用于治疗与炎症相关的疾病的去乙基羟氯喹
阅读：338发布：2020-09-01
专利汇可以提供用于治疗与炎症相关的疾病的去乙基羟氯喹专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了用于通过施用有效剂量的去乙基羟氯喹(DHCQ)来抑制或 治疗 早期和确立阶段的炎性 疾病 的组合物和方法。所述方法的一个益处是能够传递可有效治疗 炎症 ，同时使个体免于发生 视网膜 毒性反应的药剂剂量。，下面是用于治疗与炎症相关的疾病的去乙基羟氯喹专利的具体信息内容。
1.一种治疗炎性疾病或与炎症相关的疾病的方法，其包括：
向有此需要的患者施用包含有效剂量的DHCQ或其药学上可接受的盐或酯的药物组合物。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述有此需要的患者是处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下的患者。
3.如权利要求1所述的方法，其中所述有此需要的患者是处在视网膜毒性的较高风险之下的患者。
4.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是选自多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、自身免疫性肝病、骨关节炎、阿尔茨海默病、黄斑变性、II型糖尿病、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、代谢综合征、人类免疫缺陷病毒感染、丙型肝炎病毒感染、巨细胞病毒感染、脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝病、抗胰岛素性、高脂血症，以及其组合。
5.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述施用是口服。
6.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述施用提供超过约1000g的累积DHCQ剂量。
7.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是自身免疫疾病。
8.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是退化性疾病。
9.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎性疾病相关的疾病是代谢疾病。
10.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎性疾病相关的疾病是慢性感染。
11.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是非酒精性脂肪性肝炎。
12.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是红斑狼疮。
13.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是类风湿性关节炎。
14.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述炎性疾病或与炎症相关的疾病是II型糖尿病。
15.如权利要求2所述的方法，其中所述患者展现一个或多个异常炎症指标。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述异常炎症指标是代谢指标，并且所述异常代谢指标是选自：约140/90mmHg或更高的血压、约1.7mmol/L或更高的血浆甘油三酯水平、在男性中约0.9mmol/L或更低以及在女性中约1.0mmol/L或更低的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、约20μg/min或更高的微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率或约30mg/g或更高的白蛋白:肌酐比率、超过约100mg/dL的空腹血糖、超过约200的餐后2小时血糖或超过约6.5mg/dL的血红蛋白A1c。
17.如权利要求15所述的方法，其中所述一个或多个异常炎症指标是选自：异常水平的C反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、血清淀粉样蛋白P、纤维蛋白原、细胞因子、抗体、DNA序列、RNA序列或其组合。
18.如权利要求15所述的方法，其中所述异常炎症指标是临床指标，并且所述异常临床指标是选自：在体格检查中有肿胀或压痛，或其组合。
19.如权利要求16所述的方法，其中所述异常炎症指标是影像指标，并且所述异常影像指标是选自使用磁共振成像、超声波、计算机断层摄影术、血管造影术或放射性核苷酸成像测得的影像学表现。
20.如权利要求1、2或3所述的方法，其中对所述患者施用所述药物组合物持续至少1年。
21.如权利要求1、2或3所述的方法，其中对所述患者施用所述药物组合物持续至少5年。
22.如权利要求1、2或3所述的方法，其中对所述患者施用所述药物组合物持续至少
10年。
23.如权利要求1所述的方法，其还包括：
测量所述患者的至少一个炎症指标或代谢指标；
将在所述患者中测得的所述炎症指标或代谢指标的水平与在健康个体中测得的所述炎症指标或代谢指标的水平相比较以确定所述炎症指标或代谢指标是否异常；
如果所述炎症指标或所述代谢指标异常，则向所述患者经口施用包含DHCQ的药物组合物。
24.如权利要求23所述的方法，其中所述测量是测量代谢指标。
25.如权利要求23所述的方法，其中所述测量是测量炎症指标。
26.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述药物组合物还包含他汀类药物。
27.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述施用包括每天施用50-1600mgDHCQ。
28.如权利要求1所述的方法，其中在治疗的最初1至16周内向所述患者施用的DHCQ的每日用量比后来施用的DHCQ的每日用量要高至少约50％。
29.如权利要求20所述的方法，其还包括眼科监测，其中推荐在7年后进行所述监测。
30.如权利要求20所述的方法，其还包括眼科监测，其中推荐按每2年的时间间隔进行所述监测。
31.一种药物组合物，其包含约550mg或更多DHCQ。
32.一种药物组合物，其包含DHCQ与他汀类药物的组合。
33.如权利要求32所述的药物组合物，其中所述他汀类药物是阿托伐他汀。
用于治疗与炎症相关的疾病的去乙基羟氯喹
[0001] 政府权利
[0002] 本发明是按照由国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的合同号AI069160和HV000242，在政府支持下实现的。政府享有本发明的某些权利。
技术领域
[0003] 在各个实施方案中，本发明涉及包含去乙基羟氯喹(DHCQ)的组合物以及用所述组合物预防和治疗炎性疾病或与炎症相关的疾病的方法。炎性疾病或与炎症相关的疾病包括自身免疫疾病、退化性疾病、代谢疾病、心血管疾病、慢性感染和恶性疾病。在其他实施方案中，本发明涉及预防或治疗所述炎性疾病或与炎症相关的疾病，包括在患上所述疾病的风险较高的个体中防止疾病发作、在处于所述疾病早期阶段的个体中防止疾病进展以及治疗确立疾病。
背景技术
[0004] 炎症促成例如以下的炎性疾病或与炎症相关的疾病的发病机制：自身免疫疾病，包括类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、多发性硬化(MS)和自身免疫性肝病；具有炎症组分的退化性疾病，例如骨关节炎(OA)、阿尔茨海默病(AD)和黄斑变性；慢性感染，例如HIV；具有炎症组分的代谢疾病，例如II型糖尿病、代谢综合征和动脉粥样硬化；以及恶性疾病，包括癌症。使用包括羟氯喹(HCQ)的氨基喹啉作为消炎剂来治疗某些炎性疾病。
[0005] 氨基喹啉为喹啉衍生物，其因作为抗疟疾药物的作用而最引人注意，而且它们还具有消炎特性。氨基喹啉类别的药物的实例包括(但不限于)4-氨基喹啉，例如阿莫地喹、羟氯喹(HCQ)、氯喹；以及8-氨基喹啉，例如伯氨喹和帕马喹。4-氨基喹啉是在喹啉的4位上具有氨基的一种氨基喹啉形式。多种4-氨基喹啉衍生物为抗疟疾剂，并且实例包括阿莫地喹、氯喹和HCQ。
[0006] 4-氨基喹啉HCQ最初是呈羟氯喹硫酸盐(HCQ硫酸盐)形式研制而成，来用作抗疟TM TM TM TM疾药物。羟氯喹硫酸盐是以商标名Plaquenil 、Axemal (在印度)、Dolquine 和Quensyl出售，并且还被广泛用于在治疗系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肖格伦综合征和迟发性皮肤卟啉症时减轻炎症。HCQ与氯喹的区别是在侧链末端具有羟基。N-乙基取代基已被β羟基化。它可用于以羟氯喹硫酸盐(Plaquenil)形式口服使用，其中200mg含有155mg呈手性形式的羟氯喹碱。除了155mg羟氯喹碱以外，各Plaquenil片剂还含有以下非活性成分：硫酸盐(SO4)、无水乳糖、交联羧甲基纤维素钠、三乙酸甘油酯、羟丙甲纤维素、硬脂酸镁、微晶纤维素、聚右旋糖、聚乙二醇、聚维酮、十二烷基硫酸钠以及二氧化钛。羟氯喹硫酸盐具有类似于氯喹磷酸盐的药效动力学性质：被胃肠道快速吸收并且经由肾脏清除。细胞色素P450酶(CYP 2D6、2C8、3A4和3A5)使HCQ发生N-去乙基化，使其成为N-去乙基羟氯喹(Kalia等,(2007)Dermatologic Therapy 20(4):160-174)。
[0007] 对于HCQ疗法，最常见的不良反应是轻微恶心，并且偶尔有胃痉挛现象，伴随轻度腹泻。最严重的不良反应是影响眼睛。长期使用HCQ产生的最严重的副作用之一是眼部和视网膜毒性(Flach.Transactions of the American Ophthalmological Society,2007,105:191-4；discussion 195-7)。
[0008] 长期使用HCQ、氯喹或其他氨基喹啉会伴随眼部毒性的发展(Marmor等 ,Arthritis Care Res.2010；62(6):775-84；Levy 等 ,Incidence of
hydroxychloroquine retinopathy in 1,207patients in a large multicenter outpatient practice.Arthritis Rheumatism 1997,40(8):1482-6；Mavrikakis等,The incidence of irreversible retinal toxicity in patients treated with hydroxychloroquine:a reappraisal.Opthalmology,2003,110(7):1321-6)。此类毒性的发生率随着治疗时间的增加而显著增加，并且用HCQ硫酸盐治疗的人在5年后约0.5-1％具有视网膜色素上皮的检眼镜可视化损失；且用HCQ硫酸盐治疗的人在10-15年后则为约
2％。对氯喹观测到相当较高的毒性率。值得注意的是，尽管观测到视网膜毒性率，但是用HCQ硫酸盐治疗的患者在5年中因为早期眼睛问题(包括在眼科检查时注意到的无症状变化)而导致的医生对HCQ的总体停药率接近7％(Marmor等,Rates and predictors of hydroxychloroquine retinal toxicity in patients with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus,Arthritis Care Res.2010；62(6):775-84)。
hydroxychloroquine retinopathy in 1,207patients in a large multicenter outpatient practice.Arthritis Rheumatism 1997,40(8):1482-6；Mavrikakis等,The incidence of irreversible retinal toxicity in patients treated with hydroxychloroquine:a reappraisal.Opthalmology,2003,110(7):1321-6)。此类毒性的发生率随着治疗时间的增加而显著增加，并且用HCQ硫酸盐治疗的人在5年后约0.5-1％具有视网膜色素上皮的检眼镜可视化损失；且用HCQ硫酸盐治疗的人在10-15年后则为约
2％。对氯喹观测到相当较高的毒性率。值得注意的是，尽管观测到视网膜毒性率，但是用HCQ硫酸盐治疗的患者在5年中因为早期眼睛问题(包括在眼科检查时注意到的无症状变化)而导致的医生对HCQ的总体停药率接近7％(Marmor等,Rates and predictors of hydroxychloroquine retinal toxicity in patients with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus,Arthritis Care Res.2010；62(6):775-84)。
[0009] 由HCQ所致的毒性会出现在眼睛的两个不同区域：角膜和黄斑。角膜会(相对经常地)受特征在于具有涡旋样角膜上皮沉积物的无害旋涡状角膜病变影响。黄斑(视网膜的一种组分)的变化更为严重并且与HCQ使用的剂量和持续时间相关。晚期视网膜病变的特征在于视觉敏锐度降低以及“牛眼”黄斑病变，后者在较为早期的阶段不存在。牛眼黄斑病变和/或旁中心暗点为HCQ视网膜病变的临床特征。
[0010] 黄斑视网膜毒性与总累积剂量有关。每天摄入400mg HCQ S04或更少剂量的人通常具有更低的黄斑视网膜毒性风险，并且当一个人摄入药物超过5年或摄入超过1000克的累积剂量时风险增加，并且在每天400mg HCQ硫酸盐的剂量下，在给药7年时达到1000克的累积剂量(每天400mg HCQ硫酸盐×365天/年×7年＝1022克HCQ硫酸盐)(Wolfe和Marmor,Rates and Predictors of Hydroxychloroquine Retinal Toxicity in Patients with Rheumatoid Arthritis and Systemic Lupus Erythematosus,Arthritis Care and Research,2010,62(6):775-784；Marmor等,(2011)Ophthalmology 118(2):415-22)。发现在使用7年或总暴露为1000克之后视网膜毒性的风险高5倍(Marmor等,Arthritis Care Res.2010；62(6):775-84)。当存在这些风险因素中的任一种时，甚至在不存在可见症状的情况下，也建议开始常规眼睛筛查(Marmor等,(2011)Ophthalmology 118(2):415-22)。在一项对3,995位用HCQ硫酸盐治疗的类风湿性关节炎或系统性红斑狼疮患者的研究中，每年在50.5％的患者中并且每6个月在40.4％的患者中获得眼睛检查结果以监测HCQ毒性(Marmor等,Arthritis Care Res.2010；62(6):775-84)。
[0011] HCQ诱导的视网膜毒性(包括视网膜黄斑毒性)潜在的确切机制尚不清楚。迄今为止的研究已确定视网膜HCQ累积达到比在其他组织中和在血液中观测到的高得多的水平。此外，HCQ结合于视网膜色素上皮(RPE)中的黑色素，并且这种结合可能促成或延长HCQ的毒性效应。一些研究已证实氯喹与HCQ均与脂褐质形成增加有关，脂褐质形成是一种已知在自体/异体吞噬材料降解期间由增加的溶酶体pH值和溶酶体内氧化加速的过程(Sundelin等 ,APMIS[Acta Pathologica,Microbiologica Immunologica Scandinavica].2002；
110(6):481-9)。发现表明氯喹阻断自噬体与溶酶体的连接，从而引起在视网膜色素上皮细胞中脂褐质和持久性氯喹和其他氨基喹啉的累积(Yoon等,Induction of lysosomal dilatation,arrested autophagy,and cell death by chloroquine in cultured ARPE-19 cells,Invest Ophthalmol Vis Sci.2010,51(11):6030-7)。另外，因为RPE内的黑色素在中和氧化自由基中起作用，所以已表明过度水平的此类自由基的存在可能促成HCQ诱导的视网膜毒性的发病机制(Sundelin等,APMIS.2002；110(6):481-9)。
110(6):481-9)。发现表明氯喹阻断自噬体与溶酶体的连接，从而引起在视网膜色素上皮细胞中脂褐质和持久性氯喹和其他氨基喹啉的累积(Yoon等,Induction of lysosomal dilatation,arrested autophagy,and cell death by chloroquine in cultured ARPE-19 cells,Invest Ophthalmol Vis Sci.2010,51(11):6030-7)。另外，因为RPE内的黑色素在中和氧化自由基中起作用，所以已表明过度水平的此类自由基的存在可能促成HCQ诱导的视网膜毒性的发病机制(Sundelin等,APMIS.2002；110(6):481-9)。
[0012] 由氯喹和HCQ诱导的视网膜毒性的特征在于黄斑的细小斑点状阴影、小动脉变窄、周边视网膜色素沉着、中心窝反射损失，并且在晚期病例中特征为由色素环围绕的褪色斑点，这种发现被称为“牛眼黄斑病变”(Mecklenburg等,Toxicol Pathol.2007；35(2):252-67)。在视网膜毒性的早期阶段，患者可注意到视觉敏锐度降低、视觉模糊、色彩视觉和夜间视觉降低以及旁中心暗点(Mecklenburg等,Toxicol Pathol.2007；
35(2):252-67)。HCQ视网膜病变与总累积剂量有关并且发展缓慢，但可能会进展为更严重的中心和周边视觉损失，对此不存在已知疗法(Marmor等,Arthritis Care Res.2010；
62(6):775-84)。
35(2):252-67)。HCQ视网膜病变与总累积剂量有关并且发展缓慢，但可能会进展为更严重的中心和周边视觉损失，对此不存在已知疗法(Marmor等,Arthritis Care Res.2010；
62(6):775-84)。
[0013] 当前关于筛查氯喹和HCQ视网膜病变的建议含于Marmor等(Revisedrecommendations on screening for chloroquine and hydroxychloroquine retinopathy,Ophthalmology.2011,118(2):415-22) 中 所 描 述 的“2011 AAO Revised Recommendations”中。所述建议包括在患者开始羟氯喹或氯喹治疗第一年内进行基线检查，用来充当参考点并且排除经常禁忌使用这些药物的预先存在的黄斑病变。每年筛查眼睛毒性建议在5年后开始，或者若存在包括以下各项的其他风险因素，则更早开始：累积剂量>1000克HCQ硫酸盐、使用每天>400mg HCQ硫酸盐(或者对于矮小个体的消瘦体重来说>6.5mg/kg HCQ硫酸盐)的日剂量、老年、肾脏或肝脏功能障碍或视网膜疾病或黄斑病变(Marmor等,Opthamology.2011,118(2):415-22)。
[0014] 如“2011 AAO Revised Recommendations”(Revised recommendations on screening for chloroquine and hydroxychloroquine retinopathy,Ophthalmology.2011,118(2):415-22)中所描述，例如多灶性视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层扫描术(SD-OCT)和眼底自发荧光(FAF)等更新的客观测试可比视野测试更敏感。现建议在可用时，使用这些程序中的至少一种连同白色10-2自动视野阈值测试一起来进行常规筛查。当独立进行视野测试时，甚至最细微的10-2视野变化也应认真对待，并且其为通过客观测试进行评估的指示。因为mfERG测试是评估功能的客观测试，所以可使用它来代替视野测试。不再建议使用阿姆斯勒方格表测试。建议对眼底检查进行证明，但可视牛眼黄斑病变是一种后期变化，而筛查的目的是在较早的阶段检测毒性。另外，患者应意识到毒性的风险以及筛查的基本原理(用于检测早期变化并且将视觉损失降到最低，不一定防止视觉损失)。若有可能，当检测到毒性或强烈怀疑有毒性时应停止药物(Marmor等,Ophthalmology.2011,118(2):415-22)。
[0015] 虽然如本文所论述，HCQ和其他氨基喹啉已用于治疗炎性疾病，但长期施用HCQ和其他氨基喹啉伴随氨基喹啉在视网膜中的沉积以及视网膜毒性的发展。因此，对提供消炎活性同时与HCQ和其他氨基喹啉相比展现更少视网膜累积和更小视网膜毒性的改进型药物组合物存在需要。发明概要
[0016] 在各个实施方案中，提供了用于预防或治疗炎性疾病或与炎症相关的疾病的组合物和方法。具体来说，本发明的组合物和方法适合用于通过向个体施用有效剂量的氨基喹啉去乙基羟氯喹(DHCQ)来治疗不同的患者群体和疾病过程中的不同阶段，包括风险期、早期和确立性炎性疾病，包括自身免疫疾病、退化性炎性疾病、代谢性炎性疾病以及其他炎性疾病和与炎症相关的疾病。用本发明的组合物和方法在早期时间点治疗炎性疾病可以大体上减轻或防止疾病发展、临床症状或疾病进展。在一些实施方案中，当个体患上疾病的风险增加时开始治疗，以防止患上所述疾病、治疗早期病征或症状、或者逆转早期病征或症状。患上疾病的风险较高的个体可能无症状，可能无症状但具有早期病征，或可能具有早期疾病症状。在其他实施方案中，当个体患有早期疾病时开始治疗，以防止疾病进展、治疗早期病征或症状、或者逆转早期病征或症状。当个体患有早期疾病时，其具有早期症状或病征，可能具有间歇性或轻度症状，或可能无症状且仅显示出病征。在其他实施方案中，当个体具有确立疾病时开始治疗，以防止疾病进展、治疗病征和症状、或者逆转病征和症状。本发明的药物组合物的施用可以持续较长时间段，例如在数月或数年的时间段内。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约一年。在具体实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约1年。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约7年。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约5年。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约10年。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约15年。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续至少约20年。在一些实施方案中，用DHCQ治疗持续个体的一生。
[0017] 在一些实施方案中，提供了包含有效剂量的去乙基羟氯喹(例如DHCQ)和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，所述药物制剂包含日剂量为至少每天约50mg(约0.83mg/kg/天)、每天约100mg(约1.66mg/kg/天)、每天约155mg(约2.58mg/kg/天)、每天约200mg(约3.33mg/kg/天)、每天约250mg(约4.16mg/kg/天)、每天约300mg(约5mg/kg/天)、每天约310mg(约5.16mg/kg/天)、每天约350mg(约5.83mg/kg/天)、每天约00mg(约6.67mg/kg/天)、每天约450mg(约7.5mg/kg/天)、每天约465mg(约
7.75mg/kg/天)、每天约500mg(约8.33mg/kg/天)、每天约550mg(约9.16mg/kg/天)、每天约600mg(约10mg/kg/天)、每天约620mg(约10.3mg/kg/天)、每天约800mg(约13.3mg/kg/天)、每天约930mg/kg(约15.5mg/kg/天)、每天约1000mg(约16.67mg/kg/天)、每天约1200mg(约20mg/kg/天)、每天约1300mg(约21.67mg/kg/天)、每天约1400mg(约
23.3mg/kg/天)、每天约1500mg(约25mg/kg/天)或每天约1600mg(约26.67mg/kg/天)的DHCQ或等同物、由其组成或基本上由其组成。
7.75mg/kg/天)、每天约500mg(约8.33mg/kg/天)、每天约550mg(约9.16mg/kg/天)、每天约600mg(约10mg/kg/天)、每天约620mg(约10.3mg/kg/天)、每天约800mg(约13.3mg/kg/天)、每天约930mg/kg(约15.5mg/kg/天)、每天约1000mg(约16.67mg/kg/天)、每天约1200mg(约20mg/kg/天)、每天约1300mg(约21.67mg/kg/天)、每天约1400mg(约
23.3mg/kg/天)、每天约1500mg(约25mg/kg/天)或每天约1600mg(约26.67mg/kg/天)的DHCQ或等同物、由其组成或基本上由其组成。
[0018] 在一些实施方案中,所述药物制剂包含日剂量为每天约50mg(约0.83mg/kg/天)至每天约200mg(约3.33mg/kg/天)、每天约100mg(约1.67mg/kg/天)至每天约400mg(约6.67mg/kg/天)、每天约200mg(约3.33mg/kg/天)至每天约450mg(约7.5mg/kg/天)、每天约300mg(约5mg/kg/天)至每天约550mg(约9.16mg/kg/天)、每天约400mg(约
6.67mg/kg/天)至每天约600mg(约10mg/kg/天)、每天约500mg(约8.33mg/kg/天)至每天约700mg(约11.67mg/kg/天)、每天约550mg(约9.16mg/kg/天)至每天约750mg(约
12.5mg/kg/天)、每天约600mg(约10mg/kg/天)至每天约800mg(约13.3mg/kg/天)、每天约700mg(约11.67mg/kg/天)至每天约1000mg(约16.67mg/kg/天)、每天约800mg(约
13.3mg/kg/天)至每天约1600mg(约26.67mg/kg/天)、每天约900mg(约15mg/kg/天)至每天约1200mg(约20mg/kg/天)、每天约1200mg(约15mg/kg/天)至每天约1600mg(约
26.67mg/kg/天)、每天约1400mg(约23.3mg/kg/天)至每天约1600mg(约26.67mg/kg/天)的DHCQ或等同物、由其组成或基本上由其组成。
6.67mg/kg/天)至每天约600mg(约10mg/kg/天)、每天约500mg(约8.33mg/kg/天)至每天约700mg(约11.67mg/kg/天)、每天约550mg(约9.16mg/kg/天)至每天约750mg(约
12.5mg/kg/天)、每天约600mg(约10mg/kg/天)至每天约800mg(约13.3mg/kg/天)、每天约700mg(约11.67mg/kg/天)至每天约1000mg(约16.67mg/kg/天)、每天约800mg(约
13.3mg/kg/天)至每天约1600mg(约26.67mg/kg/天)、每天约900mg(约15mg/kg/天)至每天约1200mg(约20mg/kg/天)、每天约1200mg(约15mg/kg/天)至每天约1600mg(约
26.67mg/kg/天)、每天约1400mg(约23.3mg/kg/天)至每天约1600mg(约26.67mg/kg/天)的DHCQ或等同物、由其组成或基本上由其组成。
[0019] 本文中和贯穿本文件所使用的mg/kg/天剂量是基于60kg的人的理想体重 (Marmor 等 ,Revised Recommendations on Screening for Chloroquine and Hydroxychloroquine Retinopathy,Opthalmology 2011,118:415-422；Pai 等 ,The Origin of the“Ideal”Body Weight Equations.The Annals of Pharmacotherapy,2000,34(9):1066-1069；Walpole 等 ,BMC Public Health(BMC Public Health
2012,12:439)12:439)。在其他实施方案中，mg/kg/天剂量是基于60kg的人类平均瘦体重(Mackenzie AH.Dose refinements in long-term therapy of rheumatoid arthritis with antimalarials.Am J Med.1983,75(增刊):40-45；Hume,R.Prediction of lean body mass from height and weight.Journal of clinical pathology,1966,19(4):389-91.PMC 473290.PMID 5929341 ；Wolfe 和 Marmor,Rates and Predictors of
Hydroxychloroquine Retinal Toxicity in Patients with Rheumatoid Arthritis and Systemic Lupus Erythematosus,Arthritis Care and Research,2010,62(6):775-784)。
2012,12:439)12:439)。在其他实施方案中，mg/kg/天剂量是基于60kg的人类平均瘦体重(Mackenzie AH.Dose refinements in long-term therapy of rheumatoid arthritis with antimalarials.Am J Med.1983,75(增刊):40-45；Hume,R.Prediction of lean body mass from height and weight.Journal of clinical pathology,1966,19(4):389-91.PMC 473290.PMID 5929341 ；Wolfe 和 Marmor,Rates and Predictors of
Hydroxychloroquine Retinal Toxicity in Patients with Rheumatoid Arthritis and Systemic Lupus Erythematosus,Arthritis Care and Research,2010,62(6):775-784)。
[0020] 取决于正在治疗的患者和病状以及施用途径，DHCQ一般将以每天约50至1600mg(0.83至26.6mg/kg/g/天)的剂量施用。所述范围较宽，因为一般来说，对不同的哺乳动物的治疗效应的效力广泛地随剂量变化，典型地，在人类中是在小鼠中的20、30、40或甚至50分之一(每单位体重)。类似地，施用模式可能对剂量有很大影响。因而，举例来说，小鼠口服剂量可以是小鼠注射剂量的十倍。因此，对于小鼠的优选范围是约2.5至150mg/kg/天，且在一些实施方案中，在小鼠中为约10至100mg/kg/天，而对于人类可能为约0.83至26.6mg/kg/天，且在一些实施方案中为约6.67至13.3mg/kg/天。典型成年人类剂量可以是每天约400mg、或每天约500mg、或每天约550mg、或每天约600mg、或每天约700mg、或每天约750mg、或每天约800mg、或本申请中其他部分的日剂量中所描述的量。总日剂量可以分成每天两次或每天三次剂量服用。在一个实施方案中，每天两次约200mg(每天总计约
400mg，约6.67mg/kg/天)、或每天两次约250mg(每天总计约500mg，约8.33mg/kg/天)、或每天两次约275mg(每天总计约550mg，约9.16mg/kg/天)、或每天两次约300mg(每天总计约600mg，约10mg/kg/天)、或每天两次约350mg(每天总计约700mg，约11.66mg/kg/天)或每天两次约400mg(每天总计约800mg，约13.3mg/kg/天)或本申请中其他部分所描述的总剂量。剂量可随餐服用。
400mg，约6.67mg/kg/天)、或每天两次约250mg(每天总计约500mg，约8.33mg/kg/天)、或每天两次约275mg(每天总计约550mg，约9.16mg/kg/天)、或每天两次约300mg(每天总计约600mg，约10mg/kg/天)、或每天两次约350mg(每天总计约700mg，约11.66mg/kg/天)或每天两次约400mg(每天总计约800mg，约13.3mg/kg/天)或本申请中其他部分所描述的总剂量。剂量可随餐服用。
[0021] 在一些实施方案中，治疗可包括施用去乙基羟氯喹(DHCQ)与一种或多种活性剂的协同组合，其中所述协同组合包含DHCQ和一种或多种他汀类药物(例如阿托伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、帕伐他汀、瑞舒伐他汀、辛伐他汀等)、由其组成或基本上由其组成。所述协同组合的活性剂可以分开施用，或可以共配制成单一单位剂量(即，“固定剂量组合”)形式。每一或所有活性剂可以用多种方式配制，包括但不限于固体口服剂量形式。
[0022] 在一些实施方案中，提供了用于根据本发明的方法来治疗炎症的商业上适用的包装，例如包含DHCQ，任选地与一种或多种额外药剂(例如,如本文中所描述的一种或多种他汀类药物)的组合、由其组成或基本上由其组成的药物制剂；和与所述包装(例如，纸盒或容器)相关联的印刷说明性和信息性材料，所述材料可以粘附于所述纸板箱或封装在所述纸盒中的所述容器或呈现为所述纸盒或容器的组成部分，所述说明性和信息性材料以文字阐述向其阅读者传达活性成分当施用于处在炎性疾病早期的个体时将改善、减轻、积极治疗、逆转或预防继早期疾病之后对组织的任何损伤、损坏或损失。如本文中所描述的包含纸盒及/或容器的包装可以符合与药物销售和使用相关的所有规范性要求，尤其包括说明性和信息性材料。
[0023] 在一些实施方案中，本发明的方法包括鉴别处在患上炎性疾病的“风险”下或处在炎性疾病“早期”的个体的步骤。处在患上炎性疾病的“风险”下包括：(1)个体患上炎性疾病的风险增加；和(2)个体展现“临床前”疾病状态，但不满足炎性疾病的诊断准则(且因而不被正式视为患有炎性疾病)。
[0024] 处在患上炎性疾病的“较高风险”下(也称为“处在患病风险”下)的个体是与一般群体相比患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的可能性较高的个体。这样的个体可以基于其展现或具有以下各项中的一项或多项来鉴别：炎性疾病家族史；存在使个体易感染此类炎性疾病的某些基因变异体(基因)或基因变异体组合；存在身体表现、实验室化验结果、影像学表现、与患上炎性疾病相关的指标化验结果(也称为“生物指标”化验结果)或与患上代谢疾病相关的指标化验结果；存在与炎性疾病有关的临床征象；存在与炎性疾病有关的某些症状(但个体往往无症状)；存在炎症指标(也称为“生物指标”)；和指示个体其生命过程中具有患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高可能性的其他表现。处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下的大部分个体是无症状的，并且未经历与所述疾病有关的使其处在较高患病风险之下的任何症状。
[0025] 处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下的个体群组包括但不限于展现“临床前疾病状态”的个体。疾病前状态可以基于发展症状、身体表现、实验室化验结果、影像学结果和导致个体满足炎性疾病的诊断准则且因而被正式诊断的其他表现加以诊断。患有“临床前疾病”的个体展现表明个体处在患上炎性疾病的过程中的表现，但未展现包括症状、临床表现、实验室表现及/或影像学表现等满足正式诊断炎性疾病的诊断准则所必需的表现。在一些实施方案中，展现临床前疾病状态的个体具有基因变异体或基因变异体组合，使得与不具有该基因变异体或该基因变异体个体相比，将其置于较高的患病风险之下。在一些实施方案中，这些个体具有将其置于患上炎性疾病的较高风险之下的实验室结果或身体表现或症状或影像学表现。在一些实施方案中，具有临床前疾病状态的个体是无症状的。在一些实施方案中，具有临床前疾病状态的个体展现某些基因表达、某些蛋白质、炎症指标、代谢指标和其他指标的增加或降低的水平。
[0026] 在一些实施方案中，处在炎性疾病的较高风险之下的个体展现炎症指标(也称为“炎症指标”或“炎症生物指标”)增加。炎症的分子指标的实例包括c反应蛋白(CRP)、高灵敏度CRP(hs-CRP)(或常规CRP)、红细胞沉降率(ESR)、血清淀粉样蛋白A、血清淀粉样蛋白P、纤维蛋白原、血液或其他生物流体中的细胞因子、细胞因子、抗体(诸如自身抗体或抗微生物抗体)、DNA序列、RNA序列(例如编码一种或多种细胞因子或其他免疫分子的mRNA)、其他炎症指标或其组合。所述方法可以包括在治疗前例如通过检测和分析一个或多个炎症指标来确定炎症的存在，其中选择处在显示炎症病征的疾病早期的个体以便用本发明的制剂进行治疗。在一些实施方案中，所述治疗改善、减轻、积极治疗、逆转或预防组织损伤。在一些实施方案中，所述炎性疾病是自身免疫疾病，例如RA、多发性硬化、系统性红斑狼疮、舍格伦综合征等。在一些实施方案中，所述炎症指标(或炎症指标)是代谢指标(本文中也称为“代谢疾病指标”)。在一些实施方案中，所述疾病包括造成代谢疾病(例如代谢综合征、II型糖尿病、抗胰岛素性、动脉粥样硬化等)的炎性成分。在一些实施方案中，所述疾病是退化性疾病，诸如OA、阿尔茨海默病或黄斑变性。
[0027] 在一些实施方案中，所述炎症指标是异常代谢指标(本文中也称为“代谢疾病指标”)，并且所述异常代谢指标是选自：约140/90mmHg或更高的血压、约1.7mmol/L或更高的血浆甘油三酯水平、在男性中约0.9mmol/L或更低以及在女性中约1.0mmol/L或更低的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、约20μg/min或更高的微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率或约30mg/g或更高的白蛋白:肌酐比率、超过约100mg/dL的空腹血糖、超过约200的餐后2小时血糖或超过约6.5mg/dL的血红蛋白A1c。具有异常代谢指标的患者处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下。
[0028] 在一些实施方案中，本发明的方法包括鉴别和治疗处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下的个体的步骤。这些处在患上炎性疾病的较高风险之下的个体可能具有疾病风险因子及/或呈如本文中所描述的“临床前”状态，并且有时无症状。此时用单独DHCQ或其与如本文中所描述的他汀类药物的协同组合进行治疗在防止炎性疾病或与炎症相关的疾病发展方面特别有价值；然而，重要的是开具可以在长时间段内被耐受的安全又有效的疗法，如本发明所提供的。
