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作为抗炎剂的官能化糖类

阅读：594发布：2020-05-12

专利汇可以提供作为抗炎剂的官能化糖类专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明涉及对哺乳动物的炎症机制起作用的官能化糖类抗炎剂，特别是通过抑制或约束至少一种细胞因子的表达而对至少一种细胞因子的表达起作用的抗炎剂，其中，所述细胞因子选自由促炎细胞因子、抗炎细胞因子和趋化因子组成的组。，下面是作为抗炎剂的官能化糖类专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种用作抗炎剂的化合物[下文中称为抗炎化合物(C)]，其对哺乳动物中的炎性机制起作用，其中，所述抗炎化合物(C)是根据通式(I)、(II)、(III)或(IV)的至少一种所述化合物，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物：
其中，
-R1各自独立地选自-OH或-N(R1a)(R1b)，其中，R1a和R1b的每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，
-R2、R4、R5、R11和R12的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、-ORz、-N(Rz)2、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rz独立地选自H、羟基保护基、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，
-R3各自独立地选自由H、-OH、-NH2、-SH、ORw、-NH(Rw)、-N(Rw)2、-SRw、-O(C＝O)Rw、-NH(C＝O)Rw、-O(C＝NH)Rw、-NH(C＝NH)Rw、-S(C＝NH))Rw、-NH(C＝S)Rw、-S(C＝O)Rw、-O(C＝S)Rw、-S(＝S)Rw、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rw选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基，和杂脂肪族基组成的组，
-R6、R14和R15的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、羟基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分组成的组，
-R7各自独立地选自由以下项组成的组：H、C(＝O)N(Rz′)2、-C(＝O)ORz′、羟基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，其中，Rz'独立地选自由H、羟基保护基、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，
-R10各自独立地选自由-C(＝O)N(Rl)(Rp)、-C(＝O)ORk和-CH2ORk组成的组，其中，R1和Rp彼此独立并且在每次出现时选自由以下项组成的组：H、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，其中，Rk独立地选自由以下项组成的组：H、羟基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，
13 o” m” o” m”
-R 各自独立地选自由-OH和-N(R )(R )组成的组，其中，R 和R 彼此独立并且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rh、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rh选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，-(Ro)和(Rm)的每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、–C(＝O)Rw'、氨基保护基、芳w′
基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，R 选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组；
-(Rs)和(Rt)的每一个彼此独立且每次出现时选自由H、–C(＝O)Rw”、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rw”选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组；
-R6a和R6a′的每一个彼此独立且在每次出现时选自H或-OH，优选地R6a为H且R6a′为-OH；
-Rc各自独立地选自由H、卤素、杂芳基、-ORq、-N(Rq)2、-SRq、NO2、-NC、-CN、-N3、-N(Rq)＝NRq、-CHO、-C(＝O)Rq、-C(＝S)Rq、C(＝NRq)Rq、-C(＝O)ORq、-C(＝NRq)ORq、-C(＝NRq)N(Rq)2、-C(＝O)N(Rq)2、-C(＝S)ORq、-C(＝O)SRq、-C(＝S)SRq、-P(＝O)(ORq)2、-S(＝O)(ORq)、-S(＝O)2(ORq)、-P(＝O)N(Rq)2、-P(＝O)2N(Rq)2、-C(＝O)NR'S(＝O)2Rq、-S(＝O)N(Rq)2和-S(＝O)
2N(Rq)2组成的组，其中，Rq各自独立选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基、杂芳基和羟基保护基组成的组，
-Ri各自独立地选自由H、羟基保护基、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基和杂芳基组成的组，-脂质各自独立地选自H或C1-30脂肪族部分，其中，0至10个亚甲基单元可选地被以下项取代：-O-、-NRx-、-S-、-C(＝O)-、-C(＝NRx)-、-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-N＝N-、-C＝N-、-C(Ry)y' x
＝C(R )-、-N-O-、亚芳基或杂亚芳基部分，其中，R各自独立地选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基、杂芳基或氨基保护基组成的组，并且其中，Ry和Ry'的每一个彼此独立并且在每次出现时，选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基和杂芳基组成的组。
2.根据权利要求1所述的用于所述用途的抗炎化合物(C)，其中，所述抗炎化合物(C)是根据通式(Ia)的化合物的至少一种，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物：
其中，
-R1各自独立选自OH、NH2或NH(R1b)，其中，R1b为C1-10环烷基或C1-10环烯基，其可选地被卤
1 1b 1b
代基、羟基或烷氧基取代，更优选地，R为-NH(R )，其中，R 为下式：
-R3各自独立地选自由H、-OH和-ORw组成的组，其中，Rw是D-葡萄糖；
2 4
-R和R中的每一个彼此独立且在每次出现时选自H或-OH；
-R5各自独立地选自H、-OH和-CH3；
-所述脂质选自以下式L1或式L2：
3.根据权利要求2所述的用于所述用途的抗炎化合物(C)，其中，所述抗炎化合物(C)是班贝霉素。
4.根据权利要求1或2所述的用于所述用途的抗炎化合物(C)，其中，所述抗炎化合物(C)是根据通式(Ib)的至少一种化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物：
5.根据权利要求1所述的用于所述用途的抗炎化合物(C)，其中，所述抗炎化合物(C)是根据式(IIa)或式(IIIa)的化合物的至少一种，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物：
其中
-R3为H或-OH；
-R2和R4中的每一个彼此独立且在每次出现时选自H或–OH；
-R6a和R6a′中的每一个彼此独立并且在每次出现时选自H或-OH，优选地，R6a为H且R6a′为-OH；
-R5是H、-OH或CH3；
-R13是-OH或-NHC(＝O)CH3
-所述脂质选自以下式L3、式L4或式L5：
或者
其中
-R4和R5中每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、-CH3和-OH组成的组；
-R7独立地选自H或-C(＝O)NH2，优选地，R7为C(＝O)NH2；
-R10独立地选自-C(＝O)NH2或-C(＝O)OH，优选地，R10为C(＝O)NH2；
-R13独立地选自-OH或-NHC(＝O)CH3，优选地，R13为-NHC(＝O)CH3
-所述脂质选自以下式L6、式L7或式L8：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的用于所述用途的抗炎化合物(C)，其中，所述抗炎化合物(C)对非人类哺乳动物的炎症机制起作用，特别地，所述非人类哺乳动物是猪；反刍动物，诸如特别是牛、马；骆驼；绵羊；山羊；猫；狗；或啮齿动物，诸如特别是小鼠、兔子或大鼠；优选为猪。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的用于所述用途的抗炎化合物(C)，其中，所述抗炎化合物(C)通过抑制或约束至少一种细胞因子的表达而对至少一种细胞因子的表达起作用，其中，所述细胞因子选自由促炎细胞因子、抗炎细胞因子和趋化因子组成的组，所述促炎细胞因子特别是IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-9、IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、TNF-α、LT、LIF、制瘤素和IFN-α、IFN-β、IFN-γ或其混合物；所述抗炎细胞因子特别是IL-4、IL-10、IL-11、W-13、TGFβ或其混合物；所述趋化因子特别是IL-8、Gro-α、MIP-1、MCP-1、ENA-
78、RANTES或混合物。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗炎化合物(C)，其用于治疗炎性疾病或炎性相关疾病，其中，所述炎性疾病或炎性相关疾病由如权利要求7所定义的至少一种细胞因子介导。
9.根据权利要求8所述的抗炎化合物(C)，其中，所述炎性疾病选自由关节炎、类风湿性关节炎、炎性肠病、牛皮癣、多发性硬化、系统性红斑狼疮(SLE)、胰腺炎、硬皮病、I型糖尿病、胃肠炎性疾病、变应性结膜炎、肾小球肾炎、肖格伦综合征、葡萄膜炎、皮炎、强直性脊柱炎和纤维肌痛组成的组。
10.根据权利要求9所述的抗炎化合物(C)，其中，所述炎性疾病选自由胃肠炎性疾病组成的组，所述胃肠炎性疾病诸如为急性胃炎、慢性胃炎、胃溃疡的发生和复发、克罗恩氏病、炎性肠病、肠易激综合症和溃疡性结肠炎。
11.根据权利要求8所述的抗炎化合物(C)，其中，所述炎性相关疾病选自由神经退行性疾病、充血性心力衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、肾衰竭、过敏、纤维化、动脉粥样硬化、代谢性疾病、心血管疾病、化学疗法/放射相关的并发症、肝脏疾病、胃肠疾病、眼病、糖尿病性视网膜病、肺部疾病和麻风病组成的组。
12.一种用作抗炎剂的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的根据权利要求1至5中任一项所定义的抗炎化合物(C)和药学上可接受的载体。
13.根据权利要求12所述的用于所述用途的药物组合物，其中，所述药物组合物以适合于口服施用、直肠施用、经皮施用或通过肠胃外注射施用的单位剂型存在，特别是以片剂、胶囊剂、丸剂、栓剂、粉剂、晶片剂、可注射溶液或悬浮液等及其分隔的倍数存在。
14.通过使用至少一种根据权利要求1至5中任一项所定义的抗炎化合物(C)来抑制或约束炎性反应的体内方法。
15.一种在哺乳动物中抑制或约束至少一种细胞因子表达的方法，所述方法包括向有需要的哺乳动物施用一定量的足以抑制或约束至少一种细胞因子的根据权利要求1至5中任一项所定义的抗炎化合物(C)，其中，所述细胞因子选自由IL-8、Gro-α、MIP-1、MCP-1、ENA-78和RANTES，IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-9、IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、TNF-α、LT、LIF、制瘤素、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-11、W-13和TGFβ组成的组，更优选地，所述至少一种细胞因子选自由IL-8、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TNF-β、IL-17、IL-23和IFN-γ组成的组，甚至更优选地，所述至少一种细胞因子选自由IL-8，IL-1β和IFN-γ组成的组。

