11.2，1H)，4.24-4.23(dd，J ＝ 1.8，1.76Hz，1H)，3.87-3.80(m，2H)，3.78(s，3H)，
3.77(s，3H)，3.70-3.65(m，1H)，3.59-3.56(dt，J ＝ 9.0，1.44Hz，1H)，3.55-3.49(m，1H)，
3.41-3.37(ddd，J＝8.5，5.3，2.8Hz，1H)，1.78(t，J＝6.4Hz，1H)，1.50(s，9H)，1.18(t，J＝6.9Hz，3H)。
1
甲酸叔丁基乙酯(0.75g，56％)。H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.30(d，J＝8.6，2H)，7.15(d，J＝8.6，2H)，6.88-6.80(m，4H)，6.01(d，J＝6.9Hz，1H)，4.64(d，J＝11.8Hz，1H)，4.59(d，J ＝ 11.8Hz，1H)，4.48-4.45(m，1H)，4.37-4.34(ddd，J ＝ 6.8，3.6，1.28Hz，1H)，4.27(d，J ＝ 11.2，1H)，4.24-4.23(dd，J ＝ 1.8，1.76Hz，1H)，3.87-3.80(m，2H)，3.78(s，3H)，
3.77(s，3H)，3.70-3.65(m，1H)，3.59-3.56(dt，J ＝ 9.0，1.44Hz，1H)，3.55-3.49(m，1H)，
3.41-3.37(ddd，J＝8.5，5.3，2.8Hz，1H)，1.78(t，J＝6.4Hz，1H)，1.50(s，9H)，1.18(t，J＝6.9Hz，3H)。
[0203] 向三苯膦(0.179g，0.68mmol)的无水甲苯(5mL)溶液中添加碘(0.145g，0.57mmol)、吡啶(0.1mL，1.2mmol)和预溶解在甲苯(3mL)中的上述材料(0.210g，
0.357mmol)的溶液。将反应混合物在65℃下搅拌3.5小时。将不溶性黄色材料滤除并将滤液用EtOAc(50mL)稀释，用1N HCl(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)和盐水洗涤。将EtOAc层分离，用Na2SO4干燥并浓缩成粗产物，将其在硅胶上通过快速柱层析(3∶7的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(碘甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁
1
基乙酯(0.23g，92.4％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33(d，J＝8.4，2H)，7.18(d，J＝
8.4，2H)，6.89-6.82(m，4H)，6.07(d，J ＝ 7Hz，1H)，4.67(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.61(d，J＝11.6Hz，1H)，4.54-4.51(m，1H)，4.36-4.31(m，2H)，4.19(t，J ＝ 2.64Hz，1H)，3.87(d，J＝6.9Hz，1H)，3.83(d，J＝6.9Hz，1H)，3.77(s，6H)，3.50-3.48(dd，J＝ 6.8，1.3Hz，1H)，
3.37-3.34(m，1H)，3.23-3.20(m，2H)，1.51(s，9H)，1.10(t，J＝6.9Hz，3H)。
0.357mmol)的溶液。将反应混合物在65℃下搅拌3.5小时。将不溶性黄色材料滤除并将滤液用EtOAc(50mL)稀释，用1N HCl(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)和盐水洗涤。将EtOAc层分离，用Na2SO4干燥并浓缩成粗产物，将其在硅胶上通过快速柱层析(3∶7的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(碘甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁
1
基乙酯(0.23g，92.4％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33(d，J＝8.4，2H)，7.18(d，J＝
8.4，2H)，6.89-6.82(m，4H)，6.07(d，J ＝ 7Hz，1H)，4.67(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.61(d，J＝11.6Hz，1H)，4.54-4.51(m，1H)，4.36-4.31(m，2H)，4.19(t，J ＝ 2.64Hz，1H)，3.87(d，J＝6.9Hz，1H)，3.83(d，J＝6.9Hz，1H)，3.77(s，6H)，3.50-3.48(dd，J＝ 6.8，1.3Hz，1H)，
3.37-3.34(m，1H)，3.23-3.20(m，2H)，1.51(s，9H)，1.10(t，J＝6.9Hz，3H)。
[0204] 向上述材料(0.120g，0.172mmol)的乙醇(4mL)和Et3N(0.1mL)的溶液中添加Pd/C(10重量％，0.060g)。将混合物在50psi和室温下氢化24小时。通过过滤除去催化剂并减压蒸发溶剂。将残余物通过用3∶7的EtOAc/己烷洗提的硅胶柱层析纯化，从而产生白色固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5-甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.077g，78.4％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.31(d，J＝6.8，2H)，7.17(d，J＝6.8，2H)，6.87-6.81(m，4H)，
6.07(d，J＝ 5.6Hz，1H)，4.67(d，J ＝9.4Hz，1H)，4.58(d，J ＝ 9.4Hz，1H)，4.50(d，J ＝
8.9Hz，1H)，4.34(m，1H)，4.27(d，J ＝ 8.9Hz，1H)，4.23-4.17(m，1H)，3.87-3.84(m，2H)，
3.78(s，3H)，3.77(s，3H)，3.44-3.39(m，1H)，3.30-3.28(m，1H)，1.50(s，9H)，1.18(d，J ＝
4.9Hz，3H)，1.10(t，J＝5.5Hz，3H)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.31(d，J＝6.8，2H)，7.17(d，J＝6.8，2H)，6.87-6.81(m，4H)，
6.07(d，J＝ 5.6Hz，1H)，4.67(d，J ＝9.4Hz，1H)，4.58(d，J ＝ 9.4Hz，1H)，4.50(d，J ＝
8.9Hz，1H)，4.34(m，1H)，4.27(d，J ＝ 8.9Hz，1H)，4.23-4.17(m，1H)，3.87-3.84(m，2H)，
3.78(s，3H)，3.77(s，3H)，3.44-3.39(m，1H)，3.30-3.28(m，1H)，1.50(s，9H)，1.18(d，J ＝
4.9Hz，3H)，1.10(t，J＝5.5Hz，3H)。
[0205] 将上述材料(0.075g，0.131mmol)溶解在30％TFA/DCM溶液(10mL)中并在室温下搅拌2.5小时。将反应混合物浓缩并与Et2O(20mL)共蒸发。向残余物添加2M NH3/MeOH溶液(3mL)并减压浓缩。将所得产物在硅胶上通过用含5％MeOH的DCM和94∶4∶2的DCM-MeOH-NH4OH(28％水溶液)洗提的快速柱层析而纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2(乙胺基)-5-甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二
1
醇(0.021g，68.7％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.60(d，J＝6.5Hz，1H)，4.08(t，J＝7.04Hz，
1H)，3.77(t.J＝ 7.2Hz，1H)，3.75-3.72(m，1H)，3.44-3.38(ddd，J＝ 14.6，7.28，2.08Hz，
2H)，3.25-3.20(dd，J＝7.7，1.12Hz，1H)，1.33(d，J＝6.2Hz，3H)，1.28(t，J＝7.2Hz，3H)；
13
C NMR(100MHz，CD3OD)δ160.40，90.08，75.69，75.66，74.21，66.27，55.65，18.91，14.51；
MS，m/z＝233(M+1)。
1
醇(0.021g，68.7％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.60(d，J＝6.5Hz，1H)，4.08(t，J＝7.04Hz，
1H)，3.77(t.J＝ 7.2Hz，1H)，3.75-3.72(m，1H)，3.44-3.38(ddd，J＝ 14.6，7.28，2.08Hz，
2H)，3.25-3.20(dd，J＝7.7，1.12Hz，1H)，1.33(d，J＝6.2Hz，3H)，1.28(t，J＝7.2Hz，3H)；
13
C NMR(100MHz，CD3OD)δ160.40，90.08，75.69，75.66，74.21，66.27，55.65，18.91，14.51；
MS，m/z＝233(M+1)。
[0206] 实施例2
[0207] (3aR，5R，6S，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0208]
[0209] 在0℃下，向((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-二羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.64g，4.73mmol)、DIPEA(1.34g，10.4mmol)和DMAP(0.010g，0.082mmol)的DCM(50mL)溶液中缓慢添 加BzCl(1.33g，9.50mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌过夜。添加饱和NH4Cl水溶液(50mL)并收集有机层。将水层用DCM(2×40mL)进一步萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶4至
1∶2的EtOAc/己烷)分离，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]
1
噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.67g，26％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(d，J＝8.1Hz，4H)，
7.57-7.35(m，6H)，6.19(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，5.21(dd，J ＝ 2.8，9.2Hz，1H)，4.56-4.51(m，
2H)，4.47-4.42(m，2H)，4.14-4.10(m，1H)，3.99-3.92(m，2H)，1.55(s，9H)，1.19(t，J ＝
7.2Hz，3H)。
1∶2的EtOAc/己烷)分离，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]
1
噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.67g，26％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(d，J＝8.1Hz，4H)，
7.57-7.35(m，6H)，6.19(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，5.21(dd，J ＝ 2.8，9.2Hz，1H)，4.56-4.51(m，
2H)，4.47-4.42(m，2H)，4.14-4.10(m，1H)，3.99-3.92(m，2H)，1.55(s，9H)，1.19(t，J ＝
7.2Hz，3H)。
[0210] 将含上述材料(0.346g，0.623mmol)和thio-CDI(90％技术级，0.20g，1.0mmol)的无水甲苯(10mL)的混合物在95℃下搅拌4小时。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(2∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到黄色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-7-((1H-咪唑-1-羰硫基(carbonothioyl))氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基
1
苯甲酸酯(0.343g，83％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.08-7.94(m，4H)，7.70(s，
1H)，7.57-7.37(m，6H)，7.18(s，1H)，6.36(dd，J＝1.9，3.7Hz，1H)，6.17(d，J＝7.1Hz，1H)，
5.54(td，J＝1.2，9.2Hz，1H)，4.70-4.67(m，1H)，4.60(dd，J＝3.2，12.1Hz，1H)，4.42(dd，J＝5.1，12.2Hz，1H)，4.11-4.08(m，1H)，4.05-3.97(m，2H)，1.56(s，9H)，1.22(t，J＝7.2Hz，
3H)。
1
苯甲酸酯(0.343g，83％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.08-7.94(m，4H)，7.70(s，
1H)，7.57-7.37(m，6H)，7.18(s，1H)，6.36(dd，J＝1.9，3.7Hz，1H)，6.17(d，J＝7.1Hz，1H)，
5.54(td，J＝1.2，9.2Hz，1H)，4.70-4.67(m，1H)，4.60(dd，J＝3.2，12.1Hz，1H)，4.42(dd，J＝5.1，12.2Hz，1H)，4.11-4.08(m，1H)，4.05-3.97(m，2H)，1.56(s，9H)，1.22(t，J＝7.2Hz，
3H)。
[0211] 将含上述材料(0.343g，0.515mmol)、Bu3SnH(0.291g，1.00mmol)与ABCN(8.0mg，0.033mmol)的无水甲苯(10mL)的混合物在90℃下搅拌3小时。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5，6，7，
1
7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.141g，51％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-7.94(m，4H)，7.57-7.52(m，2H)，7.44-7.35(m，4H)，6.07(d，J＝ 7.2Hz，1H)，
5.44-5.40(m，1H)，4.52-4.41(m，3H)，4.06-3.96(m，3H)，2.70-2.64(m，1H)，2.47-2.40(m，
1H)，1.56(s，9H)，1.18(t，J＝7.2Hz，3H)。
1
7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.141g，51％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-7.94(m，4H)，7.57-7.52(m，2H)，7.44-7.35(m，4H)，6.07(d，J＝ 7.2Hz，1H)，
5.44-5.40(m，1H)，4.52-4.41(m，3H)，4.06-3.96(m，3H)，2.70-2.64(m，1H)，2.47-2.40(m，
1H)，1.56(s，9H)，1.18(t，J＝7.2Hz，3H)。
[0212] 将含上述材料(0.140g，0.260mmol)和K2CO3(0.030g，0.22mmol)的无水MeOH(6mL)的混合物在室温下搅拌3小时。减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(EtOAc)纯化，从而得到白色固体。将固体溶解在MeOH(3mL)中，向其用HCl(气体)发泡30秒。然后，将溶液在室温下搅拌3小时。除去溶剂并将残余物用1.0M NH3的MeOH溶液中和，然后在硅胶上通过快速柱层析(1.0M NH3的1∶8MeOH/DCM)纯化，从而得到灰白色固体形式的(3aR，5R，6S，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并
1
[3，2-d]噻唑-6-醇(0.044g，73％)。H NMR(500MHz，CD3OD)δ6.20(d，J＝7.1Hz，1H)，
4.28-4.25(m，1H)，3.75(dd，J ＝ 2.6，14.4Hz，1H)，3.73-3.69(m，1H)，3.61(dd，J ＝ 6.4，
14.4Hz，1H)，3.54-3.51(m，1H)，3.30-3.22(m，2H)，2.16-2.11(m，1H)，2.06-2.00(m，1H)，
13
1.18(t，J ＝ 7.2Hz，3H)；C NMR(125MHz，CD3OD)δ163.24，91.35，77.13，69.15，65.79，
63.36，39.60，34.75，14.87；MS，m/z＝233(M+1)。
1
[3，2-d]噻唑-6-醇(0.044g，73％)。H NMR(500MHz，CD3OD)δ6.20(d，J＝7.1Hz，1H)，
4.28-4.25(m，1H)，3.75(dd，J ＝ 2.6，14.4Hz，1H)，3.73-3.69(m，1H)，3.61(dd，J ＝ 6.4，
14.4Hz，1H)，3.54-3.51(m，1H)，3.30-3.22(m，2H)，2.16-2.11(m，1H)，2.06-2.00(m，1H)，
13
1.18(t，J ＝ 7.2Hz，3H)；C NMR(125MHz，CD3OD)δ163.24，91.35，77.13，69.15，65.79，
63.36，39.60，34.75，14.87；MS，m/z＝233(M+1)。
[0213] 实施例3
[0214] (3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0215]
[0216] 向(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(1.50g，6.40mmol)和NaHCO3(1.01g，12.0mmol)的THF/水(40mL，1∶3)悬浮液添加氯甲酸苯甲酯(1.70g，10.0mmol)。将混合物在室温下搅拌4天。减压除去有机溶剂以产生沉淀物。将沉淀的固体通过过滤而收集，用Et2O洗涤并真空干燥，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-二羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸苄酯(1.72g，73％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.44-7.32(m，5H)，6.13(d，J＝6.9Hz，1H)，5.27-5.20(m，2H)，4.14(t，J＝6.1Hz，
1H)，4.02(t，J＝4.9Hz，1H)，3.74(dd，J＝2.4，12.0Hz，1H)，3.63(dd，J＝6.1，12.0Hz，
1H)，3.53(dd，J＝4.5，9.2Hz，1H)，3.47-3.43(m，1H)，3.39(s，3H)。
1
氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸苄酯(1.72g，73％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.44-7.32(m，5H)，6.13(d，J＝6.9Hz，1H)，5.27-5.20(m，2H)，4.14(t，J＝6.1Hz，
1H)，4.02(t，J＝4.9Hz，1H)，3.74(dd，J＝2.4，12.0Hz，1H)，3.63(dd，J＝6.1，12.0Hz，
1H)，3.53(dd，J＝4.5，9.2Hz，1H)，3.47-3.43(m，1H)，3.39(s，3H)。
[0217] 将含上述材料(1.50g，4.08mmol)、苯甲醛二甲缩醛(3mL)和对甲苯磺酸一水合物(0.058g，0.30mmol)的DMF(10mL)的混合物在50℃、微真空下搅拌过夜。在冷却之后，将溶液用固体NaHCO3中和，然后减压浓缩。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(2∶4∶1的EtOAc/DCM/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，4aR，8aS，9R，9aR)-9-羟基-7-苯基-3a，4a，5，8a，9，9a-六氢-[1，3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸苄酯(0.91g，53％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.47(m，
2H)，7.40-7.35(m，8H)，6.28(d，J＝7.5Hz，1H)，5.78(s，1H)，5.29-5.21(m，2H)，4.34(dd，J＝5.1，10.4Hz，1H)，4.15-4.06(m，2H)，3.89-3.84(m，1H)，3.76(t，J 10.4Hz，1H)，3.58(t，J＝9.4，1H)，3.38(s，3H)，2.62(d，J＝2.4Hz，1H)。
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸苄酯(0.91g，53％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.47(m，
2H)，7.40-7.35(m，8H)，6.28(d，J＝7.5Hz，1H)，5.78(s，1H)，5.29-5.21(m，2H)，4.34(dd，J＝5.1，10.4Hz，1H)，4.15-4.06(m，2H)，3.89-3.84(m，1H)，3.76(t，J 10.4Hz，1H)，3.58(t，J＝9.4，1H)，3.38(s，3H)，2.62(d，J＝2.4Hz，1H)。
[0218] 将含上述材料(0.700g，1.54mmol)和thio-CDI(90％技术级，0.80g，4.04mmol)的无水DMF(20mL)的混合物在90℃下搅拌过夜。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(2∶1的EtOAc/DCM)纯化，从而得到黄色固体形式的O-((3aR，4aR，8aS，9R，9aR)-2-(((苄氧基)羰基)(甲基)氨基)-7-苯基-3a，4a，5，8a，9，9a-六氢[1，
3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-9-基)1H-咪唑-1-硫代甲酸酯(0.71g，
1
81％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(s，1H)，7.66(s，1H)，7.42-7.37(m，7H)，7.35-7.32(m，
3H)，7.03(s，1H)，6.28(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，6.20(dd，J ＝ 7.1，8.6Hz，1H)，5.56(s，1H)，
5.26(s，2H)，4.43(t，J ＝ 7.1Hz，1H)，4.39(dd，J ＝ 5.1，10.4Hz，1H)，4.19-4.13(m，1H)，
3.93(t，J＝9.0Hz，1H)，3.79(t，J＝10.4Hz，1H)，3.32(s，3H)。
3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-9-基)1H-咪唑-1-硫代甲酸酯(0.71g，
1
81％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(s，1H)，7.66(s，1H)，7.42-7.37(m，7H)，7.35-7.32(m，
3H)，7.03(s，1H)，6.28(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，6.20(dd，J ＝ 7.1，8.6Hz，1H)，5.56(s，1H)，
5.26(s，2H)，4.43(t，J ＝ 7.1Hz，1H)，4.39(dd，J ＝ 5.1，10.4Hz，1H)，4.19-4.13(m，1H)，
3.93(t，J＝9.0Hz，1H)，3.79(t，J＝10.4Hz，1H)，3.32(s，3H)。
[0219] 将 含 上 述 材 料 (0.560g，1.00mmol)、Bu3SnH(0.87g，3.0mmol)和 ABCN(24mg，0.10mmol)的无水THF(20mL)的混合物在回流下搅拌3小时。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶3∶1的EtOAc/己烷/DCM)纯化，从而
得到白色固体形式的((3aR，4aR，8aS，9aR)-7-苯基-3a，4a，5，8a，9，9a-六氢[1，3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸苄基甲酯(0.32g，73％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.47(m，2H)，7.39-7.33(m，8H)，6.21(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，
5.56(s，1H)，5.29-5.20(m，2H)，4.52-4.25(m，2H)，4.08-4.02(m，1H)，3.72(t，J＝10.3Hz，
1H)，3.61-3.54(m，1H)，3.33(s，3H)，2.41-2.35(m，1H)，1.76-1.68(m，1H)。
得到白色固体形式的((3aR，4aR，8aS，9aR)-7-苯基-3a，4a，5，8a，9，9a-六氢[1，3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸苄基甲酯(0.32g，73％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.49-7.47(m，2H)，7.39-7.33(m，8H)，6.21(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，
5.56(s，1H)，5.29-5.20(m，2H)，4.52-4.25(m，2H)，4.08-4.02(m，1H)，3.72(t，J＝10.3Hz，
1H)，3.61-3.54(m，1H)，3.33(s，3H)，2.41-2.35(m，1H)，1.76-1.68(m，1H)。
[0220] 向-78℃和N2下冷却的上述材料(0.20g，0.45mmol)的无水DCM(10mL)溶液中添加三氯化硼的DCM溶液(1.0M，2.0mL，2.0mmol)。将混合物搅拌3小时，同时使反应温度逐渐达到约0℃。然后，将混合物再在-78℃下冷却并小心添加MeOH(5mL)。在室温下搅拌30分钟之后，将混合物减压浓缩。将残余物用1.0M NH3的MeOH溶液中和，然后在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶7 MeOH∶DCM)纯化，从而得到灰白色固体形式的(3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻1
唑-6-醇(0.070g，72％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.20(d，J＝6.4Hz，1H)，4.27-4.23(m，
1H)，3.74(dd，J ＝ 2.5，12.0Hz，1H)，3.71-3.67(m，1H)，3.63(dd，J ＝ 6.2，12.0Hz，1H)，
13
3.54-3.49(m，1H)，2.83(s，3H)，2.16-2.10(m，1H)，2.04-1.97(m，1H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ163.99，91.81，77.11，69.31，65.82，63.32，34.93，30.49；MS，m/z＝219(M+1).[0221] 实施例4
唑-6-醇(0.070g，72％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.20(d，J＝6.4Hz，1H)，4.27-4.23(m，
1H)，3.74(dd，J ＝ 2.5，12.0Hz，1H)，3.71-3.67(m，1H)，3.63(dd，J ＝ 6.2，12.0Hz，1H)，
13
3.54-3.49(m，1H)，2.83(s，3H)，2.16-2.10(m，1H)，2.04-1.97(m，1H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ163.99，91.81，77.11，69.31，65.82，63.32，34.93，30.49；MS，m/z＝219(M+1).[0221] 实施例4
[0222] (3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0223]
[0224] 将(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.800g，3.23mmol)和无水ZnCl2(1.00g，7.35mmol)的苯甲醛(5mL)悬浮液在室温下搅拌过夜。添加DCM (50mL)和饱和NaHCO3水溶液(50mL)并将混合物搅拌20分钟。将固体滤除并从滤液收集有机层。将水层用DCM(2×50mL)萃取并将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1.0M NH3的3∶100 MeOH/DCM)纯化，从而得到淡黄色固体形式的(3aR，4aR，8aS，9R，9aR)-2-(二甲基氨基)-7-苯基-3a，4a，5，8a，9，9a-六氢-[1，3]二噁英并[4’，5’：
1
5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-9-醇(0.76g，70％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.51-7.48(m，
2H)，7.40-7.34(m，3H)，6.39(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.31(dd，J ＝ 5.1，10.4Hz，
1H)，4.10-4.03(m，2H)，3.86(dd，J＝8.2，9.5Hz，1H)，3.76(t，J＝10.4Hz，1H)，3.59(t，J＝9.5Hz，1H)，3.00(s，6H)。
1
