白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是属于已知统称为 “细胞因子”的重要生物学物质。这些分子被认为可调节与感染剂免疫识 别相关的炎性反应。
这些促炎性细胞因子被暗示为在许多疾病状态或综合症状尤其是类风 湿性关节炎、骨关节炎、炎性肠疾病(IBS)、败血性休克、心肺功能紊 乱、急性呼吸系统疾病、恶病质中的重要媒介物，并且因此可导致人类疾 病状态的进展和表现。
因此，长期迫切需要这样的化合物和包括化合物的药物组合物，其能 阻碍、缓和、控制、减轻或防止产生细胞因子的细胞释放细胞因子。
发明概述
本发明由于已令人惊奇地发现，某些3-(2-取代的-嘧啶-4-基)-6，7- 二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物，在用于抑制炎性细胞因 子，特别是白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)从细胞中的释放方 面是有效的，并且因此防止、缓解或换句话讲控制酶，而所述的酶被理解 为造成本发明所述的疾病状态的因素的活性组分，从而满足了上述的需 求。
本发明包括三个主要方面，每一个具有它们自己独立的类别、方面、 迭代和具体的迭代实施例。本发明主要方面包括：
i)新型物质组合物，其有效用于抑制炎性细胞因子，特别是白介 素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)从细胞中的释放；
ii)组合物或药物组合物(基质)，所述组合物或药物组合物包含 所述物质组合物，和
iii)用于控制、减少、预防或减轻疾病症状或疾病状态的方法，所 述方法通过给人或哺乳动物服用所述物质组合物是可控制的， 而不管所述物质组合物是单独服用或是与药物组合物(基质) 结合或包含在药物组合物(基质)内服用。
本发明的第一方面涉及化合物，包括其所有对映体形式和非对映体形 式及其可药用的盐，所述化合物具有下式：

其中R是：
a)-O[CH2]kR3；或
b)-NR4aR4b；
R3是取代的或未取代的C1-C4烷基、取代的或未取代的碳环、取代的 或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基或亚烷基芳基、取代的或未取代 的杂芳基或亚烷基杂芳基；指数k为0至5；
R4a和R4b每个独立地为：
a)氢；或
b)-[C(R5aR5b)]mR6；
每个R5a和R5b独立地为氢、-OR7、-N(R7)2、-CO2R7、-CON(R7)2；C1-C4 直链的、支链的或环状的烷基及其混合物；R6是氢、-OR7、-N(R7)2、 -CO2R7、-CON(R7)2；取代的或未取代的C1-C4烷基、取代的或未取代的杂 环、取代的或未取代的芳基、或取代的或未取代的杂芳基；R7是氢、水溶 性阳离子、C1-C4烷基、或取代的或未取代的芳基；指数m为0至5；
R1是：
a)取代的或未取代的芳基；或
b)取代的或未取代的杂芳基；
L是连接基团，其选自：
i)-[C(R12)2]n-；
ii)-[C(R12)2]nNR12[C(R12)2]n-；和
iii)-[C(R12)2]nO[C(R12)2]n-；
R12是氢、C1-C4烷基，以及它们的混合物；或两个R12单元可以合在 一起以形成羰基单元；指数n为0至2的单元；
每个R2单元独立地选自：
a)氢；
b)-(CH2)jO(CH2)nR8；
c)-(CH2)jNR9aR9b；
d)-(CH2)jCO2R10；
e)-(CH2)jOCO2R10；
f)-(CH2)jCON(R10)2；
g)-(CH2)jOCON(R10)2；
h)两个R2单元可以合在一起以形成羰基单元；
i)及其混合物；
R8、R9a、R9b和R10各自独立地选自氢、C1-C4烷基，及其混合物；R9a 和R9b可以合在一起以形成包括3至7个原子的碳环或杂环；两个R10 单元可以合在一起以形成包括3至7个原子的碳环或杂环；j是0至 5的指数；
Z是O、S、NR11或NOR11；R11是氢或C1-C4烷基。
本发明的第二个主要方面涉及药物组合物，所述组合物包括：
a)有效量的一种或多种依照本发明的新型物质组合物；其能有效 地抑制炎性细胞因子的从细胞中的释放；和
b)一种或多种可药用的赋形剂。
本发明的第三个主要方面涉及使用方法。如下文所述，本发明的化合 物在抑制炎性细胞因子从人类或高等哺乳动物的细胞中释放是有效的，并 且因此可用来控制、缓解、消除或换句话讲可以被用来治疗一种或多种与 存在于细胞外炎性细胞因子相关的疾病或疾病状态，例如，骨关节炎、类 风湿性关节炎、糖尿病和人艾滋病毒(HIV)感染。
本发明的第三个主要方面包括发现除了抑制炎性细胞因子从细胞中的 释放以外，本发明的化合物还改善了细胞效能和药动学性质。该优点进一 步被利用以提供用于受炎性细胞因子抑制剂控制或抑制影响的控制疾病的 方法，所述的方法包含给人类或高等哺乳动物服用有效量的组合物的步 骤，所述组合物包含一种或多种如本发明所述的炎性细胞因子抑制剂。
对于本领域普通技术人员来说，通过阅读下列详述和所附的权利要求 书，本发明的这些和其它目的、特征和优点将变得显而易见。除非另外指 明，本文中所述的所有百分数、比率和比例均按重量计。除非另外指明， 所有温度的单位均为摄氏度(℃)。所有引用文献的相关部分均引入本文 以供参考；任何文献的引用不应被解释为是对其作为本发明的现有技术的 认可。
发明详述
本发明涉及6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮，其适用于缓解、 控制或换句话讲抑制某些细胞因子，尤其是炎性细胞因子的细胞外释放， 所述细胞因子在刺激、引起或表现许多种疾病、疾病状态或综合征中起一 定的作用。
下列的化学体系用于整个说明书以特别指出并清楚地要求保护包含本 发明化合物的单元。术语“烃基”代表任何有机分子、包含无机原子的有 机官能团，包括盐，特别是羧酸盐、季铵盐或有机分子的任何部分、单 元、部分等等。包含在术语“烃基”范畴内的术语“无环的”和“环状 的”单元将烃基单元划分成环状的和非环状的类别。无环单元类别包括直 链的和支链的烷基、链烯基、炔基单元和它们相应的连接单元，特别是亚 烷基、亚烯基，(-CH＝CH-)所有的这些还可进一步通过下文定义的适宜的 氢取代作用而被取代。包含在“环状烃基”类别中的单元是碳环的、杂环 的、芳基和杂芳基单元以及它们相应的连接单元，特别是亚芳基(例如， 1，4-亚苯基)，所有的这些还可通过下文定义的适宜的氢取代作用而被取 代。包含在碳环的定义中的是螺环、双环和双桥环以及稠环，特别是四氢 萘。包含杂原子的螺环、双环、双桥环和稠环被划分成以下列规则为基础 的类型。
对本发明包含一个杂原子的稠环单元以及螺环、双环等等而言，将被 认为是属于包含杂原子环的环状的类别。例如，对于本发明而言，具有下 式的1，2，3，4-四氢喹啉：

被认为是杂环单元。具有下式的6，7-二氢-5H-[1]吡啶：

被认为是杂芳基单元。当稠环单元在饱和的环和芳环上包含杂原子时，芳 环将起支配作用并且决定了环所属的类别的类型。例如，对于本发明的目 的，具有下式的1，2，3，4-四氢-[1，8]吡啶并吡啶：

被认为是杂芳基单元。
本发明化合物包含连接单元。连接单元可与取代的或未取代的环状烃 基单元合在一起以形成一个普通的化学部分。例如，当亚甲基连接基和苯 基单元合在一起时，被普通技术人员称作为具有下式的苄基单元：

并且在本文中被称作“亚烷基芳基”单元。同样，杂芳基单元与亚甲基合 在一起被本文用术语定义为具有下式的“亚烷基杂芳基”，(例如，2-吡 啶甲基单元)：

术语“取代的”用于整个说明书。术语“取代的”被本文定义为“烃 基部分”，无论是无环的或是环状的，其具有一个或多个氢原子被取代基 或几个取代基置换，如下文所定义。取代氢原子的单元能够同时置换包括 烃基部分的一个氢原子、两个氢原子或三个氢原子。此外，这些取代基能 够置换在两个邻近碳原子上的两个氢原子以形成所述取代基、新的部分或 单元。例如，需要一个氢原子置换的取代单元包括卤素、羟基等等。两个 氢原子的置换包括羰基、肟基等。从相邻碳原子的两个氢原子置换包括环 氧基等。三个氢原子置换包括氰基等。术语取代的被用于本说明书全文， 表示烃基部分尤其是可具有一个或多个被取代基置换氢原子的芳族环、烷 基链。当部分被描述为“取代的”时，任何数目的氢原子可被置换。例 如，4-羟基苯基是“取代的芳族碳环”，(N，N-二甲基-5-氨基)辛基是 “取代的C8烷基单元”，3-胍丙基是“取代的C3烷基单元”，和2-羧 基吡啶基是“取代的杂芳基单元”。
尽管烃基单元的氢原子可以被任何单元取代，下列是单元的非限制性 实施例，其可在无论是环状的或无环的烃基单元上取代氢原子：
i)-[C(R12)2]p(CH＝CH)qR12；其中p为0至12；q为0至12；
ii)-C(Z)R12；
iii)-C(Z)2R12；
iv)-C(Z)CH＝CH2；
v)-C(Z)N(R12)2；
vi)-C(Z)NR12N(R12)2；
vii)-CN；
viii)-CNO；
ix)-CF3、-CCl3、-CBr3；
Z)-N(R12)2；
xi)-NR12CN；
xii)-NR12C(Z)R12；
xiii)-NR12C(Z)N(R12)2；
xiv)-NHN(R12)2；
xv)-NHOR12；
xvi)-NCS；
xvii)-NO2；
xviii)-OR12；
xix)-OCN；
xx)-OCF3、-OCCl3、-OCBr3；
xxi)-F、-Cl、-Br、-I以及它们的混合物；
xxii)-SCN；
xxiii)-SO3M；
xxiv)-OSO3M；
xxv)-SO2N(R12)2；
xxvi)-SO2R12；
xxvii)-P(O)H2；
xxviii)-PO2；
xxix)-P(O)(OH)2；
xxx)及其混合物；
其中R12是氢、取代的或未取代的C1-C20直链的、支链的或环状的烷 基、C6-C20芳基、C7-C20亚烷基芳基及其混合物；M是氢或成盐阳离子；Z 是＝O、＝S、＝NR11及其混合物。适合的成盐阳离子包括钠、锂、钾、钙、 镁、铵等。
本发明的化合物具有下式：

