1.0 供参考的未决申请

参考其所基于的第PCT/IB98/00315号未决国际申请和US申请， 二者都是在1998年3月10日提交的(Attorney Docket No. PC9762A)，并且以WO 98/45268于1998年10月15日公开；其要求 于1997年4月4日提交、现已放弃的第60/043403号申请(Attorney Docket No.PC9762)为优先权；该申请公开了烟酰胺衍生物，所述烟 酰胺衍生物具有作为PDE4同工酶抑制剂的生物活性，并因此可用于治 疗炎症和呼吸系统以及过敏性疾病和病症。在上述申请中没有公开指 导本领域技术人员认识到本发明新化合物或其对PDE4同工酶的出乎意 料的高水平抑制活性的任何内容。

还参考于1999年6月30日提交的第09/345,185号未决申请 (Attorney Docket No.PC10096A)；其要求于1998年10月21日提 交的第60/105,120号申请(Attorney Docket No.PC10096)为优先 权，该申请公开了化合物和制备N-取代的烟酰胺衍生物的方法。然而， 所公开的化合物和方法与本发明化合物和方法不同。

本申请还参考下列相同日期提交的未决申请文件：Attorney Docket Nos.PC10523；PC10546；PC10657；PC10690；和PC10691， 这些申请涉及其它类可用作PDE4同工酶的选择性抑制剂的烟酰胺衍生 物。 2.0 发明背景

3′，5′-环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)包括一大类酶，这些酶分成在结 构、生化和药理方面彼此不同的至少11个不同的族。在每族内的酶通 常称为同工酶。这类酶总共包括15种以上的基因产物，并且进一步的 多样性是由于这些基因产物的差别剪接和翻译后加工导致的。本发明 主要涉及4种第4族PDE的基因产物，即PDE4A、PDE4B、PDE4C、和 PDE4D。这些酶统称为PDE4D同工酶族的同种型或亚型。下文将更详细 地描述PDE4同工酶亚型的基因组织、分子结构和酶活性、差别剪接、 转录调控和磷酸化、分布和表达以及选择性抑制。

PDE4的特征是，选择性、高亲和性地水解第二信使环核苷酸腺苷 3′，5′-环一磷酸(cAMP)，敏感地被环戊苯吡酮抑制。近几年已发现了 PDE4的多种选择性抑制剂，并且已经在多种不同的疾病模型中表明了 该抑制作用所导致的有益药理作用。参见例如Torphy等人，Environ. Health Perspect.102 Suppl.10，79-84，1994；Duplantier等 人，J.Med.Chem.39 120-125，1996；Schneider等人，Pharmacol. Biochem.Behav.50 211-217，1995；Banner和Page，Br.J. Pharmacol 114 93-98，1995；Barnette等人，J.Pharmacol Exp. Ther.2736 74-679，1995；Wright等人″CP-80633—一种选择性磷 酸二酯酶-4抑制剂的体内和体外支气管松弛活性的差别，＂Can.J. Physiol.Pharmacol 75 1001-1008，1997；Manabe等人＂KF19514- 一种磷酸二酯酶4和1抑制剂的抗炎和支气管扩张性质，＂Eur.J. Pharmacol.332 97-107，1997；和Ukita等人＂作为止喘剂的新的、 有效的选择性磷酸二酯酶-4抑制剂：一系列1-吡啶基萘衍生物的合成 和生物活性，＂J.Med.Chem.42 1088-1099，1999。因此，本领域 仍然对发现另外的选择性PDE4抑制剂有很大兴趣。

本发明还涉及选择性PDE4抑制剂在多种炎性、呼吸系统和过敏性 疾病和病症的改进治疗中的应用，所述疾病和病症尤其是哮喘；慢性 堵塞性肺病(COPD)，包括慢性支气管炎、肺气肿、和支气管扩张；慢 性鼻炎；和慢性窦炎。然而，迄今为止在本领域内，哮喘和其它堵塞 性气道疾病的一线治疗是使用非选择性PDE抑制剂茶碱、以及己酮可 可碱和IBMX，三者分别由式(0.0.1)、(0.0.2)、和(0.0.3)代表：

以PDE作为其一个生化目标的茶碱除了具有支气管扩张活性以 外，还影响患者的血管系统，增加肺动脉压、抑制炎性细胞反应、并 引起嗜酸细胞的程序死亡。茶碱的不利反应，最经常是心脏节律障碍 和恶心也是由PDE抑制介导的，这促使人们寻找具有下列性质的选择 性更强的PDE抑制剂：能够在体外抑制免疫细胞功能，在体内抑制过 敏性肺炎，同时具有改进的副作用性质。在患有哮喘和其它堵塞性气 道疾病的患者的气道内，PDE4是药物开发的最重要的PDE同工酶靶， 这是因为其分布在气道平滑肌和炎性细胞内。因此，本领域迄今为止 已设计了几种在上述非选择性黄嘌呤的心血管、胃肠道、和中枢神经 系统副作用方面具有改进的治疗指数的PDE4抑制剂。

气流堵塞和气道炎症是哮喘以及COPD的特征。虽然支气管哮喘的 主要特征是嗜酸细胞性炎症，但是嗜中性白细胞似乎在COPD的发病机 理中起主要作用。因此，涉及平滑肌松弛、并且也在嗜酸细胞和嗜中 性白细胞中发现的PDE可能是这两种疾病进展的本质要素。所涉及的 PDE包括PDE3和PDE4，并且已经发现了作为选择性PDE3抑制剂和双 重PDE3/4选择性抑制剂的支气管扩张性抑制剂。这些抑制剂的实例有 甲氰吡酮—一种选择性PDE3抑制剂，以及扎达维林和苯芬群—这二者 都是双重PDE 3/4选择性抑制剂，它们分别由式(0.0.4)、(0.0.5)、 和(0.0.6)代表：

然而，苯芬群只有通过吸入施用时才导致支气管扩张，扎达维林 只有弱的短暂的支气管扩张作用。甲氰吡酮是一种强心剂，引起短暂 的支气管扩张作用和轻度的抗支气管缩小的保护作用，但是具有显著 的不利作用，例如心动过速和低血压。使用弱选择性的PDE4抑制剂替 贝拉特和选择性的PDE5抑制剂苯氮嘌呤酮也获得了不能令人满意的结 果，二者可分别由式(0.0.7)和(0.0.8)代表： 随着发现和开发了选择性的PDE4抑制剂，在本领域内已取得了更大成 功。

在体内PDE4抑制剂减少嗜酸细胞向接种变应原的动物的肺中的流 动，同时还减轻了接种变应原后发生的支气管缩小和增强的支气管反 应性。PDE4抑制剂还抑制免疫细胞的活动，包括CD4+T-淋巴细胞、 单核细胞、肥大细胞和嗜碱细胞；减轻肺水肿；抑制兴奋性非肾上腺 素能非胆碱能神经传递(eNANC)；增强抑制性非肾上腺素能非胆碱能神 经传递(iNANC)；减轻气道平滑肌致有丝分裂作用；和引起支气管扩 张。PDE4抑制剂还抑制多种与COPD病理生理学有关的炎性细胞的活 动，这些炎性细胞包括单核细胞/巨噬细胞、CD8+T-淋巴细胞、和嗜 中性白细胞。PDE4抑制剂还减轻血管平滑肌致有丝分裂作用，并可能 干扰气道上皮细胞产生粗炎性介质的能力。通过从其颗粒中释放中性 蛋白酶和酸性水解酶，并产生反应性氧类物质，嗜中性白细胞导致与 慢性炎症有关的组织破坏，并进一步参与病症例如肺气肿的病变。

迄今为止已经发现的提供治疗优点的选择性PDE4抑制剂包括SB- 207,499，其商品名为ARIFLO，可由式(0.1.9)代表： 在有大量患者参加的实验中，在第2周，与无效对照剂相比，以5、10 和15mg的剂量每日两次口服施用的SB-207，499显著地增加了沟FEV1 (1秒钟的被动呼气体积)。据表明，在支气管哮喘患者中，以15和30 mg的剂量口服施用9.5天后，另一有效的选择性PDE4抑制剂CDP840 抑制了对吸入的变应原的后期反应。CDP840可由式(0.0.9)代表：

已经将PDB作为包括COPD在内的堵塞性肺病的可能治疗法进行了 研究。在COPD患者参与的大规模SB-207,499实验中，每日两次接受 15mg的患者组表现出了沟FEV1的进行性改善，与160mL无效对照剂 相比，在第6周达到了最大平均差异，即提高了11％。参见Compton 等人，＂Ariflo (SB207499)—一种第二代口服PDE4抑制剂在COPD患 者中的效力，＂Am.J.Respir.Crit.Care Med.159，1999。已经 观察到患有严重COPD的患者具有肺动脉高血压，并且通过口服施用选 择性PDE3抑制剂甲氰吡酮和依诺西蒙，实现了在临床状态下的平均肺 动脉压的下降。已经表明依诺西蒙还能降低由于患有呼吸困难性COPD 而入院治疗的患者中的气道阻力。参见Leeman等人，Chest 91 662-6， 1987。已经表明通过使用莫他匹酮来选择性抑制PDE3和使用苯氮嘌呤 酮来选择性抑制PDE5，对PDE 3和5的联合抑制导致了肺动脉环的松 弛，这与在肺动脉平滑肌中发现的PDE同工酶模式非常符合。参见Rabe 等人，Am.J.Physio.266(LCMP 10)：L536-L543，1994。甲氰吡 酮和苯氮嘌呤酮的结构分别如上文式(0.0.4)和(0.0.8)所示。依诺西 蒙和莫他匹酮的结构分别可由式(0.0.10)和(0.0.11)代表：

PDE4抑制剂对多种炎性细胞反应的作用可用作设计与选择抑制剂 的进一步实验的基础。这些作用包括在嗜酸细胞、嗜中性白细胞和单 核细胞中增加cAMP和抑制超氧化物生成、脱粒、趋化性、和肿瘤坏死 因子-α(TNFa)释放。PDE4抑制剂可引起呕吐，即恶心和呕吐，这是 可预计的不利作用。当首先评价PDE4抑制剂对CNS适应征例如抑郁症 的作用时，当在临床试验中使用环戊苯吡酮和旦布茶碱时，呕吐不利 作用变得明显。环戊苯吡酮和旦布茶碱可分别由式(0.0.12)和(0.0.13) 代表：

PDE4抑制剂可引起呕吐的机制是不确定的，但是对PDE4抑制剂 Ro-20-1724进行的研究表明，恶心和呕吐至少部分是由脑中的呕吐中 心介导的。胃肠道不利作用可能是由局部作用引起的，例如环戊苯吡 酮是非常强的从胃壁细胞分泌酸的刺激剂，并且所分泌的过量酸通过 产生局部刺激作用可加剧胃肠道紊乱。Ro-20-1724可由式(0.0.14) 代表： 减小或消除上述时常与PDE4抑制剂有关的不利作用的努力包括获得不 能穿透中枢神经系统的PDE4抑制剂，以及通过吸入而不是口服来施用 PDE4抑制剂。

对于PDE4亚型，A、B、C、和D，已经发现，PDE4C通常对所有抑 制剂的敏感性较低；而对于亚型A、B、和D，尚没有抑制剂特异性(定 义为IC50值有10倍差异)的任何清楚证据。虽然大多数抑制剂，尤其 是RS-25,344抗PDE4D的效力更高，但是这不相当于选择性。RS- 25,344可由式(0.0.15)代表： 另一方面，在多种细胞类型中，对于增加cAMP有立体选择作用，这已 经由如上式(0.0.9)所示的CDP840的实验结果所证实，由式(0.0.16) 所代表的其对映体CT-1731具有较小活性：

很久以前就已知环戊苯吡酮能够与脑膜上的高亲和性结合位点相 互作用，后来本领域确定了在截短重组的PDE4A和全长重组的PDE4B 中存在着与催化位点(Sc)不同的高亲和性环戊苯吡酮结合位点(Sr)。最 近，已经在所有4种PDE4亚型上鉴定了Sr。参见Hughes等人，Drug Discovery Today 2(3)89-101，1997。存在的Sr似乎对一些抑制剂 例如环戊苯吡酮和RS-25,344抑制PDE4同工酶催化活性的能力有突出 的影响。

残基对抑制剂结合的影响也很显著。已经表明，PDE4B催化区域中 的一个氨基酸替换(丙氨酸替换天冬氨酸)对于环戊苯吡酮的抑制作用 是决定性的，并且这似乎是一类影响，因为相关抑制剂RP-73,401和 Ro-20-1724对于该突变的酶也失去了效力。然而，抑制剂结合Sc或Sr 在增加cAMP和抑制细胞反应方面的作用目前尚不完全清楚。

在豚鼠实验中，发现RP-73,401具有下述活性：(1)抑制抗原引 起的肺嗜酸粒细胞增多和嗜酸细胞过氧化物酶(EPO)，Banner，K.H.， ＂与其它抗哮喘药物相比选择性磷酸二酯酶抑制剂对豚鼠气道中抗原 引起的嗜酸粒细胞增多的影响，＂Pulm.Pharmacol.837-42，1995； (2)抑制抗原引起的支气管肺泡灌洗液(BAL)嗜酸粒细胞增多， Raeburn等人，＂RP73401—一种新型选择性磷酸二酯酶IV抑制剂的抗 炎和支气管扩张性＂Br.J.Pharmacol 113 1423-1431，1994；(3) 抑制抗原引起的气道嗜酸粒细胞增多和血小板活化因子-(PAF)-与臭 氧引起的气道反应性过强(AHR)，Karlsson等人，＂新的磷酸二酯酶IV 抑制剂RP73401的抗炎作用，＂Int.Arch.Allergy Immunol.107 425-426，1995；和(4)抑制IL-5引起的胸膜嗜酸粒细胞增多。RP- 73，401，即piclamilast的开发已经中止了。Piclamilast可由式 (0.0.17)代表：

一系列相关化合物由RPR-132294和RPR-132703代表，已经在大 鼠实验中证实了这两种化合物具有抑制抗原引起的支气管痉挛的活 性；Escott等人，＂磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂的药理活性以及在大 鼠和狗中的治疗比率的分析，＂Br.J.Pharmacol.123(Proc.Suppl.) 40P，1998；和Thurairatnam等人，＂RPR-132294和RPR-132703- 新型PDE4抑制剂的生物活性和副作用，＂XVth EFMC Int Symp.Med. Chem.，1998。RPR-132294的结构可由式(0.0.18)代表：

其开发已经中止的另一种化合物是WAY-PDA-641，即 filaminast，在狗中进行的实验表明其具有抑制seratonin引起的支 气管缩小的活性。Filaminast可由式(0.0.19)代表：

本领域内已有人提出，在Sr具有高亲和力的PDE4抑制剂可能与呕 吐和胃酸分泌增多有关。RS-23,544、RP-73,401、和CP-80,633引起 呕吐，并且在Sr具有高亲和力。CDP 840和SB-207,499在Sr具有较低 的亲合力，但是CDP840在Sc的效力显著高于SB-207,499。已经证实 CDP840在哮喘的治疗中能提供显著的后期反应抑制，同时没有任何恶 心或头痛的不利作用。已经表明具有恶心和呕吐不利作用的另一种 PDE4抑制剂是BRL-61,063，其也称为cipamfylline，在下文中对其 进一步描述。CDP840的开发已经中止了，而CP-80,633，即atizoram 正继续处于开发中。CP-80,633和BRL-61,063可分别由式(0.0.20) 和(0.1.12)代表：

正在开发的另一种化合物是LAS-31025，即arofylline，在豚鼠 实验中发现其具有抑制抗原引起的支气管缩小的活性；Beleta，B.J.， ＂LAS31025的特征：用于哮喘的一种新的选择性PDE IV抑制剂，＂ Third Int Conf.On Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase：From Genes to Therapies，Glasgow，UK，1996，Abstract 73.LAS- 31025，arofylline可由式(0.0.21)代表：

有多种PDE4抑制剂的开发已经取得了进展。例如，已经在随机双 盲安慰剂对照实验中测定了V-11294A对体外LPS刺激的TNF释放和 PHA引起的淋巴细胞增殖的影响，并且发现300mg的口服剂量能有效 地降低TNF水平和淋巴细胞增殖；Landells等人，＂口服磷酸二酯酶 (PDE)4抑制剂V11294A在体外抑制激动剂引起的细胞激活，＂Eur. Resp.J.12(Suppl.28)362s，1998；和Gale等人，＂磷酸二酯 酶(PDE)4抑制剂V11294A在人类志愿者中的药效-药动学(PD/PK)特 性，＂Am.J.Respir.Crit.Care Med.159 A611，1999。

已在单一逐步增加剂量的随机安慰剂对照I期实验中将化合物 D4418施用给健康的志愿者；Montana等人，＂D4418—一种新型磷酸二 酯酶4(PDE4)抑制剂的活性，在哮喘的细胞和动物模型以及早期临床 试验中的作用，＂Am.J.Respir.Crit.Care Med.159 A108，1999。 D4418是中等强度的PDE4抑制剂，其IC50为200nM。其具有良好的口 服吸收；200mg剂量提供1.4μg/ml的血浆Cmax。由于效力一般，D4418 的开发已中止了，并且已被临床前开发的D4396代替。

V-11294A和D4418可分别由式(0.0.22)和(0.0.23)代表：

已经在54名受试者中评价了另一种化合物CI-1018，并且在最高 达400mg的剂量没有任何不利作用；Pruniaux等人，＂在致敏的棕色 挪威大鼠中，新的磷酸二酯酶抑制剂CI-1018抑制抗原引起的肺嗜酸 粒细胞增多，与环戊苯吡酮的比较，＂Inflammation S-04-6，1999。 已证实CI-1018具有良好的口服生物利用度(在大鼠中是57％)和良好 的口服效力，在大鼠中的ED50为5mg/kg。CI-1018是较弱的PDE4抑 制剂，在U937细胞中的IC50为1.1μM。还确定了CI-1018与PD-168787 在结构上非常类似，已在大鼠实验中证实了PD-168787具有抑制抗原 引起的嗜酸粒细胞增多的活性；Pascal等人，＂4-氧代-1-苯基- 3，4，6，7-四氢-[1，4]-二氮杂卓[6，7，1-hi]二氢吲哚的合成以及结构 -活性关系，＂215th ACS，Dallas，USA，MEDI 50，1998。所推断的 CI-1018和PD-168787的结构分别由式(0.0.24)和(0.0.25)代表：

还在动物模型中评价了上述化合物，结果证实了其PDE4抑制活 性。例如，已在豚鼠实验中发现V-11294A具有抑制抗原引起的支气管 缩小的活性；Cavalla等人，＂V11294A—一种新的磷酸二酯酶4(PDE4) 抑制剂在哮喘的细胞和动物模型中的活性，＂Amer.J.Respir.Crit. Care Med，155 A660，1997。已在豚鼠实验中发现D4418具有抑制抗 原引起的早期和后期支气管缩小和BAL嗜酸粒细胞增多的活性； Montana，等人，同上。已在大鼠实验中发现CI-1018具有抑制抗原引 起的嗜酸粒细胞增多的活性；Burnouf，等人，＂新的磷酸二酯酶4抑制 剂CI-1018的药理活性＂215th ACS Nat.Meeting，MEDI 008，1998。

其开发已取得进展的其它化合物包括CDC-3052、D-22888、YM- 58997、和roflumilast，其分别由式(0.0.27)、(0.0.28)、(0.0.29)、 和(0.0.30)代表：

CDC-3052的开发已经中止了，但是已经有了非常有效的PDE4抑 制剂例如式(0.0.31)所代表的化合物和式(0.0.32)所代表的抗炎化合 物CDC-801来接替：

据报道，式(0.0.32)化合物作为PDE4抑制剂和TNF生成抑制剂的 IC50值分别为42pM和130nM；Muller等人，＂N-邻苯二甲酰基β-芳 基-β-氨基衍生物：有效的TNF-α和PDE4抑制剂，＂217th American Chemical Society，Annheim，Germany，MEDI 200，1999；和Muller 等人，＂沙利度胺类似物和PDE4抑制，＂Bioorg.Med.Chem.Letts. 8 2669-2674，1998。

CDC-801属于基于沙利度胺的一系列化合物之一，并且主要是为 了改善沙利度胺的TNF-α抑制活性以治疗自身免疫性疾病而开发的。 沙利度胺可由式(0.0.33)代表： 已经研究了CDC-801治疗局限性回肠炎的作用，局限性回肠炎是一种 病因学不明的通常涉及回肠终部的慢性肉芽肿炎性疾病，肠壁形成瘢 痕和增厚，经常导致肠梗阻和形成瘘管与脓肿。治疗后局限性回肠炎 的复发比例很高。

YM-58997抗PDE4的IC50值为1.2nM；Takayama等人，＂选择性 4型磷酸二酯酶(PDE IV)抑制剂的综合研究＂214th American Chemical Society，Las Vegas，USA，MEDI 245，1997。象YM-976一样，YM-58997 具有1，8-萘啶-2-酮结构。

已经实验了Roflumilast治疗COPD和哮喘的作用，并且其在标准 体外哮喘豚鼠模型中的IC50值为3.5nM。使用roflumilast和表面活 性剂来治疗成人呼吸窘迫综合征(ARDS)也已描述过。

已经表明，现在称为氯替泼诺的AWD-12，281在过敏性鼻炎大鼠模 型中有活性，下文在涉及过敏性鼻炎以及使用PDE4抑制剂治疗过敏性 鼻炎的章节对此进一步描述。AWD-12，281可由式(0.0.34)代表：

在结构上与式(0.0.9)所示的CDP840相关的化合物包括L- 826,141，据报道该化合物在支气管炎大鼠模型中有活性；Gordon等 人，＂一种PDE4抑制剂在慢性支气管炎大鼠模型中的抗炎作用，＂Am.J. Respir.Crit.Care Med.159 A33，1999。另一种这样的化合物与 Perrier等人在＂用作PDE4酶抑制剂的取代的呋喃，＂Bioorg.Med. Chem.Letts.9 323-326，1999中报道的哪些化合物在结构上相关， 并且由式(0.0.35)代表：

已经发现是非常强的PDE4抑制剂的其它化合物包括式 (0.0.36)、(0.0.37)、和(0.0.38)所代表的那些：

已经制得了在一个分子中具有联合的PDE4和基质金属蛋白酶 (MMP)抑制活性的化合物；Groneberg等人＂(芳基磺酰基)异羟肟酸模 板对磷酸二酯酶4和基质金属蛋白酶的双重抑制作用，＂J.Med.Chem. 42(4)541-544，1999。这样的化合物的两个实例由式(0.0.39)和 (0.0.40)代表： 在豚鼠巨噬细胞PDE4测定中，式(0.1.36)与(0.1.37)化合物的IC50 值分别为1nM和30nM。

已经表明，称为KF19514和KF17625的化合物在豚鼠实验中具有 抑制下列病症的活性：组胺引起的和抗原引起的支气管缩小；PAF引起 的肺嗜酸粒细胞增多和抗原引起的BAL嗜酸粒细胞增多；乙酰胆碱 (ACh)引起的AHR；PAF引起的BAL嗜酸粒细胞增多和中性白细胞增多、 以及AHR；抗原引起的支气管痉挛；和过敏性支气管缩小；Fujimura 等人，＂KF-19514和西洛他唑在豚鼠中的体内支气管保护作用，＂Eur. J.Pharmacol.327 57-63，1997；Manabe等人，同上；Manabe等 人，＂吸入给药的KF19514—一种磷酸二酯酶4和1抑制剂在豚鼠中抑 制PAF引起的肺炎反应，＂Int.Arch.Allergy Immunol.114 389-399， 1997；Suzuki等人，＂新的支气管扩张剂。3.咪唑并[4，5-c][1，8] 萘啶-4(5H)-酮，＂J.Med.Chem.35 4866-4874，1992；Matsuura 等人，＂作为选择性磷酸二酯酶IV抑制剂的取代的1，8-萘啶-2(1H)- 酮，＂Biol.Pharm.Bull.17(4)498-503，1994；和Manabe等人， ＂一种新的支气管扩张剂KF17625的药理活性，＂Jpn.J.Pharmacol. 58(Suppl.1)238P，1992。KF19514和KF17625可由式(0.0.41)和 (0.0.42)代表：

所报道的一系列二氢茚二酮具有效力并且没有呕吐作用，这意味 着下面的假设是错误的：即副作用例如呕吐与其对PDE4酶的亲和力和 其对高亲和性环戊苯吡酮结合位点(HARBS)的亲和力的比例有关。这样 的二氢茚二酮可由式(0.0.43)和(0.0.44)代表：

根据其化学结构，迄今为止所获得的PDE4抑制剂可分为很多不同 类别。这样的类别象菲啶和萘啶一样是多种多样的。一类PDE4抑制剂 是配体例如T440，已经证实了其具有抑制下列病症的活性：抗原、组 胺、LTD4、U-46619、Ach、神经激肽A、和内皮肽-1引起的早期支气 管缩小；变应原引起的早期和后期支气管缩小和BAL嗜酸粒细胞增多； 和臭氧引起的AHR和气道上皮损伤。将这些化合物的PDE4抑制效力最 优化，结果发现了T-2585，一种迄今为止所描述的最有效的PDE4抑 制剂，其抗豚鼠肺PDE4的IC50值为0.13nM。T-440和T-2585可由 式(0.0.45)和(0.0.46)代表：

另一类PDE4抑制剂由苯并呋喃和苯并噻吩组成。特别是已经使用 呋喃和色满环作为环戊苯吡酮药效基团环戊基醚的替代物。这样的化 合物的一个实例是在结构上与BAY 19-8004明显相关、并且可由式 (0.0.47)代表的化合物： 据报道，另一种苯并呋喃型化合物的IC50值为2.5nM，并且可由式 (0.0.48)代表：

具有相关结构、但不是苯并呋喃的一种化合物的特征是具有稠合 的dioxicin环，并且据报道其在100nM产生犬气管PDE4的几乎完全 的抑制。该化合物可由式(0.0.49)代表：

喹啉和喹诺酮是另一类PDE4抑制剂结构，并且它们用作环戊苯吡 酮的儿茶酚部分的替代物。该化合物和两种具有类似结构的化合物可 由式(0.0.50)、(0.0.51)、和(0.0.52)代表：

二氮杂并吲哚代表另一类化合物结构，现有技术中描述的一些 PDE4抑制剂属于该类化合物。上文进一步描述的PDE4抑制剂CI-1018 和PD-168787属于这类化合物。据报道，二氮杂并吲哚的另一实例 抗U937细胞的PDE4的IC50为3nM，并且可由式(0.0.53)代表：

嘌呤、黄嘌呤、和蝶啶代表着迄今为止现有技术描述的PDE4抑制 剂所属于的其它类化合物。上文描述的并由式(0.0.22)代表的化合物 V-11294A是嘌呤。现有技术已经描述了作为黄嘌呤化合物的PDE4抑 制剂，茶碱属于该类化合物；Montana等人，＂PDE4抑制剂，新的黄嘌 呤类似物，＂Bioorg.Med.Chem.Letts.8 2925-2930，1998。黄 嘌呤化合物可由式(0.0.54)代表：

已证实了属于蝶啶类化合物的一种强效PDE4抑制剂以16nM的 IC50值抗得自肿瘤细胞的PDE4，并以微摩尔浓度抑制肿瘤细胞生长； Merz等人，＂合成7-苄基氨基-6-氯-2-哌嗪基-4-吡咯烷基蝶啶和不 含位置异构体的新衍生物.cAMP特异性磷酸二酯酶和恶性肿瘤细胞生 长的强效抑制剂，＂J.Med.Chem.41(24)4733-4743，1998。蝶啶 PDE4抑制剂可由式(0.0.55)代表：

三嗪代表着迄今为止现有技术描述的PDE4抑制剂所属于的另一类 化合物。已经描述了在豚鼠气管模型中表现出支气管扩张活性并且是 强效弛缓剂的两种这样的三嗪化合物。可由下面式(0.0.56)和(0.0.57) 代表的这些化合物还是中等强度的PDE4抑制剂，IC50值分别为150和 140nM： 其设想的结构与式(0.0.56)和(0.0.57)化合物非常类似的三嗪是 UCB-29936，已证实了其在脓毒性休克鼠模型中具有活性；Danhaive 等人，＂UCB29936，一种选择性磷酸二酯酶IV抑制剂：在内毒素性休 克中的治疗潜力，＂Am.J.Respir.Crit Care.Med.159 A611， 1999。

本领域已经作出努力来提高在上述A-D亚型方面的PDE4抑制剂 的选择性。目前有4种已知的PDE4同工酶的同种型(亚型)，包括上文 所述的7种剪接变型。PDE4D同种型mRNA在炎性细胞(如嗜中性白细 胞和嗜酸细胞)中表达，并且现有技术已提出，PDE4的D-选择性抑制 剂将提供具有减轻的副作用的良好临床效力。已描述了对PDE4D同种 型的抑制表现出选择性的烟酰胺衍生物；WO 98/45268；以及据报道是 PDE4D选择性抑制剂的萘啶衍生物；WO 98/18796。这些化合物可分别 由式(0.0.58)和(0.0.59)代表：

现有技术中已经描述了可用于治疗CNS疾病例如多发性硬化的另 一种烟酰胺化合物；GB-2327675；现有技术已描述了以相同亲和力与 人PDE4B2B上的催化位点和HARB位点结合的作为PDE4抑制剂的环戊 苯吡酮衍生物；Tian等人，＂(R，R)-(+/-)-甲基-3-乙酰基-4-[3-(环 戊基氧基)-4-甲氧基苯基]-3-甲基-1-吡咯烷甲酸酯对人4型磷酸二 酯酶isostate的双重抑制作用，＂Biochemistry 37(19)6894-6904， 1998。该烟酰胺衍生物和环戊苯吡酮衍生物可分别由式(0.0.60)和 (0.0.61)代表：

涉及选择性PDE4同工酶的其它背景技术可参见本领域的出版物， 例如Norman，＂PDE4抑制剂1999，＂Exp.Opin.Ther.Patents 9(8) 1101-1118，1999(Ashley Publications Ltd.)；以及Dyke和 Montana，＂PDE4抑制剂的治疗潜力，＂Exp.Opin.Invest.Drugs 8 (9)1301-1325，1999(Ashley Publications Ltd.)。 3.0现有技术描述

1998年10月15日公开的WO 98/45268(Marfat等人)公开了具 有PDE4D同工酶选择性抑制剂活性的烟酰胺衍生物。这些选择性抑制 剂由式(0.1.1)代表：

于1989年8月29日公布的US 4,861,891(Saccomano等人)公 开了用作抗抑郁剂的起钙依赖性c-AMP磷酸二酯酶抑制剂作用的式 (0.1.2)烟酰胺化合物： 在该专利中公开的典型化合物的烟酰胺核直接与R1键合，其中R1定义 为1-哌啶基、1-(3-吲哚基)乙基、C1-C4烷基、苯基、1-(1-苯基乙基)、 或苄基，所述基团可任选被甲基、甲氧基、氯或氟取代。R2取代基是 二环[2.2.1]庚-2-基或 其中Y是H、F或Cl；且X是H、F、Cl、OCH3、CF3、CN、COOH、-C(＝O)(C1-C4) 烷氧基、NH(CH3)C(＝O)-(甲基氨基甲酰基)或N(CH3)2C(＝O)-(二甲基氨 基甲酰基)。

US 4,692,185(Michaely等人)公开了除草剂例如式(0.1.3)化 合物 其中R是(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、或卤素。

EP 550900(Jeschke等人)公开了式(0.1.4)除草剂和杀植物线虫 剂： 其中n是0-3；R1选自多种基团，但是通常为H、6-CH3、或5-Cl；R2 是烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基或芳烷基；R1和R2是卤素、CN、 NO2、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷硫基、卤代烷硫基、 烷基磺酰基、卤代烷基磺酰基、芳基、芳氧基、或芳硫基；且R4是烷 基。

EP 500 989(Mollner等人)公开了式(0.1.5)ACE抑制剂： 其中n是0-3；R是OH、SH、COOH、NH2、卤素、OR4、SR4、COOR4、NHR4 或N(R4)2，其中R4是低级烷基、任选取代的芳基、或酰基；R1是OH、 低级烷氧基、任选取代的芳基低级烷氧基、芳氧基、或二取代的氨基； R2是低级烷基或氨基低级烷基；且R1和R2是卤素、NO2、低级烷基、 卤代低级烷基、芳基低级烷基、或芳基。所公开的特定实施方案包括 化合物例如式(0.1.6)化合物：

FR 2.140.772(Aries)公开了声称用作镇痛剂、安定剂、退热剂、 抗炎剂、和抗风湿剂的式(0.1.7)化合物 其中R是选自低级烷基、三卤代甲基、烷氧基、和卤素的1或2个取 代基；R′是H或烷基，且R″是氢或烷基。

JP 07 304775(Otsuka等人)公开了具有抗炎、免疫调节、镇痛、 退热、抗过敏、和抗抑郁作用的萘啶和吡啶并吡嗪衍生物。还公开了 式(0.1.8)中间体： 其中X可以是CH，且R和R′分别是低级烷基。

对于上述专利和出版的专利申请的公开内容，应当理解，只有WO 98/45268(Marfat等人)的公开内容涉及抑制PDE4同工酶。该现有技 术还包含化学结构完全不同于本发明式(1.0.0)化合物的化合物的信 息，但是这些化合物另一方面具有类似于式(1.0.0)化合物的生物活 性。下面进一步举例说明公开了所述信息的代表性专利和出版的专利 申请。

优先权日都是1992年4月2目的US 5,552,438；US 5,602,157； 和US 5,614,540(都属于Christensen)涉及称为ARIFLO的治疗剂， 其是式(0.1.9)化合物，并具有如下所示的命名：

式(0.1.9)化合物落在了US 5,552,438的范围内，该专利公开了 通式(0.1.10)化合物族： 其中R1＝-(CR4R5)rR6，其中r＝0，且R6＝C3-6环烷基；X＝YR2，其 中Y＝O，且R2＝-CH3；X2＝O；X3＝H；且X4＝部分式(0.1.10.1) 所示的基团 其中X5＝H；s＝0；R1和R2＝CN；且Z＝C(O)OR14，其中R14＝H。 US 5,602,157和US 5,614,540的公开内容不同于US 5,552,438，并 且也彼此不同，因为对于ARIFLO化合物，R3的定义是CN。所公开的 ARIFLO化合物的优选的盐形式是三(羟基甲基)铵甲烷盐。