5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-9-醇(0.76g，70％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.51-7.48(m，
2H)，7.40-7.34(m，3H)，6.39(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.31(dd，J ＝ 5.1，10.4Hz，
1H)，4.10-4.03(m，2H)，3.86(dd，J＝8.2，9.5Hz，1H)，3.76(t，J＝10.4Hz，1H)，3.59(t，J＝9.5Hz，1H)，3.00(s，6H)。
[0225] 将含上述材料(0.67g，2.0mmol)和thio-CDI(90％技术级，1.6g，8.0mmol)的无水DMF(20mL)的混合物在95℃下搅拌过夜。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶100至5∶100的MeOH/DCM)纯化，从而得到含有O-((3aR，4aR，8aS，9R，9aR)-2-(二甲基氨基)-7-苯基-3a，4a，5，8a，9，9a-六氢-[1，3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-9-基)1H-咪唑-1-硫代甲酸酯的混合物。将该混合物溶解在无水THF(30mL)中，并添加Bu3SnH(1.0g，3.4mmol)和ABCN(0.060mg，0.24mmol)，并将混合物在回流下搅拌过夜。然后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的
3∶100 MeOH∶DCM)纯化，从而得到含有(3aR，4aR，8aS，9aR)-N，N-二甲基-7-苯基-3a，
4a，5，8a，9，9a-六氢-[1，3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺的淡黄色固体(0.17g，不纯)。将固体在室温下用2％HCl的MeOH溶液(10mL)处理2小时，然后减压除去溶剂。将残余物用含1.0M NH3的MeOH中和，然后在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的3∶10 MeOH∶DCM)纯化，从而得到灰白色固体形式的纯(3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.050g，11％
1
总产率)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.23(d，J＝6.4Hz，1H)，4.28-4.24(m，1H)，3.74(dd，J ＝ 2.5，12.0Hz，1H)，3.70-3.65(m，1H)，3.59(dd，J ＝ 6.2，12.0Hz，1H)，3.53-3.48(m，
13
1H)，2.99(s，6H)，2.14-2.08(m，1H)，2.02-1.95(m，1H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ165.60，
92.43，77.19，69.67，65.79，63.27，40.15，34.93；MS，m/z＝255(M+23)。
3∶100 MeOH∶DCM)纯化，从而得到含有(3aR，4aR，8aS，9aR)-N，N-二甲基-7-苯基-3a，
4a，5，8a，9，9a-六氢-[1，3]二噁英并[4’，5’：5，6]吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺的淡黄色固体(0.17g，不纯)。将固体在室温下用2％HCl的MeOH溶液(10mL)处理2小时，然后减压除去溶剂。将残余物用含1.0M NH3的MeOH中和，然后在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的3∶10 MeOH∶DCM)纯化，从而得到灰白色固体形式的纯(3aR，5R，6S，7aR)-5-(羟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.050g，11％
1
总产率)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.23(d，J＝6.4Hz，1H)，4.28-4.24(m，1H)，3.74(dd，J ＝ 2.5，12.0Hz，1H)，3.70-3.65(m，1H)，3.59(dd，J ＝ 6.2，12.0Hz，1H)，3.53-3.48(m，
13
1H)，2.99(s，6H)，2.14-2.08(m，1H)，2.02-1.95(m，1H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ165.60，
92.43，77.19，69.67，65.79，63.27，40.15，34.93；MS，m/z＝255(M+23)。
[0226] 以下实施例是根据与上面概述的方案和实施例类似的程序而合成的。
[0227] 表2
[0228]
[0229]
[0230] 实施例7
[0231] (3aR，5R，6R，7R，7aR)-2-(乙胺基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0232]
[0233] 在-40℃和N2下，向((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.49g，0.88mmol)的无水DCM(3mL)溶液中添加DAST(1.0g，6.2mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物再在-40℃下冷却之后，将其用DCM(20mL)稀释，然后通过滴加饱和NaHCO3水溶液而淬灭。收集有机层且将水层用DCM(2×15mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶5至2∶7的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.14g，不纯，约28％)。
[0234] 由实施例2所述程序，通过分别使用K2CO3的MeOH溶液和HCl的MeOH饱和溶液除去苯甲酸酯和Boc保护基团，从而完成上述材料至题述化合物的转化。在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶7MeOH/DCM)纯化后，获得灰白色固体形式的(3aR，5R，6R，7R，7aR)-2-(乙胺基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
1
(0.051g，23％总产率)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.33(d，J＝6.6Hz，1H)，4.77(td，J＝
5.0，48.2Hz，1H)，4.34-4.27(m，1H)，3.81(dd，J ＝ 2.0，12.0Hz，1H)，3.77-3.72(m，1H)，
3.68(dd，J＝5.7，12.0Hz，1H)，3.63-3.59(m，1H)，3.31-3.23(m，2H)，1.18(t，J＝7.2Hz，
13
3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ163.40，96.25(d，J ＝ 177.7Hz)，90.55(d，J ＝ 3.9Hz)，
75.26(d，J＝4.6Hz)，73.58(d，J＝24.5Hz)，68.91(d，J＝22.8Hz)，62.85，39.54，14.82；
MS，m/z＝251(M+1)。
1
(0.051g，23％总产率)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.33(d，J＝6.6Hz，1H)，4.77(td，J＝
5.0，48.2Hz，1H)，4.34-4.27(m，1H)，3.81(dd，J ＝ 2.0，12.0Hz，1H)，3.77-3.72(m，1H)，
3.68(dd，J＝5.7，12.0Hz，1H)，3.63-3.59(m，1H)，3.31-3.23(m，2H)，1.18(t，J＝7.2Hz，
13
3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ163.40，96.25(d，J ＝ 177.7Hz)，90.55(d，J ＝ 3.9Hz)，
75.26(d，J＝4.6Hz)，73.58(d，J＝24.5Hz)，68.91(d，J＝22.8Hz)，62.85，39.54，14.82；
MS，m/z＝251(M+1)。
[0235] 实施例8
[0236] (3aR，5R，6R，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0237]
[0238] 向(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(5.20g，21.0mmol)和咪唑(12.0g，176mmol)的DMF(60mL)溶液中添加TBDMSCl(15.0g，99.5mmol)。将混合物在室温下搅拌24小时，然后用盐水(200mL)稀释。将混合物用Et2O (3×100mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)和水(100mL)洗涤，然后用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶4至1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(5.95g，60％)。
1
H NMR(500MHz，CDCl3)δ6.15(d，J＝5.8Hz，1H)，4.34-4.33(m，1H)，4.20(t，J＝5.0Hz，
1H)，3.80-3.72(m，2H)，3.48(s，br.，2H)，3.01(s，6H)，0.90(s，9H)，0.89(s，9H)，0.13(s，
3H)，0.12(s，3H)，0.07(s，6H)。
1
H NMR(500MHz，CDCl3)δ6.15(d，J＝5.8Hz，1H)，4.34-4.33(m，1H)，4.20(t，J＝5.0Hz，
1H)，3.80-3.72(m，2H)，3.48(s，br.，2H)，3.01(s，6H)，0.90(s，9H)，0.89(s，9H)，0.13(s，
3H)，0.12(s，3H)，0.07(s，6H)。
[0239] 在0℃下，向上述材料(5.95g，12.5mmol)和DMAP(0.12g，0.98mmol)的吡啶(50mL)溶液中缓慢添加BzCl(3.00g，21.3mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌24小时。添加饱和NaHCO3水溶液(100mL)，并将混合物用EtOAc(3×100mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶9至1∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到澄清油形式的(3aR，5R，6R，
7R，7aR)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(6.85g，
1
94％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05-8.02(m，2H)，7.56-7.52(m，1H)，7.43-7.39(m，2H)，
6.26(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，5.06-5.03(m，1H)，4.40(dd，J ＝ 2.2，3.8Hz，1H)，3.81-3.78(m，
1H)，3.71-3.70(m，2H)，3.03(s，6H)，0.88(s，9H)，0.85(s，9H)，0.17(s，3H)，0.13(s，3H)，
0.02(s，3H)，0.00(3H)。
7R，7aR)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(6.85g，
1
94％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05-8.02(m，2H)，7.56-7.52(m，1H)，7.43-7.39(m，2H)，
6.26(d，J ＝ 6.4Hz，1H)，5.06-5.03(m，1H)，4.40(dd，J ＝ 2.2，3.8Hz，1H)，3.81-3.78(m，
1H)，3.71-3.70(m，2H)，3.03(s，6H)，0.88(s，9H)，0.85(s，9H)，0.17(s，3H)，0.13(s，3H)，
0.02(s，3H)，0.00(3H)。
[0240] 对上述材料(9.30g，16.8mmol)的无水MeOH(100mL)溶液用HCl发泡2分钟，然后将混合物在室温下搅拌2小时。在减压浓缩之后，将混合物用饱和NaHCO3水溶液(150mL)处理，然后用EtOAc(6×80mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂，从而得到白色结晶固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-7-羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(5.40g，1
96 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-8.01(m，2H)，7.58-7.53(m，1H)，7.44-7.39(m，
2H)，6.37(d，J ＝ 4.5Hz，1H)，5.12-5.09(m，1H)，4.41-4.37(m，2H)，3.94-3.85(m，1H)，
3.78-3.74(m，1H)，3.67(dd，J＝4.9，12.5Hz，1H)，3.00(s，6H)。
96 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-8.01(m，2H)，7.58-7.53(m，1H)，7.44-7.39(m，
2H)，6.37(d，J ＝ 4.5Hz，1H)，5.12-5.09(m，1H)，4.41-4.37(m，2H)，3.94-3.85(m，1H)，
3.78-3.74(m，1H)，3.67(dd，J＝4.9，12.5Hz，1H)，3.00(s，6H)。
[0241] 在0℃下，向上述材料(5.35g，15.2mmol)和DMAP(0.050g，0.41mmol)的吡啶(50mL)溶液中缓慢添加BzCl(2.22g，15.8mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌4小时。添加饱和NaHCO3水溶液(100mL)并将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂且将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶1至10∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-(二甲基氨基)-7-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)1
苯甲酸甲酯(4.45g，64％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04-8.00(m，4H)，7.58-7.51(m，2H)，
7.44-7.37(m，4H)，6.38(d，J＝6.6Hz，1H)，5.23-5.20(m，1H)，4.55(dd，J＝3.2，12.0Hz，
1H)4.48-4.40(m，3H)，4.27-4.22(m，1H)，3.00(s，6H)。
苯甲酸甲酯(4.45g，64％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04-8.00(m，4H)，7.58-7.51(m，2H)，
7.44-7.37(m，4H)，6.38(d，J＝6.6Hz，1H)，5.23-5.20(m，1H)，4.55(dd，J＝3.2，12.0Hz，
1H)4.48-4.40(m，3H)，4.27-4.22(m，1H)，3.00(s，6H)。
[0242] 在-78℃和N2下，向上述材料(0.410g，0.898mmol)的无水DCM(6mL)溶液中添加DAST(0.87g，5.4mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌16小时。然后，将反应混合物在-78℃下冷却，用DCM(20mL)稀释并通过添加饱和NaHCO3水溶液(20mL)而淬灭。收集有机层并将水层用DCM(2×30mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶3至1∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(0.380g，1
92％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-8.00(m，4H)，7.58-7.55(m，1H)，7.54-7.51(m，1H)，
7.44-7.41(m，2H)，7.39-7.36(m，2H)，6.35(d，J＝5.4Hz，1H)，5.47(dd，J＝7.3，16.3Hz，
1H)，5.23(ddd，J ＝ 1.1，2.8，35.2Hz，1H)，4.70-4.66(m，1H)，4.52(dd，J ＝ 2.8，9.6Hz)，
4.40(dd，J＝4.7，9.6Hz，1H)，4.14-4.10(m，1H)，3.05(s，6H)。
92％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-8.00(m，4H)，7.58-7.55(m，1H)，7.54-7.51(m，1H)，
7.44-7.41(m，2H)，7.39-7.36(m，2H)，6.35(d，J＝5.4Hz，1H)，5.47(dd，J＝7.3，16.3Hz，
1H)，5.23(ddd，J ＝ 1.1，2.8，35.2Hz，1H)，4.70-4.66(m，1H)，4.52(dd，J ＝ 2.8，9.6Hz)，
4.40(dd，J＝4.7，9.6Hz，1H)，4.14-4.10(m，1H)，3.05(s，6H)。
[0243] 将 含 上 述 材 料(0.375g，0.818mmol) 和K2CO3(0.113g，0.818mmol) 的 无 水MeOH(8mL)的混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用干冰中和，然后减压除去溶剂。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶12 MeOH/DCM)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6R，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.190g，93％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.35(d，J＝6.7Hz，1H)，4.74(dt，J＝48.1，5.0Hz，1H)，4.31(dt，J＝13.8，6.0Hz，1H)，3.79(dd，J ＝ 2.0，12.0Hz，1H)，3.76-3.69(m，1H)，3.66(dd，J ＝ 5.8，12.0Hz)，3.61-3.57(m，1H)，
13
3.01(s，6H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ166.25，96.36(d，J ＝ 176.8Hz)，91.60(d，J ＝
3.9Hz)，75.45(d，J＝4.6Hz)，73.99(d，J＝24.7Hz)，68.98(d，J＝22.9Hz)，62.91，40.33；
+
MS，(ES，m/z)[M+H]251.1。
1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.190g，93％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.35(d，J＝6.7Hz，1H)，4.74(dt，J＝48.1，5.0Hz，1H)，4.31(dt，J＝13.8，6.0Hz，1H)，3.79(dd，J ＝ 2.0，12.0Hz，1H)，3.76-3.69(m，1H)，3.66(dd，J ＝ 5.8，12.0Hz)，3.61-3.57(m，1H)，
13
3.01(s，6H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ166.25，96.36(d，J ＝ 176.8Hz)，91.60(d，J ＝
3.9Hz)，75.45(d，J＝4.6Hz)，73.99(d，J＝24.7Hz)，68.98(d，J＝22.9Hz)，62.91，40.33；
+
MS，(ES，m/z)[M+H]251.1。
[0244] 以下实施例是根据与上面概述的方案和实施例类似的程序而合成的。
[0245] 表3
[0246]
[0247]
[0248] 实施例11
[0249] (3aR，5R，6R，7S，7aR)-7-氟 -5-(羟 甲 基)-2-( 甲 基 氨 基 )-5，6，7，7a- 四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0250]
[0251] 对((3aR，5R，6R，7S，7aR)-5-((( 叔 丁 基 二 甲 基 甲 硅 烷 基) 氧 基) 甲基)-7-氟-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.200g，0.444mmol)的无水MeOH(6mL)溶液用HCl气体发泡30秒。将混合物在室温下搅拌5小时。在减压蒸发溶剂之后，将残余物用含1.0M NH3的MeOH溶液中和，并在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶8 MeOH/DCM)纯化，然后从MeOH/Et2O中重结晶，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6R，7S，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，1
6，7，7a-四氢-3aH吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.093g，89％)。HNMR(400MHz，CD3OD)δ6.62(d，J＝6.5Hz，1H)，4.89(td，J＝3.5Hz，51.0Hz，1H)，4.54(ddd，J＝3.5，6.5，20.6，
1H)，3.98-3.94(m，1H)，3.90-3.84(m，1H)，3.83-3.81(m，1H)，3.75(dd，J ＝ 5.4，12.2Hz，
13
1H)，2.99(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ90.63(d，J＝181.3Hz)，88.53(d，J＝2.3Hz)，
73.60(d，J＝4.3Hz)，66.02(d，J＝17.3Hz)，64.80-64.50(m)，62.44，31.38；MS，(ES，m/z)+
[M+H]237.1。
6，7，7a-四氢-3aH吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.093g，89％)。HNMR(400MHz，CD3OD)δ6.62(d，J＝6.5Hz，1H)，4.89(td，J＝3.5Hz，51.0Hz，1H)，4.54(ddd，J＝3.5，6.5，20.6，
1H)，3.98-3.94(m，1H)，3.90-3.84(m，1H)，3.83-3.81(m，1H)，3.75(dd，J ＝ 5.4，12.2Hz，
13
1H)，2.99(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ90.63(d，J＝181.3Hz)，88.53(d，J＝2.3Hz)，
73.60(d，J＝4.3Hz)，66.02(d，J＝17.3Hz)，64.80-64.50(m)，62.44，31.38；MS，(ES，m/z)+
[M+H]237.1。
[0252] 实施例12
[0253] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0254]
[0255] 在-20℃下，向((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(羟甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙酯(0.190g，0.323mmol)的无水吡啶(5mL)溶液中分批添加甲磺酰氯(0.038mL，0.495mmol)。在3小时之后，将反应混合物用DCM(20mL)稀释，并将DCM萃取物用饱和NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将残余吡啶通过与己烷共蒸发而除去。将粗产物通过硅胶柱层析(3∶7的EtOAc/己烷)纯化，从而产生白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
1
2-d]噻唑-5-基)甲磺酸甲酯(0.215g，99.6％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(d，J＝
8.5Hz，2H)，7.17(d，J＝8.5Hz，2H)，6.91-6.83(m，4H)，6.01(d，J＝6.88Hz，1H)，4.66(d，J＝ 11.6Hz，1H)，4.60(d，J＝ 11.6Hz，1H)，4.52(d，J＝ 11.1Hz，1H)，4.42-4.36(m，2H)，
4.27-4.23(m，3H)，3.96-3.84(m，2H)，3.8(s，3H)，3.79(s，3H)，3.55(m，2H)，2.98(s，3H)，
1.52(s，9H)，1.20(t，J＝6.9Hz，3H)。
1
2-d]噻唑-5-基)甲磺酸甲酯(0.215g，99.6％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(d，J＝
8.5Hz，2H)，7.17(d，J＝8.5Hz，2H)，6.91-6.83(m，4H)，6.01(d，J＝6.88Hz，1H)，4.66(d，J＝ 11.6Hz，1H)，4.60(d，J＝ 11.6Hz，1H)，4.52(d，J＝ 11.1Hz，1H)，4.42-4.36(m，2H)，
4.27-4.23(m，3H)，3.96-3.84(m，2H)，3.8(s，3H)，3.79(s，3H)，3.55(m，2H)，2.98(s，3H)，
1.52(s，9H)，1.20(t，J＝6.9Hz，3H)。
[0256] 向上述材料(0.520g，0.78mmol)的CH3CN(6mL)溶液中添加四乙基氟化铵(0.640g，4.28mmol)的CH3CN(4mL)溶液，并将混合物加热至回流2.5小时。将溶剂蒸发之后，将残余物通过硅胶柱层析(1∶1的EtOAc/己烷)纯化以提供发泡固体形式的((3aR，
5S，6S，7R，7aR)-5-(氟甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙酯(0.335g，72.7％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(d，J＝8.5Hz，2H)，7.20(d，J＝8.5Hz，2H)，6.93-6.86(m，4H)，6.08(d，J＝
6.88Hz，1H)，4.72(d，J＝11.7Hz，1H)，4.65(d，J＝11.7Hz，1H)，4.56(d，J＝11.6Hz，1H)，
4.52-4.51(m，1H)，4.41-4.38(m，2H)，4.33(d，J＝11.6Hz，1H)，4.26(t，J＝2.88Hz，1H)，
3.93-3.87(m，2H)，3.83(s，3H)，3.82(s，3H)，3.69-3.66(m，1H)，3.61-3.50(m，1H)，1.55(s，
9H)，1.15(t，J＝6.9Hz，3H)。
5S，6S，7R，7aR)-5-(氟甲基)-6，7-双((4-甲氧基苄基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙酯(0.335g，72.7％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(d，J＝8.5Hz，2H)，7.20(d，J＝8.5Hz，2H)，6.93-6.86(m，4H)，6.08(d，J＝
6.88Hz，1H)，4.72(d，J＝11.7Hz，1H)，4.65(d，J＝11.7Hz，1H)，4.56(d，J＝11.6Hz，1H)，
4.52-4.51(m，1H)，4.41-4.38(m，2H)，4.33(d，J＝11.6Hz，1H)，4.26(t，J＝2.88Hz，1H)，
3.93-3.87(m，2H)，3.83(s，3H)，3.82(s，3H)，3.69-3.66(m，1H)，3.61-3.50(m，1H)，1.55(s，
9H)，1.15(t，J＝6.9Hz，3H)。
[0257] 将在0℃下溶解在30％TFA/DCM中的上述材料(0.115g，0.195mmol)在室温下搅拌3小时。然后，将TFA/DCM完全蒸发并将所得残余物悬浮在2M NH3/MeOH(3mL)中。将甲醇氨溶液再浓缩，并将粗残余物通过使用含10％MeOH的DCM的硅胶柱层析纯化，从而产生浅黄色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.035g，72.8％)。H NMR(400MHz，CD3OD)6.49(d，J＝
6.48Hz，1H)，4.66-4.52(dt，J＝47.6，10.5，4.3Hz，2H)，4.12(t，J＝6.6Hz，1H)，3.90(t，J＝6.9Hz，1H)，3.80-3.73(m，2H)，3.55(dd，J＝6.3，3.2Hz，1H)，3.4-3.3(m，2H)，1.23(t，
13
J ＝ 7.2Hz，3H). C NMR(100MHz，MeOD)δ163.78，89.63，83.90(d，JC6，F 171.7Hz，C-6)，
76.83(d，JC5，F 17.8Hz，C-5)，75.43，69.51(d，JC4，F 7.0Hz，C-4)，67.71，42.13，14.74.ES/MS：251.0[M+1].
喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.035g，72.8％)。H NMR(400MHz，CD3OD)6.49(d，J＝
6.48Hz，1H)，4.66-4.52(dt，J＝47.6，10.5，4.3Hz，2H)，4.12(t，J＝6.6Hz，1H)，3.90(t，J＝6.9Hz，1H)，3.80-3.73(m，2H)，3.55(dd，J＝6.3，3.2Hz，1H)，3.4-3.3(m，2H)，1.23(t，
13
J ＝ 7.2Hz，3H). C NMR(100MHz，MeOD)δ163.78，89.63，83.90(d，JC6，F 171.7Hz，C-6)，
76.83(d，JC5，F 17.8Hz，C-5)，75.43，69.51(d，JC4，F 7.0Hz，C-4)，67.71，42.13，14.74.ES/MS：251.0[M+1].
