一种青决保肝明目药对组合药物、制备方法及其应用
阅读：452发布：2023-03-06
专利汇可以提供一种青决保肝明目药对组合药物、制备方法及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种青决保肝明目药对 组合药物 ，该药对组合药物为决明子和大青叶两种药材提取得到的提取物；制备方法为采用回流对大青叶和决明子的混合药材进行提取，溶媒为乙酸乙酯，溶媒的量为药材重量的7倍，提取2次，每次1.0h；本发明提供了一种中药药对组合的提取物，该药对组合物相对于两种单一药材的提取物活性更好，在保肝明目，乃至 治疗 白内障 病症上居然有良好的活性。，下面是一种青决保肝明目药对组合药物、制备方法及其应用专利的具体信息内容。
1.一种青决保肝明目药对组合药物，其特征在于：为决明子和大青叶两种药材提取得到的提取物;具体为采用乙酸乙酯为溶媒，回流提取决明子和大青叶两种药材得到的混合物；
所述决明子和大青叶的重量比为1-10:10-1。
2.根据权利要求1所述的青决保肝明目药对组合药物，其特征在于：所述决明子和大青叶的重量比为3:1。
3.根据权利要求2所述的青决保肝明目药对组合药物的制备方法，其特征在于：采用回流对大青叶和决明子的混合药材进行提取，溶媒为乙酸乙酯，溶媒的量为药材重量的7倍，提取2次，每次1.0h。
4.权利要求1或2所述的青决保肝明目药对组合药物在制备治疗白内障药物中的应用。
5.权利要求1或2所述的青决保肝明目药对组合药物在制备保肝明目药物中的应用。
一种青决保肝明目药对组合药物、制备方法及其应用
技术领域
[0001] 本发明涉及一种中药组合物，更具体的说涉及一种青决保肝明目药对组合药物、制备方法及其应用。技术背景
[0002] 白内障是我国首要的致盲原因，目前其唯一而有效的治疗方法是手术。但白内障手术可能会出现一些严重的并发症，这既会增加患者的痛苦，也会增加患者的经济负担。因此，早期用药物预防或治疗白内障就显得十分重要。由于多数白内障的发展缓慢，需长期用药，而中草药系纯天然药物，副作用小，适宜长期使用，因此对中草药有效方剂的开发已成为近年来抗白内障药物研究的热点之一。
发明内容
[0003] 为解决上述问题，发明人提供了一种青决保肝明目药对组合药物，具体为决明子和大青叶两种药材提取得到的提取物。
[0004] 采用乙醇或乙酸乙酯中的一种为溶媒提取决明子和大青叶两种药材得到的混合物。
[0005] 采用乙酸乙酯为溶媒，回流提取决明子和大青叶两种药材得到的混合物。
[0006] 所述决明子和大青叶的重量比为1-10:10-1。
[0007] 所述决明子和大青叶的重量比为3:1。
[0008] 所述的青决保肝明目药对组合药物的制备方法，采用回流对大青叶和决明子的混合药材进行提取，溶媒为乙酸乙酯，溶媒的量为药材重量的7倍，提取2次，每次1.0h。
[0009] 上述所述的青决保肝明目药对组合药物在制备治疗白内障药物中的应用。
[0010] 上述所述的青决保肝明目药对组合药物在制备保肝明目药物中的应用。
[0011] 本发明的有益技术效果是：本发明提供了一种中药药对组合的提取物，该药对组合物相对于两种单一药材的提取物活性更好，在保肝明目，乃至治疗白内障病症上居然有良好的活性。
具体实施方式
[0012] 实施例1不同溶媒提取对活性成分的影响
[0013] 称取重量比为1:1的决明子和大青叶药材3组，分别采用70%的乙醇、乙酸乙酯和水作为溶媒，用回流方法提取，溶媒的量为药材重量的7倍，提取的次数为2次，每次1h；分别合并回收各组的提取液，回收溶剂制成干膏，制备得到醇提组、乙酸乙酯提组和水提组；检测各组的总固体收率、大黄酚含量和靛玉红含量，具体如表1所示。
[0014] 表1提取工艺正交实验结果
[0015]组别 总固体得率/(%) 大黄酚的含量/(mg/g) 靛玉红含量/（mg/g）
醇提取组 31.11 2.016 0.089
乙酸乙酯提组 20.46 4.954 0.238
水提组 14.32 0.291 0.03
醇提取组 31.11 2.016 0.089
乙酸乙酯提组 20.46 4.954 0.238
水提组 14.32 0.291 0.03
