发明领域

本发明涉及异唑啉和相关的化合物，涉及其制备的中间体和方 法，涉及含有它们的组合物，和它们的应用。

技术背景

巨噬细胞游走抑制因子(MIF)是最早记载的细胞因子之一，且是具 有多种细胞和生物活性的免疫调节蛋白(综述见：Swope等，Rev. Physiol.Biochem.Pharmacol.139，1-32(1999)；Metz等，Adv. Immunol.66，197-223(1997)；和Bucala，FASEB J.14，1607-1613  (1996))。最初，发现MIF由活化的淋巴样细胞分泌，抑制巨噬细胞 的随机迁移，且与迟发型超敏反应有关(George等，Proc.Soc.Exp. Biol.Med.，111，514-521(196)；Weiser等，J.Immunol. 126，1958-1962(1981)；Bloom等，Science，153：80-82(1966)； David，Proc.Nal.Acad.Sci.USA，56，72-77(1966)。还证实MIF 能增强巨噬细胞粘附，吞噬作用和破坏癌细胞的活性(Nathan等，J. Exp.Med.，137，275-288(1973)；Nathan等，J.Exp.Med.， 133，1356-1376(1971)；Churchill等，J.Immunol.，115，781-785 (1975))。重组MIF的可获得性，已经允许证实这些生物活性，和鉴 别其它的活性。

重组人MIF最初从人T细胞文库克隆(Weiser等，Proc.Natl. Acad.Sci.USA，86，7522-7526(1989))，并证实能激活血液来源 的巨噬细胞，在体外杀死细胞内的寄生虫和肿瘤细胞，刺激IL-1β和 TNFα表达，并诱导氧化亚氮合成(Weiser等，J.Immunol.， 147，2006-2011(1991)；Pozzi等，Cellular Immunol.， 145，372-379(1992)；Weiser等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA， 89，8049-8052(1992)；Cunha等，J.Immunol.，150，1908-1912 (1993))。尽管从几项这样的早期报道得到的结论，受到使用的重组 MIF制品中存在生物活性的促有丝分裂的污染物的混淆，已经在没有 该并发因子的其它研究中确立了MIF的有效的促炎症活性(综述见 Bucala，The FASEB，Journal 10，1607-1613(1996))。

更近的MIF研究已经利用纯化形式的重组MIF的生产和MIF-特异 性的多克隆和单克隆抗体的开发，以确立MIF在许多正常体内平衡的 和病理生理学的情境下的生物学作用(综述见Rice等，Annual Reports in Medicinal Chemistry，33，243-252(1998))。在这些 较近报道的最重要的观点中，已经认识到，MIF不仅仅是免疫系统的 细胞因子产物，而且是内分泌系统(尤其是脑垂体)的激素样产物。 该工作已经强调了MIF作为糖皮质激素(内源地释放的和治疗性地施 用的)的抗炎作用的反调节剂的有效活性，作用是MIF会抑制糖皮质 激素限制和抑制炎性反应的严重性的正常活性。因而，将内源的MIF 反应视作许多炎性疾病和状况的原因或恶化因素(综述见Donnelly等， Molecular Medicine Today，3，pp.502-507(1997))。

现在，除了它的众所周知的与迟发型超敏反应的关联外，已知MIF 还具有几种生物学功能。例如，如上所述，巨噬细胞和T细胞释放的 MI F能起脑垂体介质的作用，对糖皮质激素的生理浓度作出反应 (Bucala，FASEB J.，14，1607-1613(1996))。这会通过TNF-α，IL-1B， IL-6和IL-8水平的改变，导致对糖皮质激素免疫抑制活性的克服作 用。MIF的其它生物活性包括，调节受刺激的T细胞(Bacher等，Proc. Natl.Acad.Sci.USA，93，7849-7854(1996))，控制IgE合成 (Mikayama等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90，10056-10060 (1993))，功能上灭活p53肿瘤抑制蛋白(Hudson等，J.Exp.Med.， 190，1375-1382(1999))，调节葡萄糖和碳水化合物代谢(Sakaue等， Mol.Med.，5，361-371(1999))和弱化肿瘤细胞生长和肿瘤血管发 生(Chesney等，Mol.Med.，5，181-191(1999)；Shimizu等，Biochem. Biophys.Res.Commun.，264，751-758(1999))。

白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)是由许多细胞(例如单核 细胞或巨噬细胞)生成的生物物质。已经证实，IL-1能介导许多被认 为对于免疫调节和其它生理状况例如炎症重要的生物活性。IL-1的众 多的已知的生物活性包括，激活T辅助细胞，诱导发热，刺激前列腺 素或胶原酶产生，中性粒细胞趋化性，诱导急性期蛋白和抑制血浆铁 水平。

存在许多疾病状态，其中过量的或失调的IL-1产生参与加重和/ 或造成疾病。它们包括类风湿性关节炎，骨关节炎，内毒素血症和/ 或中毒性休克综合征，其它急性或慢性炎性疾病状态例如由内毒素诱 发的炎性反应或炎性肠病，结核病，动脉粥样硬化，糖尿病，肌肉 退化，恶病质，银屑病关节炎，莱特尔氏综合征，类风湿性关节炎， 痛风，创伤性关节炎，风疹性关节炎和急性滑膜炎。

过量的或失调的TNF产生已经参与介导或加重许多疾病，包括类 风湿性关节炎，类风湿性脊椎炎，骨关节炎，痛风性关节炎和其它 关节炎状况；脓毒症，败血症性休克，内毒素性休克，革兰氏阴性 脓毒症，中毒性休克综合征，成人呼吸窘迫综合征，脑型疟，慢性 肺炎性疾病，硅肺，肺结节病，骨再吸收疾病，再灌注损伤，移植 物抗宿主反应，同种异体移植物排斥，感染例如流行性感冒引起的发 热和肌痛，感染或恶性肿瘤继发的恶病质，获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)继发的恶病质，AIDS，ARC(AIDS相关复征)，瘢痕瘤形成，瘢 痕组织形成，克罗恩病，溃疡性结肠炎或胃灼热。

白介素-8(IL-8)是由几种细胞类型生成的趋化因子，包括单核细 胞，成纤维细胞，内皮细胞和角质形成细胞。IL-1，TNF或脂多糖(LPS) 能诱导内皮细胞生成它。IL-8在体外刺激许多功能。已经证实，它具 有对嗜中性粒细胞，T-淋巴细胞和嗜碱粒细胞的化学引诱物性质。另 外，它能诱导来自正常的和特应性的个体的嗜碱粒细胞的组胺释放， 以及嗜中性粒细胞的溶酶体酶释放和呼吸爆发。还已经证实，IL-8能 增加Mac-1(CD11b/CD18)在嗜中性粒细胞上的表面表达，无需重新蛋 白合成，这可以有助于嗜中性粒细胞向血管内皮细胞的增强的粘附。 许多疾病的特征在于大量的嗜中性粒细胞浸润。与IL-8(它负责嗜中 性粒细胞进入炎性部位的趋化性)生成的增加有关的状况，可以从能抑 制IL-8生成的化合物获益。

IL-1和TNF能影响许多种类的细胞和组织，且这些细胞因子以及 其它白细胞衍生的细胞因子，是许多种类的疾病状态和状况的重要和 关键的炎性介质。抑制这些细胞因子，有助于控制、减轻和缓解许多 这样的疾病状态。

人MIF的三维晶体结构揭示，该蛋白作为同型三聚体存在(Lolis 等，Proc.Ass.Am.Phys.，108，415-419(1996)，且在结构上与 4-oxalocrotonate互变异构酶，5-羧甲基-2-羟基粘康酸盐，分支酸 变位酶和D-多巴色素互变异构酶有关(Swope等，EMBO J.， 17，3534-3541(1998)；Sugimoto等，Biochemistry，38，3268-3279 (1999))。最近，已经报道了人MIF和对羟基苯基丙酮酸之间形成的 复合物的晶体结构(Lubetsky等，Biochemistry，38，7346-7354 (1999)。发现底物结合到氨基末端的疏水腔，并与一个亚基中的Pro-1， Lys-32和Ile-64相互作用，与临近亚基中的Tyr-95和Asn-97相互 作用。已经报道了鼠MIF和(E)-2-氟-对羟基肉桂酸盐之间的类似的相 互作用(Taylor等，Biochemistry，38，7444-7452(1999))。使用 NMR的溶液研究，提供了进一步证据证实了对羟基苯基丙酮酸和氨基 端疏水腔中的Pro-1之间的相互作用(Swope等，EMBO J.， 17，3534-3541(1998))。

突变研究提供了Pro-1参与MIF的催化功能的有力证据。在使用 L-多巴色素甲基酯和对羟基苯基丙酮酸的测定中，删除Pro-1，或用 Ser(Bendrat等，Biochemistry，36，15356-15362(1997))、Gly (Swope等，EMBO J.，17，3534-3541(1998))或Phe (Hermanowski-Vosatka等，Biochemistry，38，12841-12849(1999)) 替代Pro-1，和给Pro-1添加N-端肽标签(Bendrat等，Biochemistry， 36，15356-15362(1997))，会消除MIF的催化活性。通过将Ala插 入Pro-1和Met-2之间，发现了类似的活性丧失(Lubetsky等， Biochemistry，38，7346-7354(1999)。Pro至Ser的MIF突变体， 表现出了糖皮质激素反调节活性(Bendrat等，Biochemistry， 36，15356-15362(1997))，且象Pro至Phe的突变体一样，完全能 抑制单核细胞趋化性(Hermanowski-Vosatka等，Biochemistry， 38，12841-12849(1999)。相反地，Pro至Gly的MIF突变体刺激活化 的嗜中性粒细胞中超氧化物产生的能力极大受损(Swope等，EMBO J.， 17，3534-3541(1998))。

已经将MIF表征为垂体前叶-衍生的能加强致死性内毒素血症的 激素(Bucala，Immunol.Lett.，1994，43，23-26；Bucala，Circ. Shock，1994，44，35-39)，能克服糖皮质激素-介导的对炎性和免疫反 应的抑制的因子(Calandra和Bucala，Crit.Rev.Immunol.， 1997，17，77-88；Calandra和Bucala，J.Inflamm.，1995，47， 39-51)，和作为促有丝分裂或抗原性刺激后T-细胞的活化剂(Bacher 等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，1996，93，7849-7854)。

已经证实，该细胞因子在调节免疫反应的范围中具有多种作用， 且与伤口修复和致癌作用过程中的细胞生长和分化有关。已经证实， 其表达在前列腺腺癌(Arcuri等，Prostate，1999，39，159-165； Meyer-Siegler和Hudson，Urology，1996，48，448-452)、小鼠结肠 癌(Takahashi等，Mol.Med.，1998，4，707-714)、脂多糖-诱导的 HL60细胞(白血病细胞系)(Nishihira等，Biochem.Mol.Biol.Int.， 1996，40，861-869)中升高，且在紫外线辐射处理后表达增高 (Shimizu等，J.Invest.Dermatol.，1999，112，210-215)。因此， 对MIF活性和/或表达的药理学调控，可能是病理学状况中的适当的 治疗干预点。

已经在类风湿性关节炎患者的滑液中检测到该蛋白(Onodera等， Cytokine，1999，11，163-167)，且它在炎症部位和从巨噬细胞的表 达，提示着它作为调节宿主防御中巨噬细胞的功能的介质的作用 (Calandra等，J.Exp.Med.，1994，179，1895-1902)。还已经发现， MIF的活性与人类的迟发型超敏反应和细胞免疫密切相关(Bernhagen 等，J.Exp.Med.，1996，183，277-282；David，Proc.Natl.Acad. Sci.U.S.A.，1966，56，72-77)。该蛋白还已经参与啮齿类动物 的神经功能和发育(Bacher等，Mol.Med.，1998，4，217-230； Matsunaga等，J.Biol.Chem.，1999，274，3268-3271；Nishio等， Biochim.Biophys.Acta.，1999，1453，74-82；Suzuki等，Brain Res.，1999，816，457-462)。

本领域需要发现和开发能起MIF抑制剂(例如，拮抗剂)作用的小 有机分子，且与较大聚合蛋白(例如，抗体)和基于核酸(例如，反义) 的治疗剂相比，其还具有小有机分子治疗剂的优点。鉴于抗-MIF抗体 在下述模型中的活性，低分子量MIF抑制剂的治疗潜力是相当大的： 内毒素-和外毒素-诱导的中毒性休克(Bernhagen等，Nature， 365，756-759(1993)；Kobayashi等，Hepatology，29，1752-1759 (1999)；Calandra等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.，95， 11383-11388(1998)；和Makita等，Am.J.Respir.Crit.Care Med. 158，573-579(1998)，T-细胞活化(Bacher等，Proc.Natl.Acad.Sci. USA.，93，7849-7854(1996)，自身免疫病(例如，移植物抗宿主疾 病，胰岛素依赖型糖尿病和各种形式的狼疮)包括类风湿性关节炎 (Kitaichi等，Curr.Eye Res.，20，109-114(2000)；Leech等， Arthritis Rheum.，42，1601-1608(1999)，伤口愈合(Abe等， Biochim.Biophys.Acta，1500，1-9(2000)和血管发生(Shimizum. 等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，264，751-758(1999)。能 表现出这样的活性的低分子量抗-MIF药物，可以提供胜过中和抗体和 基于核酸的试剂的临床优点，因为它们可以是口服活性的，或通常更 容易给药，具有更好的生物利用度，具有改善的生物分布，且通常生 产便宜得多。

相关领域

Markofsky的美国专利号4,933,464公开了制备3-苯基异唑 啉和3-苯基异唑和有关产物的方法。

Cohan等的美国专利号6,114,367公开了作为肿瘤坏死因子 (TNF)的抑制剂的异唑啉化合物。据称该异唑啉化合物可以用于抑 制有此需要的哺乳动物中的TNF，和治疗或缓解炎性状况或疾病。还 公开了包含这样的化合物的药物组合物。

Curuzu等，Collect.Czech.Chem.Commun.，56：2494-2499 (199)公开了3-取代的苯基-4，5-二氢异唑啉乙酸，包括3-(4-羟 基苯基)-4，5-二氢-5-异唑啉乙酸和3-(4-甲氧基苯基)-4，5-二氢 -5-异唑啉乙酸，并证实这2种化合物中的第一种缺少抗炎活性，而 第二种与在苯环的对位未取代的亲本化合物相比，在鹿角菜胶-诱导的 大鼠爪水肿测定中，这样的活性急剧降低。

Wityak等，J.Med.Chem.，40：50-60(1997)公开了糖蛋白 IIb/IIIa受体的异唑啉拮抗剂。

Kleinman等，″Striking effect of hydroxamic acid substitution on the phosphodiesterase type 4(PDE4)and TNF alpha inhibitory activity of two series of rolipram analogues： implications for a new active site model of PDE4″.J.Med.Chem. 41(3)：266-270(1998)，公开了尤其是下述化合物：[3-(3-环戊基 氧-4-甲氧基-苯基)-4，5-二氢-异唑-5-基]-乙酸和其甲基酯，以及 [3-(3-环戊基氧-4-甲氧基-苯基)-4，5-二氢-异唑-5-基]-N-羟基- 乙酰胺。

2003年12月10日授权给A1-Abed等的美国专利号6,492,428， 公开了具有MIF抑制剂活性的醌相关的化合物。

2003年7月29日授权给A1-Abed等的美国专利号6,599,938， 公开了具有MIF抑制剂活性的氨基酸/苯甲醛希夫碱化合物。

2003年7月29日授权给de Lassauniere等的美国专利号6,599, 903，公开了在药物组合物中的化合物。

2003年10月7日授权给de Lassauniere等的美国专利号6,630, 461，公开了在药物组合物中的化合物。

2003年1月9日公开的A1-Abed的美国专利申请公开号 2003/0008908，公开了在药物组合物中的化合物。

在本文中引用的所有内容，都为所有目的，整体引作参考。

发明简述

本发明的一个实施方案提供了具有式I或II的化合物：

和

其中B是氧或硫；且

每个R独立地定义如下：

R＝H，R1，或  III

其中在式I和式II中，至少一个R不是氢；

其中每个R1独立地是氢，烷基，环烷基，卤素基团，全氟烷基， 全氟烷氧基，链烯基，炔基，羟基，氧代基团，巯基，烷硫基，烷氧 基，芳基，杂芳基，芳氧基，杂芳氧基，芳烷基，杂芳烷基，芳烷氧 基，杂芳烷氧基，HO-(C＝O)-基团，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨 基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基， 芳基羰基，芳基氧羰基，烷基磺酰基或芳基磺酰基；

每个R2独立地是烷基，环烷基，卤素基团，全氟烷基，全氟烷氧 基，链烯基，炔基，羟基，氧代基团，巯基，烷硫基，烷氧基，芳基， 杂芳基，芳氧基，杂芳氧基，芳烷基，杂芳烷基，芳烷氧基，杂芳烷 氧基，HO-(C＝O)-基团，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨基甲酰基， 烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基，芳基羰基， 芳基氧羰基，烷基磺酰基或芳基磺酰基；

每个m独立地是0或1-20的整数；且

每个X独立地是碳或氮，其中当任何X是碳时，每个Y独立地如 下定义：

Y＝H，R1，或IV

其中每个Z独立地是氢，烷基，环烷基，卤素基团，全氟烷基， 全氟烷氧基，链烯基，炔基，羟基，氧代基团，巯基，烷硫基，烷氧 基，芳基，杂芳基，芳氧基，杂芳氧基，芳烷基，杂芳烷基，芳烷氧 基，杂芳烷氧基，HO-(C＝O)-基团，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，氨 基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基， 芳基羰基，芳基氧羰基，烷基磺酰基或芳基磺酰基；且