[0258] 实施例13
[0259] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0260]
[0261] 在0℃下，向(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6，7-二醇(1.19g，3.3mmol)的DMF(18mL)的搅拌溶液中以小批量形式添加NaH(60％，0.5g，13mmol)。在20分钟之后，添加BnBr (1.17mL，9.9mmol)，然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用DCM(100mL)稀释并将DCM萃取物用饱和NaHCO3、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物在硅胶上通过快速柱层析(1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到粘性固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-双(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-N，
1
N-二甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺甲醇(0.805g，45％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.31-7.16(m，10H)，6.19(d，J＝6.7Hz，1H)，4.72(d，J＝12Hz，1H)，
4.60(d，J ＝ 12Hz，1H)，4.57(d，J ＝ 11.4Hz，1H)，4.37-4.32(m，2H)，4.06-4.00(m，1H)，
3.69-3.62(m，2H)，3.60-3.52(m，2H)，2.89(s，6H)，0.80(s，9H)，0.04(s，6H)。
1
N-二甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺甲醇(0.805g，45％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.31-7.16(m，10H)，6.19(d，J＝6.7Hz，1H)，4.72(d，J＝12Hz，1H)，
4.60(d，J ＝ 12Hz，1H)，4.57(d，J ＝ 11.4Hz，1H)，4.37-4.32(m，2H)，4.06-4.00(m，1H)，
3.69-3.62(m，2H)，3.60-3.52(m，2H)，2.89(s，6H)，0.80(s，9H)，0.04(s，6H)。
[0262] 在0℃下，向上述材料(0.80g，1.48mmol)的THF(6mL)溶液中添加1M TBAF溶液(2.25mL，2.25mmol)，然后将混合物在室温下搅拌过夜。用EtOAc(50mL)稀释，将有机层用饱和NH4Cl洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗残余物在硅胶上通过快速柱层析(100％EtOAc)纯化，从而提供白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-双(苄氧基)-2-(二1
甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)甲醇(0.57g，90％)。H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.38-7.28(m，10H)，6.29(d，J＝6.9Hz，1H)，4.79(d，J＝12.1Hz，
1H)，4.69(d，J＝ 12.0Hz，1H)，4.65(d，J ＝ 11.7Hz，1H)，4.55-4.53(m，1H)，4.43(d，J ＝
11.5Hz，1H)，4.24(m，1H)，3.77(d，J＝12.1Hz，1H)，3.69-3.59(m，3H)，3.00(s，6H)。
甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)甲醇(0.57g，90％)。H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.38-7.28(m，10H)，6.29(d，J＝6.9Hz，1H)，4.79(d，J＝12.1Hz，
1H)，4.69(d，J＝ 12.0Hz，1H)，4.65(d，J ＝ 11.7Hz，1H)，4.55-4.53(m，1H)，4.43(d，J ＝
11.5Hz，1H)，4.24(m，1H)，3.77(d，J＝12.1Hz，1H)，3.69-3.59(m，3H)，3.00(s，6H)。
[0263] 在-20℃下，向上述材料(0.673g，1.57mmol)的无水吡啶(8mL)搅拌溶液中分批添加甲磺酰氯(0.180mL，2.32mmol)。在3小时之后，将反应混合物用DCM(20mL)稀释，并将DCM萃取物用饱和NaHCO3(30mL)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将残余吡啶通过与己烷共蒸发而除去。将粗产物通过用100％EtOAc洗提的硅胶柱层析纯化，从而产生白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-双(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)甲磺酸甲酯(0.610g，76.4％)。H NMR(400MHz，CDCl3)7.32-7.18(m，10H)，6.15(d，J ＝ 6.48Hz，1H)，4.68(d，J ＝ 12Hz，1H)，4.57(d，J＝12Hz，1H)，4.53(d，J＝11.5Hz，1H)，4.48-4.45(dd，J＝3.8，2.0Hz，1H)，4.29(d，J＝
11.4Hz，1H)，4.24-4.16(m，3H)，3.73-3.69(m，1H)，3.53-3.50(dt，J ＝ 8.9，1.7Hz，1H)，
2.91(s，6H)，2.90(s，3H)。
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)甲磺酸甲酯(0.610g，76.4％)。H NMR(400MHz，CDCl3)7.32-7.18(m，10H)，6.15(d，J ＝ 6.48Hz，1H)，4.68(d，J ＝ 12Hz，1H)，4.57(d，J＝12Hz，1H)，4.53(d，J＝11.5Hz，1H)，4.48-4.45(dd，J＝3.8，2.0Hz，1H)，4.29(d，J＝
11.4Hz，1H)，4.24-4.16(m，3H)，3.73-3.69(m，1H)，3.53-3.50(dt，J ＝ 8.9，1.7Hz，1H)，
2.91(s，6H)，2.90(s，3H)。
[0264] 向上述材料(0.7g，1.38mmol)的CH3CN(15mL)溶液中添加TBAF(1.13g，7.59mmol)的CH3CN(5mL)溶液，并将混合物加热至回流2.5小时。将溶剂蒸发之后，将残余物通过硅胶柱层析(7∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而提供发泡固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-6，7-双(苄氧基)-5-(氟甲基)-N，N-二甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，
1
2d] 噻 唑 -2- 胺 (0.567g，95 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)7.33-7.18(m，10H)，6.20(d，J＝ 6.5Hz，1H)，4.72(d，J＝ 12Hz，1H)，4.60(d，J＝ 12.6Hz，1H)，4.57(d，J＝ 11.9Hz，
1H)，4.46-4.41(m，2H)，4.34-4.30(m，2H)，4.14(t，J ＝ 3Hz，1H)，3.74-3.64(m，1H)，
3.59-3.55(m，1H)，2.91(s，6H)。
1
2d] 噻 唑 -2- 胺 (0.567g，95 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)7.33-7.18(m，10H)，6.20(d，J＝ 6.5Hz，1H)，4.72(d，J＝ 12Hz，1H)，4.60(d，J＝ 12.6Hz，1H)，4.57(d，J＝ 11.9Hz，
1H)，4.46-4.41(m，2H)，4.34-4.30(m，2H)，4.14(t，J ＝ 3Hz，1H)，3.74-3.64(m，1H)，
3.59-3.55(m，1H)，2.91(s，6H)。
[0265] 在-78℃下，向上述材料(0.56g，1.3mmol)的无水DCM(8mL)溶液中逐滴添加BCl3(在DCM中为1.0M，6.5mL，6.5mmol)。将混合物在-78℃至0℃下搅拌3小时。然后通过在-78℃下添加1∶1的DCM-MeOH溶液(5mL)而使反应淬灭。将混合物缓慢升温至室温。减压蒸发溶剂。将1.3M NH3/MeOH溶液(10mL)添加到残余物中并蒸发。将此再重复一次。
将残余物通过用90∶10的DCM-1.3M NH3-MeOH洗提的硅胶柱层析纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃
1
并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.25g，76.7％)。H NMR(400MHz，CD3OD)6.31(d，J＝6.44Hz，
1H)，4.63-4.50(dd，J ＝ 44.4，3.4Hz，2H)，4.09(t，J ＝ 6.0Hz，1H)，3.92(t，J ＝ 6.9Hz，
13
1H)，3.79-3.69(m，1H)，3.55-3.51(dd，J＝5.4，4.04Hz，1H)，3.01(s，6H)。 C NMR(100MHz，MeOD)δ166.34，92.58，84.50(d，JC6，F 171.2Hz，C-6)，77.09，76.56，76.55，75.72(d，JC5，F
17.7Hz，C-5)，70.73(d，JC4，F 7.12Hz，C-4)，40.97。ES/MS：251.6[M+1]。
将残余物通过用90∶10的DCM-1.3M NH3-MeOH洗提的硅胶柱层析纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃
1
并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.25g，76.7％)。H NMR(400MHz，CD3OD)6.31(d，J＝6.44Hz，
1H)，4.63-4.50(dd，J ＝ 44.4，3.4Hz，2H)，4.09(t，J ＝ 6.0Hz，1H)，3.92(t，J ＝ 6.9Hz，
13
1H)，3.79-3.69(m，1H)，3.55-3.51(dd，J＝5.4，4.04Hz，1H)，3.01(s，6H)。 C NMR(100MHz，MeOD)δ166.34，92.58，84.50(d，JC6，F 171.2Hz，C-6)，77.09，76.56，76.55，75.72(d，JC5，F
17.7Hz，C-5)，70.73(d，JC4，F 7.12Hz，C-4)，40.97。ES/MS：251.6[M+1]。
[0266] 实施例14
[0267] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0268]
[0269] 将(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.7g，3.0mmol)的DCM(40mL)溶液在-78℃下用DAST(2.5g，15.4mmol)处理30分钟。在室温下搅拌过夜之后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭。将有机层分离并将水层用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物通过使用含5％-10％EtOAc的石油醚的硅胶柱而纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，
7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+ 1
2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(580mg，32％)。(ES，m/z)：[M+H]571.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09(d，J＝7.5Hz，4H)，7.60(t，J＝7.8Hz，2H)，7.45(t，J＝7.8Hz，4H)，6.27(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，6.08(s,1H)，5.86-5.92(m，1H)，5.40(d，J ＝ 9.6Hz，1H)，5.12(d，J ＝
9.3Hz，2H)，4.81-4.89(dd，J ＝ 10.0，2.8Hz，1H)，4.63-4.69(m，2H)，4.50-4.54(m，2H)，
3.82-3.98(m，1H)，1.63(s，9H)。
7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+ 1
2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(580mg，32％)。(ES，m/z)：[M+H]571.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09(d，J＝7.5Hz，4H)，7.60(t，J＝7.8Hz，2H)，7.45(t，J＝7.8Hz，4H)，6.27(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，6.08(s,1H)，5.86-5.92(m，1H)，5.40(d，J ＝ 9.6Hz，1H)，5.12(d，J ＝
9.3Hz，2H)，4.81-4.89(dd，J ＝ 10.0，2.8Hz，1H)，4.63-4.69(m，2H)，4.50-4.54(m，2H)，
3.82-3.98(m，1H)，1.63(s，9H)。
[0270] 将上述材料(540mg，0.94mmol)的MeOH(10mL)溶液在室温下用K2CO3(26mg，0.18mmol)处理2小时，然后用AcOH中和。除去挥发物以产生残余物，将其通过用含5％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而产生白色固体形式的((3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁+ 1
基烯丙酯(310mg，86％)。(ES，m/z)：[M+H]363.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.10(d，J＝
6.9Hz，1H)，5.85-5.96(m，1H)，5.11-5.18(m，2H)，4.61(d，J ＝ 2.4Hz，1H)，4.43-4.58(m，
3H)，4.13-4.16(m，1H)，4.04-4.07(m，1H)，3.53-3.63(m，2H)，1.53(s，9H)。
基烯丙酯(310mg，86％)。(ES，m/z)：[M+H]363.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.10(d，J＝
6.9Hz，1H)，5.85-5.96(m，1H)，5.11-5.18(m，2H)，4.61(d，J ＝ 2.4Hz，1H)，4.43-4.58(m，
3H)，4.13-4.16(m，1H)，4.04-4.07(m，1H)，3.53-3.63(m，2H)，1.53(s，9H)。
[0271] 将上述材料(100mg，0.27mmol)的MeOH(6mL)溶液在室温下用无水HCl气体发泡，直至饱和。在另外4小时之后，除去挥发物以产生残余物，将其再溶解在MeOH(5mL)中并用浓NH4OH中和，浓缩并通过用含5％-10％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡+ 1喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(42.7mg，58％)。(ES，m/z)：[M+H]263.0；H NMR(300MHz，D2O)δ6.29(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，5.85-5.96(m，1H)，5.19-5.26(m，1H)，5.09-5.14(m，1H)，
4.63(d，J ＝ 3.3Hz，1H)，4.47(d，J ＝ 3.6Hz，1H)，4.07-4.11(m，1H)，3.95-3.99(m，1H)，
3.86-3.89(m，2H)，3.68-3.79(m，1H)，3.51-3.56(m，1H)。
4.63(d，J ＝ 3.3Hz，1H)，4.47(d，J ＝ 3.6Hz，1H)，4.07-4.11(m，1H)，3.95-3.99(m，1H)，
3.86-3.89(m，2H)，3.68-3.79(m，1H)，3.51-3.56(m，1H)。
[0272] 实施例15
[0273] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0274]
[0275] 在室温和N2气氛下，向(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(500mg，0.88mmol)的1，4-二氧己环(30mL)溶液中添加Pd(PPh3)4(200mg，0.17mmol)、HCO2H(84mg，1.76mmol)和Et3N(177mg，1.76mmol)。在60℃下20分钟之后，将另外的HCO2H(404mg，8.8mmol)添加至反应混合物中。将反应在60℃下再搅拌2小时，然后用H2O(40mL)淬灭，用NaHCO3中和，用DCM(3×50mL)萃取。将合并的有机层浓缩并通过用含10％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而产生白色浆液形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(330mg，71％)。(ES，m/z)：[M+H]+531.0；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.30(d，J＝7.2Hz，2H)，8.06(d，J＝7.2Hz，2H)，7.46-7.66(m，5H)，6.46(d，J＝7.5Hz，
1H)，5.85(s，1H)，5.53(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.71-4.79(m，2H)，4.62(t，J ＝ 2.1Hz，1H)，
3.95-4.03(m，1H)，1.57(s，9H)。
1H)，5.85(s，1H)，5.53(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，4.71-4.79(m，2H)，4.62(t，J ＝ 2.1Hz，1H)，
3.95-4.03(m，1H)，1.57(s，9H)。
[0276] 将上述材料(330mg，0.62mmol)的MeOH(10mL)溶液在室温下用K2CO3(24mg，0.17mmol)处理2小时，然后用AcOH中和。除去挥发物以产生残余物，将其通过用含
2％-5％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，
7aR)-5-(氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基氨基+ 1
甲酸叔丁酯(170mg，85％)。(ES，m/z)：[M+H]323.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.22(d，J＝6.6Hz，1H)，4.67-4.79(m，1H)，4.57-4.66(m，2H)，3.84-3.96(m，2H)，3.70(t，J＝8.4Hz，
1H)，1.52(s，9H)。
2％-5％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，
7aR)-5-(氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基氨基+ 1
甲酸叔丁酯(170mg，85％)。(ES，m/z)：[M+H]323.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.22(d，J＝6.6Hz，1H)，4.67-4.79(m，1H)，4.57-4.66(m，2H)，3.84-3.96(m，2H)，3.70(t，J＝8.4Hz，
1H)，1.52(s，9H)。
[0277] 对上述材料(110mg，0.34mmol)的MeOH(5mL)溶液在室温下用无水HCl气体发泡，直至饱和。在另外3小时之后，除去挥发物以产生残余物，将其用浓NH4OH中和并通过用含10％至20％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(15mg，+ 1
20％)。(ES，m/z)：[M+H]222.9；H NMR(300MHz，D2O)δ6.31(d，J＝6.3Hz，1H)，4.63(d，J＝3.3Hz，1H)，4.47(d，J＝3.6Hz，1H)，4.07(t，J＝5.7Hz，1H)，3.93(t，J＝4.8Hz，1H)，
3.66-3.80(m，2H)，3.51-3.58(m，1H)。
20％)。(ES，m/z)：[M+H]222.9；H NMR(300MHz，D2O)δ6.31(d，J＝6.3Hz，1H)，4.63(d，J＝3.3Hz，1H)，4.47(d，J＝3.6Hz，1H)，4.07(t，J＝5.7Hz，1H)，3.93(t，J＝4.8Hz，1H)，
3.66-3.80(m，2H)，3.51-3.58(m，1H)。
[0278] 实施例16
[0279] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0280]
[0281] 在-78℃下，将(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(100mg，0.2mmol)的DCM(10mL)溶液用DAST(137mg，0.8mmol)处理30分钟。在室温下搅拌过夜之后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭，用DCM(3×10mL)萃取，用盐水(10mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，从而产生白色浆液形式的粗产物(80mg)，将其溶解在MeOH(5mL)中且在室温下用K2CO3(10mg，0.07mmol)处理3小时。将反应混合物用AcOH中和并浓缩。通过用含5％-10％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化残余物，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，
7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6，7-二醇(10mg，基于两步骤为17％)。(ES，m/z)：[M+H]+263.0；1H NMR(300MHz，D2O)δ6.30(d，J＝ 6.3Hz，1H)，4.49-4.69(dd，J＝ 57，3.3Hz，1H)，4.11-4.15(m，1H)，3.93-4.01(m，5H)，
3.70-3.82(m，1H)，3.59-3.69(m，1H)，2.24-2.34(m，2H)。
7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6，7-二醇(10mg，基于两步骤为17％)。(ES，m/z)：[M+H]+263.0；1H NMR(300MHz，D2O)δ6.30(d，J＝ 6.3Hz，1H)，4.49-4.69(dd，J＝ 57，3.3Hz，1H)，4.11-4.15(m，1H)，3.93-4.01(m，5H)，
3.70-3.82(m，1H)，3.59-3.69(m，1H)，2.24-2.34(m，2H)。
[0282] 以下实施例是根据与上面概述的方案和实例例类似的程序而合成的。
[0283] 表4
[0284]
[0285] 实施例19
[0286] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0287]
[0288] 向((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-二羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.01g，14.4mmol)的DMF(25mL)溶液中添加咪唑(1.57g，23.1mmol)和TBDMSCl(2.82g，21.7mmol)。将在室温下搅拌30小时的反应混合物用EtOAc (100mL)稀释。将有机物用饱和NH4Cl、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯
1
(5.08g，76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.12(d，J＝6.7Hz，1H)，4.25(t，J＝6.2Hz，1H)，
4.16(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，4.10-4.04(m，2H)，3.91-3.85(m，3H)，3.65-3.62(m，1H)，1.55(s，
9H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，0.89(s，9H)，0.08(s，6H)。
1
(5.08g，76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.12(d，J＝6.7Hz，1H)，4.25(t，J＝6.2Hz，1H)，
4.16(t，J ＝ 6.4Hz，1H)，4.10-4.04(m，2H)，3.91-3.85(m，3H)，3.65-3.62(m，1H)，1.55(s，
9H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)，0.89(s，9H)，0.08(s，6H)。
[0289] 在0℃下，向上述材料(1.0g，2.2mmol)的吡啶(20mL)溶液中添加DMAP(0.024g，0.20mmol)，然后缓慢添加BzCl(2.0mL，17.6mmol)。将混合物升温至室温并搅拌过夜。将反应用EtOAc(50mL)稀释，用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。将有机萃取物用无水Na2SO4干燥并减压浓缩。将残余吡啶与己烷共蒸发，并将粗残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶5的EtOAc/己烷)分离，从而产生白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃
1
并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.05g，71.3％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(m，
2H)，7.99(m，2H)，7.61-7.52(m，2H)，7.47-7.38(m，4H)，6.12(d，J＝5.6Hz，1H)，5.89(dd，J＝1.5，1.4Hz，1H)，5.39(m，1H)，4.46(ddd，J＝5.5，2.9，0.96Hz，1H)，3.96(m，2H)，3.80(m，
1H)，3.75-3.70(m，2H)，1.54(s，9H)，1.18(t，J ＝ 5.5Hz，3H)，0.83(s，9H)，0.01(s，3H)，
0.03(s，3H)。
1
并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.05g，71.3％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(m，
2H)，7.99(m，2H)，7.61-7.52(m，2H)，7.47-7.38(m，4H)，6.12(d，J＝5.6Hz，1H)，5.89(dd，J＝1.5，1.4Hz，1H)，5.39(m，1H)，4.46(ddd，J＝5.5，2.9，0.96Hz，1H)，3.96(m，2H)，3.80(m，
1H)，3.75-3.70(m，2H)，1.54(s，9H)，1.18(t，J ＝ 5.5Hz，3H)，0.83(s，9H)，0.01(s，3H)，
0.03(s，3H)。
[0290] 在0℃下，向上述材料(3.2g，4.8mmol)的无水MeOH(30mL)溶液中添加AcCl(0.07mL，1.0mmol)。将反应混合物在该温度下搅拌30分钟，然后室温下过夜。将反应混合物用DCM(30mL)稀释并用10％NaHCO3水溶液中和。将DCM层用盐水进一步洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱层析(3∶7的EtOAc/己烷)纯化，从而提供发泡固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(2.4g，90％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(m，2H)，8.01(m，2H)，7.58-7.53(m，2H)，7.47-7.39(m，4H)，
6.14(d，J＝7.0Hz，1H)，5.93(dd，J＝1.9，1.8Hz，1H)，5.34(m，1H)，4.49(ddd，J＝6.8，
3.6，0.96Hz，1H)，4.03-3.92(m，2H)，3.80-3.65(m，3H)，1.53(s，9H)，1.19(t，J ＝ 6.9Hz，
3H)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(m，2H)，8.01(m，2H)，7.58-7.53(m，2H)，7.47-7.39(m，4H)，
6.14(d，J＝7.0Hz，1H)，5.93(dd，J＝1.9，1.8Hz，1H)，5.34(m，1H)，4.49(ddd，J＝6.8，
3.6，0.96Hz，1H)，4.03-3.92(m，2H)，3.80-3.65(m，3H)，1.53(s，9H)，1.19(t，J ＝ 6.9Hz，
3H)。
[0291] 在0℃下，向上述材料(1.0g，1.8mmol)的无水DCM(25mL)溶液中添加无水吡啶(0.30mL，3.7mmol)，然后添加DMP(1.14g，2.69mmol)。将反应在0℃下搅拌10分钟并在室温下接着搅拌1.5小时。将反应混合物用1M Na2S2O3/饱和NaHCO3(30mL，1∶1)稀释，并搅拌10分钟。将DCM层分离，用无水Na2SO4干燥并浓缩，从而产生粗发泡固体(3aR，5S，6S，7R，
7aR)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.0g粗产物)。在未经任何进一步纯化的情况下将产物转入
1
下一反应。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.71(s，1H)，8.04(m，4H)，7.58(m，2H)，7.47-7.39(m，
4H)，6.14(d，J＝6.24Hz，1H)，6.01(dd，J＝1.8，1.3Hz，1H)，5.53-5.51(m，1H)，4.38(ddd，J＝6.2，3.2，1.2Hz，1H)，4.27(d，J＝7.3Hz，1H)，4.0-3.9(m，2H)，1.53(s，9H)，1.15(t，J＝6.8Hz，3H)。
7aR)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.0g粗产物)。在未经任何进一步纯化的情况下将产物转入
1
