专利汇可以提供一种能够去除热原及病毒的尿激酶的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种能够去 除热原 及病毒的尿激酶的制备方法。本发明的技术方法是将尿激酶粗品经DE?AE- 纤维 素层析、CMC层析、亲和层析、去热原后得到尿激酶精品。该技术的优点在于在生产过程中采用60℃ 水 浴灭菌处理使病毒失活以及用 磷酸 三钠和 醋酸 钙 吸附 去除产品中的热原,保证产品的 质量 。该方法得到的尿激酶无病毒无热原,且精品的比活能够达到13万单位/mg以上。,下面是一种能够去除热原及病毒的尿激酶的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种能够去除热原及病毒的尿激酶的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)粗品提取:取尿激酶粗品,加磷酸盐缓冲液进行溶解,尿激酶粗品与磷酸缓冲液的比例为:1g∶10~14ml;搅拌;过滤,将滤饼再加磷酸缓冲液进行溶解,滤饼与磷酸缓冲液按的比例为:1g∶2~5ml;搅拌,过滤;合并两次的滤液,调节滤液pH至7.0~8.0; (2)超滤:将粗提液用超滤膜超滤至原体积的1/5至1/20;加水至原体积后,继续超滤至原体积的1/5至1/15;加0.025mol/L PBS平衡液至原体积后,继续超滤至原体积的1/2至1/5;
(3)DEAE-纤维素层析:取经0.025mol/L PBS平衡液平衡的DEAE-纤维素,加入超滤液中,搅拌,过滤;在滤液中加入上一次量1/2的0.025mol/L PBS
平衡液平衡的DEAE-纤维素,搅拌,过滤;合并二次滤液;
(4)CMC层析:调节滤液pH至3.0~5.0,调整电导率至15~20μS/cH;CMC柱先用
0.05~0.2mol/L醋酸缓冲液平衡,再将滤液上CMC柱,用0.05%~0.2%氨水溶液洗脱,得洗脱液;将洗脱液在60℃水浴灭菌10小时;
(5)亲和层析:将Tryp sin-inhibitor-Sepharose装柱,用含1mol/L NaCl的0.01mol/L PBS
平衡液洗涤平衡;将已灭菌的洗脱液进行上柱;用含1mol/LNaCl的0.01mol/L PBS平衡液洗涤1~3个床体积,再用含0.5mol/LNaCl的0.01mol/L PBS
平衡液洗涤0.1~1个床体积;最后用0.01mol/L PBS
洗脱液洗脱,收集洗脱液;
(6)沉淀、干燥:调节洗脱液pH至6.0~7.0,用乙醇进行沉淀,洗脱液与乙醇的体积比为1∶3~8;再用乙醇洗涤沉淀,重复2~4次;干燥,得干燥品;
(7)去热原I:将干燥品加水,按1g∶60~75ml的比例进行溶解,在搅拌下加入等体积-20~0℃的乙醇,再按溶液总体积1ml∶5~10g的比例加入醋酸铵,然后缓慢加入
0.1~0.3mol/L磷酸钠溶液,其用量与干燥品的比例为:1ml∶10~14g,搅拌,最后加入
0.1~0.5mol/L醋酸钙溶液,其用量与干燥品重量的比例为:1ml∶10~14g;调节pH至
8.5,搅拌,离心,取上清液;
(8)去热原II:上清液调pH至6.0~7.0,在搅拌时,加入乙醇进行沉淀,上清液与加入乙醇的体积比为:1∶4~6,离心;再用乙醇洗涤沉淀物,离心,反复2~ 4次;然后沉淀物干燥,得尿激酶精品。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
利用热管间接蒸发原理降温和多孔陶瓷散热除菌的保健鞋 | 2020-05-13 | 129 |
一种以黑曜岩为原料的除渣剂的热处理方法 | 2020-05-13 | 923 |
蔬菜、食用菌、水果原汁不加热除菌技术 | 2020-05-13 | 323 |
一种工业原料除杂加热搅拌设备 | 2020-05-11 | 246 |
一种去除水中热原物质的新方法 | 2020-05-11 | 338 |
管壳式除污除垢换热一体化原生污水热泵能量提升装置 | 2020-05-11 | 660 |
一种利用原有中置柜对发电机加热除湿装置 | 2020-05-12 | 45 |
一种能够去除热原及病毒的尿激酶的制备方法 | 2020-05-12 | 661 |
一种高镍-硅体系锂离子电池材料原位焦耳热除水和除油的方法 | 2020-05-13 | 104 |
原油换热器快速除砂装置 | 2020-05-11 | 316 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。