[0029] 个体的“早期疾病”的确定可包括分析该个体中的至少一个指示存在早期疾病的指标的存在。在一些实施方案中，所述方法包括分析个体中的一个、两个、三个、四个或更多个预示个体处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下或处在炎性疾病或与炎症相关的疾病早期的指标的存在。在一些实施方案中，所述指标中至少一个是影像指标，包括但不限于：关节镜检查、放射摄影成像、超声波成像、磁共振成像(MRI)、计算机断层摄影术(CT)等。在一些实施方案中，所述指标中的至少一个是分子炎症指标，其中从所述个体获得生物样品且分析分子(例如高灵敏度C反应蛋白(或常规CRP)、红细胞沉降率、血清淀粉样蛋白A、血清淀粉样蛋白P、纤维蛋白原、细胞因子、抗体(自身抗体或抗微生物抗体)、软骨成分、蛋白酶、RNA分子(例如编码一种或多种细胞因子或其他免疫分子的mRNA)等)的存在，并且与对照或参考值相比较，其中所述分子指标的水平变化指示早期疾病。在一些实施方案中，早期疾病定义为存在症状不到约6个月。在一些实施方案中，早期疾病定义为被正式诊断为炎性疾病不到约6个月。在一些实施方案中，早期疾病与无症状相关。在一些实施方案中，早期疾病与轻度症状相关。在一些实施方案中，早期疾病与间歇性症状相关，诸如每几年仅发生一次的症状或每几个月发生一次的症状或每几天发生一次的症状或每天中仅一部分时间发生的症状。被确定为已经对患有早期炎性疾病的这类个体随后宜用DHCQ或用DHCQ与如本文中所描述的他汀类药物的协同组合加以治疗。
[0030] 在某些实施方案中，本发明涉及治疗患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病的个体。炎性疾病是基于个体展现的症状、病征、临床特征、实验室化验结果、成像化验结果、生物指标结果和使得医师能够正式诊断该个体患有炎性疾病的其他表现而得以诊断。在一些实施方案中，确立的炎性疾病是个体已经被医师正式诊断为患有所述疾病超过6个月的炎性疾病。在确立的炎性疾病中，疾病的病征或症状与例如被诊断为早期炎性疾病的个体的症状相比可能更严重。在确立的炎性疾病中，疾病过程可能造成组织或器官损伤。如本文中所描述，在某些实施方案中，在患有确立疾病的个体中测定炎症可包括分析个体中的至少一个指示存在炎症的指标的存在。
[0031] 在处在疾病风险之下、患有早期疾病或患有确立疾病的个体中测定炎症可包括分析个体中的至少一个指示存在炎症或代谢异常的指标的存在。炎症指标包括分子指标、代谢指标、临床指标和影像指标。在一些实施方案中，所述方法包括分析个体中的一个、两个、三个、四个或更多个用于炎症诊断的炎症指标的存在，所述炎症可以是全身或局部炎症。在一些实施方案中，所述炎症指标中至少一个是影像指标，包括但不限于：放射摄影成像、超声波成像、磁共振成像(MRI)、计算机断层摄影术(CT)等。在一些实施方案中，所述炎症指标中的至少一个是分子指标，其中从所述个体获得生物样品且分析分子(例如高灵敏度CRP(或常规CRP)、细胞因子、血清淀粉样蛋白A、血清淀粉样蛋白P、纤维蛋白原、抗体(自身抗体或抗微生物抗体)、软骨成分、蛋白酶、RNA序列(例如编码一种或多种细胞因子或其他免疫分子的mRNA)等)的存在，并且与对照或参考值相比较，其中所述分子指标的水平变化指示炎症。在一些实施方案中，所述炎症指标是异常临床指标。炎症的异常临床指标的实例包括身体检查时肿胀、身体检查时压痛以及其组合。在一些实施方案中，指示炎症的指标指示存在局部炎症，即，受影响的关节处、中枢神经系统中或者体内的另一组织、器官或部位中存在炎症。在一些实施方案中，所述炎症指标是异常代谢指标，并且所述异常代谢指标是选自：约140/90mmHg或更高的血压、约1.7mmol/L或更高的血浆甘油三酯水平、在男性中约0.9mmol/L或更低以及在女性中约1.0mmol/L或更低的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、约20μg/min或更高的微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率或约30mg/g或更高的白蛋白:肌酐比率、超过约100mg/dL的空腹血糖、超过约200的餐后2小时血糖或超过约6.5mg/dL的血红蛋白A1c。对个体中的异常炎症指标或代谢指标的测量或检测可预测该个体处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的临床前期、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
[0033] 图1提供了羟氯奎(HCQ)、去乙基羟氯喹(DHCQ)、去乙基氯喹(DCQ)和双去乙基氯喹(BDCQ)的化学结构。
[0034] 图2是在小鼠类风湿性关节炎模型中比较用媒剂(对照)、HCQ、DHCQ、DCQ和BDCQ预防疾病的“关节炎评分”对比“加强免疫后天数”(用以诱导关节炎的第二次免疫)的图。
[0035] 图3是比较媒剂、HCQ、BDCQ和DHCQ用于防止患上小鼠多发性硬化的“平均临床评分”对比“免疫后时间”的图。
[0036] 图4是比较媒剂、HCQ和DHCQ治疗确立的小鼠多发性硬化的“平均临床评分”对比“免疫后时间”的图。
[0037] 图5是比较媒剂、HCQ和DHCQ治疗小鼠骨关节炎的软骨退变评分的图。
[0038] 图6是比较用媒剂、HCQ和DHCQ治疗的与小鼠骨关节炎进展有关的各个参数，包括“软骨退变评分”、“骨赘评分”和“滑膜炎评分”的图。
[0039] 图7示出了肝脏组织的显微照片，以及肝脏评分、AST水平和ALT水平的图，其比较了媒剂、HCQ和DHCQ用于在具有饮食诱导的肥胖的小鼠中防止患上非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
[0040] 图8示出了肝脏组织的显微照片，以及肝脏评分、AST水平和ALT水平的图，其比较了在具有饮食诱导的肥胖的小鼠中对确立的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的媒剂、HCQ和DHCQ治疗。
[0041] 图9示出了葡萄糖、甘油三酯和胆固醇水平的图，其比较了在具有饮食诱导的肥胖的小鼠中对II型糖尿病、高脂血症和代谢综合征的媒剂、HCQ、DHCQ、BDCQ和DCQ治疗。
[0042] 图10是TNFα水平的图，其比较以不同量的HCQ或DHCQ处理经过脂多糖(LPS)刺激的人类周围血液单核细胞(PBMC)。
[0043] 图11示出了活体外培养的着色视网膜上皮细胞的显微照片，其比较对媒剂(对照，CTRL)、HCQ、DHCQ和BDCQ暴露24小时。
[0044] 图12是比较着色视网膜细胞存活百分比的图，其比较对媒剂、HCQ、DHCQ和BDCQ的暴露。
[0045] 图13是比较来源于经HCQ或DCHQ治疗过的小鼠的血浆、视网膜组织、手术过的关节滑膜和未手术过的关节滑膜中的HCQ和DHCQ累积的图。
[0046] 图14是比较来源于经过HCQ或DHCQ治疗的小鼠的各个组织中的HCQ和DHCQ水平的比率的图。
[0047] 图15是比较来源于经过HCQ或DHCQ治疗的小鼠的视网膜组织与血浆中的HCQ和DHCQ水平的比率的图。
[0048] 图16是比较来源于经过HCQ或DHCQ治疗的小鼠的手术过的关节滑膜与视网膜组织中的HCQ和DHCQ水平的比率的图。
[0049] 图17示出了经过媒剂、HCQ和DHCQ治疗的小鼠的视网膜细胞层的显微照片，示出了神经节细胞层核收缩。
[0050] 图18是比较经过媒剂、HCQ和DHCQ治疗的小鼠的神经节细胞层中的细胞数目的图。
[0051] 图19是比较经过媒剂、阿托伐他汀、HCQ、DHCQ、BDCQ、DCQ、阿托伐他汀+HCQ、阿托伐他汀+DHCQ和阿托伐他汀+BDCQ治疗的小鼠的软骨退变评分的图。
[0052] 图20是比较经过阿托伐他汀、HCQ、DHCQ、BDCQ、DCQ、阿托伐他汀+HCQ、阿托伐他汀+DHCQ和阿托伐他汀+BDCQ治疗的受试者相较于经过媒剂(对照)治疗的受试者的软骨退变评分、骨赘评分和滑膜炎评分的图。
[0053] 图21是比较经过HCQ+阿托伐他汀相较于HCQ、HCQ+阿托伐他汀相较于阿托伐他汀、DHCQ+阿托伐他汀相较于DHCQ和DCHQ+阿托伐他汀相较于阿托伐他汀治疗的小鼠的软骨退变评分、骨赘评分和滑膜炎评分的图。
[0054] 图22示出了代表着来源于经过媒剂(CTRL)、HCQ、DHCQ、阿托伐他汀(Atorva)、HCQ+阿托伐他汀和DHCQ+阿托伐他汀治疗的骨关节炎小鼠的滑膜组织中的炎性细胞因子水平的热图。
[0055] 图23示出了比较各个治疗的炎性细胞因子水平的图。
[0056] 图24示出了比较各个治疗的炎性细胞因子水平的热图。
[0057] 图25示出了在16周开放标记临床试验(NCT01645176)中对内侧间室膝盖骨关节炎受试者所观测到的与炎症和疼痛有关的各个评分。
[0058] 对各实施方案的详细描述
[0059] 许多疾病具有会造成疾病开始及/或进展的潜在炎性成分。因而，炎性疾病及与炎症相关的疾病范围广泛且包括自身免疫疾病，诸如类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、多发性硬化(MS)和自身免疫性肝病；退化性疾病，诸如骨关节炎(OA)、阿尔茨海默病(AD)和黄斑变性；慢性感染诸如人类免疫缺陷病毒(HIV)感染、慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染、慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染、慢性巨细胞病毒(CMV)感染、结核病毒(TB)感染以及其他慢性病毒及细菌感染；代谢疾病，包括II型糖尿病、代谢综合征、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和酒精性脂肪性肝炎；心血管疾病，诸如动脉粥样硬化；癌症，其可由炎症引起且诱导炎症；以及具有炎性成分的其他疾病。
[0060] 其他炎性疾病和与炎症相关的疾病包括但不限于寻常痤疮、聚会性痤疮、暴发性痤疮、哮喘、乳糜泻、慢性前列腺炎、溃疡性结肠炎、微小性结肠炎、胶原性结肠炎、克罗恩氏病、特应性皮炎、憩室炎、肾小球性肾炎、间质性膀胱炎、病毒性肝炎(包括但不限于乙型肝炎和丙型肝炎)、间质性膀胱炎、过敏性肠综合征、再灌注损伤、类肉瘤病、淀粉样变性和移植物排斥反应，包括但不限于心脏、肺、肾、胰脏、骨髓、干细胞、皮肤、角膜和胰岛细胞移植物。其他炎性疾病和与炎症相关的疾病包括癌症和癌前状态以及相关的炎性反应。其他炎性疾病和与炎症相关的疾病包括与炎症相关的传染性疾病，其包括但不限于慢性感染人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、梅毒、立克次氏体疾病、莱姆氏疾病、细菌性蜂窝组织炎、慢性真菌感染、艾利希体症、HHV-6、单纯疱疹病毒1和2、类圆线虫病、埃-巴二氏病毒、巨细胞病毒、支原体感染、克雅二氏病、盘尾丝虫病、诺卡氏菌、惠普尔病、分支杆菌病、癣感染和甲病毒，包括但不限于切昆贡亚热、罗斯河病毒或其他甲病毒。其他炎性疾病和与炎症相关的疾病包括但不限于抗磷脂综合征、桥本氏甲状腺炎、德奎尔甲状腺炎、葛雷氏甲状腺炎、肾上腺炎、I型糖尿病、垂体炎、寻常天疱疮、大疱性类天疱疮、兰伯特-伊顿综合征、重症肌无力、艾迪生病、强直性脊椎炎、斑秃、自身免疫性溶血性贫血、免疫性血小板减少性紫癜、自身免疫性肝病、白塞氏病、心肌病、慢性疲劳综合征、慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病、自身免疫性内耳病、瘢痕性类天疱疮、德高斯氏病、皮肤肌炎/青少年皮肌炎、多发性肌炎、包涵体肌炎、格林-巴利综合征、美尼尔氏病、混合性结缔组织病、恶性贫血性血管炎、多发性软骨炎、多腺性自身免疫性综合征、多肌痛性风湿病、原发性胆汁性肝硬变、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、雷诺氏现象、莱特尔综合征、反应性关节炎、风湿热、硬皮病、舍格伦综合征、僵人综合征、高安氏动脉炎、颞动脉炎/巨细胞性动脉炎、结节性多动脉炎、葡萄膜炎、白癫风、自身免疫性威尔逊氏病、由于对凝血因子的自身反应性所致的出血性病症、慢性荨麻疹、血管炎，包括但不限于肉芽肿性血管炎、嗜酸性肉芽肿性血管炎、显微镜下多血管炎、亨-舍二氏紫癜、过敏性血管炎、低补体血症荨麻疹性血管炎、多发性结节性动脉炎。
[0061] 在一个分类中，炎性疾病被视为展现诸如可见炎症(包括疼痛、肿胀、发热和发红)之类的临床表现(异常临床指标)的疾病。炎性疾病的这一分类将包括但当然不限于RA、SLE、NAFLD、NASH、MS、代谢综合征、II型糖尿病、动脉粥样硬化、心血管疾病和OA。
[0062] 与炎症相关的疾病在其潜在病理学方面具有局灶性、多灶性或全身性炎性过程，但其显现为无明显临床炎症的器官或系统功能障碍。在这一分类中，高脂血症和抗胰岛素性被称为与炎症相关的疾病。诸如高脂血症之类的病状在本文中可能被视为疾病，因为它是代谢异常相关的潜在病理学。同样，抗胰岛素性在本文中可能被视为疾病，因为它是代谢异常相关的潜在病理学。高脂血症和抗胰岛素性因而可以被视为与炎症相关的疾病。应注意，显著比例的高脂血症、抗胰岛素性(有或无明显NASH或其前驱NAFLD)患者具有已知的代谢综合征。代谢综合征是指包括使患上心脏病、糖尿病或其他健康问题的风险增高的高血压、肥胖、高脂血症和抗胰岛素性(显现为明显糖尿病或高空腹血糖或葡萄糖耐受性减低)的因素群组；(Grundy等,Circulation.2004；109:433-438)。代谢综合征与炎症相关联作为所述综合征的效应和作为其引发、进展和最终发病的促成因素。(Romeo GR等,Arterioscler Thromb Vasc Biol.2012 32(8):1771-6；de Luca C等,FEBS Lett.2008582(1):97-105；Ma K等,Diabetes Metab Res Rev.2012 28(5):388-94)。这部分是由于肥胖脂肪组织中的巨噬细胞累积，其中它们响应于饱和脂肪酸和循环脂多糖(LPS)的刺激而产生TNF和其他炎性细胞因子(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84；Bhargava P等,Biochem J.2012 442(2):253-62)。此外，TNF抑制可以消除抗胰岛素性(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84)。然而，长期TNF抑制的风险非常显著且需要注射疗法。鉴别能改善脂肪巨噬细胞活化和细胞因子产生的安全又有效的药剂将是有益的。由于许多消炎剂和免疫抑制剂自身与不利代谢风险(即，高血压、抗胰岛素性、高脂血症和/或肝脂肪变性)相关，所以如果这样的药剂对代谢轮廓具有有利作用，那么这将是非常有利的。
[0063] 存在针对炎性疾病的多种治疗剂，并且实例包括：非类固醇消炎药(NSAID)，诸如布洛芬、消痛灵和阿司匹灵；类固醇，诸如强的松和甲基强的松龙；抑制免疫细胞增殖的小分子药物，包括氨甲蝶呤、柳氮磺吡啶、咪唑硫嘌呤、环磷酰胺；小分子激酶抑制剂，包括伊马替尼、托法替尼等；靶向TNF(阿达木单抗、英利昔单抗等)、IL-6(靶向IL-6受体的托珠单抗)、IL-1(卡那单抗)、IL-17(苏金单抗)、IL-12p40(优特克单抗)等的抗体治疗剂；非抗体生物治疗剂，包括CTLA4-Ig、依那西普和IL-1受体拮抗剂(阿那白滞素)。众所周知，这些药物对不同的炎性疾病展现差异性治疗活性。举例而言，抗TNF抗体能有效治疗类风湿性关节炎(RA)、牛皮癣和强直性脊椎炎；但不能有效治疗系统性红斑狼疮(SLE)和血管炎；加重多发性硬化；适用于伴随慢性丙型肝炎病毒感染的RA和牛皮癣患者，但由于其倾向于触发乙型肝炎病毒复制和加重感染而忌用于慢性乙型肝炎病毒感染患者。相比之下，优特克单抗能有效治疗牛皮癣，但在类风湿性关节炎或多发性硬化中不能提供益处。相比之下，氨甲蝶呤在类风湿性关节炎和牛皮癣中展现了效力，但不能治疗SLE或克罗恩病。结果，不可能预测具体的消炎药将对何种炎性疾病或与炎症相关的疾病提供益处。不仅消炎药的临床有效性取决于适应症而广泛变化，而且具体的消炎药可能会加重所述疾病的其他症状。因此，必须凭经验测试和证明各消炎药候选物可提供治疗特定炎性疾病的效力，以便确定所述候选消炎药对于该特定炎性疾病为安全、适当且有效的治疗。
[0064] 类风湿性关节炎(RA)为通常以外周关节的对称性炎症为特征的慢性综合征，从而可能对关节和关节周结构造成进行性破坏，存在或不存在广泛体现(Firestein(2003)Nature 423(6937):356-61；McInnes和Schett.(2011)N Engl J Med.365(23):2205-19)。原因未知。已经鉴别了基因倾向且在一些群体中位于II类组织相容性基因的HLA-DRβ1基因座中的五肽处。环境因素也可能起作用。举例来说，抽烟使得具有含“共用表位”多形性的HLA-DR4的个体患上RA的风险增加大约10倍至20倍。抽烟被认为能诱导抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)反应，这可使用市售环状瓜氨酸化肽(CCP)测定法来测量(Klareskog等(2006)Arthritis Rheum.54(1):38-46)。另外，牙周炎和牙龈卟啉单胞菌感染也可能在引发导致患上RA的自身免疫反应方面起作用(Rutger和Persson.2012,J Oral Microbiol.4)。免疫学变化可能由多种因素引发。所有人口中有约0.6％受影响，女性的频率是男性的两至三倍。发作可以在任何年龄，最经常在25岁与50岁之间。
[0065] 发病机理中可能较重要的主要免疫学异常包括在关节液细胞和血管炎中发现的抗体和免疫复合物。浆细胞产生贡献给这些复合物的抗体。浸润滑膜组织的淋巴细胞主要是T辅助细胞，其可以产生促炎性细胞因子。患病滑膜中也富含巨噬细胞和其细胞因子(例如肿瘤坏死因子、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)。粘附分子增多造成炎性细胞渗出和保留在滑膜组织中。在早期疾病中主要是巨噬细胞衍生的衬里细胞增加以及一些淋巴细胞和血管变化。
[0066] 在长期受影响的关节中，正常情况下细腻的滑膜由于滑膜衬里细胞的数目和尺寸增加以及淋巴细胞和浆细胞集群而产生许多绒毛襞并且变厚。衬里细胞产生各种物质，包括胶原蛋白酶和基质分解素，其可能造成软骨破坏；白介素-1，其刺激淋巴细胞增殖；和前列腺素。最初在血管周围但稍后形成具有生发中心的淋巴滤泡的浸润细胞合成白介素-2、其他细胞因子、RF和其他免疫球蛋白。还存在纤维蛋白沉积、纤维化和坏死。增生性滑膜组织(血管翳)可能侵蚀软骨、软骨下骨、关节囊和韧带。PMN在滑膜中不是主要的，但在滑膜液中往往是主要的。
[0067] 发作通常是隐伏的，存在进行性关节牵连，但可以是暴发性的，其中多个关节中同时存在炎症。几乎所有发炎的关节中的触痛感是最敏感的身体表现。大部分涉及的关节中最后出现最具特异性的身体表现，即滑膜变厚。对称性涉及较小的手关节(尤其是近端指节间和掌指骨)、足关节(跖趾)、腕关节、肘关节和踝关节是典型的，但初步体现可能发生在任何关节中。RA的特征在于在RA患者的关节边缘处和软骨下骨中通过骨降解和重塑而发生局部骨侵蚀。RA子集的一个标志是产生自身抗体，包括类风湿因子(RF)和抗瓜氨酸化肽蛋白抗体(ACPA)。人类γ球蛋白抗体RF存在于约70％的RA患者中。然而，往往呈低效价的RF存在于患有其他疾病的患者中，包括其他结缔组织病，诸如系统性红斑狼疮、肉芽肿病、诸如病毒性肝炎、亚急性细菌性心内膜炎和肺结核之类的慢性感染以及癌症。低RF效价还可以存在于较小百分比的一般人群中，并且在老年人中更常见。另一个疾病指标是存在ACPA，这可以使用临床抗环状瓜氨酸化肽(CCP)抗体测试加以测量。抗CCP抗体对诊断RA具有大约60％灵敏度和95％特异性，并且类似于RF，预测更坏的预后。
[0068] 系统性红斑狼疮(SLE)是以颊部皮疹、口腔溃疡、光敏感性、浆膜炎、癫痫发作、低白血球计数、低血小板计数、癫痫发作、阳性抗核抗体(ANA)测试和其他阳性自身抗体为特征的系统性自身免疫疾病。SLE是以多克隆B细胞活化为特征的自身免疫疾病，其产生多种抗蛋白和非蛋白自身抗体，从而产生免疫复合物和促成组织损伤的炎症(关于所述疾病的综述，参见例如Kotzin等1996,Cell 85:303-06)。SLE具有以加重和缓解为特征的可变过程，而且难以研究。举例来说，一些患者可能主要显示皮疹和关节疼痛，显示自发性缓解，且几乎不需要药物治疗。所述范围的另一端包括显示严重和进行性肾牵涉(肾小球性肾炎和大脑炎)的患者，其需要用高剂量的类固醇和诸如环磷酰胺之类的细胞毒性药物进行治疗。羟氯奎减缓SLE进展，并且是处置SLE的支柱性治疗剂。
[0069] 多发性硬化(MS)是以中枢神经系统脱髓鞘为特征的虚弱性炎性神经疾病。所述疾病主要影响年轻的成年人，在女性中的发病率更高。所述疾病的症状包括疲劳、麻痹、震颤、刺痛、触觉迟钝、视力障碍、眩晕、认知损伤、泌尿功能障碍、活动减少和抑郁。所述疾病的临床模式分类为四种类型：复发性缓解性、继发性进行性、原发性进行性和进行性复发性(S.L.Hauser和D.E.Goodkin,Multiple Sclerosis and Other Demyelinating Diseases in Harrison's Principles of Internal Medicine第14版,第2卷,Mc Graw-Hill,1998,第2409-19页)。
[0070] 炎性肠病包括涉及肠的自身免疫发病的克罗恩病和溃疡性结肠炎。这些疾病导致往往带血的慢性腹泻以及结肠功能障碍的症状。
[0071] 系统性硬化(SSc或硬皮病)是以皮肤和内脏器官纤维化以及广泛血管病变为特征的自身免疫疾病。根据皮肤硬化程度对SSc患者进行分类：局限型SSc患者面部、颈部和远端肢端的皮肤变厚，而扩散型SSc患者还牵涉躯干、腹部和近端肢端。相较于局限型疾病患者，内脏器官牵涉倾向于在疾病过程中的早期发生在扩散型疾病患者中(Laing等(1997)Arthritis.Rheum.40:734-42)。发生严重内脏器官牵涉扩散型SSc患者大多数将在诊断后前三年内如此，同时皮肤进行性地变得纤维化(Steen和Medsger(2000)Arthritis Rheum.43:2437-44)。扩散型SSc的造成实质性发病率和死亡率的常见体现包括间质性肺病(ILD)、雷诺氏现象和指纹样溃疡、肺动脉高压(PAH)(Trad等(2006)Arthritis.Rheum.54:184-91)、肌骨胳症状以及心脏和肾脏牵涉(Ostojic和Damjanov(2006)Clin.Rheumatol.25:453-7)。当前疗法聚焦于治疗具体的症状，但缺乏靶向潜在发病机理的疾病改良剂。
[0072] 自身免疫性肝病是身体的免疫系统侵袭肝细胞的疾病。这种免疫反应造成肝脏炎症，也称为肝炎。研究人员认为遗传因素可能使得一些人对自身免疫疾病更敏感。约70％的自身免疫性肝病患者是女性。所述疾病通常是相当严重的，并且如果不治疗就会随时间变得更坏。自身免疫性肝病典型地是慢性的，意味着它能持续数年，并且可能导致肝脏的肝硬化，即瘢痕形成和硬化。最终可造成肝衰竭。
[0073] 识别了自身免疫性肝病的四个亚类，但辨别亚类的临床效用是有限的。(1)阳性ANA和SMA、免疫球蛋白G升高(经典形式，对低剂量类固醇响应良好)；(2)阳性LKM-1(典型地女童和少女；疾病可能是严重的)、LKM-2或LKM-3；(3)针对可溶性肝抗原的阳性抗体(这一组表现得像第1组)(抗SLA、抗LP)；和(4)未检测到自身抗体(约20％)(确定性/重要性尚存争议)(Krawitt等,Autoimmune hepatitis.New England Journal of Medicine,1996 334(14):897-903)。
[0074] 许多退化性疾病具有潜在炎性成分，并且这类退化性疾病的实例包括骨关节炎(OA)、阿尔茨海默病(AD)和黄斑变性。
[0075] 骨关节炎(OA)在美国影响了几乎2700万人口，占初级护理医师问诊数的25％和所有NSAID处方的一半。类风湿性关节炎(RA)是影响了大约0.6％的世界人口的自身免疫滑膜炎。OA是以关节软骨破环和潜在损失以及其他关节变化(包括骨重塑)为特征的慢性关节病，其可包括骨肥大(骨赘形成)、软骨下硬化和软骨下囊肿形成。OA被视作滑膜关节故障(Abramson等,Arthritis Res Ther.2009；11(3):227；Krasnokutsky等,Osteoarthritis Cartilage.2008；16增刊3:S1-3；Brandt等,Rheum Dis Clin North Am.2008年8月；34(3):531-59)。OA导致关节(包括关节软骨和软骨下骨)降解，从而导致机械性异常和关节功能削弱。症状可包括关节疼痛、触痛、硬化、有时存在渗出物和关节功能削弱。多种原因可以引发过程，从而导致软骨损失。
[0076] OA可能起始于关节外伤；半月板、关节软骨、关节韧带或另一个关节结构的机械性损伤；软骨基质成分缺陷；和类似原因所致的关节损伤。对关节的机械应力可构成许多具有许多不同的机械应力来源的个体患上OA的基础，包括由先天性或病原型原因造成的骨错位；机械性损伤；过重；支撑关节的肌肉的强度损失；和周围神经损伤，从而导致使关节受到过度应力的突发性或不协调性运动。
[0077] 关节软骨包含能产生细胞外基质且被细胞外基质围绕的软骨细胞。在滑膜关节中，存在至少两个被分泌滑膜液(所述滑膜液是填充关节腔的透明碱性粘性流体)的滑膜围绕的可移动的骨表面和间杂在所述关节骨表面之间的关节软骨。骨关节炎中的最初病理大体表现是关节表面上惯常荷载区域中的关节软骨软化。关节软骨的这种软化或肿胀往往伴随着软骨基质的蛋白聚糖损失。随着骨关节炎进展，软骨表面的完整性丧失且关节软骨变薄，垂直裂缝延伸至软骨深处，这一过程称为纤维性颤动。关节运动可能导致纤维性颤动软骨脱落诸多区段从而暴露下方的骨骼(软骨下骨)。在OA中，软骨下骨被重塑，包括发生软骨下硬化、发生软骨下囊肿和形成异位骨，称为骨赘。还发生了可能填充有滑膜液的软骨下囊肿。在关节边缘形成骨赘(骨刺)。软骨下骨重塑使机械应变以及对重叠关节软骨和软骨下骨的应力增加，导致进一步损伤软骨和软骨下骨。
[0078] 组织损伤刺激软骨细胞试图修复，这增加了蛋白聚糖和胶原蛋白的产生。然而，在修复方面的努力还刺激能降解软骨的酶以及正常情况下少量存在的炎性细胞因子。炎性介体触发炎性循环，从而进一步刺激软骨细胞和滑膜衬里细胞，最终分解软骨。软骨细胞经历程序性细胞死亡(细胞凋亡)。
[0079] OA在病理上以炎性细胞(包括炎性细胞，主要是巨噬细胞，但也包括B细胞和T细胞)的低等级浸润为特征。这些细胞(又主要是巨噬细胞)能够在OA关节中产生炎性细胞因子和MMP。然而，当受到炎性细胞因子(包括IL-1和TNF)刺激时，关节内的原代细胞，包括滑膜成纤维细胞和软骨细胞，能够产生其他细胞因子，包括IL-6以及多种MMP。
[0080] 在逐渐发作症状和病征的患者中应怀疑OA，特别是在老年人中，通常始于一个或几个关节。疼痛可能是最早的症状，有时描述为深度疼痛。疼痛通常因荷重而恶化，且通过休息即可减轻，但最终可能变成常态。睡醒或不活动后僵硬。如果疑似OA，则应获取大部分症状关节的平面x射线。X射线一般显示边缘骨赘、关节间隙变窄、软骨下骨密度增加、软骨下囊肿形成、骨重塑和关节渗出物(这些被视为异常影像指标)。在检测关节间隙变窄时，膝盖的站立x射线更灵敏。可以使用磁共振成像(MRI)来检测软骨退化，并且已经开发了若干种基于MRI的评分系统以表征OA的严重程度(Hunter等,PM R.2012年5月；4(增刊5):S68-74)。
[0081] OA通常影响手、足、脊柱和大荷重关节，诸如髋关节和膝盖，但理论上体内的任何关节都可能受影响。随着OA进展，受影响的关节显得变大，僵硬和疼痛，并且在轻缓使用时感觉稍好，但在过度或长期使用时恶化。治疗一般包括运动、生活方式改变和止痛剂的组合。如果疼痛使人虚弱，则可以使用关节置换手术来改善生活品质。
[0082] 在旨在提供疾病改良的药剂中，诸如强力霉素(大概是通过其在MMP抑制剂下的作用)、双膦酸盐(大概旨在抑制蝕骨细胞活化)和利克飞龙(通过抑制环加氧酶和脂加氧酶途径)，无一显示出稳定的软骨保护，如由减缓软骨破裂所定义。已经在控制与OA相关的疼痛方面显示出部分效力的药剂是注射到关节中的止痛剂，诸如醋氨酚；和消炎剂，包括非类固醇消炎剂(NSAID)、鸦片剂、关节内皮质类固醇和透明质酸衍生物。这些药剂尚未显示能预防软骨损失或减缓关节功能损失。
[0083] 鉴于可见OA缓慢进展，需要在过长时间段内服用药剂需要高度安全性。因而，需要能提供疾病改良功能活性和允许疗法长期持续的安全轮廓的治疗剂选择。
[0084] OA的鼠类模型包括通过使内侧半月板失稳(DMM)或内侧半月板切除术(MM)诱导OA。在MM模型中进行内侧半月板切除术之后，在连续时间点对后膝(膝盖)关节软骨进行组织分析。手术诱导后大约2至6个月，将小鼠处死且用甲苯胺蓝、番红精O和/或苏木精和曙红(H&E)进行组织切片染色，以测定软骨损失水平(或软骨退化水平，或“OA评分”)，以及骨赘形成程度和滑膜炎症(称为滑膜炎)程度。
[0085] 阿尔茨海默病(AD)是人群中最常见的神经退化性疾病(Cummings等,Neurology51,S2-17；discussion S65-7,1998)。AD影响了大约10％的65岁以上的人士和几乎50％的85岁以上的人士。据估计，截至2025年，约2200万个体将受AD困扰。AD的特征在于缓慢进行性痴呆。如果死后发现痴呆、神经纤维缠结和老年斑三合一，则确诊AD。在阿尔茨海默病患者的脑中始终发现老年斑。老年斑的主成分是类淀粉β蛋白(Aβ)(Iwatsubo等,Neuron 13:45-53,1994)(Lippa等,Lancet 352:1117-1118,1998)。Aβ是来源于类淀粉前驱蛋白(APP)的42个胺基酸的肽，它是具有多种生理作用的跨膜糖蛋白，包括细胞增殖、粘附、细胞信号传递和轴突长出(Sinha等,Ann N Y Acad Sci 920:206-8,2000)。APP正常在Aβ结构域内裂解以产生分泌片段。然而，交替处理导致APP裂解以产生可在老年斑内累积的可溶性Ab。现用药物是旨在增加脑中的突触后乙酰胆碱浓度的中枢胆碱酯酶抑制剂(Farlow和Evans,Neurology 51,S36-44；discussion S65-7,1998)；(Hake,Cleve Clin J Med 68,608-9:613-4,616,2001)。这些药物仅在几个认知参数方面提供极小的临床效益。
[0086] 黄斑变性可能属于与视网膜新血管形成和血管渗漏有关的湿型，但更常见的是干型，也称为年龄相关的黄斑变性(AMD)。AMD是与中心视力丧失、视力模糊和最终失明相关的慢性病。尽管AMD的原因和风险因素是多因素的，但先天免疫性活化(包括补体活化)以及巨噬细胞和小神经胶质细胞的细胞因子产生已经牵涉患上AMD。已经提出消炎疗法(包括皮质类固醇、非类固醇消炎剂、氨甲蝶呤、雷帕霉素和生物剂，包括TNF抑制剂和补体抑制剂)减缓AMD进展(Wang等,2011.Eye(2011)25,127-139)。然而，因为这些治疗不是治愈性的并且AMD是慢性非致死性疾病，所以其使用受毒性风险限制。
[0087] HIV病毒是AIDS的原因，在不治疗的情况下几乎是不治之症。然而，高活性抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现使得HIV从不治之症变成慢性病状。在带有HIV的个体的寿命得以延长的情况下，已经注意到尽管存在病毒抑制且甚至是免疫重构，如通过周围CD4T细胞计数所衡量，但发病率和死亡率仍增加，这主要是由于代谢紊乱和心血管风险增加。这种免疫活化的确切来源尚未确定，但已经牵涉了HIV病毒的持续低等级复制和内涵体TLR7受体的活化以及CD8T细胞反应的活化。另外，对肠管粘膜免疫细胞的不可逆破坏导致细菌和内毒素移位增加且因而导致系统性炎症(Deeks 2011 Annu Rev Med.62:141-55)。不出所料，尽管是成功的HAART疗法，但细胞因子(包括TNF、IL-6)以及诸如CRP之类的其他炎性标记物以及诸如D-二聚体之类的凝聚标记物的水平显著升高(Deeks 2011.Annu Rev Med.62:141-55)。
[0088] 其他慢性感染还可能引起持续炎症。这类感染包括慢性乙型肝炎病毒感染、慢性丙型肝炎病毒感染、巨细胞病毒(CMV)感染、单纯疱疹病毒(HSV)感染、埃-巴二氏病毒(EBV)感染、慢性假单胞菌感染、慢性葡萄球菌感染和其他慢性病毒、细菌、真菌、寄生虫和其他感染。
[0089] 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是与肝脏的脂肪浸润相关的病状。NAFLD是当并非由于过量酒精使用而在肝脏中沉积脂肪(脂肪变性)时发生脂肪肝一个原因(Clark JM等,J.American Medical Association289(22):3000-4,2003)。它可能与抗胰岛素性和代谢综合征有关，并且可响应原来针对其他抗胰岛素性状态(例如2型糖尿病)而开发的治疗，诸如体重减轻、二甲双胍和噻唑烷二酮。
[0090] NAFLD被视为涵盖一定范围的疾病活动。这个范围始于肝脏中的脂肪累积(肝脂肪变性)。肝脏可以保持过多脂肪而不干扰肝功能，但通过改变诸多机制和对肝脏的可能的损伤也可能进展成NASH，即脂肪变性与炎症和纤维化组合的状态。NASH是进行性疾病：在10年周期内，多达20％的NASH患者将发生肝脏的肝硬化，并且10％将经历与肝病有关的死亡。NASH是NAFLD的最极端形式，并且被认为是未知原因性肝脏肝硬化的主要原因(McCulough AJ等,Clinics in Liver Disease 8(3):521-33,2004)。
[0091] NAFLD和NASH中的常见表现是升高的肝脏酶和显示脂肪变性的肝脏超声波。超声波还可以用于排除胆石问题(胆结石)。肝活组织检查(组织检查)是广泛当作确定性辨别NASH与其他形式的肝病的唯一测试，并且可用于评估炎症和所造成的纤维化的严重程度(Adams LA等,Postgrad Med J 82(967):315-22,2006)。已经开发了非侵袭性诊断测试，诸如评估肝脏纤维化的FibroTest和评估脂肪变性的SteatoTest，然而其使用尚未被广泛采纳(McCulough AJ等,Clinics in Liver Disease 8(3):521-33,2004)。
[0092] 虽然单独脂肪浸润不会造成肝脏损伤，但当它伴随炎症反应时，它可能导致纤维化和肝硬化和最终的肝功能衰竭。NASH中的炎症以肝脏被巨噬细胞和淋巴细胞浸润以及肝脏巨噬细胞样Kupfer细胞群体变化为特征(Tilg等,2010.Hepatology.52(5):1836-46)。炎性细胞因子，特别是TNF，对NASH病理学是最重要的。TNF的来源不清楚：它可能是周围的，即炎性脂肪组织，或局部的，即被门静脉来源的内毒素或被游离脂肪酸活化的先天免疫细胞。内毒素反应性TLR4受体已显示对小鼠NASH模型中的疾病非常重要(Tsukumo等,Diabetes 2007.56(8):1986-98)。
[0093] 已经研究了很多用于NAFLD和NASH的治疗。治疗方法包括：(i)对营养和过度体重的治疗；(ii)体重减轻；(iii)体重减轻手术；(iv)胰岛素敏化剂，包括二甲双胍和噻唑烷二酮；(v)维生素E可以改善一些症状；(vi)他汀类药物已经显示能在NAFLD患者中改善肝脏生物化学和组织学；McCulough AJ等,同上；Chalasani N.等,Gastroenterology142(7):1592-1609,2012)。
[0094] II型糖尿病和代谢综合征.II型糖尿病的特征在于抗胰岛素性和高血糖症，这又可导致视网膜病、肾病、神经病或其他发病。另外，糖尿病是动脉粥样硬化性心血管疾病的众所周知的风险因素。代谢综合征是指包括使患上心脏病、糖尿病或其他健康问题的风险增高的高血压、肥胖、高脂血症和抗胰岛素性(显现为明显糖尿病或高空腹血糖或葡萄糖耐受性减低)的因素群组；(Grundy等,Circulation.2004；109:433-438)。充分表征了从正常代谢状态进展到空腹血糖偏高(IFG：空腹血糖水平高于100mg/dL)状态或到葡萄糖耐受性降低(IGT：75克口服葡萄糖攻击后两小时血糖水平140至199mg/dL)状态。IFG和IGT两者都被视为糖尿病前状态，其中超过50％的IFG受试者平均在三年内进展到明显II型糖尿病(Nichols,Diabetes Care 2007.(2):228-233)。抗胰岛素性至少部分是由慢性低等级炎症造成(Romeo GR等,Arterioscler Thromb Vasc Biol.2012 32(8):1771-6；de Luca C等,FEBS Lett.2008 582(1):97-105；Ma K等,Diabetes Metab Res Rev.2012
28(5):388-94)。巨噬细胞在肥胖脂肪组织中累积，其中它们响应于饱和脂肪酸和循环脂多糖(LPS)的刺激而产生TNF和其他炎性细胞因子(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84；
Bhargava P等,Biochem J.2012 442(2):253-62)。此外，TNF抑制可以消除抗胰岛素性(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84)。
28(5):388-94)。巨噬细胞在肥胖脂肪组织中累积，其中它们响应于饱和脂肪酸和循环脂多糖(LPS)的刺激而产生TNF和其他炎性细胞因子(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84；
Bhargava P等,Biochem J.2012 442(2):253-62)。此外，TNF抑制可以消除抗胰岛素性(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84)。
[0095] 高脂血症在本文中被视为疾病，因为它是代谢异常相关的潜在病变。高脂血症涉及血液中的任何或所有脂质和/或脂蛋白的水平异常升高。术语脂质包括胆固醇和甘油三酯。存在许多不同类型的脂质(也称为脂蛋白)。血液测试可以测量脂蛋白的水平。标准脂质血液测试包括测量总胆固醇、LDL(低密度脂蛋白)和HDL(高密度脂蛋白)以及甘油三酯。
[0096] 总胆固醇—高总胆固醇水平可以增加个体的心血管疾病风险。然而，关于何时治疗高胆固醇的决定通常是基于LDL或HDL胆固醇水平，而非总胆固醇水平。低于200mg/dL(5.17mmol/L)的总胆固醇水平是正常的。200至239mg/dL(5.17至6.18mmol/L)的总胆固醇水平高达边界值。高于或等于240mg/dL(6.21mmol/L)的总胆固醇水平偏高。总胆固醇水平可以在一天当中的任何时间测量。测试前不必空腹(避免进食12小时)。
[0097] LDL胆固醇—低密度脂蛋白(LDL)胆固醇(有时称为“不良胆固醇”)是比总胆固醇更准确的心血管疾病预测因子。较高的LDL胆固醇含量会增加心血管疾病的风险。
[0098] 大部分保健提供者优选在未进食(空腹)12至14小时之后测量LDL胆固醇。也可利用测量未空腹人士的LDL的测试，但结果可能稍有不同。LDL胆固醇增加与心脏病发作和中风的风险增加相关。一般来说，LDL水平属于这些类别：低于100mg/dL，最佳；100至129mg/dL，接近或高于最佳；130至159mg/dL，高达边界值；160至189mg/dL，偏高；190mg/dL以上，非常高。
[0099] Framingham风险评分是用于估计个体的10年心血管风险的性别特异性算法，包括心血管事件、心肌梗死、中风、心力衰竭和其他事件的风险，这类心血管疾病代表着炎性疾病和/或与炎症相关的疾病。首先基于从Framingham Heart Study获得的数据开发了Framingham风险评分，以评估患上冠心病的10年风险(Wilson等,Prediction of coronary heart disease using risk factor categories.1998 Circulation97(18):1837-1847；D'Agostino 等 ,General cardiovascular risk profile for use in primary care:the Framingham Heart Study 2008.Circulation 117(6):743-753)。
Framingham风险评分是基于性别和合并了年龄、总胆固醇水平、抽烟史、HCL胆固醇水平和收缩压的性别特异性公式。
Framingham风险评分是基于性别和合并了年龄、总胆固醇水平、抽烟史、HCL胆固醇水平和收缩压的性别特异性公式。