每个n独立地是0或1-4的整数；

其药学上可接受的盐和其药学上可接受的前药。

本发明的一个实施方案提供了一种方法，其包括，通过给对象施 用抑制有效量的上述化合物，抑制有此需要的哺乳动物对象中至少一 种选自MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ，TNF和其组合的细胞因 子的产生。

本发明的另一个实施方案提供了一种方法，其包括，通过给对象 施用抑制有效量的上述化合物，抑制有此需要的哺乳动物对象中的 ERK/MAP途径。

附图说明

参考附图，从下面的详细描述中，可以更完全地明白和更好地理 解本发明的各个其它的目的、特征和伴随的优点，在附图中，所有视 图中的同样的参照符指示着同样的或相应的部分，其中：

图1A显示了根据本发明的一个实施方案合成苯基系列A化合物 的一个合成方案；

图1B显示了根据本发明的一个实施方案合成苯基系列B化合物 的一个合成方案；

图2A显示了根据本发明的一个实施方案合成丙基系列A化合物 的一个合成方案；

图2B显示了根据本发明的一个实施方案合成丙基系列B化合物 的一个合成方案；

图3A显示了根据本发明的一个实施方案合成丁基系列A化合物 的一个合成方案；

图3B显示了根据本发明的一个实施方案合成丁基系列B化合物的 一个合成方案；且

图4显示了根据本发明的一个实施方案合成呋喃基系列化合物 的一个合成方案。

实施方案的详述

结合附图考虑，参考下面的详细描述，可以更好地理解从而更完 整领会本发明和它的许多伴随的优点。

本发明涉及异唑啉和有关的化合物，用于它们的制备的中间体 和方法，含有它们的组合物和它们的应用。更具体地，本发明涉及含 有主题化合物的药物组合物和主题化合物和组合物的医药应用。甚至 更具体地，本发明适用于预防和治疗人类的各种状况。

本发明的一个方面提供了一类异唑啉和异唑啉-有关的化合 物，药物组合物和有关的制备方法和它们在治疗和诊断中的应用。该 化合物具有巨噬细胞游走抑制因子(MIF)拮抗剂活性，和与MIF活性 影响的其它细胞因子有关的活性。该化合物能起MI F的抑制剂的作用， 且也能调控由MIF活性影响的其它细胞因子，包括 IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF。该化合物和组合物可以用于治疗 人或其它哺乳动物中的众多疾病，包括任意疾病状态，其由这样的哺 乳动物细胞(例如，但不限于，单核细胞和/或巨噬细胞)过量或失调 产生MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF加重或造成，或能通 过抑制ERK/MAP途径进行调控的任何疾病状态。

在下面的化学式中，使用取代基的上标，标示取代基名称(例 如，″R2″用于指R2-命名的取代基)，并使用下标来列举取代基在该分子 位置出现的次数(例如，“R2”或“(R)2”都用于指2个简称作″R″的取 代基)。

本发明涉及通式I或II的化合物

和

其中B是氧或硫，且每个″R″独立地定义为：

R＝H，R1，或III

条件是，每个″R″在式I或II中不能仅仅作为氢出现(即，式I 或II上的至少一个R是除氢以外的″R″取代基)，且任何B独立地是 氧或硫；任何R1独立地是氢，(C1-C6)烷基或一些其它的合适的取代基， 任何R2是胺，烷氧基或一些其它的合适的取代基；且″m″独立地是0或 1-20的整数；

每个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是对每个X独立地 定义为以下的取代基

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，卤素或一些其它的合适的取代基；且

″n″独立地是0或1-4的整数；

和其药学上可接受的盐和前药。

在一个实施方案中，对于具有上面和下面的式I和II的化合物， 当环″X″是氮而非碳时，该X氮不携带Y。例如，在该实施方案，Y基 团的数目可以对应着X碳的数目，即，1，2，3或4的数目。

在一个实施方案中，本发明排除了在通式I内且具有落入式IA 的化学结构的化合物：

其中

每个Y1独立地是氢或(C1-C6)烷基；

每个Y2独立地是Y1，羟基，卤素，-N3，-CN，-SH或-N(Y1)2；

Resa独立地是Y1，卤素，-N3，-CN，-OY1，-N(Y1)2，-SH，＝O，＝CH2或A， 且每个A独立地是被一个或多个独立的Y2取代基取代的苯基或芳香 环；Resb定义如下：

Resb＝

Y3独立地是Y1，A，-(CH2)-A，-N(Y1)2或-NY1Y5，每个Y5是饱和的 或不饱和的、直链的或支链的(C2-C18)烷基；且

Y4独立地是Y1，-OY1，-OY5，-N(Y1)2，-NY1Y5或A。

本发明也涉及通式I或II的化合物的药学上可接受的酸加成盐。

碱性的式I或II的化合物能与各种无机和有机酸形成广泛种类的 不同的盐。尽管为了给动物施用，这样的盐必须是药学上可接受的， 在实践中经常需要初步从反应混合物中分离式I或II的化合物，作为 药学上不可接受的盐，然后通过用碱性试剂处理，简单地将后者转化 回游离碱化合物，并随后将游离碱转化成药学上可接受的酸加成盐。 通过在水性溶剂介质或合适的有机溶剂例如甲醇或乙醇中，用基本上 当量的选择的无机或有机酸处理碱性化合物，能容易地制备本发明的 碱性化合物的酸加成盐。经过小心地蒸发溶剂，可以得到需要的固体 盐。用于制备前述的本发明的碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐 的酸，包括能形成无毒的酸加成盐的那些，即含有药理学上可接受的 阴离子的盐，例如氯化物，溴化物，碘化物，硝酸盐，硫酸盐，酸式 硫酸盐，磷酸盐，酸式磷酸盐，乙酸盐，乳酸盐，柠檬酸盐，酸式 柠檬酸盐，酒石酸盐，酸式酒石酸盐，琥珀酸盐，马来酸盐，延胡索 酸盐，谷氨酸盐，L-乳酸盐，L-酒石酸盐，甲苯磺酸盐，甲磺酸盐， 葡糖酸盐，蔗糖盐，苯甲酸盐，甲磺酸盐，乙磺酸盐，苯磺酸盐，对 甲苯磺酸盐和巴莫酸盐(即，1，1′-亚甲基-二-(2-羟基-3-萘甲酸 盐))。

本发明也涉及该化合物的碱加成盐。可以用作制备那些酸性的通 式I或II的化合物的药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱，是能与这 样的化合物形成无毒的碱盐的那些。那些酸性的通式I或II的化合物， 例如，当取代基R，R1，R2或R3包括-COOH或四唑基团时，能与各种药 理学上可接受的阳离子形成碱盐。这样的盐的实例包括碱金属或碱土 金属盐，尤其是钠和钾盐。这些盐都通过常规方法制备。用作制备本 发明的药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱包括，能与本文所述的酸 性的式I或II化合物形成无毒的碱盐的那些。通过用含有需要的药理 学上可接受的阳离子的水性溶液处理对应的酸性化合物，然后蒸发得 到的溶液至干燥，优选地在减压下，可以容易地制备这些盐。或者， 通过将酸性化合物和需要的碱金属醇盐的低级烷醇溶液混合到一起， 然后以前述的相同方式，将得到的溶液蒸发至干，也可以制备它们。 在任一种情况下，优选地使用化学计量量的试剂，以确保反应完全和 最大的产率。这样的无毒的碱盐包括但不限于源自这样的药理学上可 接受的阳离子的那些，例如碱金属阳离子(例如，钾和钠)和碱土金属 阳离子(例如，钙和镁)，铵或水溶性的胺加成盐例如N-甲基葡萄糖 胺-(葡甲胺)和低级烷醇铵和药学上可接受的有机胺的其它碱盐。

本发明的化合物和前药可以以几种互变异构形式、几何异构体和 其混合物存在。所有这样的互变异构形式都包括在本发明的范围内。 互变异构体作为互变异构体的混合物存在于溶液中。在固体形式，通 常一种互变异构体占优势。即使仅仅描述一种互变异构体，本发明包 括本发明的化合物的所有互变异构体。

本发明也包括本发明的阻转异构体。阻转异构体指可以分离成旋 转受限制的异构体的本发明的化合物。本发明的化合物可以含有烯烃 样双键。当存在这样的键时，本发明的化合物作为顺式和反式构型和 其混合物存在。

本发明也包括同位素标记的化合物，其与通式I或II中所述的那 些相同，不同之处在于，一个或多个原子被具有与通常天然发现的原 子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代，可以掺入本发 明的化合物中的同位素的实例，包括氢，碳，氮，氧，磷，氟和氯各 自的同位素，例如2H，3H，13C，14C，15N，18O，17O，31P，32P，35S，18F和 36Cl。含有前述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明的化合物， 其前药和所述的化合物或所述前药的药学上可接受的盐，在本发明的 范围内。本发明的某些同位素标记的化合物，例如其中掺入了放射性 同位素例如3H和14C的那些，可以用于药物和/或底物组织分布测定。 氚标记的(即，3H)和碳-14(即，14C)同位素是特别优选的，因为它 们容易制备和检测。而且，用更重的同位素例如氘(即，2H)替换， 可以提供由更大的代谢稳定性产生的某些治疗优点，例如提高的体内 半衰期或降低的剂量需要，因此，在有些环境下可能是优选的。通常， 通过本文例如在实施例中公开的方法，通过用容易得到的同位素标记 的试剂替换未同位素标记的试剂，可以制备同位素标记的本发明的式 I或II化合物和其前药。

″合适的取代基″意指化学上和药学上可接受的官能团，即不消除 本发明的化合物的抑制活性的基团。本领域的技术人员可以常规地选 择这样的合适的取代基。合适的取代基的说明性的实例包括，但不限 于，卤素基团，全氟烷基，全氟烷氧基，烷基，环烷基，链烯基，炔 基，羟基，氧代基团，巯基，烷硫基，烷氧基，芳基或杂芳基，芳氧 基或杂芳氧基，芳烷基或杂芳烷基，芳烷氧基或杂芳烷氧基，HO-(C＝O)- 基团，氨基，烷基-和二烷基氨基，氨基甲酰基，烷基羰基，烷氧基羰 基，烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基，芳基羰基，芳基氧羰基，烷基 磺酰基，芳基磺酰基等。

更具体地，本发明也涉及具有通式I或II的化合物：

和

其中B是氧或硫，且每个″R″独立地定义：

R＝H，R1，或III

条件是，每个″R″在式I或II中不能仅仅作为氢出现，且独立地 在每个″R″中，任何B是氧或硫；且″m″独立地是0或1-20的整数；每 个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是如下为每个X独立地定 义的取代基

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2， -R1或A，且

″n″独立地是0或1-4的整数；

每个R1独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；(C1-C10) 杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6)烷基 -S-，(C1-C6)烷基-SO2，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，NO2，氨基，(C1-C6)烷基- 氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基 -(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基 -(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基 -(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)杂芳基-(C＝O)-，(C1-C10)杂环 -(C＝O)-，(C3-C10)环烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-， H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基 -NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)杂芳基 -NH-(C＝O)-，(C1-C10)杂环-NH-(C＝O)-，(C3-C10)环烷基-NH-(C＝O)-， (C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-，其中前述的(C3-C20)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一 个，可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6) 烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10) 杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代 (C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10) 环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基-SO2-，(C1-C6)烷基 -NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6)烷基]2-氨基，(C1-C6) 烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6) 烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN， (C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，(C1-C10)杂芳基-(C＝O)-，(C1-C10) 杂环-(C＝O)-，(C3-C10)环烷基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基 -O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷 基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-， (C1-C10)杂芳基-NH-(C＝O)-，(C1-C10)杂环-NH-(C＝O)-，(C3-C10)环烷基 -NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-；其中2个独立 地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所结合的任何氮原子一起， 形成3-40元环状杂环或杂芳环；

每个R2独立地选自氢，羟基，卤素，-N3，-CN，-SH，(R1)2-N-， (R3)-O-，(R3)-S-，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，(C3-C10) 环烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基和(C1-C10)杂环；其中前述的(C1-C6)烷 基，(C3-C10)环烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基和(C1-C10)杂环取代基中的 每一个，可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6) 烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C3-C10) 环烷基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，甲酰基，-CN，(C1-C6)烷基 -(C＝O)-，苯基-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，(C1-C6) 烷基-NH-(C＝O)-，[(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基 -[((C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基氨基，[(C1-C6) 烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-[((C1-C6) 烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-， H2N-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-NH-，[(C1-C6)烷基 -]2N-(C＝O)-NH-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，[(C1-C6) 烷基-]2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-HN-(C＝O)-NH-，(苯基 -)2N(C＝O)-NH-，苯基-HN-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(苯基 -)2N-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-NH-，(C1-C6) 烷基-O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-O-(C＝O)-NH-，苯基 -O-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，(C1-C6)烷基-SO2NH-，苯基-SO2NH-， (C1-C6)烷基-SO2-，苯基-SO2-，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6) 烷氧基，苯氧基，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-，苯基-(C＝O)-O-， H2N-(C＝O)-O-，(C1-C6)烷基-HN-(C＝O)-O-，[(C1-C6)烷基 -]2N-(C＝O)-O-，苯基-HN-(C＝O)-O-，(苯基-)2N-(C＝O)-O-；其中当所 述的R2苯基含有2个相邻的取代基时，这样的取代基可以任选地与它 们所结合的碳原子一起，形成5-6元碳环或杂环；其中所述含有苯基 可选物(alternative)的基团中的每一个，可以任选地被独立地选自下 述的1或2个基团取代：(C1-C6)烷基，卤素，(C1-C6)烷氧基，全卤代 (C1-C6)烷基和全卤代(C1-C6)烷氧基；

每个R3独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前 述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷 基取代基中的每一个，可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取 代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基， (C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基-O-， (C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-，(C1-C6)烷基 -SO2-，(C1-C6)烷基-NH-SO2-，-NO2，氨基，(C1-C6)烷基-氨基，[(C1-C6) 烷基]2-氨基，(C1-C6)烷基-SO2-NH-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-NH-，(C1-C6) 烷基-(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，苯基-(C＝O)-NH-，苯基 -(C＝O)-[((C1-C6)烷基)-N]-，-CN，(C1-C6)烷基-(C＝O)-，苯基-(C＝O)-， (C1-C10)杂芳基-(C＝O)-，(C1-C10)杂环-(C＝O)-，(C3-C10)环烷基-(C＝O)-， HO-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-O-(C＝O)-，H2N(C＝O)-(C1-C6)烷基-NH-(C＝O)-， [(C1-C6)烷基]2-N-(C＝O)-，苯基-NH-(C＝O)-，苯基-[((C1-C6)烷 基)-N]-(C＝O)-，(C1-C10)杂芳基-NH-(C-O)-，(C1-C10)杂环-NH-(C＝O)-， (C3-C10)环烷基-NH-(C＝O)-，(C1-C6)烷基-(C＝O)-O-和苯基-(C＝O)-O-；

或其药学上可接受的盐和前药。

如本文使用的，术语″烷基，″以及在本文中提及的其它基团(例如， 烷氧基)中的烷基部分，可以是直链的或支链的(例如甲基，乙基，正 丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基)，它们也可以是 环状的(例如，环丙基或环丁基)；任选地被1-3个如上定义的合适的 取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基， 三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。如本文使用的短语″所述烷 基中的每一个″指在基团如烷氧基、链烯基或烷基氨基内的任何在前烷 基部分。优选的烷基包括(C1-C4)烷基，最优选甲基。

如本文使用的，术语″环烷基″指单环或双环的碳环(例如，环丙基， 环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基，环壬基，环戊烯基， 环己烯基，双环[2.2.1]庚烷基，双环[3.2.1]辛烷基和双环[5.2.0] 壬烷基等)；其任选地含有1-2个双键，且任选地被1-3个如上定义的 合适的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10) 芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。如本文使用的短语 ″所述烷基中的每一个″指在基团如烷氧基、链烯基或烷基氨基内的任 何在前烷基部分。优选的环烷基包括环丁基，环戊基和环己基。

如本文使用的，术语″卤素″或″卤″包括氟，氯，溴或碘或氟化物， 氯化物，溴化物或碘化物。

如本文使用的，术语″卤素-取代的烷基″指被一个或多个卤素取代 的如上所述的烷基，包括，但不限于，氯甲基，二氯甲基，氟甲基， 二氟甲基，三氟甲基，2，2，2-三氯乙基等；其任选地被1-3个如上 定义的合适的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧 基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。

如本文使用的，术语″链烯基″指直链的或支链的2-6个碳原子的 不饱和基团，包括，但不限于乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基(烯丙基)， 异丙烯基，2-甲基-1-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基等；其任选地被1-3 个如上定义的合适的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷 氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。

如本文使用的，术语″(C2-C6)炔基″在本文中用于指直链的或支 链的具有一个三键的烃链基团，包括，但不限于，乙炔基，丙炔基， 丁炔基等；其任选地被1-3个如上定义的合适的取代基取代，例如氟， 氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲 氧基或(C1-C6)烷基。

如本文使用的，术语″羰基″或″(C＝O)″(如在烷基羰基、烷基 -(C＝O)-或烷氧基羰基等短语中使用的)指＞C＝O基团向第二个基团例 如烷基或氨基的连接(即，酰氨基)。烷氧基羰基氨基(即，烷氧基 (C＝O)-NH-)指烷基氨基甲酸酯基团。羰基在本文中也等同地定义为 (C＝O)。烷基羰基氨基指诸如乙酰胺等基团。

