专利汇可以提供高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种高 水 平人二倍 体细胞 培养水痘-带状疱疹 疫苗 病毒方法,包括建立主体细胞库:按照美国FDA标准,取ATCC(CCL171)细胞株,起始为第17代,经过20天左右共3-5次传代培养, 收获 的细胞用冷冻管在液氮保存;工作细胞库细胞培养;进行二倍体细胞群体倍增水平同步监测,选用二倍体细胞群体倍增水平2.5以上的细胞株生产疫苗;本发明可以得到较高的减毒水痘-带状疱疹病毒疫苗产量,该方法便于带状疱疹疫苗的大量制备,适用于规模化生产。本方法也可以用作其它活体疫苗,如:甲肝疫苗、狂犬病疫苗、麻疹、 天花 等工业化生产。,下面是高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法专利的具体信息内容。
1.一种高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法,其特征是:包括下列步骤:
(1)建立主体细胞库:按照美国FDA标准,取ATCC(CCL171)细胞株,起始为第17代,经过20天左右共3-5次传代培养,收获的细胞用冷冻管在液氮保存;
(2)工作细胞库细胞培养:将步骤(1)得到的细胞再经过12-15天共3-5次传代培养,按照准备临床实验材料要求进行和实验数据记录,液氮和深冻保存;
(3)为保证疫苗病毒的高滴度,同时进行二倍体细胞群体倍增水平同步监测,选用二倍体细胞群体倍增水平2.5以上的细胞株生产疫苗;
上述步骤中的传代培养采用下列二倍体细胞培养液:采用MEM细胞培养基,加有相当于二倍体细胞培养液体积8-15%的小牛血清, 每升二倍体细胞培养液中含有1-5 mM的L-谷氨酰胺, 每毫升二倍体细胞培养液中含100-200单位青霉素、50-100 微克链霉素及
20-40 纳克两性霉素,二倍体细胞培养液中含有12种非必需氨基酸。
2.根据权利要求1所述的高水平人二倍体细胞培养水痘-带状疱疹疫苗病毒方法,其特征是:12种非必需氨基酸采用GIBCO BRL生产的100倍浓缩液,且在每升二倍体细胞培养液中的加入量为10ml。
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