[0100] 动脉粥样硬化和动脉粥样硬化性心血管疾病是动脉壁疾病。其以脂肪物质在动脉壁中累积，从而导致产生可能会破裂和造成血管堵塞和局部缺血的脂肪斑为特征。如果这类血管堵塞和局部缺血发生在冠状动脉中，则可能会引起心肌梗死。动脉粥样硬化的病变包括以炎性细胞(包括巨噬细胞以及较低程度的T和B细胞)累积以及高水平的炎性细胞因子、趋化因子和MMP的产生为特征的高度炎性背景(Libby等,Nature2011.473(7347):3170-25)。动脉粥样硬化还可能与低等级系统性炎症相关，如由血液中高水平的高灵敏度CRP(hsCRP)所证明，这一异常可以通过用药物瑞舒伐他汀进行治疗而得到部分补偿(Libby等,Nature 2011.473(7347):3170-25)。
[0101] 羟氯奎(HCQ)可以是用于治疗炎性疾病的有效消炎剂。然而，HCQ在这类疗法中的使用由于显著视网膜毒性风险而受到限制。因而，推荐警觉性眼科监测与剂量减少或甚至避免HCQ偶合，特别是对于视网膜毒性风险较高的患者。处在较高视网膜毒性风险下的个体包括服用HCQ超过五年的个体；具有其他风险因素，诸如高体脂肪水平、伴随肾病或肝病或伴随视网膜疾病；年龄超过60岁；或体形和/或体重特别小。具有伴随视网膜疾病或处在患上伴随视网膜疾病的显著风险之下的患者群体包括快速增长的患有II型糖尿病和相关代谢综合征的患者群体。由于糖尿病流行率目前在美国大部分地区超过10％并且正在接近其他发达国家的类似水平，所以这将显著比例的人口置于HCQ介导的视网膜毒性的较高风险之下。值得注意的是，在目前指示HCQ可用于其的炎性疾病(包括类风湿性关节炎和系统性狼疮)的患者中，II型糖尿病的比率进一步增加(Dubreil H,Rheumatology(2014)53(2):346-352)。另一种先前未用(也不建议用)HCQ治疗的炎性病状是非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。这是一种与肝脏的脂肪浸润相关且最常见与伴随存在II型糖尿病和相关代谢综合征相关的炎性病状。事实上，估计有86％的II型糖尿病患者患有NASH，这与NASH患者患有II型糖尿病的比例几乎相同(Verderese JP,Expert Rev Gastroenterol Hepatol.2013年7月；7(5):405-7)。因而，大多数NASH患者患有II型糖尿病并且一般处在视网膜毒性的较高风险之下，这是HCQ疗法的一个禁忌。因此，需要具有较低视网膜毒性的用于这类患者的改良疗法。
[0102] 羟氯奎(HCQ)的代谢物包括去乙基羟氯喹(DHCQ)、去乙基氯喹(DCQ)和双去乙基氯喹(BDCQ)；其化学结构提供于图1中。去乙基羟氯喹(DHCQ)被分配CAS 4298-15-1；并且也称为氯托喹；去乙基羟氯喹。
[0103] HCQ增加抗原呈现细胞中的溶酶体pH值，并且相信这是它发挥消炎效应和改变toll样受体(TLR)活性的主要机制(Waller等.Medical pharmacology andtherapeutics(第2版).第370页)。HCQ抑制浆细胞样树突状细胞、巨噬细胞和其他细胞上的TLR。可识别含DNA的免疫复合物的TLR，TLR 9的活化导致干扰素产生，且使得树突状细胞成熟并且将抗原呈现于T细胞。HCQ通过减少TLR 9信号传递来减少树突状细胞活化且因此减缓炎性过程。
[0104] 如本文中所描述，去乙基羟氯喹(DHCQ)相较于HCQ治疗在治疗或预防炎性疾病方面展现出类似的且在各个情况下优越的(图2至9、19至21)活性。此外，出乎意料且惊人惊讶地发现，仅HCQ的DHCQ代谢物在预防和治疗炎性疾病和与炎症相关的疾病方面展现出有效的效力，而HCQ的BDCQ和DCQ代谢物在治疗炎性疾病和与炎症相关的疾病方面不提供活性(图1、2、3、9、19和20)。除了出乎意料地在治疗炎性疾病方面展现效力以外，DHCQ还出乎意料且令人惊讶地在治疗代谢异常方面，具体来说在减轻高血糖症、减少血清脂质和治疗代谢诱导的炎性疾病方面展现优于HCQ的效力水平。
[0105] 尽管DHCQ和HCQ两者都在预防和治疗炎性疾病和与炎症相关的疾病方面展现活性，但与针对HCQ所观测的视网膜累积和毒性相比，DHCQ展现显著较少的视网膜累积以及显著较少的视网膜细胞毒性。在DHCQ下降低视网膜细胞毒性是出乎意料且令人惊讶的，因为仅用HCQ的DHCQ代谢物治疗而非用HCQ的BDCQ代谢物治疗能提供降低的视网膜毒性(图11至12)。此外，通过DHCQ降低视网膜细胞毒性是出乎意料且令人惊讶的，因为仅用HCQ的DHCQ代谢物治疗而非用HCQ的BDCQ代谢物治疗能提供降低的视网膜细胞毒性(图11至12)。另外，仅HCQ的DHCQ而非BDCQ和DCQ代谢物展现出消炎效力(图2、3、9、19和
20)。
20)。
[0106] 提供了组合物和方法以便通过向有此需要的个体施用有效剂量的氨基喹啉去乙基羟氯喹(DHCQ)来预防或治疗炎性疾病或与炎症相关的疾病，包括自身免疫疾病、退化性疾病、代谢疾病和其他炎性疾病。在其他实施方案中，本文中所提供的组合物和方法适合于治疗低等级炎症或改善炎症或治疗与炎症相关的疾病或治疗与炎症相关的疾病相关的代谢异常。本发明方法的一个益处在于能够传递可有效治疗炎症，同时使个体在羟氯奎(HCQ)治疗下免于发现视网膜累积和毒性的药剂剂量。与HCQ治疗相比，在治疗期间减少对视网膜毒性的监测可以是用DHCQ治疗的一个特色。相较于常规治疗方法和药剂，用DHCQ治疗可以在疾病过程中的早期开始，并且可以维持更长时间段。
[0107] 在一些实施方案中，本发明提供DHCQ或其药学上可接受的盐或酯的组合物；或DHCQ或其药学上可接受的盐或酯与一种或多种来自不同的药物类别的第二药剂(例如发挥独特但重叠的调节效应的药物)的组合，这些组合物是用于治疗炎性疾病。
[0108] 在人类中的最近临床观察显示服用常规剂量的HCQ(其中400mg/天是常用剂量)，视网膜毒性发病率随着疗法持续而显著增加且在治疗5年之后发生在大约1％的经过HCQ治疗的人类中并且在治疗10至15年之后大约2％的经过HCQ治疗的人类 中 (Marmor 等 ,Arthritis Care Res.2010；62(6):775-84；Levy 等 ,Incidence of hydroxychloroquine retinopathy in 1,207 patients in a large multicenter outpatient practice.Arthritis Rheumatism 1997,40(8):1482-6；Mavrikakis等,The incidence of irreversible retinal toxicity in patients treated with hydroxychloroquine:a reappraisal.Opthalmology,2003,110(7):1321-6)。值得注意的是，尽管观测到诸多等级的视网膜毒性，但医师由于早期眼睛问题(包括在眼科检查时注意到的无症状变化)中断HCQ的总比率在5年内达到所治疗的患者的7％(Marmor等,Rates and predictors of hydroxychloroquine retinal toxicity in patients with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus,Arthritis Care Res.2010；
62(6):775-84)。
62(6):775-84)。
[0109] 本发明的数据显示在能提供类似于利用HCQ的常规治疗的临床效力的剂量水平下，DHCQ令人惊讶地在活体内和活体外都展现出显著减少的视网膜累积以及显著降低的视网膜毒性(参见图11至18)。用DHCQ长期治疗的视网膜毒性的估计比率小于目前针对HCQ在以类似有效累积剂量且在类似时间段内使用时所报告的比率的50％。更具体来说，同Marmor等关于用HCQ治疗所描述的视网膜毒性比率(Ophthalmology.2011年2月；118(2):415-22)相比，考虑到HCQ和DHCQ的类似水平的治疗活性和给予时间段，估计DHCQ能提供与给予HCQ的视网膜毒性相比小于50％的视网膜毒性。因而，在类似于美国眼科学院(American College of Opthamolology)和Marmor等(Ophthalmology.2011年2月；
118(2):415-22)所描述的患者群体中，其中视网膜毒性比率在5年后接近1％，估计DHCQ疗法能将视网膜毒性降至不到所治疗个体的0.5％。此外，鉴于常规假定视网膜筛查证明毒性比率接近1％，降低与DHCQ疗法相关的视网膜毒性的累积比率将在大体上把对视网膜毒性筛查的需要减少到在5年和10年时单次筛查，或完全取消对筛查的需要。
118(2):415-22)所描述的患者群体中，其中视网膜毒性比率在5年后接近1％，估计DHCQ疗法能将视网膜毒性降至不到所治疗个体的0.5％。此外，鉴于常规假定视网膜筛查证明毒性比率接近1％，降低与DHCQ疗法相关的视网膜毒性的累积比率将在大体上把对视网膜毒性筛查的需要减少到在5年和10年时单次筛查，或完全取消对筛查的需要。
[0111] 应理解，本发明不局限于所描述的具体方法、方案、细胞系、动物种或属和试剂，因为这些可能变化。还应理解，本文中所使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，而不希望限制本发明的范围，本发明的范围将仅由所附权利要求书加以限制。
[0112] 除非上下文另外清楚指出，否则如本文中所使用，单数形式“一”和“所述”包括复数指示物。因而，举例来说，提到“细胞”包括多个这种细胞，并且提到“培养物”包括提到一种或多种培养物以及本领域技术人员已知的其等同物等等。除非另外清楚指出，否则本文中所使用的所有科技和科学术语均具有与本发明所属领域的技术人员通常所理解的相同的含义。
[0114] 炎性疾病是涉及炎症的疾病。炎症的存在可以通过多种方法检测，包括病历、身体检查、实验室化验、对组织的组织学分析、对生物指标的分析和成像。炎症的临床特征和身体检查指标包括肿胀、渗出物、浮肿、发红、发热、疼痛或病理上与炎性细胞的流入或炎性介体的产生相关。当显示炎性细胞数目增加时，实验室化验和/或组织学指标是异常的。炎症指标可以包括分子指标，并且分子指标的实例包括C反应蛋白、细胞因子、抗体、DNA序列、RNA序列、软骨指标、代谢指标、骨指标或其组合。成像可以揭示诸多表现，包括组织强化、浮肿和组织肿胀，以及指示炎症的其他表现。炎症的影像指标的实例可以包括使用磁共振成像、超声波、计算机断层摄影术、血管造影术，以及其组合测量的影像指标。
[0115] 存在低等级炎症的特征在于诸如TNF-α、IL-6和c反应蛋白(CRP)之类的细胞因子的局部或全身浓度升高，且发生在肥胖、骨关节炎、阿尔茨海默病、II型糖尿病、代谢综合征、冠状动脉疾病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎以及许多慢性和退化性疾病中。低等级炎症显现为在人类经历临床症状期间以低于在活性自身免疫疾病(诸如活性类风湿性关节炎、牛皮癣、克罗恩病、系统性红斑狼疮、自身免疫性肝病和其他自身免疫状态)中和在某些病毒和细菌传染中检测到的“高等级”炎症的水平存在的炎症(诸如流感病毒感染、金黄色葡萄球菌感染和其他感染)。
[0116] 炎症的减轻或改善是通过炎症消散、如症状缓解(包括但不限于疼痛缓解)所证明的炎性细胞数目减少或炎性介体水平降低、放射摄影变化、生物化学变化、病理学/组织学变化、这类炎症指标进展减缓、指示组织或器官损伤的表现的发展减缓、症状或病征的发展减缓或疾病发展减缓来指示。
[0117] 症状是个体注意到偏离正常功能或感觉，表明存在疾病或异常。症状是主观的，由个别患者观测到并且不能直接测量。
[0118] 病征或医学征象(本文中也称为指标)是可在身体检查期间通过对患者的活体内检查、通过实验室化验、通过放射摄影或其他成像化验或通过另一种指标检测的一些医学事实或特征的客观指标。病征或指标对患者可能没有意义，并且甚至可能未留意，但在辅助诊断造成患者症状的医学病状方面对保健提供者来说可能是有意义而且重要的。异常指标或征象的实例包括升高的血压(高于约140mmHg收缩压和/或90mmHg舒张压)、胆固醇(LDL高于约140mg/dL，甘油三酯高于约200mg/dL，或HDL低于约40mg/dL)、杵状指(其可能是肺病或许多其他疾病的征象)、老年环、软骨蛋白聚糖损失、血糖增加、肝脏炎症的某些指标的水平增加、时相蛋白水平升高(包括ESR高于约20、hsCRP高于约0.75mg/L)和其他表现。征象是可以客观地观测(即，通过除患者以外的某人)的任何医学病状指标，而症状仅仅是对患者显而易见的任何病状体现(即，可感知地影响患者的东西)。根据这一定义，可称无症状患者是不受疾病约束的。然而，医生可能在未经历“疾病”的无症状患者中发现高血压征象，且所述征象指示对患者造成危险的临床前或早期疾病状态。
[0119] 向动物、人类或其他哺乳动物施用药物或其他化学实体包括经由任何途径施用，包括但不限于口服、皮内、肌肉内、腹膜内或静脉内。
[0120] 药物制剂是包含不同的化学物质的组合物，包括但不限于经过合并和配制以产生用于治疗人类或其他生物体的最终医学产品的活性药物、赋形剂等。
[0121] 无菌制剂是大体上不含活菌或微生物的制剂。
[0123] 各个别药剂的剂量范围是如以上所定义的制剂和制剂施用频率中能防止产生症状、防止产生疾病指标或征象、防止产生组织或器官损伤、防止疾病进展、降低疾病严重程度或治疗疾病症状的活性药物质量。
[0124] 方案意味着剂量、施用频率(例如每天两次、每天一次、每周一次、每两周一次等)和治疗持续时间(例如一天、若干天、一周、若干周、一个月、若干个月、一年、若干年等)。
[0125] 负荷剂量是为了在体内更快达到治疗浓度而给予的较大初始剂量的物质或一系列这种剂量。负荷剂量可以比维持剂量高或低。在一些情况下，以负荷剂量开始治疗数天、数周或数个月，以便在体内快速达到药物或其他化学实体的治疗水平，且随后使剂量下降至长期维持剂量。在一些情况下，使用初始低剂量持续较短时间段，以使患者耐受和适应药物(例如每天约200mg，持续1周)，随后使用负荷剂量(例如约800mg/天，持续12周)，随后使用维持剂量(约400mg/天)。对于硫酸羟氯奎和磷酸氯喹，可以服用400mg/天的标准剂量持续4至6个月以达到治疗组织水平。因此，一些医师使用硫酸羟氯奎或磷酸氯喹的负荷剂量，例如至少约600mg/天(约10mg/kg/天)、至少约800mg/天(约13.3mg/kg/天)、至少约1000mg/天(约16.67mg/kg/天)和多达约1200mg/天(约20mg/kg/天)和多达约1600mg/天(约26.7mg/kg/天)的剂量持续1至16周，以便在需要其活性的组织中更快达到治疗水平。预计去乙基羟氯喹(DHCQ)还在组织中缓慢累积，使得当用DHCQ治疗时，使用例如至少约600mg/天(约10mg/kg/天)、至少约800mg/天(约13.33mg/kg/天)、至少约
1000mg/天(约16.67mg/kg/天)和多达约1200mg/天(约15mg/kg/天)、多达约1400mg/天(约23.33mg/kg/天)、多达约1600mg/天(约26.6mg/kg/天)的负载剂量持续1至24周且优选地持续1至16周也可以显示治疗益处。用于治疗炎性疾病的HCQ的负荷剂量论述于Furst等(Arthritis Rheum.1999年2月；42(2):357-65.PMID:10025931)中。
1000mg/天(约16.67mg/kg/天)和多达约1200mg/天(约15mg/kg/天)、多达约1400mg/天(约23.33mg/kg/天)、多达约1600mg/天(约26.6mg/kg/天)的负载剂量持续1至24周且优选地持续1至16周也可以显示治疗益处。用于治疗炎性疾病的HCQ的负荷剂量论述于Furst等(Arthritis Rheum.1999年2月；42(2):357-65.PMID:10025931)中。
[0126] 单位剂量(也称为剂型)本质上是呈出售以供使用的形式的药品，典型地包括活性药物成分与非药物成分(赋形剂)以及可能不被视为成分的其他非再使用物质或包装(举例来说，诸如胶囊壳)的混合物。取决于上下文，多单位剂量可以指与包装在一起的独特药物产品或含有多种药物和/或剂量的单一药物产品。术语剂型有时还可以仅指药物产品组成原料药和所涉及的任何共混物的化学制剂。
[0127] 剂量包装是分发给患者的固定或可变剂量且在包装(包括但不限于泡罩包装或出于促进剂量方案的目的的其他容器系列)中的预测量药物用量。剂量包装可用于促进向个体传递初始和/或负荷剂量随后是维持剂量。
[0128] 赋形剂一般是与药物治疗的活性药物成分(“API”)一起配制的药理学非活性物质。当生产剂型时，常使用赋形剂来对含有效活性成分的制剂进行增量(因而经常被称为“增量剂”、“填充剂”或“稀释剂”)，以允许便利又准确地分配原料药。其还可以服务于不同的治疗增强目的，诸如促进药物吸收或溶解，或其他药效动力学考虑。
[0129] “炎症指标”(本文中也称为炎症的生物指标)是体现在疾病前状态或疾病状态下存在炎症的客观测量特征，包括但不限于分子、生物化学、影像学或总体物理测量。如本文中所使用，“炎症指标”包括炎症指标、代谢指标、影像指标、生物化学指标、基因指标、蛋白质组指标、基因表达指标和可用于评估个体内炎症的其他指标。对个体中的异常指标的测量将该个体鉴别为处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的临床前期、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
[0130] 分子炎症指标(本文中也称为“生物指标”或“炎症生物指标”是从患者的组织(例如血液)样品获得的分子，其指示炎症的存在。这类指标的非限制性实例可以包括例如C反应蛋白、细胞因子、抗体、DNA序列、RNA序列、软骨指标、代谢指标、骨指标或其组合。分子炎症指标包括生物化学指标。
[0131] 炎症影像指标(本文中也称为“影像指标”或“影像生物指标”)是通过使用成像医疗器械(包括但不限于超声波、放射摄影术、计算机断层摄影术、磁共振成像或核医学扫描)来测量或者测定炎症的存在的指标。
[0132] 生物化学指标(本文中也称为“分子指标”)是血液或其他组织中作为生物指标加以测量的生物学物质。感兴趣的生物学生物指标包括但不限于蛋白质、核酸、代谢物、脂肪酸、肽等等。
[0133] “炎症指标”(本文中也称为“炎症生物指标”)是指示发炎状态的生物指标。感兴趣的炎症生物指标包括但不限于细胞因子、趋化因子、高灵敏度C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)、编码炎性介体的mRNA的表达、炎性细胞、显示炎症的影像学生物指标和指示炎症的其他指标。
[0134] 参考范围定义为95％正态群体所属的值集合。它典型地是指某一指标(本文中称为“指标”或“生物指标”，且这类指标的实例包括但不限于炎症指标、代谢指标、影像指标、生物化学指标、临床指标、放射摄影指标和其他生物指标)的值或水平。如果指标在个别患者中的值或水平在95％正态群体所属的值或水平集合以外，则所述指标被视为在该患者中展现异常水平(例如，该患者被确定为具有“异常指标”)。在一些实施方案中，如果炎症指标在个别患者中的值或水平在95％正态群体所属的值或水平集合以外，则所述炎症指标被视为在该患者中展现异常水平(例如，该患者被确定为具有“异常炎症指标”)。在一些实施方案中，如果代谢指标(也称为“代谢疾病指标”)在个别患者中的值或水平在95％正态群体所属的值或水平集合以外，则所述代谢指标被视为在该患者中展现异常水平(例如，该患者被确定为具有“异常代谢指标”)。在一些实施方案中，如果影像指标在个别患者中的结果在95％正态群体内所观测到的同一影像指标的变化范围以外，则所述影像指标被视为展现异常结果(例如，它是“异常影像指标”)。在一些实施方案中，如果临床指标在个别患者中的结果在95％正态群体内所观测到的同一临床指标的变化范围以外，则所述临床指标被视为展现异常结果(例如，它是“异常临床指标”)。对个体中的异常指标的测量将该个体鉴别为处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的临床前期、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
[0135] 氨基喹啉是喹啉衍生物，最值得注意的是其作为抗疟疾药物的作用。氨基喹啉类的代表性实例包括但不限于4-氨基喹啉，诸如氨酚喹、羟氯奎、氯喹；和8-氨基喹啉，诸如伯氨喹和帕马奎宁。这类药物可配制为“游离碱”或更通常为其盐。
[0136] 羟氯奎(HCQ)的代谢物包括去乙基羟氯喹(DHCQ)、去乙基氯喹(DHQ)和双去乙基氯喹(BDCQ)，并且其化学结构提供于图1中。图1B提供了图2至25中所提供的关于HCQ以及其代谢物DHCQ、DCQ和BDCQ的抗炎性疾病活性和抗代谢疾病活性(称为“效力”)和视网膜毒性(称为“毒性”)的实验数据的概括。
[0137] 如本文中所使用的短语“药学上可接受的盐”意指本发明化合物的被(例如，诸如FDA和EMEA之类的管理部门)视为对于口服和局部用于哺乳动物中安全且有效并且具有所需生物活性的盐。药学上可接受的盐包括本发明化合物中所存在的酸性或碱性基团的盐。药学上可接受的盐包括但不限于如本领域中已知的盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、丁二酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖二酸盐、糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、扑酸盐(即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘酸盐))、铝盐、钙盐、锂盐、镁盐、钾盐、钠盐、锌盐和二乙醇胺盐等等。
[0138] 本发明中的DHCQ剂量包含日剂量为至少每天约50mg(约0.83mg/kg/天)、至少每天约100mg(约1.67mg/kg/天)、至少每天约155mg(约2.58mg/kg/天)、至少每天约200mg(约3.33mg/kg/天)、至少每天约250mg(约4.16mg/kg/天)、至少每天约300mg(约
5mg/kg/天)、至少每天约310mg(约5.16mg/kg/天)、至少每天约350mg(约5.83mg/kg/天)、至少每天约400mg(约6.67mg/kg/天)、每天约450mg(约7.5mg/kg/天)、每天约
465mg(约7.75mg/kg/天)、每天约500mg(约8.33mg/kg/天)、每天约550mg(约9.16mg/kg/天)、每天约600mg(约10mg/kg/天)、每天约620mg(约10.33mg/kg/天)、每天约
800mg(约13.33mg/kg/天)、约930mg/kg/天(约15.5mg/kg/天)、每天约1000mg(约
16.67mg/kg/天)、每天约1200mg(约20mg/kg/天)、每天约1300mg(约21.67mg/kg/天)、每天约1400mg(约23.3mg/kg/天)、每天约1500mg(约25mg/kg/天)或每天约1600mg(约
26.67mg/kg/天)的DHCQ或其药学上可接受的盐或酯、由其组成或基本上由其组成，包括介于其之间的所有范围和子范围。在一个具体实施方案中，DHCQ药物组合物是以每天一次剂量传递。
5mg/kg/天)、至少每天约310mg(约5.16mg/kg/天)、至少每天约350mg(约5.83mg/kg/天)、至少每天约400mg(约6.67mg/kg/天)、每天约450mg(约7.5mg/kg/天)、每天约
465mg(约7.75mg/kg/天)、每天约500mg(约8.33mg/kg/天)、每天约550mg(约9.16mg/kg/天)、每天约600mg(约10mg/kg/天)、每天约620mg(约10.33mg/kg/天)、每天约
800mg(约13.33mg/kg/天)、约930mg/kg/天(约15.5mg/kg/天)、每天约1000mg(约
16.67mg/kg/天)、每天约1200mg(约20mg/kg/天)、每天约1300mg(约21.67mg/kg/天)、每天约1400mg(约23.3mg/kg/天)、每天约1500mg(约25mg/kg/天)或每天约1600mg(约
26.67mg/kg/天)的DHCQ或其药学上可接受的盐或酯、由其组成或基本上由其组成，包括介于其之间的所有范围和子范围。在一个具体实施方案中，DHCQ药物组合物是以每天一次剂量传递。
[0139] 如本文中所论述，在各个实施方案中，本发明的组合物和方法可以包含本文中所描述的DHCQ或其药学上可接受的盐或酯的所列举用量或每日剂量中的任一种。DHCQ可以在药物组合物中以片剂、悬浮液或胶囊形式传递。DHCQ药物组合物可以用每天单次施用或2、3、4、5或6个相等剂量的方式施用。除非另外规定，否则活性化合物(例如DHCQ)的药学上可接受的盐或酯的所指示剂量表达为活性化合物的相应“游离碱”(非盐、非酯)形式的量。
[0140] 描述了关于筛查HCQ介导的和其他氨基喹啉介导的视网膜毒性的当前推荐方案(Marmor等,Ophthalmology.2011,118(2):415-22；Bernstein HN.Surv Ophthalmol.1967年 10 月；12(5):415-47；Anderson C 等 ,Retina.2009；29(8):1188-92；Michaelides M等,Arch Ophthalmol.2011年1月；129(1):30-9)。所述推荐方案包括以这些药物开始充当参考点对患者进行基线检查。如果存在额外风险因素，包括总累积剂量超过1000g、维持剂量>6.5mg/kg/天、肾异常、肝病、潜在视网膜疾病或年龄超过60岁，则对眼睛毒性的年度筛查应在5年或更短时间后开始。年度筛查应包括10-2自动视野测试，以及以下测试中的至少一项：多焦视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层摄影术(SD-OCT)或眼底自发荧光影像(FAF)。因为mfERG测试是评估功能的客观测试，所以它可以用来代替视野测试。建议进行眼底检查以便记录，但明显牛眼黄斑病变是晚期变化，而筛查的目标在于检测早期毒性。在年度HCQ毒性筛查检查时，显示多焦视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层摄影术(SD-OCT)、眼底自发荧光影像(FAF)、视野测试和/或直接目测斑点的结果恶化(测试时性能劣化和/或视网膜或黄斑表现恶化)指示产生了视网膜毒性。氯喹/羟氯奎毒性的早期眼底变化包括中央凹反射丧失、黄斑水肿和在无赤光滤器下有所增强的色素斑驳化。黄斑外观与视野测试结果不良相关。降低的视网膜毒性(或较低视网膜毒性)意指这些测试结果稳定且相对于初步预处理基线检查中所获得的基线结果无变化。
[0141] 基线中心视野检查(视野测定)可能有用，因为由于氨基喹啉和HCQ毒性所致的最早黄斑变化是非特异性的并且无法与年龄相关的变化区分。推荐Humphrey 10-2方案(白靶)用于证实通过阿姆斯勒方格表所发现的缺陷。
[0142] 视网膜电流图(ERG)可以是全视野、焦点或多焦点的。焦点ERG技术可以记录来自中心窝和中心窝旁区域的ERG反应。典型地用于大型临床中心的mfERG更适合于评估氯喹和/或羟氯奎毒性，因为它在地形上横跨后极产生局部ERG反应，并且可以记录ERG抑制的牛眼分布。mfERG客观地评估功能，并且可用来代替视野。
[0143] 谱域光学相干断层扫描术(SD-OCT)测量长期暴露于羟氯奎或氯喹的患者的视乳头旁视网膜神经纤维层(RNFL)厚度和黄斑内外视网膜厚度。OCT可用于在临床上明显的视网膜病中检测视乳头RNFL变薄。另外，可以在不存在临床上明显的眼底变化的情况下或在临床上明显的眼底变化之前检测黄斑内视网膜的选择性变薄。
[0144] 在动物研究中，在开始氯喹治疗后1周内可见的最初形态变化包括显现细胞质膜性小体的神经节细胞。视网膜的其他神经细胞稍后显示这些变化。可逆变化的存在持续至多5个月的治疗。延长治疗导致神经节细胞以及感光细胞体和核(涉及外节)的进行性退化。最严重的变化可能是中心窝旁，相对回避中心窝。色素上皮和脉络膜异常仅在神经节细胞退化后可见，且光感受器已确立。所描述的所有观测结果都是在眼底或ERG上可检测到任何异常之前进行。对氯喹视网膜病患者的病理学研究很少，并且局限于晚期视网膜病的情况。一致性表现包括外视网膜，特别是光感受器和外核层的退化，从而相对回避中心窝中的光感受器。可见色素移行至视网膜中。神经节细胞中的病理学变化是一致性表现。视网膜小动脉硬化是可变的。
[0145] 在治疗处在视网膜毒性的较高风险之下的患者时往往忌用HCQ，这是由于HCQ在这类患者中的不理想安全轮廓。处在视网膜毒性的较高风险之下的患者包括具有诸如糖尿病性或高血压性视网膜病变、视网膜创伤前黄斑变性之类的已知视网膜异常的患者。在任何I型或II型糖尿病患者、长期(例如约5年或更久)服用HCQ的患者、接受约1000g或更多的累积剂量的患者、超过60岁的患者或小身型患者(理想体重约60kg或更轻)以及肥胖患者和具有肝或肾损伤的患者中存在类似较高的风险。
[0146] 退出所述药物治疗且转向另一种治疗形式是对具有HCQ和其他氨基喹啉相关早期视网膜毒性或视网膜异常的个体的标准护理。委托与风湿病学家或皮肤病学家协作以便综合性护理所述患者。如果发生由于过度剂量或敏感性所致的严重中毒症状，则建议在已经停止治疗后经口施用氯化铵(每天8g，以分次剂量用于成人)，每周3至4次持续数月。用氯化铵使尿液酸化可使4-氨基喹啉化合物的肾排泄增加20％至90％。在肾功能受损和/或代谢性酸中毒患者中，必需小心。
[0147] 最近临床观察显示在服用常规剂量的HCQ(400mg/天是常见剂量)的人类中，视网膜毒性流行率是每1,000名使用者中有6.8名使用者(Marmor等,Ophthalmology.2011年2月；118(2):415-22)。流行率取决于HCQ使用的持续时间。毒性在使用5至7年之后急剧增至1％。治疗>15年引起甚至更高比率的视网膜毒性。
[0148] 基于本文中所提供的发现，当以相同有效总累积剂量且在相同时间段内使用DHCQ和HCQ时，用DHCQ长期治疗炎性疾病或病状之后的视网膜毒性比率将低于用HCQ治疗时所报告的(Marmor等描述了用单独HCQ治疗时的视网膜毒性比率(Ophthalmology.2011年2月；118(2):415-22)))。基于年度筛查多焦视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层摄影术(SD-OCT)、眼底自发荧光影像(FAF)、视野测试和/或直接目测黄斑时的结果恶化(测试时性能劣化和/或视网膜或黄斑表现恶化)来鉴别HCQ介导的视网膜毒性。降低的视网膜毒性(或较低的视网膜毒性)意指对于经DHCQ治疗的个体组，与关于经HCQ治疗的个体所报告的相比(或与经HCQ治疗的个体组相比)，将存在至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且可能大约或至多低50％的视网膜毒性比率(例如基于年度筛查测试结果上视网膜或黄斑的功能或性能恶化或者异常体征或表现的产生或恶化来确定毒性)。
[0149] 用于记录接受DHCQ治疗的个体中相较于服用HCQ的个体在类似有效累积剂量下和在类似时间段内的视网膜毒性比率(发病率)的特定测量包括但不限于以下(Marmor,Ophthalmology.2011年2月；118(2):415-22)：
[0150] (1)眼科检查。彻底眼科放瞳眼底检查用于检查视网膜黄斑以证明牛眼黄斑病。明显牛眼视网膜病指示毒性持续时长足以导致RPE退化，并且是相对较晚的表现。与用HCQ治疗相比，在类似有效累积剂量下和在类似时间段内治疗5年、10年、15年和20年时，用DHCQ治疗提供低至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约
75％且可能大约或至多低50％的牛眼黄斑病比率。
75％且可能大约或至多低50％的牛眼黄斑病比率。
[0151] (2)自动临限视野。视觉灵敏度的中心窝旁损失可以在眼底检查时可见变化之前出现。用白色10-2模式进行的自动临限视野测试(即，在中心窝10度内用白靶进行的测试)在黄斑区内得到高分辨率。任何可再现性降低中心或中心窝旁斑点的表现均可指示早期毒性。晚期毒性典型地将显示充分发育的中心旁暗点(有或无中心敏感性损失)。与用HCQ治疗相比，在类似有效累积剂量下和在类似时间段内治疗5年、10年、15年和20年时，用DHCQ治疗提供至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且至多低50％的受抑制的中心或中心窝旁斑点比率。与用HCQ治疗相比，在类似有效累积剂量下和在类似时间段内治疗5年、10年、15年和20年时，预期用DHCQ治疗与至少约
25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且可能大约或至多低50％的可再现性减少的中心或中心窝旁斑点比率相关。
25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且可能大约或至多低50％的可再现性减少的中心或中心窝旁斑点比率相关。
[0152] (3)谱域光学相干断层摄影术。光学相干断层摄影术显示黄斑中的视网膜层的横截面。高分辨率仪器(SD或傅里叶域OCT)可以显示中心窝旁区域中的视网膜层局部变薄且证实毒性。内/外节衬里损失可以是中心窝旁损伤的早期客观征象。需要进一步研究来评估SD-OCT相对于视野或mfERG的灵敏度，但许多情况在视野损失之前已经显示显著SD-OCT变化；16,19-22SD-OCT测试是快速的且设备可用于许多办公室和诊所。与用HCQ治疗相比，在类似有效累积剂量下和在类似时间段内治疗5年、10年、15年和20年时，用DHCQ治疗提供至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且可能至多低50％的中心窝旁区域中视网膜层局部变薄比率。
[0153] (4)眼底自发荧光影像。自发荧光影像可以显示具有较低自发荧光的隐蔽RPE缺陷，或显示早期光感受器损伤区域(其表现为由于外节碎片累积所致的自发荧光增加)。其相对于荧光素血管造影术具有更快且不需要染料注射的优势。一些情况在视野损失之前已显示FAF异常。与用HCQ治疗相比，在类似有效累积剂量下和在类似时间段内治疗5年、10年、15年和20年时，用DHCQ治疗提供至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且至多低50％的具有减少的自发荧光或早期光感受器损伤区域的隐蔽RPE缺陷比率。
[0154] (5)多焦视网膜电流图。mfERG在地形上横跨后极产生局部ERG反应，并且可以客观地记录早期CQ和HCQ视网膜病中的局部中心窝旁ERG抑制。mfERG可能比白色10-2视野对早期中心窝旁功能损失更敏感。与用HCQ治疗相比，在类似有效累积剂量下和在类似时间段内治疗5年、10年、15年和20年时，用DHCQ治疗提供至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且至多低50％的局部中心窝旁ERG抑制比率。
[0155] 如本文中所描述，同本领域中所描述的视网膜毒性比率相比，鉴于HCQ的类似水平的治疗活性和给药时间段，与以类似有效总累积HCQ剂量使用HCQ治疗相比，用DHCQ治疗提供较低视网膜毒性。在一个实施方案中，大体上无视网膜毒性意指在类似于美国眼科学院(American College of Opthamolology)和Marmor等(Ophthalmology.2011年2月；118(2):415-22)所描述的患者群体中，其中视网膜毒性比率在用HCQ治疗的个体中在5年后接近1％，用DHCQ治疗将使视网膜毒性比率降至不到所治疗个体的约0.5％。基于年度筛查多焦视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层摄影术(SD-OCT)、眼底自发荧光影像(FAF)、视野测试和/或直接目测黄斑检查上的结果恶化(测试时性能劣化和/或视网膜体检异常或黄斑物理性质或表现发展或恶化)来鉴别HCQ介导的视网膜毒性。此外，鉴于当前假定视网膜筛查被判断证明毒性比率接近1％，降低与DHCQ疗法相关的视网膜毒性的累积比率又可以把对视网膜毒性筛查的需要减少到在5年和10年时单次筛查，或完全取消对筛查的需要，或在疗法启动后7年开始每隔一年进行筛查。由于DHCQ的较低视网膜毒性，故同用HCQ治疗相比，使用DHCQ将能够传递较高的总累积剂量，从而能够在较高日剂量下和/或在较长时间段内给予DHCQ，由此在治疗炎性疾病方面提供更大的效力。由于DHCQ的较低视网膜毒性，使用DHCQ将能够治疗处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下、处在临床前期或处在早期的个体，所述个体需要长时间治疗以防止患上炎性疾病或与炎症相关的疾病。
[0156] 在另一个实施方案中，大体上无视网膜毒性意指在一组是用DHCQ治疗而第二组是用HCQ治疗的受试者组中(当DCHQ和HCQ是以相同的总累积剂量使用时)，在治疗5年之后，用DHCQ治疗的那组将展现与用HCQ治疗的那组相比低大约50％的视网膜毒性发病率。在另一个实施方案中，大体上无视网膜毒性意指在一组是用DHCQ治疗而第二组是用HCQ治疗的受试者组中(当DHCQ和HCQ是以相同的总累积剂量使用时)，在治疗10年之后，用DHCQ治疗的那组将展现与用HCQ治疗的那组相比低大约50％的视网膜毒性发病率。在另一个实施方案中，大体上无视网膜毒性意指在一组是用DHCQ治疗而第二组是用HCQ治疗的受试者组中(当DHCQ和HCQ是以相同的总累积剂量使用时)，在治疗15年之后，用DHCQ治疗的那组将展现与用HCQ治疗的那组相比低大约50％的视网膜毒性。在另一个实施方案中，大体上无视网膜毒性意指在一组是用DHCQ治疗而第二组是用HCQ治疗的受试者组中(当DHCQ和HCQ是以类似的总累积剂量使用时)，在治疗20年之后，用DHCQ治疗的那组将展现与用HCQ治疗的那组相比低大约50％的视网膜毒性发病率。
[0157] 除如以上所描述降低视网膜毒性发病率以外，使用DHCQ还可以在发生视网膜毒性时降低其严重程度。使用DHCQ降低视网膜毒性的严重程度意指对于产生视网膜毒性的服用DHCQ的个体，与关于用HCQ在类似的累积剂量下和在类似的时间段内治疗个体所报告的相比，视网膜毒性严重程度将存在至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且可为大约或至多约50％的降低(例如，基于年度筛查结果上视网膜或黄斑的功能或性能恶化或者异常体征或表现发展或恶化确定的毒性程度)。
[0158] 如以上所论述，描述了关于筛查HCQ介导的和其他氨基喹啉介导的视网膜毒性的当前推荐方案(Marmor等,Ophthalmology.2011,118(2):415-22；Bernstein HN.Surv Ophthalmol.1967年10月；12(5):415-47；Anderson C等,Retina.2009；29(8):1188-92；Michaelides M等,Arch Ophthalmol.2011年1月；129(1):30-9)。所述推荐方案包括以这些药物开始充当参考点对患者进行基线检查。在此基线检查后，推荐方案是在HCQ治疗5年时开始在具有视网膜毒性的风险因素的个体中每年筛查视网膜毒性。对于具有视网膜毒性风险因素的个体，推荐在个体达到5年HCQ治疗之前开始年度筛查。所述推荐方案提出视网膜毒性风险因素包括以下各项中的一项或多项：硫酸HCQ的总累积剂量超过1000g、硫酸HCQ的维持剂量>6.5mg/kg/天、肾机能不全、肝病、潜在视网膜疾病、年龄超过60岁。年度筛查应包括10-2自动视野测试，以及以下测试中的至少一项：多焦视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层摄影术(SD-OCT)或眼底自发荧光影像(FAF)。因为mfERG测试是评估功能的客观测试，所以它可以用来代替视野测试。建议进行眼底检查以便记录，然而，明显牛眼黄斑病变是晚期变化，而筛查的目标在于检测早期毒性。在年度HCQ毒性筛查检查时，显示多焦视网膜电流图(mfERG)、谱域光学相干断层摄影术(SD-OCT)、眼底自发荧光影像(FAF)、视野测试和/或直接目测斑点的结果恶化(测试时性能劣化和/或视网膜或黄斑表现恶化)指示产生了视网膜毒性。氯喹/羟氯奎毒性的早期眼底变化包括中央凹反射丧失、黄斑水肿和在无赤光滤器下有所增强的色素斑驳化。黄斑外观与视野测试结果不良相关。
降低的视网膜毒性(或较低视网膜毒性)意指这些测试结果稳定且相对于初步预处理基线检查中所获得的基线结果无变化。