其中R、R1和R2在下文中定义。
R是在一般骨架的嘧啶-4-基部分的2位的取代基，所述R单元 是：
a)具有下式-O[CH2]kR3的醚；或
b)具有下式的伯氨或仲氨单元-NR4aR4b；
其中R3是取代的或未取代的C1-C4烷基、取代的或未取代的环状碳 环、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基或亚烷基芳基、取代 的或未取代的杂芳基或亚烷基杂芳基；指数k为0至5。
如下是依照本发明的R单元的各方面，其中R是具有下式 -O[CH2]kR3的醚。然而，配制人员不被限定于本发明举例说明的迭代和实施 例。
A)R单元包括具有下式-OR3的醚(指数k等于0)，且R3是 取代的或未取代的芳基。
i)R的这方面的一个迭代包括具有下式-OR3的醚，且R3 是取代的或未取代的芳基。这个迭代包括R的如下非限 制性实施例：苯氧基、2-氟苯氧基、3-氟苯氧基、4-氟 苯氧基、2，4-二氟苯氧基、3-三氟甲基苯氧基、4-三氟 甲基苯氧基、2，4-三氟甲基苯氧基等。
ii)R的这方面的另一迭代包括具有下式-OR3的醚，且R3 是取代的或未取代的芳基。这一迭代包括如下非限制性 实施例：2-甲基苯氧基、3-甲基苯氧基、4-甲基苯氧 基、2，4-二甲基苯氧基、2-氰基苯氧基、3-氰基苯氧 基、4-氰基苯氧基、4-乙基苯氧基等。
iii)R的这方面的还一个迭代包括具有下式-OR3的醚，且 R3是取代的或未取代的芳基。这一迭代包括如下非限制 性实施例：(2-甲氧基)苯氧基、(3-甲氧基)苯氧基、(4- 甲氧基)苯氧基、3-[(N-乙酰)氨基]苯氧基、3-苯并[1，3] 二氧杂环戊烯-5-基等。
B)R单元包括具有下式-OR3的醚(指数k等于0)，且R3是 取代的或未取代的杂芳基。
i)R这方面的第一迭代包括具有下式-OR3的醚，且R3是 未取代的杂芳基。这一迭代包括如下非限制性实施例： 嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶- 4-基等。
ii)R的这方面的第二迭代包括具有下式-OR3的醚，且R3 是取代的杂芳基。这一迭代包括如下非限制性实施例： 2-氨基嘧啶-4-基等。
C)R单元包括具有下式-OCH2R3的醚(指数k等于1)，且R3是 取代的或未取代的芳基。
i)R的这方面的第一迭代包括具有下式-OCH2R3的醚，且 R3是取代的或未取代的杂芳基。这一迭代包括如下非限 制性实施例：嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、2-氨基嘧啶-4- 基、4-氨基嘧啶-6-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶- 4-基等。
ii)R的这方面的第二迭代，其中R是具有下式-OCH2R3的 醚，且R3是取代的或未取代的亚烷基杂芳基。这一迭代 包括如下非限制性实施例：吡啶-3-基乙基、(2-甲基-2- 吡啶-3-基)乙基等。
D)R单元包括具有下式-OR3的醚(指数k等于1)，且R3是 取代的或未取代的C1-C4烷基。
i)R的这方面的第一迭代是具有下式-OR3的醚，且R3是 未取代的C1-C4直链的、支链的或环状的烷基。这一迭 代包括如下非限制性实施例：甲基、乙基、异丙基、 (S)-1-甲基丙基等。
ii)R的这方面的第二迭代是具有下式-OR3的醚，且R3是 取代的C1-C4直链的、支链的或环状的烷基。这一迭代 包括如下非限制性实施例：2-甲氧基乙基、(S)-1-甲基- 3-甲氧基丙基等。
如下是依照本发明的R单元的各个方面，其中R是具有下式 -NR4aR4b的胺，R4a和R4b各自独立地为：
a)氢；或
b)-[C(R5aR5b)]mR6；
每个R5a和R5b独立地为氢或C1-C4直链的、直链的-OR7、 -N(R7)2、-CO2R7、-CON(R7)2；环状的烷基及其混合物；R6是氢、取代的或未 取代的C1-C4烷基、取代的或未取代的杂环、取代的或未取代的芳基、或 取代的或未取代的杂芳基；-OR7、-N(R7)2、-CO2R7、-CON(R7)2，R7是氢、 水溶性阳离子、C1-C4烷基、或取代的或未取代的芳基；指数m为0至 5。然而，配制人员不被限制于本发明示例的迭代和实施例。
A)R单元包括手性的氨基，其中R4a是氢、R5a是氢和R5b是甲 基，所述单元具有下式：

和所显示的立体化学构型。
i)R的这方面的第一迭代是包括R6的胺，所述R6是取代 的或未取代的苯基。这一迭代包括如下非限制性实施 例：(S)-1-甲基-1-苯基甲基氨基、(S)-1-甲基-1-(4-氟 苯基)甲基氨基、(S)-1-甲基-1-(4-甲基苯基)甲基-氨 基、(S)-1-甲基-1-(4-甲氧基苯基)甲基氨基、(S)-1-甲 基-1-(2-氨基苯基)甲基氨基、(S)-1-甲基-1-(4-氨基苯 基)甲基氨基等。
ii)R的这方面的第二迭代是包括R6的胺，所述R6是取代 的或未取代的杂芳基。这一迭代包括如下非限制性实施 例：(S)-1-甲基-1-(吡啶-2-基)甲基氨基、(S)-1-甲基- 1-(吡啶-3-基)甲基氨基、(S)-1-甲基-1-(吡啶-4-基)甲 基氨基、(S)-1-甲基-1-(呋喃-2-基)甲基氨基、(S)-1- 甲基-1-(3-苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基)甲基氨基等。
iii)R的这方面的第三迭代是包括R6的胺，所述R6是C1- C4取代的或未取代的烷基。这一迭代包括如下非限制性 实施例：(S)-1-甲基丙基氨基、(S)-1-甲基-2-(甲氧基) 乙氨基。
B)R单元包括手性的氨基，其中R4a是氢，R5a和R5b各自是C1- C4烷基，所述单元具有下式：

并且当R5a、R5b和R6不同时，所述单元具有所示的立体化学 构型。
i)R的这方面的第一迭代是没有手性中心的胺，其非限制 性实施例包括1，1-二甲基乙基胺、1，1-二甲基苄胺等。
ii)R的这方面的第二迭代是包括R6的胺，所述R6为取代 的或未取代的C1-C4烷基。这一迭代包括如下非限制性 实施例：(S)-1-甲基-2-羟基-2-甲基丙基胺、(S)-1-甲 基-2-羟基-2-甲基丁基胺等。
C)R单元包括亚烷基芳基胺，其中R4a是氢，R4b的R5a和R5b是 氢，R6是取代的或未取代的芳基，所述单元具有下式：

其中R12是氢或本发明如上所定义的“取代的单元”。
i)这方面的第一迭代包括R单元的如下非限制性实施例： 苄基氨基、(2-氨基苯基)甲基氨基、(4-氟苯基)甲基氨 基、(4-甲氧基苯基)甲基氨基、(4-丙磺酰基苯基)甲基 氨基等。
ii)这方面的第二迭代包括R单元的如下的非限制性实施 例：(2-甲基苯基)甲基氨基、(3-甲基苯基)-甲基氨基、 (4-甲基苯基)甲基氨基等。
D)R单元包括胺，其中R4a是氢，R4b包括R5a等于氢和R5b等 于-CO2R7或-CON(R7)2；所述单元具有下式：

i)R的这方面的第一迭代是包括R6的胺，所述R6是取代 的或未取代的苯基。这一迭代包括如下非限制性实施 例：

其中R11是氢或本发明如上定义的“取代基”。
ii)R的这方面的第二迭代是包括R6的胺，所述R6为取代 的或未取代的烷基。这一迭代包括如下非限制性实施例：

R1单元选自：
a)取代的或未取代的芳基；或
b)取代的或未取代的杂芳基。
R1单元的第一方面包括卤素取代的苯基单元，其非限制性实施例包括 4-氟苯基、2，4-二氟苯基、4-氯苯基等。
每个R2单元独立地选自：
a)氢；
b)-(CH2)jO(CH2)nR8；
c)-(CH2)jNR9aR9b；
d)-(CH2)jCO2R10；
e)-(CH2)jOCO2R10
f)-(CH2)jCON(R10)2；
g)-(CH2)jOCON(R10)2
h)两个R2单元可以合在一起以形成羰基单元；
i)及其混合物；
R8、R9a、R9b和R10各自独立地为氢、C1-C4烷基及其混合物；R9a和 R9b可以合在一起以形成包括3至7个原子的碳环或杂环；两个R10单 元可以合在一起以形成包括3至7个原子的碳环或杂环；j是0至5 的指数，n是0至5的指数。
L是连接基团，其选自：
i)-[C(R12)2]n-；
ii)-[C(R12)2]nNR12[C(R12)2]n-；和
iii)-[C(R12)2]nO[C(R12)2]n-；
R12是氢、C1-C4烷基，以及它们的混合物；或两个R12单元可以合在 一起以形成羰基单元；指数n为0至2的数；
L单元的第一方面涉及具有下式包含L单元的化合物：
               -[C(R12)2]nO[C(R12)2]n-；
其第一个实施方案是具有下式的化合物：

其中每个指数n等于0。
本发明的第二方面涉及L单元，其包含具有下式含有L单元的化合 物：
                     -[C(R12)2]n-；
该方面的第一个实施方案涉及具有下式的化合物：

L单元的第三方面涉及具有下式包含L单元的化合物：
                 -[C(R12)2]n 12O[C(R12)2]n-；
其第一个实施方案是具有下式的化合物：

其中连接单元是-CH2]NH[C(O)]-。
L单元的第四方面涉及具有下式包含L单元的化合物：
                    -[C(R12)2]-；
其中两个R12单元合在一起以形成羰基单元，所述化合物具有下式：

Z是O、S、NR11或NOR11；R11是氢或C1-C4烷基。本发明的第一方面 涉及Z单元，其包括氧原子，其提供了2-R1取代的-3-(2-R-取代的-嘧 啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮，第二方面涉及Z单 元，其包括硫原子，其提供了2-R1取代的-3-(2-R-取代的-嘧啶-4-基)- 6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-硫酮，本发明的第三方面涉及Z单 元，其包括NR11单元，从而提供2-R1取代的-3-(2-R-取代的-嘧啶-4- 基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-基亚基胺及其衍生物。
本发明的类似物(化合物)被排列成若干类别，以辅助配制人员使用合 理的合成策略来制备本文未清楚示例的类似物。类别排列并非暗示本发明 所述的任何物质的组合物功效的提高或降低。
包括本发明类别I的化合物是具有下式的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮：

其第一方面涉及R单元，其是取代的烷基胺，非限制性实施例描述 于下表I。
                       表1   编号   R   R1   1   2-甲基-2-羟基-1-(S)-甲基丙胺   2-甲基苯基   2   1-(S)-甲基苄胺   2-甲基苯基   3   2-甲氧基-1-(S)-甲基乙胺   2-甲基苯基   4   2-甲基-2-氰基-1-(S)-甲基丙胺   2-甲基苯基   5   2-甲基-2-羟基-1-(R)-甲基丙胺   2-甲基苯基   6   1-(R)-甲基苄胺   2-甲基苯基   7   2-甲氧基-1-(R)-甲基乙胺   2-甲基苯基   8   2-甲基-2-氰基-1-(R)-甲基丙胺   2-甲基苯基   9   2-甲基-2-羟基-1-(S)-甲基丙胺   2-氯苯基   10   1-(S)-甲基苄胺   2-氯苯基   11   2-甲氧基-1-(S)-甲基乙胺   2-氯苯基   12   2-甲基-2-氰基-1-(S)-甲基丙胺   2-氯苯基   13   2-甲基-2-羟基-1-(R)-甲基丙胺   2-氯苯基   14   1-(R)-甲基苄胺   2-氯苯基   15   2-甲氧基-1-(R)-甲基乙胺   2-氯苯基   16   2-甲基-2-氰基-1-(R)-甲基丙胺   2-氯苯基   17   2-甲基-2-羟基-1-(S)-甲基丙胺   4-氟苯基   18   1-(S)-甲基苄胺   4-氟苯基   19   2-甲氧基-1-(S)-甲基乙胺   4-氟苯基   20   2-甲基-2-氰基-1-(S)-甲基丙胺   4-氟苯基   21   2-甲基-2-羟基-1-(R)-甲基丙胺   4-氟苯基   22   1-(R)-甲基苄胺   4-氟苯基   23   2-甲氧基-1-(R)-甲基乙胺   4-氟苯基   24   2-甲基-2-氰基-1-(R)-甲基丙胺   4-氟苯基
包括本发明类别I第一方面的化合物可由本文概述于以下方案I的 步骤制备。
                            方案I