说明书全文

作为抗炎剂的官能化糖类

技术领域

[0001] 本发明涉及作为抗炎剂的官能化糖类化合物，其对哺乳动物的炎症机制起作用。

背景技术

[0002] 炎症是免疫系统的复杂生物反应，以保护人体免受有害物质、组织的受伤和破坏。炎症反应可以由物理因素、化学因素和传染原因素(诸如细菌、病毒和其他病原微生物)触发。炎症的目的是消除造成损害的最初原因，清除受损的细胞和组织，并开始组织修复。

[0003] 炎症可以是急性或慢性的。急性炎症是指人体免疫系统对有害刺激的初始反应。慢性炎症是长时间炎症的一种形式，会引起巨噬细胞和T淋巴细胞的募集。巨噬细胞是大型吞噬细胞的白细胞，与T淋巴细胞(已知会产生细胞因子和酶)一起，对细胞造成更长久的破坏。尽管人体必须具有正常运转的免疫系统，但控制这些炎症机制同样重要，因为慢性炎症会引起多种病理甚至癌症。

[0004] 但是，炎症并不是感染的代名词。感染仅涉及微生物入侵与人体对该入侵的炎症反应的相互作用。另一方面，炎症描述了与病因无关的炎症机制。尽管在医疗保健领域，炎症或以后缀-炎(itis)表示的器官特异性炎症通常被称为感染，因为通常观察到微生物入侵与炎症相关。然而，区分两者是很重要的，因为许多病理状况涉及的炎症过程并非由微生物或病毒的入侵所驱动，反过来说，并非所有的微生物或病毒感染都会导致炎症。

[0005] 对于胃炎或胃中存在炎症，感染和炎症之间的混淆尤其存在。许多临床医生认为慢性胃炎等同于幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)(H.pylori)感染。但是，已知有许多其他原因导致这种情况。此外，即使成功根除幽门螺杆菌，胃病状也可以持续。在《美国胃肠病学杂志》中，Genta等人最近有报道说，有多达20％的接受胃活检的患者中，诊断为幽门螺杆菌阴性胃炎。考虑到它的普遍发生，等人已在《新英格兰医学杂志》上发表了一项提案，将幽门螺杆菌阴性胃炎视为独立的临床实体。不存在细菌感染(特别是幽门螺杆菌感染)的胃部炎症的已知原因包括：

[0006] (i)病毒感染(巨细胞病毒、单纯疱疹)

[0007] (ii)由胆汁和胰液回流至胃或由外源性物质(例如非甾体类抗炎药NSAID、乙酰水杨酸ASA、酒精或化学疗法)引起的化学或反应性炎症

[0008] (iii)自身免疫炎症，其特征在于存在针对壁细胞的抗体

[0009] (iv)放射后和嗜酸性粒细胞炎症

[0010] (v)胶原蛋白病过程中的炎症

[0011] (vi)克罗恩病过程中的炎症

[0012] (vii)结节病过程中的炎症

[0013] (viii)压力引起的炎症

[0014] (ix)胃非幽门螺杆菌(NHPH)种，其中H.Suis最为流行。在人类等动物中，它都与慢性胃炎、胃溃疡和其他胃病理变化有关(G.Zhang et al.,Vet Res(2016)47:101,p.1l.1-3)。

[0015] (x)特发性：未发现因果关系的所有胃炎病例。

[0016] 除了幽门螺杆菌阴性的胃炎的问题外，即使在成功根除幽门螺杆菌之后，胃溃疡的复发仍然是人类医学和畜牧业的挑战。以猪为例，尽管经过治疗的猪可能会痊愈，但溃疡的复发是一个普遍的问题。溃疡的复发将导致动物不适和食欲不振，从而减轻体重并产生经济影响。而且在人类医学中，胃溃疡的复发也代表着巨大的健康负担。目前，患有慢性胃炎和/或胃溃疡疾病的人依赖于长期使用质子泵抑制剂(PPI)来阻止胃酸形成。已知所述长期使用具有许多副作用，并且使慢性肾脏疾病的风险增加、肾衰竭，以及心血管事件的风险增加。

[0017] 或者，通过直接靶向幽门螺杆菌来治疗胃溃疡和胃炎，而不是阻止胃酸的产生。

[0018] 此外，使用NSAID来缓解胃部炎症是禁忌，因为已知这些药物是胃病的危险因素。

[0019] 有鉴于此，需要一种抗炎剂，其可以克服当前抗炎治疗的缺点，诸如许多副作用(即慢性肾脏疾病的风险增加、肾衰竭、心血管事件的风险增加等)、应用领域有限、顺应性失败，并克服了溃疡特别是胃溃疡复发的问题。

发明内容

[0020] 申请人现在令人惊讶地发现，有可能提供满足上述需求的抗炎剂。

[0021] 本发明的目的是提供替代NSAID的抗炎剂的选择，以抑制患有胃炎、胃溃疡或具有发展它们风险的哺乳动物的胃中的炎症。

[0022] 本发明的目的是为质子泵抑制剂(PPI’s)在患有胃溃疡疾病和慢性胃炎的受试者中长期使用提供替代方案。

[0023] 本发明的目的是提供一种抗炎剂，其对哺乳动物胃溃疡病和胃炎相关的炎症机制起作用。

[0024] 本发明涉及用作抗炎剂的化合物[抗炎化合物(C)，下文中]，其对哺乳动物中的炎性机制起作用，其中，所述抗炎化合物(C)是根据式(I)、(II)、(III)或(IV)的至少一种所述化合物，或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物：

[0025]

[0026]

[0027]

[0028] 其中，

[0029] -R1各自独立地选自-OH或-N(R1a)(R1b)，其中，R1a和R1b的每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，

[0030] -R2、R4、R5、R11和R12的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、-ORz、-N(Rz)2、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rz独立地选自H、羟基保护基、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，

[0031] -R3各自独立地选自由H、-OH、-NH2、-SH、ORw、-NH(Rw)、-N(Rw)2、-SRw、-O(C＝O)Rw、-NH(C＝O)Rw、-O(C＝NH)Rw、-NH(C＝NH)Rw、-S(C＝NH))Rw、-NH(C＝S)Rw、-S(C＝O)Rw、-O(C＝S)Rw、-S(＝S)Rw、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rw选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基，和杂脂肪族基组成的组，

[0032] -R6、R14和R15的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、羟基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分组成的组，

[0033] -R7各自独立地选自由以下项组成的组：H、C(＝O)N(Rz′)2、-C(＝O)ORz′、羟基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，其中，Rz'独立地选自由H、羟基保护基、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，

[0034] -R10各自独立地选自由-C(＝O)N(Rl)(Rp)、-C(＝O)ORk和-CH2ORk组成的组，其中，R1和Rp彼此独立并且在每次出现时选自由以下项组成的组：H、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，其中，Rk独立地选自由以下项组成的组：H、羟基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基、杂脂肪族基和碳水化合物部分，

[0035] -R13各自独立地选自由-OH和-N(Ro”)(Rm”)组成的组，其中，Ro”和Rm”彼此独立并且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rh、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rh选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，[0036] -(Ro)和(Rm)的每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、–C(＝O)Rw'、氨基保护基、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，Rw′选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组；

[0037] -(Rs)和(Rt)的每一个彼此独立且每次出现时选自由H、–C(＝O)Rw”、氨基保护基、w”芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组，其中，R 选自由碳水化合物部分、芳基、杂芳基、脂肪族基和杂脂肪族基组成的组；

[0038] -R6a和R6a′的每一个彼此独立且在每次出现时选自H或-OH，优选地R6a为H且R6a′为-OH；

[0039] Rc各自独立地选自由H、卤素、杂芳基、-ORq、-N(Rq)2、-SRq、NO2、-NC、-CN、-N3、-N(Rq)＝NRq、-CHO、-C(＝O)Rq、-C(＝S)Rq、C(＝NRq)Rq、-C(＝O)ORq、-C(＝NRq)ORq、-C(＝NRq)N(Rq)2、-C(＝O)N(Rq)2、-C(＝S)ORq、-C(＝O)SRq、-C(＝S)SRq、-P(＝O)(ORq)2、-S(＝O)(ORq)、-S(＝O)2(ORq)、-P(＝O)N(Rq)2、-P(＝O)2N(Rq)2、-C(＝O)NR'S(＝O)2Rq、-S(＝O)Nq q q(R)2和-S(＝O)2N(R)2组成的组，其中，各自R独立选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基、杂芳基和羟基保护基组成的组，

[0040] -Ri各自独立地选自由H、羟基保护基、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基和杂芳基组成的组，

