本发明涉及新的苯并[1，2，5]噁二唑和苯并[1，2，5]噻二唑(thiadiazole)、 它们的制备、它们作为标记物的用途和含有它们的组合物。

更具体地，本发明提供了游离碱或酸加成盐形式的式I化合物：

其中X为O或S，R1为5-(2-氟-乙基氨基)-噻唑-2-基、5-(2-18F-乙基氨基)- 噻唑-2-基或式(a)的基团：

其中Y为CH或N，R2为NHCH3、NH11CH3、N(CH3)11CH3、N(CH3)2、 N(11CH3)2、NH(CH2)nF、NH(CH2)n18F、N(CH3)-(CH2)nF、N(CH3)-(CH2)n18F、 O-(CH2)nF、O-(CH2)n18F、CONH(CH2)nF或CONH(CH2)n18F(在每种情况 下n为2至4)，且R3为羟基，(C1-4)烷氧基、氢或硝基。

本文中所用的术语(C1-4)烷氧基涉及包含具有1个且包括1个至4个 且包括4个碳原子、为直链或支链的烷基部分的基团；优选地，(C1-4)烷 氧基为甲氧基、乙氧基或正丙氧基。

天然存在的碳由同位素12C(98.90％)、13C(1.10％)和痕量的14C组成。 术语“11C”表示与天然存在的碳相比在基团或原子团中各碳原子中有更高 比例的碳原子相当于11C同位素，尤其是其中碳原子中至少25％、优选至 少90％、更优选至少95％是11C同位素的基团或原子团。

11C同位素可以通过本身已知的方法制备。由于其半衰期短(约20分 钟)，该同位素需要在使用前短时间内在试剂中通过采用回旋加速器新鲜制 备。使用11C-碘甲烷的甲基化反应是11C标记合成中最常用的反应。合适 的方法基于在四氢呋喃中用氢化铝锂还原捕获的11C-二氧化碳，然后除去 溶剂。加入氢碘酸，在氮气流中将形成的11C-碘甲烷蒸馏至反应瓶中。

天然存在的氟由同位素19F(100％)组成。术语“18F”表示与天然存在 的氟相比在基团或原子团中各氟原子中有更高比例的氟原子相当于18F同 位素，尤其是其中至少25％、优选至少90％、更优选至少95％的氟原子 是18F同位素的基团或原子团。

18F同位素可以通过本身已知的方法制备。由于其半衰期短(约110分 钟)，该同位素需要在使用前短时间内在试剂中通过采用回旋加速器新鲜制 备。18F可以通过例如在回旋加速器中用质子束辐射含有18O-H2O的靶标 获得。在此方法中，18F从18O(p，n)18F核反应得到，将其立即用于产生最 终的放射标记物，如例如在“正电子发射断层成象术的基本原理及其在临 床前药物研发中的应用”，Simon R Cherry，J Clin Pharmacol 2001； 41：482-491和该文献所引用的参考文献中所述，该出版物作为参考文献包 括在本专利文档中。

对于诊断目的，优选包含11C或18F的那些式I化合物。

另一方面，本发明提供了制备式I化合物和它们的盐的方法，该方法 包含以下步骤：

a)为了制备不含11C或18F原子的式I化合物，使式II化合物

其中X如以上所定义且Hal为Cl、Br或I，

与5-(2-氟-乙基氨基)噻唑基-2-硼酸或式III化合物反应

其中Y和R3如以上所定义，且R’2为不含11C或18F原子的以上所定义的 R2基团，或

b)为了制备其中R1为5-(2-18F-乙基氨基)-噻唑-2-基的式I化合物，使其中 R1为5-(2-甲磺酰基氧基-乙基氨基)-噻唑-2-基或5-(2-甲苯磺酰基氧基-乙基 氨基)-噻唑-2-基的式I化合物与18Fθ反应，或

c)为了制备其中R2为NH11CH3、N(CH3)11CH3或N(11CH3)2的式I化合物， 使其中R2为NH2或NHCH3的式I化合物与11CH3I反应，或

d)为了制备其中R2为NH(CH2)n18F、N(CH3)-(CH2)n18F、O-(CH2)n18F或 CONH(CH2)n18F的式I化合物，使其中R2分别为NH(CH2)nOTs或 NH(CH2)nOMs、N(CH3)-(CH2)nOTs或N(CH3)-(CH2)n-OMs、O-(CH2)nOTs 或O-(CH2)n-OMs或者CONH(CH2)nOTs或CONH(CH2)nOMs的式I化合 物与18Fθ反应，