试剂和条件：(a)LDA，THF；-78℃至室温，1小时。

试剂和条件：(b)吡啶；回流，18小时。

试剂和条件：(c)过硫酸氢钾，H2O，室温，1小时。

试剂和条件：(d)甲苯；回流，24小时。
实施例1
(S)-3-[2-(2-甲氧基-1-甲基乙基氨基)-嘧啶-4-yl]-2-邻-甲苯氧基- 6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮(4)
原料2-甲硫基-嘧啶-4-羧酸甲氧基-甲酰胺可如下制备。
2-甲硫基-嘧啶-4-羧酸甲氧基-甲酰胺的制备：向2-甲硫基-嘧啶-4- 羧酸(10.0g，59.2mmol)在CH3CN(300mL)的浆液中依次加入：1-羟基 苯并三唑水合物(9.59g，71.0mmol)、1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二 亚胺盐酸盐(13.6g，71.0mmol)、N，O-二甲基盐酸羟胺(8.66g， 88.8mmol)和三乙基胺(Et3N)(24.9mL，178mmol)。所得的浆液在环境温 度搅拌过夜。16小时后，将反应混合物倾倒至饱和碳酸氢钠水溶液 (300mL)中，并分离所得的层。水层用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。合并 的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，且所得的残余物 通过二氧化硅(100％ EtOAc)纯化，以得到10.1g(89％收率)的黄色 油状所需的产品。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(d，J＝4.9Hz， 1H)，7.15(br s，1H)，3.77(br s，3H)，3.38(br s，3H)，2.61 (s，3H)；MS(ESI)m/z 214(M+1)。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧-2-邻-甲苯氧基-丙酸甲基酯的制备 (1)：向冷的(-78℃)二异丙氨基锂(31.5mL 1.8M的THF溶液， 56.6mmol)的THF(180mL)溶液滴加(2-甲基苯氧基)乙酸乙酯(10.0 g，51.5mmol)的THF(30mL)溶液。在-78℃搅拌1小时后，将2-甲 硫基-嘧啶-4-羧酸甲氧基-甲酰胺(10.4g，48.9mmol)的THF(30mL)溶 液滴加至反应混合物。在-78℃搅拌20分钟后，将反应混合物加热至 0℃并且再搅拌30分钟。通过倾倒入饱和NH4Cl水溶液结束反应。水相 用EtOAc(x2)萃取。干燥合并的有机相(MgSO4)，过滤并真空浓缩。粗 残余物通过硅胶色谱法(10％ EtOAc/己烷，随后是用30％ EtOAc/己烷) 纯化，以得到2.1g(32％)的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)(观 察3∶1酮基∶烯醇的混合物)酮基互变异构体：δ8.80(d，J＝4.2 Hz，1H)，7.57(d，J＝4.8Hz，1H)，7.20至7.14(m，2H)，6.96 (t，J＝7.2Hz，1H)，6.85(d，J＝8.1Hz，1H)，6.29(s，1H)， 4.30(q，J＝7.2Hz，2H)，2.50(s，3H)，2.27(s，3H)，1.26(t，J ＝7.2Hz，3H)；ESI+MS：m/z(相对强度)347.1(100，M++H)。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2-邻-甲苯氧基-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2- a]吡唑-1-酮的制备(2)：向吡唑烷二盐酸盐(1.7g，11.6mmol)的吡啶 (30mL)溶液添加3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧-2-邻-甲苯氧基-丙酸甲 基酯，1，(2.0g，5.78mmol)。反应混合物在110℃下加热18小时。真 空移除溶剂，且所得的残余物通过硅胶色谱法(10％ MeOH/EtOAc，随后用 20％ MeOH/EtOAc)纯化以得到220mg(10％)的黄色固体目标产物。1H NMR (300MHz，CDCl3)δ8.56(d，J＝5.4Hz，1H)，7.57(d，J＝5.4 Hz，1H)，7.23(d，J＝7.5Hz，1H)，7.10(dd，J＝7.5，7.5Hz， 1H)，6.96(dd，J＝7.5，7.5Hz，1H)，6.82(d，J＝7.5Hz，1H)， 4.22(t，J＝6.6Hz，2H)，4.05(t，J＝6.9Hz，2H)，2.72(dddd， J＝6.9，6.9，6.9，6.9Hz，2H)，2.62(s，3H)，2.48(s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)355.0(100，M++H)。
3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-2-邻-甲苯氧基-6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2-a]吡唑-1-酮的制备(3)：向3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-2-邻-甲苯氧 基-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，2，(0.20g，0.56mmol)的 THF∶甲醇(6mL的1∶1混合物)的溶液滴加Oxone(过一硫酸钾) (1.37g，2.24mmol)的H2O(6mL)溶液。在室温下搅拌反应1小时后， 将溶液倾倒至饱和NaHCO3水溶液中。水相用EtOAc萃取三次，合并有机 相，用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩以得到所需的产品，无需进一步纯 化即可使用。
(S)-3-[2-(2-甲氧基-1-甲基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-2-邻-甲苯氧基- 6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮的制备(4)：向3-(2-甲磺酰基-嘧 啶-4-基)-2-邻-甲苯氧基-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，3， (0.11g，0.28mmol)的甲苯(4mL)溶液添加(S)-1-甲氧基-2-丙胺 (0.10g，1.13mmol)。将反应混合物在115℃下加热24小时。在真空下 去除溶剂，并且所得残余物通过制备性HPLC纯化以得到52mg的黄色固 体目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.28(d，J＝5.1Hz，1H)， 7.22(d，J＝7.2Hz，1H)，7.16(d，J＝5.4Hz，1H)，7.09(t，J＝ 7.5Hz，1H)，6.97(t，J＝7.5Hz，1H)，6.83(d，J＝7.5Hz， 1H)，4.29至4.21(m，1H)，4.17(t，J＝7.2Hz，2H)，4.01(t，J ＝7.2Hz，2H)，3.50(dddd，J＝9.3，9.3，4.5，4.5Hz，2H)，3.42 (s，3H)，2.69(dt，J＝7.2Hz，2H)，2.46(s，3H)，1.31(d，J＝ 6.6Hz，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)396.2(90，M++H)；对C21H25N5O3 的分析计算值：C，63.78；H，6.37；N，17.71。检测值：C，63.63；H， 6.20；N，17.05。
下列是包含类别I第一方面的化合物的非限制性实施例。
(S)-3-[2-(2-羟基-1，2-二甲基-丙氨基)-嘧啶-4-基]-2-邻-甲苯氧 基-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，d6-DMSO) δ8.32(d，J＝5.1Hz，1H)，7.24(d，J＝7.2Hz，1H)，7.08(dd， J＝7.8，7.8Hz，1H)，6.94(dd，J＝7.2，7.2Hz，1H)，6.87至 6.80(m，1H)，6.73(d，J＝5.1Hz，1H)，4.40(bd s，1H)，4.15 (t，J＝6.3Hz，2H)，3.95(bd s，1H)，3.84(t，J＝7.2Hz，2H)， 3.40至3.35(m，1H)，2.62至2.56(m，2H)，2.35(s，3H)，1.11 (s，9H)。HRMS对C22H28N5O3(M+H)+计算值410.2192；检测值 410.2178。
类别I的第二方面涉及R单元，其是取代的或未取代的杂环氨基或 杂芳基氨基，它的非限制性实施例描述于本文下表II中。
          表II   编号   R   R1   25   吡喃-4-基氨基   2-甲基苯基   26   哌啶-4-基氨基   2-甲基苯基   27   吡啶-2-基氨基   2-甲基苯基   28   吡啶-3-基氨基   2-甲基苯基   29   吡啶-4-基氨基   2-甲基苯基   30   嘧啶-2-基氨基   2-甲基苯基   31   嘧啶-4-基氨基   2-甲基苯基   32   嘧啶-5-基氨基   2-甲基苯基   33   吡喃-4-基氨基   2-氯苯基   34   哌啶-4-基氨基   2-氯苯基   35   吡啶-2-基氨基   2-氯苯基   36   吡啶-3-基氨基   2-氯苯基   37   吡啶-4-基氨基   2-氯苯基   38   嘧啶-2-基氨基   2-氯苯基   39   嘧啶-4-基氨基   2-氯苯基   40   嘧啶-5-基氨基   2-氯苯基   41   吡喃-4-基氨基   4-氟苯基   42   哌啶-4-基氨基   4-氟苯基   43   吡啶-2-基氨基   4-氟苯基   44   吡啶-3-基氨基   4-氟苯基   45   吡啶-4-基氨基   4-氟苯基   46   嘧啶-2-基氨基   4-氟苯基   47   嘧啶-4-基氨基   4-氟苯基   48   嘧啶-5-基氨基   4-氟苯基
包括本发明类别I第二方面的化合物可由本文概述于以上方案I的 步骤制备。
包括类别I第二方面的其它化合物的非限制性实施例包括：
(S)-3-[2-(四氢吡喃-4-基氨基]-嘧啶-4-基]-2-邻-甲苯氧基-6，7-二 氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.31(d， J＝5.1Hz，1H)，7.22(d，J＝7.5Hz，1H)，7.14(d，J＝5.1Hz， 1H)，7.49(t，J＝7.5Hz，2H)，7.30至7.22(m，4H)，7.09(t，J ＝6.6Hz，1H)，6.99(t，J＝7.2Hz，1H)，6.81(d，J＝5.1Hz， 1H)，3.95(t，J＝7.2Hz，2H)，3.72(t，J＝7.2Hz，2H)，2.57至 2.47(m，4H)。ESI+MS：m/z(相对强度)401.2(100，M++H)。对 C22H25N5O3分析计算值：C，64.85；H，6.18；N，17.19。检测值：C， 64.27；H，5.94；N，16.73。
类别I的第三方面涉及R单元，其是取代的或未取代的芳氨基或亚 烷基芳氨基，它的非限制性实施例描述于本文下表III中。
                   表III   编号   R   R1   49   吡喃-4-基氨基   2-甲基苯基   50   哌啶-4-基氨基   2-甲基苯基   51   吡啶-2-基氨基   2-甲基苯基   52   吡啶-3-基氨基   2-甲基苯基   53   吡啶-4-基氨基   2-甲基苯基   54   嘧啶-2-基氨基   2-甲基苯基   55   嘧啶-4-基氨基   2-甲基苯基   56   嘧啶-5-基氨基   2-甲基苯基   57   吡喃-4-基氨基   2-氯苯基   58   哌啶-4-基氨基   2-氯苯基   59   吡啶-2-基氨基   2-氯苯基   60   吡啶-3-基氨基   2-氯苯基   61   吡啶-4-基氨基   2-氯苯基   62   嘧啶-2-基氨基   2-氯苯基   63   嘧啶-4-基氨基   2-氯苯基   64   嘧啶-5-基氨基   2-氯苯基   65   吡喃-4-基氨基   4-氟苯基   66   哌啶-4-基氨基   4-氟苯基   67   吡啶-2-基氨基   4-氟苯基   68   吡啶-3-基氨基   4-氟苯基   69   吡啶-4-基氨基   4-氟苯基   70   嘧啶-2-基氨基   4-氟苯基   71   嘧啶-4-基氨基   4-氟苯基   72   嘧啶-5-基氨基   4-氟苯基
包括本发明类别I第三方面的化合物可由本文概述于以上方案I的 步骤制备。
包括类别I第三方面的化合物的非限制性实施例包括：
(S)-3-[2-(1-苯基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-2-邻-甲苯氧基-6，7-二氢- 5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.31(d，J＝ 5.1Hz，1H)，7.40至7.22(m，5H)，7.20(d，J＝7.5Hz，1H)， 7.12(d，J＝5.1Hz，1H)，7.07(t，J＝6.9Hz，1H)，6.95(t，J＝ 7.5Hz，1H)，6.80(d，J＝7.8Hz，1H)，5.50(bd s，1H)，5.12至 5.09(m，1H)，3.97至3.89(m，2H)，3.75至3.60(m，1H)，2.44 (s，3H)，2.60至2.40(m，2H)，1.45(d，J＝6.6Hz，2H)。HRMS对 C25H26N5O2(M+H)+计算值428.2087；检测值428.2088。
3-[2-(2，6-二氯-苯氨基)-嘧啶-4-基]-2-邻-甲苯氧基-6，7-二氢-5H- 吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.43(d，J＝ 5.1Hz，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，2H)，7.36(d，J＝5.7Hz， 1H)，7.27至7.21(m，2H)，7.12至7.06(m，2H)，6.94(t，J＝ 7.5Hz，2H)，6.81(d，J＝8.1Hz，1H)，3.98(t，J＝6.9Hz， 2H)，3.84(t，J＝6.9Hz，2H)，2.51(dddd，J＝6.9，6.9，6.9， 6.9Hz，2H)，2.46(s，1H)。ESI+MS：m/z(相对强度)468.0(100， M++H)。
类别I的第四方面涉及R单元，其是取代的或未取代的芳氧基或亚 烷基芳氧基，它的非限制性实施例描述于本文下表IV中。
                  表IV   编号   R   R1   73   苯氧基   2-甲基苯基   74   2-氯苯氧基   2-甲基苯基   75   3-氯苯氧基   2-甲基苯基   76   2，6-二氯苯氧基   2-甲基苯基   77   2-甲基苯氧基   2-甲基苯基   78   2，6-二甲基苯氧基   2-甲基苯基   79   2-氟代苯氧基   2-甲基苯基   80   2，6-二氟代苯氧基   2-甲基苯基   81   苯氧基   2-氯苯基   82   2-氯苯氧基   2-氯苯基   83   3-氯苯氧基   2-氯苯基   84   2，6-二氯苯氧基   2-氯苯基   85   2-甲基苯氧基   2-氯苯基   86   2，6-二甲基苯氧基   2-氯苯基   87   2-氟代苯氧基   2-氯苯基   88   2，6-二氟代苯氧基   2-氯苯基   89   苯氧基   4-氟苯基   90   2-氯苯氧基   4-氟苯基   91   3-氯苯氧基   4-氟苯基   92   2，6-二氯苯氧基   4-氟苯基   93   2-甲基苯氧基   4-氟苯基   94   2，6-二甲基苯氧基   4-氟苯基   95   2-氟代苯氧基   4-氟苯基   96   2，6-二氟代苯氧基   4-氟苯基
包括本发明类别I第四方面的化合物可由本文概述于以上方案I的 步骤制备。
包括类别I第四个方面的化合物的非限制性实施例包括：
3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-2-邻-甲苯氧基-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2- a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.63(d，J＝5.1Hz，1H)， 7.62(d，J＝5.4Hz，1H)，7.49(t，J＝7.5Hz，2H)，7.30至7.22 (m，4H)，7.09(t，J＝7.5Hz，1H)，6.96(t，J＝7.2Hz，1H)， 6.82(d，J＝5.1Hz，1H)，5.15(bd s，NH)，4.13(t，J＝6.9Hz， 1H)，4.07至4.00(m，4H)，3.55(t，J＝11.7Hz，2H)，2.69 (dddd，J＝6.9Hz，2H)，2.46(s，3H)，2.05(d，J＝11.7Hz， 1H)，1.66至1.55(m，4H)。ESI+MS：m/z(相对强度)408.2(100， M++H)。对C23H20N4O3分析计算值：C，68.99；H，5.03；N，13.99。检测 值：C，69.02；H，5.01；N，13.81。
包括本发明类别II的化合物是具有下式的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮：

