技术领域：

本发明涉及一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物，确切的涉及含有治 疗缺血性脑血管疾病的人参皂苷和银杏内酯的组合，属于药品的技术领域。

背景技术：

脑血管疾病具有发病率高、致残率高、死亡率高和复发率高等特点，是威 胁人类健康的最大杀手之一。据流行病学调查得知，全世界范围内脑血管疾病 的发病率为140～200/10万人口，其平均死亡率为100/10万人口。随着人口老 龄化的加剧，脑血管病，尤其是缺血性脑血管病越来越成为威胁人类健康的主 要疾病之一，它不仅严重损害了患者的健康和生活质量，也给社会和家庭带来 了沉重的负担，引起了世界各国的普遍关注。在我国脑血管病的死亡率已跃居 各种疾病之首。而在脑血管疾病中缺血性脑血管病又占多数(约占其总数的55～ 80％)，因此，研制和开发出新型、有效、副作用小的防治脑缺血的药物是目前 亟待解决的问题。

人参皂苷Rd是一个特异性的受体操纵Ca2+通道阻断药，它能抑制激动血管 平滑肌α-受体，5-羟色胺受体及血管紧张素II受体引起Ca2+内流所致的收缩反 应及胞浆细胞内钙浓度升高反应，但对Ca2+释放无影响。对高K+去极化引起的收 缩反应与细胞内钙浓度升高及电压依赖性Ca2+电流均无作用。对腺苷三磷酸引起 脑血管平滑肌细胞细胞内钙浓度升高，人参皂苷Rd呈浓度依赖性地抑制。人参 皂苷Rd对α-受体的亲和力及配基结合数并无影响，也不影响细胞胞膜的Ca2+ 转运动功能。人参皂苷Rd抑制血小板聚集及降低及血小板胞外Ca2+内流，抑制 ConA引起的T淋巴细胞的增殖及T淋巴细胞细胞内钙浓度升高。明显减少脑组 织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍，改善脑电图；病 理切片检查发现人参皂苷Rd能明显减少神经细胞的损伤与坏死。减轻脑细胞水 肿及Ca2+超负荷的程度以及抗自由基。人参皂苷Rd作为活血化瘀药的有效单体， 具有很好的治疗脑缺血/再灌注损伤与坏死作用。

银杏内酯B足血小板激活因子受体的拮抗剂，作用靶点是抑制血小板聚集、 抑制血栓形成，可减小脑缺血再灌注损伤大鼠脑梗塞范围，改善神经症状，减 轻其病理损伤。其脑保护的作用环节可能在于：改善脑缺血后能量代谢，抗自 由基损伤和酸中毒；对缺血再灌注引起的兴奋性氨基酸释放过多引起的兴奋性 毒性有直接的抑制作用；增加HO-1、HO-2的表达能进一步增强脑缺血损伤大鼠 的抗氧化应激能力，从而增强神经细胞的抗凋亡作用，减少神经细胞坏死，增 加神经细胞的存活率从而保护大脑减少大脑对缺血再灌注损伤。银杏内酯B对 试验性脑缺血损伤有良好的保护作用，可明显减少脑梗塞程度、改善动物神经 症状。脑组织生化检测结果显示：银杏内酯B可提高脑组织对缺血缺氧刺激的 耐受性，减轻缺血后能量代谢异常、自由基损伤和酸中毒。

我们惊讶地发现，低剂量人参皂苷Rd和银杏内酯B加强和提高了缺血性脑 血管疾病的治疗效果。人参皂苷Rd对受体操纵Ca2+通道产生有效的阻断，银杏 内酯B抑制血小板聚集、抑制血栓形成，两种药物协同作用，明显减少脑组织的 梗塞区面积，减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍；人参皂苷Rd能减少神经细 胞的损伤与坏死，减轻脑细胞水肿及Ca2+超负荷的程度以及抗自由基；银杏内酯 B能改善脑缺血后能量代谢，抗自由基损伤和酸中毒，对缺血再灌注引起的兴奋 性氨基酸释放过多引起的兴奋性毒性有直接的抑制作用。人参皂苷Rd与银杏内 酯B之间的相互作用是协同性相互作用，且更强于单独药物的加合效应。既保 证疗效又降低副反应的一个重要途径是制成复方制剂。一般来说，对于作用机 制不同但药理效果一致的药物，合用后往往产生协同或相加的药效。