如本文使用的，术语″苯基-[(C1-C6)烷基)-N]-(C＝O)-″指下式的 二取代的酰胺基：

如本文使用的，术语″芳基″指诸如苯基，萘基，四氢萘基，茚满 基等芳基；其任选地被1-3个如上定义的合适的取代基取代，例如氟， 氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲 氧基或(C1-C6)烷基。

如本文使用的，术语″杂芳基″指在环中具有至少一个选自O、S 和N的杂原子的芳香杂环。除了所述杂原子外，芳香基团可以任选地 在环中具有至多4个N原子。例如，杂芳基包括吡啶基，吡嗪基，嘧 啶基，哒嗪基，噻吩基，呋喃基，咪唑基，吡咯基，唑基(例如， 1，3-唑基，1，2-唑基)，噻唑基(例如，1，2-噻唑基，1，3-噻唑基)， 吡唑基，四唑基，三唑基(例如，1，2，3-三唑基，1，2，4-三唑基)， 二唑基(例如，1，2，3-二唑基)，噻二唑基(例如，1，3，4-噻二唑基)， 喹啉基，异喹啉基，苯并噻吩基，苯并呋喃基，吲哚基等；其任选地 被1-3个如上定义的合适的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲 基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C-C6) 烷基。

如本文使用的术语″杂环″指含有1-9个碳原子和1-4个选自 N，O，S或NR′的杂原子的环状基团。这样的环的实例包括氮杂环丁烷 基，四氢呋喃基，咪唑烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，唑烷 基，噻唑烷基，吡唑烷基，硫代吗啉基，四氢噻嗪基，四氢噻二嗪 基，吗啉基，环氧丙烷基，四氢二嗪基，嗪基，噻嗪基，二氢 吲哚基，异二氢吲哚基，奎宁环基，色满基，异色满基，苯并嗪 基等。这样的单环的饱和或部分饱和的环系统的实例是四氢呋喃-2- 基，四氢呋喃-3-基，咪唑烷-1-基，咪唑烷-2-基，咪唑烷-4-基，吡咯 烷-1-基，吡咯烷-2-基，吡咯烷-3-基，哌啶-1-基，哌啶-2-基，哌 啶-3-基，哌嗪-1-基，哌嗪-2-基，哌嗪-3-基，1，3-唑烷-3-基，异 噻唑烷，1，3-噻唑烷-3-基，1，2-吡唑烷-2-基，1，3-吡唑烷-1-基， 硫代吗啉基，1，2-四氢噻嗪-2-基，1，3-四氢噻嗪-3-基，四氢噻二 嗪基，吗啉基，1，2-四氢二嗪-2-基，1，3-四氢二嗪-1-基，1，4- 嗪-2-基，1，2，5-噻嗪-4-基等；其任选地被1-3个如上定义的合适 的取代基取代，例如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧 基，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中R和B如上面的通式I和II中所定义，例外是，在每个上 面的化学结构式中的至少一个R含有2个下述的化学亚结构之一：

或

且Ar是下面的8个化学亚结构之一

或Ar定义为下面的3个化学亚结构之一

或

其中每个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是为每个X 独立地定义为以下的取代基：

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2， ″n″独立地是0或1-4的整数；且R1和R3如通式I或II中所定义。 这里的一个优选的实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独 立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷 基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的 每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6) 烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基， 全卤代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环 -O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2个独立地选择的含有 烷基的R1基团，可以与它们所结合的任何氮原子一起，形成3-40元 的环状杂环或杂芳环。更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20) 环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4 个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基， (C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂 环，(C3-C10)环烷基，羟基和(C1-C6)烷氧基。甚至更优选地，R和R1定 义为独立地选自氢，(C3-C10)环烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基。最优选地，R 和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷 基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定义。这里优选的 实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20) 环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4 个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基， (C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂 环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯 氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6) 烷基-S-；其中2个独立地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所 结合的任何氮原子一起，形成3-40元的环状杂环或杂芳环。更优选地， R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前 述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷 基取代基中的每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取 代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和 (C1-C6)烷氧基。甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C10) 环烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基。最优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6) 环烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中R和B如上面的通式I和II中所定义，且Ar是下面的8个化 学亚结构之一

或Ar定义为下面的3个化学亚结构之一

或

其中每个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是为每个X 独立地定义如下的取代基

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N (R1)2，″n″独立地是0或1-4的整数；且R1和R3如通式I或II中所定 义。这里优选的实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独立 地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷 基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的 每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6) 烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基， 全卤代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-， (C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2个独立地选择的含有烷基 的R1基团，可以与它们所结合的任何氮原子一起，形成3-40元的环 状杂环或杂芳环。甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20) 环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4 个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基， (C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环， (C3-C10)环烷基，羟基和(C1-C6)烷氧基。甚至更优选地，R和R1定义为 独立地选自氢，(C3-C10)环烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基。最优选地，R和R1定 义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定义。这里优选的 实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20) 环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4 个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基， (C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂 环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯 氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6) 烷基-S-；其中2个独立地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所 结合的任何氮原子一起，形成3-40元的环状杂环或杂芳环。更优选地， R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前 述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷 基取代基中的每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取 代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和 (C1-C6)烷氧基。甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C10) 环烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基。最优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6) 环烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中R如上面的通式I和II中所定义，且Ar是下面的8个化学 亚结构之一

或Ar定义为下面的3个化学亚结构之一

或

其中每个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是为每个X 独立地定义如下的取代基

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，氟，溴， 碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″独立地是0或1-4的整数；且R1 和R3如通式I或II中所定义。这里优选的实施方案是，其中B是氧， 和/或R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基， (C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基； 其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和 (C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述 的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤 代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基， 羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基 -O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2个 独立地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所结合的任何氮原子一 起，形成3-40元环状杂环或杂芳环。更优选地，R和R1定义为独立地 选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10) 杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯 基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个 可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基， (C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和(C1-C6)烷氧基。甚至更优 选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C10)环烷基，(C1-C10)烷氧基， (C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基。 最优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷基，(C1-C6)烷氧 基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定义。这里优选的 实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20) 环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4 个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基， (C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂 环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯 氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6) 烷基-S-；其中2个独立地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所 结合的任何氮原子一起，形成3-40元杂环或杂芳环。更优选地，R和 R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的 (C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取 代基中的每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤 素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和(C1-C6) 烷氧基。甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C10)环烷基， (C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和 (C3-C10)环烷基。最优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷 基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中R和B如上面的通式I或II中所定义，Ar是下面的8个化 学亚结构之一

或Ar定义为下面的3个化学亚结构之一

或

其中每个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是为每个X 独立地定义如下的取代基

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，氟，溴， 碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N(R1)2，″n″独立地是0或1-4的整数；且R1 和R3如通式I或II中所定义。这里优选的实施方案是，其中B是氧， 和/或R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧 基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷 基；其中前述(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和 (C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述 的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤 代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基， 羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基 -O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2 个独立地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所结合的任何氮原子 一起，形成3-40元的环状杂环或杂芳环。甚至更优选地，R和R1定义 为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷 基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的 每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6) 烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和(C1-C6)烷氧基。 甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C10)环烷基，(C1-C10) 烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10) 环烷基。最优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷基，(C1-C6) 烷氧基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中Ar，R，B和R1如上面的通式I和II中所定义。这里优选的 实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20) 环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳 基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4 个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基， (C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂 环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代(C1-C6)烷氧基，苯 氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10)环烷基-O-，(C1-C6) 烷基-S-；其中2个独立地选择的含有烷基的R1基团，可以与它们所 结合的任何氮原子一起，形成3-40元环状杂环或杂芳环1更优选地， R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20) 烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前 述(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基 取代基中的每一个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代： 卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和(C-C6) 烷氧基。甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C10)环烷基， (C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和 (C3-C10)环烷基。最优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷 基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷基。

本发明的另一个实施方案包括具有在下面的2个通式之一内的化 学结构的那些化合物：

其中R如上面的通式I和II中所定义，且Ar是下面的8个化学 亚结构之一

或Ar定义为下面的3个化学亚结构之一

或

其中每个X独立地是碳或氮；且当任何X是碳时，Y是为每个X 独立地定义如下的取代基

Y＝H，R1，或IV

每个Z独立地是氢，羟基，氟，溴，碘，-N3，-CN，-SR3，-OR3，-N (R1)2，″n″独立地是0或1-4的整数；且R1和R3如通式I或II中所 定义。这里优选的实施方案是，其中B是氧，和/或R和R1定义为独 立地选自氢，(C3-C20)环烷基，(C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基， (C1-C10)杂芳基，(C-C10)杂环和(C3-C10)环烷基；其中前述(C1-C20)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一 个可以任选地被1-4个独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷 基，(C2-C6)链烯基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10) 杂芳基，(C1-C10)杂环，(C3-C10)环烷基，羟基，(C1-C6)烷氧基，全卤代 (C1-C6)烷氧基，苯氧基，(C1-C10)杂芳基-O-，(C1-C10)杂环-O-，(C3-C10) 环烷基-O-，(C1-C6)烷基-S-；其中2个独立地选择的含有烷基的R1基 团，可以与它们所结合的任何氮原子一起，形成3-40元环状杂环或杂 芳环。甚至更优选地，R和R1定义为独立地选自氢，(C3-C20)环烷基， (C1-C20)烷氧基，(C1-C20)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和 (C3-C10)环烷基；其中前述的(C1-C10)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基， (C1-C10)杂环和(C3-C20)环烷基取代基中的每一个可以任选地被1-4个 独立地选自下述的基团取代：卤素，(C1-C6)烷基，(C2-C6)链烯 基，(C2-C6)炔基，全卤代(C1-C6)烷基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10) 杂环，(C3-C10)环烷基，羟基和(C1-C6)烷氧基。甚至更优选地，R和R1 定义为独立地选自氢，(C3-C10)环烷基，(C1-C10)烷氧基，(C1-C10)烷基， 苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环和(C3-C10)环烷基。最优选地，R 和R1定义为独立地选自氢，(C3-C6)环烷基，(C1-C6)烷氧基和(C1-C6)烷 基。

本发明的其它实施方案涉及上面所述的或下面所附的表I中列出 的那些化合物，其作为单个的化合物本身，或在组合物中，或其制备 方法，或其在根据本发明的方法中的应用。在下面的表I中列出的每 个化合物中，任何氢都可以被取代基RX替代，后者是(C1-C6)烷基，(C2-C6) 链烯基，(C2-C6)炔基，苯基，(C1-C10)杂芳基，(C1-C10)杂环或(C3-C10) 环烷基取代基。本发明的其它实施方案涉及表I中列出的具体亚属。 在这些亚属中，任何氢也可以被取代基RX替代

表I

化合物    化学结构    MF    MW

1 C11H11NO4    221.21

2 C13H15NO4    249.29

3 C18H18N2O4   326.36

4 C11H11NO4    221.21

5 C12H13NO4    235.24

6 C14H17NO4    263.3

7 C17H15NO4    297.31

8 C12H13NO4    235.24

9 C13H15NO4    249.27

10 C16H19NO6    321.33

表I

(续)

化合物    化学结构    MF   MW

11 C14H17NO4    263.3

12 C14H15NO6    293.27

13 C11H11NO4    221.21

14 C17H15NO4    297.31

15 C13H15NO4    249.29

16 C15H19NO4    277.32

17 C13H13NO6    279.25

18 C12H13NO4    235.24

19 C16H19NO6    321.33

20 C14H17NO4    263.29

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

21 C16H21NO4    291.34

22 C14H15NO6    293 27

23 C12H13NO4    235.24

24 C15H19NO4    277.32

25 C12H13NO4    235.24

26 C14H15NO5    277.27

27 C12H13NO5    251.24

28 C15H17NO6    307.31

29 C13H15NO4    249.26

30 C12H13NO4    235.24

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

31 C13H15NO4    249.27

32 C15H19NO4    277.32

33 C14H17NO4    263.3

34 C15H20N2O3    276.33

35 C14H17NO4    263.29

36 C19H25NO4    319.4

37 C15H19NO4    277.32

38 C19H27NO4    333 42

39 C15H19NO4    277.32

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

40 C15H20N2O3   276.33

41 C15H19NO5    293.32

42 C15H19NO4    277.32

43 C17H21NO4    303.35

44 C18H23NO4    317.38

45 C18H26N2O3   318.19

46 C19H28N2O3   332.21

47 C21H24N2O3   352.18

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

48 C17H15NO4    297.31

49 C15H19NO4    277.32

50 C21H24N2O3   353.18

51 C19H28N2O3   333.42

52 C19H28N2O3   332.21

53 C21H23NO4    353.16

54 C17H23NO4    30516

55 C20H22N2O3   338.16

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

56 C19H22N2O4    342.16

57 C15H13NO5     287.08

58 C17H15NO4     297.31

59 C23H25N3O3    391.46

60 C18H28N2O3    318.41

61 C19H21NO5     343.37

62 C19H16N2O4    336.34

63 C23H24N2O4    392.45

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

64 C23H25N3O3     391.46

65 C23H24N2O4     392.45

66 C16H20N2O3     288 34

67 C18H18N2O3     310.35

68 C15H18N2O3     274.32

69 C15H18N2O4     290.31

70 C17H22N2O3     302.16

71 C17H24N2O3     304.38

72 C14H18N2O4     278.3

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

73 C13H16N2O4    264.28

74 C14H18N2O4    278.3

75 C24H18N2O4    398.41

76 C24H18N2O4    398.41

77 C24H18N2O4    398.41

78 C14H16N2O5    292.29

79 C13H14N2O5    278.26

80 C18H24N2O3    316.39

81 C16H19N3O5

82 C19H20N2O3    324.37

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

83 C14H16N2O5    292.29

84 C13H14N2O5    278.26

85 C16H21N2O5    321.35

86 C15H21N2O3    277.34

亚属A 可变

亚属B 可变

亚属C 可变

87 C20H26N3O4Cl    408

88 C16H21N2O3      290

89 C16H20N2O5      321

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

90 C1 8H26N2O3    319

91 C20H22N2O3     339

92 C17H24N2O3     305

93 C16H18N2O4F2   341

94 C16H19N2O4Cl   339

95 C18H26N2O2Cl   335

96 C15H16N2O3F2   311

97 C15H17N2O3Cl   309

98 C26H22N2O3     339

99 C16H23N2O3     292

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

100 C16H19N2O5      320

101 C20H20N2O2F2    359

102 C20H20N2O2F2    359

103 C16H20N2O2F2    311

104 C17H22N2O2F2    324.37

105 C15H18N2O2F2    296.31

106 C19H18N2O5F     338

107 C16H21N2O3F     309

108 C15H17N2O4F     300

109 C16H20N2O2F2    311

表I

(续)

表I

(续)

化合物    化学结构    MF    MW

120 C16H21N2O2Cl    309

121 C20H21N2O2Cl    357

122 C18H24F2N2O2    338.4

123 C16H18F2N2O2    308.32

124 C18H24F2N2O2    338.4

125 C16H22N2O3      290.37

126 C20H20F2N2O2    358.38

127 C18H22F2N2O2    336.38

128 C19H23ClN2O4    378.85

本发明的化合物在用于治疗和预防许多特征在于MIF反应的疾病 和障碍的药理学组合物中具有用途，在所述MIF反应中MIF由细胞源 释放，且MIF产生增强。可以单独地或在它与合适的载体或赋形剂相 混合的药物组合物中，以能治疗或改善特征在于MIF释放的各种状况 的剂量，将本发明的化合物施用给人患者。治疗上有效的剂量可以指， 足以抑制MIF互变异构酶活性和MIF生物活性的化合物的量，应当理 解，这样的抑制可以在不同的浓度发生，所以本领域的技术人员能确 定抑制目标MIF活性所需的化合物剂量。治疗上有效的剂量可以单独 施用，或作为辅助治疗与其它治疗相联合，例如甾族的或非甾族的抗 炎剂或抗肿瘤剂。在Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA，最新版中，可以发现关于配制和施 用本发明的化合物的技术。

合适的给药途径可以包括例如经口的，直肠的，透粘膜的，口 腔含化的，阴道内的或肠内的给药；肠胃外的输送，包括肌肉内的， 皮下的，髓内的注射，以及鞘内的，直接心室内的，静脉内的，腹膜 内的，鼻内的或眼内的注射和任选地在贮库或持续释放制剂中。而且， 可以在靶向药物输送系统中，例如在脂质体中，施用本发明的化合物。

可以以本身已知的方式，例如，通过常规的混合，溶解，制锭剂， 漂选，乳化，包封，捕获，或冻干方法，生产本发明的药物组合物和 化合物。因而，使用一种或多种可药用的生理上可接受的载体，包含 能促进活性化合物向制品的加工的赋形剂和辅料，可以以常规方式， 配制用于根据本发明的用途的药物组合物。合适的制剂取决于选择的 给药途径。

组合物中可以存在一种或多种式I，II的化合物，盐，前药，代谢 产物，同位素标记的化合物，互变异构体，异构体和/或阻转异构体 的任意组合。

对于注射，可以在水性溶液中配制本发明的化合物，优选地在生 理上相容的缓冲液中，例如Hank溶液，林格溶液或生理盐水缓冲液。 对于透粘膜给药，在制剂中使用适合要穿透的屏障的渗透剂。这样的 渗透剂是本领域已知的。

