痛觉，或疼痛感，是由称为“伤害性感受器”的一群特定外周末 端感觉神经元所传导。哺乳动物中，各式各样物理及化学刺激诱发这 些神经的活化，引起辨识潜在的有害刺激。但是，不适当或过度活化 伤害性感受器，会产生引致急性衰弱或慢性疼痛。
神经性疼痛包含缺乏刺激下的疼痛信息传递，典型地是由对神经 是统的伤害所引起。多数情形下，这些疼痛被认为是由在先伤害末梢 是统(例如，通过直接伤害或全身性疾病)的后，引发末梢及中枢神经 是的敏化作用而发生。神经性疼痛典型地为灼热、刺痛且强度不退， 有时比诱发疼痛的初始伤害或疾病过程更会引致衰弱。
神经性疼痛的现行疗法大多不起作用。鸦片剂，例如吗啡，为具 效力的止痛剂，但由在例如身体上的成瘾与退瘾性质、以及压抑呼吸、 情绪变化、与伴随便秘的小肠蠕动降低、恶心、呕吐、及内分泌与自 律神经是统变样(alteration)等不利副作用而使其有效性受限。此外， 神经性疼痛对习知鸦片剂止痛疗法常常没有反应或只有部分反应。使 用N-甲基-D-天冬胺酸盐拮抗剂酮胺或α(2)-肾上腺素功能促效剂氯 压啶(clonidine)的疗法可降低急性或慢性疼痛，使鸦片剂用量得以减 少，但这些制剂由在副作用经常很难忍受。
使用辣椒素的局部疗法被用来治疗包括神经性疼痛在内的慢性与 急性疼痛。辣椒素为自茄科植物(包括呛辣红椒)衍生的辛辣物质，似 乎对在被认为传达疼痛的直径较小的传入神经纤维(A-Δ与C纤维)具 有选择性作用。对辣椒素有反应的特征为末梢组织伤害性感受器的持 续活化，随后为末梢伤害性感受器对一或多个刺激最终的去敏化作用。 从动物研究得知，辣椒素似乎通过打开钙与钠的阳离子选择通道而触 发C纤维细胞膜的去极化作用。
与辣椒素固有常见香草精类基团的结构类似物也也引起类似的反 应。一个类似物为产树脂毒素(resiniferatoxin，RTX)，大戟属 (Euphorbia)植物的天然产物。术语香草精类受体(VR)被创造来叙述辣 椒素与这些相关刺激化合物的神经元细胞膜识别位点。辣椒素反应受 到另一辣椒素类似物，辣椒平(capsazepine)的竞争性抑制(因而被 拮抗)，也受到非选择性阳离子通道封阻剂钌红的抑制。这些拮抗剂仅 以适度亲和力与VR结合(通常地Ki值不低在140μM)。
自背根神经节细胞克隆大鼠及人类香草精类受体。被鉴定出的第 一种香草精类受体为所知香草精类受体类型1(VR1)，本文中“VR1” 与“辣椒素受体”等词可交换使用，以指称此类型的大鼠和/或人类的 此类受体，以及哺乳类同源物。使用缺乏此受体的小鼠，表达无香草 精类引起的疼痛行为与对热及发炎伤害的降低反应，证实VR1在痛觉 上的作用。VR1为非选择性阳离子通道，其开发阈值因升高的温度、低 pH、及辣椒素受体促效剂而降低。例如，该通道通常在高在约45℃的 温度下开放。打开辣椒素受体通道后，通常接着从表达该受体的神经 元及其它邻近神经元释放炎性肽，增加疼痛反应。辣椒素受体在最初 被辣椒素活化后，即通过依赖cAMP的蛋白激酶的磷酸化，进行快速去 敏化作用。
VR1促效剂香草精类化合物由在具备在末梢组织中使伤害性感受 器去敏化的能力，因此被用作局部麻醉剂。然而，施敷促效剂本身可 能引起灼烧痛，因而使其治疗用途受限。近来，据报告指出，VR1拮抗 剂，包括非香草精类化合物，也用在治疗疼痛(见2002年1月31日公 开的PCT国际申请公开号为WO 02/08221)。
因此，与VR1作用而不会引起VR1促效剂香草精类化合物的初始 疼痛感的化合物，渴望用在治疗慢性与急性疼痛，包括神经性疼痛。 此受体的拮抗剂特别渴望用在治疗疼痛，以及例如暴露在催泪瓦斯、 痒等状况及例如尿失禁与膀胱过动等尿道症状。本发明满足该项需求， 且提供进一步的相关有利条件。

本发明提供具下式I的二芳基哌嗪基-吡啶类似物：

式I
及这些化合物药学上可接受的盐。在式I中：
Ar1为苯基或6元芳族杂环，各者被独立地选自R1的0至4个取 代基(更优选为1至4个取代基)取代；
Ar2为苯基或6元芳族杂环，各者被独立地选自R2的0至4个取 代基取代；
X、Y与Z独立地为CRx或N，但X、Y与Z至少一者为N；
Rx在每次出现时，是独立地选自氢、C1-C4烷基、氨基、氰基及单- 与二-(C1-C4烷基)氨基；
各R1是独立地选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-C6烷基、C2-C6烯 基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷基醚、C2-C6烷酰基、C3-C6烷酮、 C1-C6卤烷基、C1-C6卤烷氧基、单-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基磺 酰基、单-或二-(C1-C6烷基)磺胺基或单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基；
各R2为：
(a)独立地选自(i)羟基、氨基、氰基、卤素、-COOH、-SO2NH2、 硝基与氨羰基；及(ii)C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、(C3-C8环烷 基)C0-C4烷基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C6烷基醚、 C2-C6烷酰基、C1-C6烷氧羰基、C2-C6烷酰氧基、C3-C6烷酮、单-与二-(C1-C6 烷基)氨基C0-C6烷基、单-与二-(C3-C8环烷基)氨基C0-C4烷基、(4至7 元杂环烷基)C0-C4烷基、C1-C6烷基磺酰基、单-与二-(C1-C6烷基)磺胺 基、及单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基，各者被独立地选自卤素、羟基、 氰基、氨基、-COOH与酮基(oxo)的0至4个取代基取代；或
(b)与邻接的R2一起形成稠合5至13元碳环或杂环基，其被独 立地选自卤素、酮基与C1-C6烷基的0至3个取代基取代；
R3是选自：
(i)氢与卤素；
(ii)C1-C6烷基、(C3-C8环烷基)C0-C2烷基、C1-C6卤烷基与苯基C0-C2 烷基；及
(iii)下式的基团：
或
其中：
L为C0-C6烷基或C1-C6烷基与R5、R6或R7一起形成4至7元碳环或 杂环；
W为O、CO、S、SO或SO2；
R5与R6是：
(a)独立地选自氢、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、(C3-C8 环烷基)C0-C4烷基、C2-C6烷酰基、C1-C6烷基磺酰基、苯基C0-C6烷基、 (4至7元杂环)C0-C6烷基及与L结合形成4至7元杂环的基团；或
(b)结合形成4至12元杂环；及
R7为氢、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、(C3-C8环烷基)C0-C4 烷基、C2-C6烷酰基、苯基C0-C6烷基、(4至7元杂环)C0-C6烷基或与L 结合形成4至7元碳环或杂环的基团；
其中各(ii)与(iii)被独立地选自下述基团的0至4个取代基取 代：
(1)卤素、羟基、氨基、氰基、-COOH、-SO2NH2、酮基、硝基与 氨羰基；及
(2)C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6 烷酰基、C2-C6烷酰基氨基、单-与二-(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基、C1-C6 烷基磺酰基、单-与二-(C1-C6烷基)磺胺基、单-与二-(C1-C6烷基)氨羰 基C0-C4烷基、苯基C0-C4烷基及(4至7元杂环)C0-C4烷基，各者被独立 地选自卤素、羟基、氰基、酮基、亚氨基、C0-C4烷基、C1-C4烷氧基与 C0-C4卤烷基的0至4个第二取代基取代；及
R4代表独立地选自C1-C3烷基、C1-C3卤烷基与酮基的0至2个取代 基。
在特定目的中，本文提供的二芳基哌嗪基-吡啶类似物及其药学上 可接受的盐为VR1调节剂，在辣椒素受体结合试验中展现不大于1微 摩尔浓度、100纳摩尔浓度、50纳摩尔浓度、10纳摩尔浓度或1纳摩 尔浓度的Ki值和/或在测定辣椒素受体促效剂或拮抗剂活性的试验中 具有不大于1微摩尔浓度、100纳摩尔浓度、50纳摩尔浓度、10纳摩 尔浓度或1纳摩尔浓度的EC50或IC50值。
在特定实施方案中，如本文所述的VR1调节剂为VR1拮抗剂，在 化合物浓度等在IC50的辣椒素受体活化的体外试验中，表达无法检测 的促效剂活性。
在特定目的中，本文提供的化合物是以可检测的标记物(例如，辐 射标记或萤光拼合)予以标记。
在其它目的中，本发明进一步提供一种医药组合物，其含有如本 文提供的至少一种化合物或其药学上可接受的盐，并结合生理上可接 受的载剂或赋形剂。
在进一步目的中，是提供减少细胞性辣椒素受体的钙传导的方法， 该方法包括使表达辣椒素受体的细胞(例如，神经元细胞)与治疗有效 量的如本文所述的至少一种VR1调节剂接触。这些接触可在活体内或 体外发生。
本发明进一步提供抑制香草精类配位体与辣椒素受体结合的方 法。在这些特定目的中，是在体外发生抑制作用。这些方法包括在使 抑制香草精类配位体与辣椒素受体结合可检测地条件与足够用量下， 使辣椒素受体与至少一种如本文所述的VR1调节剂接触。在其它目的 中，该辣椒素受体是在病患体内。这些方法包括在体外，在使抑制香 草精类配位体与表达克隆辣椒素受体的细胞结合可检测地足够用量 下，使病患表达辣椒素受体的细胞与至少一种如本文所述的VR1调节 剂接触，从而抑制香草精类配位体与病患的辣椒素受体结合。
本发明进一步提供治疗病患对辣椒素受体调节敏感的状况的方 法，该方法包括投与病患治疗有效量的至少一种如本文所述的VR1调 节剂。
在其它目的中，是提供治疗病患疼痛的方法，该方法包括投与罹 患疼痛的病患治疗有效量的至少一种如本文所述的VR1调节剂。
本发明进一步提供治疗病患痒、尿失禁、膀胱过动、咳嗽和/或打 嗝的方法，该方法包括投与罹患一或多种前述状况的病患治疗有效量 的至少一种如本文所述的VR1调节剂。
本发明进一步提供促进肥胖病患体重减少的方法，该方法包括投 与肥胖病患治疗有效量的至少一种如本文所述的VR1调节剂。
本发明进一步提供用在鉴定与辣椒素受体结合的制剂的方法，该 方法包括：(a)在容许VR1调节剂与辣椒素受体结合的条件下，使辣椒 素受体与如本文所述的经标记的VR1调节剂接触，从而产生结合、标 记的VR1调节剂；(b)在测试剂不存在下，检测相应在结合、标记VR1 调节剂的量的信号；(c)使该结合、标记VR1调节剂与测试剂接触；(d) 在测试剂存在下，检测相当在结合、标记VR1调节剂的量的信号；及 (e)查出与步骤(b)检测的信号相较下，步骤(d)检测信号降低值，从而 鉴定与辣椒素受体结合的制剂。
在进一步目的中，本发明提供用在测定试样中辣椒素受体存在与 否的方法，该方法包括：(a)在容许VR1调节剂与辣椒素受体结合的条 件下，使试样与如本文所述的VR1调节剂接触；及(b)检测与辣椒素受 体结合的VR1调节剂含量。
本发明也提供经包装的医药制剂，其包括：(a)如本文所述的在容 器中医药组合物；及(b)使用该组合物治疗对辣椒素受体调节作用反应 的一或多种状况(例如疼痛、痒、尿失禁、膀胱过动、咳嗽打嗝和/或 肥胖症)的说明书。
在又一目的中，本发明提供制备本文揭示的化合物(包括中间产物) 的方法。
参照下文详细说明后，本发明的这些及其它目的将更为明白。

如上文所述，本发明提供二芳基哌嗪基-吡啶类似物。这些化合物 可在体外或活体内使用，以调节各种背景的辣椒素受体活性。
术语
本文中化合物通常使用标准命名法予以叙述。对在具有不对称中 心的化合物，应了解(除非另行指明)所有光学异构物及其混合物均涵 盖在内。此外，具有碳-碳双键的化合物可呈Z-与E-型存在，除非另 行指明，否则化合物的所有异构物型均涵盖在本发明范围之内。当化 合物以多种互变异构物存在时，所述化合物并不受限在任一特定的互 变异构物，而是涵盖所有互变异构物型。某些化合物在本文中是使用 含有变量(例如，R1、X、Ar2)的通式予以叙述，除非另行指明，上述通 式中存在的每个变量独立于其它任何变量的定义。在化学式中出现一 次以上的任何变量在每次出现时均各自独立地界定。
本文所用的“二芳基哌嗪基-吡啶类似物”涵盖所有式I化合物， 以及本文提供的其它化学式的化合物(包括任何镜像异构物、消旋物与 立体异构物)及这些化合物药学上可接受的盐。换言之，在二芳基哌嗪 基-吡啶类似物的界定下，详言之，是包括其中核心环 为吡啶 基、嘧啶基或三嗪基(例如，
的化合物。
本文所述化合物的“药学上可接受的盐”为适用于与人类或动物 组织接触而无过度毒性或致癌性，及优选为无刺激性、过敏反应、或 其它问题或并发症的酸或碱盐。这些盐包含具有如胺类碱性残基的无 机或有机酸盐，以及具有如羧酸类酸性残基的碱盐或有机盐。特定的 医药上的盐包含，但不限于，例如盐酸、磷酸、氢溴酸、苹果酸、乙 醇酸、反丁烯二酸、硫酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、甲酸、甲苯磺 酸、甲磺酸、苯磺酸、乙烷二磺酸、2-羟基乙磺酸、硝酸、苯甲酸、 2-乙酰氧基苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、硬脂酸、水杨酸、麸胺 酸、抗坏血酸、双羟萘酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、丙酸、羟基马 来酸、氢碘酸、苯基乙酸、烷酸例如乙酸、HOOC-(CH2)n-COOH(其中n 为0至4)及其相似的物等酸的盐。同样地，医药上可接受的阳离子包 含，但不限在，钠、钾、钙、铝、锂与铵。在此技术领域具有通常知 识者可进一步认知本文提供的化合物的药学上可接受的盐，包括由 Remington’s Pharmaceutical Sciences，17th ed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，p.1418(1985)所列举者。通常，医药上可接 受的酸或碱盐可利用任何已知的化学方法，以含碱性或酸性基团的母 化合物来合成。简言之，这些盐可藉由使游离酸或碱形式的彼等化合 物与化学计量的适当碱或酸，在水或有机溶剂或二者的混合物中反应 予以制备；通常，以使用非水性介质，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、 异丙醇或乙腈优选。
显见地，式I各化合物可，但不为必需，调配为水合物，溶剂合 物或非共价复合物。此外，各种结晶型与多晶型物均隶属本发明范围 的内。本文也提供式I化合物的前驱药物。“前驱药物”乃一种化合 物，其可能不完全满足本文提供的化合物的结构需求，但是在投与病 患后，可在活体内经修饰产生式I或本文提供的他式化合物。例如， 前驱药物可为如本文提供的化合物的酰基化衍生物。前驱药物包含其 中与任何基团结合的羟基、胺或硫氢基基团，在投与哺乳类对象后， 分别裂解形成游离羟基、胺基或硫氢基基团的化合物。前驱药物的实 例包含，但不限于，本文提供的化合物内的醇与胺官能团团的乙酸盐、 甲酸盐及苯甲酸盐衍生物。本文提供的化合物的前驱药物可通过修饰 存在化合物中的官能团(但这些修饰可经活体内裂解而获得母化合物) 予以制备。
本文所用的“烷基”一词是指直链或分支链的饱和脂族烃。烷基 基团包含具有1至8个碳原子(C1-C8烷基)、1至6个碳原子(C1-C6烷基) 及1至4个碳原子(C1-C4烷基)的基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙 基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己 基、2-己基、3-己基及3-甲基戊基。“C0-C4烷基”是指单一共价键或 C1-C4烷基；“C0-C8烷基”是指单一共价键或C1-C8烷基。“羟烷基”一 词是指至少被一个羟基取代基取代的烷基。
同样地，“烯基”是指直链或分支链烯烃基团。烯基基团包含分 别具有2至8个、2至6个或2至4个碳原子的C2-C8烯基、C2-C6烯基 及C2-C4烯基等基团，例如乙烯基、烯丙基或异丙烯基。“炔基”是指 具有一或多个不饱和碳-碳键且其中至少一者为三键的直链或分支链 炔烃基团。炔基基团包含分别具有2至8个、2至6个或2至4个碳原 子的C2-C8炔基、C2-C6炔基及C2-C4炔基。
“环烷基”为其所有环元均为碳的饱和或部分饱和环状基团，例 如环丙基、环丁基、环戊基及环己基。特定环烷基基团为C3-C8环烷基， 其环含有3至8个全为碳的环元。“(C3-C8环烷基)C0-C4烷基”为通过 单一共价键或C1-C4烷基连接的C3-C8环烷基基团。
本文所用的“烷氧基”意指通过氧桥连接的如上述的烷基基团。 烷氧基包含分别具有1至6个或1至4个碳原子的C1-C6烷氧基及C1-C4 烷氧基基团。特定的烷氧基基团为甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧 基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧 基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、及3-甲基 戊氧基。
同样地，“烷硫基”是指通过硫桥连接的如上述的烷基基团。优 选的烷氧基及烷硫基为其中烷基是通过杂原子桥键连接者。
本文所用的“oxo”一词是指酮基(C＝O)，为非芳族碳原子取代基 的酮基将使-CH2-转化为-C(＝O)-。
同样地，“亚氨基”是指具式C＝N的基团；“亚氨烷基”是指被 亚胺取代的如上述的烷基基团(例如，具式 的基团)。
“烷酰基”一词是指呈线型或分支链排列的酰基(例如，-(C＝O)- 烷基)，其连接是通过酮基的碳。烷酰基基团包含分别具有2至8个、 2至6个或2至4个碳原子的C2-C8烷酰基、C2-C6烷酰基及C2-C4烷酰基 等基团。“C1烷酰基”是指-(C＝O)-H，其(与C2-C8烷酰基)由“C1-C8烷 酰基”一词所涵盖。乙酰基为C2烷酰基。
“烷酮”为碳原子呈线型或分支链烷基排列的酮基团。“C3-C8烷 酮”、“C3-C6烷酮”与“C3-C4烷酮”分别是指具有3至8、6或4个碳 原子的烷酮。举例而言，C3烷酮基团的结构式为-CH2-(C＝O)-CH3。
同样地，“烷基醚”是指线型或分支链醚取代基。烷基醚基团包 含分别具有2至8、6或4个碳原子的C2-C8烷基醚、C2-C6烷基醚及C2-C4 烷基醚等基团。举例而言，C2烷基醚基团的结构式为-CH2-O-CH3。
“烷氧羰基”一词是指通过羰基连接的烷氧基团(也即，结构式为 -C(＝O)-O-烷基的基团)。烷氧羰基基团包含分别具有2至8、6或4个 碳原子的C2-C8、C2-C6及C2-C4烷氧羰基等基团。“C1烷氧羰基”是指 -C(＝O)-OH，其由“C1-C8烷氧羰基”一词所涵盖。
本文所用的“烷酰氧基”一词是指通过氧桥连接的烷酰基基团(也 即，结构式为-O-C(＝O)-烷基的基团)。烷酰氧基基团包含分别具有2 至8、6或4个碳原子的C2-C8、C2-C6及C2-C4烷酰氧基等基团。
同样地，“烷酰胺基”一词是指通过氮桥连接的酰烷酰基烷酰基 基团(也即，结构式为-N-C(＝O)-烷基的基团)。烷酰胺基基团包含分别 具有2至8、6或4个碳原子的C2-C8、C2-C6及C2-C4烷酰胺基等基团。
“烷基磺酰基”是指具结构式-(SO2)-烷基的基团，其中硫原子为 连接点。烷基磺酰基包含分别具有1至6个或1至4个碳原子的C1-C6 烷基磺酰基及C1-C4烷基磺酰基等基团。甲基磺酰基为一代表性的烷基 磺酰基基团。“C1-C4卤烷基磺酰基”为至少被一个卤素取代的具1至 4个碳原子的烷基磺酰基基团(例如，三氟甲基磺酰基)。
“烷基磺酰基氨基”是指具结构式-NH-(SO2)-烷基的基团，其中氮 原子为连接点。烷基磺酰基氨基包含分别具有1至6个或1至4个碳 原子的C1-C6烷基磺酰基氨基及C1-C4烷基磺酰基氨基等基团。甲基磺酰 基氨基为代表性的烷基磺酰基氨基基团。
“烷基磺胺基”是指具结构式-(SO2)-N(R)2的基团，其中硫原子为 连接点，各R独立地为氢或烷基。“单-或二-(C1-C6烷基)磺胺基”是 指其中一个R为C1-C6烷基，另一个R为氢或经独立地选定的C1-C6烷基 的这些基团。
“烷氨基”是指结构式为-NH-烷基或-N(烷基)(烷基)的仲或叔胺， 其中各烷基可相同或不同。这些基团包含，例如，单-及二-(C1-C8烷 基)氨基，其中各烷基可相同或不同及可含1至8个碳原子，以及单- 及二-(C1-C6烷基)氨基与单-及二-(C1-C4烷基)氨基等基团。
“烷氨基烷基”是指通过烷基连接的烷氨基基团(也即，结构式为 -烷基-NH-烷基或-烷基-N(烷基)(烷基)的基团)，其中各烷基可独立地 经选定。这些基团包含，例如，单-及二-(C1-C8烷基)氨基C1-C8烷基、 单-及二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基与单-及二-(C1-C6烷基)氨基 C1-C4烷基，其中各烷基可相同或不同。“单-或二-(C1-C6烷基)胺基C0-C6 烷基”是指通过直接键或C1-C6烷基连接的单-或二-(C1-C6烷基)氨基基 团。下文所列为代表性的烷氨基烷基基团：

