技术领域
[0001] 本
发明属于天然药物领域，涉及一种假马齿苋皂甙的制备方法。
背景技术
[0002] 假马齿苋为玄参科
植物假马齿苋Bacopa monnieri(L.)Wettst的全草，又名白花猪母菜。在印度使用假马齿苋滋补大脑、改善记忆和智
力，如焦虑、认知低下、精神不集中等已有3000年的历史，目前用于
治疗精神病和
癫痫。假马齿苋促进记忆的主要化学成分是假马齿苋皂苷A和假马齿苋皂苷B，它们最重要的作用是提高认知、记忆功能，以及
镇静抗焦虑和抗惊厥抗癫痫等
生物活性。在我国主要分布于福建、台湾、广东、
云南和四川等地。
[0003] 假马齿苋药材中含量最高的为假马齿苋皂苷A，其中主要有BacopasideⅠ(简称BacoⅠ，分子量979)、BacopasideⅡ(简称BacoⅡ，分子量929)、Bacoside A3(简称Baco A3，分子量929)、Bacopasaponin C(简称Baco C，分子量899)以及Bacopasaponin C isomer(简称Baco Ci或者简称Baco X，分子量899)，它们的母核结构类似，
苷元均为jujubogenin(酸枣仁苷元)或pseudojujubogenin(伪酸枣仁苷元)，并且BacoⅡ和Baco A3、Baco C和Baco Ci互为同分异构体。本
专利分离纯化后检测的假马齿苋皂甙含量均指这5个成分的液相含量总和。
[0004] 专利CN1303098C公开了一种制备假马齿苋皂甙的方法，原料
乙醇提取，大孔
树脂分离，RP-18低压柱或HPLC高效液相色谱纯化，得到3种假马齿苋皂甙，分别为BacoⅠ、Baco C和BacoD。该专利采用多歩柱层析的方法进行纯化，周期长、成本高、不适用于工业化生产。
[0005] 专利CN1833692B公开了一种假马齿苋皂甙的制备方法，原料采用40-80％乙醇提取，浓缩后再经大孔
吸附树脂纯化，直接采用10-95％乙醇洗脱，或先用10-60％乙醇洗脱，再用60-95％乙醇洗脱，可将假马齿苋皂甙含量提高到20-80％(以假马齿苋皂苷A计)。该专利通过树脂纯化，工艺周期长、
试剂损耗大、且有效成分回收率低(80％含量的产品，回收率仅1.17％)，不利于工业化生产。
发明内容
[0006] 本发明的目的在于提供一种假马齿苋皂甙的制备方法，主要解决了
现有技术中工艺复杂，回收率低，不适合大规模工业化生产。
[0007] 为实现上述目的，本发明所提供的技术方案是：
[0008] 该假马齿苋皂甙的制备方法，包括以下步骤：
[0009] 步骤1将假马齿苋原料
粉碎，加入混合
溶剂搅拌提取，浓缩提取液；所述混合溶剂为乙腈和正丁醇的混合溶剂；
[0010] 步骤2向步骤1浓缩后的提取液中加入壳聚糖溶液和
氯化钠水溶液，加热搅拌，然后加入
硅藻土或活性白土搅拌，过滤，收集不溶性沉淀Ⅰ；
[0011] 步骤3向步骤2所得不溶性沉淀Ⅰ中加入
有机溶剂和
表面活性剂进行溶解，过滤，收集不溶性沉淀Ⅱ；所述有机溶剂为乙酸乙酯和乙醇的混合溶剂；所述表面活性剂为十二烷基
硫酸钠或十二烷基苯磺酸钠；
[0012] 步骤4将步骤3所得的不溶性沉淀Ⅱ加入到异丙醇溶液中，加热，然后加入