并且回收得到的游离碱形式或酸加成盐形式的式I化合物。

a)项下所述的反应可以根据已知方法、例如实施例1中所述的方法实 现。

作为方法a)的替代方法，可以使用常规方法制备不含11C或18F原子 的式I化合物，例如实施例4、7和13至25中所述的方法。

b)、c)和d)项下所述的反应可以根据常规方法实现。

对反应混合物进行后处理或纯化由此获得的化合物可以根据已知方法 进行。

可以用已知方法由游离碱制备酸加成盐，反之亦然。

本发明的物质对β-淀粉样沉淀物(amyloid deposit)、尤其是细胞外β-淀 粉样沉淀物具有高亲和性，其通过物理或化学相互作用与这些沉淀物相结 合。因此，本发明的物质可用于治疗或诊断其中观察到这类β-淀粉样沉淀 物的疾病，如阿尔茨海默病。优选地，本发明的物质用于诊断。

具体地，游离碱或酸加成盐形式的式I化合物在下文中称为本发明的物 质，其具有作为组织病理学染色剂、显象剂和/或生物标记物(在下文中称 为“标记物”)的有价值的性质。

更具体地，本发明的物质可用作标记病理学结构如细胞外β-淀粉样沉 淀物的标记物，例如在患有阿尔茨海默病患者的脑中(参见实施例26)。

因此，本发明的物质可用于阿尔茨海默病的早期诊断和预防，以及用 于监测阿尔茨海默病治疗的有效性。

使用能标记淀粉样沉淀物的标记物在体内且非侵害性地对这些结构进 行评价的优点已经在WO 00/10614中报道，将其引入本文作为参考。

根据上述内容，本发明提供了包含本发明的物质、用于在体内或体外 标记组织病理学结构的组合物。

另一方面，本发明提供了在体内或体外标记组织病理学结构的方法， 其包括使脑组织与本发明的物质相接触。

所述的脑组织包含例如β-淀粉样沉淀物。

使脑组织与本发明的物质相接触例如通过给患者例如阿尔茨海默病患 者施用本发明的物质来实现。

本发明的方法可以包括旨在确定本发明的物质是否标记了靶结构的其 它步骤。

如果本发明的物质是非放射性的式I化合物，则所述的其它步骤可以通 过使用荧光显微镜法观察靶结构来实现。

如果本发明的物质是放射性的式I化合物，则所述的其它步骤可以通过 使用正电子发射断层成象术(PET)观察靶结构来实现。

对组织病理学结构进行体外标记是例如为了检测阿尔茨海默病的组织 病理学标志。

对组织病理学结构进行体内标记是例如为了在患者中诊断阿尔茨海默 病或为了监测阿尔茨海默病治疗的有效性。

另一方面，本发明涉及

·式I化合物在制备治疗或诊断阿尔茨海默病的制剂中的用途；

·一种成套包装，其包含其中R2为NH2或NHCH3的式I化合物以及通过 使起始原料与新鲜制备的11CH3I反应来制备其中R2为NH11CH3、 N(CH3)11CH3或N(11CH3)2的式I化合物的说明书；和

·一种成套包装，其包含作为起始原料的其中R2为NH(CH2)nOTs、 NH(CH2)nOMs、N(CH3)-(CH2)nOTs、N(CH3)-(CH2)nOMs、 O-(CH2)nOTs、O-(CH2)n-OMs、CONH(CH2)nOTs或ONH(CH2)nOMs (其中OMs相当于甲磺酸根且OTs相当于甲苯磺酸根)的式I化合物以 及通过该起始原料与18Fθ的适当反应序列来制备其中R2为 NH(CH2)n18F、N(CH3)-(CH2)n18F、O-(CH2)n18F或CONH(CH2)n18F的 式I化合物的说明书。