发明内容：

本发明的目的在于将两个作用于不同靶点且均能明显减少脑组织的梗塞区 面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍的药物进行组合，由于药物相 互作用是协同性相互作用，且更强于单独药物的加合效应；解决了药物使用剂 量大不安全的问题；使药物疗效更快、更强。本发明的目的是针对上述现有技 术的不足，而向人们提供一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物，主要是为 了解决单独使用人参皂苷Rd或银杏内酯作为治疗缺血性脑血管疾病时各种问 题，将特异性的受体操纵Ca2+通道阻断药人参皂苷Rd与血小板激活因子受体拮 抗剂银杏内酯B联合使用。由于人参皂苷Rd和银杏内酯B协同作用，并能够降 低两者的用药剂量并能明显减少脑组织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏 死出现的行为障碍。为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：一种治疗缺 血性脑血管疾病的药物组合物，含有人参皂苷和银杏内酯。该药物组合物主要 用于制备缺血性脑血管疾病的制剂，用于可以使用人参皂苷或银杏内酯的疾病 场合，通过人参皂苷或银杏内酯的协同作用，降低了人参皂苷或银杏内酯用药 剂量以达到改善单独使用任一种药物可能导致副作用的目的并提高对减少脑组 织的梗塞区面积，明显减轻由于脑组织坏死出现的行为障碍的作用。

基于所述发明，人参皂苷包含人参皂甙-Rd、人参皂甙-Rb1、人参皂甙-Rg1、 人参皂甙-Rg2、人参皂甙-Rg3、人参皂甙-Rh、人参皂甙-Re中的一种或一种以 上的混合物。最好选用人参皂苷-Rd。

基于所述发明，银杏内酯包含银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、银杏 内酯J、银杏内酯M及白果内酯，最好选用银杏内酯B。

基于所述发明，在药物组合物中，人参皂苷与银杏内酯的比例为1∶1～1 ∶5或1∶1～5∶1。

基于所述发明，药物组合物可以制成任何医学上允许的制剂，包括口服制 剂、注射制剂和外用制剂，如：片剂、口腔崩解片剂、分散片剂、胶囊剂、软 胶囊剂、微囊剂、注射剂、冻干粉针剂、舌下片剂、鼻腔吸入剂、透皮制剂、 颗粒剂、凝胶剂、丸剂、微丸剂、浓缩丸、气雾剂、滴丸剂、缓释制剂、控释 制剂、速释制剂、靶向制剂、口服液体制剂、糖浆剂、散剂、合剂。

基于所述发明，药物组合物在制造药物中的应用，可以治疗或预防缺血性心 脑血管疾病，如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞、脑血管痉孪、脑功能不全、 老年性痴呆、帕金森氏综合症、脑中风、高血压、高血脂、动脉硬化、冠心病、 心绞痛、心肌梗塞等疾病。

本发明解决了单独使用一种药物，作用靶点少，药物通过一个靶点达到治疗 目的，使用药物剂量大的问题，本发明根据殊途同归的原理，将两种作用于不同 靶点的药物组合，药物产生协同性相互作用，且更强于单独药物实体的加合效应， 从而减少脑组织的梗塞区面积，减轻脑组织坏死出现的行为障碍而达到治疗缺 血性心脑血管疾病的目的。

具体实施方式：

实施例1 注射液的制备

1、处方：

人参皂苷-Rd    5g

银杏内酯B      5g

氯化钠         9g

1，2-丙二醇    100ml

注射用水       约900ml

制成           1000ml

2、制备：

取人参皂苷-Rd、银杏内酯B、氯化钠、1，2-丙二醇；氯化钠溶解至20％丙 二醇水溶液500ml，加入人参皂苷-Rd、银杏内酯B，于60～70℃水浴上搅拌至 全溶，冷却至室温，加入余量的注射用水至1000ml，混匀后用0.22μm滤膜过 滤。滤液分瓶灌装，封口，灭菌，即得。

实施例2 滴丸的制备

1、处方：

人参皂苷Rd       2.5g

银杏内酯B        1g

聚乙二醇6000     37g

制成             1000粒

2、制备：

取聚乙二醇6000，置于容器中，加热至70-80℃，待全部熔融，温度降到 50℃左右时，加入人参皂苷Rd、银杏内酯B使熔融，温度控制在40-50℃，倒 入滴丸机中滴制，滴入二甲基硅油中，制成滴丸，即得。

实施例3 舌下含片的制备

1、处方：

人参皂苷Rd                20g

银杏内酯B                 4g

羟丙基甲基纤维素(E-50)    80g

羟丙基甲基纤维素(E-4M)    50g

羟丙基纤维素              20g

微粉硅胶                  3g

硬脂酸镁                  7g

制成                      1000片

2、取人参皂苷Rd、银杏内酯B、羟丙基甲基纤维素(E-50)、羟丙基甲基纤 维素(E-4M)、羟丙基纤维素、微粉硅胶、硬脂酸镁以等量递加法混合均匀，直 接压制成舌下含片，即得。