对于经口施用，通过将活性化合物与本领域的技术人员众所周知 的药学上可接受的载体相组合，可以容易地配制化合物。这样的载体 能使本发明的化合物配制成片剂，丸剂，锭剂，胶囊，液体，凝胶， 糖浆剂，膏剂，悬浮液等，由待治疗的患者经口摄入。通过使化合物 与固体赋形剂相组合，任选地磨碎得到的混合物，如果需要，在加入 合适的辅料后，加工颗粒的混合物，以得到片剂或或锭剂芯，可以得 到经口使用的药物制品。合适的赋形剂尤其是，填充剂例如糖，包括 乳糖，蔗糖，甘露醇或山梨糖醇；纤维素制品例如，玉米淀粉，小麦 淀粉，稻谷淀粉，马铃薯淀粉，明胶，西黄蓍胶，甲基纤维素，羟 丙基甲基-纤维素，羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果 需要，可以加入崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮，琼脂或海藻酸或 其盐例如海藻酸钠。

为锭剂芯提供合适的包衣。为此，可以使用浓缩的糖溶液，其可 以任选地含有阿拉伯胶，滑石，聚乙烯吡咯烷酮，聚羧乙烯凝胶， 聚乙二醇和/或二氧化钛，漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可 以将染料或颜料加入片剂或锭剂包衣中，用于识别或表征活性化合物 剂量的不同组合。

可以经口施用的药物制品包括由明胶制成的压卡式胶囊，以及由 明胶和增塑剂(例如甘油或山梨糖醇)制成的密封软胶囊。压卡式胶 囊可以含有与下述成分相混合的活性成分：填充剂例如乳糖，粘合剂 例如淀粉和/或润滑剂例如滑石或硬脂酸镁，和任选存在的稳定剂。在 软胶囊中，活性化合物可以溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油， 液体石蜡或液体聚乙二醇。另外，可以加入稳定剂。所有经口施用的 制剂，应当是适于这样的施用的剂量。

对于口腔含服给药，组合物可以采取以常规方式配制的片剂或锭 剂的形式。

对于吸入给药，可以使用合适的抛射剂，例如，二氯二氟甲烷，三 氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，二氧化碳或其它合适的气体，从压缩包或喷 雾器，以气雾剂喷雾呈递的形式，方便地输送用于根据本发明的用途 的化合物。在加压的气雾剂的情况下，通过提供阀门来输送计量的量， 可以确定剂量单位。可以配制在吸入器或吹入器中使用的例如明胶的 胶囊和药筒，其含有化合物和合适的粉末基质(例如乳糖或淀粉)的 粉末混合物。

可以将化合物配制成肠胃外注射给药，例如通过快速推注或连续 输注。注射制剂可以以单位剂型存在，例如在安瓿中，或在多剂量容 器中，其具有添加的防腐剂。组合物可以采取下述形式：在油性或水 性载体中的悬浮液，溶液，或乳状液，且可以含有配制试剂，例如悬 浮剂，稳定剂和/或分散剂。

用于肠胃外给药的药物制剂包括水溶形式的活性化合物的水溶 液。另外，可以将活性化合物的悬浮液制备成适当的油性注射悬浮液。 合适的亲脂溶剂或介质包括脂肪油例如芝麻油或合成的脂肪酸酯，例 如油酸乙酯或甘油三酯或脂质体。水性注射悬浮液可以含有能增加悬 浮液的粘度的物质，例如多离子嵌段(共)聚合物，羧甲基纤维素钠， 山梨糖醇或葡聚糖。任选地，悬浮液还可以含有合适的稳定剂或能增 加化合物的溶解度的试剂以便于制备高度浓缩的溶液，例如，多离子 嵌段(共)聚合物。

或者，活性成分可以是粉末形式，在使用前与合适的介质(例如， 无菌无热原的水)配制。

也可以将化合物配制成直肠组合物例如栓剂或保留灌肠剂，例 如，其含有常规的栓剂基质，例如可可脂或其它甘油酯。

除了前述的制剂外，也可以将化合物配制成贮库制品。这样的长 效制剂可以通过植入(例如皮下地或肌肉内地)或通过肌肉内注射来施 用。因而，例如，可以用合适的聚合的或疏水的材料(例如，作为在可 接受的油中的乳状液)或离子交换树脂配制化合物，或作为微溶的衍生 物，例如，作为微溶的盐。

脂质体和乳状液是众所周知的疏水药物的输送介质或载体的实 例。也可以使用某些有机溶剂例如二甲基亚砜，尽管通常以更大的毒 性为代价。另外，使用持续释放系统，例如含有治疗剂的固体疏水聚 合物的半透基质，可以输送化合物。已经确立了多种形式的持续释放 材料，且是本领域的技术人员众所周知的。根据它们的化学性质，持 续释放胶囊可以释放化合物几周至超过100天。根据治疗剂的化学性 质和生物稳定性，可以使用能稳定蛋白的其它策略。

药物组合物也可以包含合适的固相或凝胶相载体或赋形剂。这样 的载体或赋形剂的实例包括但不限于碳酸钙，磷酸钙，各种糖，淀 粉，纤维素衍生物，明胶和聚合物例如聚乙二醇。

可以提供许多鉴别为MIF活性的抑制剂的本发明的化合物，作为 与药学上相容的抗衡离子的盐。可以用许多酸，包括但不限于盐酸，硫 酸，乙酸，乳酸，酒石酸，苹果酸，琥珀酸等；或碱，形成药学上相 容的盐。与对应的游离碱形式相比，盐倾向于更易溶于水性的或其它 的质子性溶剂中。药学上可接受的盐、载体或赋形剂的实例，是本领 域的技术人员众所周知的，参见例如，Remington′s Pharmaceutical Sciences，18th Edition，A.R.Gennaro，Ed.，Mack Publishing Co.，Easton，PA(1990)。这样的盐包括，但不限于，钠盐，钾盐， 锂盐，钙盐，镁盐，铁盐，锌盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐， 乙酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐和马来酸盐等。

适用于本发明的用途的药物组合物包括，其中包含有效量的活性 成分、以达到它们的预期目的的组合物。更具体地，治疗有效量指， 能有效地预防或抑制治疗对象中特征在于MIF释放和产生的疾病的 发生或进展的量。本领域的技术人员能确定有效量，尤其是考虑到本 文提供的详细内容。

对于在本发明的方法中使用的任何化合物，可以从互变异构酶抑 制测定和细胞培养测定，初步估计治疗有效剂量。这样的信息可以用 于更准确地确定在人类中有用的剂量。通过细胞培养物或实验动物中 的标准的药学、药理学和毒理学的方法，可以确定这样的化合物的毒 性和治疗效力，例如，用于测定LD50(对50％群体致死的剂量)和ED50(在 50％群体中治疗有效的剂量)。毒性和治疗作用之间的剂量比，是治疗 指数，其可以表达为LD50和ED50之间的比例。能表现出高治疗指数 (ED50＞LD50或ED50＞＞LD50)的化合物是优选的。从细胞培养测定或动物 研究得到的数据，可以用于配制用于人的剂量范围。这样的化合物的 剂量，优选地在循环浓度的范围内，其包括ED50，具有极小毒性或无 毒性。根据采用的剂型和使用的给药途径，剂量可以在该范围内变化。 考虑患者的状况，各医生可以选择确切的制剂、给药途径和剂量(见例 如，Fingl等(1975)，The Pharmacological Basis of Therapeutics， Chapter.1 page 1)。

可以个别地调节剂量和间隔，以提供足以维持期望的调控效果的 活性部分的血浆水平或最小有效浓度(MEC)。MEC可以随每种化合物而 变化，但是可以从体外数据估计到；例如，达到对MIF活性的50-90％ 抑制所需的浓度。达到MEC所需的剂量，取决于个体特征和给药途径。 但是，可以使用HPLC测定，生物测定或免疫测定，来测定血浆浓度。

使用MEC值，也可以确定剂量间隔。应当使用能使血浆水平维持 在MEC以上持续1-90％时间、优选地30-90％和最优选地50-90％的方案， 施用化合物。这些范围包括1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，20，30，40，50， 60，70，8，90，99和其任意组合。

活性成分可以以0.1-99.9重量％的量，存在于药物组合物中。这 些范围包括0.1，0.5，0.9，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，20，30，40， 50，60，70，80，90，99，99.5，99.9重量％和其任意组合。

在局部给药的情况下，例如，直接导入靶器官或组织，或选择性 摄入，有效的局部的药物浓度可以与血浆浓度无关。

当然，施用的组合物的量，取决于治疗对象，对象的体重，对象 的年龄，疾患的严重性，给药方式，和处方医生的判断。

如果需要，组合物可以存在于包或分配装置中，其可以含有一个 或多个含有活性成分的单位剂型。该包可以包含例如金属或塑料箔， 例如泡罩。包或分配装置可以伴有给药说明书。也可以制备在相容的 药物载体中配制的包含本发明的化合物的组合物，置于适当的容器中， 并贴上关于治疗适应症的标签。

式I或II化合物或其药学上可接受的盐可以用于生产药物，其可 以用于预防性地或治疗性地治疗人或其它哺乳动物中的任何疾病状 态，后者由该哺乳动物的细胞(例如但不限于单核细胞和/或巨噬细胞) 过量或失调产生细胞因子加重或造成。

MIF的酶活性(互变异构酶)和它接受的底物提供酶活性测定，其 可以用于设计能结合MIF并破坏它的生物活性的低分子量试剂。本发 明提供了使用这样的具有异唑啉结构的化合物种类中的化合物的的 方法。

本发明还提供了药物组合物，其包含异唑啉化合物或其药学上 可接受的盐和药学上可接受的载体或稀释剂，其中该组合物包含有效 量的上式化合物。

本发明还提供了药物组合物，其包含具有异唑啉或异唑啉- 有关的部分的化合物和药学上可接受的载体，其中该化合物能与MIF 蛋白的至少一个氨基酸残基形成稳定的相互作用。

本发明提供了治疗下述疾病的方法：炎性障碍(包括，但不限于， 关节炎，增生性血管病，ARDS(急性呼吸窘迫综合征)，细胞因子-介 导的毒性，脓毒症，败血症性休克，银屑病，白介素-2毒性，哮喘， MIF-介导的状况，自身免疫病(包括但不限于类风湿性关节炎，胰岛 素依赖型糖尿病，多发性硬化，移植物抗宿主疾病，狼疮综合征)， 肿瘤生长或血管发生或特征在于局部的或全身的MIF释放或合成的任 何状况，该方法包括施用有效量的具有异唑啉部分的化合物，其中 该化合物能与MIF蛋白形成相互作用。例如，该化合物可以结合MIF 蛋白，从而干扰MIF蛋白的生物和/或酶活性。结合可以是可逆的或不 可逆的。

根据MIF的干扰甾族化合物(例如抗炎的糖皮质激素)的抗炎作用 的活性，式I或II的化合物可以进一步用于增强内源产生的和外源施 用的甾族抗炎剂的活性和治疗利益。在有些情况下，这样的利益最明 显的在于能减少对甾族化合物治疗的需要(例如，更低的剂量或频率； 不太强有力的试剂；减少对全身给药的需要)，或能减少与甾族化合物 施用有关的副作用。仅仅使用本发明的MIF抑制剂作为单一疗法，或 作为与其它抗炎剂(更具体地，包括但不限于抗炎的甾族化合物)的 联合疗法，可以实现用MIF抑制剂(更具体地，式I或II的化合物) 的益处。通过施用将MIF抑制剂(更具体地，式I或II的抑制剂)和 至少一种其它的抗炎剂(其可以是甾族的或非甾族的抗炎剂)相组合的 单一制剂或药物组合物，或通过彼此组合地施用分开的制剂或药物组 合物，或二者，可以实现这样的联合疗法。

式I和II的化合物也能抑制受MIF影响的促炎性细胞因子，例如 IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF，因此可以用于治疗。IL-1，IL-2， IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF能影响广泛种类的细胞和组织，且这些细 胞因子，以及其它白细胞-衍生的细胞因子，是许多种类的疾病状态和 状况的重要的和关键的炎性介质。抑制这些细胞因子，有助于控制、 减轻和缓解许多这样的疾病状态。

因此，本发明提供了治疗细胞因子介导的疾病的方法，其包括施 用有效的细胞因子-干扰量的式I或II化合物或其药学上可接受的盐。

更具体地，式I或II的化合物或其药学上可接受的盐，可以用于 治疗人或其它哺乳动物的任意疾病状态，其由这样的哺乳动物的细胞 (例如，但不限于，单核细胞和/或巨噬细胞)过量的或失调的 MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF产生而加重或造成。

因此，在另一个方面，本发明涉及抑制有此需要的哺乳动物中的 IL-1产生的方法，其包括给所述哺乳动物施用有效量的式I或II化 合物，或其药学上可接受的盐。存在许多疾病状态，其中过量的或失 调的IL-1产生参与加重和/或造成疾病。它们包括类风湿性关节炎， 骨关节炎，脑膜炎，缺血和出血性卒中，神经外伤/闭合性颅脑损伤， 中风，内毒素血症和/或中毒性休克综合征，其它急性或慢性炎性疾 病状态例如由内毒素诱发的炎性反应或炎性肠病，结核病，动脉粥样 硬化，肌肉退化，多发性硬化，恶病质，骨再吸收，银屑病关节炎， 莱特尔氏综合征，类风湿性关节炎，痛风，创伤性关节炎，风疹性 关节炎和急性滑膜炎。近期的证据还将IL-1活性与糖尿病，胰腺细 胞疾病和阿尔茨海默病相关联。

在另一个方面，本发明涉及抑制有些需要的哺乳动物中的TNF产 生的方法，其包括给所述哺乳动物施用有效量的式I或I I化合物或其 药学上可接受的盐。过量的或失调的TNF产生已经参与介导或加重许 多疾病，包括类风湿性关节炎，类风湿性脊椎炎，骨关节炎，痛风性 关节炎和其它关节炎状况，脓毒症，败血症性休克，内毒素性休克， 革兰氏阴性脓毒症，中毒性休克综合征，成人呼吸窘迫综合征，中 风，脑型疟，慢性阻塞性肺病，慢性肺炎性疾病，硅肺，肺结节病， 骨再吸收疾病例如骨质疏松症，心脏的、脑和肾脏的再灌注损伤，移 植物抗宿主反应，同种异体移植物排斥，感染例如流行性感冒(包 括HIV-诱导的形式)引起的发热和肌痛，脑型疟，脑膜炎，缺血和出 血性卒中，感染或恶性肿瘤继发的恶病质，获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)继发的恶病质，AIDS，ARC(AIDS相关复征)，瘢痕瘤形成，瘢 痕组织形成，炎性肠病，克罗恩病，溃疡性结肠炎和热病 (pyresis)。

式I或II的化合物也可以用于治疗病毒感染，其中这样的病毒对 TNF的上调是敏感的，或在体内引起TNF产生。本文中预期能治疗的 病毒是这样的，作为感染的结果产生TNF，或它对式I或II的TNF抑 制-化合物的抑制敏感，例如通过直接或间接降低复制。这样的病毒包 括，但不限于HIV-1，HIV-2和HIV-3，巨细胞病毒(CMV)，流行性感 冒，腺病毒和疱疹病毒例如但不限于，带状疱疹和单纯疱疹。因此， 在另一个方面，本发明涉及治疗感染了人免疫缺陷病毒(HIV)的哺乳动 物的方法，其包括给这样的哺乳动物施用有效的TNF抑制量的式I或 II化合物或其药学上可接受的盐。

式I或II的化合物也可以用于需要抑制TNF产生的人以外的哺乳 动物的兽医治疗。TNF介导的动物中的需要治疗的疾病包括诸如上述 的那些疾病状态，但是尤其是病毒感染。这样的病毒的实例包括，但 不限于，慢病毒属感染，例如，马传染性贫血病毒，羊关节炎病毒， 绵羊髓鞘脱落病毒或梅迪病毒或逆转录病毒感染，例如但不限于猫免 疫缺陷病毒(FIV)，牛免疫缺损病毒或犬免疫缺损病毒或其它逆转录 病毒感染。

式I或II的化合物也可以局部地用于治疗局部的疾病状态，后者 由过量的细胞因子(例如分别是IL-1或TNF)产生介导或加重，例如 发炎关节，湿疹，接触性皮炎银屑病和其它炎性皮肤状况例如晒斑； 炎性眼病包括结膜炎；热病，疼痛和与炎症有关的其它状况。牙周病 也已经涉及细胞因子产生(局部地和全身地)。因此，使用式I或II 的化合物来控制这样的口腔病例如龈炎和牙周炎中与细胞因子产生有 关的炎症，是本发明的另一个方面。

还已经证实，式I或II的化合物能抑制IL-8(白介素-8，NAP) 的产生。因此，在另一个方面，本发明涉及抑制有此需要的哺乳动物 中的IL-8的产生的方法，其包括给所述哺乳动物施用有效量的式I 或II化合物或其药学上可接受的盐。

存在许多疾病状态，其中过量的或失调的IL-8产生参与加重和/ 或造成疾病。这些疾病的特征在于大量的嗜中性粒细胞浸润，例如，银 屑病，炎性肠病，哮喘，心脏的和肾的再灌注损伤，成人呼吸窘迫 综合征，血栓形成和肾小球肾炎。所有这些疾病都与增加的IL-8产生 有关，后者负责嗜中性粒细胞向炎性部位中的趋化性。与其它的炎性 细胞因子(IL-1，TNF和IL-6)相比，IL-8具有促进中性粒细胞趋化性 和活化的独特性质。因此，抑制IL-8生产，会导致嗜中性粒细胞浸润 的直接减少。