[0041] -脂质各自独立地选自H或C1-30脂肪族部分、其中，0至10个亚甲基单元可选地被以下项取代：-O-、-NRx-、-S-、-C(＝O)-、-C(＝NRx)-、-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-N＝N-、-C＝N-、-C(Ry)＝C(Ry')-、-N-O-、亚芳基或杂亚芳基部分，其中，Rx各自独立地选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基、杂芳基或氨基保护基组成的组，并且其中，Ry和Ry'的每一个彼此独立并且在每次出现时，选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基和杂芳基组成的组。

[0042] 本发明进一步涉及用作抗炎剂的药物组合物，其在哺乳动物中对炎症机制起作用，其包含载体，以及作为活性成分的有效量的如本文提出的实施方案中的任一项所定义的抗炎化合物(C)。

[0043] 本发明进一步涉及制备所述药物组合物的方法。

[0044] 本发明进一步涉及用作药物的如本文提出的实施方案中的任一项所定义的抗炎化合物(C)。

[0045] 本发明进一步涉及用作药物的药物组合物，其包含载体，以及作为活性成分的有效量的本文所提出的实施方案的任一项所定义的抗炎化合物(C)。

[0046] 本发明进一步涉及如本文提出的实施方案中的任一项所定义的抗炎化合物(C)，其用于治疗炎性疾病或炎性相关疾病。

[0047] 本发明进一步涉及如本文提出的实施方案中的任一项所定义的抗炎化合物(C)，其用于治疗由至少一种细胞因子介导的疾病。

[0048] 本发明进一步涉及通过使用如本文提出的实施方案中的任一项所定义的抗炎化合物(C)来抑制或约束(suppressing or inhibiting)炎性反应的体内方法。

[0049] 本发明进一步涉及一种抑制或约束哺乳动物中至少一种细胞因子表达的方法。

[0050] 本发明进一步涉及治疗与哺乳动物中细胞因子表达水平有关的炎性相关疾病的方法。

[0051] 抗炎化合物(C)，及其药学上可接受的盐

[0052] 进一步应理解的是，如上文针对抗炎化合物(C)所述的所有定义和偏好同样适用于该实施方案以及如下所述的所有进一步实施方案。

[0053] 如前和下文中所使用的，除非另有说明，否则适用以下定义。

[0054] 术语“脂肪族的(aliphatic)”包括具有1至30个碳原子的饱和的及不饱和的、非芳族的、直链(即，无支链的)、支链的、无环和环状烃链，其可选地被一个或更多个基团取代，所述基团包括但不限于烷基、炔基、烯基、芳基、卤化物、硝基、氨基、酯、酮、醛、羟基、羧酸或烷氧基。根据一些实施方案，如本文所用，CF-G脂肪族的定义为具有F至G个碳原子的CF-G脂肪族基，例如C1-12脂肪族的定义为包含12个碳原子的脂肪族基，C1-10脂肪族基定义为包含1至10个碳原子的脂肪族基。

[0055] 如本领域普通技术人员之一将理解的，“脂肪族的”在本文中旨在包括但不限于烷基、烯基和炔基部分。如本文所用，术语“烷基”、“烯基”和“炔基”具有本领域通常理解的最广泛含义，并且可以包括直链的、支链的、环状的(环烷基、环烯基、环炔基)或其组合的部分。

[0056] 除非另有说明，术语“烷基”单独或组合是指衍生自烷烃的基团，其可以是含有1至30个碳原子的直链烷基、支链烷基或环状烷基。直链或支链烷基在任何可用的位置连接以产生稳定的化合物。烷基还包括含有环烷基部分或被环烷基部分中断的直链或支链烷基。
根据一些实施方案，CA-B烷基定义具有A至B个碳原子的直链或支链烷基，例如，C1-15烷基定义为具有1至15个碳原子的直链或支链烷基，C1-12烷基定义为具有1至12个碳原子的直链或支链烷基，C1-6烷基定义为具有1至6个碳原子的直链或支链烷基，诸如甲基、乙基、1-丙基、
2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-1-丙基。根据一些实施方案，环状CC-D烷基定义了具有C至D个碳原子(如C3-6环烷基)的环状烷基。

[0057] 除非另有说明，术语“烯基”单独或组合是指含有1-30个碳原子和至少一个碳碳双键的直链或支链烃。烯基的实例包括乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、环己烯基、环己烯基烷基等。烯基还包括含有环烷基部分或被环烷基部分中断的直链或支链烯基。碳碳双键可以包含在环烷基部分内，也可以包含在直链或支链部分内。根据一些实施方案，CH-I烯基定义为具有H至I个碳原子的直链或支链烯基，例如C1-6烯基定义为具有1-6个碳原子的直链或支链烯基。

[0058] 术语“炔基”单独或组合是指含有1至30个碳原子的直链、支链或环状烃，其含有至少一个碳碳三键。炔基的实例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基等。

[0059] 如本文所用，除非另有说明，术语“杂脂肪族的”是指如本文所定义的脂肪族部分，其包括具有1至30个碳原子的饱和与不饱和、非芳族、直链(即，无支链的)、支链的、无环、环状(即杂环)或多环烃，其可选地被一个或更多个基团取代，所述基团包括但不限于烷基、炔基、烯基、芳基、卤化物、硝基、氨基、酯、酮、醛、羟基、羧酸或烷氧基，并且含有例如代替碳原子的一个或更多个杂原子，诸如氧、硫、氮、磷或硅原子。在一些实施方案中，通过用一个或更多个取代基独立取代杂脂肪族部分上的一个或更多个氢原子来取代杂脂肪族部分。如本领域普通技术人员之一将理解的，“杂脂肪族的”在本文中旨在包括杂烷基、杂环烷基、杂环烯基和杂环炔基部分。因此，如本文所用，术语“杂烷基”包括含有例如代替碳原子的一个或更多个杂原子(诸如氧、硫、氮、磷或硅原子)的直链、支链和环状烷基。类似的约定适用于其他通用术语，例如“杂烯基”、“杂炔基”等。此外，如本文所用，术语“杂烷基”、“杂烯基”、“杂炔基”等涵盖取代和未取代的基团。

[0060] 如本文所用，术语“芳基”单独或组合是指任何基于碳的芳族基团，包括但不限于苯基、甲苯基、二甲苯基、枯烯基、萘基、蒽基等，可选地与优选为5-7个，更优选为5-6个环成员和/或可选地被1-5个基团或取代基取代的环烷基或杂环基稠合的碳环。芳基可以可选地被一个或更多个基团取代，所述基团包括但不限于烷基、炔基、烯基、芳基、卤化物、硝基、氨基、酯、酮、醛、羟基、羧酸或烷氧基，据此取代基连接在芳基的一个点上或据此取代基在芳基的两个点连接形成双环系统(例如苯并二恶唑、苯并二恶烷、苯并咪唑)。

[0061] 术语“杂芳基”单独或组合是指包含5或6个环原子的单环芳族环结构，或包含8至10个原子的双环芳族基团，其包含一个或更多个，优选为1-4，更优选为1-3个独立地选自由O、S和N组成的组的杂原子，并且可选地被1-5个基团或取代基取代，包括但不限于烷基、炔基、烯基、芳基、卤化物、硝基、氨基、酯、酮、醛、羟基、羧酸或烷氧基。杂芳基也意图包括氧化的S或N，诸如亚硫酰基、磺酰基和叔环氮的N-氧化物。碳或氮原子是杂芳基环结构的连接点，因此保留了稳定的芳环。更具体而言，术语杂芳基包括但不限于吡啶基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、咪唑基、异恶唑基、吡咯基、吡唑基、嘧啶基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并三唑基、吲哚基、异吲哚基、苯并恶唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并异恶唑基、苯并噻吩基、二苯并呋喃和苯并二氮杂-2-酮-5-基等。

[0062] 根据本发明的某个实施方案，脂质是不饱和的C4-20烃链，其中，1至10个亚甲基单元被-C(Ry)＝C(Ry')-代替，其中，Ry和Ry'中的每一个彼此独立并且每次出现时，选自由H、脂肪族基、杂脂肪族基、芳基或杂芳基组成的组；并且其中，所述烃链可选地被C1-6烷基、C3-6环y烷基、C1-6烯基或羟基取代，优选地，脂质是C4-20烃链，其中，1-5个亚甲基单元被-C(R )＝C(Ry')-代替，其中，Ry和Ry'的每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、C1-6烷基和C1-6烯基组成的组，并且其中，烃链可选地被C1-6烷基、C3-6环状烷基、C1-6烯基或羟基取代，更优选地，脂质选自下式：

[0063]

[0064] 甚至更优选，脂质选自下式：

[0065]

[0066]

[0067] 根据本发明的一些实施方案，所述脂质是根据通式Z的饱和烃链：

[0068]

[0069] 其中，-R9'和R9”的每一个彼此独立并且每次出现时选自由H、-OH和C1-6烷基组成的组，

[0070] -Rx′和Rx″的每一个彼此独立并且在每次出现时选自H、C1-15烷基和芳基组成，其中，所述芳基可选地进一步被C1-15烷基取代，并且其中n＝4至30，且m＝0或1

[0071] 优选地，饱和烃链选自下式：

[0072]

[0073]