US 5,863,926(Christensen等人)公开了ARIFLO化合物的类似 物，例如式(0.1.11)化合物：

WO 99/18793(Webb等人)公开了制备ARIFLO和相关化合物的方 法。WO 95/00139(Barnette等人)要求保护这样的化合物，其对于以 高亲和力结合环烷苯吡酮的PDE IV催化形式的IC50除以其对于以低亲 和力结合环戊苯吡酮的形式的IC50所获得的IC50比值约为0.1或0.1 以上；但是在从属权利要求中将其范围限制为在1993年6月21日以 前未知的PDE4抑制剂化合物。

WO 99/20625(Eggleston)公开了用于治疗PDE4和TNF介导的疾 病的晶体多晶型的式(0.1.12)的cipamfylline：

WO 99/20280(Griswold等人)公开了通过施用有效量的PDE4抑 制剂例如式(0.1.13)化合物来治疗瘙痒症的方法：

US 5,922,557(Pon)公开了稳定地表达高水平全长低-Km cAMP 特异性PDE4A酶的CHO-K1细胞系，所述酶已用于测定有效的PDE4酶 抑制剂，并把其提高全细胞制备中cAMP的效力的等级阶数，与其抑制 破碎细胞制备中的磷酸二酯酶活性的能力比较。其描述已发现，现有 技术描述的可溶性酶抑制测定不能反映出抑制剂的体内作用特性。于 是公开了据述能反映出抑制剂体内作用特性的改进的可溶性酶全细胞 测定。其进一步公开了存在至少4种不同的PDE4同种型或亚型，并且 已经表明每一种亚型能产生大量剪接变体，这些剪接变体自身可表现 出不同的细胞定位和对抑制剂的亲和力。

对于上述专利和出版的专利申请的公开内容，应当理解，所涉及 的化合物具有与式(1.0.0)化合物相同的抑制PDE4的生物活性。然 而，本领域技术人员同时应当注意到，在现有技术中公开的所述化合 物的化学结构不仅彼此不同，而且也不同于本发明新化合物。现有技 术还涉及不但化学结构与式(1.0.0)化合物不同，并且也不具有类似于 式(1.0.0)化合物的PDE4抑制活性的化合物。然而，在现有技术中公 开的这些化合物经常具有类似于式(1.0.0)化合物的治疗用途，即治疗 炎性、呼吸系统和过敏性疾病和病症的用途。对于以所谓的白三烯途 径起作用的一些酶抑制剂和受体拮抗剂，这是特别可能的。尤其是关 于白三烯LTB4和LTD4的情况。因此，下面描述公开了这类信息的代表 性专利和出版的专利申请。

花生四烯酸是由环加氧酶-1和5-脂氧合酶代谢的。5-脂氧合酶途 径导致生成白三烯(LTs)，白三烯通过其对嗜中性白细胞聚集、脱粒和 趋化性；血管渗透性；平滑肌收缩性；和淋巴细胞的影响而引起炎性 反应。半胱氨酰白三烯、LTC4、LTD4、和LTE4在哮喘的致病机理中起 重要作用。在下图表中举例说明给予了治疗干预靶的白三烯途径的组 分：

因此，能够干预5-脂氧合酶途径的任何步骤的活性剂提供了治疗 机会。一种这样的活性剂的实例是5-脂氧合酶抑制剂弃白通，这是一 种称为ZYFLO的治疗剂，可由式(0.1.14)代表：

另一种这样的活性剂是LTD4受体拮抗剂zafirlukast，这是一种 称为ACCOLATE的治疗剂，可由式(0.1.15)代表：

另一种这样的LTD4受体拮抗剂是montelukast，这是一种称为 SINGULAIR的治疗剂，可由式(0.1.16)代表：

另一类上述治疗靶是LTB4受体，所述受体的拮抗剂的一个实例是 BIIL-260，这是可由式(0.1.17)代表的一种治疗剂：

作为LTB4受体拮抗剂的治疗剂的另一实例是CGS25019c，其可由 式(0.1.18)代表：

上述现有技术都没有公开或者暗示本领域技术人员本发明新化合 物或其PDE4抑制活性，以及显著改善治疗用途和在炎性、呼吸系统和 过敏性疾病和病症的治疗中的治疗指数。 4.0发明概述

本发明涉及式(1.0.0)化合物： 或其可药用盐，

其中

-j是0或1；

-k是0或1；

-m是0或1；

-n是1或2；

-W是-O-；-S(＝O)t-，其中t是0、1、或2；或-N(R3)-；

其中

-R3是-H；-(C1-C3)烷基；-OR12；苯基；或苄基；

-RA和RB分别独立地选自-H；-F；-CF3；-(C1-C4)烷基；-(C3-C7) 环烷基；苯基；或苄基；其中所述烷基、环烷基、苯基、或苄基可分 别独立地被0-3个取代基R10取代；

条件是：对于上述以及所有其它适用的RA和RB的含义，当作为RA 或RB的取代基的R10具有-OR12、-OC(＝O)R12、或-OC(＝O)NR12R13的含义 时，所述-OR12、-OC(＝O)R12、或-OC(＝O)NR12R13与作为E的含义的-OR12的位置关系不是邻位关系；

其中

-R10选自-F；-Cl；-CF3；-CN；-OR12；(C1-C2)烷基；羟基(C1-C2) 烷基；-O-C(＝O)R13；-O-C(＝O)NR12R13；-NR12R13；-NR12C(＝O)R13； -NR12C(＝O)OR13；-NR12S(＝O)2R13；和-S(＝O)2NR12R13；

其中

-R12和R13分别独立地选自-H；-(C1-C4)烷基；苯基；或苄基；其 中所述烷基、苯基、或苄基被0-3个选自F和Cl的取代基取代；

或者 -RA和RB一起形成式(1.1.0)螺合基团，条件是m为1：

其中

-r和s独立地为0-4，条件是：r+s之和为至少1、但是不大 于5；

且

-QA选自-CH2-、-CHF、-CF2、-N(R3)-、-O-；和-S(＝O)t-，其中t 是0、1、或2；并且所述螺合基团在其任何一个或多个碳原子上、包 括在定义QA的-CH2-的碳原子上被0-3个取代基R10取代，其中R3和 R10具有与上述定义相同的含义；

条件是：对于上述以及所有其它适用的RA和RB的含义，当作为RA 或RB的取代基的R10具有-OR12、-OC(＝O)R12、或-OC(＝O)NR12R13的含义 时，所述-OR12、-OC(＝O)R12、或-OC(＝O)NR12R13与作为E的含义的-OR12的位置关系不是邻位关系；

-RC和RD具有与上述RA和RB的定义相同的含义，除了至少一个RC 和RD必须是-H，并且它们彼此独立地以及独立于RA和RB来选择；

-ZA独立地选自下列基团：

-(a)饱和或不饱和、稠合或断开的环状或二环(C3-C9)杂环基，所 述杂环基选自呋喃基；噻吩基；吡咯基；吡咯烷基；噁唑基；异噁唑基； 噻唑基；异噻唑基；吗啉基；吡唑基；噁二唑基；噻二唑基；咪唑基； 吡嗪基；嘧啶基；哒嗪基；哌啶基；哌嗪基；三唑基；四唑基；2，3- 苯并呋喃基；2，3-二氢苯并呋喃基；1，3-二氢异苯并呋喃基；苯并[b] 噻吩基；吲哚基；二氢吲哚基；异二氢吲哚基；2H-1-苯并吡喃基；4H-1- 苯并吡喃基；1H-2-苯并吡喃基；色满基；异色满基；喹啉基；异喹啉 基；1，2，3，4-四氢喹啉基；1，2，3，4-四氢异喹啉基；奎宁环基；氮杂 二环[3.3.0]辛基；1，3-苯并二氧杂环戊烯基；3H-2，1-苯并氧杂硫杂 环戊烯基；苯并噁唑基；1，2-苯并异噁唑基；2，1-苯并异噁唑基；1，2- 苯并二硫杂环戊烯基；1，3-苯并二硫杂环戊烯基；苯并噻唑基；1，2- 苯并异噻唑基；苯并咪唑基；吲唑基；1，4-苯并二氧杂环己烷基； 4H-3，1-苯并噁嗪基；2H-1，4-苯并噁嗪基；1，4-苯并噻嗪基；1，2-苯 并噻嗪基；喹唑啉基；喹喔啉基；酞嗪基；噌啉基；1，2，3-苯并噻二 唑基；2H-1，2，4-苯并噻二嗪基；2H-1，2，4-苯并噁二嗪基；苯并三嗪 基；1，2，3-苯并三嗪基；1，2，4-苯并三嗪基；和苯并四嗪基；

其中所述杂环基在任何一个或多个其氮原子上被0或1个R9取代 基取代，其中

-R9独立地选自-H；和-(C1-C4)烷基；

并且其中所述杂环基在任何一个或多个其碳原子上被0-3个R16 取代基取代，其中

-R16独立地选自-F；-Cl；-CN；-OR12；(C1-C4)烷基；(C3-C7)环 烷基；-CF3；-C(＝O)OR12；-NO2；-NR12R13；羟基(C1-C4)烷基氨基；苯 基；和苄基；其中R12和R13具有与上述定义相同的含义；并且所述烷 基、烷氧基或环烷基分别独立地为0-3个R18取代基取代，

其中

R18独立地选自-F；-Cl；-CN；-OR12；-CF3；-NR12R13；和苯基；其 中R12和R13具有与上述定义相同的含义；

-且另外的ZA-

-(b)是单环-(C3-C7)环烷基；单环-(C5-C7)环烯基，所述环烯基 选自环戊烯基、环己烯基和环庚烯基；或选自下列的二环-(C7-C10)环 烷基或-(C7-C10)环烯基：降冰片烷基、降冰片烯基、二环[2.2.2]辛基、 二环[3.2.1]辛基、二环[3.3.0]辛基、二环[2.2.2]辛-5-烯基、二环 [2.2.2]辛-7-烯基、二环[3.3.1]壬基、环癸基、和金刚烷基；其中 所述单环和二环环烷基独立地被0-3个R16取代基取代，其中R16具有 与上述定义相同的含义；

-且另外的ZA-

(c)被0-3个取代基R4取代的苯基或吡啶基，

其中

-R4是独立地选自下列的基团：

-(1)-F；-Cl；-CN；-OR12；-S(＝O)pR12；-C(＝O)OR12；-OC(＝O)R12； -NO2；-C(＝O)NR12R13；-OC(＝O)NR12R13；-NR12R13；-NR14C(＝O)R12； -NR14C(＝O)OR12；-NR14S(＝O)pR12；和-S(＝O)pNR12R13；其中p是0、1、或 2；且R12和R13具有与上述定义相同的含义；

其中

R14选自-H；-CH3；和-CH2CH3；

-且另外的R4-

-(2)独立地为-(C1-C4)烷基；或-(C1-C4)烷氧基，其中在上述R4 的定义中的-OR12的R12具有-(C1-C4)烷基的含义；其中所述烷基或烷氧 基分别独立地被0-3个取代基-F或-Cl取代；或被0或1个取代基 (C1-C2)烷氧基羰基-；(C1-C2)烷基羰基-；或(C1-C2)烷基羰基氧基-取 代；

-且另外的R4-

-(3)独立地为苯基；苄基；或选自下列的杂环基：呋喃基；四氢 呋喃基；氧杂环丁烷基；噻吩基；四氢噻吩基；吡咯基；吡咯烷基；噁 唑基；噁唑烷基；异噁唑基；异噁唑烷基；噻唑基；噻唑烷基；异噻唑 基；异噻唑烷基；吡唑基；吡唑烷基；噁二唑基；噻二唑基；咪唑基； 咪唑烷基；吡啶基；吡嗪基；嘧啶基；哒嗪基；哌啶基；哌嗪基；三 唑基；三嗪基；四唑基；吡喃基；氮杂环丁烷基；吗啉基；对噻嗪基； 吲哚基；二氢吲哚基；苯并[b]呋喃基；2，3-二氢苯并呋喃基；2-H- 色烯基；色满基；苯并噻吩基；1-H-吲唑基；苯并咪唑基；苯并噁唑 基；苯并异噁唑基；苯并噻唑基；喹啉基；异喹啉基；酞嗪基；喹唑啉 基；喹喔啉基；和嘌呤基；其中所述苯基、苄基、或杂环基分别独立 地被0-2个取代基R10取代，其中R10具有与上述定义相同的含义；

-当ZA是苯基时，在相邻碳原子上的R4与它们所连按的碳原子以 及它们是其一部分的苯环一起形成选自下列的苯并稠合的杂环基： 2，3-苯并呋喃基；2，3-二氢苯并呋喃基；1，3-二氢异苯并呋喃基；苯 并[b]噻吩基；吲哚基；二氢吲哚基；异吲哚基；2H-1-苯并吡喃基； 4H-1-苯并吡喃基；1H-苯并吡喃基；色满基；异色满基；喹啉基；异 喹啉基；1，2，3，4-四氢喹啉基；1，2，3，4-四氢异喹啉基；1，3-苯并二 氧杂环戊烯基；3H-2，1-苯并氧杂硫杂环戊烯基；苯并噁唑基；1，2-苯 并异噁唑基；2，1-苯并异噁唑基；1，2-苯并二硫杂环戊烯基；1，3-苯 并二硫杂环戊烯基；苯并噻唑基；1，2-苯并异噻唑基；苯并咪唑基； 吲唑基；1，4-苯并二氧杂环己烷基；4H-3，1-苯并噁嗪基；2H-1，4-苯 并噁嗪基；1，4-苯并噻嗪基；1，2-苯并噻嗪基；喹唑啉基；喹喔啉基； 酞嗪基；噌啉基；1，2，3-苯并噻二唑基；2H-1，2，4-苯并噻二嗪基； 2H-1，2，4-苯并噁二嗪基；苯并三嗪基；1，2，3-苯并三嗪基；1，2，4- 苯并三嗪基；和苯并四嗪基；

-ZB是苯基；吡啶基；嘧啶基；咪唑基；环戊基；环己基；环戊 烯基、环己烯基、降冰片烷基、降冰片烯基、二环[2.2.2]辛基、二环 [3.2.1]辛基、二环[3.3.0]辛基、二环[2.2.2]辛-5-烯基、二环[2.2.2] 辛-7-烯基、二环[3.3.1]壬基、或金刚烷基；

-R1和R2分别独立地选自-H；-F；-Cl；-OR12；-S(＝O)pR12； -C(＝O)OR12；-OC(＝O)R12；-CN；-NO2；-C(＝O)NR12R13；-NR12R13；和- S(＝O)pNR12R13；其中p是0、1或2；且R12和R13具有与上述定义相同的 含义；

-E选自-H；-F；-Cl；-CN；-OR12；(C1-C4)烷基；羟基(C1-C4)烷 基；-CF3；-NO2；-NR12R13；-NR12S(＝O)2R13；和-S(＝O)2NR12R13；其中R12 和R13具有与上述定义相同的含义；

且

-R7和R8分别独立地选自-H；-F；-Cl；-OR12；(C1-C4)烷基；羟 基(C1-C4)烷基；-CF3；-C(＝O)OR12；-NR12R13；羟基(C1-C4)烷基氨基； 苯基；苄基；或选自下列的杂环基：吡咯基；噁唑基；噻唑基；噁二唑 基；噻二唑基；咪唑基；吡啶基；四唑基；吲基；和苯并咪唑基； 其中所述苯基、苄基、或杂环基分别独立地被0-2个取代基R10取代， 其中R10具有与上述定义相同的含义；

-如果j或k是1，或者j和k同时为1，则式(1.0.0)化合物呈 N-氧化物的形式。

本发明还涉及式(1.0.0)化合物与一种或多种选自下列的化合物 的组合：(a)白三烯生物合成抑制剂：选自下列的5-脂氧合酶(5-LO) 抑制剂和5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)拮抗剂：弃白通；ABT-761； fenleuton；替波沙林；Abbott-79175；Abbott-85761；式(5.2.8)的 N-(5-取代的)噻吩-2-烷基磺酰胺；式(5.2.10)的2，6-二叔丁基苯酚 腙；甲氧基四氢吡喃类，包括式(5.2.11)的Zeneca ZD-2138；式 (5.2.12)的化合物SB-210661及其所属于的化合物类；L-739,010所 属于的吡啶基取代的2-氰基萘化合物类；L-746,530所属于的2-氰基 喹啉化合物类；MK-591、MK-886、和BAY x 1005所属于的吲哚和喹 啉化合物类；(b)白三烯LTB4、LTC4、LTD4、和LTE4的受体拮抗剂， 所述拮抗剂选自：L-651,392所属于的吩噻嗪-3-酮类化合物；CGS- 25019c所属于的脒基化合物类；ontazolast所属于的苯并噁唑胺类； BIIL 284/260所属于的苯甲亚胺酰胺类；和zafirlukast、阿鲁司特、 montelukast、普仑司特、维卡斯特(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、 伊拉司特(CGP 45715A)、和BAY x 7195所属于的化合物类；(c)PDE4 抑制剂；(d)5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂；或5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP) 拮抗剂；(e)双重5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂和血小板活化因子(PAF)拮 抗剂；(f)白三烯拮抗剂(LTRAs)，包括LTB4、LTC4、LTD4、和LTE4的 拮抗剂；(g)抗组胺H1受体拮抗剂，包括西替立嗪、氯雷他定、 desloratadine、fexofenadine、息斯敏、氮卓斯丁、和氯苯那敏； (h)胃保护H2受体拮抗剂；(i)用于减轻充血的口服或局部施用的α1- 和α2-肾上腺受体激动血管收缩拟交感神经剂，包括丙己君、苯福林、 苯丙醇胺、假麻黄碱、盐酸萘唑啉、盐酸羟甲唑啉、盐酸四氢唑啉、 盐酸赛洛唑啉、和盐酸乙基去甲肾上腺素；(j)与5-脂氧合酶(5-LO) 抑制剂组合的α1-和α2-肾上腺受体激动剂；(k)抗胆碱能剂，包括异 丙托溴铵；噻托溴铵；氧托溴铵；哌仑西平；和替伦折平；(l)β1-和 β2-肾上腺受体激动剂，包括奥西那林、异丙肾上腺素、异丙去甲肾上 腺素、舒喘宁、沙丁胺醇、福莫特罗、沙美特罗、特布他林、间羟异 丙肾上腺素、甲磺酸双甲苯苄醇、和吡布特罗；(m)甲基黄嘌呤，包 括茶碱和氨茶碱；(n)色甘酸钠；(o)毒蕈碱受体(M1、M2、和M3)拮 抗剂；(p)COX-1抑制剂(NSAIDs)；COX-2选择性抑制剂，包括 rofecoxib；和一氧化氮NSAIDs；(q)I型胰岛素样生长因子(IGF-1) 模拟物；(r)环索萘德；(s)具有减轻的系统副作用的吸入施用的糖皮 质激素，包括强的松、强的松龙、氟尼缩松、丙炎松、二丙酸倍氯米 松、布地奈德、丙酸氟地松、和糠酸毛他松；(t)类胰蛋白酶抑制剂； (u)血小板活化因子(PAF)拮抗剂；(v)具有抗内源性炎性实体的单克 隆抗体；(w)IPL 576；(x)抗肿瘤坏死因子(TNFa)剂，包括 Etanercept、Infliximab、和D2E7；(y)DMARDs，包括来氟米特； (z)TCR肽；(aa)白介素转化酶(ICE)抑制剂；(bb)IMPDH抑制剂； (cc)粘着分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；(dd)组织蛋白酶；(ee) MAP激酶抑制剂；(ff)葡萄糖-6磷酸酯脱氢酶抑制剂；(gg)激肽-B1- 和B2-受体拮抗剂；(hh)具有多种亲水性基团的亚金硫基形式的金； (ii)免疫抑制剂，例如山地明、硫唑嘌呤、和甲氨蝶呤；(jj)抗痛 风剂，例如秋水仙碱；(kk)黄嘌呤氧化酶抑制剂，例如别嘌醇；(ll) 促尿酸排泄剂，例如丙磺舒、磺吡酮、和苯溴马隆；(mm)抗肿瘤剂， 尤其是抗有丝分裂药物，包括长春花生物碱例如长春花碱和长春新 碱；(nn)生长激素促分泌剂；(oo)基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂， 即溶基质素、胶原酶、和明胶酶、以及聚集蛋白聚糖酶；尤其是胶原 酶-1(MMP-1)、胶原酶-2(MMP-8)、胶原酶-3(MMP-13)、溶基质素 -1(MMP-3)、溶基质素-2(MMP-10)、和溶基质素-3(MMP-11)的抑制 剂；(pp)转化生长因子(TGFβ)；(qq)血小板衍生生长因子(PDGF)； (rr)成纤维细胞生长因子例如基本成纤维细胞生长因子(bFGF)；(ss) 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)；(tt)辣椒素；(uu)选自 NKP-608C；SB-233412(talnetant)；和D-4418的速激肽NK1和NK3 受体拮抗剂；和(vv)选自UT-77和ZD-0892的弹性蛋白酶抑制剂。

本发明还涉及治疗患有由PDE4同工酶在其调节人嗜酸细胞激活和 脱粒的作用中介导的疾病或病症的个体的方法，包括给需要所述治疗 的所述个体施用治疗有效量的如上所定义的式(1.0.0)化合物。类似 地，本发明还涉及用于所述治疗的药物组合物，其中包含如上所定义 的式(1.0.0)化合物和可药用载体。

本发明涉及可用于治疗或预防选自下列的疾病、障碍、和病症的 由如上所定义的式(1.0.0)化合物组成的PDE4同工酶抑制剂：

-任何类型、病因、或发病机理的哮喘；或选自下列的哮喘：变 应性哮喘；非变应性哮喘；过敏性哮喘；特应性、支气管、IgE-介导 的哮喘；支气管哮喘；特发性哮喘；真性哮喘；由病理生理障碍引起 的内因性哮喘；由环境因素引起的外源性哮喘；未知或不明显原因的 特发性哮喘；非变应性哮喘；支气管炎哮喘；气肿性哮喘；锻炼引起 的哮喘；职业性哮喘；由细菌、真菌、原生动物、或病毒感染引起的 感染性哮喘；非过敏性哮喘；初发哮喘；哮喘婴儿综合征；

-慢性或急性支气管缩小；慢性支气管炎；小气道堵塞；和肺气 肿；

-任何类型、病因、或发病机理的堵塞性或炎性气道疾病；或选 自下列的堵塞性或炎性气道疾病：哮喘；尘肺病；慢性嗜酸细胞性肺 炎；慢性堵塞性肺病(COPD)；包括慢性支气管炎、肺气肿或与其有关 的呼吸困难的COPD；特征是不可逆进行性气道堵塞的COPD；成人呼吸 窘迫综合征(ARDS)，和其它药物治疗后的气道高反应性的恶化；

-任何类型、病因、或发病机理的尘肺病；选自下列的尘肺病： 矾土肺或铝土矿劳动者疾病；煤矽肺或矿工哮喘；石棉肺或蒸汽管工 哮喘；石末肺或石末沉着病；吸入鸵鸟羽毛尘埃引起的驼鸟毛尘肺； 吸入铁粒引起的肺铁末沉着病；矽肺或磨床工疾病；棉屑肺或棉尘哮 喘；和滑石粉尘肺病；

-任何类型、病因、或发病机理的支气管炎；或选自下列的支气 管炎：急性支气管炎；急性喉气管支气管炎；花生仁吸入性支气管炎； 卡他性支气管炎；纤维蛋白性支气管炎；干性支气管炎；感染性哮喘 性支气管炎；增生性支气管炎；葡萄球菌或链球菌性支气管炎；和肺 泡性支气管炎；

-任何类型、病因、或发病机理的支气管扩张；或选自下列的支 气管扩张：圆柱状支气管扩张；囊状支气管扩张；梭形支气管扩张； 毛细支气管扩张；囊性支气管扩张；干性支气管扩张；和滤泡性支气 管扩张；

-季节性过敏性鼻炎；或长年性过敏性鼻炎；或任何类型、病因、 或发病机理的窦炎；或选自下列的窦炎：化脓性或非化脓性窦炎；急 性或慢性窦炎；和筛骨、额、上颌、或蝶骨窦炎；

-任何类型、病因、或发病机理的类风湿性关节炎；或选自下列 的类风湿性关节炎：急性关节炎；急性痛风性关节炎；慢性炎性关节 炎；变性关节炎；感染性关节炎；Lyme关节炎；增殖性关节炎；牛皮 癣性关节炎；和脊椎关节炎；

-痛风、和与炎症有关的发热和疼痛；

-任何类型、病因、或发病机理的嗜酸细胞相关病症；或选自下 列的嗜酸细胞相关病症：嗜酸粒细胞增多；肺渗滤嗜酸粒细胞增多； Loffler′s综合征；慢性嗜酸细胞性肺炎；热带肺嗜酸粒细胞增多； 支气管肺炎性曲霉病；曲霉肿；含有嗜酸细胞的风湿性肉芽肿；过敏 性肉芽肿性脉管炎或Churg-Strauss综合征；结节性多动脉炎(PAN)； 和系统性坏死性脉管炎；

-特应性皮炎；或过敏性皮炎；或者过敏性或特应性湿疹；

-任何类型、病因、或发病机理的荨麻疹；或选自下列的荨麻疹： 免疫介导的荨麻疹；补体介导的荨麻疹；致荨麻疹物质引起的荨麻疹； 物质引起的荨麻疹；物理因素引起的荨麻疹；紧张引起的荨麻疹；自 发性荨麻疹；急性荨麻疹；慢性荨麻疹；血管性水肿；胆碱能性荨麻 疹；正染色体显性形式或获得形式的感冒性荨麻疹；接触性荨麻疹； 巨大荨麻疹；和丘疹性荨麻疹；

-任何类型、病因、或发病机理的结膜炎；或选自下列的结膜炎： 光化性结膜炎；急性卡他性结膜炎；急性触染性结膜炎；过敏性结膜 炎；特应性结膜炎；慢性卡他性结膜炎；化脓性结膜炎；和春季结膜 炎；

-任何类型、病因、或发病机理的眼色素层炎；或选自下列的眼 色素层炎：所有或部分眼色素层炎症；前眼色素层炎；虹膜炎；睫状 体炎；虹膜睫状体炎；肉芽肿性眼色素层炎；非肉芽肿性眼色素层炎； 晶状体抗原性眼色素层炎；后眼色素层炎；脉络膜炎；和脉络膜视网 膜炎；

-牛皮癣；

-任何类型、病因、或发病机理的多发性硬化；或选自下列的多 发性硬化：原发性进行性多发性硬化；和复发性缓解多发性硬化；

-任何类型、病因、或发病机理的自身免疫性/炎性疾病；或选自 下列的自身免疫性/炎性疾病：自身免疫性血液病；溶血性贫血；再生 障碍性贫血；纯红细胞贫血；原发性血小板减少性紫癜；全身性红斑 狼疮；多软骨炎；硬皮病；韦格内氏肉芽肿病；皮肤肌炎；慢性主动 性肝炎；重症肌无力；Stevens-Johnson综合征；自发性口炎性腹泻； 自身免疫性炎性肠病；溃疡性结肠炎；局限性回肠炎；内分泌性眼病； 格雷夫斯氏病；肉样瘤病；牙槽炎；慢性过敏性肺炎；原发性胆汁性 肝硬变；青少年糖尿病或I型糖尿病；前眼色素层炎；肉芽肿性眼色 素层炎或后眼色素层炎；干性角膜结膜炎；流行性角膜结膜炎；弥散 性间质性胰炎肺纤维变性或间质性肺纤维变性；自发性肺纤维变性； 囊性纤维变性；牛皮癣性关节炎；具有或不具有肾病综合征的肾小球 性肾炎；急性肾小球性肾炎；自发性肾病综合征；最小变化肾病；炎 性/高增殖性皮肤病；牛皮癣；特应性皮炎；接触性皮炎；过敏性接触 性皮炎；良性家族性天疱疮；红斑性天疱疮；落叶状天疱疮；和寻常 天疱疮；

-预防移植术后的同种异体移植物排斥；

-任何类型、病因、或发病机理的炎性肠病(IBD)；或选自下列的 炎性肠病：溃疡性结肠炎(UC)；胶原性结肠炎；息肉状结肠炎；透壁 性结肠炎；和局限性回肠炎(CD)；

-任何类型、病因、或发病机理的脓毒性休克；或选自下列的脓 毒性休克：肾衰竭；急性肾衰竭；恶病质；疟疾恶病质；垂体性恶病 质；尿毒症恶病质；心脏恶病质；肾上腺性恶病质或阿狄森氏病；癌 性恶病质；和感染人免疫缺陷病毒(HIV)后所发生的恶病质；

-肝脏损伤；

-肺动脉高血压；和低氧引起的肺动脉高血压；

-骨损失疾病；原发性骨质疏松；和继发性骨质疏松；

-任何类型、病因、或发病机理的中枢神经系统疾病；或选自下 列的中枢神经系统疾病：抑郁症；帕金森氏病；学习和记忆削弱；迟 发性运动障碍；药物依赖；动脉硬化性痴呆；和伴随亨廷顿氏舞蹈病、 Wilson′s病、震颤麻痹、和丘脑萎缩的痴呆；

-感染，尤其是病毒感染，其中这样的病毒提高TNF-α在其宿主 中的产生，或者这样的病毒对其宿主中的TNF-α下调敏感，因此其复 制或其它病毒活动受到不利影响，包括选自下列的病毒：HIV-1、 HIV-2、和HIV-3；巨细胞病毒，CMV；流感病毒；腺病毒；和疱疹病 毒，包括带状疱疹病毒和单纯性疱疹病毒；

-酵母和真菌感染，其中所述酵母和真菌对其宿主中的TNF-α下 调敏感或者引起TNF-α生成，例如真菌脑膜炎；特别是与所选的其它 药物联合使用来治疗系统酵母和真菌感染，包括但不限于多粘菌素， 例如多粘菌素B；咪唑类，例如克霉唑、益康唑、咪康唑、和酮康唑； 三唑类，例如氟康唑和itranazole；和两性霉素，例如两性霉素B和 脂质体两性霉素B。

-局部缺血再灌注损伤；自身免疫性糖尿病；视网膜自身免疫性； 慢性淋巴细胞性白血病；HIV感染；红斑狼疮；肾和输尿管疾病；泌尿 生殖器和胃肠道疾病；和前列腺疾病。

式(1.0.0)化合物可特别用于治疗(1)炎性疾病和病症，包括：关 节炎症、类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、炎性肠病、 溃疡性结肠炎、慢性肾小球性肾炎、皮炎、和局限性回肠炎；(2)呼 吸系统疾病和病症，包括：哮喘、急性呼吸窘迫综合征、慢性肺炎性 疾病、支气管炎、慢性堵塞性气道疾病、和矽肺；(3)感染性疾病和 病症，包括：脓毒病、脓毒性休克、内毒素性休克、格兰氏阴性脓毒 病、中毒性休克综合征，细菌、病毒或真菌感染引起的发热和肌痛、 和流感；(4)免疫疾病和病症，包括：自身免疫性糖尿病、全身性红 斑狼疮、移植物对宿主反应、同种移植物排斥、多发性硬化、牛皮癣、 和过敏性鼻炎；和(5)其它疾病和病症，包括：骨再吸收疾病；再灌 注损伤；感染或恶性肿瘤后继发的恶病质；人获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)、人免疫缺陷病毒(HIV)感染、或AIDS相关综合征(ARC)后继 发的恶病质；瘢痕疙瘩形成；瘢痕组织形成；1型糖尿病；和白血病。 发明详述 5.0化合物

本发明涉及一组新的化合物，所述化合物具有作为选择性PDE4抑 制剂的生物活性，并由此可用于治疗普遍和使人衰弱的疾病哮喘和慢 性堵塞性肺病。这组新的化合物由式(1.0.0)代表：

在上式(1.0.0)中，j是0或1，且k是0或1，j和k都是独立地 选取的。当j和k都是0时，所得本发明化合物是嘧啶，对于所述化 合物这是优选的构型。j或k可以是1或者j和k可以都是1，在这种 情况下所得化合物是氮氧化物(N-氧化物)形式。

式(1.0.0)化合物的另一特征是桥连基团W，其中W是-O-； -N(R3)-；或-S(＝O)t-，其中t是0、1或2，且R3是氢、(C1-C3)烷基、 (C1-C3)烷氧基、羟基、苯基、或苄基。W优选为-O-，并且当W是-S(＝O)t-时，t优选为2，这样形成了磺酰基桥连基团。

基团E构成了式(1.0.0)化合物的右手末端，并且是其整个结构的 重要方面。E优选为-H；-F；或-OH。

当RA和RB是-(C1-C6)烷基或-(C3-C7)环烷基时，所述烷基或环烷基 部分可被0-3个取代基R10取代。当RA和/或RB被R10取代时，R10的含 义定义为-OR12，其中R12是-H，所得-OH取代基的条件是：对于这个以 及所有其它适用的RA和RB的含义，定义取代基R10的所述-OH与作为E 含义(其中E是-OR12，且R12是-H)的相应-OH的位置关系不是邻位关 系。换句话说，当E是-OH，并且对于基团-[RA-C-RB]m-，当m是1， 且RA和/或RB被-OH取代时，则所得两个-OH取代基不可以连接在相邻 的碳原子上，即不可以是邻位关系。该条件适用于定义为-(C1-C6)烷 基、-(C3-C7)环烷基、或者一起形成式(1.1.0)的螺合基团的RA和RB。 作为苯基或苄基的RA和RB的含义不是落在上述条件内的适用含义。

