技术领域
[0001] 本
发明涉及一种
腹膜透析液，特别是涉及一种含吡非尼
酮的腹膜
透析液。
背景技术
[0002] 腹膜透析作为一种
治疗终末期肾脏病(end stage renal disease，ESRD)患者的方法，由于其具有治疗，操作简便，减少血源性
疾病传播，保护残存肾功能等特殊优点，近年来已得到广泛的应用。其原理是以腹膜为半透膜,以不断更换新鲜透析液来达到清除体内过多的
水分及毒素的目的。相比于
血液透析的透析膜而言,腹膜的孔径较大,因而可清除大、中、小分子的毒素。但是，
超滤衰竭，腹膜损伤等不断挑战着腹膜透析技术的进一步发展。
[0003] 目前国内市售的腹透液仅有
葡萄糖作为渗透剂，是应用最早而且目前仍被广泛使用的腹膜透析液渗透剂，能被腹膜很快吸收，进人血液后也容易被代谢。因此，为了保证足够的超滤量，就需要应用高浓度以维持渗透梯度。体外研究表明：高浓度葡萄糖作为渗透剂可上调腹膜间皮细胞
纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA的表达和合成，可合成许多细胞外基质包括层连蛋白、纤维连接蛋白及Ⅰ、Ⅲ型胶原，其中TGF-β1是一种强效的致纤维化因子,FN合成增加是纤维化
进程的典型表现，它们可参与腹膜硬化的形成，导致透析效能下降。且在高浓度葡萄糖引起腹膜纤维化的机制中，转化生长因子-β1的生成增加是重要的因素之一。还有研究发现，高糖腹膜透析液可导致腹膜间皮细胞肥大，肥大的间皮细胞是细胞早期衰老的表现，可能与腹膜的损伤有关，最终使腹膜对感染和纤维化的防御功能受损，导致纤维化和功能进行性丧失。
[0004] 目前，随着腹膜透析
插管技术的改进,感染率的下降,腹膜纤维化导致的超滤功能丧失已是CAPD患者退出腹膜透析治疗的主要原因之一，因此，探索有效防治措施，研究新型的腹膜透析液，对延长腹膜寿命和患者透龄，提高腹膜透析水平意义重大。
[0005] 吡非尼酮（Pirfenidone，简称PFD）是一种有效的细胞因子
抑制剂，能够通过参与调节某些因子，抑制
成纤维细胞的
生物学活性，导致
细胞增殖受抑，基质胶原合成减少，具有广谱的抗
肺、肝、肾和心纤维化的作用，其作用机制包括：抑制脂质过
氧化，减少转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源性的生长因子(PDGF)和
肿瘤坏死因子α(TNF-α)的生成，从而减轻
炎症反应。
发明内容
[0006] 基于此，本发明提供一种含吡非尼酮的腹膜透析液。
[0007] 解决上述技术问题的具体技术方案如下：
[0008] 一种腹膜透析液，包括浓度为0.01-5%w/v的吡非尼酮。
[0009] 在其中一些
实施例中，所述吡非尼酮的浓度为0.1-2%w/v。
[0010] 在其中一些实施例中，所述腹膜透析液的pH为6.5-8.0。
[0011] 在其中一些实施例中，包括上述吡非尼酮及腹膜透析液中可接受的缓冲
碱、渗透剂、
电解质和注射用水。
[0012] 在其中一些实施例中，所述缓冲碱为乳酸盐、
碳酸氢盐、
柠檬酸盐、异柠檬酸盐、丙
酮酸盐、
琥珀酸盐、延胡索
盐酸、苹果酸盐或草酰乙酸盐。
[0013] 在其中一些实施例中，所述缓冲碱为乳酸盐或碳酸氢盐。
[0014] 在其中一些实施例中，所述渗透剂为葡萄糖、
氨基酸、木糖醇、山梨糖醇、果糖、多聚糖或甘油。
[0015] 在其中一些实施例中，所述
电解质为
氯化钠、氯化
钙或氯化镁中的一种或两种以上。
[0016] 在其中一些实施例中，所述腹膜透析液包括：
[0017] 钠离子80-150mEq/L，
[0018] 氯离子80-110mEq/L，
[0019] 钙离子0-4.0mEq/L，
[0020] 镁离子0-4.0mEq/L，
[0022] 葡萄糖0-5%w/v，
[0023] 吡非尼酮0.1-2%w/v。
[0024] 在其中一些实施例中，还包括血管扩张剂、利尿剂、
激素、维生素或抗
氧化剂。
[0025] 本发明所述一种腹膜透析液具有以下优点或有益效果：
[0026] 本发明所制得的腹膜透析液，经大量的实验研究与分析，得出于常规腹膜透析液中添加0.01-5%w/v的吡非尼酮，可显著阻断及延缓现有腹膜透析液中高浓度葡萄糖造成的腹膜纤维化的进程。