[0074] 根据本发明的某个实施方案，R1独立地选自-OH或-N(R1a)(R1b)，其中，R1a和R1b的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、C1-20脂肪族基和C1-20杂脂肪族基组成的组，优选R1为OH、NH2或NH(R1b)，其中，R1b为C1-10环烷基或C1-10环烯基，其可选地被卤代基、羟基或烷氧基取代，更优选R1为-NH(R1b)，其中，R1b具有下式：

[0075]

[0076] 根据本发明的某个实施方案，R3独立地选自由H、-OH和-ORw组成的组，其中，Rw选自碳水化合物部分所组成的组，其中，所述碳水化合物部分独立地选自由D-和L-单糖(诸如特别是D-赤藓糖、L-赤藓糖、D-苏阿糖、L-苏阿糖、L-赤藓酮糖、D-赤藓酮糖、D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、D-脱氧核糖、L-脱氧核糖、D-来苏糖、L-来苏糖、D-核糖、L-核糖、D-核酮糖、L-核酮糖、D-木糖、L-木糖、D-木酮糖、L-木酮糖、D-阿洛糖、L-阿洛糖、D-阿卓糖、L-阿卓糖、D-半乳糖、L-半乳糖、D-葡萄糖、L-葡萄糖、D-古洛糖、L-古洛糖、D-艾杜糖、L-艾杜糖、D-甘露糖、L-甘露糖、D-塔罗糖、L-塔罗糖、D-果糖、L-果糖、D-阿洛酮糖、L-阿洛酮糖、D-山梨糖、L-山梨糖、D-塔格糖、L-塔格糖、D-岩藻糖、L-岩藻糖、D-鼠李糖和L-鼠李糖)、二糖(诸如特别是蔗糖、乳糖、海藻糖和麦芽糖)、三糖(诸如特别是阿卡波糖、棉子糖和松三糖)组成的组，更优选地，R3是-ORw，其中Rw是D-单糖，诸如特别是D-赤藓糖、D-苏阿糖、D-赤藓酮糖、D-阿拉伯糖、D-脱氧核糖、D-来苏糖、D-核糖、D-核酮糖、D-木糖、D-木酮糖、D-阿洛糖、D-阿卓糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-古洛糖、D-艾杜糖、D-甘露糖、D-塔罗糖、D-果糖、D-阿洛酮糖、D-山梨糖、D-塔格糖、D-岩藻糖和D-鼠李糖，甚至更优选地，R3是-ORw，其中Rw独立地选自由D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿洛糖、D-阿卓糖、D-甘露糖、D-艾杜糖、D-galose或D-塔洛糖组成的组，最优选地，R3是-ORw，其中Rw是D-葡萄糖。

[0077] 根据本发明的某个实施方案，R2、R4、R5、R11和R12的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、ORz、C1-12脂肪族基、C1-12杂脂肪族基和碳水化合物部分所组成的组，其中，Rz选自由H、羟基保护基、C1-12脂肪族基、C1-12杂脂肪族基、芳基和杂芳基组成的组，并且其中所述碳水化合物部分选自由D-单糖(诸如特别是D-赤藓糖、D-苏糖、D-赤藓酮糖、D-阿拉伯糖、D-脱氧核糖、D-来苏糖、D-核糖、D-核酮糖、D-木糖、D-木酮糖、D-阿洛糖、D-阿卓糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-古洛糖、D-艾杜糖、D-甘露糖、D-塔罗糖、D-果糖、D-阿洛酮糖、D-山梨糖、D-塔格糖、D-岩藻糖和D-鼠李糖)组成的组，优选地，R2、R4、R5、R11和R12的每一个彼此独立并且每次出现时，选自由H、ORz、羟基保护基、C1-6烷基和碳氢化合物所组成的组，其中，Rz选自由H、羟基保护基和C1-6烷基组成的组，并且其中，所述碳水化合物部分选自由D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿洛糖、D-阿卓糖、D-甘露糖、D-艾杜糖、D-galose和D-塔洛糖组成的组，更优选地，R2、R4、R11和R12彼此独立并且在每次出现时选自由H或ORz，其中，Rz选自H或C1-6烷基，更优选R5为C1-6烷基，甚至更优选R2为H，R4、R11和R12为-OH且R5为-CH3；

[0078] 根据本发明的某个实施方案，R6、R14和R15的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、羟基保护基、C1-12脂肪族基和C1-12杂脂肪族基组成的组。优选地，R6、R14和R15彼此独立并且在每次出现时选自由H或羟基保护基组成的组，更优选地，R6、R14和R15彼此独立并且在每次出现时为H。

[0079] 根据本发明的某个实施方案，R7为-C(＝O)N(Rz′)2基团，其中，Rz′各自独立地选自由H、芳基、杂芳基和C1-12烷基组成的组，优选地，Rz'各自独立地选自H或C1-12烷基，更优选地，Rz'各自独立地选自由H、甲基、乙基和丙基组成的组，最优选地，Rz'各自独立地为H。

[0080] 根据本发明的一些实施方案，R10各自独立地选自–C(＝O)N(RI)(Rp)或-C(＝O)ORk，其中RI和Rp彼此独立并且在每次出现时，选自由H、氨基保护基、芳基、杂芳基、C1-12脂肪族基和C1-12杂脂肪族基组成的组，并且其中，Rk独立地选自由H、羟基保护基、芳基、杂芳基、C1-30脂肪族基和C1-30杂脂肪族基组成的组，优选地，R10各自独立地选自–C(＝O)N(RI)(Rp)或-C(＝O)ORk，其中，RI和Rp独立彼此并在每次出现时选自由H、氨基保护基、芳基、杂芳基和C1-6烷基组成的组，其中，Rk各自独立地选自由H、羟基保护基和C1-6烷基组成的组，更优选地，R10I p k I p各自独立地选自–C(＝O)N(R)(R)或-C(＝O)OR ，其中，R 和R彼此独立并在每次出现时选自由H、氨基保护基、甲基、乙基和丙基组成的组，其中，Rk各自独立地选自由H、羟基保护基、甲基、乙基和丙基组成的组，最优选地，R10是-C(＝O)NH2或-C(＝O)OH。

[0081] 根据本发明的某个实施方案，R13各自独立地选自由-OH和-N(Ro”)(Rm”)组成的组，o” m” h其中，R 和R 彼此独立，并且在每次出现时，选自由H、-C(＝O)R、氨基保护基、C1-12脂肪族基和C1-12杂脂肪族基组成的组，其中，Rh独立地选自C1-12脂肪族基或C1-12杂脂肪族基，优选地，Ro”和Rm'彼此独立且每次出现时选自由H、–C(＝O)Rh和C1-12烷基组成的组，其中，Rh为C1-12烷基，更优选地，Ro”和Rm”彼此独立并且在每次出现时，选自由H、–C(＝O)Rh和C1-6烷基组成的组，其中，Rh为C1-6烷基，最优选Ro”为H且Rm'为–C(＝O)CH3。

[0082] 根据本发明的某个实施方案，(Ro)和(Rm)的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rw'、氨基保护基、C1-12脂肪族基和C1-12杂脂肪族基组成的组，其中，Rw′独立地选自由C1-12脂肪族基和C1-12杂脂肪族基组成的组，优选地，(Ro)和(Rm)彼此独立并且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rw'、氨基保护基和C1-12烷基，其中，Rw'为C1-12烷基，更优选地，(Ro)和(Rm)彼此独立且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rw'和C1-6烷基组成的组，其中，Rw'为C1-6烷o m基，最优选为(R)是H且(R)是–C(＝O)CH3。

[0083] 根据本发明的某个实施方案，(Rs)和(Rt)的每一个彼此独立并且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rw″、氨基保护基团、C1-12脂肪族基和C1-12杂脂肪族基组成的组，其中，Rw″独立地选自C1-12脂肪族基或C1-12杂脂肪族基，优选地，(Rs)和(Rt)彼此独立并且在每次出现时选w″ w″ s自由H、-C(＝O)R 、氨基保护基和C1-12烷基组成的组，其中，R 为C1-12烷基，更优选地，(R)和(Rt)彼此独立并且在每次出现时选自由H、-C(＝O)Rw″和C1-6烷基组成的组，其中，Rw″为是C1-6烷基，最优选地，(Rs)是H且(Rt)为–C(＝O)CH3。

[0084] 根据本发明的某个实施方案，Rc各自独立地选自由H、-C(＝O)ORq、-C(＝O)SRq、-Cq q q q(＝S)OR 、-C(＝O)SR 、-C(＝S)SR组成的组，其中，R各自独立地选自由H、C1-12烷基、芳基、杂芳基和羟基保护基组成的组，优选地，Rc各自独立地选自由H、-C(＝O)ORq、-C(＝O)SRq和-C(＝O)SRq组成的组，其中，Rq各自独立地选自由H、C1-6烷基和羟基保护基组成的组，更优选地，Rc各自独立地选自H或-C(＝O)ORq，其中，Rq各自独立地选自H、甲基、乙基和丙基，最优选Rc为-C(＝O)OH。

[0085] 根据本发明的某个实施方案，Ri各自独立地选自由H、羟基保护基、C1-12脂肪族基、C1-12杂脂肪族基、芳基和杂芳基组成的组，优选地，Ri独立地选自由H、羟基保护基、C1-12烷基、芳基和杂芳基组成的组，更优选地，Ri独立地选自由H、羟基保护基和C1-6烷基组成的组，甚至更优选地，Ri独立地选自由H、羟基保护基、甲基、乙基和丙基组成的组，最优选Ri为H。