下一反应。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.71(s，1H)，8.04(m，4H)，7.58(m，2H)，7.47-7.39(m，
4H)，6.14(d，J＝6.24Hz，1H)，6.01(dd，J＝1.8，1.3Hz，1H)，5.53-5.51(m，1H)，4.38(ddd，J＝6.2，3.2，1.2Hz，1H)，4.27(d，J＝7.3Hz，1H)，4.0-3.9(m，2H)，1.53(s，9H)，1.15(t，J＝6.8Hz，3H)。
[0292] 将上述材料(1.0g，粗产物)放入DCM(30mL)中并冷却至-78℃。滴加DAST(1mL，7.7mmol)，同时在-78℃下搅拌。在添加之后，除去冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用饱和NaHCO3溶液(15mL)稀释。将DCM层分离，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱层析(1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而提供发泡固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.413g，40％))。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(m，2H)，8.0(m，2H)，7.60-7.53(m，2H)，7.46-7.39(m，4H)，6.13(d，J＝7.0Hz，
1H)，5.94(m，1H)，5.93(td，J＝54.08，2.9Hz，1H)，5.59-5.56(m，1H)，4.55-4.52(ddd，J＝
7.0，3.4，1.3Hz，1H)，3.98-3.86(m，3H)，1.55(s，9H)，1.17(t，J＝6.9Hz，3H)。
1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.413g，40％))。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(m，2H)，8.0(m，2H)，7.60-7.53(m，2H)，7.46-7.39(m，4H)，6.13(d，J＝7.0Hz，
1H)，5.94(m，1H)，5.93(td，J＝54.08，2.9Hz，1H)，5.59-5.56(m，1H)，4.55-4.52(ddd，J＝
7.0，3.4，1.3Hz，1H)，3.98-3.86(m，3H)，1.55(s，9H)，1.17(t，J＝6.9Hz，3H)。
[0293] 在0℃下，向上述材料(0.41g，0.71mmol)的无水MeOH(20mL)搅拌溶液中添加K2CO3(0.050g，0.36mmol)。将反应混合物升温至室温并搅拌1.5小时。将AcOH(0.5mL)添加至反应混合物中并将内容物浓缩。将粗残余物通过硅胶柱层析(1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而提供发泡状固体形式的((3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，1
7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.24g，91.6％)。H NMR(400MHz，MeOD)δ6.03(d，J＝6.6Hz，1H)，5.93(td，J＝54.5，2.6Hz，1H)，4.19(m，1H)，
4.11(t，J ＝ 4.3Hz，1H)，3.96-3.87(m，2H)，3.82(dd，J ＝ 4.7，4.4Hz，1H)，3.56-3.47(m，
1H)，1.53(s，9H)，1.16(t，J＝6.9Hz，3H)。
7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.24g，91.6％)。H NMR(400MHz，MeOD)δ6.03(d，J＝6.6Hz，1H)，5.93(td，J＝54.5，2.6Hz，1H)，4.19(m，1H)，
4.11(t，J ＝ 4.3Hz，1H)，3.96-3.87(m，2H)，3.82(dd，J ＝ 4.7，4.4Hz，1H)，3.56-3.47(m，
1H)，1.53(s，9H)，1.16(t，J＝6.9Hz，3H)。
[0294] 将上述材料(0.24g，0.65mmol)在0℃下放入30％TFA/DCM (10mL)中，在该温度下搅拌1小时并在接下来1小时内缓慢升温至室温。将反应混合物蒸发至干燥。将残余物用2M NH3/MeOH溶液(5mL)中和并通过硅胶柱层析(95∶5的DCM/MeOH)纯化，从而提供白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.166g，95.2％)。H NMR(400MHz，MeOD)δ6.41(d，J＝
6.4Hz，1H)，6.00(td，J＝54.4，1.9Hz，1H)，4.22(t，J＝5.9Hz，1H)，4.01(t，J＝4.6Hz，
13
1H)，3.76-3.70(m，2H)，3.37-3.33(m，2H)，1.21(t，J＝7.2Hz，3H).)。C NMR(100MHz，MeOD)δ167.35，116.25(t，JC6，F 242.0Hz，C-6)，89.10，75.42(t，J ＝ 21.0Hz)，74.74，71.24，
69.96(t，J＝4.0Hz，C-4)，41.61，15.09。ES/MS：269.1[M+1]。
1
喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.166g，95.2％)。H NMR(400MHz，MeOD)δ6.41(d，J＝
6.4Hz，1H)，6.00(td，J＝54.4，1.9Hz，1H)，4.22(t，J＝5.9Hz，1H)，4.01(t，J＝4.6Hz，
13
1H)，3.76-3.70(m，2H)，3.37-3.33(m，2H)，1.21(t，J＝7.2Hz，3H).)。C NMR(100MHz，MeOD)δ167.35，116.25(t，JC6，F 242.0Hz，C-6)，89.10，75.42(t，J ＝ 21.0Hz)，74.74，71.24，
69.96(t，J＝4.0Hz，C-4)，41.61，15.09。ES/MS：269.1[M+1]。
[0295] 将上述材料的样品(13.0g，48.5mmol，通过具有UV检测的LCMS在220nm下测出纯度为97％)溶解至沸腾的EtOAc(70mL)中，然后滴加己烷(约20mL)，直至出现一些固体。使所得溶液冷却至室温。收集固体，从而得到(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(10.6g，通过具有UV检测的LCMS在220nm下测出纯度为98.3％)。该材料表现出与上述对该化合物所述的那些相同的光谱特性。
[0296] 实施例20
[0297] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0298]
[0299] 向(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.944g，3.8mmol)的DMF(5mL)溶液添中加咪唑(0.8g，12mmol)和TBDMSCl(0.75g，4.97mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时并使用高真空浓缩。将粗残余物在硅胶上通过快速柱层析(95∶5的DCM/MeOH)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2(二
1
甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.76g，55.2％)。H NMR(400MHz，MeOD)δ6.31(d，J＝6.4Hz，1H)，4.06(t，J＝6.1Hz，1H)，3.92-3.88(m，2H)，
3.81-3.76(dd，J ＝ 11.4，5.7Hz，1H)，3.62-3.58(m，1H)，3.52-3.48(dd，J ＝ 9.3，5.5Hz，
1H)，3.02(s，6H)，0.93(s，9H)，0.10(s，6H)。
1
甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.76g，55.2％)。H NMR(400MHz，MeOD)δ6.31(d，J＝6.4Hz，1H)，4.06(t，J＝6.1Hz，1H)，3.92-3.88(m，2H)，
3.81-3.76(dd，J ＝ 11.4，5.7Hz，1H)，3.62-3.58(m，1H)，3.52-3.48(dd，J ＝ 9.3，5.5Hz，
1H)，3.02(s，6H)，0.93(s，9H)，0.10(s，6H)。
[0300] 在0℃ 下，向上 述 材料(0.84g，2.31mmol)的 吡 啶(10mL)溶 液中 添 加DMAP(0.028g，0.23mmol)，然后缓慢添加BzCl(1.6mL，13.8mmol)。将混合物升温至室温并搅拌过夜。将反应用EtOAc(50mL)稀释，用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。将有机萃取物用无水Na2SO4干燥并减压浓缩。将残余吡啶与己烷共蒸发并将粗残余物在硅胶上通过快速柱层析(2∶3的EtOAc/己烷)分离，从而产生发泡白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，1
2d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.9g，68.4％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04-8.01(m，
4H)，7.53-7.47(m，2H)，7.40-7.32(m，4H)，6.36(d，J ＝ 5.2Hz，1H)，5.81(t，J ＝ 2.4Hz，
1H)，5.35-5.33(dd，J ＝ 7.1，0.9Hz，1H)，4.59(t，J ＝ 4.2Hz，1H)，3.92-3.89(m，1H)，
3.80-3.73(m，2H)，3.05(s，6H)，0.83(s，9H)，0.01(s，6H)。
2d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.9g，68.4％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04-8.01(m，
4H)，7.53-7.47(m，2H)，7.40-7.32(m，4H)，6.36(d，J ＝ 5.2Hz，1H)，5.81(t，J ＝ 2.4Hz，
1H)，5.35-5.33(dd，J ＝ 7.1，0.9Hz，1H)，4.59(t，J ＝ 4.2Hz，1H)，3.92-3.89(m，1H)，
3.80-3.73(m，2H)，3.05(s，6H)，0.83(s，9H)，0.01(s，6H)。
[0301] 在0℃下，向上述材料(0.88g，1.54mmol)的无水MeOH(6mL)溶液中添加AcCl(0.054mL，0.77mmol)。将反应混合物在该温度下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物用DCM (30mL)稀释并用10％NaHCO3水溶液中和。将DCM层用盐水进一步洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱层析(1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而提供发泡固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，
1
6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并-[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.57g，81％))。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-8.01(m，4H)，7.55-7.49(m，2H)，7.41-7.37(m，4H)，6.36(d，J＝
6.5Hz，1H)，5.84-5.83(dd，J＝4.3，3.0Hz，1H)，5.32-5.28(m，1H)，4.57(t，J＝5.2Hz，1H)，
3.92-3.88(m，1H)，3.78-3.75(dd，J＝12.4，2.5Hz，1H)，3.70-3.65(dd，J＝12.4，5.4Hz，
1H)，3.03(s，6H)。
1
6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并-[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.57g，81％))。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-8.01(m，4H)，7.55-7.49(m，2H)，7.41-7.37(m，4H)，6.36(d，J＝
6.5Hz，1H)，5.84-5.83(dd，J＝4.3，3.0Hz，1H)，5.32-5.28(m，1H)，4.57(t，J＝5.2Hz，1H)，
3.92-3.88(m，1H)，3.78-3.75(dd，J＝12.4，2.5Hz，1H)，3.70-3.65(dd，J＝12.4，5.4Hz，
1H)，3.03(s，6H)。
[0302] 在0℃下，向上述材料(0.57g，1.25mmol)的无水DCM(10mL)溶液中添加DMP(0.8g，1.88mmol)。当起始材料完全消耗时，将反应在0℃下搅拌10分钟并在室温下接着搅拌1.5小时。将反应混合物用1∶1的1M Na2S2O3：饱和NaHCO3(30mL)稀释并搅拌10分钟。将DCM层分离，用无水Na2SO4干燥并浓缩，从而产生含有(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯的粗发泡固体(0.56g粗产物)。在未经任何进一步纯化的情况下，将粗产物转入下一反应。
[0303] 将上述材料(0.56g，粗产物)放入DCM(10mL)中，并冷却至-78℃。滴加DAST(0.72mL，5.5mmol)，同时在-78℃下搅拌。在添加之后，除去冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用饱和NaHCO3溶液(15mL)稀释。将DCM层分离，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱层析(1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而提供发泡固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并
1
[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.330g，基于2个步骤为55.2％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06-8.01(m，4H)，7.57-7.53(m，2H)，7.44-7.39(m，4H)，6.38(d，J＝ 5.3Hz，1H)，
5.99-5.77(m，1H)，5.85(m，1H)，5.54(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.66-4.64(m，1H)，4.06-4.01(m，
1H)，3.06(s，6H)。
1
[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.330g，基于2个步骤为55.2％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06-8.01(m，4H)，7.57-7.53(m，2H)，7.44-7.39(m，4H)，6.38(d，J＝ 5.3Hz，1H)，
5.99-5.77(m，1H)，5.85(m，1H)，5.54(d，J ＝ 6.8Hz，1H)，4.66-4.64(m，1H)，4.06-4.01(m，
1H)，3.06(s，6H)。
[0304] 在0℃下，向上述材料(0.33g，0.69mmol)的无水MeOH(8mL)搅拌溶液中添加K2CO3(0.073g，0.53mmol)。将反应混合物升温至室温并搅拌1.5小时。将AcOH(0.5mL)添加至反应混合物中并将内容物浓缩。将由此获得的AcOH盐用2M NH3/MeOH溶液(8mL)处理并再次浓缩。将残余物通过硅胶柱层析(9∶1的DCM/MeOH)纯化，从而提供发泡状固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.1g，54％)。HNMR(400MHz，MeOD)δ6.31(d，J＝6.4Hz，
1H)，5.98(td，J ＝ 54.1，2.0Hz，1H)，4.20(t，J ＝ 5.6Hz，1H)，4.04(t，J ＝ 4.7Hz，1H)，
13
3.78-3.66(m，2H)，3.03(s，6H)。 C NMR(100MHz，MeOD)δ166.20，116.56(t，JC6，F 241.2Hz，C-6)，91.41，77.21，75.57，75.04(t，J＝21.0Hz)，70.68(t，J＝3.3Hz，C-4)，41.17。ES/MS：269.1[M+1]。
喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(0.1g，54％)。HNMR(400MHz，MeOD)δ6.31(d，J＝6.4Hz，
1H)，5.98(td，J ＝ 54.1，2.0Hz，1H)，4.20(t，J ＝ 5.6Hz，1H)，4.04(t，J ＝ 4.7Hz，1H)，
13
3.78-3.66(m，2H)，3.03(s，6H)。 C NMR(100MHz，MeOD)δ166.20，116.56(t，JC6，F 241.2Hz，C-6)，91.41，77.21，75.57，75.04(t，J＝21.0Hz)，70.68(t，J＝3.3Hz，C-4)，41.17。ES/MS：269.1[M+1]。
[0305] 实施例21
[0306] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0307]
[0308] 将含丙-2-烯-1-胺(9.2g，0.16mol)和(2S，3R，4R，5S，6R)-6-(乙酰氧基甲基)-3-异硫氰酸四氢-2H-吡喃-2，4，5-三基三乙酸酯(60g，0.154mol)的DCM(300mL)的混合物在室温下搅拌1小时，然后添加TFA(88g，0.77mol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜，用pH 8的NaHCO3水溶液淬灭，并用DCM(3×300mL)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥并冷凝，从而产生残余物，将其通过用含1％至2％MeOH的DCM的硅胶柱纯化，从而产生黄色液体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(乙酰氧基甲基)-2-(烯丙基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6，7-二基二乙酸酯(58g，84％)。+ 1
(ES，m/z)：[M+H]387.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.33(d，J＝ 6.6Hz，1H)，5.84-5.96(m，
1H)，5.32-5.44(m，4H)，4.98-5.04(m，1H)，4.37(t，J ＝ 5.7Hz，1H)，4.28-4.22(m，2H)，
3.92-3.95(m，3H)，2.14(s，3H)，2.12(s，3H)，2.11(s，3H)。
(ES，m/z)：[M+H]387.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.33(d，J＝ 6.6Hz，1H)，5.84-5.96(m，
1H)，5.32-5.44(m，4H)，4.98-5.04(m，1H)，4.37(t，J ＝ 5.7Hz，1H)，4.28-4.22(m，2H)，
3.92-3.95(m，3H)，2.14(s，3H)，2.12(s，3H)，2.11(s，3H)。
[0309] 将上述材料(50g，0.13mol)的MeOH(300mL)溶液在室温下用K2CO3(3.6g，0.26mol)处理过夜，然后添加Boc2O(56g，0.26mol)和Et3N(19.6g，0.19mol)。在另外2小时之后，将所得溶液浓缩，从而产生残余物，将其通过用含5％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而产生油形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-二羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙酯(42g，在两个步骤中为90％)。(ES，+ 1m/z)：[M+H]361.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.14(d，J ＝ 6.9Hz，1H)，5.84-5.96(m，1H)，
5.22-5.44(m，4H)，4.37-4.38(m，1H)，4.22-4.28(m，2H)，3.92-3.95(m，3H)，1.54(s，9H)。
5.22-5.44(m，4H)，4.37-4.38(m，1H)，4.22-4.28(m，2H)，3.92-3.95(m，3H)，1.54(s，9H)。
[0310] 将含TBDMSCl(26g，0.17mmol)、DMAP(1.4g，0.01mol)、Et3N(23.5g，0.23mmol)和上述材料(42g，0.12mol)的DCM(300mL)的混合物在40℃下搅拌过夜。将反应混合物由饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭并冷凝，从而产生残余物，将其通过用含1％至2％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而产生浅黄色浆液形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)氨基甲+ 1酸叔丁基烯丙酯(48g，87％)。(ES，m/z)：[M+H]474.9；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.16(d，J＝ 6.6Hz，1H)，5.84-5.93(m，1H)，5.22-5.32(m，4H)，4.65-4.67(m，1H)，4.26-4.31(m，1H)，
4.20-4.22(m，1H)，3.84-3.88(m，3H)，1.54(s，9H)，0.93(s，9H)，0.09(s，6H)。
4.20-4.22(m，1H)，3.84-3.88(m，3H)，1.54(s，9H)，0.93(s，9H)，0.09(s，6H)。
[0311] 将0℃的含BzCl(11.1g，79mmol)、DMAP(322mg，2.63mmol)、吡啶(20.8g，263mmol)和上述材料(12.5g，26.3mmol)的DCM(150mL)的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(200mL)淬灭，用DCM(3×100mL)萃取，用盐水(3×50mL)洗涤，用无水MgSO4干燥并冷凝以产生残余物，将其通过使用含10％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，得到白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二+ 1苯甲酸酯(16.5g，78％)。(ES，m/z)：[M+H]683.1；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.10(m，
4H)，7.56-7.61(m，2H)，7.42-7.47(m，4H)，6.27(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，5.99-6.02(m，2H)，
5.86-5.92(m，1H)，5.43-5.46(m，1H)，5.10-5.18(m，2H)，4.81-4.89(m，1H)，4.56-4.62(m，
2H)，3.76-3.87(m，3H)，1.56(s，9H)，0.88(s，9H)，0.04(s，6H)。
4H)，7.56-7.61(m，2H)，7.42-7.47(m，4H)，6.27(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，5.99-6.02(m，2H)，
5.86-5.92(m，1H)，5.43-5.46(m，1H)，5.10-5.18(m，2H)，4.81-4.89(m，1H)，4.56-4.62(m，
2H)，3.76-3.87(m，3H)，1.56(s，9H)，0.88(s，9H)，0.04(s，6H)。
[0312] 将上述材料(7.0g，10.3mmol)的MeOH(50mL)溶液在室温下用AcCl(0.5mL，0.07mmol)处理3小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和水(200mL)淬灭，用DCM(3×50mL)萃取，用无水MgSO4干燥并真空浓缩以产生残余物，将其通过使用含10％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，从而产生白色浆液形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻+ 1
唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.7g，29％)。(ES，m/z)：[M+H]569.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.06-8.09(m，4H)，7.60-7.63(m，2H)，7.43-7.58(m，4H)，6.26(d，J ＝ 6.9Hz，1H)，
6.06-6.27(m，2H)，5.37-5.41(d，J ＝ 8.4Hz，1H)，5.11-5.28(m，2H)，4.82-4.84(m，1H)，
4.56-4.62(m，2H)，3.71-3.86(m，3H)，1.56(s，9H)。
唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.7g，29％)。(ES，m/z)：[M+H]569.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.06-8.09(m，4H)，7.60-7.63(m，2H)，7.43-7.58(m，4H)，6.26(d，J ＝ 6.9Hz，1H)，
6.06-6.27(m，2H)，5.37-5.41(d，J ＝ 8.4Hz，1H)，5.11-5.28(m，2H)，4.82-4.84(m，1H)，
4.56-4.62(m，2H)，3.71-3.86(m，3H)，1.56(s，9H)。
[0313] 将上述材料(1.5g，2.6mmol)的DCM(30mL)溶液在室温下用DMP(1.7g，4.0mmol)处理2小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和饱和Na2S2O3水溶液(10mL)淬灭，用DCM(3×50mL)萃取，用Na2SO4干燥并真空浓缩以产生残余物，将其通过使用含30％EtOAc的石油醚的短硅胶柱而纯化，从而得到粗醛(1.3g)，将其溶解在DCM(20mL)中并在-78℃下用DAST(1.5g，9.3mmol)处理。在室温下搅拌过夜之后，将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液(50mL)淬灭，用DCM(3×50mL)萃取，用Na2SO4干燥并真空浓缩以产生残余物，将其通过使用含10％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+ 1
2d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(650mg，43％)。(ES，m/z)：[M+H]589.0；H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.03-8.13(m，4H)，7.56-7.61(m，2H)，7.48-7.51(m，4H)，6.11-6.14(d，J ＝
8.7Hz，1H)，5.95-6.09(td，J ＝ 54.3Hz，2.8Hz，1H)，5.19-5.25(m，2H)，4.44-4.45(m，2H)，
4.31-4.36(m，2H)，4.10-4.18(m，2H)，1.53(s，9H)。
2d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(650mg，43％)。(ES，m/z)：[M+H]589.0；H NMR(300MHz，CDCl3)，δ8.03-8.13(m，4H)，7.56-7.61(m，2H)，7.48-7.51(m，4H)，6.11-6.14(d，J ＝
8.7Hz，1H)，5.95-6.09(td，J ＝ 54.3Hz，2.8Hz，1H)，5.19-5.25(m，2H)，4.44-4.45(m，2H)，
4.31-4.36(m，2H)，4.10-4.18(m，2H)，1.53(s，9H)。
[0314] 将上述材料(200mg，0.34mmol)的MeOH(15mL)溶液在室温下用K2CO3(10mg，0.07mmol)处理3小时。将反应混合物用乙酸中和并冷凝以产生残余物，将其通过使用含1％至2％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而产生黄色油形式的((3aR，5S，6S，7R，
7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)+ 1
氨基甲酸叔丁基烯丙酯(150mg，76％)。(ES，m/z)：[M+H]381.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.13(d，J ＝ 8.7Hz，1H)，5.95-6.09(m，1H)，5.19-5.25(m，2H)，4.44-4.45(m，2H)，
4.31-4.36(m，2H)，4.10-4.18(m，2H)，1.53(s，9H)。
7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)+ 1
氨基甲酸叔丁基烯丙酯(150mg，76％)。(ES，m/z)：[M+H]381.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.13(d，J ＝ 8.7Hz，1H)，5.95-6.09(m，1H)，5.19-5.25(m，2H)，4.44-4.45(m，2H)，
4.31-4.36(m，2H)，4.10-4.18(m，2H)，1.53(s，9H)。
[0315] 将上述材料(150mg，0.39mmol)的DCM(18mL)溶液在室温下用TFA(1.8mL)处理过夜。将反应混合物冷凝以产生残余物，将其用NH4OH(0.5mL，25％至28％，w/v)中和，通过下列条件的制备HPLC纯化[(Agilent 1200 prep HPLC)；柱：Sun Fire Prep C18，19*50mm5μm；移动相：含有0.03％NH4OH和CH3CN(10％CH3CN，10分钟内达到45％)的水；检测器：
UV 220nm]，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(二氟甲+
基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(16.6mg，15％)。[M+H]281.0；
1
H NMR(300MHz，D2O)δ6.20(d，J＝6.3Hz，1H)，6.14-6.16(m，1H)，5.74-5.78(t，J＝2.7Hz，