活性炭进行脱色，过滤，浓缩后放置析晶，离心，最后结晶干燥即得到假马齿苋皂甙。
[0013] 进一步地，上述步骤1具体是：将假马齿苋原料粉碎80目筛，加入原料
质量5-8倍量的混合溶剂搅拌提取2次，合并提取液，浓缩提取液至比重1.03-1.05；所述混合溶剂为乙腈和正丁醇的混合溶剂，所述乙腈和正丁醇的体积比为1:1-3。
[0014] 进一步地，上述壳聚糖溶液的质量浓度为2％；其中，溶剂为质量浓度为1％的
冰醋酸。
[0015] 进一步地，上述氯化钠水溶液的质量浓度为10％-15％。
[0016] 进一步地，上述步骤1浓缩后的提取液、壳聚糖溶液和氯化钠水溶液的体积比1:0.1-0.2:0.05-0.08。
[0017] 进一步地，上述步骤3中溶解是在50℃下进行。
[0018] 进一步地，上述步骤3中的不溶性沉淀Ⅰ、有机溶剂和表面活性剂的质量比为1:15-20:0.001-0.003；
[0019] 进一步地，上述乙醇的质量浓度为90％-95％。
[0020] 进一步地，上述有机溶剂中乙酸乙酯和乙醇的体积比为10-15:1。
[0021] 进一步地，上述步骤4中不溶性沉淀Ⅱ、异丙醇溶液和活性炭质量比为1:8-10:0.05-0.1。
[0022] 本发明的技术效果如下：
[0023] 本发明的工艺简单、成本低、周期短、回收率高、质量稳定，适用于工业化生产，避免了树脂分离等复杂工艺，产物假马齿苋皂甙含量纯化达到88％以上。
附图说明
[0025] 图2是本发明假马齿苋原料的高效液相检测色谱图；
[0026] 图3是本发明产物假马齿苋皂甙的高效液相检测色谱图。
具体实施方式
[0027] 本发明根据假马齿苋皂甙的极性，采用选择性高的乙腈-正丁醇提取，然后再通过氯化钠、壳聚糖和
硅藻土或活性白土进行吸附，将假马齿苋皂甙吸附沉降，从而除去大量的杂质，进而根据假马齿苋皂甙的物理性质，选择乙酸乙酯-乙醇热洗涤，除去小极性的杂质，最后通过异丙醇将假马齿苋皂甙从沉淀中溶解出来，脱色，浓缩，结晶，从而将假马齿苋皂甙含量纯化达到88％以上。
[0029] 100Kg假马齿苋原料粉碎，过80目筛，加入5倍量乙腈-正丁醇(体积比1:1)常温搅拌提取2次，每次1.5h，合并提取液减压浓缩至少量，加水赶溶剂，然后浓缩至比重1.05-1.08。
[0030] 向上述液体中加入体积10％的壳聚糖溶液和体积5％的质量浓度为10％的NaCl水溶液，加热搅拌30min，然后再加入液体体积3％硅藻土，搅拌，过滤，收集不溶性沉淀Ⅰ。
[0031] 向上述沉淀Ⅰ中加入质量15倍量的乙酸乙酯-95％乙醇(体积比15:1)和0.1％十二烷基硫酸钠50℃溶解10min，过滤，收集不溶性沉淀Ⅱ。
[0032] 上述沉淀Ⅱ加入到质量8倍量的异丙醇溶液中加热溶解，过滤，加入5％活性炭脱色1h，过滤，浓缩至少量后放置析晶，即得假马齿苋皂甙2.58Kg，含量89.14％。
[0033] 实施例2：
[0034] 100Kg假马齿苋原料粉碎，过80目筛，加入8倍量乙腈-正丁醇(体积比1:3)常温搅拌提取2次，每次1.5h，合并提取液减压浓缩至少量，加水赶溶剂，然后浓缩至比重1.05-1.08。
