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利用空化混悬萃取分离设备高效提取齿苋皂苷的方法

阅读:424发布:2020-05-14

专利汇可以提供利用空化混悬萃取分离设备高效提取齿苋皂苷的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种从玄参科 植物 假 马 齿苋 (Bacopa Monninera)的全草中高效提取假马齿苋皂苷的工艺。其工艺流程为:将干燥假马齿苋的全草进行超微 粉碎 ,浸泡于 水 中,并用 超 声波 提取技术提取;合并提取液,减压回流至一定体积,得假马齿苋水提物,用活性 碳 进行 吸附 脱色;利用 空化 混悬萃取设备先用乙酸乙酯萃取,取水部分再用氯仿萃取,又取水部分最后用正丁醇萃取,得正丁醇部分进行减压回流,干燥,即得假马齿苋皂苷。本发明中的假马齿苋皂苷可应用于抗癌、抗抑郁和 治疗 老年痴呆药物的制备。,下面是利用空化混悬萃取分离设备高效提取齿苋皂苷的方法专利的具体信息内容。

1.一种从齿苋中高效提取分离假马齿苋皂苷的方法,其特征在于将干燥假 马齿苋Bacopa monnieri.L的全草进行超微粉碎,浸泡于中,并用声波提 取技术提取;合并提取液,减压回流至一定体积,得假马齿苋水提物,用活 性进行吸附脱色;利用空化混悬萃取设备先用乙酸乙酯萃取,取水部分再 用氯仿萃取,又取水部分最后用正丁醇萃取,得正丁醇部分进行减压回流, 干燥,即得假马齿苋皂苷。
2.按权利要求所述假马齿苋的全草,其特征在于:假马齿苋是印度阿育吠陀和 中国传统医药的植物药,是玄参科一种普遍分布于热带、亚热带地区的匍匐、 肉质、多年生草本植物。
3.按权利要求1所述用超声波技术提取,其特征在于利用超声波产生得强烈振 动、高加速度、强烈空化效搅拌作用等,加速假马齿苋全草的有效成分进入 水中,这样就大大提高了提出率,缩短了提取时间,且避免了因长时间提取 造成的提取液中含有较多杂质。
4.按权利要求1所述空化混悬萃取设备,其特征在于利用新型的一种结构简单、 快速传质、快速分离、萃取率达95%以上、废渣中溶剂残留在5%以下的空 化混悬萃取分离装置。
5.按权利要求1所述用乙酸乙酯和氯仿萃取,其特征在于去除非假马齿苋皂苷 的成分。
6.按权利要求1所述乙酸乙酯和氯仿萃取部分液体,其特征在于需回收溶剂。
7.按权利要求1所述用正丁醇萃取,其特征在于提取假马齿苋皂苷。
8.按权利要求1所述假马齿苋皂苷,其特征在于可根据药理药理活性检测结果 为指导,分离纯化得到活性假马齿苋单体化合物。
9.按权利要求1所述的假马齿苋皂苷在制备治疗肿瘤药物中的应用。
10.按权利要求1所述的假马齿苋皂苷在制备抗抑郁的药物中的应用。
11.按权利要求1所述的假马齿苋皂苷在制备治疗老年痴呆病的药物中的应 用。

说明书全文

技术领域

发明属医药技术领域,它涉及一种植物提取物及其高效提取工艺,具体 是以齿苋全草为原料提取假马齿苋皂苷,可应用于抗癌、抗抑郁和治疗老年 痴呆药物的制备。

背景技术

假马齿苋(Bacopa Monninera(L.)Wettst),又名“白花猪母菜”,为双子 叶植物药玄参科植物假马齿苋的全草。为1年生匍匐草本,常生于边、湿地及 沙滩,海拔550~650m,主要分布在热带和亚热带地区。在国外,印度对其研究 的记载较多,在国内主要分布于台湾、福建、广东、南及四川等省,中医理论 中其具有清热解毒、消炎退肿之功效,用于治疗赤目痢疾、目赤肿痛、丹毒、痔 疮中痛、皮肤红肿等症状,在印度医药理论中认为假马齿苋具有安神、增进记忆 和智力,促进学习获得,并有抗化的作用。到目前为止,从假马齿苋中分离 得到20多个化合物,其中以三萜皂苷化合物为主。