以下实施例举例说明了本发明。

缩写

Boc      叔丁氧基羰基

DMAP     二甲氨基吡啶

DMF      二甲基甲酰胺

DMSO     二甲基亚砜

Dppf     1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁

EDC      N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺

Eq.      当量

HOBt     1-羟基苯并三唑

HPLC     高压液相色谱法

NaHMDS   六甲基二硅氮烷钠(sodium hexamethyldisilazane)

NMR      核磁共振

OMs      甲磺酸根

OTs      甲苯磺酸根

THF      四氢呋喃

实施例1：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-二甲基-胺

将500mg(2.5mmol)5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑和313mg(0.1当量)四(三 苯基膦)钯于室温下在10mL 1，2-二甲氧基乙烷中搅拌30分钟。将533mg(2 当量)碳酸钠溶解在1.8mL水中并加入到反应混合物中，随后加入663mg (1.6当量)4-(二甲氨基)苯基硼酸。在回流下搅拌18小时后，将反应混合物 冷却至室温，并用乙酸乙酯和水萃取。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤 并蒸发。将残余物用柱色谱法处理(己烷，然后己烷/乙酸乙酯8∶1然后5∶1)， 得到所需的产物，为黄色固体。MS(ES+)：240(M+1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.83(d，H芳族)；7.82(s，H芳族)；7.73(d， H芳族)；7.58，6.81(2d，2×2H芳族)；3.05(s，2Me)。

以下实施例2至6的化合物可以根据同样的方法制备：

实施例2：(4-苯并[1，2，5]噻二唑-4-基-苯基)-二甲基-胺

以4-碘-苯并[1，2，5]噻二唑和4-(二甲氨基)苯基硼酸为起始原料。橙色 粉末。MS(ES+)：256(M+1)。

实施例3：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-4-基-苯基)-二甲基-胺

以4-氯-苯并[1，2，5]噁二唑和4-(二甲氨基)苯基硼酸为起始原料。橙色 粉末。MS(ES+)：240(M+1)。

实施例4：(3-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-甲基-胺

以5-苯并[1，2，5]噁二唑硼酸和(3-溴-苯基)-甲基-胺为起始原料。黄色粉 末。MS(ES+)：226(M+1)。

实施例5：5-[4-(2-氟-乙氧基)-苯基]-苯并[1，2，5，]噁二唑

以5-苯并[1，2，5]噁二唑硼酸和1-溴-4-(2-氟-乙氧基)-苯为起始原料。黄 -米黄色粉末。MS(ES+)：259(M+1)。

实施例6：(3-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-二甲基-胺

以5-苯并[1，2，5]噁二唑硼酸和(3-溴-苯基)-二甲基-胺为起始原料。橙- 黄色粉末。MS(ES+)：240(M+1)。

实施例7：(2-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-二甲基-胺

将523mg(1.65当量)双(频哪氧基)二硼(bis(pinacolato)diboran)、 552mg(4.5当量)乙酸钾和51mg(0.01当量)PdCl(dppf)-CH2Cl2加入到 373mg 5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑在8mL DMF中的溶液中，在连续搅拌下加 热至80℃达6小时。向反应混合物中加入在3.3mL水中的662mg(5当量) 碳酸钠以及500mg(1当量)2-溴-N，N-二甲基苯胺和51mg(0.01当量) PdCl(dppf)-CH2Cl2，将其在80℃下再搅拌18小时，冷却至室温并用乙酸 乙酯和水萃取。将合并的有机相用盐水洗涤、用硫酸镁干燥并蒸发。将残 余物用柱色谱法处理(己烷，然后己烷/乙酸乙酯8∶1)，得到所需产物，为 橙色树脂状物。MS(ES+)：240(M+1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.77(s，H芳族)；7.71，7.69(2d，2H芳族)； 7.25，7.03(2m，2×2H芳族)；2.53(s，2Me)。