降低的视网膜毒性(或较低视网膜毒性)意指这些测试结果稳定且相对于初步预处理基线检查中所获得的基线结果无变化。
[0159] 本文中所描述的DHCQ相对于诸如HCQ之类的常规疗法具有较低DHCQ毒性的发现减少了关于视网膜毒性的担忧，且因此当使用DHCQ时，与HCQ相比可以在晚些时候安全地启动视网膜毒性筛查。在一个实施方案中，使用DHCQ将允许在启动疗法后约5年时开始安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ将允许在启动疗法后约7年时开始安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ将允许在启动疗法后约10年时开始安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ将允许在启动疗法后约15年时开始安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ将允许在启动疗法后约20年时开始安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ将允许不进行视网膜毒性筛查。相比之下，使用HCQ要求在基线时和启动HCQ疗法后5年时开始每年进行视网膜毒性筛查。
[0160] 类似地，与用HCQ治疗相比，DHCQ的较低毒性允许不太频繁地进行视网膜毒性筛查。在一个实施方案中，使用DHCQ允许以约1年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约18个月的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。
在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约2年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约3年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约5年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约7年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约10年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ使得患者能够在不进行任何视网膜毒性筛查的情况下继续治疗。
在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约2年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约3年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约5年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约7年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许以约10年的时间间隔安全地进行视网膜毒性筛查。在另一个实施方案中，使用DHCQ使得患者能够在不进行任何视网膜毒性筛查的情况下继续治疗。
[0161] 在另一个实施方案中，治疗使用DHCQ允许在处在视网膜毒性的较高风险之下的个体中安全使用或持续使用氨基喹啉疗法，包括但不限于先前使用羟氯奎的个体。在一个实施方案中，使用DHCQ使得能够对处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的个体进行治疗(或持续治疗)，因为其先前使用HCQ超过约2.5年。在另一个实施方案中，使用DHCQ使得能够对处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的个体进行治疗(或持续治疗)，因为其先前使用HCQ超过约5年。在另一个实施方案中，使用DHCQ使得能够对处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的个体进行治疗(或持续治疗)，因为其先前使用HCQ超过约7年。在另一个实施方案中，使用DHCQ使得能够对处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的个体进行治疗(或持续治疗)，因为其先前使用HCQ超过约10年。在另一个实施方案中，使用DHCQ使得能够对处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的个体进行治疗(或持续治疗)，因为其先前使用HCQ超过约15年。
[0162] 在另一个实施方案中，使用DHCQ疗法使得能够在年龄>60岁的个体中进行氨基喹啉疗法(或持续疗法)。在另一个实施方案中，使用DHCQ疗法使得能够对患有视网膜病、处在潜在视网膜病的风险之下、其他眼病变或已经服用1000克或更多HCQ的小身型或低体重个体进行治疗。在某些情况下被文献中称为小身型或矮小身型的矮身型是指体重<60千克或小于135磅的人类。
[0163] 在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中使用氨基喹啉疗法(或持续疗法)，因为他们已经在其一生中服用了1000克或更多的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中使用氨基喹啉疗法(或持续疗法)，因为他们已经在其一生中服用了2000克或更多的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中使用氨基喹啉疗法(或持续疗法)，因为他们已经在其一生中服用了3000克或更多的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中使用氨基喹啉疗法(或持续疗法)，因为他们已经在其一生中服用了5000克或更多的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ降低了氨基喹啉疗法在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中的风险，因为他们已经在其一生中服用了>500克的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ降低了氨基喹啉疗法在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中的风险，因为他们已经在其一生中服用了>250克的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ降低了氨基喹啉疗法在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中的风险，因为他们已经在其一生中服用了>100克的HCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ降低了氨基喹啉疗法在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中的风险，因为他们已经在其一生中服用了>50克的HCQ剂量。
[0164] 在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中安全使用氨基喹啉疗法，因为他们已经在其一生中服用了1000克或更多的DHCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在处在不可接受水平的视网膜毒性的风险之下的患者中安全使用氨基喹啉疗法，因为他们已经在其一生中服用了2000克或更多的DHCQ剂量。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在已经在其一生中服用了3000克或更多的DHCQ剂量的患者中安全使用氨基喹啉疗法。在另一个实施方案中，使用DHCQ允许在已经在其一生中服用了5000克或更多的DHCQ剂量的患者中安全使用氨基喹啉疗法。在另一个实施方案中，使用DHCQ提供了在已经在其一生中服用了>500克的DHCQ剂量的患者中使用氨基喹啉疗法的较低风险。在另一个实施方案中，使用DHCQ提供了在已经在其一生中服用了>250克的DHCQ剂量的患者中使用氨基喹啉疗法的较低风险。在另一个实施方案中，使用DHCQ提供了在已经在其一生中服用了>100克的DHCQ剂量的患者中使用氨基喹啉疗法的较低风险。在另一个实施方案中，使用DHCQ提供了在已经在其一生中服用了>50克的DHCQ剂量的患者中使用氨基喹啉疗法的较低风险。
[0165] 在另一个实施方案中，使用DHCQ在将成为利用抗疟疾剂(包括但不限于HCQ)的疗法的候选人的患者中提供了由氨基喹啉疗法带来视网膜毒性的较低风险。在另一个实施方案中，使用DHCQ在将成为利用抗疟疾剂(包括但不限于HCQ)的疗法的候选人的肥胖患者(体重指数>30)中提供了由氨基喹啉疗法带来视网膜毒性的较低风险。在另一个实施方案中，使用DHCQ在将成为利用抗疟疾剂(包括但不限于羟氯奎)的疗法的候选人的小身型(体重指数<18.5)和/或低理想体重(<60Kg)患者中提供了由氨基喹啉疗法带来视网膜毒性的较低风险。
[0166] 在另一个实施方案中，使用DHCQ在将成为利用抗疟疾剂(包括但不限于HCQ)的疗法的候选人的肾损伤(肌酐廓清率<60ml/ml)或肝损伤(血清白蛋白<3.5mg/dL或INR>1.2或直接胆红素>0.2mg/dL)患者中提供了由氨基喹啉疗法带来视网膜毒性的较低风险。
[0167] 在另一个实施方案中，使用DHCQ提供了在将成为利用抗疟疾剂(包括但不限于羟氯奎)的疗法的候选人的潜在视网膜病(包括糖尿病性或高血压性视网膜病变、黄斑变性或先前视网膜创伤)患者中使用氨基喹啉疗法的较低风险。
[0168] 在另一个实施方案中，使用DHCQ提供了在将成为利用抗疟疾剂(包括但不限于羟氯奎)的疗法的候选人的处在并发性视网膜病的风险之下的患者(包括糖尿病患者、高血压患者和有明显黄斑退化家族史的患者)中使用氨基喹啉疗法的较低风险。
[0169] 他汀类药物是HMG-CoA还原酶的抑制剂。不同的出版物中详细描述了这些药剂。举例来说，美伐他汀和相关化合物公开于美国专利号3,983,140中；洛伐他汀(麦维诺素)和相关化合物公开于美国专利号4,231,938中；帕伐他汀和相关化合物公开于美国专利号
4,346,227中；辛伐他汀和相关化合物公开于美国专利号4,448,784和4,450,171中；氟伐他汀和相关化合物公开于美国专利号5,354,772中；阿托伐他汀和相关化合物公开于美国专利号4,681,893、5,273,995和5,969,156中；且西立伐他汀和相关化合物公开于美国专利号5,006,530和5,177,080中。其他的他汀类化合物公开于美国专利号5,208,258、
5,130,306、5,116,870、5,049,696、RE 36,481和RE 36,520中。他汀类药物包括其盐和/或酯。
4,346,227中；辛伐他汀和相关化合物公开于美国专利号4,448,784和4,450,171中；氟伐他汀和相关化合物公开于美国专利号5,354,772中；阿托伐他汀和相关化合物公开于美国专利号4,681,893、5,273,995和5,969,156中；且西立伐他汀和相关化合物公开于美国专利号5,006,530和5,177,080中。其他的他汀类化合物公开于美国专利号5,208,258、
5,130,306、5,116,870、5,049,696、RE 36,481和RE 36,520中。他汀类药物包括其盐和/或酯。
[0170] 出于本发明的目的，他汀类药物与DHCQ(或其盐或酯)的组合的有效剂量是当施用了合适的时间段，通常是至少约一周、约两周或更久，或多达诸如数月或数年之类的较长时间段时将证明疾病进展被减缓的剂量。本领域技术人员应理解，可以在所述时间段内施用初始剂量，随后施用在有些情况下将处在较少剂量之下的维持剂量。
[0171] 他汀类药物的配制和施用是众所周知的，并且一般将遵循常规用法。治疗炎症所需的剂量可能与用于治疗高胆固醇的剂量相称。举例来说，阿托伐他汀可以按至少约1mg、至少约5mg、至少约10mg且不超过约250mg、不超过约150mg或不超过约80mg，包括介于其之间的值、范围和子范围的日剂量加以施用。一般来说他汀类药物且具体来说阿托伐他汀的使用可以按约1至250mg(约0.01至2.5mg/kg)的剂量，而DHCQ具体来说按每天约50至1000mg(约0.83至16.67mg/kg)。表1提供了半衰期(T1/2)、最大浓度(Cmax，mg/L)、达到Cmax所花费的时间(Tmax，小时)、分布体积(Vd，L)和阿托伐他汀的经口生物利用率百分比。
[0172] DHCQ(或其盐或酯)和/或他汀类药物可以并入多种制剂中以用于治疗性施用。更具体来说，本发明化合物可以通过单独或与氨基喹啉组合与适当的药学上可接受的载剂或稀释剂组合而配制成药物组合物，并且可以配制成呈固体、半固体、液体或气体形式的制剂，诸如片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、软膏、溶液、栓剂、注射液、吸入剂、凝胶剂、微球体和气雾剂。因而，化合物的施用可以用多种方式实现，包括经口、颊、直肠、肠胃外、腹膜内、皮内、透皮、气管内、关节内等施用。活性剂在施用后可以是系统性的，或可以通过使用区域性施用、壁内施用或使用能将活性剂量保留在植入部位的植入物加以定位。在具体的实施方案中，制剂是口服制剂。
[0173] 使用组合疗法可以允许各单一疗法的剂量低于标准操作中目前所使用的，同时实现显著效力，包括超过常规给予任一种单一疗法时的效力。本领域技术人员应容易了解，剂量水平可以随特定化合物、症状严重程度和受试者对副作用的敏感性而变化。一些特定化合物比其他的更有效。指定化合物的优选剂量可由本领域技术人员通过多种手段容易地确定。优选手段是测量指定化合物的生理学效力。使用组合疗法可以允许各单一疗法的剂量低于标准操作中目前所使用的，同时实现显著效力，包括比常规给予任一种单一疗法时所实现的更大的效力。
[0174] 可用于本发明方法的他汀类药物的特定实例是阿托伐他汀(LIPITORTM)；西立伐TM TM TM TM他汀(LIPOBAY )；氟伐他汀(LESCOL )；洛伐他汀(MEVACOR )；美伐他汀(COMPACTIN )；
TM TM TM
匹伐他汀(LIVALO )；帕伐他汀(PRAVACHOL )；瑞舒伐他汀(CRESTOR )；辛伐他汀TM
(ZOCOR )；等等。
TM TM TM
匹伐他汀(LIVALO )；帕伐他汀(PRAVACHOL )；瑞舒伐他汀(CRESTOR )；辛伐他汀TM
(ZOCOR )；等等。
[0175] 本发明的组合药物产品可作为活性成分、DHCQ和他汀类药物的单一制剂或两种单独的制剂来提供。在具体的实施方案中，相对于施用呈单一药剂形式的任一种药物，组合在疾病指标或疾病症状方面提供协同改善。
[0176] 在一些实施方案中，活性剂的制剂或组合基本上由DHCQ与阿托伐他汀的组合组成，即，所述制剂中不包括额外活性剂，但将存在赋形剂、包装等等。在一些实施方案中，所述制剂不含NSAID，包括阿司匹灵。在一些实施方案中，所述制剂不含叶酸或叶酸盐。重要的是，这种组合不需要使用抗生素、抗病毒剂或抗细菌剂，且在一些实施方案中，所述制剂不含抗生素、抗病毒剂或抗细菌剂。
[0177] 所述组合可以基于两种药物的剂量比来限定，其中DHCQ通常表达为所存在的基质药物的量，即，不包括反离子的重量贡献。在所述组合物包含DHCQ和阿托伐他汀的情况下，这两种活性剂的比率可以在约160mg:80mg(约2.6mg/kg:1.3mg/kg)至约600mg:1mg( 约 10mg/kg:0.016mg/kg)、约 500mg:100mg(约 8.33mg/kg:1.6mg/kg) 至约500mg:10mg(约8.33mg/kg:0.16mg/kg)、约100mg:10mg(约1.6mg/kg:0.16mg/kg) 至约600mg:10mg(约10mg/kg:0.16mg/kg)、至约150mg:10mg(2.5mg/kg:0.16mg/kg)、至约600mg:20mg(约10mg/kg:0.28mg/kg)的范围内。
[0178] 在一个具体的实施方案中，去乙基羟氯喹(DHCQ)与阿托伐他汀的组合是按以下每日一次固定剂量(DHCQ基质mg:阿托伐他汀基质mg)之一来施用：约800:80、约600:80、约500:80、约465:80、约450:80、约425:80、约400:80、约375:80、约325:80、约310:80、约300:80、约275:80、约250:80、约225:80、约200:80、约155:80、约100:80、约800:60、约600:60、约500:60、约465:60、450:60、约425:60、约400:60、约375:60、约
325:60、约310:60、约300:60、约275:60、约250:60、约225:60、约200:60、约155:60、约
100:60、800:50、600:50、500:50、465:50、450:50、425:50、400:50、375:50、325:50、310:50、约300:50、约275:50、约250:50、约225:50、约200:50、约155:50、约100:50、约800:45、约600:45、约500:45、约465:45、约450:45、约425:45、约400:45、约375:45、约325:45、约310:45、约300:45、约275:45、约250:45、约225:45、约200:45、约155:45、约100:45、约800:40、约600:40、约500:40、约465:40、约450:40、约425:40、约400:40、约375:40、约325:40、约310:40、约300:40、约275:40、约250:40、约225:40、约200:40、约155:40、约100:40、约800:35、约600:35、约500:35、约465:35、约450:35、约425:35、约400:35、约375:35、约325:35、约310:35、约300:35、约275:35、约250:35、约225:35、约200:35、约155:35、约100:35、约800:30、约600:30、约500:30、约465:30、约450:30、约425:30、约400:30、约375:30、约325:30、约310:30、约300:30、约275:30、约250:30、约225:30、约200:30、约155:30、约100:30、约800:25、约600:25、约500:25、约465:25、约450:25、约425:25、约400:25、约375:25、约325:25、约310:25、约300:25、约275:25、约250:25、约225:25、约200:25、约155:25、约100:25、约800:20、约600:20、约500:20、约465:20、约450:20、约425:20、约400:20、约375:20、约325:20、约310:20、约300:20、约275:20、约250:20、约225:20、约200:20、约155:20、约100:20、约800:15、约600:15、约500:15、约465:15、约450:15、约425:15、约400:15、约375:15、约325:15、约310:15、约300:15、约275:15、约250:15、约225:15、约200:15、约155:15、约100:15、约800:10、约600:10、约500:10、约465:10、约450:10、约425:10、约400:10、约375:10、约325:10、约310:10、约300:10、约275:10、约250:10、约225:10、约200:10、约155:10、约100:10、约800:5、约600:5、约500:5、约465:5、约450:5、约425:5、约400:5、375:5、约325:5、约310:5、约
300:5、约275:5、约250:5、约225:5、200:5、约155:5或约100:5。
325:60、约310:60、约300:60、约275:60、约250:60、约225:60、约200:60、约155:60、约
100:60、800:50、600:50、500:50、465:50、450:50、425:50、400:50、375:50、325:50、310:50、约300:50、约275:50、约250:50、约225:50、约200:50、约155:50、约100:50、约800:45、约600:45、约500:45、约465:45、约450:45、约425:45、约400:45、约375:45、约325:45、约310:45、约300:45、约275:45、约250:45、约225:45、约200:45、约155:45、约100:45、约800:40、约600:40、约500:40、约465:40、约450:40、约425:40、约400:40、约375:40、约325:40、约310:40、约300:40、约275:40、约250:40、约225:40、约200:40、约155:40、约100:40、约800:35、约600:35、约500:35、约465:35、约450:35、约425:35、约400:35、约375:35、约325:35、约310:35、约300:35、约275:35、约250:35、约225:35、约200:35、约155:35、约100:35、约800:30、约600:30、约500:30、约465:30、约450:30、约425:30、约400:30、约375:30、约325:30、约310:30、约300:30、约275:30、约250:30、约225:30、约200:30、约155:30、约100:30、约800:25、约600:25、约500:25、约465:25、约450:25、约425:25、约400:25、约375:25、约325:25、约310:25、约300:25、约275:25、约250:25、约225:25、约200:25、约155:25、约100:25、约800:20、约600:20、约500:20、约465:20、约450:20、约425:20、约400:20、约375:20、约325:20、约310:20、约300:20、约275:20、约250:20、约225:20、约200:20、约155:20、约100:20、约800:15、约600:15、约500:15、约465:15、约450:15、约425:15、约400:15、约375:15、约325:15、约310:15、约300:15、约275:15、约250:15、约225:15、约200:15、约155:15、约100:15、约800:10、约600:10、约500:10、约465:10、约450:10、约425:10、约400:10、约375:10、约325:10、约310:10、约300:10、约275:10、约250:10、约225:10、约200:10、约155:10、约100:10、约800:5、约600:5、约500:5、约465:5、约450:5、约425:5、约400:5、375:5、约325:5、约310:5、约
300:5、约275:5、约250:5、约225:5、200:5、约155:5或约100:5。
[0179] 为了显示两种药物(例如DHCQ和诸如阿托伐他汀之类的他汀类药物)的协同活性并且确定用于临床研究的适当固定剂量比，在活性疾病时(疾病发作后)或在代表临床前疾病的早期时间点向炎性疾病的适当动物模型施用不同量的两种药物，并且测量对疾病活性或进展的效应。或者，测试两种药物的不同用量对可能涉及疾病发病机理的介导炎症的细胞反应的效应。
[0180] 确定优选施用途径和相应剂型和用量以及给药方案(即，给药频率)在临床医师的技术水平内。在具体的实施方案中，组合疗法将按每天一次(s.i.d.)给药进行传递。在其他实施方案中，可以使用每天两次(b.i.d.)给药。然而，这种一般化不考虑诸如炎性疾病的具体类型、所涉及的特定治疗剂和其药效动力学轮廓以及所涉及的特定个体之类的重要变数。对于市场上的已批准产品，已经通过为了获得这样的批准而进行的临床研究的结果提供了许多这种信息。在其他情况下，这样的信息可以根据本说明书中所含的教授内容和指导方针，根据技术人员的知识和技术，用简单直接的方式获得。所获得的结果还可能与得自相同测定中对已批准产品的相应评估的数据相关。
[0181] 在一些实施方案中，DHCQ以较高初始给药范围(剂量负荷)给予，以确保在血液和组织中更快地实现治疗水平，因为已知这种药剂具有广泛分布且因而具有较长终未半衰期。这种负荷实现稳态血液水平，且增加组织水平，比单剂量每日给药更快速，且更早产生治疗效力(Furst等,Arthritis Rheum.1999年2月；42(2):357-65)。基于用于HCQ的负荷剂量，对于DHCQ，典型剂量负荷可以在约500至1600mg/天(约8.33至26.6mg/kg/天)的范围内，持续约1至24周或持续约1至16周。这种剂量负荷是与他汀类药物分开单独或与他汀类药物组合施用，包括使用具有泡罩包装或其他机构的“剂量包”，所述其他机构提供关于通过促进初始剂量负荷随后在稳定每日给药或足以实现目标药物水平和药效动力学效力的其他常规给药间隔下继续进行的每日给药的明确信息。所述负荷剂量典型地每日传递，持续1至16周，此后将剂量减至每天400至800mg(约6.67至13.3mg/kg/天)或每天约550至700mg(9.16至11.67mg/kg/天)的典型维持剂量。DHCQ可以按每日一次剂量(例如每天口服约600mg[约10mg/kg/天])或按每日两次分剂量(例如每天两次口服约300mg[总计约10mg/kg/天])传递。DHCQ可以按每日一次剂量(例如每天口服约550mg[约
9.16mg/kg/天])或按每日两次分剂量(例如每天两次口服约275mg[总计约9.16mg/kg/天])传递。
9.16mg/kg/天])或按每日两次分剂量(例如每天两次口服约275mg[总计约9.16mg/kg/天])传递。
[0182] 在一个方面，本发明提供了本发明制剂的单位剂型。术语“单位剂量”或“单位剂型”是指适合作为用于人类受试者的单一剂量的物理离散单元，各单位含有用量经计算足以产生所要效应的预定量的药物连同药学上可接受的稀释剂、载剂或媒剂。本发明的单位剂型的规格取决于所采用的具体组合和欲实现的效应以及与宿主相关的药效动力学性质。
[0183] 在一个方面，DHCQ可以通过与适当的药学上可接受的载剂或稀释剂组合而配制成药物组合物，并且配制成呈固体、半固体、液体、悬浮液、乳液或气体形式的制剂，诸如片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、软膏、溶液、悬浮液、乳液、栓剂、注射液、吸入剂、凝胶剂、微球体和气雾剂。因而，施用可以用多种方式实现，通常通过口服。在药物剂型中，药物可以呈其药学上可接受的盐的形式施用，或其也可以单独或与其他药学活性化合物适当联合以及组合使用。以下方法和赋形剂是示例性的且不应被视为限制本发明。
[0184] 在具体的实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Tmax介于约15分钟至约2小时、约15分钟至约1小时、约30分钟至约1小时、约30分钟至约2小时、约30分钟至约3小时、约1小时至约2小时、约1小时至约2.5小时、约1小时至约3小时、约1小时至约4小时或约1小时至约5小时、约2小时至约6小时、约2小时至约7小时、约1小时至约8小时、约1小时至约9小时、约一小时至约10小时、约1小时至约11小时、约1小时至约12小时的范围内。在一些其他实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Tmax介于约2小时至2.5小时、约2至3小时、约2至4小时、约2至5小时、约2至6小时、约2至7小时、约2至8小时、约2至9小时、约2至10小时、约2至11小时或约2至12小时的范围内。
[0185] 在具体的实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约25至50、约25至100、约25至150、约25至200、约50至75、约50至100、约50至150、约50至200、约50至250、约50至300、约50至400或约50至500的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约100至150、约100至200、约100至250、约100至250、约100至300、约100至350、约100至400、约
100至450、约100至500、约100至550、约100至600或约100至700的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约150至200、约150至250、约150至300、约150至350、约150至400、约150至450、约150至500、约
150至550、约150至600、约150至650、约150至700或约150至800的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约200至250、约200至300、约200至350、约200至400、约200至450、约200至500、约200至550、约
200至600、约200至650、约200至700、约200至750或约200至800的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约250至300、约250至350、约250至400、约250至450、约250至500、约250至550、约250至600、约
250至650、约250至700、约250至750、约250至800或约250至850的范围内。
100至450、约100至500、约100至550、约100至600或约100至700的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约150至200、约150至250、约150至300、约150至350、约150至400、约150至450、约150至500、约
150至550、约150至600、约150至650、约150至700或约150至800的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约200至250、约200至300、约200至350、约200至400、约200至450、约200至500、约200至550、约
200至600、约200至650、约200至700、约200至750或约200至800的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的Cmax(ng/ml全血)介于约250至300、约250至350、约250至400、约250至450、约250至500、约250至550、约250至600、约
250至650、约250至700、约250至750、约250至800或约250至850的范围内。
[0186] 在具体的实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约100至150、约100至200、约100至250、约100至250、约100至300、约100至350、约100至400、约100至450、约100至500、约100至550、约100至600或约100至700的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约150至200、约150至250、约150至300、约150至350、约150至400、约150至450、约150至500、约150至550、约150至600、约150至650、约150至700或约150至800的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约200至250、约200至300、约200至350、约200至400、约200至450、约200至500、约200至550、约200至600、约200至650、约200至700、约200至750或约200至800的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约250至300、约250至350、约250至400、约250至450、约250至500、约250至550、约250至600、约250至650、约250至700、约250至750、约250至800或约250至850的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约300至350、约300至400、约300至450、约300至350、约300至400、约300至450、约300至500、约300至550、约300至600、约300至650、约300至700、约300至750的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约350至400、约350至450、约350至500、约350至550、约350至600、约350至650、约350至700、约350至750、约350至800、约350至850、约350至900、约350至950的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的分布体积(Vd；升)介于约
400至450、约400至500、约400至550、约400至600、约400至650、约400至700、约400至750、约400至800、约400至850、约400至900、约400至950或约400至1000的范围内。
400至450、约400至500、约400至550、约400至600、约400至650、约400至700、约400至750、约400至800、约400至850、约400至900、约400至950或约400至1000的范围内。
[0187] 在具体的实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率(Cl；升/小时)介于约0.5至1、约0.5至1.5、约0.5至2、约0.5至2.5、约0.5至3、约0.5至3.5、约0.5至4、约0.5至4.5、约0.5至5、约0.5至5.5、约0.5至6、约0.5至6.5的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率(Cl；升/小时)介于约1至1.5、约1至2、约1至2.5、约1至3、约1至3.5、约1至4、约1至4.5、约1至5、约1至
5.5、约1至6、约1至6.5、约1至7的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率(Cl；升/小时)介于约1.5至2、约1.5至2.5、约1.5至3、约1.5至3.5、约1.5至4、约1.5至4.5、约1.5至5、约1.5至5.5、约1.5至6、约1.5至6.5、约
1.5至7、约1.5至7.5的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；ml/h)介于约150至200、约150至250、约150至300、约150至350、约
150至400、约150至450、约150至500、约150至550、约150至600、约150至650、约150至700或约150至800的范围内。
5.5、约1至6、约1至6.5、约1至7的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率(Cl；升/小时)介于约1.5至2、约1.5至2.5、约1.5至3、约1.5至3.5、约1.5至4、约1.5至4.5、约1.5至5、约1.5至5.5、约1.5至6、约1.5至6.5、约
1.5至7、约1.5至7.5的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；ml/h)介于约150至200、约150至250、约150至300、约150至350、约
150至400、约150至450、约150至500、约150至550、约150至600、约150至650、约150至700或约150至800的范围内。
[0188] 在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；ml/h)介于约250至300、约250至350、约250至400、约250至450、约250至500、约250至550、约250至600、约250至650、约250至700、约250至750、约250至800或约250至
850的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；
ml/h)介于约350至400、约350至450、约350至500、约350至550、约350至600、约350至650、约350至700、约350至750、约350至800、约350至850、约350至900或约350至
950的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；
ml/h)介于约400至450、约400至500、约400至550、约400至600、约400至650、约400至700、约400至750、约400至800、约400至850、约400至900、约400至950或约400至
1000的范围内。
850的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；
ml/h)介于约350至400、约350至450、约350至500、约350至550、约350至600、约350至650、约350至700、约350至750、约350至800、约350至850、约350至900或约350至
950的范围内。在另一个实施方案中，在施用本发明的组合物之后，DHCQ的廓清率体积(Cl；
ml/h)介于约400至450、约400至500、约400至550、约400至600、约400至650、约400至700、约400至750、约400至800、约400至850、约400至900、约400至950或约400至
1000的范围内。
[0189] 对于口服制剂，DHCQ可以单独或与适当的添加剂组合使用以制造片剂、悬浮液、粉剂、颗粒剂或胶囊剂，例如与诸如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉之类常规添加剂组合；与诸如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶之类的粘合剂组合；与诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠之类的崩解剂组合；与诸如滑石或硬脂酸镁之类润滑剂组合；而且在需要时与稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂和调味剂组合。
[0190] 诸如媒剂、佐剂、载剂或稀释剂之类的药学上可接受的赋形剂可购自市面。此外，诸如pH值调节和缓冲剂、张力调节剂、稳定剂、润湿剂等药学上可接受的辅助物质可购自市面。可用于本发明的方法和组合物中的任何化合物均可作为药学上可接受的碱加成盐来提供。“药学上可接受的碱加成盐”是指保留游离酸的生物有效性和性质的那些盐，其在生物学上或其他方面不会不合需要。这些盐是通过向游离酸中加入无机碱或有机碱来制备。来源于无机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等等。优选的无机盐是铵盐、钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。来源于有机碱的盐包括但不限于以下各物的盐：伯胺、仲胺和叔胺、取代胺(包括天然存在的取代胺)、环状胺和碱性离子交换树脂，诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等等。示例性有机碱是异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己基胺、胆碱和咖啡因。在一些实施方案中，所述盐是氯化物或硫酸盐。在其他实施方案中，所述盐是双配位基盐，诸如富马酸或丁二酸。