对于在式(1.0.0)化合物左手侧的ZA基团，所述基团的含义之一定 义为饱和或不饱和环状或二环(C3-C9)杂环基，该杂环基选自：呋喃基； 噻吩基；吡咯基；噁唑基；异噁唑基；噻唑基；异噻唑基；吡唑基；噁 二唑基；噻二唑基；咪唑基；吡嗪基；嘧啶基；哒嗪基；三唑基；四 唑基；吲哚基；苯并[b]呋喃基；苯并噻吩基；1-H-吲唑基；苯并咪唑 基；苯并噁唑基；苯并异噁唑基；苯并噻唑基；喹啉基；异喹啉基；酞 嗪基；喹唑啉基；和喹喔啉基。应当注意到，在该组杂环基中没有提 及吡啶基。

在-(a)下面定义的所述杂环基的含义内没有包括“吡啶基”的原 因是由于吡啶基实施方案可包括在-(c)下面定义的ZA基团的含义 内，这使得在该优选亚属范围内可以有区别。因此，在ZA基团的-(a) 含义下面所提及的杂环基被0-3个R16取代；而在ZA基团的-(c)含义 下面，所述吡啶基被0-3个R4取代。

在ZA基团的-(a)含义下面，式(1.0.0)化合物的优选实施方案是 呋喃基；噻吩基；吡咯基；噁唑基；噻唑基；噁二唑基；噻二唑基；咪 唑基；嘧啶基；吲哚基；1-H-吲唑基；苯并咪唑基；苯并噁唑基；苯 并噻唑基；和喹啉基。

在已经依据本领域常用命名原则作出的杂环基的命名中，已特别 注意到结构异构体，即其中所包含的杂原子可占据环中的两个或更多 个不同位置的情况。某些结构异构体具有不同名称，例如其中-O-和- N-杂原子占据环的1，3和1，2位的噁唑基和异噁唑基。关于噻唑基和异 噻唑基的情形是类似的。然而，在其它情况下，不能采用有效的不同 命名来区分结构异构体。例如，噁二唑基可以是1，2，4-噁二唑基或 1，3，4-噁二唑基。本文所用术语“噁二唑基”是指1，2，4-噁二唑基或 1，3，4-噁二唑基，或者如果合适的话是指这两种基团。

苯并稠合型实施方案是这样的，其中ZA选自2，3-苯并呋喃基；2，3- 二氢苯并呋喃基；1，3-二氢异苯并呋喃基；苯并[b]噻吩基；吲哚基； 二氢吲哚基；异二氢吲哚基；2H-1-苯并吡喃基；4H-1-苯并吡喃基； 1H-2-苯并吡喃基；色满基；异色满基；喹啉基；异喹啉基；1，2，3，4- 四氢喹啉基；1，2，3，4-四氢异喹啉基；1，3-苯并二氧杂环戊烯基； 3H-2，1-苯并氧杂硫杂环戊烯基；苯并噁唑基；1，2-苯并异噁唑基；2，1- 苯并异噁唑基；1，2-苯并二硫杂环戊烯基；1，3-苯并二硫杂环戊烯基； 苯并噻唑基；1，2-苯并异噻唑基；苯并咪唑基；吲唑基；1，4-苯并二 氧杂环己烷基；4H-3，1-苯并噁嗪基；2H-1，4-苯并噁嗪基；1，4-苯并 噻嗪基；1，2-苯并噻嗪基；喹唑啉基；喹喔啉基；酞嗪基；噌啉基； 1，2，3-苯并噻二唑基；2H-1，2，4-苯并噻二嗪基；2H-1，2，4-苯并噁二 嗪基；苯并三嗪基；1，2，3-苯并三嗪基；1，2，4-苯并三嗪基；和苯并 四嗪基。

在本文的描述中，通常给出任何给定的结构异构体的全名，例如 “1，2，4-噁二唑基”。然而，有时并且通常是为了方便起见，可使用 一般术语例如“噁二唑”。应当理解，在这些情况下，所用的一般术语 例如“噁二唑”的含义包括所有可能的结构异构体形式，对于噁二唑， 包括“1，2，4-噁二唑”和“1，3，4-噁二唑”。

在所述ZA基团上的任选取代基R16选自-F；-Cl；-CN；-OR12；(C1-C4) 烷基；(C3-C7)环烷基；-CF3；-C(＝O)R12、-C(＝O)OR12；-NO2；-NR12R13； 羟基(C1-C4)烷基氨基；苯基；和苄基；其中R12和R13具有与上述定义 相同的含义；并且所述烷基、烷氧基或环烷基分别独立地为0-3个R18 取代。

在本发明的这些优选实施方案中，其中ZA基团被取代，但是只有 一个这样的取代基R16，并且R16是-F；-Cl；-CH3；-OCH3；-CH(CH3)2； -CN；-NO2；-C(＝O)R12；-C(＝O)OR12；-环丙基；或-NH2；其中R12是-CH3； -CH2CH3；-CH2CH2CH3；-CH(CH3)2；或-C(CH3)3。对于涉及如上所述的R16 的这些优选的实施方案，甲基、异丙基、甲氧基、和环丙基可被R18进 一步取代，R18优选为独立地选自-F；-CF3；和-NH2的一个取代基。

依据ZA的-(c)含义的其它优选的式(1.0.0)化合物的实施方案包 含苯基或吡啶基。

如本文描述本发明化合物以及与本发明化合物相关的其它式和部 分式所用的那样，当其一个或多个氮原子部分由N[ (0)]代表时，其 包含所述氮原子的任选氮的氧化物形式。当有一个以上的这样的氮的 氧化物形式时，它们是彼此独立地选取的。此外，应当理解，所述氮 的氧化物形式还可以由“N→(O)j”或“N→(O)k”代表，其中j和k 是0或1，正象它们在式(1.0.0)中一样。

当ZA基团是苯基或吡啶基时，其可以被0-3个R4取代。应当理解， 取代基R4仅连接在有效的碳原子上，并且实际上R4是任选的取代基， 但是同时可存在最高达3个这样的取代基。

除了别的之外，R4具有选自下列的含义：-F；-Cl；-CN；-OR12； -S(＝O)pR12：-C(＝O)R12；-C(＝O)OR12；-OC(＝O)R12；-NO2；-C(＝O)NR12R13； -0C(＝O)NR12R13；-NR12R13；-NR14C(＝O)R12；-NR14C(＝O)OR12； -NR14S(＝O)pR12：和-S(＝O)pNR12R13；其中p是0、1、或2；且R12和R13 具有与上述定义相同的含义。R14选自-H；-CH3；-CH2CH3；异丙基；和 叔丁基。

在式(1.0.0)化合物的优选实施方案中，有一个或两个R4取代基， 并且R4优选为-F；-Cl；-CN；-NO2；-OCH3；-C(＝O)CH3；-C(＝O)NH2； -N(CH3)2；或-NHS(＝O)2CH3。

在本发明化合物的其它优选实施方案中，其中ZA是苯基的在相邻 碳原子上的两个R4取代基与它们所连接的碳原子以及它们是其一部分 的苯环一起形成苯并稠合的杂环基。应当理解，在定义R4的苯并稠合 杂环基的命名中，两个R4取代基连接在其上面相邻碳原子上的定义Z′ 的苯环作为整个基团的苯并稠合部分包括在该命名中。因此，在本发 明这些实施方案中定义R4以及在所述实施方案中还最终定义ZA的苯并 稠合杂环基包括选自下列的杂环基： 2，3-苯并呋喃基       2，3-二基氢苯并        1，3-二氢异苯并        苯并[b]噻吩基

                      呋喃基                  呋喃基 吲哚基                  二氢吲哚基             异二氢吲哚基         2H-1-苯并吡喃基 4H-1-苯半吡喃基        1H-2-苯并吡喃基            色满基               异色满基  喹啉基                    异喹啉基            1，2，3，4-四氢       1，2，3，4-四氢异

                                              喹啉基                喹啉基 1，3-苯并二氧杂环      3H-2，1-苯并氧杂          苯并噁唑基         1，2-苯并异噁唑基   戊烯基                 硫杂环戊烯基  2，1-苯并异噁唑基      1，2-苯并二硫杂环      1，3-苯并二硫杂环        苯并噻唑基

                        戊烯基                戊烯基   1，2-苯并异噻唑基        苯并咪唑基            吲唑基              1，4-苯并二氧杂环

                                                                     己烷基 4H-3，1-苯并噁嗪基  2H-1，4-苯并噁嗪基    1，4-苯并噻嗪基            1，2-苯并噻嗪基 喹唑啉基                  喹喔啉基             酞嗪基                  噌啉基 1，2，3-苯并噻二唑基  2H-1，2，4-苯并      2H-1，2，4-苯并            苯并噁三嗪基

                      噻二嗪基             噁二嗪基 1，2，3-苯并三嗪基    1，2，4-苯并三嗪基       苯并四嗪基 其中“*”是指出在式(1.0.0)化合物的剩余部分中涉及W的该基团的 连接点的符号；且R9和R16具有与上述定义相同的含义。所代表的这些 基团形成了式(1.0.0)化合物的优选实施方案的一部分。

在其中R4是苯并稠合杂环基的本发明实施方案中，R4以及由此ZA 具有吲哚基；喹啉基；1，3-苯并二氧杂环戊烯基；苯并噁唑基；1，3- 苯并二硫杂环戊烯基；苯并噻唑基；苯并咪唑基；和1，4-苯并二氧杂 环己烷基的含义。

式(1.0.0)中的其余取代基是R7和R8，它们独立地为-H；-F；-Cl； -OR12；(C1-C4)烷基；羟基(C1-C4)烷基；-CF3；-C(＝O)OR12；-NR12R13； 羟基(C1-C4)烷基氨基；苯基；苄基；或选自下列的杂环基：吡咯基； 噁唑基；噻唑基；噁二唑基；噻二唑基；咪唑基；吡啶基；四唑基；吲 哚基；和苯并咪唑基；其中所述苯基、苄基、或杂环基分别独立地被0 -2个取代基R10取代，其中R10具有与上述定义相同的含义。

在式(1.0.0)化合物的优选实施方案中，R7和R8是-H；-CH3；-OCH3； -CF3；或-NH2。

本文所用表达用语“-(C1-C2)烷基”、“-(C1-C3)烷基”、“-(C1-C4) 烷基”、和“-(C1-C6)烷基”及其等同变型包括这些脂族基团的支链和 直链构象。因此，上述表达用语除了包括直链基团甲基、乙基、正丙 基、正丁基、正戊基、和正己基以外，还包括支链基团异丙基、异丁 基、仲丁基、叔丁基、异戊烷(2-甲基丁烷)、2-甲基戊烷、3-甲基戊 烷、1-乙基丙烷、和1-乙基丁烷。上述表达用语的含义也适用于无论 它们是否被取代的所述用语。因此，表达用语“氟代的(C1-C3)烷基” 包括正丙基和异丙基脂族基团的各种氟代基团。

本文所用表达用语“-(C1-C2)烷基”和“-(C1-C4)烷基”及其等同 变型包括其中“烷基”如上所定义的O-烷基。

式(1.0.0)化合物可具有手性中心，并因此以不同的对映体形式存 在。本发明涉及式(1.0.0)化合物的所有光学异构体和立体异构体，以 及所述光学异构体和立体异构体的外消旋和非外消旋混合物。

优选的式(1.0.0)化合物包括定义如下的那些：其中m是0或1； n是1；j和k是0或1；R1是-H、-F、或-Cl；R2是-H、-F、或-Cl； R3是-H；RA和RB当中一个是-CH3，另一个是-H或-CH3；RC或RD之一是 -H，另一个是-H或-CH3；ZB是苯基、吡啶基、环戊基、环己基、呋喃 基、噻吩基、噻唑基、二氢吲哚-2-酮基、或吡嗪基；E是-H、-OR12； -NR12R13、-NHS(＝O)2CH3、或-S(＝O)2NH2；ZA是未取代的吡啶基、或被R4 取代的苯基，其中存在两个R4取代基，并且其是-F或-Cl，或者存在 一个R4取代基，并且其是-F、-Cl、-CN、-NO2、-NH2、-CF3、-SCH3、 -OCH3、-OCH2CH3、-C(＝O)CH3、或-C(＝O)OCH3；或者ZA是苯基，其中两 个R4与它们所连接的碳原子以及它们是其一部分的苯环一起形成1，3- 苯并二氧杂环戊烯基、2，3-二氢苯并呋喃基、二氢吲哚基、色满基、 1，3-苯并二硫杂环戊烯基、或1，4-苯并二氧杂环己烷基。

其它优选的式(1.0.0)化合物是定义如下的那些：其中m是0；n 是1；j是0；k是0；R1是-H、-F、或-Cl；R2是-H、-F、Cl、或-CH3； R3是-H；RC是-H；RD是-H或-CH3；ZB是苯基、环戊基、环己基、呋喃 基、噻吩基、噻唑基、噁唑基、二氢吲哚-2-酮基、吡啶基、或吡嗪基， E是-H、-OCH3、-OH、-CH(OH)CH3、-C(OH)(CH3)2、-OC(＝O)R12、 -NHS(＝O)2CH3、-S(＝O)2NH2、或-N(CH3)2；ZA是苯基或吡啶基，其中存在 两个R4取代基，并且其是-F或-Cl，或者存在一个R4取代基，并且其 是-F、-Cl、-CN、-NO2、-NH2、-CF3、-SCH3、-OCH3、-OCH2CH3、-C(＝O)CH3、 或-C(＝O)OCH3；或者ZA是苯基，其中两个R4与它们所连接的碳原子以 及它们是其一部分的苯环一起形成1，3-苯并二氧杂环戊烯基。

其它优选的式(1.0.0)化合物是定义如下的那些：其中m是0；n 是1；j是0；k是0；R1是-H；R2是-H、-F、-Cl、或-CH3；R3是-H； RC是-H；RD是-H或-CH3；ZB是苯基、呋喃基、或噻吩基；E是-OCH3、 -OH、-CH(OH)CH3、或-C(OH)(CH3)2；ZA是苯基或吡啶基，其中存在两 个R4取代基，并且其是-F或-Cl，或者存在一个R4取代基，并且其是 -F、-Cl、-CN、-OCH3、或-NO2；或者ZA是苯基，其中两个R4与它们所 连接的碳原子以及它们是其一部分的苯环一起形成1，3-苯并二氧杂环 戊烯基。

通过名称提及和通过结构式说明、并且确定为式(6.0.1)- (6.0.52)的式(1.0.0)化合物的特别实施方案如下表1所示：

                       表1 发明详述 6.0制备式(1.0.0)化合物的方法

-下述合成方案(10.1.0)中显示了制备式(1.0.0)化合物左侧部 分的方法，其中R7、R8、和ZA具有与上述定义相同的含义。最终产物 如式(2.0.5)所示。

                    合成方案(10.1.0)

在合成方案(10.1.0)的反应1中，通过在亚硫酰氯存在下将 (2.0.0)与乙醇反应来将式(2.0.0)5-羧基-6-氯-嘧啶化合物转化成 式(2.0.1)相应的乙酯嘧啶化合物。将该反应混合物加热回流约1-约 3小时、优选约1.5小时。

在合成方案(10.1.0)的反应2中，通过在氢化钠或碳酸铯和极性 非质子传递溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)存在下将(2.0.1)与式ZA-OH 化合物反应来将式(2.0.1)乙基酯6-氯-嘧啶化合物转化成式(2.0.2) 相应的乙酯化合物。该反应在约60℃-约150℃、优选约80℃-100 ℃温度下进行约10小时-约24小时、优选约18小时。

在合成方案(10.1.0)的反应3中，通过在乙醇溶剂中将(2.0.2) 与氢氧化钠反应来将式(2.0.2)乙基酯嘧啶化合物转化成式(2.0.3)相 应的5-羧基-嘧啶化合物。将该反应混合物加热回流约3-约5小时、 优选约4小时。

在合成方案(10.1.0)的反应4中，将在上一合成步骤中制得的、 构成式(1.0.0)化合物左侧部分的式(2.0.3)5-羧基-嘧啶化合物与构 成式(1.0.0)化合物右侧部分的式(2.0.4)胺反应。该化合物呈胺的形 式，并且形成了连接式(1.0.0)化合物两半的酰胺键。该反应是用偶联 剂1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与1-羟基苯并三 唑水合物的混合物进行的。也可以使用其它偶联剂例如二环己基碳二 亚胺(DCCI)、N，N′-羰基二咪唑、和苯并三唑-1-基二乙基磷酸酯。

该偶联反应在非质子传递极性溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺 (DMF)；二氯甲烷；四氢呋喃(THF)；乙腈；或N-甲基吡咯烷酮(NMP) 中进行。无水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)是优选的。该反应在室温-稍 微高于室温的温度下进行8-30小时、通常10-24小时、更通常18 小时。

在下面的合成方案(10.2.0)中，在合成方案(10.1.0)中以一般术 语描述的合成方法是关于特定原料、中间体、和特定终产物4-(苯并 [1，3]二氧杂环戊烯-5-基氧基)-嘧啶-5-甲酸2-氟-4-(1-羟基-1-甲 基乙基)苄基酰胺进行的。

                   合成方案(10.2.0)

在合成方案(10.2.0)的反应1中，将式(3.0.0)4-氯-5-乙氧羰 基-嘧啶在二甲基甲酰胺(DMF)中与式(3.0.1)3，4-亚甲二氧基苯酚在 碳酸铯或氢化钠存在下反应，以生成式(3.0.2)亚甲二氧基苯氧基-嘧 啶。将包含(3.0.0)和(3.0.1)的该反应混合物在80℃-100℃、优选 90℃温度下加热1小时-24小时、优选18小时。

在合成方案(10.2.0)的反应2中，通过下述方法将式(3.0.2)5- 乙氧羰基-4-亚甲二氧基苯氧基嘧啶转化成式(3.0.3)相应的5-羧基- 4-亚甲二氧基苯氧基-嘧啶：在四氢呋喃(THF)和水中用氢氧化锂将 (3.0.2)于室温处理1小时-48小时、优选18小时。然后用3N盐酸 将该反应混合物酸化至pH为1.5-2.5、优选2.0。

在合成方案(10.2.0)的反应3中，将在无水二氯甲烷或N，N-二甲 基甲酰胺中的式(3.0.3)5-羧基-嘧啶与酰胺偶联剂1-[3-(二甲基氨 基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、1-羟基苯并三唑水合物、和N，N- 二异丙基乙胺或三乙胺于室温混合15-45分钟、优选30分钟；然后 在室温将其与式(3.0.4)4-氨基甲基-羟基丙基-苯反应12-24小时、 优选18小时。由此形成的产物是式(3.0.5)化合物，这是本发明化合 物。 发明详述 7.0可药用盐和其它形式

上述本发明化合物可以以其最终的非盐形式使用。另一方面，使 用依据本领域众所周知的方法由多种有机和无机酸和碱制得的可药用 盐形式的这些化合物也在本发明范围内。

式(1.0.0)化合物的可药用盐形式在大多数情况下是通过常规方 法制得的。当式(1.0.0)化合物含有羧酸基团时，其合适的盐可通过将 该化合物与适当的碱反应以提供相应的碱加成盐来形成。这样的碱的 实例有碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氢氧化钠、和氢氧化锂；碱 土金属氢氧化物例如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属醇化物例如乙醇钾 和丙醇钠；和多种不同的有机碱例如哌啶、二乙醇胺、和N-甲基谷氨 酰胺。还包括式(1.0.0)化合物的铝盐。

对于一些式(1.0.0)化合物，可通过用可药用有机和无机酸处理所 述化合物来形成酸加成盐，例如氢卤酸盐如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘 酸盐；其它无机酸及其相应的盐例如硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等；和 烷基磺酸盐以及一芳基磺酸盐例如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐、和苯磺酸 盐；以及其它有机酸及其相应的盐例如乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、 琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。

因此，式(1.0.0)化合物的可药用酸加成盐包括但不限于：乙酸 盐、己二酸盐、藻酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸 盐(苯磺酸盐)、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、 樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯化物、氯苯甲酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸 盐、二葡萄糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、 乙磺酸盐、富马酸盐、半乳糖二酸盐(由粘酸制得)、半乳糖醛酸盐、 葡萄庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、 半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸 盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、 乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、 甲磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸 盐、草酸盐、油酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、3- 苯基丙酸盐、磷酸盐、膦酸盐、邻苯二甲酸盐。

此外，本发明化合物的碱加成盐包括但不限于铝盐、铵盐、钙盐、 铜盐、三价铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、三价锰盐、二价锰盐、钾盐、 钠盐、和锌盐。在上述盐当中，优选的是铵盐；碱金属盐钠盐和钾盐； 和碱土金属盐钙盐和镁盐。得自可药用有机无毒碱的式(1.0.0)化合物 的盐包括但不限于下列有机碱的盐：伯胺、仲胺、和叔胺，取代的胺， 包括天然取代的胺，环状胺，和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜 菜碱、咖啡因、氯普鲁卡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二胺(苯乍生)、二 环己基胺、二乙醇胺、二乙基胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基 乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡 萄糖、组氨酸、哈胺、异丙基胺、利多卡因、赖氨酸、葡甲胺、N-甲 基-D-葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可 碱、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺、和三(羟基甲基)甲基胺(氨 丁三醇)。

包含碱性含氮基团的本发明化合物可用诸如下列的试剂季铵化： (C1-C4)烷基卤化物，例如甲基、乙基、异丙基和叔丁基氯化物、溴化 物和碘化物；二(C1-C4)烷基硫酸酯，例如二甲基、二乙基和二戊基硫 酸酯；(C10-C18)烷基卤化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基 和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；和芳基-(C1-C4)烷基卤化物，例如 苄基氯和苯乙基溴。这样的盐使得能够制得既具水溶性又具油溶性的 本发明化合物。

在上述可药用盐当中，优选的盐包括但不限于乙酸盐、苯磺酸盐、 柠檬酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、半琥珀酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、 氢溴酸盐、羟乙基磺酸盐、扁桃酸盐、葡甲胺盐、硝酸盐、油酸盐、 膦酸盐、新戊酸盐、磷酸钠盐、硬脂酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、 酒石酸盐、硫羟苹果酸盐、甲苯磺酸盐、和氨丁三醇盐。

式(1.0.0)的碱性化合物的酸加成盐是通过以常规方法将游离碱 形式与足量的所需酸接触以形成盐而制得的。游离碱可通过以常规方 法将盐形式与碱接触、并分离出游离碱来再生。游离碱形式在一些物 理性质例如在极性溶剂中的溶解度方面与其各自的盐形式略有不同， 但是对于本发明目的，盐与其各自的游离碱形式是等同的。

如上所述，式(1.0.0)化合物的可药用碱加成盐是与金属或胺例如 碱金属和碱土金属或有机胺形成的。优选的金属是钠、钾、镁、和钙。 优选的有机胺是N，N′-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、 乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺、和普鲁卡因。

本发明酸性化合物的碱加成盐是通过以常规方法将游离酸形式与 足量的所需碱接触以生成盐而制得的。游离酸形式可通过以常规方法 将盐形式与酸接触、并分离出游离酸形式来再生。游离酸形式在一些 物理性质例如在极性溶剂中的溶解度方面与其各自的盐形式略有不 同，但是对于本发明目的，盐与其各自的游离酸形式是等同的。

当本发明化合物包含一个以上能形成这样的可药用盐的基团时， 多盐形式包括在本发明范围内。一般的多盐形式的实例包括但不限于 二酒石酸盐、二乙酸盐、二富马酸盐、二葡甲胺盐、二磷酸盐、二钠 盐、和三盐酸盐。

通过上文的描述可以看出，本文所用的表达用语“可药用盐”是 指包含式(1.0.0)化合物的以其盐形式使用的活性组分，尤其是与游离 形式的所述活性组分或以前使用的所述活性组分的某些盐形式相比， 所述盐形式给所述活性组分带来了改进的药动学特征。所述活性组分 的可药用盐形式还可以给所述活性组分带来先前不具有的所需药动学 特征，并且甚至可以明确地影响所述活性组分在其体内治疗活性方面 的药效学特征。

可有利地受影响的所述活性组分的药动学特征包括例如所述活性 组分越过细胞膜运输所采用的方式，而这种方式可直接明确地影响所 述活性组分的吸收、分配、生物转化和排泄。虽然药物组合物的给药 途径很重要，但是各种解剖学上的、生理学上的和病理学上的因素可 显著影响生物利用度，所述活性组分的溶解度通常取决于其所采用的 特定盐形式的性质。此外，本领域技术人员应当理解，所述活性组分 的水溶液将使活性组分最快地吸收到所治疗的患者体内，而脂质溶液 和悬浮液以及固体剂型将使所述活性组分的吸收较慢。

出于安全性、方便、和经济方面的原因，口服摄取式(1.0.0)活性 组分是最优选的给药途径，但是这样的口服剂型的吸收可受到下列不 利影响：物理特征例如极性的影响，胃肠道粘膜刺激所引起的呕吐， 消化酶和低pH的破坏作用，在食物或其它药物存在下的不规则吸收或 推进，和被粘膜、肠内菌丛、或肝脏的酶代谢。将所述活性组分配制 成不同的可药用盐形式可有效地克服或减轻口服剂型的吸收所遇到的 一个或多个上述问题。

依据本文所述方法制得的式(1.0.0)化合物可从反应混合物中分 离出来，其中在反应混合物中，产物最终是通过有机化合物制备领域 的化学技术人员已知的任何常规方法生成的。一旦分离出来，即可通 过已知方法纯化所述化合物。有多种不同的方法和技术可用作分离和 纯化的手段，并包括例如蒸馏；重结晶；柱色谱法；离子交换色谱法； 凝胶色谱法；亲和色谱法；制备薄层色谱法；和溶剂萃取法。 7.1立体异构体

在式(1.0.0)范围内的化合物可以是这样的，其构成原子能够以两 种或更多种方式进行空间排列，尽管具有相同的连接性。结果是所述 化合物以立体异构体的形式存在。顺式-反式异构是一种类型立体异构 现象。当立体异构体彼此是不可重叠的镜像时，它们是对映体，由于 在其构成结构中存在一个或多个不对称碳原子，它们具有手性或手型 性。对映体具有旋光性，并且由于它们旋转等量但是相反方向的偏振 光平面，它们可区别得出来。

当式(1.0.0)化合物中存在两个或更多个不对称碳原子时，在每个 所述碳原子上有两个可能的构型。例如，当存在两个不对称碳原子时， 就有4种可能的立体异构体。此外，这4种可能的立体异构体可排列 成彼此不同的6对立体异构体。对于具有一个以上不对称碳的是对映 体的一对分子，它们必须在每个不对称碳上具有不同构型。不是作为 对映体而相关的分子对具有称为非对映体关系的不同的立体化学关 系。不是对映体的立体异构体称为非对映异构体，或更通常称为非对 映体。

式(1.0.0)化合物的所有这些众所周知的立体化学方面都是本发 明一部分。因此本发明的范围内包括式(1.0.0)化合物的立体异构体、 和其为对映体时的、各个对映体、所述对映体的外消旋混合物，和人 工的、即制造的含有一定比例的所述对映体的混合物，所述对映体比 例不同于在外消旋混合物中发现的所述对映体比例。当式(1.0.0)化合 物包含是非对映体的立体异构体时，单独的非对映体以及任意比例的 任何两种或多种所述非对映体的混合物包括在所述化合物的范围内。

例如，当式(1.0.0)化合物中有一个不对称碳原子时，其存在(-)(R) 和(+)(S)对映体；具有治疗活性并且可用于治疗或预防本文所述的疾 病和病症的所有可药用盐形式、其前药和代谢物都包括在所述化合物 的范围内。当式(1.0.0)化合物以(-)(R)和(+)(S)对映体形式存在 时，如果所有、基本上所有、或主要的治疗活性仅存在于一种所述对 映体中，和/或不需要的副作用仅存在于一种所述对映体中，则单独的 (+)(S)对映体、或单独的(-)(R)对映体也包括在所述所述化合物的范 围内。当两种对映体的生物活性基本上没有任何差异时，作为外消旋 混合物或者作为以其任何适当比例的非外消旋混合物一起存在的 (+)(S)对映体和(-)(R)对映体也包括在所述式(1.0.0)化合物范围 内。

例如，式(1.0.0)化合物的一对或一组对映体的特定生物活性和/ 或物理和化学性质可促使人们使用以一定比例组成最终治疗产品的所 述对映体。例如，当有一对对映体时，它们可以以例如下列比例使用： 90％(R)-10％(S)、80％(R)-20％(S)、70％(R)-30％(S)、60％(R) -40％(S)、50％(R)-50％(S)、40％(R)-60％(S)、30％(R)-70 ％(S)、20％(R)-80％(S)、和10％(R)-90％(S)。评价式(1.0.0) 化合物的不同对映体的性质以后，可以以简单的方式确定组成最终治 疗产品的具有一些所需性质的一种或多种所述对映体的量的比例。 7.2 同位素

式(1.0.0)化合物的同位素标记形式也包括在其范围内。同位素标 记形式的式(1.0.0)化合物与所述化合物相同，除了所述化合物的一个 或多个原子已被原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的所述 原子的原子质量或质量数的一个或多个原子代替。易于商购获得并且 可依据良好确定的方法掺入到式(1.0.0)化合物内的同位素的实例分 别包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如2H、3H、13C、14C、 15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F、和36Cl。含有一个或多个上述同位素 和/或其它原子的其它同位素的式(1.0.0)化合物、其前药、或其可药 用盐包括在本发明范围内。

同位素标记的式(1.0.0)化合物可用于很多有益方面。例如，同位 素标记的式(1.0.0)化合物，例如已掺入放射性同位素如3H或14C的式 (1.0.0)化合物可用于药物和/或底物组织分布测定。这些放射性同位 素，即氚3H和碳-1414C由于易于制备和具有显著的可检测性而是特别 特别优选的。将较重的同位素例如氘2H掺入到式(1.0.0)化合物内将 提供基于所述同位素标记的化合物具有更强代谢稳定性的治疗优点。 更强的代谢稳定性可直接理解为延长的体内半衰期或降低的剂量需 求，这在大多数情况下将构成本发明优选的实施方案。同位素标记的 式(1.0.0)化合物通常可按照在本文合成方案和相关描述、实施例和制 备中公开的方法，通过用易于获得的同位素标记试剂代替其相应的非 同位素标记试剂来制得。

还可以将氘2H掺入到式(1.0.0)化合物内以通过一级动力同位素 效应来操纵所述化合物的氧化代谢。一级动力同位素效应是由于同位 素原子核的取代所导致的化学反应速度改变，而同位素原子核的取代 是由于所述同位素取代后形成共价键所需的基态能量改变所引起的。 较重同位素的取代通常将导致化学键的基态能量降低，由此引起限速 性键断裂步骤的速度降低。在多产物反应的配位过程中，如果键断裂 在鞍点区域或接近鞍点区域发生，则产物分配率可显著改变。例如， 当氘在不可交换的位点与碳原子结合时，kM/kD的速度差异一般＝2- 7。成功施加给式(1.0.0)氧化不稳定化合物的这种速度差异可显著影 响所述化合物的体内性质，并带来改进的药动学特征。

在治疗剂的发现和开发过程中，本领域技术人员努力将药动学参 数最优化，同时保持所需的体外性质。合理的推测是，药动学性质不 佳的许多化合物是由于对氧化代谢不稳定所致。现在可采用的体外肝 微粒体测定提供了关于该氧化代谢过程的有价值信息，这使得能合理 地设计具有改善的稳定性、能抗这样的氧化代谢的氘化的式(1.0.0) 化合物。由此显著地改善了式(1.0.0)化合物的药动学性质，并且可以 以体内半衰期(t/2)、在最大疗效的浓度(Cmax)、和剂量反应曲线下面 积(AUC)、以及F的增加；和清除率、剂量、和成本下降定量表示。

为了举例说明上述内容，制备具有多个可能氧化代谢位点例如苄 型氢原子和连在氮原子上的氢原子α的式(1.0.0)化合物，作为一系列 其中不同氢原子组合被氘原子代替以使得一些、大部分或所有氢原子 被氘原子代替的类似物。测定半衰期以方便且精确地确定抗氧化代谢 的程度。通过该方法测得，用氘代替氢可使得母化合物的半衰期延长 了高达100％。

在式(1.0.0)化合物中用氘代替氢还可用于通过减少或消除不需 要的毒性代谢物来使母化合物的代谢特性发生有利改变。例如，当由 于氧化性碳-氢C-H键断裂而导致形成毒性代谢物时，可合理地预计氘 化类似物能大大地减少或消除不需要的代谢物生成，甚至当特定的氧 化不是决定速度的步骤时也是如此。

关于氘代替氢的现有技术的其它信息可参见例如Hanzlik等人，J. Org.Chem.55 3992-3997，1990；Reider等人，J.Org.Chem.52 3326-3334，1987；Foster，Adv.Drug Res.141-40，1985；Gillette 等人，Biochemistry 33(10)2927-2937，1994；和Jarman等人， Carcinogenesis 16(4)683-688，1993。 发明详述 8.0 治疗应用和临床终点

下面的描述涉及式(1.0.0)化合物的治疗应用，以及与这样的治疗 应用有关的临床终点的适用解释。下文还描述了能够提供足以确定和 证实式(1.0.0)化合物治疗用途的数据的多种体内测定和动物模型实 验。

式(1.0.0)化合物的治疗用途适用于患有本文所提出的疾病或病 症并因此需要这样的治疗的患者或个体。无论是施用给动物还是人， 有益结果是治疗性的。本文所用术语“动物”仅是为了指出与其它动 物相对的人类。式(1.0.0)化合物具有治疗哺乳动物、特别是人的治疗 应用。所有主要亚门的哺乳动物(哺乳类动物)都包括在关于本文所述 治疗受者的本发明范围内。哺乳动物是指从宠物到人，并因此可以是 治疗个体。这尤其适用于犬科和猫科哺乳动物。其它哺乳动物是驯养 动物，并且从如果不治疗本文所述疾病和病症所带来的不利经济影响 的角度来看，依据本发明对其进行治疗是有可能的。这尤其适用于马 类、牛类、猪类和羊类哺乳动物。