同样地，“烷氨基烷氧基”是指通过烷氧基连接的烷氨基基团(也 即，结构式为-O-烷基-NH-烷基或-O-烷基-N(烷基)(烷基)的基团)，其 中各烷基可独立地经选定。这些基团包含，例如，单-及二-(C1-C6烷 基)氨基C1-C4烷氧基，例如
“氨羰基”一词是指酰胺基团(也即，-(C＝O)NH2)。“单-或二-(C1-C6 烷基)氨羰基C0-C4烷基”是其一或两个氢原子被C1-C6烷基置换的氨羰 基，且是通过单一共价键(也即，单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基)或C1-C4 伸烷基基团(也即，-(C0-C4烷基)-(C＝O)N(C1-C8烷基)2)连接者。当两个 氢原子均被如此置换时，这些C1-C6烷基可相同或不同。
“卤素”一词是指氟、氯、溴或碘。
“卤烷基”为被1或多个卤原子取代的分支链、直链或环状烷基(例 如，“C1-C8卤烷基”基团具有1至8个碳原子；“C1-C6卤烷基”基团 具有1至6个碳原子)。卤烷基的实例包含，但不限在，单-、二-或三 -氟甲基；单-、二-或三-氯甲基；单-、二-、三-、四或五氟乙基；单 -、二-、三-、四或五氯乙基；及1，2，2，2-四氟-1-三氟甲基-乙基。典 型的卤烷基为三氟甲基及二氟甲基。“卤烷氧基”是指通过氧桥连接 的如上文界定的卤烷基。“C1-C8卤烷氧基”基团具有1至8个碳原子。
非介于两个字母或符号间的破折号(-)用在指示取代基的连接点。 例如，-CONH2是通过碳原子连接。
本文所用的“杂原子”为氧、硫或氮。
“碳环”或“碳环状基团”含有完全由碳-碳键形成的至少一个环 (本文称为碳环状环)，而不含杂环。除非另行指示，否则碳环内的各 碳环状环可为饱和、部分饱和或芳族环。碳环通常具有1至3个稠合、 侧出或螺旋环；特定实施方案中的碳环具有一个环或两个稠合环。典 型地，各环含有3至8个环元(也即，C3-C8)；在特定实施方案中列举 出C5-C7环。由稠合、侧出或螺旋环构成的碳环典型地含有9至14个 环元。特定代表性碳环为环烷基(也即，含有饱和和/或部分饱和环的 基团，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、金 刚烷基(adamantyl)、十氢萘基、八氢茚基，及任何前述基团的部分 饱和变体，例如环己烯基)。其它碳环为芳基(例如，含有至少一个芳 族碳环)。这些碳环包含，例如，苯基、萘基、芴基、茚满基及1，2，3，4- 四氢-萘基。
本文列举的特定碳环为C6-C10芳基C0-C8烷基基团(也即，其中含有 至少一个芳族环的碳环基团是通过直接键结或C1-C8烷基连接的基团)。 这些基团包含，例如，苯基与茚满基，以及前述任一基团通过C1-C6烷 基(优选为C1-C4烷基)而连接的基团。通过直接键结或C1-C6烷基烷基基 团连接的苯基标明为苯基C0-C6烷基(例如，苯甲基、1-苯基-乙基、1- 苯基-丙基及2-苯基-乙基)。
“杂环”或“杂环状基团”具有1至3个稠合、侧出或螺旋环， 其中至少一个为杂环状环(也即，一或多个环原子为杂原子，其余环原 子为碳)。典型地，杂环状环含有1、2、3或4个杂原子；在特定实施 方案中，各杂环状环每环具有1或2个杂原子。各杂环状环通常含有3 至8个环元(特定实施方案中列举出具有4或5至7个环元的环)及由 典型地含有9至14个环元的稠合、侧出或螺旋环构成的杂环。特定杂 环包含硫原子环元；在特定实施方案中，硫原子氧化为SO或SO2。杂 环可视需要被各种所示取代基取代。除非另行指示，否则杂环可为杂 环烷基(也即，各环为饱和或部分饱和)或杂芳基(也即，该基团内的至 少一环为芳族环)。
只要可产生稳定化合物，杂环基团通常可通过任何环或取代基原 子连接。N-连接的杂环基团是通过环氮原子而连接。
杂环基是包括，例如，吖啶基、全氢吖庚因基(azepanyl)、吖辛 因基(azocinyl)、苯并咪唑基、苯并咪唑啉基、苯并异噻唑基、苯并 异噁唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、 苯并噻唑基、苯并三唑基咔唑基、苯并四唑基、NH-咔唑基、咔啉基、 苯并二氢吡喃基、苯并吡喃基、噌啉基、十氢喹啉基、二氢呋喃并[2，3-b] 四氢呋喃、二氢异喹啉基、二氢四氢呋喃基、1，4-二噁-8-氮杂-螺[4.5] 癸-8-基、二噻嗪基、呋喃基、呋呫基、咪唑啉基、咪唑啶基、咪唑基、 吲唑基、吲哚烯基(indolenyl)、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、异苯并 呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异 噻唑基、异噁唑基、异喹啉基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁 二唑基、噁唑啶基、噁唑基、啡啶基、啡啉基、啡嗪基、啡噻嗪基、 啡噁噻基、啡噁嗪基、2，3-二氮杂萘基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、 喋啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑啶基、吡唑啉基、吡唑基、 哒嗪基、吡啶并咪唑基、吡啶并噁唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧 啶基、吡咯啶基、吡咯啶酮基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉 基、喹噁啉基、喹咛环基(quinuclidinyl)、四氢异喹啉基、四氢喹啉 基、四唑基、噻二嗪基、噻二唑基、噻嗯基、噻唑基、噻吩并噻唑基、 噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、苯硫基、硫代吗啉基及其中 硫原子经氧化的变体、三嗪基、呫吨基及以上述1至4个的取代基所 取代的上述任何基团。
“杂环C0-C8烷基”为通过单一共价键或C1-C8烷基连接的杂环基 团。(4至7元杂环)C0-C8烷基为通过直接键结或具有1至8个碳原子 的烷基连接的具4至7个环元的杂环基团。“(6元杂芳基)C0-C6烷基” 为通过直接键或C1-C6烷基连接的杂芳基基团。
特定杂环为含有1个杂环或2个稠合、侧出或螺旋环的4至12元、 5至10元、3至7元、4至7元或5至7元基团，视需要被取代。4至 10元杂环烷基基团包含，例如，哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、全氢吖 庚因基(azepanyl)、1，4-二恶-8-吖-螺[4.5]癸-8-基、吗啉基、硫 代吗啉基及1，1-二酮基-硫代吗啉-4-基。这些基团可如所示被取代。 代表性芳族杂环为吖辛因基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、四唑基及3，4- 二氢-1H-异喹啉-2-基。
本文所用的“取代基”是指与所关注分子的原子共价结合的分子 基团。举例而言，“环取代基”可为例如卤素、烷基、卤烷基或本文 论及的基团与环元原子(优选为碳或氮原子)共价结合。“取代”一词 是指以如上述的取代基置换分子结构中的氢原子，且未超出该指定原 子的价数，及由该取代产生具化学稳定性的化合物(也即，可单离、鉴 定、及测试生物活性的化合物)。
“视需要被取代”的基团为未被取代或在一或多个可用位置，典 型地为1、2、3、4或5个位置，被氢以外的一或多个适当基团(彼等 可相同或不同)取代。这些适当取代基包含，例如，羟基、卤素、氰基、 硝基、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C2-C8烷基醚、 C3-C8烷酮、C1-C8烷硫基、胺基、单-或二-(C1-C8烷基)胺基、C1-C8卤烷 基、C1-C8卤烷氧基、C1-C8烷酰基、C2-C8烷酰基氧基、C1-C8烷氧羰基、 -COOH、-CHNH2、单-或二-(C1-C8烷基)氨羰基、-SO2NH2、和/或单-或二 -(C1-C8烷基)磺胺基，以及碳环与杂环基团。视需要被取代也以“被0 至X个取代基取代”一词表示，其中X为可能取代基的最大个数。特 定的视需要被取代的基团是被0至2、3或4个独立地选定的取代基取 代(也即，未被取代或被达所述最大个数的取代基取代)。
“VR1”与“辣椒素受体”等词可交换使用，以指称1型香草精类 受体。除非另行指示，否则彼等名词涵盖大鼠及人类VR1受体(例如， GenBank接收号AF327067、AJ277028及NM_018727；特定人类VR1 cDNAs 的序列提供在美国专利案6,482,611的SEQ ID NOs：1-3，所编码的氨 基酸序列示在SEQ ID NOs：4与5)，以及在其它物种中发现的其它同 源物。
“VR1调节剂”，在本文中也称为“调节剂”，乃调节VR1活化作 用和/或由VR1传导的信息传导作用的化合物。详言的，本文提供的VR1 调节剂为式I化合物及式I化合物药物上可接受的盐。VR1调节剂可为 VR1促效剂或拮抗剂。若VR1的Ki小于1微摩尔浓度，优选为小于100 纳摩尔浓度、10纳摩尔浓度或1纳摩尔浓度，则调节剂是以“高亲和 力”结合。本文实施例5提供用在测定VR1的Ki值的代表性试验。
调节剂若被检测发现抑制香草精类配位体与VR1的结合和/或由 VR1传导的信息传导作用(使用例如实施例6提供的代表性试验)，则被 视为是“拮抗剂”；一般而言，此等拮抗剂在实施例6提供的试验中， 以小于1微摩尔浓度，优选为小于100纳摩尔浓度，更优选为小于10 纳摩尔浓度或1纳摩尔浓度的IC50值，抑制VR1的活化作用。VR1拮抗 剂包含中性拮抗剂及反促效剂。在特定实施方案中，本文提供的辣椒 素受体拮抗剂不为香草精类。
VR1的“反促效剂”为在添加的香草精类配位体不存在下，使VR1 的活性减少至其基础活性量以下的化合物。VR1的反促效剂也可抑制香 草精类配位体的VR1活性，和/或也可抑制香草精类配位体与VR1的结 合。化合物对香草精类配位体与VR1结合的抑制能力可藉由结合试验 予以测定，例如实施例5提供的结合试验。VR1基础活性，以及由在 VR1拮抗剂存在下VR1活性的减少，均可由钙移动试验予以测定，例如 实施例6的试验。
VR1的“中性拮抗剂”为抑制香草精类配位体对VR1的活性，但不 显著改变该受体的基础活性的化合物(也即，在香草精类配位体不存在 下所进行的如实施例6所述的钙移动试验中，VR1活性的减少不大于 10％，更优选为不大于5％，又更优选为不大于2％；最优选为，无可检 测的活性减少)。VR1的中性拮抗剂可抑制香草精类配位体与VR1的结 合。
本文所用的“辣椒素受体促效剂”或“VR1促效剂”是指提升该受 体的活性至其基础活性量以上(也即，增进VR1活化作用和/或由VR1 传导的信息传导)的化合物。辣椒素受体促效剂活性可使用实施例6提 供的代表性试验予以鉴定。通常，此等促效剂在实施例6提供的试验 中，具有小于1微摩尔浓度，优选为小于100纳摩尔浓度，更优选为 小于10纳摩尔浓度的EC50值。在特定实施方案中，本文提供的辣椒素 受体促效剂不为香草精类。
“香草精类”是含有苯环的辣椒素或任何辣椒素类似物，其苯环 上带有与相邻环碳原子结合的两个氧原子，其中一个碳原子是位在与 该苯环结合的第三个基团连接点的对位。香草精类若以不大于10μM 的Ki(如本文所述予以测定)与VR1结合，则为“香草精类配位体”。 香草精类配位体促效剂包含辣椒素、欧瓦尼(olvanil)、N-花生四烯酰 基-多巴胺及产树脂毒素(RTX)。香草精类配位体拮抗剂包含辣椒吖庚 因(capsazepine)及碘-产树脂毒素。
“治疗有效量”(或剂量)是指投与病患后，产生可识别的病患利 益(例如，对所治疗的状况提供可检测的缓和)的量。此等缓和可使用 任何适当准则予以检测，包括一或多种症状(例如疼痛)的缓解。治疗 有效量或剂量通常造成化合物在体液(例如血液、血浆、血清、CSF、 关节液、淋巴、细胞性肠液、泪液或尿液)中达到足以改变香草精类配 位体与VR1的体外结合(使用实施例5提供的试验)和/或由VR1传导的 信息传导(使用实施例6提供的试验)的浓度。
“病患”是以本文提供的VR1调节剂治疗的任何个体。病患包括 人类，以及其它动物例如伴侣动物(例如狗与猫)及家畜。病患可能历 经对辣椒素受体调节具敏感状况的一或多种症状(例如，疼痛、暴露在 香草精类配位体、痒、尿失禁、膀胱过动、呼吸性疾病、咳嗽和/或打 嗝)，或可能并无这些症状(也即，为预防性治疗)。
二芳基哌嗪基-吡啶类似物
如上述，本发明提供具式I的二芳基哌嗪基-吡啶类似物及这些化 合物药物上可接受的盐。在特定方面中，这些化合物为VR1调节剂， 可用在多种情况，包括治疗疼痛(例如，神经性或末梢神经传导的疼 痛)；暴露在辣椒素；暴露在酸、热、光、催泪瓦斯空气污染物、辣椒 喷雾剂或相关制剂；呼吸性症状例如气喘或慢性梗塞性肺疾；痒；尿 失禁或膀胱过动；咳嗽或打嗝；和/或肥胖症。VR1也可在体外试验(例 如，受体活性试验)中使用、作为检测与定位VR1的探针用及在配位体 结合及由VR1传导的信息传导试验中作为标准用。
一般而言，所提供的VR1调节剂以纳摩尔(也即，次微摩尔)浓度)， 优选为以次纳摩尔浓度，更优选为以100微微摩尔(picomolar)、20 微微摩尔、10微微摩尔或5微微摩尔等浓度，可被检测地调节辣椒素 与VR1的结合。此等调节剂优选不为香草精类。特定的优选调节剂为 VR1拮抗剂，其在实施例6叙述的试验中具有无法检测的促效剂活性。 优选的VR1调节剂进一步以高亲和力与VR1结合。
在特定方面中，本文所提供的化合物为具下式Ia的二芳基哌嗪基 -吡啶类似物：
式Ia
以及其药物上可接受的盐。在式Ia中：
A、B与E独立地为CH、CR2a或N，使得A、B与E至少一者为CH 或CR2a，优选为A、B与E至少一者为CR2a；更优选为B与E至少一者 为CR2a；
D、F、G、J与K独立地为N、CH或被R1取代的碳；
R1代表独立地选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-C6烷基、C2-C6烯 基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷基醚、C2-C6烷酰基、C3-C6烷酮、 C1-C6卤烷基、C1-C6卤烷氧基、单-或二-(C1-C6烷基)胺基、C1-C6烷基磺 酰基、单-或二-(C1-C6烷基)磺胺基或单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基的0 至3个取代基；
各R2独立地为CH或CR2a：
各R2a为：
(a)独立地选自(i)羟基、氨基、氰基、卤素、-COOH、-SO2NH2、 硝基与氨羰基；及(ii)C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、(C3-C8环烷 基)C0-C4烷基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C6烷基醚、 C2-C6烷酰基、C1-C6烷氧羰基、C2-C6烷酰氧基、C3-C6烷酮、单-与二-(C1-C6 烷基)胺基C0-C6烷基、单-与二-(C3-C8环烷基)胺基C0-C4烷基、(4至7 元杂环烷基)C0-C4烷基、C1-C6烷基磺酰基、单-与二-(C1-C6烷基)磺胺 基、及单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基，各者被独立地选自卤素、羟基、 氰基、胺基、-COOH与酮基的0至4个取代基取代；或
(b)与邻接的R2a一起形成稠合5至13元碳环或杂环基，其被独 立地选自卤素、酮基与C1-C6烷基的0至3个取代基取代；
其余变量如上文式I中所述。
在特定实施方案中，本文所提供的化合物满足式II至IV的一或 多者，其中(除非另行指示)R4、X、Y、与Z如上文式I中所述；R1、A、 B、E、D、F、J、K与G如式Ia中所述；其余变量如下示：

式II                                       式III                             式IV
在式II中：
Ar2为苯基或6元芳族杂环，各者被独立地选自R2的0至4个取代 基取代；
各R2是独立地选自：
(a)羟基、氨基、氰基、卤素、-COOH、-SO2NH2、硝基与氨羰基； 及
(b)C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、(C3-C8环烷基)C0-C4烷基、 C1-C6卤烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C6烷基醚、C2-C6烷酰基、 C1-C6烷氧羰基、C2-C6烷酰氧基、C3-C6烷酮、单-与二-(C1-C6烷基)胺基 C0-C6烷基、(4至7元杂环)C0-C4烷基、C1-C6烷基磺酰基、单-与二-(C1-C6 烷基)磺胺基、单-与二-(C3-C8环烷基)胺基C0-C4烷基、及单-与二-(C1-C6 烷基)氨羰基，各者被独立地选自卤素、羟基、氰基、胺基、-COOH与 酮基的0至4个取代基取代；及
R3是选自：
(i)氢与卤素；
(ii)苯基C0-C2烷基或(C4-C7环烷基)C0-C2烷基；及
(iii)下式的基：
或
式中：
L为C0-C6烷基或C1-C6烷基，其与R5、R6或R7一起形成4至7元碳 环或杂环；
W为O、CO、S、SO或SO2；
R5与R6是：
(a)独立地选自氢、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、(C3-C8 环烷基)C0-C4烷基、C2-C6烷酰基、C1-C6烷基磺酰基、苯基C0-C6烷基、 (4至7元杂环)C0-C6烷基及与L结合形成4至7元杂环使得在L为单 一共价键时则R5与R6至少一者不为氢的基团；或
(b)结合形成4至12元杂环；及
R7为氢、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、(C3-C8环烷基)C0-C4 烷基、C2-C6烷酰基、苯基C0-C6烷基、(4至7元杂环)C0-C6烷基或与L 结合形成4至7元碳环或杂环使得在L为单一共价键时则R7不为氢的 基团；
其中各(ii)与(iii)被独立地选自下述基团的0至4个取代基取 代：
(1)卤素、羟基、氨基、氰基、-COOH、-SO2NH2、酮基、硝基与 氨羰基；及
(2)C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6 烷酰基、单-与二-(C1-C6烷基)胺基C0-C4烷基、C1-C6烷基磺酰基、单- 与二-(C1-C6烷基)磺胺基、C2-C6烷酰基氨基、单-与二-(C1-C6烷基)氨 羰基C0-C4烷基、苯基C0-C4烷基及(4至7元杂环)C0-C4烷基，各者被独 立地选自卤素、羟基、氰基、酮基、亚氨基、C0-C4烷基、C1-C4烷氧基 与C1-C4卤烷基的0至4个第二取代基取代；及
在式III中，Ar2与R3如上文式I中所述。
在式IV中：
A、B与E独立地为CH、CR2a或N，使得B与E至少一者为CR2a；
J、G与D独立地为N或CR1b；
R1a为卤素、羟基、氨基、氰基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷 基醚、C2-C6烷酰基、C3-C6烷酮、C1-C6卤烷基、C1-C6卤烷氧基、单-或 二-(C1-C6烷基)胺基、C1-C6烷基磺酰基、单-或二-(C1-C6烷基)磺胺基 或单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基；
各R1b独立地为氢、卤素、羟基、氨基、氰基、C1-C6烷基、C1-C6 烷氧基、C2-C6烷基醚、C2-C6烷酰基、C3-C6烷酮、C1-C6卤烷基、C1-C6 卤烷氧基、单-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基磺酰基、单-或二 -(C1-C6烷基)磺胺基或单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基；
各R2独立地为CH或CR2a：
各R2a为：
(a)独立地选自(i)羟基、氨基、氰基、卤素、-COOH、-SO2NH2与硝基；及(ii)C1-C6烷基、(C3-C8环烷基)C0-C4烷基、C1-C6卤烷基、 C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C6烷基醚、C2-C6烷酰基、C1-C6烷氧羰基、 C2-C6烷酰氧基、C3-C6烷酮、单-与二-(C1-C6烷基)胺基C0-C6烷基、单- 与二-(C3-C8环烷基)胺基C0-C4烷基、(4至7元杂环)C0-C4烷基、C1-C6 烷基磺酰基、单-与二-(C1-C6烷基)磺胺基、及单-或二-(C1-C6烷基)氨 羰基，各者被独立地选自卤素、羟基、氰基、胺基、-COOH与酮基的0 至4个取代基取代；或
(b)与邻接的R2a一起形成稠合5至13元碳环或杂环基，其被独 立地选自卤素、酮基与C1-C6烷基的0至3个取代基取代；
R3是选自：
(i)氢与卤素；
(ii)C1-C6烷基、(C3-C8环烷基)C0-C2烷基、C1-C6卤烷基与苯基C0-C2 烷基；及
(iii)下式的基：
或
式中：
L为C0-C6烷基或与R5、R6或R7一起形成4至7元碳环或杂环的C1-C6 烷基；
W为O、CO、S、SO或SO2；
R5与R6是：
(a)独立地选自氢、C1-C12烷基、C2-C12烯基、(C3-C8环烷基)C0-C4 烷基、C2-C6烷酰基、C1-C6烷基磺酰基、苯基C0-C6烷基、(4至7元杂 环)C0-C6烷基及与L结合形成4至7元杂环的基团；或
(b)结合形成4至12元杂环；及
R7为氢、C1-C12烷基、C2-C12烯基、(C3-C8环烷基)C0-C4烷基、C2-C6 烷酰基、苯基C0-C6烷基、(4至7元杂环)C0-C6烷基或与L结合形成4 至7元杂环使得在L为单一共价键时则R7不为氢的基团；
其中各(ii)与(iii)被独立地选自下述基团的0至4个取代基取 代：
(1)卤素、羟基、氨基、氰基、-COOH、-SO2NH2、酮基、硝基与 氨羰基；及
(2)C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6 烷酰基、单-与二-(C1-C6烷基)胺基C0-C4烷基、C1-C6烷基磺酰基、单- 与二-(C1-C6烷基)磺胺基、C2-C6烷酰基氨基、单-与二-(C1-C6烷基)氨 羰基C0-C4烷基、苯基C0-C4烷基及(4至7元杂环)C0-C4烷基，各者被独 立地选自卤素、羟基、氰基、酮基、亚氨基、C0-C4烷基、C1-C4烷氧基 与C0-C4卤烷基的0至4个第二取代基取代；及
Ar2如式I中所述。
在上文诸式的特定实施方案中，各变量如下述：
Ar1、R1、R1a、R1b与R1c
特定Ar1基团满足下式：
或 在特定实施方案中，F为N，J为N和/或K 为N。在其它实施方案中，G为N，J为N和/或D为N。
在具式II与III的特定化合物中，R1代表独立地选自卤素、氰基、 羟基、胺基、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷基醚、C2-C6 烷酰基、C3-C6烷酮、单-及二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基磺酰基、 单-及二-(C1-C6烷基)磺胺基、及单-及二-(C1-C6烷基)氨羰基的0至3 个取代基。在这些化合物的一类中，R1代表1或2个取代基。在特定 这些化合物中，由R1所示的至少一个取代基为C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、 C1-C3烷基磺酰基、单-或二-(C1-C4烷基)氨羰基、单-或二-(C1-C6烷基) 磺胺基或单-及二-(C1-C3烷基)胺基。
在具式I的特定化合物中，Ar1是取代在连接点的邻位。同样地， 在具式Ia的特定化合物中，D与F至少一者为被取代的碳。在具式II 与III的特定化合物中，由R1所示的一取代基是位在连接点的邻位(也 即，F为被取代的碳)。例如，若式II中标明： 的环为被取 代的2-吡啶基，则一R1是位在该吡啶基的位置3(也即，F位置)。代 表性的邻位取代基包含，但不限于，卤素、胺基、氰基、C1-C6烷基、 C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷基磺酰基与单-及二-(C1-C6烷基)磺 胺基；在特定实施方案中，该邻位R1为卤素、氰基、甲基、三氟甲基 或甲基磺酰基。在其它这些化合物中，R1代表两个取代基，其一者是 位在邻位，另一者则位在连接点的对位或间位(例如，下文式IIa的R1b 或R1c)。代表性的对位或间位取代基包含，例如，卤素、羟基、氨基、 氰基、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷氧基、C2-C6烷基醚、C2-C6烷酰 基、单-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基磺酰基、单-或二-(C1-C6烷 基)磺胺基、或单-或二-(C1-C6烷基)氨羰基。
在具式IV的特定化合物中，G为N或D为N。在具式IV的特定化 合物中，G为CR1b，在G位置(对位)的R1b不为氢。在具式IV的其它化 合物中，间位的R1b不为氢。代表性对位及间位R1b基团包含，例如，上 文式II及III所述者。
在具式IV的特定化合物中，R1a为卤素、胺基、氰基、C1-C6烷基、 C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷基磺酰基或单-或二-(C1-C6烷基)磺 胺基。代表性的这些R1a基团包含卤素、氰基、甲基、三氟甲基及甲基 磺酰基。
代表性的Ar1基团包含满足下文诸亚式者：
或
Ar2、R2与R2a
在具式I、II与III的特定化合物中，Ar2为苯基或吡啶基(也即， 2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)。在具式I与III的特定化合物中， Ar2为如上述视需要被取代的9至12元双环芳基或杂芳基。优选为， Ar2被独立地选自如上述R2的0至3个或1至3个取代基取代。在特定 化合物中，Ar2具有至少一个取代基(R2)，各R2是独立地选自氨基、氰 基、卤素、-SO2NH2、C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4羟烷基、C1-C4烷氧 基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤烷氧基、单-及二-(C1-C4烷基)胺基C0-C4烷基、 C2-C4烷酰基、C1-C4烷氧羰基、C1-C4烷基磺酰基、C1-C4卤烷基磺酰基与 单-及二-(C1-C4烷基)磺胺基。更优选为，Ar2的取代基是独立地选自氨 基、氰基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤烷氧 基、C1-C4烷硫基与单-及二-(C1-C4烷基)氨基C0-C4烷基。在特定这些化 合物中，Ar2是在连接点的间位和/或对位被取代。换言的，若Ar2为苯 基，则该苯基是在位置3被单取代、在位置4被单取代、或在位置3 与4被双取代。
在特定Ar2基团中，一R2与相邻R2一起形成稠合碳环或杂环。代 表性的这些基团包含，例如，下述双环基团，其视需要如本文所述被 取代：

与 以及前述基团的变体，其中稠合环含有一或多个附加的 双键，例如：

与
在具式Ia与IV的特定化合物中，各R2a是独立地选自氨基、氰基、 卤素、-SO2NH2、-COOH、C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4羟烷基、C1-C4 烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤烷氧基、单-及二-(C1-C4烷基)氨基C0-C4 烷基、C2-C4烷酰基、C1-C4烷氧羰基、C1-C4烷基磺酰基、C1-C4卤烷基磺 酰基与单-及二-(C1-C4烷基)磺胺基。在进一步的这些化合物中，A为 CH或CR2a，各R2a是独立地选自氰基、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、 C1-C4烷氧基与单-及二-(C1-C4烷基)胺基C0-C2烷基。在其它这些化合物 中，A、B与E至少一者为N。
R3
在R3的界定中，变量“L”是界定为与R5、R6或R7一起形成4至7 元杂环的C0-C6烷基或C1-C6烷基。在如此形成的任何杂环中，存在L 中的至少一个碳原子也为环原子，且与R5、R6或R7的组成原子共价结 合。所产生的杂环可为杂环烷基(例如，四氢呋喃基、吗啉基、哌啶基 或哌嗪基)或杂芳基例如吡啶基、嘧啶基或四氢呋喃基。由此等杂环构 成的R3基团包含，例如：
舆
在式I、Ia与II至IV的特定实施方案中，R3为具下式的基团：

式中：
L为C0-C3烷基；及
R5与R6是：
(a)独立地选自氢、C1-C6烷基、C2-C6烯基、(C5-C7环烷基)C0-C4 烷基及C2-C4烷酰基；或
(b)结合形成4至12元杂环烷基；
其中烷基、烯基、(环烷基)烷基、烷酰基及杂环烷基各者被独立 地选自下述基团的0至4个取代基取代：(i)卤素、羟基、胺基、氨羰 基、酮基、-COOH与-SO2NH2；及(ii)C1-C4烷基、C5-C7环烷基、C1-C4 烷氧基、C2-C4烷酰基、C1-C4卤烷基、单-与二-(C1-C4烷基)胺基C0-C2 烷基、单-与二-(C1-C4烷基)氨羰基C0-C2烷基、苯基C0-C4烷基及(4至 7元杂环)C0-C2烷基，各者被独立地选自卤素、羟基、氰基、C1-C4烷基、 C1-C4烷氧基与C1-C4卤烷基的0至4个第二取代基取代。
这些R3基团包含，例如，单-与二-(C1-C4烷基)胺基基团，彼等被 独立地选自卤素、羟基、胺基、酮基、氨羰基、-COOH、-SO2NH2、C1-C4 烷基、C2-C4烯基、C5-C7环烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4烷氧基、C2-C4烷基 醚、C2-C4烷酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C4烷酰基氨基及单-与二-(C1-C4 烷基)胺基的0至4个取代基取代。
其它R3基团包含苯基及4至7元杂环，各者被独立地选自下述基 团的0至4个取代基取代：(a)卤素、羟基、胺基、酮基、氨羰基、 -SO2NH2与-COOH；及(b)C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、C2-C4烯基、(C5-C7 环烷基)C0-C2烷基、C1-C4烷氧基、C2-C4烷基醚、C2-C4烷酰基、C1-C4烷 基磺酰基、C2-C4烷酰基氨基、单-与二-(C1-C4烷基)胺基、单-与二-(C1-C4 烷基)氨羰基、单-与二-(C1-C6烷基)磺胺基、苯基C0-C4烷基及(4至7 元杂环)C0-C4烷基，各者被独立地选自卤素、羟基、氰基、-COOH、C1-C4 烷基与C1-C4卤烷基的0至4个第二取代基取代。特定的这些R3基团包 含 丁啶基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、哌嗪基、四 氢吡啶基及全氢吖庚因基，各者被独立地选自下述基团的0至4个取 代基取代：(a)卤素、羟基、胺基、酮基、氨羰基、-SO2NH2与-COOH； 及(b)C1-C4烷基、C2-C4烯基、C5-C7环烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4烷氧基、 C2-C4烷基醚、C2-C4烷酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C4烷酰基氨基及单- 与二-(C1-C4烷基)胺基，各者被独立地选自羟基与卤素的0至4个第二 取代基取代。这些R3基团的一实施例为：
以及其镜像异构物 舆 其它这些R3 基团为苯基、吡啶基、嘧啶基、哌嗪基、哒嗪基、咪唑基、噻吩基、 恶唑基或四氢呋喃基，各者被独立地选自卤素、羟基、氨基、氨羰基、 -SO2NH2、-COOH、C1-C4烷基、C5-C7环烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷氧基、 C2-C4烷酰基、C1-C4卤烷基及单-与二-(C1-C4烷基)胺基的0至4个取代 基取代。在特定实施方案中，R3不为-NH2。换言的，若L为单一共价键， 则R5与R6至少一者不为氢。
在式I、Ia与II至IV的进一步实施方案中，R3为 在 特定这些化合物中，L为C0-C3烷基；及R7为C1-C6烷基、C2-C6烯基、(C5-C7 环烷基)C0-C4烷基、C2-C4酰烷酰基、苯基C0-C6烷基或(6元杂芳基)C0-C4 烷基，各者被独立地选自卤素、羟基、氨基、氨羰基、-SO2NH2、-COOH、 C1-C4烷基、C5-C7环烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷氧基、C2-C4烷酰基、C1-C4 卤烷基及单-与二-(C1-C4烷基)胺基的0至4个取代基取代。这些R3基 团包含，例如， 氧基及C1-C6烷氧基，各者视需要被卤素、甲基、甲 氧基或三氟甲基取代。
在式I、Ia与II至IV的又进一步实施方案中，R3为卤素。
在式I、Ia、III与IV的特定化合物中，R3为C1-C4烷基、C3-C7环 烷基或C1-C4卤烷基，各者被独立地选自卤素、羟基、氰基、酮基、氨 羰基、-SO2NH2、-COOH、C3-C7环烷基、苯基及4至7元杂环的0至4个 取代基取代。
R4
R4，在本文提供的特定化合物中，代表零个取代基或一个甲基、乙 基或酮基，优选为位于哌嗪的位置2。在特定实施方案中，与甲基或乙 基连接的碳具手性。在其它化合物中，R4代表单一酮基取代基。
X、Y与Z
X、Y与Z，如上述，是独立地为CRx或N，使得X、Y与Z至少一 者为N。在特定实施方案中，各Rx是独立地选自氢及甲基，或各Rx为 氢。在特定代表性化合物中，Z为N(例如，X与Y为CH)。在本文提 供的其它化合物中，X为N(例如，Y与Z为CH)。在进一步化合物中， Z与X为N，X与Y为N或Z与Y为N。在进一步化合物中，X、Y与Z 各为N。在式II的情况下，阐明一些彼等实施方案的代表性亚式包括：
舆
具式II的特定化合物满足式IIa至IIh或其药物上可接受的盐的 至少一者。在各个彼等结构式中的变量如上文式II及其特定实施方案 中所述，但下文所述除外：