以下实施例8至12的化合物可以根据同样的方法制备：

实施例8：(2-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-苯基)-二甲基-胺

以5-溴-苯并[1，2，5]噻二唑和2-溴-N，N-二甲基苯胺为起始原料。橙色树 脂状物。MS(ES+)：256(M+1)。

实施例9：(3-苯并[1，2，5]噁二唑-4-基-苯基)-甲基-胺

以5-氯-苯并[1，2，5]噁二唑和(3-溴-苯基)-甲基-胺为起始原料。黄色粉 末。MS(ES+)：226(M+1)。

起始原料如下获得：

(3-溴-苯基)-甲基-胺

将2g(11.6mmol)3-溴苯胺溶解在15mL DMF中，在室温、连续搅拌 下使其与716mg(1.1当量)KOH和0.722mL(1当量)碘甲烷反应20小时。 用乙酸乙酯和水萃取反应混合物，将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠 干燥并蒸发至干。将残余物用柱色谱法处理(乙酸乙酯/石油醚2∶5)，蒸发 后得到所需的产物，为黄色油状物。

实施例10：4-[4-(2-氟-乙氧基)-苯基]-苯并[1，2，5]噁二唑

以4-氯-苯并[1，2，5]噁二唑和1-溴-4-(2-氟-乙氧基)-苯为起始原料。黄 色晶体。MS(ES+)：259(M+1)。

实施例11：5-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-N-(2二氟-乙基)-烟酰胺

以5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑和5-溴-N-(2-氟-乙基)-烟酰胺为起始原料。 米黄色粉末。MS(ES-)：285(M-1)。

起始原料如下获得：

5-溴-N-(2-氟-乙基)-烟酰胺

在室温下，将2.03g(10mmol)5-溴烟酸、1g(1当量)2-氟乙胺、2.31g(1.2 当量)EDC.HCl、123mg(0.1当量)DMAP和5.6mL(4当量)三乙胺在60mL 二氯甲烷中搅拌20小时。用二氯甲烷和水萃取反应混合物，将合并的有机 相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。将残余物在乙醚和己烷中研磨，过 滤后得到所需的产物，为白色粉末。MS(ES+)：347和349(M+1)。

实施例12：4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-N-(2-氟-乙基)-烟酰胺

以4-氯-苯并[1，2，5]噁二唑和5-溴-N-(2-氟-乙基)-烟酰胺为起始原料。 米黄色粉末。MS(ES-)：285(M-1)。

实施例13：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-甲基-胺

将510mg(1.57当量)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-甲基-氨基甲酸 叔丁酯溶解在10mL二氯甲烷中，用0.126mL(1.05当量)三氟乙酸处理， 在室温下搅拌过夜。蒸发反应混合物，将残余物用柱色谱法处理(己烷，己 烷/乙酸乙酯4∶1然后3∶1)，得到所需的产物，为橙色固体。MS(ES+)：226 (M+1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.82(d，H芳族)；7.81(s，H芳族)，7.71(d， H芳族)；7.54，6.72(2d，2×2H芳族)；2.92(s，Me)。

根据实施例7中所述的方法由5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑和(4-溴-苯基)- 甲基-氨基甲酸叔丁酯获得起始原料，为黄色粉末。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.84(s，H芳族)；7.82，7.63(2d，2H芳族)； 7.54，7.18(2d，2×2H芳族)；3.26(s，Me)；1.43(s，tBu)。

以下实施例14至16的化合物可以根据同样的方法制备：

实施例14：(4-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-苯基)-甲基-胺

以(4-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯为起始原料。 MS(ES+)：242(M+1)。

根据实施例7中所述的方法由5-溴-苯并[1，2，5]噻二唑和(4-溴-苯基)- 甲基-氨基甲酸叔丁酯获得起始化合物，为黄色粉末。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝8.08(s，H芳族)；7.98，7.80(2d，2H芳族)； 7.60，7.33(2d，2×2H芳族)；3.26(s，Me)；1.43(s，tBu)。