[0086] 如上所述，本发明的抗炎化合物(C)具有若干手性中心并且以立体化学异构形式存在。如本文所用，术语“立体化学异构形式”定义了由通过相同键序列键合的相同原子组成但具有不可互换的不同三维结构的所有可能的化合物，以上本文指定的抗炎化合物(C)可能具备。

[0087] 除非另有说明或指出，如前所述抗炎化合物(C)的化学名称包括所述抗炎化合物(C)可能具备的所有可能的立体化学异构形式的混合物。所述混合物可包含所述抗炎化合物(C)的基本分子结构的所有非对映异构体和/或对映异构体。纯形式或彼此混合的本发明化合物的所有立体化学异构形式均意图包含在本发明的范围内。

[0088] 优选的抗炎化合物(C)为根据式(Ia)的化合物[下文称为I类抗炎化合物(C)]或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物，

[0089]

[0090] 其中，

[0091] -R1各自独立选自OH、NH2或NH(R1b)，其中，R1b为C1-10环烷基或C1-10环烯基，其可选地1 1b 1b
被卤代基、羟基或烷氧基取代，更优选地，R为-NH(R )，其中R 具有下式：

[0092]

[0093] -R3各自独立地选自由H、-OH和-ORw组成的组，其中Rw是D-葡萄糖；

[0094] -R2和R4的每个彼此独立且在每次出现时选自H或-OH；

[0095] -R5各自独立地选自H、-OH和-CH3；

[0096] -脂质选自以下式L1或式L2：

[0097]

[0098] 更优选地，抗炎化合物(C)是如上所述的I类抗炎化合物(C)的混合物。

[0099] 适用于本发明的市售抗炎化合物(C)的非限制性实例包括

[0100] 市售的也以其同名班贝霉素(Bambermycin)所周知。

[0101] 班贝霉素或是已知的化合物复合物，主要由莫能霉素A和C组成，特别是主要化合物是如下式(Ib)所示的莫能霉素A，次要化合物标记为A12、C1、C3和C4。如上所述，莫诺霉素A和标记为A12、C1、C3和C4的次要化合物是根据式(Ia)的化合物。

[0102] 在莫诺霉素A中(根据下面详细描述的式(Ib))以及次要化合物A12、C1、C3和C4，脂质根据式L2、R2为H，R1为-NH(R1b)，其中，R1b为下式：

[0103]

[0104] 在莫诺霉素A中，R3为ORw，其中，Rw为D-葡萄糖，R4为OH且R5为CH3。在莫诺霉素A12中，R3为ORw，其中，Rw为D-葡萄糖，R4为H且R5为OH。

[0105] 在莫诺霉素C1中，R3为H，R4为H，R5为OH。在莫诺霉素C3中，R3为H，R4为OH且R5为CH3。在莫诺霉素C4中，R3为OH，R4为OH且R5为CH3。

[0106] 可以从班氏链霉菌和加纳链霉菌、埃德链霉菌，吉氏链霉菌和相关菌株中获得班贝霉素或或通过其进行生物合成，从而形成如上所述的化合物的复合物。由于复合物未得到充分纯化，因此还包含生物合成的基本构成要素和各种中间产
物。

[0107] 班贝霉素也被称为黄磷脂素(flavophospholipol)。班贝霉素、黄磷脂素和在本文可互换使用。

[0108] 优选的I类抗炎化合物(C)特别是根据式(Ib)的莫能霉素A或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或混合物：

[0109]

[0110] 根据本发明的替代性实施方案，抗炎化合物(C)为根据式(IIa)的化合物[以下称为II类抗炎化合物(C)]或药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或其混合物：

[0111]

[0112] 其中

[0113] -R3为H或-OH；

[0114] -R2和R4的每一个彼此独立且在每次出现时选自H或-OH；

[0115] -R6a和R6a＇的每一个彼此独立并且在每次出现时选自H或-OH，优选R6a为H且R6a＇为-OH；

[0116] -R5是H、-OH或CH3；

[0117] -R13是-OH或-NHC(＝O)CH3

[0118] -脂质选自以下式L3、式L4或式L5：

[0119]

[0120] 根据本发明的替代性实施方案，抗炎化合物(C)为根据式(IIIa)的化合物[下文称为III类抗炎化合物(C)]或药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或其混合物：

[0121]

[0122] 其中

[0123] -R4和R5的每一个彼此独立且在每次出现时选自由H、-CH3和-OH组成的组；

[0124] -R7独立地选自H或-C(＝O)NH2，优选地，R7为C(＝O)NH2；

[0125] -R10独立地选自-C(＝O)NH2或-C(＝O)OH，优选地，R10为C(＝O)NH2。

[0126] -R13独立地选自由-OH或-NHC(＝O)CH3组成的组，优选地，R13为-NHC(＝O)CH3[0127] -脂质选自以下式L6、式L7或式L8：

[0128]

[0129]

[0130] 对于治疗用途，如上所述，本发明的抗炎化合物(C)的盐是其中抗衡离子是药学上可接受的盐，这些盐可以称为药学上可接受的酸和碱加成盐。但是，非药学上可接受的酸和碱的盐也可用于例如药学上可接受的化合物的制备或纯化。无论是否药学上可接受的，所有盐都包括在本发明的范围内。

[0131] 上文提及的药学上可接受的酸和碱加成盐意欲包含如上所述的本发明的抗炎化合物(C)能够形成的治疗活性的无毒酸和碱加成盐形式。药学上可接受的酸加成盐可以方便地通过用这种合适的阴离子形式的酸处理碱形式而获得。合适的阴离子包括，例如，三氟乙酸根、乙酸根、苯磺酸根、苯甲酸根、碳酸氢根、酒石酸氢根、溴离子、依地酸钙、樟脑磺酸根、碳酸根、氯离子、柠檬酸根、二氢盐酸、依地酸根、乙二磺酸根、丙酸酯月桂硫酸根、乙磺酸根、富马酸根、葡庚糖酸根、葡糖酸根、谷氨酸根、乙酰水杨酸乙二醇根(glycollylarsanilate)、己基间苯二酸根(hexylresorcinate)、海巴胺(hydrabamine)、氢溴酸、盐酸、羟萘甲酸根、碘离子、羟乙磺酸根、乳酸根、乳糖醛酸根、苹果酸根、马来酸根、扁桃酸根、甲磺酸根、甲基溴、甲基硝酸根、甲基硫酸根、粘酸根、萘磺酸根、硝酸根、双羟萘酸根(思波酸根)、泛酸根、磷酸根/二磷酸根、聚半乳糖醛酸根、水杨酸根、硬脂酸根、次乙酸根、琥珀酸根、硫酸根、单宁酸根、酒石酸根、氯茶碱、三乙基碘等。可以使用离子交换树脂引入选择的抗衡离子。相反，可以通过用适当的碱处理将所述盐形式转化为游离碱形式。

[0132] 含有酸性质子的本文指定的抗炎化合物(C)也可以通过用阳离子形式的适当有机和无机碱处理而转化成它们的无毒金属或胺加成盐形式。合适的碱性盐包括那些与有机阳离子(诸如苄星青霉素、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、普鲁卡因等)形成的那些；以及由金属阳离子(诸如铝离子、钙离子、锂离子、镁离子、钾离子、钠离子、锌离子等)形成的那些。相反，可以通过用适当的酸处理将所述盐形式转化为游离形式。

[0133] 上文所用的术语加成盐还包括本文所述的抗炎化合物(C)能够形成的溶剂化物。这样的溶剂化物是例如水合物、醇化物等。

[0134] 众所周知，与炎症有关的疾病涉及复杂的细胞因子网络“系统”，使得免疫系统的功能通过促炎和抗炎介质或细胞因子的活性得到很好的平衡。

[0135] 正如所说的，如上所述，本发明的抗炎化合物(C)对哺乳动物的炎症机制起作用。优选地，如上所述，本发明的抗炎化合物(C)对非人类哺乳动物的炎性机制起作用。非人类哺乳动物可以是猪；反刍动物，诸如特别是牛、马；骆驼；绵羊；山羊；猫；狗；或啮齿动物，诸如特别是小鼠、兔子或大鼠；优选为猪。

[0136] 申请人惊奇地发现，如上所述，本发明的抗炎化合物(C)可通过抑制或约束至少一种细胞因子的表达而对细胞因子的表达起作用，其中，所述细胞因子选自由促炎细胞因子、抗炎细胞因子和趋化因子组成的组。

[0137] 在本发明的上下文中，表述“至少一种细胞因子”旨在表示一种或一种以上细胞因子。换句话说，本发明的抗炎化合物(C)可以同时抑制或约束一种、两种、三种或更多种细胞因子的表达，从而以更少的副作用获得更好的治疗效果。

[0138] 申请人进一步发现，通过本发明的抗炎化合物(C)抑制或约束至少一种细胞因子的表达，观察到巨噬细胞、B细胞和T细胞的浸润显著降低。就是说，本发明的抗炎化合物(C)显示出抑制或约束炎症特性。