其第一方面涉及R单元，其是取代的或未取代的芳氨基或亚烷基芳 氨基，它的非限制性实施例描述于本文下表V中。
                   表V   编号   R   R1   97   吡喃-4-基氨基   2-甲基苯基   98   哌啶-4-基氨基   2-甲基苯基   99   吡啶-2-基氨基   2-甲基苯基   100   吡啶-3-基氨基   2-甲基苯基   101   吡啶-4-基氨基   2-甲基苯基   102   嘧啶-2-基氨基   2-甲基苯基   103   嘧啶-4-基氨基   2-甲基苯基   104   嘧啶-5-基氨基   2-甲基苯基   105   吡喃-4-基氨基   2-氯苯基   106   哌啶-4-基氨基   2-氯苯基   107   吡啶-2-基氨基   2-氯苯基   108   吡啶-3-基氨基   2-氯苯基   109   吡啶-4-基氨基   2-氯苯基   110   嘧啶-2-基氨基   2-氯苯基   111   嘧啶-4-基氨基   2-氯苯基   112   嘧啶-5-基氨基   2-氯苯基   113   吡喃-4-基氨基   4-氟苯基   114   哌啶-4-基氨基   4-氟苯基   115   吡啶-2-基氨基   4-氟苯基   116   吡啶-3-基氨基   4-氟苯基   117   吡啶-4-基氨基   4-氟苯基   118   嘧啶-2-基氨基   4-氟苯基   119   嘧啶-4-基氨基   4-氟苯基   120   嘧啶-5-基氨基   4-氟苯基
包括本发明类别II第一方面的化合物可由本文概述于以下方案II 的步骤制备。
                    方案II

试剂和条件：(a)K2CO3，1-冠-6，THF；室温，20小时。

试剂和条件：(b)吡唑烷，吡啶；加热，2天。

试剂和条件：(c)过硫酸氢钾，H2O，室温，1.5小时。

试剂和条件：(d)NMP；90℃至室温，1.5小时。
实施例2
(S)-2-(2-氯苄基)-3-[2-(1-苯基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二氢- 5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮(9)
2-(2-氯苄基)-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧-丙酸叔丁酯的制备 (6)：向3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧-丙酸叔丁酯，5，(1.6g， 6.0mmol)的THF(15mL)溶液中添加18-冠-6(6.3g，23.9mmol)和碳 酸钾(3.3g，23.9mmol)。接下来，加入2-氯苄基溴化物(1.2mL， 9.0mmol)并且该混合物在室温下搅拌20小时。上述混合物用水和乙酸 乙酯稀释，并且水层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并将滤液真空浓 缩。粗残余物通过硅胶色谱法(20％ EtOAc/己烷)纯化，以得到1.9g (81％)的目标产物：1H NMR(300MHz，CDCl3)(酮基形式)δ8.76(d，J ＝5.1Hz，1H)，7.52(dd，J＝7.2，1.8Hz，1H)，7.38(m，1H)， 7.26至7.18(m，3H)，4.96(t，J＝7.2Hz，1H)，3.52(dd，J＝ 7.2，1.8Hz，2H)，2.60(s，3H)，1.49(s，9H)；ESI+ MS：m/z 393 M++H。
2-(2-氯苄基)-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a] 吡唑-1-酮的制备(7)：向2-(2-氯苄基)-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧- 丙酸叔丁酯，6(2.0g，5.7mmol))的吡啶(40mL)溶液中添加吡唑烷二 盐酸盐(1.2g，8.1mmol)。在室温下搅拌反应10分钟后，上述混合物在 90℃搅拌2.5小时，然后在60℃搅拌17小时。将溶液真空浓缩并且 所得的粗产品通过二氧化硅(EtOAc接下来通过f 20％ MeOH/EtOAc)醇 化，以得到460mg(22％)目标产物：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.58 (d，J＝5.1Hz，1H)，7.42至7.2(m，4H)，6.96(d，J＝5.1Hz， 1H)，4.42至4.3(m，4H)，4.10(s，2H)，2.95至2.75(m，2H)， 2.58(s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)373.0(100，M++H)。
2-(2-氯苄基)-3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2-a]吡唑-1-酮的制备(8)：向冷的0℃ 2-(2-氯苄基)-3-(2-甲硫基- 嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，7，(460mg， 1.23mmol)的THF/MeOH(20mL的1∶1混合物)溶液中滴加Oxone(过 一硫酸钾)(3.0g，4.9mmol)的H2O(15mL)溶液。在室温下搅拌反应 1.5小时后，将溶液倾倒至饱和NaHCO3水溶液中。水相用EtOAc萃取三 次，并且合并的有机相用盐水洗涤，用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩， 以得到316mg所需的产品，无需进一步纯化即可使用。
(S)-2-(2-氯苄基)-3-[2-(1-苯基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二氢- 5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮的制备(9)：向2-(2-氯苄基)-3-(2-甲磺酰 基-嘧啶-4-基]-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，8，(0.10g， 0.26mmol)的NMP(2mL)溶液中添加α-甲基苄胺(0.10mL， 0.78mmol)。在90℃搅拌1.5小时后，反应混合物用甲醇稀释(至 5mL)，并用反相液体色谱法(CH3CN/水/1％ TFA)纯化以得到27mg(23％) 的目标产物：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.27(d，J＝5.1Hz，1H)， 7.38至7.12(m，9H)，6.52(d，J＝5.1Hz，1H)，5.06(q，br， 1H)，4.07至3.95(m，4H)，4.02(s，2H)，2.58至2.45(m，2H)， 1.58(d，J＝7.0Hz，3H)；ESI- MS：m/z(相对强度)446.0(100，M+- H)。
下列是包含类别II第一方面的化合物的非限制性实施例。
(S)-2-(2-甲基-苄基)-3-[2-(1-苯基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二 氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.00 (d，J＝5.1Hz，1H)，7.28至6.90(m，8H)，6.78(d，J＝7.2Hz， 1H)，6.45(d，J＝5.1Hz，1H)，4.94(q，br，1H)，4.07至3.95 (m，4H)，4.02(s，2H)，2.58至2.45(m，2H)，2.26(s，3H)，1.56 (d，J＝7.2Hz，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)426.0(100，M++H)。
(S)-2-(4-氟代苄基)-3-[2-(1-苯基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二氢- 5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.16(d，J ＝5.1Hz，1H)，7.40至7.20(m，5H)，7.18至7.02(m，2H)，6.84 (dd，J＝7.2，1.8Hz，2H)，6.68(s，J＝5.1Hz，1H)，4.96(q， br，1H)，4.18至4.04(m，4H)，2.58至2.45(m，2H)，1.58(d，J ＝7.2Hz，3H)；ESI- MS：m/z(相对强度)430.0(100，M++H)。
2-(2-氯苄基)-3-[2-(2，6-二氟-苯氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二氢-5H- 吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.42(d，J＝ 5.1Hz，1H)，7.39至7.14(m，7H)，6.72(d，J＝5.1Hz，1H)， 4.16(t，J＝6.9Hz，2H)，4.07(t，J＝6.9Hz，2H)，4.03(s， 2H)，2.67(dddd，J＝6.9，6.9，6.9，6.9Hz，2H)；ESI- MS：m/z(相 对强度)453.8(100，M++H)。
2-(2-氯苄基)-3-[2-(2-甲氧基-1-甲基-乙氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二 氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.14(d， J＝5.1Hz，1H)，7.38(d，J＝5.4Hz，1H)，7.18-7.10(m，3H)， 6.61(d，J＝5.4Hz，1H)，4.40至4.23(m，5H)，4.07(s，2H)， 3.45(d，J＝5.4Hz，2H)，3.38(s，3H)，2.82(dddd，J＝6.9， 6.9，6.9，6.9Hz，2H)；ESI- MS：m/z(相对强度)413.9(100， M++H)。
类别II的第二方面涉及R单元，其是取代的或未取代的取代的烷 基胺，它的非限制性实施例描述于本文下表VI中。
                           表VI   编号   R   R1   121   2-甲基-2-羟基-1-(S)-甲基丙胺   2-甲基苯基   122   1-(S)-甲基苄胺   2-甲基苯基   123   2-甲氧基-1-(S)-甲基乙胺   2-甲基苯基   124   2-甲基-2-氰基-1-(S)-甲基丙胺   2-甲基苯基   125   2-甲基-2-羟基-1-(R)-甲基丙胺   2-甲基苯基   126   1-(R)-甲基苄胺   2-甲基苯基   127   2-甲氧基-1-(R)-甲基乙胺   2-甲基苯基   128   2-甲基-2-氰基-1-(R)-甲基丙胺   2-甲基苯基   129   2-甲基-2-羟基-1-(S)-甲基丙胺   2-氯苯基   130   1-(S)-甲基苄胺   2-氯苯基   131   2-甲氧基-1-(S)-甲基乙胺   2-氯苯基   132   2-甲基-2-氰基-1-(S)-甲基丙胺   2-氯苯基   133   2-甲基-2-羟基-1-(R)-甲基丙胺   2-氯苯基   134   1-(R)-甲基苄胺   2-氯苯基   135   2-甲氧基-1-(R)-甲基乙胺   2-氯苯基   136   2-甲基-2-氰基-1-(R)-甲基丙胺   2-氯苯基   137   2-甲基-2-羟基-1-(S)-甲基丙胺   4-氟苯基   138   1-(S)-甲基苄胺   4-氟苯基   139   2-甲氧基-1-(S)-甲基乙胺   4-氟苯基   140   2-甲基-2-氰基-1-(S)-甲基丙胺   4-氟苯基   141   2-甲基-2-羟基-1-(R)-甲基丙胺   4-氟苯基   142   1-(R)-甲基苄胺   4-氟苯基   143   2-甲氧基-1-(R)-甲基乙胺   4-氟苯基   144   2-甲基-2-氰基-1-(R)-甲基丙胺   4-氟苯基
包括本发明类别II第二面的化合物可由本文概述于以下方案II的 步骤制备。
包括类别II第二方面化合物的非限制性实施例包括：
(S)-2-(2-氯苄基)-3-[2-(2-羟基-1，2-二甲基-丙氨基-嘧啶-4-基- 6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.23(d，J＝5.1Hz，1H)，7.39至7.34(m，1H)，7.26至7.13 (m，3H)，8.58(d，J＝5.1Hz，1H)，4.15至4.10(m，7H)，2.8至 2.75(m，2H)，1.26(d，J＝9.1Hz，6H)，1.20(d，J＝6.8Hz， 3H)；ESI- MS：m/z(相对强度)428.0(100，M++H)。
(S)-3-[2-(2-羟基-1，2-二甲基-丙氨基)-嘧啶-4-基]-2-(2-甲基-苄 基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.98(d，J＝5.1Hz，1H)，7.29至6.98(m，3H)，6.85(d，J＝5.1 Hz，1H)，6.52(d，J＝5.1Hz，1H)，4.30至4.10(m，4H)，3.99 (q，J＝7.2.Hz，1H)，2.88至2.72(m，2H)，2.26(s，3H)，1.26至 1.15(m，9H)；ESI- MS：m/z(相对强度)408.0(100，M++H)。
(S)-2-(4-氟代苄基)-3-[2-(2-羟基-1，2-二甲基-丙氨基)-嘧啶-4- 基]-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.15(d，J＝5.1Hz，1H)，7.12至7.05(m，2H)，6.88(dd，J＝ 7.2，1.8Hz，2H)，6.72(d，J＝5.1Hz，1H)，4.28-4.06(m，4H)， 3.88(s，2H)，2.82至2.70(m，2H)，1.26至1.15(m，9H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)412.1(100，M++H)。
类别II的第三方面涉及R单元，其是取代的或未取代的杂环氨基 或杂芳基氨基，它的非限制性实施例描述于本文下表VII中。
                   表VII   编号   R   R1   145   吡喃-4-基氨基   2-甲基苯基   146   哌啶-4-基氨基   2-甲基苯基   147   吡啶-2-基氨基   2-甲基苯基   148   吡啶-3-基氨基   2-甲基苯基   149   吡啶-4-基氨基   2-甲基苯基   150   嘧啶-2-基氨基   2-甲基苯基   151   嘧啶-4-基氨基   2-甲基苯基   152   嘧啶-5-基氨基   2-甲基苯基   153   吡喃-4-基氨基   2-氯苯基   154   哌啶-4-基氨基   2-氯苯基   155   吡啶-2-基氨基   2-氯苯基   156   吡啶-3-基氨基   2-氯苯基   157   吡啶-4-基氨基   2-氯苯基   158   嘧啶-2-基氨基   2-氯苯基   159   嘧啶-4-基氨基   2-氯苯基   160   嘧啶-5-基氨基   2-氯苯基   161   吡喃-4-基氨基   4-氟苯基   162   哌啶-4-基氨基   4-氟苯基   163   吡啶-2-基氨基   4-氟苯基   164   吡啶-3-基氨基   4-氟苯基   165   吡啶-4-基氨基   4-氟苯基   166   嘧啶-2-基氨基   4-氟苯基   167   嘧啶-4-基氨基   4-氟苯基   168   嘧啶-5-基氨基   4-氟苯基
下列是制备包含类别II第三方面化合物的实施例。
2-(2-氯苄基)-3-[2-(四氢吡喃-4-基氨基)-嘧啶-4-基]-6，7-二氢- 5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮的制备：向2-(2-氯苄基)-3-(2-甲磺酰基- 嘧啶-4-基]-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，8，(0.10g， 0.26mmol)的NMP(2mL)溶液中添加氨基四氢吡喃(0.09mL， 0.78mmol)。在90℃搅拌1.5小时后，反应混合物用甲醇稀释(至 5mL)并通过反相液体色谱法(CH3CN/水/1％ TFA纯化，以得到44mg(40％) 的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.30(d，J＝5.1Hz，1H)， 7.39至7.12(m，4H)，6.57(d，J＝5.1Hz，1H)，4.10至3.94 (m，9H)，3.60-3.48(m，2H)，2.80至2.68(m，2H)，2.95至1.95 (m，2H)，1.65至1.50(m，2H)；ESI- MS：m/z(相对强度)426.0 (100，M++H)。
类别II的第四方面涉及R单元，其是取代的或未取代的芳氧基或 亚烷基芳氧基，它的非限制性实施例描述于本文下表VIII中。
                      表VIII   编号   R   R1   169   苯氧基   2-甲基苯基   170   2-氯苯氧基   2-甲基苯基   171   3-氯苯氧基   2-甲基苯基   172   2，6-二氯苯氧基   2-甲基苯基   173   2-甲基苯氧基   2-甲基苯基   174   2，6-二甲基苯氧基   2-甲基苯基   175   2-氟代苯氧基   2-甲基苯基   176   2，6-二氟代苯氧基   2-甲基苯基   177   苯氧基   2-氯苯基   178   2-氯苯氧基   2-氯苯基   179   3-氯苯氧基   2-氯苯基   180   2，6-二氯苯氧基   2-氯苯基   181   2-甲基苯氧基   2-氯苯基   182   2，6-二甲基苯氧基   2-氯苯基   183   2-氟代苯氧基   2-氯苯基   184   2，6-二氟代苯氧基   2-氯苯基   185   苯氧基   4-氟苯基   186   2-氯苯氧基   4-氟苯基   187   3-氯苯氧基   4-氟苯基   188   2，6-二氯苯氧基   4-氟苯基   189   2-甲基苯氧基   4-氟苯基   190   2，6-二甲基苯氧基   4-氟苯基   191   2-氟代苯氧基   4-氟苯基   192   2，6-二氟代苯氧基   4-氟苯基
下列是制备包括类别II第四方面化合物的非限制性实施例，所述制 备使用中间体8按照上文所述的方案II进行。
2-(2-氯苄基)-3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a] 吡唑-1-酮的制备(8)：向苯酚(0.18g，1.00mmol)的THF(4mL)溶液 添加氢化钠(0.10g 60％的矿物油分散体，1.60mmol)。在室温搅拌5 分钟后，将2-(2-氯苄基)-3-(2-甲磺酰-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑 并[1，2-a]吡唑-1-酮8，(0.21g，0.50mmol)的THF(5mL)溶液加入到 反应混合物中。在室温搅拌1.5小时后，混合物用饱和NaHCO3水溶液稀 释。水相用CHCl3萃取三次且合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤， 用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物通过二氧化硅(5％ MeOH/CHCl3)纯化以得到100mg黄色固体目标产物：1H NMR(300MHz， CDCl3)δ8.63(d，J＝5.4Hz，1H)，7.47(t，J＝7.8Hz，2H)， 7.40(d，J＝5.4Hz，1H)，7.29至7.10(m，7H)，4.16(t，J＝6.9 Hz，2H)，4.07(s，2H)，3.91(t，J＝6.9Hz，2H)，2.61(dddd，J＝ 6.9，6.9，6.9，6.9Hz，2H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)418.9(100， M++H)。
包括本发明类别III的化合物是具有下式的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮：