以足以抑制细胞因子、尤其是MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ 和TNF生产的量，施用式I或II的化合物，使其向下调节至正常水平， 或在有些情况下，向下调节至亚正常水平，以便改善或预防疾病状态。 MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的异常水平，例如在本发 明的上下文中，构成：(i)大于或等于1pg/ml的游离的(未结合细胞 的)MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的水平；(ii)任何 细胞结合的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF；或(iii)存 在超过在分别生产MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF的细 胞或组织中的基础水平的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF mRNA。

如本文使用的，术语″抑制MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ 和TNF的产生″指：

a)通过抑制所有或选择细胞(包括但不限于单核细胞或巨噬细 胞)对细胞因子的体内释放，使人中过量的体内水平的细胞因子 MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF降低至正常的或亚正常 的水平；

b)在转录水平，将人中过量的体内水平的细胞因子MIF，IL-1， IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF下调节至正常的或亚正常的水平；

c)在转录后水平，将人中过量的体内水平的细胞因子MIF，IL-1， IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF下调节至正常的或亚正常的水平；

d)作为翻译后事件，通过抑制细胞因子MIF，IL-1，IL-2，IL-6， IL-8，IFN-γ和TNF的直接合成，下调节至正常的或亚正常的水平；或

e)在翻译水平，将人中过量的体内水平的细胞因子MIF，IL-1， IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF下调节至正常的或亚正常的水平。

如本文使用的，术语″MIF介导的疾病或疾病状态″指，其中MIF 起作用的任何和所有的疾病状态，无论是通过MIF自身的生产或生物 的或酶的(互变异构酶和/或氧化还原酶)活性，还是通过MIF造成或调 控要释放的另一种细胞因子，例如但不限于IL-1，IL-2，IL-6， IL-8，IFN-γ和TNF。因此，应当将疾病状态，其中例如IL-1是重要组 分，且它的产生或作用响应MIF而加重或分泌，视作由MIF介导的疾 病状态。

如本文使用的，术语″细胞因子″指能影响细胞功能、且是能调控 免疫、炎症或造血反应中细胞之间的相互作用的分子的任何分泌多肽。 细胞因子包括，但不限于，单核因子和淋巴因子，不管哪种细胞生产 它们。例如，提及的单核因子由单核的细胞生产和分泌，例如巨噬细 胞和/或单核细胞。但是，许多其它的细胞也生产单核因子，例如自然 杀伤细胞，成纤维细胞，嗜碱粒细胞，嗜中性粒细胞，内皮细胞， 脑星形胶质细胞，骨髓基质细胞，表皮角质形成细胞和B-淋巴细胞。 提及的淋巴因子通常由淋巴细胞生产。细胞因子的实例包括，但不限 于，巨噬细胞游走抑制因子(MIF)，白介素-1(IL-1)，白介素 -2(IL-2)，白介素-6(IL-6)，白介素-8(IL-8)，肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)和肿瘤坏死因子-β(TNF-β)。

如本文使用的，术语″细胞因子干扰″或″细胞因子抑制量″指有效 量的式I或II化合物，当施用给患者来治疗由过量的或失调的细胞因 子生产加重或造成的疾病状态时，其能造成体内或体外存在的细胞因 子的生物活性或水平、或细胞因子的体内水平降低至正常的或亚正常 的水平。

如本文使用的，在短语″抑制细胞因子用于治疗HIV-感染的人″中 提及的细胞因子是参与下述活动的细胞因子：(a)启动和/或维持T细 胞活化和/或活化的T细胞-介导的HIV基因表达和/或复制，和/或(b) 任何细胞因子-介导的疾病有关的问题，例如恶病质或肌肉退化。

由于TNF-β(也称作淋巴毒素)具有与TNF-α(也称作恶病质素) 接近的结构同源性，且由于各自都能诱导类似的生物反应和结合相同 的细胞受体，TNF-α和TNF-β都能被本发明的化合物抑制，因而在本 文中一起称作″TNF″，除非另有特别说明。

这些式I或II的抑制剂化合物，有助于测定参与炎性反应的信号 传递途径。更具体地，可以为脂多糖在巨噬细胞细胞因子产生中的作 用，描述确定的信号转导途径。除了本文已经指出的那些疾病外，也 包括对中风，神经外伤/CNS颅脑损伤，心脏的、脑和肾脏的再灌注损伤， 血栓形成，肾小球肾炎，糖尿病和胰腺细胞疾病，多发性硬化，肌 肉退化，湿疹，银屑病，晒斑和结膜炎的治疗。

还认识到，IL-6和IL-8都在鼻病毒(HRV)感染过程中产生，且有 助于普通感冒的发病和与HRV感染有关的哮喘的恶化(Turner等， (1998)，Clin.Infec.Dis.，Vol.26，p.840；Teren等(1997)， Am.J.Respir.Crit.Care Med.，Vol.155，p.1362；Grunberg 等(1997)，Am.J.Respir.Crit.Care Med.，Vol.156，p.609 和Zhu等，J.Clin.Invest.(1996)，Vol.97，p421)。还已经体 外地证实，HRV对肺上皮细胞的感染，会导致L-6和IL-8的产生 (Subauste等，J.Clin.Invest.(1995)，Vol.96，p.549)。上皮 细胞代表着HRV感染的首要部位。因此，本发明的另一个方面是，减 轻与鼻病毒感染有关的炎症的治疗方法，所述炎症不一定是病毒自身 的直接效应。

本发明的另一个方面涉及这些细胞因子抑制剂用于治疗由过量的 或不适当的血管发生造成的慢性的炎性的或增殖性的或血管发生性的 疾病的新应用。具有不适当的血管发生组分的慢性疾病是各种眼新血 管形成，例如糖尿病性视网膜病和黄斑变性。具有过量的或增加的血 管系统增殖的其它慢性疾病是肿瘤生长和转移，动脉粥样硬化和某些 关节炎状况。因此，细胞因子抑制剂可以用于阻断这些疾病状态的血 管发生组分。

如本文使用的术语″过量的或增加的血管系统不适当的血管发生 的增殖″包括，但不限于，特征在于血管瘤的疾病和眼病。

如本文使用的术语″不适当的血管发生″包括，但不限于，特征在 于伴有组织增殖的囊泡增殖的疾病，例如发生在癌症，转移，关节炎 和动脉粥样硬化中。

本发明也包括治疗或预防哺乳动物、优选人中的疾病的方法，该 疾病可以通过抑制ERK/MAP来治疗或预防，其包括给所述哺乳动物施 用有效量的式I或II化合物。因此，本发明提供了治疗有此需要的哺 乳动物、优选人中的ERK/MAP激酶介导的疾病的方法，其包括给所述 哺乳动物施用有效量的式I或II化合物或其药学上可接受的盐。

优选的可治疗的ERK/MAP介导的疾病包括，但不限于，银屑病关 节炎，莱特尔氏综合征，类风湿性关节炎，痛风，创伤性关节炎， 风疹性关节炎和急性滑膜炎，类风湿性脊椎炎，骨关节炎，痛风性 关节炎和其它关节炎状况，脓毒症，败血症性休克，内毒素性休克， 革兰氏阴性脓毒症，中毒性休克综合征，阿尔茨海默病，中风，缺 血和出血性卒中，神经外伤/闭合性颅脑损伤，哮喘，成人呼吸窘迫综 合征，慢性阻塞性肺病，脑型疟，脑膜炎，慢性肺炎性疾病，硅肺， 肺结节病，骨再吸收疾病，骨质疏松症，再狭窄，心脏的再灌注损 伤，脑和肾的再灌注损伤，慢性肾衰竭，血栓形成，肾小球肾炎， 糖尿病，糖尿病性视网膜病，黄斑变性，移植物抗宿主反应，同种 异体移植物排斥，炎性肠病，克罗恩病，溃疡性结肠炎，神经变性 疾病，多发性硬化，肌肉退化，糖尿病性视网膜病，黄斑变性，肿 瘤生长和转移，血管发生疾病，鼻病毒感染，口腔疾病例如龈炎和 牙周炎，湿疹，接触性皮炎，银屑病，晒斑和结膜炎。

如本文使用的，术语″治疗(treating)″指，逆转、减轻、抑制这 样的术语应用的障碍或状况、或这样的障碍或状况的一种或多种症状 的进展，或预防它们。如本文使用的，术语″治疗(treatment)″指 治疗行为，“治疗”如上面定义。

本发明也包括用于治疗哺乳动物、包括人中的选自下述的状况的 药物组合物：关节炎，银屑病关节炎，莱特尔氏综合征，痛风，创伤 性关节炎，风疹性关节炎和急性滑膜炎，类风湿性关节炎，类风湿 性脊椎炎，骨关节炎，痛风性关节炎和其它关节炎状况，脓毒症， 败血症性休克，内毒素性休克，革兰氏阴性脓毒症，中毒性休克综 合征，阿尔茨海默病，中风，神经外伤，哮喘，成人呼吸窘迫综合 征，脑型疟，慢性肺炎性疾病，硅肺，肺结节病，骨再吸收疾病，骨 质疏松症，再狭窄，心脏的和肾的再灌注损伤，血栓形成，肾小球肾 炎，糖尿病，移植物抗宿主反应，同种异体移植物排斥，炎性肠病， 克罗恩病，溃疡性结肠炎，多发性硬化，肌肉退化，湿疹，接触性 皮炎，银屑病，晒斑或结膜炎，其包含在这样的治疗中有效的量的式 I或II化合物和药学上可接受的载体。

本发明的一个实施方案提供了灭活人MIF的酶活性和生物活性 的方法，其包括使人MIF接触化合物或化合物的组合，形成与人MIF 的至少一个氨基酸残基的稳定的相互作用。本发明也涉及抑制受MIF 活性影响的其它的细胞因子，包括IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ 和TNF。本发明包括治疗或预防哺乳动物、优选人中的障碍的方法， 该障碍可以通过抑制ERK/MAP途径来治疗或预防，其包括给所述哺乳 动物施用有效量的化合物。

作为本发明的治疗方法的一个实例，本发明的含有异唑啉的化 合物可以用于治疗ARDS(急性呼吸窘迫综合征)患者。ARDS经常被视 作原型临床反应，其中免疫反应的动态平衡向过度的炎症和组织破坏 迁移。MIF在II型肺泡细胞和浸润的免疫细胞中表达。与对照对象相 比，发现ARDS患者的支气管肺泡灌洗中的MIF水平显著升高 (Donnelly等，Nat.Med.，3，320-323(1997))。与对照细胞相比， 人MIF能增强ARDS肺泡巨噬细胞(离体)的TNFα和IL-8分泌。用抗 -MIF抗体预处理这些细胞，能显著减少ARDS肺泡细胞的TNFα和IL-8 产生。而且，如上面“发明背景”中所讨论的，发现rMIF(重组 MIF)能以浓度依赖性的方式，克服糖皮质激素-介导的对ARDS巨噬细 胞中细胞因子分泌的抑制。这些是表明在人疾病过程中MIF/糖皮质激 素二联体在体内已经经历促炎症激活的细胞中是有活性的最初数据 (Donnelly等，Nat.Med.，3，320-323(1997)。在处于向ARDS进展 危险中的那些患者中，发现了比没有危险的患者中明显升高的肺泡 MIF水平。MIF可能作为重要的介质，促进和维持ARDS中的肺炎性反 应。它在ARDS中的显著表达，可以解释该疾病的暴发进程，并可能解 释为什么在确定的病例中糖皮质激素治疗被证实是令人失望的。因而， 包含本发明的含有异唑啉的化合物的药物组合物，可以用于治疗 ARDS患者。

作为本发明的治疗方法的另一个实例，本发明的含有异唑啉的 化合物可以用于治疗类风湿性关节炎患者。从类风湿性关节炎患者的 患病关节得到的滑液，含有比从骨关节炎患者或从正常的对照对象得 到的那些明显更高水平的MIF(Metz等，Adv.Immunol.，66，197-223 (1997)；Leech等，Arthritis Rheum.，41，910-917(1998)；Onodera 等，Cytokine，11，163-167(1999))。如免疫组织化学染色方法所揭 示的，人关节炎关节内的浸润性单核细胞是MIF的主要来源。在关节 炎的2个动物模型中，中和抗-MIF mAb显著抑制疾病进展和疾病严重 性(Leech等，Arthritis Rheum.，41，910-917(1998)；Mikulowska 等，J.Immunol.，158，5514-5517(1997))，刺激开发用于炎性疾 病的潜在治疗性应用的其它MIF抑制剂的需要。因而，本发明的包含 异唑啉化合物或异唑啉-有关的化合物的药物组合物，可以用于治 疗关节炎患者。

在本发明的治疗方法的另一个实例中，本发明的含有异唑啉的 化合物可以用于治疗特应性皮炎患者。特应性皮炎是一种慢性的瘙痒 的炎性皮肤病.认为它的发病部分地是由于外周单核细胞的失调的细 胞因子产生。在特应性皮炎患者的病损中，MIF蛋白弥漫地分布在整 个表皮层中，角质形成细胞表达增加(Shimizu等，FEBS Lett.， 381，199-202(1996))。在正常的人皮肤中，MIF主要定位在表皮角质 形成细胞。特应性皮炎患者的血清MIF水平，是对照对象的6倍那么 高。另外，特应性皮炎患者的血清MIF水平，随着临床特征的改善而 降低，表明在皮炎过程中，MIF在皮肤的炎性反应中起关键作用。因 而，本发明的包含含有异唑啉的化合物的药物组合物，可以用于治 疗特应性皮炎患者。

以类似的方式，本发明还提供了治疗或预防其它炎性或自身免疫 病的方法，包括但不限于，增生性血管病，细胞因子-介导的毒性， 脓毒症，败血症性休克，银屑病，白介素-2毒性，哮喘，MIF-介导的 状况，胰岛素依赖型糖尿病，多发性硬化，移植物抗宿主疾病，狼 疮综合征和特征在于局部的或全身的MIF释放或合成或受MIF影响的 其它细胞因子的其它状况。

在本发明的治疗方法的另一个实例中，本发明的化合物可以用于 治疗具有肿瘤生长的患者。已经发现，中和抗-MIF抗体，能在体内显 著减少小鼠38C13B细胞淋巴瘤的生长和血管化(血管发生)(Chesney 等，Mol.Med.，5，181-191(1999))。MIF主要在肿瘤有关的新血管 系统中表达。观察到培养的微血管内皮细胞(但不是38C13 B细胞) 能产生MIF，且在体外增殖中需要它的活性(Takahashi等，Mol.Med.， 4，707-714(1998))。另外，发现给小鼠施用抗-MIF抗体，能显著抑 制由Matrigel植入引起的新血管形成反应，后者是一种体内新血管形 成的模型(Bozza等，J.Exp.Med.，189，341-346(1999))。这些 数据表明，MIF在肿瘤血管发生中起重要作用，是开发能抑制肿瘤新 血管形成的抗肿瘤剂的新靶物。

因而，本发明还提供了治疗或预防肿瘤生长或血管发生的方法， 其包括施用有效量的化合物或化合物的组合，其具有异唑啉部分， 且能与MIF蛋白的至少一个氨基酸残基形成稳定的相互作用。

本发明还提供了式I或II化合物或其药学上可接受的盐，作为前 述任一种的药物组合物，其用于治疗或预防下述疾病的药物中或药物 的生产中：炎性障碍包括关节炎，增生性血管病，ARDS，细胞因子- 介导的毒性，脓毒症，败血症性休克，银屑病，白介素-2毒性，哮 喘，MIF-介导的状况，自身免疫病(包括，但不限于，类风湿性关节 炎，胰岛素依赖型糖尿病，多发性硬化，移植物抗宿主疾病，狼疮 综合征)，肿瘤生长或血管发生或特征在于局部的或全身的MIF释放 或合成的任何状况。

本发明也包括用于治疗哺乳动物、包括人的疾病的药物组合物， 该疾病可以通过抑制ERK/MAP激酶途径来治疗，其包含在这样的治疗 中有效的量的式I或II化合物和药学上可接受的载体。

本发明也包括式I或II化合物的前药，和含有这些前药的药物组 合物。可以将具有游离氨基、酰氨基、羟基或羧基的式I或II的化合 物，转化成前药。前药包括这样的化合物，其中氨基酸残基或2个或 多个(例如，2，3或4个)氨基酸残基的多肽链，通过肽键共价连接到 式I或II化合物的游离氨基、羟基或羧酸基上。氨基酸残基包括20 种天然存在的通常用3字母符号命名的氨基酸，也包括4-羟基脯氨酸， 羟赖氨酸，demosine，isodemosine，3-甲基组氨酸，正缬氨酸，β- 丙氨酸，γ-氨基丁酸，瓜氨酸，高半胱氨酸，高丝氨酸，鸟氨酸和甲 硫氨酸砜。前药也包括这样的化合物，其中碳酸酯，氨基甲酸酯，酰 胺和烷基酯，通过羰基碳前药侧链，共价结合到式I的上述取代基上。 本发明也包括持续释放组合物。

本领域的普通技术人员能认识到，本发明的化合物可以用于治疗 多种疾病。本领域的普通技术人员也能认识到，当使用本发明的化合 物治疗特定疾病时，本发明的化合物可以与各种现有的用于该疾病的 治疗剂相组合。