式(1.0.0)化合物抑制PDE4同工酶，并因此具有如下文所述的广 泛治疗应用，这是因为PDE4族同工酶在所有哺乳动物的生理中起重要 作用。PDE4同工酶所具有的酶作用是在细胞内水解粗炎性白细胞内的 腺苷3′，5′-一磷酸酯(cAMP)。cAMP负责调节体内多种激素的作用，并 且结果是PDE4抑制在多种生理过程中起重要作用。现有技术中有大量 描述PDE抑制剂对多种炎性细胞反应的作用的文献，这些作用除了增 加cAMP以外，还包括抑制嗜酸细胞、嗜中性白细胞和单核细胞中的超 氧化物生成、脱粒、趋化性、和肿瘤坏死因子(TNF)释放。

PDE4首先是在1985年鉴定的，Nemoz等人，Biochem.Pharmacol. 34 2997-3000，1985，并且早先在CNS适应症例如抑郁症的临床试验 中研究了PDE4抑制剂环戊苯吡酮和旦布茶碱。之后确定了PDE4是炎 性白细胞中的主要磷酸二酯酶。如同其mRNA的存在所确定的那样， PDE4的4种亚型，即PDE4A、PDE4B、PDE4C、和PDE4D广泛分布在人 组织中。PDE4D在肾、胸腺、小肠、和结肠组织中表达，并在脑、肺、 骨骼肌、前列腺、和外周血液白细胞(PBL)组织中有强表达。其在心脏、 胎盘、肝脏、胰腺、脾脏、睾丸、和卵巢组织中仅有弱表达。PDE4A 和PDE4B也在脑和骨骼肌组织中有强表达，并且在胎盘、肝脏和卵巢 组织中仅有弱表达。PDE4C在骨骼肌组织中也有强表达，并且还在卵巢 组织中有弱表达。PDE4C在大多数上述组织中通常不能检测出。

PDE4族同工酶是在涉及慢性炎性疾病的细胞类型中发现的磷酸二 酯酶的主要形式，并且在骨髓衍生细胞类型当中，只有血小板不表达 PDE。PDE4是免疫和炎性细胞中的主要cAMP-代谢酶，并且是气道平滑 肌中的两种主要cAMP-代谢酶中的一种。PDE4仅存在于嗜中性白细 胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、和单核细胞中，还已经证实了在巨噬细胞 中的PDE3和PDE1活性以及在T淋巴细胞中的PDE7活性。迄今为止已 经使用体外实验证实了PDE抑制剂的有益抗炎作用，已确定了这样的 化合物抑制人单核细胞、嗜酸细胞、和嗜中性白细胞中的超氧化物生 成；嗜碱细胞、巨噬细胞、和嗜中性白细胞中的调质释放；和单核细 胞与巨噬细胞中的TNF-α释放。PDE抑制剂还抑制炎性细胞中的调质释 放，如单核细胞和单核细胞衍生的巨噬细胞、肺肥大细胞、T淋巴细胞、 B淋巴细胞、肺泡巨噬细胞、和嗜酸细胞。

迄今为止还在体内观察到了有益的抗炎作用，包括抑制微血管渗 漏到致敏豚鼠的肺内，减少反复抗原攻击后cynomolgus猴子中的支气 管过高反应性和嗜酸粒细胞增多。迄今为止还证实了PDE4抑制剂有力 地抑制了从单核噬吞细胞释放TNF-α。 8.1 哮喘

可用在式(1.0.0)化合物范围内的PDE4抑制剂治疗的一种最重要 的呼吸系统疾病是哮喘，这是一种慢性、不断增多的全世界范围内的 常见病症，并且特征是间歇可逆的气道堵塞、气道反应性过强和炎性。 哮喘的原因仍然有待确定，但是哮喘的最常见病理表现是气道炎症， 即使在轻度哮喘患者中气道炎症也可能很显著。根据支气管活组织检 查和灌洗研究，已经清楚地表明，哮喘涉及肥大细胞、嗜酸细胞、和 T-淋巴细胞渗透到患者气道内。特应性哮喘患者的支气管小泡灌洗 (BAL)显示出白介素(IL)-3、IL-4、IL-5和意味着存在T-辅助细胞2 (Th-2)样T-细胞群体的粒细胞/巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)的 激活。

式(1.0.0)化合物抑制人嗜酸细胞中的PDE4，并因此可用于治疗 特应性和非特应性哮喘。术语“特应性”是指发展成抗常见环境抗原 的I型(即时型)过敏反应的遗传倾向。最常见的临床表现是过敏性鼻 炎，而支气管哮喘、特应性皮炎、和食物过敏反应则较少发生。因此， 本文所用术语“特应性哮喘”与“过敏性哮喘”是同义词，即在致敏 人体中是过敏表现的支气管哮喘。本文所用术语“非特应性哮喘”是 指所有其它哮喘，尤其是特发性哮喘或“真”哮喘，这种哮喘是由多 种因素，包括剧烈锻炼、刺激性颗粒、心理紧张等引起的。

确认了式(1.0.0)化合物治疗特应性哮喘或非特应性哮喘的应 用，并且通过下文描述的PDE抑制模型、嗜酸细胞激活模型、和支气 管扩张模型证实了该应用。

PDE同工酶抑制-通过人PDE抑制测定来证实式(1.0.0)化合物选 择性地抑制PDE4的能力。在该测定中，所有同工酶制备物都是得自人 来源。PDE3和PDE4制备物是通过利用血小板中的PDE3同工酶显性基 因和嗜中性白细胞中的PDE4同工酶获得的。使用下列技术。收集柠檬 酸化的人血液，并通过葡聚糖沉积作用、密度梯度离心、和红细胞低 渗溶解作用来分离嗜中性白细胞。将得自相同来源的人血小板用PBS (NaCl 140mM，KCl 2.7mM，KH2PO4 1.5mM，Na2HPO4，8.1mM，pH 7.4)洗涤。将嗜中性白细胞和血小板悬浮在含有下列蛋白酶抑制剂的 10ml缓冲液(0.24M蔗糖，1mM EDTA，1mM二硫苏糖醇，10mM tris HCI，pH 7.4)中：5μl/ml苯基甲基磺酰氟(7mg/ml 2-丙醇溶液)、 1μl/ml亮抑蛋白酶肽和抑胃酶肽A(分别是1mg/ml乙醇溶液)。在 4℃超声15秒后，将均化物离心(2200g)。将离心团重悬在10ml缓 冲液中，并重复超声操作。将汇集的上清液在-20℃贮存。

按照现有技术中描述的色谱法将其它同工酶部分纯化，其中PDE1 和PDE5是得自人肺，PDE2得自人血小板。如下所述测定PDE活性： 在或不在不同浓度的式(1.0.0)测试物存在下，使用Thompson等人在 Nucleotide Res.，10 69-92，1979中描述的离子交换柱法；用1μM [3H]-环AMP作为底物(PDE3和PDE4)，或使用0.5μM钙、0.125μM 钙调蛋白和1.0μM[3H]-环AMP(PDE1)，或100μM[3H]-环AMP (PDE2)、或1.0μM[3H]-环GMP(PDE5)作为底物。

在该测试方法中，式(1.0.0)化合物主要抑制PDE4同工酶，对 PDE1、PDE2、PDE3、和PDE5具有较小的抑制作用。

式(1.0.0)化合物的选择性PDE4抑制活性还可以按照本领域已知 方法使用一组5种不同的PDE同工酶来确定。用作不同同工酶来源的 组织可包括下列：PDE1B-猪主动脉；PDE1C-豚鼠心脏；PDE3-豚鼠 心脏；PDE4-人单核细胞；和PDE5-犬小气管。使用常规色谱技术将 PDEs 1B、1C、3、和5部分纯化；Torphy和Cieslinski，Mol.Pharmacol. 37 206-214，1990。通过顺序使用阴离子交换色谱和肝素-琼脂糖色 谱将PDE4纯化至动力学纯度；Torphy等人，J.Biol.Chem.267 1798-1804，1992。使用在上述文献中描述的Torphy和Cieslinski 的方法测定PDE活性。

通过使用U-937细胞—一种据表明含有大量PDE4的人单核细胞 系，可以评价式(1.0.0)PDE4抑制化合物增加完整组织中cAMP积聚 的能力。为了评价完整细胞中PDE4抑制活性的水平，将未分化的U-937 细胞(约105个细胞/反应管)与不同浓度(0.01-1000μM)的PDE抑制 剂一起培养1分钟，并再与1μM前列腺素E2培养4分钟。通过加入 17.5％高氯酸启动反应5分钟后，将细胞溶解，通过加入1M K2CO3将pH调节至中性，并通过RIA测定cAMP含量。Brooker等人在“环 AMP和环GMP的放射免疫测定，”Adv.Cyclic Nucleotide Res.10 1-33，1979中描述了用于该测定的一般方法。

支气管扩张活性-已经确定了多种同工酶选择性PDE抑制剂能引 起人气道中的气道平滑肌有效地松弛，并且已经在这些组织和细胞中 鉴定了PDE1、2、3、4、和5的酶活性。据表明，PDE3和PDE4的选 择性抑制剂引起在不同条件下的支气管环松弛。此外，cAMP不仅涉及 平滑肌松弛，还对气道平滑肌增生有全面的抑制影响。气道平滑肌肥 大和增生可通过cAMP调节，并且这些症状是慢性哮喘的一般形态特 征。据表明，PDE3和PDE4抑制剂的组合对增生有显著抑制作用。已 经在人肺动脉中发现了几种PDE同工酶，包括PDE4，并且已经表明选 择性PDE抑制剂使得肺动脉环松弛。

人支气管松弛-在癌症手术期间解剖的人肺样本是在除去后3天 内获得的。切下小支气管(内直径为2-5mm)，切成片断，并置于2ml 液氮贮存安瓿中，该安瓿填充着含有1.8M二甲亚砜(DMSO)和0.1M 蔗糖作为细胞保护剂的胎牛血清(FCS)中。将安瓿置于聚苯乙烯盒子 (11×11×22cm)中，并在保持在-70℃的冰箱中以约0.6℃/分钟的平 均冷却速度缓慢地冷冻。3-15小时后，将安瓿转移到液氮(-196℃) 内，将其在液氮中贮存直至使用。在使用前，将组织在-70℃暴露30 -60分钟，然后通过将安瓿在37℃水浴中放置2.5分钟来将其融解。 然后通过将支气管片断置于含有Krebs-Henseleit溶液(μM：NaCl 118， KCl 4.7，MgSO4 1.2，CaCl2 1.2，KH2PO4 1.2，NaHCO3 25，葡萄糖 11，EDTA 0.03)的培养皿中来将其洗涤，切成环，并悬浮在用于在约 1g预载力下记录等长张力的10ml器官浴(organ bath)中。通过 累积加入来产生浓度-反应曲线，每一浓度都是在前一浓度已产生最大 作用时加入的。在浓度反应曲线结束时加入罂粟碱(300μM)，以诱导 完全的支气管环松弛。该作用视为100％松弛。

在上述测试模型中，式(1.0.0)化合物在0.001-1.0μM浓度下 产生了与浓度有关的人支气管环制备物的松弛，优选的方案是在5.0 nM-50nM的浓度下有活性。

抑制铃蟾肽引起的支气管缩小-将在实验前可自由摄取食物和水 的雄性Dunkin-Hartley豚鼠(400-800g)用苯巴比妥钠(100mg/kg i.p.)和戊巴比妥钠(30mg/kg i.p.)麻醉，然后用季铵酚(10mg/kg i.m.)使其瘫痪。将由直肠温度计控制的用加热衬垫保持在37℃的动 物用空气和氧气的混合物(45∶55 v/v)经由导气管换气(约8ml/kg，1 Hz)。通过与差压转换器(与呼吸泵连接)连接的呼吸速度描记器监测换 气。使用差压转换器经由胸腔插管直接监测胸腔内的压力改变，这样 可测定并显示导气管与胸腔之间的压力差。对于每个呼吸循环，使用 数字式电子呼吸分析仪由这些气流和跨肺压力计算气道阻力(R1cm H2O/1/s)和柔顺力(Cddyn)。使用压力转化器从颈动脉记录血压和心 率。

当基准阻力和柔顺力稳定时，通过连续的静脉内输注铃蟾肽(100 ng/kg/分钟)来诱导持续的支气管缩小。将铃蟾肽溶解在100％乙醇 中，并用磷酸盐缓冲盐水稀释。当对铃蟾肽反应达到最大并且稳定时 (该反应是开始铃蟾肽输注2分钟后计算的)，施用式(1.0.0)测试化合 物。气管内或十二指肠内滴注或静脉内快速浓注1小时后，评价支气 管缩小的逆转。支气管解痉活性以输注铃蟾肽后的初始最大阻力(RD) 的％抑制表示。ED50值代表由铃蟾肽引起的阻力增加减小50％时的剂 量。作用持续时间定义为支气管缩小减轻50％或更多时的时间(分钟。 对血压(BP)和心率(HR)的影响是以ED20值表示的；即施用5分钟后将 BP或HR降低20％的剂量。

式(1.0.0)测试化合物是作为溶液施用的，或者对于气管内或十二 指肠内滴注，当测试化合物的溶解性不足时，还作为含有0.5％西黄蓍 胶的水悬浮液施用。将悬浮液超声5分钟，以在施用前获得小的粒径。 每种药物测试2-4份剂量(对于每份剂量n＝3-4)。使用适当数目 的对照(5-6)。

在上述测试模型中，式(11.0.0)化合物在0.001-0.1mg/kg i.v. 或0.1-5.0mg/kg i.d.的剂量表现出支气管扩张活性。

哮喘大鼠模型-评价式(1.0.0)化合物对呼吸困难症状，即难以呼 吸或呼吸费力的治疗作用的测试使用得自同系繁殖系哮喘大鼠的大 鼠。使用雌性(190-250g)和雄性(260-400g)大鼠。

在该测试中使用的第V级结晶或冷冻干燥的卵白蛋白(EA)、氢氧 化铝、和美西麦角马来酸氢盐都是商购获得的。在内部尺寸为10×6 ×4英寸的干净的塑料盒子中进行攻击和随后的呼吸读数。盒子的顶部 是可移动的。在使用时，通过4个夹子坚固地固定顶部，并通过软的 橡胶垫片保持不透气的密封。穿过每个室末端的中心经由气密的密封 片插入雾化器，并且每个盒子的末端具有一个出口。将呼吸速度描记 器插到盒子的一端内，并与容量压力转化器连接，然后将压力转化器 经由合适的耦合器与dynograph连接。在将抗原雾化时，把出口开放， 然后从室中取出呼吸速度描记器。然后将出口封闭，并且在记录呼吸 特征期间将呼吸速度描记器与室连接。为了进行攻击，将2ml 3％抗 原在盐水中的溶液置于每个雾化器中，并用空气从小隔膜泵中以10 psi和8升/分钟的流速产生喷雾。

通过皮下注射1ml在盐水中含有1mg EA和200mg氢氧化铝的 悬浮液将大鼠致敏。它们在致敏后12-24天使用。为了消除该反应的 血清素组分，在气雾剂攻击前5分钟施用3.0mg/kg美西麦角来预治 疗大鼠。然后将大鼠暴露于3％EA盐水溶液的气雾1分钟，之后记录 30分钟的呼吸特征。从呼吸记录中测定连续呼吸困难的持续时间。

式(1.0.0)的测试化合物一般在攻击前1-4小时口服施用或者在 攻击前2分钟静脉内施用。将化合物溶解在盐水或1％甲基纤维素中， 或悬浮在1％甲基纤维素中。注射的测试化合物的体积为1ml/kg(静 脉内)或10ml/kg(口服)。在口服治疗之前，将大鼠饥锇过夜。在其 与载体治疗对照组相比降低呼吸困难症状持续时间的能力基础上确定 大鼠的活动。用一系列剂量评价式(1.0.0)的测试化合物，并且由此得 到的ED50定义为将症状持续时间抑制50％的剂量(mg/kg)。

在训练过的意识清醒的squirrel猴子中的肺力学-在该方法中 评价式(1.0.0)化合物抑制蛔虫抗原引起的squirrel猴子测试个体呼 吸参数例如气道阻力改变的能力。该测试方法包括将训练过的 squirrel猴子放置在施以气雾剂的室内的椅子上。为了对照，在测试 当天记录约30分钟呼吸参数的肺力学测定以确立每只猴子的正常对照 值。对于口服给药，将式(1.0.0)化合物溶解或悬浮在1％甲基纤维素 溶液(甲基纤维素，65HG，400cps)中，并以1ml/kg体重的体积施 用。为了喷雾施用式(1.0.0)化合物，使用超声喷雾器。在用蛔虫抗原 的气雾剂量攻击猴子前，预治疗时间为5分钟-4小时。

攻击后，每分钟的数据计算为每个呼吸参数相对于对照值的变化 百分比，呼吸参数包括气道阻力(RL)和动力柔顺力(Cdyn)。攻击后最少 60分钟内获得每种测试化合物的结果，然后与先前获得的特定猴子的 过去基准对照值进行比较。此外，对于每只猴子，攻击后60分钟的所 有数值，即过去基准值和测试值单独平均，并用来计算测试化合物对 蛔虫抗原反应的总体抑制百分比。为了对结果进行统计学分析，使用 成对t-检验。

在过敏绵羊中预防诱导的支气管缩小-下面描述测试式(1.0.0) 化合物在预防支气管缩小方面的治疗活性的方法。该方法是基于这样 的发现，即已知对特定抗原Ascaris suum有敏感性的一些饲养的过敏 绵羊对吸入攻击的反应是急性以及后期支气管反应。急性和后期支气 管反应随时间的发展近似于在患有哮喘的人中所观察到的时间进程； 此外，这种急性和后期反应的药理学改变类似于在人中发现的药理学 改变。这些绵羊对抗原攻击的反应主要是在其大气道中观察的，这使 得能够监测作为肺阻力改变、即特定肺阻力改变的作用。

使用平均体重为35kg(范围：18-50kg)的成年绵羊。使用的 所有动物都满足两个标准：1)它们对1∶1000或1∶10000稀释的 Ascaris suum提取物有天然皮肤反应，和2)它们以前对Ascaris suum 吸入攻击的反应是急性支气管缩小和后期支气管堵塞。参见Abraham 等人，Am.Rey.Res p.Dis.128 839-844，1983。

将未服镇静剂的绵羊以其头部被固定的前俯姿势束缚在车上。用2 ％利多卡因溶液经鼻局部麻醉后，将气囊式导管经由一个鼻孔置于食 道底部。然后使用易曲的纤维支气管镜作为引导，用扎口的气管内管 给动物插管。用食管气囊式导管(填充1ml气体)估测胸膜压力，所述 导管是这样放置的，其使得吸气产生具有清楚可辨别的心原性振动的 负压偏离。用经过并放置在鼻气管插管顶端远侧的侧孔导管(内尺寸： 2.5mm)测定气管中的侧压。用差别压力转换器测定跨肺压力，即气管 压力与胸膜压力之间的差异。压力转换器导管系统的测试表明在压力 和流量之间没有达到9Hz频率的相移。为了测定肺阻力(RL)，将鼻气 管插管的最大末端与呼吸速度描记器连接。在与计算机连接的示波器 上记录流量和跨肺压力的信号，其中所述计算机由跨肺压力、通过整 合获得的呼吸体积、和流量在线计算RL。分析10-15次呼吸用以确定 RL。在身体体积描记器中测定胸气体体积(Vtg)以获得肺阻力(SRL＝RL ×Vtg)。

使用一次性医用喷雾器产生Ascaris suum提取物(1∶20)的气雾， 该喷雾器产生如电粒度分析仪所测定的质量中值空气动力学直径为 6.2μm(几何标准偏差为2.1)的气雾。将从喷雾器排出的气雾直接输 送到塑料T-片上，该塑料T-片一端与鼻气管插管连接，另一端与常规 呼吸器的吸气部分连接。以20ml/分钟的速度递送总体积为500ml 的气雾。因此，在安慰剂和药物试验中每只绵羊接受等剂量的抗原。

在抗原攻击前，获得SRL的基准测定，在攻击前1小时开始输注测 试化合物，重复SRL测定，然后让绵羊吸入Ascaris suum抗原。抗原 攻击后立即以及在抗原攻击后第1、2、3、4、5、6、6.5、7、7.5、 和8小时获得SRL。安慰剂和药物测试间隔至少14天。在另一试验中， 给绵羊施用快速浓注剂量的测试化合物，然后在如上所述用蛔虫抗原 攻击前0.5-1小时和蛔虫抗原攻击后8小时输注测试化合物。使用 Kruskal-Wallis单向ANOVA检验来比较对照和药物治疗动物中的对抗 原的急性即时反应和峰值后期反应。

Turner等人在“使用抗过敏/抗哮喘剂的哮喘灵长目动物模型的 特征，”Inflammation Research 45 239-245，1996中描述了基于使 用灵长目动物的另一有用测定。

抗炎活性-通过抑制嗜酸细胞激活来证实式(1.0.0)化合物的抗 炎活性。在该测定中，从嗜酸细胞数目为0.06-0.47×109 L-1的非特 应性志愿者中采集血样(50ml)。静脉血液收集到含有5ml柠檬酸三 钠(3.8％，pH7.4)的离心管中。

将抗凝血液用磷酸盐缓冲盐水(PBS，既不含有钙也不含有镁)稀释 (1∶1，v∶v)，并在50ml离心管中放到15ml等渗的Percoll(密度 为1.082-1.085g/ml，pH 7.4)上。离心(30分钟，1000×g，20℃) 后，将在血浆/Percoll界面的单核细胞小心地抽吸出来并弃去。

将嗜中性白细胞/嗜酸细胞/红细胞血小板(约5ml体积)轻轻地重 悬在35ml等渗氯化铵溶液(NH4Cl，155mM；KHCO3，10mM；EDTA.0.1 mM；0-4℃)中。15分钟后，将细胞在含有胎牛血清(2％，FCS)的PBS 中洗涤2次(10分钟，400×g，4℃)。

使用磁性细胞分离系统来分离嗜酸细胞和嗜中性白细胞。该系统 能够根据表面标记分离悬浮液中的细胞，并包含放置在柱内的永久磁 铁，所述柱包含可磁化的钢基质。在使用前，用PBS/FCS将该柱平衡1 小时，然后经由20ml注射器用冰冷的PBS/FCS在逆行基础上冲洗。 将一个21G皮下针头连接在柱的底部上，并使1-2ml冰冷的缓冲液 经由针头流出。

将粒细胞离心后，抽吸出上清液，并用100μl磁颗粒(抗-CD16 单克隆抗体，与超顺磁性颗粒缀合)将细胞轻轻地重悬。将嗜酸细胞/ 嗜中性白细胞/抗-CD16磁性颗粒混合物在冰上培养40分钟，然后用 冰冷的PBS/FCS稀释至5ml。将细胞悬浮液缓慢地加到柱顶部，打开 接头以使细胞缓慢地移动到钢基质内。然后用PBS/FCS(35ml)洗涤该 柱，其中该洗涤液是小心地加到柱顶部以不扰乱已经捕集到钢基质中 的磁标记的嗜中性白细胞。将未标记的嗜酸细胞收集到50ml离心管 中，并洗涤(10分钟，400×g，4℃)。将所得离心团重悬在5ml Hank′s 平衡盐水溶液(HBSS)中，以在使用前可以估测细胞数目和纯度。将分 离柱从磁铁中取出来，并洗脱嗜中性白细胞级分。然后用PBS(50ml) 和乙醇(无水)洗涤该柱，并在4℃贮存。

用微细胞计数器计数细胞总数目。将一滴引起溶解的溶液加到样 本中，30秒后再计数以评价被红细胞的污染。在Shandon Cytospin 2 cytospinner上制备Cytospin涂片(100μl样本，3分钟，500rpm)。 将这些制备物染色，并通过光学显微镜确定分化的细胞计数，其中测 定至少500个细胞。通过排除台盼蓝来评价细胞存活力。

将嗜酸细胞在HBSS中稀释，并以1-10×103个细胞/孔的量吸移 到96孔微量滴定板(MTP)上。每个孔含有200μl样本，该200样本包 含：100μl嗜酸细胞悬浮液；50μl HBSS；10μl光泽精；20μl激 活刺激物；和20μl测试化合物。

将样本与测试化合物或载体培养10分钟，然后加入溶解在二甲亚 砜中的激活刺激物fMLP(10μM)，然后用缓冲剂稀释，这样所用的最 高溶剂浓度为1％(在100μM测试化合物)。将MTPs搅拌以促进细胞 与培养基混合，并将MTP置于发光计内。用20分钟同时测定每个孔的 总化学发光和暂时特征，并且结果以任意单位表示，或者按不存在测 试化合物的fMLP引起的化学发光的百分比表示。将结果与Hill方程 拟合，并自动计算IC50值。

式(1.0.0)化合物在上述测试方法中在0.0001μM-0.5μM浓度 范围内有活性，优选的实施方案是在0.5nM-20nM的浓度范围内有 活性。

从上文可以看出，式(1.0.0)化合物可用于治疗炎性疾病或堵塞性 气道疾病或其它涉及气道堵塞的病症。它们可特别用于治疗支气管哮 喘。

从其抗炎活性、其对气道过度反应性的影响、和其涉及PDE同工 酶抑制作用的性质，特别是作为选择性PDE4抑制剂的角度来看，式 (1.0.0)化合物可用于治疗、特别是预防性治疗堵塞性或炎性气道疾 病。因此，通过长时间连续且有规律的施用，式(1.0.0)化合物可用于 提供抗支气管缩小复发或堵塞性或炎性气道疾病后的其它症状发作的 保护作用。式(1.0.0)化合物还可用于控制、改善或逆转这样的疾病的 基本状态。

由于其支气管扩张活性，式(1.0.0)化合物可作为支气管扩张剂， 例如用于治疗慢性或急性支气管缩小，以及用于症状性治疗堵塞性或 炎性气道疾病。

因此，本说明书和权利要求书在描述堵塞性或炎性气道疾病时所 用的术语“治疗”是指预防和症状性治疗方式。

从上述描述可看出，本发明还涉及治疗哺乳动物中气道过度反应 性的方法；在哺乳动物中进支气管扩张的方法；以及特别是治疗哺乳 动物个体中堵塞性或炎性气道疾病、尤其是哮喘的方法，所述方法包 括给所述个体哺乳动物施用有效量的式(1.0.0)化合物。

本发明适用的堵塞性或炎性气道疾病包括哮喘；尘肺病；慢性嗜 酸粒细胞性肺炎；慢性堵塞性气道或肺疾病(COAD或COPD)；和成人呼 吸窘迫综合征(ARDS)，以及其它药物治疗例如阿司匹林或β-激动剂治 疗后的气道过度反应性加重。

式(1.0.0)化合物可用于治疗任何类型、病因、或发病机理的哮 喘，包括病理生理障碍所致的内因性哮喘，某些环境因素引起的外因 性哮喘，和未知或不明显原因的特发性哮喘。式(1.0.0)化合物可用于 治疗过敏性(特应性/支气管/IgE-介导的)哮喘；并且它们可用于治疗 非特应性哮喘，包括例如支气管炎、气肿、锻炼引起的和职业性哮喘； 微生物尤其是细菌、真菌、原生动物、或病毒感染引起的感染性哮喘； 以及其它非过敏性哮喘例如初期哮喘(哮喘婴儿综合征)。

式(1.0.0)化合物还可用于治疗任何类型、病因、或发病机理的尘 肺病；包括例如矾土肺(铝土矿工人疾病)；煤矽肺(矿工哮喘)；石棉 肺(蒸汽管工哮喘)；石末肺(石末沉着病)；吸入鸵鸟羽毛灰尘引起的 驼鸟毛尘肺；吸入铁颗粒引起的肺铁末沉着病；矽肺(磨工疾病)；棉 屑肺(棉尘哮喘)；和滑石粉尘肺病。 8.2 慢性堵塞性肺病(COPD)

式(1.0.0)化合物还可用于治疗COPD或COAD，包括慢性支气管 炎、肺气肿或与其有关的呼吸困难。COPD的特征是不可逆的进行性气 道堵塞。慢性支气管炎与大软骨气道中的粘膜下层的粘膜分泌腺的增 生和肥大有关。在末端和呼吸细支气管中都发现了杯状细胞增生、粘 膜和粘膜下层炎性细胞渗入、水肿、纤维变性、粘液塞栓和平滑肌增 多。已知小气道是气道堵塞的主要部位。肺气肿的特征是肺泡壁破坏 和损伤肺弹性。还已经鉴定了有多种危险因素与COPA的发生有关。已 经良好地确立了吸烟与COPD之间的联系。其它危险因素包括暴露于煤 粉尘和多种遗传因素。参见Sandford等人，＂慢性堵塞性肺病的遗传危 险因素，＂Eur.Respir.J.10 1380-1391，1997。COPD的发生率正 在增加，并代表了工业化国家人口的严重经济负担。在临床上COPD自 身还代表了单纯慢性支气管炎的多种变型，所述单纯慢性支气管炎对 于处于具有慢性呼吸衰竭的严重失能状态的患者没有病废。

COPD的特征是气道炎症，这与哮喘一样，但是在患者支气管小泡 灌洗液和痰中发现的炎性细胞是嗜中性白细胞而不是嗜酸细胞。在 COPD患者中还发现了炎性介质，包括IL-8、LTB4、和TNF-α的水平增 加，并且发现这类患者支气管的表面上皮和上皮下膜渗入了T-淋巴细 胞和巨噬细胞。可通过使用β-激动剂和抗胆碱能支气管扩张剂来解除 COPD患者的症状，但是该疾病的进展保持不变。已经使用茶碱来治疗 COPD，但是没有多大成功，虽然其减少了COPD患者痰中的嗜中性白细 胞数目。甾族化合物也不是令人满意的COPD治疗剂。

因此，式(1.0.0)化合物在治疗COPD及其相关和包括的堵塞性气 道疾病中的应用代表着本领域的显著进步。对于使用式(1.0.0)化合物 所实现的所需治疗目标的途径，本发明不限于任何特定作用方式或任 何假设。然而，本领域中认识到，PDE4是嗜中性白细胞和巨噬细胞中 的主要PDE；Cheng等人，“一系列新的儿茶酚苯并咪唑的合成和体外 特性.发现了对[3H]环戊苯吡酮结合位点有很弱亲和力的有效的选择 性磷酸二酯酶IV抑制剂，”Bioorg.Med.Chem.Lett.51969-1972， 1995；Wright等人“人嗜中性白细胞功能的差别抑制：环AMP-特异性、 对环GMP不敏感的磷酸二酯酶的作用，”Biochem.Pharmacol.40 699-707，1990；Schudt等人，“选择性磷酸二酯酶抑制剂对人嗜中性 白细胞功能和cAMP以及Cai水平的影响，”Naunyn Schmiedebergs Arch.Pharmacol.344 682-690，1991；和Tenor等人，“环核苷酸 磷酸二酯酶同工酶在人肺泡巨噬细胞中的活性，”Clin.Exp.Allergy 25 625-633，1995。

为了更好地理解本发明，推断式(1.0.0)化合物能抑制嗜中性白细 胞中的PDE4，导致趋化性、激活、粘着、和脱粒降低；Schudt等人，见 上文；Nelson等人，“选择性磷酸二酯酶抑制剂对多形核白细胞呼吸 爆裂的作用，”J.Allergy Clin.Immunol.86 801-808，1990；和 Bloeman等人，“刺激的嗜中性白细胞中的cAMP水平增高抑制其对人 支气管上皮细胞的粘着，”Am.J.Physiol.272 L580-587，1997。

还推断式(1.0.0)化合物减少外周血液嗜中性白细胞中的由PDE4 介导的超氧化物阴离子生成，并且它们调节由PDE4介导的白三烯合 成；Wright等人，见上文；Schudt等人，见上文；Bloeman等人，见 上文；Al Essa等人，“在对环AMP和环AMP增加剂的超氧化物生成性 反应方面，循环和渗出的多形核白细胞的不均匀性：其机制的研究，” Biochem.Pharmacol.49 315-322，1995；Ottonello等人，“环AMP- 增加剂下调粘着性嗜中性白细胞中的由粒细胞-巨噬细胞集落刺激因 子(GM-CSF)引起的氧化爆裂，”Clin.Exp.Immunol.101 502-506， 1995；和Ottonello等人，“在与纤连蛋白粘着的嗜中性白细胞中肿瘤 坏死因子-α引起的氧化爆裂：环AMP-增加剂的作用，”Br.J.Haematol. 91 566-570，1995。

还推断式(1.0.0)化合物抑制CD11b/CD18表达；Berends等人， “通过IV型选择性PDE抑制剂环戊苯吡酮抑制人嗜中性白细胞和嗜酸 细胞上PAF-引起的CD11b表达和L-选择蛋白脱落，”Eur.Respir.J. 10 1000-1007，1997；和Derian等人，“通过cAMP调节剂抑制趋化 性肽引起的嗜中性白细胞与血管内皮的粘着，”J.Immunol.154 308-317，1995。

还推断式(1.0.0)化合物抑制肺泡巨噬细胞PDE4，并由此减少趋 化性因子和TNF-α释放；式(1.0.0)化合物增加抗炎细胞因子IL-10的 合成和促进其从单核细胞的释放，IL-10又能够降低滑液单核细胞生成 TNF-α、IL-1β、和GM-CSF，并由此增强式(1.0.0)PDE4抑制剂的整 个抗炎性质；Schudt等人，“作为抗哮喘药物靶的PDE同工酶，”Eur. Respir.J.8 1179-1183，1995；和Kambayashi等人，“IV型环核 苷酸磷酸二酯酶参与IL-10的调节，并由此抑制内毒素刺激的巨噬细 胞释放TNF-α和IL-6，”J.Immunol 155 4909-4916，1995。

已经在临床试验中证实了PDE4抑制剂在治疗人患者COPD中的应 用。已经表明，用上述式(0.1.9)所代表的SB-207，499以15mg的剂 量每天两次治疗6周，导致了FEV1和受迫肺活量(FVC)增加；Brown，W. M.，“SB-207499，”Anti-inflamm.Immunomodulatory Invest.Drugs 1 39-47，1999。已经在四周试验中证实了SB-207，499的临床效力， 该试验提供了FEV1改善的证据，在6周试验中，COPD患者每天接受2 次15mg剂量，也提供了FEV1改善的证据；Brown，见上文。SB-207，499 已经在上文中进一步描述过，并且由式(0.1.9)代表： 8.3 支气管炎和支气管扩张