[0191] 活性剂或其药学上可接受的盐可以含有一个或多个不对称中心，且因而可能产生对映异构体、非对映异构体和就绝对立体化学来说可以定义为(R)-或(S)-，或就氨基酸来说定义为(D)-或(L)-的其他立体异构体形式。本发明意在包括所有这类可能的异构体以及其外消旋和光学纯形式。光学活性(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂来制备，或使用诸如逆相HPLC之类的常规技术来拆分。当本文中所描述的化合物包含烯类双键或其他几何不对称中心时，且除非另外说明，否则希望所述化合物包括E和Z几何异构体。同样，还意图包括所有互变异构形式。
[0192] 本发明的活性剂或其盐可以形成溶剂合物和/或结晶多形物，并且本发明含有各种类型的这类溶剂合物和结晶多形物。溶剂合物意指本发明化合物或其盐的溶剂合物，且实例包括溶剂是醇(例如乙醇)的溶剂合物、水合物等等。水合物的实例包括单水合物、二水合物等等。溶剂合物可以与任意数目的溶剂分子(例如水分子)配位。可以将化合物或其盐留在大气中以吸收水分，并且可能出现所吸收的水被吸附的情况或形成水合物的情况。此外，化合物或其盐可以再结晶以形成其结晶多形物。
[0193] 如本文中所描述，“可购自市面”的化合物可以获自商业来源，包括但不限于Acros Organics(Pittsburgh PA)、Aldrich Chemical(Milwaukee WI，包 括 Sigma Chemical and Fluka)、Apin Chemicals Ltd.(Milton Park UK)、Avocado Research(Lancashire U.K.)、BDH Inc.(Toronto，Canada)、Bionet(Cornwall，U.K.)、Chemservice Inc.(West Chester PA)、Crescent Chemical Co.(Hauppauge NY)、Eastman Organic Chemicals、Eastman Kodak Company(Rochester NY)、Fisher Scientific Co.(Pittsburgh PA)、Fisons Chemicals(Leicestershire UK)、Frontier Scientific(Logan UT)、ICN Biomedicals,Inc.(Costa Mesa CA)、Key Organics(Cornwall U.K.)、Lancaster Synthesis(Windham NH)、Maybridge Chemical Co.Ltd.(Cornwall U.K.)、Parish Chemical Co.(Orem UT)、Pfaltz&Bauer,Inc.(Waterbury CN)、Polyorganix(Houston TX)、Pierce Chemical Co.(Rockford IL)、Riedel de Haen AG(Hannover，Germany)、Spectrum Quality Product,Inc.(New Brunswick，NJ)、TCI America(Portland OR)、Trans World Chemicals,Inc.(Rockville MD)、Wako Chemicals USA,Inc.(Richmond VA)、Novabiochem和Argonaut Technology。
[0194] 化合物还可以通过本领域技术人员已知的方法来制造。如本文中所使用，“本领域技术人员已知的方法”可以通过各种参考书和数据库来确定。合适的参考书和专著详细描述了可用于制备本发明化合物的反应物的合成，或提供了描述所述制备的论文的参考文献，包括例如“Synthetic Organic Chemistry”,John Wiley&Sons,Inc.,New York；S.R.Sandler 等 ,“Organic Functional Group Preparations”, 第 2版 ,Academic Press,New York,1983；H.O.House,“Modern Synthetic Reactions”,第 2 版 ,W.A.Benjamin,Inc.Menlo Park,Calif.1972；T.L.Gilchrist,“Heterocyclic Chemistry”,第2版,John Wiley&Sons,New York,1992；J.March,“Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms and Structure”,第4版,Wiley-Interscience,New York,1992。具体的和类似的反应物还可以通过由美国化学学会化学文摘服务社制备的已知化学品索引来确定，该索引可在大部分公共和大学图书馆中以及通过在线数据库获得(可联系美国化学学会(Washington,D.C.)以获得更多细节)。目录中已知但无法购得的化学品可以通过定制化学合成公司来制备，其中许多标准化学品供应公司(例如，以上所列出的那些)提供委托合成服务。
[0195] 虽然本文中示例了具体的药物，但在观阅本发明后对本领域技术人员显而易见的许多替代药物和方法中的任一种同样可应用于且适合用于实施本发明。本发明的方法以及用于测定其在具体患者或应用中的效力的测试可以使用本领域中的标准程序，根据本文中的教授内容来进行。因而，本发明的实施可以采用在本领域技术人员能力范围内的常规分子生物学(包括重组技术)、微生物学、细胞生物学、生物化学和免疫学技术。这类技术充分说明文献中，诸如“Molecular Cloning:A Laboratory Manual”,第二版(Sambrook等,1989)；“Oligonucleotide Synthesis”(M.J.Gait编,1984)；“Animal Cell Culture”(R.I.Freshney编,1987)；“Methods in Enzymology”(Academic Press,Inc.)；
“Handbook of Experimental Immunology”(D.M.Weir&C.C.Blackwell 编 )；“Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells”(J.M.Miller&M.P.Calos编,1987)；“Current Protocols in Molecular Biology”(F.M.Ausubel等编 ,1987)；“PCR:The Polymerase Chain Reaction”(Mullis等 编,1994)；和“Current Protocols in Immunology”(J.E.Coligan等编,1991)；以及上述所有的更新或修订版。
“Handbook of Experimental Immunology”(D.M.Weir&C.C.Blackwell 编 )；“Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells”(J.M.Miller&M.P.Calos编,1987)；“Current Protocols in Molecular Biology”(F.M.Ausubel等编 ,1987)；“PCR:The Polymerase Chain Reaction”(Mullis等 编,1994)；和“Current Protocols in Immunology”(J.E.Coligan等编,1991)；以及上述所有的更新或修订版。
[0196] 术语“受试者”、“个体”和“患者”在本文中可互换用于指正在评估治疗和/或正在治疗的哺乳动物。在一个实施方案中，所述哺乳动物是人类。术语“受试者”、“个体”和“患者”因而涵盖患有前驱期或早期炎性疾病的人类。受试者可以是人类，但也包括其他哺乳动物，特别是可用作人类疾病的实验室模型的哺乳动物，例如小鼠、大鼠、猫、狗、马等。
[0197] 如本文中所使用的表达“体液”意在包括所有可用作临床样品的可接取体液，其可以含有在所述流体中的浓度足以处在所使用的测试装置或测定法的检测极限之内的测试化合物。体液因而将包括全血、血清、血浆、尿液、脑脊髓液、滑膜液和间质液以及其他细胞外液，特别是受影响关节的滑膜液。在一些实施方案中，用于测定早期炎症的异常指标的体液是得自疑似涉及早期关节炎的关节的滑膜液。在其他实施方案中，用于指标测定的体液是系统的，例如血液、尿液等。
[0198] 在收集和存储欲测试的体液时应小心进行。应采取避免所述体液中的欲测试化合物发生蛋白水解的步骤，并且除非所涉及的测试可以在收集体液后不久就进行，否则通常委托将体液冷冻。通常优选使用滑膜液而非血清，因为滑膜液中可能存在较高浓度的测试化合物。另一方面，滑膜液的粘度水平增加在免疫测定系统中提出了必须由技术人员解决的诸多问题。可能优选对细胞因子和指标以及其相应抑制剂和结合蛋白的选择进行纵向研究，以获得最准确的轮廓，从而可用于确定个体是否处在关节软骨退化的早期且因此成为用本发明方法进行干预的候选人。
[0199] 本发明方法可用于预防以及治疗目的。如本文中所使用，在一个实施方案中，术语“治疗”是指在具有较高炎性疾病风险或患有早期炎性疾病的个体中预防性使用干预。在这类个体中，治疗可防止产生症状或病征，防止患上疾病，和/或逆转病征或症状。在另一个实施方案中，术语“治疗”是指治疗患有确立疾病的个体以减轻症状或病征、防止疾病进展和/或逆转症状或病征。
[0200] 处在炎性疾病的较高风险之下或患有早期炎性疾病的个体一般无症状，且不展现或展现极少症状和病征。在一些实施方案中，用DHCQ治疗处在患上炎性疾病的较高风险之下的个体，以预防性预防其产生炎性疾病的征象、炎性疾病的症状或炎性疾病。在一些实施方案中，用DHCQ治疗处在患上炎性疾病的较高风险之下的个体，以预防其展现炎性疾病征象或炎性疾病症状的进展，和/或预防其患上炎性疾病。因而，本发明在通过防止产生疾病的临床症状或征象或通过防止疾病的临床症状或征象进展来治疗处在风险之下的个体、具有临床前表现的个体或患有早期疾病个体方面提供了显著进步。理想地在产生临床症状或病征之前和在受影响组织中存在显著功能损失之前，即，在“处在炎性疾病的较高风险之下”或“早期”炎性疾病状态时进行这种治疗。
[0201] 在具体的实施方案中，本发明提供了用于处在较高风险之下、患有临床前或患有早期炎性疾病但无症状，或者具有早期和轻度症状或病征的人类和其他哺乳动物的治疗，所有这些亚组在本文中都称为处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下的患者。在患有临床前或早期炎性疾病的这类无症状个体中，本发明可以防止患上有症状的炎性疾病、防止产生病征或减缓早期有症状的炎性疾病的进展。在具有炎性疾病的早期症状或征象的个体中，其中这类早期症状和征象存在不到6个月或在严重程度上是轻度的，本发明可以防止发生炎性疾病的完全症状、防止发生疾病征象和特征或减缓早期炎性疾病进展。本发明的一个方面是治疗患有临床前或早期炎性疾病的无症状个体以防止其患上有症状的炎性疾病。
[0202] 在各个实施方案中，具体来说本发明提供了对患有早期(其是在某些情况下且疾病可能具有轻度症状或间歇性症状或具有症状不到6个月)或确立炎性疾病的人类和其他哺乳动物的治疗。在患有早期或确立炎性疾病的这类有症状个体中，可以防止炎性疾病的症状和征象的进展或降低其严重程度。
[0203] 在一个实施方案中，对处在患上炎性疾病的较高风险之下的个体的治疗能降低其患上炎性疾病的总体风险。降低个体患上炎性疾病的风险意指对于经DHCQ治疗的个体或个体群组，与未用DHCQ治疗的个体(关于具有类似特征的患者群体或关于经替代疗法治疗的个体，任一者先前已描述于文献中)中患上炎性疾病的比率相比，患上炎性疾病的比率将为至少约25％、至少约35％、至少约45％、至少约55％、至少约65％、至少约75％且可能低大约或至多约50％。
[0204] 患上炎性疾病意指被医师正式诊断为患有炎性疾病。此外，患上炎性疾病意指产生症状、体检表现、实验室化验表现、影像学表现和满足炎性疾病的确立诊断准则且从而使得医师能够诊断个体患有炎性疾病的其他表现。
[0205] 如本文中所使用的表达“目前或未来”意在指根据以下所论述的作出该决定的方法，有可能将个体鉴别为目前需要所述治疗，或者很可能或预计在不久的将来需要所述治疗。治疗的未来需要可以通过根据技术人员的经验将直接导致早期炎性疾病的积极因素的那些测定值来确定。
[0206] 表达“处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下”(本文中也称为“处在较高风险之下”)意在指无症状但具有患上这种疾病的较高可能性的个体、具有轻度症状且具有患上这种疾病的较高可能性的个体、无症状但处在这种疾病的临床前期的个体、具有轻度症状但处在这种疾病的临床前期的个体、无症状且处在疾病早期的个体和具有轻度症状且处在疾病早期的个体。“炎性疾病的早期”意在指初步病理学变化的一开始。所述病理学变化包括所涉及的组织或器官在组成、形式、密度、征象和/或炎性状态和/或代谢状态方面与健康个体中所存在的相比的变化。
[0207] 可以用DHCQ治疗处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下的个体，以防止患上疾病、防止产生疾病征象、防止有症状的疾病发作、防止病征或症状进展、或防止炎症进展、或防止代谢异常进展、或防止相关代谢病状或疾病进展。DHCQ可以使用片剂、胶囊剂或悬浮液经口传递。
[0208] HCQ的视网膜毒性显著限制了其用于治疗处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的风险之下、处在临床前期或处在早期的人类的医学使用。许多医师不甘愿用HCQ治疗处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的风险之下、处在临床前期或处在早期的个体持续数年或数十年，因为治疗约5年后有大约0.5％至1％的发生视网膜毒性的风险(发病率)，治疗约7年后有大约1％的视网膜毒性风险，且治疗10至15年后有大约2％的视网膜毒性风险。被医师或其他保健专业人士告知其处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的临床前期或处在早期的个别人类不甘愿或不情愿服用HCQ数年或数十年以试图防止患上疾病，因为治疗约5年后有大约0.5％至1％的发生视网膜毒性的风险(发病率)，治疗约7年后有大约1％的视网膜毒性风险，且治疗10至15年后有大约2％的视网膜毒性风险。
[0209] DHCQ具有强劲消炎效力，同时具有极低视网膜细胞毒性，从而使得DHCQ能够持续数年或数十年安全地用于治疗处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的风险之下的个体以防止患上该疾病是出乎意料且令人惊讶的发现。DHCQ具有强劲消炎效力，同时具有极低视网膜细胞毒性，从而使得DHCQ能够持续数年或数十年安全地用于治疗处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的临床前期的个体以防止患上该疾病或防止该疾病进展是出乎意料且令人惊讶的发现。DHCQ具有强劲消炎效力，同时具有极低视网膜细胞毒性，从而使得所使用的DHCQ能够持续数年或数十年安全地用于治疗处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的临床前期的个体以防止患上该疾病或防止该疾病进展曾经是出乎意料且令人惊讶的发现。在DHCQ治疗下，预计在类似于HCQ的累积剂量下和在类似的给药周期内的视网膜毒性比率比在HCQ疗法下所观测到的视网膜毒性比率低约30％、40％、50％、60％或70％。在DHCQ疗法下，预计治疗约5年后的视网膜毒性比率(发病率)不到0.5％或不到0.25％或不到0.1％。在DHCQ疗法下，预计治疗约7年后的视网膜毒性比率(发病率)不到0.6％、或不到0.5％、或不到0.25％、或不到0.1％。在DHCQ疗法下，预计治疗约10年后的视网膜毒性比率(发病率)不到1％、或不到0.75％、或不到0.5％、不到0.25％或不到0.1％。在DHCQ疗法下，预计治疗约15年后的视网膜毒性比率(发病率)不到1.5％、或不到1％、或不到0.5％、或不到0.25％或不到0.1％。
[0210] 在另一个实施方案中，本发明提供了对患有确立炎性疾病的个体的治疗。炎性疾病是基于个体展现的症状、征象、临床特征、实验室化验结果、影像化验结果、指标结果和使得医师能够正式诊断该个体患有炎性疾病的其他表现来诊断。在一些实施方案中，确立炎性疾病是个体已经被医师正式诊断所述疾病超过6个月的炎性疾病。在确立的炎性疾病中，病征或症状可能更严重。在确立的炎性疾病中，疾病过程可能造成组织或器官损伤。
[0211] 处在患上炎性疾病的较高风险之下、患有早期炎性疾病或患有确立炎性疾病的个体可以用本发明的DHCQ治疗，以防止患上疾病、防止疾病进展和防止症状或病征进展。DHCQ的剂量一般是每天约400mg、或每天约500mg、或每天约550、或每天约600mg、或每天约
650mg、或每天约700mg、或每天约750mg、或每天约800mg，但可在每天25至1600mg之间变化。炎性疾病和与炎症相关的疾病包括自身免疫疾病，包括多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、自身免疫性肝病和其他自身免疫疾病；退化性疾病，包括骨关节炎、阿尔茨海默病、黄斑变性和其他退化性疾病；代谢疾病，包括II型糖尿病、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、高脂血症、抗胰岛素性、代谢综合征和其他代谢疾病；导致炎症的慢性感染，包括人类免疫缺陷病毒感染、丙型肝炎病毒感染、巨细胞病毒感染和其他病毒、细菌、真菌、寄生虫和其他感染；以及其他炎性疾病，诸如脂肪性肝病。
650mg、或每天约700mg、或每天约750mg、或每天约800mg，但可在每天25至1600mg之间变化。炎性疾病和与炎症相关的疾病包括自身免疫疾病，包括多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、自身免疫性肝病和其他自身免疫疾病；退化性疾病，包括骨关节炎、阿尔茨海默病、黄斑变性和其他退化性疾病；代谢疾病，包括II型糖尿病、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、高脂血症、抗胰岛素性、代谢综合征和其他代谢疾病；导致炎症的慢性感染，包括人类免疫缺陷病毒感染、丙型肝炎病毒感染、巨细胞病毒感染和其他病毒、细菌、真菌、寄生虫和其他感染；以及其他炎性疾病，诸如脂肪性肝病。
[0212] 本发明提供了提供一种在有需要的个体的关节中治疗或预防关节软骨退化或破坏或软骨下骨重塑的方法，其包括将个体状态确定为目前或未来处于所述早期且因而需要所述治疗；和以对于治疗或预防关节软骨或软骨下骨的所述退化或破坏来说在治疗上有效的量向所述个体施用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合。在一些实施方案中，治疗的准则还包括在受影响的关节中证明炎症。
[0213] OA的评估可以使用凯尔格-伦劳伦斯(KL)分级系统(Kellgren和Lawrence,Ann.Rheum.Dis.,16:494-502,1957，该文献以引用的方式明确并入本文中)。KL分级系统依赖于前后(AP)放射照片并且如下：0级＝无OA特征；1级＝疑似存在OA、存在微小骨赘、关节间隙未改变；2级＝最低限度的OA、明确骨赘、关节间隙未改变；3级＝中度OA、中度关节间隙减小；4级＝严重OA、关节间隙因软骨下骨硬化而大大减小。出于本发明的目的，KL评分小于3，在一些实施方案中小于2，且理想地小于一。
[0214] 在一些实施方案中，使用本文中所描述的DHCQ目的在于在OA的临床前期或早期期间、在如存在至少一个指示临床前期或早期OA的异常影像指标所定义、如通过成像或直接目测医疗器械、分子市场分析或倾向于患上OA的状况或事件的病历所确定存在仅轻度软骨异常或病变的证据期间进行干预。本发明的DHCQ疗法改变了OA疾病进展，如通过KL评分稳定和/或关节间隙变窄、或对进一步软骨破裂的预防(如使用MRI或另一种成像模式通过成像所评估)，或软骨破裂分子指标的水平降低所衡量。
[0215] 患有临床前OA或“前驱OA”的个体是处在患上OA的风险之下的个体，如异常炎症指标、异常生物化学指标、异常影像指标或异常临床指标所证明。倾向于患上OA的状况或事件包括但不限于关节损伤史；在有或无手术干预的情况下临床上或放射摄影上诊断的半月板损伤；韧带扭伤伴随临床上或放射摄影上诊断的前或后十字韧带或内侧副韧带或外侧副韧带损伤(Chu等,Arthritis Res Ther.201214(3):212.PMID:22682469)；临床上测量的肢体长度差异；当前或过去较长时间段BMI>27的肥胖；异常步态或关节移动的或生物力学特征。一般来说，临床前OA的确定与一个或多个、两个或更多个、三个或更多个关节病变参数(异常指标)相关，包括(而不限于且相对于健康对照样品)软骨蛋白聚糖损失；软骨损伤；或降解酶水平升高；存在软骨或细胞外基质降解或骨重塑产物。处在OA的风险之下、患有前驱OA和患有早期OA的人类往往无症状，但患者子集经历由于软骨损伤(例如半月板损伤)、韧带损伤(例如前十字韧带撕裂)或另一种关节异常所致的关节疼痛。患有前驱OA和早期OA的个体的关节疼痛一般是间歇性的且本质上是轻度的。
[0216] 与健康对照个体的关节相比，患有临床前OA的个体中的关节将展现KL评分0，并且具有一个、两个、三个、四个或更多个指示临床前疾病的异常指标。指示存在临床前OA的MRI检测影像指标包括软骨浮肿、软骨蛋白聚糖损失、软骨基质损失、骨髓浮肿、关节软骨裂缝、关节软骨退化、半月板撕裂、前十字韧带撕裂、后十字韧带撕裂和关节中软骨或韧带的其他异常。超声波将显示软骨浮肿或损伤的证据。关节镜检查可以允许直接检测或目测软骨浮肿、软骨软化、软骨变薄、软骨裂缝、软骨侵蚀或其他软骨异常。软骨损伤经常由奥特布里奇分类准则或关节内的类似直接观测变化来定义。举例来说，一个这类评分系统如下定义损伤的存在：0级＝正常软骨；I级：软骨软化和肿胀；II级：软骨中存在部分厚度缺陷，表面上有未到达软骨下骨或直径超过1.5cm的裂缝；III级：软骨中的裂缝延伸到软骨下骨的水平面上直径超过1.5cm的区域。处在OA的风险之下或患有“临床前OA”的人类可能无症状或具有轻度症状，KL评分为0，但基于MRI成像、超声波成像或在关节镜上对关节进行直接目测，可能具有软骨损伤、半月板损伤、韧带损伤或其他关节异常的征象。
[0217] 同健康对照个体的关节相比，患有早期OA的个体中的关节典型地将展现KL评分0或1(异常影像指标)，并且具有一个、两个、三个、四个或更多个指示早期疾病的异常指标。所涉及的关节的平面X射线将显示与KL评分0至2相符的特征，包括无骨赘或小骨赘和无或极小程度的关节间隙变窄。指示早期OA的MRI检测影像指标包括软骨蛋白聚糖损失、软骨变薄、软骨裂缝或软骨破裂。超声波将显示软骨浮肿或损伤的证据。可以提供关节镜检查以便直接检测或目测软骨浮肿、软骨软化、软骨变薄、软骨裂缝、软骨侵蚀或其他软骨异常。软骨损伤经常由奥特布里奇分类准则或关节内的类似直接观测变化来定义。患有早期OA的人类可能无症状，或可能具有轻度或间歇性症状，或可能具有症状不到6个月，但基于MRI成像、超声波成像或在关节镜上对关节进行直接目测，可能展现与如由奥特布里奇0级、I级和II级评分表示的软骨损伤或关节内的类似直接观测变化以及与其他软骨、半月板和韧带损伤相关的表现。
[0218] 与临床前期OA(也称为处在风险之下)和早期OA相反，确立或晚期OA在放射摄影学上可定义为KL等级>＝2或者关节软骨彻底、完全或接近完全损失的MRI证据。关节故障的其他指标证据可以通过直接或关节镜目测到关节间隙或软骨彻底、完全或接近完全损失、通过对不能维持功能关节完整性的生物力学评估、或通过对关节故障的临床评估来确定，如由不能进行全范围运动或维持正常关节功能所证明。在体检时，晚期OA患者可以具有异常临床指标，包括骨扩大、小渗出物、磨擦音和滑膜关节不对准。可用于对OA严重程度进行分类的半定量MRI评分系统的实例包括：WORMS(全器官磁共振成像评分；Peterfy CG等,Osteoarthritis Cartilage 2004；12:177-190)；KOSS(膝盖骨关节炎评分系统；Kornaat PR等,Skeletal Radiol 2005；34:95-102)；BLOKS(波士顿-利兹骨关节炎膝盖评分；Hunter DJ等,Ann Rheum Dis 2008；67:206-211)；MOAKS(MRI骨关节炎膝盖评分；
Hunter DJ等,Osteoarthritis Cartilage.2011；19(8):990-1002)；HOAMS(髋关节骨关节炎MRI评分；Roemer FW等,Osteoarthritis Cartilage.2011；19(8):946-62)；OHOA(奥斯陆手骨关节炎MRI评分)。晚期OA可以由于关节功能障碍而引起显著关节疼痛和活动性损失。
Hunter DJ等,Osteoarthritis Cartilage.2011；19(8):990-1002)；HOAMS(髋关节骨关节炎MRI评分；Roemer FW等,Osteoarthritis Cartilage.2011；19(8):946-62)；OHOA(奥斯陆手骨关节炎MRI评分)。晚期OA可以由于关节功能障碍而引起显著关节疼痛和活动性损失。
[0219] 在一个优选实施方案中，用本发明的组合物和方法治疗的个体具有临床前(处在风险之下)或早期OA或RA。在其他实施方案中，用本发明方法治疗的个体患有确立的OA、RA或其他类型关节炎。
[0220] 可以使用多种指标来评估临床前OA、早期OA和晚期OA中的炎症，包括影像指标、分子指标和临床指标。异常临床指标的实例包括体检时存在关节渗出物。异常临床指标的另一个实例是关节中存在清晨僵直。异常影像指标的实例包括使用MRI或超声波在关节中检测的炎症征象。MRI可在有或无钆造影剂的情况下进行，并且MRI证明的炎症定义为存在以下表现中的一项或多项：滑膜炎(滑膜衬里变厚、增生和/或增强(有所增加的信号，包括滑膜衬里中的正多普勒流信号)、关节渗出物、骨髓浮肿等(Krasnokutsky等 ,Arthritis Rheum.201163(10):2983-91.doi:10.1002/art.30471 PMID:21647860；Roemer等,Osteoarthritis Cartilage.2010年10月；18(10):1269-74.PMID:20691796；
Guermazi等,Ann Rheum Dis.201170(5):805-11,PMID:21187293)。超声波证明的炎症(异常影像指标)定义为存在以下表现中的一项或多项：滑膜衬里变厚和/或增强、关节渗出物、骨髓增强等(Guermazi等,Curr Opin Rheumatol.2011 23(5):484-91.PMID:21760511；
Hayashi 等 ,Osteoarthritis Cartilage.2012 年 3 月；20(3):207-14.PMID:22266236；
Haugen等,Arthritis Res Ther.2011；13(6):248.PMID:22189142)。可用于评估炎症的分子指标包括红细胞沉降率(ESR)、CRP、细胞因子、趋化因子和其他炎性介体。ESR和CRP是在血液中测量，且炎症的其他分子指标可以在血液或滑膜液中测量。
Guermazi等,Ann Rheum Dis.201170(5):805-11,PMID:21187293)。超声波证明的炎症(异常影像指标)定义为存在以下表现中的一项或多项：滑膜衬里变厚和/或增强、关节渗出物、骨髓增强等(Guermazi等,Curr Opin Rheumatol.2011 23(5):484-91.PMID:21760511；
Hayashi 等 ,Osteoarthritis Cartilage.2012 年 3 月；20(3):207-14.PMID:22266236；
Haugen等,Arthritis Res Ther.2011；13(6):248.PMID:22189142)。可用于评估炎症的分子指标包括红细胞沉降率(ESR)、CRP、细胞因子、趋化因子和其他炎性介体。ESR和CRP是在血液中测量，且炎症的其他分子指标可以在血液或滑膜液中测量。
[0221] 在一个实施方案中，使用这些炎症指标(包括异常体检指标、异常影像(MRI表现、超声波表现)指标、异常实验室指标(CRP、ESR)和其他异常生物指标)中的一个或多个来鉴别最可能响应DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀治疗的具有活性炎症的个体。在另一个实施方案中，对膝盖退化性半月板撕裂的个体进行膝盖MRI分析和hs-CRP实验室化验。如果MRI滑膜炎评分(Guermazi等,Ann Rheum Dis.2011 70(5):805-11.PMID:21187293)测量为>5或hs-CRP测量为>2.5mg/L，则确定个体处在较高风险之下或患有早期OA，并且因而用DHCQ进行治疗。在另一个实施方案中，对经历间歇性膝盖疼痛的处在膝盖OA的较高风险之下的个体进行膝盖MRI分析和hs-CRP实验室化验。如果MRI滑膜炎评分(Guermazi等,Ann Rheum Dis.2011 70(5):805-11.PMID:21187293)测量为>5或hs-CRP测量为>2.5mg/L，则确定个体处在较高风险之下或患有早期OA，并且因此用DHCQ进行治疗。
[0222] 在另一个实施方案中，使用这些同样的炎症指标中的一个或多个来监测个体对治疗的反应，以便确定是否应继续治疗或确定是否可以中止治疗。举例来说，每年或每隔一年通过MRI和hs-CRP监测正在用DHCQ治疗的处在OA的较高风险之下的个体。MRI滑膜炎评分降至3以下或hs-CRP降至1mg/L以下的个体确定为对疗法展现积极反应，并且其处于风险之下的状态、早期疾病状态或确立疾病状态良好响应于治疗。
[0223] 基于存在指示RA的异常炎症指标、异常影像指标或异常临床指标来鉴别处在患上RA的较高风险之下或患有“临床前RA”或患有早期RA的个体。表明个体患有早期RA的异常指标包括以下各项中的一项或多项：存在一个或多个肿胀的关节、存在抗CCP或RF抗体、MRI扫描或超声波上的滑膜增强的证据(信号增加)、可以预测患上RA的自身抗体或细胞因子的水平升高(如以下文献中所描述：Sokolove等,PLoS One.2012；7(5):e35296；Deane等,Arthritis Rheum.2010 62(11):3161-72；Gerlag等,Ann Rheum Dis.2012 71(5):638-41)。使个体患上RA的风险增加的因素包括以下各项中的一项或多项：RA家族史(特别是在一级亲属中)、抗CCP和/或RF自身抗体水平增加、与RA易感性相关的基因轮廓和抽烟(如以下文献中所描述：Deane等,Rheum Dis Clin North Am.2010
36(2):213-41；Klareskog等,Semin Immunol.2011年4月；23(2):92-8)。
36(2):213-41；Klareskog等,Semin Immunol.2011年4月；23(2):92-8)。
[0224] 基于测量到个体具有特殊异常生物化学指标、血清学指标、遗传学指标、影像学指标或临床指标将其分类为处在患上RA的风险之下。临床前期RA以在临床上明显的RA发作之前数年即存在RA的异常炎症指标，包括产生抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)和类风湿因子(RF)为特征。随着临床上明显的疾病发作接近，ACPA反应传播，即，靶向瓜氨酸化蛋白的自身抗体的水平数值增加。另外，往往伴随血清细胞因子和趋化因子以及急性期反应物(包括但不限于ESR和CRP)的水平上升(Sokolove等,PLoS One.012；7(5):e35296.2012,PMID:22662108；Deane等,Arthritis Rheum.2010年11月；62(11):3161-72)。因而，“处在风险之下”和“临床前”RA可以由存在分子指标ACPA、RF、细胞因子升高或这些指标的组合来定义。另外，包括“处在风险之下”的临床前RA可以由遗传指标和/或家族史来定义。这类遗传指标在本文中被视为异常指标，并且包括但不限于HLA DR4共用表位和其他遗传多态性，诸如PTPN22、PAD4、STAT4和TRAF1-C5。
[0225] 早期RA很少无症状；其最常显现为小或中等关节的疼痛和/或僵硬，并且其可能与关节肿胀或滑膜炎相关。早期RA可以由存在征象和症状以及与RA小于3至6个月持续时间和缺乏如平面X射线所测定的放射摄影关节损伤一致的异常指标来定义。早期RA还由存在诸如滑膜增强、骨髓浮肿、渗出物或指示炎症的其他表现之类的异常影像指标(例如通过MRI或超声波测定，包括超声波上的多普勒流体信号增加)来指示(Gerlag等,Ann Rheum Dis.201271(5):638-41.PMID:22387728)。
[0226] 晚期RA可以定义为超过3至6月持续时间且经常至少1年持续时间的RA。可以在疾病发作1至2年内检测到诸如骨关节旁侵蚀之类的RA放射摄影征象(异常影像指标)，且因此晚期RA的替代定义可以包括放射摄影关节间隙变窄和/或侵蚀的证据。
[0227] 多发性硬化是由免疫损伤所引起的神经元脱髓鞘造成的自身免疫神经学病状。其是由直接免疫学侵袭造成，由处在髓鞘蛋白质和脂质成分上的自身反应T细胞和B细胞介导。
[0228] 临床前MS个体是如异常生物化学参数、血清学参数、遗传参数、影像参数或临床参数所指示，处在患上MS的较高风险之下的个体。临床前期MS可以存在与MS稍后发作相关的异常炎症指标，例如在临床上明显的MS发作之前若干年出现的自身抗体为特征。另外或替代地，临床前MS个体可以具有单独不能诊断MS但可能与临床上明显的MS的稍后发作相关的神经学征象和/或症状。这类征象或症状包括但不限于视神经炎(其一般显现为单眼视力损失或视力下降)、麻痹、眩晕、肌肉痉挛。临床前MS的症状典型地具有有限的持续时间但可能时强时弱。其可能与放射摄影变化相关，包括但不限于如通过MRI测得的白质病变，其通常表现为T2加权MRI上的明亮区域。另外，临床前MS可以与存在脑脊髓液(CSF)异常(包括异常高的白血球数目或蛋白质水平)和/或存在寡克隆带相关。
[0229] 因而，临床前MS可以定义为存在早期脱髓鞘的临床症状和/或血清或CSF中存在特定的自身抗体、CSF中存在异常高的蛋白质或白血球水平、通过影像检测到的脑或脊髓病变或这些指标的组合。
[0230] 早期MS最常显现为脱髓鞘的持续性或复发性神经学症状，包括但不限于焦点或多焦点麻痹、刺痛、虚弱、丧失平衡或视力受损，包括视力模糊或复视。MS确诊需要MRI检测到2个或更多个脑部病变和/或2次或更多次持续至少24小时且相隔至少一个月发生的神经病症状发作的证据。
[0231] 晚期MS可以定义为进行至永久神经残疾，通常伴随原因不明性病变(如通过MRI检测)的MS。另外，MS症状可以按称为复发性-缓解性MS的模式时强时弱。这种模式可在损伤继续或不继续以慢性进行性模式累积的MS过程晚期见到，其中疾病在尚未从现有病变中完全恢复的情况下即在增加神经病症状的情况下进展。
[0232] 动脉粥样硬化以脂肪物质在动脉壁中累积，从而导致产生可能会破裂且造成血管堵塞和局部缺血的脂肪斑为特征。动脉粥样硬化的病变包括以炎性细胞(包括巨噬细胞以及较低程度的T和B细胞)累积以及高水平的炎性细胞因子、趋化因子和MMP的产生为特征的高度炎性背景(Libby等,Nature 2011.473(7347):3170-25.PMID#21593864)。动脉粥样硬化与低级炎症相关且可能由其激发。
[0233] 处在患上动脉粥样硬化的风险之下的个体是具有动脉粥样硬化性冠状动脉疾病的已知风险因素的那些个体。风险因素包括动脉粥样硬化性心脏病的传统风险因素，诸如弗莱明汉风险评分中所描述的那些且包括以下异常指标：高血压、抽烟、HDL胆固醇水平升高、葡萄糖不耐性、年龄增加、男性和其他因素(参见D'Agostino RB Sr,Vasan RS,Pencina MJ,Wolf PA,Cobain M,Massaro JM,Kannel WB.Circulation.2008年2月12日；117(6):743-53.PMID:18212285)。
[0234] 早期动脉粥样硬化以冠状动脉、脑动脉和/或其他动脉中的早期变化为特征。这类动脉异常可以使用MRI、CT、血管造影术或其他方法通过成像进行目测。因为所述早期疾病不阻塞所涉及的血管，所以个体无症状，并且其展现正常锻炼(脚踏车或自行车)或化学品(潘生丁或腺苷或多巴酚丁胺)应力化验结果(基于使用表明局部缺血的放射摄影对比和/或心电图(EKG)变化的读出结果)。
[0235] 晚期动脉粥样硬化以有症状的心脏或心血管疾病(包括心绞痛、心肌梗死、短暂性缺血性发作和/或由于动脉阻塞所致的中风)为特征。晚期动脉粥样硬化显现了可看作通过使用MRI、CT、血管造影术和其他方法获得的异常影像指标的更多晚期动脉异常。另外，利用以锻炼(脚踏车或自行车)或化学品(潘生丁或腺苷或多巴酚丁胺)应力化验结果进行晚期动脉粥样硬化功能测试，通过放射摄影对比和/或心电图(EKG)检测到表明局部缺血的表现。
[0236] 在一个实施方案中，使用一个或多个异常炎症指标来鉴别处在动脉粥样硬化疾病的较高风险之下且展现活性炎症，并且因而可能响应于利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗的个体。在另一个实施方案中，对具有较高血液胆固醇(总胆固醇>250mg/dL或LDL>150mg/dL)的处在动脉粥样硬化疾病的较高风险之下的个体进行hs-CRP实验室化验。如果hs-CRP>3，则确定所述个体处在动脉粥样硬化性心脏病进展的高风险之下并且用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合进行治疗。
[0237] 在另一个实施方案中，使用hs-CRP来监测个体对利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗的反应，以确定处在动脉粥样硬化疾病的较高风险之下的个体是否响应于治疗和/或所述治疗是否应继续。举例来说，每年或每隔一年通过重复胆固醇和hs-CRP化验来监测正在利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合进行治疗的处在动脉粥样硬化的较高风险之下的个体。总胆固醇减至220以下、LDL胆固醇降至120以下且hs-CRP降至1以下的个体被确定为已经对疗法展现了积极反应，且其处在风险之下的状态、早期疾病状态或确立疾病状态受到DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀组合疗法充分控制。
[0238] II型糖尿病的特征在于存在抗胰岛素性和高血糖症，这又可导致视网膜病、肾病、神经病或其他发病。在本文中被称为疾病状态的抗胰岛素性(IR)是细胞不能响应胰岛素的正常作用的生理学状况。身体产生胰岛素，但体内的细胞对胰岛素具有抗性并且不能有效地使用它，从而导致高血糖症。胰脏中的β细胞随后增加其胰岛素产生，进一步促成高胰岛素血症。此经常仍未被检测到并且可以促成2型糖尿病的诊断。另外，2型糖尿病是动脉粥样硬化性心血管疾病的众所周知的风险因素。代谢综合征是指包括使患上心脏病、糖尿病或其他健康问题的风险增高的高血压、肥胖、高脂血症和抗胰岛素性(显现为明显糖尿病或高空腹血糖或葡萄糖耐受性减低)的因素群组；(Grundy等,Circulation.2004；109:433-438)。充分表征了从正常代谢状态进展到如通过空腹血糖偏高(IFG：空腹血糖水平高于100mg/dL)所造成的“抗胰岛素性”状态或到葡萄糖耐受性降低(IGT：75克口服葡萄糖攻击后两小时血糖水平140至199mg/dL)状态。IFG和IGT两者都被视为指示糖尿病前状态的异常代谢指标，其中超过50％的IFG受试者平均在三年内进展到明显II型糖尿病(Nichols,Diabetes Care 2007.(2):228-233)。抗胰岛素性至少部分是由慢性低等级炎症造成(Romeo GR等,Arterioscler Thromb Vasc Biol.2012 32(8):1771-6；
de Luca C等,FEBS Lett.2008582(1):97-105；Ma K等,Diabetes Metab Res Rev.2012