对于类风湿性关节炎的治疗，本发明的化合物可以与下述药剂相 组合：例如TNF抑制剂例如抗-TNF单克隆抗体和TNF受体免疫球蛋 白分子，COX-2抑制剂，例如塞来考昔，罗非考昔，伐地考昔和艾托 考昔，低剂量甲氨蝶呤，lefunomide，羟氯喹，d-青霉胺，金诺芬或 者胃肠外或口服金。

本发明的化合物也可以与现有的用于治疗骨关节炎的治疗剂组合 使用。要组合使用的合适的试剂包括标准的非甾族抗炎剂例如吡罗昔 康，双氯芬酸，丙酸类例如萘普生，氟苯布洛芬，非诺洛芬，酮洛 芬和布洛芬，灭酸酯类例如甲芬那酸，茚甲新，舒林酸，阿扎丙宗， 吡唑酮类例如保泰松，水杨酸类例如阿司匹林，COX-2抑制剂例如塞 来考昔，伐地考昔，罗非考昔和艾托考昔，镇痛药和关节内治疗剂例 如皮质甾类和透明质酸例如海尔根和synvisc。

本发明的化合物也可以与下述物质组合使用：抗癌剂例如内皮他 丁和血管他丁或细胞毒性药物例如阿霉素，道诺霉素，顺铂，依托 泊苷，紫杉酚，泰索帝和生物碱类，例如长春新碱，法尼基转移酶 抑制剂，VegF抑制剂和抗代谢物例如甲氨蝶呤。

本发明的化合物也可以与下述物质组合使用：抗病毒剂例如奈非 那韦，叠氮胸苷，阿昔洛韦和泛昔洛韦和防腐化合物例如Valant。

本发明的化合物也可以与下述物质组合使用：心血管药物例如钙 通道阻滞剂，降脂药例如他汀类药物，贝特类药物，β-受体阻断剂， Ace抑制剂，血管紧张素-2受体拮抗剂和血小板聚集抑制剂。

本发明的化合物也可以与下述物质组合使用：骨质疏松症药物例 如roloxifene，屈洛昔芬，拉索昔芬或fosomax和免疫抑制剂例如 FK-506和雷帕霉素。

本发明的化合物也可以与下述物质组合使用：CNS药物例如抗抑 郁药，例如舍曲林，抗帕金森病药物例如塞利吉林，左旋多巴， Requip，普拉克索，MAOB抑制剂例如selegine和雷沙吉兰，comP抑 制剂例如托卡朋，A-2抑制剂，多巴胺重摄取抑制剂，NMDA拮抗剂， 烟碱激动剂，多巴胺激动剂和神经元氧化亚氮合酶的抑制剂，和抗- 阿尔茨海默病药物例如多奈哌齐，他克林，COX-2抑制剂，丙戊茶碱 或metryfonate。

本发明也包括用于治疗哺乳动物、包括人中的状况的药物组合物， 所述状况可以通过抑制ERK/MAP激酶来治疗，其包含在这样的治疗中 有效的量的式I或II化合物和药学上可接受的载体。

本发明还提供了治疗炎性障碍的方法，包括，但不限于，关节炎， 增生性血管病，ARDS(急性呼吸窘迫综合征)，细胞因子-介导的毒性， 脓毒症，败血症性休克，银屑病，白介素-2毒性，哮喘，MIF-介导的 状况，自身免疫病(包括，但不限于，类风湿性关节炎，胰岛素依赖 型糖尿病，多发性硬化，移植物抗宿主疾病，狼疮综合征)，肿瘤生 长或血管发生或特征在于局部的或全身的MIF释放或合成的任何状 况，该方法包括施用有效量的具有异唑啉部分的化合物，其中该异 唑啉部分能与MIF蛋白的至少一个氨基酸残基形成稳定的共价相互 作用。优选地，相互作用发生在MIF蛋白的互变异构酶活性的活性部 位或其附近。本发明还提供了药物组合物，其包含具有异唑啉或异 唑啉-有关的部分的化合物和药学上可接受的载体，其中该部分能与 MIF蛋白的至少一个氨基酸残基形成稳定的共价相互作用。

本发明涉及与抑制巨噬细胞游走抑制因子(MIF)活性有关的化合 物，组合物，其制备方法和使用方法。该化合物包含一类包含任选地 取代的异唑啉环系统的低分子量化合物，其能起MIF的抑制剂的作 用，且也能抑制受MIF活性影响的其它细胞因子，包括IL-1， IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF。本发明也包括治疗或预防哺乳动物、 优选人中的障碍的方法，所述障碍可以通过抑制ERK/MAP途径来治疗 或预防，该方法包括给所述哺乳动物施用有效量的化合物。该化合物 可以用于治疗人或其它哺乳动物中的许多疾病，包括任何疾病状态， 其由这样的哺乳动物的细胞(例如，但不限于，单核细胞和/或巨噬细 胞)过量的或失调的MIF，IL-1，IL-2，IL-6，IL-8，IFN-γ和TNF产生 而加重或造成，或可以通过抑制ERK/MAP途径来调控的任何疾病状态。

本发明的一个实施方案提供了一类新的结构上与异唑啉有关的 MIF和其它细胞因子的抑制剂，其适用于中和内源的和外源的MIF和 其它细胞因子。因此，本发明提供了一类抑制剂化合物。该类化合物 概括地由本文的通式I和II描述。除非另有说明，结构式I和II和 所述的取代基如本文所述。

根据本文的教导，通过具有本领域的普通技术的有机化学人员已 知的多种途径，可以合成所述化合物。

实施例

已经概括地描述了本发明，参考某些具体的实施例，可以进一步 得到理解，除非另有说明，在本文中提供的实施例仅仅用于解释目的， 无意进行限制。

实施例1

靶分子的结构

1A          1B

R           R

---         ---

OH          OH

O-异丁基    O-异丁基

N-异丁基    N-异丁基

现在参考图1A中的苯基系列反应图：

向氯肟(化合物8，14.8g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三 乙胺(14.2g)，并将溶液冷却至5-10℃。向上述溶液中，缓慢加入苯 乙烯基乙酸甲酯(5g)，并将得到的溶液在室温搅拌24小时。蒸馏去 除溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)、然后用盐 水溶液洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩成残余物。TLC 表明，形成了2种区域异构体(化合物23a和23b)。对作为2种区域 异构体的混合物的黄色固体(25g)，采取水解步骤。

将粗反应物质(化合物23a和23b，25g)吸收于甲醇(200ml)中， 并加入25％氢氧化钠溶液(13.0ml)。将得到的溶液回流2小时。蒸馏 去除溶剂，用水(100ml)稀释残余物，并用盐酸(2M)调至pH2。用乙酸 乙酯(2×200ml)萃取化合物。用盐水(100ml)进一步洗涤有机层。 经无水硫酸钠干燥得到的有机层，过滤，并浓缩。通过柱色谱(100-200 目硅胶，50％乙酸乙酯-石油醚)，纯化2种异构体(化合物24a和24b) 的混合物，产生白色固体状的24a(0.700g)。取该物质，不进一步 表征。

将苄基化的酸衍生物(化合物24a，0.300g)溶于乙醇(60ml) 中，并加入10％碳披钯。使用气球压(balloon pressure)，氢化反应 混合物4小时。通过硅藻土垫，过滤反应混合物，并用乙醇(30ml) 洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物。使用60-120目硅胶和作为洗脱 剂的10％甲醇-氯仿，通过柱色谱进一步纯化化合物25a，产生米色 固体状的纯25a(0.060g)。熔点：203-206℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry shield RP-18(4.6×150)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(70∶30)

流速：1.0mL/min；波长：215nm

保留时间13.33；纯度：92.38％

IR(KBr，vmax)：3382，3035，1704，1607，1516，1433，1219，1173， 872.

1H NMR：(DMSO-d6，300MHz)；δ12.3(br.s，1H)，9.9(br.s， 1H)，7.3(d，2H)，7.2(m，5H)，6.8(d，2H)，4.8(d，1H)，4.7(m， 1H)，2.7(m，2H).

质量：m/z.298(M+1)。

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物24a，0.300g)中，加入亚 硫酰氯(1ml)，将得到的澄清溶液在室温搅拌30分钟。在减压(10mmHg) 下，去除多余的亚硫酰氯。向残余物中，加入异丁醇(1.6g)，将反应 混合物在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml) 洗涤。将有机层浓缩成残余物。通过柱色谱(60-120目硅胶，20％乙 酸乙酯-石油醚)，纯化化合物26a，产生液体状的26a(0.150g)。

将苄基化的酸衍生物(化合物26a，0.150g)溶于乙醇(15ml)， 并加入10％碳披钯。使用气球压氢化反应混合物4小时。通过硅藻土 垫，过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，产生 残余物。使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙酸乙酯-石油醚， 通过柱色谱进一步纯化酯27a，产生固体状的27a(0.060g)。熔点： 143-146℃.

HPLC条件：

柱：Zorbax SBC-18(4.6×250)mm

最大：流动相：0.1％TFA∶乙腈(50∶50)

流速：1.0mL/min；波长：275nm

保留时间.18.93min；纯度95.10％

IR(KBr，vmax)：3407，2961，1707，1608，1516，1428， 1346，1279，1213，1169，1050，1005，877，700cm-1.1H NMR： (DMSO-d6，300MHz)；δ9.8(s，1H)，7.6(d，2H)，7.3-7.5(m，5H)， 6.8(d，2H)，4.9(d，1H)，4.8(m，1H)，3.9(d，2H)，2.8(2dd， 2H)，1.9(m，1H)，0.9(d，6H).质量：m/z.354(M+1)，235；

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物24a，0.300g)中，加入亚 硫酰氯(1ml)，将得到的澄清溶液在室温搅拌30分钟。在减压 (10mm-Hg)下，去除多余的亚硫酰氯，并向残余物中加入异丁基胺(1.46 g)，在室温搅拌反应2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml) 洗涤，将有机层浓缩成残余物。通过柱色谱(60-120目硅胶，30％乙 酸乙酯-石油醚)，纯化化合物28a，产生液体状的纯28a(0.180g)。 化合物用于下一步，不进一步表征。

将苄基化的酰胺衍生物(化合物28a，0.150g)溶于乙醇(15 ml)，并加入10％碳披钯。使用气球压，氢化反应混合物4小时。通过 硅藻土垫，过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇， 产生残余物。使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙酸乙酯-石 油醚，通过柱色谱，进一步纯化化合物29a，产生固体状的目标产物 29a(0.060g)。熔点：144-149℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry C-18(4.6×250)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(60∶40)

流速：0.6mL/min；波长：270nm

保留时间：21.38min；纯度：92.35％

IR(KBr，vmax)：3373，2959，1647，1607，1517，1440， 1273，1171，882，839，700cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)，δ7.5(d，. 2H)，7.3(m，5H)，6.8(d，2H)，6.1-6.2(2br.s，2H)，4.8(m，1H)， 4.7(d，1H)，3.1(m，2H)，2.7(m，2H)，1.8(m，1H)，0.8(m，6H). 质量：m/z.353(M+1)，335，232.

现在参考图1B中的苯基系列反应图：

向氯肟(化合物8，14.8g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三 乙胺(14.2g)，并将溶液冷却至5-10℃。向上述溶液中，缓慢加入苯 乙烯基乙酸甲酯(5.0g)，并将得到的溶液在室温搅拌24小时。然后 通过蒸馏去除溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)、 然后用盐水溶液洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，浓缩成残余物。TLC 表明，形成了2种区域异构体(化合物23a和23b)。对2种区域异构 体的黄色固体混合物(粗质量25g)，采取水解步骤。

将粗23a和23b(25.0g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入氢氧化钠 溶液(25％，3.24g)，将得到的溶液回流2小时。蒸馏去除溶剂，用水 (100ml)稀释残余物，并用盐酸(2M)酸化至pH2。用乙酸乙酯(2× 200ml)萃取化合物。用盐水(100ml)进一步洗涤有机层。经无水硫酸钠 干燥得到的有机层，过滤，并真空浓缩。通过柱色谱(100-200目硅 胶，50％乙酸乙酯-石油醚)，进一步纯化2种异构体(化合物24a和 24b)的混合物，产生白色晶体固体状的24b(1.1g)。该化合物用于下 一步。

将苄基化的酸衍生物(24b，0.300g)溶于乙醇(60ml)中，随后 加入10％碳披钯(0.060g)。使用气球压，氢化反应混合物4小时。通 过硅藻土床，过滤反应混合物，并用乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇， 得到残余物25b。使用60-120目硅胶和作为洗脱剂的10％甲醇-氯仿， 通过柱色谱进一步纯化化合物25b，产生米色固体状的 25b(0.050g)(熔点153-159℃)。

IR(KBr，vmax)：3150，1707，1600，1517，1437，1350， 1275，961，755cm-1.1H NMR：(CD3OD，300MHz)；δ7.3(d，2H)，7.2 (m，5H)，6.8(d，2H)，5.5(d，1H)，4.0(m，1H)，2.7(m，2H).质 量：m/z.296(M-1)，252，171，133.

在0℃，向苄基化的酸衍生物(24b，0.300g)中，加入亚硫酰氯(1 ml)。将得到的澄清溶液在室温搅拌30分钟。在减压(10mmHg)下，去 除多余的亚硫酰氯。向残余物中，加入异丁醇(1.6g)，将溶液在室温 搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)萃取。将有 机层浓缩成残余物。通过柱色谱(60-120目硅胶，20％乙酸乙酯-石 油醚)，纯化化合物26b。分离液体状的产物(180mg)。

将苄基化的酸衍生物(化合物26b，0.150g)溶于乙醇(15ml)， 并加入碳披钯(0.030g)。使用气球压氢化反应混合物4小时。通过硅 藻土垫，过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇， 产生残余物。使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙酸乙酯-石 油醚，通过柱色谱进一步纯化化合物27b，产生米色固体状的目标27b (80mg)。熔点：136-143℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry shield RP-18(4.6×150)mm

流动相0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60)

流速：1.0mL/min.；波长：275nm

保留时间7.13min.；纯度：96.4％

IR(KBr，vmax)：3174，2965，1735，160，1517，1350，1274， 1171，752cm-1.

1H NMR：(CD3OD，300MHz)；δ7.6(d，2H)，7.3-7.5(m，5H)， 6.8(d，2H)，5.5(d，1H)，4.1(m，1H)，3.9(m，2H)，2.8(2dd， 2H)，1.9(m，1H)，0.9(d，6H).质量：m/z.354(M+1)，335，307.

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物24b，0.300g)中，加入亚 硫酰氯(1ml)，将得到的澄清溶液在室温搅拌30分钟。在减压(10mmHg) 下，去除多余的亚硫酰氯。向残余物中，加入异丁基胺(2ml)，将溶 液在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)洗 涤。将有机层真空浓缩成残余物。通过柱色谱(60-120目硅胶，30％乙 酸乙酯-石油醚)，纯化化合物28b，产生液体状的28b(170mg)。

向苄基化的酰胺衍生物(化合物28b，0.150g)在乙醇(15ml) 中的溶液中，加入碳披钯，并使用气球压，在室温氢化反应混合物4 小时。通过硅藻土床，过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。 蒸发乙醇，产生残余物。使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙 酸乙酯-石油醚，通过柱色谱进一步纯化化合物29b，产生0.060g固 体状的纯29b。熔点：185-190℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry C-18(4.6×250)mm

流动相：0.05％TFA∶乙腈(55∶45)

流速1.0mL/min.；波长：210nm

保留时间13.57min.；纯度98.16％

IR(KBr，vmax)：3396，2961，1649，1606，1544，1441，1346， 1278，1241，1172，839，747cm-1.

1HNMR：(DMSO-d6，300MHz)，δ8.1(t，1H)，(br.s，1H)，7.5 (d，2H)，7.3(m，5H)，6.8(d，2H)，5.5(d，1H)，4.0(m，1H)， 3.0(m，2H)，2.5(m，2H)，1.7(m，1H)，0.8(m，6H).质量：m/z. 353(M+1)，335，234.