根据式(1.0.0)化合物所具有的上述特定和不同的抑制活性，它们 可用于治疗任何类型、病因、或发病机理的支气管炎，包括例如具有 短但严重病程、并且由于暴露于寒冷、吸入刺激性物质、或急性感染 的急性支气管炎；非白喉性哮吼形式的急性喉气管支气管炎；由于支 气管中存在花生仁而引起的花生仁吸入性支气管炎；具有大量粘液脓 性排出物的急性支气管炎形式的卡他性支气管炎；长期持续支气管炎 形式的慢性支气管炎，其在静止阶段后，由于反复的急性支气管炎或 慢性一般疾病的发作，具有较明显或较不明显的复发趋势，特征是咳 嗽、缺乏或有大量咳出物、以及肺组织中有继发性改变；特征是剧烈 咳嗽和呼吸困难发作的哮吼性支气管炎；特征是坚韧痰分泌很少的干 性支气管炎；感染性哮喘性支气管炎，其是特征为哮喘患者中呼吸道 感染后发展成支气管痉挛症状的综合征；增生性支气管炎，其是与排 痰性咳嗽有关的支气管炎；由葡萄球菌或链球菌引起的葡萄球菌或链 球菌支气管炎；和其中炎症延伸到肺泡内的肺泡性支气管炎，该病症 有时由于有白黄色小米状肉芽而可以在胸膜下看见。

支气管扩张是支气管的慢性扩张，其特征是恶臭性呼吸和阵发性 咳嗽，并咳出粘液脓性物质。其可以一致地影响支气管，在这种情况 下其称为圆柱式支气管扩张，或者其可以在不规则的囊中发生，对于 这种情况其称为囊状支气管扩张。当扩张的支气管具有终期球状增大 时，使用术语梭形支气管扩张。在其中扩张状态延伸到细支气管的情 况下，其称为毛细支气管扩张。如果支气管的扩张是球形，该病症称 为囊性支气管扩张。干性支气管扩张在偶发感染时发生，并且其可能 伴有咯血、咳出血液或带血的痰。在干性支气管扩张的静息的期，发 生的咳嗽是非排痰性的。滤泡性支气管扩张是其中受影响区域中的淋 巴组织显著增大的一类支气管扩张，并且通过延伸到支气管腔，可使 支气管严重畸变和部分堵塞支气管。因此，式(1.0.0)化合物可通过抑 制PDE4同工酶而有益地治疗各种上述类型的支气管扩张。

式(1.0.0)化合物作为支气管扩张剂或支气管解痉剂治疗支气管 哮喘、慢性支气管炎和本文所述的相关疾病和病症的用途可通过使用 多种不同的本领域已知体内动物模型来得到证实，这些动物模型包括 在下文中描述的那些。

体外支气管解痉活性-在下述测试中证实式(1.0.0)化合物引起 豚鼠气管平滑肌松弛的能力。用硫喷妥钠(100mg/kg i.p.)将豚鼠 (350-500g)杀死。将气管切开，并切成长2-3cm的切片。在交替软 骨板上在横向平面中将气管横切，以获得深3-5mm的组织环。弃去 邻近的和远侧的环。将各个环垂直固定在不锈钢载体上，其中一个载 体固定在器官浴的基板上，另一个连接在等长转换器上。在37℃将环 浸泡在Krebs溶液(组成μM：NaHCO3 25；NaCl 113；KCl 4.7； MgSO4.7H2O 1.2；KH2PO4 1.2；CaCl2 2.5；葡萄糖11.7)中并用O2/CO2(95∶5，v/v)充气。以该方式制得的、预负载至1g的环产生自发伸缩， 一段平衡期(45-60m)后，在加入解痉药物时一致地松弛。为了确定 解痉活性，将式(1.0.0)的测试化合物溶解在生理盐水中，并以5分钟 的时间间隔以递增量的方式加到器官浴中，以获得累积浓度-作用曲 线。

在上述测试模型中，式(1.0.0)化合物在0.001-1.0μM的浓度 下产生了豚鼠气管环制备物的浓度相关性松弛。

在PAF治疗的动物中抑制气道过度反应性-将豚鼠麻醉，并如上 文在“抑制铃蟾肽引起的支气管缩小”下面所述记录肺功能。静脉内 注射低剂量组胺(1.0-1.8g/kg)以引起对致痉物的气道敏感性。输注 PAF(血小板活化因子)1小时(总剂量＝600ng/kg)，停止输注20分 钟后注射低剂量的铃蟾肽，引起了气道过强反应性，这种气道过强反 应性以在施用PAF之前和之后的最大反应幅度之间的成对差异表示。 在暴露于PAF期间，输注0.01-0.1mg/kg剂量的式(1.0.0)化合物 抑制了PAF。 8.4 过敏性和其它类型的鼻炎；窦炎

过敏性鼻炎的特征是鼻堵、瘙痒、湿润、溢鼻液、打喷嚏和偶发 的嗅觉缺失。过敏性鼻炎分为两类，季节性和常年性鼻炎，前者是由 花粉或户外霉菌孢子引起的，后者是由一般的过敏原例如尘螨、动物 皮屑、和霉菌孢子引起的。过敏性鼻炎一般表现出早期反应和后期反 应。早期反应与肥大细胞脱粒有关，而后期反应的特征是渗入嗜酸细 胞、嗜碱细胞、单核细胞、和T-淋巴细胞。这些细胞还释放多种炎性 介质，所有这些介质都导致炎症表现出后期反应。

特别流行形式的季节性过敏性鼻炎是枯草热，其表现为急性结膜 炎，伴有流泪和瘙痒、鼻粘膜肿胀、鼻粘膜炎、突然打喷嚏，和经常 伴有哮喘症状。式(1.0.0)化合物尤其可有益地用于治疗枯草热。

可用式(1.0.0)化合物作为治疗剂治疗的其它类型的鼻炎包括急 性卡他性鼻炎，其是涉及鼻粘膜急性充血的头部伤风，表现为干燥， 然后鼻粘膜分泌增加，妨碍通过鼻子呼吸，和某些疼痛；萎缩性鼻炎， 其是一种特征为粘膜和腺体消耗的慢性形式；脓性鼻炎，其是形成脓 汁的慢性鼻炎；和血管舒缩性鼻炎，这是一种非过敏性鼻炎，其中诸 如轻度寒冷、疲劳、发怒、和焦虑这样的刺激引起血管张力和渗透性 的暂时改变，并具有与过敏性鼻炎相同的症状。

过敏性鼻炎与哮喘之间有公认的联系。哮喘经常伴有过敏性鼻 炎，并且已经证实了治疗过敏性鼻炎可改善哮喘。已经用流行病学数 据表明了严重鼻炎与更严重的哮喘之间的联系。例如，处于临床前开 发阶段的治疗过敏性鼻炎的化合物D-22888表现出强的抗过敏作用， 并且能抑制接种抗原的猪中的鼻液溢。参见Marxet 30al “D-22888- 用于治疗过敏性鼻炎和其它过敏性病症的一种新的PDE4抑制剂，”J. Allergy Clin.Immunol 99 S444，1997。据表明另一种实验化合物 AWD12，281在过敏性鼻炎大鼠模型中有活性。参见Poppe等人“AWD 12-281—一种新的PDE-4抑制剂、loteprednol和倍氯米松在棕色挪 威大鼠的过敏性鼻炎和气道炎症模型中的作用，”Am.J.Respir.Crit. Care Med.A95，1999。化合物D-22888和AWD-12，281在上文中进一 步描述过，并分别由式(0.0.28)和(0.0.34)代表：

由于在解剖学上近似，窦炎与鼻炎是相关的，并且在某些情况下 具有相同的病因和发病机理。窦炎是窦的炎症，并且该病症可以是化 脓性或非化脓性的，以及是急性或慢性。根据炎症所位于的窦，该病 症称为筛窦炎、额窦炎、上颌窦炎、或蝶骨窦炎。筛窦是一种位于筛 骨中的鼻侧的窦。额窦是位于额骨中的一对鼻旁窦。上颌窦是位于上 颌骨体内的成对鼻旁窦之一。因此，式(1.0.0)化合物可有益地用于治 疗急性或慢性窦炎，但是尤其是慢性窦炎。 8.5 类风湿性关节炎、骨关节炎、疼痛、发热、和痛风

关节炎定义为关节的炎症，并且类风湿性关节炎是主要关节、通 常多关节的慢性系统疾病，其特征为滑液膜和关节结构中的炎性变 化、以及肌肉萎缩和骨疏松。后期类风湿性关节炎表现为关节僵硬和 变形。类风湿性关节炎是病因未知的跛性自身免疫性疾病，影响着约1 ％人口。

本文所用术语“类风湿性关节炎”的范围包括本领域众所周知的 合适的有关和相关形式的关节炎，因为它们也可以用式(1.0.0)化合物 治疗。因此，术语“类风湿性关节炎”包括急性关节炎，其特征是疼 痛、发热、变红，和由于炎症、感染、或创伤所致的肿胀；急性痛风 性关节炎，其是与痛风有关的急性关节炎；慢性炎性关节炎，其是慢 性病症例如类风湿性关节炎中的关节炎症；退变性关节炎，其是骨关 节炎；感染性关节炎，其是由细菌、立克次氏体、支原体、病毒、真 菌、或寄生虫引起的关节炎；Lyme关节炎，其是与Lyme 20疾病有关 的大关节的关节炎；增生性关节炎，其是与在类风湿性关节炎中发现 的滑膜增生有关的关节炎症；牛皮癣性关节炎，其是发生与炎性关节 炎有关的牛皮癣的综合征；和椎骨关节炎，其是涉及椎间盘的炎症。

导致进行性关节破坏的类风湿性关节炎的3个主要病理特征是炎 症、异常的细胞和体液反应、和滑液增生。类风湿性关节炎的特定细 胞病变包括存在T-细胞和单核细胞。主要是记忆T-细胞的T-细胞占从 类风湿性关节炎患者的滑液组织中回收的细胞的最高达50％；在相同 组织中发现的单核细胞有30-50％是抗原呈递细胞，这是该疾病的自 身免疫性特征的指征。促炎性细胞因子例如IL-1、IL-4、IL-5、IL-6、 IL-9、IL-13、和TNF-α是导致关节组织损伤、炎症、增生、血管翳形 成和骨再吸收的主要因子。参见Firestein，.G.S.和Zvaifier，W.J.， “T-细胞在慢性类风湿性滑膜炎中有多重要？”Arth.Rheum.33 768-773，1990。这已经通过例如下一事实得到证实：据表明在RA临 床试验中存在TNF-α的单克隆抗体(Mabs)；Maini等人，“肿瘤坏死因 子-α(TNF-α)阻断类风湿性关节炎(RA)的有益作用，”Clin.Exp. Immunol.101 207-212，1995。

式(1.0.0)的PDE4抑制剂可用于治疗类风湿性关节炎，因为它们 能够抑制多种炎性细胞，包括嗜碱细胞、嗜酸细胞和肥大细胞的活动。 式(1.0.0)化合物的这些抑制活性上文已经描述过，它们通过释放反应 性氧、前列腺素、和炎性细胞因子例如IL-5、IFN-γ、和TNF-α而具有 广泛的体外抗炎作用。还参见Cohan等人，“新的IV型磷酸二酯酶抑 制剂CP-80，633的体外药理性质，”J.Pharm.Exp.Ther.278 1356-1361，1996；和Barnette等人，“SB207499(Arifio)—一种 有效的选择性第二代磷酸二酯酶4抑制剂：体外抗炎作用，”J.Pharm. Exp.Ther.284 420-426，1998。式(1.0.0)PDE4抑制剂还可用于 治疗类风湿性关节炎，这是因为它们能有效地抑制经由多种物质，包 括抗原例如住宅尘螨引起的已经由本领域证实的T-细胞增殖； Barnette等人，见上文。式(1.0.0)化合物促进单核细胞释放细胞因子 IL-10的能力(IL-10能减少滑液单核细胞生成TNF-α、IL-1、IL-4、 IL-5、IL-6、IL-9、IL-13、和GM-CSF)，进一步增强式(1.0.0)PDE4 抑制剂的整个抗炎作用；Kambayashi等人，见上文。此外，式(1.0.0) 化合物抑制刺激的单核细胞释放TNF-α的能力与其中可表明抗炎作用 和抑制TNF-α积聚一致的炎症动物模型相关。一个这样的动物模型涉 及通过口服施用PDE4抑制剂来抑制小鼠中LPS引起的TNF-α释放； Cheng等人，“4型磷酸二酯酶(PDE4)抑制剂CP-80，633提高小鼠中环 AMP水平和降低TNF-α生成：肾上腺切除术的影响，”J.Pharm.Exp. Ther.280 621-626，1997。另一这样的动物模型涉及通过口服施用 环戊苯吡酮抑制角叉菜胶引起的大鼠爪子水肿；Singh等人，“在发炎 的大鼠膝盖中的肿瘤坏死因子的滑液水平：地塞米松和基质金属蛋白 酶和磷酸二酯酶抑制剂的调节作用，”Inflamm.Res.46(Suppl.2) S153-S154，1997。

本领域已使用类风湿性关节炎动物模型来证实PDE4抑制剂对 TNF-α的体内调节作用与其治疗类风湿性关节炎的用途之间的联系。本 领域已经证实了环戊苯吡酮在急性炎症动物模型例如小鼠佐剂关节炎 模型中的活性；Sekut等人，“磷酸二酯酶(PDE)IV抑制剂在急性和慢 性炎症模型中的抗炎作用，”Olin.Exp.Immunol.100(1)126-132， 1995。本领域已经证实了sc.或ip.注射后环戊苯吡酮在胶原II引起 的关节炎(CIA)模型中减轻疾病严重程度的能力；Nyman等人，“IV型 磷酸二酯酶抑制剂环戊苯吡酮改善大鼠中胶原II引起的关节炎，” Olin.Exp.IrnmunoL 108 415-419，1997。在该实验中，环戊苯吡 酮的给药方案是在关节炎发作前施用2mg/kg，每天2次，治疗5天， 并且其显著延迟了关节炎症状的出现。停止治疗后，试验动物发展成 了关节炎，并达到与对照组相同的关节炎程度。在同一实验中，还在 出现关节炎时施用3mg/kg。每天施用2次环戊苯吡酮。该治疗显著 改变了疾病的进展，由此严重程度的进展被中止了，甚至在停止治疗 后也是如此，关节炎指标分数没有达到在未治疗动物中观察到的水 平。研究人员还能够证实在局部淋巴结中TNF-α和IFN-γmRNA表达很 强的下调，这意味着环戊苯吡酮的主要作用是影响炎性过程的效应子 期。Nyman等人，见上文。

抑制体外人单核细胞产生TNF-α-可按照EP 411 754(Badger 等人)和WO 90/15534(Hanna)中描述的方法测定式(1.0.0)化合物在 体外对人单核细胞产生TNF-α的抑制作用。所参考的出版物还描述了 可用于测定式(1.0.0)化合物体内抑制活性的两个内毒素性休克模 型。详细描述在这些模型中使用的方法，并且测试化合物通过降低由 于注射内毒素引起的TNF-α血清水平而获得了正性结果。

据表明选择性PDE4抑制剂例如RP73401在动物模型例如涉及链球 菌细胞壁(SCW)引起的关节炎动物模型中显著改善疾病，尤其是改善关 节破坏、滑膜炎、和纤维变性；Souness等人，“IV型磷酸二酯酶抑制 剂治疗类风湿性关节炎的潜在可能，”Drugs 1541-553，1998。

对于类风湿性关节炎的治疗，特别值得关注的是观察到PDE4抑制 剂在该疾病的活动位点具有正性作用。例如，已经证实了RP73401能 够在胶原II处理的小鼠的爪关节的血管翳/软骨界面降低TNF-αmRNA 表达。Souness等人，见上文。还已经在35名每日三次施用400pg化 合物的类风湿性关节炎患者的安慰剂对照的双盲II期实验中，临床实 验了RP73401在类风湿性关节炎患者中的作用。该化合物能够诱导与 C-反应性蛋白和IL-6血清水平降低有关的正性临床改善趋势。 Chikanza等人，“4型磷酸二酯酶抑制剂RP73401在类风湿性关节炎患 者中的临床作用，”Br.J.RheumatoL 36：Abstr.Suppl.I，186， 1997。

使用U-937细胞测定完整组织中的增加的cAMP累积-适于证实式 (1.0.0)化合物的PDE4抑制活性的另一测定是使用据表明含有大量 PDE4的人单核细胞系的U-937细胞的测定。为了测定在完整细胞中的 PDE4活性抑制，将未分化的U-937细胞以大约105个细胞/反应管的密 度与浓度为0.01-1000pM的测试化合物一起培养1分钟，并再与1μM 前列腺素E2一起培养4分钟。开始反应5分钟后，通过加入17.5％高 氯酸将细胞裂解，然后通过加入1M碳酸钾将pH调节至中性。使用RIA 技术测定反应管的cAMP含量。进行该测定的详细方案描述在Brooker 等人，“环AMP和环GMP的放射免疫测定，”Adv.Cyclic Nucleotide Res.10 1-33，1979。

痛风是指一组嘌呤代谢病症，并且完全发展的痛风表现为高尿酸 血，由尿酸一钠一水合物晶体引起的复发、特征性急性炎性关节炎， 和所述晶体在肢关节中或肢关节周围的砂砾性沉积(这种沉积可导致 关节破坏和严重的残废)，以及尿酸尿石病的不同组合。类风湿性痛风 是类风湿性关节炎的另一名称。痛风石性痛风是其中发生尿酸钠痛风 石或白垩沉积的痛风。某些治疗剂可用于治疗痛风及其伴随的炎症， 例如保泰松和秋水仙碱；而其它治疗剂仅具有促尿酸尿特征，例如磺 吡酮和苯溴马隆。

发热或热病可能是大量不同因素中任何一种因素的结果，但是对 于本发明来说，这样的发热是在咽结膜热或风湿热中表现的发热，或 者是在炎症期间表现出的发热。炎症的一种伴发反应是疼痛，尤其是 在类风湿性关节炎和痛风患者的关节和结缔组织中发生的炎症更是如 此。

因此，式(1.0.0)的PDE4抑制化合物给痛风、发热和与炎症有关 的疼痛的治疗提供了有益结果。 8.6 嗜酸细胞相关性病症

作为其整个抗炎活性一部分的式(1.0.0)PDE4抑制化合物抑制嗜 酸细胞激活的能力已在上文中描述过。因此，式(1.0.0)化合物可用于 治疗嗜酸细胞相关性病症。这样的病症包括嗜酸粒细胞增多，这是异 常的大量嗜酸细胞在血液中形成和积聚。该病症的名称源自“曙红” —一种包含荧光素溴衍生物的玫瑰红色的染剂或染料，其易于将患者 血液中的“嗜酸性白细胞”染色，因此使得患者易于确定。可依据本 发明治疗的一种特定嗜酸细胞性病症是肺渗入嗜酸粒细胞增多，其特 征是嗜酸细胞渗入到肺实质内。该病症尤其包括Loffler′s综合征， 这是特征为肺暂时渗入的病症，并伴有咳嗽、发热、呼吸困难、和嗜 酸粒细胞增多。

其它嗜酸细胞性病症包括慢性嗜酸细胞性肺炎，这是特征为咳 嗽、呼吸困难、不适、发热、盗汗、体重下降、嗜酸粒细胞增多、和 胸膜显示肺周围有非片断、非迁移渗入物的慢性间隙性肺病；热带肺 嗜酸粒细胞增多，这是一种亚急性或慢性形式的隐性丝虫病，通常涉 及感染动物的Brugia malayi、班氏吴策线虫、或丝虫，并且特征是 偶发夜间喘鸣和咳嗽、显著增加的嗜酸粒细胞增多、和肺的弥散性网 状小结渗入；支气管肺炎曲霉病，这是支气管和肺被曲霉属真菌感染， 导致表现如下的病症：鼻窦和肺中，但是也在皮肤、耳朵、眼眶、以 及有时骨和脑脊膜中发生炎性肉芽肿损伤，并导致曲霉肿，这是曲霉 在支气管或肺腔中移生而形成的最常见类型的真菌球。

术语“肉芽肿”是指含有风湿性肉芽肿，术语“肉芽瘤”是指单 核炎性细胞的任何小结划界的聚集，或类似于上皮细胞的改变的巨噬 细胞的集合，通常环绕着一个淋巴细胞轮缘，具有常见于损害周围的 纤维变性。一些肉芽肿含有嗜酸细胞。肉芽肿形成代表着由多种不同 的感染性和非感染性物质引起的慢性炎性反应。有多种这样的肉芽肿 性病症可用式(1.0.0)化合物治疗，例如过敏性肉芽肿性脉管炎，还称 为Churg-Strauss综合征，其是主要涉及肺的一种系统坏死性脉管 炎，通常表现为嗜酸粒细胞增多、肉芽肿反应、以及通常严重的哮喘。 一种相关病症是结节性多动脉炎(PAN)，其表现为多种炎症和破坏性动 脉损伤，并且是一种涉及小和中等尺寸动脉的系统坏死性脉管炎，具 有由影响器官系统、特别是肺的梗塞和瘢痕形成所导致的征状和症 状。可依据本发明治疗的其它嗜酸细胞性病症是影响气道的那些，它 们是由于对与任何式(1.0.0)化合物无关的治疗剂起反应而引起或偶 发的。 8.7 特应性皮炎、荨麻疹、结膜炎、和眼色素层炎

特应性皮炎是一种在具有降低的瘙痒皮肤阈的遗传素因的个体中 发现的慢性炎性皮肤病，通常伴有过敏性鼻炎、枯草热、和哮喘，并 且主要特征为严重瘙痒。特应性皮炎还称为过敏性皮炎，和过敏性或 特应性湿疹。

特应性皮炎(AD)是幼小儿童中最常见的慢性炎性皮肤病，并且10 ％-15％儿童患有该疾病。特应性皮炎通常伴随哮喘和过敏，并因此 称为“特应性三联症”的一个组分，这是因为其经常在患有哮喘和/或 过敏性鼻炎的个体中发生。参见Leung Dym，特应性皮炎：从发病机 理到治疗，R.G.Landes Co.，Austin，Texas，1-226，1996。因此， 与特应性皮炎有关的免疫机能障碍可用是PDE4抑制剂的治疗剂治疗。 例如，据报道环戊苯吡酮、Ro-201724、和旦布茶碱可产生对正常患者 和特应性皮炎患者的人外周血液单核细胞(HPBM)的增殖的浓度相关性 抑制作用。分别参见Torphy等人，Drugs and the Lung，Page and Metzger编著，Raven Press，New York，1994；和O′Brien，Mol. Medicine Today，369，1997。这些研究还证实了特应性皮炎患者的 HPBM增殖性反应对PDE4抑制作用比在正常个体的HPBM中观察到的增 殖更敏感。

表达皮肤淋巴细胞相关性抗原的TH2型细胞因子分泌性T-细胞在 该疾病中的局部IgE反应和嗜酸细胞募集的诱导中起关键作用。在特 应性皮炎中发现的慢性炎症可认为是几个相互依赖的因素的结果，例 如反复或持续的可导致TH2细胞扩张的过敏原暴露。还已经证实了在 特应性皮炎患者的血液中过敏原特应性T-细胞产生增加的IL-4、IL- 5、和IL-3水平的频率增高了。参见Leung Dym等人，“过敏性和免疫 性皮肤病，”JAMA 278(22)1914-1923，1997。这是显著的，因为 IL-4和IL-3引起血管粘着分子-1(VCAM-1)和涉及单核细胞迁移的粘 着分子以及在组织炎症位点内的嗜酸细胞的表达。此外，IL-5是嗜酸 细胞激活—特应性皮炎的一个常见特征—的一种关键介质。

长期以来已知淋巴细胞和嗜碱细胞中的cAMP浓度增加与这些细胞 释放的介质减少有关，最近据报道，在鼠TH2细胞中作用于H2受体的 组胺能增加cAMP水平和抑制IL-4生成。因此推测在特应性疾病例如 特应性皮炎中存在减弱的肾上腺素能反应或提高的白细胞炎性反应的 PDE4活性。减小的cAMP反应可能是由于具有遗传基础或者是获得性 病症的PDE4活性增强所致。

已经进行了研究以比较得自特应性患者和得自健康志愿者的不同 细胞类型，并且结果表明，特应性细胞中的增强的cAMP-PDE活性与特 应性皮炎中的异常炎性和免疫细胞功能相关。此外，得自特应性白细 胞的PDE4酶对PDE4抑制剂的敏感性比得自正常白细胞的PDE4酶强， 并且已证实了差异最高达14倍。参见Chan和Hanifin，“cAMP磷酸二 酯酶同种型在特应性和正常白细胞中的差别抑制作用，”J.Lab.Clin. Med.，121(1)44-51，1993。在得自用PDE4抑制剂治疗的特应性供 体的外周血液单核细胞的增殖抑制中也看到了增加的敏感性。例如， 已经发现环戊苯吡酮抑制PHA刺激的特应性皮炎PBMC增殖的效力比抑 制PHA刺激的正常PBMC增殖的效力大，其IC50值分别为IC50＝280nM 和IC50＝2600nM。

此外，已经表明，选择性PDE4抑制剂的结构变化范围在降低经由 一定范围的物质例如PAF、花生四烯酸、酵母聚糖活化的血浆、和皮肤 过敏反应蛋白介导的豚鼠中的皮肤嗜酸粒细胞增多方面是有效的。参 见Beasley等人，“合成和评价一系列新的磷酸二酯酶4抑制剂.治疗 哮喘的可能性，”.Bioorg.Med.Chem.Letts.8 2629-2634，1998。 这样的数据表明了PDE4抑制剂治疗嗜酸细胞性皮肤病的用途。这样的 治疗是通过局部给药进行的，例如在临床试验中给20名患者在两侧局 部施用atizoram，治疗8天，结果发现有效地抑制了所测试的所有炎 性参数，这表明获得了既定性又定量的改善效果，同时没有任何不利 的副作用。参见Hanifin等人，“4型磷酸二酯酶抑制剂对于特应性皮 炎具有临床和体外抗炎作用，”J.Invest Dermatol.107 51-56， 1996；还参见Turner等人，“CP-80，633—一种选择性磷酸二酯酶抑 制剂的体内药理性质，”J.Pharmacol.Exp.Ther.278(3)1349-1355， 1996。

因此，式(1.0.0)PDE4抑制剂可用于有益地治疗如上所述的特应 性皮炎。式(1.0.0)化合物的相关治疗应用还在荨麻疹的治疗中产生了 有益结果。荨麻疹是一种通常短暂的涉及上皮的血管反应，代表由毛 细血管扩张和渗透性增加所引起的局部水肿，并且表现为发展成风疹 块或荨麻疹。许多不同的刺激能够引起荨麻疹反应，并且根据起作用 的病因其可分为：免疫介导的、可涉及免疫或非免疫机制的补体介导 的、致荨麻疹物质引起的、物理因素引起的、紧张引起的、或自发性 的荨麻疹。根据发作持续时间，该病症还可称为急性或慢性荨麻疹。 血管水肿是深度皮肤或皮下或粘膜下组织中的相同反应。

可用式(1.0.0)化合物治疗的最常见类型的荨麻疹是胆碱能荨麻 疹，其特征为存在被红斑区域环绕着的明显的点状风疹块，据信这是 非免疫性超敏反应，其中从副交感神经或运动原神经末端释放的乙酰 胆碱引起肥大细胞释放介质，并且是被劳力、紧张、或增加的环境热 量引起的；寒性荨麻疹，这是由冷的空气、水或物体引起的荨麻疹， 并且存在两种形式：与发热、关节痛、和白细胞增多有关的正染色体 显性形式，存在的损害是红斑、象燃烧一样的丘疹和斑点，和更常见 的获得性形式，该形式通常是自发性的和自身限制性的；接触性荨麻 疹，这是由于暴露于可迅速吸收的致荨麻疹物质而引起的局部或扩散 的短暂的风疹块-和-潮红反应；巨大荨麻疹，这是血管水肿；和丘疹 性荨麻疹，这是代表对昆虫咬伤的过敏反应的持续的皮肤出疹。

因此，式(1.0.0)PDE4抑制剂可用于有益地治疗各种类型的上述 荨麻疹。式(1.0.0)化合物的相关治疗应用还在多种眼科应用、特别是 结膜炎和眼色素层炎的治疗中产生了有益结果。

结膜是限定眼睑并覆盖巩膜的暴露表面的柔弱的膜。结膜炎是一 般由与溢液有关的结膜充血构成的结膜炎症。可用式(1.0.0)化合物治 疗的最常见类型的结膜炎是由紫外光产生的光化性结膜炎；急性卡他 性结膜炎，这是与感冒或粘膜炎有关的感染性结膜炎，并且特征是活 体充血、水肿、半透明损失、和排出粘液或脓性粘液；急性触染性结 膜炎，这是一种粘液脓性流行性结膜炎，是由流感嗜血杆菌引起的， 具有与急性卡他性结膜炎相同的症状，并且还称为“传染性结膜炎”； 过敏性结膜炎，其是枯草热的一个构成组分；特应性结膜炎，这是由 空中传播的过敏原例如花粉、粉尘、孢子、和动物皮屑引起的即发型 过敏性结膜炎；慢性卡他性结膜炎，这是仅具有轻度充血和粘液排出 的轻度慢性结膜炎；化脓性结膜炎，这是由细菌或病毒，特别是淋球 菌、脑膜炎球菌、和链球菌引起的急性结膜炎，并且特征是严重的结 膜炎症和排出很多脓汁；和春季结膜炎，这是原因未明的季节性发生 的两侧结膜炎，影响儿童、尤其是男孩，并且特征是失去光泽的丘疹 和浓厚的胶状渗出液。因此，式(1.0.0)PDE4抑制剂可用于有益地治 疗如上所述的各种类型的结膜炎。式(1.0.0)化合物的相关治疗应用还 在眼色素层炎的治疗中产生了有益结果。

眼色素层是眼睛的血管中间覆盖层或眼睛的被膜，包括虹膜、睫 状体、和脉络膜。眼色素层炎是所有或部分眼色素层的炎症，并通常 涉及眼睛的其它被膜，即巩膜和角膜、以及视网膜。可用式(1.0.0) 化合物治疗的最常见类型的眼色素层炎是前眼色素层炎，其是涉及虹 膜和/或睫状体的结构的眼色素层炎，包括虹膜炎、睫状体炎、和虹膜 睫状体炎；肉芽肿性眼色素层炎，其是葡萄膜任何部分、但是特别是 后面部分的眼色素层炎，特征是被淋巴细胞包围的上皮样细胞和巨细 胞的聚集小结；非肉芽肿性眼色素层炎，其是葡萄膜的前面部分，即 虹膜和睫状体的炎症；晶状体抗原性眼色素层炎，这是一种晶状体引 起的眼色素层炎，是类似于交感性眼炎的严重的前眼色素层炎，在囊 外晶状体手术或被膜的其它创伤后数周、甚至是数月观察到；和后眼 色素层炎，这是涉及眼睛后面部分的眼色素层炎，包括脉络膜炎和脉 络膜视网膜炎。因此，式(1.0.0)PDE4抑制剂可用于有益地治疗如上 所述的各种类型的眼色素层炎。 8.8 牛皮癣

牛皮癣是一种常见的慢性、鳞屑性皮肤病，具有多基因遗传和起 伏病程，特征是微脓肿和海绵状脓疱，以及不同大小的红斑、干燥、 和脱皮斑。牛皮癣是常见的皮肤病，影响着大约2％人口，在美国每年 有一百五十万以上的患者要求医师给其治疗。牛皮癣经常复发，并且 在某些情况下可使人变得非常衰弱。牛皮癣的病因是未知的，但是似 乎是具有遗传素因的自身免疫性疾病。

在患病的皮肤区域，牛皮癣涉及严重的T-细胞渗入，在真皮中是 CD4+淋巴细胞，在表皮中是CD8+淋巴细胞。这些淋巴细胞分泌IL-2、 IFN-γ、和TNF-α，它们改变角质细胞增殖和分化。此外，5％-10％ 的牛皮癣患者发展成牛皮癣性关节炎，其症状与类风湿性关节炎非常 类似。由于PDE4抑制剂具有如上所述的广谱的抗炎活性，因此这样的 抑制剂可有益地用于治疗牛皮癣。

已经证实了，用PDE4抑制剂Ro 20-1724处理初生组织中的表皮 基底细胞会导致cAMP浓度增加3倍。还已经表明，用Ro 20-1724处 理牛皮癣表皮切片和角膜刀牛皮癣表皮切片导致cAMP浓度比对照有非 常显著的增加。具体来说，在角膜刀牛皮癣表皮切片中已经观察到cAMP 浓度增加了1395％。还已经表明，经由局部或系统施用的PDE4抑制 剂能抑制多种介质的炎性反应。例如，据表明，以每只耳朵低至0.03mg 的剂量局部施用的环戊苯吡酮能抑制小鼠中巴豆油引起的耳朵炎症。 已经在比较其与载体的有效性的两个双盲实验中研究了选择性PDE4抑 制剂Ro 20-1724，结果表明其改善了牛皮癣损伤，同时没有不利的系 统或皮肤作用。 8.9 多发性硬化和其它炎性自身免疫性疾病

硬化是硬结或硬化，并且尤其是指炎症、结缔组织形成增加和间 隙物质疾病的部分硬化。术语“硬化”主要是指由于结缔组织沉积而 导致的神经系统硬化，或者指血管硬化。多发性硬化[MS]是这样的疾 病，其是中枢神经系统的整个白质、有时延伸到灰质的不同大小区域 的脱髓鞘病灶，导致虚弱、共济失调、感觉异常、语言障碍、和视觉 障碍。多发性硬化是未知病因的疾病，其具有包括许多次缓解和复发 的长期病程。

多发性硬化是自身免疫性疾病，除了导致慢性炎症和脱髓鞘以 外，它们还导致中枢神经系统内神经胶质增生。有几种疾病亚型，包 括原发性进行性多发性硬化、和复发性缓解性多发性硬化。这些疾病 亚型根据疾病的病程、所涉及的炎症的类型、以及通过使用磁共振成 像(MRI)来彼此区分开。在多发性硬化的病程期间，基础疾病机制也可 以发生改变，后期基于炎症的过程可被涉及脱髓鞘和轴索损害的过程 代替。参见Weilbach和Gold，“对于多发性硬化的改进治疗，什么是 治疗靶？”CNS Drugs 11 133-157，1999。

