一种螳螂卵蛸蛋白的提取方法及其应用
阅读：2发布：2022-04-17
专利汇可以提供一种螳螂卵蛸蛋白的提取方法及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种螳螂卵蛸蛋白的提取方法及其应用，提供一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，具体操作包括：将螳螂卵蛸洗净捣碎，使用NaOH溶解后进行多次除杂过滤，最后以 透析 的方式提取螳螂卵蛸蛋白后 冷冻干燥 制成成品。本发明通过提取螳螂卵蛸蛋白，从而有效的利用了天然资源。，下面是一种螳螂卵蛸蛋白的提取方法及其应用专利的具体信息内容。
1.一种螳螂卵蛸蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗3～5次至洁净，沥干，粉碎过60目筛，再加入12～15％的丁醇，搅拌除脂，过滤后干燥，得除脂后的螳螂卵蛸；
(2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入15～20倍的蒸馏水溶液搅拌溶解4-8h，过滤，收集滤液；
(3)将步骤(2)中收集的滤液在0～4℃下静置1～3h，然后置于温度4～8℃下进行离心分离，收集上清液；
(4)将步骤(3)中收集的上清液放入透析袋中，然后将透析袋放在温度为2～4℃的去离子水中进行透析10～15h，每隔5h换一次去离子水，收集透析液；
(5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
(6)将步骤(5)收集的沉淀进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
2.根据权利要求1所述的螳螂卵蛸蛋白的提取方法，其特征在于，所述步骤(3)的离心条件：离心机转速为5000～8000r/min，离心时间为20～30min。
3.根据权利要求1所述的螳螂卵蛸蛋白的提取方法，其特征在于，所述步骤(4)中透析袋的截留分子量为3000～3500。
4.根据权利要求1所述的螳螂卵蛸蛋白的提取方法，其特征在于，所述步骤(4)中去离子水量为上清液体积的10～15倍，换水量为上清液体积的10～15倍。
5.根据权利要求1所述的螳螂卵蛸蛋白的提取方法，其特征在于，所述步骤(6)的冷冻干燥条件为利用4～6h时间将温度降低到-30℃以下。
6.根据权利要求1～5任一项所述的提取方法制得的螳螂卵蛸蛋白在制备饲料中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述饲料为蜥蜴饲料。
8.一种蜥蜴饲料，其特征在于，由以下重量份的成分组成：螳螂卵蛸蛋白10～15份，黄粉虫粉5～15份，蚯蚓粉15～20份，大豆肽5～15份，骨粉5～10份，蛋壳粉1～4份，鱼肝油1～
3份，苜蓿粉3～6份，复合维生素0.1～1份，复合矿物质0.1～1份。
一种螳螂卵蛸蛋白的提取方法及其应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种蛋白的提取方法，具体的涉及一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法。背景技术：
[0002] 蛋白质资源不足是当今世界存在的四大危机之一，缺乏动物性蛋白质、寻求新的蛋白质资源已是摆在我们面前的一项迫切任务。目前螳螂养殖作为一种新兴的特种养殖行业，开始具有一定的规模，但其利用方法大多为生物学上的方法，用于驱赶、杀灭害虫，经过专利检索后发现对其中成分提取的研究并不多。
[0003] 对于螳螂卵鞘蛋白而言氨基酸的总含量达到干重的66％以上，其中干重的30％为包括组氨酸在内的9种必需氨基酸，可见螳螂卵鞘蛋白为一种完全蛋白质原料，可以将其进一步加工成各种高蛋白产品。
[0004] 由于螳螂卵鞘对螳螂卵起到保护作用的同时也残留有一定的营养物质，其中包括大量充当能量储备的脂肪，这些脂肪在蛋白提取过程中会成为杂质，宜将其单独分离除去。
[0005] 蛋白质是由多种氨基酸以肽键性质构成的高分子化学键，具有较复杂的空间结构，且容易受到物理化学因素，导致蛋白质内部结构与性质发生改变，从而影响原本的生物活性。
[0006] 而通过检索专利池可以发现，关于螳螂成分，尤其是螳螂卵鞘蛋白的提取专利较少。发明内容：
[0007] 本发明的目的在于，提供一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，以解决上述技术问题。本发明通过从螳螂卵蛸中提取蛋白，达到充分利用自然资源的目的。
[0008] 为实现上述目的，本发明提供如下方案：
[0009] 本发明提供一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0011] (2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入15～20倍的蒸馏水溶液搅拌溶解4-8h，过滤，收集滤液；
[0012] (3)将步骤(2)中收集的滤液在0～4℃下静置1～3h，然后置于温度4～8℃下进行离心分离，收集上清液；
[0014] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0015] (6)将步骤(5)收集的沉淀进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0016] 进一步的，所述步骤(3)的离心条件：离心机转速为5000～8000r/min，离心时间为20～30min。