起始原料如下获得：

a)(4-溴-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯

在室温下，将0.263mL(1.1当量)碘甲烷滴加到搅拌着的1.1g(4mmol) (4-溴-苯基)-氨基甲酸叔丁酯和2g(1.6当量)碳酸铯在15mL DMF中的混悬 液中。再搅拌18小时后，用水/乙酸乙酯萃取反应混合物，将合并的有机 相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发，得到所需的产物，为无色油状物， 将其不经进一步纯化直接使用。

b)(4-溴-苯基)-氨基甲酸叔丁酯

将2mL(1.2当量)三乙胺加入到2g(11.6mmol)对溴苯胺在25mL THF 中的溶液中。将反应混合物冷却至0℃，在连续搅拌下用2.66g(1.05当量) Boc2O处理，然后使其达到20℃，再搅拌20小时，用水/乙酸乙酯萃取。 将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发。将残余物用柱色谱法 处理(己烷，己烷/乙酸乙酯7∶1然后4∶1)，蒸发并用己烷重结晶后得到所需 的产物，为白色粉末。

实施例15：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-甲基-胺

以(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯为 起始原料。

1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ(ppm)＝7.78(m，3H芳族)；7.25(d，H芳族)； 6.38(m，H芳族)；6.36(m，H芳族)；3.83(s，Me)；2.84(s，Me)。

根据实施例7中所述的方法由5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑和(4-溴-3-甲氧 基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯获得起始化合物，为黄色粉末。MS(ES+)： 378(M+23)。

起始原料如下获得：

(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯

在室温下，将0.5mL(1.1当量)碘甲烷滴加到搅拌着的2g(6.6mmol)(4- 苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯和3.2g(1.5 当量)碳酸铯在50mL DMF中的混悬液中。再搅拌17小时后，用水/乙酸 乙酯萃取反应混合物，将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发， 得到所需的产物，为黄色油状物，将其不经进一步纯化直接使用。

实施例16：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-(2-氟-乙基)-胺

以(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-(2-氟-乙基)-氨基甲酸叔 丁酯为起始原料。

1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ(ppm)＝7.78-7.84(m，3H芳族)；7.26(d，H芳 族)；6.44(s，H芳族)；6.40(d，H芳族)；4.68(t，CH2F)；4.58(t，CH2F)；3.82(s，Me)； 3.55(t，CH2N)；3.46(t，CH2N)。

根据实施例7中所述的方法由5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑和(4-溴-3-甲氧 基-苯基)-(2-氟-乙基)-氨基甲酸叔丁酯获得起始化合物，为黄色玻璃状物。 MS(ES+)：410(M+23)。

起始原料如下获得：

(4-溴-3-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯

在室温下，将0.63mL(1.25当量)1-溴-2-氟乙烷加入到搅拌着的2g (6.6mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-甲基-氨基甲酸叔丁 酯和3.2g(1.5当量)碳酸铯在50mL DMF中的混悬液中。在50-55℃下搅拌 12小时后，将反应混合物冷却至室温，用水/乙酸乙酯萃取。将合并的有 机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发，得到所需的产物，为黄色油状物， 将其不经进一步纯化直接使用。

实施例17：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-(2-氟-乙基)-甲基-胺

将220mg(0.98mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-甲基-胺溶解在 5mL DMF中，用1.9g(6当量)碳酸铯、320mg(2当量)碘化钾和0.364mL(5 当量)1-溴-2-氟乙烷处理，并在50℃下搅拌20小时。用水和乙酸乙酯萃取 反应混合物，将合并的有机相用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发。将 残余物用柱色谱法处理(梯度为从己烷至乙酸乙酯)，得到所需的产物，为 橙色粉末。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.77(d，H芳族)；7.75(s，H芳族)；7.65(d， H芳族)；7.51，6.75(2d，2×2H芳族)；4.57，3.67(2m，2CH2)；3.04(s，Me)。