对于多发性硬化，炎性损害位于、但是主要遍布于中枢神经系统 的整个白质内，虽然脱髓鞘的特征硬化斑是该疾病的标志。而脱髓鞘 的发展是由少突神经胶质细胞坏死引起的，并且脱髓鞘与主要由T-细 胞和巨噬细胞组成的渗透物有关，T-细胞和巨噬细胞与局部细胞例如 星形细胞、小神经胶质细胞和微血管脑内皮细胞一起表达II类主要组 织相容性复合物(MHC)。因此这些细胞涉及抗原呈递和炎性反应，并且 已经在多发性硬化患者的脑组织中鉴定了大量促炎性细胞因子，包括 TNF-α、TNF-β、IL-1、IL-6和IFN-γ，并且其存在一般与活性损害有 关。TNF-α已经特别成为关注的焦点，因为其介导体外髓磷脂和少突神 经胶质细胞损害，引起星形细胞表达表面粘性分子，并且与血脑屏障 的瓦解有关。

已经使用动物模型证实了TNF-α在多发性硬化中的作用，例如， 在实验过敏性脑脊髓炎(EAE)中，已表明施用抗-TNF抗体或可溶性TNF 受体提供了保护作用。参见Selmaj等人，“通过可溶性肿瘤坏死因子 预防实验性自身免疫性脑脊髓炎的慢性复发，”J.Neuroimmunol.56 135-141，1995。据报道，在TNF-a mRNA与EAE进展之间有直接的相 互关系。参见Reeno等人，“在患有实验性过敏性脑脊髓炎的小鼠的中 枢神经系统中，常驻小神经胶质细胞和渗入的白细胞引起TNF-α表达： 通过Th1细胞因子调节，”J..Immunol.154 944-953，1995。表明 TNF-α是多发性硬化介质的其它证据是，在该疾病的病程期间，多发性 硬化患者的脑脊髓液中的TNF-α浓度增加了。此外，在中枢神经系统 中过度表达TNF-α的转基因小鼠已表现出自发的脱髓鞘征状，而转基 因TNF-α剔除小鼠表现出保护作用。参见Probert等人，“表现出肿瘤 坏死因子α的中枢神经系统特异性表达的转基因小鼠中的自发性炎性 脱髓鞘疾病，”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92 11294-11298，1995； 和Liu等人，“TNF是自身免疫介导的脱髓鞘作用中的有效抗炎细胞因 子，”Nature Med.4 78-83，1998。

因为PDE4抑制剂还能减少TNF-α，所以它们可有益地用于治疗多 发性硬化，这是由于如上所述TNF-α在介导多发性硬化中起关键作用。 例如，在实验性过敏性脑脊髓炎的狨模型中，经发现环戊苯吡酮能抑 制临床征状的出现和消除MRI成象中的异常。在测试环戊苯吡酮对SJL 小鼠中慢性复发性实验过敏性脑脊髓炎的作用的实验中，发现环戊苯 吡酮改善了该模型中的临床征状和病理改变。参见Genain等人，“通 过cAMP-特异性磷酸二酯酶预防非人灵长目动物中的自身免疫性脱髓 鞘，”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92 3601-3605，1995；和Sommer 等人，“抑制4型磷酸二酯酶在慢性自身免疫性脱髓鞘疾病中的治疗潜 力，”J.Neuroimmunol.79 54-61，1997。

除了抑制PDE4活性和TNF-a生成以外，式(1.0.0)化合物还具有 作为免疫抑制剂的活性，并且可尤其用于其中炎症是自身免疫性疾病 组成部分、或其中炎症是自身免疫性疾病的一部分病因、或其中炎症 涉及自身免疫性疾病的自身免疫性疾病。或者，式(1.0.0)化合物是可 用于治疗其中自身免疫性反应是炎性疾病组成部分、或其中自身免疫 性反应是炎性疾病一部分病因、或其中自身免疫性反应涉及炎性疾病 的炎性疾病的抗炎剂。因此，式(1.0.0)化合物可用于治疗在上文中详 细讨论的多发性硬化。

可用包含式(1.0.0)化合物的治疗剂治疗的其它自身免疫性/炎性 疾病包括但不限于自身免疫性血液疾病例如溶血性贫血、成形性贫 血、纯红细胞性贫血、和自发性血小板减少性紫癜；全身性红斑狼疮； 多软骨炎；硬皮病；韦格内氏肉芽肿病；皮肤肌炎；慢性活动性肝炎； 重症肌无力；Stevens-Johnson综合征；自发性口炎性腹泻；自身免 疫性肠病例如溃疡性结肠炎和局限性回肠炎；内分泌性眼病；格雷夫 斯氏病；肉样瘤病；牙槽炎；慢性过敏性肺炎；原发性胆汁性肝硬变； 青少年糖尿病(I型糖尿病)；前眼色素层炎和肉芽肿性(后)眼色素层 炎；干性角膜结膜炎和流行性角膜结膜炎；弥散性间质性肺纤维变性 (间质性肺纤维变性)；自发性肺纤维变性；囊性纤维变性；牛皮癣性 关节炎；具有和不具有肾病综合征的肾小球性肾炎，包括急性肾小球 性肾炎、自发性肾病综合征、和最小改变肾病；炎性/高增殖性皮肤病， 包括上文详细讨论过的牛皮癣和特应性皮炎，接触性皮炎、过敏性接 触性皮炎、良性家族性天疱疮、红斑性天疱疮、落叶状天疱疮、和寻 常天疱疮。

此外，式(1.0.0)化合物可用作用于预防器官移植术后同种异体移 植物排斥的免疫抑制剂这样的器官一般包括骨髓、肠、心脏、肾、肝 脏、肺、胰腺、皮肤和角膜的组织。 8.10 炎性肠病

溃疡性结肠炎(UC)是结肠、主要是粘膜和粘膜下层中的慢性复发 性溃疡，其原因未明，并在临床上表现为痛性痉挛性腹部疼痛、直肠 出血、和松散地排出血液、脓汁、和粪便颗粒不足的粘液。相关的肠 病包括产生胶原的结肠炎，这是未知病因的一种结肠炎，特征为结肠 上皮下方沉积胶原物质，并表现为痉挛性腹部疼痛，伴有导致水泻的 流体和电解质吸收显著减少；息肉状结肠炎，这是与形成假息肉，即 在溃疡区域之间粘膜的水肿性红肿岛状物有关的溃疡性结肠炎；和透 壁性结肠炎，这是整个厚度的肠而不是粘膜和粘膜下层疾病的炎症， 通常形成在临床上类似于溃疡的非干酪化风湿性肉芽肿，但是该溃疡 通常是纵向或在深处，该疾病经常是节段性的，经常形成狭窄，并且 瘘管、特别是在会阴部的瘘管是时常发生的并发症。

局限性回肠炎(CD)是病因未明的慢性肉芽肿性炎症，其涉及胃肠 道的任何部分，但是通常涉及终部回肠，肠壁形成瘢痕和增厚，经常 导致肠梗阻，和形成瘘管与脓肿，并且治疗后具有高复发率。溃疡性 结肠炎、局限性回肠炎和上述相关疾病统称为炎性肠病(IBD)。这些疾 病是病因未知的慢性自发性复发性疾病，是免疫介导的，并且已通过 使用动物模型和先进的免疫技术确立了其发病机理。参见Bickston和 Caminelli，“IBD治疗的最近进展，”Curr.Opin.Gastroenterol.14 6-10，1998；和Murthy等人，“炎性肠病：一波新的治疗，”Exp.Opin. Ther。Patents 8(7)785-818，1998。虽然溃疡性结肠炎的发病率已 保持相对稳定，但是局限性回肠炎的发病率已显著增高。

炎性肠病的当前治疗包括5-氨基水杨酸、皮质类固醇、和免疫调 节剂例如硫唑嘌呤、6-巯基嘌呤、和甲氨蝶呤。这些治疗剂具有很多 不利副作用，并且不改变疾病自身，因此一直需要更有效的治疗剂。 式(1.0.0)化合物能有效地治疗炎性肠病，这是因为它们能够抑制 TNF-α生成，而TNF-α引起炎性肠病中的免疫细胞激活、增殖、和介质 释放。参见Radford Smith和Jewell，“细胞因子和炎性肠病。” Baillieres Clin.GasteroenteroL 10 151-164，1996。还已经在 炎性肠病患者的粪和肠粘膜中检测到了TNF-α。此外，使用TNF单克 隆抗体在局限性回肠炎中的早期临床实验已显示了很大的希望。

如上所述，用多种介质刺激外周血液单核细胞后，选择性PDE4抑 制剂对于在体外和体内抑制TNF-α从这些细胞中释放有显著作用。已 经表明，当在大鼠结肠炎模型中测试时，选择性PDE4抑制剂具有良好 作用。另外，已经证实了与强的松龙相比，环戊苯吡酮和选择性PDE4 抑制剂LAS31025具有良好效果。据表明这两种测试化合物都能改善出 血和炎性指标。参见Puig等人“在葡聚糖硫酸钠引起的大鼠结肠炎中 磷酸二酯酶4抑制剂的治愈效果，”Gastroenterology 114(4)A1064， 1998。其它研究人员已经使用其它模型来证实选择性PDE4抑制剂提供 胃肠道保护的能力。例如，据表明脂多糖在大鼠中引起的红细胞外渗 和在狗中引起的肠灌注过低可被选择性PDE4抑制剂环戊苯吡酮和旦布 茶碱减弱。参见Cardelus等人，“通过磷酸二酯酶抑制剂抑制LPS在 大鼠中引起的肠红细胞外渗和在狗中引起的肠系膜灌注过低，”Eur.J. Pharmacol.299 153-159，1996；和Cardelus等人，“旦布茶碱抗内 毒素引起的肠增生的保护作用，”Met.Find.Exp.Clin.PharmacoL 17(Suppl.A)142，1995。 8.11 脓毒性休克、肾衰竭、恶病质、和感染

脓毒性休克是与压倒性感染、主要是与革兰氏阴性菌感染有关的 休克，虽然其也可能是由其它细菌、病毒、真菌和原生动物引起。据 信脓毒性休克是内毒素或感染物的其它产物作用于血管系统，引起血 液停留在毛细血管和静脉中所致。还涉及补体和激肽系统的激活，以 及组胺、细胞因子、前列腺素、和其它介质的释放。

据表明，在内毒素引起的急性肾衰竭大鼠模型中，以10μg/kg/ 分钟的剂量在治疗后施用的选择性PDE4抑制剂Ro-201724显著地增加 了尿cAMP排泄，显著地减弱了内毒素引起的肾血管阻力增加和肾血流 以及肾小球过滤速度减小。据表明Ro-201724还提高了内毒素处理大 鼠的存活率。参见Carcillo等人，Pharmacol.Exp.Ther.279 1197， 1996。还在脓毒性休克患者中实验了己酮可可碱。在该实验中，选择 满足脓毒性休克标准的24名个体，其中的12名在24小时内以以1 mg/kg/小时的剂量接受己酮可可碱，另外12名作为对照组。24小时 后，发现治疗组中的TNF-α水平显著下降了，而IL-6水平显著增加了。

在另一实验中，已经表明，用己酮可可碱以5-50mg/kg i.p.3× 治疗，或者用选择性PDE4抑制剂环戊苯吡酮以10-30mg/kg i.p.3× 治疗，和用旦布茶碱以0.1-3mg/kg i.p.3×治疗减轻了大鼠中脂 多糖引起的肠红细胞外渗，并且旦布茶碱抑制脂多糖引起的肠系膜血 流下降的效力比己酮可可碱强100倍，同时没有影响肾血流或心脏指 数。参见Cardelus等人，见上文，Eur.J.Pharmacol。

肾衰竭是在正常负载条件下在正常血浆水平下不能排泄代谢物， 或者肾脏在正常摄取条件下不能保留电解质。在急性形式中，其表现 为尿毒症和通常是少尿或无尿，并伴有高钾血和肺水肿。在选择性PDE4 抑制剂的上述活性基础上，已证实了选择性PDE4抑制剂可用于治疗肾 衰竭、尤其是急性肾衰竭。参见Begany等人，“Ro-20-1724抑制IV 型磷酸二酯酶的作用减轻了内毒素引起的急性肾衰竭，”J.Pharmacol. Exp.Thera.278 37-41，1996。还参见属于Pittsburgh大学的WO 98/00135。因此，式(1.0.0)化合物可用于治疗肾衰竭、特别是急性肾 衰竭。

恶病质是特征为一般不健康和营养不良的深度显著全身病症状 态。恶病质可能是多种成因因素的最终结果，例如其可能是被任何一 种不同的单细胞生物或微生物，包括细菌、病毒、真菌、和原生动物 感染所致。疟疾性恶病质是代表性的，并包括一组由严重疟疾先前发 作所致的慢性征状，主要征状是贫血、淡黄皮肤、黄色巩膜、脾大、 和肝大。恶病质的另一原因是体液或其它器官功能缺乏或降低，例如 垂体性恶病质包括一连串的由于垂体功能丧失所导致的症状，包括肺 痨、性功能损失、脑垂萎缩、心搏徐缓、低体温、无情感、和昏迷。 尿毒症性恶病质是与沉重期肾衰竭的其它系统症状有关的恶病质。心 脏恶病质包括心脏病引起的消瘦。恶病质肾上腺机能障碍或阿狄森氏 病是一种特征为低血压、体重下降、食欲缺乏、和虚弱的病症，其是 由肾上腺皮质激素不足引起的。是由于顿挫性结核或自身免疫引起的 肾上腺皮层破坏导致了醛固酮和皮质醇不足。

恶病质可能是不同类型疾病的结果。癌性恶病质包括在恶性肿瘤 中发现的虚弱性、衰弱性状态。恶病质还可能是人免疫缺陷病毒(HIV) 感染的后果，并包括通常称为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的症状。 式(1.0.0)化合物可用于治疗上述不同类型的恶病质，这是因为它们能 下调或抑制TNF-α释放。用多种介质刺激外周血液单核细胞后，本发 明选择性PDE4抑制剂在抑制TNF-α从这些细胞中释放方面有显著作 用。TNF-α释放参与其病因涉及或包括致病性、即不健康的过度或失控 的TNF-α释放的疾病或病症或者在这些疾病或病症中起介导作用。

式(1.0.0)PDE4抑制性化合物还可用于治疗感染，尤其是病毒感 染，其中这样的病毒增加其宿主中TNF-α的生成，或者这样的病毒对 其宿主中的TNF-α上调敏感，这样其复制或其它病毒活性受到不利影 响。这样的病毒包括例如HIV-1、HIV-2、和HIV-3；巨细胞病毒；CMV； 流感病毒；腺病毒；和疱疹病毒，尤其是带状疱疹病毒和单纯性疱疹 病毒。

式(1.0.0)PDE4抑制性化合物还可用于治疗酵母和真菌感染，其 中所述酵母和真菌对其宿主中的TNF-α上调敏感或者引起TNF-α生 成。可用该方式治疗的特定疾病是真菌性脑膜炎。当与为治疗系统酵 母和真菌感染所选择的其它药物合用、即联合施用时，式(1.0.0)化合 物也提供了有益效果。所选的这样的药物包括但不限于多粘菌素，例 如多粘菌素B；咪唑类，例如克霉唑、益康唑、咪康唑、和酮康唑；三 唑类，例如氟康唑和itranazole；和两性霉素，例如两性霉素B和脂 质体两性霉素B。在本文中提及式(1.0.0)化合物和为治疗酵母和真菌 感染所选的药物时所用的术语“联合施用”是指并包括(a)当配制在一 个剂型中时将这样的化合物和药物同时施用给个体；(b)当彼此分开配 制在单独的剂型中时将这样的化合物和药物基本上同时施用给个体； 和(c)当彼此分开配制时将这样的化合物和药物顺序施用给个体，和采 用较长时间间隔的接连施用。 8.12  肝脏损伤

除了TNF-α的上述不利作用以外，其还引起人中的肝脏衰竭，这 是已经在多种动物模型中表明的一种现象。例如，在T-细胞介导的肝 脏衰竭急性模型中，据表明，在用伴刀豆球蛋白A或葡萄球菌内毒素B 攻击前30分钟以0.1-10mg/kg i.p.施用的环戊苯吡酮显著地降低 了血浆TNF-α和INF-γ浓度，因此其还显著地提高了IL-10水平。参见 Gantner等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.280 53，1997。在该同 一实验中，已证实了环戊苯吡酮能抑制伴刀豆球蛋白A引起的IL-4释 放。还在该实验中评价了肝脏特异酶ALT、AST、和SDH的血浆活性， 因为其水平的任何增加都将意味着大量的肝细胞破坏。还已经发现， 在用环戊苯吡酮以0.1-10mg/kg i.p.预治疗的接受伴刀豆球蛋白A 的幼小小鼠或接受半乳糖胺/葡萄球菌内毒素B的半乳糖胺致敏的小鼠 中，环戊苯吡酮以剂量依赖性方式抑制上述血浆酶活性。因此，式 (1.0.0)化合物可用于治疗T-细胞病症例如肝脏衰竭。 8.13 肺动脉高血压

已知水解血管舒张性第二信使cAMP和cGMP的磷酸二酯酶活性可 被低氧症引起的肺动脉高血压(HPH)增加。低氧症是供给组织的氧减 少，低于生理水平，尽管组织灌注了足够的血液。所导致的肺动脉高 血压的特征是肺动脉循环内的血压增高，即高于30mmHg的收缩压和 高于12mmHg的舒张压。在使用从正常大鼠和患有低氧症引起的肺动 脉高血压的大鼠中分离的肺动脉环的模型中，已经表明，选择性PDE4 抑制剂环戊苯吡酮加强了异丙肾上腺素和福斯高林的弛缓活性。用甲 氰吡酮—一种选择性PDE3抑制剂观察到了相同作用，由此支持了抑制 PDE3和PDE4以显著提高低氧症引起的肺动脉高血压中的肺动脉松 弛。参见Wagner等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.282 1650，1997。 因此，式(1.0.0)化合物可用于治疗肺动脉高血压、尤其是低氧症引起 的肺动脉高血压。 8.14  骨损失疾病

更经常称为骨质疏松的骨损失疾病是导致具有最小创伤的骨折的 低骨质和微体系结构瓦解的病症。继发性骨质疏松是由于系统疾病或 药物例如糖皮质激素引起的。已经研究的原发性骨质疏松应当视为包 括两种病症：由于绝经期雌激素不足引起的小梁骨损失的I型骨质疏 松，和由于长期重构不足、饮食不充分、和甲状腺旁轴随着年龄激活 引起的骨密质和小梁骨损失的II型骨质疏松。成人骨质的主要调质包 括身体活动、生殖内分泌状态、和钙摄取，并且骨的最佳保持要求在 所有三个区域中的充足。

已经证实了选择性PDE4抑制剂可用于有益地治疗骨损失疾病、特 别是骨质疏松。已经在骨髓培养系统中研究了旦布茶碱对Walker 256/S-携带大鼠中的骨质疏松和矿化的小结组织以及破骨细胞样细胞 形成的作用。已经发现，连续口服施用旦布茶碱能抑制Walker 256/S- 携带大鼠股骨的骨质密度下降，并恢复股骨干骺端的骨质和以及每个 小梁表面上的破骨细胞和成骨细胞数目。已经发现，施用旦布茶碱可 导致体外骨髓培养系统中的矿化小结的数目增加和破骨细胞样细胞数 目的减少。这些有益作用是PDE4抑制特异性的，并且被二丁酰基cAMP 模拟，这表明PDE4同工酶在经由cAMP的骨更新中起重要作用。参见 Miyamoto等人，Biochem.PharmacoL 54 613，1997；Waki等人， “XT-44—一种磷酸二酯酶4抑制剂在培养物中的成骨和破骨中的作用 及其在大鼠骨质疏松模型中的作用，”Jpn.J.Pharmacol.79 477- 483，1999；和Miyamoto的JP 9169665(1997)。所以，式(1.0.0) 选择性PDE4抑制剂可用于治疗涉及骨损失的疾病、特别是骨质疏松。 8.15  CNS病症

PDE4选择性抑制剂环戊苯吡酮最初是作为抗抑郁剂开发的，并继 续在该适应症的临床试验中进行了研究。此外，还已证实了选择性PDE4 抑制剂在其它中枢神经系统病症中提供了有益作用，包括帕金森氏病 Hulley等人，“IV型磷酸二酯酶抑制剂在体内减轻了黑质神经元中的 MPTP毒性，”Eur.J.Neurosci.7 2431-2440，1995；以及学习和 记忆削弱，Egawa等人，“环戊苯吡酮及其旋光异构体磷酸二酯酶4抑 制剂减轻了大鼠中东莨菪碱引起的学习和记忆削弱，”Jpn.J. Pharmacol.75 275-281，1997；Imanishi等人，“环戊苯吡酮对啮 齿动物中实验诱导的学习和记忆削弱的改善作用，”Eur.J.Pharmacol. 321 273-278，1997；和Barad等人，“环戊苯吡酮—一种IV型特异 性磷酸二酯酶抑制剂促进建立长期持续的记忆增强和改善，”Proc. Natl.Acad.Sci.USA 95 15020-15025，1998。

PDE4抑制剂治疗迟发型运动障碍和药物依赖的应用已经在现有技 术WO 95/28177和JP 92221423(1997)中公开，二者都属于Meiji Seika Kaisha Ltd。已经发现PDE4同工酶在中脑神经元中控制多巴 胺生物合成中起主要作用；因此，PDE4抑制剂可用于治疗与中脑神经 元内和周围的多巴胺有关或由其介导的病症和疾病，Yamashita等人， “环戊苯吡酮—一种选择性4型磷酸二酯酶抑制剂显著地增强了原始 培养的大鼠中脑神经元中的福斯高林引起的多巴胺生物合成增加，” Jpn.J.Pharmacol.75 91-95，1997。

式(1.0.0)PDE4抑制性化合物还可用于治疗动脉硬化性痴呆和皮 质下性痴呆。还称为血管性痴呆和多梗塞性痴呆的动脉硬化性痴呆是 具有一系列小发作、和脑血管疾病引起的神经病缺陷的不规则分布形 式的逐步式恶化过程。皮质下性痴呆是由影响皮质下脑结构的损伤引 起的，并且特征是记忆损失，加工信息或形成智力反应的能力迟钝。 包括含有亨廷顿氏舞蹈病、Wilson′s病、震颤麻痹、和丘脑萎缩的痴 呆。 8.16  其它治疗应用

已经证实了PDE4抑制剂可用于治疗局部缺血再灌注损伤，Block 等人，“在大鼠中用环戊苯吡酮延迟治疗保护了脑缺血后不发生神经元 损伤，”NeuroReport 8 3829-3832，1997和Belayev等人“通过IV 型磷酸二酯酶抑制剂BBB022抗病灶脑缺血中的血脑屏障瓦解的保护 作用：一个定量实验，”Brain Res.787 277-285，1998；用于治疗 自身免疫性糖尿病，Liang等人，“磷酸二酯酶抑制剂己酮可可碱和环 戊苯吡酮预防NOD小鼠中的糖尿病，”Diabetes 47 570-575，1998； 用于治疗视网膜自身免疫性，Xu等人，“IV型磷酸二酯酶抑制剂环戊 苯吡酮在EAU中的保护作用：保护作用与IL-10-诱导活性无关，” Invest.Ophthalmol.Visual Sci.40 942-950，1999；用于治疗 慢性淋巴细胞性白血病，Kim和Lerner，“4型环腺苷一磷酸磷酸二酯 酶作为慢性淋巴细胞白血病的治疗剂，”Blood 92 2484-2494，1998； 用于治疗HIV感染，Angel等人，“环戊苯吡酮—一种特异性IV型磷 酸二酯酶抑制剂是HIV-1复制的有效抑制剂，”AIDS 9 1137-1144， 1995和Navarro等人，“抑制IV型磷酸二酯酶抑制了原发T细胞中的 1型免疫缺陷病毒复制和细胞因子生成：涉及NF-kappaB和NFAT，”J. Virol.72 4712-4720，1998；用于治疗红斑狼疮，Fujisawa Pharm. Co.Ltd.的JP 10067682(1998)；用于治疗肾脏和输尿管疾病， Schering AG的DE 4230755(1994)；用于治疗泌尿生殖器和胃肠道 疾病，Schering AG的WO 94/06423；和治疗前列腺疾病，Porssmann 的WO 99/02161和Stief的WO 99/02161。

根据上面的描述，应当理解，式(1.0.0)化合物可用于有益地治疗 任何一种或多种选自下列的疾病、障碍、和病症：

-任何类型、病因、或发病机理的哮喘；或选自下列的哮喘：变 应性哮喘；非变应性哮喘；过敏性哮喘；特应性、支气管、IgE-介导 的哮喘；支气管哮喘；特发性哮喘；真性哮喘；由病理生理障碍引起 的内因性哮喘；由环境因素引起的外源性哮喘；未知或不明显原因的 特发性哮喘；非变应性哮喘；支气管炎哮喘；气肿性哮喘；锻炼引起 的哮喘；职业性哮喘；由细菌、真菌、原生动物、或病毒感染引起的 感染性哮喘；非过敏性哮喘；初发哮喘；哮喘婴儿综合征；

-慢性或急性支气管缩小；慢性支气管炎；小气道堵塞；和肺气 肿；

-任何类型、病因、或发病机理的堵塞性或炎性气道疾病；或选 自下列的堵塞性或炎性气道疾病：哮喘；尘肺病；慢性嗜酸细胞性肺 炎；慢性堵塞性肺病(COPD)；包括慢性支气管炎、肺气肿或与其有关 的呼吸困难的COPD；特征是不可逆进行性气道堵塞的COPD；成人呼吸 窘迫综合征(ARDS)，和其它药物治疗后的气道高反应性的恶化；

-任何类型、病因、或发病机理的尘肺病；选自下列的尘肺病： 矾土肺或铝土矿劳动者疾病；煤矽肺或矿工哮喘；石棉肺或蒸汽管工 哮喘；石末肺或石末沉着病；吸入鸵鸟羽毛尘埃引起的驼鸟毛尘肺； 吸入铁粒引起的肺铁末沉着病；矽肺或磨床工疾病；棉屑肺或棉尘哮 喘；和滑石粉尘肺病；

-任何类型、病因、或发病机理的支气管炎；或选自下列的支气 管炎：急性支气管炎；急性喉气管支气管炎；花生仁吸入性支气管炎； 卡他性支气管炎；纤维蛋白性支气管炎；干性支气管炎；感染性哮喘 性支气管炎；增生性支气管炎；葡萄球菌或链球菌性支气管炎；和肺 泡性支气管炎；

-任何类型、病因、或发病机理的支气管扩张；或选自下列的支 气管扩张：圆柱状支气管扩张；囊状支气管扩张；梭形支气管扩张； 毛细支气管扩张；囊性支气管扩张；干性支气管扩张；和滤泡性支气 管扩张；

-季节性过敏性鼻炎；或任何类型、病因、或发病机理的窦炎； 或选自下列的窦炎：化脓性或非化脓性窦炎；急性或慢性窦炎；和筛 骨、额、上颌、或蝶骨窦炎；

-任何类型、病因、或发病机理的类风湿性关节炎；或选自下列 的类风湿性关节炎：急性关节炎；急性痛风性关节炎；慢性炎性关节 炎；变性关节炎；感染性关节炎；Lyme关节炎；增殖性关节炎；牛皮 癣性关节炎；和脊椎关节炎；

-痛风、和与炎症有关的发热和疼痛；

-任何类型、病因、或发病机理的嗜酸细胞相关病症；或选自下 列的嗜酸细胞相关病症：嗜酸粒细胞增多；肺渗滤嗜酸粒细胞增多； Loffler′s综合征；慢性嗜酸细胞性肺炎；热带肺嗜酸粒细胞增多； 支气管肺炎性曲霉病；曲霉肿；含有嗜酸细胞的风湿性肉芽肿；过敏 性肉芽肿性脉管炎或Churg-Strauss综合征；结节性多动脉炎(PAN)； 和系统性坏死性脉管炎；

-特应性皮炎；或过敏性皮炎；或者过敏性或特应性湿疹；

-任何类型、病因、或发病机理的荨麻疹；或选自下列的荨麻疹： 免疫介导的荨麻疹；补体介导的荨麻疹；致荨麻疹物质引起的荨麻疹； 物理因素引起的荨麻疹；紧张引起的荨麻疹；自发性荨麻疹；急性荨 麻疹；慢性荨麻疹；血管性水肿；胆碱能性荨麻疹；正染色体显性形 式或获得形式的感冒性荨麻疹；接触性荨麻疹；巨大荨麻疹；和丘疹 性荨麻疹；

-任何类型、病因、或发病机理的结膜炎；或选自下列的结膜炎： 光化性结膜炎；急性卡他性结膜炎；急性触染性结膜炎；过敏性结膜 炎；特应性结膜炎；慢性卡他性结膜炎；化脓性结膜炎；和春季结膜 炎；

-任何类型、病因、或发病机理的眼色素层炎；或选自下列的眼 色素层炎：所有或部分眼色素层炎症；前眼色素层炎；虹膜炎；睫状 体炎；虹膜睫状体炎；肉芽肿性眼色素层炎；非肉芽肿性眼色素层炎； 晶状体抗原性眼色素层炎；后眼色素层炎；脉络膜炎；和脉络膜视网 膜炎；

-牛皮癣；

-任何类型、病因、或发病机理的多发性硬化；或选自下列的多 发性硬化：原发性进行性多发性硬化；和复发性缓解多发性硬化；

-任何类型、病因、或发病机理的自身免疫性/炎性疾病；或选自 下列的自身免疫性/炎性疾病：自身免疫性血液病；溶血性贫血；成形 性贫血；纯红细胞贫血；原发性血小板减少性紫癜；全身性红斑狼疮； 多软骨炎；硬皮病；韦格内氏肉芽肿病；皮肤肌炎；慢性主动性肝炎； 重症肌无力；Stevens-Johnson综合征；自发性口炎性腹泻；自身免 疫性炎性肠病；溃疡性结肠炎；局限性回肠炎；内分泌性眼病；格雷 夫斯氏病；肉样瘤病；牙槽炎；慢性过敏性肺炎；原发性胆汁性肝硬 变；青少年糖尿病或I型糖尿病；前眼色素层炎；肉芽肿性眼色素层 炎或后眼色素层炎；干性角膜结膜炎；流行性角膜结膜炎；弥散性间 质性肺纤维变性或间质性肺纤维变性；自发性肺纤维变性；囊性纤维 变性；牛皮癣性关节炎；具有或不具有肾病综合征的肾小球性肾炎； 急性肾小球性肾炎；自发性肾病综合征；最小变化肾病；炎性/高增殖 性皮肤病；牛皮癣；特应性皮炎；接触性皮炎；过敏性接触性皮炎； 良性家族性天疱疮；红斑性天疱疮；落叶状天疱疮；和寻常天疱疮；

-预防器官移植术后的同种异体移植物排斥；

-任何类型、病因、或发病机理的炎性肠病(IBD)；或选自下列的 炎性肠病：溃疡性结肠炎(UC)；胶原性结肠炎；息肉状结肠炎；透壁 性结肠炎；和局限性回肠炎(CD)；

-任何类型、病因、或发病机理的脓毒性休克；或选自下列的脓 毒性休克：肾衰竭；急性肾衰竭；恶病质；疟疾恶病质；垂体性恶病 质；尿毒症恶病质；心脏恶病质；肾上腺性恶病质或阿狄森氏病；癌 性恶病质；和感染人免疫缺陷病毒(HIV)后所发生的恶病质；

-肝脏损伤；

-肺动脉高血压；和低氧引起的肺动脉高血压；

-骨损失疾病；原发性骨质疏松；和继发性骨质疏松；

-任何类型、病因、或发病机理的中枢神经系统疾病；或选自下 列的中枢神经系统疾病：抑郁症；帕金森氏病；学习和记忆削弱；迟 发性运动障碍；药物依赖；动脉硬化性痴呆；和伴随亨廷顿氏舞蹈病、 Wilson′s病、震颤麻痹、和丘脑萎缩的痴呆；

-感染，尤其是病毒感染，其中这样的病毒提高TNF-α在其宿主 中的产生，或者这样的病毒对其宿主中的TNF-α下调敏感，这样其复 制或其它病毒活动受到不利影响，包括选自下列的病毒：HIV-1、 HIV-2、和HIV-3；巨细胞病毒，CMV；流感病毒；腺病毒；和疱疹病 毒，包括带状疱疹病毒和单纯性疱疹病毒；

-酵母和真菌感染，其中所述酵母和真菌对其宿主中的TNF-α下 调敏感或者引起TNF-α生成，例如真菌脑膜炎；特别是与所选的其它 药物联合使用来治疗系统酵母和真菌感染，包括但不限于多粘菌素， 例如多粘菌素B；咪唑类，例如克霉唑、益康唑、咪康唑、和酮康唑； 三唑类，例如氟康唑和itranazole；和两性霉素，例如两性霉素B和 脂质体两性霉素B。

-局部缺血再灌注损伤；自身免疫性糖尿病；视网膜自身免疫性； 慢性淋巴细胞性白血病；HIV感染；红斑狼疮；肾和输尿管疾病；泌尿 生殖器和胃肠道疾病；和前列腺疾病。 发明详述 9.0  与其它药物和治疗的组合

本发明涉及这样的其中方法，其中式(1.0.0)化合物是在本文所述 的治疗方法中采用的唯一治疗剂，不论它们是单独使用还是更通常与 可药用载体一起使用以制得施用给患者的合适剂型。本发明其它实施 方案涉及式(1.0.0)化合物与一种或多种另外的治疗剂的组合以联合 施用给患者来获得某些特别需要的最终治疗结果。第二种等治疗剂可 以是一种或多种式(1.0.0)化合物，或本领域已知的并且在本文中详细 描述的一种或多种PDE4抑制剂。第二种等治疗剂更通常选自不同种类 的治疗剂。下文中详细描述这些选择。