1H)，5.04-5.10(m，2H)，4.20-4.24(t，J ＝ 6.0Hz，1H)，4.04-4.07(t，J ＝ 4.2Hz，1H)，
3.66-3.86(m，4H)。
UV 220nm]，从而产生白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基氨基)-5-(二氟甲+
基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(16.6mg，15％)。[M+H]281.0；
1
H NMR(300MHz，D2O)δ6.20(d，J＝6.3Hz，1H)，6.14-6.16(m，1H)，5.74-5.78(t，J＝2.7Hz，
1H)，5.04-5.10(m，2H)，4.20-4.24(t，J ＝ 6.0Hz，1H)，4.04-4.07(t，J ＝ 4.2Hz，1H)，
3.66-3.86(m，4H)。
[0316] 实施例22
[0317] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0318]
[0319] 在N2氛围和10℃下，向(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(900mg，1.53mmol)的1，4-二氧己环(30mL)溶液中添加Pd(PPh3)4(347mg，0.30mmol)、HCO2H(384mg，8.35mmol)和Et3N(846mg，8.38mmol)。在60℃下20分钟之后，添加另外的HCO2H(1.4g，30.3mmol)。在60℃下搅拌过夜之后，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭，用DCM(3×30mL)萃取，用无水MgSO4干燥并减压浓缩，从而得到残余物，将其通过使用含10％EtOAc的己烷洗提的硅胶柱纯化，从而产生白色浆液形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]+ 1
噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(600mg，72％)。(ES，m/z)：[M+H]549.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.07-8.14(m，4H)，7.60-7.65(m，2H)，7.51-7.59(m，4H)，6.34(d，J ＝ 8.7Hz，
1H)，5.82-6.20(td，J ＝ 54.0Hz，2.7Hz，1H)，5.83-5.85(m，1H)，5.61-5.64(m，1H)，
4.59-4.63(m，1H)，4.05-4.18(m，1H)，1.53(s，9H)。
噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(600mg，72％)。(ES，m/z)：[M+H]549.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.07-8.14(m，4H)，7.60-7.65(m，2H)，7.51-7.59(m，4H)，6.34(d，J ＝ 8.7Hz，
1H)，5.82-6.20(td，J ＝ 54.0Hz，2.7Hz，1H)，5.83-5.85(m，1H)，5.61-5.64(m，1H)，
4.59-4.63(m，1H)，4.05-4.18(m，1H)，1.53(s，9H)。
[0320] 将上述材料(600mg，1.1mmol)的MeOH(50mL)溶液在室温下用K2CO3(45mg，0.33mmol)处理3小时。将反应混合物通过添加AcOH而中和，并冷凝以产生残余物，将其通过使用含1％至5％MeOH的DCM 洗提的硅胶柱纯化，从而产生固体形式的(3aR，5S，6S，
7R，7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基氨+ 1
基甲酸叔丁酯(300mg，81％)。(ES，m/z)：[M+H]341.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.17(d，J＝6.6Hz，1H)，5.85-6.21(td，J＝51.6Hz，2.7Hz，1H)，3.84-4.16(m，4H)，1.56(s，9H)。
7R，7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基氨+ 1
基甲酸叔丁酯(300mg，81％)。(ES，m/z)：[M+H]341.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.17(d，J＝6.6Hz，1H)，5.85-6.21(td，J＝51.6Hz，2.7Hz，1H)，3.84-4.16(m，4H)，1.56(s，9H)。
[0321] 将上述材料(135mg，0.4mmol)的DCM(10mL)溶液在室温下用TFA(1mL)处理过夜。除去溶剂产生残余物，将其溶解在MeOH(5mL)中并用浓NH4OH(0.5mL，25％至28％，w/v)中和。通过下列条件的制备HPLC浓缩并纯化[(Agilent 1200)；柱，X-Bridge C18；移动相：
含有0.05％NH4OH和CH3CN(5％CH3CN，在10分钟内达到20％)的50mmol/L的NH4HCO3水溶液；检测器：UV 220nm]，得到白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(二氟甲+
基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6，7-二醇(26.7mg，27％)。[M+H]240.9；
1
H NMR(CD3OD，300MHz)δ6.28(d，J＝6.3Hz，1H)，5.50-6.14(td，J＝54.3Hz，2.1Hz，1H)，
4.16-4.20(m，1H)，4.02-4.05(t，J＝4.5Hz，1H)，3.74-3.80(m，1H)，3.63-3.71(m，1H)。
含有0.05％NH4OH和CH3CN(5％CH3CN，在10分钟内达到20％)的50mmol/L的NH4HCO3水溶液；检测器：UV 220nm]，得到白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-氨基-5-(二氟甲+
基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6，7-二醇(26.7mg，27％)。[M+H]240.9；
1
H NMR(CD3OD，300MHz)δ6.28(d，J＝6.3Hz，1H)，5.50-6.14(td，J＝54.3Hz，2.1Hz，1H)，
4.16-4.20(m，1H)，4.02-4.05(t，J＝4.5Hz，1H)，3.74-3.80(m，1H)，3.63-3.71(m，1H)。
[0322] 实施例23
[0323] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(丙-2-炔基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0324]
[0325] 将(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-5(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(800mg，1.46mmol)和3-溴丙-1-炔(538mg，4.56mmol)的DMF(15mL)溶液在室温下用K2CO3(125mg，0.91mmol)处理过夜。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(30mL)淬灭，用DCM(3×10mL)萃取，用盐水(3×10mL)洗涤，用无水MgSO4干燥并冷凝从而产生残余物，将其通过使用含10％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，从而产生含有浅黄色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(叔丁氧基羰基(丙-2-炔基)氨基)-5(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯的混合物(210mg)，将其在未进一步纯化的情况下用于下一步骤。(ES，m/z)：+
[M+H]587.0。
[M+H]587.0。
[0326] 将上述混合物(210mg，0.36mmol)的MeOH(10mL)溶液在25℃下用K2CO3(14.8mg，0.11mmol)处理2小时，然后用AcOH中和。除去挥发物得到残余物，将其通过使用含20％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，从而产生含有(3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基(丙-2-炔基)氨基甲酸叔丁酯+
的混合物(125mg)。(ES，m/z)：[M+H]379.0。
的混合物(125mg)。(ES，m/z)：[M+H]379.0。
[0327] 将上述混合物(50mg，0.1mmol)的THF(10mL)溶液在10℃下用MeMgCl(0.3mL，1mmol，在THF中为3M)处理过夜。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1mL)淬灭，并冷凝以产生残余物，将其溶解在含10％MeOH的DCM中并通过短硅胶柱过滤。由下列条件的制备HPLC浓缩并纯化[(Agilent 1200 prep HPLC)；柱，Sun Fire Prep C18*50mm 5μm；移动相，含有CH3CN(40％CH3CN，在5分钟内达到60％)的H2O；检测器：UV 220nm]，从而得到(3aR，
5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(丙-2-炔基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+
2-d]噻唑-6，7-二醇(22mg，通过HPLC为较快移动的异构体)。(ES，m/z)：[M+H]279.0；
1
H NMR(300MHz，DMSO)δ7.37(宽，1H)，6.21(d，J＝6.3Hz，1H)，5.76-6.28(td，J＝53.7Hz，
2.1Hz，1H)，5.27(d，J ＝ 4.5Hz，1H)，4.96-4.98(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，4.05-4.09(m，1H)，
3.85-3.99(m，3H)，3.51-3.60(m，2H)，3.13(s，1H)。
5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(丙-2-炔基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+
2-d]噻唑-6，7-二醇(22mg，通过HPLC为较快移动的异构体)。(ES，m/z)：[M+H]279.0；
1
H NMR(300MHz，DMSO)δ7.37(宽，1H)，6.21(d，J＝6.3Hz，1H)，5.76-6.28(td，J＝53.7Hz，
2.1Hz，1H)，5.27(d，J ＝ 4.5Hz，1H)，4.96-4.98(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，4.05-4.09(m，1H)，
3.85-3.99(m，3H)，3.51-3.60(m，2H)，3.13(s，1H)。
[0328] 实施例24
[0329] (3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(吖 丁 啶-1- 基)-5-( 二 氟 甲 基 )-5，6，7，7a- 四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0330]
[0331] 将含Et3N(18.7g，185mmol)、吖丁啶盐酸盐(12g，129mmol)和(2S，3R，4R，5S，6R)-6-(乙酰氧基甲基)-3-异硫氰酸四氢-2H-吡喃-2，4，5-三基三乙酸酯(48g，123mmol)的DCM(500mL)的混合物在室温下搅拌2小时，然后添加TFA(56g，493mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜，用NaHCO3中和，用DCM(3×100mL)萃取，用无水Na2SO4干燥并冷凝，从而产生残余物，将其通过使用含30％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化以产生浅黄色浆液形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(乙酰氧基甲基)-2-(吖丁啶-1-基)-5，6，7，7a-四+
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二乙酸酯(36g，75％)。(ES，m/z)：[M+H] ：
1
386.9；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.29(d，J＝6.6Hz，1H)，5.44-5.47(m，1H)，4.95-4.99(m，
1H)，4.36(t，J ＝ 5.4Hz，1H)，4.05-4.18(m，6H)，3.86-3.92(m，1H)，2.34-2.44(m，2H)，
2.07-2.14(m，9H)。
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二乙酸酯(36g，75％)。(ES，m/z)：[M+H] ：
1
386.9；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.29(d，J＝6.6Hz，1H)，5.44-5.47(m，1H)，4.95-4.99(m，
1H)，4.36(t，J ＝ 5.4Hz，1H)，4.05-4.18(m，6H)，3.86-3.92(m，1H)，2.34-2.44(m，2H)，
2.07-2.14(m，9H)。
[0332] 将上述材料(36g，93mmol)的MeOH(200mL)溶液在室温下用K2CO3(5.14g，37mmol)处理4小时。将所得溶液通过短硅胶柱过滤，从而得到浅黄色浆液形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二+ 1
醇(21g，87％)。(ES，m/z)：[M+H] ：261.0；H NMR(300MHz，DMSO)δ6.27(d，J＝6.3Hz，1H)，
3.94(t，J＝6.3Hz，1H)，3.85(t，J＝7.5Hz，4H)，3.70(t，J＝4.8Hz，1H)，3.55-3.59(m，
1H)，3.33-3.42(m，3H)，2.21-2.51(m，2H)。
醇(21g，87％)。(ES，m/z)：[M+H] ：261.0；H NMR(300MHz，DMSO)δ6.27(d，J＝6.3Hz，1H)，
3.94(t，J＝6.3Hz，1H)，3.85(t，J＝7.5Hz，4H)，3.70(t，J＝4.8Hz，1H)，3.55-3.59(m，
1H)，3.33-3.42(m，3H)，2.21-2.51(m，2H)。
[0333] 向 上 述 材 料(34g，131mmol)、Et3N(20.2g，0.2mol)和 DMAP(0.5g，4mmol) 的DCM(200mL)溶液中添加TBDMSCl(21.6g，143mmol)。在15℃下搅拌过夜之后，将反应混合物通过添加饱和NaHCO3水溶液(200mL)而淬灭，用DCM(3×100mL)萃取，用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，从而产生残余物，将其在使用含2％MeOH的DCM的硅胶柱上纯化，从而得到固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(32g，65％)。(ES，m/+ 1z)：[M+H] ：375.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.38(d，J＝6.3Hz，1H)，4.24(t，J＝6.3Hz，
1H)，4.04-4.09(m，5H)，3.85(d，J ＝ 3.6Hz，2H)，3.70-3.78(m，1H)，3.66-3.69(m，1H)，
2.33-2.43(m，2H)，0.91(s，9H)，0.09(s，6H)。
1H)，4.04-4.09(m，5H)，3.85(d，J ＝ 3.6Hz，2H)，3.70-3.78(m，1H)，3.66-3.69(m，1H)，
2.33-2.43(m，2H)，0.91(s，9H)，0.09(s，6H)。
[0334] 将上述材料(3.0g，8.0mmol)的DMF(40mL)溶液在室温下用NaH(1.5g，37.50mmol)处理30分钟，然后添加BzCl(3.36g，24mmol)。将所得溶液在15℃下搅拌过夜，用水/冰(100mL)淬灭，用DCM(3×50mL)萃取，用盐水(3×20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并冷凝，从而产生残余物，将其通过使用含10％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，从而得到浅黄色油形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(1.38g，30％)。+ 1
(ES，m/z)：[M+H] ：583.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.09(m，4H)，7.54-7.59(m，2H)，
7.28-7.39(m，4H)，6.43(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，5.84-5.96(m，1H)，5.37(dd，J ＝ 2.1，1.5Hz，
1H)，4.59-4.61(m，1H)，4.04-4.09(m，5H)，3.78-3.93(m，2H)，2.38-2.43(m，2H)，0.91(s，
9H)，0.09(s，6H)。
(ES，m/z)：[M+H] ：583.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.05-8.09(m，4H)，7.54-7.59(m，2H)，
7.28-7.39(m，4H)，6.43(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，5.84-5.96(m，1H)，5.37(dd，J ＝ 2.1，1.5Hz，
1H)，4.59-4.61(m，1H)，4.04-4.09(m，5H)，3.78-3.93(m，2H)，2.38-2.43(m，2H)，0.91(s，
9H)，0.09(s，6H)。
[0335] 将上述 材料(1.3g，2.2mmol)的MeOH(10mL)溶液 在15℃下用 AcCl(1mL，0.45mmol)处理过夜。将反应用饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭，用DCM(3×40mL)萃取，用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，从而产生残余物，将其通过使用含20％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而得到固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(0.42g，40％)。
+ 1
(ES，m/z)：[M+H] ：469.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.04-8.11(m，4H)，7.55-7.62(m，2H)，
7.42-7.48(m，4H)，6.48(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，5.92(t，J ＝ 3.6Hz，1H)，5.35(dd，J ＝ 8.0，
3.6Hz，1H)，4.63(t，J ＝ 5.4Hz，1H)，4.11-4.18(m，4H)，3.92-3.96(m，1H)，3.80-3.84(m，
1H)，3.69-3.68(m，1H)，2.38-2.48(m，2H)。
+ 1
(ES，m/z)：[M+H] ：469.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.04-8.11(m，4H)，7.55-7.62(m，2H)，
7.42-7.48(m，4H)，6.48(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，5.92(t，J ＝ 3.6Hz，1H)，5.35(dd，J ＝ 8.0，
3.6Hz，1H)，4.63(t，J ＝ 5.4Hz，1H)，4.11-4.18(m，4H)，3.92-3.96(m，1H)，3.80-3.84(m，
1H)，3.69-3.68(m，1H)，2.38-2.48(m，2H)。
[0336] 将上述材料(400mg，0.85mmol)的DCM(20mL)溶液在0℃下用DMP(600mg，1.41mmol)处理10分钟，然后在25℃下处理另外2小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和饱和Na2S2O3水溶液(10mL)淬灭，用DCM(3×20mL)萃取，用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，从而得到残余物，将其溶解在DCM(20mL)中并在-78℃下用DAST(5mL，4.48mmol)处理。将所得溶液在15℃下搅拌过夜并用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭。将有机层分离并将所得水层用DCM(2×20mL)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物通过使用含20％EtOAc的石油醚的硅胶柱纯化，从而得到浅黄色油形式的(3aR，5S，
6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]+ 1
噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(240mg，46％)。(ES，m/z)：[M+H] ：488.9；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.03-8.13(m，4H)，7.56-7.63(m，2H)，7.42-7.49(m，4H)，6.48(d，J＝ 6.6Hz，1H)，
5.94-5.96(m，2H)，5.58(d，J ＝ 8.7Hz，1H)，4.73(s，1H)，4.07-4.17(m，4H)，2.43-2.51(m，
2H)。
6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]+ 1
噻唑-6，7-二基二苯甲酸酯(240mg，46％)。(ES，m/z)：[M+H] ：488.9；H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.03-8.13(m，4H)，7.56-7.63(m，2H)，7.42-7.49(m，4H)，6.48(d，J＝ 6.6Hz，1H)，
5.94-5.96(m，2H)，5.58(d，J ＝ 8.7Hz，1H)，4.73(s，1H)，4.07-4.17(m，4H)，2.43-2.51(m，
2H)。
[0337] 将上述材料(110mg，0.23mmol)的MeOH(10mL)溶液在25℃下用K2CO3(20mg，0.14mmol)处理2小时，然后用AcOH中和。除去挥发物以产生残余物，将其通过使用含
10％MeOH的DCM的硅胶柱纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇+ 1
(24mg，22 ％ )。(ES，m/z)：[M+H] ：280.9；H NMR(300MHz，D2O)δ6.29(d，J ＝ 6.3Hz，
1H)，5.82-6.00(td，J ＝ 54.0Hz，1.8Hz，1H)，4.24(t，J ＝ 5.7Hz，1H)，3.97-4.04(m，5H)，
3.82-3.87(m，1H)，3.69-3.80(m，1H)，2.29(m，2H)。
10％MeOH的DCM的硅胶柱纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5S，6S，7R，7aR)-2-(吖丁啶-1-基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇+ 1
(24mg，22 ％ )。(ES，m/z)：[M+H] ：280.9；H NMR(300MHz，D2O)δ6.29(d，J ＝ 6.3Hz，
1H)，5.82-6.00(td，J ＝ 54.0Hz，1.8Hz，1H)，4.24(t，J ＝ 5.7Hz，1H)，3.97-4.04(m，5H)，
3.82-3.87(m，1H)，3.69-3.80(m，1H)，2.29(m，2H)。
[0338] 以下实施例是根据与上面概述的方案和实施例类似的程序而合成的。
[0339] 表5
[0340]
[0341]
[0342] 实施例27
[0343] (3aR，5S，6S，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0344]
[0345] 将含((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苄氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(5.00g，9.24mmol)和thio-CDI(90％技术级，3.40g，19.1mmol)的无水DMF(30mL)的混合物在
95℃下搅拌4小时。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至2∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到淡黄色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，
7aR)-7-(((1H-咪唑-1-羰硫基)氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(5.60g，93％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.03-8.01(m，2H)，7.97-7.95(m，2H)，7.64-7.60(m，
1H)，7.54-7.50(m，1H)，7.45(t，J ＝ 7.7Hz，2H)，7.34(t，J ＝ 7.7Hz，2H)，7.02(s，1H)，
6.38-6.37(m，1H)，6.15(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，5.56(td，J ＝ 1.2，9.2Hz，1H)，4.70-4.67(m，
1H)，4.58(dd，J ＝ 3.2，12.1Hz，1H)，4.42(dd，J ＝ 5.1，12.1Hz，1H)，4.08-4.03(m，1H)，
3.43(s，3H)，1.56(s，9H)。
95℃下搅拌4小时。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至2∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到淡黄色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，
7aR)-7-(((1H-咪唑-1-羰硫基)氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(5.60g，93％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.03-8.01(m，2H)，7.97-7.95(m，2H)，7.64-7.60(m，
1H)，7.54-7.50(m，1H)，7.45(t，J ＝ 7.7Hz，2H)，7.34(t，J ＝ 7.7Hz，2H)，7.02(s，1H)，
6.38-6.37(m，1H)，6.15(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，5.56(td，J ＝ 1.2，9.2Hz，1H)，4.70-4.67(m，
1H)，4.58(dd，J ＝ 3.2，12.1Hz，1H)，4.42(dd，J ＝ 5.1，12.1Hz，1H)，4.08-4.03(m，1H)，
3.43(s，3H)，1.56(s，9H)。
[0346] 将含上述材料(5.60g，8.59mmol)、Bu3SnH(5.84g，17.0mmol)和ABCN(0.15g，0.60mmol)的混合无水甲苯/THF(50/50mL)的混合物在90℃下搅拌16小时。在冷却之后，减压除去溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(3.20g，
1
70％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-7.98(m，4H)，7.58-7.49(m，2H)，7.44-7.40(m，4H)，
6.08(d，J ＝ 7.3Hz，1H)，5.44-5.40(m，1H)，4.49-4.40(m，3H)，4.07-4.03(m，1H)，3.35(s，
3H)，2.64-2.59(m，1H)，2.44-2.37(m，1H)，1.56(s，9H)。
1
70％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-7.98(m，4H)，7.58-7.49(m，2H)，7.44-7.40(m，4H)，
6.08(d，J ＝ 7.3Hz，1H)，5.44-5.40(m，1H)，4.49-4.40(m，3H)，4.07-4.03(m，1H)，3.35(s，
3H)，2.64-2.59(m，1H)，2.44-2.37(m，1H)，1.56(s，9H)。
[0347] 依照实施例32所述程序，用K2CO3将上述材料(3.20g，6.10mmol)中的苯甲酰基去保护。在硅胶上通过快速柱层析(1∶50至1∶20的MeOH/DCM)纯化之后，获得白色固体形式的((3aR，5R，6S，7aR)-6-羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]1
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.82g，94％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.91(d，J＝ 6.9Hz，1H)，4.36-4.32(m，1H)，3.89-3.85(m，1H)，3.81-3.75(m，1H)，3.65-3.59(m，1H)，
3.38-3.34(m，1H)，3.33(s，3H)，2.48-2.43(m，1H)，2.32(d，J＝10.7Hz，1H)，2.17-2.11(m，
1H)，1.84(t，J＝6.3Hz，1H)，1.54(s，9H)。
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.82g，94％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.91(d，J＝ 6.9Hz，1H)，4.36-4.32(m，1H)，3.89-3.85(m，1H)，3.81-3.75(m，1H)，3.65-3.59(m，1H)，
3.38-3.34(m，1H)，3.33(s，3H)，2.48-2.43(m，1H)，2.32(d，J＝10.7Hz，1H)，2.17-2.11(m，
1H)，1.84(t，J＝6.3Hz，1H)，1.54(s，9H)。
[0348] 依照实施例32所述程序，对上述材料(1.82g，5.74mmol)进行单-TBDMS保护。在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶2的EtOAc/己烷)纯化之后，获得无色粘油