发明内容

本发明的技术方案是提供了该提取物的高效制备方法和用途。其得率可达 到8%-10%。
本发明的高效提取工艺流程见说明书附图。附图中的流程图的流程说明如 下:称取假马齿苋的全草,经过干,超微粉碎后,加入水于声波提取器中提 取,将提取液浓缩至一定体积,再用活性炭进行吸附脱色,接着利用空化混悬萃 取分离装置先用7乙酸乙酯萃取,回收乙酸乙酯将水溶液部分用氯仿萃取,接着回 收氯仿并将水溶液部分再用正丁醇萃取,回收正丁醇得假马齿提取物,再以药理 活性检测结果为指导进行分离纯化,得到活性假马齿苋皂苷单体化合物。
实验研究证明:假马齿苋皂苷对体外人肿瘤细胞K-562,SHG-44,A-549, HCT-8,PC-3M等细胞株的生长均有抑制作用;对S180荷瘤小鼠的肉瘤组织也有抑 制作用;对抑郁病人和老年痴呆均有明显的改善作用。假马齿苋皂苷是有效的治 疗肿瘤和老年痴呆的药物。
本发明对假马齿苋皂苷进行了抗肿瘤的评价实验。
(一)假马齿苋皂苷对体外人肿瘤细胞的抑制作用。
1、实验目的:
对体外人肿瘤细胞A-549(癌)、MCF-7(乳腺癌)、IA-9(卵巢癌)、CAKI-1 (肾癌)、PC-3(前列腺癌)等细胞株生长的影响。
2、方法:
试验方法为国际通用的SRB法:根据细胞生长速率,将处于对数生长期的 肿瘤细胞以90μl/孔接种于96孔培养板,贴壁生长24小时再加药10μl/孔。每个 浓度设三复孔。并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞调零孔。肿瘤细胞在 37℃、5%CO2条件下培养72小时,然后倾去培养液,用10%冷TCA固定细胞, 4℃放置1小时后用蒸馏水洗涤5次,空气干燥。最后加入150μl/孔的Tris溶液, 酶标仪520nm波长下测定OD值。
3、结果:如下表1所示。
表1.假马齿苋皂苷抗人类肿瘤的疗效试验结果(ED50,μg/ml)

表1的结果表明,假马齿苋皂苷对5种不同肿瘤细胞株均显示明显抑制作用。
(二)假马齿苋皂苷对老年痴呆的治疗作用。
1、实验目的:
评价假马齿苋皂苷对老年痴呆的治疗作用。
2、方法:
取ICR小鼠,雄性,体重20±5g。随机分为3组,阴性对照和阳性对照组 每次均灌以等体积的生理盐水,其余1个实验组先分别给药7天,末次给药后, 除阴性对照组外,其余各组均用东莨菪灌胃10mg/kg,给药后1小时进行跳台 实验。
3、实验结果:假马齿苋皂苷(10-50mg/kg)能显著延长小鼠跳台潜伏期并 使错误次数明显减少(表2)。
表2假马齿苋皂苷对小鼠跳台作用影响

4、结论:
假马齿苋皂苷具有显著的治疗老年痴呆症作用和促智活性。
具体实施例
实施例一
将500g干燥假马齿苋Bacopa monnieri.L的全草进行超微粉碎,浸泡于 5000mL水中,并用超声波提取技术提取1次;合并提取液,减压回流至2000mL 左右,得假马齿苋水提物,用活性进行吸附脱色;利用空化混悬萃取设备先用 乙酸乙酯萃取,至乙酸乙酯部分基本无色,回收乙酸乙酯;取水部分再用氯仿萃 取,至氯仿基本无色,回收氯仿;又取水部分最后用正丁醇萃取,至正丁醇无色, 合并正丁醇部分溶液进行减压回流,干燥,即得假马齿苋皂苷42.8g,得率为8.56 %,皂苷含量39.9%。
实施例二
将500g干燥假马齿苋Bacopa monnieri.L的全草进行超微粉碎,浸泡于 5000mL水中,并用超声波提取技术提取3次;合并提取液,减压回流至2000m L左右,得假马齿苋水提物,用活性碳进行吸附脱色;利用空化混悬萃取设备先 用乙酸乙酯萃取,至乙酸乙酯部分基本无色,回收乙酸乙酯;取水部分再用氯仿 萃取,至氯仿基本无色,回收氯仿;又取水部分最后用正丁醇萃取,至正丁醇无 色,合并正丁醇部分溶液进行减压回流,干燥,即得假马齿苋皂苷45.8g,得率 为9.16%,皂苷含量为41.4%。
实施例三
取假马齿苋皂苷100g,用适量注射用水分散,加入辅料适量,混匀,制成 颗粒,干燥。
按实施例所得的颗粒剂,按所需剂量分装于空胶壳中,即得胶囊剂。
按实施例所得的颗粒剂,直接压片,薄膜包衣,即得片剂。
用于治疗肿瘤和老年痴呆疾病
实施例四
将假马齿苋皂苷适量加注射用水分散,喷雾干燥真空干燥,得假马齿苋皂 苷干粉。取聚乙二醇400,加假马齿苋皂苷干粉,边加边搅拌至匀,采用压制法, 制成软胶囊。用于治疗肿瘤和老年痴呆疾病。
实施例五
取假马齿苋皂苷400mg,加注射用水适量溶解。加甘露醇400mg,按照常规 冻干工艺冻干,即得假马齿苋皂苷冻干粉。用于治疗肿瘤和老年痴呆疾病。
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