具体实施方式
[0027] 以下将结合具体实施例对本发明做进一步说明。
[0028] 下述w/v是指
质量体积比，即每100ml水溶液中溶质含有的克数。
[0029] 脂多糖购自美国sigma。
[0030] 本发明所述一种腹膜透析液的具体实施例参见下表1：
[0031] 表1对比例和实施例1-6的腹膜透析液配方表
[0032]
[0033] 实施例7抗腹膜纤维化评价
[0034] 一、实验目的
[0035] 通过对比分析指标：大鼠腹膜厚度和大鼠腹水和血液中TGF-β1浓度，以评价本发明实施例1-4中腹膜透析液的抗腹膜纤维化效果。
[0036] 二、实验方法
[0037] （1）大鼠腹膜厚度的测定
[0038] 将对比例和实施例1-6所述的腹膜透析液装入三层共挤输液用膜制袋中，湿热灭菌，灭菌
温度115℃，灭菌时间30min。
[0039] 将雄性SD大鼠80只按随机数字表分为8组，即A组-H组，每组10只，其中，A组作为正常对照组，
腹腔注射20ml生理盐水；其余均采用4.25%含葡萄糖透析液+脂多糖致腹膜纤维化模型，B组为模型对照组，腹腔注射20ml常规4.25%腹膜透析液（即对比例所述透析液），C组-H组，分别腹腔注射20ml实施例1-6所制得的腹膜透析液，上述各组腹膜注射均为1次/d，观察4周。
[0040] 上述含葡萄糖透析液+脂多糖致腹膜纤维化模型的造模方法为：每日大鼠腹腔内直接注射4.25%含糖透析液20ml,并在第8、10、12天加入脂多糖75μg。
[0041] 4周后取大鼠壁层腹膜组织，采用Van Gieson氏法
染色即（VG法染色）：切片脱蜡至水，用Weigert氏苏木精染20min，流水冲洗10min，染Van Gieson氏液1min，用体积分数95%
乙醇快速分化，无水乙醇脱水，二
甲苯透明，封固。光学
显微镜观察，镜下测量腹膜胶原厚度。
[0042] （2）血液中TGF-β1浓度的测定：
[0043] 在无菌条件下用一次性无菌
注射器抽取腹水，同时经下腔静脉
采血。
[0044] 采用双
抗体夹心ELISA法对转化生长因子TGF-β1浓度进行测定，具体方法为：将标准品、待测样品加入到预先包被TGF-β1单克隆抗体透明酶标包被板中，37℃反应90分钟，洗涤除去未结合的成分，再用抗体稀释液稀释的生物素抗大鼠TGF-β1抗体每孔加入0.1ml(1:100)，37℃反应60分钟后，0.01M PBS洗涤除去未结合的成分，然后加入稀释液稀释的亲和素过氧化物酶复合物每孔0.1ml(1:100)，37℃反应30分钟，亲和素和生物素特异性结合，0.01M PBS洗去未结合的酶结合物，TMB显色液0.1ml加入每孔，反应15分钟，底物（TMB)在辣根过氧化物酶（HRP)催化下转化为蓝色产物，加入终止液变黄，
颜色的深浅与样品中的TGF-β1浓度呈正相关，用酶标仪在450nm测定OD值，根据标准品的浓度和样品的OD值计算待测转化生长因子β1的浓度。
[0045] 结果判定：将酶标板在酶标仪上，于450nm读数，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，生成标准曲线和直线回归方程式，根据公式计算未知样品的浓度，并记录。
[0046] 三、实验结果
[0047] （1）大鼠腹膜厚度的试验结果如表2：
[0048] 表2各组大鼠腹膜厚度比较表（ μm）
[0049]
[0050] 注：*P<0.05，与模型对照组B组比较。
[0051] 从表2可知：与B组-模型对照组相比，C组-H组的腹膜厚度均有所减少，其中，与模型对照组B组相比：C组-F组的腹膜增厚降低，且差异显著，实验期间SD大鼠的死亡率低；H组的腹膜增厚无显著性差异，其原因为吡非尼酮浓度过低，仅为0.005%w/v；G组的腹膜增厚降低，且差异显著，说明浓度为6%w/v的吡非尼酮，有效延缓腹膜增厚的效果，但因G组浓度过高，实验结束后，致死率高达50%。另外，D组、E组、G组同为吡非尼酮较高浓度组，E组和G组与D组相比，无显著性差异（P>0.05），可以看出当吡非尼酮浓度大于2%时，对腹膜厚度影响较小。
[0052] （2）大鼠血液中TGF-β1浓度的试验结果如表3：
[0053] 表3各组大鼠血液中TGF-β1浓度表
[0054]
[0055]