实施例18：5-[3-(2-氟乙氧基)-苯基]-苯并[1，2，5]噁二唑

将600mg(2.83mmol)3-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯酚溶解在15mL DMF中，在室温下、于1.15g(1.25当量)碳酸铯和0.264mL 1-溴-2-氟乙烷 存在下搅拌20小时。用水和乙酸乙酯萃取反应混合物，将合并的有机相用 水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发至干。将残余物用柱色谱法处理(梯度 为从己烷至己烷/乙酸乙酯3∶2)，得到所需的产物，为淡黄色粉末。MS(ES+)： 259(M+1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.95(s，H芳族)；7.90(d，H芳族)；7.70(d， H芳族)；7.42(m，H芳族)；7.27(m，H芳族)；7.22(s，H芳族)；7.04(m，H芳族)；4.80， 4.31(2m，2CH2)。

根据实施例1中所述的方法由5-溴-苯并[1，2，5]噁二唑和3-羟基苯基硼 酸获得起始原料3-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯酚，为浅黄色粉末。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.94(s，H芳族)；7.92，7.68(2d，2H芳族)； 7.38(t，H芳族)；7.24(d，H芳族)；7.13(s，H芳族)；6.94(d，H芳族)；4.93(OH)。

实施例19：(2-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-噻唑-5-基)-(2-氟-乙基)-胺

将53mg(0.2mmol)苯并[1，2，5]噁二唑-5-甲酸[(2-氟-乙基氨基甲酰基)- 甲基]-酰胺和97mg(1.2当量)Lawesson试剂混悬在20mL甲苯中，加热至 回流达1小时。冷却至室温后，将反应混合物倾在含有2mL饱和碳酸钠水 溶液的冰水上，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用硫酸钠干燥并蒸 发至干。将残余物用柱色谱法处理(石油醚/乙酸乙酯3∶2)，蒸发相应的级 分后得到所需的产物，为橙色粉末。MS(ES+)：265(M+1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝8.12(d，H芳族)；7.95(s，H芳族)；7.82(d， H芳族)；7.04(s，Hhet)；4.70，3.53(2m，2CH2)。

起始原料如下获得：

a)苯并[1，2，5]噁二唑-5-甲酸[(2-氟-乙基氨基甲酰基)-甲基]-酰胺

将221mg(1mmol)[(苯并[1，2，5]噁二唑-5-羰基)-氨基]-乙酸、120mg (1.2当量)2-氟乙胺、162mg(1.2当量)HOBt和230mg(1.2当量)EDC.HCl 溶解在18mL DMF中并冷却至5℃。在搅拌下加入0.7mL(4当量)Hünig 碱，将反应混合物在室温下再搅拌3小时，然后用水和乙酸乙酯萃取。将 合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发，得到所需的产物，为米 黄色固体。

MS(ES+)：267(M+1)。

b)[(苯并[1，2，5]噁二唑-5-羰基)-氨基]-乙酸

在室温下，使500mg(2.13mmol)[(苯并[1，2，5]噁二唑-5-羰基)-氨基]-乙 酸甲酯在50mL甲醇中与含有10％水的6mL(3当量)1N KOH甲醇溶液反 应2小时，然后冷却至5℃以下，用6mL 1N HCl水溶液中和。用乙酸乙 酯萃取反应混合物，将合并的有机相用盐水洗涤并用硫酸钠干燥，然后蒸 发至干，得到所需的产物，为米黄-粉红色粉末。MS(ES-)：220(M-1)。

c)[(苯并[1，2，5]噁二唑-5-羰基)-氨基]-乙酸甲酯

在氩气下，将492mg(3mmol)苯并[1，2，5]噁二唑-5-甲酸、376mg(1当 量)甘氨酸甲酯盐酸盐、486mg(1.2当量)HOBt和690mg(1.2当量) EDC.HCl溶解在20mL DMF中，加入2mL(4当量)Hünig碱后，将反应 混合物在室温下搅拌90分钟。将反应混合物倾在冰和盐水上，用乙酸乙酯 萃取。将合并的有机相用硫酸钠干燥并蒸发，得到所需的产物，为米黄色 粉末。