[0017] 进一步的，所述步骤(4)中透析袋的截留分子量为3000～3500。
[0018] 进一步的，所述步骤(4)中去离子水量为上清液体积的10～15倍，换水量为上清液体积的10～15倍。
[0019] 进一步的，所述步骤(6)的冷冻干燥条件为利用4～6h时间将温度降低到-30℃以下。
[0020] 进一步的，所述螳螂卵蛸蛋白能应用于饲料。
[0021] 进一步的，所述螳螂卵鞘蛋白能制备成蜥蜴饲料。
[0022] 进一步的，所述的蜥蜴饲料，由以下重量份的成分组成：螳螂卵蛸蛋白10～15份，黄粉虫粉5～15份，蚯蚓粉15～20份，大豆肽5～15份，骨粉5～10份，蛋壳粉1～4份，鱼肝油1～3份，苜蓿粉3～6份，复合维生素0.1～1份，复合矿物质0.1～1份。
[0023] 与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
[0024] (1)本发明通过利用丁醇的亲脂特性，能有效分离螳螂卵鞘中含量较多的脂肪，使提取物杂质减少；
[0025] (2)本发明的螳螂卵鞘蛋白提取过程中，采用低温条件进行，能有效保持蛋白的结构及其生物活性，同时在保持低温的条件下进行透析处理，能进一步获得较高品质的蛋白质；
[0026] (3)螳螂卵鞘中含有较高比例的必需氨基酸，同时由于采用本发明技术提取的螳螂卵鞘蛋白的活性保持度高，因此可以通过添加进饲料配方中，制成蜥蜴饲料，以达到促进生长、添加所需的各种氨基酸成分的功效。
具体实施方式
[0027] 下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。
[0028] 实施例1
[0029] 一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0030] (1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗4次至洁净，沥干，粉碎过60目筛，再加入13.5％的丁醇，搅拌除脂，过滤后干燥，得除脂后的螳螂卵蛸；
[0031] (2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入18倍的蒸馏水溶液搅拌溶解6h，过滤，收集滤液；
[0032] (3)将步骤(2)中收集的滤液在2.5℃下静置2h，然后置于温度6℃下进行离心分离，离心机转速为6500r/min，离心时间为25min，收集上清液；
[0033] (4)将步骤(3)中收集的上清液放入分子量为3200透析袋中，然后将透析袋放在温度为3℃、13倍上清液体积的去离子水中进行透析12h，每隔5h换一次13倍上清液体积的去离子水，收集透析液；
[0034] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0035] (6)将步骤(5)收集的沉淀在-30℃以下5h时间内进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0036] 实施例2
[0037] 一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0038] (1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗3次至洁净，沥干，粉碎过60目筛，再加入12％的丁醇，搅拌除脂，过滤后干燥，得除脂后的螳螂卵蛸；
[0039] (2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入15倍的蒸馏水溶液搅拌溶解4h，过滤，收集滤液；
[0040] (3)将步骤(2)中收集的滤液在0℃下静置1h，然后置于温度4℃下进行离心分离，离心机转速为5000r/min，离心时间为20min，收集上清液；
[0041] (4)将步骤(3)中收集的上清液放入分子量为3000透析袋中，然后将透析袋放在温度为2℃、10倍上清液体积的去离子水中进行透析10h，每隔5h换一次10倍上清液体积的去离子水，收集透析液；
[0042] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0043] (6)将步骤(5)收集的沉淀在-30℃以下4h时间内进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0044] 实施例3
[0045] 一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0046] (1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗5次至洁净，沥干，粉碎过60目筛，再加入15％的丁醇，搅拌除脂，过滤后干燥，得除脂后的螳螂卵蛸；
[0047] (2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入20倍的蒸馏水溶液搅拌溶解8h，过滤，收集滤液；
[0048] (3)将步骤(2)中收集的滤液在4℃下静置3h，然后置于温度8℃下进行离心分离，离心机转速为8000r/min，离心时间为30min，收集上清液；
[0049] (4)将步骤(3)中收集的上清液放入分子量为3500透析袋中，然后将透析袋放在温度为4℃、5倍上清液体积的去离子水中进行透析15h，每隔5h换一次15倍上清液体积的去离子水，收集透析液；
[0050] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0051] (6)将步骤(5)收集的沉淀在-30℃以下6h时间内进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0052] 实施例4