其第一方面涉及上文所述的R单元，R1单元是取代的或未取代的芳 基，而L单元是-[C(R12)2]nNR12[C(R12)2]n-，其非限制性实施例描述于本文 下表IX中。
                         表IX   编号   L   R   R1   193   -CH2NHC(O)-   苯氧基   2-甲基苯基   194   -CH2NHC(O)-   2-氯苯氧基   2-甲基苯基   195   -CH2NHC(O)-   3-氯苯氧基   2-甲基苯基   196   -CH2NHC(O)-   2，6-二氯苯氧基   2-甲基苯基   197   -CH2NHC(O)-   2-甲基苯氧基   2-甲基苯基   198   -CH2NHC(O)-   2，6-二甲基苯氧基   2-甲基苯基   199   -CH2NHC(O)-   2-氟代苯氧基   2-甲基苯基   200   -CH2NHC(O)-   2，6-二氟代苯氧基   2-甲基苯基   201   -CH2NHC(O)-   苯氧基   2-氯苯基   202   -CH2NHC(O)-   2-氯苯氧基   2-氯苯基   203   -CH2NHC(O)-   3-氯苯氧基   2-氯苯基   204   -CH2NHC(O)-   2，6-二氯苯氧基   2-氯苯基   205   -CH2NHC(O)-   2-甲基苯氧基   2-氯苯基   206   -CH2NHC(O)-   2，6-二甲基苯氧基   2-氯苯基   207   -CH2NHC(O)-   2-氟代苯氧基   2-氯苯基   208   -CH2NHC(O)-   2，6-二氟代苯氧基   2-氯苯基   209   -CH2NHC(O)-   苯氧基   4-氟苯基   210   -CH2NHC(O)-   2-氯苯氧基   4-氟苯基   211   -CH2NHC(O)-   3-氯苯氧基   4-氟苯基   212   -CH2NHC(O)-   2，6-二氯苯氧基   4-氟苯基   213   -CH2NHC(O)-   2-甲基苯氧基   4-氟苯基   214   -CH2NHC(O)-   2，6-二甲基苯氧基   4-氟苯基   215   -CH2NHC(O)-   2-氟代苯氧基   4-氟苯基   216   -CH2NHC(O)-   2，6-二氟代苯氧基   4-氟苯基
包括本发明类别II第一方面的化合物可由本文概述于以下方案III 的步骤制备。
                         方案III

试剂和条件：(a)NaOH，H2O，CH2Cl2；室温，3小时。

试剂和条件：(b)H2，Pd/C，MeOH；室温，16小时。

试剂和条件：(c)EDCI，HOBt，DMF；室温，22小时。

试剂和条件：(d)DBU，DMF；室温，2小时。

试剂和条件：(e)NaOH，THF/H2O；室温，1.5小时。

试剂和条件：(f)EDCI，HOBt，DMF；室温，6天。

试剂和条件：(g)过硫酸氢钾，THF/MeOH；室温，1.5小时。

试剂和条件：(h)NaH，苯酚，THF；室温，1.5小时。
实施例3
1-氧-3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸2-氯-苯甲酰胺(17)
2-(2-乙酯基-乙酰基)-吡唑烷-1-羧酸苄酯的制备(10)：向氢氧化钠 (93.0mL的1N溶液93.0mmol)的溶液添加CH2Cl2(280mL)，随后加入 吡唑烷-1-羧酸苄酯(15.0g，61.8mmol)然後是3-氯-3-氧丙酸乙酯 (11.1mL，86.5mmol)。在室温下剧烈搅拌上述两相混合物3小时后，混 合物通过倾入饱和NH4Cl的水溶液结束反应。有机相用(MgSO4)干燥， 过滤并真空浓缩。粗残余物通过二氧化硅(10％EtOAc/己烷)纯化以得到 15.5g(78％收率)的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.38(s， 5H)，5.23(dd，J＝11.8，8.4Hz，2H)，4.19至4.07(m，4H)，3.65 (d，J＝15.9Hz，1H)，3.31(d，J＝15.9Hz，1H)，3.20至3.15 (m，2H)，2.20至2.04(m，2H)，1.26(t，J＝7.2Hz，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)321.0(100，M++H)。
3-氧-3-吡唑烷-1-基丙酸乙酯的制备(11)：用氮气冲洗2-(2-乙酯 基-乙酰基)-吡唑烷-1-羧酸苄酯，10，(15.5g，48.0mmol)的MeOH(300mL)溶液。将钯(1.5g，10％重量，吸附在活性炭上)添加到反应混 合物。将氢气球固定到烧瓶上，并且溶液在室温下搅拌16小时。该混合 物通过硅藻土过滤并用MeOH充分洗涤。将滤液真空浓缩以得到8.8g的 粗产物，无需进一步纯化即可使用。
3-[2-(2-甲硫基-嘧啶-4-羰基)-吡唑烷-1-基]-3-氧-丙酸乙酯的制备 (12)：向3-氧-3-吡唑烷-1-基丙酸乙酯11，(8.8g，47.7mmol)的DMF (165mL)溶液中添加2-甲硫基-嘧啶-4-羧酸(8.5g，50.1mmol)，接下来 是1-羟基苯并三唑(12.9g，95.5mmol)，然後是1-(3-二甲基氨丙基)- 3-乙基碳二亚胺盐酸盐(11.0g，57.3mmol)。在室温下搅拌反应混合物 22小时，然后将其倾入饱和NaHCO3的水溶液中。水相用EtOAc萃取三 次，并且合并的有机相用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩，以得到10.5mg 目标产物，无需进一步纯化即可使用。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1-氧-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸乙酯的制备(13)：向3-[2-(2-甲硫基-嘧啶-4-羰基)-吡唑烷- 1-基]-3-氧-丙酸乙酯，12，(9.6g，28.4mmol)的DMF(280mL)溶液中 添加1.8-二氮杂二环[5.4.0]-十一碳-7-烯(12.7mL，85.2mmol)。该反 应溶液在室温搅拌2小时，并用H2O稀释。水相用CHCl3萃取三次。合 并的有机相用饱和NH4Cl水溶液洗涤(x3)，用(MgSO4)干燥，过滤并真 空浓缩。残余物通过二氧化硅(5％MeOH/CHCl3)纯化以得到3.1g的目标 产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.67(d，J＝5.1Hz，1H)，7.61 (d，J＝5.1Hz，1H)，4.33(q，J＝7.2Hz，2H)，4.31(t，J＝7.2 Hz，2H)，4.09(t，J＝7.2Hz，2H)，2.74(dddd，7.2，7.2，7.2， 7.2Hz，2H)，2.61(s，3H)，1.35(t，J＝7.2Hz，3H)；ESI+ MS：m/z (相对强度)321.1(100，M++H)。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1-氧-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸的制备(14)：向3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1-氧-6，7-二氢- 1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-2-羧酸乙酯，13，(2.7g，8.4mmol)的THF (85mL)溶液中添加NaOH(42mL的1N溶液，42.0mmol)水溶液。在室 温下搅拌该溶液18小时后，用饱和NaHCO3水溶液稀释，并且水相用 CHCl3萃取两次。然后该水相用1N HCl水溶液酸化至pH 1，并用CHCl3 萃取两次。合并的有基层用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩以得到2.3g 的目标产物，无需进一步纯化即可使用。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1-氧-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸2-氯-苯甲酰胺的制备(15)：向3-(2-甲硫基-嘧啶-4-yl基)- 1-氧-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-2-羧酸，14，(0.23g， 0.78mmol)和2-氯苯甲酰胺(0.10mL，0.78mmol)的DMF(3mL)溶液中 添加1-羟基苯并三唑(0.21g，1.57mmol)，然後是1-(3-二甲基氨丙 基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.18g，0.94mmol)。在室温下搅拌反应溶液 6天，然后将其倾入饱和NaHCO3的水溶液中。水相用EtOAc萃取三次并 且合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液和H2O洗涤，用(MgSO4)干燥，过 滤并真空浓缩，以得到目标产物，无需进一步纯化即可使用：1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ9.49(bd s，NH)，8.69(d，J＝5.1Hz，1H)，8.16 (d，J＝5.1Hz，1H)，7.44至7.37(m，2H)，7.25至7.19(m， 2H)，4.70(d，J＝5.4Hz，2H)，4.41(t，J＝7.2Hz，2H)，4.14 (t，J＝7.2Hz，2H)，2.78(dd，J＝7.5，7.5，7.5，7.5Hz，2H)， 2.06(s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)415.9(100，M++H)。
3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1-氧-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸2-氯-苯甲酰胺的制备(16)：向3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-1- 氧-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-2-羧酸2-氯-苯甲酰胺，15， (0.20g，0.48mmol)的THF/MeOH(8mL的1∶1混合物)溶液中滴加 Oxone(过一硫酸钾)(的H2O 8mL)溶液。在室温下搅拌反应1.5小时 后，将溶液倾倒至饱和NaHCO3水溶液中。水相用CHCl3萃取(x3)。合 并的有机相用(MgSO4)干燥，过滤并在真空下浓缩，以得到目标产物， 无需进一步纯化即可使用。
1-氧-3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸2-氯-苯甲酰胺的制备(17)：向苯酚(0.09g，1.00mmol)的 THF(2mL)溶液添加氢化钠(0.05g 60％的矿物油分散体，0.80mmol)。 在室温搅拌5分钟后，将3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-1-氧-6，7-二氢- 1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-2-羧酸2-氯-苯甲酰胺，16，(0.18g， 0.40mmol)的THF(3mL)溶液加入到反应混合物中。在室温搅拌1.5小 时后，混合物用饱和NaHCO3水溶液稀释。水相用CHCl3萃取(x3)。合 并的有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤，用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓 缩。粗残余物通过二氧化硅(5％MeOH/CHCl3)纯化以得到110mg白色固 体的目标产物：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.59(bd s，NH)，8.75 (d，J＝5.1Hz，1H)，8.49(d，J＝7.2Hz，1H)，7.49至7.20(m， 9H)，4.72(d，J＝5.4Hz，2H)，4.04(t，J＝7.2Hz，2H)，3.98 (t，J＝7.2Hz，2H)，2.57(dddd，J＝6.9，6.9，6.9，6.9Hz， 2H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)462.1(100，M++H)；HRMS m/z对 C24H20ClN5O3(M+H+)的计算值462.1333，检测值462.1320。
下述是如类别III第一方面所述的化合物的非限制性实施例。
1-氧-3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-1H，5H-吡唑并[1，2-a]吡 唑-2-羧酸(2-氯苯基)-酰胺：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ11.53(s， NH)，8.79(d，J＝5.1Hz，1H)，8.50(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)， 8.41(d，J＝5.1Hz，1H)，7.48(t，J＝8.1Hz，2H)，7.41(dd，J ＝8.1，1.5Hz，1H)，7.34至7.21(m，5H)，7.03(ddd，J＝7.5， 7.5，1.8Hz，1H)，6.94至6.85(m，1H)，4.09(t，J＝7.2Hz， 2H)，4.01(t，J＝7.2Hz，2H)，2.62(dddd，J＝7.2，7.2，7.2， 7.2Hz，2H)；ESI+MS：m/z(相对强度)447.9(100，M++H)；HRMS m/z 对C24H20ClN5O3(M+H+)的计算值462.1333，检测值462.1320。
包括本发明类别IV的化合物是具有下式的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮：