式IIa                                                式IIb
在式IIa与IIb中：
A、B与E独立地为氮或CR2a；
各R2a是独立地选自氢、氨基、氰基、卤素、-SO2NH2、C1-C4烷基、 C1-C4卤烷基、C1-C4羟烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤烷氧基、 单-及二-(C1-C4烷基)氨基C0-C4烷基、C2-C4烷酰基、C1-C4烷氧羰基、C1-C4 烷基磺酰基、C1-C4卤烷基磺酰基与单-及二-(C1-C4烷基)磺胺基，使得 至少一个R2a不为氢；在特定实施方案中，各R2a是独立地选自氢、卤素、 氰基、胺基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基及C1-C4卤烷基；
R1a为卤素、胺基、氰基、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷氧基、 C1-C6烷基磺酰基或单-或二-(C1-C6烷基)磺胺基；在特定实施方案中， R1a为卤素、氰基、甲基或三氟甲基；及
R1b与R1c是独立地选自氢、卤素、胺基、氰基、C1-C6烷基、C1-C6 烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷基磺酰基、单-及二-(C1-C6烷基)氨羰基、 单-及二-(C1-C6烷基)氨基与单-及二-(C1-C6烷基)磺胺基；
R4为氢、甲基、乙基或酮基；及
Rx在每次出现时是独立地选自氢、甲基、胺基与氰基。
在式IIa与IIb的特定实施方案中：
R1a为卤素、氰基、甲基或三氟甲基；
R1b与R1c独立地为氢、卤素、胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、单- 或二-(C1-C4烷基)胺基、单-或二-(C1-C4烷基)氨羰基、C1-C3烷基磺酰 基、或单-或二-(C1-C4烷基)磺胺基；
各R2a是独立地选自氢、卤素、氰基、胺基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基及C1-C4卤烷基；及
R5与R6是独立地选自：
(i)氢；及
(ii)C1-C6烷基、C2-C6烯基、(C3-C8环烷基)C0-C2烷基、C2-C6烷酰 基、苯基C0-C2烷基与(4至7元杂环烷基)C0-C2烷基及与L结合形成4 至7元杂环的基团；各者被独立地选自卤素、羟基、酮基、COOH、氨 羰基、-SO2NH2、C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧羰基、 C1-C4烷基磺酰基、与单-及二-(C1-C6烷基)氨基的0至2个取代基取代；
或R5与R6，和与其结合的N一起，形成4至7元杂环烷基，其被 独立地选自卤素、羟基、氨基、酮基、氨羰基、-SO2NH2、COOH、C1-C4 烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4羟烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷氧羰基、C2-C4 烷酰基、C2-C4烷酰基氨基、(C3-C7环烷基)C0-C2烷基、(4至7元杂环烷 基)C0-C2烷基、单-及二-(C1-C6烷基)氨羰基、C1-C4烷基磺酰基、与单- 及二-(C1-C6烷基)氨基C0-C2烷基的0至2个取代基取代。

式IIc                                      式IId
在式IIc与IId中，诸变量如式IIa中所述。优选为，L为单一共 价键或亚甲基及B与E至少一者为CR2a。

式IIe                                                   式IIf
在式IIe与IIf中：
A、B与E独立地为氮或CR2a；
各R2a是独立地选自氢、氨基、氰基、卤素、-SO2NH2、C1-C4烷基、 C1-C4卤烷基、C1-C4羟烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤烷氧基、 单-或二-(C1-C4烷基)氨基C0-C4烷基、C2-C4烷酰基、C1-C4烷氧羰基、C1-C4 烷基磺酰基、C1-C4卤烷基磺酰基或单-或二-(C1-C4烷基)磺胺基，使得 至少一个R2a不为氢；在特定实施方案中，各R2a是独立地选自氢、卤素、 氰基、胺基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基及C1-C4卤烷基；
R1a为卤素、胺基、氰基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷基、 C1-C6烷基磺酰基或单-或二-(C1-C6烷基)磺胺基；在特定实施方案中， R1a为卤素、氰基、甲基或三氟甲基；
R1b与R1c是独立地选自氢、卤素、胺基、氰基、C1-C6烷基、C1-C6 烷氧基、C1-C6卤烷基、C1-C6烷基磺酰基、单-及二-(C1-C6烷基)氨羰基、 单-及二-(C1-C6烷基)氨基与单-及二-(C1-C6烷基)磺胺基；
R4为氢、甲基、乙基或酮基；及
Rx在每次出现时是独立地选自氢、甲基、胺基与氰基。
在式IIe与IIf的特定实施方案中：
R1a为卤素、氰基、甲基或三氟甲基；
R1b与R1c独立地为氢、卤素、胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、单- 或二-(C1-C4烷基)胺基、单-或二-(C1-C4烷基)氨羰基、C1-C3烷基磺酰 基、或单-或二-(C1-C4烷基)磺胺基；
各R2a是独立地选自氢、卤素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4烷 氧基、与C1-C4卤烷基；及
R7为C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷基醚、(C3-C8环烷基)C0-C2烷基、 C2-C6烷酰基、苯基C0-C2烷基或(4至7元杂环烷基)C0-C2烷基，各者被 独立地选自卤素、羟基、酮基、C1-C4烷基、C1-C4卤烷基及C2-C4烷酰基 的0至2个取代基取代。

式IIg                                              式IIh
在式IIg与IIh中，诸变量如式IIa中所述。优选为，L为单一共 价键或亚甲基，及B与E至少一者为CR2a。
具式IV的特定化合物满足式IVa或式IVb，或为其药物上可接受 的盐：

式IVa                                                式IVb
在式IVa与IVb中，诸变量如式IV中所述，但R4为氢、甲基、乙 基或酮基。在式IVa与IVb的特定化合物中：
R1a为卤素、氰基、甲基或三氟甲基；
R1b与R1c独立地为氢、卤素、胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、单- 或二-(C1-C4烷基)胺基、单-或二-(C1-C4烷基)氨羰基、C1-C3烷基磺酰 基、或单-或二-(C1-C4烷基)磺胺基；及
各R2a是独立地选自卤素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、 与C1-C4卤烷基。
在式IVa与IVb的特定化合物中，R3为单-或二-(C1-C4烷基)胺基， 其被独立地选自卤素、羟基、氨基、氨羰基、-COOH、-SO2NH2、C1-C4 烷基、C2-C4烯基、C1-C4卤烷基、C5-C7环烷基、C1-C4烷氧基、C2-C4烷基 醚、C2-C4烷酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C4烷酰基氨基与单-及二-(C1-C4 烷基)胺基的0至4个取代基取代。在式IVa与IVb的其它化合物中， R3为苯基或4至7元杂环，各者被独立地选自下述基团的0至4个取 代基取代：(a)卤素、羟基、氨基、酮基、氨羰基、-SO2NH2与-COOH； 及(b)C1-C4烷基、C1-C4卤烷基、C2-C4烯基、(C5-C7环烷基)C0-C2烷基、 C1-C4烷氧基、C2-C4烷基醚、C2-C4烷酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C4烷酰 基氨基、单-与二-(C1-C4烷基)胺基、单-与二-(C1-C4烷基)氨羰基、单- 与二-(C1-C6烷基)磺胺基、苯基C0-C4烷基及(4至7元杂环)C0-C4烷基， 各者被独立地选自卤素、羟基、氰基、-COOH、C1-C4烷基与C1-C4卤烷 基的0至4个第二取代基取代。特定的这些R3基团包含吡咯烷基、吗 啉基、硫代吗啉基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡啶基及全氢吖庚因基， 各者被独立地选自下述基团的0至4个取代基取代：(a)卤素、羟基、 氨基、酮基、氨羰基、-SO2NH2与-COOH；及(b)C1-C4烷基、C2-C4烯基、 C5-C7环烷基、C1-C4卤烷基、C1-C4烷氧基、C2-C4烷基醚、C2-C4烷酰基、 C1-C4烷基磺酰基、C2-C4烷酰基氨基及单-与二-(C1-C4烷基)胺基，各者 被独立地选自羟基与卤素的0至4个第二取代基取代。其它这些R3基 团为苯基、吡啶基、嘧啶基、哌嗪基、哒嗪基、咪唑基、恶唑基或四 氢呋喃基，各者被独立地选自卤素、羟基、氨基、氨羰基、-SO2NH2、 -COOH、C1-C4烷基、C5-C7环烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷氧基、C2-C4烷 酰基、C1-C4卤烷基及单-与二-(C1-C4烷基)胺基的0至4个取代基取代。
在式IVa与IVb的其它化合物中，R3为具下式的基团：

式中L为C0-C3烷基；及R7为C1-C6烷基、C2-C6烯基、(C5-C7环烷 基)C0-C4烷基、C2-C4烷酰基、苯基C0-C6烷基或(6元杂芳基)C0-C4烷基， 各者被独立地选自卤素、羟基、氨基、氨羰基、-SO2NH2、-COOH、C1-C4 烷基、C5-C7环烷基、C2-C4烷基醚、C1-C4烷氧基、C2-C4烷酰基、C1-C4 卤烷基及单-与二-(C1-C4烷基)胺基的0至4个取代基取代。一些R3基 团为苄氧基，其视需要被卤素、甲基、甲氧基或三氟甲基取代。
在式IVa与IVb的进一步化合物中，R3为C1-C4烷基或C1-C4卤烷 基，各者被独立地选自羟基、氰基、酮基、C3-C7环烷基、苯基及4至 7元杂环的0至4个取代基取代。
本文提供的代表性化合物包含，但不限在，实施例1至3具体叙 述者。显见地，本文列举的特定化合物仅具代表性而不拟对本发明范 围构成局限。进一步，如上述，本发明所有化合物可呈游离酸或碱或 呈药物上可接受的盐存在。
如使用体外VR1配位体结合试验和/或功能性试验(例如钙移动试 验、背根神经节试验或活体内疼痛舒缓试验)所测定，本文提供的二芳 基哌嗪基-吡啶类似物可被检测地改变(调节)VR1活性。本文中有关 “VR1配位体结合试验”意欲参照例如实施例5提供的标准体外受体结 合试验；“钙移动试验”(在本文中也称为“信息传导试验”)则如实 施例6所述进行。简言之，欲评估对VR1的结合作用，可进行竞争性 结合试验，其中将VR1制剂与VR1(例如，辣椒素受体促效剂例如RTX) 以及未标示的测试化合物结合的被标记(例如，125I或3H)化合物一起孵 育。在本文提供的试验中，所用VR1优选为哺乳类VR1，更优选为人类 或大鼠VR1。受体可重组表达或自然表达。VR1制剂可为，例如，得自 重组表达人类VR1的HEK293或CHO细胞的细胞膜制剂。与可被检测地 调节香草精类配位体与VR1结合的化合物一起孵育，造成与VR1制剂 结合的标记量相对在化合物不存在下结合的标记量降低或增加。此降 低或增加可如本文所述，用在测定VR1的Ki。一般而言，在此等试验 中，优选降低与VR1制剂结合的标记量的化合物。
如上述，在特定实施方案中，以VR1拮抗剂的化合物优选。这些 化合物的IC50值可使用如实施例6提供的体外VR1传导的钙移动试验 予以测定。简言之，使表达辣椒素受体的细胞与所关注的化合物及细 胞内钙浓度指示剂(例如，细胞膜渗透钙敏感染料例如Fluo-3或 Fura-2(二者均得自，例如，Molecular Probes，Eugene，OR)，其与 Ca++结合时，均产生萤光讯号)接触。此等接触优选为利用使细胞在包 含化合物和/或溶在溶液中的指示剂的缓冲液或培养基中孵育一或多 次而进行。使接触维持足够长的时间，以容许染料进入细胞中(例如， 1至2小时)。将细胞洗涤或过滤，以去除过量染料，然后与香草精类 受体促效剂(例如，辣椒素、RTX或欧瓦尼)接触，其浓度一般等在EC50 浓度，接着测定萤光反应。当接触促效剂的细胞与VR1拮抗剂化合物 接触时，相较在测试化合物不存在下与促效剂接触的细胞，其萤光反 应通常减少至少20％，优选为至少50％及更优选为至少80％。本文提供 的VR1拮抗剂的IC50值优选为小于1微摩尔浓度、小于100nM、小于 10nM或小于1nM。在特定实施方案中，本文提供的VR1拮抗剂在化 合物浓度等于IC50的体外辣椒素受体促效试验中，展现未可检测的促 效剂活性。特定的这些拮抗剂在化合物浓度较IC50高100倍的体外辣 椒素受体促效试验中，展现未可检测的促效剂活性。
在其它实施方案中，以辣椒素受体促效剂的化合物优选。辣椒素 受体促效剂活性通常可如实施例6所述予以测定。当细胞与1微摩尔 浓度的VR1促效剂化合物接触时，其萤光反应通常较细胞与100nM辣 椒素接触时观察到的增加至少30％。本文提供的VR1促效剂的EC50值优 选为小于1微摩尔浓度、小于100nM或小于10nM。
VR1调节活性也可，或者，使用如实施例9提供的经培养的背根神 经节试验和/或如实施例10提供的活体内疼痛舒缓试验予以评估。本 文提供的化合物优选为在本文提供的一或多个功能性试验中，对于VR1 活性具有统计学上显著的特定影响。
在特定实施方案中，本文提供的VR1调节剂不会实质上调节配位 与其它细胞表面受体(例如EGF受体酪胺酸激酶或烟碱酸乙酰胆碱受体) 结合。换言之，此等调节剂不会实质上抑制细胞表面受体活性，例如 人类上皮细胞生长因子(EGF)受体酪胺酸激酶或烟碱酸乙酰胆碱受体 (例如，此等受体的IC50或IC40优选为大于1微摩尔浓度，最佳为大于 10微摩尔浓度)。优选为，调节剂在0.5微摩尔浓度、1微摩尔浓度或 更优选为10微摩尔浓度下，不会被可检测地抑制EGF受体活性或烟碱 酸乙酰胆碱受体活性。测定细胞表面受体活性的试验为市售可得，包 括购自Panvera(Madison，WI)的酪胺酸激酶试验试剂盒。
本文提供的优选VR1调节剂为非镇静性。换言的，在测定疼痛舒 缓的动物模式(例如本文实施例10提供的模式)中足以提供止痛的最小 剂量的两倍的VR1调节剂剂量，在动物模式镇静试验中(使用 Fitzgerald et al.(1988)Toxicology 49(2-3)：433-9叙述的方法) 只引起短暂(例如，持续不超过疼痛舒缓持续的时间的1/2)或优选为无 统计学上显著的镇静作用。优选为，足以提供止痛的最小剂量的五倍 剂量不会产生统计学上显著的镇静作用。更优选为，本文提供的VR1 调节剂在小于25毫克/公斤(优选为小于10毫克/公斤)的静脉内剂量 或小于140毫克/公斤(优选为小于50毫克/公斤，更优选为小于30毫 克/公斤)的口服剂量下，不会产生镇静作用。
如果需要，则可对本文提供的VR1调节剂进行特定药理性质的评 估，包括，但不限于，经口生物利用性(优选化合物为具经口生物利用 性至容许化合物的治疗有效浓度达到小于140毫克/公斤，优选为小于 50毫克/公斤，更优选为小于30毫克/公斤，又更优选为小于10毫克/ 公斤，尚又更优选为小于1毫克/公斤，及最佳为小于0.1毫克/公斤 的口服剂量程度)、毒性(优选的VR1调节剂在投与对象治疗有效量时， 不具毒性)、副作用(优选的VR1调节剂在投与对象治疗有效量的化合 物时，产生可与宽慰剂比较的副作用)、血清蛋白结合作用及体外与活 体内半衰期(优选的VR1调节剂具有活体内半衰期相等在体外半衰期且 虑及Q.I.D.给药，优选为T.I.D.给药，更优选为B.I.D.给药，及最佳 为一天给药一次)。此外，血脑障壁的差异渗透性对于用在治疗疼痛的 VR1调节剂而言可能符合所需，其利用调节CNS VR1活性使得如上述的 口服总每日剂量提供这些调节作用至治疗有效的程度，同时低脑含量 的VR1用在治疗末梢神经传导的疼痛可能优选(也即，这些剂量不会提 供足以显著地调节VR1活性的化合物的脑(例如，CFS)含量)。可使用 此项技术中悉知的例行试验来评估彼等性质，及鉴定特别用途的优异 化合物。例如，用于预测生物利用性的试验包含越过人类单层肠细胞 (包括Caco-2单层细胞)的运送。化合物在人体的血脑障壁的渗透性可 由给与(例如，经静脉内)实验室动物的脑含量化合物的予以预测。血 清蛋白结合可由白蛋白结合试验进行预测。化合物半衰期与剂量所需 频率成反比。化合物的体外半衰期可由本文实施例7叙述的微粒体半 衰期试验予以预测。
如上述，本文提供的优选化合物不具毒性。一般而言，应了解本 文所用的“不具毒性”一词为相对意义，是意指由美国食品药物管理 局(FDA)认可的投与哺乳动物(优选为人类)用或，与已建立的准则一致 地，易由FDA认可的投与哺乳动物(优选为人类)用的任何物质。此外， 高度优选的不具毒性的化合物满足一或多个下述准则：(1)实质上不抑 制细胞ATP产生；(2)不显著延长心脏QT间隔；(3)实质上不引起肝脏 扩大；或(4)实质上不引起肝脏酵素释放。
本文所用的实质上不抑制细胞ATP产生的化合物为满足本文实施 例8提出的准则的化合物。换言的，如实施例8所述，使用100μM这 些化合物处理细胞时，展现相较在未处理细胞中检测的ATP量的至少 50％的ATP量。在更高度优选的实施方案中，这些化合物展现相较在未 处理细胞中检测的ATP量的至少80％的ATP量。
不显著延长心脏QT间隔的化合物为在投与获得等在EC50或IC50的 血清浓度的化合物剂量后，对天竺鼠、迷你猪或狗不造成统计学上显 著的延长心脏QT间隔(如心动电流描记法所测定)的化合物。在特定优 选实施方案中，非经肠或经口投与0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、 40或50毫克/公斤的剂量不造成统计学上显著的延长心脏QT间隔。所 谓“统计学上显著”意指造成使用具统计显著性的标准参数试验例如 学生氏T试验(Student’s T test)测定的在p＜0.1或更优选为p＜0.5 显著水准的与对照组的不同。
若以获得等于EC50或IC50的血清浓度的化合物剂量每天治疗实验 室啮齿类(例如，小鼠或大鼠)5至10天后，造成肝脏对体重比增加不 大于相配对照组的100％，则称该化合物实质上不引起肝脏扩大。在更 高度优选的实施方案中，相对在相配对照组，这些剂量不引起大于75％ 或50％的肝脏扩大。若是使用非啮齿类哺乳动物(例如，狗)，则这些剂 量必须不造成肝脏对体重比增加大于相配对照组的50％，优选为不大于 25％，更优选为不大于10％。此等试验中的优选剂量包括非经肠或经口 投与0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50毫克/公斤。
同样地，若投与两倍的获得等于EC50或IC50的血清浓度的最小剂量 的化合物，与相配的仿真处理对照组比较下，不会提升实验室啮齿类 动物的ALT、LDH或AST血清含量100％以上，则称该化合物不促进实质 的肝脏酵素释放。在更高度优选的实施方案中，相对于相配对照组， 这些剂量不提升这些血清含量75％以上或50％以上。或者，如果在体外 肝细胞试验中，等于该化合物的EC50或IC50的浓度(在体外与肝细胞接 触及孵育的培养基或其它这些溶液中)不会引致任何这些肝脏酵素可 检测地释入培养基中，至相当仿真处理的对照组细胞培养基中观察到 的基线量以上，则称该VR1调节剂不促进实质的肝脏酵素释放。在更 高度优选的实施方案中，当这些化合物浓度为化合物EC50或IC50的五 倍，优选为十倍时，仍无可检测的任何这些肝脏酵素释入培养基中。
在其它实施方案中，特定的优选化合物在等于EC50或IC50的化合物 浓度时，不抑制或诱发微粒体细胞色素P450酵素活性，例如CYP1A2 活性、CYP2A6活性、CYP2C9活性、CYP2C19活性、CYP2D6活性、CYP2E1 活性或CYP3A4活性。
特定的优选化合物在等于EC50或IC50的化合物浓度时，不具基因破 坏性(clastogenic)(例如，如使用小鼠红血球前身细胞小核试验、Ames 小核试验、螺旋小核试验或相似的物等测定)。在其它实施方案中，在 这些浓度下，特定的优选VR1调节剂不诱发姊妹染色单体交换(例如， 在中国仓鼠卵巢细胞中)。
为了检测目的，如下文更具细节的讨论，本文提供的化合物可进 行同位素标记或放射标记。例如，式I至III列举的化合物可有一或 多个原子被原子质量或质量数与一般在自然界发现的原子质量或质量 数不同的相同元素的原子置换。可出现在本文提供的化合物中的同位 素实施例包含氢、碳、氮、氧、磷、氟及氯的同位素，例如2H、3H、11C、 13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F及36Cl。此外，以重同位素例 如氘(也即，2H)置换由在代谢稳定性较大，例如活体内半衰期增加或剂 量需求减少，可得到特定的治疗优点，因此，在一些情形下更被喜用。
二芳基哌嗪基-吡啶类似物的制备
二芳基哌嗪基-吡啶类似物通常可使用标准合成方法予以制备。起 始物质可自供货商例如Sigma-Aldrich Corp.(St.Louis，MO)购得， 或可使用己建立的实验流程由市售可得的前体物合成。举例而言，可 使用与下文任何反应图式所示的相同合成途径，以及合成有机化学领 域中已知的合成方法，或在此项技术领域具有通常知识者所知的其变 异方法。下文反应图式中的各变量是参照与本文提供的化合物说明中 一致的任何基团。
在下文反应图式中，“还原”是指将硝基官能基还原为氨基官能 基的过程，或将酯官能基转化为醇官能基的过程。硝基的还原可以熟 习有机合成技术人士悉知的许多方法进行，包括，但不限于，催化性 氢化反应、以SnCl2还原及以三氯化钛还原。酯基的还原典型地是使用 金属氢化物试剂进行，包括，但不限于，氢化二异丁铝(DIBAL)、氢化 铝锂(LAH)、及硼氢化钠。还原方法的回顾参见：Hudlicky，M. Reductions in Organic Chemistry，ACS Monograph 188，1996。
在下文反应图式中，“水解”是指基质或反应物与水的反应。详 言的，“水解”是指酯或腈官能基成为羧酸的转化反应。此过程可利 用熟习有机合成技术人士悉知的许多酸或碱予以催化。
在下文反应图式中，“催化剂”是指适当的过渡金属催化剂例如， 但不限于，肆(三苯基膦)钯(O)或乙酸钯(II)。此外，催化剂系统可包 含配位体例如，但不限在，2-(二环己基膦酰)联苯及三-叔丁基膦，也 可包含碱例如K3PO4、Na2CO3或叔丁醇钾或钠。由过渡金属催化的反应 可使用惰性溶剂包含，但不限于，甲苯、二恶烷、DMF、N-甲基吡咯烷 酮、乙二醇、二甲醚、二乙二醇二甲醚及乙腈，在常温或升高的温度 下进行。与适当金属-芳基试剂组合使用时，由过渡金属催化的(杂)芳 基/芳基偶联反应可用在制备结构式1D与1E(反应图式1)、2C(反应 图式2)、4E(反应图式4)、5B(反应图式5)、6-F(反应图式6)、8B 与8D(反应图式8)、9C(反应图式9)、及10C(反应图式10)包含的 化合物。常见使用的试剂/催化剂对包括芳基硼酸/钯(O)(Suzuki反 应；Miyaura and Suzuki(1995)Chemical Reviews 95：2457)与芳基 三烷基锡烷/钯(O)(Stille反应；T.N.Mitchell，(1992)Synthesis 9：803-815)、芳基锌/钯(O)与芳基格利那(Grignard)/镍(II)。此外， 金属催化的(杂)芳基/胺偶联反应(Buchwald-Hartwig交叉偶联反应； J.F.Hartwig，Angew.Chem.Int.Ed.37：2046-2067(1998))可用 在制备结构式7F(反应图式7)、9E(反应图式9)、及10E(反应图式 10)包含的化合物。
在反应图式11中，R8与R9通常如本文式I中R5与R6所述。
下文反应图式及本文他处所用的其它界定为：
BINAP    (消旋性)-2，2’-双(二苯基膦酰)-1，1’-联二萘
CDCl3   氘化氯仿
d        化学转移
DCM      二氯甲烷
DDQ      2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯并醌
DIEA     N，N-二异丙基乙胺
DMA      N，N-二甲基乙酰胺
DMF      二甲基甲酰胺
DMSO     二甲亚砜
DPPF     1，1’-双(二苯基膦酰)二茂铁
Et3N    三乙胺
EtOAc    乙酸乙酯
EtOH     乙醇
1H NMR  质子核磁共振
HOAc     乙酸
HPLC     高压液相层析法
Hz         赫兹
KOAc       乙酸钾
LCMS       液相层析法/质谱分析法
MS         质谱分析法
(M+1)      质量+1
m-CPBA     间氯过苯甲酸
MeOH       甲醇
MsCl       甲磺酰氯
n-BuLi     正丁基锂
Tf         -SO2CF3
Pd2(dba)3三(二亚苄基丙酮)二钯(O)
Pd(pph3)4四(三苯基膦)钯(O)
PhNEt2    二乙基-苯基-胺，也称为N，N-二乙基苯胺
PPh3      三苯基膦
t-BuOK     叔丁醇钾
THF        四氢呋喃
TLC        薄层色析法
                             反應圖式1

