专利汇可以提供一种由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 提供一种安全、简单的间充质干细胞和 成 纤维 细胞 的培养方法,能通过从活体 牙龈 中 抽取 的牙龈组织培养出间充质干细胞和成纤维细胞,该方法能容许组织样本被长距离运输,而不受地域的界限;且提取出来的成纤维细胞及间充质干细胞的纯度及一致性比起 现有技术 要高。,下面是一种由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法专利的具体信息内容。
1.一种由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述培养方法包括以下步骤:
a.从活体牙龈中抽取牙龈组织,将牙龈组织置于组织保持液中保存,所述组织保持液包含有MEM培养基底液、牛血清、抗生素和抗真菌素;
b.以磷酸盐缓冲液对所述牙龈组织进行清洗,再加入胶原蛋白酶对所述牙龈组织进行消化;
c.对消化后的混合液进行离心分离,得到细胞团;
d.将上述细胞团置于含有MEM培养基底液的培养瓶中培养,收集培养得到的细胞并将所述细胞悬浮于磷酸盐缓冲液中;
e.在步骤d的磷酸盐缓冲液中加入带有磁铁的成纤维细胞抗体,混合后静置反应;
f.将步骤e反应后的产物置于磁化细胞分离器的分离管中,加入磷酸盐缓冲液进行分离,收集磁化细胞分离器的洗脱物即为间充质干细胞;
g.取出所述分离管,加入磷酸盐缓冲液到分离管中,利用柱塞将分离管中的细胞压出,收集得到的细胞即为成纤维细胞。
2.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述组织保持液包含有MEM培养基底液、体积分数为5-20%的牛血清、80-120U/ml的抗生素和0.25-2.5ug/ml抗真菌素。
3.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤b中胶原蛋白酶的浓度为50-100U/ml。
4.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤c中,离心的转速为1000-2500rpm,离心时间为3-5分钟。
5.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤d中利用质量体积比为0.2-0.3%的胰蛋白酶或dispase分散酶收集培养得到的细胞。
6.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤e中成纤维细胞抗体的加入量为10-30ul每四百万颗细胞。
7.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤f中还包括,重复加入磷酸盐缓冲液进行分离,再收集洗脱物。
8.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤g中还包括,重复加入磷酸盐缓冲液到分离管中,利用柱塞将分离管中的细胞压出,收集得到的细胞即为成纤维细胞。
9.根据权利要求1所述的由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述步骤g后还包括,将收集到的间充质干细胞和成纤维组织分别置于含有细胞培养液的培养瓶进行培养,得到目标数量的间充质干细胞和成纤维组织。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
可用于治疗免疫相关疾病的组合物 | 2020-05-11 | 67 |
一种基于光交联水凝胶的双层复合牙周缺损修复材料及其制备方法 | 2020-05-18 | 477 |
一种治疗牙周脓肿的药物组合物及其制备方法 | 2020-05-17 | 602 |
用于牙周软组织再生的组合物及其制备方法 | 2020-05-23 | 539 |
杏鲍菇、五加皮和三七的草本植物混合物提取物以及用于预防和治疗牙周炎的包含其的组合物 | 2020-05-15 | 635 |
一种牙龈细胞水凝胶填充剂及其制备方法、应用 | 2020-05-12 | 588 |
一种化合物在制备以组织蛋白酶K为靶标的疾病药中的应用 | 2020-05-16 | 738 |
一种中药牙膏 | 2020-05-18 | 729 |
一种自体再生生物材料的制备方法及自体再生生物材料 | 2020-05-24 | 305 |
用于治疗运动系统的疾病的组合物 | 2020-05-23 | 56 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。