形式的((3aR，5R，6S，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-羟基-5，
6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.30g，
1
93％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.92(d，J＝6.8Hz，1H)，4.31-4.28(m，1H)，3.92-3.90(m，
1H)，3.73(d，J ＝ 4.6Hz，2H)，3.35-3.31(m，1H)，3.33(s，3H)，2.41(d，J ＝ 9.4Hz，1H)，
2.41-2.36(m，1H)，2.18-2.12(m，1H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.06(s，6H)。
形式的((3aR，5R，6S，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-羟基-5，
6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.30g，
1
93％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.92(d，J＝6.8Hz，1H)，4.31-4.28(m，1H)，3.92-3.90(m，
1H)，3.73(d，J ＝ 4.6Hz，2H)，3.35-3.31(m，1H)，3.33(s，3H)，2.41(d，J ＝ 9.4Hz，1H)，
2.41-2.36(m，1H)，2.18-2.12(m，1H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.06(s，6H)。
[0349] 依照实施例32所述程序，用BnBr对上述材料(2.78g，6.45mmol)中的苄基进行保护。在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶4的EtOAc/己烷)纯化之后，获得无色粘油形式的((3aR，5R，6S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.7g，80％)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36-7.27(m，5H)，6.02(d，J＝7.1Hz，1H)，4.67(d，J＝11.6Hz，
1H)，4.40(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.34-4.30(m，1H)，3.83-3.78(m，1H)，3.77-3.69(m，2H)，
3.53-3.50(m，1H)，3.29(s，3H)，2.44-2.39(m，1H)，2.14-2.08(m，1H)，1.52(s，9H)，0.88(s，
9H)，0.04(s，6H)。
1
H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36-7.27(m，5H)，6.02(d，J＝7.1Hz，1H)，4.67(d，J＝11.6Hz，
1H)，4.40(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.34-4.30(m，1H)，3.83-3.78(m，1H)，3.77-3.69(m，2H)，
3.53-3.50(m，1H)，3.29(s，3H)，2.44-2.39(m，1H)，2.14-2.08(m，1H)，1.52(s，9H)，0.88(s，
9H)，0.04(s，6H)。
[0350] 依照实施例32所述程序，用TBAF将上述材料(2.70g，5.30mmol)中的甲硅烷基去保护。在硅胶上通过快速柱层析(1∶5至1∶1的EtOAc/己烷)纯化之后，获得无色粘泡沫形式的((3aR，5R，6S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g，93％)。H NMR(400MHz，
CDCl3)δ7.37-7.27(m，5H)，6.01(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，4.69(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.40(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.36-4.34(m，1H)，3.77-3.72(m，2H)，3.62-3.54(m，2H)，3.30(s，3H)，
2.53-2.48(m，1H)，2.09-2.02(m，1H)，1.71(t，J＝6.3Hz，1H)，1.53(s，9H)。
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g，93％)。H NMR(400MHz，
CDCl3)δ7.37-7.27(m，5H)，6.01(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，4.69(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.40(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.36-4.34(m，1H)，3.77-3.72(m，2H)，3.62-3.54(m，2H)，3.30(s，3H)，
2.53-2.48(m，1H)，2.09-2.02(m，1H)，1.71(t，J＝6.3Hz，1H)，1.53(s，9H)。
[0351] 依照实施例32所述程序，用DMP将上述材料(0.663g，1.62mmol)氧化成醛。在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至2∶3的EtOAc/己烷)纯化之后，获得白色泡沫形式的((3aR，5S，6S，7aR)-6-(苄氧基)-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.57g，86％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.63(s，1H)，
7.36-7.27(m，5H)，6.04(d，J＝4.3Hz，1H)，4.69(d，J＝9.2Hz，1H)，4.50(d，J＝9.2Hz，
1H)，4.43-4.39(m，1H)，4.07(d，J＝6.4Hz)，4.02-3.99(m，1H)，3.29(s，3H)，2.64-2.59(m，
1H)，2.10-2.03(m，1H)，1.53(s，9H)。
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.57g，86％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.63(s，1H)，
7.36-7.27(m，5H)，6.04(d，J＝4.3Hz，1H)，4.69(d，J＝9.2Hz，1H)，4.50(d，J＝9.2Hz，
1H)，4.43-4.39(m，1H)，4.07(d，J＝6.4Hz)，4.02-3.99(m，1H)，3.29(s，3H)，2.64-2.59(m，
1H)，2.10-2.03(m，1H)，1.53(s，9H)。
[0352] 依照实施例32所述程序，用DAST处理上述材料(0.550g，1.35mmol)。在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶3的EtOAc/己烷)纯化之后，获得淡黄色粘油形式的((3aR，5S，6S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(二氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.48g，83％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34-7.27(m，
5H)，6.04(d，J ＝ 7.4Hz，1H)，5.79(dt，J ＝ 2.2，54.7Hz，1H)，4.67(d，J ＝ 11.4Hz，1H)，
4.43(d，J＝11.4Hz，1H)，4.43-3.40(m，1H)，4.01-3.97(m，1H)，3.82-3.73(m，1H)，3.27(s，
3H)，2.59-2.54(m，1H)，2.10-2.05(m，1H)，1.53(s，9H)。
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.48g，83％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34-7.27(m，
5H)，6.04(d，J ＝ 7.4Hz，1H)，5.79(dt，J ＝ 2.2，54.7Hz，1H)，4.67(d，J ＝ 11.4Hz，1H)，
4.43(d，J＝11.4Hz，1H)，4.43-3.40(m，1H)，4.01-3.97(m，1H)，3.82-3.73(m，1H)，3.27(s，
3H)，2.59-2.54(m，1H)，2.10-2.05(m，1H)，1.53(s，9H)。
[0353] 依照实施例32所述程序，用BCl3将上述材料(0.480g，1.12mmol)去保护。在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶1 MeOH/DCM)纯化之后，获得淡黄色粘固体形式的(3aR，5S，6S，7aR)-5-(二氟甲基)-2(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]1
噻唑-6-醇(0.24g，87％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.17(d，J＝6.4Hz，1H)，5.91(dt，J ＝ 2.6，54.4Hz，1H)，4.38-4.34(m，1H)，4.03-3.98(m，1H)，3.64-3.61(m，1H)，2.84(s，
13
3H)，2.16-2.13(m，2H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ163.35，116.00(t，J＝241.0Hz)，91.12，
74.97(t，J＝42.7Hz)，70.00，64.54(t，J＝3.6Hz)，34.19，30.79；MS，m/z＝239.0(M+1)。
噻唑-6-醇(0.24g，87％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.17(d，J＝6.4Hz，1H)，5.91(dt，J ＝ 2.6，54.4Hz，1H)，4.38-4.34(m，1H)，4.03-3.98(m，1H)，3.64-3.61(m，1H)，2.84(s，
13
3H)，2.16-2.13(m，2H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ163.35，116.00(t，J＝241.0Hz)，91.12，
74.97(t，J＝42.7Hz)，70.00，64.54(t，J＝3.6Hz)，34.19，30.79；MS，m/z＝239.0(M+1)。
[0354] 实施例28
[0355] (3aR，5S，6S，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0356]
[0357] 向(3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-6-醇(4.26g，8.95mmol)的无水DMF(30mL)溶液中添加BnBr(1.68g，9.84mmol)和碘化四丁基铵(0.330g，0.895mmol)。在0℃下，分批添加NaH(60％，0.430g，10.744mmol)，然后将反应在该温度下搅拌2小时。将混合物用水(200mL)稀释，用Et2O(2×100mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，从而产生含有约80％的(3aR，5R，6R，7R，7aR)-6-(苄氧基)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-N，N-二甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺(5.06g，100％)的混合物，其在硅胶柱为不可分离的。将该混合物直接提供至下一反应。
[0358] 在0 ℃ 下，向上 述 材 料(9.89g，17.5mmol) 的MeOH(100mL)溶 液 中 添 加AcCl(6.21mL，87.4mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。减压蒸发溶剂。将残余物在使用含2％至5％2M NH3 MeOH溶液的DCM洗提的硅胶柱上纯化，从而产生(3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-7-醇(4.58g，78％)。MS m/z 339.1(M+1，100％)。
[0359] 在0℃下，向上述材料(4.58g，13.6mmol)和咪唑(2.76g，40.7mmol)的无水DMF(30mL)溶液中添加TBDMSCl(2.45g，16.3mmol)。将混合物在室温下搅拌21小时。将反应用水(200mL)稀释，用Et2O(2×100mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂。将残余物在使用含1％至3％2M NH3 MeOH溶液的DCM洗提的硅胶柱上纯化，从而产生(3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-7-醇1
(5.80g，95％)。MS m/z 453.2(M+1，100％)；H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.27-7.37(m，5H)，
6.37(d，J＝6.6Hz，1H)，4.88(d，J＝11.4Hz，1H)，4.63(d，J＝11.4Hz，1H)，4.22(t，J＝
6.4Hz，1H)，4.09-4.13(m，1H)，3.80-3.82(m，2H)，3.74-3.78(m，1H)，3.64(dd，J ＝ 8.7Hz，
6.4Hz，1H)，2.98(s，6H)，0.897(s，9H)，0.90(s，9H)，0.052(s，3H)，0.056(s，3H)。
(5.80g，95％)。MS m/z 453.2(M+1，100％)；H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.27-7.37(m，5H)，
6.37(d，J＝6.6Hz，1H)，4.88(d，J＝11.4Hz，1H)，4.63(d，J＝11.4Hz，1H)，4.22(t，J＝
6.4Hz，1H)，4.09-4.13(m，1H)，3.80-3.82(m，2H)，3.74-3.78(m，1H)，3.64(dd，J ＝ 8.7Hz，
6.4Hz，1H)，2.98(s，6H)，0.897(s，9H)，0.90(s，9H)，0.052(s，3H)，0.056(s，3H)。
[0360] 将含上述材料(5.80g，12.8mmol)和thio-CDI(90％技术级，4.57g，23.1mmol)的无水DMF(30mL)的混合物在90℃下搅拌2.5小时。在冷却之后，将混合物用水(200mL)稀释，用Et2O(2×100mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂。将残余物在用含30％至100％EtOAc的己烷洗提的硅胶柱上纯化，从而产生O-((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-7-基)1H-咪唑-1-硫代甲酸酯
1
(6.51g，90％)。MS m/z 563.2(M+1，100％)；HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.59(s，
1H)，7.23-7.34(m，5H)，7.03(s，1H)，6.36(brs，1H)，6.31(d，J ＝ 6.7Hz，1H)，4.91(d，J ＝
11.6Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.58(d，J＝11.6Hz，1H)，3.85(d，J＝8.7Hz，1H)，3.64-3.74(m，
3H)，3.03(s，6H)，0.82(s，9H)，0.02(s，3H)，0.00(s，3H)。
1
(6.51g，90％)。MS m/z 563.2(M+1，100％)；HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.59(s，
1H)，7.23-7.34(m，5H)，7.03(s，1H)，6.36(brs，1H)，6.31(d，J ＝ 6.7Hz，1H)，4.91(d，J ＝
11.6Hz，1H)，4.62(m，1H)，4.58(d，J＝11.6Hz，1H)，3.85(d，J＝8.7Hz，1H)，3.64-3.74(m，
3H)，3.03(s，6H)，0.82(s，9H)，0.02(s，3H)，0.00(s，3H)。
[0361] 将含 上述 材 料(6.51g，11.6mmol)、氢 化 三丁 基锡(7.47g，25.7mmol) 和ABCN(0.313g，1.28mmol)的无水THF(100mL)的混合物在回流下加热17小时。在冷却之后，减压蒸发溶剂。将残余物用含50％至80％EtOAc的己烷洗提的硅胶柱层析纯化，从而产生白色固体形式的(3aR，5R，6S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-N，N-二甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺(4.07g，81％)。MS1
m/z 437.2(M+1，100％)；H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24-7.37(m，5H)，6.25(d，J＝6.6Hz，
1H)，4.71(d，J＝11.6Hz，1H)，4.42(d，J＝11.6Hz，1H)，4.34-4.39(m，1H)，3.65-3.80(m，
4H)，2.99(s，6H)，2.25(brs，1H)，2.10-2.16(m，1H)，0.89(s，9H)，0.05(s，6H)。
m/z 437.2(M+1，100％)；H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24-7.37(m，5H)，6.25(d，J＝6.6Hz，
1H)，4.71(d，J＝11.6Hz，1H)，4.42(d，J＝11.6Hz，1H)，4.34-4.39(m，1H)，3.65-3.80(m，
4H)，2.99(s，6H)，2.25(brs，1H)，2.10-2.16(m，1H)，0.89(s，9H)，0.05(s，6H)。
[0362] 在0℃下，向上述材料(4.07g，9.33mmol)的MeOH(50mL)溶液中添加AcCl(1.33mL，18.7mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。减压蒸发溶剂。将残余物在使用含3％-5％2M NH3MeOH溶液的DCM洗提的硅胶柱上纯化，从而产生((3aR，5R，6S，7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)甲醇(2.78g，91％)。MS
1
m/z 323.1(M+1，100％)；H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.25-7.36(m，5H)，6.22(d，J＝6.6Hz，
1H)，4.70(d，J＝11.6Hz，1H)，4.42(d，J＝11.6Hz，1H)，4.32-4.37(m，1H)，3.71-3.79(m，
2H)，3.60-3.67(m，2H)，2.97(s，6H)，2.19-2.25(m，1H)，2.09-2.15(m，1H)，1.86(brs，1H)。
1
m/z 323.1(M+1，100％)；H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.25-7.36(m，5H)，6.22(d，J＝6.6Hz，
1H)，4.70(d，J＝11.6Hz，1H)，4.42(d，J＝11.6Hz，1H)，4.32-4.37(m，1H)，3.71-3.79(m，
2H)，3.60-3.67(m，2H)，2.97(s，6H)，2.19-2.25(m，1H)，2.09-2.15(m，1H)，1.86(brs，1H)。
[0363] 在-78℃和N2下，向DMSO(0.875g，11.2mmol)的无水DCM(15mL)溶液中滴加草酰氯(1.316g，10.36mmol)。将混合物在约-30℃下搅拌30分钟并再冷却至-78℃。滴加上述材料(1.39g，4.32mmol)的无水DCM(15mL)溶液。在约-30℃下搅拌2小时之后，将反应混合物冷却回到-78℃并添加Et3N(1.74g，17.3mmol)。将混合物在约-30℃下再搅拌30分钟，然后用水(50mL)淬灭。收集有机层，并将水层用DCM(2×20mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，从而产生黄色泡沫形式的粗(3aR，5S，6S，7aR)-6-(苄氧基)-2(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-甲醛(1.24g)。MS m/z353.1(M+23，100％)。
[0364] 在0℃下，向上述粗材料(200mg)的无水DCM(5mL)溶液中添加三氟化双(2-甲氧基乙基)氨基硫(0.553g，2.50mmol)。将混合物在室温下搅拌27小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭，然后用EtOAc(2×10mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，并将残余物通过硅胶柱层析(2∶1至5∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到淡黄色泡沫形式的(3aR，5S，6S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(二氟甲基)-N，N-二甲基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-胺(0.050g，2个步骤为23％)。MS m/z 343.1(M+1，100％)。
[0365] 在-78℃下，向上述材料(0.049g，0.14mmol)的DCM(2mL)溶液中添加BCl3的DCM溶液(1.0M，0.19mL，0.19mmol)。将混合物缓慢升温至室温并搅拌18小时。将反应再冷却至-78℃并滴加1∶1的MeOH-DCM混合物(2mL)以淬灭反应。将溶剂蒸发，并且残余物用MeOH处理三次。将粗产物通过使用含1％至2％2M NH3 MeOH溶液的DCM洗提的硅胶柱层析纯化，从而产生白色固体形式的产物(3aR，5S，6S，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(二甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.0193g，53％)。MS m/Nz 253.1(M+1，100 ％ )；1HMR(400MHz，MeOD)δ6.22(d，J ＝ 6.5Hz，1H)，5.93(td，J ＝
54.4Hz，2.6Hz，1H)，4.36-4.40(m，1H)，3.99-4.03(m，1H)，3.59-3.68(m，1H)，3.03(s，6H)，
2.12-2.16(m，2H)；13CNMR(100MHz，MeOD) 165.06，115.86(t，J ＝ 192.8Hz)，91.48，
74.91(t，J＝17.1Hz)，70.02，64.40(t，J＝2.8Hz)，40.31，34.09。
54.4Hz，2.6Hz，1H)，4.36-4.40(m，1H)，3.99-4.03(m，1H)，3.59-3.68(m，1H)，3.03(s，6H)，
2.12-2.16(m，2H)；13CNMR(100MHz，MeOD) 165.06，115.86(t，J ＝ 192.8Hz)，91.48，
74.91(t，J＝17.1Hz)，70.02，64.40(t，J＝2.8Hz)，40.31，34.09。
[0366] 实施例29
[0367] (3aR，5S，6R，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇
[0368]
[0369] 将((3aR，5S，6S，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-6，7-二羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.3mmol)和咪唑(277mg，4mmol)的DMF(20mL)溶液在40℃下用TBDMSCl(611mg，4mmol)处理3小时。然后，将所得溶液冷却至室温，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)溶液淬灭，用DCM(3×20mL)萃取，用盐水(3×10mL)洗涤，用无水MgSO4干燥并真空浓缩，从而产生残余物，将其通过使用含
5％-10％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而得到浅黄色浆液形式的(3aR，5S，6R，7R，
7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5-(二氟甲基)-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃+
并[3，2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁酯(420mg，64％)。(ES，m/z)：[M+1]483.0；
1
H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.87(d，J ＝ 5.4Hz，1H)，5.98(td，J ＝ 55.2Hz，3.6Hz，1H)，
4.10-3.91(m，5H)，3.77-3.70(m，1H)，1.56(s，9H)，1.21(t，J ＝ 6.9Hz，3H)，0.94(s，9H)，
0.19(s，3H)，0.15(s，3H)。
5％-10％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而得到浅黄色浆液形式的(3aR，5S，6R，7R，
7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5-(二氟甲基)-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃+
并[3，2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁酯(420mg，64％)。(ES，m/z)：[M+1]483.0；
1
H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.87(d，J ＝ 5.4Hz，1H)，5.98(td，J ＝ 55.2Hz，3.6Hz，1H)，
4.10-3.91(m，5H)，3.77-3.70(m，1H)，1.56(s，9H)，1.21(t，J ＝ 6.9Hz，3H)，0.94(s，9H)，
0.19(s，3H)，0.15(s，3H)。
[0370] 将上述材料(440mg，0.9mmol)的DCM(20mL)溶液在室温下用DMP(587mg，1.4mmol)处理1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(5mL)和硫代硫酸钠(5mL)的混合物淬灭。收集有机层并将水层用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤并用无水MgSO4干燥。在过滤之后，将滤液浓缩以产生残余物，将其通过使用含5％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而得到白色浆液形式的(3aR，5S，7R，7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基-5-(二氟甲基)-6-氧代-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基(乙基)+ 1
氨基甲酸叔丁酯(370mg，84％)。(ES，m/z)：[M+1]481.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.20(d，J＝6.9Hz，1H)，6.08(td，J＝52.8Hz，1.5Hz，1H)，4.69(d，J＝3.6Hz，1H)，4.63(dd，J＝
6.9Hz，3.9Hz，1H)，4.16-4.09(m，1H)，3.98-3.89(m，2H)，1.57(s，9H)，1.14(t，J ＝ 6.9Hz，
3H)，0.93(s，9H)，0.20(s，3H)，0.13(s，3H)。
氨基甲酸叔丁酯(370mg，84％)。(ES，m/z)：[M+1]481.0；H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.20(d，J＝6.9Hz，1H)，6.08(td，J＝52.8Hz，1.5Hz，1H)，4.69(d，J＝3.6Hz，1H)，4.63(dd，J＝
6.9Hz，3.9Hz，1H)，4.16-4.09(m，1H)，3.98-3.89(m，2H)，1.57(s，9H)，1.14(t，J ＝ 6.9Hz，
3H)，0.93(s，9H)，0.20(s，3H)，0.13(s，3H)。
[0371] 将上述材料(400mg，0.8mmol)的MeOH(5mL)溶液在室温下用NaBH4(63mg，1.7mmol)处理2小时。将反应混合物用水(20mL)淬灭并用DCM(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水MgSO4干燥并真空浓缩以产生残余物，将其通过使用含10％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而得到白色浆液形式的(3aR，5S，6S，7R，
7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5-(二氟甲基)-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃+
并[3，2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁酯(103mg，25％)。(ES，m/z)：[M+1]483.0；
1
H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.04(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，6.06(td，J ＝ 70.2Hz，6.6Hz，1H)，
4.37-4.31(m，1H)，4.25-4.20(m，1H)，4.12-4.06(m，1H)，4.01-3.92(m，2H)，3.87(m，1H)，
3.85-3.76(m，1H)，1.56(s，9H)，1.21(t，J＝6.9Hz，3H)，0.96(s，9H)，0.22(s，3H)，0.18(s，
3H)。
7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5-(二氟甲基)-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃+
并[3，2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁酯(103mg，25％)。(ES，m/z)：[M+1]483.0；
1