本文提及式(1.0.0)化合物和一种或多种其它治疗剂时所用术语 “联合施用”、“联合给药”和“与......的组合”是指并包括下列 内容：(a)当这样的组分一起配制成基本上同时将这些组分释放给所述 患者的剂型时，同时将化合物和治疗剂的组合施用给需要治疗的患 者；(b)当这些组分彼此分开配制成独立的基本上同时被所述患者服用 的剂型时，基本上同时将化合物和治疗剂的组合施用给需要治疗的患 者，由此所述组分基本上同时释放给所述患者；(c)当这样的组分彼此 分开配制成以长的时间间隔连续服用的单独的剂型时，将化合物和治 疗剂的组合顺序施用给需要治疗的患者，由此所述组分在不同时间顺 序释放给所述患者；和(d)当这样的组分配制成以控制方式释放所述组 分的单一剂型时，将化合物和治疗剂的组合顺序施用给需要治疗的患 者，由此所述组分在相同和/或不同时间被所述患者同时、连续和/或 重叠地摄取。 9.1  与白三烯生物合成抑制剂：5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂和5-脂氧 合酶激活蛋白(FLAP)拮抗剂

将一种或多种式(1.0.0)化合物与白三烯生物合成抑制剂，即5- 脂氧合酶抑制剂和/或5-脂氧合酶激活蛋白拮抗剂联合使用以形成本 发明的实施方案。如上所述，5-脂氧合酶(5-LO)是代谢花生四烯酸的 两组酶当中的一组，另一组是环加氧酶、COX-1和COX-2。5-脂氧合酶 激活蛋白是一种18kDa的膜结合、花生四烯酸盐结合蛋白，其刺激细 胞花生四烯酸被5-脂氧合酶转化。花生四烯酸转化成5-氢过氧化二十 碳四烯酸(5-HPETE)，并且该路径最终导致生成炎性白三烯；所以5- 脂氧合酶激活蛋白或5-脂氧合酶自身提供了有益地干预该路径的理想 的靶。一种这样的5-脂氧合酶抑制剂是由上文式(0.1.14)代表的弃白 通。可用于和式(1.0.0)化合物形成治疗组合的白三烯合成抑制剂的类 别包括下列物质：

(a)氧化还原活性剂，包括N-羟基脲；N-烷基异羟肟酸；亚硒酸 盐；羟基苯并呋喃；羟基胺；和儿茶酚；参见Ford-Hutchinson等人， “5-脂氧合酶，”Ann.Rev.Biochem.63 383-417，1994；Weitzel 和Wendel，“硒代酶经由过氧化物状况调节白细胞5-脂氧合酶的活 性，”J.Biol.Chem.268 6288-92，1993；Bjornstedt 等人“与 NADPH和哺乳动物硫氧还蛋白还原酶一起培养的亚硒酸盐生成了硒化 物，该硒化物抑制脂氧合酶和改变活性位点铁的电子自旋共振谱，” Biochemistry 35 8511-6，1996；和Stewart等人，“N-羟基脲5- 脂氧合酶抑制剂的结构-活性关系，”J.Med.Chem.40 1955-68， 1997；

(b)已经发现烷基化剂和与SH基团反应的化合物能在体外抑制白 三烯合成；参见Larsson等人，“1-氯-2，4，6-三硝基苯对5-脂氧合酶 活性和细胞白三烯合成的影响，”Biochem.Pharmacol.55 863-71， 1998；和

(c)基于硫代吡喃并吲哚和甲氧基烷基噻唑结构的5-脂氧合酶的 竞争性抑制剂，其可以作为5-脂氧合酶的非氧化还原抑制剂；参见 Ford-Hutchinson等人，见上文；和Hamel等人，“作为有效且口服有 活性的5-脂氧合酶抑制剂的取代的(吡啶基甲氧基)萘-L-739,010的 合成、生物性质、和药动学特征，”J.Med.Chem.40 2866-75，1997。

关于花生四烯酰基hydroxyamate抑制5-脂氧合酶的观察已经导 致发现了临床上有用的选择性5-脂氧合酶抑制剂例如N-羟基脲衍生物 弃白通和ABT-761，二者由式(0.1.14)和(5.2.1)代表：

另一种N-羟基脲化合物是由式(5.2.2)代表的fenleuton (Abbott-76745)：

弃白通包括在Abbott Laboratorie的US 4,873,259(Summers 等人)的范围内，该专利公开了可由式(5.2.3)代表的含有吲哚、苯并 呋喃、和苯并噻吩的脂氧合酶抑制化合物： 其中R1是H、(C1-C4)烷基、(C2-C4)链烯基、或NR2R3，其中R2和R3是 H、(C1-C4)烷基、或OH；X是O、S、SO2、或NR4，其中R4是H、(C1-C6) 烷基、(C1-C6)链烷酰基、芳酰基、或烷基磺酰基；A是(C1-C6)亚烷基、 或(C2-C6)亚链烯基；n是1-5；且Y是H、卤素、OH、CN、卤素取代 的烷基、(C1-C12)烷基、(C2-C12)链烯基、(C1-C12)烷氧基、(C3-C8)环烷 基、(C1-C8)烷硫基、芳基、芳氧基、芳酰基、(C1-C12)芳基烷基、(C2-C12) 芳基烯基、(C1-C12)芳基烷氧基、(C1-C12)芳基硫代烷氧基、或取代的 芳基、芳氧基、芳酰基、(C1-C12)芳基烷基、(C2-C12)芳基烯基、(C1-C12) 芳基烷氧基、(C1-C12)芳基硫代烷氧基的衍生物；其中所述取代基是卤 素、NO2、CN、或(C1-C12)-烷基-烷氧基和-卤素取代的烷基；Z是O或S； 且M是H、可药用阳离子、芳酰基、或(C1-C12)链烷酰基。

相关化合物公开在US 4,769,387(Summers等人)；US 4,822,811 (Summers)；US 4,822,809(Summers和Stewart)；US 4,897,422 (Summers)；US 4,992,464(Summers等人)；和US 5,250,565(Brooks 和Summers)中；每一专利都全文引入本发明以作参考。

将弃白通或其任何上述衍生物与式(1.0.0)化合物组合以形成本 发明的实施方案。

Fenleuton公开在下列文献中US 5,432,194；US 5,446,062；US 5,484,786；US 5,559,144；US 5,616,596；US 5,668,146；US 5,668,150；US 5,843,968；US 5,407,959；US 5,426,111；US 5,446,055；US 5,475,009；US 5,512,581；US 5,516,795；US 5,476,873；US 5,714,488；US 5,783,586；US 5,399,699；US 5,420,282；US 5,459,150；和US 5,506,261；每一专利都全文引入 本发明以作参考。这样的N-羟基脲和相关的5-脂氧合酶与炎性白三烯 合成的抑制剂的其它描述可参见WO 95/30671；WO 96/02507；WO 97/12865；WO 97/12866；WO 97/12867；WO 98/04555；和WO 98/14429。

替波沙林是双重COX/5-LO抑制剂，在体内的半衰期很短，形成两 个系列的混合化合物，分别是式(5.2.4)和(5.2.5)N-羟基脲和异羟 肟酸： 其中R1-R4是H、Cl、CH3、乙基、异丙基、或正丙基；或者R3和R4一 起是(CH2)5或(CH2)2O(CH2)2；且R5是甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三 氟甲基、氯甲基、丙酸乙酯基、苯基、2-呋喃基、3-吡啶基或4-吡啶 基。参见Connolly等人，“环加氧酶和5-脂氧合酶的N-羟基脲和异羟 肟酸抑制剂，”Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 9 979-984，1999。

另一种N-羟基脲化合物是由式(5.2.6)代表的Abbott-79175： Abbott-79175的作用持续时间比弃白通长；Brooks等人，J.Pharm. Exp.Therapeut.272 724，1995。

另一种N-羟基脲化合物是由式(5.2.7)代表的Abbott-85761： Abbott-85761是通过将均匀的、物理稳定的且几乎单分散的制剂气雾 施用来递送到肺中；Gupta等人，“在长耳短腿小猎犬中肺递送5-脂氧 合酶抑制剂Abbott-85761，”International Journal of Pharmaceutics 147 207-218，1997。

将Fenleuton、Abbott-79175、Abbott-85761或其任何上述衍生 物或替波沙林与式(1.0.0)化合物组合以形成本发明的实施方案。

因为阐明了5-LO生物合成途径，所以一直在争论抑制5-脂氧合酶 或拮抗肽或非肽白三烯受体是否更有利。据信5-脂氧合酶抑制剂优于 LT-受体拮抗剂，因为5-脂氧合酶抑制剂阻断所有5-LO产物的作用， 而LT-拮抗剂产生较窄的作用。然而，本发明实施方案包括式(1.0.0) 化合物与下述LT-拮抗剂以及5-LO抑制剂的组合。上文描述的具有与 N-羟基脲和异羟肟酸不同的化学结构的5-脂氧合酶抑制剂也与式 (1.0.0)化合物组合以形成另外的本发明实施方案。这样的不同类别的 实例是式(5.2.8)N-(5-取代的)-噻吩-2-烷基磺酰胺： 其中X是O或S；R′是甲基、异丙基、正丁基、正辛基、或苯基；且R 是正戊基、环己基、苯基、四氢-1-萘基、1-萘基或2-萘基，或被下 列基团单取代或二取代的苯基：Cl、F、Br、CH3、OCH3、SCH3、SO2CH3、 CF3、或异丙基。优选的化合物是式(5.2.9)化合物： 这些化合物的进一步描述可参见Beers等人，“作为5-脂氧合酶有效 抑制剂的N-(5-取代的)噻吩-2-烷基磺酰胺，”Bioorganic & Medicinal Chemistry 5(4)779-786，1997。

另一类不同的5-脂氧合酶抑制剂是2，6-二叔丁基苯酚腙，描述在 Cuadro等人，“作为5-脂氧合酶抑制剂的2，6-二叔丁基苯酚腙的合成 和生物评价，”Bioorganic & Medicinal Chemistry 6 173-180， 1998。这类化合物由式(5.2.10)代表： 其中″Het′是苯并噁唑-2-基；苯并噻唑-2-基；吡啶-2-基；吡嗪-2- 基；嘧啶-2-基；4-苯基嘧啶-2-基；4，6-二苯基嘧啶-2-基；4-甲基 嘧啶-2-基；4，6-二甲基嘧啶-2-基；4-丁基嘧啶-2-基；4，6-二丁基 嘧啶-2-基；和4-甲基-6-苯基嘧啶-2-基。

将式(5.2.8)的N-(5-取代的)噻吩-2-烷基磺酰胺、或式(5.2.10) 的2，6-二叔丁基苯酚腙、或其任何上述衍生物与式(1.0.0)化合物组 合以形成本发明的实施方案。

另一类不同的5-脂氧合酶抑制剂是甲氧基四氢吡喃，Zeneca ZD-2138属于该类抑制剂。ZD-2138由式(5.2.11)代表： ZD-2138在多种动物中有高度选择性和高度口服活性，并且已经通过 口服施用在哮喘和类风湿性关节炎的治疗中进行过评价。关于ZD- 2138及其衍生物的其它详细内容公开在Crawley等人，J.Med. Chem.，35 2600，1992；和Crawley等人，J.Med.Chem.36 295， 1993中。

另一类不同的5-脂氧合酶抑制剂是SmithKline Beecham化合物 SB-210661所属于的类别。SB-210661由式(5.2.12)代表：

另外两种不同但相关的5-脂氧合酶抑制剂包括由Merck Frosst 发现的一系列吡啶基取代的2-氰基萘化合物和一系列2-氰基喹啉化合 物。这两类5-脂氧合酶抑制剂的实例是L-739，010和L-746，530，二 者分别由式(5.2.13)和(5.2.14)代表： 关于L-739，010和L-746，530的详细内容公开在Dube等人，“作为有 效的5-脂氧合酶抑制剂的喹啉：L-746，530的合成与生物性质，” Bioorganic & Medicinal Chemistry 8 1255-1260，1998；和WO 95/03309(Friesen等人)中。

将包括式(5.2.11)的Zeneca ZD-2138的甲氧基四氢吡喃类抑制 剂；或式(5.2.12)的先导化合物SB-210661及其所属类别的抑制剂； 或L739，010所属的一系列吡啶基取代的2-氰基萘和L-746，530所属 的一系列2-氰基喹啉化合物；或任何上述类别的任意上述衍生物与式 (1.0.0)化合物组合以形成本发明的实施方案。

除了5-脂氧合酶以外，在白三烯的生物合成中起重要作用的其它 内源性物质是5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)。与5-脂氧合酶的直接作用 不同，该作用是间接作用。此外，使用5-脂氧合酶激活蛋白拮抗剂来 抑制白三烯合成，并且也与式(1.0.0)化合物联合使用以形成本发明实 施方案。

目前已经用吲哚和喹啉结构合成了与5-脂氧合酶激活蛋白结合并 由此阻断花生四烯酸内源性汇集的化合物；参见Ford-Hutchinson等 人，见上文；Rouzer等人“MK-886—一种有效的特异性白三烯生物合 成抑制剂阻断和逆转实电解质攻击的白细胞中的5-脂氧合酶的膜缔 合，”J.BioL Chem.265 143642，1990；和Gorenne等人，“{(R)-2- 喹啉-2-基-甲氧基)苯基)-2-环戊基乙酸}(BAY x1005)—一种有效的 白三烯合成抑制剂：对人气道中抗-IgE攻击的作用，”J.Pharmacol. Exp.Ther.268 868-72，1994。

称为quiflipon sodium的MK-591由式(5.2.15)代表：

将上述吲哚和喹啉类化合物以及属于它们的具体化合物MK-591、 MK-886、和BAY x 1005或任意上述类别的任何上述衍生物与式(1.0.0) 化合物组合以形成本发明实施方案。 9.2  与白三烯LTB4 、LTC4 、LTD4 、和LTE4 受体拮抗剂

将一种或多种式(1.0.0)化合物与白三烯LTB4、LTC4、LTD4、和LTE4 受体拮抗剂联合使用。根据介导的炎性反应，这些白三烯当中最值得 注意的是LTB4和LTD4。在下面的段落中描述这些白三烯受体拮抗剂。

4-溴-2，7-二甲氧基-3H-吩噻嗪-3-酮，包括L-651，392是有效的 LTB4受体拮抗剂，并描述在US 4,939,145(Guindon等人)和US 4,845,083(Lau等人)中。L-651，392由式(5.2.16)代表：

包括CGS-25019c的一类脒基化合物描述在US 5,451,700 (Morrissey和Suh)；US 5,488,160(Morrissey)；和US 5,639,768 (Morrissey和Suh)中。这些LTB4受体拮抗剂的代表是式(5.2.17)所 示的CGS-25019c：

Ontazolast—一种苯并噁唑胺类LTB4受体拮抗剂描述在EP 535 521(Anderskewitz等人)中，并由式(5.2.18)代表： 同一组研究人员已经发现了一类是LTB4受体拮抗剂的苯甲亚胺酰胺， 描述在WO 97/21670(Anderskewitz等人)；和WO 98/11119 (Anderskewitz等人)中，并且其实例是式(5.2.19)所代表的BIIL 284/260：

Zafirlukast是LTC4、LTD4、和LTE4的受体拮抗剂，其以商品名 Accolate市售。其属于在下列专利中描述的杂环酰胺衍生物类：US 4,859,692(Bernstein等人)；US 5,319,097(Holohan和Edwards)； US 5,294,636(Edwards和Sherwood)；US 5,482,963；US 5,583,152 (Bernstein等人)；和US 5,612,367(Timko等人)。Zafirlukast 由式(5.2.20)代表：

Ablukast是称为Ro 23-3544/001的LTD4受体拮抗剂，并由式 (5.2.21)代表：

Montelukast是LTD4受体拮抗剂，其以商品名Singulair市售， 并描述在US 5,565,473中。Montelukast由式(5.2.22)代表：

其它LTD4受体拮抗剂包括pranlukast、维卡斯特(MK-679)、 RG12525、Ro-245913、iralukast(CGP 45715A)、和BAY x 7195。

将上述吩噻嗪-3-酮类化合物，包括L-651，392；包括CGS-25019c 的脒基化合物类；包括Ontazolast的苯并噁唑胺类；其实例是BIIL 284/260的苯甲亚胺酰胺类；包括Zafirlukast的杂环酰胺衍生物； Ablukast和Montelukast及其所属的化合物类；或任何上述类别化合 物的任何上述衍生物与式(1.0.0)化合物组合以形成本发明实施方 案。 9.3  与其它治疗剂一起形成另外的组合

将一种或多种式(1.0.0)化合物与其它治疗剂以及非治疗剂一起 使用以形成作为本发明其它实施方案的可用于治疗本文所述的多种不 同疾病、障碍、和病症的组合。所述实施方案包括一种或多种式(1.0.0) 化合物与一种或多种下列药物：

(a)PDE4抑制剂；

(b)5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂；或5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP) 拮抗剂；

(c)双重5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂和血小板活化因子(PAF)拮抗 剂；

(d)白三烯拮抗剂(LTRAs)，包括LTB4、LTC4、LTD4、和LTE4拮抗 剂；

(e)组胺H1受体拮抗剂，包括西替立嗪、氯雷他定、 desloratadine、fexofenadine、息斯敏、氮卓斯丁、和氯苯那敏；

(f)胃保护H2受体拮抗剂；

(g)用于减轻充血的口服或局部施用的α1-和α2-肾上腺受体激动 血管收缩拟交感神经剂，包括丙己君、苯福林、苯丙醇胺、假麻黄碱、 盐酸萘唑啉、盐酸羟甲唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸赛洛唑啉、和盐酸 乙基去甲肾上腺素；

(h)与5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂组合的α1-和α2-肾上腺受体激动 剂；

(i)抗胆碱能剂，包括异丙托溴铵；噻托溴铵；氧托溴铵；哌仑 西平；和替伦折平；

(j)β1--β4-肾上腺受体激动剂，包括奥西那林、异丙肾上腺素、 异丙去甲肾上腺素、舒喘宁、沙丁胺醇、福莫特罗、沙美特罗、特布 他林、间羟异丙肾上腺素、甲磺酸双甲苯苄醇、和吡布特罗；

(k)茶碱和氨茶碱；

(l)色甘酸钠；

(m)毒蕈碱受体(M1、M2、和M3)拮抗剂；

(n)COX-1抑制剂(NSAIDs)；COX-2选择性抑制剂，包括 rofecoxib；和一氧化氮NSAIDs；

(o)I型胰岛素样生长因子(IGF-1)模拟物；

(p)环索萘德；

(q)具有减轻的系统副作用的吸入施用的糖皮质激素，包括强的 松、强的松龙、氟尼缩松、丙炎松、二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙 酸氟地松、和糠酸毛他松；

(r)类胰蛋白酶抑制剂；

(s)血小板活化因子(PAF)拮抗剂；

(t)具有抗内源性炎性实体活性的单克隆抗体；

(u)IPL 576；

(v)抗肿瘤坏死因子(TNFα)剂，包括Etanercept、Infliximab、 和D2E7；

(w)DMARDs，包括来氟米特；

(x)TCR肽；

(y)白介素转化酶(ICE)抑制剂；

(z)IMPDH抑制剂；

(aa)粘着分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；

(bb)组织蛋白酶；

(cc)MAP激酶抑制剂；

(dd)葡萄糖-6磷酸酯脱氢酶抑制剂；

(ee)激肽-B1-和B2-受体拮抗剂；

(ff)具有多种亲水性基团的金硫基形式的金；

(gg)免疫抑制剂，例如山地明、硫唑嘌呤、和甲氨蝶呤；

(hh)抗痛风剂，例如秋水仙碱；

(ii)黄嘌呤氧化酶抑制剂，例如别嘌醇；

(jj)促尿酸排泄剂，例如丙磺舒、磺吡酮、和苯溴马隆；

(kk)抗肿瘤剂，尤其是抗有丝分裂药物，包括长春花生物碱例如 长春花碱和长春新碱；

(ll)生长激素促分泌剂；

(mm)基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂，即溶基质素、胶原酶、和明 胶酶、以及聚集蛋白聚糖酶；尤其是胶原酶-1(MMP-1)、胶原酶-2 (MMP-8)、胶原酶-3(MMP-13)、溶基质素-1(MMP-3)、溶基质素-2 (MMP-10)、和溶基质素-3(MMP-11)的抑制剂；

(nn)转化生长因子(TGFD)；

(oo)血小板衍生生长因子(PDGF)；

(pp)成纤维细胞生长因子例如基本成纤维细胞生长因子 (bFGF)；

(qq)粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)；

(rr)辣椒素；

(ss)选自NKP-608C；SB233412(talnetant)；和D-4418的速 激肽NK1和NK3受体拮抗剂；

(tt)选自UT-77和ZD-0892的弹性蛋白酶抑制剂；和

(uu)腺苷A2a受体激动剂。 发明详述 10.0  药物组合物和制剂

下面的描述涉及式(1.0.0)化合物以及所需的其它治疗剂或非治 疗剂与大多数常规可药用载体组合以形成剂型的方式，所述剂型适于 任何给定患者所使用的不同的施用途径、以及适于所治疗的任何给定 患者的疾病、障碍、或病症。

本发明药物组合物包含任何一种或多种上述本发明抑制性化合 物、或上述其可药用盐、和本领域众所周知的根据其性质和预期性能 而选择的可药用载体。

可以与载体材料组合以生成单一剂型的活性组分的量将随所治疗 的宿主、和特定给药方式而变。然而，应当理解，对于任何特定患者， 特定剂量和治疗方法将取决于多种因素，包括所使用的特定化合物的 活性、年龄、体重、一般健康、性别、饮食、给药时间、排泄速度、 药物组合、和治疗医师的判断以及所治疗的特定疾病的严重程度。若 有的话，活性组分的量还取决于与其联合施用的治疗剂或预防剂。

上述本发明化合物可以以酸、酯、或所述化合物所属的其它化学 类别的化合物的形式使用。使用依据上述方法和本领域众所周知的方 法由多种有机酸和无机酸和碱制得的可药用盐形式的化合物也在本发 明范围内。包含式(1.0.0)化合物的活性组分通常以其盐形式使用，尤 其是当所述盐形式使活性组分的药动性质比游离形式的所述活性组分 或以前使用的其它盐形式的所述活性组分有改善时更是如此。可药用 盐形式的所述活性组分还可以赋予所述活性组分以前不具有的所需药 动学性质，并且甚至可有效地影响所述活性组分在其体内治疗活性方 面的药效学性质。

可有利地受影响的所述活性组分的药动学性质包括例如活性组分 越过细胞膜运输的方式，该运输方式可直接且正性影响所述活性组分 的吸收、分布、生物转化和排泄。虽然药物组合物的给药方式很重要， 并且各种解剖学上的、生理学上的和病理学上的因素可显著影响生物 利用度，但是所述活性组分的溶解度通常取决于其所采用的特定盐形 式的性质。此外，本领域技术人员应当理解，所述活性组分的水溶液 将使活性组分最快地吸收到所治疗的患者体内，而脂质溶液和悬浮液 以及固体剂型将使所述活性组分的吸收较慢。出于安全性、方便、和 经济方面的原因，口服摄取所述活性组分是最优选的给药途径，但是 这样的口服剂型的吸收可受到下列不利影响：物理特征例如极性的影 响，胃肠道粘膜刺激所引起的呕吐，消化酶和低pH的破坏作用，在食 物或其它药物存在下的不规则吸收或推进，和被粘膜、肠内菌丛、或 肝脏的酶代谢。将所述活性组分配制成不同的可药用盐形式可有效地 克服或减轻口服剂型的吸收所遇到的一个或多个上述问题。

在上述可药用盐当中，优选的盐包括但不限于乙酸盐、苯磺酸盐、 柠檬酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、半琥珀酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、 氢溴酸盐、羟乙基磺酸盐、扁桃酸盐、葡甲胺盐、硝酸盐、油酸盐、 膦酸盐、新戊酸盐、磷酸钠盐、硬脂酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、 酒石酸盐、硫羟苹果酸盐、甲苯磺酸盐、和氨丁三醇盐。

当本发明化合物包含一个以上能形成这样的可药用盐的基团时， 多盐形式包括在本发明范围内。一般的多盐形式的实例包括但不限于 二酒石酸盐、二乙酸盐、二富马酸盐、二葡甲胺盐、二磷酸盐、二钠 盐、和三盐酸盐。

本发明药物组合物包含任何一种或多种上述本发明抑制性化合 物、或上述其可药用盐、和本领域众所周知的根据其性质和预期性能 而选择的可药用载体。

本文所用术语“载体”包括可药用稀释剂、赋形剂、助剂、载体、 助溶剂、粘度调节剂、防腐剂、和本领域技术人员众所周知的能给最 终的药物组合物带来有利性质的其它物质。为了举例说明这样的载 体，下面对可用于本发明药物组合物的可药用载体作简短说明，然后 更详细地描述各种类型组分。一般的载体包括但不限于离子交换组合 物；氧化铝；硬脂酸铝；卵磷脂；血清蛋白例如人血清白蛋白；磷酸 盐；甘氨酸；山梨酸；山梨酸钾；饱和植物脂肪酸的部分甘油三酯混 合物；氢化棕榈油；水；盐或电解质，例如硫酸醇溶蛋白、磷酸氢二 钠、磷酸氢钾、氯化钠、和锌盐；胶态二氧化硅；三硅酸镁；聚乙烯 吡咯烷酮；基于纤维素的物质，例如羧甲基纤维素钠；聚乙二醇；聚 丙烯酸酯；蜡；聚乙烯-聚丙烯嵌段聚合物；和羊毛脂。

更特别地，本发明药物组合物所用的载体包括各种类别和种类的 添加剂，所述添加剂独立地选自在下述段落中列举的那些。

加入酸化剂和碱化剂以获得所需或预定的pH，并包括酸化剂例如 乙酸、冰醋酸、苹果酸、和丙酸。强酸例如盐酸、硝酸和硫酸也可以 使用，但是较不优选的。碱化剂包括例如乙二胺四乙醇(edetol)、碳 酸钾、氢氧化钾、硼酸钠、碳酸钠、和氢氧化钠。也可以使用含有活 性胺基的碱化剂例如二乙醇胺和三乙醇胺。

当药物组合物作为气雾剂在高压下递送时，需要气雾剂推进剂。 这样的推进剂包括例如可接受的氟氯烃例如二氯二氟甲烷、二氯四氟 乙烷、和三氯一氟甲烷；氮气；或挥发性烃例如丁烷、丙烷、异丁烷 或其混合物。

当把药物组合物局部施用在可能患有不利病症或持续擦伤或切伤 从而使皮肤被细菌、真菌或原生动物感染的皮肤上时，加入抗微生物 剂，包括抗菌剂、抗真菌剂、和抗原生动物剂。抗微生物剂包括化合 物例如苯甲醇、氯丁醇、苯乙醇、乙酸苯汞、山梨酸钾、和山梨酸。 抗真菌剂包括化合物例如苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸 乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、和苯甲酸钠。

将抗微生物防腐剂加到本发明药物组合物中以保护它们抗可能有 害的微生物的生长，这样的微生物通常会侵入水相，但是在某些情况 下，也可以在组合物的油相中生长。因此，既具有水溶性又具有脂溶 性的防腐剂是可取的。合适的抗微生物防腐剂包括例如对羟基苯甲酸 的烷基酯、丙酸盐、苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯钠、对羟基苯甲 酸丙酯钠、脱氢醋酸钠、苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲醇、乙内酰脲衍 生物、季铵化合物和阳离子聚合物、咪唑烷基脲、diazolidinyl urea、 和乙二胺四乙酸三钠(EDTA)。防腐剂优选以占组合物总重量约0.01％ -约2.0％的量使用。

加入抗氧化剂以保护药物组合物的所有组分不被组合物自身存在 的氧化剂或使用环境破坏或降解，例如anoxomer、抗坏血酸棕榈酸酯、 丁化羟基茴香醚、丁化羟基甲苯、次磷酸、偏亚硫酸氢钾、丙基辛基 和没食子酸十二烷酯、偏亚硫酸氢钠、二氧化硫、和生育酚。

可使用缓冲剂来维持一旦建立起来的组合物的所需pH，以不受外 部物质和组合物组分的平衡漂移的影响。缓冲剂可选自本领域技术人 员熟悉的用于制备药物组合物的那些，例如乙酸钙、偏磷酸钾、磷酸 二氢钾、和酒石酸。

使用螯合剂来帮助维持药物组合物的离子强度，并结合以及有效 地除去破坏性化合物和金属，其包括例如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺 四乙酸二钾、和乙二胺四乙酸。

将皮肤病活性剂加到准备局部施用的本发明药物组合物中，其包 括例如伤口愈合剂如肽衍生物、酵母、泛醇、己基间苯二酚、苯酚、 盐酸四环素、核纤层蛋白和激动素；治疗皮肤癌症的类维生素A例如 维生素A醇、维甲酸、异维甲酸、苯壬四烯酯、阿昔曲丁、和arotinoid； 治疗皮肤感染的温和抗菌剂，例如间苯二酚、水杨酸、过氧化苯甲酰、 红霉素-过氧化苯甲酰、红霉素、和克林霉素；治疗体癣、脚癣、念珠 菌病和花斑癣的抗真菌剂，例如灰黄霉素，唑类例如咪康唑、益康唑、 itraconazole、氟康唑、和酮康唑，和烯丙胺例如纳呋替芬和 terfinafine；治疗皮肤单纯性疱疹、带状疱疹、和水痘的抗病毒剂例 如阿昔洛韦、泛西洛维、和valacyclovir；治疗瘙痒症、特应性皮炎 和接触性皮炎的抗组胺药，例如苯海拉明、特非那定、阿司咪唑、氯 雷他定、西替立嗪、阿伐斯丁、和temelastine；减轻疼痛、刺激和 瘙痒的局麻剂，例如苯佐卡因、利多卡因、二丁卡因、和盐酸普莫卡 因；用于缓解疼痛和炎症的局部镇痛剂，例如水杨酸甲酯、樟脑、薄 荷醇、和间苯二酚；预防感染的局部消毒剂，例如苯扎氯铵和聚维酮 碘；和维生素及其衍生物例如生育酚、乙酸生育酚、视黄酸和维生素A 醇。

使用分散剂和悬浮剂以有助于制备稳定的制剂，其包括例如 pollgeenan、聚维酮、和二氧化硅。

润肤剂是软化和缓和皮肤、尤其是由于过度失水而变得干燥的皮 肤的物质，其优选是非油性和水溶性的。这样的润肤剂与准备局部施 用的本发明药物组合物一起使用，并包括例如烃油和蜡、甘油三酯、 乙酰化甘油单酯、和C10-C20脂肪酸的甲酯和其它烷基酯、C10-C20脂肪 酸、C10-C20脂肪醇、羊毛脂和衍生物、多元醇酯例如聚乙二醇(200- 600)、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、蜡酯、磷脂、和甾醇；用于制 备水包油乳剂的乳化剂；赋形剂例如laurocapram和聚乙二醇一甲 醚；润湿剂例如山梨醇、甘油和透明质酸；膏剂基质例如凡士林、聚 乙二醇、羊毛脂、和泊咯沙姆；渗透增强剂例如二甲基异山梨醇、二 乙基-二醇-一乙基醚、1-十二烷基氮杂环庚-2-酮、和二甲亚砜 (DMSO)；防腐剂例如苯扎氯铵、苄索氯铵、对羟基苯甲酸的烷基酯、 乙内酰脲衍生物、氯化十六烷基吡啶鎓、对羟基苯甲酸丙酯、季铵化 合物例如苯甲酸钾、和硫汞撒；包含环糊精的螯合剂；溶剂，例如丙 酮、乙醇、戊烯水合物、丁醇、玉米油、棉籽油、乙酸乙酯、甘油、 己二醇、异丙醇、异硬脂醇、甲醇、二氯甲烷、矿物油、花生油、磷 酸、聚乙二醇、聚氧丙烯15硬脂基醚、丙二醇、丙二醇二乙酸酯、芝 麻油、和纯化水；稳定剂，例如糖二酸钙和百里酚；表面活性剂例如 拉匹氯铵；laureth 4，即α-十二烷基-ω-羟基-聚(氧-1，2-乙二基) 或聚乙二醇单十二烷基醚。

当水包油乳剂形成本发明药物组合物的基底时，使用包括乳化硬 化剂和乳化助剂在内的乳化剂来制备水包油乳剂。这样的乳化剂包括 例如非离子乳化剂如C10-C20脂肪醇和所述脂肪醇与2-20摩尔环氧乙 烷或环氧丙烷的缩合产物，(C6-C12)烷基苯酚与2-20摩尔环氧乙烷的 缩合产物，乙二醇的一和二C10-C20脂肪酸酯、C10-C20脂肪酸甘油单酯、 二甘醇、MW 200-6000的聚乙二醇、MW 200-3000的聚丙二醇、特 别是山梨醇、脱水山梨醇、聚氧乙烯山梨醇、聚氧乙烯脱水山梨醇、 亲水性蜡酯、鲸蜡硬脂醇、油醇、羊毛脂醇、胆固醇、甘油单酯和甘 油二酯、甘油一硬脂酸酯、聚乙二醇一硬脂酸酯、乙二醇和聚氧乙二 醇的混合一和二硬脂酸酯、丙二醇一硬脂酸酯、和羟丙基纤维素。还 可以使用含有活性胺基的乳化剂，并一般包括阴离子乳化剂例如脂肪 酸皂，例如C10-C20脂肪酸的钠、钾和三乙醇胺皂；碱金属、铵或取代 铵(C10-C30)的烷基硫酸盐、(C10-C30)烷基磺酸盐、和(C10-C50)烷基乙氧 基醚磺酸盐。其它合适的乳化剂包括蓖麻油和氢化蓖麻油；卵磷脂； 和与丙烯酸聚合物在一起的2-丙烯酸聚合物，两种聚合物都与蔗糖和/ 或季戊四醇的烯丙基醚交联，具有不同粘度，并且产品名称为卡波姆 910、934、934P、940、941、和1342。还可以使用具有活性胺基的阳 离子乳化剂，包括基于季铵、吗啉鎓和吡啶鎓化合物的那些。类似地， 可使用具有活性胺基的两性乳化剂，例如椰油基甜菜碱 (cocobetaines)、月桂基二甲基胺氧化物、椰油基咪唑啉。有用的 乳化硬化剂还包括鲸蜡醇和硬脂酸钠；和乳剂助剂例如油酸、硬脂酸、 和硬脂醇。