28(5):388-94)。
de Luca C等,FEBS Lett.2008582(1):97-105；Ma K等,Diabetes Metab Res Rev.2012
28(5):388-94)。
[0239] 临床前II型糖尿病或“处在”II型糖尿病的“风险之下”可以定义为空腹血糖偏高，空腹血糖偏高定义为空腹血糖高于100mg/dL。空腹血糖水平偏高且处在患上II型糖尿病的“风险之下”的人类是无症状的。
[0240] 早期II型糖尿病由在两个独立时刻的>126mg/dL的异常空腹血糖读数来定义。早期II型糖尿病个体不具有组织损伤或末梢器官损伤的症状或征象。
[0241] 晚期II型糖尿病以异常代谢指标为特征，包括非空腹状态下血糖水平持续升高超过200mg/dL，或空腹状态下多个读数>126mg/dL，且血红蛋白A1c读数>7％。晚期II型糖尿病人类往往具有症状、微血管并发症和/或末梢器官或组织损伤。
[0242] 在一个实施方案中，使用对一个或多个异常代谢和炎症指标的量测来鉴别具有活性炎症的处在II型糖尿病的较高风险之下且因而处在其II型糖尿病进展的最高风险之下而且还最可能响应于利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗的个体。举例来说，化验体重指数(BMI)大于25的个体的空腹血糖、血红蛋白A1c和hs-CRP。展现在两个独立时刻的空腹血糖>126mg/dL且血红蛋白A1c>6.5％或hs-CRP>3mg/L的个体被确定为已经对展现异常代谢指标且处在疾病进展的最高风险之下，并且启动利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的疗法。
[0243] 在另一个实施方案中，使用这些同样的代谢和炎症指标中的一个或多个来监测个体对治疗的反应，以便确定治疗是否需要继续或确定是否可以中止治疗。举例来说，每年通过化验血红蛋白A1c和hs-CRP来监测正在利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合进行治疗的处在II型糖尿病的较高风险之下的个体。血红蛋白A1c降至不到5.6％且hs-CRP降至1以下的个体被确定为对疗法展现积极反应，并且其处于风险之下的状态、早期疾病状态或确立疾病状态良好响应于治疗。
[0244] 术语代谢综合征的国际糖尿病联盟全球共识定义(2006)是基于炎症指标、代谢指标和临床指标中的以下异常：中心性肥胖(定义为具有种族特异性的腰围数值)和以下各项中的任何两项：甘油三酯水平升高：>150mg/dL(1.7mmol/L)，或针对这种脂质异常的特殊治疗；HDL胆固醇降低：男性中<40mg/dL(1.03mmol/L)，女性中<50mg/dL(1.29mmol/L)，或针对这种脂质异常的特殊治疗；血压(BP)升高：收缩BP>130或舒张BP>85mm Hg或对先前诊断的高血压的治疗；空腹血糖(FPG)升高：空腹血糖>100mg/dL(5.6mmol/L)，或先前诊断的2型糖尿病。世界健康组织1999准则要求存在糖尿病、血糖耐受性降低、空腹血糖或抗胰岛素性升高中的任一项和以下各项中的两项：血压：≥140/90mmHg；血脂异常：甘油三酯(TG)：≥1.695mmol/L和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)≤0.9mmol/L(男性)、≤1.0mmol/L(女性)；中心性肥胖：腰臀比>0.90(男性)；>0.85(女性)，或体重指2
数>30kg/m；和微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率≥20μg/min或白蛋白:肌酐比≥30mg/g。相关疾病和征象是：高尿酸血症、脂肪肝(尤其是并发性肥胖)进展成NAFLD、多囊卵巢综合征(妇女)和黑棘皮病。代谢综合征进展引起明显糖尿病或高空腹血糖或低葡萄糖耐受性，且因此，个体产生冠状动脉疾病、II型糖尿病、心脏病、糖尿病或其他健康问题的症状和征象。在一个实施方案中，使用DHCQ来治疗代谢综合征患者，从而使血清脂质减少(诱使总胆固醇、LDL或甘油三酯减少，或替代地，诱使HDL增加)。在另一个实施方案中，使用DHCQ来治疗代谢综合征患者，从而减轻抗胰岛素性，如由空腹血糖水平降低、餐后血糖水平降低和/或血红蛋白A1c减少所显现。在另一个实施方案中，使用DHCQ来治疗高脂血症患者，从而使总胆固醇、LDL或甘油三酯减少，或替代地，使HDL增加。
数>30kg/m；和微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率≥20μg/min或白蛋白:肌酐比≥30mg/g。相关疾病和征象是：高尿酸血症、脂肪肝(尤其是并发性肥胖)进展成NAFLD、多囊卵巢综合征(妇女)和黑棘皮病。代谢综合征进展引起明显糖尿病或高空腹血糖或低葡萄糖耐受性，且因此，个体产生冠状动脉疾病、II型糖尿病、心脏病、糖尿病或其他健康问题的症状和征象。在一个实施方案中，使用DHCQ来治疗代谢综合征患者，从而使血清脂质减少(诱使总胆固醇、LDL或甘油三酯减少，或替代地，诱使HDL增加)。在另一个实施方案中，使用DHCQ来治疗代谢综合征患者，从而减轻抗胰岛素性，如由空腹血糖水平降低、餐后血糖水平降低和/或血红蛋白A1c减少所显现。在另一个实施方案中，使用DHCQ来治疗高脂血症患者，从而使总胆固醇、LDL或甘油三酯减少，或替代地，使HDL增加。
[0245] 代谢综合征是炎性病状。在代谢综合征的情形时，巨噬细胞在肥胖脂肪组织中积聚，其中它们响应于饱和脂肪酸和循环脂多糖(LPS)的刺激而产生TNF和其他炎性细胞 因子(Johnson等,Cell 2013.152(4):673-84；Bhargava P 等,Biochem J.2012 442(2):253-62)。此外，TNF抑制可以消除抗胰岛素性(Johnson等,Cell2013.152(4):673-84)，然而，这对于长期疗法来说是不实际或不安全的。因而，代谢综合征是直接或间接与共病性炎症相关的代谢疾病。如以上所论述，最常用的消炎治疗性疗法自身具有潜在肝毒性(即，皮质类固醇、氨甲蝶呤、来氟米特、柳氮磺胺吡啶)或可能使代谢综合征成分恶化(即，诸如他克莫司和环孢霉素之类的钙调磷酸酶抑制剂与高血压、高脂血症和糖尿病以及较小潜在肝毒性风险相关)。
[0246] 在一个实施方案中，使用对一个或多个代谢和炎症指标来鉴别处在代谢综合征的较高风险之下且患有活动性潜在疾病，且因而处在疾病进展的高风险之下而且最可能响应于利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗的个体。举例来说，对体重指数(BMI)大于25的个体化验以下代谢指标中的两个或更多个：空腹血糖、血红蛋白A1c、总胆固醇、LDL胆固醇、HDL胆固醇、甘油三酯和血压。在两个时刻的空腹血糖>126且具有以下征象或表现中的至少1个、或具有以下征象或表现中的至少2个、或具有以下征象或发现中的至少3个的个体被确定为已经对具有异常代谢指标，且因而处在患上代谢综合征的高风险之下，并且启动利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗。征象或表现包括但不限于以下异常炎症指标、代谢指标和临床指标：血压：≥140/90mmHg；甘油三酯(TG)：≥1.695mmol/L和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)≤0.9mmol/L(男性)、≤1.0mmol/L(女性)，或微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率≥20μg/min，或白蛋白:肌酐比≥30mg/g。
[0247] 在另一个实施方案中，使用这些同样的代谢和炎症指标中的一个或多个来监测个体对DHCQ治疗或对DHCQ+阿托伐他汀治疗的反应，以确定治疗是否应继续或确定是否可以中止治疗。举例来说，每年监测正在用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合进行治疗的处在代谢综合征的较高风险之下的个体。展现以下各项中的一项或多项的个体被确定为已经对疗法展现积极反应：空腹血糖回到低于126mg/dL，血红蛋白A1c降至不到5.6％，血压变成不到140/90mmHg，甘油三酯(TG)在1.695mmol/L以下，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)增加和微量白蛋白尿:尿白蛋白排泄率正常化。基于在一个或多个征象和表现方面的改善对疗法展现积极反应的个体被确定为已经对疗法展现积极反应的个体，且其处在风险之下的状态、早期疾病状态或确立代谢疾病状态良好响应于利用DHCQ的治疗或利用DHCQ+阿托伐他汀的治疗。
[0248] 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是与肝脏的脂肪浸润(或累积)相关的病状。虽然单独脂肪浸润不会造成肝脏损伤，但当它伴随炎症反应时，它可能导致纤维化和肝硬化和最终的肝功能衰竭。NASH中的炎症以肝脏被巨噬细胞和淋巴细胞浸润以及肝脏巨噬细胞样Kupfer细胞群体变化为特征(Tilg等,2010.Hepatology.52(5):1836-46)。炎性细胞因子，特别是TNF，对NASH病理学是最重要的。TNF的来源尚不清楚：它可能是周围的，即炎性脂肪组织，或局部的，即被门静脉来源的内毒素或被游离脂肪酸活化的先天免疫细胞(Tilg等,2010.Hepatology.52(5):1836-46)。内毒素反应性TLR4受体已显示对小鼠NASH模型中的疾病非常重要(Tsukumo等,Diabetes2007.56(8):1986-98)。
[0249] 目前不存在针对NASH的已批准药物治疗。先前造成的饮食调节、体重减轻和胃绕道在治疗NASH方面已经显示大部分效力。对二甲双胍、吡格列酮和维生素E的小型至中型研究已经显示了小但显著的益处。然而，结果与最终未能在纤维化方面显示最终变化的许多研究不一致(Schwenger KJP,World J Gastroenterol.2014年2月21日；20(7):1712-1723)。鉴于炎症是NASH的主要成分，预期消炎疗法或免疫抑制疗法可以在治疗NASH方面提供效力。然而，最常用的消炎疗法和免疫抑制疗法本身具有潜在肝毒性。举例来说，皮质类固醇与发生肝脂肪变性相关，而非类固醇消炎剂与胆汁郁积相关并且忌用于肝硬化的情形下。类似地，常用于系统性炎性疾病的其他药物，包括氨甲蝶呤、来氟米特和柳氮磺胺吡啶，与肝毒性的相关性并不罕见。同样，其他常用免疫抑制剂与NASH患者中所见的许多常见共病性相关。举例来说，诸如他克莫司和环孢霉素之类的钙调磷酸酶抑制剂与高血压、高脂血症和糖尿病以及较小肝毒性潜在风险相关。
[0250] 临床前NASH或对于NASH而言“处在风险之下”可以定义为NAFLD，其为在不存在酒精消耗或对其他肝毒素的暴露的情况下，超声波上存在肝脏脂肪浸润(异常影像指标)。肝脏脂肪浸润的异常影像指标是通过肝脏的超声波成像进行评估，且确定展现与肝脏脂肪浸润一致的超声波结果的个别患者中哪些在95％的正常人类中的超声波表现的范围之外。
患有NAFLD和临床前NASH(即，NAFLD)的人类在其血液中具有正常水平的肝脏酶(例如正常的氨基转移酶[转氨酶]水平，包括正常的AST(SGOT)和ALT(SGPT))。
患有NAFLD和临床前NASH(即，NAFLD)的人类在其血液中具有正常水平的肝脏酶(例如正常的氨基转移酶[转氨酶]水平，包括正常的AST(SGOT)和ALT(SGPT))。
[0251] 早期NASH定义为存在NAFLD连同肝炎症和损伤，如异常高的血液氨基转移酶水平(即，同人类的正常范围相比，AST(SGOT)和ALT(SGPT)的水平升高，这代表NASH的异常炎症指标)所体现。
[0252] 晚期NASH定义为存在慢性肝脏炎症和损伤，如肝脏转氨酶水平持续升高(AST(SGOT)和ALT(SGPT)持续升高)和存在早期或晚期肝纤维化和/或肝硬化所体现。肝纤维化是通过肝脏的超声波或CT或MRI影像或通过肝活组织检查来鉴别。
[0253] 在一个实施方案中，使用对一个或多个异常代谢指标、异常炎症指标和异常影像指标的量测来鉴别处在随后患上NAFLD或NASH的较高风险之下且因而最可能响应于利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗的个体。举例来说，基于AST>60IL/L(正常范围6至40IU/L)或ALT>50IU/L(正常范围7至35IU/L)、指示脂肪肝的超声波表现和两个独立时刻的空腹血糖>126或血红蛋白A1c>6.5％而得出肝转氨酶升高的个体被确定为展现异常炎症指标、异常影像指标或异常代谢指标，且因此处在进展到NASH的高风险之下并且启动利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的疗法。
[0254] 在另一个实施方案中，使用这些同样的代谢和炎症指标中的一个或多个来监测个体对治疗的反应，以便确定个体是否已经对疗法展现了积极反应或确定是否可以中止治疗。举例来说，周期性地通过化验AST、ALT、血红蛋白A1c和空腹血糖来监测正在利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合进行治疗的处在NAFLD或NASH的较高风险之下的个体。AST和ALT正常化、血红蛋白A1c降至不到5.6％且空腹血糖正常化的个体被确定为已经对疗法展现积极反应，并且其处于风险之下的状态、早期疾病状态或确立疾病状态良好响应于治疗。
[0255] 鉴于高脂血症和抗胰岛素性在代谢综合征中同时出现，DHCQ作为消炎剂和抗代谢剂可以提供独特且出乎意料的作用，其将在受代谢综合征影响或处在患上代谢综合征的风险之下的患者中的多数人良好耐受。使用HCQ治疗代谢综合征的潜在风险将是与在2型糖尿病的情形下使用HCQ相关的潜在视网膜毒性。当前推荐方案是谨慎使用HCQ或避免用于视网膜毒性风险较高的个体，包括患有潜在视网膜疾病的个体、糖尿病个体、过重或超过60岁的个体。因而，具有HCQ的免疫调节性质和代谢性质但具有较低视网膜毒性风险的药剂的鉴别可以提供针对代谢综合征、包括其代谢成分和炎性成分的可行治疗剂。一个实例将为用DHCQ治疗代谢综合征患者，这可能会不仅允许疗法的充足初始给药，而且另外可能允许剂量滴定至实现临床效力的水平，包括以高于HCQ的推荐剂量限制的水平给药。在并发性NASH的情形下，预期结果将是抑制系统性炎症，伴随血清脂质降低和胰岛素敏感性改善以及肝酶降低或正常化。
[0256] 所公开的涉及DHCQ的组合物和方法还可以用于治疗酒精性脂肪性肝炎。长期消耗大量酒精可能引起多种症状，从简单的脂肪变性到硬变性肝衰竭。事实上，每天消耗超过60克酒精的个体中几乎90％将发生肝脏脂肪浸润。这种脂肪变性可能进展到可介于从轻度和慢性进行性疾病到严重和暴发性死亡性肝炎的范围内慢性酒精性肝炎。尽管酒精性肝炎的机制可能是多因素的，但涉及炎症的多个途径存在一定作用，包括先天性免疫受体以及细胞因子，TNFα和IL-1β。已经用多种消炎疗法，包括皮质类固醇以及TNFα(阻断剂)来治疗急性酒精性肝炎(O'Shea等,Alcoholic Liver Disease,Hepatology,2010,51(1):307-28)。尽管在严重酒精性肝炎的急性情形下可能有效，但这类疗法的风险-效益轮廓禁止用于慢性酒精性脂肪性肝炎。鉴于对炎症(包括经由TLR的先天性免疫活化)的重要作用，所公开的涉及DHCQ的组合物和方法还可以用于治疗慢性酒精性脂肪性肝炎。这特别重要，因为肝功能不全是利用羟氯奎时的视网膜毒性的风险因素，且因而，就视网膜毒性而言具有较宽治疗窗的药物将是优选的。
[0257] 以下提供了在个体，包括处在诸如自身免疫疾病(例如RA、MS、克罗恩病、牛皮癣等)、涉及低等级炎症的退化性疾病(例如OA、阿尔茨海默病、黄斑变性等)、其他炎性疾病(例如NASH、II型糖尿病、代谢综合征、动脉粥样硬化、心脏病等)以及与慢性炎症相关的炎性疾病(例如HIV感染、HCV感染、CMV感染、TB感染等)之类的多种不同的炎性疾病的风险之下的个体中测定是否存在炎症的方法的实例。尽管以下描述了特别是在处在患上关节炎的风险之下或患有早期关节炎的人类中确定炎症的方法，但在另一个实施方案中，其用于在患有确立炎性疾病的个体中评估疾病活性或者组织或器官损伤。
[0258] 可以使用多个指标来评估炎性疾病中的炎症，包括影像指标、分子指标和临床指标。这类指标的异常水平或值或表现的测量或检测可以促进确定个体处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下或处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期，而且可以用于鉴别将会受益于利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的治疗的个体。
[0259] 许多炎性疾病和与炎症相关的疾病，包括以上所描述的那些，与代谢异常相关，如异常代谢指标水平或值所体现。将用于治疗这类病症的大部分消炎/免疫抑制疗法还缺乏改善在炎性疾病下所观测到的代谢异常的重要能力，并且许多(包括皮质类固醇)和钙调磷酸酶抑制剂自身可能可以诱导代谢异常，包括抗胰岛素性、高血压和高脂血症。类似地，鉴于在患有代谢综合征的那些人中由于NAFLD/NASH所致的潜在肝病的风险较高，诸如氨甲蝶呤和来氟米特之类的免疫抑制剂由于其潜在固有肝毒性而应该避免。类似地，可能具有良好代谢轮廓的HCQ本身与视网膜毒性风险相关，并且因而在处在潜在视网膜疾病的较高风险之下的那些人(包括患有2型糖尿病的那些人)中应慎重或避免使用。因而，使用DHCQ具有不仅治疗炎症而且治疗炎性疾病的代谢成分(包括但不限于抗胰岛素性、高脂血症和NASH)的独特能力。并且DHCQ能在较低视网膜毒性风险下这样做。因而，在一个实施方案中，DHCQ可用于治疗炎症与相关代谢疾病，包括但不限于抗胰岛素性、2型糖尿病、高脂血症和NAFLD和/或NASH。在另一个实施方案中，DHCQ可用于治疗炎症与相关代谢疾病，由此将患者置于较高视网膜毒性风险之下。DHCQ的这类性质是出乎意料的，因为母体分子HCQ的其他代谢物缺乏较低视网膜毒性和良好新陈代谢效应。
[0260] 提供对OA和RA的指标(包括炎症指标、代谢指标、临床指标和影像指标)的综合性描述作为在一般情况下以何种方式实现产生临床前期或早期炎性疾病指标的实例。在关节炎中，异常临床指标的实例包括发热、红疹(发红)、炎症和渗出物。异常临床指标的其他实例是关节中持续超过1小时的清晨僵直以及疼痛和肿胀。异常影像指标的实例包括MRI或超声波检测的关节中炎症。在有或无钆造影剂的情况下进行的MRI基于存在以下表现中的一个或多个来检测炎症(异常影像指标)：滑膜炎(滑膜衬里变厚、增生和/或增强(Gd-MRI上的信号增加))；滑膜衬里中的多普勒流体信号增加；关节渗出物；大范围骨髓浮肿；和表明炎症的其他表现。当所使用的成象方法是超声波时，炎症(异常影像指标)由存在以下表现中的一项或多项来定义：滑膜衬里变厚和/或增强、关节渗出物、骨髓增强和表明炎症的其他表现。可用于评估炎症的分子指标包括ESR、CRP、细胞因子、趋化因子和其他炎性介体。ESR和CRP是在血液中测量，且炎症的其他分子指标可以在血液或滑膜液中测量。使用血液中的分子指标来鉴别患有临床前RA或早期RA的个体描述于Sokolove等(PLoS One.2012；7(5):e35296)和Deane等(Arthritis Rheum.201062(11):3161-72)中。
[0261] 存在临床前和早期炎性疾病可以通过体液(包括但不限于滑膜液)或关节组织中的分子指标和炎症指标相对于得自无关节炎个体的对照体液或关节组织中的水平差异来确定或证实。临床前和早期OA和RA中的这类分子指标水平变化的实例如下：白介素-1β(IL-1β)的水平增加；TNF的水平增加；IL-1β与IL-1受体拮抗蛋白(IRAP)之比增加；p55TNF受体(p55TNF-R)的表达增加；白介素-6(IL-6)的水平增加；白血病抑制因子(LIF)的水平增加；胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的水平改变、转化生长因子β(TGFβ)、血小板衍生生长因子(PDGF)或碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)的水平增加；硫酸角质素的水平增加；基质分解素的水平增加；基质分解素与金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)之比增加；骨钙素的水平增加；碱性磷酸酶增加；激素攻击反应性cAMP增加；尿激酶纤溶酶原活化因子(uPA)增加；软骨寡聚基质蛋白的水平增加；胶原蛋白酶的水平增加；其他细胞因子的水平增加；CRP的水平增加；或针对滑膜关节蛋白质或其他生物分子的自身抗体的水平增加。如本文中所使用的术语“金属蛋白酶”意在指MMP，尤其是在存在关节软骨退化时其水平典型地是升高的浓度的那些，即，基质分解素、胶原蛋白酶和明胶酶。蛋白聚糖酶也包括在该术语内。退化早期期间的关节软骨中所存在的三种胶原蛋白酶是胶原蛋白酶-1(MMP-1)、胶原蛋白酶-2(MMP-8)和胶原蛋白酶-3(MMP-13)。在三种基质分解素，即基质分解素-1(MMP-3)、基质分解素-2(MMP-10)和基质分解素-3(MMP-11)中，仅基质分解素-1在其退化早期期间出现在关节软骨中。金属蛋白酶由软骨细胞分泌为酶原，在其可降解细胞外基质大分子之前必需经过活化。
[0262] 这类分子炎症指标的参考范围定义为95％正态群体所属的值集合。如果分子炎症指标的在个别患者中的值或水平在95％正态群体所属值或水平集合以外，则所述指标被视为在该患者中展现异常水平(例如，该患者被确定为具有“异常指标”或“异常分子炎症指标”)。
[0263] 作为IL-1α和IL-1β存在的IL-1是介导关节软骨损伤和哺乳动物关节损失的分解代谢细胞因子。其抑制关节软骨中所见的II型胶原蛋白的合成，而促进成纤维细胞所特有的I型胶原蛋白的合成；诱导涉及基质降解的酶的产生；并且抑制软骨细胞合成新蛋白聚糖的能力。IL-1和其调节因子IRAP是由滑膜巨噬细胞以自分泌和旁分泌方式产生，并且在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)存在下，IRAP产生可以增加。然而，IL-1比IRAP有效得多，需要多出大约130倍的IRAP来消除IL-1的病原效应，如在软骨细胞和软骨外植体中所测量。IL-1与IRAP之间的不平衡加重了关节软骨的退化。因此，还适于鉴别在IL-1和IRAP水平以及IL-1与IRAP比率方面的异常，以便在可以通过放射摄影术鉴别局部软骨损失之前鉴别处在软骨损伤和损失早期的个体。因而，测定IL-1和IRAP的水平以及IL-1与IRAP的比率可使得能够在发生显著软骨退化之前鉴别作为早期药理学干预候选人的个体。此外，滑膜液中的分泌IL-1α和IL-1β的巨噬细胞的频率显著较高，且可以检测正经历关节软骨退化早期的关节的滑膜组织，且显著高于滑膜液和得自正常关节(即，无关节软骨退化的关节)的滑膜组织中。
[0264] 在进行膝关节十字韧带剖开的哺乳动物中，剖开的膝关节的滑膜液中的TNF浓度在统计上高于未剖开的对侧膝关节中的TNF浓度。在剖开的膝关节中，p55TNF受体(TNF-R)在关节软骨中的软骨细胞上的表达也较高。因此，由于TNF水平增加和可能的TNF信号传递与早期软骨损伤和损失相关，所以适于测量处在软骨退化和损失的风险之下的个体的关节中的TNF和TNF-R水平。这些结果有助于对作为在显著软骨退化发生前进行早期药理学干预的候选人的个体进行诊断分类。
[0265] IL-6是一种炎性细胞因子，同健康关节和滑膜液相比，其水平在受损肢体的关节和滑膜液中异常高(统计上升高)。IL-6使软骨细胞上的TNF-R表达和软骨细胞的蛋白聚糖产生增加；它还诱导氨基多糖自软骨基质中释放。比较处在关节软骨损伤和损失早期的关节的滑膜液和软骨细胞中的与对照关节的滑膜液和软骨细胞中的IL-6水平可以在可通过放射摄影术检测到任何局部软骨损失之前鉴别作为适当药理学治疗候选人的个体。
[0266] LIF是由单核细胞、粒细胞、T细胞、成纤维细胞和与炎性病状相关的其他细胞类型产生。滑膜细胞和软骨细胞在IL-1β和TNFα存在下合成并分泌LIF。因而，鉴别LIF水平增加可以允许选择在关节软骨损伤和损失早期进行药理学治疗的候选人。
[0267] IGF作为I型和II型存在，且IGF-I介导软骨合成。此外，即使在IL-1β和TNFα存在下，它也能减少降解和促进蛋白聚糖合成。IGF-1的血清水平是由高亲和力结合蛋白(IGF-BP)维持，而且IGF-1调节骨和软骨更换。检测异常高的IGF-1水平允许鉴别对关节软骨退化进行早期药理学治疗的候选人。
[0268] TGFβ由软骨细胞产生且充当促进软骨和骨更换的强力有丝分裂原。此外，它刺激细胞外基质的合成且具有消炎活性。它还通过刺激蛋白酶抑制剂的产生和阻断胶原蛋白酶和金属蛋白酶的释放来抑制细胞外基质降解。更进一步，它通过刺激哺乳动物关节中的各种细胞产生胶原蛋白、纤连蛋白、纤溶酶原活化因子抑制剂和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)来促进软骨修复。在处在关节软骨损伤和损失早期的哺乳动物的关节中，滑膜液TGFβ水平异常低。因此，TGFβ水平与对照相比允许对关节软骨退化早期药理学治疗的候选人进行诊断性评估。
[0269] 在进行性退化，即，关节中的关节软骨的分解代谢的情况下，产生了许多可用作针对软骨退化发生与进展两者的软骨退化指标的代谢物。举例来说，IL-1α和IL-1β或TNFα激活介导软骨降解和氨基多糖(GAGS)释放的炎性和降解路径，这可以在个体滑膜液中进行测量。此外，GAG水平在治疗之后变化，使得有可能通过使用滑膜液中的GAG水平作为关节软骨更换指标来监测药理学干预的效力。因为关节软骨降解涉及胶原蛋白以及其他软骨成分，所以若干种胶原蛋白分解产物充当哺乳动物中的软骨降解指标。可以在诸如滑膜液、血浆、血清和尿液之类的体液中鉴别II型特异性胶原蛋白分解产物，例如20至30个胺基酸的新表位。这些体液中存在胶原蛋白新表位可以用作OA发作和进展的指标。
[0270] GAG硫酸角质素新表位5D4在滑膜液中的存在或水平增加是早期关节软骨损伤和损失的指标。相反，另一种GAG硫酸软骨素的各种新表位的存在或水平增加与处在软骨损伤和损失早期的哺乳动物的关节软骨中的合成代谢事件相关。这些表位在滑膜液中的水平，特别是3B3、7D4和846，可以通过特定的单克隆抗体来测定。3B3表位在细胞外基质修复和重塑期间表达于软骨的硫酸软骨素链上，且因此其在滑膜液中的水平与5D4的水平反向相关。测试哺乳动物滑膜液中的3B3水平的测定和这些水平与对照值的比较允许建立作为早期药理学治疗的适当候选人的哺乳动物的诊断性轮廓。
[0271] 软骨合成代谢的其他指标是II型前胶原蛋白前肽(PIIP)。II型胶原蛋白是关节软骨的主要胶原蛋白并且由软骨细胞产生为前胶原蛋白PIIP。在胶原蛋白纤维形成过程期间，PIIP的非胶原蛋白部分氨基前肽和羧基前肽裂解并释放到体液中，其中它们可测量为在关节软骨中的合成代谢活性的体现。滑膜液中的PIIP羧基前肽(羧基-PIIP)的水平在软骨合成代谢期间较高且与软骨病理学变化的放射摄影术证据相关。因此，在滑膜液中检测到较高羧基PIIP水平可以鉴别个体以进行早期药理学治疗。
[0272] 哺乳动物关节软骨和关节液中的基质分解素:TIMP比的波动是早期关节软骨退化的另一个指标。关节损伤后的异常关节负荷导致产生过量基质分解素，这是一种在IL-1介导的过程中由软骨细胞和滑膜细胞产生的酶。纤维性颤动(受伤)软骨中的基质分解素浓度比距损伤更远处的软骨中的更高。基质分解素水平可以仅在较短时间段内非常高，但在关节损伤超过关节软骨的潮线区且到达软骨下骨的情况下，存在后续关节软骨退化(通常在软骨下骨僵化之前)的实质性可能性。在这类情形下，涉及基质分解素、IL-1α、IL-1β以及致癌基因蛋白c-MYC、c-FOS和c-JUN的合成的细胞数目增加。在滑膜细胞中分泌这些因子的是浅表滑液膜衬里细胞，而在软骨中这类细胞是浅表层和中间层中的软骨细胞以及胫骨坪的纤维性颤动区域中的软骨细胞。此外，基质分解素和IL-1扩散至胫骨坪的软骨基质中。可降解结缔组织的成分(包括蛋白聚糖和IX型胶原蛋白)的基质分解素在处在关节软骨退化早期的哺乳动物的滑膜中活跃地合成，并且是涉及软骨破坏的主要蛋白水解酶。在这类哺乳动物的滑液中可检测到较高水平的基质分解素mRNA，同样有较高水平的胶原蛋白酶mRNA。较高水平的两种IL-1亚型(但尤其是IL-1β)刺激滑膜成纤维细胞合成基质分解素和胶原蛋白酶。IL-1不刺激金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)的产生，使得这种金属蛋白酶抑制剂在滑膜中的水平保持不变，而金属蛋白酶的水平大幅增加。上文呈现了关于OA和RA的详细描述，但方法、指标类型和指标子集与广谱炎性疾病相关，且这些描述意在充当在一般情况下以何种方式实现产生临床前期或早期炎性疾病指标的实例。
[0273] 在一些实施方案中，本发明方法包括治疗前在炎性疾病个体或易患炎性疾病的个体中测定早期炎性疾病的存在且因而指示需要治疗的步骤。所述方法可以进一步包括在施用步骤之前测定炎症的存在，其中选择处在炎性疾病的较高风险之下或处在显示炎症征象(特别是有关器官的炎症)的炎性疾病早期的个体以便用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合疗法进行治疗。各疾病的描述中提供了与各疾病有关的指标。这类指标包括临床指标、代谢指标、炎症指标、影像指标、研究指标和其他指标，其中指标的独特子集与不同的疾病有关。当指标的水平或值或结果处在95％健康群体中所观测的水平、值或结果分布以外时，其被视为异常的。具有异常水平的疾病特异性炎症指标、代谢指标、临床指标、影像指标或其他指标的个体处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下或处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期。
[0274] 在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗能防止疾病发展。在一些实施方案中，用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合进行治疗可防止炎性疾病的征象或症状进展。在一些实施方案中，用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合进行治疗使得炎性疾病的早期征象或症状恢复正常。在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗使得炎症指标正常化。在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合进行治疗能防止发生器官或组织损伤。在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗使得实验室化验、影像指标或其他疾病指标稳定或正常化。
[0275] 在其他实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗用来在展现升高的炎症指标(异常炎症指标)的个体中治疗确立疾病。在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合治疗确立炎性疾病使得炎症指标和其他疾病指标正常化。在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗使得实验室化验、影像指标或其他疾病指标稳定或正常化。在一些实施方案中，利用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合的治疗能防止发生器官或组织损伤。
[0276] 本发明中可以使用各种技术和试剂来分析炎症指标。在本发明的一个实施方案中，测定血液或滑膜液样品或来源于血液的样品(例如血浆、血清等)中的特定生物指标的存在。其他样品来源是体液，诸如滑膜液、淋巴、脑脊髓液、支气管吸出物、唾液、乳汁、尿液等等。还包括这类细胞和流体的衍生物和级分。在个体疑似患有炎性疾病或处在患上炎性疾病的风险之下的任何时间收集诊断样品。这类测定以许多不同的形式进行，包括自身抗原阵列；酶联免疫吸附测定(ELISA)和放射免疫测定(RIA)；通过流式细胞术或质谱测量标记肽在悬浮液或溶液中的结合的测定。
[0277] 许多这类方法是本领域技术人员已知的，包括ELISA、荧光免疫测定、蛋白质阵列、eTag系统、基于珠粒的系统、基于标记或其他阵列的系统、基于表面等离子体共振(SPR)的检测系统等。本领域中阐述了这类方法的实例，尤其包括基于晶片的毛细管电泳：Colyer等(1997)J Chromatogr A.781(1-2):271-6；质 谱：Petricoin等 (2002)Lancet
359:572-77；eTag系统：Chan-Hui等(2004)Clinical Immunology 111:162-174；微粒增强比浊测量免疫测定：Montagne等(1992)Eur J Clin Chem Clin Biochem.30(4):217-22；
Luminex XMAP珠粒-阵列系统(www.luminexcorp.com)；和类似方法，各文献以引用的方式并入本文中。
359:572-77；eTag系统：Chan-Hui等(2004)Clinical Immunology 111:162-174；微粒增强比浊测量免疫测定：Montagne等(1992)Eur J Clin Chem Clin Biochem.30(4):217-22；
Luminex XMAP珠粒-阵列系统(www.luminexcorp.com)；和类似方法，各文献以引用的方式并入本文中。
[0278] 对于多路分析，可以产生含有一种或多种可识别目标生物标记物的检测抗体的阵列。筛查中可使用旨在定量生物标记物的各种免疫测定法。测量样品或其级分中的靶蛋白或其他生物标记物的浓度可以通过多种特定测定法来实现。举例来说，常规夹层型测定法可以阵列、ELISA、RIA、珠粒阵列等形式使用。
[0279] 生物样品的分析可以通过使用任何合宜的方案来进行，例如，如以下所论述。读出值可以是中间值、平均值、中值或方差或与测量值相关的其他统计或算术衍生值。读出信息可以通过与相应参考或对照读出值的直接比较进一步重新定义。
[0280] 在对测定样品中的指标进行定量之后，将获得的值与参考或对照值相比较，以便对获得样品的患者的表型作出诊断。典型地，用从得自未受影响的个体的一份样品或一组样品获得的类似值进行比较。另外，参考或对照值可以是从已知患有诸如RA或OA之类的目标自身免疫疾病或退化性疾病的患者的样品获得的值，且因此可以是正参考或对照轮廓。
[0281] 出于预后目的，可以使用组合多个抗体特异性和/或细胞因子水平和/或软骨退化指标和/或其他指标水平的测定结果并且将鉴别具有异常水平的这类指标的个体且因而粗略区分具有患上自身免疫疾病(例如RA或退化性疾病，例如OA)的较高风险或患有确立的自身免疫疾病的个体与对照的算法。
[0282] 分子炎症指标(也称为炎症指标)的实例包括c反应蛋白(CRP)、高灵敏度CRP(hs-CRP)(常规CRP)、红细胞沉降率(ESR)、血清淀粉样蛋白A、血清淀粉样蛋白P、纤维蛋白原、血液或其他生物流体中的细胞因子、细胞因子、抗体(诸如自身抗体或抗微生物抗体)、DNA序列、RNA序列(例如编码一个或多个细胞因子或其他免疫分子的mRNA)、其他炎症指标或其组合。
[0283] C反应蛋白(CRP)，包括高灵敏度CRP(hs-CRP)，作为炎症指标包括在内，且提供作为多种炎性疾病中的指标的效用。已知具有高水平(异常水平，例如异常炎症指标)、甚至在正常范围的上限的hs-CRP的个体患上炎性疾病或与炎症相关的疾病(包括但不限于动脉粥样硬化病、动脉粥样硬化心血管疾病、RA、牛皮癣关节炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、II型糖尿病、代谢综合征、NAFLD、NASH和其他炎性代谢疾病)的风险增加1.5至4倍。美国心脏学会和美国疾病控制和预防中心已经基于hs-CRP水平限定了风险组，如下：
[0284] ·低风险：hs-CRP不到1.0mg/L
[0285] ·平均风险：hs-CRP 1.0至3.0mg/L(这代表着异常炎症指标)
[0286] ·高风险：hs-CRP超过3.0mg/L(这代表着异常炎症指标)
[0287] 被认为正常的血浆纤维蛋白原的水平范围因实验室而各异，但典型地为1.5至4.0g/L。超过2.8g/L的血浆纤维蛋白原水平被视为异常炎症指标且与患上炎性疾病的较高风险相关，而>4g/L的水平与甚至更高的风险相关。
[0288] 血清淀粉样蛋白A(SAA)的正常水平范围广泛。然而，已经将SAA水平升高与炎性疾病的较高风险相关联，中等升高(>3.9但<8mg/L；异常SSA[炎症指标]水平)赋予超过最低百分位点的较高风险，而大于8.2mg/L(最高百分位点；异常SSA[炎症指标]水平)的值赋予最高风险。
[0289] 被视为正常的ESR值存在较宽范围，但异常且因而指示炎症的ESR值包括ESR在不到50岁的男性中>15mm/h、在超过50岁的男性和不到50岁的妇女中>20mm/h和在超过50岁的妇女中>30mm/h。对患者中的异常ESR(炎症指标)水平的测量指示该个别患者处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下。
[0290] 异常代谢指标包括总胆固醇(TC)超过约160mg/dL、超过约180mg/dL、超过约190mg/dL、超过约200mg/dL、超过约210mg/dL、超过约220mg/dL、超过约230mg/dL、超过约
240mg/dL、超过约250mg/dL、超过约260mg/dL。异常代谢指标包括LDL胆固醇超过约70mg/dL、超过约80mg/dL、超过约90mg/dL、超过约100mg/dL、超过约110mg/dL、超过约120mg/dL、超过约130mg/dL、超过约140mg/dL、超过约150mg/dL、超过约160mg/dL。异常代谢指标包括HDL胆固醇不到约60mg/dL、不到约50mg/dL、不到约40mg/dL、不到约30mg/dL、不到约
20mg/dL。异常代谢指标包括相对于一般群体升高的LDL粒子数或减少的HDL粒子数。异常代谢指标可预测患上疾病的较高风险、临床前期、早期或确立疾病，所述疾病包括高脂血症、动脉粥样硬化、动脉粥样硬化病、NASH、NAFLD、代谢综合征以及其他炎性疾病和与炎症相关的疾病。
240mg/dL、超过约250mg/dL、超过约260mg/dL。异常代谢指标包括LDL胆固醇超过约70mg/dL、超过约80mg/dL、超过约90mg/dL、超过约100mg/dL、超过约110mg/dL、超过约120mg/dL、超过约130mg/dL、超过约140mg/dL、超过约150mg/dL、超过约160mg/dL。异常代谢指标包括HDL胆固醇不到约60mg/dL、不到约50mg/dL、不到约40mg/dL、不到约30mg/dL、不到约
20mg/dL。异常代谢指标包括相对于一般群体升高的LDL粒子数或减少的HDL粒子数。异常代谢指标可预测患上疾病的较高风险、临床前期、早期或确立疾病，所述疾病包括高脂血症、动脉粥样硬化、动脉粥样硬化病、NASH、NAFLD、代谢综合征以及其他炎性疾病和与炎症相关的疾病。
[0291] 处在与炎症相关的代谢疾病的风险之下的患者的其他炎性和代谢指标包括：脂蛋白a(LPa)，异常代谢指标水平是超过约30mg/dL；载脂蛋白A1，异常代谢指标水平是不到约123mg/dL；载脂蛋白B，异常代谢指标水平是超过约100mg/dL；脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)，异常代谢指标水平是超过约200ng/ml；或尿白蛋白/肌酐比，大于约30mg/g的比率代表着异常指标比率。
[0292] 有或无钆或其他造影增强剂的MRI可用于检测炎症的存在且从而鉴别患有炎性疾病或处在患上炎性疾病的较高风险之下的个体。举例来说，MRI检测的炎症(这代表着异常影像指标结果)定义为存在以下表现中的一项或多项：滑膜炎(滑膜衬里变厚、增生和/或增强)、关节渗出物、骨髓浮肿和表明炎症的其他MRI影像学表现(Krasnokutsky等 ,Arthritis Rheum.201163(10):2983-91.doi:10.1002/art.30471 PMID:21647860；Roemer等,Osteoarthritis Cartilage.2010年10月；18(10):1269-74.PMID:20691796；