其第一方面涉及上文所述的R单元，R1单元是取代的或未取代的芳 基，而L单元是-[C(R12)2]-其中两个R12单元合在一起以形成羰基单元 其非限制性实施例描述于本文下表X中。
                  表X   编号   R   R1   217   苯氧基   2-甲基苯基   218   2-氯苯氧基   2-甲基苯基   219   3-氯苯氧基   2-甲基苯基   220   2，6-二氯苯氧基   2-甲基苯基   221   2-甲基苯氧基   2-甲基苯基   222   2，6-二甲基苯氧基   2-甲基苯基   223   2-氟代苯氧基   2-甲基苯基   224   2，6-二氟代苯氧基   2-甲基苯基   225   苯氧基   2-氯苯基   226   2-氯苯氧基   2-氯苯基   227   3-氯苯氧基   2-氯苯基   228   2，6-二氯苯氧基   2-氯苯基   229   2-甲基苯氧基   2-氯苯基   230   2，6-二甲基苯氧基   2-氯苯基   231   2-氟代苯氧基   2-氯苯基   232   2，6-二氟代苯氧基   2-氯苯基   233   苯氧基   4-氟苯基   234   2-氯苯氧基   4-氟苯基   235   3-氯苯氧基   4-氟苯基   236   2，6-二氯苯氧基   4-氟苯基   237   2-甲基苯氧基   4-氟苯基   238   2，6-二甲基苯氧基   4-氟苯基   239   2-氟代苯氧基   4-氟苯基   240   2，6-二氟代苯氧基   4-氟苯基
包括本发明类别IV第一方面的化合物可由本文概述于以下方案IV 的步骤制备。
                      方案IV