                             反應圖式2

                             反應圖式3

                             反應圖式4

                             反應圖式5

                             反應圖式6

                             反應圖式7

                             反應圖式8

                             反應圖式9

                             反應圖式10

                            反應圖式11

                     反應圖式12

                     反應圖式13

在特定实施方案中，本文提供的化合物可能含有一或多个不对称 碳原子，化合物因而可呈不同立体异构物形式存在。这些形式可为， 例如，消旋体或具光学活性的形式。如上文所述，所有立体异构物均 涵盖在本发明范围的内。然而，一般可能期望获得单一镜像异构物(也 即，具光学活性的形式)。制备单一镜像异构物的标准方法包括不对称 合成法及消旋体的解析。消旋体的解析可利用，举例而言，已知方法 例如解析剂存在下的结晶法，或使用例如手性HPLC管柱的层析法而达 成。
化合物的辐射标记可藉由使用含有至少一个原子为放射性同位素 的前体物进行其合成。各放射性同位素优选为碳(例如，14C)、氢(例如， 3H)、硫(例如，35S)、或碘(例如，125I)。以氚标记的化合物也可通过在 氚化乙酸中的铂催化剂交换、在氚化三氟乙酸中的酸催化剂交换、或 以化合物为基质的使用氚气的异相催化剂交换予以催化制备。此外， 如果适当，则特定前驱体可与氚气进行氚-卤素交换、进行不饱和键的 氚气还原、或使用硼氚化钠进行还原。辐射标记化合物的制备也可方 便地向专精在合成辐射标记探针化合物的放射性同位素供货商订购。
药学组合物
本发明也提供含有本发明提供的一或多种化合物、以及至少一种 生理上可接受的载剂或赋形剂的药学组合物。药学组合物可包含，例 如以下一或多种的水、缓冲剂(例如，中性缓冲盐液或磷酸盐缓冲盐 液)、乙醇、无机油、植物油、二甲亚砜、碳水化合物(例如，葡萄糖、 甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、甘露糖醇、蛋白质、佐剂、多肽或氨基酸例 如甘氨酸、抗氧化剂、螯合剂例如EDTA或谷胱苷肽和/或防腐剂。此 外，本文提供的药学组合物中也可包含其它活性成分(但不必然)。药 学组合物可调配以供任何适当的投与方式，包括例如局部、经口、鼻、 直肠或非经肠投与。本文所用的非经肠一词包含经皮下、皮内、血管 内(例如，静脉内)、肌内、脊髓、颅内、脑脊髓膜内与腹膜内注射， 以及任何类似的注射或灌注技术。在特定实施方案中，以适用在口服 用途的组成物优选。这些组成物包含，例如，锭剂、片剂、菱形锭剂、 水性或油性悬浮液、分散性粉剂或粒剂、乳液、硬或软胶囊、或糖浆 或酏剂。在其它实施方案中，本发明组成物可调配为冻干物。特定症 状(例如，治疗例如灼伤或痒等皮肤症状)下，供局部投与的配方优选； 治疗尿失禁及膀胱过动时，供直接投与至膀胱(膀胱内投与)的配方优 选。
意欲供口服用途的组成物可进一步包含一或多种成分例如增甜 剂、调味剂、着色剂和/或防腐剂，以提供诱人且美味的制剂。锭剂含 有活性成分，并掺合适用在制造锭剂的生理上可接受的赋剂。这些赋 形剂包含，例如，惰性稀释剂(例如，碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙 或磷酸钠)、造粒及崩解剂(例如，玉米淀粉或海藻酸)、粘合剂(例如， 淀粉、明胶或阿拉伯胶)及润滑剂(例如，硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉)。 锭剂可未包覆或利用已知技术包覆以延缓在胃肠道的崩解与吸收，因 而提供长期的持续作用。例如，可使用时间延缓物质例如单硬脂酸甘 油酯或二硬脂酸甘油酯。
供口服用途的配方也可呈其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如， 碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合的硬明胶胶囊，或呈其中活性成分与水 或油介质(例如，花生油、液态石蜡或橄榄油)混合的软明胶胶囊存在。
水性悬浮液含有掺合适用在制造水性悬浮液的赋形剂与活性物 质。这些赋形剂包含悬浮剂(例如，羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟 丙甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶与阿拉伯胶)；及 分散剂或润湿剂(例如，天然存在的磷脂类例如卵磷脂、环氧化物与脂 肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯、环氧乙烷与长链脂族醇的缩 合产物例如十七乙烯氧鲸蜡醇、环氧乙烷与衍生自脂肪酸及己糖醇的 部分酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯、或环氧乙烷与衍 生自脂肪酸及己糖醇无水物的部分酯的缩合产物例如聚乙烯山梨聚糖 单油酸酯)。水性悬浮液也可包含一或多种防腐剂例如对羟苯甲酸-乙 酯或-正丙酯、一或多种着色剂、一或多种调味剂、及一或多种增甜剂 例如蔗糖或糖精。
油性悬浮液可藉由在植物油(例如，花生油、橄榄油、芝麻油或椰 子油)中或矿物油例如液态石蜡中悬浮活性成分予以调配。油性悬浮液 可含增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可添加例如上文所述的甜味 剂和/或调味剂以提供美味的口服制剂。此等悬浮液可通过添加抗氧化 剂(例如抗坏血酸)予以防腐。
适用于通过添加水制备水性悬浮液的分散性粉剂及粒剂是由活性 成分掺合分散剂或润湿剂、悬浮剂与一或多种防腐剂提供。适当的分 散剂或润湿剂及悬浮剂，其实施例为上文已述者。也可存在其它赋形 剂，例如增甜剂、调味剂与着色剂。
药学组合物也可调配为水包油型乳液。其油相可为植物油(例如， 橄榄油或花生油)、矿物油(例如，液态石蜡)或其混合物。适当的乳化 剂包含天然存在的胶类(例如阿拉伯胶或黄蓍胶)、天然存在的磷脂类 (例如，黄豆卵磷脂、及衍生自脂肪酸与己糖醇的酯或部分酯类)、酸 酐类(例如山梨聚糖单油酸酯)及衍生自脂肪酸与己糖醇的部分酯与环 氧乙烷的缩合产物(例如，聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯)。乳液也可包 含一或多种增甜剂和/或调味剂。
糖浆与酏剂可与增甜剂例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖一起 调配。此等配方也可包含一或多种缓和剂、防腐剂、调味剂和/或着色 剂。
供局部投与的配方典型地包含结合活性剂的局部载体，含或不含 附加的视需要成分。适当的局部载体及附加成分为此项技术中所悉知， 显见地，载体的选择取决在特定的物理形式及递送方式。局部载体包 含水；有机溶剂例如醇类(例如，乙醇或异丙醇)或甘油；二醇类(例如， 丁二烯、异戊二烯或丙二醇)；脂族醇类(例如，羊毛脂)；水与有机溶 剂的混合物及有机溶剂例如醇与甘油的混合物；脂质为基底的物质例 如脂肪酸、酰基甘油类(包含油类例如矿物油，及天然或合成来源的脂 肪)、磷酸甘油酯类、神经鞘脂质类及蜡类；蛋白质为基底的物质例如 胶原蛋白及明胶；硅酮为基底的物质(非挥发性与挥发性二者)；及烃 为基底的物质例如微囊海绵及聚合物基质。组成物可进一步包含一或 多种经改造以增进所施用配方的稳定性或有效性的成分，例如稳定剂、 悬浮剂、乳化剂、粘度调整剂、胶凝剂、防腐剂、抗氧化剂、皮肤渗 透增强剂、保湿剂及持续释放物质。这些成分的实施例如Martindale-- The Extra Pharmacopoeia(Pharmaceutical Press，London 1993)及 Martin(ed.)Remington’s Pharmaceutical Sciences中所述。配方 可包含微胶囊，例如羟甲基纤维素或明胶-微胶囊、微脂粒、白蛋白微 球体、微乳液、纳米颗粒或纳米胶囊。
局部配方可制备为多种物理形式包括，例如，固体、糊剂、乳霜、 泡沫剂、洗剂、凝胶、粉剂、水性液体及乳液。这些形式的物理外观 及粘性可由配方中存在的乳化剂及粘度调整剂的存在与否及用量来控 制。固体通常坚实且不具倾泻性，通常调配为棒状或条状、或呈微粒 状；固体可为不透明或透明，视需要可含有溶剂、乳化剂、保湿剂、 软化剂、芳香剂、染料/着色剂、防腐剂及增加或加强最终产物效力的 其它活性成分。乳霜及洗剂常为彼此相似，主要为粘性不同；洗剂及 乳霜均可为不透明、半透明或透明及常含有乳化剂、溶剂、粘度调整 剂、以及保湿剂、软化剂、芳香剂、染料/着色剂、防腐剂及增加或加 强最终产物效力的其它活性成分。凝胶可制备为具有广范围的粘性， 从浓稠或高粘性至稀薄或低粘性。这些配方，与洗剂及乳霜类似地， 也可含有溶剂、乳化剂、保湿剂、软化剂、芳香剂、染料/着色剂、防 腐剂及增加或加强最终产物效力的其它活性成分。液体比乳霜、洗剂、 或凝胶稀薄，通常不含乳化剂。液体局部产物常含有溶剂、乳化剂、 保湿剂、软化剂、芳香剂、染料/着色剂、防腐剂及增加或加强最终产 物效力的其它活性成分。
供局部配方用的适当乳化剂包含，但不限于，离子性乳化剂、鲸 蜡基硬脂酰醇、非离子性乳化剂例如聚氧乙烯油烯基醚、PEG-40硬脂 酸酯、聚氧乙烯鲸蜡基硬脂酰醇(ceteareth)-12、聚氧乙烯鲸蜡基硬 脂酰醇-20、聚氧乙烯鲸蜡基硬脂酰醇-30、聚氧乙烯鲸蜡基硬脂酰醇、 PEG-100硬脂酸酯及硬脂酸甘油酯。适当的粘性调整剂包含，但不限于， 保护胶体或非离子性胶类例如羟乙基纤维素、黄原胶、硅酸铝镁、硅 石、微晶蜡、蜂蜡、石蜡、及棕榈酸鲸蜡酯。凝胶组成物可利用添加 胶凝剂例如几丁聚糖、甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯醇、聚季铵 类(polyquaterniums)、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维 素、卡波姆(carbomer)或胺化的甘草酸而形成。适当的表面活性剂包 含，但不限于，非离子性、两性、离子性及阴离子性表面活性剂。举 例而言，可在局部配方中使用一或多种选自聚二甲基硅氧烷共聚醇、 聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯40、聚山梨糖醇酯60、聚山梨糖醇酯 80、月桂酰胺DEA、椰油酰胺DEA与椰油酰胺MEA、油基三甲铵内酯、 椰油酰胺丙基磷脂基PG-二硬脂氯(PG-dimonium chloride)、及月桂醇 硫酸铵。适当的防腐剂包含，但不限于，抗微生物剂例如对羟苯甲酸 甲酯、对羟苯甲酸丙酯、山梨酸、苯甲酸、与甲醛，以及物理稳定剂 与抗氧化剂例如维生素E、抗坏血酸钠/抗坏血酸及没食子酸丙酯。适 当的保湿剂包含，但不限于，乳酸与其它羟基酸及其盐、甘油、丙二 醇、与丁二醇。适当的软化剂包含羊毛脂醇、羊毛脂、羊毛脂衍生物、 胆固醇、矿脂、新戊酸异硬脂酯及矿物油。适当的芳香剂包含，但不 限于，FD&C红色40号、FD&C黄色5号。其它可纳入局部配方中的适 当附加成分包含，但不限于，磨蚀剂、吸收剂、抗结块剂、抗起泡剂、 抗静电剂、收敛剂(例如，金缕梅、醇与草本抽出物例如洋甘菊抽出物)、 粘合剂/赋形剂、缓冲剂、螯合剂、薄膜形成剂、调理剂、推进剂、遮 光剂、pH调整剂及保护剂。
供凝胶配方用的适当局部载体的实施例为：羟丙基纤维素(2.1％)； 70/30异丙醇/水(90.9％)；丙二醇(5.1％)；及聚山梨糖醇酯80(1.9％)。 供泡沫配方用的适当局部载体的实施例为：鲸蜡醇(1.1％)；硬脂醇 (0.5％)；季铵52(0.1％)；丙二醇(2.0％)；乙醇95 PGF3(61.05％)； 去离子水(30.05％)；P75烃推进剂(4.30％)。所有百分比均为重量％。
典型的局部组成物的递送模式包括使用手指的施敷法；使用物理 施敷器例如布、面纸、纱布、棉棒或刷子的施敷法；喷雾法(包括水气、 气溶胶或泡沫喷雾法)；点滴器施敷法；淋洒；浸渍；及漂洗法。也可 使用经控制的释放载体。
药学组合物可制备为无菌注射用水性或油质悬浮液。视所用载体 与浓度而定，可使调节剂悬浮或溶解在载体中。此等组成物可使用例 如上述的适当分散剂、润湿剂和/或悬浮剂，根据已知技术予以调配。 在可接受的载体与溶剂中，可使用的为水、1，3-丁二醇、林格氏溶液 (Ringer’s solution)及等张氯化钠溶液。此外，可使用无菌的固定 油类作为溶剂或悬浮介质。欲达此目的，可使用任何厂牌的固定油， 包括合成的单-或二甘油酯。此外，在注射用组成物的制备中可使用脂 肪酸例如油酸；佐剂例如局部麻醉剂、防腐剂和/或缓冲剂可溶在载体 中。
调节剂也可调配为栓剂(例如，供直肠投与用)。此等组成物的制 备可使药物与适当的无刺激性赋形剂混合，该赋形剂在常温时为固体， 直肠温度时为液体，因而在直肠熔解而释出药物。适当赋形剂包含， 例如，可可脂及聚乙二醇类。
药学组合物可调配为持续释放型配方(例如在投与后缓慢释放调 节剂的胶囊配方)。此等配方通常可使用悉知技术予以制备及利用，例 如，经口、直肠或皮下植入法，或利用在所需标的位置的植入法投与。 此等配方中所用的载剂具生物兼容性，也可具生物降解性；优选为配 方提供相当固定的调节剂释放量。持续释放型配方中所含调节剂的量 取决于，例如，植入位置、释放率与预期持续释放时间及所治疗或预 防的症状性质。
除了上述投与模式的外或并用的，也可方便地将调节剂添加在食 物或饮用水(例如，供投与非人类动物包括伴侣动物(例如狗与猫)及家 畜用)中。可调配动物饲料与饮用水，俾使动物随其膳食一起摄入适量 组成物。也可方便地使组成物呈预混物，供添加在饲料或饮用水的用。
调节剂通常投与治疗有效量。优选的全身性剂量每天每公斤体重 不高于50毫克(例如，每天每公斤体重约0.001毫克至约50毫克不等)， 其中口服剂量通常比静脉内剂量高出约5至20倍(也即，每天每公斤 体重0.01至40毫克不等)。
与载剂物质组合以产生单一剂量单位的活性成分的量视，例如， 所治疗病患、投与的特定模式及任何其它一起投与的药物而不同。剂 量单位通常含介于约10微克与约500毫克间的活性成分。最适剂量可 使用此项技术中悉知的例行测试法及程序予以建立。
药学组合物可加以包装，以供治疗对VR1调节有敏感的症状(例如， 治疗暴露在香草精类配位体、疼痛、痒、肥胖症或尿失禁)。经包装的 药学组合物可包含容纳治疗有效量的如本文所述的至少一种VR1调节 剂的容器，及指示所含组成物是用在治疗病患对VR1调节有敏感的症 状的说明书(例如，卷标)。
使用方法
本文提供的VR1调节剂可在体外及活体内的多种情况下，用于改 变辣椒素受体的活性和/或活化作用。在特定方面中，VR1拮抗剂可用 于抑制香草精类配位体促效剂(例如辣椒素和/或RTX)在体外或活体内 与辣椒素受体的结合。一般而言，这些方法包括在溶在水性溶液中的 香草精类配位体存在下，或此外在适在该配位体与辣椒素受体结合的 条件下，使辣椒素受体与一或多种本文提供的VR1调节剂接触的步骤。 VR1调节剂通常以足以改变香草精类配位体与VR1的体外结合(使用实 施例5提供的试验)和/或由VR1传导的信息传导(使用实施例6提供的 试验)的浓度存在。辣椒素受体可在溶液或悬浮液(例如，在分离的细 胞膜或细胞制剂)中，或在培养细胞或分离细胞中存在。在特定实施方 案中，辣椒素受体由存在病患中的神经元细胞所表达，及水性溶液为 体液。优选为，以使存在动物的至少一种体液中的VR1调节剂为1微 摩尔或1微摩尔以下；优选为500纳摩尔或500纳摩尔以下；又更优 选为100纳摩尔或100纳摩尔以下、50纳摩尔或50纳摩尔以下、20 纳摩尔或20纳摩尔以下，或10纳摩尔或10纳摩尔以下的治疗有效浓 度的量投与动物一或多种VR1调节剂。例如，可以小于20毫克/公斤 体重，优选为小于5毫克/公斤体重，在一些情形下为小于1毫克/公 斤体重的剂量，投与这些化合物。
本文也提供调节，优选为减少，细胞性辣椒素受体的信息传导活 性(也即，钙传导)的方法。这些调节藉由使辣椒素受体(在体外或者活 体内)与本文提供的一或多种VR1调节剂在适于使这些调节剂与受体结 合的条件下接触而达成。这些VR1调节剂通常以足以改变香草精类配 位体与VR1的体外结合和/或由VR1传导如本文所述的信息传导的浓度 存在。该受体可在溶液或悬浮液中、在培养或分离的细胞制剂中或在 病患的细胞中存在。例如，该细胞可为在动物中活体内接触的神经元 细胞。或者，该细胞可为在动物中活体内接触的上皮细胞，例如膀胱 上皮细胞(泌尿上皮细胞)或气管上皮细胞。信息传导活性的调节可利 用检测对钙离子传导(也称为钙移动或通量)的影响予以评估；或者， 可利用检测以本文提供的一或多种VR1调节剂治疗的病患症状(例如， 疼痛、灼烧感、气管收缩、炎症、咳嗽、打嗝、痒、尿失禁或膀胱过 动)的改变予以评估。
本文提供的这些VR1调节剂优选为经口或局部投与病患(例如，人 类)，及在调节VR1信息传导活性的同时，是存在动物的至少一种体液 中。用在此等方法的优选VR1调节剂在的体液中，在体外以1纳摩尔 或1纳摩尔以下，优选为100微微摩尔或100微微摩尔以下，更优选 为20微微摩尔或20微微摩尔以下的浓度，在活体内例如血液，以1 微摩尔或1微摩尔以下，500纳摩尔或500纳摩尔以下，或100纳摩尔 或100纳摩尔以下的浓度调节VR1信息传导活性。
本发明进一步提供治疗对VR1调节有敏感的症状的方法。在本发 明内容中，“治疗”一词涵盖改善疾病的治疗及根据症状的治疗，二 者均可为预防性(也即，在症状发作的前，以预防、延缓或减少症状的 严重性)或治疗性(也即，在症状发作的后，以减少症状的严重性和/或 持续性)。症状的特征若为无论局部存在的香草精类配位体的量多寡， 辣椒素受体活性均不适当，和/或若调节辣椒素受体活性造成其状况或 症状缓解，则称该症状“对VR1调节有敏感”。这些状况包括，例如， 在下文详述的由暴露在VR1活化刺激产生的症状、疼痛、呼吸性疾病 例如气喘及慢性梗塞性肺疾、痒、尿失禁、膀胱过动、咳嗽、打嗝、 及肥胖症。这些状况可使用本领域中已建立的准则予以诊断及侦测。 病患可包括人类、驯养的伴侣动物及家畜，其剂量如上述。
治疗方法随所用化合物及欲治疗的特定状况而不同。然而，用在 治疗多数疾病时，以每天4次或4次以下的投与频率优选。通常，以 每天2次的剂量疗法更优选，一天用药一次特佳。治疗急性疼痛时， 迅速达到有效浓度的单一剂量为所需。然而，一般将了解，对在任何 特定病患的具体剂量标准及治疗方法是取决在包括所用特定化合物的 活性、年龄、体重、一般健康情形、性别、饮食、投与时间、投与途 径、及排泄率、药物组合及进行治疗的特定疾病的严重性等多项因素。 一般而言，以使用足以提供有效治疗的最小剂量优选。通常可使用适 用在所治疗或预防状况的医学或兽医学准则，侦测病患的治疗有效性。
经历由暴露在辣椒素受体活化刺激产生的症状的病患包括具有由 热、光、催泪瓦斯或酸引起的灼伤的个体，及其粘膜暴露(例如，通过 摄取、吸入或眼睛接触)在辣椒素(例如，得自辣椒或辣椒喷雾剂)或相 关刺激物例如酸、催泪瓦斯或大气污染物者。所产生的症状(可使用本 文提供的VR1调节剂，尤其是拮抗剂治疗者)包括，例如，疼痛、气管 收缩及炎症。
可使用本文提供的VR1调节剂治疗的疼痛可为急性或慢性疼痛包 括，但不限在，由末梢神经传导的疼痛(尤其是神经痛)。本文提供的 化合物可用在治疗，例如，乳房切除后疼痛综合症、残肢痛、幻觉肢 体痛、口腔神经痛、牙痛、假牙痛、带状 疹后神经痛、糖尿病神经 病变、反射性交感神经失养症、三叉神经痛、骨关节炎、风湿性关节 炎、纤维肌痛、格巴两氏综合症(Guillain-Barre Syndrome)、感觉异 常性股痛、口腔灼热综合症和/或两侧性周边神经病变。其它神经痛症 状包括灼热痛(反射性交感神经失养症-RSD，仅次在末梢神经伤害)、 神经炎(包括，例如，坐骨神经炎、末梢神经炎、多神经炎、视神经炎、 热病后神经炎、移动性神经炎、分节性神经炎及宫保氏神经炎 (Gombault’s neuritis))、神经细胞炎、神经痛(例如，上文所述者、 颈臂神经痛、颅部神经痛、膝状神经痛、舌咽神经痛、偏头性神经痛、 自发性神经痛、肋间神经痛、乳房神经痛、下颔关节神经痛、摩顿氏 神经痛(Morton’s neuralgia)、鼻睫神经痛、枕骨神经痛、红斑性肢 痛症、史路德氏神经痛(Sluder’s neuralgia)、蝶腭神经痛、眶上神 经痛及翼管神经痛)、与手术相关的疼痛、肌肉与骨胳疼痛、与AIDS 相关的神经病变、与MS相关的神经病变、及与脊椎神经受伤相关的疼 痛。头痛，包括涉及末梢神经活性的头痛，例如窦性、丛发性(也即， 偏头性神经痛)及一些压力性头痛与偏头痛，也可如本文所述予以治 疗。例如，偏头痛可在病患一感受到偏头痛前的预兆，即投与本文提 供的化合物而加以防止。可如本文所述治疗的进一步疼痛症状包括“口 腔灼热综合症”、产痛、恰可氏疼痛症(Charcot’s pains)、肠气疼 痛、经痛、急性与慢性背痛(例如，下背痛)、痔痛、消化不良痛、心 绞痛、神经根疼痛、同位性疼痛及异位性疼痛-包括与癌症有关的疼 痛(例如，骨癌病患)、与暴露在毒液(例如，由在被蛇咬、被蜘蛛咬、 或虫叮)有关的疼痛(及炎症)、及与外伤有关的疼痛(例如，手术后疼 痛、由伤口、瘀伤与骨折引起的疼痛、及灼伤痛)。可如本文所述予以 治疗的其它疼痛包括与炎性肠疾相关的疼痛、肠激躁综合症和/或炎性 肠疾。
在特定方面中，本文提供的VR1调节剂可用在治疗机械性疼痛。 本文所用的“机械性疼痛”一词是指头痛以外的不为神经痛或暴露在 热、冷或外在化学刺激的结果的疼痛。机械性疼痛包括物理外伤(热或 化学灼烧或有毒化学剂的其它刺激和/或疼痛暴露以外)例如手术后疼 痛及得自伤口、瘀伤与骨折的疼痛；牙痛；假牙痛；神经根疼痛；骨 关节炎；风湿性关节炎；肌纤维痛；感觉异常性股痛；背痛；与癌症 相关的疼痛；心绞痛；腕隧道综合症；及由骨折、生产、痔疮、肠气、 消化不良、及月经产生的疼痛。
可治疗的痒症状包括牛皮癣搔痒、由在血液透析的痒、过水搔痒 症、及与阴道前庭炎、接触性皮肤炎、虫咬及皮肤过敏相关的痒。可 如本文所述予以治疗的尿道症状包含尿失禁(包括满溢性尿失禁、急迫 性尿失禁及压力性尿失禁)、以及膀胱过动或不稳定的膀胱症状(包括 源自脊椎的迫尿肌过度反射及膀胱过敏症)。在特定这些治疗方法中， VR1调节剂是通过导管或类似装置投与，将VR1调节剂注射入膀胱中。 本文提供的化合物也可作为止咳剂用(以预防、缓和或压制咳嗽)、用 在治疗打嗝、及促进肥胖病患的减重。
在其它方面中，本文提供的VR1调节剂可在组合疗法中用在治疗 涉及炎性成分的状况。这些状况包括，例如，已知具有炎性成分的自 体免疫失调与病理性自体免疫反应包含，但不限在，关节炎(尤其是风 湿性关节炎)、牛皮癣、克隆氏病症(Crohn’s disease)、红斑狼疮症、 肠激躁综合症、组织移植排斥、及移植器官的超急性排斥。其它这些 状况包括外伤(例如，对头或脊椎神经的伤害)、心血管与脑血管疾病 及特定感染病症。
在这些组合疗法中，VR1调节剂是与抗炎剂一起投与病患。VR1调 节剂与抗炎剂可存在相同药学组合物中，或可以任一顺序分开投与。 抗炎剂包括，例如，非类固醇抗炎性药物(NSAIDs)、非专一性及环氧 酶-2(COX-2)专一性环氧酶抑制剂、金化合物、皮质类固醇类、胺甲 喋呤、癌症细胞坏死因子(TNF)受体拮抗剂、抗-TNFα抗体、抗-C5抗 体、及介白素-1(IL-1)受体拮抗剂。NSAIDs的实施例包含，但不限在 异丁苯丙酸(例如，ADVILTM、MOTRINTM)、氟联苯丙酸(ANSAIDTM)、甲氧 萘丙酸或甲氧萘丙酸钠(例如，NAPROSYN、ANAPROX、ALEVETM)、双氯芬 酸(diclofenac)(例如，CATAFLAMTM、VOLTARENTM)、双氯芬酸钠与米索 前列醇(misoprostol)(例如，ARTHROTETM)的组合、舒林酸 (sulindac)(CLINORILTM)、恶丙秦(oxaprozin)(DAYPR0TM)、二氟苯水杨 酸(DOLOBIDTM)、匹若西卡(piroxicam)(FELDENETM)、消炎痛(INDOCINTM)、 伊托多雷(etodolac)(LODINETM)、菲诺洛芬钙(fenoprofen calcium)(NALFONTM)、酮布洛芬(ketoprofen)(例如，ORUDISTM、 ORUVAILTM)、钠萘美丁酮(sodium nabumetone)(RELAFENTM)、硫氮磺吡 啶(sulfasalazine)(AZULFIDINETM)、托美丁钠(tolmetin sodium) (TOLECTINTM)、与羟基氯喹(hydroxychloroquine)(PLAQUENILTM)。特 定的NSAIDs类别由抑制环氧酶(COX)酵素的化合物组成，例如塞利昔 布(celecoxib)(CELEBREXTM)与罗非昔布(rofecoxib)(VIOXXTM)。 NSAIDs进一步包含水杨酸盐例如乙酰基水杨酸或阿司匹灵、水杨酸钠、 胆碱与水杨酸镁类(TRILISATETM)、与双水杨酯 (salsalate)(DISALCIDTM)、以及皮质类固醇类例如可体松 (cortisone)(CORTONETM乙酸盐)、地塞米松(dexamethasone)(例如， DECADRONTM)、甲基氢化泼尼松(MEDROLTM)、氢化泼尼松(PRELONETM)、磷 酸氢化泼尼松钠(PEDIAPREDTM)、与泼尼松(例如，PREDNICEN-MTM、 DELTASONETM、STERAPREDTM)。
在这些组合疗法中，VR1调节剂的适当剂量通常如上述。抗炎剂的 投与剂量及方法见述在，例如，Physician’s Desk Reference中的厂 商指示。在特定实施方案中，VR1调节剂与抗炎剂的组合投与导使需要 产生治疗效果的抗炎剂的剂量减少(也即，最低治疗有效量降低)。因 此，优选为，在本发明的组合或组合治疗方法中，抗炎剂的剂量小于 由厂商告知的未与VR1拮抗剂组合一起投与的抗炎剂最大剂量。更优 选为，此剂量小在由厂商告知的未与VR1拮抗剂组合一起投与的抗炎 剂最大剂量的3/4，又更优选为小于1/2，及非常更优选为，小于1/4， 最佳为小于该最大剂量的10％。显见地，达到期望效果所需组合的VR1 拮抗剂成分的剂量同样地被该组合抗炎剂成分的剂量与效力所影响。
在特定优选实施方案中，VR1调节剂与抗炎剂的组合投与可藉由在 相同包装盒中包装一或多种VR1调节剂与一或多种抗炎剂而达成，其 可分别包装在该包装盒的分别容器中，或含有一或多种VR1调节剂与 一或多种抗炎剂的混合物在相同容器中。优选的混合物是调配以供经 口投与(例如，呈丸剂、胶囊、锭剂及其相似的物等)。在特定实施方 案中，该包装含印有指针的卷标，指示该一或多种VR1调节剂及一或 多种抗炎剂是一起用在治疗炎性疼痛状况。一高度优选的组合为其中 抗炎剂包含至少一种COX-2专一性环氧酶抑制剂例如瓦第昔布 (valdecoxib)(BEXTRA_)、兰拉昔布(lumiracoxib)(PREXIGETM)、依托 昔布(etoricoxib)(ARCOXIA_)、塞利昔布(CELEBREX_)和/或罗非昔布 (VIOXX_)者。
在进一步的方面中，本文提供的VR1调节剂可用在组合一或多种 附加的疼痛缓解药物。特定的这些药物也为如上所述抗炎剂。其它这 些药物为麻醉止痛剂，其典型地作用在一或多种类鸦片剂受体亚型(例 如，μ、？和/或d)，优选为呈促效剂或部分促效剂。这些制剂包括鸦 片剂、鸦片剂衍生物及类鸦片剂，以及其药物上可接受的盐与水合物。 在优选实施方案中，麻醉止痛剂的详细实施例包括阿芬旦尼 (alfentanyl)、阿法普鲁汀(alphaprodine)、安尼勒立汀 (anileridine)、培集屈密特(bezitramide)、丁基原啡因 (buprenorphine)、可待因(codeine)、二乙酰基二氢吗啡、二乙酰基 吗啡、二氢可待因、氰苯哌酯、乙基吗啡、芬太尼(fentanyl)、海洛 英、二氢可待因酮、二氢吗啡酮、异美沙冬(isomethadone)、左旋甲 基吗泛(levomethorphan)、羟甲左吗南(levorphane)、羟甲左吗喃、 麦啶(meperidine)、美他唑新(metazocine)、美沙酮(methadone)、美 索芬(methorphan)、美托酮(metopon)、吗啡、鸦片抽出物、鸦片流体 抽出物、鸦片粉剂、鸦片粒剂、粗鸦片、鸦片酊、羟氢可待因酮 (oxycodone)、羟二氢吗啡酮(oxymorphone)、复方樟脑酊、潘他唑新 (pentazocine)、配西汀(pethidine)、吩那唑新(phenazocine)、匹密 诺汀(piminodine)、丙氧吩(propoxyphene)、消旋甲基吗泛 (recemethorphan)、消旋吗泛(racemorphan)、蒂巴因(thebaine)及 前述制剂药物上可接受的盐与水合物。
麻醉止痛剂的其它实施例包括乙酰托啡因、乙酰基二氢可待因、 乙酰美沙多、丙烯普鲁汀、阿法乙酰美沙多、阿法美普鲁汀 (alphameprodine)、阿法美沙多、苯才西汀(benzethidine)、苄基吗 啡、贝他乙酰美沙多、贝他美普鲁汀、贝他美沙多、贝他普鲁汀、美 妥芬诺(butorphonol)、克罗尼他净(clonitazene)、甲基溴可待因、 N-氧化可待因、赛普诺啡(cyprenorphine)、二氢去氧吗啡 (desomorphine)、右旋吗拉密特(dextromoramide)、狄安普鲁密特 (diampromide)、二乙胺二噻吩丁烯、二氢吗啡、狄门诺沙多 (dimenoxadol)、狄美菲坦诺(dimepheptanol)、二甲胺二噻吩丁烯、 吗苯丁酯(dioxaphetyl butyrate)、狄匹潘浓(dipipanone)、托蒂巴 醇(drotebanol)、乙醇、甲乙胺二噻吩丁烯、爱托失立汀 (etonitazene)、羟戊甲吗啡、爱托失立汀(etoxeridine)、佛莱西汀 (furethidine)、羟二氢吗啡(hydromorphinol)、羟基配西汀、酚哌丙 酮(ketobemidone)、左旋吗拉密特(levomoramide)、左旋苯甲酰吗喃 (levophenacylmorphan)、甲基去氧吗啡、甲基二氢吗啡、吗啡里汀 (morpheridine)、吗啡甲基溴化物、甲基磺胺吗啡、N-氧化吗啡、密 罗啡因(myrophin)、那诺松(naloxone)、那拜芬(nalbuyphine)、那提 喝松(naltyhexone)、烟碱酰可待因(nicocodeine)、烟碱酰吗啡、去 甲基乙酰美沙多(noracymethadol)、左旋原吗泛(norlevorphanol)、 去甲美沙酮、去甲吗啡、原匹潘浓(norpipanone)、戊唑凯因 (pentazocaine)、芬那多松(phenadoxone)、吩喃普鲁密特 (phenampromide)、吩诺吗泛(phenomorphan)、吩诺配立汀 (phenoperidine)、匹立屈密特(piritramide)、福可汀(pholcodine)、 普鲁庚唑英(proheptazoine)、普鲁配立汀(properidine)、普鲁匹兰 (propiran)、外消旋吗密特(racemoramide)、蒂巴康(thebacon)、屈 美配立汀(trimeperidine)及其药物上可接受的盐与水合物。
进一步详细代表性麻醉止痛剂包括，例如：TALWIN_Nx与DEMEROL_ (二者均得自Sanofi Winthrop Pharmaceuticais；New York，NY)； LEVO-DROMORAN_；BUPRENEX_(Reckitt & Coleman Pharmaceuticals， Inc.；Richmond，VA)；MSIR_(Purdue Pharma L.P.；Norwalk，CT)； DILAUDID_(Knoll Pharmaceutical Co.；Mount Olive，NJ)； SUBLIMAZE_；SUFENTA_(Janssen Pharmaceutica Inc.；Titusville， NJ)；PERCOCET_、NUBAIN_与NUMORPHAN_(所有均得自Endo Pharmaceuticals Inc.；Chadds Ford，PA)HYDROSTAT_IR、MS/S与 MS/L(所有均得自Richwood Pharmaceutical Co.Inc；Florence，KY)、 ORAMORPH_SR与ROXICODONE_(二者均得自Roxanne Laboratories； Columbus OH)及STADOL_(Bristol-Myers Squibb；New York，NY)。 又进一步的麻醉止痛剂包括CB-2受体促效剂，例如AM124l，及与a2d 亚基结合的化合物，例如Neurontin(Gabapentin)(加巴喷丁)与普瑞 加巴林(pregabalin)。
在这些组合疗法中，VR1调节剂的适当剂量通常如上述。其它疼痛 缓解药物的投与剂量及方法见述在，例如，Physician’s Desk Reference中的厂商指示。在特定实施方案中，VR1调节剂与一或多种 附加疼痛缓解药物的组合投与导使需要产生治疗效果的各治疗剂的剂 量减少(例如，其一制剂或二制剂的剂量可能小在厂商告知或上列最大 剂量的3/4，小于1/2，小于1/4，或小于该最大剂量的10％)。在特定 优选实施方案中，VR1调节剂与一或多种附加疼痛缓解药物的组合投与 可，如上述，藉由在相同包装盒中包装一或多种VR1调节剂与一或多 种附加疼痛缓解药物而达成。
为VR1促效剂的调节剂可进一步用于，例如，群众控制(作为催泪 瓦斯的代用品)、私人保护(例如，喷雾调配剂)，或通过辣椒素受体去 敏化作用作为治疗疼痛、痒、尿失禁或膀胱过动的医药剂用。一般而 言，用在群众控制或私人保护的化合物是根据习知催泪瓦斯或辣椒喷 雾剂技术调配及使用。
在分别的方面中，本发明为本文提供的化合物提供多种非医药上 的体外及活体内用途。例如，这些化合物可予以标记，作为辣椒素受 体(在例如细胞制剂或组织切片、制剂或其片段中)的检测与定位的探 针用。此外，含有适当反应基团(例如芳基羰基、硝基或叠氮基)的本 文提供的化合物可用在受体结合位点的光亲和性标记研究。此外，本 文提供的化合物可在受体活性试验中作为正对照组用、作为测定候选 剂与辣椒素受体结合的能力的标准、作为正子射出断层扫描术(PET)成 像用或单光子发射计算机断层扫描术(SPET)用的放射性追踪剂。这些 方法可用在鉴定活对象中的辣椒素受体。举例而言，VR1调节剂可使用 任何各种悉知技术予以标记(例如，以放射性核种例如氚进行放射性标 记，如本文所述)，及与试样一起孵育适当的孵育时间(例如，先进行 结合时间进程试验予以决定)。孵育的后，去除未结合的化合物(例如， 利用洗涤)，使用适用在所用标记的任何方法检测结合化合物(进行辐 射标记化合物的自动放射照相术或闪烁计数；可使用光谱分析法检测 放光基团及萤光基团)。针对含有标记化合物及较大量(例如，10倍量) 未标记化合物的相配试样进行相同方法，作为对照组。与对照组相较 下，较大量的残留在测试试样中的可检测标记表示试样中辣椒素受体 的存在。这些试验，包括培养细胞或组织试样中的受体的自动放射照 相术(受体制图)可如Kuhar在Current Protocols in Pharmacology (1998)John Wiley & Sons，New York中8.1.1至8.1.9章节所述进 行。
本文提供的调节剂也可在各种悉知的细胞分离方法中使用。例如， 调节剂可连接在组织培养盘或其它支撑体的内侧表面，作为供固定的 亲和配位体用，因而在体外分离辣椒素受体(例如，分离受体表达细 胞)。在一优选实施方案中，是使连接在萤光标记(例如萤光素)的调节 剂与细胞接触，然后利用萤光活化细胞分类法(FACS)进行分析(或分 离)。
本文提供的调节剂可进一步用在与辣椒素受体结合的其它制剂的 鉴定试验。一般而言，这些试验为标准竞争性结合试验，其中经结合、 标记的VR1调节剂被测试化合物取代。简言之，这些试验是如下文所 述进行：(a)在容许VR1调节剂与辣椒素受体结合的条件下，使辣椒 素受体与辐射标记的如本文所述的VR1调节剂接触，从而产生结合、 标记的VR1调节剂；(b)在测试剂不存在下，检测相当在结合、标记 VR1调节剂的量的讯号；(c)使该结合、标记VR1调节剂与测试剂接触； (d)在测试剂存在下，检测相当在结合、标记VR1调节剂的量的讯号； 及(e)查出与步骤(b)检测的讯号相较下，步骤(d)检测讯号是否降低， 从而鉴定与辣椒素受体结合的制剂。
下文提供的实施例意在说明而不拟构成局限。除非另行指出，否 则所有试剂与溶剂均为标准商用级，不需要进一步纯化即可使用。运 用例行修饰法下，起始物质可进行各种变化，也可使用其它步骤来产 生本文提供的其它化合物。
[实施例]
                       实施例1
             代表性二芳基哌嗪基-吡啶类似物的制备
此实施例说明代表性哌嗪基-吡啶类似物的制备。本实施例及下文 实施例中的质谱分析数据为电喷雾MS，是使用装备着Waters 600泵 (Waters Corp.，Milford，MA)、Waters 996光电二极管数组检测器、 Gilson 215自动取样器(Gilson，Inc.Middleton，WI)、及Gilson 841 微注射器的Micromass Time-of-Flight LCT(Micromass，Beverly， MA)，在正离子模式中获得。使用带有OpenLynx处理程序的MassLynx (Advanced Chemistry Development，Inc；Toronto，Canada)4.0版 软件进行数据收集及分析。MS条件如下：毛细管电压＝3.5kV；圆锥 体电压＝30V，去溶剂及来源温度分别为350℃及120℃；质量范围 ＝181-750，扫描时间0.22秒，扫描间延缓0.05分钟。
将容积1微升的试样注入50×4.6毫米Chromolith SpeedROD RP-18e管柱(Merck KGaA，Darmstadt，Germany)中，在6毫升/分钟流 速下，以2相线型梯度洗脱。在220至340纳米的UV范围内，使用总 吸光计数检测试样。洗脱条件为：移动相A-95/5/0.05水/甲醇/TFA； 移动相B-5/95/0.025水/甲醇/TFA。
若未指出方法或为“LCMS方法B”，则使用下述梯度：
梯度：     时间(分钟)     ％B
           0               10
           0.5             100
           1.2             100
           1.21            10
注射与注射间的周期为2.2分钟。
若指出为“方法A”，则使用下述梯度：
梯度：     时间(分钟)     ％B
           0               10
           0.3             100
           1.7             100
           1.71            10
注射与注射间的周期为2.7分钟。
A.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-六氧 -1-基]-密啶-2-基}-吗
1.4，6-二氯-2-吗啉-基嘧啶