[0016] 实施例2采用乙酸乙酯提取大青叶和决明子混合物的条件考察
[0017] 本实施例以测定提取液中大黄酚的含量、靛玉红的含量和总固体得率为指标，采用正交试验法，实验设计见表2所示；优选决明子的提取工艺条件。根据预试验结果，选取影响提取效果的因素和水平，见表3所示。
[0018] 表2提取工艺因素水平表
[0019]
[0020] 样品溶液的制备：称取重量比为2:1的决明子和大青叶药材，按表3试验列号的实验方法，以乙酸乙酯为溶媒，分别回流提取、滤过，并浓缩定容至250mL，放置备用。
[0022] 表3提取工艺正交实验结果
[0023]
[0024]
[0025] 由方差分析可知，A、B、C三因素对提取工艺有显著影响。因素A：水平2﹥3﹥1；因素B：水平2﹥3﹥1；因素C：水平2﹥1﹥3。各因素的最佳组合应为A2B2C2：即提取工艺应该是加溶媒7倍、提取2次，每次1.0h。
[0026] 实施例3实验样品的制备
[0027] 称取重量比为10:1的决明子和大青叶药材，根据实施例中最优的方法，采用乙酸乙酯作为溶媒，提取并合并提取液，回收制成干膏，制备得到实验组Ⅰ；
[0028] 称取重量比为1:10的决明子和大青叶药材，根据实施例中最优的方法，采用乙酸乙酯作为溶媒，提取并合并提取液，回收制成干膏，制备得到实验组Ⅱ；
[0029] 称取重量比为3:1的决明子和大青叶药材，根据实施例中最优的方法，采用乙酸乙酯作为溶媒，提取并合并提取液，回收制成干膏，制备得到实验组Ⅲ；
[0030] 称取决明子药材，根据实施例中最优的方法，采用乙酸乙酯作为溶媒，提取并合并提取液，回收制成干膏，制备得到决明子对照组；
[0031] 称取大青叶药材，根据实施例中最优的方法，采用乙酸乙酯作为溶媒，提取并合并提取液，回收制成干膏，制备得到大青叶对照组。
[0032] 实施例4青决保肝明目药对组合药物治疗白内障的活性研究
[0033] 将Wistar大鼠乳鼠随机分为5组，即对照组1O只、模型组1O只、醇提组1O只、乙酸乙酯提取组10只、水提组10只。各组乳鼠年龄相同，雌雄兼用，体重相近，以母乳及普通颗粒饲料分笼喂养，自由饮水。给模型组、醇提组、乙酸乙酯提取组、水提组大鼠颈背部皮下注射小剂量(3.46mg/kg)亚硒酸钠，隔日1次，连续3次。对照组大鼠不做任何处理。末次给药后第3天用裂隙灯显微镜观察大鼠晶状体变化，晶状体混浊为造模成功。
[0034] 将青决保肝明目药对组合药物捻碎后用蒸馏水配成混悬液。配制不同质量浓度，分别装于玻璃瓶中，密封，置人4℃冰箱保存备用。给模型组、醇提组、乙酸乙酯提取组、水提组给药实施例1中制备得到的对应样品；大鼠分别灌胃30mg/mL的实施例青决保肝明目药对组合药物。灌胃量均为原药材3g·1kg-1体质量，1次/d，持续30d。对照组与模型组大鼠不用任何药物。
[0035] 实验结束时，用双星明滴眼液将各组实验大鼠双眼瞳孔散大，用裂隙灯显微镜检查并记录晶状体混浊情况。晶状体混浊程度参照文献的标准分级：“-”示无混浊，即晶状体透明；“+”示核混浊，即晶状体核发生混浊，但皮质部仍清亮；“*”示全混浊，即晶状体核及皮质均出现混浊。
[0036] 实验结束时，用不锈钢眼科剪处死各组实验大鼠，立即取出双侧眼球。将眼球用O～4℃生理盐水冲洗3次后，剥离晶状体，用滤纸吸干，放在电子天平上称重，并记录。将双侧晶状体放入5mL匀浆杯内，按比例加入8.6g/L冰生理盐水，用控温多用高速组织捣碎机以10000r/min捣碎1.5min，制成3.5%晶状体匀浆。再将匀浆以2000r/min低速离心8min后，取出上清液。用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，用硫代巴比妥酸法测定MDA含量，用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。
[0037] 实验数据以均数±标准差( ±s)表示，各组间比较用t检验，P
[0038] 对照组、给模型组、醇提组、乙酸乙酯提取组、水提组大鼠在注射亚硒酸钠3次后的第3天，肉眼及裂隙灯显微镜观察发现这些大鼠双眼晶状体均出现了不同程度的灰白色混浊，表明注射亚硒酸钠后的大鼠100%形成了不同程度的白内障，而对照组大鼠则无1例出现晶状体混浊。于杀鼠的当天，用裂隙灯显微镜检查各组实验大鼠晶状体混浊情况，结果见表4所示。