实施例4 软胶囊剂的制备

1、处方：

人参皂苷Rd             2.5g

银杏内酯B              10g

明胶                   100g

甘油                   40g

大豆油                 60g

卵磷脂                 6g

蜂蜡                   4g

制成                   1000粒

2、制备：

取明胶加入反应罐中，在搅拌状态下加入适量水，密闭，待明胶完全溶解 后，再加入甘油，搅拌均匀，抽真空脱气2小时，放入保温桶中，保温静置过 夜，待用。取大豆油、卵磷脂、蜂蜡混合均匀，称取人参皂苷Rd、银杏内酯B 加入，搅拌均匀，胶体磨研磨至胶体状，室温静置。将药液倒入软胶囊机中， 压制软胶囊，干燥，即得。

实施例5 冻干制剂的制备

1、处方：

人参皂苷Rd         4g

银杏内酯B          10g

甘露醇             36g

乳糖               12g

制成               100瓶

2、制备：

取人参皂苷Rd、银杏内酯B加适量乙醇溶解，补充注射用水至3000ml，用 碳酸钠溶液调节PH值至6.0～8.0，加入甘露醇、乳糖使完全溶解，按注射剂 的要求进行高压消毒灭菌，采用微孔滤膜过滤，滤液按每瓶3ml进行分装，冷 冻干燥，封口，即得。

实施例6对脑梗塞面积的影响

分组与给药

将实验动物随机分为假手术组，模型组，阳性药尼莫地平组，本发明药物 组合物高剂量8mg/kg(即人参皂苷Rd、银杏内酯B各占一份)组、中剂量4mg/kg (同上)组，低剂量2mg/kg(同上)组，各组动物于缺血即刻于舌下静脉给药， 6小时后再腹腔给药一次。假手术组与模型组给予等量的生理盐水。

2、模型建立

大鼠麻醉后，仰卧固定，分离右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)及颈 外动脉(ECA)，结扎ECA与CCA，用动脉夹夹闭ICA远心端后，迅速于距ECA与 ICA分叉处约0.5cm的颈总动脉处作一切口，插入一端涂有石蜡的尼龙线(直径 为0.28mm)，插入深度为18.5±0.5mm，实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。结扎 入口处，尼龙线外留约1cm，缝合皮肤。3小时后轻轻向外提拉所留线头至略有 阻力以实现大脑中动脉再灌注。在缺血3小时和再灌注0.5小时内用电热毯维 持大鼠肛温在36.5～37.5℃。假手术与其他模型鼠一样分离颈总动脉、颈内动 脉及颈外动脉，但只结扎CCA。

3、脑梗塞范围测定

动物于缺血3小时再灌注21小时末次行为评分后断头，迅速置于冰盘上 取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，将大脑均匀切成6片置于TTC染液中(每 5ml染液中含4％TTC1.5ml，1mol/LK2HPO40.1ml)，37℃孵箱孵育30min，孵 育后将其转入10％甲醛溶液固定。脑缺血经TTC染色后的结果为非缺血区呈玫 瑰红色，缺血部分呈白色。脑组织固定后仔细将白色组织挖出并称重，按以下 公式确定脑梗塞范围：脑梗塞百分比＝缺血部分重量/全脑重量，缺血部分重量 占全脑重量的百分比作为脑梗塞范围。

4、结果

大鼠缺血3小时再灌注21小时后，模型组大鼠出现明显梗塞灶，其梗塞范 围占全脑的14.88％，与假手术组比较差异显著，说明造模成功。高剂量组、中 剂量组、尼莫地平能明显减少模型大鼠脑梗塞范围，与模型组比较有显著差异， 分别为P＜0.05，P＜0.05，P＜0.01。结果见表1。

表1脑梗塞范围测定

组别   剂量   (mg/kg)   样本   n  3小时 21小时 梗塞范围 ％ 假手术组 模型组 尼莫地平组 高剂量组 中剂量组 低剂量组   -   -   0.02   8   4   2   12   13   12   13   12   12  0**  2.92**  2.50±0.80  2.54±0.78  2.67±0.79  2.58±0.79 0±0** 0±0** 1.83±1.03* 1.69±0.85c** 2.08±0.79* 2.42±0.67 0±0* 0±0*P＜ 11.47±4.22* 10.48±3.00** 11.40±3.46* 13.26±4.02

注：*P＜0.05，**P＜0.01

3.讨论

本实验采用栓线法造成大脑缺血再灌注脑损伤模型观察本发明的药物组合 物的保护作用。实验结果显示，大鼠缺血3小时后出现明显的神经症状，再灌 注21小时后，模型组大鼠行为学评分及脑梗塞体积与假手术组比较有显著差异， 这表明大鼠右侧大脑中动脉被阻断后，局部脑组织缺血后出现梗死，对侧肢体 运动功能发生明显障碍。给予高剂量、中剂量组大鼠其肢体运动功能得到明显 改善，行为学评分与模型组大鼠比较有明显改善，脑梗塞体积也有明显减轻。 这些结果提示本发明药物组合物对实验性大脑缺血再灌注脑损伤大鼠具有保护 作用。