[0139] 由细胞因子(C)介导并可由本发明的抗炎化合物(C)治疗的疾病的实例特别地包括炎性疾病和炎性相关疾病。

[0140] 炎性疾病的非限制性实例特别地包括关节炎、类风湿性关节炎、炎性肠病、牛皮癣、多发性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、胰腺炎、硬皮病、I型糖尿病、胃肠炎性疾病、变应性结膜炎、肾小球肾炎、肖格伦综合征、葡萄膜炎、皮炎、强直性脊柱炎和纤维肌痛。

[0141] 据了解，“胃肠炎性疾病”是指诸如急性胃炎、慢性胃炎、胃溃疡的发生和复发、克罗恩病、炎性肠病、肠易激综合症和溃疡性结肠炎等疾病。

[0142] 炎性相关疾病的非限制性实例特别地包括神经退行性疾病、充血性心力衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、肾衰竭、过敏、纤维化、动脉粥样硬化、代谢性疾病、心血管疾病、化学疗法/辐射相关并发症、肝脏疾病、胃肠疾病、眼病、糖尿病性视网膜病、肺部疾病和麻风病。

[0143] 促炎细胞因子特别地包括IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-9、IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、TNF-α、LT、LIF、制瘤素和IFN-α、IFN-β和IFN-Υ。

[0144] 抗炎细胞因子特别包括IL-4、IL-10、IL-11、W-13和TGFβ。

[0145] 趋化因子尤其包括IL-8、Gro-α、MIP-1、MCP-1、ENA-78和RANTES。

[0146] 除非另有说明或指出，否则如上文详述的细胞因子(C)的名称包括可被所述抗炎化合物(C)抑制的所有可能的同源形式的存在。同源定义为源自共同祖先的生物学结构、蛋白质或DNA序列之间的关系。例如，术语“IL-8”是指IL-8和IL-8的所有同源物，诸如特别是IL-8Kc、IL-8MIP、IL-8LIX等。

[0147] 药物组合物

[0148] 本发明进一步涉及药物组合物，其包含治疗有效量的如上文所定义以及如本文所呈现的实施方案中任一项所定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中的任何一种的抗炎化合物(C)和药学上可接受的载体。

[0149] 在本文的其余部分中，出于本发明的目的，表述“抗炎化合物(C)”应理解为复数和单数，也就是说，本发明的组合物可以包含一种或不止一种抗炎化合物(C)”

[0150] 在另一方面，本发明涉及制备如上所述的药物组合物的方法，该方法包括将药学上可接受的载体与治疗有效量的如上定义以及如本文所呈现的任一实施方案中所定义的抗炎化合物(C)(特别是如上定义的(I)至(III)中任一项的抗炎化合物(C))紧密混合。

[0151] 因此，可以将本文特定的本发明的抗炎化合物(C)，特别是如上所定义的(I)至(III)类的任何抗炎化合物(C)配制成用于施用目的的各种药物形式。作为合适的组合物，可以列举通常用于全身性施用的所有组合物。为了制备本发明的药物组合物，将有效量的特定化合物，可选以盐形式或金属络合物的形式，作为活性成分与药学上可接受的载体紧密混合，该载体取决于施用所需的制剂形式可以采取多种形式。这些药物组合物以适合的单位剂型需要，特别适合于口服、直肠、经皮或肠胃外注射施用。例如，在制备口服剂型的组合物时，对于口服液体制剂(诸如悬浮剂、糖浆、酏剂、乳剂和溶液)，可以使用任何常用的药物介质，诸如水、乙二醇、油、醇等；在粉末、丸剂、胶囊和片剂的情况下，也可以是固体载体，诸如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。

[0152] 由于易于施用，片剂和胶囊剂是最有利的口服剂量单位形式，在这种情况下，显然使用固体药物载体。对于肠胃外组合物，尽管可以包括例如有助于溶解的其他成分，载体通常将至少大部分包含无菌水。例如，可以制备可注射溶液，其中载体包括盐溶液、葡萄糖溶液或盐和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备可注射的悬浮液，在这种情况下，可以使用适当的液体载体、悬浮剂等。还包括固体剂型，打算在使用前不久将其转变成液体剂型。在适合于经皮施用的组合物中，载体可选地包含渗透增强剂和/或合适的湿润剂，可选地以较小比例与任何性质的合适添加剂组合，该添加剂不会对皮肤产生明显的有害作用。

[0153] 如上文所定义以及如本文所呈现的实施方案中任一项所定义的抗炎化合物(C)，特别是如上文所定义的(I)至(III)类中的任一种的抗炎化合物(C)也可以通过本领域中用于通过经口吸入或吹入方式施用的方法和制剂，来经口吸入或吹入进行施用。因此，通常可以将如本文所特定的抗炎化合物(C)，特别是如上文所定义的(I)至(III)类的任何抗炎化合物(C)以溶液、悬浮液或干粉的形式(优选溶液)施用至肺中。为通过口服吸入或吹入递送溶液、悬浮液或干粉而开发的任何系统均适用于本发明化合物的施用。

[0154] 为了易于施用和剂量均匀，将上述药物组合物配制成单位剂型是特别有利的。如本文所用的单位剂型是指适合作为单位剂量的物理上离散的单位，每个单位包含预定量的活性成分，该活性成分经计算与所需的药物载体结合产生期望的治疗效果。此类单位剂型的实例是片剂(包括刻痕(scored)片剂或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、栓剂、粉剂包、晶片剂、可注射溶液剂或悬浮剂等，以及其离散倍数(segregated multiples)。

[0155] 应当理解，术语“治疗有效量”通常是指按照本发明根据需要在组织、系统、动物或人中引起生物学或医学反应(包括减轻所治疗疾病的症状)的活性化合物或组分或药剂的量，该量由研究者、兽医、医生或其他临床医生确定。

[0156] 在本发明中，如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中任何一种的抗炎化合物(C)的治疗有效量，意在指的是足以预防地作用、稳定或减轻由至少一种选自上述由促炎细胞因子、抗炎细胞因子和趋化因子组成的组的细胞因子介导的疾病的量，特别地，至少一种细胞因子选自由IL-8、Gro-α、MIP-1、MCP-1、ENA-78和RANTES，IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-9、IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、TNF-α、LT、LIF、制瘤素、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-11、W-13和TGFβ组成的组，更优选地，至少一种细胞因子选自由IL-8、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TNF-β、IL-17、IL-23和IFN-γ组成的组，甚至更优选地，至少一种细胞因子选自由IL-8、IL-1β和IFN-γ组成的组。

[0157] 抗炎化合物(C)和药物组合物，其用作药物以及用于治疗疾病中

[0158] 本发明涉及如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类的任何抗炎化合物(C)，其用作药物。

[0159] 本发明还涉及药物组合物，其包含治疗有效量的如上所定义和如本文所呈现的实施方案中任一项所定义的抗炎化合物(C)，尤其是如上定义的(I)至(III)类中的任何一种抗炎化合物(C)，以及药学上可接受的载体，该药物组合物用作药物。

[0160] 本发明涉及如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中任何一种的抗炎化合物(C)，用于治疗选自由关节炎、类风湿性关节炎、炎症性肠病、牛皮癣、多发性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、胰腺炎、硬皮病、I型糖尿病、胃肠炎性疾病、变应性结膜炎、肾小球肾炎、肖格伦综合征、葡萄膜炎、皮炎、强直性脊柱炎和纤维肌痛组成的组的炎性疾病，优选地用于治疗胃肠炎性疾病，诸如急性胃炎、慢性胃炎、胃溃疡的发生和复发、克罗恩病、炎性肠病、肠易激综合征和溃疡性结肠炎，更优选用于治疗急性胃炎、慢性胃炎、胃溃疡的发生和复发。

[0161] 本发明涉及如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中任何一种的抗炎化合物(C)，其用于治疗选自由神经退行性疾病、充血性心力衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、肾衰竭、过敏、纤维化、动脉粥样硬化、代谢性疾病、心血管疾病、化学疗法/放射相关并发症、肝脏疾病、胃肠疾病、眼病、糖尿病性视网膜病、肺部疾病和麻风病组成的组的炎性相关疾病。

[0162] 因此，如上所定义的抗炎化合物(C)，特别是如上所定义的(I)至(III)类中的任何一种的抗炎化合物(C)，以及如上所定义的药物组合物可以用于制造可用于治疗、预防或对抗与细胞因子表达相关的病或疾病的药物，所述疾病包括上文定义的炎性疾病和上文定义的炎性相关疾病。

[0163] 本发明涉及如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中任何一种的抗炎化合物(C)，其用于治疗由至少一种细胞因子介导的疾病。

[0164] 如上所述，至少一种细胞因子有利地选自由促炎细胞因子、抗炎细胞因子和趋化因子组成的组，优选至少一种细胞因子选自由IL-8、Gro-α、MIP-1、MCP-1、ENA-78和RANTES，IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-9、IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、TNF-α、LT、LIF、制瘤素、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-11、W-13和TGFβ组成的组，更优选地，至少一种细胞因子选自由IL-8、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TNF-β、IL-17、IL-23和IFN-γ组成的组，甚至更优选地，所述细胞因子中的至少一种选自由IL-8、IL-1β和IFN-γ组成的组。