实施例2

靶分子的结构

2A         2B

R          R

---        --- 

OH         O-异丁基

O-异丁基   N-异丁基

N-异丁基 

现在参考图2A中的丙基系列反应图：

向4-羟基苯甲醛(化合物5，10g)在THF(200ml)中的溶液中， 加入碳酸钾(16.95g)，随后加入苄基溴(16.8g)，并将得到的反应混 合物回流24小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压(10mm-Hg)下 去除THF。将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(100ml)、随后 用盐水(100ml)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩。蒸 发溶剂，得到残余物，用石油醚磨碎，产生晶体状固体。过滤固体化 合物，用石油醚洗涤，并在减压(10mm-Hg)下干燥，得到米色晶体状固 体(化合物6，15.6g)。

向苄基化的衍生物(化合物6，10g)在甲醇(100ml)中的溶液 中，加入盐酸羟胺(4.9g)和乙酸钠(9.6g)。将得到的反应混合物回 流3小时。将反应物冷却至室温。在减压(10mm-Hg)下去除溶剂，将残 余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、随后用盐水(100ml)洗涤。 经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩。蒸发溶剂，产生白色晶体 状固体，用石油醚冲洗，在减压(10mm-Hg)下干燥，产生化合物7(8.0 g)。

在0℃，经30分钟的时间，向肟衍生物(化合物7，10g)在THF(100 ml)中的溶液中，加入在THF中的N-氯琥珀酰亚胺(8.8g)，并在 0-5℃搅拌得到的溶液2-3小时。在40℃，在减压下，蒸发溶剂。将 残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、随后用盐水(100ml)洗涤。 经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩成残余物。用己烷洗涤残余 物，并在减压(10mm-Hg)下干燥，产生浅黄色固体(化合物8，11.0g)。

向氯肟(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三 乙胺(14.2g)，将反应混合物冷却至5-10℃。向该溶液中，缓慢加入 3-庚烯酸甲酯(4.5g)，并将得到的溶液在室温搅拌24小时。在减压 (10mm-Hg)下去除溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水 (2×50ml)、随后用盐水溶液洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤， 并浓缩成残余物。TLC表明，形成了2种区域异构体(结构9a和结构 9b)。2种区域异构体的粗质量(25g)用于水解步骤。

将粗反应物质(25g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入氢氧化钠溶液 (25％，13.6ml)。将得到的溶液回流2小时。蒸馏去除溶剂，用水(100ml) 稀释残余物，并用盐酸(2M)将pH调节至2。用乙酸乙酯(2×200ml) 萃取化合物。用盐水(100ml)再次洗涤合并的有机层，经无水硫酸钠干 燥得到的有机层，过滤，并浓缩。通过柱色谱(100-200目硅胶，50％. 乙酸乙酯-石油醚)，进一步纯化2种异构体的混合物，产生白色固体 状的化合物10a(0.700g)。

将酸衍生物(化合物10a，0.300g)溶于乙醇(30ml)，并加入碳 披钯(0.030g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土垫过滤反应 混合物，并用乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物。使用 60-120目硅胶和作为洗脱剂的30％乙酸乙酯-石油醚，通过柱色谱进 一步纯化产物，产生米色固体状的11a(0.060g)。熔点：175-177C

HPLC条件：

柱：Symmetry shield RP-18(4.6×150)nm

最大：流动相：0.01 M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(65∶35)

流速1.0ml/min；波长：210nm

保留时间5.49min.；纯度：94.44％

IR(KBr，vmax)：3372，3284，2931，1703，1607，1516，1435，1351， 1283，1220，1171，943，878，834，674cm-1.1H NMR：(DMSO-d6，300 MHz)；δ12.2(br.s，1H，10(br.s，1H)，7.5(d，2H)，6.8(d， 2H)，4.7(m，1H)，3.5(m，1H)，2.5(m，2H)，1.2-1.4(m，4H)，0.8 (t，3H).质量：m/z，263(M+1)，219，178.

在0℃，向化合物10a(0.300g)中加入亚硫酰氯(1ml)，并在室 温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg)下，去除多余的亚 硫酰氯，向残余物中加入异丁醇(1.6g)，并将得到的溶液在室温搅拌 2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)洗涤。将有机 层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅胶，20％乙酸乙酯-石油 醚)纯化，产生液体状的12a(0.150g)。

将化合物12a(0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披钯 (0.30g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土垫过滤反应混合 物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物，使用 100-200目硅胶和作为洗脱剂的30％乙酸乙酯-石油醚，通过柱色谱进 一步纯化产物，产生液体状的13a(0.060g)。产量：60mg.

HPLC条件：

柱：Symmetry Sheild RP-18(4.6×150)

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝5)∶乙腈

流速1.0ml/min波长270nm

保留时间：5.82min；纯度：96.30％

IR(KBr，vmax)：3390，2961，1729，1607，1516，1464，1350，1272， 1173，738cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.9(d，2H)， 4.8(m，1H)，3.9(d，2H)，3.4(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)， 1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H).质量：m/z.320(M+1).

在0℃，向化合物10a(0.300g)中加入亚硫酰氯(1ml)，并在室 温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg)下，去除多余的亚 硫酰氯，向残余物中加入异丁胺(1.46g)，将溶液在室温搅拌2小时。 用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)萃取。将有机层浓缩 成残余物，通过柱色谱(60-120目硅胶，30％乙酸乙酯-石油醚)纯化， 产生液体状的14a(0.180g)。

将化合物14a(0.150g)溶于乙醇(15ml)，并加入10％碳披钯 (0.030g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土垫过滤反应混合 物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物，使用 100-200目硅胶和作为洗脱剂的30％乙酸乙酯-石油醚，通过柱色谱进 一步纯化产物，产生固体状的15a(0.060g)。熔点：136.6-143.5℃

HPLC条件：

柱：Zorbax SBC-18(4.6×250)mm

最大：流动相：水∶乙腈(60∶40)

流速：1.0ml/min；波长：220nm

保留时间：10.28min纯度95.10％

IR(KBR，vmax)：3296，2934，1646，1608，1517，1462，1352，1278， 1172，880，838，605cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)， 6.8(d，2H)，6.3(br.t，1H)，4.8(m，1H)，3.4(m，1H)，3.1(m， 2H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H). 质量：m/z：319(M+1)，301，200.

现在参考图2B中的丙基系列反应图：

向4-羟基苯甲醛(化合物5，10.0g)在THF(200ml)中的溶液 中，加入碳酸钾(16.95g)，随后加入苄基溴(16.8g)，并将得到的反 应混合物回流24小时。将反应混合物冷却至室温，并在减压(10mm-Hg) 下去除THF。将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(100ml)、随 后用盐水(100ml)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层。蒸发溶剂，得到 残余物，用石油醚滗析残余物，产生晶体状固体。过滤固体化合物， 用石油醚洗涤，并在减压(10mm-Hg)下干燥，得到米色晶体状固体(化 合物6，15.6g)。取该化合物，不进一步表征。

向苄基化的衍生物(化合物6，10.0g)在甲醇(100ml)中的溶液 中，加入盐酸羟胺(4.9g)和乙酸钠(9.6g)。将得到的反应混合物回 流3小时。将反应物冷却至室温，在减压(10mm-Hg)下去除溶剂，将残 余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、随后用盐水(100ml)洗涤。 经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩，产生白色晶体状固体(化合 物7)，用石油醚冲洗，在减压(10mm-Hg)下干燥，产生8.0g化合物7。 取该化合物，不进一步表征。

在0℃，经30分钟的时间，向肟衍生物(化合物7，10.0g)在THF (90ml)中的溶液中，加入在THF(10ml)中的N-氯琥珀酰亚胺(8.8 g)，并在0-5℃搅拌得到的溶液2-3小时。在40℃，在减压下，蒸发 溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(100ml)、随后用盐水 (100ml)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩成残余物。用 己烷洗涤残余物，产生晶体状固体(化合物8)，在减压(10mm-Hg)下 干燥，产生11.0g浅黄色半固体状的氯-肟8。取产物，不进一步表 征。

向氯肟(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三 乙胺(14.2g)，将反应混合物冷却至5-10℃。向该溶液中，缓慢加入 3-庚烯酸甲酯(4.5g)，并将得到的溶液在室温搅拌24小时。在减压 (10mm-Hg)下去除溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水 (2×50ml)、随后用盐水溶液洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤， 并浓缩成残余物。TLC表明，形成了2种区域异构体(结构9a和结构 9b)。2种区域异构体的黄色固体粗质量(25g)用于水解步骤。

TLC系统：20％乙酸乙酯-石油醚.Rf：0.4

将9a和9b的粗反应混合物(25g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入 氢氧化钠溶液(25％，13.6ml)。将得到的溶液回流2小时。蒸馏去除溶 剂，用水(100ml)稀释残余物，并用盐酸(2M)将pH调节至2。用乙酸 乙酯(2×200ml)萃取化合物。用盐水(100ml)再次洗涤合并的有机 层。经无水硫酸钠干燥得到的有机层，过滤，并浓缩。通过柱色谱 (100-200目硅胶，50％.乙酸乙酯-石油醚)，进一步纯化2种异构体 (化合物10a和10b)的混合物，产生白色晶体固体状的10b(1.3g)， 取它，不进一步表征。

在0℃，向化合物10b(0.300g)中加入亚硫酰氯(1ml)，并在室 温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg)下，去除多余的亚 硫酰氯，向残余物中加入异丁醇(1.6g)，并将得到的溶液在室温搅拌 2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)洗涤。将有机 层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅胶，20％乙酸乙酯-石油 醚)纯化化合物12b，产生液体状的12b(0.150g)。取该物质，用于 下一步骤。

将化合物12b(0.150g)溶于乙醇(15ml)，然后加入碳披钯 (0.030g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土垫过滤溶液，并 用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物，使用100-200 目硅胶和作为洗脱剂的30％乙酸乙酯-石油醚，通过柱色谱进一步纯 化产物，产生浅黄色液体状的13b(70mg)。

HPLC条件：

柱：Symmetry Sheild RP-18(4.6×150)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(45∶55)

流速：1.0ml/min；波长：270nm

保留时间：8.99min；纯度：92.24％

IR(KBr，vmax)：3781，3377，2962，1728，1602，1267，1170，738 cm-1.1H NMR：(DMSO-d6，300MHz)；δ7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，4.3 (m，1H)，3.9(m，2H)，3.8(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)， 1.3-1.5(m，4H)，0.8(m，9H).质量：m/z.320(M+1)，302，248，192.

在0℃，向化合物10b(0.300g)中加入亚硫酰氯(1ml)，并在室 温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg)下，去除多余的亚 硫酰氯，向残余物中加入异丁胺(1.46g)，将溶液在室温搅拌2小时。 然后，用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)洗涤。将有机 层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅胶，30％乙酸乙酯-石油 醚)纯化残余物，产生液体状的14b(0.180g)。

将化合物14b(0.150g)溶于乙醇(15ml)，然后加入碳披钯 (0.030g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土垫过滤反应混合 物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物，使用 100-200目硅胶和作为洗脱剂的30％乙酸乙酯-石油醚，通过柱色谱进 一步纯化产物，产生浅褐色半固体状的15b(0.080g)。

HPLC条件：

柱：Symmetry Sheild RP-18(4.6×150)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4∶乙腈(55∶45)

流速：1.0ml/min；波长：210nm

保留时间：6.27min；纯度：93.87％

IR(KBr，vmax)：3416，3300，2924，1653，1610，1550，1515，1348， 1275，809cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)；δ8.2(br.s，1H)，7.5(d， 2H)，6.8(d，2H)，6.2(m，1H)，4.4(m，1H)，3.8(m，1H)，3.1 (m，2H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3-1.5(m，4H)，0.8(m， 9H).质量：m/z：319(M+1)，301，200.

实施例3

靶分子的结构

3A          3B

R           R  

---         ---

OH          OH

O-异丁基    O-异丁基

N-异丁基    N-异丁基

现在参考图3A中的丁基系列反应图：

向氯肟衍生物(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中， 加入三乙胺(14.2g)，并将溶液冷却至5-10℃。向该溶液中，缓慢加 入3-辛烯酸甲酯(5.0g)，并将得到的溶液在室温搅拌24小时。蒸馏 去除溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，用水(2×50ml)、随后用 盐水洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩成残余物。TLC 表明，形成了黄色固体状的2种区域异构体(化合物16a和16b，25g)。 取粗物质，进行酯水解步骤。

将粗反应物质(16a和16b，25g)吸收于甲醇(200ml)，加入25％ 氢氧化钠溶液。将得到的溶液回流2小时。在减压(10mm-Hg)下去除 溶剂，用水(100ml)稀释残余物，并用盐酸(2M)调至pH2。用乙酸乙 酯(2×200ml)萃取溶液。用盐水(100ml)再次洗涤有机层，经无水 硫酸钠干燥得到的有机层，过滤，并浓缩。通过柱色谱(100-200目 硅胶：40％乙酸乙酯-石油醚)纯化混合物，得到白色固体状的17a (0.700g)。

将苄基化的酸衍生物(化合物17a，0.300g)溶于乙醇(60ml)， 并加入碳披钯(0.060g)。使用气球压，氢化溶液4小时。通过硅藻土 垫，过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。在减压下去除乙 醇，得到残余物，使用60-120目硅胶和作为洗脱剂的10％甲醇和氯 仿，通过柱色谱进一步纯化产物，产生米色固体状的18 a(0.060g)。 熔点：174-176℃

HPLC条件：

柱：Symmetry shield(4.6×150)mm

流动相：0.01M KH2PO4(2.5)∶ACN(60∶40)

流速：1.0ml/min；波长：225nm

保留时间：5.53min；纯度：94.35％

IR(KBr vmax)：3406，2930，1701，1606，1516，1434，1351，1283， 1221，1170，936，828，833，675cm-1.1H NMR：(DMSO-d6，300MHz)；δ 10(s.br，1H)，7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，4.8(m，1H)，3.4(m， 1H)，2.5(m，2H)，1.2-1.4(m，6H)，0.8(t，3H).质量： m/z.278(M+1)，234，192，65.

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物17a，0.300g)中加入亚硫 酰氯(1ml)，并在室温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg) 下，去除多余的亚硫酰氯，向残余物中加入异丁醇(1.6g)，并将溶液 在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)、 随后用盐水洗涤。将有机层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅 胶，石油醚和乙酸乙酯(10％))进一步纯化，产生液体状的19a(0.150 g)。

系列号 化合物，试剂和溶剂 分子量 mM 当量 量 苄基化的酯衍生物 (化合物19) 423.46 0.3542 - 150mg 碳披钯(10％w/w) 20X 30mg 乙醇 100X 15ml

反应时间：4小时  反应温度：25-30℃

将苄基化的酸衍生物(化合物19a，0.150g)溶于乙醇(15ml)， 并加入10％碳披钯。使用气球压，氢化溶液4小时。通过硅藻土垫， 过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，产生残余 物，使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的20％乙酸乙酯-石油醚，通 过柱色谱进一步纯化产物，产生20a(0.060g)。

HPLC条件：

柱：Symmetry shield(4.6×150)mm

流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60)

流速：1.0ml/min；波长：270nm

保留时间：7.51min；纯度：97.19％

IR(KBr，vmax)：3378，2960，1729，1606，1517，1464，1352，1276， 1173，993，888，839cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)；δ7.5(d，2H)， 6.9(d，2H)，5.3(br.s，1H)，4.8(m，1H)，3.8(d，2H)，3.4(m，1H)， 2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)，1.3-1.6(m，6H)，0.9(d，6H)，0.8(t， 3H).质量：m/z.334(M+1)，192.

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物17a，0.300g)中加入亚硫 酰氯(1ml)，并在室温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg) 下，去除多余的亚硫酰氯，向残余物中加入异丁胺(1.46g)，将所得 溶液在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水 (2×5ml)、然后用盐水洗涤。将有机层浓缩成残余物，通过柱色谱 (60-120目硅胶，20％乙酸乙酯-石油醚)进一步纯化，产生液体状的 21a(0.180g)。

将苄基化的酰胺衍生物(化合物21a，0.150g)溶于乙醇(15 ml)，并加入10％碳披钯。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土垫 过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余 物，使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的20％乙酸乙酯-石油醚，通 过柱色谱进一步纯化产物，产生油状固体22a(0.060g)。

HPLC条件：

柱：Symmetry C-18(4.6×250)mm

最大：流动相：水∶乙腈(40∶60)

流速0.8ml/min；波长：210nm

保留时间5.65min；纯度：94.73％

IR(KBr vmax)：3298，2959，2930，1646，1607，1517，1461，1353， 1278，1172，888，838cm-1.1H NMR(CDC13，300MHz)：δ7.5(d，2H)， 6.8(d，2H)，6.1(br.s，1H)，4.8(m，1H)，3.4(m，1H)，3.2(m， 2H)，2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3(m，4H)，0.8(m，9H).质 量：m/z.333(M+1)，315，308，287，286

现在参考图3B中的丁基系列反应图：

向氯肟衍生物(化合物8，16.74g)在THF(100ml)中的溶液中， 加入三乙胺(14.2g)，并将溶液冷却至5-10℃。向该溶液中，缓慢加 入3-辛烯酸甲酯(5.0g)，并将得到的溶液在室温搅拌24小时。蒸馏 去除溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml)、然后 用盐水洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并浓缩成残余物。TLC 表明，形成了2种区域异构体(化合物16a和16b)。取粗黄色固体(25 g)，不经进一步纯化，用于水解步骤。

将16a和16b的混合物(25.0g)吸收于甲醇(200ml)中，并加入 25％氢氧化钠溶液(13.6ml)。将得到的溶液回流2小时。在减压 (10mm-Hg)下去除溶剂，用水(100ml)稀释残余物，并用盐酸(2M)调 至pH2。用乙酸乙酯(2×200ml)萃取溶液。用盐水(100ml)再次洗涤 有机层，经无水硫酸钠干燥得到的有机层，过滤，并浓缩。通过柱色 谱(100-200目硅胶，：40％乙酸乙酯-石油醚)，进一步纯化2种异构 体(化合物17a和17b)的混合物，产生白色固体状的化合物17b(1.4 g)。

将苄基化的酸衍生物(化合物17b，0.300g)溶于乙醇(60ml)， 并加入10％碳披钯。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土床过滤 反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。在减压下去除乙醇，使用 60-120目硅胶和作为洗脱剂的10％甲醇和氯仿，通过柱色谱进一步纯 化残余物。分离米色晶体状的化合物18b(0.080g)。熔点：163-168℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry shield C-18(4.6×250)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(50∶50)

流速：0.7ml/min；波长：270nm

保留时间6.87min；纯度95.72％

IR(KBr vmax)：3209，2958，1711，1612，1597，1519，1434，1352， 1274，909，838cm-1.1H NMR：(DMSO-d6，300MHz)；δ10.0(s.br，1H)， 7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，4.5(m，1H)，3.7(m，1H)，2.5(m，2H)， 1.5(m，2H)，1.2(m，4H)，0.8(m，3H).质量：M/z.278(M+1).