[0039] 表4各组大鼠晶状体浑浊情况
[0040]
[0041] 注：“-”表示晶状体透明；“+”表示晶状体核浑浊，但皮质仍然清亮；“*”表示晶核及皮均出现浑浊。
[0042] 模型组大鼠晶状体SOD活性明显低于对照组，而MDA含量显著高于对照组，其差异均具有显著性意义。青决保肝明目药对组合药物2个剂量组的SOD活性均高于模型组，而MDA含量均低于模型组，其差异均有统计学意义，表明青决保肝明目药对组合药物能提高自内障大鼠的抗氧化能力；见表5所示。
[0043] 表5各组大鼠晶状体SOD活性或MDA含量的比较( ±s)
[0044]组别 大鼠数量/n SOD(U/mgprot) MDA(nmol/mgprot)
对照组 10 34.26±3.28 0.22±0.27
模型组 10 27.94±3.12 1.26±0.26
醇提组 10 31.87±3.77 0.71±0.35
乙酸乙酯提取组 10 29.65±4.23 0.93±0.45
水提组 10 27.51±4.62 1.05±0.65
对照组 10 34.26±3.28 0.22±0.27
模型组 10 27.94±3.12 1.26±0.26
醇提组 10 31.87±3.77 0.71±0.35
乙酸乙酯提取组 10 29.65±4.23 0.93±0.45
水提组 10 27.51±4.62 1.05±0.65
[0045] 注：*与对照组比较，P﹤0.05；△与模型组比较，P﹤0.05。
[0046] 表5所示数据显示，采用乙酸乙酯制备的大青叶和决明子制备的提取物，治疗白内障效果最佳。
[0047] 实施例5青决保肝明目药对组合药物治疗白内障的活性研究2
[0048] 将Wistar大鼠乳鼠随机分为7组，即对照组1O只、模型组1O只、实验组Ⅰ1O只、实验组Ⅱ10只、实验组Ⅲ10只、决明子对照组10只和大青叶对照组10只。各组乳鼠年龄相同，雌雄兼用，体重相近，以母乳及普通颗粒饲料分笼喂养，自由饮水。给模型组、实验组Ⅰ、实验组Ⅱ、实验组Ⅲ、决明子对照组和大青叶对照组大鼠颈背部皮下注射小剂量(3.46mg/kg)亚硒酸钠，隔日1次，连续3次。对照组大鼠不做任何处理。末次给药后第3天用裂隙灯显微镜观察大鼠晶状体变化，晶状体混浊为造模成功。
[0049] 将青决保肝明目药对组合药物捻碎后用蒸馏水配成混悬液。配制不同质量浓度，分别装于玻璃瓶中，密封，置人4℃冰箱保存备用。给模型组、实验组Ⅰ、实验组Ⅱ、实验组Ⅲ、决明子对照组和大青叶对照组大鼠分别灌胃30mg/mL的实施例青决保肝明目药对组合药物。灌胃量均为原药材3g·1kg-1体质量，1次/d，持续30d。对照组与模型组大鼠不用任何药物。
[0050] 采用实施例4所述的方法进行检测。
[0051] 实验数据以均数±标准差( ±s)表示，各组间比较用t检验，P
[0052] 模型组、实验组Ⅰ、实验组Ⅱ、实验组Ⅲ、决明子对照组和大青叶对照组大鼠在注射亚硒酸钠3次后的第3天，肉眼及裂隙灯显微镜观察发现这些大鼠双眼晶状体均出现了不同程度的灰白色混浊，表明注射亚硒酸钠后的大鼠100%形成了不同程度的白内障，而对照组大鼠则无1例出现晶状体混浊。于杀鼠的当天，用裂隙灯显微镜检查各组实验大鼠晶状体混浊情况，结果见表6所示。
[0053] 表6各组大鼠晶状体浑浊情况
[0054]
[0055] 注：“-”表示晶状体透明；“+”表示晶状体核浑浊，但皮质仍然清亮；“*”表示晶核及皮均出现浑浊。
[0056] 模型组大鼠晶状体SOD活性明显低于对照组，而MDA含量显著高于对照组，其差异均具有显著性意义。青决保肝明目药对组合药物2个剂量组的SOD活性均高于模型组，而MDA含量均低于模型组，其差异均有统计学意义，表明青决保肝明目药对组合药物能提高自内障大鼠的抗氧化能力；见表7所示。
[0057] 表7各组大鼠晶状体SOD活性或MDA含量的比较(x±s)
[0058]组别 大鼠数量/n SOD(U/mgprot) MDA(nmol/mgprot)
对照组 10 34.26±3.28 0.22±0.27
对照组 10 34.26±3.28 0.22±0.27