H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.04(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，6.06(td，J ＝ 70.2Hz，6.6Hz，1H)，
4.37-4.31(m，1H)，4.25-4.20(m，1H)，4.12-4.06(m，1H)，4.01-3.92(m，2H)，3.87(m，1H)，
3.85-3.76(m，1H)，1.56(s，9H)，1.21(t，J＝6.9Hz，3H)，0.96(s，9H)，0.22(s，3H)，0.18(s，
3H)。
[0372] 在0℃下，用无水HCl气体向上述材料(20mg，0.04mmol)的MeOH(10mL)溶液发泡，直至其饱和。将所得溶液在室温下搅拌3小时。除去挥发物产生残余物，将其溶解在MeOH(2mL)中并用浓NH4OH(1mL)中和。在减压浓缩之后，将粗产物通过使用含10％MeOH的DCM洗提的短硅胶柱纯化，得到白色固体形式的(3aR，5S，6R，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-2-(乙胺基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(10mg，90％)。+ 1
(ES，m/z)：[M+1]269.0；H NMR(300MHz，CD3OD)δ6.31(d，J＝6.0Hz，1H)，5.97(td，J＝
56.1，6.3Hz，1H)，4.12(t，J ＝ 6.3Hz，1H)，4.03(t，J ＝ 3.0Hz，1H)，3.95-3.90(m，1H)，
3.88-3.85(m，1H)，3.32-3.21(m，2H)，1.17(t，J＝7.5Hz，3H)。
(ES，m/z)：[M+1]269.0；H NMR(300MHz，CD3OD)δ6.31(d，J＝6.0Hz，1H)，5.97(td，J＝
56.1，6.3Hz，1H)，4.12(t，J ＝ 6.3Hz，1H)，4.03(t，J ＝ 3.0Hz，1H)，3.95-3.90(m，1H)，
3.88-3.85(m，1H)，3.32-3.21(m，2H)，1.17(t，J＝7.5Hz，3H)。
[0373] 实施例30
[0374] (3aR，5R，6S，7R，7aR)-7-氟 -5-(羟 甲 基)-2-( 甲 基 氨 基 )-5，6，7，7a- 四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0375]
[0376] 在0℃下，向((3aR，5R，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-氧代-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.57g，5.72mmol)的无水MeOH (50mL)溶液中添加NaBH4(0.295g，7.80mmol)。将混合物在0℃下搅拌20分钟之后，添加干冰碎片并将溶剂蒸发。将残余物溶解在DCM(50mL)中并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。收集有机层并将水层用DCM(2×30mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到粘油形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.95g，37％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.11(d，J＝6.7Hz，1H)，4.84(ddd，J＝3.2，6.7，48.2Hz，1H)，4.45(td，J＝6.7，16.6Hz，
1H)，4.32-4.29(m，1H)，4.00-3.93(m，2H)，3.90-3.86(m，1H)，3.36(s，3H)，3.19(s，br.，1H，(OH))，1.53(s，9H)，0.90(s，9H)，0.093(s，3H)，0.087(s，3H)。
1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.95g，37％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.11(d，J＝6.7Hz，1H)，4.84(ddd，J＝3.2，6.7，48.2Hz，1H)，4.45(td，J＝6.7，16.6Hz，
1H)，4.32-4.29(m，1H)，4.00-3.93(m，2H)，3.90-3.86(m，1H)，3.36(s，3H)，3.19(s，br.，1H，(OH))，1.53(s，9H)，0.90(s，9H)，0.093(s，3H)，0.087(s，3H)。
[0377] 用HCl气体向上述材料(0.110g，0.244mmol)的无水MeOH(4mL)溶液发泡30秒。将混合物在室温下搅拌2小时。在减压蒸发溶剂之后，将残余物用含1.0M NH3的MeOH中和并在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶9 MeOH/DCM)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-7-氟-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.043g，89％)。HNMR(400MHz，CD3OD)δ6.38(dd，J＝1.0，6.7Hz，1H)，4.65(ddd，J＝3.3，7.8，48.2Hz，1H)，4.30-4.22(m，1H)，4.15-4.11(m，
13
1H)，4.01-3.98(m，1H)，3.78-3.72(m，2H)，2.83(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ164.87，
94.77(d，J＝182.5Hz)，91.73(d，J＝7.8Hz)，75.66(d，J＝5.8Hz)，69.89(d，J＝21.0Hz)，+
67.01(d，J＝27.6Hz)，61.81(d，J＝3.1Hz)，30.30；MS，(ES，m/z)[M+H]237.1。
1
氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.043g，89％)。HNMR(400MHz，CD3OD)δ6.38(dd，J＝1.0，6.7Hz，1H)，4.65(ddd，J＝3.3，7.8，48.2Hz，1H)，4.30-4.22(m，1H)，4.15-4.11(m，
13
1H)，4.01-3.98(m，1H)，3.78-3.72(m，2H)，2.83(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ164.87，
94.77(d，J＝182.5Hz)，91.73(d，J＝7.8Hz)，75.66(d，J＝5.8Hz)，69.89(d，J＝21.0Hz)，+
67.01(d，J＝27.6Hz)，61.81(d，J＝3.1Hz)，30.30；MS，(ES，m/z)[M+H]237.1。
[0378] 实施例31
[0379] (3aR，5S，6R，7R，7aR)-7-氟 -5-(氟 甲 基)-2-( 甲 基 氨 基 )-5，6，7，7a- 四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0380]
[0381] 向(3aR，5R，6S，7R，7aR)-5-(羟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(80.00g，341.6mmol)的DMF(500mL)悬浮液中依次添加DIPEA(8mL)、MeOH(8mL)和Boc2O(100.0g，458.7mmol)。将悬浮液在室温下搅拌6小时，变成澄清溶液。在溶液体积在减压和室温下减少约100mL以除去MeOH和叔丁醇之后，将溶液用冰冷却浴冷却并依序添加咪唑(92.9g，1.36mol)和TBDMSCl(155g，1.03mol)。在室温下搅拌过夜之后，将混合物用盐水(1.5L)稀释。用Et2O进行3次萃取(500mL以及2×300mL)。将合并的醚萃取物用盐水(1L)洗涤并用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂，将两批次的残余物合并并在硅胶上通过快速柱层析(2∶11的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色结晶固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(136g，71％)。H NMR(500MHz，CDCl3)δ6.15(d，J＝ 6.2Hz，1H)，4.29(s，br.1H)，4.06-4.05(m，1H)，3.81-3.75(m，2H)，3.71-3.68(m，1H)，
3.47-3.43(m，1H)，3.36(s，3H)，1.54(s，9H)，0.915(s，9H)，0.893(s，9H)，0.161(s，3H)，
0.149(s，3H)，0.068(s，6H)。
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(136g，71％)。H NMR(500MHz，CDCl3)δ6.15(d，J＝ 6.2Hz，1H)，4.29(s，br.1H)，4.06-4.05(m，1H)，3.81-3.75(m，2H)，3.71-3.68(m，1H)，
3.47-3.43(m，1H)，3.36(s，3H)，1.54(s，9H)，0.915(s，9H)，0.893(s，9H)，0.161(s，3H)，
0.149(s，3H)，0.068(s，6H)。
[0382] 在0℃下，向上述材料(94.30g，167.5mmol)和DMAP(0.50g，4.1mmol)的吡啶(350mL)溶液中添加BzCl(28.3g，201mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，添加另一份BzCl(6.90g，49.1mmol)并将混合物在室温下再搅拌3小时。添加MeOH(20mL)并将混合物再搅拌30分钟。将混合物用盐水(1L)稀释并用混合EtOAc/己烷萃取3次(1∶4；600mL、200mL和100mL)。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将合并的所有三批次残余物在室温下用含1.5M HCl的MeOH(1.0L)处理16小时。然后在室温和减压下除去溶剂以得到白色固体。将DIPEA(100mL)和Boc2O(109g，500mmol)依序添加至含白色固体的DCM中(1.6小时)。然后，将混合物在室温下搅拌4天。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(1L)和盐水(1L)洗涤，并用无水Na2SO4干燥。(将合并的水性洗涤液用饱和Na2CO3水溶液碱化至pH＝约9，并用DCM(5×150mL)萃取。将合并的DCM萃取物用无水Na2SO4干燥。
在过滤之后，将溶液用Boc2O(30g)处理5小时。在用饱和NH4Cl水溶液(1L)和盐水(1L)洗涤之后，用无水Na2SO4干燥。)将所有的DCM萃取物合并。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶4至3∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-羟基-5-(羟甲基)-5，
1
6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(56.5g，77％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00-7.98(m，2H)，7.59-7.54(m，1H)，7.44-7.40(m，2H)，6.20(d，J＝ 7.0Hz，1H)，
5.15-5.12(m，1H)，4.55-4.50(m，1H)，4.41-4.39(m，1H)，3.80-3.76(m，1H)，3.70-3.66(m，
1H)，3.49(s，br.，1H)，3.34(s，3H)，1.56(s，9H)。
在过滤之后，将溶液用Boc2O(30g)处理5小时。在用饱和NH4Cl水溶液(1L)和盐水(1L)洗涤之后，用无水Na2SO4干燥。)将所有的DCM萃取物合并。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶4至3∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-羟基-5-(羟甲基)-5，
1
6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(56.5g，77％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00-7.98(m，2H)，7.59-7.54(m，1H)，7.44-7.40(m，2H)，6.20(d，J＝ 7.0Hz，1H)，
5.15-5.12(m，1H)，4.55-4.50(m，1H)，4.41-4.39(m，1H)，3.80-3.76(m，1H)，3.70-3.66(m，
1H)，3.49(s，br.，1H)，3.34(s，3H)，1.56(s，9H)。
[0383] 在-78℃和氮气氛下，向上述材料(500mg，1.1mmol)的DCM(15mL)溶液中添加DAST(1.1g，6.8mmol)。在室温下搅拌过夜之后，将反应混合物用饱和NaHCO3(30mL)水溶液淬灭，用DCM(3×15mL)萃取，用无水Na2SO4干燥并冷凝以产生残余物，将其通过含10％-30％EtOAc的石油醚洗提的硅胶柱纯化，从而得到浅黄色油形式的(3aR，5S，6R，7R，
7aR)-2-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-7-氟-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃+ 1
并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(370mg，73％))。(ES，m/z)：[M+H]443.0；HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.02-8.01(m，2H)，7.64-7.62(m，1H)，7.59-7.44(m，2H)，6.19(d，J＝ 7.2Hz，1H)，
5.44-5.26(m，2H)，4.62-4.60(m，2H)，4.58-4.46(m，1H)，3.90-3.80(m，1H)，3.39(s，3H)，
1.58(s，9H)。
7aR)-2-(叔丁氧基羰基(甲基)氨基)-7-氟-5-(氟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃+ 1
并[3，2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯(370mg，73％))。(ES，m/z)：[M+H]443.0；HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.02-8.01(m，2H)，7.64-7.62(m，1H)，7.59-7.44(m，2H)，6.19(d，J＝ 7.2Hz，1H)，
5.44-5.26(m，2H)，4.62-4.60(m，2H)，4.58-4.46(m，1H)，3.90-3.80(m，1H)，3.39(s，3H)，
1.58(s，9H)。
[0384] 将上述材料(170mg，0.4mmol)的THF(10mL)溶液在室温下用MeMgCl(3mmol，1mL，在THF中为3M)处理1小时。将反应混合物用饱和NH4Cl(30mL)水溶液淬灭，用EtOAc(3×20mL)萃取，用盐水(10mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥并冷凝以产生残余物，将其通过使用含2％-5％MeOH的DCM洗提的硅胶柱纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，
5S，6R，7R，7aR)-7-氟-5-(氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+ 1
2-d]噻唑-6-醇(35mg，38％)。(ES，m/z)：[M+H]239.0；HNMR(300MHz，CDCl3)δ6.27(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，5.14(td，J ＝ 45.6Hz，2.1Hz，1H)，4.70-4.44(m，3H)，3.90-3.79(m，1H)，
3.73-3.61(m，1H)，2.95(s，3H)。
5S，6R，7R，7aR)-7-氟-5-(氟甲基)-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，+ 1
2-d]噻唑-6-醇(35mg，38％)。(ES，m/z)：[M+H]239.0；HNMR(300MHz，CDCl3)δ6.27(d，J ＝ 6.3Hz，1H)，5.14(td，J ＝ 45.6Hz，2.1Hz，1H)，4.70-4.44(m，3H)，3.90-3.79(m，1H)，
3.73-3.61(m，1H)，2.95(s，3H)。
[0385] 实施例32
[0386] (3aR，5S，6R，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-7-氟-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0387]
[0388] 向(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇(8.50g，37.0mmol)的DMF(60mL)悬浮液中添加DIPEA(2.0mL)、Boc2O(23.0g，105mmol)和MeOH(2.0mL)。将混合物在室温下搅拌3小时，然后添加MeOH(50mL)。将反应混合物在减压和约35℃下浓缩。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶8的MeOH/DCM)纯化，然后从EtOAc/己烷重结晶，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6，7-二羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)
1
(甲基)氨基甲酸叔丁酯(11.8g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.14(d，J＝6.9Hz，
1H)，4.20(d，J＝6.4Hz，1H)，4.11(d，J＝5.6Hz，1H)，3.85-3.70(m，2H)，3.63-3.55(m，1H)，
3.31(s，3H)，1.53(s，9H)。
1
(甲基)氨基甲酸叔丁酯(11.8g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.14(d，J＝6.9Hz，
1H)，4.20(d，J＝6.4Hz，1H)，4.11(d，J＝5.6Hz，1H)，3.85-3.70(m，2H)，3.63-3.55(m，1H)，
3.31(s，3H)，1.53(s，9H)。
[0389] 在 0 ℃ 下，向 上 述 材 料 (11.7g，35.1mmol)、DIPEA(10.3g，80.0mmol) 和DMAP(0.040g，0.33mmol)的DCM(180mL)溶液中缓慢添加BzCl(10.1g，72.0mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌5小时。添加饱和NH4Cl水溶液(100mL)并收集有机层。将水层用DCM(3×50mL)进一步萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶4至1∶1的EtOAc/己烷)分离，得到白色固体形式的((3aR，5R，6S，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(4.20g，1
22 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01-7.99(m，4H)，7.60-7.55(m，1H)，7.54-7.50(m，
1H)，7.45-7.41(m，2H)，7.37-7.35(m，2H)，6.21(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，5.23-5.20(m，1H)，
4.55-4.51(m，2H)，4.48-4.42(m，2H)，4.15-4.07(m，2H)，3.36(s，3H)，1.56(s，9H)。
22 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01-7.99(m，4H)，7.60-7.55(m，1H)，7.54-7.50(m，
1H)，7.45-7.41(m，2H)，7.37-7.35(m，2H)，6.21(d，J ＝ 7.1Hz，1H)，5.23-5.20(m，1H)，
4.55-4.51(m，2H)，4.48-4.42(m，2H)，4.15-4.07(m，2H)，3.36(s，3H)，1.56(s，9H)。
[0390] 在-78℃和N2下，向上述材料(7.91g，14.6mmol)的无水DCM(100mL)溶液中添加DAST(11.8g，73.0mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌72小时。然后，将反应混合物在-78℃下冷却，用DCM(100mL)稀释并接着用饱和NaHCO3水溶液(150mL)淬灭。收集有机层并将水层用DCM(2×100mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH吡喃并[3，2-d]噻唑-5-基)苯甲酸甲酯(6.10g，1
77 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01-7.98(m，4H)，7.60-7.56(m，1H)，7.56-7.52(m，
1H)，7.45-7.41(m，2H)，7.38-7.35(m，2H)，6.19(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，5.52-5.46(m，1H)，
5.40-5.28(m，1H)，4.61-4.56(m，1H)，4.52(dd，J ＝ 3.6，12.0Hz，1H)，4.43(dd，J ＝ 5.7，
12.0Hz，1H)，4.03-3.99(m，1H)，3.36(s，3H)，1.56(s，9H)。
77 ％ )。H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01-7.98(m，4H)，7.60-7.56(m，1H)，7.56-7.52(m，
1H)，7.45-7.41(m，2H)，7.38-7.35(m，2H)，6.19(d，J ＝ 7.2Hz，1H)，5.52-5.46(m，1H)，
5.40-5.28(m，1H)，4.61-4.56(m，1H)，4.52(dd，J ＝ 3.6，12.0Hz，1H)，4.43(dd，J ＝ 5.7，
12.0Hz，1H)，4.03-3.99(m，1H)，3.36(s，3H)，1.56(s，9H)。
[0391] 将含上述材料(6.10g，11.2mmol)和K2CO3(1.00g，7.25mmol)的无水MeOH(50mL)的混合物在室温下搅拌3小时。添加干冰并减压除去溶剂。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶1至10∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲
1
基)氨基甲酸叔丁酯(3.25g ，86％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.8Hz，1H)，
5.15(ddd，J ＝ 2.4，4.4，45.7Hz，1H)，4.46-4.41(m，1H)，3.96-3.89(m，1H)，3.83(dd，J ＝
3.2，11.8Hz，1H)，3.73(dd，J ＝ 5.4，11.8Hz，1H)，3.46-3.42(m，1H)，3.32(s，3H)，1.54(s，
9H)。
1
基)氨基甲酸叔丁酯(3.25g ，86％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.8Hz，1H)，
5.15(ddd，J ＝ 2.4，4.4，45.7Hz，1H)，4.46-4.41(m，1H)，3.96-3.89(m，1H)，3.83(dd，J ＝
3.2，11.8Hz，1H)，3.73(dd，J ＝ 5.4，11.8Hz，1H)，3.46-3.42(m，1H)，3.32(s，3H)，1.54(s，
9H)。
[0392] 在0℃下，向上述材料(0.880g，2.61mmol)和咪唑(0.354g，5.20mmol)的无水DMF(15mL)溶液中添加TBDMSCl(0.452g，3.00mmol)。将混合物在室温下搅拌72小时并用Et2O(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层并将水层用Et2O(50mL)萃取。将合并的萃取物用水(50mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色泡沫形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.10g，1
93％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.8Hz，1H)，5.19-5.02(m，1H)，4.43-4.38(m，
1H)，3.98-3.93(m，1H)，3.85(dd，J ＝ 5.0，10.6Hz，1H)，3.73(dd，J ＝ 5.2，10.6Hz，1H)，
3.45-3.43(m，1H)，3.34(s，3H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.08(s，6H)。
93％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.8Hz，1H)，5.19-5.02(m，1H)，4.43-4.38(m，
1H)，3.98-3.93(m，1H)，3.85(dd，J ＝ 5.0，10.6Hz，1H)，3.73(dd，J ＝ 5.2，10.6Hz，1H)，
3.45-3.43(m，1H)，3.34(s，3H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.08(s，6H)。
[0393] 在0℃下，向上述材料(1.06g，2.35mmol)和Bu4NI(0.087g，0.24mmol)的无水DMF(15mL)溶液中添加NaH(在矿油中为60％，0.118g，2.94mmol)。在添加NaH之后，将BnBr(0.703g，4.11mmol)添加至反应混合物中。将混合物在室温下搅拌16小时并用Et2O(60mL)和饱和NH4Cl(50mL)稀释。收集有机层并将水层用Et2O(2×30mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(40mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而得到粘油形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁1
酯(1.22g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.27(m，5H)，6.10(d，J＝7.0Hz，1H)，
5.30-5.16(m，1H)，4.80(d，J＝11.0Hz，1H)，4.55(d，J＝11.0Hz，1H)，4.48-4.42(m，1H)，
3.88-3.80(m，1H)，3.78-3.69(m，2H)，3.46-3.44(m，1H)，3.31(s，3H)，1.53(s，9H)，0.89(s，
9H)，0.04(s，6H)。
酯(1.22g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.27(m，5H)，6.10(d，J＝7.0Hz，1H)，
5.30-5.16(m，1H)，4.80(d，J＝11.0Hz，1H)，4.55(d，J＝11.0Hz，1H)，4.48-4.42(m，1H)，
3.88-3.80(m，1H)，3.78-3.69(m，2H)，3.46-3.44(m，1H)，3.31(s，3H)，1.53(s，9H)，0.89(s，
9H)，0.04(s，6H)。
[0394] 在0℃下，向上述材料(1.22g，2.25mmol)的THF(15mL)溶液中添加TBAF(在THF中为1.0M，5.0mL，5.0mmol)。在添加之后，将反应混合物在室温下搅拌2小时并用EtOAc(20mL)和盐水(50mL)稀释。收集有机层并将水层用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶5至1∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.96g，100％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.29(m，
5H)，6.09(d，J＝6.7Hz，1H)，5.32(ddd，J＝1.8，3.6，45.4Hz，1H)，4.80(d，J＝11.6Hz，
1H)，4.55(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.53-4.48(m，1H)，3.81-3.72(m，2H)，3.61-3.55(m，1H)，
3.49-3.45(m，1H)，3.31(s，3H)，1.53(s，9H)。
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.96g，100％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.29(m，
5H)，6.09(d，J＝6.7Hz，1H)，5.32(ddd，J＝1.8，3.6，45.4Hz，1H)，4.80(d，J＝11.6Hz，
1H)，4.55(d，J ＝ 11.6Hz，1H)，4.53-4.48(m，1H)，3.81-3.72(m，2H)，3.61-3.55(m，1H)，
3.49-3.45(m，1H)，3.31(s，3H)，1.53(s，9H)。
[0395] 向上述材料(1.50g，3.52mmol)的DCM(40mL)溶液中添加DMP(2.20g，5.20mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物用Et2O(20mL)稀释并接着浓缩至干燥。添加含有Na2S2O3(2g)的饱和NaHCO3水溶液(30mL)并将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶5至1∶2的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5S，
6R，7R，7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.02g，68％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.60(s，1H)，
7.35-7.29(m，5H)，6.12(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，5.39-5.27(m，1H)，4.78(d，J ＝ 11.4Hz，1H)，
4.66(d，J＝11.4Hz，1H)，4.57-4.51(m，1H)，4.00-3.95(m，2H)，3.31(s，3H)，1.53(s，9H)。
6R，7R，7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.02g，68％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.60(s，1H)，