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物17b，0.300g)中加入亚硫 酰氯(1ml)，并在室温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg) 下，去除多余的亚硫酰氯，向残余物中加入异丁醇(1.6g)，将溶液在 室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)、 然后用盐水洗涤。将有机层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅 胶，20％乙酸乙酯-石油醚)进一步纯化残余物，产生液体状的19b (0.150g)。

将苄基化的酸衍生物(化合物19b，0.150g)溶于乙醇(15ml)， 然后加入10％碳披钯(0.030g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅 藻土床过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得 到残余物，使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的20％乙酸乙酯-石油 醚，通过柱色谱进一步纯化产物。分离固体状的目标酯20b(0.060g)。 熔点：114-116℃.

HPLC条件：

柱：Symmetry shield RP-18(4.6×150)mm

最大：流动相：0.01 M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60)

流速：1.0ml/m in；波长：270nm；

保留时间：8.74min；纯度：97.76％

IR(KBr vmax)：3159，2958，2870，1734，1614，1596，1519，1445， 1354，1273，1236，1173，898，838cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)， δ7.5(d，2H)，6.9(d，2H)，5.8(br.m，1H)，4.4(m，1H)，3.9 (m，2H)，3.7(m，1H)，2.6(2dd，2H)，1.9(m，1H)，1.3-1.6(m，6H)， 0.8(m，9H).质量：M/z.334(M+1).

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物17b，0.300g)中加入亚硫 酰氯(1ml)，并在室温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg) 下，去除多余的亚硫酰氯。向残余物中加入异丁基胺(1.46g)，将得 到的溶液在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水 (2×5ml)、然后用盐水洗涤。将有机层浓缩成残余物，通过柱色谱 (60-120目硅胶，20％乙酸乙酯-石油醚)进一步纯化化合物21b，产 生液体状的纯21b(0.180g)。取该化合物，不进一步表征。

将苄基化的酰胺衍生物(化合物21b，0.150g)溶于乙醇(15 ml)，然后加入10％碳披钯。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土 垫过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残 余物，使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的20％乙酸乙酯-石油醚， 通过柱色谱进一步化合物22b，产生固体状的纯22b(0.060g)。熔 点：157-161℃

HPLC条件：

柱：Symmetry C-18(4.6×150)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(40∶60)

流速：1.0ml/min；波长：270nm

保留时间：10.07min；纯度：91.43％

IR(KBr vmax)：3286，2961，1653，1610，1558，1516，1461， 1348，1277，1229，886，840cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHz)；δ7.5(d， 2H)，6.8(d，2H)，6.1(br.s，1H)，4.8(m，1H)，3.3(m，1H)， 2.6(2dd，2H)，1.8(m，1H)，1.3(m，4H)，0.8(m，9H).质量：M/z. 333(M+1)，315，214.

实施例4

靶分子的结构

4

R

---  

OH

O-异丁基

N-异丁基

现在参考图4中的呋喃基系列反应图：

向氯肟(化合物8，15.7g)在THF(100ml)中的溶液中，加入三 乙胺(14.2g)，并将溶液冷却至5-10℃。向上述溶液中，缓慢加入4- 呋喃-2-基-丁-3-烯酸甲基酯(5.0g)，并将得到的溶液在室温搅拌 24h。蒸馏去除溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(100ml)，并用水(2×50ml) 洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩成浅黄色液体(4.0g)。 TLC表明，仅仅形成了单一异构体。将粗反应物质用于水解步骤。

将粗反应物质(化合物30，1.5g)吸收于甲醇(20ml)中，加入氢氧 化钠溶液(25％)(0.2g)。将得到的溶液在25-30℃搅拌16小时。蒸馏 去除溶剂，用水(100ml)稀释残余物，并用盐酸(2M)将pH调节至2。 用乙酸乙酯(2×200ml)萃取羧酸衍生物，用盐水(100ml)进一步洗 涤有机层。经无水硫酸钠干燥合并的有机层，干燥，并浓缩。通过柱 色谱(100-200目硅胶，30％乙酸乙酯-石油醚)，进一步纯化化合物 31，为固体(800mg)。

将苄基化的酸衍生物(化合物31，0.150g)溶于乙醇(15ml)， 并加入碳披钯(0.030g)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土床 过滤反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余 物。使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙酸乙酯-石油醚，通 过柱色谱进一步纯化化合物32，产生米色固体状的32(0.060g)。 熔点：192-194℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry shield RP-18(4.6×250)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(60∶40)

流速0.8mL/min.；波长：210nm

保留时间：6.15min.；纯度：97.82％

IR(KBr.vmax)：3149，2923，1711，1612，1592，1437，1352，1283， 911，837，745cm-1.1H NMR：(DMSO-d6，300MHz)；δ12.3(br.s，1H)， 9.9(br.s，1H)，7.6(s，1H)，7.5(d，2H)，6.8(d，2H)，6.5(d， 2H)，5.4(d，1H)，4.2(m，1H)，2.6(m，2H).质量：m/z.288(M+1)， 270，24 2，192，164，97.

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物31，0.300g)中加入亚硫酰 氯(1ml)，将得到的澄清溶液在室温搅拌30分钟。在减压(10mm-Hg) 下去除多余的亚硫酰氯。向残余物中，加入异丁醇(1.6g)，并在室温 搅拌溶液2小时。用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水(2×5ml)洗 涤。将有机层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅胶，20％乙酸 乙酯-石油醚)纯化。分离液体状的产物33(0.180g)。

将苄基化的酸衍生物(化合物33，0.200g)溶于乙醇(15ml)， 加入碳披钯。使用气球压，氢化反应混合物4小时。经硅藻土垫过滤 反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物， 使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙酸乙酯-石油醚，通过柱 色谱进一步纯化产物，产生米色固体状的34(0.80g)。熔 点：123-125℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry C-18(94.6×250)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4∶乙腈(50∶50)

流速：1.0mL/min.；波长：215nm

保留时间：13.58分钟。；纯度：95.97％

IR(KBr.vmax)：3781，3221，1735，1598，1517，1440，1348，1276， 1228，1175，736cm-1.1H NMR：(CDC13，300MHZ)，δ7.5(d，2H)，7.3 (s，1H)，6.9(d，2H)，6.5(2d，2H)，5.5(d，1H)，5.2(br.s，1H)， 4.2(m，1H)，3.8(d，2H)，2.8(2dd，2H)，1.9(m，1H)，0.8(d， 6H).质量：m/z.344(M+1)，326，248，192，151.

在0℃，向苄基化的酸衍生物(化合物31，0.500g)中加入亚硫 酰氯(1ml)，并在室温搅拌得到的澄清溶液30分钟。在减压(10mm-Hg) 下，去除多余的亚硫酰氯，向残余物中加入异丁基胺(1.46g)，将溶 液在室温搅拌2小时。然后，用乙酸乙酯(5ml)稀释溶液，并用水 (2×5ml)洗涤。将有机层浓缩成残余物，通过柱色谱(60-120目硅胶， 40％乙酸乙酯-石油醚)纯化化合物，产生液体状的35(0.280g)，其 不作进一步表征。

将苄基化的酸衍生物(35)溶于乙醇(15ml)，并加入碳披钯 (10％w/w，0.030mg)。使用气球压，氢化溶液4小时。经硅藻土床过滤 反应混合物，并用热乙醇(30ml)洗涤滤床。蒸发乙醇，得到残余物， 使用100-200目硅胶和作为洗脱剂的40％乙酸乙酯-石油醚，通过柱 色谱进一步纯化产物，产生米色固体状的36(0.60g)。熔点： 167-169℃。

HPLC条件：

柱：Symmetry C-18(4.6×150)mm

最大：流动相：0.01M KH2PO4(PH＝2.5)∶乙腈(60∶40)

流速：1.0ml/min.；波长：210nm

保留时间：8.05min，纯度：98.17％

IR(KBr.vmax)：3286，2961，1653，1608，1516，1350，1278， 1231，1167，841，748.1H NMR：(CDC13，300MHz)，δ7.5(d，2H)，7.3 (s，1H)，6.9(d，2H)，6.3(d，2H)，5.4(br.s，1H)，5.3(d，1H)， 4.3(m，1H)，3.1(m，2H)，2.6(m，2H)，1.8(m，1H)，0.8(m，6H). 质量：m/z.343(M+1)，325，275，224.

根据下述测定中的一个或多个，可以确定本发明的化合物对上述 的各种障碍的活性。

材料和方法

合成。在下面的合成实施例中，以最高的商品质量，购买使用的 所有试剂和溶剂。使用的所有溶剂都是购自Fisher的HPLC级。在JEOL Eclipse 270波谱仪上记录1H(270MHz)和13C NMR(67.5MHz)NMR波 谱。以赫兹(Hz)为单位记录偶合常数，以CDCl3，DMSO或CD3OD为溶 剂，以相对于四甲基硅烷(TMS，0.0ppm)的百万分率(ppm)记录化学位 移。使用分别购自Selecto Scientific和Fisher Scientific Basic alumina Brockman activityI的Alumina B，F-254 TLC平板，进行 薄层(TLC)和快速柱色谱。通过TLC和1HNMR监测反应，当根据1H NMR 的粗产量是90-95％时停止。

试剂。除非另有说明，所有化学试剂都购自Aldrich或Sigma Chemicals Companies，且是可商业得到的最高级别。与以前公开的方 法类似地制备多巴色素甲基酯(Bendrat等，Biochemistry，36， 15356-15362(1997)；Swope等，EMBO J.，17，3534-3541(1998))。

当在475nm的吸光度达到最大值时(这表示消耗了限制试剂 NaIO4)，开始测定。在大肠杆菌中表达重组人和小鼠MIF，并如前报道 进行纯化(Bernhagan等，Biochemistry，33，14144-14155(1994)。

MIF互变异构酶活性

将式I或II的化合物鉴别为MIF抑制剂，因为它们能体外抑制 MIF酶活性。MIF能催化互变异构化(即，酮-烯醇异构化)反应 (Rosengren等，Molecular Medicine，2，143-149(1996))。MIF能 催化多巴色素-有关的MIF底物向无色产物的互变异构化。除非特别地 相反说明，在本文中提及的抑制浓度(例如，IC50或其它活性指数)指 实验化合物在MIF互变异构酶测定中的抑制活性(如在下面和 Bendrat等，Biochemistry，36，15356-15362(1997)中进一步详细 描述的)。鉴别出的最有活性的底物是多巴色素的非生理的D-异构体。 该反应能预测治疗性MIF抑制剂(见美国专利号6,420,188和美国 专利号6,599,938，其内容在这里整体引作参考)。对MIF互变异构 酶活性的抑制，能预测对MIF生物活性的抑制。

测定MIF多巴色素互变异构酶活性的方法，从DOPA-有关的底物 前体(例如L-3，4-二羟基苯丙氨酸甲基酯)的制备和氧化开始。用高 碘酸钠进行的该氧化，会产生对应的多巴色素衍生物(例如，L-3，5- 二氢-6-羟基-5-氧-2H-吲哚-2-羧酸甲基酯(″多巴色素甲基酯″)，它 是橙色的，且构成在作为互变异构酶的MIF的酶活性的光度计测定中 使用的方便底物。MIF(典型地，终浓度为50-1000ng/ml的重组MIF 的纯化制品)的添加，会造成有色的多巴色素底物向无色的5，6-二羟 基吲哚-2-羧酸甲基酯产物的快速互变异构化。根据多巴色素-有关的 底物在合适的缓冲液中的有色溶液的脱色速度，典型地在添加最终的 测定组分和混合后20秒的时间，测量MIF的酶活性。在约475nm(或 550nm，对于超过0.5nM的底物浓度)，测量吸光度。在测定溶液中可 以包含实验化合物，以便通过记录底物互变异构化动力学与在没有实 验抑制剂化合物存在下进行的对照测定相比的变化，可以测量实验化 合物对MIF互变异构酶活性的作用(即，作为抑制剂)。更具体地，可 以基本上如下进行MIF互变异构酶测定：

L-3，4-二羟基苯丙氨酸甲基酯(例如，Sigma D-1507)是多巴色 素底物前体，且制成在ddH2O中的4mM溶液。将高碘酸钠制成在ddH2O 中的8mM溶液。制备了测定缓冲液(50mM磷酸钾/1mM EDTA，pH 6.0)。在150mM NaCl/20mM Tris缓冲液(pH.4)中制备纯化的重 组MIF，作为能方便地供应约700ng/ml的终浓度的MIF的原液。在 即将开始测定之前，将3.6ml多巴色素底物前体溶液，2.4ml高碘 酸盐溶液和4.0ml测定缓冲液合并成均匀的混合物(在1min后和之 后约30min，该多巴色素底物制品适用于测定用途)。然后，将实验 化合物(典型地制备成在DMSO中的浓缩原液)和MIF与0.7ml测定缓 冲液+0.3ml多巴色素底物溶液混合，提供需要的实验化合物在均匀 混合物中的终浓度，在475nm监视该测定混合物的光密度(吸光度)。 典型地，每5秒记录OD475，进行0-60秒，然后将给定时间点的OD475 与没有添加MIF或省略实验化合物的平行测定相对比。通过抑制测定 混合物的脱色，经常在20秒时间点，测定实验化合物对MIF互变异 构酶活性的抑制。通过从在几个不同的抑制剂浓度的MIF互变异构酶 测定得到的结果的内插，确定具有MIF互变异构酶抑制活性的化合物 的IC50值，这对应着能抑制MIF互变异构酶活性达50％的抑制剂浓度。 这些IC50值能提供实验化合物的MIF酶抑制活性和对MIF的生物活性 的抑制之间的合理关联。

MIF互变异构酶测定表明，某些化合物能抑制MIF酶活性。该数 据提供了MIF互变异构酶酶测定和生物测定中的MIF拮抗作用之间 的合理关联。总之，这些数据表明，化合物在MIF互变异构酶测定中 的抑制，能预测它在抑制MIF生物活性中的潜在治疗用途。还合理地 将对MIF的抑制与调控受MIF影响的其它细胞因子和ERK/MAPK途径 相关联。

用抑制剂处理MIF

用不同浓度的抑制剂处理MIF样品，然后用多巴色素互变异构酶 测定，分析经处理的MIF样品的酶活性。

多巴色素互变异构酶测定

向重组小鼠或人MIF样品的室温溶液中，加入多巴色素甲基酯。 立即监视样品与未处理的MIF溶液和没有添加MIF的多巴色素甲基酯 相比，在475nm的吸光度损失。

酶抑制研究

该测定解释了本发明的化合物对人MIF的酶活性的抑制。使用L- 多巴色素甲基酯作为产色底物，进行了重组人MIF的酶促互变异构化 活性(Bendrat等，Biochemistry，36，15356-15362(1997))。如上 面详细描述的，MIF催化的互变异构化反应，会导致无色的二羟基吲 哚产物的形成。

制备和测试了几种化合物在MIF多巴色素互变异构酶测定中的 活性。化合物68和69(表I)以剂量依赖性的方式抑制MIF互变异 构酶活性，IC50为约10μM。

因而，根据本发明，在结构上与化合物68和69有关的化合物， 构成了对MIF酶活性的新的一大类低分子量特异性抑制剂。

MIF活性的生物测定

该测定表明，所述化合物不仅仅能特异性地抑制MIF酶活性，而 且也能抑制MIF免疫调节活性，更具体地，MIF糖皮质激素调节活性。 测试了根据本发明的化合物中和MIF影响对人单核细胞产生TNFα的 抗炎作用的效应的能力。化合物的性质是剂量依赖性的。为了解释该 抑制作用对MIF的特异性，测试了不是MIF互变异构酶活性的这样有 效的抑制剂的其它类似物。

这些结果与下述假说相一致，即通过小分子在互变异构酶活性位 点处的结合，可以中和MIF的促炎症作用，尽管认为该作用不依赖于 互变异构酶活性本身的中和。

另外，评估了化合物在任何多种MIF生物活性测定中对MIF生物 活性的抑制，包括，例如，对MIF结合靶细胞的抑制，对MIF释放或 合成的抑制，用MIF-特异性的抗体对MIF免疫反应性的抑制，根据圆 二色谱学、液体NMR-光谱学、X-射线结晶学、热稳定性测量评估的MIF 构象或结构完整性的改变，抑制MIF对静止期NIH/3T3细胞的促增殖 作用和抑制其中有关的延长的ERK激活，对MIF-诱导的NIH/3T3细胞 释放花生四烯酸的抑制，对L6肌细胞中MIF-诱导的2，6二磷酸果糖 形成的抑制，对MIF、TNF或LPS-攻击的实验动物中MIF毒性的抑制， 对MIF在体外或体内的糖皮质激素反调节活性的抑制，对MIF-诱导的 p53肿瘤抑制蛋白的功能灭活的抑制(Hudson等，J.Exp.Med.， 190，1375-1382(1999))，对MIF-诱导的前列腺素E2的释放的抑制， 和对许多特征在于MIF的释放、生产和/或出现的人疾病动物模型中的 发病率或死亡率的抑制。

从前面的描述可以看出，本发明包含新的且独特的化合物，组合 物，制备方法，和与上述化合物抑制MIF有关的使用方法。本领域的技 术人员能认识到，可以改变本发明的上述实施方案，而不背离其广泛 的发明构思。因此，应当理解，本发明不限于公开的特定实施方案， 而是意在涵盖在本发明的精神和范围内的所有和任何改变。

相关申请的交叉参考

本申请要求享有2004年3月26日提交的美国临时申请系列号 60/556,440的优先权，其完整内容在这里引作参考。

发明背景