试剂和条件：(a)正-丁基锂，DIPA，THF；-78℃，30分钟。

试剂和条件：(b)Dess-martin过碘烷，H2O；室温，1小时。

试剂和条件：(c)吡唑烷，TEA；回流，4小时。

试剂和条件：(d)I2，CCL4/吡啶；0℃，30分钟。

试剂和条件：(e)异丙基氯化镁，2-氯苯甲醛，THF；-40℃至0℃，1小时。

试剂和条件：(f)MnO2，CH2Cl2；室温，18小时。

试剂和条件：(d)过硫酸氢钾THF/MeOH；室温，1.5小时。

试剂和条件：(h)NaH，苯酚，THF；室温，1.5小时。
实施例4
2-(2-氯苯甲酰基)-3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-6，7-氢-5H-吡唑并 [1，2-a]吡唑-1-酮(25)
如下是用于制备2-甲硫基-嘧啶-4-甲醛的方法，改编自H.Bredereck 等人，Chem.Ber.，97，3407-3417(1964年)的步骤，该文献引入本文 以供参考。
在惰性气氛下向12L三颈烧瓶中加入N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙酰 (801g)和丙酮醛二甲基缩醛(779g)。将混合物加热至回流18小时，在 此过程中温度从约109℃至约80℃。冷却溶液，并加入甲醇(4L)以溶 解粗残余物。然后，将溶液冷却至20℃，并加入硫脲(892g， 11.7mol)。在将混合物搅拌15分钟后，在保持溶液的温度在18℃至 28℃范围内的同时，在1小时内以4等份加入甲醇钠(741g， 13.7mol)。将混合物在室温下搅拌5小时，冷却至20℃，然后在保持反 应温度在17℃至29℃范围内的同时，在1.25小时内加入甲基碘 (2kg)。在室温下持续搅拌18小时。在35℃ @5kPa(40torr)下加热去 除甲醇和未反应的甲基碘，以得到约4.46kg深色残余物，将其在14L 水和5L乙酸乙酯之间分配。水部分用乙酸乙酯二次萃取，合并有机层， 并在真空下浓缩，以得到685g油，其通过二氧化硅纯化得到522g 4-二 甲氧基甲基-2-甲硫基-嘧啶。
然后将上边得到的二甲基缩醛在60℃下1M HCl中加热3小时而 水解为游离醛。处理为中性溶液，使用乙酸乙酯萃取产物，得到347g粗 产物，该产物通过二氧化硅纯化以得到401g 2-甲硫基-嘧啶-4-甲醛。
3-羟基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-丙酸叔丁酯的制备：(18)向冷的 (0℃)的二异丙基胺(5.7mL，40.5mmol)的THF(130mL)溶液中滴加 正-丁基锂(16.2mL的2.5M己烷溶液，40.5mmol)。在0℃搅拌混合物 45分钟，然后将溶液冷却至-78℃。将叔-乙酸丁酯(5.5mL，40.5mmol) 滴加至反应混合物中。在-78℃搅拌40分钟后，滴加2-甲硫基-嘧啶- 4-甲醛(5.0g，32.4mmol)。在-78℃ 30分钟后，将溶液倾入饱和NH4Cl水溶液中。水相用EtOAc萃取。有机相用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓 缩。粗残余物通过二氧化硅(5％EtOAc/己烷，接下来是20％EtOAc/己烷) 纯化以得到7.2g(82％收率)的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 8.52(d，J＝5.1Hz，1H)，7.22(d，J＝5.1Hz，1H)，5.00(dd，J ＝8.4，3.6Hz，1H)，2.93(dd，J＝16.5，3.6Hz，1H)，2.70(dd，J ＝16.5，7.8Hz，1H)，2.58(s，3H)，1.46(s，9H)；ESI+ MS：m/z(相 对强度)271.1(85，M++H)。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧-丙酸叔丁酯的制备(19)：向3-羟 基-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-丙酸叔丁酯，18，(5.6g，20.9mmol)的 CH2Cl2溶液添加Dess-Martin过碘烷(10.7g，25.1mmol)，接下来是 H2O(0.5mL，25.1mmol)。在室温下搅拌1小时后，将溶液倾倒至饱和 Na2S2O4水溶液中。水相用CH2Cl2萃取，然后用EtOAc。合并的有机相用 (MgSO4)干燥，过滤并在真空下浓缩。粗残余物通过二氧化硅(10％EtOAc/ 己烷)以得到5.6g(95％收率)的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3) (观察3∶1烯醇∶酮基的混合物)烯醇互变异构体：δ12.34(s，OH)， 8.67(d，J＝5.1Hz，1H)，7.48(d，J＝5.1Hz，1H)，6.35(s， 1H)，2.62(s，3H)，1.57(s，9H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)269.1 (30，M++H)。
3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮的 制备(20)：向3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-3-氧-丙酸叔丁酯，19，(6.8g， 25.4mmol)，吡唑烷二盐酸盐(5.5g，38.1mmol)和4-埃分子筛(8.5g) 的甲苯溶液添加三乙胺(10.6mL，76.1mmol)。在回流下将反应混合物搅 拌4小时。该溶液通过硅藻土过滤并用醚洗涤。所得黄色固体通过二氧 化硅(10％MeOH/氯仿)纯化以得到5g的黄色固体目标产物：1H NMR (300MHz，CDCl3)δ8.72(d，J＝5.1Hz，1H)，7.62(d，J＝5.1 Hz，1H)，6.08(s，1H)，4.26(t，J＝7.5Hz，2H)，3.80(t，J＝ 7.8Hz，2H)，2.62(dddd，J＝7.5，7.5，7.5，7.5Hz，2H)，2.60 (s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)249.1(70，M++H)。
2-碘代-3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑- 1-酮的制备(21)：向冷的(0℃)3-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H- 吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，20，(4.7g，19.1mmol)，的四氯化碳/吡啶 (140mL的1∶1混合物)溶液滴加碘单质的四氯化碳/吡啶(80mL的1∶1 混合物)的溶液。在0℃搅拌30分钟后，移除冰浴并让混合物在室温 下搅拌。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物倾入饱和Na2S2O3水溶液 中。水相用EtOAc萃取(x3)。合并的有机相用(MgSO4)干燥，过滤并在 真空下浓缩。所得黄色固体通过硅胶色谱法(5％MeOH/氯仿)纯化以得到 4.2g目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.72(d，J＝5.1Hz， 1H)，7.97(d，J＝5.1Hz，1H)，4.31(t，J＝6.9Hz，2H)，4.10 (t，J＝6.9Hz，2H)，2.74(dddd，J＝6.9，6.9，6.9，6.9Hz， 2H)，2.62(s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)375.0(100，M++H)。
2-[(2-氯苯基)-羟甲基]-3-(2-2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H- 吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮的制备(22)：向冷的(-40℃)2-碘代-3-(2-甲 硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，21，(0.40g， 1.07mmol)的THF(3mL)的悬浮液滴加异丙基氯化镁(0.59mL的2M THF溶液，1.18mmol)。在-40℃搅拌30分钟后，滴加2-氯苯甲醛 (0.16mL，1.40mmol)的溶液。用1小时的时间将反应混合物加热至0 ℃。通过将混合物倾倒入饱和NH4Cl水溶液结束反应。用EtOAc萃取水 相三次，并将合并的有机层用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物 通过二氧化硅(10％ MeOH/氯仿)纯化以得到240mg(58％收率)的目标 产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.56(d，J＝5.1Hz，1H)，7.78 (dd，J＝7.2，1.8Hz，1H)，7.34至7.18(m，2H)，7.01(d，J＝ 5.1Hz，1H)，6.21(s，1H)，4.20-4.01(m，5H)，2.80至2.70(m， 2H)，2.58(s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)371.1(100，M++H)。
2-(2-氯苯甲酰基)-3-(2-2-甲硫基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2-a]吡唑-1-酮的制备(23)：向2-[(2-氯苯基)-羟甲基]-3-(2-甲硫 基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，22，(0.22g， 0.56mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中添加锰(IV)氧化物(0.30g， 3.40mmol)。在室温下搅拌18小时后，将混合物通过硅藻土过滤并用 CH2Cl2洗涤。将滤液真空浓缩。粗残余物通过二氧化硅(5％ MeOH/氯仿) 纯化以得到165mg(69％收率)的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3) δ8.69(d，J＝5.1Hz，1H)，7.78(dd，J＝7.2，1.8Hz，1H)，7.81 (d，J＝5.1Hz，1H)，7.46至7.33(m，4H)，4.44(t，J＝7.2Hz， 2H)，4.03(t，J＝7.2Hz，2H)，2.76(dddd，J＝7.2，7.2，7.2， 7.2Hz，2H)，2.63(s，3H)；ESI+ MS：m/z(相对强度)387.1(100， M++H)。
2-(2-氯苯甲酰基)-3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2-a]吡唑-1-酮的制备(24)：向2-(2-氯苯甲酰基)-3-(2-甲硫基-嘧 啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮，23，(0.15g， 0.39mmol))的THF/MeOH(3mL的1∶1混合物)溶液中滴加Oxone (过一硫酸钾)(0.72g，1.16mmol)的H2O(3mL)溶液。在室温下搅拌反 应1.5小时后，将溶液倾倒至饱和NaHCO3水溶液中。用CHCl3萃取水 相三次，并将合并的有机层用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。粗产物无 需进一步纯化即可使用。
2-(2-氯苯甲酰基)-3-(2-苯氧基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2-a]吡唑-1-酮的制备(25)：向苯酚(0.04g，0.43mmol)的THF(1mL) 溶液添加氢化钠(0.02g的60％矿物油分散体，0.32mmol)在室温搅拌 5分钟后，将2-(2-氯苯甲酰基-3-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-6，7-二氢- 5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮24，(0.09g，0.21mmol)的THF(2mL)溶液 加入到反应混合物中。在室温搅拌1.5小时后，混合物用饱和NaHCO3水 溶液稀释。水相用CHCl3萃取三次且合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液 洗涤，用(MgSO4)干燥，过滤并真空浓缩。粗残余物通过二氧化硅(10％ MeOH/CHCl3)纯化以得到30mg的目标产物。1H NMR(300MHz，CDCl3) δ8.77(d，J＝5.1Hz，1H)，8.04(d，J＝5.1Hz，1H)，7.49(t， J＝7.8Hz，1H)，7.41至7.20(m，9H)，4.00(t，J＝7.2Hz， 2H)，3.95(t，J＝7.2Hz，2H)，2.54(dddd，J＝7.5，7.5，7.5， 7.5Hz，2H)；ESI- MS：m/z(相对强度)431.1(100，M++H)。
下列是包含类别III第二方面的化合物的非限制性实施例。
2-(2-氯苄基)-3-[2-(2-甲氧基-1-甲基-乙氨基)-嘧啶-4-yl]-6，7-二 氢-5H-吡唑并[1，2-a]吡唑-1-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.14(d， J＝5.1Hz，1H)，7.38(d，J＝5.4Hz，1H)，7.18至7.10(m， 3H)，6.61(d，J＝5.4Hz，1H)，4.40至4.23(m，5H)，4.07(s， 2H)，3.45(d，J＝5.4Hz，2H)，3.38(s，3H)，2.82(dddd，J＝ 6.9，6.9，6.9，6.9Hz，2H)；ESI-MS：m/z(相对强度)413.9(100， M++H)。
已发现，本文上面所列出和描述的化合物在许多情况下在低于1微 摩尔(μM)的量上具有活性(在本文如下描述的基于细胞的检测中的 IC50，或本文所引用的其它指标)。
配制人员欲治疗的各种疾病状态或状况需要不同水平或含量的本发明 所述的化合物以达到治疗水平。配制人员可通过本领域技术人员已知的任 何测试方法来确定这个量。
受细胞因子活性影响的疾病
下列的疾病受存在的不可取的细胞外细胞因子含量的影响。
A)本发明的类似物致力于阻断白介素-1(IL-1)的细胞外释放， 而白介素-1被暗示为造成多数疾病状态，特别是，类风湿性 关节炎，1，2，3骨关节炎，4，5，6，7，8，9以及其它与结缔组织降解(牙 周病、肌肉退化)相关的疾病状态的分子。10
B)本发明的类似物还致力于阻断显示为被细胞因子所增强的环加 氧酶-2(COX-2)的细胞外释放。11据称受COX-2影响的疾病 状态和状况包括发烧、不适、肌痛和头痛。12
C)本发明的类似物进一步致力于阻断肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 的细胞外释放。这些促炎性细胞因子被暗示为在许多疾病状态 或综合症状特别是，类风湿性关节炎、骨关节炎、由内霉素引 起的急性或慢性炎症、或过敏性肠炎(IBD)、节段性回肠炎和 溃疡性结肠炎、败血病性休克、心肺功能异常、急性呼吸道疾 病和恶病质中的重要媒介物。
D)本发明的类似物是有效的拮抗剂，能够调整、控制、或换句话 讲减轻不必要的细胞因子或过量的细胞因子的过量的释放，或 能用来治疗其它与细胞因子活性相关的疾病状态。与细胞因子 活性相关的疾病或疾病状态的非限制性实施例包括充血性心力 衰竭、高血压；13慢性阻塞性肺病(COPD)和败血病性休克； 14肺结核、成人呼吸窘迫综合征、气喘病；15动脉硬化症；16 肌肉退化和牙周病；17恶病质、Reiter综合征、痛风、急性 滑膜炎、摄食障碍、特别是食欲不振和易饿病；18发烧、不 适、肌痛和头痛。19
此外，其它的疾病状态已经与细胞因子活性关联起来。与炎性细胞因 子不必要的或过度的释放相关的疾病、疾病状态、综合征(急性或慢性 的)的非限制性实施例包括糖尿病20和HIV/AIDS。21
下列是在细胞因子的过度活性、过度表达和不必要的细胞外释放和疾 病以及疾病状态之间相关联的非限制性实施例。
充血性心力衰竭
已在患有由于局部缺血或特发性心肌病引起的晚期心力衰竭的患者身 上发现，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，以及其它促炎性细胞因子，特别是， 白介素-1β(IL-1β)和IL-6。22，23，24，25例如，Aukrust等人26已发现患有 充血性热衰竭的患者具有提高的炎性细胞因子，特别是，TNF-α，IL-1β血 浆含量。
Behr等人已发现，27大鼠的容积过载充血性心力衰竭与细胞因子、单 核细胞化学引诱物蛋白-1(MCP-1)的表达和结合受体的改变相关。因 此，非常确定的是细胞因子的抑制，例如，通过如本发明所述的6，7-二 氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮，其抑制炎性细胞因子的细胞外释放，是 有效的作为控制、调节、或换句话讲调整充血性心力衰竭或其它与细胞外 细胞因子不必要的释放有关的心脏病的方法。
节段性回肠炎
影响肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性的化合物，例如，如本发明所述 的选择性类似物，已显示具有调节节段性回肠炎的能力。
例如，Stack等人28使双盲试验法的患者接触遗传工程的人类对 TNF-α，CDP571的抗体。一剂5mg/kg注射的TNF-α活性调节抗体在2 周内减少节段性回肠炎中疾病活性。诸如这些的资料建议抑制TNF-α，例 如，通过抗体或其它因子如抑制细胞因子活性的化合物，在处理节段性回 肠炎方面是有效的方法。能够抑制TNF-α的本发明化合物适用于治疗节段 性回肠炎的方法。
配制人员欲治疗的每一种疾病状态或状况需要不同水平或含量的本文 所述的化合物以达到治疗水平。配制人员可通过本领域技术人员已知的任 何测试方法来确定这个量。
下列是涉及细胞因子活性和疾病或疾病状态之间关联的文献，并引入 本文以供参考。
1.Dinarello，C.A.等人，Rev Infect Disease，6：51， (1984)。
2.Maini，R.E.，The Lancet，354：1932，(1999)。
3.Weinblatt，M.E.，New England Journal of Medicine，340， 253，(1999)。
4.Pelletier和Pelletier，J Rheum，16：19，(1989)。
5.Pelletier等人，Am J Path，142：95，(1993)。
6.Farahat等人，Ann Rheum Dis，52：870，(1993)。
7.Tiku等人，Cell Immunol，140：1，(1992)。
8.Webb等人，O and C，5：427，(1997)。
9.Westacott等人，O and C，8：213，(2000)。
10.Howells，Oral Diseases，1：266，(1995)。