[0053] 一种蜥蜴饲料，由以下重量份的成分组成：螳螂卵蛸蛋白10份，黄粉虫粉5份，蚯蚓粉20份，大豆肽15份，骨粉5份，蛋壳粉4份，鱼肝油1份，苜蓿粉6份，复合维生素0.1份，复合矿物质1份。
[0054] 实施例5
[0055] 一种蜥蜴饲料，由以下重量份的成分组成：螳螂卵蛸蛋白15份，黄粉虫粉15份，蚯蚓粉15份，大豆肽5份，骨粉10份，蛋壳粉1份，鱼肝油3份，苜蓿粉3份，复合维生素1份，复合矿物质0.1份。
[0056] 对比例1
[0057] 一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0058] (1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗4次至洁净，沥干，粉碎过60目筛；
[0059] (2)取步骤(1)中的螳螂卵蛸加入18倍的蒸馏水溶液搅拌溶解6h，过滤，收集滤液；
[0060] (3)将步骤(2)中收集的滤液在2.5℃下静置2h，然后置于温度6℃下进行离心分离，离心机转速为6500r/min，离心时间为25min，收集上清液；
[0061] (4)将步骤(3)中收集的上清液放入分子量为3200透析袋中，然后将透析袋放在温度为3℃、13倍上清液体积的去离子水中进行透析12h，每隔5h换一次13倍上清液体积的去离子水，收集透析液；
[0062] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0063] (6)将步骤(5)收集的沉淀在-30℃以下5h时间内进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0064] 对比例2
[0065] 一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0066] (1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗4次至洁净，沥干，粉碎过60目筛，再加入13.5％的丁醇，搅拌除脂，过滤后干燥，得除脂后的螳螂卵蛸；
[0067] (2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入18倍的蒸馏水溶液搅拌溶解6h，过滤，收集滤液；
[0068] (3)将步骤(2)中收集的滤液在5℃下静置2h，然后置于温度9℃下进行离心分离，离心机转速为6500r/min，离心时间为25min，收集上清液；
[0069] (4)将步骤(3)中收集的上清液放入分子量为3200透析袋中，然后将透析袋放在温度为5℃、13倍上清液体积的去离子水中进行透析12h，每隔5h换一次13倍上清液体积的去离子水，收集透析液；
[0070] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0071] (6)将步骤(5)收集的沉淀在-30℃以下5h时间内进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0072] 对比例3
[0073] 一种从螳螂卵鞘中提取蛋白的方法，包括如下步骤：
[0074] (1)取适量螳螂卵蛸，用清水漂洗4次至洁净，沥干，粉碎过60目筛，再加入13.5％的丁醇，搅拌除脂，过滤后干燥，得除脂后的螳螂卵蛸；
[0075] (2)取步骤(1)中除脂后的螳螂卵蛸加入18倍的蒸馏水溶液搅拌溶解6h，过滤，收集滤液；
[0076] (3)将步骤(2)中收集的滤液在18℃下静置2h，然后置于温度18℃下进行离心分离，离心机转速为6500r/min，离心时间为25min，收集上清液；
[0077] (4)将步骤(3)中收集的上清液放入分子量为3200透析袋中，然后将透析袋放在温度为18℃、13倍上清液体积的去离子水中进行透析12h，每隔5h换一次13倍上清液体积的去离子水，收集透析液；
[0078] (5)取步骤(4)中的透析液，调节pH值至等电点，过滤，收集沉淀；
[0079] (6)将步骤(5)收集的沉淀在-30℃以下5h时间内进行冷冻干燥，即得螳螂卵蛸蛋白。
[0080] 结果分析：实施例1-5和对比例1-2、对照组的制备条件螳螂卵鞘蛋白的含量如下表1。
[0081] 提取蛋白质的含量：采用凯氏定氮法测定。
[0082] 表1：实施例1-5和对比例1-3的性能测试结果：
[0083]
[0084] 结果表明：
[0085] 从表1中可以看出，由本发明提取的螳螂卵鞘蛋白含量均达到了较高水平，且优于对比例。对比例1未加入丁醇对螳螂卵鞘的处理，其它的制备工艺与实施例1相同，结果对比例1得到螳螂卵鞘蛋白的含量明显低于实施例1，说明通过利用丁醇对螳螂卵鞘进行处理能有效分离螳螂卵鞘中含量较多的脂肪，使提取物杂质减少；对比例2改变提高了制备工艺中的温度参数，结果对比例2得到螳螂卵鞘蛋白的含量低于实施例1；对比例3提高了温度提取，结果对比例3得到螳螂卵鞘蛋白的含量明显低于实施例1，表明在低温条件进行，能有效保持蛋白的结构及其生物活性，同时在保持低温的条件下进行透析处理，能进一步获得较高品质的蛋白质。
[0086] 以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应该涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。
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