在含2，4，6-三氯嘧啶(8克，44毫摩尔)的MeOH(80毫升)与NaHCO3(10克)冰冷溶液中，缓缓滴加吗啉(4毫升，46毫摩尔)的甲醇溶液(20 毫升)。令混合液回升至25℃，搅拌过夜。在以水稀释前，剧烈搅拌1 小时，过滤，得到白色结晶固体(10克)，为位相异构物的混合物。小 心地以甲苯再结晶，得到6-吗啉-基-2，4-二氯嘧啶。浓缩母液，小心 地以EtOH再结晶，得到4，6-二氯2-吗 -4-基嘧啶。
2.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-吗啉

在含4，6-二氯-2-吗啉-基嘧啶(0.2M二恶烷溶液，0.25毫升)与 1-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)哌嗪(0.2M二恶烷溶液，0.28毫 升)(Oakwood Products，Inc.，West Columbia，SC)的橡胶隔板覆盖 瓶中，添加K3PO4水溶液(0.5M，0.125毫升)。在90℃加热此混合物 24小时。冷却后，添加3-氯-4-氟苯基硼酸(0.2M二恶烷溶液，0.35 毫升)与K3PO4(0.5M水溶液，0.10毫升)，使瓶中充满氩气。添加 Pd(PPh3)4(0.01M甲苯溶液，0.125毫升)。在80℃加热此混合物过夜， 添加EtOAc(0.5毫升)，分离有机相，将其装填在含有1克SCX(浸渍 磺酸的硅胶强阳离子交换剂)的6毫升匣(cartridge)上。以5毫升MeOH洗涤该SCX匣，及以10％Et3N的EtOAc(5毫升)溶液洗脱产物。浓缩 洗脱液，得到纯产物，可将其转化为HCl盐：
LCMS(m/e)；523，1H NMR(CDCl3)；d 3.4(br s，4H)，3.8(br s，4 H)，4.0(br s，8H)，6.4(br s，1H)，7.1(br s，1H)，7.2(br s，1H)，7.9(m，3H)，8.5(s，1H).
B.环戊基-[4-[2-甲基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-6-(3-三氟甲基-苯基)-[1，3，5]三嗪-2-基甲基]-胺
1.N，N-二甲基-3-三氟甲基-苯甲酰胺

剧烈搅拌含3-三氟甲基-苯甲酰氯(10.5克，0.05摩尔)与二甲胺 HCl(8.3克，0.1摩尔)的甲苯(100毫升)与1.0M NaOH(300毫升) 溶液2小时。分离有机层，将其干燥(Na2SO4)，减压浓缩，得到呈结 晶固体的标题化合物。
2.2-氯-4-氯甲基-6-(3-三氟甲基-苯基)-[1，3，5]三嗪

在室温，添加氯氧化磷(POCl3，3.5毫升)至含N，N-二甲基-3-三氟 甲基-苯甲酰胺(3.0克，0.0138摩尔)的乙腈溶液中。在该清澈无色溶 液中一次添加(N-氰基)-2-氯乙脒(1.62克，0.0138摩尔)，在室温搅 拌16小时。减压去除溶剂，将其分配在EtOAc与NaHCO3水溶液的间。 将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。使粗产物进行层析法(己烷类至 15％EtOAc/己烷类洗脱液)，分离呈透明无色油的纯产物。
3.3-甲基-1-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪

氮气氛围下，使2-氯-3-三氟甲基吡啶(0.057摩尔)与(R)-(-)-2- 甲基哌嗪(5.75克，0.057摩尔)溶在DMA(125.0毫升)中。在此混合 物中添加无水粉末状的K2CO3(23.75克，0.172摩尔)，在135-140℃ 搅拌48小时。冷却反应混合物至室温，以水(400毫升)稀释，以EtOAc(3 ×200毫升)萃取，以盐水(2×150毫升)洗涤合并的有机萃取液。以 MgSO4干燥，真空浓缩，得到呈橘黄色液体的粗产物。在高度真空下蒸 馏此粗产物，得到标题化合物。
4.2-氯甲基-4-[2-甲基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-6-(3-三氟甲基-苯基-[1，3，5]三嗪

使2-氯-4-氯甲基-6-(3-三氟甲基-苯基)-[1，3，5]三嗪(1.5克， 0.0049摩尔)溶在乙腈中，添加DIEA(1.28毫升，0.0074摩尔，1.5 当量)。添加3-甲基-1-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪(1.32克，0.0054 摩尔，1.1当量)，在室温搅拌2小时。减压浓缩，将其分配在EtOAc与NaHCO3水溶液的间，并将有机层干燥(Na2SO4)。通过硅胶塞(15％ EtOAc/己烷类)过滤此粗产物，移除未反应芳基哌嗪。减压去除溶剂， 获得纯产物。
5.环戊基-[4-[2-甲基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-6-(3-三氟甲基-苯基)-[1，3，5]三嗪-2-基甲基]-胺

使2-氯甲基-4-[2-甲基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-6-(3-三氟甲基-苯基)-[1，3，5]三嗪(50毫克，0.097毫摩尔)溶在 DMA(1毫升)中，添加环戊胺(40微升，4当量)。在80℃加热此溶液 1.5小时，然后将此反应混合物分配在饱和NaHCO3水溶液与EtOAc的 间。以水(3x)洗涤有机层，将其干燥(Na2SO4)，减压浓缩。粗产物在制 备性TLC板上进行层析法(洗脱液10％MeOH/DCH)，得到纯产物。
C.4-(2-(3-氯苯基)-6-{4-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]哌嗪基}嘧 啶-4-基)吗
1.2-(3-氯苯基)嘧啶-4，6-二醇

在50℃，将在MeOH(19.2毫升，96毫摩尔)中的甲醇钠、3-氯- 苯甲脒盐酸盐(12.1克，64毫摩尔)与丙二酸二乙酯(10.3克，64毫摩 尔)中的混合物加热8小时。冷却该混合物，减压浓缩。将此白色胶状 物溶在水中，此溶液以浓硫酸酸化。过滤收集所得白色固体，水洗， 风干，得到标题化合物。
2.4，6-二氯-2-(3-氯苯基)嘧啶

在90℃，加热含2-(3-氯苯基)嘧啶-4，6-二醇(13.5克，61毫摩 尔)、PhNEt2(15克，122毫摩尔)与POCl3(75毫升)的混合物8小时。 蒸发去除过量POCl3，加水(200毫升)，过滤收集固体，风干，得到标 题化合物。
3.4-[6-氯-2-(3-氯苯基)嘧啶-4-基]吗啉

在110℃，加热4，6-二氯-2-(3-氯苯基)嘧啶(1.3克，5毫摩尔)、 吗啉(0.52克，6毫摩尔)、碳酸钾(0.828克，6毫摩尔)在甲苯(15毫 升)中的混合物2小时。过滤此反应混合物，蒸发滤液。加水在残留物， 然后以EtOAc(3×25毫升)萃取。合并的萃取液以盐水(50毫升)洗涤， 干燥(MgSO4)，减压浓缩。以EtOH再结晶纯化残留物，得到标题化合物。
4.4-(2-(3-氯苯基)-6-{4-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]哌嗪基}嘧 啶-4-基)吗啉

氮气下，添加4-(6-三氟甲基-2-吡啶基)哌嗪(46毫克，0.2毫摩 尔)至含4-[6-氯-2-(3-氯苯基)嘧啶-4-基]吗啉(62毫克，0.2毫摩 尔)、Pd2(dba)3(18毫克，0.02毫摩尔)、与BINAP(17毫克，0.02 毫摩尔)的甲苯(2毫升)溶液中，随后添加t-BuOK(45毫克，0.4毫摩 尔)。在90℃搅拌此混合物8小时，以氯化铵水溶液稀释，并以EtOAc(3×10毫升)萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，减压浓缩。在硅胶 上使用闪层析法(50％己烷/50％乙醚)纯化该残留物，得到标题化合物。 MS 505(M+1)。
D.4-(4-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-6-{4-[3-(三氟甲基)(2-吡啶 基)]哌嗪基}嘧啶-2-基)吗啉
1.5-甲基-2-吗啉-4-基嘧啶-4，6-二醇

在50℃，将甲醇钠在MeOH(15毫升，45毫摩尔)、吗啉-4-基甲 脒氢溴酸盐(6.3克，30毫摩尔)与甲基丙二酸二乙酯(5.22克，30毫 摩尔)中的混合物加热2小时。冷却该混合物，减压浓缩。将此白色胶 状物溶在水中，此溶液以浓硫酸酸化。过滤收集所得白色固体，水洗， 风干，得到标题化合物。
2.4-(4，6-二氯-5-甲基嘧啶基-2-基)吗啉

在90℃，加热5-甲基-2-吗啉-4-基嘧啶-4，6-二醇(3.57克，17 毫摩尔)、PhNEt2(4.37克，35毫摩尔)与POCl3(25毫升)的混合物2 小时。蒸发去除过量POCl3，加水(100毫升)，此溶液以EtOAc(3×100 毫升)萃取。合并的有机相以1M盐酸(100毫升)、水(100毫升)、盐水 (100毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到标题化合物，不需进 一步纯化即可使用。
3.4-(4-氯-5-甲基-6-{4-[3-(三氟甲基)(2-吡啶基)]哌嗪基}嘧 啶-2-基)吗啉

在78℃，加热4-(4，6-二氯-5-甲基嘧啶基-2-基)吗啉(496毫克， 2.0毫摩尔)、4-(6-三氟甲基-2-吡啶基)哌嗪(462毫克，2.0毫摩尔)、 碳酸钾(345毫克，2.5毫摩尔)与EtOH(10毫升)的混合物8小时。冷 却此混合物，以水(20毫升)稀释，并以EtOAc(3×25毫升)萃取。合 并的有机相以盐水(25毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。残留物在 硅胶上利用闪层析法(80％己烷/20％乙醚)予以纯化，得到标题化合物。
4.4-(4-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-6-{4-[3-(三氟甲基)(2-吡啶 基)]哌嗪基}嘧啶-2-基)吗啉

氮气氛围下，在80℃加热4-(4-氯-5-甲基-6-{4-[3-(三氟甲 基)(2-吡啶基)]哌嗪基}嘧啶-2-基)吗啉(66毫克，0.15毫摩尔)、3- 氯-4-氟苯基硼酸(35毫克，0.2毫摩尔)、Pd2(PPh3)4(10毫克)与2M 碳酸钾(0.2毫升)在甲苯(3毫升)中的混合物4小时。冷却该反应混合 物，分离各层。其水层以EtOAc(3×10毫升)萃取，合并的有机层以 4M NaOH(10毫升)、水(10毫升)、盐水(10毫升)洗涤，干燥(MgSO4)， 减压浓缩。残留物在硅胶上使用闪层析法(70％己烷/30％乙醚)进行纯 化，得到标题化合物。MS 537(M+1)。
E.{4-(3-氯-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]- 嘧啶-2-基甲基}-二乙基-胺
1.2-甲氧甲基-嘧啶-4，6-二醇

回流加热丙二酸二乙酯(7.96克，50毫摩尔)、2-甲氧基-乙脒盐 酸盐(6.2克，50毫摩尔)、及NaOMe MeOH溶液(4.37M，22.7毫升， 100毫摩尔)在MeOH(30毫升)中的混合物24小时。浓缩，以H2O(50 毫升)稀释，以EtOAc洗涤，浓缩水层。以MeOH萃取，浓缩，得到2- 甲氧甲基-嘧啶-4，6-二醇。
2.4，6-二氯-2-甲氧甲基嘧啶

回流加热2-甲氧甲基-嘧啶-4，6-二醇(4.1克)与POCl3(30毫升) 的混合物2小时。冷却至室温，浓缩，分配在饱和NaHCO3与EtOAc的 间。以Na2SO4干燥，真空浓缩，利用急骤管柱(2∶1己烷类/EtOAc)进行 纯化，得到4，6-二氯-2-甲氧甲基嘧啶。
3.4-氯-2-甲氧甲基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶

合并4，6-二氯-2-甲氧甲基嘧啶(800毫克，4.14毫摩尔)、1-(3- 三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪(960毫克，4.14毫摩尔)、碳酸氢钠(500 毫克)、与EtOH(50毫升)。回流加热4小时，令其冷却至室温，真空 过滤，蒸发母液。残留物利用管柱层析法进行纯化，以20∶1 DCM/MeOH洗脱，获得呈白色固体的4-氯-2-甲氧甲基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶。
4.4-(3-氯-苯基)-2-甲氧甲基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶

氮气下，合并4-氯-2-甲氧甲基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶(388毫克，1毫摩尔)、3-氯苯基硼酸(157毫克，1 毫摩尔)、Pd(P(Ph)3)4(100毫克，0.09毫摩尔)、2M碳酸钠水溶液(1 毫升)、与1，2-二甲氧乙烷(5毫升)。回流16小时，蒸发，加水(5毫 升)，以EtOAc萃取。有机层以硫酸钠干燥，利用液相层析法进行纯化， 获得呈白色固体的4-(3-氯-苯基)-2-甲氧甲基-6-[4-(3-三氟甲基-吡 啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶。
5.2-溴甲基-4-(3-氯-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌 嗪-1-基]-嘧啶

在60℃，搅拌4-(3-氯-苯基)-2-甲氧甲基-6-[4-(3-三氟甲基-吡 啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶在30％HBr的HOAc溶液(25毫升)中的混合 物3小时。蒸发此混合物，以1M NaOH调pH至碱性，收集茶色固体。 利用液相层析法(3∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，获得呈黄色固体的2- 溴甲基-4-(3-氯-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]- 嘧啶。
6.{4-(3-氯-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]- 嘧啶-2-基甲基}-二乙基-胺

合并2-溴甲基-4-(3-氯-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶(32毫克，0.06毫摩尔)、二乙胺(0.5毫升)、与DMA (2毫升)，在80℃加热3小时。令其冷却至室温，加水(5毫升)。以 EtOAc(10毫升)萃取，以水(10毫升)洗涤，干燥(Na2SO4)，及蒸发。 利用管柱层析法(1∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，获得呈黄色固体的 {4-(3-氯-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶 -2-基甲基}-二乙基-胺。
F.4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-甲氧基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶
1.2，4-二氯-6-(3-氯-4-氟-苯基)-嘧啶

合并2，4，6-三氯嘧啶(9.15克，0.05摩尔)、3-氯-4-氟苯基硼酸 (8.7克，0.05摩尔)、1，2-二甲氧乙烷(300毫升)、与2M碳酸钠水溶 液(25毫升)，在氮气下令其搅拌10分钟。添加乙酸钯(56毫克，0.25 毫摩尔)与PPh3(131毫克，0.5毫摩尔)，回流加热此混合物16小时。 蒸发，加水(100毫升)，以DCM(每次25毫升)萃取两次。有机层以硫 酸钠干燥，蒸发，得到黄色胶状物。混合物以20∶1己烷类/EtOAc进行 层析法，得到呈白色固体的2，4-二氯-6-(3-氯-4-氟-苯基)-嘧啶。
2.2-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌 嗪-1-基]-嘧啶

合并2，4-二氯-6-(3-氯-4-氟-苯基)-嘧啶(1.6克，5.75毫摩尔)、 碳酸氢钠(1.28克，15毫摩尔)、MeOH(100毫升)，在冰上予以冷却。 逐滴添加1-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪(1.33克，5.75毫摩尔)在 MeOH(50毫升)中的混合物，在室温令反应搅拌16小时。蒸发此混合 物，使用10∶1己烷类/EtOAc直接纯化，获得呈白色固体的2-氯-4-(3- 氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶。
3.4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-甲氧基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶

合并2-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶(47毫克，1毫摩尔)、四氢呋喃(1毫升)、与21％甲 醇钠的MeOH(0.5毫升)溶液的混合物。令反应在60℃搅拌16小时。 蒸发此混合物，加水(5毫升)，以EtOAc(每次5毫升)萃取两次。合 并有机层，干燥(Na2SO4)，利用制备性TLC(8∶1己烷类/EtOAc)进行纯 化，得到4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-甲氧基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶。
G.{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-二乙基-胺