11.M.K.O’Banion等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，89， 4888(1998)。
12.Beisael，American Journal of Clinical Nutrition， 62：813，(1995)。
13.Singh，等人，Journal of Hypertension，9：867(1996)；
14.Dinarello，C.A.，Nutrition 11：492(1995)；
15.Renzetti，等人Inflammation Res.46：S143；
16.Elhage，等人，Circulation 97：242(1998)；
17.Howells，Oral Dis.1：266(1995)；
18.Holden，等人，Medical Hypothesis 47：423(1996)；
19.Beisel，American Journal of Clinical Nutrition，62：813 (1995)。
20.McDaniel等人，Proc Soc，Exp，Biol Med，211：24， (1996)。
21.Kreuzer等人，Clinical Experiments Immunology，45：559， (1997)。
22.Levine B，Kalman J，Mayer L，等人Elevated circulating levels of tumor necrosis factor in severe chronic heart failure。New England Journal of Medicine，323，236-241 (1990)。
23.Dutka DP，Elborn JS，Delamere F，等人，Tumor necrosis factor alpha in severe congestive cardiac failure。 British Heart Journal，70 141-143(1993)。
24.Torre-Amione G，Kapadia S，Lee J，等人Tumor necrosis factor-αand tumor necrosis factor receptors in the failing human heart。Circulation，93，704-711(1996)。
25 Packer M.Is tumor necrosis factor an important neurohormonal mechanism in chronic heart failure？ Circulation，92，1379-1382(1995)。
26.Pl Aukrust等人，Cytokine Network in Congestive Heart Failure Secondary to Ischemic or Idiopathic Dilated Cardiomyopathy，American Journal of Cardiology，83，376- 382(1999)。
27.Behr TM等人，Monocyte Chemoattractant Protei-1 is Upregulated in Rats with Volume-Overload Congestive Heart Failure，Circulation，102，1315-1322(2000)。
28.Stack，W A；Mann，S D；Roy，A J；等人，The Lancet；2月 22日，1977；349，9051。
本发明还涉及化合物的形式，其在正常人类或高等哺乳动物的生理学 条件下可释放本发明所述的化合物。这方面的一个迭代包括本发明所述类 似物的可药用的盐。配制人员，为了与递送模式、赋形剂等相容的目的， 可选择本类似物的一种成盐形式而不选另一种，因为该化合物自身是能缓 和本发明所述的疾病过程的活性物质种类。
前体药物形式
与这个方面相关的是本发明类似物的各种前体或“前药”形式。希望 将本发明的化合物配制化学物质，其自身不是本文所述的拮抗黑素聚集激 素的拮抗剂，但当它们被递送至人类或高等哺乳动物体内时，它们为本类 似物的形式，能通过身体正常功能，尤其是存在于胃、血清中的酶的催化 而发生化学反应，所述化学反应可释放母体类似物。术语“前药”涉及这 些物质种类，其在体内被转化为活性药物。
本发明的前药可具有任何适宜配制人员的形式，例如，酯是常见的前 药形式。然而在本文的情况下，前药可能必需以其中共价键被存在于目标 位点的酶的作用而断裂的形式存在。例如，C-C共价键可选择性的被一种 或多种在所述目标位点的酶断裂并且，因此可以使用除了易于水解的前 体，特别是酯、酰胺等等以外形式的前药。
对本发明的目的，术语“治疗学上适宜的前药”在本文定义为“黑素 聚集激素拮抗剂，其以便于在体内转变成治疗学活性物质的形式的方式被 改性，而不管是用单一或用多种生物转化的方法，当与前药所作用的人类 或哺乳动物的组织相接触时，没有不适当的毒性、刺激性或变应性反应， 并且获得预期的治疗结果。”
前药衍生物的详述可见于下文，引入本文以供参考：
a)Design of Produrgs，H.Bundgaard编辑，(Elsevier， 1985)；
b)Methods in Enzymology，K.Widder等人编辑42，309- 396，(Academic Press，1985)；
c)Textbook of Drug Design and Development第5章， Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard编辑，“Design and Application of Prodrugs”，113-191(1991)；
d)H.Bundgaard的Advanced Drug Delivery Reviews，8，1- 38(1992)；
e)N.Kakeya等人的Chem Pharm Bull，32，692(1984)。
制剂
本发明也涉及包括依照本发明的炎性细胞因子释放抑制化合物的组合 物或制剂。一般地，本发明的组合物包括：
a)有效量的一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物，其能有效的抑制炎性细胞因子 的释放；和
b)一种或多种可药用的赋形剂。
对于本发明的目的，术语“赋形剂”和“载体”遍及本发明的描述中 可互换使用，所述术语在本文中是指“能用于实施配制安全有效的药物组 合物的成分”。
配制人员将会理解，赋形剂主要用于递送安全、稳定和官能化的药 物，它们不仅作为总递送赋形剂的一部分，也是用于使受体有效吸收活性 成分的工具。赋形剂可以作为惰性填充剂而简单直接地发挥作用，或者如 本发明使用的，赋形剂可以是部分的pH稳定系统或包衣，以保证成分安 全地递送至胃。配制人员也可利用如下事实，即本发明的化合物具有改进 的细胞效力、药动学性质以及改进的口服生物利用度。
本发明还涉及包括依照本发明的炎性细胞因子释放抑制化合物的前体 或“前药”形式的组合物或制剂。对本发明的目的而言，当其涉及服用化 学个体的患者时，该化学个体在体内转变成6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]- 吡唑-1-酮，术语“前药”、“衍生物”、和“前体细胞”被认为是可互 换的并且代表相同的概念。通常，本发明的这些包括前体的组合物包括：
a)有效量的一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮的衍生物或前药，其充当在体内释放相应的 能有效的抑制炎性细胞因子的释放的类似物；和
b)一种或多种可药用的赋形剂。
本发明还涉及有效的提供镇痛作用，包括依照本发明的炎性细胞因子 释放抑制化合物的组合物或制剂。一般地，本发明的组合物包括：
a)有效量的一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物或前药，其能有效的抑制炎性细 胞因子的释放；
b)有效量的一种或多种具有疼痛缓解性能的化合物；和
c)一种或多种可药用的赋形剂。
下列是具有疼痛缓解性能的化合物或有效地提供疼痛减轻并且能够适 宜地与本发明化合物化合的化合物的非限制性实施例：
对乙酰氨基酚、阿司匹林、氟苯水杨酸、安乃近、布洛芬、萘普生、 非诺洛芬、芬布芬、酮洛芬、氟比洛芬、消炎痛、酮咯酸、双氯芬酸、氟 喹氨苯酯、吡罗昔康、塞来考昔和罗非考昔。
下列是可与本发明化合物化合的非限制性辅助成分：咖啡因、相容的 安非他明、相容的抗组胺剂、相容的抗抑郁药。
此外，可化合鸦片麻醉止痛药以形成可药用的组合物，例如，羟可酮 (Percadan，Percacet，奥施康定、镇痛药)、哌替啶/甲基哌啶(度冷 丁)、美沙酮(美沙酮、盐酸美沙酮制剂)、利富吩(左吗南、酒石酸左 吗南制剂)、二氢吗啡酮(盐酸二氢吗啡酮制剂)和丁丙诺啡(丁丙诺 啡)。
术语“有效量”在本文定义为“能实现所需的药用结果但也安全的医 疗实践范围以内的含量”例如，长久已知，某些药物活性化合物的使用， 特别是，麻醉剂，可导致肉体上或精神上的依赖性。本发明组合物所包括 的含量可以是不同的量，这取决于活性成分、活性成分活性水平、和由测 试确定的习惯和实践或长期以来被医疗实践所公认的那些。
配制人员将会理解，赋形剂主要用于递送安全、稳定和官能化的药 物，它们不仅作为总递送赋形剂的一部分，也是用于使受体有效吸收活性 成分的工具。赋形剂可以作为惰性填充剂而简单直接地发挥作用，或者如 本发明使用的，赋形剂可以是部分的pH稳定系统或包衣，以保证成分安 全地递送至胃。配制人员也可利用如下事实，即本发明的化合物具有改进 的细胞效力、药动学性质以及改进的口服生物利用度。
使用方法
本发明还涉及用于控制一种或多种引发炎症的细胞因子的量的方法， 所述细胞因子包括白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介 素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)，从而控制、调节或缓和被细胞外炎性 细胞因子的量影响的疾病状态的方法。本方法包括给人类或高等哺乳动物 施用有效量的包括一种或多种依照本发明的炎性细胞因子抑制剂组合物的 步骤。
因为本发明的炎性细胞因子抑制剂能以一定的方式递送以到达多于一 个的控制位点，所以它们可以同时调节多于一种的疾病状态。通过控制或 抑制炎性细胞因子抑制剂，从而调节过度的细胞因子活性而被影响的疾病 的非限制性实施例包括骨关节炎、类风湿性关节炎、糖尿病、人类免疫缺 陷病毒(HIV)感染。
此外，现已令人惊讶的发现本发明的类似物(化合物)能够给人类和 高等哺乳动物提供镇痛。同样的，本发明涉及用于给人类或高等哺乳动物 提供镇痛和/或疼痛缓解的方法，该方法包括给所述人类或高等哺乳动物 服用有效量上文所述的6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮的步骤。
本发明还包括用于给人类或高等哺乳动物提供镇痛和/或疼痛缓解的 方法，该方法包括该方法包括给所述人类或高等哺乳动物服用药物组合物 的步骤，所述药物组合物包括：
a)有效量的一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物，其能有效的抑制炎性细胞因子 的释放；
b)有效量的一种或多种具有疼痛缓解性能的化合物；和
c)一种或多种可药用的赋形剂。
本发明方法的第三方面涉及减少人类或高等哺乳动物牛皮癣，所述方 法包括给人类或高等哺乳动物服用有效量上文所述的6，7-二氢-5H-吡唑 并[1，2a]吡唑-1-酮的步骤。非常确切的是细胞因子活性的控制直接涉及 牛皮癣的形成，并且该活性的抑制可用作治疗以控制该病症。例如，参 见：
Lamotalos J.，等人，“Novel Biological Immunotherapies for Psoriasis.”Expert Opinion Investigative Drugs；(2003；12， 1111-1121。
本发明包括用于控制人类和高等哺乳动物体内环加氧酶-2(COX-2) 细胞因子的细胞外释放的方法，所述方法包括给所述人类或高等哺乳动物 服用一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮及 其衍生物的步骤。
本发明包括用于控制人类和高等哺乳动物体内肿瘤坏死因子-α(TNF- α)，的细胞外释放，所述方法包括给所述人类或高等哺乳动物服用一种或 多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物的 步骤。
本发明包括用于控制人类或高等哺乳动物疾病或疾病状态的方法，所 述疾病或疾病状态选自充血性心力衰竭；高血压；慢性阻塞性肺病(COPD) 和败血性休克综合征；肺结核、成人呼吸窘迫症和哮喘；动脉硬化症；肌 肉衰退和牙周病；恶病质、Reiter综合征，痛风、急性滑膜炎、食欲不 振、易饿病；发烧、不适、肌痛和头痛，所述方法包括给所述人类或高等 哺乳动物服用一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡 唑-1-酮及其衍生物的步骤。
本发明包括用于防止人类或高等哺乳动物体内炎性细胞因子升高的血 浆含量的方法，其中所述细胞因子选自TNF-α、IL-1β和IL-6，因此控 制或处理人类和高等哺乳动物充血性心力衰竭，所述方法包括给所述人类 或高等哺乳动物服用一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物的步骤。
本发明包括通过控制细胞因子的细胞外释放，用于治疗人节段性回肠 炎或减轻其病症的方法，所述方法包括给所述人服用一种或多种如本发明 所述的6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物的步骤。
本发明还包括用于治疗人牛皮癣的方法，所述方法包括给所述人服用 药物组合物的步骤，所述药物组合物包括：
a)有效量的一种或多种如本发明所述的6，7-二氢-5H-吡唑并 [1，2a]吡唑-1-酮及其衍生物，其能有效地用于抑制和/或控制 炎性细胞因子的释放并因此控制牛皮癣；和
b)一种或多种可药用的赋形剂。
对本发明的目的而言，术语“有效量”当它涉及递送到需要治疗的患 者的一种或多种6，7-二氢-5H-吡唑并[1，2a]吡唑-1-酮时，在本文中定义 为，“药物活性化合物的量，其引起病症的减轻或当直接测定时，抑制细 胞因子活性，例如，通过实验室试验或方法，或间接地，例如，通过患者 没有经历不可取的疾病或疾病状态病症的能力反映出来。”所述病症不可 避免地取决于一种或多种因子，特别是，细胞因子活性水平、患者的年 龄、涉及的疾病的程度、存在的其它疾病或疾病状态、期望的疗效(当为 慢性病时，完全治愈或当为急性病症时，暂时缓解)。公认的是，本发明 的组合物可以多种剂量递送，并因此，如果需要的话，有效量可以患者为 依据，为患者确定。
方法
可对本发明的化合物进行功效评估，例如细胞因子抑制常数Ki的测 量，且可通过任何配制人员选用的方法获得IC50值。
合适的检测方法的非限制性实施例包括：
i)紫外-可见光基质酶检测，描述于L.Al Reiter，Int.J. Peptide Protein Res.，43，87-96(1994)。
ii)荧光基质酶检测，描述于Thornberry等人，Nature，356， 768-774(1992)。
iii)PBMC细胞检测，描述于2001年3月20日公布的 Batchelor等人的U.S.6,204,261 B1。
上述所有文献均引入本文以供参考。
此外，肿瘤坏死因子TNF-α的抑制可通过使用脂多糖(LPS)模拟人 单核细胞(THP-1)来测量，其描述于：
i)K.M.Mohler等人，“ProttectionAgainst a Lethal Dose of Endotoxin by an Inhibitor of Tumour Necrosis Factor Processing”Nature，370，218-220(1994)。
ii)公布于2001年10月2日的Cirillo等人的 U.S.6,297,381 B1，该文献引入本发明以供参考，并在本发明 如下的相关部分复述。
细胞因子产量的抑制可通过测量在脂多糖模拟THP细胞中的TNF-α 的抑制而观察到。所有的细胞和试剂在RPMI1640中用苯酚红和L-谷酰 氨稀释，补充以附加的L-谷氨酰胺(总量：4mM)、青霉素和链霉素(各 50单位/mL)和胎牛血清(FBS3％)(GIBCO，最终的所有浓度)。检测在 无菌条件下进行，只有测试化合物制剂是非无菌的。最初的原料溶液制备 于DMSO，随后被稀释为RPMI 1640，其浓度比期望的最终检测浓度高2 倍。将融合的THP.1细胞(2×106细胞/mL，最终浓度；American Type Culture Company，Rockville，Md.)加入到包含125μL测试化合物(2 倍浓度)的96孔聚丙烯圆底培养基板(Costar 3790；无菌)或DMSO 赋形剂(对照物，空白物)中。DMSO浓度最终不应超过0.2％。细胞混合 物在37℃，5％ CO2中预培养30分钟，然后用脂多糖(LPS，最终浓度 为1μg/mL；Sigma L-2630，得自大肠杆菌血清型0111.B4；在-80℃， 以1mg/mL原料在内毒素筛选的稀释的H2O赋形剂中储存)刺激。空白物 (未刺激的)接受H2O赋形剂；最终培养体积是250μL。如上所述，继续 培养(4小时)。通过将板在室温下，离心5分钟而结束检测，其中离 心转速为167.5rad/s(1600rpm)(4033g)；将上清液转移至干净的96 孔板并在-80℃储存，直至用市售的ELISA套盒(Biosource #KHC3015， Camarillo，Ca.)分析人TNF-α。IC50的计算值就是导致最大TNF-α产量 下降50％的测试化合物的浓度。
本发明的化合物已令人惊讶的发现可有效地提供镇痛、或换句话讲为 人类或高等哺乳动物缓解疼痛。用于评价疼痛和用于测量化合物实现镇痛 的有效量的一个便利的方法，并且因此，提供用于测定本发明药物组合物 包括的化合物的量以及用于本文所述方法所必需的化合物的量的方法，是 下文所述的大鼠热痛觉过敏模型。
大鼠热痛觉过敏模型，即，“哈格里夫斯模型”[Hargreaves，K.， 等人，Pain，(1988年)，32：77-88]，被用于确定在内脚底注射角叉 菜胶后，系统的服用测试化合物削弱痛觉过敏反应的水平。
痛觉过敏测试方法：
Sprague-Dawley雄性大鼠称重为100g至150g并且每鞋盒笼装两 只，使用带有控温、控制湿度和有规律的光线循环的卫生、通风的动物房 间。鼠的食物和水没有限制。动物在使用前用一周适应环境。所有使用的 动物均依照美国农业部人道护理指导方针。
在研究的第一天，每一个动物适应测试仪器并且记录对辐射热源脚爪 缩回反应时间(PWL)基线。第二天，动物口服一剂赋形剂或测试化合物。 三十分钟后，每个动物接收0.1mL左后脚爪内脚底角叉菜胶(1.2％溶 液，w/v)注射。角叉菜胶注射四小时以后，动物回到测试仪器以确定红 肿的脚爪的PWL。然后动物用过量的二氧化碳人道地施以安乐死。
统计分析数据：计算每个动物PWL前后的变化。在处理组这些两个 端点之间的统计学比较，以及预处理测量作为基线共变，通过带有处理条 件的ANCOVA模型进行。
在发明详述中引用的所有文献的相关部分均引入本文以供参考；任何 文献的引用并不可理解为是对其作为本发明的现有技术的认可。
尽管已用具体实施方案来说明和描述了本发明，但对于本领域的技术 人员显而易见的是，在不背离本发明的精神和保护范围的情况下可作出许 多其它的变化和修改。因此，有意识地在附加的权利要求书中包括本发明 范围内的所有这些变化和修改。