[0165] 如本领域技术人员众所周知的，确切的施用剂量和施用频率取决于如本文所述，使用的特定抗炎化合物(C)、所治疗的特定病症、所治疗病症的严重程度、年龄、体重、性别、疾病程度和特定患者的身体一般状况，以及该个体可能正在服用的其他药物。此外，很明显，所述有效日剂量可以根据所治疗对象的反应和/或根据开具本发明化合物的医师的评价而降低或增加。

[0166] 正如所说的，如上所述，本发明的抗炎化合物(C)可以对动物的炎症机制起作用。

[0167] 为了施用于动物，如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中任何一种的抗炎化合物(C)，或其药物组合物(包含至少一种所述抗炎化合物(C)作为活性成分的)，可以添加到动物的饲料或饮用水中，可以通过洒水作为益生菌施用到泌乳母畜(lactating dam)。可以作为缓释推注或通过舔石(licking stone)施用。

[0168] 如上所述，用于治疗动物的如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类中任何一种的抗炎化合物(C)(其能特异性地抑制或约束至少一种细胞因子的表达)的有效量，基于动物饲料的总重量，有利地为至少1ppm，优选至少2ppm，更优选至少3ppm。另一方面，有效量的如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上定义的(I)至(III)类的任何抗炎化合物(C)，基于动物饲料的总重量，组合物(C)有利地小于130ppm，优选小于
70ppm，更优选小于35ppm，动物在这种情况下为啮齿动物，特别是小鼠。必须理解，对于本发明而言，上限不是关键的，并且有效量取决于所治疗的特定物种。本发明进一步涉及动物饲料，其包含如上定义的抗炎化合物(C)特别是如上定义的(I)至(III)类抗炎化合物(C)，或其包含所述抗炎化合物(C)作为活性成分的药物组合物。

[0169] 使用抗炎化合物(C)治疗炎性疾病的方法

[0170] 本发明涉及一种通过使用至少一种如上定义的抗炎化合物(C)，特别是如上文所定义以及如本文所呈现的实施方案中任一项所定义的任何一种(I)至(III)类抗炎化合物(C)来抑制或约束炎症反应的体内方法。

[0171] 本发明进一步涉及一种在哺乳动物中抑制或约束至少一种细胞因子表达的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用一定量的如上定义且如本文提出的实施方案中任一项所定义的抗炎化合物(C)，足以抑制或约束至少一种细胞因子，其中、所述细胞因子选自由IL-8、Gro-α、MIP-1、MCP-1、ENA-78和RANTES，IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-7、IL-9、IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、TNF-α、LT、LIF、制瘤素、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-11、W-13和TGFβ组成的组，更优选地，至少一种细胞因子选自由IL-8、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TNF-β、IL-17、IL-23和IFN-γ组成的组，甚至更优选地，所述细胞因子选自由IL-8，IL-1β和IFN-γ组成的组。

[0172] 本发明进一步涉及一种在哺乳动物中治疗与细胞因子表达水平相关的炎性相关疾病的方法，所述方法包括向需要其的哺乳动物施用一定量的如上定义和在本文提出的任何实施方案中所定义的抗炎化合物(C)，其足以治疗所述炎性相关疾病。

[0173] 以下实施例仅说明本发明的一些非限制性实施方案。

具体实施方式

[0174] 实施例

[0175] 材料

[0176] a)实验设置

[0177] 进行实验以评估补充作为抗炎化合物(C)的饲料在小鼠模型中的作用。

[0178] 对于体内实验，与其他小鼠品系相比，BALB/c小鼠品系与更明显的胃病理学相关联，因此选择BALB/c小鼠品系。将小鼠分成4组，每组8只动物。这四个组具有以下特征：

[0179] 1)感染的+标准饮食：比较例1

[0180] “比较例1”组小鼠在48小时间隔内(第8天和第9天)在胃内接种了两次108海尔曼螺杆菌(Helicobacter Suis)(H.suis)HS1株的活细菌。在第17天，随意给小鼠饲喂对照饮食(不含的标准饮食)。73天后，通过在异氟烷深麻醉下的颈椎脱位使小鼠安乐死。取一条胃组织条进行如下详细描述的实验程序。

[0181] 2)感染的+ 补充饮食(基于给定食物的总量，量<100ppm)：

[0182] 实施例1

[0183] 在48小时的间隔内(在第8天和第9天)对“实施例1”的小鼠组在胃内接种了两次108HS1株(海尔曼螺杆菌)的活细菌。在第17天，给小鼠随意饲喂补充饮食(基
于饮食总量，的量＜100ppm)。73天后，通过在异氟烷深麻醉下的颈椎脱位使小
鼠安乐死。取一条胃组织条进行如下详细描述的实验程序。

[0184] 3)未感染的+标准饮食：比较例2

[0185] “比较例2”组小鼠未接受胃内接种，并随意饲喂对照饲料(不含的标准饮食)。73天后，通过在异氟烷深麻醉下的颈椎脱位使小鼠安乐死。取一条胃组织条进行如下详细描述的实验程序。

[0186] 4)未感染的+ 补充饮食(基于给定食物的总量，量<100ppm)：

[0187] 实施例2

[0188] “实施例2”的小鼠组没有接受胃内接种，并随意饲喂补充饮食(基于饮食的总量，量<100ppm)。73天后，通过在异氟烷深麻醉下的颈椎脱位使小鼠
安乐死。取一条胃组织条进行如下详细描述的实验程序。

[0189] b)实验设置的验证–海尔曼螺杆菌定量

[0190] 通过qRT-PCR实验确定海尔曼螺杆菌感染的存在。实验如下进行。在表1中，证明“比较例1”和“实施例1”组成功感染了海尔曼螺杆菌。如表1所示，“比较例2”和“实施例2”组未被感染，因为在这些动物中未检测到海尔曼螺杆菌。

[0191] 表1：通过qRT-PCR实验确定的海尔曼螺杆菌感染的存在，以每毫克组织的海尔曼螺杆菌的对数比表示(每定量样品(毫克组织)的核酸绝对量(细菌DNA量))。

[0192]实施例毫克组织的海尔曼螺杆菌的对数比
比较例1 7880
实施例1 36900
比较例2 0
实施例2 0

[0193] 方法

[0194] qRT-PCR检测

[0195] 1)H.suis定量

[0196] 胃中海尔曼螺杆菌定植的定量是根据Blaecher C.et al.(2013)和O’Rourke J.L.et al.(2004).的出版物进行的。

[0197] 基于ureA基因，使用具有绝对定量功能的海尔曼螺杆菌特异性qRT-PCR来确定提取物中海尔曼螺杆菌DNA的存在(Blaecher C.et al.(2013))。首先，通过使用引物U430F和U1735R扩增海尔曼螺杆菌HS5的部分ureAB基因簇(1236bp)来生成标准品(O’Rourke J.L.et al.(2004))。简而言之，PCR扩增反应涉及1倍反应缓冲液[67mM Tris/HCl、16mM(NH4)2SO4、0.45％Triton X-100、0.2％明胶]、一单位Taq DNA聚合酶(Biotech International)、200μM的每种三磷酸脱氧核苷酸、2mM的MgCl2、10pmol的每种寡核苷酸引物和1μl的稀释DNA(通常是原始样品的1：10稀释液，约含20-100ngμl-1)，最终体积为50微升。循环条件为：在94℃下初始变性3分钟，然后在94℃下10秒钟，52℃下30s和72℃下1.5分钟的35个循环，然后是72℃下的最终延伸5分钟步骤。所有反应均使用Perkin Elmer PE2400热循环仪进行。将PCR产物在TAE缓冲液(40mM Tris/乙酸盐、1mM EDTA)中的琼脂糖微凝胶上分离，并在用溴化乙锭染色后在UV透照下拍照。在使用Wizard PCR Preps DNA纯化系统(Promega)或Centricon-100 过滤器(Amicon)在测序之前，先纯化PCR产物。然后根据制造商的方案，使用ABI PRISM Ready Reaction DyeDeoxy终止子循环测序试剂盒(PE Applied Biosystems)和 PCR系统2400(Perkin Elmer)直接对扩增的DNA进行测
序。在377型DNA测序仪上分离测序产物，并使用继承软件包(PE Applied Biosystems)中包含的程序进行分析。在所有情况下，两条DNA链均以连续的重叠进行测序。生成标准品后，对于每9μL反应混合物，从108PCR扩增子开始进行10倍稀释。将一微升提取的DNA模板添加到9μL反应混合物中，该混合物由0.25μL位于1236bp片段内的两个引物(以产生150bp PCR产TM
物)、3.5μL HPLC水和5μL SensiMix SYBR No-ROX(Bioline Reagents Ltd，英国伦敦)组成。正义引物是BF_HsuisF1：5'-AAA ACA MAG GCG ATC GCC CTG TA-3'。反义引物是BF_Hsuis R1：5'-TTT CTT CGC CAG GTT CAA AGC G-3'。退火温度为62℃。标准液和样品均在带有C1000热循环仪(Bio-Rad，Hercules，CA，USA)的CFX96TMRT-PCR系统上一式两份运行。结果以每给定样品量(mg组织)的核酸(细菌DNA量)的绝对定量表示。