[0035] 向上述液体中加入体积15％的壳聚糖溶液和体积8％的质量浓度为15％的NaCl水溶液，加热搅拌30min，然后再加入液体体积5％活性白土，搅拌，过滤，收集不溶性沉淀Ⅰ。
[0036] 向上述沉淀Ⅰ中加入质量20倍量的乙酸乙酯-90％乙醇(体积比15:1)和0.3％十二烷基苯磺酸钠50℃溶解10min，过滤，收集不溶性沉淀Ⅱ。
[0037] 上述沉淀Ⅱ加入到质量10倍量的异丙醇溶液中加热溶解，过滤，加入10％活性炭脱色1h，过滤，浓缩至少量后放置析晶，即得假马齿苋皂甙2.57Kg，含量90.27％。
[0038] 实施例3：
[0039] 100Kg假马齿苋原料粉碎，过80目筛，加入6倍量乙腈-正丁醇(体积比1:2)常温搅拌提取2次，每次1.5h，合并提取液减压浓缩至少量，加水赶溶剂，然后浓缩至比重1.05-1.08。
[0040] 向上述液体中加入体积20％的壳聚糖溶液和体积7％的质量浓度为12％的NaCl水溶液，加热搅拌30min，然后再加入液体体积3％活性白土，搅拌，过滤，收集不溶性沉淀Ⅰ。
[0041] 向上述沉淀Ⅰ中加入质量18倍量的乙酸乙酯-95％乙醇(体积比12:1)和0.3％十二烷基苯磺酸钠50℃溶解10min，过滤，收集不溶性沉淀Ⅱ。
[0042] 上述沉淀Ⅱ加入到质量10倍量的异丙醇溶液中加热溶解，过滤，加入6％活性炭脱色1h，浓缩至少量后放置析晶，即得假马齿苋皂甙2.63Kg，含量88.93％。
[0043] 实施例4：
[0044] 100Kg假马齿苋原料粉碎，过80目筛，加入6倍量乙腈-正丁醇(体积比1:2)常温搅拌提取2次，每次1.5h，合并提取液减压浓缩至少量，加水赶溶剂，然后浓缩至比重1.05-1.08。
[0045] 向上述液体中加入体积15％的壳聚糖溶液和体积8％的质量浓度为15％的NaCl水溶液，加热搅拌30min，然后再加入液体体积5％硅藻土，搅拌，过滤，收集不溶性沉淀Ⅰ。
[0046] 向上述沉淀Ⅰ中加入质量20倍量的乙酸乙酯-90％乙醇(体积比10:1)和0.3％十二烷基苯磺酸钠50℃溶解10min，过滤，收集不溶性沉淀Ⅱ。
[0047] 上述沉淀Ⅱ加入到质量8倍量的异丙醇溶液中加热溶解，过滤，加入8％活性炭脱色1h，过滤，浓缩至少量后放置析晶，即得假马齿苋皂甙2.70Kg，含量90.54％。
[0048] 实施例5：
[0049] 100Kg假马齿苋原料粉碎，过80目筛，加入7倍量乙腈-正丁醇(体积比1:1)常温搅拌提取2次，每次1.5h，合并提取液减压浓缩至至少量，加水赶溶剂，然后浓缩至比重1.05-1.08。
[0050] 向上述液体中加入体积18％的壳聚糖溶液和体积6％的质量浓度为13％的NaCl水溶液，加热搅拌30min，然后再加入液体体积4％硅藻土，搅拌，过滤，收集不溶性沉淀Ⅰ。
[0051] 向上述沉淀Ⅰ中加入质量16倍量的乙酸乙酯-90％乙醇(体积比12:1)和0.2％十二烷基硫酸钠50℃溶解10min，过滤，收集不溶性沉淀Ⅱ。
[0052] 上述沉淀Ⅱ加入到质量9倍量的异丙醇溶液中加热溶解，过滤，加入9％活性炭脱色1h，过滤，浓缩至少量后放置析晶，即得假马齿苋皂甙2.59Kg，含量89.79％。