7.35-7.29(m，5H)，6.12(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，5.39-5.27(m，1H)，4.78(d，J ＝ 11.4Hz，1H)，
4.66(d，J＝11.4Hz，1H)，4.57-4.51(m，1H)，4.00-3.95(m，2H)，3.31(s，3H)，1.53(s，9H)。
[0396] 在-78℃和N2下，向上述材料(0.156g，0.367mmol)的无水DCM(6mL)溶液中添加DAST(0.354g，2.20mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌16小时。然后，将反应混合物在-78℃下冷却，用DCM(10mL)稀释并接着用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭。收集有机层并将水层用DCM(2×15mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而得到淡黄色油形式的((3aR，5S，6R，7R，7aR)-6-(苄氧基)-5-(二氟甲基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.125g，
1
76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-7.29(m，5H)，6.11(d，J＝7.2Hz，1H)，5.79(dt，J＝
2.4，54.4Hz，1H)，5.37-5.25(m，1H)，4.78(d，J ＝ 11.3Hz，1H)，4.59(d，J ＝ 11.3Hz，1H)，
4.58-4.53(m，1H)，4.00-3.92(m，1H)，3.72-3.63(m，1H)，3.29(s，3H)，1.53(s，9H)。
1
76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-7.29(m，5H)，6.11(d，J＝7.2Hz，1H)，5.79(dt，J＝
2.4，54.4Hz，1H)，5.37-5.25(m，1H)，4.78(d，J ＝ 11.3Hz，1H)，4.59(d，J ＝ 11.3Hz，1H)，
4.58-4.53(m，1H)，4.00-3.92(m，1H)，3.72-3.63(m，1H)，3.29(s，3H)，1.53(s，9H)。
[0397] 在-78℃和N2下，向上述材料(0.240g，0.537mmol)和五甲基苯(0.26g，1.7mmol)的无水DCM(10mL)溶液中添加BCl3(在DCM中为1.0M，1.6mL，1.6mmol)。将混合物在室温下搅拌约3小时，同时冷却阱(cooling trap)的温度达到0℃。将反应混合物冷却至-78℃，用混合MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干燥。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶15 MeOH/DCM)纯化，从而得到灰白色固体形式的(3aR，5S，6R，7R，7aR)-5-(二氟甲基)-7-氟-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.104g，1
76 ％ )。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.30(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，5.96(dt，J ＝ 2.4，54.1Hz，
1H)，4.89(td，J ＝ 3.9，46.5Hz，1H)，4.48-4.42(m，1H)，4.02-3.94(m，1H)，3.72-3.63(m，
13
1H)，2.85(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ164.08(d，J＝2.3Hz)，115.63(dt，J＝7.9，
241.6Hz)，94.73(d，J＝177.6Hz)，89.90(d，J＝2.0Hz)，74.04(d，J＝26.1Hz)，72.92(dt，J＝3.9，21.3Hz)，67.87(td，J＝3.8，25.0Hz)，30.74；MS，m/z＝257.0(M+1)。
76 ％ )。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.30(d，J ＝ 6.6Hz，1H)，5.96(dt，J ＝ 2.4，54.1Hz，
1H)，4.89(td，J ＝ 3.9，46.5Hz，1H)，4.48-4.42(m，1H)，4.02-3.94(m，1H)，3.72-3.63(m，
13
1H)，2.85(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ164.08(d，J＝2.3Hz)，115.63(dt，J＝7.9，
241.6Hz)，94.73(d，J＝177.6Hz)，89.90(d，J＝2.0Hz)，74.04(d，J＝26.1Hz)，72.92(dt，J＝3.9，21.3Hz)，67.87(td，J＝3.8，25.0Hz)，30.74；MS，m/z＝257.0(M+1)。
[0398] 实施例33
[0399] (3aR，5S，6R，7S，7aR)-5-(二氟甲基)-7-氟-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇
[0400]
[0401] 在0℃下，向((3aR，5R，6R，7R，7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(18.7g，55.5mmol)和咪唑(11.4g，167mmol)的无水DMF(150mL)溶液中添加TBDMSCl(9.19g，61.0mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时，用Et2O(300mL)稀释并用盐水(2×300mL)洗涤。收集有机层并将水层用Et2O(2×150mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至1∶3的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色泡沫形式的((3aR，5R，6R，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲1
基)氨基甲酸叔丁酯(24.1g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.8Hz，1H)，
5.19-5.02(m，1H)，4.43-4.38(m，1H)，3.98-3.93(m，1H)，3.85(dd，J ＝ 5.0，10.6Hz，1H)，
3.73(dd，J ＝ 5.2，10.6Hz，1H)，3.45-3.43(m，1H)，3.34(s，3H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，
0.08(s，6H)。
基)氨基甲酸叔丁酯(24.1g，96％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.8Hz，1H)，
5.19-5.02(m，1H)，4.43-4.38(m，1H)，3.98-3.93(m，1H)，3.85(dd，J ＝ 5.0，10.6Hz，1H)，
3.73(dd，J ＝ 5.2，10.6Hz，1H)，3.45-3.43(m，1H)，3.34(s，3H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，
0.08(s，6H)。
[0402] 向上述材料(9.28g，20.6mmol)的DCM(150mL)溶液中添加DMP(13.1g，30.9mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应用Et2O(400mL)稀释。将所得悬浮液通过硅藻土饼过滤并将滤液在室温下浓缩至干燥。将残余物装载在分层的NaHCO3/硅胶塞上并将产物洗提(1∶4的EtOAc/己烷)，从而得到白色结晶固体形式的((3aR，5R，7R，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-氧代-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]
1
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(8.96g，97％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.29(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，5.09(dd，J ＝ 4.7，48.4Hz，1H)，4.75-4.69(m，1H)，4.12-4.05(m，2H)，
3.96-3.93(m，1H)，3.28(s，3H)，1.54(s9H)，0.86(s，9H)，0.056(s，3H)，0.050(s，3H)。
1
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(8.96g，97％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.29(d，J ＝ 7.0Hz，1H)，5.09(dd，J ＝ 4.7，48.4Hz，1H)，4.75-4.69(m，1H)，4.12-4.05(m，2H)，
3.96-3.93(m，1H)，3.28(s，3H)，1.54(s9H)，0.86(s，9H)，0.056(s，3H)，0.050(s，3H)。
[0403] 向上述材料(8.96g，20.0mmol)的无水MeOH(250mL)溶液中添加NaH(在矿油中为60％，0.158g，3.95mmol)，并将混合物在室温下搅拌15分钟。然后，将反应混合物在0℃下冷却并添加NaBH4(1.32g，34.9mmol)。将混合物在0℃下搅拌20分钟之后，添加干冰碎片并将溶剂蒸发。将上述残余物溶解在DCM(100mL)中并用饱和NH4Cl水溶液(100mL)洗涤。收集有机层并将水层用DCM(2×50mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶10至2∶5的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色泡沫形式的((3aR，5R，6R，7S，7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸
1
叔丁酯(6.84g，基于2个步骤为76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.7Hz，1H)，
5.01(td，J ＝ 4.3，46.8Hz，1H)，4.49-4.44(m，1H)，4.17-4.13(m，1H)，3.80-3.79(m，2H)，
3.66-3.63(m，1H)，3.38(s，3H)，2.72(s，br.，1H，(OH))，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.062(s，
3H)，0.057(s，3H)。
1
叔丁酯(6.84g，基于2个步骤为76％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.06(d，J＝6.7Hz，1H)，
5.01(td，J ＝ 4.3，46.8Hz，1H)，4.49-4.44(m，1H)，4.17-4.13(m，1H)，3.80-3.79(m，2H)，
3.66-3.63(m，1H)，3.38(s，3H)，2.72(s，br.，1H，(OH))，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.062(s，
3H)，0.057(s，3H)。
[0404] 在0℃下，向上述材料(1.30g，2.89mmol)和Bu4NI(0.107g，0.290mmol)的无水DMF(12mL)溶液中添加NaH(在矿油中为60％，0.145g，3.63mmol)。在添加NaH之后，添加BnBr(0.989g，5.78mmol)。在0℃下搅拌30分钟并接着在室温下过夜之后，将混合物用Et2O(100mL)稀释。将混合物用饱和NH4Cl水溶液(2×50mL)洗涤。将水层用Et2O(2×40mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(50mL)洗涤并用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶20至1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而得到粘油形式的((3aR，5R，6R，7S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔1
丁酯(1.44g，92％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36-7.27(m，5H)，6.21(d，J＝7.2Hz，1H)，
5.30-5.16(m，1H)，4.80(d，J＝11.4Hz，1H)，4.56(d，J＝11.4Hz，1H)，4.50-4.42(m，1H)，
3.95-3.78(m，4H)，3.44(s，3H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.049(s，6H)。
丁酯(1.44g，92％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36-7.27(m，5H)，6.21(d，J＝7.2Hz，1H)，
5.30-5.16(m，1H)，4.80(d，J＝11.4Hz，1H)，4.56(d，J＝11.4Hz，1H)，4.50-4.42(m，1H)，
3.95-3.78(m，4H)，3.44(s，3H)，1.54(s，9H)，0.89(s，9H)，0.049(s，6H)。
[0405] 在0℃下，向上述材料(1.44g，2.66mmol)的THF(25mL)溶液中添加TBAF (在THF中为1.0M，3.5mL，3.5mmol)。在添加之后，将反应混合物在室温下搅拌2小时并用盐水(50mL)稀释。将混合物用EtOAc(2×40mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶2至1∶1的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色固体形式的((3aR，5R，6R，7S，7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.08g，1
95％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.27(m，5H)，6.18(d，J＝7.4Hz，1H)，5.17-5.04(m，
1H)，4.84(d，J＝11.6Hz，1H)，4.55(d，J＝11.6Hz，1H)，4.50-4.43(m，1H)，3.95-3.91(m，
1H)，3.883.82(m，1H)，3.79-3.75(m，1H)，3.71-3.67(m，1H)，3.37(s，3H)，1.53(s，9H)。
95％)。H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37-7.27(m，5H)，6.18(d，J＝7.4Hz，1H)，5.17-5.04(m，
1H)，4.84(d，J＝11.6Hz，1H)，4.55(d，J＝11.6Hz，1H)，4.50-4.43(m，1H)，3.95-3.91(m，
1H)，3.883.82(m，1H)，3.79-3.75(m，1H)，3.71-3.67(m，1H)，3.37(s，3H)，1.53(s，9H)。
[0406] 在0℃下，向上述材料(2.57g，6.03mmol)的DCM(60mL)溶液中添加DMP(3.82g，9.00mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物用Et2O(100mL)稀释。将所得悬浮液通过硅藻土饼过滤并将滤液在室温下浓缩至干燥。将残余物用EtOAc(3×50mL)萃取并将固体滤除。将萃取物用混合饱和NaHCO3(30mL)和Na2S2O3(5mL)水溶液洗涤。收集萃取物并用无水MgSO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂，从而产生粗醛((3aR，5S，6R，7S，7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基
1
甲酸叔丁酯。在未进一步纯化的情况下，将该粗材料用于下一步骤。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.65(s，1H)，7.39-7.29(m，5H)，6.04(d，J＝7.0Hz，1H)，5.08(td，J＝4.2，46.7Hz，1H)，
4.84(d，J＝11.4Hz，1H)，4.64(d，J＝11.4Hz，1H)，4.55-4.49(m，1H)，4.31(d，J＝7.5Hz，
1H)，4.19-4.15(m，1H)，3.30(s，3H)，1.52(s，9H)。
1
甲酸叔丁酯。在未进一步纯化的情况下，将该粗材料用于下一步骤。H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.65(s，1H)，7.39-7.29(m，5H)，6.04(d，J＝7.0Hz，1H)，5.08(td，J＝4.2，46.7Hz，1H)，
4.84(d，J＝11.4Hz，1H)，4.64(d，J＝11.4Hz，1H)，4.55-4.49(m，1H)，4.31(d，J＝7.5Hz，
1H)，4.19-4.15(m，1H)，3.30(s，3H)，1.52(s，9H)。
[0407] 在-78℃和N2下，向上述材料(0.19g，约80％纯度，约0.36mmol)的无水DCM(6mL)溶液中添加DAST(0.37g，2.3mmol)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌24小时。然后，将反应混合物在-78℃下冷却并用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭。收集有机层并将水层用DCM(2×10mL)萃取。将合并的萃取物用无水Na2SO4干燥。在过滤之后，减压蒸发溶剂并将残余物在硅胶上通过快速柱层析(1∶20至1∶4的EtOAc/己烷)纯化，从而得到白色泡沫形式的((3aR，5S，6R，7S，7aR)-6-(苄氧基)-5-(二氟甲基)-7-氟-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.097g，60％)。H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.37-7.28(m，5H)，6.12(d，J＝ 6.9Hz，1H)，5.85(dt，J＝ 1.6，54.5Hz，1H)，5.11(td，J＝4.0，47.3Hz，1H)，4.83(d，J＝11.2Hz，1H)，4.57(d，J＝11.2Hz，1H)，4.55-4.50(m，1H)，
4.12-4.04(m，2H)，3.28(s，3H)，1.52(s，9H)。
喃并[3，2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.097g，60％)。H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.37-7.28(m，5H)，6.12(d，J＝ 6.9Hz，1H)，5.85(dt，J＝ 1.6，54.5Hz，1H)，5.11(td，J＝4.0，47.3Hz，1H)，4.83(d，J＝11.2Hz，1H)，4.57(d，J＝11.2Hz，1H)，4.55-4.50(m，1H)，
4.12-4.04(m，2H)，3.28(s，3H)，1.52(s，9H)。
[0408] 在-78℃和N2下，向上述材料(0.097g，0.22mmol)和五甲基苯(0.050g，0.34mmol)的无水DCM(3mL)溶液中添加BCl3(在DCM中为1.0M，1.0mL，1.0mmol)。将混合物在室温下搅拌约5小时，同时使冷却阱的温度达到室温。将反应混合物在-78℃下冷却，用混合MeOH/DCM淬灭并接着浓缩至干燥。将残余物在硅胶上通过快速柱层析(含1.0M NH3的1∶12 MeOH/CH2Cl2)纯化，从而得到白色固体形式的(3aR，5S，6R，7S，7aR)-5-(二氟甲基)-7-氟-2-(甲基氨基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6-醇(0.041g，
1
72％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.37(d，J＝6.6Hz，1H)，6.04(dt，J＝1.5，54.0Hz，1H)，
4.86(td，J ＝ 3.3，50.9Hz，1H)，4.39(ddd，J ＝ 3.8，6.6，20.9Hz，1H)，4.05-3.95(m，2H)，
13
2.86(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ165.00，115.89(t，J ＝ 242.6Hz)，90.65(d，J ＝
185.7Hz)，90.25(d，J＝3.5Hz)，72.22-71.71(m)，71.71(d，J＝16.1Hz)，66.22-65.97(m)，
30.48；MS，m/z＝257.1(M+1)。
1
72％)。H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.37(d，J＝6.6Hz，1H)，6.04(dt，J＝1.5，54.0Hz，1H)，
4.86(td，J ＝ 3.3，50.9Hz，1H)，4.39(ddd，J ＝ 3.8，6.6，20.9Hz，1H)，4.05-3.95(m，2H)，
13
2.86(s，3H)；C NMR(100MHz，CD3OD)δ165.00，115.89(t，J ＝ 242.6Hz)，90.65(d，J ＝
185.7Hz)，90.25(d，J＝3.5Hz)，72.22-71.71(m)，71.71(d，J＝16.1Hz)，66.22-65.97(m)，
30.48；MS，m/z＝257.1(M+1)。
[0409] 以下实施例可根据与上述概述的方案和实施例类似的程序而合成。
[0410] 表6
[0411]
[0412]
[0413] 生物活性
[0414] 抑制O-GlcNAase活性的KI值的测定试验
[0415] 动力学分析的实验程序：在含有50mM NaH2PO4、100mM NaCl和0.1％BSA(pH 7.0)的反应中进行了酶反应，使用溶解在ddH2O中的2mM 4-甲基伞形酮(umbelliferyl)N-乙酰基-β-D-氨基葡糖苷二水合物(Sigma M2133)作为底物。在反应中所用的纯化人类O-GlcNAcase酶的量为0.7nM。在开始反应之前，将各种浓度的受试化合物添加至酶中。反应是在室温下的96孔板中进行的，并以添加底物开始。通过在355nm下激发和在460nm下检测的发射，由Tecan Infinite M200读板仪每60秒测量荧光产物的产生，持续45分钟，并且将4-甲基伞形花内酯(Sigma M1381)用于产生标准曲线。测定所测试化合物的各浓度的产物生产斜率并使用S形剂量反应曲线的标准曲线拟合算法绘图。测定了数据的4参数逻辑曲线拟合的值。
[0416] 使用Cheng-Prusoff方程测定了KI值；底物的O-GlcNAcase的Km为0.2mM。
[0417] 在上述试验中测试了实施例1至33并表现出为0.1nM至10μM的抑制O-GlcNAcase的KI值。
[0418] 抑制β-氨基己糖苷酶活性的KI值的测定试验
[0419] 动力学分析的实验程序：在含有50mM NaH2PO4、100mM NaCl和0.1％BSA(pH 7.0)的反应中进行了酶反应，使用溶解在ddH2O中的2mM 4-甲基伞形酮N-乙酰基-β-D-氨基葡糖苷二水合物(Sigma M2133)作为底物。在反应中所用的纯化人类β-氨基己糖苷酶酶的量为24nM。在开始反应之前，将各种浓度的受试化合物添加至酶中。反应是在室温下的96孔板中进行的，并以添加底物开始。通过在355nm下激发和在460nm下检测的发射，由Tecan Infinite M200读板仪每60秒测量荧光产物的产生，持续45分钟，并且将4-甲基伞形花内酯(Sigma M1381)用于产生标准曲线。测定所测试的化合物的各浓度的产物生产斜率并使用S形剂量反应曲线的标准曲线拟合算法绘图。测定了数据的4参数逻辑曲线拟合的值。
[0420] 使用Cheng-Prusoff公式测定了KI值。
[0421] 当在该试验中测试时，本文所述的许多化合物表现出为10nM至大于100μM的抑制β-氨基己糖苷酶的KI值。
[0422] O-GlcNAcase相对于β-氨基己糖苷酶的抑制作用的选择比在此如下所定义：
[0423] KI(β-氨基己糖苷酶)/KI(O-GlcNAcase)
[0424] 通常，本文所述化合物通常表现出为约10至100000的选择比。因此，许多本发明化合物表现出高的O-GlcNAcase相对于β-氨基己糖苷酶的抑制的选择性。
[0425] 抑制O-GlcNAase活性的化合物的细胞活性测定试验
[0426] 从细胞蛋白除去O-GlcNAc的O-GlcNAcase的抑制导致细胞中O-GlcNAc化蛋白(O-GlcNAcylated protein)的水平增加。能够通过与O-GlcNAc化蛋白结合的诸如RL-2的抗体测量O-GlcNAc化蛋白的增加。能够通过酶联免疫吸附测定(ELISA)程序测量O-GlcNAc化蛋白：RL2抗体交互作用的量。
[0427] 能够利用表达内源性O-GlcNAcase水平的各种组织培养细胞系；实例包括大鼠PC-12和人类U-87或SK-N-SH细胞。在此试验中，将大鼠PC-12细胞以约10,000个细胞/孔而涂在96-孔板中。将要测试的化合物溶解在DMSO中，或2mM或10mM原液，然后使用Tecan工作台以两步法用DMSO和水稀释。将细胞用稀释的化合物处理24小时(5.4μL稀释成200μL，即使1个孔体积)，以达到测量化合物浓度依赖反应所需的最终抑制剂浓度，典型地，使用以10μM开始的10次3倍稀释步骤来测定浓度反应曲线。为了制备细胞溶解产物，从经化合物处理的细胞除去培养基，将细胞用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤一次，然后在室温下经5分钟溶解在具有蛋白酶抑制剂和PMSF的50μL Phosphosafe试剂(Novagen Inc，Madison，WI)中。收集细胞溶解产物并转移至新的板，然后，将其直接涂布至检定板或-80℃下冷冻，直至在ELISA程序中使用。若需要，使用20μL样品、使用BCA方法测定样品的总蛋白浓度。
[0428] 试验的ELISA部分是在4℃下以100μL/孔的细胞溶解产物(将溶解产物用含有含蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂和PMSF的PBS以1∶10稀释)涂布过夜的黑色Maxisorp96-孔板中进行的。隔天将孔用300μL/孔的洗涤缓冲液(含有0.1％Tween 20的Tris-缓冲盐水)洗涤3次。将槽孔用100μL/孔的阻断缓冲液(含有0.05％Tween 20和2.5％牛血清白蛋白的Tris缓冲盐水)阻断。然后，将每一孔用300μL/孔的洗涤缓冲液洗涤
2次。以100μL/孔添加在阻断缓冲液中1∶1000稀释的抗O-GlcNAc抗体RL-2(Abcam，Cambridge，MA)。将板密封并在37℃下通过温和摇动而孵育2小时。然后，用300μL/孔的洗涤缓冲液洗涤孔3次。为了检测RL-2的量，以100μL/孔添加结合辣根过氧化酶(HRP)配合的山羊抗小鼠二级抗体(在阻断缓冲液中以1∶3000稀释)。将板在37℃下通过温和摇动而孵育60分钟。然后，每一孔用300μL/孔的洗涤缓冲液洗涤3次。添加检测试剂，即100μL/孔的Amplex Ultra RED试剂(通过将30μL的10mM Amplex Ultra Red原液添加至含有18μL3％过氧化氢(H2O2)的10mL PBS中而制备)。将检测反应在室温下孵育
15分钟，然后通过在530nm下激发和590nm下发射而读取。
2次。以100μL/孔添加在阻断缓冲液中1∶1000稀释的抗O-GlcNAc抗体RL-2(Abcam，Cambridge，MA)。将板密封并在37℃下通过温和摇动而孵育2小时。然后，用300μL/孔的洗涤缓冲液洗涤孔3次。为了检测RL-2的量，以100μL/孔添加结合辣根过氧化酶(HRP)配合的山羊抗小鼠二级抗体(在阻断缓冲液中以1∶3000稀释)。将板在37℃下通过温和摇动而孵育60分钟。然后，每一孔用300μL/孔的洗涤缓冲液洗涤3次。添加检测试剂，即100μL/孔的Amplex Ultra RED试剂(通过将30μL的10mM Amplex Ultra Red原液添加至含有18μL3％过氧化氢(H2O2)的10mL PBS中而制备)。将检测反应在室温下孵育
15分钟，然后通过在530nm下激发和590nm下发射而读取。
[0429] 使用S形剂量反应曲线的标准曲线拟合算法，对受试化合物的每一浓度绘制如ELISA试验所检测的O-GlcNAc化蛋白的量。测定数据的4参数逻辑曲线拟合的值，并且曲线的拐点为受试化合物的效力值。
[0430] 视渗透率(Papp)的测定试验
[0431] 在LLC-PK1细胞中评估了双向输送，以便测定视渗透率(Papp)。LLC-PK1细胞能够形成紧密的单层，因此能够用于评定从底外侧到顶点(B→A)以及从顶点至底外侧(A→B)的化合物向量输送。
[0432] 为了测定Papp，将LLC-PK1细胞在96-孔transwell培养板(Millipore)中培养。在含有10mM HEPES的汉克氏平衡盐(Hank′s Balanced Salt)溶液中制备含有受试化合物的溶液(1μM)。将底物溶液(150μL)添加到培养板的顶端(A)或底外侧(B)隔间中，并且将缓冲液(150μL)添加到与含有化合物的隔间相对的隔间中。在t＝3h时，从给予受试化合物的单层的两面取出50μL样品，并将样品放入96孔板中，将闪烁剂(200μL)或内标物(100μL的1μM拉贝洛尔)添加到样品中，并通过在MicroBeta Wallac Trilux闪烁计数器(Perkin Elmer Life Sciences，Boston，MA)中计数液体闪烁或通过LCMS/MS(Applied
3
Biosystems SCIEX API 5000三重四极质谱仪)来测定浓度。使用[H]维拉帕米(1μM)作为阳性对照。将实验重复3次。
3
Biosystems SCIEX API 5000三重四极质谱仪)来测定浓度。使用[H]维拉帕米(1μM)作为阳性对照。将实验重复3次。
[0433] 视渗透率Papp是由以下公式对t＝3h时所采集的样品而计算的：
[0434]
[0435] 其中：受体室的体积为0.15mL；膜面积为0.11cm2；初始浓度为t＝3h时在供体中所测量的浓度加上在接受者隔间中所测量的浓度的总和；Δ浓度为在3h时接受者隔间中-6的浓度；以及Δ时间为孵育时间(3×60×60＝10800s)。Papp以10 cm/s表示。Papp(LLC-PK1细胞)为t＝3h时从A输送至B的Papp与从B输送至A的Papp的平均值：
[0436]
[0437] 将上述结合、基于细胞以及渗透率试验的代表性数据在下表中示出。与在WO2006/092049和WO2008/025170中所公开的化合物相比，本发明的某些化合物在这些试验中的一个或多个中表现出优异的效力或渗透率。为了进行比较，前两个表项示出在WO2008/025170中所公开的化合物(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(乙胺基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇和(3aR，5R，6S，7R，7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟甲基)-5，6，7，7a-四氢-3aH-吡喃并[3，2-d]噻唑-6，7-二醇的数据。
[0438]
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