合并2-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶(47毫克，1毫摩尔)与二乙胺(2毫升)的混合物。60 ℃下，在密封管中加热此混合物16小时。冷却至室温，并予以蒸发。 添加1M NaOH(1毫升)，以EtOAc(每次2毫升)萃取两次。合并有机 层，干燥(Na2SO4)，利用制备性TLC(9∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得 到呈白色固体的{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-2-基}-二乙基-胺。
H.4-{6-(3-氯-4-氟-苯基)-4-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}吗啉
1.2-氯-6-吗啉-4-基吡啶-4-基胺

在150℃，搅拌含4-胺基-2，6-二氯吡啶(3.3克)的吗啉(15毫升) 溶液4小时，浓缩，分配在H2O与EtOA的间，以Na2SO4干燥，真空浓 缩。利用闪层析法(2∶3己烷类/EtOAc)进行纯化，得到2-氯-6-吗啉-4- 基吡啶-4-基胺。
2.2-(3-氯-4-氟-苯基)-6-吗啉-4-基-吡啶-4-基胺

氮气下，在含3-氯-4-氟苯基硼酸(849毫克，4.87毫摩尔)、2- 氯-6-吗啉-4-基吡啶-4-基胺(800毫克，3.74毫摩尔)与2M K3PO4(7.5 毫摩尔)的二恶烷(15毫升)脱气混合物中，添加Pd(PPh3)4(0.23毫摩 尔)。在80℃搅拌此混合物过夜，浓缩，以EtOAc萃取。以Na2SO4干燥， 真空浓缩，利用闪层析法(1∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得到2-(3-氯 -4-氟-苯基)-6-吗啉-4-基-吡啶-4-基胺。
3.4-{4-溴-6-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶-2-基}-吗啉

在含2-(3-氯-4-氟-苯基)-6-吗啉-4-基-吡啶-4-基胺(250毫克， 0.81毫摩尔)的75％H2SO4(10毫升)冰冷溶液中，逐滴添加NaNO2(56 毫克，0.81毫摩尔)的3毫升H2O溶液。在0℃搅拌此混合物30分钟。 添加CuBr(135毫克，0.93毫摩尔)与48％HBr(2毫升)。在0℃搅拌 此混合物15分钟，接着在60℃搅拌30分钟。冷却至室温，中和至pH 8，以EtOAc萃取，以Na2SO4干燥，真空浓缩。利用闪层析法(3∶1己烷 类/EtOAc)进行纯化，得到4-{4-溴-6-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶-2-基}- 吗啉。
4.4-{6-(3-氯-4-氟-苯基)-4-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-吡啶-2-基}吗啉

氮气下，在4-{4-溴-6-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶-2-基}-吗啉(50 毫克，0.135毫摩尔)、4-(6-三氟甲基-2-吡啶基)哌嗪(37毫克，0.162 毫摩尔)、与1M(THF)t-BuOK(0.162毫摩尔)的甲苯(3毫升)脱气混 合物中，添加Pd2(dba)3(0.0054毫摩尔)与BINAP(0.0067毫摩尔)。 在80℃搅拌此混合物过夜，浓缩，以EtOAc萃取。以Na2SO4干燥，真 空浓缩，利用制备性TLC(3∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得到4-{6-(3- 氯-4-氟-苯基)-4-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2- 基}吗啉。
I.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-吡啶-2-基}吗啉
1.2，3-二氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶

氮气下，在3-氯-4-氟苯基硼酸(77毫克，0.44毫摩尔)、4-溴-2，6- 二氯-吡啶(Talik and Plazek(1959)Rocz.Chem.33：387-92；100 毫克，0.44毫摩尔)、与2M Na2CO3(0.55毫摩尔)的DME(4毫升)脱 气混合物中，添加Pd(PPh3)4(0.026毫摩尔)。在80℃搅拌此混合物过 夜，浓缩，以EtOAc萃取。以Na2SO4干燥，真空浓缩，利用制备性TLC (9∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得到2，3-二氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)- 吡啶。
2.4-[6-氯-4-(3-氯-4-氯-苯基)-吡啶-2-基]吗啉

在80℃，搅拌2，3-二氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶(100毫克)的 吗啉(2毫升)溶液3小时，浓缩，分配在H2O与EtOA的间，以Na2SO4干燥，真空浓缩。利用制备性TLC(3∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得 到4-[6-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶-2-基]吗啉。
3.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-吡啶-2-基}吗啉

氮气下，在4-[6-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-吡啶-2-基]吗啉(50毫 克，0.153毫摩尔)、4-(6-三氟甲基-2-吡啶基)哌嗪(43毫克，0.183 毫摩尔)、与1M(THF)t-BuOK(0.183毫摩尔)的甲苯(3毫升)脱气混 合物中，添加Pd2(dba)3(0.006毫摩尔)与BINAP(0.008毫摩尔)。在 80℃搅拌此混合物过夜，浓缩，以EtOAc萃取。以Na2SO4干燥，真空 浓缩，利用制备性TLC(3∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得到4-{4-(3- 氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-吡啶-2- 基}吗啉。
J.4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(1-丙基- 啶-4-基)-6-[4-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶
1.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在80℃，加热含2-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基- 吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶(774毫克，1.64毫摩尔)、4-(4，4，5，5- 四甲基-[1，3，2]二恶硼茂烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯 (608毫克，1.97毫摩尔(实质上如Eastwood(2000)Tetrahedron Letters 41(19)：3705-3708)所述制备))、K3PO4(2M，1.64毫升)与 Pd(PPh3)4(76毫克，0.07毫摩尔)的二恶烷溶液16小时。使反应混合 物分配在盐水与EtOAc的间，将EtOAc层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。进 行闪层析法(以30％EtOAc的己烷溶液为洗脱液)，获得呈泡沫物的 4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-2-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯。
2.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-哌啶-1-羧酸叔丁酯

使4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(124毫克，0.02 毫摩尔)溶在MeOH中，添加铂(5％，经硫化)在碳(50毫克)。在1大气 压氢气下，搅拌反应混合物两天。通过硅藻土过滤混合物，减压浓缩。 残留物以2毫米制备性TLC板(20％EtOAc/己烷类洗脱液)进行层析法， 获得标题化合物。
3.4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(1-丙基-哌啶-4-基)-6-[4-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶

在4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-哌啶-1-羧酸叔丁酯(97毫克，0.157毫摩尔)的二 恶烷溶液中，添加0.5毫升HCl的二恶烷溶液(4M)，在室温搅拌2小 时。减压浓缩此溶液，以无水乙醚洗涤残留物。丢弃乙醚洗液，再添 加乙醚，搅拌一小时，得到淡黄色悬浮液。收集固体，得到呈HCl盐 的4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-哌啶-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶。利用分配在EtOAc与10％NaOH间制备游离碱。 干燥(Na2SO4)，蒸发EtOAc层。将该游离碱溶在二氯乙烷中，添加丙醛 (0.09毫摩尔)与三乙酰氧基硼氢化钠(22毫克，0.10毫摩尔)，随后添 加一滴HOAc。搅拌此混合物一小时，以DCM稀释，及以10％NaOH(1x) 洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物以2毫米制备性TLC 板(5％MeOH(1N NH3)/DCM洗脱液)进行层析法，得到4-(3-氯-4-氟-苯 基)-2-(1-丙基-哌啶-4-基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶。
1H NMR(CDCl3)：δ0.93(t，3H)， 1.59(m，2H)，2.05(m，6H)，2.37(m，2H)，2.75(m，1H)，3.08)m，2H)，3.40(m，4H)，3.88(m， 4H)，6.69(s，1H)，7.06(m，1H)，7.21(t，1H)，7.86-7.93(m，2H)，8.08(d，1H)，8.47(m，1H).
K.1-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-4-丙基-哌嗪-2-酮
1.4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-3-酮基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯

在含2-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶(259毫克，0.55毫摩尔)、3-酮基-哌嗪-1-羧酸叔丁 酯(实质上如Kane and Carr(1980)Tett.Lett.21：3019-20所述制 备；132毫克，0.66毫摩尔)与Cs2CO3(250毫克，0.77毫摩尔)的恶烷 溶液中，添加4，5-双(二苯基膦基)-9，9-二甲基二苯并吡喃(19毫克， 0.03毫摩尔)。以氮气吹扫反应混合物10分钟，然后添加Pd2(dba)3(10 毫克，0.011毫摩尔)。以氮气再吹扫5分钟后，在氮气下90℃加热混 合物16小时。通过硅藻土过滤混合物，减压浓缩，得到标题化合物。
2.1-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-哌嗪-2-酮

使用实施例1-J步骤3叙述的程序，以HCl/二恶烷(4M)处理 4-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-2-基}-3-酮基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，获得哌嗪-酮标题化合 物。
3.1-{4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶-2-基}-4-丙基-哌嗪-2-酮

使用实施例1-J步骤3叙述的还原性胺化程序，将1-{4-(3-氯-4- 氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-2-基}- 哌嗪-2-酮转化成标题化合物。
1H NMR(CDCl3)：δ0.96(t，3H)，1.55 (m，2H)，2.43(t，2H)，2.83(t，2H)，3.35(s，2H)，3.41(m，4H)，3.87(m，4H)，3.40(t，2H)，6.69 (s，1H)，7.06(m，1H)，7.21(t，1H)，7.91(m，2H)，8.06(d，1H，J＝7.1Hz)，8.46(d，1H，J＝2.9 Hz).
L.二甲基-[3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙基]-胺
1.4-{4-氯-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-2- 基}-吗啉

在78℃，加热含4，6-二氯-2-吗啉-4-基嘧啶(468毫克，2.0毫摩 尔)、4-(6-三氟甲基-2-吡啶基)哌嗪(462毫克，2.0毫摩尔)、碳酸钾 (345毫克，2.5毫摩尔)与EtOH(10毫升)的混合物8小时。冷却该混 合物，以水(20毫升)稀释，及以EtOAc(3×25毫升)萃取。合并的有 机相以盐水(25毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。残留物在硅胶 上利用闪层析法(80％己烷/20％乙醚)进行纯化，得到标题化合物。
2.3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙-1-醇

以氮气吹扫4-{4-氯-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-2-基}-吗啉(142毫克，0.33毫摩尔)、(3-(3-羟丙基)苯基) 硼酸(89毫克，0.5毫摩尔)与K3PO4(2M，331微升)的二恶烷溶液10 分钟。添加Pd(PPh3)4(19毫克，0.017毫摩尔)，再吹扫5分钟。将内 容物密封在反应瓶中，在80℃加热16小时。将混合物分配在EtOAc与水的间，有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。通过小硅胶垫过滤残留物， 以50％EtOAc/己烷类洗脱。减压浓缩，得到标题化合物。
3.甲磺酸3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酯

使3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙-1-醇(104毫克，0.197毫摩尔)溶在二氯甲 烷中，添加三乙胺(55微升，0.394毫摩尔)。以冰浴将溶液带至0℃， 逐滴添加甲磺酰氯(23微升，0.394毫摩尔)。2小时后，以另外的二氯 甲烷稀释反应，在分液漏斗中以盐水洗涤混合物(1x)。将有机层干燥 (Na2SO4)，减压浓缩，得到标题化合物，不需进一步纯化即可使用。
4.二甲基-[3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)- 哌嗪-1-基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙基]-胺

使上文获得的粗甲磺酸3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基- 吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酯溶在THF中，55℃下， 在密封管中，与过量二甲胺一起加热。减压浓缩，将残留物分配在 NaHCO3水溶液与EtOAc的间。将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留 物以制备性TLC板(MeOH/DCM洗脱液)进行纯化，得到标题化合物。
1HNMR(CDCl3)：δ1.17(m，2H)，2.27(s，6H)，2.37(t，2H)，2.72(t，2H)，3.40(m，4H)，3.80 (m，8H)，3.87(m，4H)，6.37(s，1H)，7.03(m，1H)，7.25(d，1H，J＝7.1Hz)，7.35(dd，1H)，7.79 (m，2H)，7.89(d，1H，J＝7.87Hz)，8.46(d，1H).
M.3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸
1.3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸甲酯

以氮气吹扫4-{4-氯-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-2-基}-吗啉(142毫克，0.33毫摩尔)、(3-(2-甲氧羰基乙基) 苯基)硼酸(Combi-Blocks，Inc.，San Diego，CA；104毫克，0.5毫 摩尔)与K3PO4(2M，331微升)的二恶烷溶液10分钟。添加Pd(PPh3)4(19 毫克，0.017毫摩尔)，再吹扫5分钟。将内容物密封在反应瓶中，在 80℃加热16小时。将混合物分配在EtOAc与水的间，有机层干燥 (Na2SO4)，减压浓缩。通过小硅胶垫过滤残留物，以50％EtOAc/己烷类 洗脱。减压浓缩，得到标题化合物。
2.3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸

在3-(3-{2-吗啉-4-基-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1- 基]-嘧啶-4-基}-苯基)-丙酸甲酯的THF溶液中，逐滴添加水至几乎持 续浑浊为止。在此混合物中添加LiOH.H2O(10当量)，随后添加少量乙 醇以达异质性。在55℃加热此混合物2小时，然后减压浓缩。添加少 量水在残留物，随后添加10当量HCl(3M溶液)。将pH调至4，过滤 收集米色固体。以水洗涤该固体，干燥，得到标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6)：δ2.58(t，2H)，2.89(t，2H)，3.29(br m，4H)， 3.66(br m，4H)，3.72(br m，4H)，3.79(br m，4H)，6.72(s，1H)，7.22(m，1H)，7.31-7.37(m， 2H)，7.95(m，2H)，8.09(d，1H，J＝7.87Hz)，8.54(d，1H，J＝3.3Hz).
N.N-(6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧 啶-4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-基)-甲磺酰胺

1.4-[6-氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶-4-基]-哌嗪-1-羧酸 叔丁酯

在80℃，加热4，6-二氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶(1克，4.3 毫摩尔)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(886毫克，4.76毫摩尔)、与NaHCO3(730 毫克，8.66毫摩尔)在乙醇中的混合物16小时。减压浓缩，分配在乙 酸乙酯与水的间。将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物在硅胶上 进行层析法，以乙酸乙酯/己烷类为洗脱系，得到标题化合物。
2.4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-6-哌嗪-1-基 嘧啶

在80℃，加热4-[6-氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶-4-基]-哌 嗪-1-羧酸叔丁酯(1.6克，4.19毫摩尔)、3-氯-4-氟-苯基硼酸(877 毫克，5毫摩尔)、K3PO4(2M，4.2毫升)与肆-三苯基膦钯(O)在二恶烷 中的混合物16小时。以乙酸乙酯稀释此混合物并以盐水溶液洗涤。将 有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物使用急骤管柱层析法纯化(以 己烷类及随后的10％乙酸乙酯/己烷类洗脱)。使产物溶在无水二恶烷 中，在室温，添加4M HCl的二恶烷溶液(过量)。搅拌数小时后，减压 浓缩反应液，以乙醚洗涤固体，得到呈HCl盐的标题化合物。
3.4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶

在120℃，加热4-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-6- 哌嗪-1-基嘧啶游离碱(270毫克，0.72毫摩尔)、2-氯-3-甲基-5-硝基 -吡啶(149毫克，0.86毫摩尔)与二异丙基乙胺(185毫克，1.44毫摩 尔)在二甲基乙酰胺中的混合物16小时。以乙酸乙酯及水稀释此混合 物。以水洗涤有机层数次，然后干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用 制备性薄层色析法进行纯化，以乙酸乙酯/己烷类溶剂系洗脱，得到标 题化合物。
4.6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶 -4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-基胺

回流4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-哌 嗪-1-基]-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶(300毫克)与4当量SnCl2在 乙酸乙酯(50毫升)中的混合物16小时。将此混合物分配在乙酸乙酯与 1N NaOH的间。分离有机层，干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物通过硅 胶塞过滤予以纯化，以乙酸乙酯为洗脱液，得到标题化合物。
5.N-(6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧 啶-4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-基)-甲磺酰胺

在含6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶 -4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-基-胺(50毫克，0.103毫摩尔)的 DCM冷却溶液中，添加甲磺酸酐(22毫克，0.125毫摩尔)。在室温搅拌 此溶液5小时。水洗，将溶液干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用急 骤管柱层析法纯化，以EtOAc∶己烷类(1∶4)洗脱，获得呈固体的 N-(6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶-4- 基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-基)-甲磺酰胺。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.30(m，CH3)；1.72(m，1H，CH2CH2)；1.91(m， 1H，CH2CH2)；2.06(m，2H，CH2CH2)；2.35(s，3H，Ar-CH3)；3.01(s，3H，CH3SO2)；3.24(m， 4H)；3.67(m，2H)；3.80(m，4H)；4.34(m，1H)；6.25(s，1H，Ar-H)；6.34(s，1H，Ar-H)；7.18 (m，1H)；7.48(d，J＝2.4Hz，1H)；7.89(m，1H)；8.03(m，1H)；8.07(m，1H).
O.6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶 -4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-醇

在含6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶 -4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-基胺(146毫克，0.303毫摩尔)的 10％H2SO4冷却水溶液中逐滴添加溶在1毫升水中的NaNO2(22毫克， 0.318毫摩尔)。在0℃搅拌溶液30分钟。在90℃加热此混合物1小时。 冷却至室温，将pH调至7，以EtOAc萃取。以盐水洗涤，将溶液干燥 (Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用急骤管柱层析法进行纯化，以EtOAc∶ 己烷类(1∶1)洗脱，得到呈米白色固体的6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯 基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶-4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶 -3-醇。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.29(t，3H，J＝6.3Hz，CH3)；1.69(m， 1H，CH2CH2)；1.90(m，1H，CH2CH2)；2.05(m，2H，CH2CH2)；2.29(s，3H，Ar-CH3)；3.11(m， 4H)；3.67(m，4H)；3.78(m，4H)；4.35(m，1H)；6.23(s，1H，Ar-H)；7.03(d，J＝2.4Hz，1H)； 7.16(m，1H)；7.72(d，1H，J＝2.7Hz)；7.86(m，1H)；8.04(m，1H).
P.4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(5-甲氧基-3-甲基-吡啶-2-基)-哌 嗪-1-基]-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶

在含6-{4-[6-(3-氯-4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶 -4-基]-哌嗪-1-基}-5-甲基-吡啶-3-醇(50毫克，0.10毫摩尔)的DMF 溶液中，添加60％NaH(12毫克，0.30毫摩尔)。在室温搅拌此溶液 30分钟。添加甲基碘(0.3毫摩尔)，在室温搅拌此溶液2小时。将其 分配在EtOAc与水的间。以盐水洗涤，将溶液干燥(Na2SO4)，减压浓缩。 残留物利用急骤管柱层析法进行纯化，以EtOAc∶己烷类(1∶4)洗脱，得 到呈固体的4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(5-甲氧基-3-甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶。1H NMR (300MHz，CDCl3)：δ1.30(t，3H，J＝6.3Hz，CH3)；1.70(m，1H，CH2CH2)；1.91(m，1H， CH2CH2)；2.06(m，2H，CH2CH2)；2.33(s，3H，Ar-CH3)；3.13(m，4H)；3.67(m，2H)；3.78(m， 4H)；3.80(s，OCH3)；4.33(m，1H)；6.25(s，1H，Ar-H)；7.06(d，J＝2.4Hz，1H)；7.18(m， 1H)；7.88(m，2H)；7.86(m，1H)；8.07(m，1H).
Q.4-[4-(3-氯-6-甲氧基-吡啶-2-基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-6-(4- 氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶
1.2-氯-6-甲氧基-吡啶-3-基胺

回流加热2-氯-6-甲氧基-3-硝基-吡啶(7克，0.37摩尔)与3当量 SnCl2(22克，0.111摩尔)在乙酸乙酯(150毫升)中的混合物16小时。 将此混合物分配在乙酸乙酯与1N NaOH的间。分离有机层，干燥 (Na2SO4)，减压浓缩。残留物通过硅胶塞过滤予以纯化，以乙酸乙酯为 洗脱液，得到标题化合物。
2.2，3-二氯-6-甲氧基-吡啶

使用冰浴将含2-氯-6-甲氧基-3-硝基-吡啶(2.8克，0.018摩尔) 的75％H2SO4(15毫升)溶液带至0℃。在此反应混合物中缓缓添加NaNO2水溶液(5毫升)，搅拌30分钟。添加三摩尔当量CuCl的浓HCl溶液， 搅拌15分钟。在80℃加热此混合物30分钟。将其倾在冰上，其水层 以乙酸乙酯萃取，将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。利用急骤管柱层 析法进行纯化(己烷类至10％乙酸乙酯/己烷类洗脱液)，得到标题化合 物。
3.1-(3-氯-6-甲氧基-吡啶-2-基)-3-(R)-甲基-哌嗪

在110℃，加热2，3-二氯-6-甲氧基-吡啶(1.0克，5.62毫摩尔)、 2-(R)-甲基哌嗪(1.13克，11.23毫摩尔)、与Na2CO3(596毫克，5.62 毫摩尔)在DMA中的混合物16小时。分配此混合物在EtOAc与水的间， 将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。通过小硅胶垫过滤残留物，以 90∶10∶1(DCM∶MeOH∶NH4OH)洗脱。减压浓缩，得到标题化合物。
4.4，6-二氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶

在含2，4，6-三氯嘧啶(8克，44毫摩尔)的MeOH(80毫升)与NaHCO3(10克)冰冷溶液中，缓缓地逐滴添加2-甲基吡咯烷(46毫摩尔)的甲醇 溶液(20毫升)。令此混合物回升至25℃，搅拌过夜。以水稀释，剧烈 搅拌1小时，过滤，得到呈位相异构物混合物的白色结晶固体。此混 合物使用急骤管柱层析法(乙酸乙酯/己烷类洗脱系)进行纯化，得到 4，6-二氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶。
5.4-氯-6-(4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶

在80℃，加热4，6-二氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶(2.25克， 9.74毫摩尔)、4-氟苯基-硼酸(1.44克，10.2毫摩尔)、K3PO4(2M水 溶液，9.74毫升)与四-三苯基膦钯(O)(562毫克)在二恶烷(35毫升) 中的混合物16小时。以乙酸乙酯稀释此混合物并以盐水洗涤。将有机 层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物使用急骤管柱层析法(乙酸乙酯/己 烷类洗脱液系)纯化，得到呈油状物的标题化合物。
6.4-[4-(3-氯-6-甲氧基-吡啶-2-基)-2-甲基-哌嗪-1-基]-6-(4- 氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶

在120℃，加热4-氯-6-(4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)- 嘧啶(440毫克，1.51毫摩尔)、1-(3-氯-6-甲氧基-吡啶-2-基)-3-(R)- 甲基哌嗪(400毫克，1.66毫摩尔)、与K2CO3(230毫克，1.66毫摩尔) 在DMA中的混合物16小时。分配此混合物在EtOAc与水的间，将有机 层干燥(Na2SO4)，减压浓缩。以急骤硅胶管柱法纯化，10％EtOAc/己烷 类为洗脱液。减压浓缩，得到标题化合物。1H NMR (300MHz，CDCl3)：δ1.36(m，6H，2×CH3)；1.70(m，1H，CH2CH2)；1.93(m，1H，CH2CH2)； 2.06(m，2H，CH2CH2)；3.05(m，2H)；3.38(m，1H)；3.70(m，2H)；3.88(s，3H，OCH3)；3.90 (m，2H)；4.35(m，2H)；4.70(m，1H)；6.232(s，1H)；6.30(d，1H，J＝8.4Hz)；7.12(m，2H)； 7.46(d，J＝9.0Hz，1H)；8.00(m，2H).
R.5-氯-6-{4-[6-(4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶 -4-基]-3-甲基-哌嗪-1-基}-吡啶-2-醇

在90℃，加热4-[4-(3-氯-6-甲氧基-吡啶-2-基)-2-甲基-哌嗪-1- 基]-6-(4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶(120毫克，0.241 毫摩尔)的浓HCl溶液24小时。冷却至室温，将pH调至7，并以EtOAc萃取。以盐水洗涤，将溶液干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用急骤 管柱层析法进行纯化，以EtOAc∶己烷类(1∶4)洗脱，得到呈米白色固体 的5-氯-6-{4-[6-(4-氟-苯基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶-4- 基]-3-甲基-哌嗪-1-基}-吡啶-2-醇。1H NMR (300MHz，CDCl3)：δ1.32(m，6H，2×CH3)；1.69(m，1H，CH2CH2)；1.91(m，1H，CH2CH2)； 2.04(m，2H，CH2CH2)；3.06(m，1H)；3.24(m，1H)；3.36(m，1H)；3.67(m，4H)；4.33(m， 2H)；4.71(m，1H)；6.22(m，2H)；7.10(m，2H)；7.45(d，J＝8.7Hz，1H)；8.01(m，2H)；9.27 (br，1H，OH).
S.2，4，4-三甲基-7-{2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-6-[4-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-4-基}-1，2，3，4-四氢-异喹啉
1.7-溴-2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氢-异喹啉

在含2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氢-异喹啉-7-基胺(实质上如PCT 国际申请公告案WO 00/009486、WO 00/007993或WO 98/41507所述制 备；330毫克，1.734毫摩尔)的75％H2SO4冷却水溶液中，逐滴添加溶 在1毫升水中的NaNO2(132毫克，1.91毫摩尔)溶液。在0℃搅拌此溶 液30分钟。添加CuBr(298毫克，2.08毫摩尔)与48％HBr(2毫升)。 在0℃搅拌此混合物15分钟。在60℃加热此混合物30分钟。冷却至 室温，将pH调至9-10，以EtOAc萃取。以盐水洗涤，将此溶液干燥 (Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用急骤管柱层析法进行纯化，以EtOAc∶ 己烷类(1∶1)洗脱，得到7-溴-2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氢-异喹啉。
2.4-氯2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶

在78℃，加热4，6-二氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶(2.0毫摩 尔)、4-(6-三氟甲基-2-吡啶基)哌嗪(462毫克，2.0毫摩尔)、碳酸钾 (345毫克，2.5毫摩尔)与EtOAc(10毫升)的混合物8小时。冷却该 混合物，以水(20毫升)稀释，及以EtOAc(3×25毫升)萃取。合并的 有机相以盐水(25毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。残留物在硅 胶上利用闪层析法(80％己烷/20％乙醚)进行纯化，得到标题化合物。
3.2，4，4-三甲基-7-{2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-6-[4-(3-三氟甲 基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-4-基}-1，2，3，4-四氢-异喹啉

在7-溴-2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氢-异喹啉(140毫克，0.55毫 摩尔)、4，4，5，5，4’，4’，5’，5’-八甲基-[2，2’]二[[1，3，2]二恶硼 茂烷基](140毫克，0.55毫摩尔)、DPPF(9毫克，0.017毫摩尔)、 与KOAc(162毫克，1.65毫摩尔)的DMSO混合物中，添加 PdCl2(DPPF)-DCM复合物(13毫克，0.0165毫摩尔)。以无水N2吹扫该 反应混合物10分钟。在80℃加热搅拌中的反应混合物过夜。冷却至室 温。添加4-氯-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2- 基)-哌嗪-1-基]-嘧啶(141毫克，0.33毫摩尔)、Pd(PPh3)4(19毫克， 0.017毫摩尔)，与Cs2CO3(162毫克，0.50毫摩尔)。在80℃加热搅拌 中的反应混合物过夜，冷却至室温，将其分配水与EtOAc的间。将此 溶液干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用急骤管柱层析法纯化，以 DCM∶MeOH(9∶1)洗脱，得到2，4，4-三甲基-7-{2-(2-甲基-吡咯烷-1- 基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶-4- 基}-1，2，3，4-四氢-异喹啉。
1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.30(m，9H，3×CH3)；1.68(m，1H，CH2CH2)； 1.91(m，1H，CH2CH2)；2.05(m，2H，CH2CH2)；2.40(s，2H)；2.43(s，3H，NCH3)；3.39(m， 4H)；3.61(s，2H)；3.67(m，2H)；3.79(m，4H)；4.34(m，1H)；6.27(s，1H，Ar-H)；7.01(m， 1H)；7.35(m，1H)；7.63(s，1H)；7.88(m，1H)；7.88(m，1H)；8.44(m，1H).
T.4-(3-氯-4-氟苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-6-[4-(3-三氟 甲基吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶

在2-氯-4-(3-氯-4-氟苯基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌 嗪-1-基]-嘧啶(200毫克，0.43毫摩尔)、1-甲基-1H-咪唑(42毫克， 0.51毫摩尔)、CuI(161毫克，0.86毫摩尔)、MgO(21毫克，0.51 毫摩尔)、与PPh3(22毫克，0.086毫摩尔)的二恶烷混合物中，添加 Pd(OAc)2(5毫克，0.021毫摩尔)。以无水N2吹扫该反应混合物10分 钟。在150℃加热混合物24小时，冷却至室温，将其分配水与EtOAc的间。将此溶液干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残留物利用急骤管柱层析法 纯化，以DCM∶MeOH∶NH4OH(95∶5∶1)洗脱，得到4-(3-氯-4-氟苯 基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪 -1-基]-嘧啶。1H NMR (2HCl300MHz，DMSO-d6)：δ3.35(m，4H)；4.01(m，4H)；4.31(s，3H，NCH3)；7.23(m， 1H，Ar-H)；7.63(m，2H)；7.89(s，1H)；7.97(s，1H)；8.11(m，1H)；8.43(m，1H)；8.54(m， 1H)；8.66(m，1H).
U.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((R)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪 -1-基)-2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶
1.2-(苄硫基)-4-氯-6-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶

在氮气氛围下，使2-(苄硫基)-4，6-二氯嘧啶(2.71克，0.01摩尔) 与3-氯-4-氟苯基硼酸(1.74克，0.01摩尔)溶在无水二恶烷(100毫升) 中。添加K3PO4(2.0M，7.5毫升)与Pd(PPh3)4(578毫克)。回流加热 此混合物过夜，真空浓缩，以CHCl3(150毫升)萃取，水洗，以MgSO4 干燥。过滤，真空浓缩，得到黄色油。此粗产物利用急骤管柱层析法 使用2％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈无色油的标题化合物。
2.(R)-1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪

氮气氛围下，使2，3-二氯吡啶(8.5克，0.057摩尔)与(R)-(-)-2- 甲基哌嗪(5.75克，0.057摩尔)溶于DMA(125.0毫升)中。于此混合 物中添加无水粉末状之K2CO3(23.75克，0.172摩尔)，于135-140℃ 搅拌48小时。冷却反应混合物至室温，以水(400毫升)稀释，以EtOAc(3×200毫升)萃取，以盐水(2×150毫升)洗涤合并之有机萃取液。以 MgSO4干燥，真空浓缩，得到呈橘黄色液体的粗产物。于高度真空下蒸 馏该粗产物，得到呈黄色粘稠油的吡啶基哌嗪衍生物。
3.2-(苄硫基)-4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((R)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲 基哌嗪-1-基)-嘧啶

氮气氛围下，使2-(苄硫基)-4-氯-6-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶(1.15 克，0.00316摩尔)与(R)-1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-甲基-哌嗪(0.65克， 0.00316摩尔)溶于CH3CN(30.0毫升)中。于此混合物中添加无水粉末 状的K2CO3(0.872克，0.00632摩尔)，回流3天。真空浓缩此反应混 合物，以水(100毫升)稀释，以DCM(3×50毫升)萃取，及以MgSO4干 燥。过滤，真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析法使用15-20％EtOAc/ 己烷予以纯化，得到呈白色非晶固体的标题产物。
4.2-(苄基磺酰基)-4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((R)-4-(3-氯吡啶-2- 基)-2-甲基哌嗪-1-基)-嘧啶

氮气氛围下，使2-(苄硫基)-4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((R)-4-(3- 氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-嘧啶(1.0克)溶于DCM(25.0毫升) 中，冷却至-20℃。以15分钟，分数次添加77％m-CPBA(1.0克)至此 混合物中。于-20℃搅拌反应混合物4小时。以饱和Na2CO3洗涤反应混 合物，并以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪 层析法使用30-40％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈白色非晶固体的标题 产物。
5.4-(3-氯-4-氯苯基)-6-((R)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1- 基)2-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-嘧啶

氮气氛围下，使2-(酰苄基磺酰基)-4-(3-氯-4-氟苯 基)-6-((R)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-嘧啶(57毫克， 0.1毫摩尔)与2-甲基吡咯烷(0.5毫摩尔)溶于二恶烷(1.0毫升)中， 于110℃加热72小时。真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪层析法 使用5％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈白色非晶固体的标题产物。
NMR(CDCl3)δ1.31(3H，d，J＝1.5)，1.41(3H，dd)，1.69(1H，m)，1.9(1H，m)，2.0 (2H，m)，2.98(2H，m)，3.39(1H，m)，3.65(2H，m)，3.82(2H，m)，4.35(2H，m)，4.68(1H，m)： 6.22(1H，s)，6.86(1H，m)，7.16(1H，t)，7.61(1H，d，J＝1.6)，7.88(1H，m)，8.07(1H，m)，8.20 (1H，m).質譜m/z＝501.13.
V.2-氯-3-((R)-4-(6-(4-氟苯基)-2-((R)-2-甲基吡咯烷-1-基)嘧啶 -4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)

1.2，4-二氯-6-(4-氟苯基)嘧啶

氮气氛围下，使4-氟溴苯(8.75克，0.05摩尔)溶于无水乙醚(80 毫升)中，冷却至-78℃。逐滴添加1.6M n-BuLi(34毫升，0.055摩 尔)，于-78℃搅拌45分钟。使2，4-二氯嘧啶(7.45克，0.05摩尔)溶 于Et2O(100毫升)中，逐滴添加至反应混合物中，加温此反应混合物 至-30℃，于此温度搅拌30分钟，随后于0℃搅拌30分钟。以溶于THF (5.0毫升)中的HOAc(3.15毫升，0.055摩尔)与水(0.5毫升，0.027 摩尔)淬息反应混合物。逐滴添加DDQ(11.9克，0.053摩尔)的THF(40 毫升)溶液至反应混合物中。将反应混合物带至室温，于室温搅拌30 分钟。冷却反应混合物至0℃，添加3.0N NaOH水溶液(35毫升)，搅 拌30分钟。自反应混合物中轻轻倒出有机层，以Et2O(3×100毫升) 洗涤褐色固体。合并有机层，以饱和NaCl溶液洗涤数次，并以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到褐色固体。此粗产物利用闪层析闪层析 法使用5％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈白色固体的标题产物。
2.2-氯-3-((R)-3-甲基哌嗪-1-基)-吡嗪

氮气氛围下，使2，3-二氯吡嗪(3.0克，0.02摩尔)与(R)-(-)-2- 甲基哌嗪(2.0克，0.02摩尔)溶于DMA(30.0毫升)中。于此混合物中 添加无水粉末状的K2CO3(8.3克，0.06摩尔)，于110℃加热4小时。 冷却此反应混合物至室温，以水(100毫升)稀释，以EtOAc(3×50毫 升)萃取，合并的有机萃取液以盐水(2×50毫升)洗涤。以MgSO4干燥， 真空浓缩，得到呈橘黄色液体的粗产物。此粗产物利用管柱层析法使 用2.5％MeOH的CHCl3溶液予以纯化，得到呈黄色粘稠油的标题产物。
3.2-氯-3-((R)-4-(2-氯-6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)- 吡嗪

氮气氛围下，使2，4-二氯-6-(4-氟苯基)嘧啶(486毫克，2.0毫摩 尔)与2-氯-3-((R)-3-甲基哌嗪-1-基)吡嗪(424毫克，2.0毫摩尔)溶 于CH3CN(30.0毫升)中。于此混合物中添加无水粉末状的K2CO3(0.872 克，0.00632摩尔)，于室温搅拌6天。真空浓缩此反应混合物，以水 (50毫升)稀释，以EtOAc(3×50毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤， 真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪层析法使用5-20％EtOAc/己烷 予以纯化，得到呈粘稠油的标题产物。
4.2-氯-3-((R)-4-(6-(4-氟苯基)-2-((R)-2-甲基吡咯烷-1-基)嘧啶-4- 基)-3-甲基哌嗪-1-基)吡嗪

氮气氛围下，使2-氯-3-((R)-4-(2-氯-6-(4-氟苯基)嘧啶-4- 基)-3-甲基哌嗪-1-基)-吡嗪(41.9毫克，0.1毫摩尔)与(R)-2-甲基吡 咯烷氢溴酸盐(0.3毫摩尔，实质上如Nijhuis et.al.(1989)J.Org. Chem.54：209-216所述制备)溶于CH3CN(2.0毫升)中。添加K2CO3(83 毫克，0.6摩尔)，于80℃加热48小时。真空浓缩，以水(5.0毫升) 稀释，以EtOAc(3×3毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩， 得到粗产物，利用闪层析闪层析法使用10-20％EtOAc/己烷予以纯化， 得到呈粘稠油的标题产物。
NMR(CDCl3)δ1.31(3H，d，J＝2.4)， 1.38(3H，d，J＝1.6)，1.69(1H，m)，1.91(1H，m)，2.06(2H，m)，3.06(1H，t)，3.17(1H，dd)， 3.375(1H，t)，3.65(2H，m)，3.97(2H，m)，4.34(2H，m)，4.70(1H，bs)，6.24(1H，s)，7.10(2H， t)，7.91(1H，s)，7.99(2H，m)，8.13(1H，m).質譜m/z＝468.17.
W.5-氯-4-((R)-4-(6-(4-氟苯基)-2-((R)-2-甲基吡咯烷-1-基)嘧啶 -4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)2-甲氧嘧啶
1.2，5-二氯-4-((R)-3-甲基哌嗪-1-基)嘧啶

氮气氛围下，使2，5，6-三氯嘧啶(5.5克，0.03摩尔)与(R)-(-)-2- 甲基哌嗪(3.0克，0.03摩尔)溶于CH3CN(100.0毫升)中。于此混合物 中添加无水粉末状的K2CO3(8.3克，0.06摩尔)，于25℃搅拌4小时。 真空浓缩此反应混合物，以水(100毫升)稀释，以EtOAc(3×100毫升) 萃取，合并的萃取液以盐水(2×50毫升)洗涤。以MgSO4干燥，真空浓 缩，得到呈白色固体的标题产物。
2.5-氯-2-甲氧基-4-((R)-3-甲基哌嗪-1-基)嘧啶

氮气氛围下，使2，5-二氯-4-((R)-3-甲基哌嗪-1-基)嘧啶(2.5克) 溶于MeOH(25.0毫升)中。于此混合物中添加25％NaOMe的MeOH溶液 (10毫升)，回流2小时。真空浓缩此反应混合物，以水(100毫升)稀 释，以CHCl3(3×50毫升)萃取，合并的有机萃取液以盐水(2×50毫 升)洗涤。以MgSO4干燥，真空浓缩，利用闪层析闪层析法使用1％MeOH的CHCl3溶液予以纯化，得到呈无色粘稠油的标题产物。
3.5-氯-4-((R)-4-(2-氯-6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1- 基)-2-甲氧嘧啶

氮气氛围下，使2，4-二氯-6-(4-氟苯基)嘧啶(486毫克，2.0毫摩 尔)与5-氯-2-甲氧基-4-((R)-3-甲基哌嗪-1-基)嘧啶(484毫克，2.0 毫摩尔)溶于CH3CN(10.0毫升)中。于此混合物中添加无水粉末状的 K2CO3(0.552克，0.004摩尔)，于室温搅拌3天。真空浓缩此反应混 合物，以水(50毫升)稀释，以EtOAc(3×50毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪层析法使用10-40％ EtOAc/己烷予以纯化，得到呈白色非晶固体的标题产物。
4.5-氯-4-((R)-4-(6-(4-氟苯基)-2-((R)-2-甲基吡咯烷-1-基)嘧啶 -4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)2-甲氧嘧啶

氮气氛围下，使5-氯-4-((R)-4-(2-氯-6-(4-氟苯基)嘧啶-4- 基)-3-甲基哌嗪-1-基)-2-甲氧嘧啶(45毫克，0.1毫摩尔)与(R)-2-甲 基吡咯烷氢溴酸盐(0.2毫摩尔，实质上如Nijhuis et.al.(1989)J. Org.Chem.54：209-216所述制备)溶于CH3CN(2.0毫升)中。添加K2CO3(55毫克，0.4毫摩尔)，于80℃加热20小时。真空浓缩，以水(5.0 毫升)稀释，以EtOAc(3×3毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空 浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪层析法使用20％EtOAc/己烷予以纯 化，得到呈粘稠油的标题产物。
NMR(CDCl3)δ1.3(6H，m)，1.69(1H，m)，1.91 (1H，m)，2.06(2H，m)，3.21(1H，m)，3.35(2H，m)，3.63(2H，m)，3.94(3H，s)，4.28(2H，m)， 4.45(2H，m)，4.64(1H，bs)，6.19(1H，s)，7.07(2H，t)，7.97(2H，m)，8.08(1H，s). 質譜m/z＝498.17.
X.4-((R)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-(4-氟苯 基)-2-(2，5-二甲基-1H- 咯-1-基)嘧啶
1.4，6-二氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)嘧啶

氮气氛围下，使2-胺基-4，6-二氯嘧啶(8.2克，0.05摩尔)与己 -2，5-二酮(5.7克，0.05摩尔)溶于甲苯(150毫升)中。于此反应混合 物中添加对甲苯磺酸(300毫克)，于汀斯达克条件(Dean Stark conditions)下，回流加热并去除水6小时。冷却，通过硅胶进行过滤， 真空蒸发，得到呈黄色固体的标题产物。
2.4-氯-6-(4-氟苯基)-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)嘧啶

氮气氛围下，使4，6-二氯-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)嘧啶 (1.2克，0.005摩尔)与4-氟苯基硼酸(0.7克，0.005摩尔)溶于无水 二恶烷(25毫升)中。添加K3PO4水溶液(2.0M，3.75毫升)与 Pd(PPh3)4(289毫克)。回流加热此混合物隔夜，真空浓缩，以CHCl3(150 毫升)萃取，水洗，以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到黄色油。此 粗产物利用闪层析闪层析法使用2％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈褐色 油的标题化合物。
3.4-((R)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-(4-氟苯 基)-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)嘧啶

氮气氛围下，使4-氯-6-(4-氟苯基)-2-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1- 基)嘧啶(60.4毫克，0.2毫摩尔)与(R)-1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-甲基 哌嗪(42.4毫克，0.2毫摩尔)溶于DMA(2.0毫升)中。于此混合物中 添加无水粉末状的K2CO3(0.4毫摩尔)，于130℃加热24小时。冷却， 以水(5毫升)稀释，以EtOAc(3×2毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过 滤，真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪层析法使用10％EtOAc/己 烷予以纯化，得到呈白色非晶固体的标题产物。
NMR(CDCl3)δ1.47(3H，d，J＝1.7)， 2.45(6H，s)，3.04(2H，m)，3.45(1H，t)，3.84(2H，t)，4.35(1H，m)，4.85(1H，bs)，5.9(1H，s)， 6.77(1H，s)，6.89(1H，m)，7.14(2H，t)，7.63(1H，d，J＝2.3)，8.06(2H，m)，8.21(1H，m). 質譜m/z＝477.11.
Y.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-(4-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-异 丙基嘧啶
1.3-(3-氯-4-氟苯基)-3-酮基丙酸乙酯

氮气氛围下，使丙二酸单乙酯(11.88克，0.09摩尔)与2，2’-联 二吡啶(10毫克)溶于无水THF(200毫升)中，冷却至-78℃。逐滴添加 2.5M n-BuLi(80毫升，0.2摩尔)，令反应混合物缓缓加温至-5℃。 冷却该反应混合物回-65℃。逐滴添加3-氯-4-氟苯甲酰氯(9.65克， 0.05摩尔)，于-65℃搅拌60分钟。以1.0N HCl水溶液(200毫升)淬 息反应混合物，以Et2O(3×200毫升)萃取。合并有机层，以饱和NaCl溶液洗涤，并以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到粗产物。此粗产物 利用闪层析闪层析法使用5％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈橘黄色液体 的所需产物。
2.6-(3-氯-4-氟苯基)-2-异丙基嘧啶-4-醇

氮气氛围下，使3-(3-氯-4-氟苯基)-3-酮基丙酸乙酯(1.22克， 0.005摩尔)与异丁脒盐酸盐(0.73克，0.005摩尔)溶于甲苯(25.0毫 升)中。添加K2CO3(3.45克，0.05摩尔)于反应混合物中，于室温搅拌 20小时。以水稀释反应混合物，酸化至pH 6.0至7.0，以DCM(3×100 毫升)萃取，以水洗涤及以MgSO4干燥。过滤，真空蒸发，得到呈白色 固体的标题产物。
3.4-氯-5-(3-氯-4-氟苯基)-2-异丙基嘧啶

氮气氛围下，使6-(3-氯-4-氟苯基)-2-异丙基嘧啶-4-醇(0.3克， 1.13毫摩尔)溶于POCl3(3.0毫升)中。于100℃加热此混合物4小时， 真空浓缩，以冰淬息反应，以饱和NaHCO3中和，及以EtOAc(2×25毫 升)萃取，以盐水洗涤并以MgSO4干燥。过滤，真空蒸发，得到黄色油。 此粗产物利用闪层析闪层析法使用15％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈 无色油的标题产物。
4.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-(4-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 基)-2-异丙基嘧啶

氮气氛围下，使4-氯-6-(3-氯-4-氟苯基)-2-异丙基嘧啶(56毫克， 0.2毫摩尔)与1-(3-(三氟甲基)-吡啶-2-基)哌嗪(46毫克，0.2毫摩 尔)溶于DMA(1.5毫升)中。于此混合物中添加无水粉末状的K2CO3(55 毫克，0.4毫摩尔)，于120℃加热18小时。冷却，以水(5毫升)稀释， 以EtOAc(3×2毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到 粗产物，利用闪层析闪层析法使用7％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈无 色粘稠油的标题产物。
NMR(CDCl3)δ1.33(6H，d，J＝1.8)，3.05 (1H，m)，3.40(4H，m)，3.87(4H，m)，6.68(1H，s)，7.03(1H，m)，7.19(1H，t)，7.89(2H，m)， 8.07(1H，d，J＝2.3)，8.45(1H，m).質譜m/z＝480.22.
Z.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-(4-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶
1.6-(3-氯-4-氟苯基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶-4-醇

氮气氛围下，使3-(3-氯-4-氟苯基)-3-酮基丙酸乙酯(2.44克， 0.01摩尔)与异烟碱酰胺盐酸盐(isonicotinamidine hydrochloride) (1.57克，0.01摩尔)溶于EtOH(50.0毫升)中。添加21％NaOEt(3.2 毫升)于反应混合物中，回流3天。冷却，从反应混合物中过滤分离白 色固体，水洗，真空干燥，得到标题产物。
2.4-氯-6-(3-氯-4-氟苯基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶

氮气氛围下，使6-(3-氯-4-氟苯基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶-4-醇 (0.26克，0.863毫摩尔)溶于POCl3(3.0毫升)中。于100℃加热此混 合物20小时，真空浓缩，以冰淬息反应，以饱和NaHCO3中和，及以 CHCl3(2×50毫升)萃取，以盐水洗涤并以MgSO4干燥。过滤，真空蒸 发，得到呈米色固体的标题产物。
3.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-(4-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶

氮气氛围下，使4-氯-6-(3-氯-4-氟苯基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶(64 毫克，0.2毫摩尔)与1-(3-(三氟甲基)-吡啶-2-基)哌嗪(46毫克，0.2 毫摩尔)溶于DMA(2.0毫升)中。于此混合物中添加无水粉末状的K2CO3(55毫克，0.4毫摩尔)，于140℃加热20小时。冷却，以水(5毫升) 稀释，以EtOAc(3×2毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩， 得到粗产物。以Et2O(2.0毫升)洗涤此粗产物，得到呈奶油色固体的 标题产物。
NMR(CDCl3)δ3.34(4H，s)，3.99(4H，s)，7.20(1H，m)，7.47(1H，s)， 7.43(1H，t)，8.09(1H，d，J＝2.0)，8.30(2H，m)，8.35(1H，m)，8.55(2H，m)，8.70(2H，m). 質譜m/z＝515.24.
AA.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-(4-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1- 基)-2-(1，2，3，6-四氢-1-异丙基吡啶-4-基)嘧啶

氮气氛围下，使4-(3-氯-4-氟苯基)-6-(4-(3-(三氟甲基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-基)-2-(吡啶-4-基)嘧啶(40毫克)与2-溴丙烷(0.1毫升) 溶于DMF(1.5毫升)中。于120℃，在密封管中加热此混合物48小时。 冷却混合物至室温，然后添加NaBH4(50毫克)。于室温搅拌此混合物 20小时，以水(5毫升)稀释，以EtOAc(3×3毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析闪层析法使用20％ EtOAc/己烷予以纯化，得到呈白色固体的标题产物。质谱m/z＝561.27。
BB.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((S)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1- 基)-2-((S)-2-甲基吡咯烷-1-基)嘧啶
1.2，4-二氯-6-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶

氮气氛围下，使3-氯-4-氟溴苯(10.0克，0.04摩尔)溶于无水乙 醚(80毫升)中，冷却至-78℃。逐滴添加1.6M n-BuLi(36毫升，0.048 摩尔)，于-78℃搅拌45分钟。使2，4-二氯嘧啶(7.1克，0.04摩尔) 溶于Et2O(100毫升)中，将其逐滴添加至反应混合物中，将反应混合物 加温至-30℃，于此温度搅拌30分钟，随后于0℃搅拌30分钟。以溶 于THF(5.0毫升)中的HOAc(3.15毫升，0.055摩尔)与水(0.5毫升， 0.027摩尔)淬息反应混合物。逐滴添加DDQ(13克)的THF(40毫升) 溶液至反应混合物中。将反应混合物带至室温，于室温搅拌30分钟。 冷却反应混合物至0℃，添加3.0N NaOH水溶液(35毫升)，搅拌30 分钟。自反应混合物中轻轻倒出有机层，以Et2O(3×100毫升)洗涤褐 色固体。合并有机层，以饱和NaCl溶液洗涤数次，并以MgSO4干燥。 过滤，真空浓缩，得到褐色固体。此粗产物利用闪层析闪层析法使用 5％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈白色固体的标题产物。
2.(S)-1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪

氮气氛围下，使2，3-二氯吡啶(7.4克，0.05毫摩尔)与(S)-(-)-2- 甲基哌嗪(5.0克，0.05毫摩尔)溶于DMA(125.0毫升)中。于此混合 物中添加无水粉末状的K2CO3(20.75克，0.15摩尔)，于135至140℃ 搅拌56小时。冷却反应混合物至室温，以水(400毫升)稀释，以EtOAc(3 ×200毫升)萃取，合并的有机萃取液以盐水(2×150毫升)洗涤。以 MgSO4干燥，真空浓缩，获得呈黄色液体的粗产物。利用闪层析法使用 CHCl3予以纯化，得到呈黄色粘稠油的吡啶基哌嗪衍生物。
3.2-氯-4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((S)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪 -1-基嘧啶

氮气氛围下，使2，4-二氯-6-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶(554毫克，2.0 毫摩尔)与2-氯-3-((S)-3-甲基哌嗪-1-基)吡嗪(424毫克，2.0毫摩尔) 溶于CH3CN(20.0毫升)中。于此混合物中添加无水粉末状的K2CO3(0.552克，4.0毫摩尔)，于室温搅拌40小时。真空浓缩此反应混合 物，以水(50毫升)稀释，以EtOAc(3×50毫升)萃取，及以MgSO4干 燥。过滤，真空浓缩，得到粗产物，利用闪层析法使用5-20％EtOAc/ 己烷予以纯化，得到呈白色固体的标题产物。
4.4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((S)-4-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1- 基)-2-((S)-2-甲基吡咯烷-1-基)嘧啶

氮气氛围下，使2-氯-4-(3-氯-4-氟苯基)-6-((S)-4-(3-氯吡啶 -2-基)-2-甲基哌嗪-1-基嘧啶(45毫克，0.1毫摩尔)与(S)-2-甲基吡 咯烷氢溴酸盐(0.2毫摩尔，实质上如Nijhuis et.al.(1989)J.Org. Chem.54：209-216所述制备)溶于CH3CN(2.0毫升)中。添加K2CO3(55 毫克，0.4摩尔)，于80℃加热20小时。真空浓缩，以水(5.0毫升) 稀释，以EtOAc(3×3毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓缩， 得到粗产物。利用闪层析法使用10-20％EtOAc/己烷予以纯化，得到呈 粘稠油的标题产物。
NMR(CDCl3)δ1.31(3H，d，J＝2.1)，1.41(3H，d， J＝2.3)，1.62(2H，m)，1.93(3H，m)，3.00(2H，m)，3.35(1H，t)，3.65(2H，m)，3.81(2H，m)， 4.35(1H，m)，4.68(1H，bs)，6.22(1H，s)，6.87(1H，m)，7.16(1H，t)，7.61(1H，m)，7.88(1H， m)，8.06(1H，m)，8.20(1H，m).質譜m/z＝501.22.
CC.4-(3-氟苯基)-2-吗啉-4-基-6-(4-(3-(三氟甲基)-吡啶-2-基)-哌 嗪-1-基)-嘧啶-5-甲腈
1.4-(3-氯苯基)-6-羟基-2-吗啉嘧啶-5-甲腈

氮气氛围下，使钠(230毫克，0.01摩尔)溶于无水EtOH(15毫升) 中。于反应混合物中添加吗啉-4-甲脒盐酸盐(2.1克，0.01摩尔)，于 室温搅拌30分钟。添加氰基乙酸乙酯(1.13克，0.1摩尔)与3-氯苯甲 醛(1.4克，0.01摩尔)至反应混合物中，于室温搅拌2小时。以水(50 毫升)稀释反应混合物，使用AcOH酸化至pH 5.0，过滤白色固体，真 空浓缩，得到标题产物。
2.4-氯-6-(3-氯苯基)-2-吗啉嘧啶-5-甲腈

氮气氛围下，使4-(3-氯苯基)-6-羟基-2-吗啉嘧啶-5-甲腈(1.75 克，0.0055摩尔)溶于POCl3(3.0毫升)中。添加N，N-二甲基苯胺(0.81 克，0.0067摩尔)，于90℃加热此混合物4小时，真空浓缩，以冰淬 息反应，以EtOAc(3×50毫升)萃取，以盐水洗涤并以MgSO4干燥。过 滤，真空蒸发，得到黄色油。此粗产物利用闪层析法予以纯化，得到 呈白色固体的标题产物。
3.4-(3-氟苯基)-2-吗啉-6-(4-(3-(三氟甲基)-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基)- 嘧啶-5-甲腈

氮气氛围下，使4-氯-6-(3-氯苯基)-2-吗啉嘧啶-5-甲腈(33.5毫 克，0.1毫摩尔)与1-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪(23毫克，0.1毫 摩尔)溶于CH3CN(1.0毫升)中。于此混合物中添加无水粉末状的 K2CO3(28毫克，0.2毫摩尔)，于80℃搅拌24小时。冷却，以水(5毫 升)稀释，以EtOAc(3×2毫升)萃取，及以MgSO4干燥。过滤，真空浓 缩，得到粗产物，利用闪层析法使用30％EtOAc/己烷予以纯化，得到 呈白色固体的标题产物。
NMR(DMSO-D6)δ3.30(4H，s)，3.62(4H，m)，3.80 (4H，s)，3.93(4H，s)，7.19(1H，m)，7.51(1H，m)，7.59(1H，m)，7.76(1H，m)，7.83(1H，s)， 8.07(1H，d，J＝2.0)，8.52(1H，d，J＝1.2).質譜m/z＝530.12.
DD.4-(3-氯-4-氟苯基)-2-吡啶-3-基-6-[4-(3-三氟甲基吡啶-2-基) 哌嗪-1-基]-嘧啶