MS(ES+)：236(M+1)。

实施例20：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-(2-氟-乙基)-胺

将391mg(1mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-(2-氟-乙基)-氨基 甲酸苄酯在Pd/C存在下进行氢化，将反应混合物通过硅藻土过滤并蒸发 至干。将残余物用柱色谱法处理(二氯甲烷/石油醚8∶2)，得到所需的产物， 为黄色粉末。MS(ES+)：258(M+1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝7.82(d，H芳族)；7.81(s，H芳族)；7.70(d， H芳族)；7.53(m，2H芳族)；6.75(m，2H芳族)；4.66，3.51(2m，2CH2)。

根据实施例1中所述的方法由5-苯并[1，2，5]噁二唑硼酸和(4-溴-苯 基)-(2-氟-乙基)-氨基甲酸苄酯获得起始原料，为浅棕色树脂状物。MS(ES+)： 392(M+1)。

起始化合物可以如下合成：

a)(4-溴-苯基)-(2-氟-乙基)-氨基甲酸苄酯

将2.9g(6mmol)甲苯-4-甲烷磺酸2-[苄氧羰基-(4-溴-苯基)-氨基]-乙酯 溶解在100mL THF中，加入1M四丁基氟化铵的THF溶液后，在室温下 搅拌18小时。将反应混合物倾在冰上，用叔丁基甲基醚和饱和碳酸氢钠水 溶液萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发至干。将粗 产物用柱色谱法处理(石油醚/乙酸乙酯4∶1)，得到920mg所需的产物，为 黄色树脂状物。MS(ES+)：352(M+1)。

b)甲苯-4-甲烷磺酸2-[苄氧羰基-(4-溴-苯基)-氨基]-乙酯

将1.3g(6mmol)2-(4-溴-苯基氨基)-乙醇溶解在150mL甲苯中，用 0.93mL(1.1当量)苄氧基碳酰氯和6.3mL(1.05当量)1N氢氧化钠水溶液处 理。将反应混合物在室温下搅拌18小时，然后分离水相并用乙酸乙酯和水 萃取。将合并的有机相用水和盐水洗涤，然后蒸发至干，得到2.1g(4-溴- 苯基)-(2-羟基-乙基)-氨基甲酸苄酯粗品，不经另外纯化使其进一步反应， 方法是将其溶解在100mL二氯甲烷中，加入5mL(过量)吡啶，冷却至5℃， 在10分钟内滴加2.45g在20mL二氯甲烷中的对甲苯磺酸酐。在室温下将 反应混合物再搅拌2小时，倾在冰上，然后在10℃下用二氯甲烷和碳酸氢 钠水溶液萃取。将合并的有机相用硫酸钠干燥并蒸发，得到所需的产物， 为浅棕色树脂状物，将其不经进一步纯化直接使用。

实施例21：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-2-硝基-苯基)-甲基-胺

在0℃下，将140mg(0.62mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-苯基)-甲基 -胺在2mL浓硫酸中进行搅拌，然后用66mg(1.05当量)硝酸钾处理并再搅 拌4小时。将反应混合物倾在冰上，滤出沉淀，用水充分洗涤并在高真空 下干燥。将粗产物用柱色谱法处理，用乙酸乙酯/石油醚1∶2洗脱，将含有 产物的级分蒸发后得到所需的产物，为橙色固体。

MS(ES-)：269(M-1)。

1H-NMR(CDCl3，400MHz)：δ(ppm)＝8.55(s，H芳族)；8.22(br.s，NH)；7.92 (d，H芳族)；7.91(s，H芳族)；7.82(d，H芳族)；7.72(d，H芳族)；7.01(d，H芳族)；3.13(s， Me)。

实施例22：2-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-5-甲氨基-苯酚

在-10至0℃下，将100mg(0.4mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲 氧基-苯基)-甲基-胺在1.3mL CH2Cl2中进行搅拌，然后在5分钟期间用 1.3mLAlBr3(1.0M的在CH2Br2中的溶液，3当量)处理，在升温至室温的 条件下再搅拌17小时。然后，将混合物倾在盐水/乙酸乙酯上，用NaHCO3 将pH调节至6。然后用乙酸乙酯萃取水相，将合并的有机层用硫酸钠干 燥并浓缩。将粗产物用柱色谱法处理，用乙酸乙酯/己烷1∶1洗脱，将含有 产物的级分蒸发后得到所需的产物，为黄色固体。