[0059]模型组 10 27.94±3.12 1.26±0.26
实验组Ⅰ 10 31.87±3.77 0.81±0.35
实验组Ⅱ 10 30.61±4.01 0.77±0.41
实验组Ⅲ 10 32.59±4.28 0.35±0.33
决明子对照组 10 29.88±3.63 0.81±0.25
大青叶对照组 10 28.66±3.81 1.01±0.32
实验组Ⅰ 10 31.87±3.77 0.81±0.35
实验组Ⅱ 10 30.61±4.01 0.77±0.41
实验组Ⅲ 10 32.59±4.28 0.35±0.33
决明子对照组 10 29.88±3.63 0.81±0.25
大青叶对照组 10 28.66±3.81 1.01±0.32
[0060] 注：*与对照组比较，P﹤0.05；△与模型组比较，P﹤0.05。
[0062] 实施例6青决保肝明目药对组合药物降脂保肝的活性研究
[0063] Wistar大鼠72只，雌雄各半，体重150～170g，随机分出12只作为空白对照组，喂饲普通饲料，其余均喂饲高脂饲料，配方为：1%胆固醇、5%猪油、5%花生油、5%蛋黄粉、0.02%丙硫氧嘧啶、2%蔗糖、82%普通饲料。喂养10d。
[0064] 将喂饲高脂饲料大鼠禁食12h，眶后取血测TC、TG，根据TC、TG值将喂饲高脂饲料大鼠随机分为5组：模型对照组、空白对照组、阳性对照组(1mg·kg-1)、青决保肝明目药对组合药物低剂量组(0.40g·kg-1)、中剂量组(0.80g·kg-1)、(高剂量组1.60g·kg-1)。各给药组均按lmL/100g体重灌胃给予相应药物，空白对照组和模型对照组给予生理盐水，qd，连续5周。给药期间除空白对照组动物给予普通饲料外，其余各组动物均给予高脂饲料喂养。
[0065] 于末次给药前11h禁食，给药后1h，麻醉大鼠腹主动脉取血离心2400r·min-1提取血清，测定ALT、AST、TCT、TG、LDL-C、HDL-C；数据以均数±标准差( ±s)表示，方差齐性检验用F检验，组间比较用t检验。青决保肝明目药对组合药物对高脂血症大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、HDL-C和LDL-C的影响；结果见表8所示。
[0066] 表8对高血脂症大鼠血脂的影响( ±s)
[0067]
[0068] 注：与空白组对照组比较，△P﹤0.05,△△P﹤0.01；与模型对照组比较，*P﹤0.05,**P﹤0.01。
[0069] 由表8可知，模型对照组与空白对照组相比，血清ALT值明显升高(P<0.05)；辛伐他汀组、青决保肝明目药对组合药物各组组与模型对照组相比，血清ALT值均无明显变化。模型对照组与空白对照组相比，血清AST值明显升高(P<0.05)；辛伐他汀组、青决保肝明目药对组合药物各组组与模型对照组相比，血清AST值均明显降低(P<0.05)。模型对照组与空白对照组相比，TC、TG、LDL-C值明显升高(P<0.01)，HDL-C值明显降低(P<0.05)；辛伐他汀组、青决保肝明目药对组合药物各组与模型对照组相比，TC、TG、LDL-C值明显降低(P<0.05)，HDL-C值明显升高(P
[0070] 肝脏在脂质和蛋白代谢中起核心作用，肝脏发生病变，可引起脂质代谢的紊乱，形成高脂血症，表现为血TC、TG和LDL-C升高，HDL-C降低；高脂血症严重时又可导致脂肪肝发生，造成肝细胞功能损害进一步的加重，两者互为因果关系，从而形成恶性循环。药物可通过调节脂质代谢的异常来发挥改善肝细胞功能的作用。
[0071] 本实验通过给动物进食高脂饲料，使脂类物质超过机体的需要和清除的能力，从而构建了高脂血症模型，利用该模型观察了青决保肝明目药对组合药物对高脂血症大鼠的防治作用。结果表明青决各组可明显降低大鼠血清中TC、TG、LDL-C含量，并对HDL-C有升高作用，提示青决保肝明目药对组合药物可能通过改善脂质的代谢来发挥保肝的作用。病理结果显示，模型组大鼠存在明显的肝脏脂肪变性，临床上脂肪肝一般伴有肝功能的损害，表
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