Guermazi等,Ann Rheum Dis.201170(5):805-11,PMID:21187293)。Guermazi等(Guermazi等,Ann Rheum Dis.201170(5):805-11,PMID:21187293)定义了用于对关节中炎症的水平进行分级，从而允许确定(1)个体是否患有炎症和(2)个体中的炎症程度的半定量评分系统。根据Guermazi评分系统具有关节炎症证据的个体可以分类为具有患上OA的较高风险、临床前OA、早期OA或确立OA。如通过Guermazi评分系统评估的炎症程度可预测炎性疾病OA的发展和/或进展。有或无钆的MRI可以应用于许多其他病状以确定是否存在炎症(异常影像指标结果)，且当存在时个体处在患上炎性疾病的较高风险之下、患有临床前、患有早期炎性疾病或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
Guermazi等,Ann Rheum Dis.201170(5):805-11,PMID:21187293)。Guermazi等(Guermazi等,Ann Rheum Dis.201170(5):805-11,PMID:21187293)定义了用于对关节中炎症的水平进行分级，从而允许确定(1)个体是否患有炎症和(2)个体中的炎症程度的半定量评分系统。根据Guermazi评分系统具有关节炎症证据的个体可以分类为具有患上OA的较高风险、临床前OA、早期OA或确立OA。如通过Guermazi评分系统评估的炎症程度可预测炎性疾病OA的发展和/或进展。有或无钆的MRI可以应用于许多其他病状以确定是否存在炎症(异常影像指标结果)，且当存在时个体处在患上炎性疾病的较高风险之下、患有临床前、患有早期炎性疾病或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
[0293] 超声波检测的炎症(异常影像指标)定义为存在以下表现中的一项或多项：滑膜衬里变厚和/或增强、关节渗出物、骨髓增强、滑膜衬里中的多普勒流体信号和表明炎症的其他表现(Guermazi等,Curr Opin Rheumatol.2011 23(5):484-91.PMID:21760511；Hayashi 等 ,Osteoarthritis Cartilage.2012 年 3 月；20(3):207-14.PMID:22266236；
Haugen等,Arthritis Res Ther.2011；13(6):248.PMID:22189142)。患有超声波检测的炎症的个体处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
Haugen等,Arthritis Res Ther.2011；13(6):248.PMID:22189142)。患有超声波检测的炎症的个体处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下、处在炎性疾病或与炎症相关的疾病的早期或患有确立的炎性疾病或与炎症相关的疾病。
[0294] 在各个实施方案中，本发明涉及使用DHCQ或DHCQ与阿托伐他汀的组合来治疗炎性疾病和与炎症相关的疾病。在一个实施方案，所述他汀类药物包含阿托伐他汀，且在其他实施方案中，所述他汀类药物可以包含西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀或匹伐他汀。重要的是，DHCQ与他汀类药物的组合的这种新颖使用不需要使用抗生素、抗病毒剂或抗细菌剂。针对DHCQ或DHCQ与他汀类药物的组合所描述的消炎活性和疾病改善活性不需要抗生素、抗病毒剂或抗细菌化合物。
[0295] 在某些活体外测定、间接体内测定和活体内模型中，DHCQ与阿托伐他汀的组合在活体外和间接体内测定中在减少炎性介体产生方面以及在活体内模型中在降低疾病活性和炎症方面展现了出乎意料且令人惊讶的协同作用。在其他些活体外测定、间接体内测定和活体内模型中，所述组合在活体外和间接体内测定中在减少炎性介体产生方面以及在活体内模型中在降低疾病活性和炎症方面展现了出乎意料且令人惊讶的加和效应。一般来说，单独DHCQ和单独个别他汀类药物不能提供与所述组合(DHCQ+阿托伐他汀的组合)同样强劲的消炎或疾病改善活性，其在组合时可以提供协同效益。
[0296] 多个炎性疾病指标且具体来说是检测到异常水平的这些指标可以用于鉴别个体处在较高疾病风险之下、患有早期疾病，以及监测对利用DHCQ或DHCQ和阿托伐他汀疗法进行干预的反应。所述指标也称为生物指标，包括实验室化验结果、影像结果、体检表现、研究性化验指标以及炎症和疾病的其他指标。实验室指标的实例包括：作为系统性炎症的量度的hs-CRP；作为系统性炎症的量度的ESR；作为不良血糖控制且因而作为糖尿病和/或代谢综合征的严重程度的量度的血红蛋白A1C；作为肝功能失常和NAFLD或NASH活性的量度的肝酶化验；以及作为动脉粥样硬化征象的胆固醇和LDL胆固醇。影像指标的实例包括患有临床前或早期RA的个体的手关节MRI上的早期滑膜炎的证据；处在OA的风险之下的个体的关节MRI上的低等级滑膜炎的证据；处在MS的风险之下的个体的脑部MRI上的脱髓鞘病变的证据。研究性生物指标的实例包括：对血液中的细胞因子的多路轮廓分析，其用于鉴别患有系统性炎症的个体，和确定造成个体“处于风险之下”或介导早期疾病的特定细胞因子子集；对基因表达的分析，其用于对炎性疾病分亚型；通过对个体基因组进行基因分型或测序而对基因变异体的分析，其用于确定个体处在患上何种炎性疾病的较高风险之下。在其他实施方案中，这类实验室、影像和研究性生物指标用于鉴别处在患上炎性疾病的较高风险之下或患有早期炎性疾病的个体。在其他实施方案中，这类实验室、影像和研究性生物指标用于监测个体对DHCQ疗法的反应、确定疗法是否需要继续、或疗法是否需要增加、或个体的风险是否已经降低且因而可以中止疗法。实施例
[0297] 以下是本发明方法和组合物的实施例。应理解，鉴于以上所提供的一般描述，可以实施各种其他实施例。
[0298] 实施例1
[0299] 利用去乙基羟氯喹(DHCQ)的治疗可防止鼠类类风湿性关节炎(RA)发展和降低其严重程度
[0300] 通过用在完全弗氏佐剂(CFA)中乳液化的II型胶原蛋白免疫，随后在21天后通过用在不完全弗氏佐剂(IFA)中乳液化的II型胶原蛋白加强免疫来诱导DBA/1小鼠(n＝12至15只/组)患上胶原蛋白诱导的关节炎(CIA)，即小鼠RA模型。在第一次免疫当天，即在这段前驱期或早期RA疾病时间段期间小鼠未展现RA症状但已经被诱导并且截至第14天已经展现了较严重的炎性状态(由于用CFA免疫)且产生自身抗体的时间点，启动用羟氯奎(HCQ)、去乙基羟氯喹(DHCQ)、去乙基氯喹(DCQ)或双去乙基氯喹(BDCQ)治疗，且各分子以50mg/kg/天通过经口管饲法给予(每天一次给药)，自初次免疫那天开始持续2周，随后在第14天开始通过经口管饲法增至100mg/kg/天的负荷剂量，以便有效地在组织中达到治疗药物浓度，并且随后在第21天，通过经口管饲法将剂量减回至50mg/kg/天的较低维持剂量并且继续。对个别组的评分的统计比较显示，与用媒剂(对照)治疗相比，用HCQ或DHCQ治疗在统计上减缓疾病发展且降低疾病活性(#P<0.05，曼-惠特尼U检验)。相比之下，同媒剂治疗的小鼠相比，HCQ代谢物去乙基氯喹(DCQ)和双去乙基氯喹(BDCQ)与统计性保护或疾病严重程度降低无关(曼-惠特尼U检验)。
[0301] 使用8周龄雄性DBA/1小鼠(Jackson Laboratory)来产生鼠类RA模型。实验是根据经斯坦福大学动物研究委员会批准的方案且根据NIH指导方针来进行。用在含250μg/小鼠的热杀结核分枝杆菌H37Ra(BD)的完全弗氏佐剂(CFA)中乳液化的100μg/小鼠的牛II型胶原蛋白(Chondrex)经皮内对DBA/1小鼠进行免疫。免疫后二十一天，在小鼠尾根部经皮下注射100μg/小鼠的在不完全弗氏佐剂(IFA)中乳液化的牛CII。大约在第28天之前，小鼠未展现RA症状，但由于胶原蛋白免疫而处在具有较高炎症水平的前驱期或早期RA状态。此外，截至第14天，经过免疫的前驱期RA小鼠已经产生了针对II型胶原蛋白的自身抗体，自身抗体反应进行表位扩展，并且小鼠具有持续发炎的前驱期RA疾病状态(Arthritis Res Ther.2008；10(5):R119；Finnegan等,Autoimmunity.2012
45(5):353-63)。小鼠大约在第28天开始显现临床RA，并且通过对肢体炎症进行直观评分、测量爪厚度和对脾脏进行称重来评估小鼠中的炎性关节炎。直观评分系统如下：0级，无肿胀或红疹；1级，轻度肿胀和红疹或趾部炎症；2级，局限于爪垫远端区域的中度肿胀和红疹；3级，蔓延到踝部的更明显肿胀和红疹；4级，严重肿胀、红疹和踝部、足部和足趾的关节僵化。各肢体用0至4的评分进行分级，其中各个别小鼠的最高可能评分是16。通过用0至10mm测径规测量后爪的厚度和计算两个测量值的平均值来确定爪厚度。
45(5):353-63)。小鼠大约在第28天开始显现临床RA，并且通过对肢体炎症进行直观评分、测量爪厚度和对脾脏进行称重来评估小鼠中的炎性关节炎。直观评分系统如下：0级，无肿胀或红疹；1级，轻度肿胀和红疹或趾部炎症；2级，局限于爪垫远端区域的中度肿胀和红疹；3级，蔓延到踝部的更明显肿胀和红疹；4级，严重肿胀、红疹和踝部、足部和足趾的关节僵化。各肢体用0至4的评分进行分级，其中各个别小鼠的最高可能评分是16。通过用0至10mm测径规测量后爪的厚度和计算两个测量值的平均值来确定爪厚度。
[0302] 在第一次免疫当天，通过每天一次经口管饲100μL持续2周来传递50mg/kg/天的羟氯奎(HCQ)、去乙基羟氯喹(DHCQ)、去乙基氯喹(DCQ)或双去乙基氯喹(BDCQ)来启动治疗，随后通过经口管饲一周增至100mg/kg/天的负荷剂量水平，以便更有效地在组织中达到治疗氨基喹啉水平，随后在加强免疫时(第21天)开始，通过经口管饲将HCQ、DHCQ、DCQ或BDCQ的剂量降至50mg/kg/天的维持剂量。负荷剂量的目的是在疗法启动后促进所给予的氨基喹啉的组织水平达到治疗水平。用单独的媒剂治疗对照组中的小鼠。小鼠是使用直观评分系统(称为“关节炎评分”)对关节炎的严重程度进行评分，且大约在加强免疫后一周(初次免疫后28天)患上关节炎。HCQ和DHCQ治疗组的关节炎严重程度在统计上低于经媒剂、双去乙基氯喹(BDCQ)或去乙基氯喹(DCQ)治疗的小鼠的关节炎严重程度，P<0.05，曼-惠特尼U检验。图2显示与经BDCQ或媒剂治疗的小鼠相比，经CIA诱导且经HCQ或DHCQ治疗的小鼠展现有所减轻的关节炎，如通过总关节炎评分所衡量(P<0.05，曼-惠特尼U检验)。
[0303] 实施例2
[0304] 去乙基羟氯喹(DHCQ)防止患上实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠多发性硬化(MS)模型和降低其严重程度
[0305] 通过用含蛋白脂质蛋白肽139-151(PLP 139-151)的CFA进行免疫在SJL小鼠(n＝10只/组)中诱导实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)，即小鼠MS模型。在免疫时开始通过经口管饲法用100mg/kg/天的DHCQ或HCQ负荷剂量治疗小鼠，以促进所给予的氨基喹啉在疗法启动后达到治疗组织水平，且在第8天将剂量降至50mg/kg/天的维持剂量。在初次免疫后的大约前10天，小鼠未展现MS症状但发炎，产生自身抗体，并且呈前驱期或早期MS疾病状态。第8天开始，每天对小鼠的EAE严重程度进行评分。各组之间的曼-惠特尼U检验比较显示，与用媒剂对照或双去乙基氯喹(BDCQ)治疗相比，用DHCQ和HCQ治疗既防止患上EAE又降低EAE严重程度(图3)。因而，我们证明了去乙基羟氯喹防止患上EAE小鼠MS模型和降低其严重程度(*P<0.05，曼-惠特尼U检验)，而且减轻炎症与疾病严重程度降低有关。DHCQ在统计上显示了优越的活性，与HCQ治疗相比，在若干个时间点使EAE疾病活性下降更大程度(#P<0.05，曼-惠特尼U检验)。
[0306] 实施例3
[0307] 去乙基羟氯喹(DHCQ)治疗确立的小鼠多发性硬化(MS)
[0308] 通过用含蛋白脂质蛋白肽139-151(PLP 139-151)的CFA进行免疫在SJL小鼠(n＝10只/组)中诱导实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)，即小鼠MS模型。在第14天，当小鼠展现大约2.5的平均临床评分时，用DHCQ 100mg/kg/天或HCQ 100mg/kg/天通过经口管饲法启动治疗，且8天后将剂量降至50mg/kg/天。各组之间的曼-惠特尼U检验比较显示，与用媒剂对照治疗相比，用DHCQ和HCQ治疗都能通过降低EAE严重程度治疗确立的EAE(*P<0.05；**P<0.01，曼-惠特尼U检验)(图4A)。在实验终止时，将小鼠处死，且收集脑，固定，由不知情的检查者使用确立的“炎性病灶评分”(Chang等,Recovery from EAE is associated with decreased survival of encephalitogenic T cells in the CNS of B7-1/B7-2-deficient mice.European J.Immunology,2003,33(7):2022-32)针对脑膜和软组织中的炎性病灶数目对切片进行组织学评分。同媒剂对照治疗相比，用HCQ治疗减少脑膜中的炎性病灶评分(*P<0.05，双尾T检验)且展现出倾向于减少软组织和总评分(图4B)，而用DHCQ治疗在统计上减少脑膜中的炎性病灶评分、软组织以及总评分(*P<0.05，双尾T检验)(图4C)。因而，DHCQ有效地治疗EAE小鼠模型中的确立多发性硬化，并且展现了比用HCQ治疗更强劲的治疗活性。
[0309] 实施例4
[0310] 去乙基羟氯喹(DHCQ)在小鼠模型中防止患上骨关节炎(OA)且降低其严重程度[0311] 本实施例说明在通过使内侧半月板失稳(DMM)而手术诱导患上OA的小鼠中，利用去乙基羟氯喹的治疗在统计上预防OA和降低其严重程度(P＝0.03，双尾T检验)(图5和6)。通过使内侧半月板失稳(DMM)来手术诱导C57BL6(B6)小鼠(n＝6至10只/组)患上OA。手术诱导后一周，用通过经口管饲法以100mg/kg/天给予的媒剂对照、羟氯奎(HCQ)或去乙基羟氯喹(DHCQ)启动治疗。3个月后，将小鼠处死，收集关节，切成关节切片，并且用番红精O将组织切片染色。对治疗不知情的检查者使用显微术对OA严重程度进行评分。
由不知情的检查者确定“软骨退化评分”(也称为“OA评分”、“严重性评分”和“组织学评分”)，且使用双尾T检验来确定各组之间的软骨退化评分是否存在统计差异。DHCQ在统计上预防OA且降低其严重程度，如通过双尾T检验将软骨退化评分与利用媒剂对照的治疗相比较所评估(P＝0.03)(图5)。基于软骨退化评分，羟氯奎不产生统计显著的预防或OA严重程度降低(图5)。
由不知情的检查者确定“软骨退化评分”(也称为“OA评分”、“严重性评分”和“组织学评分”)，且使用双尾T检验来确定各组之间的软骨退化评分是否存在统计差异。DHCQ在统计上预防OA且降低其严重程度，如通过双尾T检验将软骨退化评分与利用媒剂对照的治疗相比较所评估(P＝0.03)(图5)。基于软骨退化评分，羟氯奎不产生统计显著的预防或OA严重程度降低(图5)。
[0312] 对以上和图5中所提供的小鼠OA实验终止时产生的组织切片进行“骨赘评分”(骨赘或异位性骨形成的量的量度)和“滑膜炎评分”(测量滑膜和关节炎症的量的量度)的不知情评分。通过双尾T检验来比较各组之间的评分。同经过媒剂治疗的对照相比，DHCQ在统计上预防软骨退化且降低其严重程度，并且还在统计上预防和减缓骨赘(P<0.01)和滑膜炎(P<0.01)发展(图6)。
[0313] 通过使内侧半月板失稳(DMM)来手术诱导C57/BL6(B6)小鼠(n＝7至10只/组)患上OA。实验是根据经斯坦福大学动物研究委员会批准的方案且根据NIH指导方针来进行。通过DMM失稳而以手术方式产生鼠类OA(Glasson,S.,S.等,Osteoarthritis Cartilage,15:1061-1069(2007))。对DMM模型手术诱导后一周，小鼠正常走动和跑动，关节软骨完整且不存在OA的证据，但由于手术程序，小鼠呈前驱OA或早期OA疾病状态且在随后数月内患上OA。
[0314] 手术后3个月对小鼠施以安乐死。将其膝关节在EDTA溶液中脱钙，在4％多聚甲醛中固定，且嵌埋在石蜡中。切出一系列4微米切片且用甲苯胺蓝染色。根据先前描述的综合评分系统的改进版本对这些组织学切片中的关节炎进行评分(Kamekura,S.等 ,Osteoarthritis Cartilage 13:632-641(2005)；Bendele,A.M.,J Musculoskelet Neuronal Interact.,1:363-376(2001))。“OA评分”计算如下：软骨退化(0至4)乘以股骨内侧髁和胫骨内侧髁各三分之一的宽度(1＝1/3表面积，2＝2/3表面积，且3＝3/3表面积)，且将6个区的评分加和。为了评估骨赘(异位性骨)形成，我们根据先前描述的评分系统(Kamekura,S.等,Osteoarthritis development in novel experimental mouse models induced by knee joint instability.Osteoarthritis Cartilage 13,632-641(2005))对经甲苯胺蓝染色的切片进行评分：0，无；1，形成软骨样组织；2，软骨基质增加；3，软骨内骨化。为了评估滑膜炎，我们根据先前描述的评分系统(Blom,A.B.等,Synovial lining macrophages mediate osteophyte formation during experimental osteoarthritis.Osteoarthritis Cartilage 12,627-635(2004))对经过H&E染色的切片进行评分：0，与正常关节相比无变化；1，滑膜衬里变厚和炎性细胞的一定程度的流入；2，滑膜衬里变厚和炎性细胞的中等流入；和3，滑膜衬里大幅变厚(超过四个细胞层)和炎性细胞的最大程度的观测流入。记录对关节手术侧上的股骨内侧髁和胫骨内侧髁的骨赘形成和滑膜炎的评分，且将两个区域的评分加和并且使用双尾T检验进行统计比较。
[0315] 手术诱导内侧半月板失稳(DMM)后1周开始治疗，在该时间点，小鼠处在患上OA的较高风险之下。小鼠中的DMM类似于人类中的退化性或外伤性半月板撕裂，其已经显示使人类患上OA的风险增加5倍。诱导DMM后一周，小鼠正常走动和跑动，处在患上OA的较高风险之下但不展现OA的经典组织学特征，具体来说，在这个时间点，不存在明显软骨损失或骨重塑(骨赘形成、软骨下骨重塑)的证据。尽管如此，DMM后一周可能存在软骨浮肿、蛋白聚糖损失以及鼠类和人类OA所特有的其他早期特征。
[0316] 实施例5
[0317] 去乙基羟氯喹(DHCQ)防止患上高脂肪饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)[0318] 为了评估DHCQ和HCQ对可导致患上NASH的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的动物模型的效应，对C57BL/6小鼠(8只/组)喂食高脂肪“西式”饮食(60％卡路里含量来自脂肪；Taconic)持续6周。小鼠在这段时间内无症状，但发展前驱或早期疾病状态。在启动高脂肪饮食时开始，用HCQ (100 mg/kg/天)、DHCQ (100 mg/kg/天)或媒剂对照治疗小鼠， 以防止患上NAFLD和NASH。用DHCQ、HCQ和媒剂(对照)治疗同时遵守高脂肪饮食6周后，收集血液且将小鼠处死以便对肝脏病变进行组织学分析。将各治疗组中的小鼠的肝脏固定，嵌埋，切片，用H & E染色，代表性显微照片提供于图7A中(10倍和20倍放大)，使用确立的评分系统确定NASH的“肝脏评分”(Brunt等, Nonalcoholic steatohepatitis: a proposal for grading and staging the histological lesions, American J.Gastroenterology, 1999, 94(9):2467-74)。如图7B中所显示，经过DHCQ治疗的小鼠(P<0.001)和经过HCQ治疗的小鼠(P<0.05)同经过媒剂对照治疗的小鼠相比“肝脏评分”在统计上降低(通过双尾T检验)。作为NASH的血清实验室指标，测量丙氨酸转氨酶(ALT；也称为血清谷氨酸丙酮酸转氨酶[SGPT])和血清天冬氨酸转氨酶(AST；也称为血清谷氨酸草酰乙酸转氨酶[SGOT])的血清水平，并且显示DHCQ同利用媒剂对照的治疗相比能预防和降低这些肝脏转氨酶水平的异常升高(双尾T检验；*P<0.05；***P<0.001)(图7C、7D)。这些研究显示利用DHCQ的治疗能防止患上NAFLD和NASH且降低其严重程度。此外，DHCQ在降低肝脏评分、AST和ALT方面展现统计上优于HCQ的活性(P<0.05，双尾T检验，未指示于图7C至7D中的图上)。
[0319] 实施例6
[0320] 去乙基羟氯喹(DHCQ)治疗确立的高脂肪饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)[0321] 为了评估DHCQ和HCQ对确立的NASH的效应，对C57BL/6小鼠(8只/组)喂食高脂肪“西式”饮食(60％卡路里含量来自脂肪；Taconic)。启动高脂肪饮食后，在两周后抽取血液且分析NASH血清指标(包括AST和ALT)的异常升高。在初步2周高脂肪饮食后，AST和ALT异常升高，并且在那时用HCQ (10 mg/kg/天)、DHCQ (10 mg/kg/天)或媒剂对照启动治疗。治疗6周后，使小鼠禁食且收集血液用于血清分析，并且将小鼠处死以便对肝脏病变进行组织学分析。图8A提供了代表性肝脏组织切片在10倍和20倍放大下的显微照片。使用先前描述的评分系统(Tous等, Feeding apolipoprotein E-knockout mice with cholesterol and fat enriched diets may be a model of non-alcoholic steatohepatitis. Mol cell Biochemistry, 2005, 268:53-59；Tous 等 , Dietary cholesterol and differential monocyte chemoattractant protein-1gene expression in aorta and liver of apo E-deficient mice.Biochemical and Biophysical Research Communications,2006,340:1078–1084)的修正和改适版本针对“全区域的滑膜炎百分比”对肝脏切片进行评分，并且如通过肝脏组织学所评估，利用DHCQ或HCQ的治疗均统计上降低脂肪变性百分比(*P<0.05，***P<0.01，双尾T检验)(图8B)。测量所收集的血清中的AST和ALT水平，并且使用双尾T检验来比较各组之间的水平。利用DHCQ的治疗同媒剂对照相比在统计上减轻AST和ALT的异常升高(P<0.001；图8C、8D)，而利用HCQ的治疗仅展现倾向于减轻AST和ALT的异常升高(N.S.＝不显著)。DHCQ治疗同HCQ治疗相比展现了AST和ALT的统计性减少(*P<0.05，**P<0.01，双尾T检验)。这些研究显示，DHCQ在治疗确立的NASH方面展现了强劲的效力。
[0322] 实施例7
[0323] DHCQ治疗小鼠饮食诱导肥胖中的II型糖尿病、高脂血症和代谢综合征
[0324] 为了评估利用DHCQ和HCQ的治疗对饮食诱导的II型糖尿病、高脂血症和代谢综合征小鼠模型的效应，对C57BL/6小鼠(8只/组)喂食高脂肪“西式”饮食(60％卡路里含量来自脂肪；Taconic)。以类似于实施例6的方式，高脂肪饮食启动后两周，对各组小鼠启动利用媒剂对照、HCQ(10mg/kg/天)或HCQ代谢物DHCQ(10mg/kg/天)、DCQ(10mg/kg/天)或BDCQ(10mg/kg/天)的治疗。治疗6周后，收集血液以用于分析葡萄糖、甘油三酯和胆固醇水平。图9示出了比较HCQ、DHCQ、DCQ和BDCQ治疗小鼠饮食诱导的肥胖中的II型糖尿病、高脂血症和代谢综合征时的葡萄糖、甘油三酯和胆固醇水平的图。葡萄糖水平代表了II型糖尿病早期抗胰岛素性和早期发作的生物指标，且利用DHCQ的治疗同利用媒剂对照的治疗相比引起血糖水平的统计性降低(*P<0.05，双尾T检验)(图9A)，而相比之下，HCQ、DCQ和BDCQ同媒剂对照相比不引起血糖的统计性降低(图9A)。还测量了所收集的血液中的脂质水平，并且基于通过双尾T检验进行的统计分析，DHCQ治疗同利用媒剂对照的治疗相比使得总胆固醇(***P<0.001；图9B)和甘油三酯(***P<0.001；图9C)产生统计性降低。利用HCQ、DCQ和BDCQ的治疗同媒剂对照治疗过的小鼠中的水平相比在葡萄糖、胆固醇或甘油三酯方面不产生统计性降低(N.S.＝不显著，双尾T检验)(图9)。此外，DHCQ治疗同利用HCQ的治疗相比使得胆固醇和甘油三酯产生统计上显著的降低(***P<0.001，双尾T检验)。DHCQ治疗还引起了同利用DCQ的治疗相比在葡萄糖、胆固醇和甘油三酯方面的统计上显著的降低(*P<0.05，***P<0.001，双尾T检验)，和同利用BDCQ的治疗相比在胆固醇方面的统计上显著的降低(***P<0.001，双尾T检验)。这些数据显示DHCQ治疗饮食诱导的肥胖相关的抗胰岛素性、II型糖尿病、高脂血症和代谢综合征发展，而且这样做比HCQ、DCQ和BDCQ在统计上更有效。
[0325] 实施例8
[0326] 去乙基羟氯喹(DHCQ)减少响应于促炎性刺激的炎性细胞因子产生
[0327] DHCQ减少人类周围血液单核细胞(PBMC)响应于促炎性脂多糖(LPS)刺激的促炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)产生(图10)。使用Ficoll分离人类PBMC，将200,000个PBMC加入到96孔板的各孔中，并且在浓度范围0至50μM DHCQ或0至50μM HCQ存在下用LPS 10μg/ml刺激14小时，此后收集培养物上清液且通过ELISA测量TNF。一式三份进行测定。显示平均TNF水平与平均值标准误差。使用Tukey检验在统计上比较各组之间的结果，且HCQ和DHCQ同不存在这些分子时的LPS刺激相比在10、25和50μM浓度下都减少PMBC TNF产生(**P<0.001，双尾T检验)。
[0328] 分离人类PBMC和单核细胞。使用Ficoll-PaqueTM Plus(目录号17-1440-03GE，Healthcare)从自健康供体收集的血液中分离人类周围血液单核细胞(PBMC)。对于细胞培养，使分离的PBMC再悬浮于含10％FCS和抗生素(青霉素100IU/mL和链霉素100μg/mL)的培养基(RPMI1640)中。使用单核细胞分离试剂盒II(目录号130-091-153，Miltenyi Biotec)从人类PBMC的悬浮液中分离单核细胞。
[0329] 刺激测定。在37℃、5％CO2下用HCQ或去乙基羟氯喹或媒剂将以1.0×106个细胞/孔接种于48孔培养板中的人类PBMC预处理60min。10μg/ml脂多糖(LPS；Sigma)，20h，4
37℃，5％CO2。在37℃、5％CO2下用HCQ或去乙基羟氯喹或媒剂将以5.0×10 个细胞/孔接种于96孔培养板中的人类单核细胞预处理60min，且随后在37℃、5％CO2下用LPS(Sigma)刺激15h。
37℃，5％CO2。在37℃、5％CO2下用HCQ或去乙基羟氯喹或媒剂将以5.0×10 个细胞/孔接种于96孔培养板中的人类单核细胞预处理60min，且随后在37℃、5％CO2下用LPS(Sigma)刺激15h。
[0330] 读出。对于LPS刺激的测定，PMBC细胞测定的输出是TNF。对于各测定，制备经过相同处理的平行孔且测量LDH水平以确保不存在药物治疗诱导细胞死亡的证据。
[0331] 实施例9
[0332] 去乙基羟氯喹(DHCQ)治疗同利用会引起视网膜细胞死亡增加的羟氯奎(HCQ)或双去乙基羟氯奎(BDCQ)的治疗相比对视网膜细胞具有较低细胞毒性。
[0333] 长期施用羟氯奎的主要严重风险是视网膜累积和随后的眼部毒性(Terahi等,2008.Semin Opthal.(3):201-208.PMID)。通过孵育等效浓度的这些分子与视网膜色素上皮细胞系ARPE-19，通过直接视网膜细胞毒性来评估HCQ、DHCQ和BDCQ的眼部沉积。ARPE-19是具有分化性质的人类视网膜色素上皮细胞系(Dunn等,Exp Eye Res.199662(2):155-69)。使ARPE-19细胞生长至90％汇合，且随后暴露于10μg/ml HCQ、DHCQ、BDCQ或媒剂对照24小时，此后在40倍放大率下进行微观分析和显微照相术。图11提供了代表性显微照相，显示DHCQ治疗同引起细胞毒性和死亡增加的利用HCQ或BDCQ的治疗相比与较低ARPE-19细胞毒性相关。在媒剂对照和DHCQ治疗过的细胞中，视网膜上皮细胞活力较高。在HCQ和BDCQ治疗过的细胞中观测到视网膜细胞畸形特征和视网膜细胞死亡(红色箭头)。因而，同在HCQ或BDCQ治疗下观测到较高视网膜细胞毒性相比，DHCQ展现较低视网膜细胞细胞毒性。
[0334] 在图12中，基于乳酸脱氢酶(LDH)释放对这种细胞毒性进行定量。如以上所论述，使ARPE-19细胞生长至90％汇合，随后暴露于10μg/ml HCQ、DHCQ、BDCQ或媒剂对照24小时，随后通过乳酸脱氢酶(LDH)释放测定(Abcam)对细胞死亡进行定量。图12显示，利用DHCQ的治疗同利用媒剂对照的治疗相比不造成细胞毒性和死亡(P＝N.S.(不显著)，双尾T检验)。相比之下，BDCQ和HCQ同媒剂对照相比都引起LDH释放且因而引起视网膜上皮细胞系的细胞毒性在统计上增加(***P<0.01，双尾T检验)。此外，等摩尔浓度的HCQ和BDCQ同DHCQ相比引起视网膜细胞毒性显著增加(###P<0.001，双尾T检验)(图12)。这些数据显示DHCQ活体外展现极小视网膜细胞毒性，这与HCQ和另一HCQ代谢物BDCQ相反，这两者都展现显著增加的视网膜细胞毒性。
[0335] 实施例10
[0336] 显示DHCQ相对于在视网膜中的低累积水平以较高水平累积在血浆和滑膜组织中；而相比之下，HCQ相对于其在血浆或滑膜组织中的水平以高水平累积在视网膜中[0337] 长期施用羟氯奎的主要风险是视网膜累积和随后的眼毒性(Terahi等,2008.Semin Opthal.(3):201-208.PMID)。我们设法评估HCQ和DHCQ的视网膜沉积。为了这样做，我们对来源于HCQ或DHCQ治疗过的小鼠的视网膜中、手术侧和非手术侧滑膜组织中和血浆中的药物和代谢物含量进行了质谱分析。图13提供了得自给予HCQ的小鼠的所指示组织(血浆、视网膜、手术侧滑膜组织、非手术侧滑膜组织)中的HCQ水平；得自给予HCQ的小鼠的所指示组织中的DHCQ水平和得自给予DHCQ的小鼠的所指示组织中的DHCQ水平的测量浓度。在得自各组的所指示组织中测量的水平之间的所指示统计比较是通过双尾T检验加以比较(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)。对在给予HCQ或DHCQ的小鼠群组中的所指示组织中所测量的HCQ和DHCQ浓度之比的比较提供于图14至16中。
[0338] DHCQ以高水平累积在血浆和滑膜组织中，仅以低水平累积在视网膜中；这与以高水平累积在视网膜中相对于以较低水平累积在血浆或滑膜组织中的HCQ相反(*P<0.05，***P<0.01，双尾T检验)(图13)。显示HCQ治疗过的小鼠的视网膜中HCQ水平较高，但HCQ小鼠或DHCQ治疗过的小鼠的视网膜中仅存在低水平的DHCQ累积(*P<0.05，***P<0.01，双尾T检验)(图13)。因而，与HCQ相反，DHCQ在HCQ和DHCQ治疗过的小鼠中展现较低视网膜累积。
[0339] 这通过比较不同的给药组和组织中的DHCQ或HCQ水平之比而进一步得以证明(图14至16)。具体来说，在图13中的HCQ和DHCQ给药组中测量的DHCQ和HCQ浓度显示为以下3个比率之一：(1)手术膝关节[膝盖]滑膜组织中的水平/血浆中的水平；(2)视网膜中的水平/血浆中的水平；(3)术膝关节[膝盖]滑膜组织中的水平/视网膜中的水平(图14至16)。
[0340] 视网膜中的DHCQ水平相对于血浆中较低，而相比之下，视网膜中的HCQ积聚水平相对于血浆中较高(图14和15)。图15中提供了给予DHCQ或HCQ的小鼠中的DHCQ视网膜中水平/血浆中水平的比率和给予DHCQ的小鼠中的DHCQ视网膜中水平/血浆中水平的比率。这些数据显示，HCQ在视网膜中达到的水平比血浆高出大约8.5倍，而相比之下，DHCQ展现相反的情况，血浆中水平比给予HCQ和DHCQ的小鼠的视网膜中低得多。
[0341] 此外，DHCQ以高水平累积在手术关节滑膜组织中相对于在视网膜中测量到低水平；而相比之下，HCQ以高水平累积在视网膜中相对于在手术关节滑膜组织中测量到低水平(图14和16)。图16中显示了给予DHCQ或HCQ的小鼠中的DHCQ手术侧滑膜中水平/视网膜中水平的比率和给予DHCQ的小鼠中的DHCQ手术侧滑膜中水平/视网膜中水平的比率。这些数据显示，在给予HCQ和DHCQ的小鼠中，DHCQ差异性地以高水平累积在手术关节滑膜组织中相对于以低水平累积在视网膜中。相比之下，在给予HCQ的小鼠中，视网膜中HCQ水平相对于血浆或手术关节组织中水平较高。因而，DHCQ优先以高水平累积在手术关节滑膜中相对于视网膜中的低水平，这可能促成DHCQ导致视网膜毒性的可能性比HCQ低。
[0342] 给予小鼠HCQ和DHCQ，分离特定组织，且用质谱测量组织样品中的HCQ和DHCQ水平。通过经口管饲法用HCQ(100mg/kg/天)或DHCQ(100mg/kg/天)治疗C57BL6(B6)小鼠(n＝5只/组)持续3个月。在实验终止(3个月)时，将小鼠处死且在解剖显微镜下取出眼球。使用弯曲的微型解剖剪沿角膜和巩膜切割，取出晶状体和内容物并丢弃，将神经视网膜与眼球壁被放在PBS中并且均质化，随后进行离心。从手术膝盖或对侧未手术膝盖对滑膜进行显微解剖，用组织重量正规化，且放在HPLC等级水中，随后均质化并离心。通过尾部采血获得血浆。用乙腈使血浆和组织样品沉淀，并且在Climax Laboratories,Inc.(San Jose，CA)通过液相色谱/质谱(LC/MS)评估HCQ、DHCQ、BDCQ的水平。通过使用Shimazu10A HPLC系统(Shimadzu Scientific Instruments,Inc.，Pleasanton，CA)，用ACE C18
50×2.1HPLC管柱以及具有电喷雾电离(ESI)和负离子多重反应监测(MRM)扫描的ABSciex API-4000质谱仪(ABSciex Corp.，Foster City，CA)进行LC/MS分析。使用梯度洗脱，用流动相A(0.1％甲酸/5mM NH4AC)和B(0.1％甲酸/乙腈)分离测试化合物。
50×2.1HPLC管柱以及具有电喷雾电离(ESI)和负离子多重反应监测(MRM)扫描的ABSciex API-4000质谱仪(ABSciex Corp.，Foster City，CA)进行LC/MS分析。使用梯度洗脱，用流动相A(0.1％甲酸/5mM NH4AC)和B(0.1％甲酸/乙腈)分离测试化合物。
[0343] 实施例11
[0344] 视网膜组织学分析显示利用DHCQ的活体内治疗同利用HCQ的治疗相比与较低视网膜毒性和细胞死亡相关
[0345] 由如实施例10和图13至16中所描述的给予HCQ 100mg/kg/天或DHCQ 100mg/kg/天持续3个月的多组小鼠(n＝5)，进行视网膜分析，且在DHCQ治疗过的小鼠中同HCQ治疗过的小鼠相比显示较低视网膜毒性。在终止时，小心地对各治疗组的眼球进行显微解剖，以确保视网膜保持完整，将眼球固定在福尔马林中，并且将经过固定的眼球进行切片以目测视网膜。用苏木精和曙红(H&E)将视网膜细胞层染色，并且评估神经节细胞层(GCL)中的核数目，以及表明视网膜神经节细胞的选择性损失的GCL中核收缩率。基于图17中所提供的结果，在HCQ治疗过的小鼠中观测到GCL中核收缩率较高(图17B)。在DHCQ治疗过的小鼠群组中未观测到GCL中核收缩率增加(图17C)。各治疗组的H&E染色视网膜切片的代表性图像提供于图17中。
[0346] 使用由 Shichiri等改编的组织学和定量病理学方法论(Shichiri等,JBC.2012,287(4):2926-34.PMID 22147702)，评估H&E染色视网膜切片的神经节细胞层(GCL)中核数目(图18)。该图提供了对来自所指示治疗组的视网膜的GCL中核数目的定量。通过双尾T检验将各治疗组的视网膜的GCL中细胞数目与媒剂治疗过的对照中的细胞数目相比较。同得自媒剂治疗过的对照小鼠的视网膜相比，我们发现HCQ治疗过的小鼠中的GCL中细胞数目同媒剂治疗过的小鼠相比显著较低(*P<0.05)(图18)。相比之下，同得自媒剂治疗过的对照小鼠的视网膜相比，得自DHCQ治疗过的小鼠的视网膜中的GCL中细胞数目未见减少(N.S.＝不显著)(图18)。此外，我们统计性地比较了得自DHCQ治疗过的同HCQ治疗过的小鼠的视网膜中的GCL中细胞数目，并且显示HCQ治疗同DHCQ治疗相比引起统计上增加的视网膜细胞损失(#P<0.05)(图18)。
[0347] 这些结果显示，利用DHCQ的治疗同利用HCQ的治疗相比产生统计上较低的视网膜毒性(视网膜病)。
[0348] 实施例12
[0349] 利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗可防止患上鼠类骨关节炎(OA)且降低其严重程度
[0350] 图19提供了比较阿托伐他汀、HCQ、DHCQ、BDCQ、DCQ、阿托伐他汀+HCQ、阿托伐他汀+DHCQ或阿托伐他汀+BDCQ治疗过的小鼠群组的软骨退化评分的结果。DHCQ+阿托伐他汀和HCQ+阿托伐他汀的组合在小鼠模型中防止患上骨关节炎(OA)且降低其严重程度。通过使内侧半月板(DMM)失稳来手术诱导C57BL6(B6)小鼠(n＝7至10只/组)患上OA。手术诱导后一周，即小鼠无症状且展现轻度前驱OA关节症状的时间点，用以下分子中的一种或多种启动治疗：阿托伐他汀40mg/kg/天、HCQ(HCQ)100mg/kg/天、DHCQ 100mg/kg/天、去乙基氯喹(DCQ)100mg/kg/天或双去乙基羟氯喹(BDCQ)100mg/kg/天，呈个别分子或分子组合的形式，全部通过经口管饲法每天传递一次。3个月后，将小鼠处死，收集关节，切成关节切片，并且用番红精O将组织切片染色。膝关节内侧区域的番红精O染色切片中的平均“软骨退化评分”提供于该图中。使用双尾T检验来比较各组同媒剂对照组相比的软骨退化评分。
[0351] 图20是比较阿托伐他汀、HCQ、DHCQ、BDCQ、DCQ、HCQ+阿托伐他汀、DHCQ+阿托伐他汀或BDCQ+阿托伐他汀治疗过的小鼠群组的“软骨退化评分”、“骨赘评分”和“滑膜炎评分”(关于这些评分的描述，参见Wang等,Identification of a critical role for complement in osteoarthritis.Nature Medicine,2011,17(12):1674-9)的表格。DHCQ+阿托伐他汀和HCQ+阿托伐他汀的组合在小鼠OA模型中防止患上OA和降低软骨退化评分的严重程度。由图19中所提供的小鼠OA实验，通过双尾T检验在媒剂治疗组与各其他治疗组之间比较膝关节内侧区的番红精O染色切片中的平均“软骨退化评分”，并且显示DHCQ+阿托伐他汀以及HCQ+阿托伐他汀的组合同媒剂治疗过的小鼠相比都在统计上减轻关节中的滑膜炎(炎症)(P<0.01)、防止患上OA(P<0.01)且降低OA严重程度(P<0.01)。