1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ(ppm)＝7.88-7.94(m，2H芳族)；7.79(d，H芳 族)；7.24(d，H芳族)；6.29(d，H芳族)；6.21(m，H芳族)；2.81(s，Me)。

实施例23：2-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-5-(2-氟-乙基氨基)-苯酚

将10mg(0.03mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-(2-氟- 乙基)-胺溶解在0.3mL乙酸和0.3mL氢溴酸(33％，在乙酸中)中，在80℃ 下搅拌72小时。然后除去溶剂。该起始原料和所需产物的混合物可以通过 HPLC(20至100％CH3CN/H2O(6分钟)，100％CH3CN(1.5分钟)，100至 20％CH3CN/H2O(0.5分钟)：4.5分钟后洗脱出产物)分离。MS(ES+)：274 (M+1)。

实施例24：(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧基-苯基)-二甲基-胺

在0至5℃下，将200mg(0.8mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲氧 基-苯基)-甲基-胺在5mL DMF中进行搅拌，然后在1分钟期间用1mL NaHMDS-溶液(1.0M，1.25当量)处理并再搅拌1分钟。然后，加入0.5mL (7.8mmol，10当量)碘甲烷并升温至室温的条件下搅拌2分钟。然后，用乙 酸乙酯/NaHCO3水溶液萃取混合物，将合并的有机层用硫酸钠干燥并浓 缩。由此得到所需的产物，为微红色-黄色固体。

1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ(ppm)＝7.80-7.84(m，2H芳族)；7.36(d，H芳 族)；6.50(d，H芳族)；6.45(m，H芳族)；3.90(s，MeO)；3.08(s，2Me)。

实施例25：2-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-5-二甲氨基-苯酚

在-10至0℃下，将140mg(0.52mmol)(4-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-3-甲 氧基-苯基)-二甲基-胺在1.7mL CH2Cl2中进行搅拌，然后在5分钟期间用 1.7mL AlBr3(1.0M的在CH2Br2中的溶液，3.3当量)处理，在升温至室温 的条件下再搅拌19小时。然后，用盐水/乙酸乙酯萃取混合物，将合并的 有机层用硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物用柱色谱法处理，用乙酸乙酯/己烷 1∶4洗脱，将含有产物的级分蒸发后得到所需的产物，为红色固体。

1H-NMR(CD3OD，400MHz)：δ(ppm)＝7.90-7.94(m，2H芳族)；7.80(d，H芳 族)；6.43(d，H芳族)；6.38(m，H芳族)；4.00(s，2Me)。

实施例26：

用本发明的物质或硫黄素S对APP23小鼠和人阿尔茨海默病(AD)脑切片 染色

将来自26月龄的APP23小鼠的4-微米厚的石蜡切片在二甲苯中脱石 蜡并重新水合。将10mg化合物溶解在1mL DMSO中，用去离子水以1∶10 稀释。将该染色溶液涂敷在切片上约20分钟。通过用95％乙醇洗涤清除 切片背景。最后，将切片在99％乙醇中脱水，在二甲苯中清洗并用 Vectashieldtm封片。使用具有下列滤片组合的荧光显微镜法研究切片：激 发450-490nm，发射510nm。将来自AD大脑皮层的20微米厚的低温切 片风干，在4％PFA中固定5分钟。用自来水洗涤后，将切片用硫黄素S 或本发明的化合物染色5分钟，并如上所述进一步处理。将化合物溶解在 DMSO中并用50％乙醇稀释到0.01％的最终浓度，将硫黄素S溶解在50％ 乙醇中，最终浓度为0.01％。

结果：

(这些结果不适用于实施例4、5、11、12和21的化合物，它们没有荧光)

1)APP23小鼠脑切片染色

本发明的物质对APP23小鼠脑切片的淀粉样沉淀物和血管沉淀物可 强烈染色。

2)人AD脑切片染色

将来自AD患者额皮质的脑切片用本发明的物质染色并将结果与硫黄 素S染色对比。本发明的物质强烈地且选择性地对淀粉样沉淀物染色。