[0198] 2)细胞因子表达水平

[0199] 基于Flahou B.et al.(2012)和Liu C.et al.(2016)的出版物进行了qRT-PCR以评估细胞因子表达水平。根据制造商的说明，使用RNeasy (德国，希尔登，Qiagen)提取RNA。使用分光光度计(Isogen Life Science，乌特勒支，荷兰)测量获得的RNA浓度，然后，按照实验设置中的定义，从属于4组的所有小鼠获得的所有样品的浓度。将其调节至1μTMg/μL，然后使用iScript cDNA合成试剂盒(美国加利福尼亚州Bio-Rad)进行cDNA合成。然后对编码参与炎症的宿主因子的基因进行表达分析。管家基因PPIa、H2afz和HPRT也包括在内作为参考基因。使用的所有引物序列均显示在表2中。如前所述(Flahou B.et al.(2012))，使用RT-PCR对参考基因和靶基因的mRNA表达水平进行定量。包括无模板对照的反应混合物，以及所有所述样品一式两份运行。首先将阈值循环值(Ct)值标准化为参考基因中Ct值的几何平均值。使用ΔΔCT方法(72)以海尔曼螺杆菌阴性小鼠的Ct值的平均值计算倍数变化。最后，对于每个靶基因，结果表示为海尔曼螺杆菌阳性小鼠的mRNA表达相对于海尔曼螺杆菌阴性小鼠的mRNA表达水平的倍数变化。结果总结在下表3和4中。

[0200] 表2：在qRT-PCR方法中使用的引物序列

[0201] 序列(5’-3’) 引物CTGACCTAGAGAAGACACAT IFN-Υ–正向
GGTCAGTGAAGTAAAGGTAC IFN-Υ-负向
CACCTCACAAGCAGAGCACAAG IL-1β-正向
GCATTAGAAACAGTCCAGCCCATAC IL-1β-负向
TGCCTGAAGACCCTGCCAAGG IL-8MIP-正向
GTTAGCCTTGCCTTTGTTCAG IL8MIP-负向
管家基因
GGTATCACCCCTCGTCACTT H2AFZ-正向
TCAGCGATTTGTGGATGTGT H2AFZ-负向
CAGGCCAGACTTTGTTGGAT HPRT-正向
TTGCGCTCATCTTAGGCTTT HPRT-负向
AGCATACAGGTCCTGGCATC PPIa-正向
TTCACCTTCCCAAAGACCAC PPIa-负向

[0202] 免疫组织化学实验–测定T细胞、B细胞、壁细胞、坏死细胞和巨噬细胞浸润[0203] 免疫组织化学基于Flahou B.et al.(2010)的出版物进行。从石蜡包埋的组织切下5μm的连续切片。补液和脱石蜡后，使用微波炉在柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)中进行热诱导的抗原修复。将玻片与3％H2O2的甲醇溶液(5分钟)和30％的山羊血清(30分钟)孵育，以分别阻断内源性过氧化物酶活性和非特异性反应。T和B淋巴细胞之间的区分是通过对CD3和CD20抗原进行染色来实现的。使用多克隆兔抗CD3抗体(1/100；DakoCytomation)检测CD3抗原。使用多克隆兔抗CD20抗体(1/100；Thermo Scientific，Fremont，美国)分别检测CD20抗原。与针对CD3和CD20的一抗孵育后，再与生物素化的山羊抗兔IgG抗体(1/500；DakoCytomation)一起孵育。冲洗后，将切片与链霉亲和素-生物素-HRP复合物
(DakoCytomation)一起孵育，并用二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)和H2O2显色。针对F4/80表面标志物的一抗(1/50；美国圣克鲁斯的圣克鲁斯生物技术有限公司)用于突出显示成熟的巨噬细胞。使用大鼠ABC染色系统(Santa Cruz Biotechnology，Inc.)进行检测。使用针对活性caspase-3的兔多克隆抗体以及抗兔HRP-AEC细胞和组织染色试剂盒(R&D Systems，明尼阿波利斯，美国)，通过免疫组织化学染色鉴定了凋亡细胞。使用小鼠单克隆抗体(1/200；
Abcam Ltd，剑桥，英国)和生物素化的山羊抗小鼠IgG抗体(1/200；DakoCytomation)，通过氢钾ATP酶的免疫组织化学染色鉴定壁细胞。使用针对活性caspase-3的兔多克隆抗体以及抗兔HRP-AEC细胞和组织染色试剂盒(R&D Systems，明尼阿波利斯，美国)，通过免疫组织化学染色鉴定了凋亡细胞。使用小鼠单克隆抗体(1/200；Abcam Ltd，Cambridge，UK)和生物素化的山羊抗小鼠IgG抗体(1/200；DakoCytomation)通过氢钾ATPase的免疫组织化学染色鉴定壁细胞。计算在五个随机选择的高功率场中(放大倍数：x400)的阳性细胞。然后确定每只小鼠的阳性细胞计数的平均值。表5、表6、表7和表8证明了所有结果。

[0204] 结果

[0205] 实验1

[0206] 如上所述，通过使用qRT-PCR方法测量海尔曼螺杆菌感染的动物的细胞因子表达水平

[0207] 表3：qRT-PCR实验结果，确定补充剂对海尔曼螺杆菌感染动物的细胞因子水平的影响，以mRNA表达水平的倍数变化表示。

[0208]

[0209] 表3显示与标准饮食对照组(比较例1)相比，接受补充饮食(实施例1)的感染动物中IL-1β、IL-8MIP和IFN-γ的表达水平降低。

[0210] 实验2

[0211] 通过使用上述qRT-PCR方法，在不存在海尔曼螺杆菌感染的情况下测量细胞因子的表达水平。

[0212] 表4：qRT-PCR实验结果，确定补充剂对未感染动物的细胞因子水平的影响，以mRNA表达水平的倍数变化表示。

[0213]

[0214] 表4显示即使在没有感染的情况下IL-1β的表达降低。IL-8MIP表达水平保持稳定，而IFN-γ表达略有增加。

[0215] 实验3

[0216] 通过使用如上所述的免疫组织化学实验评价海尔曼螺杆菌感染动物的炎症反应。

[0217] 表5：免疫组织化学实验的结果，用以确定补充剂对海尔曼螺杆菌感染动物中浸润性T细胞、B细胞和巨噬细胞数量的影响，表示为阳性细胞平均数目计数。

[0218] 炎性参数比较例1 实施例1T细胞 60.28 21.38
B细胞 3.08 0.48
巨噬细胞 4.75 1.35

[0219] 表5显示与比较例1相比，在感染了海尔曼螺杆菌并用 (实施例1)治疗的小鼠中，浸润性T细胞、B细胞和巨噬细胞的数量大大减少。

[0220] 实验4

[0221] 通过使用如上所述的免疫组织化学实验评价不存在海尔曼螺杆菌感染的炎症反应。

[0222] 表6：免疫组织化学实验的结果，用以确定补充剂对未感染动物中浸润性T细胞、B细胞和巨噬细胞数量的影响，表示为阳性细胞平均数目计数。

[0223]炎性参数比较例2 实施例2
T细胞 54.00 14.10
B细胞 0.85 1.65
巨噬细胞 1.15 0.18

[0224] 表6显示了与比较例2相比，对于接受补充饮食的未感染小鼠组(实施例2)的的抗炎作用。特别是观察到T细胞和巨噬细胞的减少。

[0225] 综合实验3和4的结果，表明具有抗炎能力，而与海尔曼螺杆菌感染无关。

[0226] 实验5

[0227] 通过使用如上所述的免疫组织化学实验对海尔曼螺杆菌感染的动物进行了生理学评估。

[0228] 表7：免疫组织化学实验的结果，用以确定补充剂对海尔曼螺杆菌感染动物中坏死细胞和壁细胞数量的影响，以阳性细胞平均计数表示。

[0229] 生理学参数比较例1 实施例1坏死细胞 0.95 0.50
壁细胞 151.25 213.25

[0230] 表7显示了与比较例1相比，接受补充饮食的感染组(实施例1)的坏死细胞数量减少。这表明接受补充饮食的动物的细胞坏死较少，这可以通过抑制
炎症反应来解释。对于壁细胞的数量，在接受补充饮食的组中测得的细胞数量
更高。这可以通过以下事实来解释：由于服用炎症的减轻对胃壁细胞的损害
较小。

[0231] 实验6

[0232] 通过使用如上所述的免疫组织化学实验对没有海尔曼螺杆菌感染的动物进行生理学评估。

[0233] 表8：免疫组化实验的结果，以确定补充剂对未感染动物中坏死细胞和壁细胞数量的影响，表示为阳性细胞平均计数。

[0234] 生理学参数比较例2 实施例2坏死细胞 2.18 0.60
壁细胞 214.63 211.38

[0235] 表8表明由于炎症减少而引起的坏死细胞数量减少。实施例2和比较例2中壁细胞的数量大致相同。这表明用Flavomycin处理不会对壁细胞的数量产生负面影响。

[0236] 综合所有结果，施用表现出抗炎作用，这是因为接受补充饮食的动物中B细胞、T细胞和巨噬细胞浸润以及IL-1β、IL-8MIP和IFN-γ的水平降低。此外，显示出抗炎作用独立于海尔曼螺杆菌感染。

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作为抗炎剂的官能化糖类

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