于110℃，加热2-氯-4-(3-氯-4-氟-苯基)-6-[4-(3-三氟甲基吡 啶-2-基)-哌嗪-1-基]-嘧啶(47毫克，0.1毫摩尔)、3-三正丁基甲锡 烷基吡啶(92毫克，0.25毫摩尔)、Pd(PPh3)4(6毫克，0.005毫摩尔) 于甲苯(5毫升)中的混合物16小时。令其冷却至室温，滤除催化剂， 加水(5毫升)。以EtOAc萃取。干燥(Na2SO4)，予以蒸发。利用急骤层 析法(9∶1己烷类/EtOAc)进行纯化，得到呈茶色固体的纯4-(3-氯-4- 氟苯基)-2-吡啶-3-基-6-[4-(3-三氟甲基吡啶-2-基)哌嗪-1-基]-嘧 啶。
1H NMR(DMSO D6)： 9.75(s，1H).9.21(d，1H)，8.97(d，1H)，8.62(d，1H)，8.58(d，1H)，8.40(dd，1H)，8.19(d， 1H)，8.00(d，1H)，7.61(d，1H)，7.58(s，1H)，7.21(dd，1H)，4.01(br m，8H).
EE.3-{4-[6-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-甲基吡咯烷-1-基)-嘧啶-4-基]- 哌嗪-1-基}-4-甲基哒嗪

于120℃，加热4-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-甲基吡咯烷-1-基)-6- 哌嗪-1-基-嘧啶(125毫克，0.33毫摩尔)、3-氯-4-甲基哒嗪(43毫克， 0.33毫摩尔；见Takahayashi(1957)Chem.Pharm.Bull 5(3)：229)、 DIEA(85毫克，0.66毫摩尔)于DMA(5毫升)中的混合物16小时。令 其冷却至室温，加水(5毫升)。以EtOAc萃取(2×10毫升)，以水(3× 5毫升)洗涤，干燥(Na2SO4)，予以蒸发。利用管柱层析法(1∶1己烷类 /EtOAc)进行纯化，得到3-{4-[6-(3-氯-4-氟苯基)-2-(2-甲基吡咯烷 -1-基)-嘧啶-4-基]-哌嗪-1-基}-4-甲基哒嗪。
                     实例2
其它代表性二芳基哌嗪基-吡啶类似物的平行配置合成法
此实例说明2，4-双(二烷胺基)-6-芳基嘧啶类的制法。

以类似Kreutzberger(1987)Arzneimittel-Forschung 37(9)：999-1002叙述的方法制备2，4-二氯-6-[4-(3-三氟甲基-吡啶 -2-基)-哌嗪-1-基]-[1，3，5]三嗪。于含2，4-二氯-6-[4-(3-三氟甲基- 吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-[1，3，5]三嗪(0.2M的二恶烷溶液，0.1毫升) 与仲胺(0.2M的甲苯溶液，0.1毫升)的小瓶中，添加K3PO4(0.5M的水 溶液，0.05毫升)。于60℃，在方形加热器-振荡机中加热该小瓶30 分钟。冷却至室温，添加芳基硼酸(0.2M的二恶烷溶液，0.15毫升)及 另一份K3PO4(0.5M的水溶液，0.05毫升)。以氩气充填该小瓶，添加 Pd(PPh3)4(0.01M的甲苯溶液，0.05毫升)。于80℃加热此混合物16 小时，冷却，以EtOAc(0.5毫升)稀释，直接装填于SCX匣上。以EtOAc(4毫升)洗涤，随后以10％Et3N的EtOAc溶液洗脱。浓缩洗脱液，以 定量收率得到实质上很纯的产物(利用LC/MS)。
                         实例3
             其它代表性二芳基哌嗪基-吡啶类似物
运用例行修饰法下，起始物质可进行各种变化，亦可使用其它步 骤来产生本文提供的其它化合物。表I及II所列的化合物即系使用该 等方法制备。表I所列的所有化合物具有1微摩尔浓度或1微摩尔浓 度以下的IC50(如本文实例6所述测定)。至于表II所列的化合物，标 明「IC50」的栏中的「*」表示如实例6所述测定的IC50为1微摩尔或1 微摩尔以下。表I中的质谱分析数据(标明「MS」的栏)系使用上文方 法B获得，以M+1呈现。表II中的MS数据系如所示，使用上文方法A 或方法B获得。表II所示滞留时间单位为分钟。
                           表I
                代表性的二芳哌嗪基-吡啶类似物































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                               Table II

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                         实例4
                 VR1转染细胞与细胞膜制剂
本实例说明供辣椒素结合试验(实例5)用之VR1转染细胞与含VR1的细胞 膜制剂之制备。
将编码全长人类辣椒素受体之cDNA(美国专利案6,482,611之SEQ ID NO：1、2或3)于质体pBK-CMV(Stratagene，La Jolla，CA)中次选殖，以于哺 乳细胞中重组表现。
使用标准方法，以编码全长人类辣椒素受体之pBK-CMV表现构筑体转染人 类胚胎肾(HEK293)细胞。于含G418(400微克/毫升)之培养基中挑选转染细胞 2周，以获得稳定之转染细胞群。利用限制稀释法，自此细胞群中将独立选殖株 单离，得到选殖稳定细胞株，供随后实验用。
供放射配位体结合实验时，将细胞接种至T175细胞培养瓶之无抗生素培 养基中，培养至达大约90％全面生长。然后以PBS洗涤培养瓶，收集于含5mM EDTA 之PBS中。轻微离心使细胞沉淀，至进行试验前，将其贮存于-80℃。
藉组织均质机之助，于冰冷的HEPES均质化缓冲液(5mM KCl 5、5.8mM NaCl、 0.75mM CaCl2、2mM MgCl-2、320mM蔗糖、及10mM HEPES pH7.4)中，使先前冻 结之细胞瓦解。先于1000xg(4℃)将组织均质物离心10分钟，以去除核部分 及碎屑，再将第一次离心之上澄液于35,000xg(4℃)进一步离心30分钟，得 到部分纯化之细胞膜部分。进行试验前，使细胞膜再悬浮于HEPES均质化缓冲 液中。取部分此膜均质物经由Bradford方法(BIO-RAD Protein Assay Kit， #500-0001，BIO-RAD，Hercules，CA)测定蛋白质浓度。
实例5
辣椒素受体结合试验
本实例说明辣椒素受体结合之代表性试验，其可用于测定化合物对辣椒素 (VR1)受体之结合亲和力。
使用[3H]产树脂毒素(RTX)之结合研究实质上系如Szallasi and Blumberg (1992)J.Pharmacol.Exp.Ter.262：883-888所述进行。此实验流程中，结 合反应终止后，利用添加牛α1酸醣蛋白(每管100微克)，减少非专一性RTX结 合。
[3H]RTX(37Ci/毫莫耳)系由Chemical Synthesis and Analysis Laboratory，National Cancer Institute-Frederick Cancer Research and Development Center，Frederick，MD合成获得。[3H]RTX亦为市售可得(例如， Amersham Pharmacia Biotech，Inc.；Piscataway，NJ)。
如前述，将实例4之膜均质物离心，并再悬浮于均质化缓冲液中至蛋白质 浓度为333微克/毫升。将含[3H]RTX(比活性2200 mCi/毫升)、2微升无放射 活性测试化合物、0.25毫克/毫升牛血清白蛋白(Cohn fraction V)、与5×104至 1×105个VR1转染细胞之结合试验混合物安置于冰上。以上述冰冷HEPES均质化 缓冲液(pH7.4)调整最终容积至500微升(供竞争性结合试验用)或1,000微升 (供饱和性结合试验用)。非专一性结合系界定为发生于1μM无放射活性 RTX(Alexis Corp.；San Diego，CA)存在下之结合。进行饱和性结合时，系使 用1至2次稀释，添加浓度范围为7至1,000pM之[3H]RTX。每条饱和结合曲 线典型地收集11个浓度点。
竞争性结合试验系于60pM[3H]RTX与各种浓度测试化合物存在下进行。 将试验混合物移入37℃水浴中以激活结合反应，经60分钟培育期后，利用于冰 上冷却诸管终止反应。于使用前以1.0％PEI(聚乙烯亚胺)预浸2小时之WALLAC 玻璃纤维滤器(PERKIN-ELMER，Gaithersburg，MD)上进行过滤，使结合细胞膜 之RTX与游离、以及结合α1酸醣蛋白之任何RTX分离。令滤器干燥隔夜，接着 于添加WALLAC BETA SCINT闪烁液后，在WALLAC 1205 BETA PLATE计数器中计 数。
如Szallasi，et al.(1993)J.Pharmacol.Exp.Ther.266：678-683 所述，借助计算机程序FIT P(Biosoft，Ferguson，MO)，将测定值带入异位性 Hill等式中以试合(fit)平衡结合参数。于此试验中，本文提供之化合物通常展 现小于
1μM、100nM、50nM、25nM、10nM、或1nM之对辣椒素受体之Ki值。
实例6
钙移动试验
本实例说明用于评估测试化合物的促效剂及拮抗剂活性之代表性钙移动 试验。
将转染表现质体(如实例4所述)因而表现人类辣椒素受体之细胞接种于 FALCON黑色壁、透明底之96槽培养盘(#3904，BECTON-DICKINSON，Franklin Lakes，NJ)，培养至达70至90％全面生长。倒空该等96槽盘之培养基，于各槽 添加FLUO-3 AM钙敏感染料(Molecular Probes，Eugene，OR)(染料溶液：于DMSO 中之1毫克FLUO-3AM、440微升DMSO及440微升20％普洛尼酸(pluronic acid)， 在Krebs-Ringer HEPES(KRH)缓冲液(25mM HEPES、5mM KCl、0.96mM NaH2PO4、 1mM MgSO4、2mM CaCl2、5mM葡萄糖、1mM丙磺舒、pH7.4)中进行1∶250之 稀释，每槽50微升)。以铝箔覆盖培养盘，于37℃、含5％CO2之环境下，培养 1至2小时。然后，倒空培养盘之染液，以KRH缓冲液洗涤细胞一次，使其再悬 浮于KRH缓冲液中。
测定辣椒素EC50
欲测定测试化合物在表现辣椒素受体的细胞中对辣椒素或其它香草精类 促效剂之促进或拮抗钙移动反应的能力，需先测定促效剂辣椒素之EC50值。于如 前述制备之各细胞槽中，添加另外20微升KRH缓冲液与1微升DMSO。利用FLIPR 仪器将100微升溶于KRH缓冲液中之辣椒素自动移入各槽。使用FLUOROSKAN ASCENT(Labsystems；Franklin，MA)或FLIPR(萤光成像盘读取系统；Molecular Devices，Sunnyvale，CA)仪器侦测辣椒素诱发之钙移动。使用施加促效剂后30 至60秒间所得数据来产生8点浓度反应曲线，最终辣椒素浓度为1nM至3μM。 使用KALEIDAGRAPH软件(Synergy Software，Reading，PA)，将数据试合于下 文方程式中：
y＝a*(1/(1+(b/x)c))
以测定反应之50％刺激性浓度(EC50)。此方程式中，y为最大萤光讯号，x为促效 剂或拮抗剂(此情形下，为辣椒素)浓度，a为Emax，b为对应之EC50值及c为Hill 常数。
促效剂活性之测定
使测试化合物溶于DMSO中，以KRH缓冲液稀释后，随即添加于如上述制 备之细胞中。在相同96槽盘中亦添加100nM辣椒素(接近EC90浓度)作为正对照 组。试验槽中测试化合物之最终浓度介于0.1nM与5μM间。
测试化合物作为辣椒素受体促效剂用的能力系利用测量表现辣椒素受体 的细胞被化合物以化合物浓度为函数诱发之萤光反应予以测定。如上述，将此 数据试合于方程式中获得EC50，此值通常小于1微莫耳浓度，较佳为小于100nM， 更佳为小于10nM。各测试化合物的效力程度亦可利用计算由测试化合物浓度(典 型地为1μM)诱发的反应与由100nM辣椒素诱发的反应之相对量予以测定。此 值，称为讯号百分比(POS)，系利用下文方程式计算：
POS＝100*测试化合物反应/100nM辣椒素反应
此分析提供测试化合物作为人类辣椒素受体促效剂的潜能与效力之定量 评估。人类辣椒素受体促效剂通常于小于100μM之浓度，或较佳为于小于1μM 之浓度或最佳为于小于10nM之浓度，诱发可检测之反应。对人类辣椒素受体 的效力程度，于1μM浓度，较佳为大于30POS，更佳为大于80POS。在下文 叙述之试验中，于低于4nM之化合物浓度，更佳为低于10μM之浓度，最佳为 于小于或等于100μM之浓度下，特定促效剂不存在可检测之拮抗剂活性，证实 其实质上不具拮抗剂活性。
拮抗剂活性之测定
使测试化合物溶于DMSO中，以20微升KRH缓冲液稀释，使测试化合物于 试验槽中之最终浓度介于1μM与5μM之间，并添加至如上述制备之细胞中。 室温下，于暗处及室温下培育含制备细胞与测试化合物之该等96槽盘0.5至6 小时。重要的是此培育不可持续6小时以上。正要测定萤光反应之前，于96槽 盘之各槽，利用FLIPR仪器自动添加两倍如上述测定的EC50浓度之于KRH缓冲液 中之100微升辣椒素，使最终试样容积为200微升及最终辣椒素浓度等于EC50。 试验槽中测试化合物之最终浓度介于1μM与5μM之间。相较于相配之对照组 (亦即，测试化合物不存在下，以两倍EC50浓度之辣椒素处理细胞)，于10微莫 耳或更小之浓度，较佳为1微莫耳或更小之浓度下，辣椒素受体之拮抗剂此反 应降低至少约20％，较佳为至少约50％，最佳为至少80％。相对于存在辣椒素而 无拮抗剂下观察到的反应，需要提供50％降低的拮抗剂之浓度，亦即该拮抗剂之 EC50，较佳为低于1微莫耳浓度、100奈莫耳浓度、10奈莫耳浓度或1奈莫耳浓 度。
特定较佳之VR1调节剂为在上文叙述之试验中，于低于4nM之化合物浓度， 更佳为低于10μM之浓度，最佳为于小于或等于100μM之浓度下，不存在可检 测的促效剂活性，证实其实质上不具促效剂活性之拮抗剂。
实例7
试管内微粒体半衰期
本实例说明使用代表性肝脏微粒体半衰期试验来评估化合物半衰期值(t1/2 值)。
群集之人类肝脏微粒体系得自XenoTech LLC(Kansas City，KS)，亦可得 自In Vitro Technologies(Baltimore，MD)或Tissue Transformation Technologies(Edison，NJ)。制备六个测试反应，各含25微升微粒体、5微升 测试化合物之100μM溶液、及399微升0.1M磷酸盐缓冲液(19毫升0.1M NaH2PO4、81毫升0.1M Na2HPO4、以H3PO4调至pH7.4)。第七个反应系制备为含 25微升微粒体、399微升0.1M磷酸盐缓冲液、及5微升已知代谢性质的化合 物(例如，DIAZEPAM或CLOZAPINE)之100μM溶液之正对照组。于39℃预培育诸 反应10分钟。
于4毫升100mM MgCl2中稀释16.2毫克NADP与45.4毫克葡萄糖-6-磷酸 盐，制备共因子混合物。于1285.7微升蒸馏水中稀释214.3微升葡萄糖-6-磷 酸盐脱氢悬浮物(Roche Molecular Biochemicals；Indianapolis，IN)，制 备葡萄糖-6-磷酸盐脱氢溶液。添加激活反应混合物(3毫升共因子混合物；1.2 毫升葡萄糖-6-磷酸盐脱氢溶液)至6个测试反应中的5个，及添加于正对照 组中。添加71微升100mM MgCl2至第6个测试反应中，作为负对照组用。于每 一时间点(0、1、3、5及10分钟)，以移液管将75微升各反应混合物移入含75 微升冰冷乙之96槽深槽盘之槽中。旋荡诸试样，于3500rpm离心10分钟 (Sorval T6000D离心机，H1000B旋转片)。将得自各反应之75微升上澄液移 入每槽含150微升具有已知LCMS性质(内标准)的化合物之0.5μM溶液的96槽 盘槽中。进行各试样之LCMS分析，未代谢的测试化合物之量测定为AUC，以化 合物浓度对时间作图，外推获得测试化合物之t1/2值。
本文提供之较佳化合物展现大于10分钟至小于4小时，较佳为介于30分 钟与1小时之间之人类肝微粒体之试管内t1/2值。
实例8
MDCK毒性试验
本实例说明使用Madin Darby狗肾(MDCK)细胞胞毒试验来评估化合物毒 性。
添加1微升测试化合物至透明底96槽盘(PACKARD，Meriden，CT)之各槽， 使此试验中化合物之最终浓度为10、100或200微莫耳浓度。对照槽中添加不 含测试化合物之溶剂。
根据ATCC(American Type Culture Collection，Manassas，VA)产品信息 表指示，使MDCK细胞，ATCC编号CCL-34，维持于无菌状态。以胰蛋白  分解 全面生长之MDCK细胞，收取，并以温的(37℃)培养基(VITACWLL Minimum Essential Medium Eagle，ATCC目录#30-2003)稀释至浓度为0.1×106个细胞/ 毫升。添加100微升稀释细胞至各槽，惟含100微升温培养基而不含细胞的五 个标准曲线对照槽除外。接着于37℃，95％O2、5％CO2及持续振荡下，培育培养 盘2小时。然后，每槽添加50微升哺乳细胞溶胞液(得自PACKARD(Meriden， CT)ATP-LITE-M Luminescent ATP检测套组)，以PACKARD TOPSEAL贴片覆盖诸 槽，于适当振荡器上，大约700rpm下，振荡诸盘2分钟。
相对于未经处理之细胞，引致毒性的化合物会降低ATP产生。一般系根据 厂商指示使用ATP-LITE-M Luminescent ATP检测套组，测定处理及未处理的MDCK 细胞之ATP产生。令PACKARD ATP-LITE-M试剂于室温达平衡，一旦平衡后，于 5.5毫升基质缓冲液(得自套组)中使冻干之基质溶液再生。冻干的ATP标准溶液 系于脱离子水中再生，得到10mM贮液。针对五个对照槽，添加10微升经系列 稀释之PACKARD标准至各标准曲线对照槽，获得各相继槽200nM、100nM、50nM、 25nM及12.5nM之最终浓度。于所有槽中添加PACKARD基质溶液(50微升)， 然后加以覆盖，于适当振荡器上，大约700rpm下，振荡诸盘2分钟。于各盘 底部粘贴白色PACKARD贴片，培养盘以铝箔包起，置于暗处10分钟，使试样适 应暗处。然后使用放光计数器(例如，PACKARD TOPCOUNT Microplate Scintillation and Luminescence Counter或TECAN SPECTRAFLUOR PLUS)测量 放光，以标准曲线计算ATP量。进行以测试化合物处理的细胞之ATP量及未处 理细胞测得量之比较。以10μM较佳测试化合物处理之细胞展现未处理细胞之 至少80％，较佳为至少90％之ATP量。于使用100μM测试化合物浓度时，以较 佳测试化合物处理之细胞展现于未处理细胞中检测的ATP量之至少50％，较佳为 至少80％之ATP量。
实例9
背根神经节细胞试验
本实例说明用于评估化合物的VR1拮抗剂或促效剂活性之代表性背根神经 节细胞试验。
使用标准方法(Aguayo and White(1992)Brain Research 570：61-67)自 初生大鼠解剖DRG、解离并培养。经48小时培育后，洗涤细胞一次，与钙敏感 染料Fluo 4 AM(2.5至10微克/毫升；TefLabs，Austin，TX)一起培育30至 60分钟。再洗涤细胞一次。添加辣椒素于细胞将造成依赖VR1之细胞内钙量之 增加，其可藉由使用萤光计之Fluo-4萤光变化予以侦测。收集60至180秒之 数据，以测定最大萤光讯号。
进行拮抗剂试验时，添加各种浓度的化合物至细胞中。然后以化合物浓度 为函数，针对萤光讯号作图，以鉴定达到辣椒素活化反应之50％抑制作用需要的 浓度，或IC50。辣椒素受体之拮抗剂较佳为具有1微莫耳浓度、100奈莫耳浓度、 10奈莫耳浓度或1奈莫耳浓度以下之IC50。
进行促效剂试验时，添加各种浓度的化合物至细胞中而不添加辣椒素。为 辣椒素受体促效剂之化合物将造成依赖VR1之细胞内钙量之增加，其可藉由使 用萤光计之Fluo-4萤光变化予以侦测。EC50，或达到辣椒素活化反应之50％最大 讯号需要的浓度，较好在1微莫耳以下、100奈莫耳以下或10奈莫耳以下。
实例10
测定疼痛舒缓之动物模式
本实例说明评估由化合物提供的疼痛舒缓程度之代表性方法。
A.疼痛舒缓测试
下述方法可用于评估疼痛舒缓。
机械式触痛
机械式触痛(对无害刺激之异常反应)实质上系如Chaplan et al.(1994)J. Neurosci.Methods 53：55-63及Tal and Eliav(1998)Pain 64(3)：511-518 所述予以评估。施加不同坚硬度的一系列von Frey细丝(典型地一系列为8至 14根细丝)于后脚脚底表面，其力道刚好使细丝弯曲。使细丝保持此位置不超过 三秒或至大鼠表现正触痛反应为止。正触痛反应包括举起受影响的脚，随即予 以舔舐或抖动。使用Dixon上下法测定个别细丝施加的顺序与频率。从该系列 中央毛发开始进行测试，视启始细丝系获得负或正反应而分别决定施加于下一 细丝之连贯方式，上升或下降。
如果相较于未处理或以载体处理的大鼠，以化合物处理的大鼠需要较高坚 硬强度之von Frey细丝来激发正触痛反应，表示该等化合可有效地逆转或预防 似机械触痛之症状。或者，此外，可于投与化合物之前或之后，进行动物慢性 疼痛之试验。于此等试验中，相较于处理前诱发反应之细丝或同样处于慢性疼 痛惟未予以处理或以载体处理的动物，有效力的化合物将造成需用于诱发处理 后反应的细丝坚硬度之增加。测试化合物于疼痛发作之前或之后投与。于疼痛 发作之后投与测试化合物时，系于投与后10分钟至三小时进行测试。
机械式痛觉过敏
机械式痛觉过敏(对疼痛刺激之过大反应)实质上系如Koch et al.(1996) Analgesia 2(3)：157-164所述予以测试。将大鼠置于具有温暖、有洞的金属地 板的笼子之个别区间内。对其任一后脚脚底表面进行轻微的针刺后，测量其后 脚退缩的持久性(亦即，动物将其后脚放回地板之前，维持举脚之时间量)。
若后脚退缩的持久性于统计学上显著地降低，表示化合物产生减少之机械 式痛觉过敏。测试化合物可于疼痛发作之前或之后投与。于疼痛发作之后投与 化合物时，系于投与后10分钟至三小时进行测试。
对热之痛觉过敏
对热之痛觉过敏(对有害热刺激之过大反应)实质上系如Hargreaves et al. (1998)Pain 32(1)：77-88所述予以测定。简言之，系施加固定的辐射热源于动 物任一后脚脚底表面。其退缩时间(亦即，于动物移动其脚掌之前，施加热之时 间量)，或者叙述为加热底限或潜伏期，决定动物后脚掌对热的敏感性。
若后脚退缩的时间于统计学上显著地增加(亦即，对反应之加热底限或潜 伏期增加)，表示化合物产生减少之对热之痛觉过敏。测试化合物可于疼痛发作 之前或之后投与。于疼痛发作之后投与化合物时，系于投与后10分钟至三小时 进行测试。
B.疼痛模式
可使用下述任何方法诱发疼痛，以提供化合物止痛效力之测试。一般而言， 如使用SD公大鼠及至少一种下文模式之前述至少一种测试方法所测定，本文提 供之化合物产生于统计学上显著之疼痛减少。
急性炎性疼痛模式
实质上如Field et al.(1997)Br.J.Pharmacol.121(8)：1513-1522 所述，使用鹿角菜胶模式诱发急性炎性疼痛。将100至200微升1至2％鹿角菜 胶溶液注射入大鼠后脚掌，三至四小时后，使用上述方法测试动物对热及机械 式刺激之敏感性。于测试之前，或于注射鹿角菜胶之前，投与动物测试化合物 (0.01至50毫克/公斤)，投与方式可为经口或经由任何非经肠途径，或局部投 与至脚掌上。舒缓此模式疼痛之化合物产生于统计学上显著之机械式触痛及/或 对热痛觉过敏减少。
慢性炎性疼痛模式
使用下述实验流程之一者诱发慢性炎性疼痛模式：
1.实质上如Bertorelli et al.(1999)Br.J.Pharmacol.128(6)：1252-1258， 及Stein et al.(1998)Pharmacol.Biochem.Behav.31(2)：455-51所述， 将200微升完全佛氏佐剂(Complete Freund’s Adjuvant)(0.1毫克加热杀 死及干燥之肺结核杆菌(M.tuberculosis))注射入大鼠后脚：100微升注入 脚背，100微升注入脚底。
2.实质上如Abbadie et al.(1994)J Neurosci.14(10)：5865-5871所述， 以150微升CFA(1.5毫克)注入大鼠胫骨与跖之关节处。
各实验流程中，于注射CFA之前，针对各实验动物建立其后脚对机械式及 热刺激的敏感性之个别基线。
注射CFA之后，如上述测试大鼠之热痛觉过敏、机械式触痛及机械式痛觉 过敏反应。为了证实症状的进展，于注射CFA后第5、6与7天对大鼠进行测试。 第7天，以测试化合物、吗啡或载体处理动物。适当地以1至5毫克/公斤之吗 啡口服剂量作为正对照组。典型地，系使用0.01至50毫克/公斤之测试化合物 剂量。化合物可呈单一丸剂于测试前投与，或于测试前几天，每天投与一、二 或三次。药物可经口或经由任何非经肠途径投与，或局部施加于动物。
结果以最大潜在效力百分比(MPE)表示。0％MPE界定为载体之止痛效果， 100％MPE界定为动物回到注射CFA前之基线敏感性。舒缓此模式疼痛之化合物 产生至少30％之MPE。
慢性神经性疼痛模式
实质上如Bennett and Xie(1988)Pain33：87-107所述，对大鼠臀部神 经施用不断的压缩伤害(CCI)，诱发慢性神经性疼痛。将大鼠麻醉(例如，使用 50至65毫克/公斤戊巴比妥之腹膜内剂量，需要时投与额外剂量)，剃去各后肢 侧面的毛并消毒。使用无菌技术，从后肢侧面大腿中央切开。直率地解剖股二 头肌，使坐骨神经暴露出来。于各动物之一后肢上，在坐骨神经附近相隔1至2 毫米以结扎线打四个宽松的结；另一侧的坐骨神经不打结也不进行操作。以连 续范型使肌肉闭合，皮肤则以伤口夹或缝线闭合。如上述评估大鼠的机械式触 痛、机械式痛觉过敏及对热之痛觉过敏。
舒缓此模式疼痛之化合物于呈单一丸剂在正要进行测试前投与(0.01至50 毫克/公斤，经口、非经肠或局部投与)或于测试前几天，每天投与一、二或三 次时，产生于统计学上显著之机械式触痛、机械式痛觉过敏及/或对热痛觉过敏 减少。