[0352] 图21是比较HCQ、DHCQ、BDCQ或DCQ与阿托伐他汀的组合对比利用单独HCQ、DHCQ或阿托伐他汀的单一疗法治疗过的受试者的软骨退化评分、骨赘评分和滑膜炎评分的表格。在鼠类OA中比较DHCQ+阿托伐他汀和HCQ+阿托伐他汀与单独HCQ或阿托伐他汀单一疗法的保护效应。由图19中所提供的小鼠OA实验，通过双尾T检验在个别单一药物治疗组(例如阿托伐他汀治疗组或HCQ治疗组或DHCQ治疗组)与各组合治疗组(例如DHCQ+阿托伐他汀或HCQ+阿托伐他汀)之间比较“平均软骨退化评分”、“骨赘评分”和“滑膜炎评分”，并且显示DHCQ+阿托伐他汀以及HCQ+阿托伐他汀的组合同媒剂治疗过的小鼠相比都在统计上减轻OA关节中的滑膜炎(炎症)(P<0.01)、防止患上OA(P<0.01)且降低OA严重程度(P<0.01)。
[0353] 利用单独DHCQ的治疗同利用媒剂的治疗相比降低“软骨退化评分”(P＝0.03，双尾T检验)(图19和20)。相比之下，利用单独HCQ或单独阿托伐他汀的治疗仅倾向于改善“软骨退化评分”(图19和20)。通过双尾T检验，DHCQ+阿托伐他汀的组合同媒剂治疗组相比(P<0.01)以及同利用单独DHCQ或单独阿托伐他汀的治疗相比(P<0.05)在统计上降低“软骨退化评分”(图21)。另外，利用单独DHCQ的治疗同利用媒剂的治疗相比产生对患上滑膜炎和骨赘的统计上显著的防护作用(图20)，而DHCQ+阿托伐他汀的组合同利用任一单独药物的治疗相比对滑膜炎和骨赘发展提供甚至更强且统计上显著的预防和减缓作用(图21)。
[0354] 因而，显示DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合能防止患上骨关节炎和降低其严重程度。
[0355] 实施例13
[0356] DHCQ、DHCQ+阿托伐他汀的组合和HCQ+阿托伐他汀的组合在小鼠OA模型中抑制滑膜中炎性细胞因子产生的发展
[0357] 由实施例12和图19中所提供的小鼠OA实验的平行实验，在活体内给药后和在终止时对OA滑膜组织进行显微解剖，均质化以形成溶解产物，离心，且使用基于珠粒的多路细胞因子测定法(BioRad Laboratories，Hercules，CA)测定上清液中的炎性细胞因子水平。图22显示了代表来源于媒剂治疗过的小鼠(CTRL)、羟氯奎治疗过的小鼠(HCQ)、去乙基羟氯喹治疗过的小鼠(DHCQ)、阿托伐他汀治疗过的小鼠(阿托伐他汀)、HCQ+阿托伐他汀的组合治疗的小鼠和DHCQ+阿托伐他汀的组合治疗的小鼠的小鼠OA滑膜(SNY)中的炎性细胞因子水平的热图。提供了得自各治疗组的两只独立的小鼠中的每一只的两次独立测量的结果并加以分析。与媒剂对照治疗过的小鼠相比，在单独HCQ或单独DHCQ治疗过的小鼠中，OA滑膜中的炎性细胞因子水平较低，并且在HCQ+阿托伐他汀的组合治疗过的小鼠中还要更低，并且在DHCQ+阿托伐他汀的组合治疗过的小鼠中最低(图22)。类似地，图22和23显示，得自单独DHCQ治疗过的小鼠的小鼠OA滑膜组织中多个炎性细胞因子的水平同利用媒剂对照的治疗相比较低(图22和23A至23E)，以及在中DHCQ+阿托伐他汀治疗过的小鼠中同利用媒剂对照的治疗相比较低(图22和23F至23I)。利用HCQ+阿托伐他汀的组合的治疗同利用媒剂对照的治疗相比还能抑制炎性细胞因子的产生(图22和23J)。图24显示使用微阵列显著性分析算法和软件对多种细胞因子进行高维数分析(Tusher等,PNAS.200198(9):5116-21.PMID11309499)，以鉴别得自不同治疗组的OA滑膜中差异性地产生的细胞因子，如通过假发现率<0.1％所确定(q值)。如图24中所显示：
[0358] 与HCQ单一疗法相比，利用HCQ+阿托伐他汀的组合的治疗产生显著较低水平的MCP-1(图24I)。
[0359] 与阿托伐他汀单一疗法相比，HCQ+阿托伐他汀的组合产生显著较低水平的TNFα和MCP1。
[0360] 与媒剂对照治疗相比，利用DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗产生显著较低水平的IL-1β、MCP-1、IL12p40和IL-12p70。
[0361] 与阿托伐他汀单一疗法相比，利用DHCQ+阿托伐他汀的组合的治疗产生显著较低水平的IL-1β、MCP-1、IL12p40和IL-10。
[0362] DHCQ单一疗法同利用媒剂对照、单独阿托伐他汀(图24H)、HCQ+阿托伐他汀(图24G)和单独HCQ(图24F)的治疗相比降低多种炎性细胞因子(包括IL-1b、MCP-1、IFNγ、TNF-α、IL12p40和IL-12p70)的水平。
[0363] 实施例14
[0364] 在16周开放标记先导临床试验(NCT01645176)中，HCQ+阿托伐他汀的组合在内侧间室OA人类受试者中减轻滑膜炎并且改善疼痛和功能评分。
[0365] 美国有接近2700万人患有某种形式的骨关节炎(OA)，这一数字是从1990年的2100万增加而来。膝盖OA在16％的所有45岁以上成年人中非常流行。在加拿大，OA影响了整个人口的10％。2005年，美国工作者由于OA所致的估计年度损失生产时间超过700亿美元。从1990年到2000年进行的基于人口的研究显示，年龄>45岁的患者中全膝盖置换发病率在那期间增加了81.5％。2000年，美国保健系统对全膝盖置换的总收费大约是
14800万美元。
14800万美元。
[0366] 用于治疗OA的医学疗法包括非类固醇消炎药(NSAID)、醋氨酚、关节内皮质类固醇、关节内透明质酸制剂、麻醉药和物理疗法。尽管所有这些都可以减轻与OA相关的症状，但目前尚无可用于防止软骨损失进展或逆转疾病过程的医学疗法。在患有更严重膝盖OA的患者中，全关节置换术是一项选择。全膝盖置换发病率稳定上升，且OA成了膝盖置换术的主要原因。膝盖置换术发病率增加加重了保健系统的负担以及产生了手术并发症的风险。
[0367] 临床前研究显示HCQ+阿托伐他汀的组合阿斯洛他汀(Arthrostatin)在内侧半月板失稳(DMM)小鼠模型中防止患上OA(图19至21)。HCQ+阿托伐他汀的组合在此模型中提供了统计上显著的效益，而若干种其他组合和利用单独HCQ或阿托伐他汀的治疗未能在统计上显著地降低OA严重程度。
[0368] 迄今为止，HCQ已经在人类OA中得以测试并且展现了在侵蚀性OA的病例系列中倾向于存在治疗效益，但在非侵蚀性OA中尚未显示疾病改善或疼痛减轻活性。
[0369] 临床试验的主要目标是评估阿斯洛他汀对于治疗骨关节炎(非侵蚀性)的效力，其测量介于0与24周之间的膝盖滑膜炎变化的差异，如在OA患者中通过MRI所测量。第二目标是评估研究药剂在24周内的安全性和耐受性，以及评估研究药剂在24周内对疼痛和功能的影响。探索目标是超声波评估滑膜炎；和市场分析，包括软骨破环指标、代谢指标和炎症指标。迄今为止，7名人类内侧间室膝盖OA患者已经完成了16周给药，包括所有基线、日常和随访检查、化验和钆强化MRI影像研究。
[0370] 本研究的主要终点是基于在经过阿斯洛他汀治疗的患者中在24周时如通过Gd-MRI所测量的滑膜炎评分降低超过4点来确定实现有意义的滑膜炎改善的用阿斯洛他汀治疗的受试者的比例(Guermazi等,Ann Rheum Dis.2011 70(5):805-11.PMID:21187293)，如在24周时通过MRI所测量。这一先导试验的首要假设是在该开放标记先导试验中能减轻低等级滑膜炎OA的干预(如通过Gd-MRI所测量)将提供软骨保护效应并且随后的II期和III期临床试验中减缓OA进展。
[0371] 第二终点包括阿斯洛他汀在患有早期OA的受试者中的安全性和耐受性；WOMAC疼痛分量表中从基线到第4周、第12周和第24周的变化以及WOMAC功能分量表中从基线到第4周、第12周和第24周的变化；患者总体VAS中从基线到第4周、第12周和第24周的变化；使用OMERACT-OARSI反应指数(Onel等,Clin Drug Investig.2008；28(1):37-45.PMID:18081359)分析效力数据；HAQ-DI中从基线到第4周、第12周和第24周的变化；医师总体VAS中从基线到第4周、第12周和第24周的变化；和确定在第4周、第12周和第24周使用救援药物治疗。
[0372] 征募患有OA的受试者且获得知情同意书。在持续多达34天的筛查期间，受试者进行医学和关节炎病史、身体检查且完成WOMAC疼痛与功能分量表调查问卷和患者VAS总体评估。对指数膝盖进行ECG、双侧膝盖x射线和MRI，且记录伴随药物治疗。获得样品用于尿分析、血液学、血液化学和尿妊娠化验(对于具有生育潜能的妇女)。记录生命体征和体重。受试者被要求在该试验过程中维持其NSAID和/或其他止痛剂的通常剂量，但在第1天(基线)和第2周、第4周、第12周和第24周时的效力评估(WOMAC和HAQ调查表以及患者总体评估VAS)前48小时或24小时(醋氨酚)期间除外。
[0373] 满足所有包括准则和无一排除准则的受试者在第1天进入研究并且将接受阿斯洛他汀。其他随访在第2周、第4周、第12周和第24周进行，并且根据评估流程进行安全性和效力评估。电话随访将发生在第8周、第16周和第20周。给药方案是HCQ每天400mg和阿托伐他汀每天40mg。
[0374] 包括准则(异常指标)：1.患有膝盖OA、存在症状至少6个月和在最后的30天中大多数日子存在疼痛的非卧床受试者(异常临床指标的评估)。症状必须包括膝关节疼痛。在患有双侧膝盖OA的受试者中，症状更明显的膝盖是指数膝盖(异常临床指标的评估)。
2.年龄>40岁且体重指数<35的男性或女性(异常代谢指标的测量)。3.后前位(PA)和侧位屈膝站立时任一膝盖中存在至少一个骨赘的放射摄影证据，弯曲x射线(异常影像指标的测量)。4.指数膝盖中的OARSI Atlas关节间隙狭窄等级1或2(异常影像指标的成像)。5.在筛查访问2和第1天/基线访问时指数膝盖上的WOMAC疼痛评分>8(异常临床指标的测量)。6.基于指数膝盖的钆强化MRI(Gd-MRI)和Guermazi等(Ann Rheum Dis.2011
70(5):805-11.PMID:21187293)中所描述的评分系统(基于11个部位的总评分)的滑膜炎评分9至14。7.能够顺应研究且提供知情同意书。8.能够读、写和理解英文。
2.年龄>40岁且体重指数<35的男性或女性(异常代谢指标的测量)。3.后前位(PA)和侧位屈膝站立时任一膝盖中存在至少一个骨赘的放射摄影证据，弯曲x射线(异常影像指标的测量)。4.指数膝盖中的OARSI Atlas关节间隙狭窄等级1或2(异常影像指标的成像)。5.在筛查访问2和第1天/基线访问时指数膝盖上的WOMAC疼痛评分>8(异常临床指标的测量)。6.基于指数膝盖的钆强化MRI(Gd-MRI)和Guermazi等(Ann Rheum Dis.2011
70(5):805-11.PMID:21187293)中所描述的评分系统(基于11个部位的总评分)的滑膜炎评分9至14。7.能够顺应研究且提供知情同意书。8.能够读、写和理解英文。
[0375] 对于此试验，基于需要存在多个异常临床和实验室指标来评估候选患者中低等级炎性疾病OA的证据。为了进入试验而测量和需要的临床指标包括膝盖疼痛至少6个月、膝盖疼痛局限于一侧和WOMAC疼痛评分>8。另外，为了进入试验需要两个影像指标，包括后前位(PA)和侧位立式弯曲x射线上任一膝盖中存在至少一个骨赘的放射摄影证据和指数膝盖的基于钆强化MRI(Gd-MRI)和Guermazi等(Ann Rheum Dis.2011 70(5):805-11.PMID:21187293)中所描述的评分系统(基于11个部位的总评分)的滑膜炎评分9至14。基于对这些异常临床指标和异常影像指标的测量和检测(如包括准则中详细描述)，在先导试验中登记个体且用HCQ+阿托伐他汀的组合进行治疗。
[0376] 排除准则：1.需要用高效力阿片类药物治疗以便缓解疼痛。2.研究期间在疼痛评估前48小时不愿意戒除NSAID和/或除了醋氨酚(即，COX-2抑制剂，反胺苯环醇)的其他止痛药物和疼痛评估前24小时不愿意戒除醋氨酚。服用低剂量阿司匹灵以维持心血管健康的受试者在整个研究中可以保持其稳定剂量。3.在筛查访问1前至少3个月摄入不稳定剂量的NSAID或止痛剂。4.>50％的时间使用残疾辅助装置(即，扶杖、扶车)。5.进行新物理疗法或参与在筛查访问1之前至少3个月不稳定并且在其参与研究期间不会保持稳定的体重减轻或锻炼计划。6.具有在过去6个月中对指数关节进行关节镜或开放手术的既往病史或计划在研究随访期间手术。7.指数膝盖中进行了关节置换手术。8.指数膝盖在3个月的筛查访问1内接受皮质类固醇、短期作用透明质酸或其他关节内注射液和/或在研究持续时间内不愿意戒除治疗。9.过去5至10年中有反应性关节炎、类风湿性关节炎、牛皮癣关节炎、强直性脊椎炎、与炎性肠病相关的关节炎、类肉瘤病、淀粉样变性或纤维肌痛病史。10.活性膝盖感染的临床征象和症状或除假性痛风以外的晶体性疾病(即，痛风和CPPD)的放射摄影证据。11.指示任何显著医学疾病的异常实验室结果>2.5×ULN的病史，依据研究人员的意见，这将妨碍受试者参与研究。12.筛查期间存在以下异常实验室结3
果中的任一个：a.ALT和AST>2.5×ULN；b.血色素<9g/dL；c.WBC<3500个细胞/mm；d.淋
3
巴细胞计数<1000个细胞/mm；e.血清肌酐>1.5×ULN。13.过去十年内的恶性病史(<10年)，除了切除基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌或切除原位子宫颈异型性或子宫颈癌。14.可能干扰对指数膝盖疼痛的评估的与指数膝盖同侧的显著髋部疼痛。15.已知或临床上疑似感染人类免疫缺陷病毒(HIV)或者丙型或乙型肝炎病毒。16.3个月内参与或将同时参与另一项研究性药物或疫苗研究。17.过去3年中有药物或酒精依赖或滥用史。18.在研究持续时间内不愿意使用节育措施和/或打算在给药的12个月内怀孕的有生殖能力的女性。
19.根据研究人员的判断可能损害受试者安全、限制受试者完成研究的能力和/或损害研究的客观性的其他严重、非恶性、显著、急性或慢性医学或精神病学疾病。
果中的任一个：a.ALT和AST>2.5×ULN；b.血色素<9g/dL；c.WBC<3500个细胞/mm；d.淋
3
巴细胞计数<1000个细胞/mm；e.血清肌酐>1.5×ULN。13.过去十年内的恶性病史(<10年)，除了切除基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌或切除原位子宫颈异型性或子宫颈癌。14.可能干扰对指数膝盖疼痛的评估的与指数膝盖同侧的显著髋部疼痛。15.已知或临床上疑似感染人类免疫缺陷病毒(HIV)或者丙型或乙型肝炎病毒。16.3个月内参与或将同时参与另一项研究性药物或疫苗研究。17.过去3年中有药物或酒精依赖或滥用史。18.在研究持续时间内不愿意使用节育措施和/或打算在给药的12个月内怀孕的有生殖能力的女性。
19.根据研究人员的判断可能损害受试者安全、限制受试者完成研究的能力和/或损害研究的客观性的其他严重、非恶性、显著、急性或慢性医学或精神病学疾病。
[0377] 在研究期间监测所有受试者的AE。评估可以包括监测任何或所有以下参数：受试者的临床症状；实验室、病理学、放射学或手术表现；体检表现；或其他适当的化验和程序。必须追踪导致受试者中断研究参与的AE直到该事件得以解决、稳定或回到基线(如果基线评估可利用的话)。
[0378] 该试验标题为“羟氯喹/阿托伐他汀用于治疗膝盖骨关节炎(OA)”并且在ClinicalTrials.gov上注册为NCT01645176。迄今为止，7名人类内侧间室膝盖OA患者已经满足包括准则并且被登记。在我们的试验中，没有启动组合HCQ+阿托伐他汀疗法的受试者中途退出。该试验中无严重不利事件。所有7名受试者现在都已经完成了16周给药，包括所有基线、日常和随访检查、化验和钆强化MRI影像研究。如图25中所呈现，在该16周开放标记临床试验中，HCQ+阿托伐他汀的组合(该组合称为“阿斯洛他汀”)减轻了患有内侧间室膝盖OA的人类中的关节炎症。通过在基线时和在16周日常HCQ+阿托伐他汀治疗期结束时对各受试者的受影响膝盖进行钆强化MRI扫描来测量MRI滑膜炎评分，并且代表了关节中的炎症程度。仅登记和治疗具有异常MRI滑膜炎评分9至14以及其他临床和炎症指标的候选受试者。利用每天经口HCQ 600mg与每天经口阿托伐他汀40mg的组合治疗受试者16周。通过双路配对T检验来分析MRI滑膜炎评分，由此显示利用HCQ+阿托伐他汀的组合的治疗在统计上减少了受影响膝关节中的滑膜炎(炎症)的量(P＝0.024)(图25)。
[0379] 此外，在所登记的7名内侧间室膝盖OA患者中，HCQ+阿托伐他汀的组合降低了内侧间室膝盖OA人类患者在该16周开放标记临床试验中的WOMAC疼痛评分、WOMAC功能评分和WOMAC综合评分。在此试验中，我们测量了西安大略大学与麦梅斯特大学关节炎指标(WOMAC)疼痛评分、功能评分和综合评分(参见McConnell等,The Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index(WOMAC):a review of its utility and measurement properties.Arthritis Rheum2001；45:453-61.PMID:11642645)。通过单尾T检验来分析WOMAC疼痛评分、功能评分和综合评分，由此显示HCQ+阿托伐他汀的组合在统计上降低了16周时的WOMAC疼痛评分(P＝0.035)、WOMAC功能评分(P＝0.005)和WOMAC综合评分(P＝0.003)(图25B至25D)。
[0380] 因而，我们在患有内侧间室膝盖OA的人类中对HCQ+阿托伐他汀的组合的16周开放标记先导试验显示，该组合减轻了受影响膝盖中的滑膜炎(炎症)(P＝0.024；图25A)，并且改善了WOMAC疼痛、功能和综合评分(图25B至25D)。总之，这些数据表明，HCQ+阿托伐他汀的组合提供了有意义的临床效益，并且减轻了人类中的炎症且因而可以减缓OA疾病进展。
[0381] 能减轻炎症的药物可以提供疾病减缓效应，包括软骨保护(例如，降低软骨破环率)。具体来说，HCQ+阿托伐他汀的组合不仅可以减轻滑膜炎，而且这种滑膜炎减轻将减缓OA疾病进展。后续II期和III期试验中的这种OA疾病进展减缓将由受影响膝盖的负重平片X射线来显示，其显示维持关节间隙(例如，受影响膝盖的内侧间室中的关节间隙狭窄化的减缓)，和/或膝盖MRI扫描将显示维持软骨体积和/或完整。
[0382] 正在开发新方法用于测量软骨体积和完整性，并且这些新方法将用于后续II期和III期研究中以显示HCQ+阿托伐他汀共同在人类OA中防止软骨损失。用于通过平面X射线分析内侧间室膝盖OA中的关节间隙狭窄的方法的一个实例描述于Brandt等(Arthritis and Rheumatism,52(7):2015-2025,PMID:15986343)中，且关节间隙狭窄减缓被视为在OA中显示疾病减缓活性。用于显示软骨保护的第二种更敏感的方法是MRI扫描上显示维持软骨体积，并且使用MRI显示软骨体积维持的方法的一个实例描述于Raynauld等(Ann Rheum Dis.2009,68(6):938-47.PMID:18653484)中。
[0383] 鉴于DHCQ的有效消炎性质，在人类OA中，DHCQ+阿托伐他汀在减轻滑膜炎(基于Gd-MRI)、降低WOMAC疼痛评分和提高WOMAC功能评分方面可以提供甚至更大的效力。
[0384] 实施例15
[0385] 使用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀组合疗法防止患上骨关节炎(OA)
[0386] 在人类中筛查早期OA或患上OA的较高风险的证据。许多因素可以将人类置于临床前OA疾病状态之下，包括关节损伤、关节手术、退化性半月板撕裂、关节软骨退化、前十字韧带撕裂、胶原蛋白和其他基质蛋白缺陷、遗传素质和其他因素。可以用DHCQ或用DHCQ+阿托伐他汀的组合来治疗处在患上OA的过程中或具有早期OA特征的人类，以防止OA的发展和进展。此外，可以进一步测试处在OA的风险之下或患有早期OA的人类的所涉及的关节中的炎症的存在，以鉴别最可能响应于利用DHCQ或利用DHCQ+阿托伐他汀的治疗的个体。对关节炎症的化验可以用诸如有或无钆造影剂的MRI之类的影像指标或超声波来进行，以确定是否存在指示炎症的以下异常影像指标中的一个或多个：滑膜增强或增生、存在渗出物和骨髓浮肿。还可以测试分子炎症指标以鉴别异常分子炎症指标，包括CRP、ESR和炎性细胞因子中的一种或多种的异常水平。最后，可以使用临床病史和检查来评估炎症，包括存在异常临床指标，包括体检时的渗出物或病史上的清晨僵直。
[0387] DHCQ的剂量可以是约400mg/天(约6.7mg/kg/天)，但可以是约500mg/天(约8.3mg/kg/天)，或可以是约550mg/天(9.16mg/kg/天)，或可以是600mg/天(约10mg/kg/天)，或可以是约800mg/天(约13.3mg/kg/天)，或可以介于100至1600mg/天(约
1.6至26.67mg/kg/天)之间。阿托伐他汀的剂量一般是约20或约40mg/天(约0.33至
0.66mg/kg/天)，但可以介于约5与80mg/天之间(约0.08至1.3mg/kg/天)。DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀可以呈个别片剂或胶囊剂的形式或呈包括两种药物的组合片剂或胶囊剂的形式传递。
1.6至26.67mg/kg/天)之间。阿托伐他汀的剂量一般是约20或约40mg/天(约0.33至
0.66mg/kg/天)，但可以介于约5与80mg/天之间(约0.08至1.3mg/kg/天)。DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀可以呈个别片剂或胶囊剂的形式或呈包括两种药物的组合片剂或胶囊剂的形式传递。
[0388] 处在患上OA的高风险之下和患有临床前OA的人类以及利用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀组合疗法对其进行治疗的实例包括：
[0389] (1)存在膝盖疼痛的59岁男性被诊断为患有右膝骨关节炎(凯尔格-伦劳伦斯，K-L，II级)。他在跑动和静坐较长时间段时因感觉膝盖僵硬或“胶化”而受限制。他的右膝活动范围完整，而且在步行时不存在内收力矩成角畸形。使用用于评估膝关节疼痛、功能和僵硬的西安大略与麦梅斯特大学(WOMAC)OA指标以及使用针对疼痛的视觉模拟评分(VAS)以评分1至100进行评估。对所述患者的右膝进行钆-MRI，由此测量并且显示增强与使用半定量评分系统评估滑膜炎时一致。基于异常临床和影像指标，确定患者处在OA早期，且因此用DHCQ 550mg加以治疗，呈组合胶囊形式，每日一次。在六个月时再重复MRI连同评估，以确定是否存在滑膜炎减轻。
[0390] (2)44岁男性业余橄榄球选手发生左膝疼痛且在跑步时有咔嗒声。通过X射线(显示K-L 1级变化)和膝盖MRI(显示后半月板撕裂)对他进行评估，并且给他预定关节镜清创术。血液测试显示3.1的升高(异常)C-反应蛋白(CRP)。手术清创术前一个月开始，每天用DHCQ 200mg治疗所述患者持续1周，随后每天800mg持续3周，随后从那以后每天600mg。
[0391] (3)54岁男性的左膝呈现轻度间歇性锁定。X射线显示K-L 1级OA，而超声波显示退化性半月板撕裂和中度滑膜增强，与滑膜炎一致。对所述患者提供关节镜半月板清创术，但拒绝手术干预。给他开具DHCQ 600mg的处方。
[0392] (4)28岁男性发生右踝(胫骨平台)骨折，进行适当复位和石膏固定。他的X射线不显示OA的任何特征。鉴于2至4年内显著放射摄影OA的30％风险截至骨折后11年增至74％，通过超声波和MRI和/或通过分子指标监测所述患者以获得关节炎症的证据。超声波检测(测量)滑膜渗出物和滑膜炎，且因此，确定患者处在进展到OA的较高风险之下并且因此开始每日两次DHCQ 300mg(达到每天600mg[10mg/kg/天]的总剂量)。
[0393] (5)49岁男性的左膝呈现间歇性疼痛。X射线显示K-L 1级OA，而MRI显示退化性半月板撕裂和中度滑膜增强，与滑膜炎一致。对所述患者提供关节镜半月板清创术，但拒绝手术干预。基于临床病史以及异常临床指标和影像指标的存在和测量，确定他患有早期OA。为了治疗他的早期OA和防止进展，给他开具了每天DHCQ 550mg+每天阿托伐他汀40mg的组合的处方。
[0394] 实施例16
[0395] 使用DHCQ治疗系统性红斑狼疮
[0396] 系统性红斑狼疮(SLE)是具有多样性表现的系统性炎性病症。涉及内涵体toll样受体(TLR，包括TLR7和TLR)强烈牵涉疾病发病机理(Rahman等,2008.NEJM.(9)929-939,PMID#18305268)，并且大概是经由内涵体抑制起作用的羟氯喹的治疗效力已经非常确定(Rahman等,2008.NEJM.(9)929-939,PMID#18305268)。然而，由于SLE是慢性疾病，所以大部分患者需要用HCQ长期治疗，而中断的一个原因是眼部沉积和潜在眼部毒性(Terahi等,2008.Semin Opthal.(3):201-208.PMID#.18432546)。
[0397] 处在患上SLE的高风险之下、患有临床前SLE或患有确立SLE的人类以及其利用DHCQ进行治疗的实例包括：
[0398] (1)22岁女性呈现有颊部皮疹、关节痛，并且发现患有肾炎，如血清肌酐升高和显示红细胞管型的尿分析所证明。用强的松、环磷酰胺和HCQ对她进行治疗，并且在若干个月之后显示所有症状都有所缓解，除了轻度关节痛和在强日光暴露下复发颊部皮疹。中断环磷酰胺且逐渐停止强的松。鉴于持续HCQ治疗过的SLE患者的复发风险较低，嘱咐她终身持续。鉴于需要长期疗法，存在较高视网膜毒性风险。为了避免视网膜毒性，使所述患者从HCQ转向DHCQ治疗，并且在5年氨基喹啉疗法后，按每2年一次的时程启动针对视网膜毒性的眼科检查。
[0399] (2)随访时见到具有12年SLE病史的34岁女性。初步呈现包括皮疹、关节炎和急性肾小球肾炎，用强的松和环磷酰胺加以治疗，随后过渡至咪唑硫嘌呤和HCQ。在大约六个时刻发生暴发，每次都是响应于低至中等剂量的强的松。然而，基于使用眼底自发荧光(FAF)的近期眼科评估，观测到与可能的视网膜病一致的早期变化。鉴于抗疟疾疗法对于防止SLE暴发和降低SLE暴发严重程度的确定效力，在早期视网膜病的情形下，她的治疗从HCQ变成每天DHCQ 550mg。她继续遵守每天DHCQ 550mg，随后的10年中每年眼科检查时无黄斑病进展。此外，她注意到在这10年内SLE暴发率或严重程度未增加。
[0400] (3)28岁女性驻院医务人员基于颊颊部皮疹、光敏感性、关节炎、口腔溃疡和胸膜炎而被诊断为患有SLE。她52kg且用羟氯奎200mg进行治疗，仅对疗法有部分反应。她由于小骨架和低骨质而对使用皮质类固醇具有高度抗性，而且她由于频繁与患病的患者接触而拒绝免疫抑制剂。她和医师知道她在较高羟氯奎剂量下的视网膜毒性风险较高，因而给她开具每天两次DHCQ 300mg(每天总计600mg)的处方，所有SLE征象和症状都消退。在用DHCQ治疗5年和10年时的眼科筛查显示无视网膜毒性的证据，而在用DHCQ治疗10年后，每2年进行眼科监测以监测视网膜毒性，并且在再治疗10年内未观测到视网膜毒性。
[0401] 实施例17
[0402] 使用DHCQ治疗人类非酒精性脂肪性肝病(NASH)
[0403] 非酒精性脂肪性肝病(NALFD)是以肝脏中的脂肪积贮为特征的常见病状。NAFLD患者处在患上非酒精性脂肪性肝炎的显著风险之下，该疾病是取决于胃肠道中由内毒素所引起的TLR4活化的炎性肝病。鉴于观测到羟氯奎能够废除LPS介导的TLR4活化，所以考虑羟氯奎处方。然而，所述患者是已知的2型糖尿病患者，该病状通常与NAFLD/NASH共同存在，并且这已经引起了早期糖尿病性视网膜病。由于NASH/NAFLD是慢性疾病，所以需要利用HCQ的长期疗法，从而将所述患者置于眼部沉积和潜在眼部毒性的风险之下。
[0404] 处在患上NASH的高风险之下、患有临床前NASH或患有确立NASH的人类以及其利用DHCQ进行治疗的实例包括：
[0405] (1)常规随访长期2型糖尿病时见到59岁男性。注意到他具有是正常值上限的两倍的升高的AST和ALT。他无症状且报告无肝毒性药物治疗。腹部超声波与肝脏脂肪浸润一致。基于临床呈现以及异常炎性和影像指标，确定患者处在进展至NASH的高风险之下。考虑利用羟氯奎的疗法，但为了降低视网膜毒性风险，每天用DHCQ 550mg治疗患者，由此防止所述患者进展至NASH，且在DHCQ疗法10年之后，筛查所述患者的视网膜毒性且完全没有发现，并且继续每5年进行眼科筛查。
[0406] (2)53岁男性见多尿症(频繁排尿)。发现他具有390mg/dL的空腹血糖和8.5mg/dL的血红蛋白A1C。注意到他的肝酶(ALT和AST)是正常值上限的几乎三倍，且高灵敏度CRP(hsCRP)升高在2.1。他在其他方面无症状且报告无肝毒性药物治疗。腹部超声波与肝脏脂肪浸润一致，且肝活组织检查显示肝脂肪变性伴随巨噬细胞簇。在控制血糖的情况下启动利用胰岛素和二甲双胍的疗法，并且在6个月时，血红蛋白A1c降至7.5mg/dL。然而，AST和ALT仍是正常值上限的几乎三倍，且hsCRP是1.9。基于所测量的异常临床指标、异常代谢指标和异常影像指标，确定患者患有NASH。考虑HCQ，但为了降低视网膜毒性风险，每天用DHCQ 600mg治疗患者，由此防止患者进展，使得AST和ALT正常化并且hsCRP降至0.9mg/dL。值得注意的是，在不进一步滴定主要低血糖症疗法的情况下，血红蛋白A1c降至
6.1。DHCQ疗法10年之后，筛查所述患者的视网膜毒性且完全没有发现，并且所述患者随后每隔一年通过眼科检查来筛查视网膜毒性。
6.1。DHCQ疗法10年之后，筛查所述患者的视网膜毒性且完全没有发现，并且所述患者随后每隔一年通过眼科检查来筛查视网膜毒性。
[0407] 实施例18
[0408] 用DHCQ治疗代谢疾病非酒精性脂肪性肝炎(NASH)
[0409] 49岁男性具有升高的肝脏酶，其中丙氨酸转氨酶(ALT)水平是59IU/L，而天冬氨酸转氨酶(AST)水平是55IU/L。肝脏的超声波将与脂肪浸润一致，且血清学化验将对乙型或丙型肝炎病毒呈阴性，并且他将拒绝使用酒精。发现所述患者具有超过120的偏高空腹葡萄糖水平和超过320mg/dL的升高甘油三酯。他进行肝活组织检查，显示脂肪变性鼓胀、肝细胞退化以及混合性门静脉炎症但无纤维化。基于这些异常发现和指标，他被诊断为患有NAFLD和早期NASH，并且基于这一诊断，给他开具DHCQ 600mg/天的处方。在基线时和治疗2个月之后收集血清样品，以评估丙氨酸转氨酶(ALT；也称为血清谷氨酸丙酮酸转氨酶[SGPT])和天冬氨酸转氨酶(AST；也称为血清谷氨酸草酰乙酸转氨酶[SGOT])丙氨酸转氨酶(ALT)以及一组多路细胞因子的水平。ALT、AST和/或细胞因子减少指示对治疗的积极反应。
[0410] 实施例19
[0411] 代谢疾病和炎性疾病的治疗：用DHCQ治疗II型糖尿病和代谢综合征
[0412] 处在患上II型糖尿病和/或代谢综合征的高风险之下、患有临床前II型糖尿病和/或代谢综合征或患有确立II型糖尿病和/或代谢综合征的人类以及其利用DHCQ进行治疗的实例包括：
[0413] (1)发现具有肥胖(BMI 31)病史的42岁男性具有106mg/dL的空腹血糖、135的LDL水平和220的甘油三酯水平。对于高血糖症继发性病因的评估是阴性，且基于异常代谢指标，确定他处在患上炎性疾病或与炎症相关的疾病的较高风险之下。基于这种较高风险，每天用阿托伐他汀40mg和DHCQ 400mg对他进行治疗。
[0414] (2)发现具有肥胖(BMI 30)病史的48岁男性具有121mg/dL的空腹血糖、135的LDL水平和220的甘油三酯水平。高灵敏度CRP(hsCRP)升高在1.9。用阿托伐他汀40mg治疗他4个月，LDL降至105且hsCRP降至1.7。随后对他开始DHCQ 400mg/天，LDL进一步降至95且hsCRP降至0.9。另外，在5年的时间段内，空腹血糖水平降至101，未进展至2型糖尿病。
[0415] (3)注意到具有高血压病史和先前心肌梗死的53岁男性具有140mg/dL的LDL胆固醇水平和1.6mg/L的高灵敏度CRP(hsCRP)。用阿托伐他汀对他进行治疗，他的LDL降至115mg/dl并且他的hsCRP降至1.2。随后每天用DHCQ 600mg对他进行治疗，临床上表现良好，LDL进一步降至99mg/dl且hsCRP降至0.8。治疗10年后，对他进行视网膜毒性筛查且未发现视网膜毒性的证据。
[0416] 实施例20
[0417] 使用DHCQ治疗系统性红斑狼疮
[0418] 系统性红斑狼疮(SLE)是具有多样性表现的系统性炎性病症。涉及内涵体toll样受体(TLR，包括TLR7和TLR)强烈牵涉疾病发病机理(Rahman等,2008.NEJM.(9)929-939,PMID#18305268)，并且大概是经由内涵体抑制起作用的羟氯喹的治疗效力已经非常确定(Rahman等,2008.NEJM.(9)929-939,PMID#18305268)。然而，由于SLE是慢性疾病，所以大部分患者需要用HCQ长期治疗，而中断的一个主要原因是眼部沉积和潜在眼部毒性(Terahi等,2008.Semin Opthal.(3):201-208.PMID#.18432546)。
[0419] 处在患上SLE的高风险之下、患有临床前SLE或患有确立SLE的人类以及其利用DHCQ进行治疗的实例包括：
[0420] (1)22岁女性呈现有颊部皮疹、关节痛，并且发现患有肾病综合征，如血清肌酐升高和显示红细胞管型的尿分析所证明。用强的松、环磷酰胺和HCQ对她进行治疗，并且在若干个月之后显示所有症状都有所缓解，除了轻度关节痛和在强日光暴露下复发颊部皮疹。中断环磷酰胺且逐渐停止强的松。鉴于持续HCQ治疗过的SLE患者的复发风险较低，嘱咐她终身持续。鉴于需要长期疗法，存在较高视网膜毒性风险。为了避免视网膜毒性，让所述患者从HCQ转向DHCQ治疗。
[0421] (2)随访时见到具有12年SLE病史的34岁女性。初步呈现是皮疹、关节炎和急性肾小球肾炎，用强的松和环磷酰胺加以治疗，随后过渡至咪唑硫嘌呤。在大约六个时刻发生暴发，每次都是响应于低至中等剂量的强的松。然而，基于使用眼底自发荧光(FAF)的近期眼科评估，观测到与可能羟氯喹视网膜病一致的早期变化。鉴于抗疟疾疗法防止和/或减少SLE暴发的确定效力，但在早期羟氯喹黄斑病的情形下，每天用DHCQ 400mg对她进行治疗，随后10年每年检查时未见黄斑病进展。此外，她注意到在这10年内SLE暴发率或严重程度未增加。
[0422] (3)28岁女性驻院医务人员基于颊颊部皮疹、光敏感性、关节炎、口腔溃疡和胸膜炎而被诊断为患有SLE。她52kg且用羟氯奎200mg进行治疗，仅对疗法有部分反应。她由于小骨架和低骨质而对使用皮质类固醇具有高度抗性，而且她由于频繁与患病的患者接触而排斥免疫抑制剂。她和医师知道她在较高羟氯奎剂量下的视网膜毒性风险较高，因而给她开具DHCQ 600mg/天的处方，所有SLE征象和症状都消退。每年眼科筛查显示治疗5年和10年时无视网膜病的证据。
[0423] (4)30岁女性感到疲劳，发生颊部皮疹，且发现具有1:320的抗Sm抗体效价。她处在患上SLE的风险之下，并且每天用DHCQ 550mg进行治疗，她的症状有所改善，并且治疗5年后开始每隔一年进行监测且未观测到视网膜毒性。
[0424] 实施例21
[0425] 用DHCQ治疗代谢和炎性疾病II型糖尿病
[0426] 处在患上II型糖尿病的高风险之下、患有临床前II型糖尿病或患有确立II型糖尿病的人类以及其利用DHCQ进行治疗的实例包括：
[0427] (1)发现具有肥胖(BMI 31)病史的42岁男性具有106mg/dL的空腹血糖、135的LDL水平和220的甘油三酯水平。对于高血糖症继发性病因的评估是阴性，且每天用阿托伐他汀40mg和DHCQ 400mg对他进行治疗。
[0428] (2)注意到具有高血压病史和先前心肌梗死的53岁男性具有140mg/dL的LDL胆固醇水平。用阿托伐他汀对他进行治疗，他的LDL降至115mg/天。随后每天用DHCQ600mg对他进行治疗，临床上表现良好，且在治疗10年后筛查视网膜毒性并且无视网膜毒性的证据。
[0429] 实施例22
[0430] 用DHCQ治疗HIV感染中的慢性免疫活化和代谢异常
[0431] 具有9年HIV病史且经过抗逆转录病毒疗法的三药物方案治疗的38岁男性具有不可检测的病毒负荷(<10,000个拷贝/ml)和490的CD4T细胞计数。他感觉良好并且没有机会感染。记录他具有109mg/dL的偏高空腹血糖水平和299mg/dL的升高甘油三酯。高灵敏度C反应蛋白(hsCRP)水平是5.8mg/L。冠状动脉CT扫描显示冠状动脉显著钙化，钙化评分是124，但锻炼应力测试显示无可诱导的心脏局部缺血。基于这些异常炎症指标和异常代谢指标，给他开具每天DHCQ 600mg的处方，临床上表现良好，且在治疗10年后筛查视网膜毒性并且无视网膜毒性的证据。
[0432] 实施例23
[0433] 用DHCQ治疗动脉粥样硬化
[0434] 处在患上动脉粥样硬化的高风险之下、患有临床前动脉粥样硬化或患有确立动脉粥样硬化的人类以及其利用DHCQ进行治疗的实例包括：
[0435] (1)评估具有高血压病史的59岁男性的劳累性胸痛。锻炼应力影像显示心脏外侧壁中的可逆局部缺血区域，并且他采取心导管插入法，显示左主干和左前冠状动脉左前降支中的40％至60％狭窄的弥漫性病变。每天用DHCQ 500mg对他进行治疗，并且他不会进一步患有心肌梗死。
[0436] (2)见到无活性医学问题且无药物治疗的48岁男性的急性胸痛的第一次发作持续1小时，且被诊断为患有非ST升高性心肌梗死。他具有早发性冠状动脉疾病家族史。心应力测试显示心电图(ECG)或核灌注影像上无局部缺陷区域。他的LDL是161mg/dL。利用新药物治疗方案对他进行治疗和释放，包括每天阿司匹灵81mg和阿托伐他汀40mg。在8周内随访时，他是无症状的，具有90的LDL，但据记录具有71的ALT和66的AST，两者先前都是正常的。阿托伐他汀剂量减至20mg引起极小的ALT/AST几率，但LDL上升至140，远远高于已知冠心病的LDL目标。给他开具除了每日阿托伐他汀20mg以外每天服用DHCQ 400mg的处方，LDL降至110mg/dL并且他的AST/ALT正常化。他的阿托伐他汀增回40mg，LDL降至80mg/dL，而AST ALT未上升。在10年内持续治疗，在治疗5、10和20年时未进行稳定LDL、AST/ALT以及正常视网膜检查。
[0437] 实施例24
[0438] 使用去乙基羟氯喹(DHCQ)或DHCQ+阿托伐他汀的组合疗法防止患上类风湿性关节炎(RA)和降低其严重程度
[0439] 在人类中筛查早期RA或处在患上RA的高风险之下的证据。表明个别人类患有早期RA的表现包括以下各项中的一项或多项：存在一个或多个肿胀关节、存在抗CCP或类风湿因子抗体、MRI扫描或超声波上的滑膜增强的证据和包括显示能对RA的后续发展提供预测效用的自身抗体和细胞因子的升高在内的指标(如Sokolove等,PLoS One.2012；7(5):e35296,PMID:22662108中所描述)。将无症状个体或单一关节炎个体置于患上RA的较高风险之下的表现包括以下各项中的一项或多项：RA家族史(特别是关于一级)、增加的抗CCP和/或类风湿因子抗体和RA易感性较高的遗传轮廓和/或一或多个关节展现滑膜炎(关节肿胀和炎症)。
[0440] 此外，可以测试处在RA的高风险之下或患有早期RA的人类的所涉及的关节中的炎症的存在，以鉴别最可能响应于利用DHCQ的治疗或利用DHCQ+阿托伐他汀的组合治疗的个体。对关节炎症的化验可以用诸如有或无钆造影剂的MRI之类的影像指标或超声波来进行，以确定是否存在指示炎症的以下特征中的一个或多个：滑膜增强或增生、存在渗出物和骨髓浮肿。还可以化验分子炎症指标，包括CRP、ESR和炎性细胞因子中的一种或多种。最后，可以使用临床病史和检查来评估炎症，包括体检时存在滑膜炎、体检时的渗出物或病史上清晨僵直>1小时。
[0441] 患有临床前或早期RA的个别人类，特别是当使用影像指标、分子指标或临床指标发现炎症的证据时，可以用DHCQ或DHCQ+阿托伐他汀的组合进行治疗，以防止临床前或早期RA进展。DHCQ的剂量一般是至少约400mg/天，但可以介于约100至1600mg/天之间，或介于约550与1000mg/天之间。DHCQ可以呈个别片剂或胶囊剂的形式传递，或组合DHCQ+阿托伐他汀呈包括两种药物的组合片剂或胶囊剂的形式传递。
[0442] 本文中所引用的所有出版物和专利文件是以全文引用的方式并入。在以引用的方式并入的材料与本说明书相矛盾或不一致的程度上，本说明书将优先于任何这样的材料。
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