赋形剂包括例如laurocapram和聚乙二醇一甲醚。

当本发明药物组合物是准备局部施用时，可使用渗透促进剂，其 包括例如二甲基异山梨醇、二乙基-乙二醇-一乙醚、1-十二烷基氮杂 环庚烷-2-酮、和二甲亚砜(DMSO)。这样的组合物一般包含膏剂基质， 例如凡士林、聚乙二醇、羊毛脂、和泊咯沙姆，其中泊咯沙姆是聚氧 乙烯与聚氧丙烯的嵌段共聚物，其还可以起表面活性剂或乳化剂的作 用。

使用防腐剂来保护本发明药物组合物不受周围环境微生物降解性 攻击，其包括例如苯扎氯铵、苄索氯铵、对羟基苯甲酸的烷基酯、乙 内酰脲衍生物、氯化十六烷基吡啶鎓、一硫代甘油、苯酚、苯氧基乙 醇、对羟基苯甲酸甲酯、咪唑烷基脲、脱氢醋酸钠、对羟基苯甲酸丙 酯、季铵化合物、尤其是聚合物例如polixetonium chloride、苯甲 酸钾、甲醛次硫酸钠、丙酸钠、和硫汞撒。

使用螯合剂来提高本发明药物组合物的稳定性，并包括例如环糊 精，所述环糊精是能够与多种材料形成包埋复合物的天然环低聚糖， 并具有不同的环尺寸，在环中具有6-葡萄糖残基、7-葡萄糖残基和8- 葡萄糖残基的环糊精一般分别称为α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精。 合适的环糊精包括例如α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、δ-环糊精和 阳离子化的环糊精。

可用于制备本发明药物组合物的溶剂包括例如丙酮、乙醇、戊烯 水合物、丁醇、玉米油、棉籽油、乙酸乙酯、甘油、己二醇、异丙醇、 异硬脂醇、甲醇、二氯甲烷、矿物油、花生油、磷酸、聚乙二醇、聚 氧丙烯15硬脂基醚、丙二醇、丙二醇二乙酸酯、芝麻油、和纯化水。

适用的稳定剂包括例如糖二酸钙和百里酚。

在局部施用制剂中一般使用硬化剂来提供所需的粘度和操作特 征，并包括例如鲸蜡酯蜡、肉豆蔻醇、石蜡、合成石蜡、乳化蜡、微 晶蜡、白蜡和黄蜡。

经常使用糖来给本发明药物组合物带来各种所需特征，并改善所 得结果，其包括例如单糖、二糖和多糖例如葡萄糖、木糖、果糖、reose、 核糖、戊糖、阿拉伯糖、阿洛糖、tallose、阿卓糖、甘露糖、半乳糖、 乳糖、蔗糖、赤藓糖、甘油醛、或其任何组合。

可使用表面活性剂来给本发明的多组分药物组合物提供稳定性， 提高这些组合物的已有性质，以及给所述组合物赋予新的所需特征。 表面活性剂用作润湿剂、减小水表面张力的止泡剂、和用作乳化剂、 分散剂和渗透剂，并包括例如拉匹氯铵；laureth 4，即α-十二烷基- ω-羟基-聚(氧-1，2-乙二基)或聚乙二醇单十二烷基醚；laureth 9， 即每个分子平均具有约9个环氧乙烷基的聚乙二醇单十二烷基醚混合 物；一乙醇胺；壬苯醇醚4、9和10，即聚乙二醇一(对壬基苯基)醚； 壬苯醇醚15，即α-(对壬基苯基)-ω-羟基十五(氧乙烯)；壬苯醇醚30， 即α-(对壬基苯基)-ω-羟基三十(氧乙烯)；泊洛沙林，即聚乙烯-聚丙 二醇型非离子聚合物，MW＝约3000；在上文膏剂基质的讨论中提及 的泊咯沙姆；聚烃氧基8、40和50硬脂酸酯，即聚(氧-1，2-乙二基)、 α-氢-ω-羟基-；硬脂酸酯；聚烃氧基10油醇醚，即聚(氧-1，2-乙二 基)、α-[(Z)-9-十八烯基-ω-羟基-；多乙氧基醚20，即脱水山梨醇、 一月桂酸酯、聚(氧-1，2-乙二基)；多乙氧基醚40，即脱水山梨醇、 一十六烷酸酯、聚(氧-1，2-乙二基)；多乙氧基醚60，即脱水山梨醇、 一硬脂酸酯、聚(氧-1，2-乙二基)；多乙氧基醚65，即脱水山梨醇、 三硬脂酸酯、聚(氧-1，2-乙二基)；多乙氧基醚80，即脱水山梨醇、 一-9-一癸烯酸硬脂酸酯，聚(氧-1，2-乙二基)；多乙氧基醚85，即脱 水山梨醇，三-9-硬脂酸酯，聚(氧-1，2-乙二基)；十二烷基硫酸钠； 脱水山梨醇一月桂酸酯；脱水山梨醇一油酸酯；脱水山梨醇一棕榈酸 酯；脱水山梨醇一硬脂酸酯；脱水山梨醇倍半油酸酯；脱水山梨醇三 油酸酯；和脱水山梨醇三硬脂酸酯。

本发明药物组合物可用本领域技术人员众所周知的非常简单的方 法值得。当本发明药物组合物是普通的水和/或其它溶剂的溶液时，将 整个组合物的各个组分以主要从方便角度来考虑的任意实用顺序混合 在一起。将水溶性不强、但是在含有水的助溶剂中有足够溶解度的组 分全部溶解在所述助溶剂中，然后将助溶剂溶液加到载体的水部分 中，由此使得其中的溶质溶解在水中。为了促进该分散/溶解过程，可 使用表面活性剂。

当准备将本发明药物组合物制成乳剂形式时，按照下述一般方法 将药物组合物的组分混合在一起。首先将连续水相加热至约60℃-约 95℃、优选约70℃-约85℃，所用温度的选择取决于构成水包油乳剂 组分的物理和化学性质。一旦连续的水相已达到其所选温度，即将准 备在该阶段加入的最终组合物的组分与水混合，并在高速搅拌下将其 分散在其中。然后将水的温度恢复至大约其初始水平，在中等程度搅 拌下将构成下一步骤的组合物的组分加到组合物混合物中，并根据前 两个阶段的组分，继续混合约5-约60分钟、优选约10-约30分钟。 然后将组合物混合物被动或主动地冷却至约20℃-约55℃，以加入其 余阶段的任何组分，然后加入足量的水以达到其在整个组合物中的原 始预定浓度。

根据本发明，药物组合物可呈无菌注射制剂的形式，例如无菌注 射水或油悬浮液。该悬浮液可依据本领域已知的技术用合适的分散剂 或润湿剂和悬浮剂配制。无菌注射制剂还可以是在无毒非胃肠道可接 受稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的 溶液。可使用的可接受的载体或溶剂有水、林格氏溶液和等渗氯化钠 溶液。此外，无菌不挥发油通常用作溶剂或悬浮基质。对于此，可使 用任何温和的不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。脂肪酸， 例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备可注射制剂，天然可药用油例 如橄榄油或蓖麻油、尤其是其聚氧乙基化的变型也是如此。这些油溶 液或悬浮液还可以含有长链醇稀释剂或分散剂，例如Rh、HCIX或类似 的醇。

本发明药物组合物可以在任何口服可接受剂型中口服施用，所述 口服剂型包括但不限于胶囊、片剂、水悬浮液或溶液。对于口服使用 的片剂，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。一般还加入润滑剂例如硬 脂酸镁。对于以胶囊形式口服施用，有用的稀释剂包括乳糖和无水玉 米淀粉。当需要水悬浮液来口服使用时，将活性组分与乳化剂和悬浮 剂混合。还可以按照需要加入一些甜味剂、矫味剂或着色剂。或者， 本发明药物组合物可以以直肠用栓剂的形式给药。栓剂可通过将活性 剂与在室温下为固体、但是直肠温度下为液体并因此将在直肠中熔化 以释放药物的合适的非刺激性赋形剂混合而制得。这样的材料包括椰 子油、蜂蜡和聚乙二醇。

本发明药物组合物还可以局部施用，尤其是当治疗靶包括易于通 过局部给药治疗的区域或器官时更是如此，包括眼睛、皮肤、或肠道 下部的疾病。适用于每一这些区域或器官的局部给药制剂可方便地制 得。

对于肠道下部，局部施用可通过如上所述的直肠栓剂或合适的灌 肠剂来进行。也可以使用局部有效的透皮贴剂。

对于局部给药，可将药物组合物配制成含有悬浮或溶解在一种或 多种载体中的活性组分的合适的膏剂。用于局部施用本发明化合物的 载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙 烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，可将药物组合物配制成含 有悬浮或溶解在一种或多种可药用载体中的活性组分的合适的洗剂或 霜剂。合适的载体包括但不限于矿物油、脱水山梨醇一硬脂酸酯、多 乙氧基醚、鲸蜡基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。

在本发明范围内的药物组合物包括这样的组合物：其中在适于全 身给药的剂型中提供了治疗或预防如本文所述的由PDE4活动调节介导 或与其有关的疾病、障碍、和病症所需的治疗有效量的包含本发明化 合物的活性组分。这样的药物组合物在通过下列方式施用的合适的液 体剂型中含有所述活性组分：(1)注射或输注，所述注射或输注是动 脉内、皮内或经皮、皮下、肌内、脊柱内、鞘内或静脉内施用，其中 所述活性组分：(a)作为溶质包含在溶液中；(b)包含在乳剂的不连 续相中，或包含在当注射或输注时反转的相反乳剂的不连续相中，所 述乳剂含有合适的乳化剂；或(c)作为胶体或微颗粒形式的悬浮固体 包含在悬浮液中，所述悬浮液含有合适的悬浮剂；(2)作为贮药库注 射或输注到合适的身体组织或空腔内，其中所述组合物提供所述活性 组分的贮藏处，并其后延迟、持续和/或控制释放所述活性组分以全身 分布；(3)将合适的固体形式的药物组合物滴注、吸入或吹入到合适 的身体组织或空腔内，其中所述活性组分：(a)包含在提供延迟、持 续和/或控制释放所述活性组分的固体植入组合物中；(b)包含在欲吸 入到肺内的颗粒组合物中；或(c)包含在欲吹入到合适的身体组织或 空腔内的颗粒组合物中，其中所述组合物任选提供所述活性组分的延 迟、持续和/或控制释放；或(4)摄入经口递送所述活性组分的合适的 固体或液体形式的所述药物组合物，其中所述活性组分包含在固体剂 型中；或(b)包含在液体剂型中。

上述药物组合物的特别剂型包括(1)作为特殊类型植入物的栓 剂，其中包含在室温下为固体、但是在体温下熔化以缓慢地释放出活 性组分的基质，活性组分渗入到周围的身体组织内，在这些组织中活 性组分被吸收并转移以实现全身施用；(2)选自下列的固体口服剂型： (a)延迟释放的口服片剂、胶囊、螺帽式剂型、锭剂、糖锭剂、和多 颗粒剂；(b)包有肠溶衣的片剂和胶囊，其防止在胃中释放和吸收以 有助于在所治疗的患者的胃的远侧释放活性组分；(c)持续释放的口 服片剂、胶囊和微颗粒剂，其在最高达24小时的时间内以控制方式系 统递送活性组分；(d)速溶片剂；(e)包封的溶液；(f)口服糊剂； (g)掺入到或欲掺入到所治疗患者的食物中的粒剂；和(h)选自溶液、 悬浮液、乳剂、相反乳剂、酏剂、浸膏剂、酊剂、和浓缩剂的液体口 服剂型。

在本发明范围内的药物组合物包括这样的组合物：其中在适于局 部施用给所治疗患者的剂型中提供了治疗或预防如本文所述的由PDE4 活动调节介导或与其有关的疾病、障碍、和病症所需的治疗有效量的 包含本发明化合物的活性组分，其中所述药物组合物在通过下列方式 施用的合适的液体剂型中含有所述活性组分：(1)注射或输注到局部 位点，所述注射或输注是动脉内、关节内、软骨内、肋内、囊内、皮 内或经皮、束内、韧带内、髓内、肌内、鼻内、神经内、眼内(即经眼 施用)、骨内、骨盆内、心包内、脊柱内、胸骨内、滑膜内、跗骨内、 或鞘内施用，包含将所述活性组分延迟释放、控制释放、和/或持续释 放到所述局部位点内的组分；其中所述组分包含在：(a)作为溶质包 含在溶液中；(b)包含在乳剂的不连续相中，或包含在当注射或输注 时反转的相反乳剂的不连续相中，所述乳剂含有合适的乳化剂；或(c) 作为胶体或微颗粒形式的悬浮固体包含在悬浮液中，所述悬浮液含有 合适的悬浮剂；或(2)作为贮药库注射或输注到所述局部位点内，其 中所述组合物提供所述活性组分的贮藏处，并其后将活性组分延迟、 持续和/或控制释放到所述局部位点内，其中所述组合物还包含确保活 性组分主要具有局部活性、具有很小的系统带出活性的组分；或者其 中所述药物组合物在通过下述方式施用所述抑制剂的合适的固体剂型 中含有所述活性组分：(3)滴注、吸入或吹入到所述局部位点上，其 中所述活性组分包含在：(a)包含在安装在所述局部位点中的固体植 入组合物中，所述组合物任选将所述活性组分延迟、持续和/或控制释 放到所述局部位点上；(b)包含在吸入到包括肺在内的局部位点内的 颗粒组合物中；或(c)包含在吹入到局部位点内的颗粒组合物中，其 中所述组合物包含确保活性组分主要具有局部活性、具有很小的系统 带出活性的组分，并任选将所述活性组分延迟、持续和/或控制释放到 所述局部位点上。对于眼科应用，可将药物组合物配制成在等渗pH调 节的无菌盐水中的微粒化悬浮液，或优选配制成在等渗pH调节的无菌 盐水中的溶液，所述液体剂型含有或不含有防腐剂例如苯扎氯铵。或 者，对于眼科应用，可在软膏例如凡士林中配制药物组合物。

本发明药物组合物还可以通过使用喷雾器、干粉吸入器或计量剂 量吸入器经由鼻喷雾或吸入来施用。这样的组合物是依据药物制剂领 域的众所周知的技术制得的，并且可以制成在盐水中的溶液，可使用 苯甲醇或其它合适的防腐剂，用于提高生物利用度的吸收促进剂，氟 代烃和/或其它常用助溶剂或分散剂。

如上所述，本发明式(1.0.0)的活性组分可作为适当液体形式的药 物组合物通过注射或输注全身施用给欲治疗的患者。在患者体内有很 多能够使得适当配制的药物组合物一旦注射或输注后即可渗透到所治 疗患者的整个身体或所有器官系统的部位或器官系统。注射是通常通 过注射器将单次剂量的药物组合物施加到所涉及的组织内。最常见的 注射是肌内、静脉内、和皮下注射。与之相反，输注是将药物组合物 逐渐施加到所涉及的组织内。最常见的输注类型是静脉内输注。其它 类型注射或输注包括动脉内、皮内或经皮(包括皮下)、或脊柱内、尤 其是鞘内注射或输注，在这些液体药物组合物中，活性组分可作为溶 质包含在溶液中。这是该组合物的最常用和最优选的类型，但是需要 具有相当好水溶性的盐形式的活性组分。水(或盐水)显然是这类组合 物的最优选溶剂。有时候可使用过饱和溶液，但是存在着使得它们不 能在每日基础上使用的稳定性问题。

就象有时可能存在的那样，如果不能获得具有必需程度水溶性的 式(1.0.0)化合物的形式，可制备乳剂，这在本领域技术人员的知识范 围内，乳剂是一种液体的小液滴—不连续相或内相在与其不可混溶的 整个另一种液体—连续相或外相中的分散体。通过使用可药用乳化剂 将两种液体维持在乳化状态。因此，如果活性组分是水不溶性油，可 将其在它作为不连续相的乳剂中施用。当活性组分不溶于水、但是溶 解在与水不可混溶的溶剂中时，可使用乳剂。虽然活性组分通常是作 为不连续相或内相使用，在这种情况下乳剂称为水包油乳剂，但是其 也可以作为相反乳剂的不连续相或内相使用，这样的乳剂通常称为油 包水乳剂。对于这种乳剂，活性组分是溶解在水中，并且可以作为普 通的水溶液施用。然而，在注射或输注到水介质例如血液内时，相反 乳剂会发生反转，并带来这样的优点：与使用水溶液相比，更迅速和 有效地将活性组分分散到水介质内。相反乳剂是通过使用本领域众所 周知的合适的可药用乳化剂制得的。当活性组分具有有限的水溶性 时，其还可以作为在使用合适的可药用悬浮剂制得的悬浮液中的胶体 或微颗粒形式的悬浮固体施用。含有活性组分的悬浮颗粒还可以配制 成延迟、持续、和/或控制释放组合物。

虽然全身给药通常是通过注射或输注液体来进行的，但是在许多 情况下，将活性组分作为固体施用是有利的，甚至是必需的。固体的 全身给药是通过滴注、吸入或吹入含有活性组分的适当固体形式的药 物组合物来进行的。滴注活性组分可能需要将固体植入组合物安放在 合适的组织或空腔内。植入物可包含生物相容性和生物可降解性材料 的基质，其中固体活性组分颗粒分散在基质内，或者液体活性组分的 小体或隔离小室包埋在基质内。理想情况是，基质在体内分解并完全 被吸收。还优选选择基质的组成以在长时间内、甚至长达数月的时间 内控制、持续、和/或延迟释放活性组分。

术语“植入物”通常是指含有活性组分的固体药物组合物，而“贮 药库”通常是指含有活性组分的液体药物组合物，贮药库放置在任意 合适的身体组织或空腔中以形成活性组分贮库或汇集库，其缓慢地迁 移到周围组织和器官中，并最终全身分布。然而，这些区别在本领域 中并不总是很严格，因此液体植入物和固体贮药库、以及甚至是各自 的混合固体和液体形式也包括在本发明范围内。栓剂可视为一类植入 物，因为它们它们包含在室温下为固体、但是在患者体温下熔化以释 放活性组分的基质，在熔化时，活性组分渗入到患者身体的周围组织 内，在这些周围组织中活性组分被吸收并运送以实现全身施用。

全身给药还可以通过吸入或吹入粉剂、即含有活性组分的颗粒组 合物来进行。例如，可使用将颗粒制剂雾化的常用装置将粉末形式的 活性组分吸入到肺内。作为颗粒制剂的活性组分还可以通过吹入来给 药，即通过简单的撒布或使用将颗粒制剂雾化的常用装置将活性组分 吹到或分散到合适的身体组织或空腔内。还可以按照众所周知的方法 和已知材料配制这些颗粒组合物以延迟、持续、和/或控制释放活性组 分。

可利用液体或固体形式的本发明活性组分的其它全身给药手段包 括透皮、鼻内、和经眼途径。特别是可制备依据众所周知的药物递送 技术制得的透皮贴剂并施用在欲治疗患者的皮肤上，之后由于其配制 的溶解特征，活性组分越过表皮迁移并进入患者皮肤的真皮层，在真 皮层内活性组分作为患者一般循环的一部分被摄取，最终在所需的延 长时间内通过活性组分全身分布。还包括置于皮肤下方和表皮层之 间，即所治疗患者皮肤的表皮和真皮之间的植入物。这样的植入物可 依据众所周知的方法和这类给药技术常用的材料配制，并且可以这样 制备以将活性组分控制、持续、和/或延迟释放到患者的全身循环内。 这样的表皮下(表皮下的)植入物提供了与透皮贴剂相同的安放便利性 和递送效力，但是没有这样的限制：即由于放置在患者皮肤的上层而 使患者受到降解、破坏或意外除去的影响。

在上文含有式(1.0.0)活性组分的药物组合物的描述中，相同含义 的表达用语“施用”、“给药”、“施以”和“施药”是为了描述药 物组合物而使用的。在这样使用时，这些表达用语是指通过任何本文 所述的给药途径给需要治疗的患者提供本发明的药物组合物，其中所 述活性组分是可用于治疗患者中由PDE4活动调节介导或与其有关的疾 病、障碍、或病症的式(1.0.0)化合物或其前药、衍生物、或代谢物。 因此，施用给患者后能直接或间接提供式(1.0.0)化合物的任何其它化 合物都包括在本发明范围内。这样的化合物公认为前药，并且可采用 多种既定方法来制备的式(1.0.0)化合物这种前药形式。

有效地治疗或预防由PDE4活动调节介导或与其有关的疾病、障 碍、或病症的式(1.0.0)化合物的剂量和给药速度取决于多种因素，例 如抑制剂性质、患者身体大小、治疗的目标、欲治疗的病变的性质、 所用的特定药物组合物、和临床医师的观察和推断。

例如，当剂型是口服剂型例如片剂或胶囊时，式(1.0.0)化合物的 合适剂量水平为约0.1μg/kg-约50.0mg/kg体重/天、优选约5.0 μg/kg-约5.0mg/kg体重/天、更优选约10.0μg/kg-约1.0mg/kg 体重/天、最优选约20.0μg/kg-约0.5mg/kg体重/天活性组分。

当剂型局部施用给支气管和肺，例如通过粉末吸入器或喷雾器局 部施用时，式(1.0.0)化合物的合适的剂量水平为约0.001μg/kg-约 10.0mg/kg体重/天、优选约0.5μg/kg-约0.5mg/kg体重/天、更 优选约1.0μg/kg-约0.1mg/kg体重/天、最优选约2.0μg/kg-约 0.05mg/kg体重/天活性组分。

使用10kg-100kg的代表性体重以举例说明可如上所述使用的 日口服剂量范围，式(1.0.0)化合物的合适的剂量水平为约1.0-10.0 μg到500.0-5000.0mg/天、优选为约50.0-500.0μg到50.0-500.0 mg/天、更优选约100.0-1000.0μg到10.0-100.0mg/天、最优选约 200.0-2000.0μg到约5.0-50.0mg/天包含式(1.0.0)化合物的活性 组分。这些剂量范围代表对于给定患者每天活性组分的总量。每天给 药次数取决于药理学和药动学因素，例如反映其分解代谢和清除的速 度的活性组分的半衰期，以及在患者中为达到治疗效率所必需的所述 活性组分的最小和最佳血浆或其它体液水平。

在决定每天给药次数和每次所施用的活性组分的剂量时必须还考 虑许多其它因素。并非不重要的这样的其它因素是所治疗患者的个体 反应。因此，例如，当使用活性组分来治疗或预防哮喘，并且是通过 气雾剂吸入到肺内来局部给药时，每天将施用由分药装置的 acuations，即吸入器的“喷出”确定的1-4个剂量、每个剂量含有 约50.0g-约10.0mg活性组分。 发明详述 11.0制备和运转实施例

下面描述多个制备例，通过其制得了制备特定式(1.0.0)化合物所 用的中间体。还描述了多个制备特定式(1.0.0)化合物的实施例。这些 制备例和实施例是为了进一步举例说明本发明化合物以及本领域技术 人员制备其所依据的方法。本领域技术人员应当知道，也可以使用许 多其它合适的方法以及下述方法的可接受的变型。

下面的描述是为了举例说明本发明，而不是以任何方式限制、表 示或暗指本发明的范围。权利要求书是为了叙述本发明，表示其所要 求的保护范围，以及指出其其细节。

在下列制备例中，所制得的化合物的特征分析是用通过GCMS、 AMPI、APCI或热喷雾法确定的质谱分析进行的。所有1H NMR光谱都是 在400MHz仪器上测得的。 制备例1 式(5.0.1)的4-乙酰基-2-氟-苄腈

将4-溴-2-氟苄腈(5.0g，20.0mmol)、丁基乙烯基醚(12.5g， 124.0mmol)、三乙胺(4.0g，40.0mmol)、1，3-二(二苯基膦基)丙 烷(453mg，1.1mmol)、乙酸铊(5.8g，22.0mmol)、和乙酸钯(224 mg，1.0mmol)在无水二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物于氮气氛下在 90℃加热3小时。再加入1，3-二(二苯基膦基)丙烷(453mg，1.1mmol) 和乙酸钯(244mg，1.0mmol)，并将该反应混合物在90℃加热4小 时。将该反应混合物冷却至室温，加入25mL 2N盐酸，并将该反应混 合物在室温搅拌30分钟。然后将该反应混合物倒入300mL水中，并 用乙醚萃取(2×300mL)。将有机萃取液合并，然后用水和盐水洗涤， 之后用硫酸镁(MgSO4)干燥，并浓缩，获得了油状物。通过快速硅胶柱 色谱纯化该油状物，用乙酸乙酯/己烷(1∶3)洗脱，获得了2.5g 4-乙 酰基-2-氟苄腈最终产物，为油状物。 1H-NMR(CDCl3)：δ 2.63(s，1H)，7.73(m，2H)，7.81(m，1H)。 制备例2 式(5.0.2)的2-氟-4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苄腈

在0℃向氯化铈(III)(4.7g，15.0mmol)在四氢呋喃(30mL) 内的搅拌悬浮液中滴加3.0M甲基氯化镁在四氢呋喃(6.0mL，19mmol) 中的溶液。将该反应混合物在0℃搅拌，然后滴加4-乙酰基-2-氟苄腈 (2.5g，15.0mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液。将该反应混合物 在0℃搅拌1小时，然后滴加5mL 2N乙酸以中止反应。然后将该反 应混合物倒入水(200mL)中，用2N乙酸酸化至pH值为2，然后用乙 酸乙酯萃取(2×200mL)。合并有机萃取液，用水和盐水洗涤，用硫酸 镁(MgSO4)干燥，然后浓缩，获得了油状物。通过硅胶柱色谱纯化该油 状物，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱，获得了1.95g 2-氟-4-(1-羟基 -1-甲基-乙基)-苄腈终产物，为油状物。 MS(m/z)：179(M+，100)。 制备例3 式(5.0.3)的2-(4-氨基甲基-3-氟-苯基)-丙-2-醇：

在0℃向2-氟-4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苄腈(1.95g，11.0 mmol)在四氢呋喃(30mL)内的搅拌溶液中滴加1.0M氢化锂铝在四氢 呋喃(34mL，34.0mmol)中的溶液。将该反应混合物温热至室温，然 后回流30分钟。将该反应混合物冷却至0℃，然后滴加甲醇(20mL) 以中止反应。然后将该反应混合物用氯仿(700mL)稀释，并用水(100mL) 洗涤。将所得悬浮液经由硅藻土过滤，然后分离出包含在滤液中的有 机萃取液，用硫酸镁(MgSO4)干燥，浓缩，获得了1.6g 2-(4-氨基甲 基-3-氟-苯基)-丙-2-醇，为琥珀色树胶状物。 GC-MS(m/z)：183(M+，100)。 制备例4 式(5.0.4)的4-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基氧基)嘧啶-5-甲酸乙 酯：

向在无水二甲基甲酰胺(15mL)内的4-氯-5-乙氧羰基嘧啶(0.73 g)[Bredereck，H.；Effenberger，F.；Schweizer，E.H.Chem Ber (1962)803]中加入苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-醇(0.67g)和碳酸铯 (3.2g)。将所得混合物在90℃加热2小时，然后冷却至室温，加入 水(50mL)，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。将合并的有机相用水(100mL) 和饱和盐水洗涤。用硫酸镁干燥后，将有机相真空浓缩，获得了粗的 油状物，并通过硅胶色谱(乙酸乙酯/己烷1∶1)纯化，获得了纯的本标 题化合物(0.76g)。 1H NMR(CDCl3)：δ 9.07(s，1H)，8.80(s，1H)，6.80(d，1H)， 6.63(s，1H)，6.58(d，1H)，5.99(s，2H)，4.41(q，2H)，1.39 (t，3H)。 LR-MS m/z 289(m+H)+.TLC(乙酸乙酯/己烷1∶1)Rf＝0.58。 制备例5 式(5.0.5)的4-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基氧基)嘧啶-5-甲酸：

向在四氢呋喃(22mL)和水(3mL)内的上述制备例4的产物(0.76 g)中加入氢氧化锂(0.26g)。2小时后，加入乙酸乙酯(25mL)和水(25 mL)，然后取出有机层。向水层中加入3N盐酸直至pH达到2。然后将 所得酸性层用乙酸乙酯萃取(4×25mL)。将合并的有机层用饱和盐水 洗涤，用硫酸镁干燥，并真空浓缩，获得了纯的本标题化合物，为固 体(0.60g)。 1H NMR(D6-DMSO)：δ9.0(s，1H)，8.79(s，1H)，6.92(d，1H)， 6.86(s，1H)，6.60(d，1H)，6.05(s，2H).LRMS m/z 259(m- H)+。 制备例6 式(5.0.6)的4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苄腈

在-78℃向对乙酰基苄腈(3.0g，20.0mmol)在四氢呋喃内的搅 拌溶液中滴加3.0M甲基氯化镁在四氢呋喃(7.6，23.0mmol)中的溶 液。将该反应混合物在-78℃搅拌3小时，然后滴加甲醇以中止反应。 然后将该反应混合物倒入水(200ml)中，用分批加入的草酸酸化，然 后用乙醚萃取(2×200ml)。将有机萃取液合并，用水(1×40ml)、 盐水(1×40ml)洗涤，用硫酸镁(MgSO4)干燥，然后浓缩，获得了油状 物。通过硅胶色谱纯化该油状产物，用乙酸乙酯/己烷(1∶5)洗脱，获 得了1.4g 4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苄腈，为澄清的油状物。 GC-MS(m/z)：161(M+，100)。 制备例7 式(5.0.7)的2-(4-氨基甲基苯基)-丙-2-醇：

在0℃向4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苄腈(1.4g，8.7mmol)在四 氢呋喃(26ml)内的搅拌溶液中加入1.0M氢化锂铝(26ml，26.1mmol) 溶液。将该反应混合物回流30分钟，冷却至0℃，然后滴加甲醇以中 止反应。然后将该反应混合物倒入氯仿(300ml)中，用水(80ml)洗涤， 用硫酸镁(MgSO4)干燥，并浓缩，获得了1.1g 2-(4-氨基甲基苯基)- 丙-2-醇，为白色固体，熔点为62-64℃。 元素分析C10H11NO的计算值：C，74.51；H，6.88；N，8.69.实测 值：C，72.74；H，8.89；N，7.66。 制备例8 式(5.0.8)的4-[4-氟-苯氧基]-嘧啶-5-甲酸乙酯：

按照类似于在上述制备例4中描述的方法，用4-氟苯酚代替苯并 [1，3]二氧杂环戊烯-5-醇，制得了本标题化合物。 1H-NMR(CDCl3)：δ9.1(s，1H)，8.8(s，1H)，7.1(m，4H)，4.4 (q，2H，J＝7Hz)，1.4(t，3H，J＝7Hz)。 制备例9 式(5.0.9)的4-[4-氟-苯氧基]-嘧啶-5-甲酸：

按照类似于在上述制备例5中描述的方法，由4-[4-氟-苯氧基]- 嘧啶-5-甲酸乙酯制得了本标题化合物。 1H-NMR(d6-DMSO)：δ8.6(s，1H)，8.5(s，1H)，7.2(m，2H)， 7.1(m，2H)。 实施例1 式(6.0.1)的4-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基氧基)-嘧啶-5-甲酸2- 氟-4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苄基酰胺：

向在无水二氯甲烷(30mL)内的4-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5- 基氧基)嘧啶-5-甲酸(0.34g)中加入1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙 基碳二亚胺盐酸盐(0.30g)、1-羟基苯并三唑水合物(0.21g)、和二 异丙基乙胺(1mL)。将该反应混合物在室温搅拌30分钟，然后一次性 加入上述制备例3的化合物(0.26g)2-氟-4-(1-羟基-1-甲基-乙基)- 苄腈。搅拌18小时后，加入水(25mL)，然后将所得混合物用二氯甲 烷萃取(3×30mL)。用硫酸镁(MgSO4)干燥后，将有机层真空浓缩，通 过硅胶色谱纯化，获得了纯的本标题化合物，为玻璃状物。 1H NMR(CDCl3)：δ9.40(s，1H)，8.81(s，1H)，8.0(br s， 1H)，7.39(t，J＝8Hz，1H)，7.22-6.98(m，2H)，6.86(d，J＝ 8Hz，1H)，6.66(s，1H)，6.61(m，1H)，6.05(s，2H)，4.71(d， J＝6Hz，2H)，1.55(s，6H).LRMS m/z 426(m+H)+。 实施例2 式(6.0.2)的4-(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基氧基)-嘧啶-5-甲酸 4-(1-羟基-1-甲基-乙基)苄基酰胺：

按照类似于在上述实施例1中描述的方法，但是使用2-(4-氨基甲 基苯基)-丙-2-醇(制备例7)代替2-(4-氨基甲基-3-氟-苯基)-丙-2- 醇，制得了本标题化合物。 1H NMR(CDCl3)：δ9.39(s，1H)，8.78(s，1H)，7.83(br s，1 H)，7.44(d，J＝8Hz，2H)，7.30(d，J＝8Hz，2H)，6.81(d，J ＝8Hz，1H)，6.61(s，1H)，6.56(m，1H)，6.01(s，2H)，4.67 (d，J＝6Hz，2H)，1.54(s，6H)。 LR-MS m/z 408(m+H)+。 实施例3 式(6.0.3)的2-N-(2-氯-苄基)-1-[6-(4-氟-苯氧基)-嘧啶-5-基]- 甲酰胺：

按照类似于在上述实施例1中描述的方法，由4-[4-氟-苯氧基]- 嘧啶-5-甲酸和2-氯-苄基胺制得了本标题化合物；熔点为135-137 ℃。 元素分析C18H13N3O2ClF的计算值：C，60.43；H，3.66；N，11.74. 实测值：C，60.19；H，3.55；N，11.63。